TWI342773B

TWI342773B -

Info

Publication number: TWI342773B
Application number: TW093128401A
Authority: TW
Inventors: Sachiyo Igarashi; Hideo Tanaka; Osamu Takasu; Shigeo Shinohara; Masahiko Tanaka; Misato Yago
Original assignee: Otsuka Pharma Co Ltd
Priority date: 2003-09-19
Filing date: 2004-09-20
Publication date: 2011-06-01
Also published as: HK1092057A1; JP4847756B2; EP1671629A1; KR20060076775A; AU2004273738A1; EP1671629A4; AU2004273738B2; TW200524585A; BRPI0414543A; CN1852708A; CN1852708B; CA2538760A1; US20070093416A1; JPWO2005027893A1; WO2005027893A1

Description

1342773 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明是有關於可促進yS防禦素分泌之沒防禦素分泌促進劑。又，本發明是有關於促進/5防禦素分泌之方法。 5【先前技術】

從以前就已知，在植物、昆蟲、兩棲類、哺乳類等當中存在有活體内之抗諸物質（抗菌肽）作為與生俱來之活體防禦機構，稱之為天然免疫，負責局部區域之感染防禦。在人類身上已知之抗菌肽之一種之防禦素，對細菌、真菌、原蟲、病毒等 10 具有抗菌活性，而與活體内各種活體防禦機構相關連。

顯現於皮膚、肺、氣管、腎臟、生殖器等黏膜上皮之防禦素，為人知的有召防禦素。現在，人類/3防禦素已有6種（人類防禦素-1、人類/5防禦素-2、人類/5防禦素-3、人類/3防禦素-4、人類/3防禦素-5及人類/3防禦素-6)已被單離且其構 15 造亦已確定。特別是人類/3防禦素-6，已清楚得知其在皮膚、肺、氣管及口腔黏膜中尤其強烈地顯現出可在細菌感染或炎症性細胞介素刺激下顯現衍生這種特徵（參考富田哲治等、「作為活體防禦機構之防禦素」、曰本老年醫學會雜誌、2001年、第18卷、第4號、第440-443頁），同時有報告指出其與肺炎 20 等氣管感染症或炎症有著密切關係。又，近年，也有報告指出，/3防禦素不僅關係到局部之感染防禦，甚至也藉由使樹狀細胞、T淋巴球、單核白血球等細胞趨化而與後天性免疫有所關聯。（參考Yang, D·，Chertov, 0.， Bykovskaia, S.N. et al·，‘‘ /S -Defensins : linking innate and 5 1342773

Adaptive immunity through dendritic and T cell CCR6’，，Science, 1999, vol.286 ' p.525 ； Territo, M.C., Ganz, T., Selsted, M.E. et al” “Monocyto- chemotactic activity of defensins from human neutrophils”，J. Clin. Invest” 1989, vol,84, p.2017 ; Lillard，J.W·， 5 Jr.，Boyaka，P.N·，Chertov 0· et a]., “Mechanisms for induction of

acquired host immunity by neutrophil peptide defensins’’，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 1999，vol.96, p.651 ;長岡功等、「Defensin在感染防禦與免疫應答之角色」、臨床免疫、2000 年、第33卷、第577頁）。 10 目前為止，已知炎症性細胞介素或脂多醣具有促進人類/3 防禦素分泌之作用。然而，關於人類/3防禦素之產生、分泌之機制’仍未能充分清楚解釋，且除上述物質以外，亦未知可促進人類/3防禦素分泌之方法機制。【發明内容】

15 因此，本發明之目的係提供可促進人類万防禦素分泌之yS

防紫素分泌促進劑。又，本發明之目的在於提供可以外用劑、内用劑、食品等各種型態來使用之人類冷防禦素分泌促進劑。又’本發明之目的是提供可有效促進人類万防禦素分泌之方法。 20 本發明人為了解決上述課題而專心研討，結果發現，有機酸具有可促進人類/3防禦素分泌之作用。本發明即是以該發現為基礎再經過反覆研究而開發者。亦即’本發明是以下揭示之人類冷防禦素分泌促進劑：種人類/3防禦素分泌促進劑，係以有機酸為有效成分。 6 1342773 2.如第1項之人類/3防禦素分泌促進劑，其中前述有機酸為選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸構成之群之至少-種。 5 3.如第1項之人類yS防禦素分泌促進劑，其中前述有機酸為選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸及酒石酸構成之群之至少一種。

