JP2810240B2 - サイトカイン調節剤およびサイトカインレベルの変化に関連する病状および状態における使用方法 - Google Patents

サイトカイン調節剤およびサイトカインレベルの変化に関連する病状および状態における使用方法

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Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本出願は、1995年６月７日に提出された米国特許出願
第08/484,262号の一部継続出願であり、米国特許出願第
08/484,262号は、1995年３月６日に提出された米国特許
出願第08/400,983号の一部継続出願である。これらの出
願のそれぞれは、全体で本明細書中に参考として援用さ
れている。
発明の分野 本発明は、一般にペプチド化学および分子病理学の分
野に関し、さらに詳細には、新規なサイトカイン調節剤
およびサイトカインにより調節される病理的過程および
病状の制御における新規なサイトカイン調節剤の使用に
関する。
背景情報 サイトカインは、環境的、機械的、および病理学的ス
トレスを含む多くの異なる種類の誘導刺激に応答して種
々の細胞により産生される、分泌された溶解性タンパク
質のクラスである。リンパ球、炎症細胞および造血細胞
は、細胞の増殖、分化およびエフェクター機能を制御す
ることによって免疫応答を調節する種々のサイトカイン
を分泌する。例えば、免疫応答の間でＴ細胞刺激に応答
する際に産生される調節サイトカインは、免疫抑制的ま
たは免疫刺激的であり得る。サイトカインレベルの変化
に関連する免疫応答および急性期の応答は、例えば、廃
用性体調偏移（disuse deconditioning）、移植、ガン
の処置、敗血症性ショックおよび他の細菌に関連する病
状に関連する器官損傷のような器官損傷、薬物有害作
用、酸化窒素に媒介される組織損傷、および糖尿病によ
って起こり得る。
サイトカインは、通常、組織に非常に低い濃度で存在
し、そしてその効果は、特定の細胞タイプの高親和性の
レセプターに結合することによって媒介される。種々の
サイトカイン（例えば、インターロイキン（IL）、イン
ターフェロン（IFN）、コロニー刺激因子（CSF）および
腫瘍壊死因子（TNF））が、免疫応答、炎症応答、修復
応答および急性期の応答の間で産生され、そしてこれら
は、これらの応答の種々の局面を制御する。このような
免疫応答、炎症応答、修復応答または急性期応答の誘導
に続いて、種々のサイトカインの濃度は異なる時点で増
加または減少し得る。例えば、サイトカインのレベルの
上昇は、廃用性体調偏移を引き起こす宇宙飛行、固定
化、骨髄損傷、および寝たきり（bed rest）のような種
々の状況に関連する。宇宙飛行の間で、例えば、TNF、I
L−６、およびIL−２のレベルが、被験体が最初に無重
量状態に曝されるときに上昇し、そして宇宙から戻ると
きに再び上昇する。
サイトカインレベルの変化はまた、異常な骨代謝、お
よび固定化、骨髄損傷、または長期間の寝たきりの間に
起こる迅速な脱灰化に関連する。同様に、サイトカイン
レベルは、慢性の状況の間（例えば、器官損傷への修復
および自己免疫反応、サイクロスポリンの移植被験体へ
の投与に関連する腎毒性、ガン化学療法の間）で、なら
びに肥満の個体あるいは糖尿病、敗血症性（エンドトキ
シン性）ショックまたは糸球体腎炎に罹った個体で変化
する。
TNF、CSF、インターフェロンおよびインターロイキン
を含むサイトカインは、宿主防御応答、細胞調節および
細胞分化を媒介する。例えば、これらのサイトカイン
は、被験体において発熱を誘導し得、Ｔ細胞、Ｂ細胞お
よびマクロファージの活性化を引き起こし得、そして他
のサイトカインのレベルに影響し得る。この他のサイト
カインは、カスケード効果を生じさせ、それにより、他
のサイトカインは第１のサイトカインの生物学的レベル
および作用を媒介する。
サイトカインは、免疫刺激作用または免疫抑制作用に
より免疫応答を調節し得る。例えば、IL−10は、TNF、I
L−１およびIL−６を含む多くの炎症性サイトカインの
活性化をブロックするが、IL−12のような抗炎症サイト
カインをアップレジュレートする。マイクロファージお
よび他の細胞タイプにより産生されるIL−10はまた、肥
満細胞および胸腺細胞の増殖を刺激し、そして単球およ
びマクロファージの種々の機能を阻害する。この単球お
よびマクロファージの阻害の結果として、Ｔ細胞の活性
もまた影響される。免疫系におけるIL−10の役割全貌
は、まだ理解され始めたばかりである。
サイトカインは、多数の生物学的活性を有し、１つ以
上の細胞タイプと相互作用する。従って、１つの特定の
サイトカインまたは細胞タイプを標的して処置の損傷性
副作用を防ぐことが不可能である。サイトカイン活性の
不必要なまたは制御されていない過剰抑制（over−supp
ression）または過剰刺激（over−stimulation）に起因
する生涯を防ぐためのより良いアプローチは、いずれの
サイトカインも除去または過剰発現することなく、免疫
応答に関与する関連または制御サイトカイン（単数また
は複数）の発現を調節することである。このような処置
は、病理的または進行中の免疫応答を生じないかまたは
悪化させない。このようにして、病理的免疫媒介作用
（例えば、免疫抑制または自己免疫反応）が防がれ得、
そして恒常性が維持され得る。
コルチコステロイド類はサイトカイン発現を調節する
ために使用され得る。しかし、これらは完全な免疫抑制
を引き起こし得、そして「消耗」症候群、糖尿病および
骨粗しょう症を誘導するというような他の好ましくない
副作用を有する。同様に、非ステロイド抗炎症薬（NSAI
D）（例えば、ケトロラク（Toradol ;Syntex）は、炎
症および疼痛を処置する際に有効である。しかし、NSAI
Dもまた、プロスタグランジン産生を阻害することによ
り、好ましくない副作用を引き起こす。プロスタグラン
ジン産生への阻害は、胃潰瘍、出血および腎不全を含む
潜在性重症合併症をもたらし得る。
上記のようにサイトカインの異常発現により引き起こ
される病状状態または正常な免疫媒介機能を損うのを防
ぐために、サイトカインレベルが正確に操作され、そし
て効率的に抑制され得るならば、有利である。従って、
被験体において、望ましくない副作用を引き起こさず
に、サイトカイン活性を調節し得る薬剤に対する必要が
存在する。さらに、サイトカインレベルの変化に関連す
る病状および状態の処置に使用され得る薬剤を同定する
必要が存在する。本発明はこれらの必要を満たし、その
上、関連の利点も提供する。
発明の要旨 本発明は、強力なサイトカイン調節剤である新規ペプ
チドに関する。本明細書中に開示するように、このよう
なサイトカイン調節剤は、一般構造X1−X2−His−
（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−X3、およびX4−X5−
（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−X3を有し、ここで、X1、X
2、X3、X4、およびX5はアミノ酸またはアミン酸アナロ
グであり得る。本発明はまた、構造Ac−His−（Ｄ）Phe
−Arg−｛（Ｄ）Trp（CH2）｝−（NAc）Gly−NH2を有す
るサイトカイン調節剤に関し、この構造は、還元された
（Ｄ）Trpアナログを含有する。
さらに、本発明は、薬学的に受容可能なキャリアおよ
びサイトカイン調節剤（単数または複数）を含有する薬
学的組成物に関する。このようなサイトカイン調節剤ま
たはその配合物の被験体への投与は、個体における種々
のサイトカインのレベルを変化させ得、これにより、調
節される特定のサイトカインに依存する免疫刺激または
免疫制御となる。
本発明はまた、被験体におけるサイトカイン活性の増
強により調節する方法、およびサイトカイン活性の変化
または異常により部分的に特徴付けられる状態、病状ま
たは障害を処置する方法を提供する。このような状態、
病状または障害は、廃用性体調偏移、酸化窒素およびサ
イトカインにより媒介される疾患、糖尿病、肥満症、自
己免疫疾患、敗血症性（エンドトキシン性）ショック、
糸球体腎炎、移植の間に起こる器官損傷、およびガン化
学療法の有害作用（例えば、腎毒性）を包含する。
図面の簡単な説明 図1aおよび1bは、サイトカイン調節剤がサイクロスポ
リン誘導腎毒性によって起こる糸球体濾過率の減少を有
効に抑制することを示す。
図２は、EX−２がマウス血漿中のIL−10レベルを上昇
させることを示す。
図3aおよび3bは、EX−２がヒト血漿中のIL−10レベル
を誘導することを示す。
図４は、EX−２で処置した肥満ラット（fa/fa）およ
び正常ラット（Fa/＋）の体重を示す。
発明の詳細な説明 本発明は、一般に、以下の構造を有する新規サイトカ
イン調節剤に関する： ここで X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり;R1は、Ｈ、COC
H3、C2H5、CH2Ph、COPh、COO−ｔ−ブチル、COOCH2Ph、
CH2CO−（ポリエチレングリコール）、またはＡであり;
R2はＨまたはCOCH3であり;R3は、１個〜６個の炭素原子
を有する直鎖または分枝アルキル基、あるいは３個〜６
個の炭素原子を有する環状アルキル基であり;R4は（C
H2）ｍ−CONH2、（CH2）ｍ−CONHR1、または（CH2）ｍ
−CONHAであり;R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3、NHCH2
Ph、またはＡであり；そしてR6は、ＨまたはR3であり；
そして、ここで「Ph」はC6H5であり；「ｍ」は、１、２
または３であり；「ｎ」は、０、１、２または３であ
り；そして「Ａ」は、以下の一般式を有する炭水化物で
ある： 本発明の１つの実施態様において、本ペプチドは、X1
およびX2について上記の可変物のいずれかを有し、そし
て特に、X3についてはOHを有する（X3はR5であり、ここ
でR5はOHである）。さらなる他の実施態様においては、
Ｙ、R1、R2、R3、R4、R5、およびR6は、上記可変物のい
ずれかであり得、そしてR3は、３個〜６個の炭素原子を
有する環状アルキル基である。
上述の式により包含される例示的なペプチドとして
は、Nle−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly
−NH2;Ac−Nle−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp
−Gly−NH2;およびAc−（シクロヘキシル）Gly−Gln−H
is−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly−NH2が挙げら
れ、これらの各々は、サイトカイン活性を調節し得る。
本発明はまた、以下の構造を有する新規サイトカイン
