TWI250022B

TWI250022B - Pharmaceutical composition for use in the treatment of an inflammatory autoimmune disease or condition

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Publication number: TWI250022B
Application number: TW088109078A
Authority: TW
Inventors: Peter Hiestand
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-06-02
Filing date: 1999-06-01
Publication date: 2006-03-01
Also published as: JP2010059177A; SK18142000A3; TW200522975A; IL139589A0; BR9910860A; WO1999062540A1; NO20006113D0; HUP0102142A2; KR20010043969A; PL344451A1; AU750422B2; CN1304315A; ID27576A; AU4372499A; TWI250021B; CA2333315A1; ZA200006464B; JP2002516873A; GB9811854D0; EP1082130A1

Description

1250022 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（本發明係關於「學、多J:的教用塗，特別是非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素之新醫藥用途。、非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素及其在治療及預防AIDS及AIDS相關疾病的用途，可見於歐洲專利484281 號中，其包括環孢素類化合物的一般描述、其命名法，及其作用模式。EP 0,484,281 B中所揭示的，特別是與上述有關之一般描述部份，及其他與本發明有關之描述部份，倶收爲本發明之參考文獻。目前已令人驚異地發現可結合環親素但不會有免疫抑制性的環孢素，對發炎性自體免疫疾病具有抑制效果。以 Quesniaux 於 Eur· J. Immunol· 1987, 12，1359-1365 中所述之competitive ELISA測試，若環孢素具有五分之一 Ciclosporin (亦稱爲環孢素A)結合人類重組環親素的能力，則環孢素被認爲是可結合環親素。在該試驗中，待測之ί衣孢素於ί衣親素與被包覆之B SA-環抱素A培養途中被加入’同時亦計算在無競爭者存在下達到5〇%抑制對照組反應所品之濃度（IC5〇)。結果以結合率（br )表示，其爲測試化合物之ICw與使用環孢素A取代環孢素之相同試驗之IC50 的比率，以1 0爲底的log値。因此，1 〇之B R係指試驗化合物具有十分之一環孢素A結合環親素之能力，而負値則是表示其結合力大於環孢素A之結合力。可有效抑制發炎性自體免疫疾病的環孢素，其B R値低於〇·7 (因log1() 5約等於〇·7)，較佳等於或低於零。若環孢素在混合淋巴球反應（MLR )中具有少於環孢素A 5 %，本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A:1規格（U0 x 297公f )

(V ------------裝--------訂---------· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1250022 ____B7__ 五、發明說明（2 )

較佳爲少於2 %之結合力，則該環孢素被視爲是非免疫抑制性。混合淋巴球反應見述於T· Meo於Γ免疫方法」，L

Lefkovits 及 B. Peris，Eds·，Academic Press，Ν·Υ· ρρ· 227-239 (1979)中之論述。取自Balb/C鼠（雌性，8至l〇週齡）之脾臟細胞（0·5 X 106)與取自CBA鼠（雌性，8至1 〇週齡）之放射線處理（2000雷得）或漿黴素C處理的0.5 X 1〇6脾臟細胞一起培養五天，經放射線處理之同種組織細胞會在Balb/C 細胞中謗發增殖反應，該反應可用標記前區物被收入 DNA中之試驗進行測量。因爲謗發者細胞已被放射線（或聚撤素C )處理過’故不會被Balb/C細胞謗發增殖，但仍保留其抗原性質。在MLR所找到之試驗化合物的IC5()，可與在平行試驗中所的之環孢素A的値相較。目前已發現以上述MLR所判定之非免疫抑制性化合物，在IL_2 Reporter Gene Assay中常是無活性的，因此，il_2 Reporter Gene Assay可作爲可被用作初步篩選的方法以篩選用於本發明之環親素結合環孢素化合物。可抑制發炎性自體免疫疾病之非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素，在此及後文中視爲該活性化合物。活性化合物特別有用於治療、預防、或改善自體免疫疾病及發炎反應，特別是有自體免疫成分病因之發炎反應，如關節炎（如風濕性關節炎、慢性漸進性關節炎、及變形性關節炎）及風濕性疾病。可使用活性化合物之特定自體免疫疾病包括自體免疫造血疾病（包括如溶血性貧血、發育不全性貧血、純紅血球性貧血、及原發性血小板減少 -5- 紙張尺度適用中國國家標準（CNShV!規格（210x297公f ) ----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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五、發明說明（3 ) 症）、全身性紅斑性狼瘡、多軟骨炎、硬皮病、章格納氏肉芽腫、皮肌炎、慢性活性肝炎、重症肌無力、史蒂芬強森氏症候群 '原發性熱帶Π瘡、自體免疫發炎性腸病（包括如潰瘍性結腸炎及局部性迴腸I)、_炎、分泌性眼病、突眼性甲狀腺腫、類肉瘤病、多發性硬化症、初級膽汁性硬變、糖尿病，如幼年型糖尿病（第一型糖尿病）、葡萄膜性視網膜炎（貝瑟氏症）、葡萄膜炎（前葡萄膜炎及後葡萄膜炎）、乾性角膜結膜炎、春季角膜結膜炎、間質性肺纖維化、牛皮癣關節炎及絲球體性腎炎（伴隨或無伴 P迎腎病變症候群，如包括原發性腎病變症候群或最低限改笑腎病）、氣喘及其他包含自體免疫成份之發炎性呼吸道疾病、甲狀腺炎（慢性甲狀腺炎）、腦脊髓炎、發炎性中樞神經疾病、及相似之自體免疫疾病。環孢素作爲發炎性免疫反應抑制劑時的活性可由下列試驗系統展現：复自體免疫葡菡暄*