4.如第1項之人類沒防禦素分泌促進劑，其中作為分泌促進對象之人類/3防禦素為人類/3防禦素-2。 10 5.如第1項之人類yS防禦素分泌促進劑，係使用於口唇部或口腔内。 6. —種人類防禦素分泌促進用之外用組成物，含有第1〜4 項中任一項之人類/5防禦素分泌促進劑。 7. —種人類/3防禦素分泌促進用之内用組成物，含有第1〜4 15 項中任一項之人類/3防禦素分泌促進劑。

8. —種人類；5防禦素分泌促進用之食品，含有第1〜4項中任一項之人類/3防禦素分泌促進劑。又，本發明是以下揭示之人類/3防禦素分泌促進方法： 9. 一種人類/3防禦素分泌促進方法，係對對象投予有效量 20 之有機酸或使對象攝取有效量之有機酸。 10. 如第9項之人類万防禦素分泌促進方法，其中前述有機酸為選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸構成之群之至少一種。 7 5 峻為Ζ第9項之人師防Μ分泌促進方法，其巾前述有機 Μ自於由延胡索酸、頻果酸、檸檬酸及酒石酸之至少一種。 △如第9項之人類緒紫素分泌促進方法其中作為分泌促進對象之人類㈣«為人類錄紫素-2。 13·如第9項之人㈣防禦素分泌促進方法，係在口 |部或口腔内促進人類Θ防禦素分泌。 10 15

jl4.如第9項之人類万防禦素分泌促進方法，係使用第1〜5 具中任-項之人類0 P㈣素分泌促進劑作為前述有機酸。 15. 如第9項之人類諸禦素分泌促進方法係使用第6項之内用組成物作為前述有機酸。 16. 如第9項之人類沒防禦素分泌促進方法，係使用第7項之食品作為前述有機酸。 Π.如第9項之人類沒防禦素分泌促進方法，係使用第名項之外用組成物作為前述有機酸。又’本發明是以下使用態樣··

18.—種有機酸之用途，係用以製造人類石防禦素分泌促進 19. 一種有機酸之用途，係用以製造人類点防禦素分泌促進 20用内用組成物。 20. —種有機酸之用途，係用以製造人類点防禦素分泌促進用食品。 21. —種有機酸之用途，係用以製造人類冷防禦素分泌促進用外用組成物。 8 1342773 22.—種有機酸之用途，係用以促進人類冷防禦素之分泌。圖式簡單說明第1圖是顯示試驗例1中，於口腔内使用各有機酸時’唾液中業經促進分泌之人類沒防禦素·2之量（ng/min)之圖。 5 第2圖是顯示試驗例2中，於口腔内使用各有機酸時，唾液中業經促進分泌之人類冷防禦素·2之量（ng/min)之圖。第3圖是顯示試驗例3中，於口腔内使用各種量之蘋果酸時，唾液中業經促進分泌之人類厶防紫素-2之量（ng/min)之圖。 10【實施方式】用以實施發明之形態 (1)人類召防禦素分泌促進劑本發明之人類万防禦素分泌促進劑中，作為分泌促進對象之人類石防禦素中，包含了人類石防禦素_丨、人類防禦素-2、 15人類点防禦素_3、人類沒防禦素-4 '人類；5防禦素-5及人類/5 防禦素-6任一種。其中，尤其可有效促進人類沒防禦素_2之分泌’因此成為最適當之分泌促進對象。本發明之沒防禦素分泌促進劑之有效成分為有機酸。本發明中所使用之有機酸，只要是藥學上、香粧學上或食品衛生上 2〇可容許者，皆無特別限制。本發明所使用之有機酸之一例，可舉蟻酸、醋酸、丙酸、酪酸、纈草酸、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉菫蔻酸、棕櫚酸、硬脂醆、丙烯酸、丙醯酸、桂皮酸、咖啡酸等單羧酸；草酸、丙二酸、琥珀酸、麩酸、己二酸、庚 —酸、延胡索酸、順丁烯二酸、笨二甲酸、異笨二甲酸、對笨 9 1342773 二甲酸等二羧酸；麩胺酸、天冬胺酸等胺基酸；乙二醇酸、蘋果酸、酒石酸、異酒石酸、#檬酸、異檸檬酸、乳酸、羥丙烯酸、α-羥酪酸、丙三醇酸、羥基丙二醆、水楊酸、五倍子酸、托品酸、抗壞血酸、葡糖酸等羥醆；葉酸；泛酸、菸鹼酸； 5及其他糖衍生物等之有機酸。其中又以延胡索酸、蘋果酸、棒檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麵胺酸及琥珀酸為佳，更以延胡索睃、蘋果酸、檸檬酸及酒石酸為佳。這些有機酸可單獨使用1種，或任意組合2種以上來使用。又，本發明中，有效成分除上述有機酸外，還可使用藥 10學上、香粧學上或食品衛生上可容許之上述有機酸之鹽，或使其鹽與上述有機酸結合。八，丄逆3风敬便用褙裂者，只要含有上述有機作為成分之-者，即可作為本發明之人師防禦素分泌促违之有效成分來使用。 15 20