調節剤に関する： ここで、 X4は H,COCH3であるか、または存在せず； X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり;R1は、Ｈ、COC
H3、C2H5、CH2Ph、COPh、COO−ｔ−ブチル、COOCH2Ph、
CH2CO−（ポリエチレングリコール）、またはＡであり;
R2はＨまたはCOCH3であり;R4は（CH2）ｍ−CONH2、（CH
2）ｍ−CONHR1、または（CH2）ｍ−CONHAであり;R5は、
OH、OR3、NH2、SH、NHCH3、NHCH2Ph、またはＡであり；
そしてR6は、ＨまたはR3であり；そして、ここで「Ph」
はC6H5であり；「ｍ」は、１、２または３であり；
「ｎ」は、０、１、２または３であり；そして「Ａ」
は、以下の一般式を有する炭水化物である： 本発明の１つの実施態様において、本ペプチドは、３
個〜５個のアミノ酸残基の短いアナログであり、X4およ
びX5については上記の可変物のいずれかを有し、そして
特に、X3についてはOHを有する（X3はR5であり、ここで
R5はOHである）。さらなる他の実施態様においては、X4
は存在せず、X5はＨまたはCOCH3であり、そしてX3はR5
であり、サイトカイン調節剤は、（Ｄ）Phe−Arg−
（Ｄ）Trpのトリペプチドである。好ましいペプチドと
しては、His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly−NH2;A
c−His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly−NH2;His−
（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−OH;Ac−（Ｄ）Phe−Arg−
Trp−NH2;およびシクロ（His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）
Trp）が挙げられ、これらはサイトカイン活性を調節し
得る。
本明細書で使用される用語「調節する（regulate）」
または「調節の」は、増強（enhancing）、限定（limit
ing）、制限（restricting）、抑制（restraing）、調
節（modulating）、または節制（moderating）すること
により制御することを意味する。このような調節には、
多面発現性効果、重複効果、相乗効果、または拮抗効果
が挙げられ、このような効果はサイトカインのような生
物学的因子の活性により生じる。生物学的因子は、カス
ケードまたはバイオフィードバック機構を介して直接ま
たは間接的に多様な生物学的機能に影響し得る。
本明細書で使用される用語「サイトカイン調節剤」
は、サイトカインの生物学的活性を、増強、限定、制
限、抑制、調節または節制によりサイトカインの活性を
制御する因子を意味する。しかし、サイトカイン調節剤
は、一般的にサイトカイン活性を調節し得るが、どのよ
うにサイトカイン調節剤が作用して、変化したまたは異
常なサイトカインの活性により特徴付けられる状態をも
たらすかという特定の作用機構は提案されないことが認
識されるべきである。
サイトカインは当該分野において周知であり、これに
は腫瘍壊死因子（TNF）、コロニー刺激因子（CSF）、イ
ンターフェロン（INF）、インターロイキン（IL−１、I
L−２、IL−３、IL−４、IL−５、IL−６、IL−７、IL
−８、IL−９、IL−10、IL−11、IL−12、IL−13、IL−
14、およびIL−15）、トランスフォーミング成長因子
（TGF）、オンコスタチンＭ（OSM）、白血病抑制因子
（LIF）、血小板活性化因子（PAF）、および宿主防御応
答、細胞調節および細胞分化を媒介する他の可溶性免疫
調節ペプチド（例えば、Kuby、Immunology第２版（W.H.
Freeman and Co.1994）を参照のこと；第13章を参照の
こと、これは本明細書中に参考として援用される）が挙
げられるが、これらに限定されない。
本発明のサイトカイン調節剤は、種々の状態（例え
ば、病状、免疫応答、および炎症応答が挙げられる）で
生じる１つ以上のサイトカインの異常なまたは変化した
発現を調節し得る。このような状態は、変化したまたは
異常なサイトカイン活性により部分的に特徴付けられ、
それゆえ、１つ以上のサイトカイン調節剤による調節に
影響されるために、本発明の目的のためにともに考慮さ
れる。
本明細書で使用される用語「により特徴付けられる」
は、少なくとも部分的な寄与または影響を意味する。サ
イトカインの寄与は、状態の単独の、根本的な因子、ま
たは主要な因子でさえあり得るが、そうである必要はな
い。例えば、感染がサイトカインレベルを変え、それゆ
え感染はサイトカイン活性により特徴付けられる状態で
あるが、サイトカイン活性は感染状態の一部分であるに
すぎないことが当該分野で十分に理解される。
本明細書で使用される用語「変化したまたは異常なサ
イトカイン活性により特徴付けられる状態」は、全ての
サイトカインに調節（regulated）または調節（modurat
ed）される病状および障害を包含し、これには、障害に
関連する免疫プロセス、炎症プロセス、および治癒プロ
セスが挙げられる。当業者は、健康な個体において見出
されると予想されるサイトカインの正常なレベルに比べ
て、特定のサイトカインの増加または減少したレベルま
たは活性を検出することにより、このような状態を認識
し得る。このような正常なレベルを測定するための方法
は、当該分野において周知である。
変化したまたは異常なサイトカイン活性により特徴付
けられる状態には、廃用性体調偏移、器官移植に応答し
て生じるような器官損傷；ガンの化学治療に関連する有
害な反応；肥満；フリーラジカルおよび一酸化窒素の作
用により媒介される糖尿病およびアテローム硬化症のよ
うな疾患；細菌エンドトキシン敗血症および関連するシ
ョック；痛み；悪液質；成人呼吸窮迫症候群；および自
己免疫または他の病原免疫性（patho−immunogenic）疾
患または反応（例えば、アレルギー反応またはアナフィ
ラキシー、関節炎、炎症性腸疾患、糸球体腎炎、全身性
エリテマトーデス）、移植アテローム硬化症、およびシ
ャーガス病のような寄生体媒介性免疫機能不全が挙げら
れるが、これらに限定されない。
サイトカイン調節剤は、例えば、本明細書中で記載さ
れるようなアミノ酸またはアミノ酸アナログを含むペプ
チドであり得る。上記で提供した例に加えて、他のペプ
チド性サイトカイン調節剤の代表的な例には以下が挙げ
られる： ここで、｛（Ｄ）Trp（CH2）｝は、（Ｄ）Trpのアナ
ログであり、ここでH2は、α−カルボニル酸素を置換
し、そして（NAc）Glyは、Ｎ−アセチル部分を有するグ
リシン誘導体である。
上記のようなペプチド性サイトカイン調節剤が、アミ
ノ酸配列（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp、または（Ｄ）Trp
のアナログを有するコア構造、より好ましくは、コアア
ミノ酸配列、His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp、または
（Ｄ）Trpのアナログにより、部分的に特徴付けられ
る。アミノ酸は、それらの一般的に公知の３文字コード
により示され、および（Ｄ）は、天然に存在するＬ−ア
ミノ酸と対照的に、「Ｄ」配置を有するアミノ酸を示
す。特に配置を示さない場合、当業者はアミノ酸は
（Ｌ）−アミノ酸であることを理解する。上記で例示さ
れたペプチドにおいて、「Nle」は、ノルロイシンにつ
いての３文字モードであり、そして「Ph」は、「フェニ
ル」基（C6H5）を示す。
上記のペプチドのようなサイトカイン調節剤は、Merr
ifield（J.Am.Chem.Soc.,85:2149（1964）、これは本明
細書に参考として援用される）の固相ペプチド合成法の
改変を用いて合成されたか、または当該分野において周
知の標準的な溶液法（例えば、Bodanzsky,M.、Principl
es of peptide Synthesis第２改訂版（Springer−Verla
g,1988および1993）、これは本明細書に参考として援用
される、を参照のこと）を用いて合成され得る。Merrif
ieldの方法により調製されるペプチドは、Applied Bios
ystems 431A−01 Peptide Synthesizer（Mountain Vie
w,CA）のような自動化ペプチド合成装置を用いるか、ま
たはHoughten（Proc.Natl.Acad.Sci.,USA 82:5131（198
5）、これは本明細書に参考として援用される）により
記載される手作業によるペプチド合成技術を用いて合成
され得る。
ペプチドは、アミノ酸またはアミノ酸アナログを用い
て合成され、その活性基を、例えば、ｔ−ブチルジカー
ボネート（ｔ−BOC）基、またはフルオレニルメトキシ
カルボニル（FMOC）基を用いて必要に応じて保護した。
アミノ酸およびアミノ酸アナログは、商業的に購入し得
る（Sigma Chemical Co.;Advanced Chemtec）か、また
は当該分野で公知の方法を用いて合成され得る。固相法
を用いて合成されたペプチドは、樹脂に付着させ得る。
樹脂には、４−メチルベンズヒドリルアミン（MBHA）、
４−（オキシメチル−フェニルアセトアミドメチル、お
よび４−（ヒドロキシメチル）フェノキシメチル−コポ
リ（スチレン−１％ジビニルベンゼン）（Wang樹脂）
（これらのすべては市販されている）、またはｐ−ニト
ロベンゾフェノンオキシムポリマー（オキシム樹脂）
（De GradoおよびKaiser、J.Org.Chem.47:3258（1982）
（これは本明細書に参考として援用される）により記載
されるように合成され得る）が挙げられる。
当業者には、ペプチドに取り込まれるアミノ酸または
アミノ酸のアナログの選択が、サイトカイン調節剤に必
要とされる特異的な物理的、化学的または生物学的特徴
に、部分的に依存することは公知である。このような特
徴は、サイトカイン調節剤が投与される経路により、ま
たはサイトカイン調節剤の活性が導かれる被験体におけ
る位置によって、部分的に決定される。
ペプチドにおける反応基の選択的な修飾によってもま
た、サイトカイン調節剤に対するさらに所望の特徴を与
え得る。ペプチドは、樹脂に付着したままで操作され、
アセチル化されたペプチドのようなＮ末端が修飾された
化合物が得られ得るか、あるいはフッ化水素または等価
な切断試薬を用いて樹脂から除去され、次いで修飾され
得る。Ｃ末端カルボキシ基を含む合成化合物（Wang樹
脂）は、樹脂からの切断後に修飾され得るか、または、
場合によっては、液相合成の前に修飾され得る。ペプチ
ドのＮ末端またはＣ末端を修飾するための方法は、当該
分野で周知であり、例えば、Ｎ末端のアセチル化の方
法、またはＣ末端のアミド化の方法が挙げられる。同様
