TWI250162B - Beta-lactamase inhibitor prodrug - Google Patents

Description

1250162 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係揭示一種如下結構式之6-/3-超甲基青黴烧酸楓 之前藥

R 又 〇 〇 〇

其中R為Η或甲基’及其溶合物。亦揭示包含本發明前藥、 或其溶合物、可視需要選用之^内醯胺抗生素及至少一種 醫藥上可接受之載劑之醫藥組合物。 亚揭示-種提高万-内醯胺抗生素於哺乳動物體内醫療 有效性之方法’其係投予有效量之内醯胺抗生素與提高 其有效性之用量之本發明前藥，或其溶合物。 乂一卜並揭示種治療哺乳動物之細菌感染之方法，其 係對有此需要之哺乳動物投予醫療有效量之本發明醫藥組 合物。 【先前技術】 /5内fe胺抗生素（通常指青黴素與頭孢素）已廣泛用於、、二 療哺乳動物(如：人類)之感染，主要指細菌感染。咸信某： 微生物對此等抗生素具有抗性，因為其產生之多種内醯 胺酶酵素會侵人抗生素之A A醯胺環，導致藥物失效。 主Kellogg之吴國專利案Ν〇·4,287，⑻揭示多種Η)至烷基 月M m包括6_ ^ _羥甲基f黴貌酸楓，其係本發明所使 87130 1250162 用之/3 -内酸胺酶抑制劑，為強效之厶-内醯胺酶抑制劑。 Metzger等人之英國專利申請案GB2〇5322〇A及Schneider等 人之英國專利申請案GB2〇76812同樣揭示卜石-羥甲基-青 後酸楓為-内醯胺酶抑制劑。然而，召-内醯胺酶抑制劑 6-/5 -羥甲基-青黴烷酸碉於預備臨床試驗中，當經口投藥時 ’於嚆齒類活體内之吸收性極差。

Kellogg、Metzger等人與Schneider等人亦揭示6- /3 -幾甲 基青黴烷酸楓之酯前藥，其在預備臨床試驗中很容易於活 體内水解，且已於嚅齒類動物身上證實其吸收性優於游離 酸。 $而，許多此等酯前藥僅可合成低熔點之油或固體，以 致其於醫藥調配物中之用途比具有適合顧、礙磨或純化 之熔點之固體前藥更受限制。 此外，此等酯前藥經口投藥時，典型地不會被高度吸收 。因此可能需要比吸收性較高之前藥更高之口服藥物劑量 i方能得到沒-内醯胺酶抑制劑6+經甲基青黴垸酸楓之 二療上有效之血漿濃度。此外，吸收性較差之前藥經口投 =可能造成接受者發生m會增加且嚴4性提高， n破吸收之前藥會在胃腸道中水解，形成活性率物， 且殘留之任何羥胺节青黴素會選擇性 族雜夕V莊， 吊4文生物囷落 、 必要成分。此外，製造所需前藥之過程 低。 ❿之成本相當 口此，需要一種口服生體利用率高 6- η ^ θ'*内醯胺酶抑制劑 經甲基青黴烷酸楓之結晶前藥， 乂具有適當熔點之結 87130 1250162 晶更佳。 【發明内容】 本發明係有關6-A -羥甲基青黴烷酸楓之前藥（亦稱為4_ 硫雜小氮雜雙環[3.2.0]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3_二甲基 -7-氧代-，4,4-二氧化物（2S，5R，6R))及其溶合物，其結構式如 下：

其中R為Η或甲基。本發明之前藥包括4-硫雜氮雜雙環 (^。·(^庚烷^-羧酸…气羥甲基卜^一-二甲基^-氧代-^^苯 曱醯氧基）-曱酯，4,4-二氧化物（2S，5R，6R); 4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2·0]庚烧-2-魏酸，6-(¾甲基）_3，3_二甲 基-7-氧代-，-1-(苯甲驢氧基）-乙酯，4,4-二氧化物 (2S，5R，6R); 4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚烷-2-羧酸，6-(經甲基）_3,3_二 曱基-7-氧代-，（lR)-l-(苯甲醯氧基）乙酯，4,4_二氧化物 (2S，5R，6R);與 4-硫雜-1-氮1雜雙壞[3.2.0]庚烧-2-魏酸，6_(窥甲基）-3 3 -二 曱基-7-氧代-，（lS)-l-(苯甲酸氧基）乙@旨，4,4-二氧化物 (2S，5R，6R)。本發明較佳前藥為4-硫雜-K氮雜雙環[3 2 〇] 庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲基-7-氡代_，（1Κ)-1_(苯甲 酉藍氧基）乙酯，4,4-二氧化物（2S，5R，6R)或其溶合物，其結構 87130 1250162 式如下：