本發明之人㈣防《分崎進射以是由上述有效

分形成者，而除上述有效齡外，亦可含有其他食品衛生上樂學上或隸學上可料之基劑、賴或添加物等其他成份本發明之人類沒防禦素分泌促進劑之適用對象，並無特限制，可以是活體内之任一部位或 ^ ^從較優異之人類 -素之分泌促進這個觀點來看’鼻腔内、肚門部、氣管内、 =、口腔内、咽頭、眼睛、生殖器、皮廣、消化器官内等較適宜之對象。其中，在口唇部及口促U 腔仅人類錄禦素分從進作用特別優異，因此口唇部及御ι 腔邛為本發明之人類/3 π素分泌促進劑之最適宜之適用對象。 10 1342773 本發明之人類万防紫素分泌促進劑可混合於食品、内用醫藥品、内用醫藥部外品等，作為人類万防紫素分泌促進用之食品或内用組成物來使用。又，本發明之人類績紫素分泌促進劑，可混合於外用醫藥品、外用醫藥部外品、香粧品、外用品 5 (絆創膏）等，作从㈣防紫素分泌促進用之外用組成物來使用。含有本發明之人類Μ禦素分泌促進劑之人歸防” 分泌促進用外用組成物之調製，除上述有效成分外’還可混合藥學上或香粧學上可容許之基劑或載趙，調製成所希望之形態 10即可。又’該外用組成物中，在不損壞本發明之效果之範圍内，可混合各種界面活性劑、色素（染料、顏料）、香料、防腐劑、殺菌劑（抗菌劑）、增稠劑、抗氧化劑、金屬堵劑、清涼化劑、防臭劑、pH調整劑等各種添加劑。又，亦可因應需要添加保濕劑、紫外線吸收劑、紫外線漫射劑、維他命類、植物精華液、 15皮膚收斂劑、抗炎症劑（消炎劑）、美白劑、細胞賦活劑、血管擴張劑、血行促進劑、抗生素劑等可混合於外用劑之眾所周知之藥效成分。上述外用組成物，只要可使用於皮膚或黏膜，其形狀並無特別限制，例如可舉液狀、乳液狀、粉末狀、懸浮液狀霜狀、 2〇軟膏狀、幕斯狀、膠狀、抹醬狀、糊狀、凍狀、片狀、噴霧狀、噴淋狀、濃稠劑、面膜劑、貼附劑等形狀。又，上述外用組成物之形狀可因應投予對象部位來適宜設定。又，上述外用組成物只要以發揮人類点防禦素之分泌促進作用為限度，亦可為具有人類点防禦素分泌促進作用以外之作 11 1342773 用之外用組成物、具體來說，可舉創傷治癒劑、輕拭劑、清淨劑（例如洗顏料、洗面乳' 身體洗淨料等）、基礎化妝料（例如乳液、乳霜、化妝水、油及面膜等）、刷牙劑、洗口劑、口中清涼劑、口中用貼附劑等形態之外用組成物。尤其是從適用 5 於口腔内而可發揮人類yS防禦素分泌促進作用之觀點來看，以口中用貼附劑、刷牙劑、洗口劑或口中清涼劑之形態為佳。