に、アミノ酸またはアミノ酸アナログの側鎖を修飾する
方法は、ペプチド合成の当業者に周知である。ペプチド
上に存在する反応基になされる改変の選択は、当業者が
サイトカイン調節剤において必要とする特徴により決定
される。
特定の環状ペプチドはまた、効果的なサイトカイン調
節剤であり得る。環状ペプチドは、例えばペプチドのＮ
末端のアミノ基とＣ末端のカルボキシル基との間の共有
結合の形成を誘導することにより得られ得る。例えば、
ペプチドシクロ（His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp）、
これはHisと（Ｄ）Trpとの間の共有結合の形成の誘導に
より生成され得、サイトカイン調節活性を有し得る。あ
るいは、環状ペプチドは、末端の反応基と反応性のアミ
ノ酸側鎖との間で、または２つの反応性アミノ酸側鎖の
間で共有結合を形成することにより得られ得る。当業者
には、特定の環状ペプチドの選択が、ペプチド上に存在
する反応基ならびにペプチドの所望の特徴により決定さ
れることが公知である。例えば、環状ペプチドは、イン
ビボで安定性が増加し、溶解性が増加し、免疫原性が減
少するか、またはクリアランスが減少するサイトカイン
調節剤を提供し得る。
新しく合成されたペプチドは、下記（実施例Ｉを参照
のこと）に詳細に記載される逆相高速液体クロマトグラ
フィー（RP−HPLC）か、またはペプチドの大きさまたは
電荷に基づいた他の分離法のような方法を用いて精製さ
れ得る。さらに、精製ペプチドは、これらの方法または
他の周知の方法（例えば、アミノ酸分析、および質量分
光分析）を用いて特徴付けられ得る。これらの方法は、
下記に詳細に記載されている（実施例Ｉを参照のこ
と）。
本発明はまた、１つまたは複数のサイトカイン調節剤
および薬学的に受容可能なキャリアを含有する薬学的組
成物に関連する。薬学的に受容可能なキャリアは当該分
野で公知であり、これには生理学的に緩衝化された生理
食塩水、または他の緩衝液のような水性溶液、あるいは
溶媒、またはビヒクル（例えば、グリコール、グリセロ
ール、オリーブ油のような油、または注入可能な有機エ
ステル）が挙げられる。
薬学的に受容可能なキャリアは、例えば、サイトカイ
ン調整剤を安定化させるか、またはこの薬剤の吸収を増
加させるために作用する生理学的に受容可能な化合物を
含み得る。このような生理学的に受容可能な化合物に
は、例えば、炭水化物（例えば、グルコース、スクロー
ス、またはデキストラン）、抗酸化物（例えば、アスコ
ルビン酸、またはグルタチオン）、キレート剤、低分子
量タンパク質、または他の安定剤、あるいは賦形剤が挙
げられる。当業者には、生理学的に受容可能な化合物を
含む薬学的に受容可能なキャリアの選択が、例えば、サ
イトカイン調節剤の投与経路、および特定のサイトカイ
ン調節剤の特定の生理−化学的特徴に依存していること
は公知である。
上記のようなサイトカイン調節剤、またはサイトカイ
ン調節剤を含む薬学的組成物は、被験体における病理学
的に改変された（減少および上昇を含む）サイトカイン
活性を調節するために、被験体に投与され得る。例え
ば、ペプチドまたは組成物は、以下について処置するた
めに被験体に投与され得る：外傷的傷害、細菌性敗血
症、およびエンドトキシンショック、炎症、痛み、悪液
質、成人呼吸窮迫症候群、移植アテローム硬化症、病原
免疫原性疾患（例えば、関節炎、炎症性腸疾患、全身性
エリテマトーデス、および他の自己免疫不全）、これら
のそれぞれは、病理学的に上昇した炎症性サイトカイン
活性により特徴付けられる。
本明細書で使用される用語「病理学的に上昇した」
は、サイトカイン活性が正常な集団のこのような被験体
において予想される、および病理学的応答に関連する活
性の範囲よりも上昇したことをいう。例えば、特定の組
織に存在するIL−１βのようなIL−１活性の正常な範囲
は、集団の多くの被験体のサンプリングにより測定され
得る。サイトカインで誘導される病理学的効果により特
徴付けられる病状を有する被験体は、被験体中のサイト
カイン活性が正常な範囲よりも病理学的に上昇すること
を測定することにより容易に同定される。それは、そし
て発熱のような病理学的応答を生じる。
さらに、下記により詳細に記載されるように、ペプチ
ドまたは薬学的組成物はまた、肥満、廃用性体調偏移、
および一般化窒素により媒介される疾患（例えば、糖尿
病および糸球体腎炎）、移植アテローム硬化症、複合性
硬化症を処置するために用いられ得、ならびにガン化学
療法剤のネガティブな効果を減少させるために用いられ
得、そして損傷に対して器官を保護するために用いられ
得る。この損傷は、化学療法剤、抗菌剤（アンホテリチ
ン）、抗菌性剤（アミノグリコシド抗生物質）、および
抗ウイルス剤（アジドチミジン）により誘導され、これ
らの全ては病理学的に変化したレベルのサイトカインに
関連する。
廃用性体調偏移 サイトカインレベルの変化が、廃用性体調偏移（例え
ば、宇宙飛行、固定化、脊髄損傷、寝たきり、および外
傷）を導く種々の状態と関連する。廃用性体調偏移をも
たらす他の状態の例は、例えば、模擬無重力、キャステ
ィング、および脱神経を包含する。従って、「廃用性体
調偏移」とは、上記の条件または当該分野において公知
である類似の条件によって引き起こされる状態をいう。
廃用性体調偏移は、身体の使用の抑制から生じる身体の
体調偏移およびその影響であり、そしてサイトカインレ
ベルの変化を特徴とする。
例えば、宇宙飛行は、多くの免疫応答およびサイトカ
インネットワークを含む免疫応答の調節成分を変える。
宇宙飛行ならびに宇宙飛行のモデルシステムは、インタ
ーロイキン類およびTNFを含む種々のサイトカインの産
生および活性化に影響を及ぼす。IL−６およびIL−２の
レベルは、宇宙飛行の初日に上昇し、そして宇宙飛行か
らの帰還後に再びに上昇する。
サイトカインはまた、破骨細胞の機能を調節し、そし
てIL−１およびTNFは、固定化、寝たきり、および骨髄
損傷によりもたらされる急速な脱灰または骨無機質密度
の損失と関係している。損傷後のサイトカイン発現と逆
行輸送の増大との相関は、サイトカインが末梢神経の損
傷に役割を果たすことを示唆する。寝たきりは、ステロ
イドの関節内投与と組み合わされる場合、サイトカイン
に媒介される急性期の応答（acute phase response）に
特に急速な全身作用を生じる。
本発明のサイトカイン調節剤またはこのペプチドを含
む組成物は、サイトカインレベルの変化と関連する廃用
性体調偏移のネガティブな効果を低減または改善するこ
とにより廃用性体調偏移を処置するために用いられ得
る。ネガティブな効果は、例えば、筋重量、骨密度、運
動能力、および酸素消費量の損失、ならびに酸化酵素お
よび抗酸化酵素（例えば、筋組織におけるヒラメ筋クエ
ン酸シンターゼ）のレベルの減少を包含する。
器官保護 サイトカインはまた、器官の損傷および器官保護に重
要な役割を果たす。例えば、サイトカインは、器官移
植、特に移植された器官の拒絶反応、移植アテローム硬
化症、虚血−再潅流、サイクロスポリン誘導腎毒症、心
筋梗塞、および脳卒中のような事象および状態に著しく
影響する。
器官移植に関しては、サイトカイン、特に腫瘍壊死因
子（TNF）が同種異系移植拒絶反応の重要なメディエー
ターである。TNFの血清レベルの上昇は、腎臓、肝臓、
および心臓が同種異系移植片拒絶反応を被る患者に生じ
る。TNFの存在のさらなる証拠が、ラットの心臓および
腎臓の同種異系移植ならびにヒトの腎臓および肝臓移植
を拒絶することにおいて示されている。腎移植患者にお
ける急性の拒絶反応のエピソードは、血清IL−６レベル
の上昇を伴う。このようなエピソードの間のグルココル
チコイドの投与が、迅速で顕著なIL−６レベルの低下お
よび拒絶反応のエピソードの重篤度の軽減をもたらす
と、Rayら，J.Am.Soc.Nephr.２（12）:5214−5221（199
2）により報告された。本発明のサイトカイン調節剤
は、このような拒絶反応のエピソードおよびそれにより
生じる損傷の重篤度を軽減するのに同様に有用であり得
る。
免疫抑制剤（例えば、サイクロスポリン）の移植被験
体への投与もまた、サイトカイン活性に影響し、腎臓の
損傷をもたらすサイクロスポリン誘導腎毒性を生じる。
サイトカインを調節する薬剤（例えば、本発明の薬剤）
は、サイクロスポリン誘導腎毒性を減少するのに有効で
あり得る。
さらに、本発明のサイトカイン調節剤は、虚血−再潅
流に関連する器官損傷（糸球体濾過速度の減少および腎
臓における血管抵抗の増大のような損傷を含む）に対し
て保護し得る。虚血−再潅流損傷はまた、サイトカイン
の上昇に関連している。IL−１およびTNFは、心筋虚血
を媒介し、そしてIL−１レベルの増大は骨格筋の虚血の
再潅流期の間に生じ得る。TNF放出の増大の後、肝臓へ
の中程度および重度の虚血損傷の両方が続く。
従って、本発明は、被験体にサイトカイン調節剤を投
与することにより、器官損傷に対して被験体の器官を保
護する方法を提供する。保護される器官損傷は、器官移
植、免疫抑制剤（例えば、サイクロスポリン）の投与、
虚血−再潅流の結果の損傷、心筋梗塞、脳卒中などのよ
うな状態または事象の結果であり得る。
本明細書中で用いたように、「損傷」は、器官全体へ
の損傷（例えば、器官の機能不全）または器官の組織へ
の損傷を包含する。多くの例では、このような損傷は、
サイトカインレベルの上昇のみならずフリーラジカルの
増大を伴う。例えば、虚血によりもたらされる活性化白
血球細胞は酸素ラジカルを放出し、そしてアグレッシブ
（aggressive）メディエーター（例えば、白血球に対し
て走化性であるサイトカインおよびPAF）を送達する。
これにより、酸素ラジカルおよびメディエーター（例え
ば、サイトカイン）が循環し、虚血後損傷の増大の原因
となる。
フリーラジカルまたはサイトカインを誘導し得る損傷
のタイプは、炎症、アテローム硬化症、血管透過性の増
大、繊維症、および壊死を包含するが、これに限定され
ない。これらおよび他のタイプの損傷は、当該分野で周
知の方法により組織形態学的に評価され得る。損傷はま
た、しばしば、特定の器官または組織に特異的である傾
向があり、そして当該分野で周知の技術により日常的に
測定され得る生理学的および生化学的パラメーターの変
化により反映される器官機能不全により証明され得る。
例えば、腎臓損傷を示唆する腎機能不全は、糸球体濾過
速度および腎血流量の減少、ならびに腎血管抵抗の増大
を導き得る。組織および器官の損傷の初期マーカーとし
て使用され得る生化学的パラメーターの例は、酸化窒素
またはマロンジアルデヒドのレベルの上昇を包含する。
マロンジアルデヒドは、脂質の過酸化の副生成物であ
り、従って、フリーラジカルのレベルを示唆する。ある
いは、またそれに加えて、細胞死のマーカーである乳酸
デヒドロゲナーゼのような酵素レベルの上昇が評価され
得る。
本発明のサイトカイン調節剤の投与により損傷に対し
て保護される器官は、心臓、腎臓、肝臓、肺、脳、筋
肉、皮膚、または骨を包含するが、これに限定されな