::明：有關—種醫藥組合物，其包含本發明前藥或其 物、可視需要選用之万-内酸胺抗生素與至少—種” 卜可垃為裡酉樂 & —、賦形劑或稀釋劑。較佳者 :ί:::崎青彳數素。亦較佳為該醫藥組合物心 月'』一-石爪雜+氮雜雙環[3.2.〇]庚院-2-羧酸，6_(經甲基）_ 3’3· 一甲基-7_氧代'，⑽)·1·(苯甲醯氧基）乙酯，4,4-二氧化 物（2S，5R，6R)或其溶合物。更佳為醫藥組合物中包含心硫雜 小氮雜雙環[3.2.0]庚烧_2_㈣，咐甲基）_3,3_ = = 1R)小（苯二酿氧基）乙自旨，4,4_二氧化物（2s,5R,6R)或 其溶合物、㈣节青黴素與醫藥上可接受之載劑、賦 或稀釋劑。 本發明並有關-種提高石_内醯胺抗生素於哺乳動物體 内之醫療有效性之方法，其係對該哺乳動物投予有效量： /3-内醯胺抗生素與提高其有效性之用量之本發明前藥，或 其溶合物。較佳者，該卜㈣胺抗生素為經胺节青徽素。 亦較佳為所使用之前藥為4_硫雜小氮雜雙環[3 ·2 〇]庚烷-2_ 緩酸，6-(經甲基)_3,3_二甲基_7_氧代、(1R)小(笨甲酿㈣ 乙酉旨，4,4-二氧化物（2S,5R，6R)或其溶合物。更佳為該前藥為 4-硫雜-1-氮雜雙環[3.2.0]庚烷_2-羧酸，6_(羥曱基）_3,3_二曱 基-7-氧代-，（1R)-1_(笨曱醯氧基）乙酯，M-二氧化物 87130 -10- 1250162 (2S，5R，6R)，或其溶合物，且該内醯胺抗生素為經胺节 青黴素。亦較佳為該哺乳動物為人類。 本發明並有關—種治療哺乳動物細®感染之方法，其係 對有此需要之哺乳動物投予醫療有效量之本發明醫藥組合 物較么者’此醫藥組合物尚包含内醯胺抗生素。較佳 者’ =·内醯胺抗生素為經胺节青黴素。亦較佳者，所使 用之前藥為4·硫雜_】氮雜雙環[3.2.G]庚院_2邊酸，6_(經甲 基）-3,3-二甲基_7·氧代_，〇R)小（苯甲醯氧基）乙醋，n 氧，物（2S，5R，6R)或其溶合。更佳為該前藥為4_硫雜_ι_氮雜 雙核[3.2.0]庚貌_2,酸，6_(經甲基）_3,3_二甲基氧代_， 〇R)-H苯甲醯氧基）乙醋，4,4_二氧化物（2s，5r，6r)或其溶 :物’且該石-内醯胺抗生素為羥胺〒青黴素。亦較佳為該 哺乳動物為人類。 【實施方式】 用於說明本發明之術語於本文中之定義如下。 一有效量”―詞係指内酿胺抗生素單獨投藥或與本發明 “組合投藥時，可在哺乳動物體内預防細菌感染發生， 或減輕其症狀、阻止其發展、或消除其感㈣之用量。。 活ΓΛ其，有效性時之用量，’指當該前藥投予哺乳動物後於 $豆7午成本發明之/3 _内醯胺酶抑制劑時，可提高共 5才又予之/5 _内驢胺抗生素醫療有效性時之用量。 ° 括::;Γ動物，'一詞指屬於哺乳動物綱之動物。魏^ 羊、狗.人頰、摇子、黑㈣、大獲獲、牛、豬、馬、綿 手狗、猶、小白鼠與大老鼠。 87130 1250162 本發明中，較佳哺乳動物為人類。 ’’醫藥上可接受，，一詞竟於姑 〜曰μ载劑、稀釋劑與賦形劑必須 可與組合物中他成合如a 成刀相公’且不危害其接受者。本發明 之醫藥組合物可依相關技蓺 π匕知之方式，採用習知且容易 取得之成分製備。 本發明之前藥包括心硫雜錢雜雙環[3.2.0]庚烧-2省酸 ’6-(搜甲基）-3,3-二曱基i氧代、小（苯甲醯氧基）甲酯4,心 二氧化物（2S，5R，6R)(其說明於實例3)及4·硫雜小氮雜雙環 [3.2.0]庚烷j羧酸，6,甲基)_3,3_二甲基氧代、小(苯 曱酉监虱基）乙酯，4,4-二氧化物（2S，5R，6R)(其說明於實例4” /說明於實例7之本發明前藥於上胃腸道中安但吸收後 很谷易於'舌體内水解形成6_冷-羥曱基青黴烷酸楓(下文中 %為6-/?-HMPASn)，其係一種万_内酸胺酶抑制劑，可提 鬲/5-内醯胺抗生素對抗會產生沒·内醯胺酶之細菌之有效 性。此/3 -内醯胺酶抑制作用保留了共同投藥之沒_内醯胺抗 生素對抗/?-内醯胺酶（+)菌種之抗細菌藥效。 由於本發明前藥可於活體内水解形成游離酸点_内醯胺 酶抑制劑6-/3-HMPAS，因此此等前藥當投予哺乳動物時， 適用於加強共同投藥之石_内醯胺抗生素對抗會產生点·内 酉避胺酶之細菌之有效性。 本發明别樂可用於併用/5 -内醯胺抗生素之組合療法，供 治療例如：人類之呼吸道、尿道與軟組織之感染。本發明 組合物亦可用於治療其他哺乳動物之感染，如··貓之乳腺 87130 -12- 1250162 炎。 可採用本發明前藥、醫藥組合物及方法治療之細菌感染 上哞吸道疾病，包括集體感染型肺炎（CAP)、慢性支氣管炎 之急性惡化（AECB)與急性細菌性鼻竇炎（ABS)、由呼吸病 原囷引起者如：流感嗜血菌（Haemophilus influenzae)與卡汉 莫拉氏i] (M or axell a catarrhal is)，包括其抗生素抗性單離 株。 此外’可採用本發明包含抗生素之醫藥組合物治療之細 菌感染特定言之包括因流感嗜血菌或肺炎鏈球菌 (Streptococcus pneum〇niae)，包括藥物抗性肺炎鏈球菌 (DRSP)如：青黴素抗性肺炎鏈球菌所引起之小兒中耳炎、 鼻竇炎、肺炎與成人支氣管炎急性惡化。 其他可採用本發明包含抗生素之醫藥組合物治療之細菌 感染包括因大腸桿菌（E· C〇H)、肺炎克雷伯氏菌（Klebsieiia pneumoniae)、腸桿菌屬（Enter〇bacter spp)，及腸桿菌科所 有其他成員引起之軟組織感染。 /、他叮採用本發明包含抗生素之醫藥組合物治療之細菌 感染包括彼等因會產生冷·内醯胺酶之二甲氧基苯青黴素 易感性葡萄球菌及會產生万—内醯胺酶之厭氧菌所引起之 感染。 由於本發明之前藥包含一個以上對掌性中心，因此會出 現不同之光學活性非對映異構塑。更明確言之，本發明較 佳^樂於1 -乙基位置包含一個對掌性中心。本發明包括心 硫雜小氮雜雙環[3·2.〇]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲 87130 -13- 1250162 基-7-氧代-，-1-(苯甲醯氧基）乙酯，4,4-二氧化物（2s，5R，6R) 之1R與1 S兩種非對映異構物，亦包括此等非對映異構物之 混合物，如消旋混合物。此等非對映異構型、其混合物及 其個別合成法亦說明於下列實例4-6中。 甚至更佳者，本發明前藥包括4-硫雜氮雜雙環[3.2.〇卜 庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）_3，3_二甲基氧代_，_ΐβ(苯甲醯 氧基）乙酯，4,4-二氧化物（2S，5R，6R)之1R非對映異構物，其 說明於實例5中。 本發明刖樂可呈多晶型。前藥之多晶型可成為本發明之 一部份，其可由本發明前藥於不同條件下結晶製成。例如 :使用不同溶劑或不同溶劑混合物進行再結晶;於不同溫 度下結晶；於結晶期間，由極快速至極緩慢之冷卻條件範圍 内之不同冷卻模式。亦可由前藥加熱或熔化後逐漸或快速 7 P而得到夕日日型。多晶型之存在可由固體探針nmr光譜 子、IR光4學、i讀目g比色法、粉末1射線繞射或其他 此等技術測定。 例如：水合物。本發明包 本發明前藥亦可呈溶合物型 括其各溶合物與混合物。 从可樂而言，前藥之最低投 内酸胺抗生素之有效性時之田3 、， 、、， 生寸之用1。前藥之最高量為其單 或併用/?-内醯胺抗生素組合^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ 口仅条日寸仍為毒物學上可接 時之用量。 典型地，對體重至少4〇公斤 每曰劑量在約200 mg至約1 g或 之成人與兒童而言，前藥之 以上之間。對體重40公斤以 87130 1250162 下之兒里而言，前藥之每日齊 里在約7 mg/kg/天至約2〇 mg/kg/天或以上之間。然而， ^ 此寺數字僅供說明用，有時 候可能必須使用此等限制範圍以外之劑量。 本發明前藥之每曰劑量可分成 刀战数4份，一天投藥1至4次。 治療細菌感染時，本發明前¥ — 市14召·内醯胺抗生素共同投 樂。前藥與/3 _内醯胺抗生辛τ 、，— 畜j冋日守投藥或依序投藥。此外 ’鈾藥與抗生素可包含在分開 你刀閉之髻樂組合物中或含在單一 醫藥組合物中。 /3 -内醯胺抗生素為對酵 同/3 -内醯胺酶酵素去除 與本發明前藥共同投藥之典型 素性降解作用敏感且可被多種不 活f生之/5 _内^ 抗生素。此等0 •内胺_敏感性抗生素包 括實例（但不限於）青黴素，如：天然青«、㈣节青黴素 與胺苄青黴素；頭孢素如：希法卓（cefadr〇xil)、希法林 (cefaz〇lin)、希法辛（cephalexin)、希法汀㈣沖山咖）、希 法置（cephapmn)、希法定（cephradine)、希法克（cefacl〇〇、 希法得（cefamandole)、希弗喜（cefoicid)、希弗耐（cef〇ranide) 希曰其（cefprozil)、希弗散（cefuroxime)、希狄尼（cefdinir) 希弗松（cefoperazone)、希弗塔（cefotaxime)、希普得散 (cefpodoxime)、希塔定（ceftazidime)、希特丹（ceftibuten) 、希色散（ceftizoxime)、希奇松（ceftriaxone)與希弗平 (cefepime);及莫巴坦類（monobactams)如··亞奇南（aztreonam)。 典型地，當共同存在於同一醫藥組合物中時，y9-内醯胺 抗生素對前藥之重量比在約丨5:丨至約1:1之間。 較佳者，本發明前藥與羥胺苄青黴素共同投藥。更佳者 87130 -15- 1250162 ’由羥胺T青黴素與前藥4_硫雜小氮 2规6,甲基)_3,3_二甲 取〇]·庚院_ A),r 4/1 虱代_ ,(α)-ι-(笨甲醯氧 土 -日，，_—氧化物（2S，5R，6R)共同投藥。 ^文所知用’’經胺苄青黴素詞應指 驗鹽、或其水合物，如：特定言之經胺：：賴其 ,,, a ^ L妝卞5慠素三水合物 或（、、、口日日之）羥胺节青黴素鈉。 偷去少舌旦 于升乃有口兄明，否則羥胺Τ青 2主係指相應游離酸之當量重。此外，咸了解，經 '下月Μ，貫際上加至調配物中之重量還可以配合-般操 作法考嚴备胺Τ青黴素之藥效調整。 典型地’羥胺苄青黴素對體重至少40公斤之成人與兒童 之^劑量在約25〇 mg至約5g之間。對體重4〇公斤以下之 兒童而言，提高有效性之羥胺苄青黴素用量為每曰約2〇 mg/kg/天至約15〇mg/kg/天之間 '然而，此等數字僅供說明 用，有時候可能必須使用此等限制範圍以外之劑量。 羥胺苄青黴素可呈立即釋出型、經修飾型或緩釋型組合 物等型式，將每日劑量分成丨至4等份投予丨_4次。適合本發 明w樂組合物之含羥胺卞青黴素之立即釋出型、經修飾髮 或緩釋型調配物及其製法說明於美國專利案N〇s_ 4,5 3 7,8 87(頒予11〇〇1^等人）、6,051，25 5(頒予(^〇11^等人）、 6,2 1 8,3 80(頒予 Cole 等人）、6,051，25 5(頒予 Conley 等人）；美 國專利申請案序號09/911，905((：〇11^丫等人）；及國際申請案 案號PCT/IB01/01899(Conley等人）。美國專利案Nos· 4,537,887、6,051，255、6,21 8,380、6,051，255 、USSN 〇9/911，905與國際申請案案號PCT/IB01/01899之教示内容 87130 -16- 1250162 已以弓I用之方式完全併入本文中。 等、、且口物中，4藥與羥胺苄青黴素之確實用量部份依 所處理之微生物而定。 又 口:，相關技蟄之人士咸了解，有些万_内醯胺化合物當經 驢=市或非經腸式投藥時有效，但有些則僅當非經腸式投 τ 了才有效。當本發明前藥與僅當非經腸式投藥時才有嗲 _、、二腸式技樂用之卢_内醯胺抗生素組合時，將使 八 非么；ρ賜· m 、口 、、几一式用之組合調配物。當前藥係與經口投藥或非經腸 式投藥時均有效之^内酸胺抗生素組合時，可製備適合經 口或非經腸式投藥之組合。此外，該前藥製劑可經口投藥 而/5-内醯胺抗生素則同時以非經腸式投藥；前藥製劑亦 可非經腸式投藥，而同時再經口投予/5-⑽胺抗生素。 本毛月之w樂組合物包含本發明前藥與至少一種醫藥上 可接叉之賦形劑、載劑或稀釋劑。 醫藥組合物中可視需要包含石-内醯胺抗生素。較佳者， /抗生素為羥胺卞青黴素。亦較佳者，該前藥為4_硫雜小 氮‘雙％_[3·2.0]庚烧-2-叛酸，6-(經甲基）」，3_二甲基·7_氧 代，（1R)小（苯甲醯氧基）乙醋，七4_二氧化物（况瓜伙卜更 佺者，该醫藥組合物包含4_硫雜小氮雜雙環[3.2.0]庚烷-2_ 羧鲅，6 (羥甲基）·3,3-二甲基1氧代_，（__〗_(苯甲醯氧基） 乙酯，4,4-二氧化物（2S，5R，6R)、羥胺苄青黴素與至少一種 醫藥上可接受之載劑。 適合此等醫藥組合物之賦形劑、稀釋劑與載劑實例包括： 填料與補充劑如：澱粉、糖類、甘露糖醇與矽衍生物；結合 87130 -17- 1250162 片J如·羧甲基纖維素與其他纖一 、與聚乙烯。㈣㈣；濕化劑如：甘酸鹽、明塌 酸約與碳酸氣納；延滞溶解劑如··石=制如：洋菜、碳 級銨化合物；界面活性劑如··録^再吸收加速劑如：四 性載劑如··高嶺土與專土;及潤滑劑如早？酸甘油一 鎂及聚乙二醇固體。該調配物 ^月石、硬脂酸㈣ 硬脂酸鎮與礦物油;渴 广’滑劑如：滑石、 基苯甲酸甲醋愈丙化_懸浮劑；防腐劑如：經 f 甜味劑；與調味劑。 製備本發明醫藥組合物時，該前藥與 内醯胺抗生素通常與 &用之yS_ 載劑中，該載劑可呈« = _稀釋或包埋在 〜t 表市包或其他容器形式。去瞄形 =稀釋劑時’其可為固體、半固體或液體材料：作為 活性成分之媒劑、载劑或介質。 …、 醫，合物可經口投藥或非經腸式投藥，亦即經肌内、 ΊΓ脈内或腹膜内。該載劑、賦形劑或稀釋劑係依據 计旦之投樂模式選擇。例如：當考慮採用 ，依據標準醫藥操作法，本發明醫藥組合物可呈 用’包括可货式錠劑、膠囊、口含錠、糖衣鍵、散劑、糖 水馳劑、水性溶液與懸浮液，等等。活性成分對載劑之 比例當然依活性成分之化學性質、溶解度與安定性，及計 晝使用=劑型而異。’然而，含/5·内Si胺抗生素與本發明前 藥之醫藥組合物最好包含約2〇%至約活性成分。若為口 服用錠劑時，常用之載劑包括乳糖、檸檬酸鈉與磷酸之鹽 類。錠劑中常使用多種崩解劑如：殿粉、與潤滑劑如：硬 87130 -18- 1250162 脂Γ、月桂基硫酸醋納與滑石。經口投藥用之膠囊型中 ，適用之稀釋劑為乳糖與高分子量聚乙二醇。卜' 水性溶液或懸洋液經σ投藥時，活性成分可與乳= 洋劑組合。若需要時，可添加某些甜味劑與： 、 μ通，製成活性成分之無菌溶液，適去調敕 溶液之ρ Η，並加以埃你 田。王 戍衝。、、，至#脈内投藥用時，溶質之魄 度應加以控制，使製劑呈等張性。 “ 本發明調配物可依醫藥技藝上常用之方法製成經口投藥 之固體劑型’例如：錠劑或散劑或供再組成懸浮液或溶液 用之粒劑產品。 / 製備此等錠劑用之合適成分與方法揭示於例如：國際申 請案WO 92/19227與w〇 95/28927，其教示内容已以引用丁之 方式完全併人本文中。散劑或粒劑調配物，如：小兒科用 懸浮液調配物可使用製造醫藥調配物之相關技藝及製造供 再、、且成此等懸浮液用之乾物調配物之相關技藝常用之技術 衣k。例如.合適之技術為混合乾粉末狀或粒狀成分，再 填裝至合適容器中。 J兒科用剤型中’本發明調配物最好將一般調配物（除了 其新賴备胺卞月彳放素：前藥比例與計晝用途不同外）製成甜 味水性糖漿調配物，其中在劑量單位體積中(例％ : 5 ml或 2·5 ml)包含合適重量之羥胺苄青黴素與前藥，該調配物為 糖桌較佳。小兒科用調配物因此可包含散裝之溶液或懸浮 液，例如：糖裝，或可製成此等溶液或懸浮液之粒劑或散 劑’浴液或懸洋液之濃度則為在此等體積中包含此等劑量 87130 -19- 1250162 。合適之此等調配物說明於國際申請案n〇pct Ep 96 881 (SmnhKilneBeecham藥廠）。本發明之調配物中除 J其活性成分經胺地素與前藥外，通常亦包含口服用 5周配物技術領域中輕進 节軚準用法之賦形劑且通常依標準比例、 一般標準粒子及等級，等等使用。 若為小兒科使用之經σ投藥懸浮液時，此等賦形劑可包 括懸浮助劑、滑動添丨丨f^ ^ A協助填充）、稀釋劑、膨脹劑、調味劑 、甜味劑與安定劑。 適用之賦形劑包括普眉狀 ，、原懸净助劑）、膠體矽石 '琥珀酸（安定劑）、財把m 勁" | ^ 甜（甜味劑卜羥丙基甲基纖維

素（懸/予助劑）與二氧彳卜々/ I 可依告地+ t h R㈣劑與膨膜劑）°調味劑 隹:求，包括—般香料，如：口香糖膠、柳燈、香 '、、、、後盆子、葡萄與金色糖漿，或其混合物。 本發明醫藥組合物可？ 旦今 如· §有適合投予此等每曰劑 里之劑量之固體單位劑型。 口口 例如··早位劑型可為錠劑，或 各有再組成用之粒劑或散劑 U 包，其中—種或兩種Ρ 仅市1至人。或者，單 懸浮液，例如：小兒科用之1 叙之固體或溶液或 當量益哭、 糖漿，配合使用已知型式之適 田里市态，以協助投予適卷 劑量通常指可分成i至糊 調配物。適當單位 量。 *小劑量投予上述每日劑量時之用 本發明另一項具體 抗細菌醫療效果之套么且，Λ 在動物體内達到 需要選用之^ «胺抗生;包含本發明前藥與可視 素之酱樂組合物，及（2)指導如何 87130 -20、 1250162 使用該醫藥組合物投藥，以達成所需醫療效果之說明。 本發明另包含利用下列實例進一步說明。然而咸了解， 本發明並無意受到其中説明之詳細内容之限制。 實例1 达/s)苯曱酸17氯-乙醋t裝益與羞昧異構性分離法 chq〇