又，上述外用組成物亦可為浣腸製劑、點眼劑、點鼻劑等形態。又，使用蒸散性有機酸作為人類/5防禦素分泌促進劑之有效成分時，藉由使有效成分揮發（蒸發）並吸取，亦可適用 10 於鼻腔内、口腔内或支氣管内。以這種形態來使用之方法，可舉例如將含有有效成分之水溶液加熱等，吸取所得到之蒸氣這種方法。亦可以如此使有效成分蒸發來使用之形態調製上述外用組成物。調製為這種形態時，上述外用組成物可因應需要，藉由含有芳香成分，作為芳香液來使用。作為人類召防禦素分 15 泌促進劑之有效成分來使用之蒸散性有機酸可舉例如醋酸、丙酸、蟻酸、酪酸、纈草酸等。上述人類/3防禦素分泌促進用之外用組成物中之上述人類 /3防禦素分泌促進劑之混合比例，可因應該組成物之形態、有效成分之種類、對象者之年齡或性別、所期待之效果等來適宜 20 地設定。例如，相對於上述外用組成物之總重量，上述人類/3 防禦素分泌促進劑之有效成分之比例可舉以總量0.001重量％以上為佳，又以0.005〜99重量％為佳，又以0.01〜99重量％更佳。本發明之人類/3防禦素分泌促進劑藉由使用於皮膚或黏膜，可發揮人類/5防禦素分泌促進作用。使用該人類/3防禦素 12 1342773 分泌促進劑之量及次數，可因應有效成分之種類或濃度、使用者之年齡或性別、使用形態、所期待之程度等來適宜地設定。例如，以一日1〜10次之程度，於皮膚或黏膜使用人類/3防禦素分泌促進劑之有效成分O.lmg以上，又以0.5〜lOOOOmg為佳。 5 又，調製含有本發明之人類点防禦素分泌促進劑之人類/3

防禦素分泌促進作用之食品時，在一般之食品製造中，以上述有效成分為成分之一混合於食品（包含飲料）中即可。又，人類/5防禦素分泌促進用食品中，可適當含有食品衛生上可容許之各種食品添加物。 10 上述食品可舉例如特定保徤用食品、營養補助食品、病患

用食品等。更具體來說，可例舉飲料（碳酸飲料、清涼飲料、乳飲料、酒精飲料、果汁飲料、茶類、營養飲料等）、粉末飲料（粉末果汁、粉末湯等）、點心類（口香糖、糖果、餅乾、膠質點心、仙貝、比斯吉、果凍、牛奶糖、檸檬劑糖、可食性 15 片材、可食性薄片、喉錠等）、口中清涼劑（口香糖、飴、膠質點心、可食性片材、可食性薄片、喉錠等）、乳製品（乳酪、優格等）、麵包、麵類、五榖、調味料（醬汁、調味汁等）等。從促進口腔内人類yS防禦素之分泌這個觀點來看，其中適宜的可有口香糖、膠質點心、檸檬劑、糖果、可食性片材及可食性 20 薄片。上述人類/3防禦素分泌促進用食品中，所混合之人類/3防禦素分泌促進劑之比例，可因應有效成分之種類、對象者之年齡、性別、所期待之效果等來適宜地設定。例如，相對於上述食品之總重量，上述人類;5防禦素分泌促進劑之有效成分之比 13 1342773 例可舉以總量0.01重量％以上為佳，又以〇〇2〜1〇〇重量％為佳又以0.05〜100重量％更佳。關於上述人類点防禦素分泌促進用食品—日之攝取量。因應有效成分之種類或濃度、使用者之年齡或性别、食品之^ 5態、所㈣之效果，來適宜地設枝進人類諸紫素分泌所冑 · 要之有效量。例如，該食品-曰之攝取量，可舉人類卢防紫素 . 分泌促進劑之有效成分o.lmg以上，又以〇5〜1〇〇〇〇mg之I為佳。 .、又，調製含有本發明之人類/3防禦素分泌促進劑之人類点 · 1〇防禦素分泌促進作用之内用醫藥品組成物或内用醫藥部外品組成物時，除上述有效成分之外，再混合藥學上可容許之基劑或載體，調製成所希望之形態即可。又，可因應需要任意配合結合劑、崩解劑' 滑澤劑、濕澗化劑、緩衝劑、保存劑、香料等藥學上可容許之添加劑。上述内用醫藥品組成物或内用醫藥部外品組成物之形態，並無特別限制，不過宜為可在黏膜上、特別是口香内熔解者。 $ 例如，可舉薄片劑、喉錠、咀嚼錠、粉劑、錠劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑等。其申，從可在口腔内熔解這個觀點來看，以舉薄片劑、喉錠及咀嚼錠為佳。 )〇 > 關於上述内用醫藥品或内用醫藥部外品組成物中，人類冷防禦素分泌促進劑之混合比例，可因應有效成分之種類、組成物之形態、對象者之年齡或性別、所期待之效果等來適宜地設疋。例如，相對於上述内用醫藥品或内用醫藥部外品組成物之總重量’上述人類点防禦素分泌促進劑之有效成分之比例為總 14 1342773 量0.01重量％以上為佳，又以0.02〜99重量％為佳，又以0.05〜99 重量％更佳。