い。本発明により保護され得る器官内の組織の例は、皮
膚の上皮である。移植され得る器官、または移植被験体
への免疫抑制剤の投与により生じるネガティブな副作用
に関連する器官、ならびに虚血−再潅流、梗塞、脳卒
中、または細胞損傷または細胞死を導き得る他の特定の
状態または事象を受ける器官もまた包含する。１より多
い器官が同時に保護され得る。
ガン化学療法 本発明のサイトカイン調節剤またはこの薬剤を含む組
成物はまた、腎毒効果またはガン化学療法剤の他のネガ
ティブな効果を軽減するためにガン化学療法に使用され
得る。
ガン化学療法剤（例えば、シスプラチン、Taxol 、
タキソール（登録商標）、およびAdriamycin （ドキソ
ルビシン）は、サイトカインの産生を誘導および増強す
る。微小管を安定化する抗新生物剤であるTaxol は、T
NFおよびIL−１の発現を誘導し、そしてマクロファージ
におけるTNFの産生を増強する。IL−６およびTNFの濃度
の上昇は、シスプラチンを受けている患者に生じ、サイ
トカイン濃度は腎臓毒性または肝臓毒性を経験する患者
で特に上昇する。サイトカイン産生はまた、ガン患者に
おいて化学過温症（chemo−hyperthermia）の間に増大
する。シスプラチンを含む過温症誘導性加熱溶液（hype
rthermia−inducing heating solution）を投与する場
合に測定されるTNFおよびIL−６レベルは、処置開始後3
0分以内に生じるIL−６の劇的な増加を示した。TNF値
は、わずかに上昇するのみであった。
実施例に示すように、ガン化学療法における本発明の
サイトカイン調節剤の使用は、ガン化学療法剤の腎毒効
果を軽減し得る。さらに、ペプチドは、化学療法薬物の
他のネガティブな副作用（悪心、嘔吐、粘膜炎症、食欲
不振、疲労、および他の器官機能不全を包含するがこれ
に限定されない）を軽減するためにガン化学療法を受け
る被験体に投与され得る。
酸化窒素およびサイトカインにより媒介される、糖尿病
および糸球体腎炎を含む疾患 サイトカインおよび酸化窒素（NO）は両方とも、例え
ば、糖尿病および糸球体腎炎を含む種々の疾患状態の重
要なメディエーターである。サイトカインおよびNOは、
初期のインスリン依存性糖尿病（insulin−dependent d
iabetes mellitus）におけるβ細胞の損傷を調節する。
IL−１、γ−インターフェロン、およびTNFは、小島のN
Oを誘導する。NOの産生と平行して、IL−１、γ−イン
ターフェロン、およびTNFは、小島機能を損ない、グル
コースレベルを低下させ、そしてグルコース誘導インス
リン放出を減少させる。サイトカインにより生ずる小島
細胞への有害な効果のほとんどは、NO産生をブロックす
ることにより妨げられている。単離されたヒト小島が、
単離された齧歯類の小島よりもサイトカインおよびNOの
抑制効果に対してより耐性であることを示すいくつかの
研究であるが、サイトカインはNO生成へそれらの効果に
関係なくヒト小島機能を抑制し得る。
サイトカインおよびNOはまた、糸球体腎炎によりもた
らされる傷害の程度に影響する。TNFおよびIL−１は、
腎炎における中の糸球体の傷害の重篤度を増大し得、従
って、糸球体の傷害の調節において臨床上重要であり得
る。Karkerら，Clin.Expt.Immunol.90（２）:312−318
（1992）は、サイトカインを抑制する薬剤がアルブミン
レベルの上昇および腎糸球体腎炎における組織損傷を減
少するに効果的であることを報告している。他の研究
は、誘導性酸化窒素シンターゼ（iNOS）のインビボの誘
導が免疫複合性糸球体腎炎において生じることを示して
いる（Jansenら，Kid.Internat.45（４）:1215−1219
（1994））。
本発明のサイトカイン調節剤は、酸化窒素およびサイ
トカインにより媒介される疾患（例えば、糖尿病および
糸球体腎炎）を有する被験体を処置するために用いられ
得る。本明細書中で用いるように、用語「処置」は、NO
およびサイトカインにより媒介される特定の疾患状態に
関係する１またはそれ以上の徴候または状態を軽減また
は緩和することを含む意味を包含する。例えば、糖尿病
の処置は、糖尿病患者のグルコールレベルを減少するこ
とにより明示され得る。
体重に対するサイトカイン調節剤の効果 サイトカイン調節剤は、被験体の体重を減少させるの
に有用である。特に、この薬剤は、肥満被験体の体重を
減少させるのに有用である。肥満症と非インスリン依存
性糖尿病（NIDDM）との間の関連は、当該分野で周知で
ある（HotamisligilおよびSpiegelman,Diabetes 43:127
1−1278（1994a）を参照のこと）。TNF−α発現の上昇
が、肥満個体の脂肪組織において検出されており、そし
てこれらの個体におけるNIDDMの発症に役割りを有する
ことが示唆されている（Hotamisligilら，J.Clin.Inves
t.95:2409−2415（1995））。しかし、TNFレセプターに
結合する抗体を用いてTNF活性を中和する努力は、ラッ
トの肥満症／糖尿病モデルであるZucker fa/faラットモ
デルにおいて試験した場合、有意な体重の減少を示さな
かった（Hotamisligilら，J.Clin.Invest.94:1543−154
9（1994b））。
驚くべきことに、サイトカイン調節剤EX−２の正常ラ
ットまたは肥満ラットへの投与は、投与した用量に依存
して体重増加速度の有意な減少、または体重の有意な減
少をもたらした（実施例XXを参照のこと）。本明細書中
で用いるように、用語「体重の減少」は、その期間にお
いて期待される正常な体重増加と比較して、体重の実際
の減少またはある時間にわたる体重増加速度の減少を意
味するために、広範に使用される。実施例XXに示すよう
に、EX−２はまた、小さいが有意な、正常（非肥満）ラ
ットの体重の減少を生じた。これらの結果は、サイトカ
イン調節剤が体重の増加速度の減少および体重の減少を
生じ得ることを示す。
EX−２処置ラットにおいて観察される体重の減少は、
安静時酸素消費量の増大により決定される代謝速度の増
加と相関した。これらの結果は、サイトカイン調節剤が
また、被験体の安静時酸素摂取量を増大させるために有
用であることを示す。上で議論したように、サイトカイ
ン調節剤はまた、例えば、廃用性体調偏移により生じる
最大酸素消費量の減少を弱め得る。被験体における最大
酸素消費量を増大させる能力は、例えば、鬱血性心不全
または酸素摂取量の欠乏（例えば、体調偏移の間に生じ
る酸素消費量の減少）により特徴付けられる他の状態を
被る被験体に有意な臨床的利点を提供し得る（実施例XI
IIを参照のこと）。さらに、廃用性体調偏移の結果は、
少なくとも約２週間のサイトカイン調節剤での反復処置
が、被験体におけるポジティブな適応性の変化を生じ
得、そして酸素消費能および運動能力の増大をもたらす
ことを示す。従って、サイトカイン調節剤は、被験体内
における酸素消費量を増大するためのさらなる使用を見
出す。本明細書で用いるように、用語「酸素消費量の増
大」または「酸素摂取量の増大」は、被験体による安静
時酸素摂取量または最大酸素摂取量の正常なベースライ
ンレベルより上の増大、あるいは安静時酸素消費量また
は最大酸素消費量の予期される損失の減少を意味するた
めに広範に用いられる。
ヒトにおけるガン化学療法により媒介されるネガティブ
な副作用の処置 サイトカイン調節剤は、ガン治療剤のネガティブな副
作用を改善または軽減するために用いられ得る。サイト
カイン調節剤は、ガンの処置法の間にガン治療剤と同時
に投与され得るか、または予防法において、例えば、Ta
xol （これは、乳ガンの再発を減少させるために投与
される）と同時に投与され得る。
実施例XIXは、ガン化学療法剤（例えば、サイトカイ
ンの産生を誘導および増強する、シスプラチン、Taxol
およびAdriamycin ）に関連する有害な副作用を改善
するためのサイトカイン調節剤EX−２の使用を開示す
る。
EX−２は、ガン化学療法またはガン化学予防法を受け
ている、または受けようとする患者への静脈内注入によ
り投与され得る。例えば、シスプラチン、Taxol 、Adr
iamycin 、あるいは他の化学療法処置または放射線医
学処置が、化学療法または放射線療法により生じる有害
な副作用を軽減または阻害するために、サイトカイン調
節剤と同時に投与され得る。
哺乳動物におけるサイトカインレベルの上昇 本発明のサイトカイン調節剤、またはこの薬剤を含む
組成物はまた、１つまたはそれより多いサイトカインの
生理学的レベルを上昇させるために用いられ得る。例え
ば、特定の状態は、サイトカインのレベルまたは活性を
減少し得、免疫応答または免疫系の全てまたは一部を阻
害し得る。薬理学的に有効な用量でのサイトカイン調節
剤の投与は、サイトカインのレベルまたは活性を増強し
得、その結果免疫抑制のレベルを低下させ得る。
サイトカイン調節剤は、哺乳動物（例えば、ヒト）に
おけるIL−10のレベルを上昇し得る（図２および図３を
参照のこと）。IL−10は、いくつかの炎症性サイトカイ
ン（TNF、IL−１およびIL−６を含む）の活性化をブロ
ックし得、一方IL−12のようなサイトカインをアップレ
ギュレートし得る。IL−10はまた、肥満細胞および胸腺
細胞の増殖を刺激する。IL−10は、いくつかの単球およ
びマクロファージの機能を阻害し、この機能は、例え
ば、クラスII MHC発現;IL−１、IL−６、IL−８、CSF、
およびTNFの合成；および殺菌活性を低下させることに
よるＴ細胞への抗原提示を含む。阻害される殺菌活性
は、窒素酸化物および殺菌性代謝物の産生を抑制するこ
とを包含する。単球およびマクロファージのIL−10媒介
阻害の結果、いくつかのタイプのヘルパーＴ細胞の活性
が阻害される。特に、細胞媒介機能の原因となるTH1細
胞（例えば、遅延型過敏性細胞）および細胞傷害性Ｔ細
胞が阻害される。さらにTH12細胞阻害の結果、TH2細胞
（特に、Ｂ細胞の活性、細菌および駆虫剤耐性、ならび
にアレルギー反応を増大するＴ細胞のサブセット）の活
性が増大される。本明細書中に開示するように、サイト
カイン調節剤の投与は、哺乳動物におけるIL−10の血漿
レベルを上昇させ得（実施例XVIIおよびXVIIIならびに
図２および図３を参照のこと）、従って、例えば、被験
体における免疫応答性を調節するために有用であり得
る。
サイトカイン調節剤またはこのペプチドを含む薬学的
組成物は、上記の任意の病状および状態を処置するため
に用いられ得る。当業者には、サイトカイン調節剤を含
む夜学的組成物が、上昇したサイトカイン活性を有する
被験体に種々の経路により投与され得ることが公知であ
り、これらの経路には、例えば、経口投与、膣内投与、
直腸投与、あるいは、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投
与、眼窩内投与、包内投与、腹腔内投与、槽内投与、ま
たは例えば、皮膚パッチまたは経皮イオン導入法を用い