在十一週齡的雌性路易斯鼠（Lewis m，brL，Basei )的右腳掌注射5 0毫克純視網膜s抗原。抗原以磷酸緩衝生理食鹽水稀釋，並用佛羅恩特氏（Freund，s)完全佐劑及Bact〇M

Tuberculosis H37 RA (Difco)作 50:50 (v/v)乳化。注射量爲〇. 1晕升’含5 〇微升完全佐劑及114毫克結核菌。於注射後第十天開始，每天以裂隙燈檢查眼睛。以分數範圍〇到 4之半定量法對眼發炎蔓延計分： 0無視力改變 -6- 本紙張尺度適用中國⑵Gx 297 [ϊ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝--------訂_丨經濟部智慧財產局員工消費合作杜印製 4// 1250022 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 U, 五、發明說明（4 ) 1血管分佈小幅改變，部份虹膜及結合膜血管擴張 2中度改變，血管清澈度喪失，虹膜及血管擴張，霧狀介質 3明顯改變，眼突，瞳孔模糊，血管結構明顯喪失，部份出血 4嚴重改變，明顯眼突，結構完全喪失，擴散性出血。參考資料：Wacker W.B.，Donoso L.A·，Kalsow C.M·， Yakeelov J.A. Jr·，Organisciak D.T. .Experimental Allergic Uveitis. Isolation，Characterisation and Localization of a soluble Uveitopathogenic antigen from bovine retina. J. Immunol. 119 (1977) 1949-1958 大鼠實驗性自體免疫腦脊髓炎（EAE) 在雄性溫斯頓鼠（Wistar)後腳掌上注射胎牛脊髓及佛羅恩特氏完全佐劑混合物。疾病症狀（尾巴及雙後肢癱瘓）通常在十六天中發生。記錄發病動物數及病發時間。上述試驗模式中疾病發生的抑制可作爲醫藥用途之指標。參考資料：Levine et al.，Am. J· Path. 47 (1965) 61; McFarlin et al·，J. Immunol· 113 (1974) 712; Borel， Transplant. & Clin. Immunol· 13 (1981) 3]〇佛羅恩特氏佐劑謗發之關節炎在OFA及溫斯頓鼠（雄性或雌性，150克重）的尾巴底部或後腳掌注射0.1毫升含0.6毫克熱死滅恥垢分枝桿菌的礦物油。在發展中的關節炎模式中，治療是在注射佐劑後即開始（第一到第十八天）；在以建立之關節炎模式中，治療本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)Ai規格（210 X 297公釐） ------------裝---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---- 線Φ A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1250022 __B7_ 五、發明說明（5 ) 則啓始於第十四天，此時第二階段發炎已完全（第十四到第二十天）。實驗結束時，以微彎角規測量關節腫脹情形。在發展或建立試驗模式中對疾病進程的預防或抑制，可作爲醫藥用途之指標。參考資料：Winter & Nuss，Arthritis and Rheumatism 9 (1996) 394: Billingham & Davies, Handbook of Experimental Pharmacology (Vane & Ferreira Eds，Springer Verlag， Berlin), 50/11. (1979) 108-144] 膠原謗發之關節炎在尾巴基底處以皮内注射方式給予大鼠第二型膠原以激發免疫反應。十到十二天後，關節炎發作，特徵爲皮膚紅腫及關節腫大。以測試化合物一天兩次口服治療實驗動物，一般是以兩種不同劑量在腫脹初期即開始治療，並持續至最多十天。本試驗亦包括已具專利之COX抑制劑處理的對照組具關節炎動物和大鼠。對後腳掌的腫脹作常規評估。研究結束時，犧牲實驗動物並處理其關節以作組織學評估。具有好抑制腫脹效果，即約具有具專利之COX抑制劑50%以上效果之測試化合物，可選作進一步試驗。亦可使用體外趨化性試驗（如用Boy den Chamber )，及環親素謗發嗜中性球滲入試驗和類似試驗。已發現本發明之活性化合物與環孢素之結構差異在4及/ 或5的位置。其他可能差異位置則是在6及7。活性化合物中的一群是將環孢素在位置4之甲基白氨酸以N-甲基氨基酸取代，如r-羥基甲基白氨酸、甲基異白 -8- 本紙張汶度適用中國國家標準（CNS)A]規格（210 x 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