Cl 上示（R/S) -笨甲酸1-氯-乙酯之製法如下。 於氮蒙氣下，在含122 g(862 mmol)苯甲醯基氯（Aldrich 藥腐:）之二頸圓底燒瓶中添加2.35 g(17.2 mmol)無水氯化鋅 (Aldrich藥廠），反應混合物於室溫下攪拌15分鐘後，使用 乙一醇/C〇2洛冷卻至-15 C。在混合物中慢慢添加37.9 g (862 mmol)乙醛（Aldrich藥廠），同時保持内溫在以下。 添加完畢後，使反應混合物回升至室溫。添加4〇〇 mL水與 400 mL CH2C12，分層。分離有機層，以餘和NaHC〇3、水 、鹽水洗滌，經硫酸鎂脫水，過濾及真空濃縮。經石夕膠層 析，以1.75 %乙酸乙酯/ 98.25%己烷溶離，產生55 4 g普色 油狀物。1H-NMR (CDC13, 400 MHz): 8.08 (d，2H，J二7·5Ηζ) 7.61 (t，1Η，J=7.5Hz)，7.47 (t，2Η，J = 7.5Hz)，6.80 (q，1Η， J = 6Hz)，1.93 (d，3H，J=6Hz)。 如下所示之（R)-本甲酸卜氯-乙醋係經由（ + /·)_苯甲酸1 _氯 -乙醋使用1 0 cm X 50 cm Chiralcel OJ管柱進行對掌性分離 ，以庚烷/IPA(98/2)溶離，流速250 mL/分鐘。在分析純度 87130 -21 - 1250162 構物。 N %間為7.123分鐘時收集第二個溶離出之對映里

H-NMR (CDC13, 400MHz): 8.08 (d，2H，J = 7.5Hz)，7 61 (t 1H, J^7.5Hz)5 7.47 (t? 2H? J=7.5Hz)9 6.80 (q? 1H? J=6Hz)? 1.93 (d，3H，J:6Hz)。[ad卜-140° (C + 0.0315, CHC13)。 如下所示之（S)-苯甲酸1-氯-乙酯係經由（+A)_苯甲酸丨-氯 -乙酯使用10 cm X 50 cm Chiralcel OJ管柱進行對掌性分離 ，以庚烷/IPA(98/2)溶離，流速250 mL/分鐘。在分析純度 滯留時間為5 · 8 0 7分鐘時收集第一個溶離出之對映異構物。

^-NMR (CDC13? 400MHz): 8.08 (d? 2H5 J=7.5Hz)5 7.61 (t，lH，J = 7.5Hz)，7.47 (t，2H，J = 7.5Hz)，6.80 (q，lH，J = 6Hz)， 1·93 (d，3H，J = 6Hz)。[6ϋ d] = +130〇 (C + 0.0345，CHC13)。 實例2

4-瑞雜小氮雜雙環「3.2.01庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二王 某-7-氣代-，4,4-二氧化物，一鈉鹽，（2S,5R，6jJ

Ο -C N

HO^ ^ONa 上示4-硫雜小氮雜雙環[3.2.0]庚烧-2-羧酸，6_(經甲基）· 87130 1250162 3,3-二甲基_7_氧代-，4,4-二氧化物，一鈉鹽，（2S，5R，6R)(下 文中稱為’’Na-HMPASn)係以下列四步驟法製備。 二6,6-二溴青黴迄酸鈉楓之製法

Br H?wP

添加乙酸乙酯（15·8 L)至6,6-二溴青黴烷酸鈉楓（2500 g) 中’加熱至50 C。撲拌添加乙基己酸鈉（1044 g)與乙酸乙酯 (5.0 L)，形成溶液後，以6〇分鐘時間加至6,6_二溴青黴烷酸 楓溶液中。使反應混合物冷卻至常溫，所得固體於丨小時内 結成顆粒。過濾收集產物，以乙酸乙酯洗滌，產生2丨97 g (83°/〇) 6,6-二溴青黴酸鈉楓。M.P. 186-187°C。iHNMR (D20) 占 1.30 (s，3H)，1.45 (s，3H)，4.29 (s，1H)，5.54 (s，1H)。 童二溴青黴烷酸茉甲基酯碰之寧法

合併二甲基甲醯胺（5.7 L)與6,6-二溴青黴烷酸鈉楓（3 820 g) ’混合物攪拌幾分鐘，至所有固體均溶解為止。以1小時 時間，在此混合物中添加苯曱基溴（丨4〇〇 g)。於常溫下攪拌 反應混合物一夜。添加水（4.5 L)與乙酸乙酯（15.0 L)中止反 應。水相經乙酸乙酯（2x600 mL)洗滌，合併之有機相依序 經飽和碳酸氫鈉溶液（2xl L)及氯化鈉水溶液（2χ1 L)洗滌。 87130 -23 - 1250162

有機層經硫酸鎂脫水及濃縮，產生3566 g(90%)所需6,6-二 溴青黴烷酸苯曱基酯楓之晶體。M.P. 146-147°C。iHNMR (C D C13) (5 1 · 2 (s，3 Η)，1.5 (s，3 Η)，4 · 5 (s，1Η)，4.9 (s，1Η) 5.16 (d，1Η，J= 12 Ηζ)，5·29 (d，1Η，J = 12 Ηζ)，7.35-7.40 (m， 5Η)。 步驟3 - 6- /3 -羥甲基-6- α -溴青黴烷酸茉甲某酯fli之 〇.〇

JV Me Η’Ϊ02Βη 在圓底燒瓶中，取多聚甲酸於氮氣沖刷下加熱至160-1 80 °C，以壓出過量水。在另一個圓底燒瓶中，合併四氫吱喃 (8.0 L)與6,6-二溴青黴烷酸苯甲基酯楓（1000 g)，攪拌至所 有固體均浴解為止。溶液冷卻至-7 8 C，慢慢添加含3 Μ甲基 鎂化氯之THF溶液（720 mL)至溶液中，同時保持溫度在_70 C以下。攪;拌反應混合物1小時。此時，自第一個圓底燒瓶 中壓出之曱搭氣體使用氮氣流吹過低溫冷卻之反應混合物 之表面。此曱醛氣體壓過反應混合物表面約6小時，同時保 持冷卻，並激烈攪拌低溫冷卻之反應燒瓶。當由TLc(80:20 己少元：乙酸乙酯）決定已反應完成時，於_ 7 8 下，使用含乙 酸（132 mL)之THF(400 mL)溶液中止反應。使反應混合物回 升至常溫後’反應混合物經SUpercel過濾。濾液濃縮成油狀 物（約1 000 g)。此油狀物再移至大反應瓶中，添加乙酸乙酯 (5 ·0 L)/水（2·5 L)。攪拌混合物後，分離。水層經乙酸乙醋 (2 X 5 00 mL)洗滌。合併之有機層依序經in鹽酸（3.〇 L)、水 87130 -24- 1250162 (3 x 3.0 L)與飽和氯化鈉水溶液（3 χ 3.0 l)洗滌。有機層經 經硫酸鎮脫水，經Supercel過濾，濃縮及保存在冰箱中。所 传之油狀物經矽膠層析（每5〇〇 g油狀產物使用1 Kg)，以9:1 己烧/乙酸乙_ (20.0 L)溶離，以排除雜質，然後以4:1己烷 /乙酸乙自旨（4.0-8.0 L)及最後以3:2己烷/乙酸乙酯（依需要而 丈）溶離’直到排出6-/3_經甲基冬α _漠_青黴烷酸苯甲基酯 楓為止。產生 205.5 g(23 %hM.P.120-12rc(CDCl3) ^NMR (5 1.28 (s，3H)，1.57 (s，3H)，4.09 (d，1H，J= 16Hz)，4 54 (s， 1H)，4.62 (d，1H，16Hz)，4.82(s，1H)，5.18 (d，1H，J = 16 Hz), 5.32 (d，1H，J = 16Hz)，7.36-7.42 (m，5H)。 氮雜雙環P，2,〇l庚烷_2_羧gL 6彳麵甲土 1^，3-二曱基-2^^代-，4,4-二氧化物，一鈉鹽吖215只-6]^之製 合併水（163 mL)、乙酸乙酯（2000 mL)、6-厶-羥甲基_6-α -溴青黴烧酸楓（18〇 g)、三乙胺（9〇 〇幻與5% pd/碳（45 g) ，於50 psi與常溫下氫化約2小時。反應混合物經TLC顯示 ，该反應尚未完成，因此再添加觸媒（丨5 g)，混合物氫化工 小時。一旦反應完成後，即以硫酸（112·5 g)與水（27〇 mL) 之混合物中止反應。反應混合物過濾去除觸媒，以Et〇Ac (450 mL)洗務。水層經Et0Ac(3 x 75〇 mL)洗滌。有機相合 併’經氯化#5脫水至水含量低於1%為止。然後濾出氯化每 ’並縮減乙酸乙酯之體積至其一半體積為止。回添加新鮮 乙酸乙酯至溶液中’現在溶液中之水含量為〇·〇9〇/。。合併乙 基己酸鈉（59 g)與EtOAc(450 mL)，於常溫下慢慢加至有機 87130 -25 - 1250162 相中。使混合物以30至45分鐘時間形成顆粒。所得固體過 濾，以EtOAc(500 mL)洗滌，乾燥，產生79 〇 g(66%)卜石_ 羥甲基青黴烷酸鈉楓。該固體再進一步經由2_丙醇/水中再 結晶純化。Μ·Ρ· 246-245°C。hNMR (D2〇）5 1.23(s，3H) 1.39 (s5 3H)? 3.82-3.89 (m? 1H)5 3.97-4.10.(m? 3H)5 4.85 (s^ 1H)。 互二- 4-硫雜小環「3上〇1麼烷羧酸，6一（ 二甲基-7-羞^4,4_二氣化物广 L2_g，5R^6R)之掣法 取6-/S _羥甲基-6-α _溴青黴烷酸苯甲基酯楓（1143 g)置 於大反應瓶中。添加苯（6.2 L)與三丁基錫氫化物（77〇 mL) ，反應混合物加熱至回流溫度2_3小時。以TLC追蹤反應， 溶劑=1:1己烧/乙酸乙酯。 反應成時，混合物濃縮成油狀物，以去除苯。此油狀 物於常溫下經己烷洗滌，直到所有殘留之錫副產物均排出 為止。再加熱反應至回流；添加乙酸乙酯（Et〇Ac)，將物質 移至單頸燒瓶中，濃縮。物質經己烷（3 χ)洗滌，產物層減 壓濃縮。 取一半油狀物（549 g)經矽膠（1 Kg)層析，使用足量二氯 甲烷與油狀物形成溶液，以7:3己烷/Et〇Acs 3:2己烷/EtOAc 溶離。合併產物溶離份，濃縮。 取油狀物（約540 g)置於高壓爸中，添加四氫呋喃（1.9 L) 10/。Pd/碳之水（3〇〇 mL)溶液，反應混合物於pSi及 C溫度下氫化約1小時。反應完成時，反應混合物經寅氏鹽 87130 -26- 1250162 過濾去除觸媒。 濾液濃縮，以EtOAc(3.0 L)稀釋。水相經EtOAc(l.OL)洗 條。合併之有機層經氯化鈣脫水，濃縮至一半體積。依序 滴加 EtOAc(2.5 L)及乙基己酸鈉（SEH，250 g)與 EtOAc(1.05 L)之溶液。過濾排除所得固體，於真空烘箱中乾燥。 在所得固體中加水（6-800 mL)，以4M硫酸調整pH至0.5 與1 ·〇之間。以EtOAc (5x 1.0 L)萃取產物。合併之有機相經 氯化鈣脫水，經閃爍（sparkle)濾器過濾。濾液濃縮至一半體 積’添加含SEH(115.3 g)與EtOAc(500 mL)之溶液。使混合 物形成顆粒。過濾所得固體，以Et〇Ac洗滌，產生所需產物。 實例3 1.樂1:4_-硫雜-1二氮雜雙環「3.2.〇1庚烧-2-羧酸，6-(羥甲基）- L3_-二甲基-，（苯甲醯氧基）曱酯，4, 4-二氧化物