關於上述内用醫藥品或内用醫藥部外品組成物人類之一曰之投藥量，會隨著有效成分之種類或濃度、使用者之年齡或性 5 別、組成物之形狀、投藥方法、所期待之程度等而不同，因此不能統一規定。不過只要是可促進人類/3防禦素分泌之有效量即可。例如，一曰投藥1〜1〇次，每一次之投藥量為人類召防禦素分泌促進劑之有效成分O.lmg以上，又以0.5〜lOOOOmg之量為佳。 10 如前所述，有機酸具有促進人類/3防禦素分泌之作用。因此，本發明更提供有機酸之用於製造人類^防禦素分泌促進用之外用組成物或内用組成物之用途。 (2)人類卢防禦素分泌促進方法如前所述，有機酸可有效促進人類/3防禦素之分泌。因此， 15 本發明提供利用有機酸促進人類/3防禦素之分泌之方法。

本發明之人類点防禦素分泌促進方法，係藉由針對目的欲促進人類/5防禦素分泌之身體部位以外用形態投予有機酸來實施。又，本發明之人類/3防禦素分泌促進方法可藉由以内用形態投予有機酸，或使對象攝取有機酸來實施。本發明之方法 20 係藉由使用上述（1 )之人類/3防禦素分泌促進劑、尤其是人類/3防禦素分泌促進用之外用組成物、内用組成物或食品來實施。本發明方法中，被促進分泌之人類/5防禦素、使用之有機酸、該有機酸之投藥量或投藥次數、作為分泌促進對象之身體 15 1342773 部位（或組織）等，如前（1 )所記載。藉由使用有機酸，可有效促進人類yS防禦素之分泌。因此，本發明更是提供有機酸之用以促進人類/3防禦素分泌之用途。 (3)人類石防禦素分泌促進方法-2 5 又，本發明人發現，藉由使口腔内環境暫時呈現酸性，即

可促進口腔内之人類/3防禦素分泌。依據該發現，本發明更提供促進口腔内人類点防禦素分泌之方法。藉該方法，欲促進人類/3防禦素分泌，

口腔内環境暫時呈現酸性，具體來說使口腔内之pH保持在7 10 以下即可，又以6.2以下為佳。又，該方法中，使口腔内環境保持酸性之時間，是促進人類/3防禦素分泌之有效時間即可。又，該方法中，欲使口腔内環境成為酸性，例如只需在口腔内投予前述有機酸即可。該方法之適當實施形態之一例，可舉在口腔内投予前述人類/3防禦素分泌促進劑之方法。藉該方法，· 15 可保持口腔内健康，因此，該方法對預防及緩和牙周病、口内炎、齟齒、口臭等是有用的。又，上述（1 )之人類yS防禦素分泌促進劑之用途、或上述 (2)之人類/3防禦素分泌促進方法中，皮膚或黏膜上之pH條件並無特別限制。 20 實施例以下舉實施例及試驗例說明本發明，然而本發明並不受限於這些實施例。又，以下，人類/3防禦素亦僅表記為hBD-2。實施例1 口香糖依據一般方法製造下述處方之口香糖。 16 1342773 混合量（重量％) 檸檬粉末 5.0 (檸檬粉末中含檸檬酸75重量％) 口香糖基質（主成分：醋酸乙烯） 22.0 木糖醇 35.0 麥芽糖醇 27.0 香料適量合計 100重量％實施例2 檸檬劑糖果

依據一般方法製造下述處方之檸檬劑糖果。混合量（重量％ ) 蘋果酸碳酸氫鈉木糖醇麥芽糖醇玉米澱粉合計 7.5 7.5 40.0 30.0 15.0 100重量％實施例3 口中清涼錠（液狀）依據一般方法製造下述處方之口中清涼錠（液狀）。乳酸混合量（重量％) 0.2 1 -薄荷醇 1.0 乙醇 40.0 丙三醇 20.0 單月桂酸十丙三醇 0.5 香料 0.1 精製水殘量合計 100重量％實施例4 口中清涼錠 (喉錠）

10 依據一般方法製造下述處方之口中清涼錠（喉錠）。 17 1342773 酒石酸 1 -薄荷醇碳酸氫鈉乳糖蔗糖脂肪酸酯風味劑甘味劑合計混合量（重量％) 45 1 24 25 3 1 1 100重量％實施例5 食品（喉錠）依據一般方法製造下述處方之食品（喉錠）。