る受動性または促進された経皮吸収によるような非経口
投与が含まれる。さらに、この組成物は、注入、挿管
法、経口投与、または局所投与により投与され得る。こ
の後者は、例えば、軟膏または粉末の直接塗布により受
動性であり得るか、または例えば鼻用スプレーまたは吸
入を用いる能動性であり得る。サイトカイン調節剤はま
た、局所スプレーとして投与され得る。この場合、組成
物の１成分は適切なプロペラント（propellant）であ
る。薬学的組成物はまた、所望により、リポソーム、マ
イクロフェア、または他のポリマーマトリックスに組み
込まれ得る（Gregoriadis,Liposome Technology，第１
巻（CRC Press,Boca Raton,FL 1984）、これは、本明細
書中に参考として援用されている）。例えば、リン脂質
または他の脂質からなるリポソームは、製造および投与
が比較的簡便な、非毒性の生理学的に受容可能な、そし
て代謝可能なキャリアである。
サイトカインは、局所的に（例えば、局在感染部位
で）発現され得るか、または、例えば、廃用性体調偏移
または免疫応答におけるように全身的に発現され得る。
サイトカイン発現は、被験体内の発熱（熱）および痛覚
過敏（痛みに対する極度の感受性）、ならびに被験体内
で炎症応答を生成またはさらに寄与するマクロファージ
および単球の活性化を誘導し得る。サイトカイン発現が
局所的または全身的であり得るために、当業者は、被験
体内のサイトカインの供給源および分布に基づいてサイ
トカイン調節剤の投与の特定の経路および方法を選択す
る。例えば、全身性の状態（例えば、廃用性体調偏移）
を被る被験体において、サイトカイン調節剤を含む薬学
的組成物は、静脈内投与、経口投与、またはサイトカイ
ン調節剤を全身に分布させる別の方法により投与され得
る。しかし、局在化したサイトカイン発現により生じる
病状（例えば、急性呼吸窮迫症候群）を患う被験体にお
いて、サイトカイン調節剤は、適切な薬学的に受容可能
なキャリアに懸濁または溶解され得、そして例えは鼻用
スプレーを用いて肺に直接投与され得る。
サイトカインの生物学的活性を調節するために、サイ
トカイン調節剤は、有効用量で投与されなければならな
い。有効用量は、１注入あたり約0.0001〜0.5mg/kg体重
であり、または、別の様式の投与による有効用量は、約
0.0001〜100mg/kg体重である。全有効用量は、ボーラス
としてまたは比較的短時間にわたる注入によるいずれか
の単回用量として被験体に投与され得るか、あるいは多
回用量がより長期にわたって投与される分割処置プロト
コルを用いて投与され得る。当業者には、被験体内にお
いて有効用量を得るために必要なサイトカイン調節剤の
濃度が、被験体の年齢および一般的健康状態、ならびに
投与経路および投与される処置数を含む多くの因子に依
存することが公知である。これらの因子を考慮して、当
業者は、サイトカイン活性を効果的に調節するための有
効量を得るために特定の用量を調整する。
サイトカインにより媒介される有害な生物学的効果を
防止または最少にするまたは排除することにおけるサイ
トカイン調節剤およびサイトカイン調節剤の有効性の例
を、以下に提供し、そして表Ｉ〜Ｖにまとめる。以下に
記載のように、サイトカイン調節剤（例えば、実施例II
に記載のペプチド）は、マウスにおけるサイトカインの
発現を効果的に調節し得（実施例IIIおよびIV）、そし
て当該分野においてヒトにおける効能の予測物として認
識されるマウス、ラット、およびウサギのモデル系を用
いて示されるように、サイトカインに媒介される痛み、
腫脹、熱の軽減、および致死率の減少を提供し得る（実
施例Ｖ〜XII）。
本明細書中に記載の化合物は、炎症、痛み、悪液質、
および病原免疫原性疾患（例えば、関節炎、炎症性腸疾
患、全身性エリテマトーデス、および他の自己免疫機能
不全）のような状態（これらは、サイトカイン活性の変
化により特徴付けられる）の処置のための薬物として用
いられ得る。さらに、これらの実施例は、本発明のサイ
トカイン調節剤が、廃用性体調偏移のネガティブな局面
の緩和（実施例XIII）、特に虚血−再潅流傷害およびサ
イクロスポリン誘導腎毒性後の器官の保護（実施例XI
V）、ガン化学療法の腎毒性効果の低減（実施例XV）、
糖尿病および糸球体腎炎を包含する酸化窒素に関連する
疾患状態の処置（実施例XVI）、および個体の体重の減
少（実施例XX）に有用である証拠を提供する。
本発明の薬剤がサイトカイン発現を調節し、それゆ
え、上記の状態の処置に有用であるさらなる証拠が、実
施例XVII〜XVIXに提供される。マウス（実施例XVII）お
よびヒト（実施例XVIII）を含む哺乳動物におけるサイ
トカイン調節剤投与後のサイトカインレベルの上昇は、
本判明の薬剤が、サイトカインの発現および活性を調節
するさらなる証拠を提供する。
以下の実施例は、本発明の例示を意図するが、本発明
を限定することを意図しない。
実施例Ｉ ペプチド性サイトカイン調節剤の合成 本実施例は、ペプチド性サイトカイン調節剤の固相合
成のための方法を記載する。
A.Nle−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly−N
H2 アミノ酸配列Nle−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg−
（Ｄ）Trp−Gly（「EX−１」）を有するペプチド性サイ
トカイン調節剤を、Merrifield（1964）の固相ペプチド
合成法の改変を用いて合成した。本質的には、ｔ−BOC
グリシン誘導体を含有するMBHA樹脂（Advanced Chemtec
h;Louisville、KY）を、固相ペプチド合成に適切な反応
容器（Houghten（1985）、前出を参照のこと）に添加し
た。樹脂を塩化メチレンで３回洗浄し、そしてｔ−BOC
保護基を、塩化メチレン中に１〜２％のアニソールを含
有するトリフルオロ酢酸（TFA）を用いて除去した。次
いで、樹脂を塩化メチレンで洗浄し、そしてイソプロピ
ルエチルアミンで処理した。
ペプチドを、ジメチルホルムアミド中の3.2当量のＮ
−ホルミル−BOC保護化Ｄ−トリプトファンおよび3.0当
量のジシクロヘキシカルボジイミドの添加により伸長し
た。反応を、ニンヒドリンを用いてモニターし、そして
25分間進行させた。その後、樹脂を塩化メチレンを用い
て洗浄した。ジトルリル−BOCアルギニンを用いて、次
いで、それぞれの所望の保護化アミノ酸で、完全なヘプ
タペプチドが合成されるまで、この手順を繰り返した。
ヘプタペプチドの合成後、トリプトファン残基のＮ−
ホルミル保護基を、DMF中の20％ピペリジンを用いて除
去し、そして樹脂を塩化メチレンで洗浄した。ペプチド
を、10％のアニソールを含有する無水フッ化水素（HF）
を用いて樹脂から切断し、反応混合物を濃縮し、そして
残渣を酢酸溶液で抽出した。酢酸画分（溶解サンプルを
含有する）を取り出し、そして残渣を水で洗浄した。洗
液を酢酸画分に加え、合わせたサンプルを濃縮した。得
られた粗ペプチドを、RP−HPLC（Vydac、Ｃ−18カラ
ム、30分にわたる１〜60％溶液Ｂのグラジエントを用い
る（溶液Ａは0.1％TFA/水であり、そして溶液Ｂは0.1％
TFA/アセトニトリルである））により精製した。
このペプチドは、RP−HPLC（Vydac C−18カラム、24
％の一定の溶液Ｂを用いる：溶液Ａおよび溶液Ｂは上記
の通りである；吸収を215nmで測定した）により、97％
の純度であることが測定された。精製ヘプタペプチドの
質量を、BioIon 20 Mass Analyzer飛行時間型検出器を
用いるプラズマ脱離質量分析法により測定した。EX−１
ペプチドの質量は、942.7であると測定され、これは、
本質的に予測された分子量と同一であった（MS（Ｍ＋
１）＝942.2）。
B.His−（Ｄ）Phe−Arg−｛（Ｄ）Trp（CH2）｝−（NA
c）Gly−NH2 本発明のサイトカイン調節剤は、アミノ酸配列His−
（Ｄ）Phe−Arg−｛（Ｄ）Trp（CH2）｝−（NAc）Gly−
NH2を有し、以下の改変を除いて、上記のように合成さ
れ、そして精製された。Boc−（Ｄ）Trpを、クロロギ酸
メチルおよびN,O−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩
を用いて対応するN,O−ジメチルヒドロキサメートに転
換した。リチウムアルミニウムヒドリドによるトリプト
ファンアミドの還元により、Boc−（Ｄ）Trpアルデヒド
を得た。
Boc−（Ｄ）Trpアルデヒドおよびナトリウムシアノボ
ロヒドリドのDMF溶液を、１％酢酸を含有するDMF中でRi
nkアミド樹脂に結合したグリシンに加えた。還元的アミ
ノ化が完了した後、二級アミンを無水酢酸でアセチル化
し、そして樹脂をを1:1のトリフルオロ酢酸および塩化
メチレンを振盪し、Boc基を除去した。残りのアミノ酸
の連続的なカップリングをペプチド（合成機（Applied
Biosystems）で行い、ペプチドHis−（Ｄ）Phe−Arg−
｛（Ｄ）Trp（CH2）｝−（NAc）Gly−NH2を生成した。
ペプチドを樹脂から切断し、そして上記のように精製し
た。
実施例II アセチル化されたペプチド性サイトカイン調節剤の調製 本実施例は、Ｎ−アセチル化されたペプチド性サイト
カイン調節剤の調製のための方法を記載する。
ヘプタペプチドNle−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg−
（Ｄ）Trp−Gly−NH2を、実施例I.A.に記載のように合
成した。しかし、全く新しく合成したペプチドを樹脂か
ら切断する前に、ペプチドのアミノ末端を、無水酢酸、
ジイソプロピルエチルアミン、および塩化メチレンで２
時間、サンプルを処理することによりアセチル化したこ
とを除く。アセチル化後、上記のように、ヘプタペプチ
ドを樹脂から切断し、RP−HPLCにより精製し、そして質
量分析法により特徴付けした。実施例IIのアセチル化し
たヘプタペプチドは、ここで、EX−２と称し、98％の純
度であることが測定され、質量は985.2ダルトンである
と測定された。これは、予想される分子量と同一であっ
た。
実施例ＩおよびIIに記載の同様な方法を用いて、以下
に示す、本発明の他のサイトカイン調節剤を合成した:A
c−（シクロヘキシル）Gly−Gln−His−（Ｄ）Phe−Arg
−（Ｄ）Trp−Gly−NH2（「EX−３」）;Ac−（Ｄ）Phe
−Arg−（Ｄ）Trp−NH2（「EX−４」）;Ac−His−
（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−Gly−NH2（「EX−
５」）；およびAc−His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−
NH2（「EX−６」）。Ac−His−（Ｄ）Phe−Arg−
｛（Ｄ）Trp（CH2）｝−（NAC）Gly−NH2を、実施例I.