如上示之前藥1之製法如下。 在含3.13 g(18.4 mmol)苯甲酸氯甲酯（Narchem藥廠）之 200 mL丙_攪拌溶液中添加η』g(92.i mmol)埃化納 (Aldrich樂廠）。所得混合物於室溫下攪拌一夜。在此溶液 中添加3.5 g(12.3 mmol)4-硫雜-1-氮雜雙環[3,2,〇]庚烷-2-羧 酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲基-7-氧代·，4,4-二氧化物，一鈉鹽 87130 -27- 1250162 ，（2S，5R，6R)。反應混合物於室溫下攪拌一夜◦反應混合物 真空濃縮。然後添加200 mL水與2〇〇 !^[乙酸乙酯，分離有 機層，以鹽水洗滌，經硫酸鈉脫水，過滤及真空濃縮。經 矽膠層析法，以1:1乙酸乙酯/己烷溶離，產生8·62 g油狀物 。此油狀物自乙酸乙酯/己烷中再結晶，產生5.5g晶體。母 液中仍含有所需化合物。熔點=102它。lH_NMR<DMS〇）: 7·97 (d，2H，J=7.5Hz)，7.70 (t，1H，J二7·5Ηζ)，7.56 (t，2H， J-7.5Hz)，6·12 (d，1H，J=6Hz)，5.99 (d，1H，J=6Hz)，5·19 (d， 巩 J:5Hz)，5.17 (m，OH)，4,62 (s，1H)，4·2〇 (m，m)，4·〇3 (m，1H)，3.73 (m，1Η)，1·41 (s，3H)，1.28 (s，3H)。

如上示之前藥2之製法如下。

mmol) (+/_)_笨曱酸^氯-乙酯。所 。添加40 mL水與1〇〇 mL乙酸乙酯 鹽，（2S，5R，6R)之20mLDMF授拌溶液中添加u仙.4 所得混合物加熱至3 5 °C 3天 酿’分層。水層經乙酸乙酯 87130 -28- 1250162 卒取。合併之有機層以水、鹽水洗滌，經硫酸鈉脫水，過 慮及真空辰細。經矽膠層析法，以1 L 20%乙酸乙酯/80%己 院溶離後’以1 L 1:1乙酸乙酯/己烷溶離，產生1.2 g油狀物 ’使用乙酸乙_/己烷再結晶，產生1 g白色晶體（2種非對映 兴構物之混合物）。熔點=133_135。〇。1h_NMr (d-DMS0, 4〇〇MHz): 7_96 (d，2H, J=7.5Hz)，7.71 (t，1H，卜7·5Ηζ)，7·55 (t，2H，J二7·5Ηζ)，7·〇7 (q，0.5H，J = 5.4Hz)，7.03 (q，0.5H， J —5·4Ηζ)，5·19 (d，叫 J=5Hz)，5.15 (m，OH)，4·54 (s，0.5H)， 4·53 (S，〇.5H)，4·19 (m，1H)，4.01 (m，1H)，3.73 (m，1H)， 1.62 (d5 1.5H5 J-5.4Hz), 1.61 (d? 1.5H, J=5.4Hz)5 1.44 (s? 1·5Η) 1·38 (m，4.5H)。 實例5 雜雙環Ρ·2·01庚烷-2-羧酸，羥甲某）-&二甲蓋二^&^1^(1幻-1-(苯甲醯氣基）乙酯，4,4-二氣化 物（2S，5R，6R)

〇 如上示之前藥3可依實例4之製法製備，但其中改用（s)_ 苯曱酸1-氯-乙酯，及僅加熱至30°C。、j：容點54°C。〖H NMR (d-DMS〇，400 MHz): 7.96 (d，J= 7.5 Ηζ，2Η)，7.71 (t，J= 7.5 Hz, 1H)，7.55 (t，7.5 Hz，2H)，7.03 (q，J= 5·4 Hz，1H)， 5.19 (d，5 Hz，1H)，5.15 (m，OH)，4·53 (s，1H)，4.18 (m5 87130 -29- 1250162 1H)5 4.02 (m5 1H)? 3.72 (m5 1H), 1.61 (d5 J= 5.4 Hz5 3H)5 L39 (s，3H)，1·37 (s，3H)。 [^]d=+119(c = 0.0121, CHC13) 亦可依下列另一種途徑製備前藥3。於201下合併52.03 g 〇82·4 mmol) 4-硫雜小氮雜雙環[3,2,0]庚烷-2-羧酸，6-(羥 甲基）-3,3- 一甲基-7-氧代-，4，4-二氧化物，一鈉鹽， (2S，5R，6R)、61.50 g(18 1.1 mmol)硫酸氫四丁 基銨與 15.44 g (1 83 ·2 mmol)碳酸氫鈉。添加4〇〇 mL二氯甲烧，同時保持溫 度在20 C。隨後添加1〇〇 mL水。所得混合物於20°C下搜拌 30分鐘。分離有機層，經硫酸鈉脫水，過濾及真空濃縮。 在所知殘質中添加1 69.4 g (917·6 mmol) (S)-苯甲酸1_氯_ 乙酯後，添加1 60 mL丙酮。所得溶液再於室溫下授拌3天。 反應真空濃縮，經矽膠層析法使用40-50 %乙酸乙酯/己烧溶 • 所传產物自乙醇中結晶後’自乙酸乙自旨/己烧中再結晶 。過濾及真空乾燥後，產生85.9g白色結晶產物。 實例 6 雙環「3· 2·〇ι庚羧酸，6—(羥甲^^

曱基-7 物（2S,5R,6R^

但其中改用（R)- 如上示之前藥4可依實例4之製法製備 87130 -30- 1250162 苯甲酸1-氯-乙酯，及僅加熱至3〇它。Ipi — NMR (d-DMS〇，400 MHz): 7·96 (d，2H，J = 7.5 Hz)，7.71 (t，1H，J = 7.5 Hz)，7.55 (t， 2H，J = 7.5 Hz)，7.07 (q，1H，J二5.4 Hz)，5.19 (d，1H，J=5 Hz)， 5.15 (m，〇H)，4.54 (s，1H)，4.18 (m，1Η)，4·01 (m，1H)，3.72 (m，1H)，1·62 (d，3H，J:5.4 Hz)，1.44 (s，3H) 1.35 (s，3H). MS (m/z): 410 (M、l，100) 〇 實例7 藥4-硫雜-1-氮雜擊瑷「3.2.01庚烷-2-羧酸， 6-(¾^甲基甲基-7-氧代-，4,4-二氧化物（2S，5R，6R)之 碳酸之製法

如上示之碳酸氯甲基酯異丙酯之製法如下。於〇 t下，在 含10 g(75.2 mmol)氣曱酸氯甲酯（Fluka藥廠）之1〇〇 mL二氯 曱炫攪：拌溶液中添加5.8 mL (76 mmol)異丙醇後，添加 11.93 g (97·8 mmol)二甲胺基吡啶（Fluka藥廠）。使所得反應 混合物回升室溫並攪拌一夜。反應混合物加水稀釋。分層 。有機層經鹽水洗滌，經硫酸鎂脫水，過濾及真空丨|縮， 產生6 g透明油狀物。此油狀物即直接進行下一個反應。 W-NMR (CDC13, 400 MHz) : 5.72 (s，2H)，4·95 (m，m，j二 6·2Ηζ)，1·33 (d，6H，J=6.2Hz) 〇 註：當僅使用1.05當量二甲胺基吼唆時，可得到更佳產量。 87130 31 1250162

Cl

類似碳酸氯甲基酯異丙酯之方法 L ^ & ’改用氣甲酸氯乙酯 (Fluka藥廠），製備（+/-)-碳酸1'氯、,& m 1

V 7 礼乙酯異丙酯。1H-NMR ;.8)，4_94 (m，1H，J: (CDC13，400 MHz): 6.41 (q，1H， 6.2Hz)，1.81 (d，3H，J=5.8)，1.32 (m，6H) ci

類似碳酸氯甲基醋異丙酯之方法，改用丙醇（湯⑽藥薇 )，製備（+/+碳酸i-氯-乙醋丙_。lH_NMR (CDCl3, 4㈧ MHz): 6.41 (g，1H，J=5.8)，4.17 (m，2H)，i 81 (d，3H，j=5 8)， 1.71 (m，2H)，0·96 (m，3H)。 ci

類似礙酸氯曱基酯異丙醋之方法，改用正丁醇（Aldrich 藥薇），製備（+/+碳酸丁醋卜氣-乙酯。W-NMR (CDC13, 400 MHz): 6.41 (q，1H，J=5.8)，4·20 (m，2H)，1.81 (d，3H，J = 5.8)， 1.67 (m，2Η)，1·41 (m，2H)，0.93 (m，3H)。 ci

類似碳酸氯甲基酯異丙酯之方法’改用丙醇（Aldrich藥廠 )，製備碳酸氣曱基酯丙酯。1H-NMR(Cr)Cl3, 400MHz): 5.72 (s，2H)，4·18 (t，2H，J二6.6 Hz)，1.71 (m，2H)，0.97 (t，3H， J = 7.5Hz) 〇 87130 -32 - 1250162 〇 ci

類似碳酸氯甲基酯異丙酯之方法’改用正丁醇（Aldrich 藥廠），製備石炭酸丁酯氯甲基酯。lH_NMR (CDCls，400MHz): 5.72 (s, 2H)，4.23 (t，2H，J = 6.6Hz)，1·70 (m，2H)，1.41 (m， 2H)，0.94 (t，3H，J = 7.5Hz)。

類似 Tett· Lett· 22，34，1981，3269-3272 之方法製備（+/+ 5 -溴-5H-咬喃-2- i同。

依Neuenschwander等人述於Helvetica Chimica 1978; 61: 2047-2058之方法製備乙酸-1-氣小曱基乙酯。 〇

類似碳酸氯甲基酯異丙酯之方法，改用乙醇，製備碳酸 氣曱基酯乙酯。1H-NMR (CDC135 400MHz): 5.72 (s，2H)， 4.28 (q，2H，7·1Ηζ)，1.34 (t，3H，J=7.1Hz)。 實例 8 週1默前藥4-硫雜-1-氮雜雙環「3.2·〇1庚烧-2-羧酸，6-(羥1基）1 二甲基· 7 -氣代二氧化物（2S. 5R，6R)之絮法 製備前藥4-硫雜小氮雜雙環[3.2.0]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲 87130 -33 - !25〇162 基）-3,3-二甲基-7-氧代-，4,4-二氧化物（2s，5R，6R)來證明本 發明前樂已出人意外地改善之生體可用率與物理性質。對 知則樂中’對照前樂1說明於美國專利案Ν〇·4,287,181之實 例2 5中，對知、箣樂2 -1 5為新穎化合物，但仍屬於美國專利 案Νο·4,287，181所揭示内容範圍内。 激照前藥1:

〇 硫雜-1-氮雜雙環「3 ·2·〇1庚烧- 2-#酸，6-(麵甲基）-3,3-二甲 基氧代-，（m曱基-1-氧代基）曱酯· 4,4二氮仆物 O^S.5R.6R) 在含2·5 g(8.77 mmol)4-硫雜-1-氮雜雙環[3,2,〇]庚烷_2· 叛酸，6-(經甲基）-3,3-二甲基-7-氧代-，4,4-二氧化物，一納 鹽，（2S，5R，6R)之20 mL DMF攪拌溶液中添加（11·4 mrnol)特 戊酸氯甲酯（Aldrich藥廠），於室溫下攪拌一夜。所得混合 物加熱至35°C 3天。添加40 mL水與1〇〇 mL乙酸乙酯，分層 。水層經乙酸乙酯卒取。合併之有機層經水、鹽水洗條， 經硫酸鈉脫水’過濾及真空濃縮，經;δ夕膠層析，以1L 2 0 % 乙酸乙酯/ 80%己烷溶離後，以1L 1:1乙酸乙酯/己院溶離， 產生油狀物。添加己烷（1 5 mL)至油狀物中，取樣置入冰箱 87130 -34- 1250162 中4天，此％有固體沉殿。真空濃縮，產生11 〇 mg白色非晶 形固月旦。$谷點- 7〇-73°C。iH-NMR (CDC13, 400 MHz)·· 5.94 (d， 1H’ J 5·4ΗΖ)，5·70 (d，1H，J=5_4Hz)，4.69 (d，1H，J = 4.1Hz)， 4·48 (S，1H)，4.30 (m，1H)，4.15 (m，2H)，1.55 (s，3H)，1.41 (s，3H)，1 ·21 (s，9H)。 或者此化3物亦已知為6- /3 _羥甲基青黴烷酸特戊醯氧 甲基酉曰楓，亦可依美國專利案No. 4,287，181中實例25之方 法製備。 〇