抗壞血酸乳糖木糖醇蔗糖脂肪酸酯風味劑合計混合量（重量％) 5.0 85.5 5.0 4.0 0.5 100重量％實施例6 液體刷牙劑依據一般方法製造下述處方之液體刷牙劑。

延胡索酸 1-薄荷醇碳酸氫鈉混合量（重量％) 45 1 24 乳糖 25 蔗糖脂肪酸酯 3 風味劑 1 甘味劑 1 合計 100重量％實施例7 芳香液 10 依據一般方法製造下述處方之芳香液。 18 1342773 精製水無水乙醇檸檬萃取葡萄柚萃取醋酸香料合計混合量（重量％) 54 40 4 1 1 適量 100重量％實施例8 點鼻劑

依據一般方法製造下述處方之點鼻劑。成分名混合量（重量％) 氣化鈉 0.9 檸檬酸 1.0 pH調整劑精製水合計適量殘餘 100重量％實施例9 點眼劑依據一般方法製造下述處方之點眼劑。

成分名氣化納氣化鉀黃素腺二核苷酸透明質酸擰檬酸 pH調整劑精製水合計混合量（重量％) 0.9 0.1 0.05 0.1 1.0 適量殘餘 100重量％試驗例1 yS防禦素分泌促進確認試驗-1 10 為了評價各種有機酸之yS防禦素分泌促進效果，以健常人1 名為受驗者進行下述試驗。 19 1342773

藉吐出法回收業已處於安靜之受驗者在3分鐘内所分泌之唾液（以下記為控制組）。然後，於口腔内放入延胡索酸50mg，保持1分鐘後，與分泌出之唾液一起回收。藉ELISA法，測定所回收之唾液中之人類yS防禦素-2濃度，依據下記計算式，計算 5 出在1分鐘内藉該有機酸而分泌之人類/3防禦素-2之量。但是，下記計算式中之01液量（ml )係以唾液重量1 g=唾液量1 ml，而從業已回收之唾液之重量（g)算出。前述相同試驗，亦分別利用抗壞血酸、檸檬酸、蘋果酸、乳酸、己二酸、醋酸及酒石酸取代延胡索酸來進行。又，乳酸及醋酸之情況，係藉由在口 10 腔中置入業已在該有機酸50mg中添加水以調整全量為lg者，來進行上述試驗。計算式 [1分錢被分泌之hBD-2之量（ng/min)]= {[唾液中之hBD-2濃度（ng/ml)] X [唾液量（ml)]}/[°t液回收時間（min)] 15 #唾液回收時間，在控制組為3分鐘，在投予有機酸後之情況為1分鐘。

所得到之結果顯示於第1圖。可清楚得知，藉由在口腔内適用有機酸，而增加了唾液中所分泌之人類yS防禦素-2量。從該結果，確認了有機酸具有促進活體内人類点防禦素-2之分泌之作用，尤其在口腔内之人類/3防禦素-2之分泌促進作用上很優 20 異。試驗例2 yS防禦素分泌促進確認試驗-2 為了評價各種有機酸之/5防禦素分泌促進效果，以健常人6 名為受驗者進行下述試驗。有機酸係使用檸檬酸、蘋果酸、延胡索酸、L-麩胺酸、反桂皮酸、L ( + )-抗壞血酸、琥珀酸、 20 1342773 DL·-酒石酸、己二酸、L·-乳酸及醋酸。

藉吐出法回收業已處於安靜之受驗者在3分鐘内所分泌之唾液（以下記為控制組）。然後，於口腔内放入有機酸50mg ’ 保持1分鐘後，與分泌出之唾液一起回收。藉ELISA法，測定所 5 回收之唾液中之人類/3防禦素-2濃度，依據下記計算式，計算出在1分鐘内藉該有機酸而分泌之人類/3防禦素-2之量。但是，下記計算式中之唾液量（ml )係以唾液重量1 g=唾液量1 ml，而從業已回收之唾液之重量（g)算出。又，乳酸及醋酸之情況，係藉由在口腔中置入業已在該有機酸50mg中添加水以調整全 10 量為lg者，來進行上述試驗。計算式 [1分錢被分泌之hBD-2之量（ng/min)]= {[唾液中之hBD-2濃度（ng/ml)] X [唾液量（ml)]}/[唾液回收時間（min)] #唾液回收時間，在控制組為3分鐘，在投予有機酸後之情況為1分鐘。 15 所得到之結果顯示於第2圖。從該結果可清楚得知，與試驗