B.に記載の方法を用いて調製した。しかし、ペプチドを
樹脂から切断する前に、ペプチドを過剰の無水酢酸を用
いてアセチル化したことを除く。
実施例III マウスにおけるリポ多糖誘導腫瘍壊死因子レベルの低下 本実施例は、リポ多糖類（LPS;エンドトキシン）処置
マウスにおける腫瘍壊死因子（TNF）レベルの低下につ
いての２つのサイトカイン調節剤の効果を記載する。
約20g重のBalb/c雌マウスを２群（コントロール群お
よび処置群）に分けた。0.9％生理食塩水中のLPSを5mg/
kgで、コントロールマウスに腹腔内（IP）注射により投
与した。処置群のマウスを、最初に、生理食塩水中30μ
ｇのEX−２または150μｇのEX−３を用いてIP注射を行
い、次いで、EX−２またはEX−３を投与した１分後に、
コントロール群について記載したように、このマウスに
LPSを投与した。
血液サンプルを、LPS投与後、４時間までの種々の時
間で、処置マウスおよびコントロールマウスの眼窩腔か
ら採取した。血漿を、3000×ｇで５分間の遠心分離によ
り離し、次いで１％ウシ血清アルブミンを含有する１×
リン酸緩衝化生理食塩水（pH7.4）の４容量で希釈し
た。100μｌの血清サンプルを、TNF−α（Genzyme;Camb
ridge MA）についてELISAによりアッセイした。
各群からの６匹のマウスの平均（＋／−SEM）のTNF−
αレベルを測定し、そしてTNFレベルの減少パーセント
を算出した。表Ｉに示すように、EX−２でマウスを処置
することにより、未処置のコントロールマウスと比較し
て、TNF−αのレベルにおいて50％の減少を生じた。同
様に、EX−３でマウスを処置することにより、未処置の
コントロールマウスと比較して、TNF−αのレベルにお
いて56％の減少を生じ、そしてEX−４での処置は53％の
減少を生じた（表II）。これらの結果は、本発明のペプ
チドがLPS誘導サイトカイン活性を抑制し得ることを示
す。
実施例IV マウスにおけるリポ多糖誘導インターロイキン−６レベ
ルの低下 本実施例は、LPS処置マウスにおけるインターロイキ
ン−６（IL−６）レベルの低下についてのサイトカイン
調節剤の効果を記載する。
Balb/cマウスを、上記、実施例IIIに記載するよう
に、群分けし、そして処置した。上記のように、血液サ
ンプルを、６時間までの種々の時間で、眼窩腔から得
て、血清を採取し、そして希釈した。100μｌのアリコ
ートを、Starnesら、J.Immunol.145:4185−4194（199
0）（これは、本明細書において参考として援用され
る）の方法の改変により、IL−６特異的ELISAを用いてI
L−６レベルについてアッセイした。
各群からの６匹のマウスの平均（＋／−SEM）のIL−
６レベルを測定し、そしてIL−６の減少パーセントを算
出した。表Ｉに示すように、EX−２でのマウスの処置に
より、未処置のコントロールマウスと比較して、IL−６
のレベルにおいて60％の減少を生じた。
実施例Ｖ カラゲナン誘導の足の腫脹 本実施例は、炎症および痛みを軽減させるための２つ
のサイトカイン調節剤の効果を記載する。
カラゲン誘導の足の腫脹を、HiltzおよびLipton、Pep
tides 11:979−982（1990）;Vingerら、Fed.Proc.46:11
8−126（1987）；およびVinegarら、J.Pharmacol.Expt.
Therap.166:96−103（1969）（これらのそれぞれは、本
明細書中に参考として援用される）の方法の改変を用い
て誘導した。簡潔に記すと、成熟雌のBalb/cマウスに、
7mg/kgケトアミンおよび0.6mg/kgロムプンの腹腔内注射
により麻酔をかけた。足蹠厚を、スプリング加重ミクロ
メーター（Swiss Precision Instruments）を用いて計
測した。足蹠厚を、1/100インチの単位で表した。ベー
スライン測定を行った後、マウスに、0.2mlの生理学的
食塩水（コントロール）または0.2ml生理食塩水中の種
々の用量のEX−２もしくはEX−３（処置）のいずれかを
後足の足蹠に注射した。最初の注射を、0.15％のκ−カ
ラゲナン（Sigma Chemical Co.;St.Louis、MO.）の0.02
mlの注射の直後に行った。
後足の足蹠厚を６時間の間、１時間毎に計測し、厚さ
の変化を測定し、そしてEX−２での処置による腫脹の減
少パーセントを算出した。表ＩおよびIIに示すように、
１μｇのEX−２または１μｇのEX−３の腹腔内注射は、
２時間目に測定したとき、カラゲナン誘導の腫脹を、そ
れぞれ45％または49％減少させた。
実施例VI リポ多糖誘導致死率 本発明例は、LPS投与により誘導される敗血症からの
致死率を減少させる際の、サイトカイン調節剤（EX−
２、およびEX−３、およびEX−４）の効果を記載する。
これらの実施例を、Rivierら、Endocrinology 125:28
00−2805（1989）（これは、本明細書中で参考として援
用される）により報告された情報に基づいて行った。成
熟雌のBalb/cマウスに、自由に餌および水を与えた。マ
ウスに、40時間の間、４時間毎に、0.2mlの生理食塩水
中の30〜300μｇのEX−２、EX−３、またはEX−４（処
置群）あるいは0.2mlの生理的食塩水単独（コントロー
ル群）を腹腔内注射した（各群10匹のマウス）。最初の
注射の直後、0.2mlの生理的食塩水中の0.6mgのLPSエン
ドトキシンを、それぞれのマウスに投与した。LPS注射
後、EX−２または生理食塩水を、処置マウスまたはコン
トロールマウスに、それぞれ４時間毎に36時間にわたり
投与した。
表ＩおよびIIに示すように、3.3mgのEX−２、EX−
３、またはEX−４の投与（それぞれ300μｇの11回の注
射）により、コントロールマウスと比較して、それぞれ
83％、86％、および75％の生存の増加を生じた。これら
の結果は、本発明のサイトカイン調節剤の腹腔内投与に
より、LPS誘導敗血症による致死率を低下させ得ること
を示す。
実施例VII インターロイキン−１β誘導痛覚過敏の低減 本実施例は、痛みの予防を提供する際のサイトカイン
調節剤（EX−２）の効果を記載する。
これらの実験を、Pooleら、Br.J.Pharmacol.106:489
−492（1992）;Follenfantら、Br.J.Pharmacol.98:41−
43（1989）；および、RandallおよびSellito、Arch.Int
ernatl.Pharmacodyn.111:409−419（1957）（これらの
それぞれは、本明細書中で参考として援用される）に記
載される方法の改変を用いて行った。成熟雄Sprague−D
awleyラット（175〜275g）を、可変圧力計測器（IITC L
ife Sciences;Woodland Hills、CA）を用いて、足圧（p
aw pressure）技術により痛覚過敏について試験した。
ラットを生活環境に順応させ、そして訓練期間の開始に
先立ち、３日間手を触れて馴らした。痛覚過敏実験を開
始すべき前日に、各ラットをソックス（sock）に入れ、
そして２通りの足圧力試験を15分間隔で行った。その翌
日、ラットは、各動物が回避反射（例えば、全身的なも
がき（struggling）および／またはうめき（vocalizati
on））を示す圧力（mmHg）を決定するために予備試験を
行った。約５〜10％のラットは応答せず、そしてさなら
る試験から除外した。
足圧力に応答した動物を、1ml/kgの容量で種々の濃度
のEX−２（処置）または生理食塩水単独（コントロー
ル）を腹腔内注射により、前処置した。20分後、100μ
ｌのIL−１β（1U/100μｌ）を、足底内注射を介してラ
ットに投与した。IL−１投与の２時間後、ラットを２つ
のさらなる足圧力試験に供し、そしてコントロールラッ
トと比較して、EX−２処置ラットに適用し得た圧力のmm
Hgにおける増加を測定した。表Ｉに示すように、１μｇ
のEX−２での処置は、コントロールラットと比較して、
ラットが125％まで耐える圧力量を増加させた。
実施例VIII 成人呼吸窮迫症候群 この実施例は、LPS処置ラットにおいて呼吸窮迫症候
群を最小にすることにおける、サイトカイン調節剤EX−
２の効果を記載する。
これらの実験を、Ulichら、Am.J.Pathol.141:61−68
（1992）およびWheeldenら、Lab.Animals 26:29−37（1
992）に記載された方法の改変を用いて行った。これら
の文献はそれぞれ本明細書中に参考として援用されてい
る。雄Harlan Sprague−Dawlwyラットを、70mg/kgのケ
タミンと6mg/kgのロムパン（rompun）の混合物を用いて
腹腔内に注射して麻酔をかけた。２〜3cmの切開部を麻
酔をかけた各ラットの頚部に作成し、そしてその気管を
周囲軟組織の鈍的剥離により露出した。ラットをほぼ垂
直な平板につるし、そして気管内注射は、喉頭の1cm後
方の点に、1ccシリンジに装着した25G×1/2インチ針を
露出した気管に挿入することにより行った。
各ラットは、0.5ml/kgの生理食塩液または0.5ml/kgの