庚烷-2-羧酸，6-傻甲基）_3,3_ 二甲 甲 S旨，4,4-二氧化物（2S,5R· 6R、 、’某係依據上述對照前藥1之方法製備，但其中改用每 _ =曱酉曰乙酉曰替代特戍酸氯甲酯。溶點（非晶形固體）： 1〇3_1〇5°C。丸NMR (Me0D，4〇〇 MHz): 5 91 (d，1Κ J 5·8Ηζ)，5.76 (d，1Η，J = 5_8Hz)，4·96 (d，1Η，J:4.6Hz)，4·5 (S，1Η)，4·15-4.25 (m，4Η)，3.95 (m，1Η)，1·53 (s，3Η)，1.4 (s，3Η)，1·29 (t，3Η，j:7」）。 «JLt 3： 87130 -35 - 1250162

4-硫雜-1-氮雜雙環「3.2.01庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲 基-7-氧代-，1，3-二氫-3-氧代-1-異笨並呋喃基酯，4,4-二氧 化物（2S,5R,6R) 此前藥係依據上述對照前藥1之方法製備，但其中改用3-溴苯酞（Aldrich藥廠）替代特戊酸氣甲酯。加水稀釋DMF時 ，所需產物呈非晶形固體沉澱析出，過濾及真空乾燥。MS (m/z)·· 3 94(Μ·)。NMR代表非對映異構物之混合物。1H-NMR (d-DMSO, 400 MHz): 7.8麵8.0 (m，4Η)，7.60 (s，0.5Η)，7.59 (s， 0·5Η)，5.23 (m，1H)，5·16 (OH)，4.71 (s，0·5Η)，4.67 (s， 0.5H)，4.20 (m，1H)，4.02 (m，1H)，3.74 (m，1H)，1.47 (s， 1.5H)，1.37 (s，1.5H)，1.36 (s，1.5H)，1.31 (s，1.5H)。 對照前藥 4 :

〇

87130 -36- 1250162 4-硫雜-_1 二羧酸，6-(羥甲基甲 基-7-氧一代_」JjQ-甲羞)魏基1氧1甲醋，4,4 -二氧 在含（18.4 mmol)碳酸氯甲酯異丙酯之200 mL丙酮攪拌溶 液中添加13.8 g (92.1 mmol)碘化鈉（Aldrich藥廠）。所得混 合物於室溫下攪拌一夜。在此溶液中添加3.5 g (12.3 mmol) 4-硫雜小氮雜雙環[3，2,0]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3，3-二甲 基-7-氧代-，4,4-二氧化物，一鈉鹽，（2S,5R,6R) (US 4,287，181)，反應混合物於室溫下攪拌一夜。反應混合物真 空濃縮。添加200 mL水與200 mL乙酸乙酯，分離有機層， 以鹽水洗滌，經硫酸鈉脫水，過濾及真空濃縮。經矽膠層 析，以1:1乙酸乙酯/己烷溶離。終產物為紅色油狀物。MS (m/z): 378 (NT)。W-NMR (d-DMSO, 400 MHz): 5.86 (d，1H， J = 5.8Hz)，5.74 (d，1H，J = 5.8Hz)，5·20 (d，1H，J=5Hz)，5.17 (m，OH)，4.82 (m, 1H)，4.60 (s，1H)，4.20 (m，1H)，4.03 (m， 1H)，3.74 (m，1H)，1_42 (s，3H)，1.30 (s，3H)，1.22 (d，6H， J = 6.2Hz)。 對照前藥 5 :

87130 -37- 1250162 1:^1 隹-1-氮雜雙環「3.2·〇1庚烷-2-羧酸，甲基甲 羞二X.-氧代-甲基乙氧基）羰基1氣 物（2S,5R，6R) 此前藥係依據上述對照前藥4之方法製備，但其中改用碳 酸1-氯-乙醋異丙酯替代碳酸氯甲酯異丙酯。Ms (m/z). 392(M_)。NMR代表紅色之油狀物之數據，其係2種非對映 異構物之混合物。iH_NMR (d_DMS〇，4〇〇 MHz): 6 7i (q 〇.5H5 J=5.4Hz)? 6.67 (q5 0.5H, J = 5.4Hz)5 5.20 (d9 1H, J-5Hz)5 4.79 (m5 1H)5 4.51 (s? 0.5H), 4.49 (s5 0.5H)? 4.20 (m? 1H)，4.03 (m，1H)，3.74 (m，1H)，1.48 (m，3H)，1.43 (s，1.5H), 1.39 (s，1·5Η)，1·33 (m，3H)，1.22 (m，6H)。 對照前藥6：

座盖雙環「3.2.0]^! 羧酸，6-(羥甲某V3 J

此鈉本％依據上述對照前藥4之戈 氯乙g曰丙酯替代碳酸氯甲酯異 NMR代表黃紅色油狀物之數 酸1 -氯- 前藥4之方法製備，但其中改用碳 酉义氟甲S旨異丙酉旨。MS (m/z):392(M-) 據，其係2種非對映異構物之 87130 1250162 混合物。1H-NMR (d-DMSO，400 MHz): 6.72 (q，0·5Η， J二5.4Hz)，6.68 (q，0.5H，J = 5.4Hz)，5.20 (m，1H)，4·51 (s， 〇·5Η)，4.49 (s，0.5H)，4.20 (m，1H)，4·03 (m，3H)，3.74 (m， 旧），l.59(m，2H)，1.48 (m，3H)，1.39 (s，1·5Η)，1.34 (s， !_5H)，ΐ·22 (m，3H)，〇 86 (m，3H) ◦ JUr 藥 7 : Η〇、ΤΤ^0

庚墘 _2-羧酸，6-(羥甲基 V3,3 -氣 1 乙酯.4,4-二氣化物 此蝻藥係依據上述對照前藥4之方法製備，但其中改用碳 酉文丁 s曰1-氯-乙酯替代碳酸氯曱酯異丙酯。MS (m/z): 4〇6(M-) 。nmr代表黃紅色油狀物之數據，其係2種非對映異構物之 混合物。1H-NMR (d-DMSO, 400 MHz): 6 72 (q，〇阳 J二5·4Ηζ)，6.6δ (q，〇 5H，J = 5 4Hz)，5 2〇 (爪，ιη)，= μ =， 〇·5Η)，4.49 (s，〇·5Η)，4·2〇 (m，1H)，4 〇3 (m，叫，m (⑺ 1H)^ 2H)5 1.15-1.55 (m5 11H)? 0.86 3H) o ’ 對照前I R · 一 ---- · 87130 -39 - 1250162 H〇/\

〇 4-硫雜-1-氮雜雙環「3.2.01庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二曱 基-7-氧代丙氧羰基）氧1曱酯，4 ,4-二氧化物（2S，5R，6R) 此前藥係依據異丙酯之製法製備。終產物為非晶形白色 固體。MS (m/z) :378 (ΝΓ)。W-NMR (d-DMSO，400MHz): 5_86 (d，1H，J-6.2H)，5·74 (d，1H，J=6.2Hz)，5.20 (d，1H， J=5Hz)，5.17 (m，OH)，4.60 (s，1H)，4.20 (m，1H)，4.10 (m, 2H)，4.03 (m，1H)，3.74 (m，1H)，1.60 (m，2H)，1.42 (s，3H)， 1.30 (s，3H)，0.86 (t，3H，J = 7_5Hz)。 對照前藥 9:

〇

87130 -40- 1250162

此i C係依據上述對照前藥4之方法製備，但其中改用碳 丙酯。終產物為非晶形白 酸丁酯氯甲酯替代碳酸氯甲酯異 色固月且。MS (m/z) :392 (M·)。W-NMR (d-DMSO, 400MHz): 5.86 (d，1H，J=6.2Hz)，5·74 (d，1H，J=6.2Hz)，5.20 (d，1H， J 5HZ)，5.17 (m，0H)，4·6〇 (s，1H)，4.20 (m，1H)，4.15 (m， 2H)，4.03 (m，1H)，3.74 (m，1H)，1.60 (m，2H)，1.42 (s，3H)， 1·30 (m，2H)，1.30 (s，3H)，〇 % (t, 3H，J=7 5Hz)。 對照前藥10:

廢烷-2-潋酸，6-(羥甲基）-3,3-二曱 二氫-5-氫代-2-咹喃基酯，4,4-二氣化物 L2S.5R.6R) 此前藥係依據上述對照前藥4之方法製備，但其中改用5_ 漠-5H-吱喃-2-酮替代特戊酸氯甲酯。MS (m/z) :344(Μ·)。 NMR為2種非對映異構物之混合物。產物為非晶形固體。 lH-NMR (d-DMSO, 400 MHz): 7.81 (m?〇.5H)? 7.73 (m? 0.5H), 87130 -41 - 1250162 7·14 (m，0·5Η)，7.10 (m，0·5Η)，6.61 (m，1H)，5.21 (m，1H)， 5.17 (m，〇H)，4.67 (s，0.5H)，4.63 (s，0.5H)，4.20 (m，1H)， 4.03 (m，1H)，3.74(m，1H)，1.42 (s，1.5H)，1.40 (s，3H)，1.32 (s，1.5H)。 對照前藥11:

4-硫雜_1-氮雜雙環『3.2.01庚烷_2-羧酸，6-(羥甲基）_3,3-二曱 基-7-氧代(1-氧代丁基）曱酯，4,4-二氧化物（2S,5R,6R) 此前藥係依據上述對照前藥4之方法製備，但其中改用丁 酸氯甲酯（Acros organics藥廠）替代特戊酸氯甲酯。產物為 透明油狀物。MS (m/z) :362(M_)。iH-NMR (d-DMSO，400 MHz): 5.86 (d，1H，J=5.8Hz)，5.74 (d，1H，J=5.8Hz)，5.20 (d， 1H，J = 5Hz)，5.17 (m，OH)，4.55 (s，1H)，4.20(m, 1H)，4·01 (m，1H)，3.74 (m，1H)，2.35 (m, 2H)，1.52(m，2H)，1.40 (s， 3H)，1.30 (s，3H)，0.86 (m，3H)。 對照前藥1 2 : 87130 -42- 1250162

H〇〆 4-硫雜小氮雜雙環「3.2.01庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3, 3-二 曱基-7-氧代-，1,3-二氫-3-氧代小異笨並呋喃基酯，4,4-二氧 化物（2S,5R,6R) 取275 mg對照前藥3使用5%異丙醇/95%二氯甲烷進行矽 膠層析法，產生200 mg非對映異構物之混合物後，再產生 70 mg單一（極性較高）之非對映異構物。產物為非晶形固體 。MS (m/z):3 94 (M·)。NMR代表極性較高之非對映異構物 之數據。iH-NMR (d_DMSO，400 MHz) : 7·95 (d，1H， J = 7.5Hz)，7.90 (m，1H)，7.81 (d，1H，J=7.5Hz)，7.77 (m，lH)， 7.60 (s，1H)，5.23 (d，1H，J = 5Hz)，5·16 (OH)，4.71 (s，1H)， 4.20 (m，1H)，4.02 (m，1H)，3·74 (m，1H)，1.47 (s，3H)， 1.37(s，3H)。 對照前藥13 :

广〇

87130 -43 - 1250162 tAil-liA.,,.雜雙環「3.2.01庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基V3,3-二甲 其 一 ~~ ...(乙醯氧基）甲酯，1 2 3 4,4_二氣化物（2S,5R,6R) 此前藥係依據上述對照前藥1之方法製備，但其中改用乙 酸淳甲酯（Aldrich藥廠）替代特戊酸氯甲酯。終產物為黏稠 油狀物。MS(m/z): 334(Μ·)。W-NMR (d-DMSO, 400 MHz): 5.82 (d，1H，J二6·2Ηζ)，5.72 (d，1H，J二6.2Hz)，5.19 (d，1H， J-5Hz)5 5.17 (m? 〇H)5 4.55 (s? 1H)5 4.20 (m5 lH)5 4.01 (m5 1H)，3.74 (m，1H)，2.08 (s，3H)，1.40 (s，3H)，L3〇 (s，3H)。 M 14：