1250022 A7 B7 五、發明說明（6 氣敌、甲基2-氣基異戊酸、甲基蘇氨酸、甲基氨基丙酸、甲基路氨酸或甲基赂氨酸（〇-P〇(〇H)2)、或脯氨酸。除了甲基異白氨酸及甲基蘇氨酸外，同素形式之Mea白氨酸及 Mea蘇氨酸亦可使用。在同素形式中，其在空間化學方面是與天然氨基酸在A位置上有相反之組態，故天然形式與同素形式之氨基酸互爲非對映異購物。另一群活性化合物則是將2·氨基異戊酸在位置5以N-燒基，較佳爲N-甲基氨基酸取代。較佳做义烷基化的氨基酸爲2-氨基異戊酸或白氨酸。[2-氨基異戊酸]5的亞胺基上的氫較佳以無分支Cw烷基，較佳以甲基、乙基、或卜丙基取代。最後一群較佳之活性化合物則全是新穎化合物。此外，某些活性化合物可能與環孢素在1、2、3及/或6 位置不同。用於本發明中之特別一群活性北合物爲式A之環孢素衍生物、 -MeBmt-GcAbu-B-C-Val-MeLeu-Ala-(D)AJa-MeLeu-MeLeu-MeVal 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ι〇 π Α (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝訂------- 經濟部智慧財產局員工消費合作杜印製其中B是式B之氨基酸殘基 S-Alk-R XH / b II CH, 〇

B -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 1250022 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（7 ) 其中a代表連結至位置2上之以Abu殘基的鍵； b代表連結至位置4上之C殘基的鍵； A1 k代表直鏈或支鏈含2到6個碳原子之烯類或3到6個碳原子之環烯類，且 R代表羧基或燒氧羧自由基；自由基-NH，其中&及r2可相同或不同，是爲氫、烷基、C：2·4烯基、c3_6環烷基、苯基（可選擇性以 i素、烷氧基、烷氧羰基、胺基、烷胺基或二烷胺基取代）、或苯甲基、或飽和或未飽和含5到6員環及1 到3雜原子之雜環基自由基、或其中之1及R2與氮原子一起形成4到6員環之飽和或未飽和雜環，且可視情況含有其他選自氮、氧或硫之雜原子及視情況以烷基、苯基、或苯甲基取代s、下式之自由基 R3 1¾ 其中1^及112如上所定義，R3代表氫或烷基，而η爲從2 到4之整數’且其中之烷基代表含1到4個後原子的直鏈或支鏈烷基； c爲甲基白氨酸或4-經基-甲基白氨酸；及其醫藥可接受鹽類。孩群環孢素衍生物可見述於已發表之國際專利N〇 S. W〇 -10- 本紙張尺度過用中國國家標準（CNS)A4規格（210: W裝--------訂---------. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1250022 A7 B7 五、發明說明（8 98/28328、WO 98/28329、及 WO 98/28330 中。該群中特佳之化合物爲式A化合物，其中B爲氨基酸殘基B， a /L3