10mg/ml（5mg/kg）LPSエンドトキシンを、ゆっくりの気
管内投与を介して受けた。LPSエンドトキシンの投与直
後、ラットに、生理食塩液（コントロール）または種々
の濃度のEX−２を含む生理食塩水（処置）のいずれかの
1ml/kgを腹腔内に注射した。ラットを、１〜２分間高く
した位置に維持し、LPSおよび生理食塩液の肺への分布
を容易にした。切開部を閉じ、そしてラットを回復させ
た。気管内注射の２および４時間後、生理食塩液または
EX−２を再度、それぞれコントロールおよび処置ラット
に投与した。
気管内投与の６時間後に、ラットに再麻酔をかけ、心
臓穿刺により瀉血した。血清を採取し、保存した。頚部
および胸部を開いて気管および肺を露出させ、肺を27G
×3/4インチ針を用いて６×5mlの生理食塩液で洗浄し、
そして洗浄液をプールした。
気管支肺胞洗浄液中の全多形核白血球（PMN;好中球）
をEX−２処置ラットで計数し、そしてコントロールラッ
トにおける数と比較した。表Ｉに示すように、100μg/k
gのEX−２での処置は、LPS処置肺におけるPMN浸潤の増
加を58％阻害した。
実施例IX インターロイキン−１βまたはリポ多糖誘導性体温上昇
の阻害 この実施例は、２つの異なる薬剤に応じてラットにお
いて体温上昇を阻害することにおける、サイトカイン調
節剤、EX−２、EX−３、およびEX−４の効果を記載す
る。
雄Wistarラット（45〜75日齢）を、ラットの正常体温
に対して熱的中性（thermoneutral）である26℃に保持
された温度制御された室内に入れ、そしてテスト前の24
時間、自由に食餌および水にアクセスできる室内に維持
した。研究の朝、ラットを同定のために印を付け、そし
て体重を量った。各ラットの体温を、ストレスを最小に
するように設計された調節ケージに動物を置き、そして
温度プローブ（YSIプローブ♯402）を動物の直腸中に３
〜5cm挿入することによって測定した。体温を安定化さ
れた読みの15秒後に記録した。測定を各ラットに対する
ベースライン温度を確立するために１時間後に繰り返し
た。
ベースライン温度が確立された後、ラットに、生理食
塩液、IL−１β、またはLPSエンドトキシンを腹腔内に
注射した。次いで、ラットに、生理食塩液（コントロー
ル）あるいはEX−２、EX−３、またはEX−４（処置）の
種々の濃度のいずれかを腹腔内に注射した。ラットの体
温を１時間毎に６時間測定し、そしてIL−１βまたはLP
Sによる体温の上昇のEX−２、EX−３、またはEX−４に
よる阻害を測定した。
表Ｉに示すように、500μg/kgのEX−２での処置は、I
L−１で誘導された熱を52％阻害した。さらに、50また
は150μg/kgのEX−２での処置は、LPS注射６時間後に測
定した場合、LPSで誘導された熱をそれぞれ45％または5
2％阻害した。さらに、150μg/kgのEX−３またはEX−４
での処置は、LPSで誘導された熱をそれぞれ57％または5
2％阻害した（表II）。これらの結果は、本発明の種々
のサイトカイン調節剤が熱を効果的に下降させ得ること
を示す。
実施例Ｘ マウスにおけるアラキドン酸誘導耳腫脹の低減 この実施例は、EX−２およびEX−３が、マウスにおい
てアラキドン酸誘導耳腫脹を低減し得ることを示す。
実験を、18〜23グラムの体重の雌Balb/cマウスを用い
て行った。生理食塩液あるいは100μｇのEX−２またはE
X−３を、アラキドン酸（AA）の局所塗布の30分前に腹
腔内に投与した。10μｌのピペットを用いて、10μｌの
AA溶液（100mg/mlエタノール;Calbiochem−Novabioche
m;San Diego CA）を各マウスの右耳の内表面および外表
面に塗布した。10μｌのエタノール単独を、各マウスの
左耳の内表面および外表面に塗布した。
耳の厚さを、AA塗布の直前および60分後に、手持ち型
のバネ付カリパス（hand−held spring loaded calipe
r）を用いて測定した。耳の厚さの増加を、AA処置耳で
観察された変化からコントロール耳で観察された変化を
差し引くことにより算出した。各群（生理食塩液および
コントロール）の値は、各群における個々のマウスで観
察された膨脹の平均である。膨脹の減少の割合は、生理
食塩液コントロール群で観察された膨脹に基づく。表Ｉ
およびIIに示すように、EX−２およびEX−３は、AAで誘
導された耳の膨脹をそれぞれ72％および62％減少した。
実施例XI ウサギにおけるモルヒネ誘導呼吸抑制の低減 この実施例は、EX−２およびEX−３がウサギにおいて
モルヒネにより誘導される呼吸の抑制を低減し得ること
を示す。
雄Sheltonウサギ（３〜4kg）を押さえて、前肢のすぐ
後ろの胸郭のまわりに呼吸変換器（Model F−RCT;Grass
Instruments;Quincy MA）を取り付けた。この変換器
を、EKGケーブルを介してグラスポリグラフ（grass pol
ygraph）に接続した。25Gバタフライ針を用いて辺縁耳
静脈をカニュレーションすることにより、薬物投与のた
めの静脈内ラインを確立した。
ウサギの呼吸を安定化させ、次いで、硫酸モルヒネ
（2mg/kg、0.5ml生理食塩液中）を静脈内注射により投
与し、そして呼吸数および深度を10分間モニターした。
モルヒネの第２回目の容量を投与し、次いで、10分後、
EX−２またはEX−３（10μg/kg、0.5ml生理食塩液中）
を静脈内投与し、そしてウサギを20分間モニターした。
EX−２またはEX−３（20μg/kg、1.0ml生理食塩液中）
の２回の追加用量を20分間の間隔で、すなわち、最初の
モルヒネ注射後40分および60分に投与した。
結果を、ベースライン値からの変化の割合として算出
し、そして実験の最後（80分）での処置群の平均値から
コントロール群の平均値を引いた刺として表した。表Ｉ
およびIIに示すように、EX−２およびEX−３は、ウサギ
におけるモルヒネ誘導呼吸抑制をそれぞれ50％および65
％低減した。
実施例XII TNF−αレベルおよびLPS誘導致死率の低下における経口
投与されたサイトカイン調節剤の効果 この実験は、マウスでのLPS誘導されたTNF−αレベル
および致死率の低下における種々のサイトカイン調節剤
の経口効果を記載する。
LPS誘導された致死率の研究を、Rivierら、前述、198
9により報告された情報に基づいて行った。成熟雌Balb/
cマウスを、任意に食餌および水を与えた。マウスに、1
00μｌ生理食塩液中の150μｇまたは300μｇのEX−２、
EX−３、EX−５、またはEX−６を、ガバージュにより４
時間毎に40時間投与した（それぞれ1.65mgおよび3.3mg
の総容量）。コントロールマウスに100μｌの生理食塩
液単独を投与した。サイトカイン調節剤または生理食塩
液の最初の投与の直後に、0.2ml生理食塩液中の0.6mgの
LPSを腹腔内注射により投与した。3.3mgのEX−５（63
％）、1.65mgのEX−６（68％）、または3.3mgのEX−５
（44％）を投与したマウスにおいて、コントロールマウ
ス（０％）またはEX−２またはEX−３を投与したマウス
（０％〜11％）と比較して、統計学的に有意な生存率の
増加を観察した。
経口投与されたサイトカイン調節剤がLPS誘導TNF−α
レベルを低下する能力も検査した。Balb/c雌マウス（20
g）に、100μｌ生理食塩液中の150μｇまたは300μｇの
EX−２、EX−３、EX−５、またはEX−６を、ガバージュ
により投与した。コントロールマウスに100μｌの生理
食塩液単独を投与した。１分後に、0.1mgのLPSを腹腔内
注射により投与した。サンプルを採取し、そしてTNF−
αレベルを上記の実施例IIIに記載のように測定した。
各群（ｎ＝９〜20）のマウスにおける平均TNF−αレ
ベルを測定し、そしてTNF−αレベルの低下の割合を算
出した。TNF−αレベルは、150μｇのEX−３（49％）;3
00μｇのEX−３（40％）、または300μｇのEX−５（44
％）を投与したマウスにおいて、コントロールマウス
（０％）およびEX−２を投与したマウス（26％〜28％）
と比較して、有意に低下した。これらの結果は、本発明
の種々のサイトカイン調節剤が経口投与された場合に有
効であることを示す。
実施例XIII ラットにおける廃用性体調偏移 この実験は、ラットにおける14日の廃用性体調偏移に
関連するネガティブな効果を改良することにおける、サ
イトカイン調節剤EX−２の効果を記載する。
成熟雄Sprague−Dawleyラット（355〜365g）をこの研
究に用いた。動物を、標準的なラットケージに個別に入
れ、４日間トレッドミルに慣らした。翌日、ベースライ
ンの尾出血を、次いで最大トレッドミルストレス試験を
明後日に行った。ストレス試験の翌日、動物を、適切な
処置群およびコントロール群に分け、そして動物を懸垂
ケージ中にその尾によって懸垂させるが、これは無重力
をシミュレーとし、そのため動物を体調偏移させる。コ
ントロール動物の他の群を、懸垂ケージで用いるものと
同様に格子床を有する標準的なラットケージ中に入れ
た。全ての動物を１ケージにつき１匹ずつ入れ、任意に