例1之結果同樣地，藉由在口腔内適用有機酸，而增加了唾液中所分泌之人類/3防禦素-2量。試驗例3 沒防禦素分泌促進確認試驗-3 (濃度依賴性）為了評價有機酸之万防禦素分泌促進效果與濃度依賴性之 20 關係，以健常人3名為受驗者進行下述試驗。藉吐出法回收業已處於安靜之受驗者在3分鐘内所分泌之唾液（以下記為控制組）。然後，於口腔内放入0.01重量％蘋果酸水溶液1 ml (蘋果酸攝取量0.1 mg )。保持1分鐘後，與分泌出之唾液一起回收。藉ELISA法，測定所回收之唾液中之人類/3 21 1342773 防禦素-2濃度，依據下記計算式，計算出在1分鐘内藉攝取該蘋果酸而分泌之人類石防禦素_2之量。但是，下記計算式中之唾液量（ml)係以咕液重量lg==唾液量lml，而從業已回收之唾液之重量（g)算出。進一步，分別利用〇.〇5、0.1、0.2、0.5及1 5 重量％蘋果酸水溶液（攝取量〇.5、1、2、5、10mg)進行。計算式 Π分鐘被分泌之hBD-2之量（ng/min)]= {["t液中之hBD·2濃度（ng/ml)] X [喷液量（ml)]}/[唾液回收時間（min)] #唾液回收時間’在控制組為3分錢，在投予有機酸後之情況為1分錢。 10 所得到之結果顯示於第3圖。從第3圖可清楚得知，唾液中所分泌之人類沒防禦素-2量係蘋果酸水溶液之濃度依賴性而增大。從該結果，確認了有機酸之人類防禦素·2分泌促進效果具有濃度依賴性，即使為〇·〇1%濃度（攝取量0.lmg)，也具有人類万防禦素-2分泌衍生效果。 15 產業上可利用性人類々防禦素因具備以下優異特性而為人所知：（a)由於其自身具有抗菌性，因此可在短時間内發揮抗菌作用；（b)由於在活體内分必，因此對習知抗菌劑難以利用外用或内用形熊來投藥之部位，也可發揮優異抗菌作用：（c)使樹狀細胞或記 20憶T淋巴球趨化（chemotaxis)(亦即，動貞免疫負責細胞而與後天免疫有關）。本發明之人類点防禦素分泌促進劑可在適用之部位促進冷防禦素之分泌，尤其是促進人類点防禦素_2之分泌。因此，藉本發明之人類/3防禦素分泌促進劑，可促進点防禦素之分泌’ 22 1342773 增強活體内之抗菌作用或免疫作用，藉此，可提高活體之防禦機制。因此，本發明之人類以方紫素分泌促進劑對預防或緩和起因於細菌、真菌、病毒、原蟲感染所造成之症狀上很有效。尤其是可有效利用在預防異位性皮廣炎之二次感染、預防面皰 5粉刺、防止口臭、防止足臭、預防到鬚或脫毛後之二次感染、預防尿布疹之二次感染、預防痱子之二次感染、預防燙傷之二次感染、預防因使用類固醇造成之易感染性等護膚上。又，對起因於細菌、真菌、病毒、原蟲感染所造成之皮廣粗糖、皮廣乾燥、富貴手等護廣上也有效。 10 又，本發明之人類点防禦素分泌促進劑，可期待其依據人類；5防禦素分泌促進作用所帶來的藥理效果。因此，本發明之人類/5防禦素分泌促進劑，例如投藥於眼内時，可預防或治療病毒性結膜炎、細菌性結膜炎、麥粒腫等；投藥於鼻腔内或咽頭時，可預防或治療感W、流行性感冒等：投藥於鼻腔内時， 15可預防或治療鼻炎、膿性鼻漏、副鼻腔炎等；使用於口腔内時，可預防或治療牙周病、口内炎、齟齒等，使用於口唇部時，可預防或治療單純泡疹等；使用於皮膚時，可預防香港腳治療泡療、疢贅、傳染性軟屬腫、水痘、性器官泡療病毒感染症、念珠菌症、帶狀泡m躲、面皰、異位性皮膚炎、創傷 20等；使用於其他部位時，可作為肺炎、胃炎 '腫瘤、後天性免疫缺乏症、錐蟲病等疾病之預防或治療劑。這些疾病當中，作為與細菌、真菌、病毒、原蟲等有關之疾病之預防或治療劑尤其有用。又，本發明之人類沒防禦素分泌促進劑，在口腔内及口唇 23 1342773 部可發揮進一步的/S防禦素分泌促進作用，因此作為牙周病、口内炎、齟齒、口臭、單純泡疹等之預防或治療劑特別有效。因此，本發明之人類yS防禦素分泌促進劑可適當使用在用以保持健康口腔環境之護膚製品。 5【圖式簡單說明】第1圖是顯示試驗例1中，於口腔内使用各有機酸時，唾液中業經促進分泌之人類/3防禦素-2之量（ng/min)之圖。第2圖是顯示試驗例2中，於口腔内使用各有機酸時，唾液中業經促進分泌之人類/3防禦素-2之量（ng/min)之圖。 10 第3圖是顯示試驗例3中，於口腔内使用各種量之蘋果酸時，唾液中業經促進分泌之人類/5防禦素-2之量（ng/min )之圖。【主要元件符號說明】無