〇 87130 -44- 1 庚烷-2-羧 甲基）_3,3_二 2 醯氧基）-1-甲^^,4_二氣化物 d5R.6R、 3 此前藥係依據上述對照前藥丨之方法絮 4 表備，但其中改用乙 酸1 -氯-1 ·甲基乙_ (Aldrieh藥廠）替代特戊酸氯甲_。終農 物為非晶形固體。MS(m/z):362(M-)。1h_nmr 4㈧ MHz): 4.68 (d,lH,^5.0Hz), 4.40 (s,lH),4.31(m m)3,4l5 2.06 (S,3H), 1.92 (s,3H),l.82(s?3HM 58(〇H)! 1.47 (s，3H) 〇 1250162 與血漿安定性 $刀析刚藥3之安定性：（1)於多種不同ρΗ下之溶液中之化 子女疋性’（2)呈懸洋液時維持之效力，及(3)來自多種不同 哺乳動物之血製之化學衫性，以分析前藥3於吸收前抗拒 水解，然、後於吸收後迅速水解成Μ··之能力。 於 PH1、2、2.5、4_〇、5.〇、65 與 74下，比較前藥3、& 石HMPAS之鈉鹽（下文中稱為”Na HpMAs”）及棒形酸链 ⑽hium clavulanate)於溶液中之化學安定性。適當調配緩 衝液，使各培養物達所需pH。培養物包括99〇# 1適當pH緩 衝液，亚添加1 〇 # 1丨〇 mM化合物之丨〇〇%甲醇母液開始反 應(終濃度叫〇〇 "M)。採用自動注射器，於〇、1〇、2〇、 4〇、60、120與240分鐘時取出―系列樣本（2〇" ，直接注 ’、用於榀測分析物質之Lc/Ms單一四極質譜系統直接連 泉之HPLC中。使用96·孔加熱器調整培養溫度。於说與 37 C下培養。LC/MS系統係以陰離子模式操作。各分析物 質選擇性追㈣子之適t[M_H].，用於制及定量每一時 間點殘留之化合物。每一時間點之吸收峰反應以相對於時 間=〇時之百分比表示。降解速率常數(kd)係由時間=〇分鐘 起，至時間= 240分鐘止之此等百分比之迴歸分析得到。然 後估算得到表觀一級半衰期為ln %。此等測定法係進行 雙重覆，並以平均值表示。 如下表所示，前藥3證實具有優越之酸安定性及在可吸收 接近中性pH下具有適當安定性。亦證實比棒 87130 -45 - 1250162 形酸鹽具有較佳之毅安定性，尤其在低pH下。 亦分析前藥3於懸浮液中之安定性（在未緩衝下，含於 0.5%甲基纖維素中，25t),以測定於懸浮液中之時間:效 力之影響。如下所示’前藥3於室溫下保存ι〇天後，其效： 仍保持90%以±。反之，棒形酸鹽於奥孟汀（Au牌灿n)懸 浮液中時’若同樣置於於室溫下相同時間自，其效力僅保 ®40〇/〇(#^ Mehta, A.C., S. Hart-Davies, J. Payne and R.W.

Lacey，1994. Stability of amoxicillin and potassium clavulanate in a co-amoxicillin-clavulanate oral suspension. J. Clin. Pharm.JTher. 19:313-315.) 〇 pH 溶液安定性 (100 μΜ) 7.4 6.5 5.0 4.0 2.5 1.2 前藥 3(25°C) 2.7 >24 半衰期(小時) >24 >24 >24 >24 前藥 3(37t：) 0.6 4.5 >24 >24 >24 >24 Na-HMPAS (25〇C ) >24 >24 >24 >24 >24 >24 Na-HMPAS (37〇C ) >24 >24 >24 >24 >24 >24 棒形酸鹽（25°C) >24 >24 >24 >24 1.2 0.6 棒形酸鹽（37°C) >24 >24 >24 >24 0.9 ND 前藥3 懸浮液安定性 1天 3天 5天7天 10天 1.51 mg/ml1 2 ND 103 效力(％)1 98 1〇4 91*** (10 mg/kg大老鼠製 劑） 87130 -46- 1 效力以相對於溶解之標準物採用lc/ms分析之目標濃度 2 之百分比表示。數值代表兩重覆之平均值。ND =未測定 1250162 ”懸浮液㈣之PH㈣6 8，㈣天時降至4 7。 …非對映異構物之混合物基本上未改變，約95:5 採用來自小白鼠、大去& _ 宅乳、狗、猴子與人類之血漿，使

一人冷;東/解;東循環處理，測定前藥3、Na-HMPAS 人才+形酸鐘之血Μ车令从 性。培養物包括990 Μ 1血漿（已先 C〇6孔加熱以，於抓下預培養5分鐘）。添加10 身% 1〇 ^合物之_°巧醇母液開始反應。採用自動注 、2〇、30與60分鐘時取出一系列 (…’移至200處⑵乙腈/3%過氯酸中。樣本離 〜’取上澄液移至注射闕中’注入2〇Vl至與LC/MS單一四 =系，連線之HPLC中。LC/MS系統係以陰離子模 式木乍。口分析物質選擇性追縱離子之適，用於 定量每-時間點殘留之化合物。每-時間點之吸收 =二相對於時間·百分比表示。降解速率常編 肩·:八才 刀鐘起，至時間侧分鐘止之此等百分比之迴 二二：因此估算得到表觀一級半衰修％。此 半衰期 _ 人類 3.6分鐘 <2.0分鐘 >4小時 >4小時 3.6小時 2.6小時 血漿 安定性 (100 μΜ) 前藥 3 37〇C Na-HMPAS 37〇C 棒形 酸鹽 37〇C ^鼠 大老鼠 87130 -47- 1250162 珂藥3已證實具有優越之酸安定性，且在接近吸收之中性 pH下具有適當安定性。前藥3於所有試驗物種之血装中之水 解速率已證實可於吸收時，有效地經酵素水解成&石-HMPAS。證實具有優於棒形酸鹽之溶液安定 性，尤其在低pH下。儘管這兩種化合物均於血漿中不安定 ，但Na-HMPAS仍於人類血漿中展現改善之安定性。 實例10 前藥3於腸内ph值下之抑^舌性 棒形酸鹽被認為會在人類胃腸道中造成下痢，因為其會 與殘留之《τ青黴素結合，選擇性殺死正常菌^族群之 必要成分。棒形酸鹽不是一種前藥，因此腸中仍有4〇%仍 呈相同活性分子未吸收，而60%被吸收進入循環中。雖然 依據Berry，v.等人之研究：於大老鼠中對抗肺炎鍵球菌引起 之實驗性呼吸道感染之羥胺〒青黴素/棒形酸鹽之加強調 配物之藥理動力學效力（Abstract B988, 4pt Wemiena Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, December 16-19'则Chicag〇, IL)，胃與鄰接之小腸中 之PH為酸性’但已發現自下痢者收集24小時糞便之pH中間 值顯示為6.4(範圍為5.4-7.8)。 如實例7所示，前藥3在ρΗ<6·5下非常安定，不容易轉化 成6-/5-HMPAS。為了在人類大腸之邱條件下比較前藥3與 Na-HMPAS之/5-内醯胺酶抑制劑活性，吾等在阳6.〇與入〇 下測定這兩種化合物對抗娜1/3_内醯胺酶之心。數據 顯不，在PH6.G時，前藥仍未轉化成抑制劑之活性型。前藥 87130 -48 - 1250162 3沒有對抗TEM-1/3-内醯胺酶之活性（Ι(：5〇>1〇〇 "m)。反之 在pH 7·0日7，月ί】樂轉化成活性抑制劑，半衰期為d分鐘 ，所形成之6J-HMPAS對此^内醯胺酶所造成之抑制作 用遠大於pH 6.0時。 IC5〇U M) 6- β -HMPAS 0.37 0.12 前藥 3 大腸桿菌 TEM-1 pH 6.0 > 1〇〇 大腸桿菌 TEM-1 pH 7.0 2.2

實例 U 嘎收性（活體内口見基體可用率） 由於IT藥3於酯酶之存在下時，於中性pH下之溶液半衰期 為30刀|里，鈾藥在幾分鐘内即水解，因此採用人類&⑶ 細胞株之活體外分析法並不適合用來測定前藥吸收性。反 之，發現活體内吸收性模式與分析本發明前藥吸收性具有 較南相關性。此外，使用幾種市售藥劑商品探討其在大老 鼠與人類中之吸收比例之相關性，且具有相當良好之相關 性（相關係數=0.971)(參見 Chiou，W.L. and A. Barve，1998.

Linear correlation of the fraction of oral dose absorbed of 64 drugs between humans and rats. Pharm. Res. 15:1792-1795·)。依據此相關性，可使用大老鼠來預測人類之吸收性 。亦咸了解，由大老鼠與人類之肝細胞證實召-HMpAS於 肝中之萃取性最低。因此，大老鼠之口服生體可用率分析 法應與人類之吸收比例呈極佳相關性。 口服生體可用率之估算法係以Na-HMPAS、前藥！、2、3 -49- 87130 1250162 與4、及實例8之14種對照前藥進行，各組採用三隻先經手 術植入頸靜脈導管之Sprague_Dawley大老鼠(2〇〇_225㈣ 。經口投藥試驗所選用之劑型媒劑依所試驗之化合物物理 狀態而定。除了前藥外’所有化合物均經口投_，其係呈 油狀物或非晶形固體。因此’此等化合物使用70/20/10水 /Chremophore/乙醇媒劑形成溶液（p〇)劑型投藥。 ^備投藥之前藥劑型，以傳送mg/kg 6-P-HMPAS :里劑ϊ，劑量體積為1〇 ml/kg。Na.pAs係經靜脈内投 藥，劑量為10mg/kg，以估算生體可用率Μ.·當量）。 於投藥後0、15、30分鐘、1、2、3、與5小時取血樣。 樣，、：處理取得血漿，分析前先保存在。依下文中說 日二分析樣本中之6 + HMPAS ’測定經口投藥及經靜脈内 ，樂=平均濃度相對於時間之圖形。由q時間點至最後可定 置之時間，點，使用線性梯形面積估算法，測定血漿濃度相 ^於時間之曲線之曲線下面積（獄。_终_)。由顯著出現 ’:失期之時間起點至最後取樣時間點之血漿濃度數據之迴 ^析估計最終消失速率常數（Kel)。消失半衰期以In2/Kel 估言十 〇 於。+ 、 終點時間/Kel估算自終點時間至無限遠之面積 (AU C 、 終點時間…）’其中C⑻終點時間代表終點時間所估算之濃 度其中依據迴歸分析定量藥物。由鞭。'終點時間與厦終 點時間，之總和估算曲、線下總面積（AUC“）。以auc —)經 。投藥X靜脈内投藥劑量/AUq㈣靜脈内投荜χ經口投藥劑量 表不生體可用率0)。 所’則得之平均生體可用率如下。 87130 -50- 1250162 化合物 平均生體可用率 標準偏差 Na-HMPAS 6.0 1.6 前藥1 113.1 10.7 前藥2 102.0 11.1 前藥3 92.4 6.0 前藥4 111.1 8.8 對照前藥1 55.4 4.7 對照前藥2 6.2 1.0 對照前藥3 27.2 2.6 對照前藥4 6.8 0.9 對照前藥5 46.5 1.4 對照前藥6 60.9 6.1 對照前藥7 40.3 10.8 對照前藥8 7.9 1.5 對照前藥9 12.3 2.0 對照前藥1 0 10.9 1.7 對照前藥11 33.1 5.4 對照前藥12 20.4 1.0 對照前藥13 37.6 3.7 對照前藥14 15.4 3.9 如上述，本發明前藥具有顯著優於劑型6- /3 -HMPAS、過 去已知之對照前藥1、或先前技藝已揭示之前藥（對照前藥 2-14)之生體可用率。 87130 -51 - 1250162 分析法說明i 本分析法中，以水相萃取所要測定之分析物，然後經乙 腈沉澱，及以氯仿處理。結果在不採用蒸發及再組成步驟 下產生約2倍濃度。 採用LC/MS/MS之陰離子模式操作法檢測。單一四極操作 法並不適合選擇性檢測分析物。 所添加溶劑（95:5 20 mM甲酸銨/乙腈；溶劑A)之pH為約 5.0。 分析管柱為Pheneomenex AQUA C18 4.6x50 mm。 所有樣本製劑均於96孔1.2 mL MARSH試管中完成。依下 列方法製備樣本。添加血漿樣本（200 // 1)至含5// g/ml舒巴 坦（su lb act am)作為内標準之400// 1 95:5乙腈：20 mM甲酸銨 中。樣本於桌上型離心機中，於3000 rpm下離心10分鐘。 取上澄液（400 // 1)移至透明之1.2 ml MARSHr試管中。添加 氣仿（600 // 1)至樣本中，混合後，於3000 rpm下離心1 0分鐘 。移出上層水相（約1 00 // 1)進行分析。 φ 質譜儀條件：