-CHH S 一：· C cy ο b B* 且C爲氨基酸殘基4-羥基-甲基白氨酸。一群特佳之活性化合物是由式I化合物所組成 -W-X-R-Y-Z-Q - AJa - (D)Ala - MeLeu - MeLeu - MeVal i 12 3 4 5 6 7 8 9 10 n 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製其中W爲甲基Bmt、二氫甲基Bmt、或8·-^基甲基; X是a Abu、：2-氨基異戊酸、蘇氨酸、Nva、或〇-甲基蘇氨酸（甲基Ο蘇氨酸）； R是Sar或（D)_甲基胺基丙酸； Y是甲基白氨酸、r-羥基-甲基白氨酸、甲基異白氨酸、甲基2-氨基異戊酸、甲基蘇氨酸、甲基胺基丙酸、甲基酪氨酸、甲基酪氨酸（OPO(OH)2)、Mea異白氨酸或Mea蘇氨酸、或脯氨酸； Z是2-氨基異戊酸、白氨酸、N-Alk-2_氨基異戊酸、或N-Alk-白氨酸，其中Aik代表甲基，或甲基以乙基取代，視情況該乙基可由苯基、或含6員環之 -11 - 本紙張尺度適用屮國國家標準（CNS)A4規格（210x297公釐） -------!| 裝·！訂 i — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 9? 1250022 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣五、發明說明（9 ) 氣、硫、乳雜5展基取代，或苯基取代’視情況該苯基可由_素取代；且 Q是甲基白氨酸、r-羥基·甲基白氨酸、或曱基胺基丙酸及其醫藥可接受鹽類。 W、X、γ、z及Q等基團具有獨立之下列特性： W較佳爲W ’，而W ’是甲基Bmt或二氫甲基B m t ; X較佳爲X’，而X ’是a Abu或Nva，更佳爲χ"，，而χ”是 ^Abu ; Y較佳爲Y’，而Y1是護基-甲基白氨酸、甲基2-氨基異戊酸、甲基蘇氨酸、甲基胺基丙酸、或甲基酪氨酸 (opo(oh)2); Z較佳爲Z’ ’而Z1是2-氨基異戊酸或甲基2-氨基異戊酸；且 Q較佳爲Q’，而Q’是甲基白氨酸。一群特佳之活性化合物是式I化合物，其中W爲W'、X 爲X’、Y爲Υ·、Z爲Z，、且Q爲Q·。特佳之式I活性化合物有： a) [二氫甲基Bmt]、[ r-羥基-甲基白氨酸]4-環孢素A， b) [甲基2-氨基異戊酸]4_環孢素A， c) [甲基異白氨酸]4_環孢素A， d) [甲基蘇氨酸]4_環孢素a， e) [r-羥基·甲基白氨酸]4_環孢素A， f) [Nva]2-[r-羥基·甲基白氨酸]4-環孢素A， g) [ r -羥基·甲基白氨酸]4_[ r -羥基-甲基白氨酸]ό-環孢素 -12 - 本紙張尺度適闬屮國國家標準（CNS)i\4規格（210 X 297公釐） ------------裝--------訂--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1250022 Α7 Β7 五、發明說明（1〇) A， h)[甲基2-氨基異戊酸]環孢素a， Ο [甲基氧蘇氨酸]2-[(D)甲基胺基丙酸]3_[甲基2-氨基異戊酸]環孢素A， j) [以·羥基-甲基Bmt] L環孢素a， k) [甲基胺基丙酸]環孢素a， l) [ (D)甲基胺基丙酸]3·[甲基酪氨酸（〇ρ〇(〇Η)2)]4_環孢素 A， m ) [N-苯甲基-2-氨基異戊酸]5_環孢素a， η) [N-5-氟-苯甲基-2_氨基異戊酸]5-環孢素A， ο ) [N_缔丙基-2-氨基異戊酸]5-環抱素A， p) [N-3-苯基-烯丙基-2-氨基異戊酸]5-環孢素A，

q) [脯氨酸]4-環孢素A 特佳之活性化合物爲[甲基異白氨酸]4-環孢素A及[r -羥基-甲基白氨酸]4-環孢素A，最佳則爲[甲基異白氨酸]4-環孢素A。除式I化合物外，較佳之活性化合物包括如〇 [ r 呈基-甲基白氨酸]9-環孢素A。該活性化合物可經下列方法得到： 1) 發效法 2) 生物轉形法 3) 衍生作用 4) 部份合成 5) 全合成。 -13- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝-----