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Claims

1342773 公告本 5 10 15 忉年Ιί月？曰修(更)正本第93丨28401號專利申請案申請專利範圍替換本卯年u」十、申請專利範圍： 1· 一種人_防紫素分泌促進劑’其特徵在於·以選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二醆、酒石酸、桂皮醆、麩胺酸及_賴構成群組令之至少一種有機酸作為有效成分，且施用在口腔内而用以促進人類汐防禦素在口腔内之分泌。 2. 如申請專利範圍第】項之人類点防紫素分泌促進劑其中前述有機酸選自於由延胡索醆、蘋果酸、擦樣酸及酒石酸所構成群組中之至少一種。 3. 如申請專利範圍第！項之人類^防紫素分泌促進劑其中成為分泌促進對象之人類召防禦素為人類y?防禦素-2。 4- 一種人類厶防禦素分泌促進用之外用組成物，含有如申請專利範圍第卜3項中任-項之人類㈣禦素分泌促進劑。 5. —種人類/3防禦素分泌促進用之内用組成物，含有如申請專利範圍第卜3項中任-項之人類諸紫素分泌促進劑。 —種人類/3防禦素分泌促進用之食品，含有如申請專利範圍第1 ~3項中任一項之人類厶防禦素分泌促進劑。 •一種人類/9防禦素分泌促進方法，係於非治療目的下，將有效量之選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸所構成群組中之至少一種有機酸投予至口腔内，以促進人類/5防禦素在口腔内之分泌。 •如申請專利範圍第7項之人類点防禦素分泌促進方法，其中前述有機酸選自於由延胡索酸、蘋果酸 '檸檬酸及酒石酸

25 所構成群組中之至少一種。 9.如申請專利範圍第7項之人_防禦素分泌促進方法，其中成為分泌促進對象之人類召防禦素為人類沒防禦素_2。〇.如申請專利範圍第7項之人類万防紫素分泌促進方法，其係使用如申吻專利範圍第1 ~3項中任一項之人類沒防紫素分 &促進劑作為有機酸。 1·如申請專利範圍第7項之於口腔内的人類沒防紫素分泌促進方法，其係使用如申請專利範圍第5項之内用組成物作為有機酸。 2’如申靖專利範圍第7項之人類万防禦素分泌促進方法，其係使用申請專利範圍第6項之食品作為前述有機酸。 13. 如申凊專利範圍第7項之人類々防禦素分泌促進方法，其係使用申請專利範圍第4項之外用組成物作為前述有機酸。 14. 一種將有機酸使用在製造人類石防禦素分泌促進劑之用途’該有機酸係選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸樣酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸所構成群組中之至少一種物質，且該人類万防禦素分泌促進劑係施用口腔内而用以促進人類点防禦素在口腔内之分泌。 15. —種將有機酸使用在製造人類点防禦素分泌促進用内用組成物之用途’該有機酸係選自於由延胡索酸、蘋果酸、择檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸所構成群組中之至少一種物質，且該人類泠防禦素分泌促進用内用组成物係施用口腔内而用以促進 1342773

人類/5防禦素在口腔内之分泌。 16 · —種將有機酸使用在製造人類点防禦素分泌促進用食品之用途，該有機酸係選自於由延胡索酸、蘋果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺 5 酸及琥珀酸所構成群組中之至少一種物質，且該人類召防禦素分泌促進用内用組成物係施用口腔内而用以促進人類 /3防禦素在口腔内之分泌。

17. —種於非治療目的下將有機酸用以促進人類/3防禦素在口腔内之分泌的用途，且該有機酸係選自於由延胡索酸、蘋 10 果酸、檸檬酸、抗壞血酸、乳酸、醋酸、己二酸、酒石酸、桂皮酸、麩胺酸及琥珀酸所構成群組中之至少一種物質。

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