質譜儀：API-3 000，使用Turbo喷灑（電喷灑）操作陰離子模式 離子化電壓：-3000V 銳孔電壓：-25 eV 碰撞能量：30 eV 依需要調整氣霧化與加熱氣體 反應追蹤 6-β -HMPAS ： 262-> 218 87130 -52- 1250162 舒巴坦（内標準）·· 232=> 140 羥胺T青黴素：364=>223 棒形酸：198二> 136 操作時間：3分鐘 RT :所有分析物均約2分鐘 注射體積：20// 1 HPLC條件： 溶劑A : 95 : 5 20mM甲酸銨：乙腈 溶劑B : 95 : 5乙腈：20mM甲酸銨 分析流速：lml/分鐘 送至質譜儀之流速：約100 μ 1/分鐘 彈道梯度計晝 0- 0.5 分鐘 100%Α 0.5-1 分鐘 100%Α至 100%Β 1- 1.5 分鐘 100%Β 1.5-2.0 分鐘 100%Β 至 100%Α LLOQ^O. 1 // g/ml(6- /3 -HMPAS與經胺节青黴素），0.5 " g/ml (棒形酸） ULOQ = 50// g/ml(所有） 迴歸分析=線性1 / X重量 管柱壽命：約注射300-400次 大老鼠之門靜脈試驗:亦以插入門靜脈導管之大老鼠在經 口投予1 00 mg/kg之前藥劑量後分析前藥3之全身暴露結果 87130 -53 - 1250162 。於投t後5、15與3〇分鐘時取全血樣，纟即分裝至冰冷 酉文中女疋化。任何樣本均未測得前藥3(分析1⑽ mg/ml)。此等結果顯示當吸收時，前藥3迅速水解成 HMPAS後才進入肝與全身循環中。 i例 12 篩選法 對抗來自社區型呼吸道感染之病原菌之^ _内驗胺酶之 生化活性··市面上僅有三種万-内醯胺酶抑制劑分子：舒巴 坦，棒形st鹽與二唾巴坦（tazQbaetam)。這三種均抑制會出 現在許多種細菌中之A型青黴素酶。其中僅棒形酸鹽直：針 對社區型呼吸這感染之口服療法。測試抗常出 見在級感g血_及卡塔莫拉氏菌中之無細胞之青黴素酶之 活性。下表中之數據顯示Na-HMPAS在對抗流感嗜血菌之 ROB-1與TEM]酵素上相當於棒形酸鐘。這三種心内驢胺 酶抑制劑均對卡塔莫拉氏菌中之BR〇-1與611〇_2青黴素酶 具有強烈效力，以舒巴坦活性最高（表丨）。由3〇種最近臨床 單離出之卡塔莫拉氏菌菌株中更廣泛分析万·内醯胺酶，顯 不Na-HMPAS可有效抑制所有來自此等菌株之BRCm與 酵素，平 為 0.19//M。 ^ -内醯胺酶抑制劑對抗細胞萃出物中万-内醯胺酶之Ic A -内醯胺酶 ^5〇( U M)* i υ 5 0 菌株 型態 舒巴坦 6-/9-HMPAS 棒形酸鹽 流感嗜血菌 ATCC43334 ROB-1 3.40 0.01 0.04 87130 -54- 1250162 流感嗜血菌 54A1173 TEM-1 4.78 0.03 0.02 卡塔莫拉氏菌 87A1178 ATCC43617 BRO-2 0.03 一—-— 0.32 0.11 卡塔莫拉氏菌 87A1115 .~~~-----------^. BRO-1 0.011 —-——. 0.143 0.14 --- 所有抑fj作用值均於比色分析法中，針對產色性頭抱素測 定。 皮等輿皮膚感染有關之病原^_ &冷内l 較Na_HMPAS與棒形酸鹽在 /、對抗夕種TEM延伸範圍之召_内醯胺酶⑦SBL〇之抑制效 力，其巾Na_HMPAS與棒形酸鹽對抗ESBLs之效力相差不 多0 對k疋4種延伸|&圍之^内酸胺酶（EsBLS)(iC5。，v M)之抑制 作用 菌株 大腸桿菌 ATCC35218 大腸桿菌 51A1101 見」安酉每 型態 TEM-1 TEM- 肺炎克雷伯氏菌 TEM-3 抑制劑 IC5〇(/z M): 舒巴坦 6.85 4.76 0.55 6-/3-HMPAS 0.14 0.07 <0.003 棒形酸鹽 〇.〇5 "----- 〇.〇2 —— <〇.〇〇3 87130 -55 - 1250162 —------ CF104 ------ '———— 肺炎克雷伯氏菌 CF504 ' ^---— TEM-5 4.68 0.08 ~——~~_ <0.003 肺炎克雷伯氏菌B L-1 TEM-10 23.19 0.39 ^~ ---. >100 肺炎克雷伯氏菌 MCV37 ----- TEM-12 5.86 0.27 <0.003 肺炎克雷伯氏菌 CF1304 ----- TEM-16 5.80 ----- 0.09 ~~~ ----- 0.06 肺炎克雷伯氏菌 E264 ~~' ----—— TEM-17 10.36 — 0.66 ~~---_ 0.004 肺炎克雷伯氏菌 CF1104 ----——, TEM-24 10.48 -~·—— 7.13 ----— 0.01 大腸桿菌 CF1609 ~~~~~—-_ TEM-25 2.58 —---- 0.04 --—~~—_____ 0.02 肺炎克雷伯氏菌 5657 '~~~~— TEM-26 0.56 0.08 ~~———__ 0.02 丨 沙雷氏菌S6 ------ Sme-I 15.65 ------___ 0.68 --~~ ------ 19.55 所有抑制作用值均於比色分析法中，針對產色性頭孢素測 定。 、、 —般而言’其結論為Na-HMPAS之效力相當於棒形酸鐘。 每之菌種流感嗜血菌與卡塔莫 採用會產生/3 -内醯胺酶之流感嗜血菌與卡技 莫拉氏菌之臨床單離菌株分析6- /3 -HMPAS與羥胺节青徽 87130 -56 - 1250162 素多種不同比例下之活體外活性。採用NCCLS(國家臨床實 焉双才示準委員會（National Committee for Clinical Laboratory Standards))核准之奥孟汀易感性分析法，以固定比例2 :丨羥 胺▼青黴素/棒形酸鹽進行分析。結果顯示，流感嗜血菌之 46種/5 -内酿胺酶（+ )菌株中，羥胺苄青黴素/棒形酸鹽處理 及羥胺苄青黴素/6_石_HMPAS處理之羥胺苄青黴素…^^。與 MlC^i(亦即要阻止5〇%或90%試驗之單離株生長時所需 之隶小抑制濃度）分別為1與2 // g/ml，而2:1經胺节青黴素/ 舒巴坦處理則為4與8 // g/ml。應注意，該數值指混合物中 之羥胺苄青黴素濃度。 對48種卡塔莫拉氏菌單離株而言，羥胺苄青黴素/棒形酸 f之…化⑼與以⑴一直分別為$〇125與〇25//g/mi，及羥胺 T青黴素/6-/5-HMPAS之0.5與1.0// g/ml。羥胺苄青黴素/ 舒巴坦（2:1)之數值為〇·25及1〇// g/ml。因此，全細胞所得 之MICs不一疋會與抑制劑對抗無細胞之冷_内醯胺酶之效 力呈良好相關性，因為舒巴坦仍一致地較有效地對抗卡塔 莫拉氏菌中之BRO-1/2酵素。 由組合使用藥劑時與單獨使用㈣〒##素時對抗肺炎鍵 球菌臨床單離株時之活體外活性進行比較，該肺炎鍵球菌 臨床單離株分成青黴素易感性、中間抗性、及抗性菌種。 其中有些菌種對青徽素及經胺▼青黴素展現高度抗性，其 MlCs為4-8//g/ml之範圍内。如同具pBp抗性之病原菌，肺 炎鏈球菌單離株之結果已證實抑制劑之存在並不影響_ 87130 -57- 1250162 苄青黴素MICs。 主、/安卞月U素單獨或所有万-内醯胺酶抑制劑在羥胺▼ 青黴素/抑制劑2 ·】、7 . ^ , 7.1與14:1試驗比例之組合下，對2 1種 青黴素抗性菌株（青徵去 月U素MlCs為1-8// g/ml)之羥胺〒青黴素 %1(：5。與％1<：9()分別爲 9 & z / 馬2與4 // g/mi。最後，測試所有組合對 4几 組 2 1 種青摧} φτ pq u U京中間k性肺炎鏈球菌與12種青黴素易感 性單離株之活性。芦 乂兩組囷株之所有MICs仍舊反映組合中 之髮胺卞青黴素成分。巾門 ，> —士 尺刀〒間抗性組之羥胺卞青黴素MICs 在3至1舡g/ml之範圍内，易感性組之％1(^為$〇.〇156至 〇·〇6 // g/ml。 此分析法係依據NCCLS文獻M7_A4(丨997年i 2月與 M100-S12, 2GG2).厭氧性生長之細菌之稀釋抗微生物易感 性試驗法-核准之標準法（Meth〇ds f〇r DUuti〇n

Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically-Approved Standard)中說明之方法進行。 mi 使流感嗜血菌生長在巧克力洋菜盤上生 長。取菌洛懸浮於嗜血菌試驗培養基中（HTM，Remel Diagnostics)，其已經使用1N Na〇H調至ρΗ7·4，並經無菌過 濾。與50%甘油混合，形成終濃度為2〇%甘油。自羊血洋菜 盤上刮下已生長之肺炎鏈球菌與卡塔莫拉氏菌，置入添加 5%溶胞羊血之慕勒-亨頓（Mueller Hinton)營養液中◦冷;東時 ，添加50%甘油至終濃度20%。所有物質於_7fC下冷凍。 樂製.生採用96孔微滴定板稀釋藥物。所有藥物 均稱取足量，以供製造4倍濃度之操作母液。藥物溶kDMS〇 87130 -58- 1250162 或其他適當溶劑中，溶於試驗培養基中，取斷夏，在⑺ 個各含初體積100//1培養基之藥物孔中[第⑴晴]進行一 系列稀釋2倍，並留一個孔不接種 接種[弟11行]。第12行為不含 藥物之細菌接種菌對照組。各孔之終體積為1〇〇“。 流感嗜血菌之藥物分析板使用已使用m Na〇H調至 PH7.4,並經無菌過濾之HTM進行一系列稀釋。另兩種菌種 則於添加5%溶胞馬血之慕勒·亨頓營養液中稀釋。每次 時=使用對照化合物操作。藥物分析板於_贼下冷滚，使 用前一天方解凍。 使流感嗜血菌於添加1%血紅素1% gchi[巧 克力洋菜盤]之慕勒·亨頓洋菜盤中，於5% c〇2培養箱中， 於37t下培養—夜。使肺炎鏈球菌與卡塔莫拉氏菌於添加 5%溶胞羊血之慕勒-亨頓洋菜上，於相同條件下生長。 自洋菜盤上取下生長-夜之菌種，再懸浮於 適當試驗培養基中。所有懸浮液均於分析當天使用流感嗜 血菌之嗜血菌試驗培養基（HTM)營養液或補充陽離子之添 加W溶胞馬血之慕勒_亨頓營養液（用料炎鍵球菌與卡塔 莫拉氏囷）’利用分光光度測定法調至標準㈤，使混濁度相 當於〇·5 McFarland標準懸浮液（約1至2x 108CFU/ml)。此 懸洋液之OD625為0.14。為了在孔中得到最終接種菌達2七 10 cfu/ml (終體積為200私1),由McFarland母液進行下列稀 釋法。 所有流感嗜血菌菌株均於HTM中稀釋1/1〇〇。 所有肺炎鏈球菌與卡塔莫拉氏菌均於補充陽離子之含 87130 -59- 1250162 5%溶胞馬血之慕勒-亨頓營養液中稀釋i: loo。 接直邊一養盤:取1⑻a 1稀釋之接種菌加至無菌試驗盤中各 100// 1稀釋之藥物中。試驗總體積為每孔200 // 1。取經過適 當稀釋之菌株（如上述）加至各微滴定板之孔中，最終接種潭 度為2至7 X 105 CFU/ ml。此等細胞接種菌均於零時間點， 於隨機取樣之培養盤上計算孔中活細胞數，其作法很容易 ，可自孔中取出10#1， 釋1:1000)。渦轉混合後 於10 ml無菌生理食鹽水中稀釋（稀 ，取1〇〇//1稀釋之懸浮液塗覆在血 液洋菜盤上或流感嗜血菌所使用之巧克力洋菜盤上。培養 後，出現50個菌落，表示接種菌密度為5 χ i〇5 化1。使 用此培養物接種至微較盤中，畫線培養單—菌落，並觀 察典型之菌落外型。 土❼|俊，微滴定盤於控制漁 度之塑膠培養箱中培養，以防止 丨万止孔中瘵發。培養盤最吝口 可疊到4層高。所有微較盤均於有氧下，於饥下培養^ 小時。 < NC=:養盤於培養24小時後讀數，僅當對照藥物對 NCCLS型囷種流感嗜血g ATcc 、 ATCC 49619之數值在已公 〜肺炎鍵球菌 以^)，才可記錄其結果 内S“NCCLS，M1°〇- 适内#力 -hmpas於活體内 抑制活性。此等所 丨从木候式中， 對β-内醯胺酶（+病原菌之内酿 87130 -60- 1250162 選定之單離株之數據顯示6- /3 -HMPAS對來自呼吸道病原 菌··流感嗜血菌與卡塔莫拉氏菌之/3 _内醯胺酶之活性一般 相當於棒形酸鹽。 此模式中，由蒙古種沙鼠接受肺炎鏈 t囷或*感嗜血菌之挑戰。取雌性蒙古種沙鼠（5G_60 ^接 種以體積50 “ 1傳详夕！ c 寻k之l〇g 5·6 CPU之流感嗜血菌或肺炎鏈 球菌至左鼓室大痴φ。4立％ ^