I— an ϋ 1 、· n ϋ ·ϋ ϋ mmmi I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1250022 A7 B7 五、發明說明（11) 這些方法之一般性及專一性敘述可見於EP 0484281 B中之實例1到1 0。該一般性敘述及實例敎導倶收錄爲本發明之參考資料。EP 0484281 B中之實例1 1則敘述活性化合物相對於環孢素A之非免疫抑制性且可結合環親素的活性測量，而該實例敎導亦收錄於本發明之中。該活性化合物可用於病人以預防或治療發炎性自體免疫疾病。因此本發明提供了一種非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素在製造藥物以治療或預防發炎性自體免疫疾病上的用途。本發明更提供了一種治療或預防患有或有風險患有發炎性自體免疫疾病的病人之方法，其包括給予該病人有效量之本發明的活性化合物。該活性化合物可經由任何一種傳統途徑給予，特別是内月I，如口服，以喝的溶液形式、錠劑或膠囊，或非經腸方式’如可注射之溶液或懸浮液形式。若採靜脈注射，則一天之劑量可爲1到2 0毫克/公斤，較佳爲3到1 0毫克/公斤’而若用口服，則爲1到5 〇毫克/公斤，較佳爲i 〇到3 〇毫克/公斤。孩活性化合物之毒性據信小於環孢素A之毒性。因該活性化合物爲非免疫抑制性，可避免環孢素A在免疫抑制方面的副作用。在其他環孢素A具有的副作用方面，特別是長期使用時的腎毒性及中樞神經毒性，該活性化合物之毒性均小於環孢素A。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝訂---- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -14- 1250022 A7 B7 五、發明說明（12) 該活性化合物可單獨或與其他藥物使用於治療或預防發炎性自體免疫疾病，如與抗發炎化合物及/或免疫抑制化合物並用。在特佳的具體實施例中，該活性化合物與 Sanglifehrins (山格力服瑞）並用，山格力服瑞是一種最近發現的具免疫抑制性且可結合環親素之化合物，其不會抑制卡西紐因（calcineurin )活性。山格力服瑞及其製備法見述於W0 9702285及W0 9807743中。與活性化合物並用之特佳的山格力服瑞爲山格力服瑞A到L，特別是山格力服瑞A、B、C、及D。因此在較佳具體實施例中，本發明提供了一種治療或預防患有或有風險患有發炎性自體免疫疾病的病人之方法，包括給予該病人有效量之結合藥物，其中含有本發明的活性化合物及一種山格力服瑞。本發明亦提供一種治療或預防發炎性自體免疫疾病的醫藥組合物，含有本發明的活性化合物及一種山格力服瑞。本發明之醫藥組合物的形式適於同時、分別、或順序治療。因此，活性化合物與山格力服瑞可用固定組合物形式一起給予，或可在不同時間分別給予。一般而言，該組合物可爲具有效量結合製備物之單位劑量形式。較佳的活性化合物法定配方包括基於如英國專利案 2 222 770A所述之微乳化劑，其包括外用及口服形式；以及由固態溶液所得之口服及注射形式，其由如見述於英國專利案2 209 671A中之脂防酸單醣酯，如月桂酸單薦醣酉旨所組成。適用於口服給予的單位劑量形式，包括如每劑量 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNShV】規格（210 X 297公釐） ,!轉裝 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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五、發明說明（13) 2 5到200毫克活性化合物。，裝----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) EP 0484281 B之配方實例a、B、C、及D，俱收入本發明之參考資料中。 & 該配方之各種成分及其製備法，完整見述於英國專利案 2 222 770A中，其内容亦收錄於本發明之參考資料中。當活性化合物與其他如山格力服瑞之化合物併用時，在適當之活性化合物與其他化合物比例下，可使用類似之配方。因此，如使用活性化合物及山格力服瑞時，較佳的重量比範圍爲約5:1到50:1 (活性化合物：山格力服瑞），其中活性化合物劑量約爲1 〇到1〇〇毫克/公斤。本發明之活性化合物活性以於動物模型生物活性試驗 A、B及C中測試過，參見附圖，其中：圖1爲對照組動物（A，黑條）及免疫激發後9到is天（X •軸）之[甲基異白氨酸]4_Cs處理動物（B，灰條）在EAE 試驗中之疾病分數（y轴）圖；圖2爲在發展中佐劑關節炎試驗中，動物分別處理以a _ 30亳克/公斤[甲基異白氨酸]4_Cs ρ·〇· ; B - 1毫克/公斤山格力服瑞A s.c·;及C.-30毫克/公斤[甲基異白氨酸]4_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