Μ ^接種後18小時，開始以含在500 v L 體積0.5%曱基纖維素媒劑中傳送之經胺▼青黴素與前藥 (7·1)之組σ進仃劑量_效應療程（（丄丄，2天）。於接種後第4 天時，^細菌清除數據計算ED50。 ?工胺F月嫉素/所藥3與奥孟、;丁之組合對清除此病原菌同 有效其ed5。為6_10 mg/kg，且其了：丄及“]之組合之姓 ^等。以㈣素作為單—藥劑時則無法對抗此病° 此模式中，由雌性叫伽鄉 = 8_2Gg)接受挑戰，其係、經腹膜内接 . 或3/0啤酒酵母）中之log 2-6 CPU肺产絲 囷、金黃色葡萄球蘭Γς 夂鏈3 Αςη (S.aUreUS)或卡塔莫拉氏菌，傳 為500//L。接種徭】^ 士 寻U體^ 编雉各 小日守，開始以含在200 體積〇 5。/Ψ 1 缄維素媒劑中俜译 货/0曱^ 八 傳适之羥胺苄青黴素與前藥3(7:1)之0人 仃劑量-效應療程（ ）之、、且合$ 私# ( .d·，1天）。於接種後第4天時，ώ + 數據計算ed5。。 r由存活4 备胺卞青黴素/前玆 一 市3之組合可有效保護小白白名 二種/3-内醯胺酶 乳免於因道 ()囷株而死亡。一般而古，',一 87130 , °羥胺苄青黴 -61 - 1250162 素/前藥3組合之活性相當於奥孟ίτ(亦即對流感嘻血菌具有 同等效力，且對卡塔莫拉氏菌之效力稍低）。7:1之組合通常 2 14:1之組合更有效。對皮膚及皮膚結構病原菌金黃色葡 甸球菌、肺炎克雷伯氏菌與大腸桿菌之數據亦包括在下表 中。

C 此模式中’使雌性CF_1(18_2Gg)經傳送㉖ 積為40W之lGg5_6CFu肺炎鏈球菌，於鼻内接種，接㈣ 我後18小時’開始以含在2()(^體積請甲基纖維素媒劑 中傳送之羥胺苄青黴素與前藥3(7:1)之組合進行劑量-效應 ^呈（b.i.d.,2天）。於接種後第1〇天時，由存活率數據計 經月女卞青黴素、經胺▼青黴素/前藥3及奥孟红可有效對 抗青徽素抗性肺炎g株（叩5。為22_25 mg/kg)及對抗青徵素 炎菌株(PD5。為2_7_3.3mg/kg)。由於青黴素抗性肺 火囷株中沒有f㈣胺酶，因此㈣〒#黴素之活性沒有 或棒形酸鹽之存在而改善（亦未產生梅抗）。 月傕支素抗性菌株之PD 冥#軎織* I η ^ 〇5〇同於月磁素易感性菌株之結鱼 MIC較高之結果一致。 ” …’於沙鼠中耳炎迷你及小白鼠腹膜炎模式中，以 -對一之方式，由羥胺苄青黴素/前藥3之組合^丨及m) ，口投藥之活體内活性與奥孟';τ比較。經胺节青黴素/前藥 二組合於此等模式中，對呼吸道病原菌（流感嗜血菌、卡 2拉=菌與肺炎鏈球菌）及皮膚與軟組織病原菌（金黃色 葡甸球菌、大腸桿菌及肺炎克雷伯氏菌)之活體内活性相當 87130 -62- 1250162 於奥孟汀。羥胺苄青黴素/前藥3之活體内效力與此組合以 2:1之比例於MIC分析法中測得之活體外活性一致。 對抗呼吸道與皮膚及皮膚結構病原菌之活體内抗細菌活性（ 經 口投藥 KED50, mg/kg) 病原菌 經胺T青黴素 前藥3 羥胺苄青黴素/前藥3 奥孟汀 (7/1比例） (7/1比例） 沙鼠中耳炎模式 流感嗜血菌 >50 >25 8.9/1.31 9.9/1.4 Γ54Α121 8^2 鼠類全身模式 流感嗜血菌 >100 >25 9.8/1.4 13.4/1.9 (54A1218) 卡塔莫拉氏菌 >100 >100 37.6/5.4 12.6/1.8 (87A1115) 金黃色葡萄球菌 (01A0400) >100 >12.5 30.6/4.4 17.8/2.5 肺炎克雷伯氏菌 (53A003 1) >200 >25 20.2/2.9 13.0/1.8 大腸桿菌 m A0257) >200 >100 62.2/8.9 146/20.8 小 白鼠肺炎模式 肺炎鏈球菌 25 >25 21.8/3.1 21.8/3.1 (02J1095) 肺炎鏈球菌 3.3 >25 2.66/0.38 2.66/0.38 〔02J1016) 87130 -63 - 1250162 1第-個數值代表經胺τ青黴素濃度，而第二個數值指l 内fe胺酶抑制劑濃度。 2括號中數字代表Pfizer藥廠菌株之ι〇編號。 义抗呼吸逼與皮膚及皮膚結構病原菌之活體内抗細菌活性 (I 口投樂）（ED50，mg/kg) 病原菌 羥胺苄青黴素前藥3 羥胺〒青黴素/前藥3 奥孟汀

沙鼠中耳炎模式 >50 >25 10.5/0.73 5.8/0,4

鼠類全身模式

流感嗜血菌 L54A1 21 R 流感嗜血菌 (54A1218) >100 >25 12.3/0.88 37·9/2·7 卡塔莫拉氏菌 (87A1115) >100 >100 42.5/3.0 23.6/1.7 金黃色葡萄球菌 (01A0400) 肺炎克雷伯氏菌 >100 >12.5 94.2/6.7 24.4/1.7 (53A003 1) 大腸桿菌 >200 >25 23.4/1.7 23.4/1.7 〔51 A0257、 小白鼠肺炎模式 196/1—L 肺炎鏈球菌 (02J 1095) 25 >25 23.6/1.7 17.8/1.3 87130 -64 - 1250162 肺炎鏈球菌 3.3 >25 1.6/0.1 1 1.85/0.12 Γ02Π016)_ 1第一個數值代表羥胺T青黴素濃度，而第二個數值指/5 -内醯胺酶抑制劑濃度。 2括號中數字代表Pfizer藥廠菌株之ID編號。 87130 -65 -

Claims (1)

1250▲说23156號專利申請考 中文申請專利範圍替換本&4年2月） 拾、申請專利範圍： 1 · 一種如下結構式之前藥

〇 /^0 〇 叉。 〇

其中R為Η或甲基。 其係選自下列組成之群 2 ·根據申請專利範圍第1項之前藥 中： ⑷4·硫雜+氣雜雙環[3.2.0]庚燒-2-竣酸，6·(經甲基） -3,3-二甲基·7·氧代_，（1R)小（苯甲醯氧基）乙醋，^· 二氧化物，（2S，5R，6R)-; ’ (b) 4-硫雜小氮雜雙環[3·2〇]庚烷_2_羧酸，6(羥甲基 )-3,3_二甲基_7·氧代（以）-1^苯甲醯氧基）乙酯，4,4· 二氧化物，（2S，5R，6R)-; ⑷4_硫雜小氮雜雙環[3·2 〇]庚烷_2_羧酸，卜（羥甲基 )_3，弘二曱基-7-氧代_，（iR/is)-i-(苯曱醯氧基）乙酯， 4,4·二氧化物，（2S，5R，6R)-;或 (d) 4-硫雜小氮雜雙環[32〇]庚烷_2_羧酸，6_(羥曱基 )_3,3-二曱基氧代_，（苯甲醯氧基）曱酯，4,4-二氧 化物，（2S，5R，6R)·。 3· —種如下結構式之前藥， 87130-940216.doc 1250162

4- 一種提高石_内醯胺抗生素於哺乳動物體内醫療有效性之 醫藥組合物，其包含： 0)根據申請專利範圍第1項之前藥；及 (b)至少一種醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。 5 ·根據申請專利範圍第4項之醫藥組合物，其另包含々—内醯 胺抗生素。 6·根據申請專利範圍第5項之醫藥組合物，其中該万-内醯胺 抗生素為羥胺苄青黴素。 7·根據申請專利範圍第6項之醫藥組合物，其中該前藥為4- 硫雜小氮雜雙環[3·2·0]庚烷-2-羧酸，6-(羥曱基）-3,3-二甲 基-7-氧代-，（1R)_1_(苯甲醯氧基）乙酯，4,4-二氧化物， (2S，5R，6R)… 8· 一種提高/3 -内醯胺抗生素於哺乳動物體内醫療有效性之 醫藥組合物，其包含： (a) 4-硫雜-i•氮雜雙環[3·2〇]庚烷_2-，羧酸，6_ (羥甲基 )_3,3_二甲基-7-氧代-’（ir)·^(苯甲醯氧基）乙酯，4，心 二氧化物，（2S，5R，6R)-， (b) 經胺苄青黴素，及 (c) 醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。 9 · 種療哺乳動物細菌感染之醫藥組合物，其包含·· 87130-940216.doc -2 - 1250162 (a)根據申請專利範圍第1項之前藥；及 ----- 削驭稀釋劑。 10·根據申請專利範圍第9項之醫藥 ^ ^ ^ ^ 具另包含万·内醯 月女抗生素。 11.根據申請專利範圍第10項之醫藥組合物，其中該心内醯 胺抗生素為羥胺芊青黴素。 12·根據中請專利範圍第_之醫藥組合物，其中該前藥為 4-硫雜小氮雜雙環[3·2〇]庚烷_2_羧酸，6•(羥甲基»，弘二 甲土 7氡代，（IR)」-(苯甲醢氧基）乙酯，4,4_二氧化物 ，（2S，5R，6R)- 〇 13· —種治療哺乳動物細菌感染之醫藥組合物，其包含·· (a) 4-硫雜小氮雜雙環[3·2〇]庚烷羧酸，6_ (羥甲基 )-3,3-二甲基_7_氧代…(苯甲醯氧基）乙酯，4，扣 二氧化物，（2S，5R，6R)_， (b) 羥胺苄青黴素，及 (0醫藥上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑。 14. 一種包含沒-内醯胺抗生素及根據申請專利範圍第1項之 月’J藥之組合於製造用於提高点-内醯胺抗生素於哺乳動物 體内醫療有效性之藥物之用途。 15·根據申請專利範圍第14項之用途，其中該/3 -内醯胺抗生 素為羥胺苄青徽素。 16·根據申請專利範圍第14或15項之用途，其中該前藥為4_ 硫雜-卜氮雜雙環[3.2.0]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲 基-7-氧代-，(苯曱醯氧基）乙酯，4,4_二氧化物， 87130-9402l6.doc 1250162 (2S，5R，6R)-。 1 7. —種包含；5 -内醯胺抗生素及根據申請專利範圍第1項之 前藥之組合於製造用於治療哺乳動物細菌感染之藥物之 用途。 18. 根據申請專利範圍第18項之用途，其中該冷-内醯胺抗生 素為羥胺苄青黴素。 19. 根據申請專利範圍第17或18項之用途，其中該前藥為4-硫雜-1-氮雜雙環[3丄0]庚烷-2-羧酸，6-(羥甲基）-3,3-二甲 基-7-氧代-，（lR)-l-(苯甲醯氧基）乙酯，4,4·二氧化物， (2S，5R，6R)- 〇 87130-940216.doc