A

Cs ρ.〇· + 1毫克/公斤山格力服瑞a後抑制腫脹百分比圖，另外圖3爲在膠原謗發關節炎試驗中，大鼠分別被處理以載劑（;乙醇1〇〇/0 /玉米油/ 5毫升/公斤，6隻動物）、[甲基異白氨酸]4_Cs ( 〇 ; 2x12.5毫克/公斤/天，7隻動物）、[甲基異白氨酸]4_CS (W· ; 2x25毫克/公斤/天，7隻 -16- 本，我依/1度適弔中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） 1250022 A7 B7 五、發明說明（14) 動物），及具專利之C〇X抑制劑（+ ; 2X2,5亳克/公斤/ 天，4隻動物），於第十二天免疫激化且於第零到第九天 (X軸）治療時，後腳掌腫脹（單位毫米，y軸）圖。生物活性試驗 A. 大鼠實驗性自體免疫腦脊髓炎ΓΕΑΕ、本發明之一種活性化合物，[甲基異白氨酸]弋環孢素A 以3 0耄克/公斤劑量於如上述之急性e A E試驗中測試，發現可有意義地抑制發病。所得結果示於圖1，其顯示對照組動物及活性化合物處理動物在免疫激化後第9到第i 8天的病況。對照組動物在第1 1天分數就超過〇·5，並在第i 5 及第16天接近2.0 ;而[甲基異白氨酸]4-Cs處理動物則直到第1 2天才測得到分數，並在第1 5到第1 7天達到約〇.5的最大分數後下降。 B. 太鼠實驗性自體免疫葡萄膜炎（EAU) i)[甲基異白氨酸]4·環孢素A及山格力服瑞A亦如上述於 EAU試驗中分別測試，另再與山格力服瑞A結合使用測試。所得結果列於下表I。 1 裝--------訂---------· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)iV】規格（210 X 297公釐） 1250022 A7 B7 五、發明說明（15)

表I

[甲基異白氨酸]4_環孢素A及山格力服瑞A在實驗性自體免疫葡萄膜炎中的效果組別劑量最南分數 (4=最高）天數對照組 3.3 17.2 [甲基異白氨酸]4_環孢素A 25 1.9 29.5 山格力服瑞A 1 2.5 17.7 山格力服瑞A 3 2.5 23.9 [甲基異白氨酸]4_環孢素A +山格力服瑞A 25 + 1 1.0 33.8 [甲基異白氨酸]4-環孢素A +山格力服瑞A 25 + 3 0 37 ii)[甲基異白氨酸]4-環孢素A、[ r -羥基-甲基白氨酸]4-環孢素A，及[N-苯甲基-2-氨基異戊酸]5-環孢素A，和乙醇加玉米油安慰劑亦如上所述在EAU試驗中測試。所得結果列於下表II。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝----- 訂--- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -18- 本紙張泛度適用中國國家標準（CNS)A1規格（210 X 297公釐） 1250022

發明說明（16 J1 人表口田乙醇/玉米油給予化合物安慰劑玉米油NM811 21L-810 224-602 25 25 25 :克/公斤 — 第十二天出現葡萄膜炎被影響眼睛的數目/ 總眼睛數對高分數(0-4) 0=無葡萄膜炎 4=非常嚴重天數公斤 ---- 4/10 4 14 — 0/10 2 18.4 2/10 3.66 16.7 -------- 5/10 4 13.5 ~裝----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 kL> 展中佐劑關即炎試驗中分別測試及結合使用測試。所得結果示糸圖一，其顯示由5隻動物處理以30亳克/公斤[甲基異白氨酸]、環抱素A、1毫克/公斤山格力服瑞A，或結合使用毫克/公斤[甲基異白氨酸]4_環孢素A和1毫克//公斤山格力服瑞A所得之平均抑制腫脹圖。 C·膠原謗發關節恭於大鼠膠原謗發關節炎模式中，研究非免疫抑制性環袍素，[甲基異白氨酸4]_環孢素A (亦稱爲NIM 811)用於治療上的方法。對大鼠由尾巴基底處經皮内給予第二型膠原以作免疫激化。十到十二天後，會發生關節炎，可由關節紅腫判足。腫脹發生後，立即對動物施以一天兩次[甲基異白氨酸4]_環孢素A (於乙醇1〇%/玉米油載劑中，不同 19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐）

I I I 1 、· ϋ ·_1 _1 ϋ n ϋ I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1250022

五、發明說明（17) 的兩種劑量）治療，持續十天。本研究亦包括了以c〇x抑制劑處理的對照組關節炎動物和大鼠。對後腳掌的腫脹作p 常規評估。研究結束時，犧牲動物並取其關節以研究其組織學情況。 ' / [甲基異白氨酸4]-環孢素A在第九天於兩種劑量（12 5及 2 5毫克/公斤，一天兩次）上均展現良好抑制腫脹效果（圖 3 )’最高約爲COX抑制劑在第9天（劑量2· 5亳克/公斤，一天兩次，腹腔注射）效果之60%。與環孢素A的資料 (CyA，有效的ED5〇約爲1〇_15毫克/公斤，見Smith R j and Sly L. M·，J. Pharmacol. Exp. Ther.? June 1996* 277(3)· 18 01 -1813 )作比較，顯示在風濕性關節炎模式中，[甲基異白氨酸4]-環孢素A具有類似效力。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標iMCNS)Al規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Claims

年 8 8 8 8 A B c D 六、申請專利範圍 1. 一種用於治療發炎性自體免疫疾病或病症之醫藥組合物，其包含一有效量之非免疫抑制性且可結合環親素之式I之環孢素： -W - X - R - Y - Z - Q - AJa - (D)AJa - MeLeu - MeLeu - MeVal— ]2 3 4 5 6 7 8 9 10 .11 其中W為甲基Bmt、二氫甲基Bmt、或8’-羥基-甲基 Bmt ; X是a Abu、2-氨基異戊酸、蘇氨酸、Nva、或Ο-甲基蘇氨酸（甲基Ο蘇氨酸）； R是Sar或（D)-甲基胺基丙酸； Y是甲基白氨酸、7-羥基-甲基白氨酸、甲基異白氨酸、甲基2-氨基異戊酸、甲基蘇氨酸、甲基胺基丙酸、甲基酪氨酸、甲基酪氨酸（OPO(OH)2)、Mea異白氨酸或 Mea蘇氨酸、或脯氨酸； Z是2-氨基異戊酸、白氨酸、N-Alk-2-氨基異戊酸、或N-Alk-白氨酸，其中Aik代表甲基，或甲基以乙基取代，視情況該乙基可由苯基、或含6員環之氮、硫、氧雜環基取代，或苯基取代，視情況該苯基可由素取代；且 Q是甲基白氨酸、T-羥基-甲基白氨酸、或甲基胺基丙酸，以及藥理上可接受之稀釋劑、賦形劑、或載劑。本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1250022 as B8 C8 __________ D8 六、申請專利範圍 2·根據申請專利範圍第！項之醫藥組合物，其中該非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素係選自由以下所構成群組：[r - #至基-甲基白氨酸]環孢素a ’ [甲基異白氨酸]4-環孢素A，[甲基2-氨基異戊酸]4-環孢素八，[甲基蘇氨酸]4-環孢素A，[甲基胺基丙酸]4_環孢素a，[甲基酪氨酸]4-環孢素A，[甲基酪氨酸（〇-P〇(〇H)2)]4-環孢素A，[脯氨酸[Mea異白氨酸]4-環孢素A，及[Me a蘇氨酸]4-環孢素A。 3·根據申請專利範圍第2項之醫藥組合物，其中該非免疫抑制性且可結合環親素之環孢素是[甲基異白氨酸]4-環孢素A或[7-#呈基-甲基白氨酸]4-環孢素A。 -2 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公A)