食餌および水を供給した。体重および食餌摂取を毎日測
定した。動物に、１μg/kg体重または５μg/kg体重のEX
−５（処置）、あるいは1ml/kg体重の生理食塩液（コン
トロール）を１日２回腹腔内注射により投与した。10日
目に、全動物を、動物が疲労に達するまでトレッドミル
上でストレス試験した。最大VO2および走行時間のデー
タを採取し、懸垂前の結果と比較した。14日目に、全動
物を屠殺し、そして血液、組織、および器官をさらなる
分析のために採取した。全ての手順および試験を、研究
者の主観を避けるために盲検で行った。群間の統計学的
有意性（ｐ＜0.05）を、多重比較のためのStudent−New
man−Keuls検定を用いるANOVAにより評価した。全ての
データは平均±標準誤差（SE）として報告される。
体重は、処置にかかわらず、全ての懸垂した動物につ
いて有意に減少した。食餌摂取は、群間で有意な差はな
かった。動物の全てをストレス試験に供し、運動時間お
よび最大VO2を測定した。同様に、酸化酵素のヒラメ筋
クエン酸シンターゼのレベルおよび脛骨の骨密度を測定
した。
表IIIに要約されるように、EX−２は、廃用性体調偏
移に関連する多くのパラメータに有意な結果を示す。低
用量のEX−２（１または５μg/kg）の１日２回注射は、
運動時間、最大VO2、ヒラメ筋クエン酸シンターゼのレ
ベル、および脛骨の骨密度の脱馴化効果を有意に減少さ
せた。より具体的には、EX−２は、生理食塩液コントロ
ールと懸垂した動物との間の減少を比較した場合、運動
時間および最大VO2の両運動実行パラメータをそれぞれ4
4％および80％有意に低下させた。ヒラメ筋クエン酸イ
ンターゼは50％低下した。脛骨の骨密度の測定は、EX−
２が懸垂誘導骨密度の鉱物質除去を50％低下させること
を示した。これらの結果は、本発明のサイトカイン調節
剤の投与が不使用による脱馴化のネガティブ効果を低減
させることを示す。
実施例XIV 器官保護 この実施例は、２つのラットモデルである虚血−再潅
流モデルおよびサイクロスポリン誘導腎毒性モデルにお
いて腎損傷を妨げることにおけるサイトカイン調節剤EX
−２の効果を記載する。
A.虚血−再潅流傷害： これらの実験を、サイトカイン調節特性を有するペプ
チドであるEX−２が、再潅流誘導血管収縮および腎動脈
を締め付けることから生じる糸球体濾過速度の低下を改
善させ得るかどうかを測定するために行った。比較とし
て、NSAIDケトロラクを同じモデルに用いた。
Sprague−Dawleyラット（250〜300g）にInactin （1
20mg/kg）で麻酔をかけた。深い麻酔が確実になった
後、ラットを、ポリエチレン（PE）チューブ（PE240）
を用いて気官に、頚静脈、大腿動脈、膀胱（この３つの
カニュレーションについてはPE 50）に、および左尿管
（伸縮性PE 50）にカニュレーションした。カニュレー
ションが完了すると、左腎臓の上に2cmの脇腹の切開を
行い、そして腎盂および血管束（vascular bundle）を
露出した。左腎動脈の周囲を取りまく組織を動脈から穏
やかに切除した。露出させた腎動脈を、小さな血管交差
クランプを用いて１時間締め付けた。
締め付けの直前に、EX−２（50または500μg/kg）、
ケトロラク（KETO、1mg/kg）、またはビヒクルを、静脈
内（iv）投与した。締め付け（虚血）の１時間後、腎動
脈または神経のいずれかを損傷することを避けることに
気を付けて、クランプを穏やかに除去した。3H−イヌリ
ン（NEN/Dupont;Wilmington、DE）の注入（リン酸緩衝
化生理食塩液（PBS）中、0.6μCi/ml）（2ml/時間）を
４μCi/時間の一定の速度で開始した。再潅流の60分
後、糸球体濾過速度（GFR）、腎血漿流量（RPF）、およ
び腎血管抵抗（RVR）を、２回の30分採取時間で評価し
た。次いで、腎臓を分析用に取り出した。擬手術および
締め付けたラットを上記の群についてのコントロールと
して用いた。対則の腎機能を用いて測定期間中のラット
腎機能の安定性を測定した。結果は、EX−２が、糸球体
濾過速度の上昇および血管の抵抗の減少をもたらすこと
を示す（表IV）。このデータは、本発明のサイトカイン
調節剤が、虚血−再潅流に関連する損傷に対して腎臓を
保護することを示す。
B.シクロスポリン誘導腎毒性： この実験を、EX−２が、糸球体濾過速度（GFR）およ
び腎血流量の減少、ならびにサイクロスポリンＡでの免
疫抑制処置により誘導される体液および電解質のホメオ
スタシスの不全を軽減し得るかどうかを確かめるために
行った。
第１の研究では、サイクロスポリンＡ（CsA）処置の
開始時に240〜290gの体重の範囲の雄Sprague−Dawleyラ
ット（ｎ＝43）を、４つの重量を合わせた群に分けた。
群は、以下のようであった：（１）コントロール:CsAな
し、EX−２なし、CsAビヒクル（PBS）経口投与およびEX
−２ビヒクル（これもPBS）腹腔内投与のみでの処置；
（２）CsA:CsAでの処置（PBS中50mg/kgを毎日８時30分
に９日間経口投与した）およびPBS（EX−２ビヒクル）
の腹腔内中注射；（３）CsAおよび50μg:2群と同一のCs
A処置に加えてEX−２での処置（50μg/kgを毎日８時お
よび17時にEX−２ビヒクルで腹腔内投与した）；および
（４）CsAおよび500μg:2群および３群と同一のCsA処
置、およびEX−２の用量が500μg/kg体重であること以
外は３群と同様のEX−２処置プロトコル。深い麻酔を確
認した後、ラットを、気管（PE 240）、頚静脈、大腿動
脈、および膀胱（この３つのカニュレーションについて
はPE 50）にカニュレーションした。カニュレーション
の後、3H−イヌリンの注入を、測定期間の50分前に開始
して、糸球体濾過速度、腎血流量、および腎血漿流量を
評価した。腎血流量をイヌリン抽出法により測定した。
研究の最後に、腎臓を組織学的分析用に取り出した。
第２の研究では、サイクロスポリン処置の開始時に24
0〜290gの体重範囲の雄Sprague−Dawleyラット（ｎ＝3
1）を、４つの重量を合わせた群に分けた。この研究の
時間経過およびプロトコルは以下を除いて第１の研究と
一致した：（１）CsAの日用量を、30mg/kgに減らし、そ
して皮下（SC）投与した；および（２）EX−２の50μg/
kg用量を、200μg/kgの１日２回用量に代えた。500μg/
kg用量のEX−２をこの研究で繰り返した。腎血液動力学
を測定し、そして細胞外液量も評価した。
CsA処置は、データのばらつきのために、これらの研
究において腎血流量を有意に減少させなかった。しか
し、EX−２処置は血流量をコントロールとの差がない値
に改善した。第２の研究において、細胞外液量（ECF）
を測定する場合、コントロール群および処置群間でECF
の差はなかった（コントロールでは27.6±1.9、CsAおよ
びビヒクルでは27.5±1.7、CsA＋200μg/kg EX−２では
26.2±0.9、およびCsA＋500μg/kg EX−２では25.7±1.
4％）。
尿タンパク質排泄も測定し、そしてデータは、EX−２
処置がGFRの有意な増加にもかかわらずCsA処置ラットと
比較して、尿タンパク質排泄を増加しなかったことを示
した。EX−２は、CsAおよびビヒクルコントロールと比
較して、両方の研究においてGFRを有意に増加させ、そ
して腎血流量をコントロールと差がない値に回復させ
た。EX−２処置の結果としてECFに変化はなく、そして
糸球体濾過速度に標準化させる尿タンパク質排泄を減少
させる傾向があった。２つの実験の結果を図1aおよび図
1bに示し、これは、本発明のサイトカイン調節剤がサイ
クロスポリン誘導腎毒性およびそれにより生じる損傷を
低減させることの証拠を提供する。
実施例XV ガン化学療法 この実施例は、サイトカイン調節剤であるEX−２のガ
ン化学療法剤の腎毒性効果を低減させる効果を記載す
る。
雄Sprague−Dawleyを用いて、シスプラチン（CDDP）
投与後の腎機能へのEX−２の影響を測定した。全ラット
にCDDP（4mg/kg、腹腔内）を投与し、３つの処置群に分
けた（ｎ＝6/群）。群は以下のとおりであった：（１）
ビヒクルおよび滅菌PBSの投与、３回／日；（２）EX−
２を５μg/kgの用量で投与、３回／日；および（３）EX
−２の用量が50μg/kgであったこと以外は２群と同様、
３回／日。
3H−イヌリンの注入（PBS中、0.6μCi/ml）（2ml/時
間）を、手術調製期間の最後で開始した。連続注入を腎
機能測定の60分前に開始し、研究の最後まで維持した。
糸球体濾過を、２回の30分期間においてイヌリンクリア
ランス法により評価し、そして腎血流量（RBF）および
腎血漿流量（RPF）を、２回目のGFR測定期間の最後にサ
ンプリングした左腎臓の腎静脈血からのイヌリン抽出法
（動脈対腎静脈イヌリン濃度）により測定した。尿排出
量も、尿流量および水の分割排泄（fractional excreti
on）の両方を測定するためにモニターした。尿電解質
（Na+およびK+）濃度を炎光光度法（Model 51 Ca、Bach
arch,Inc.;Pittsburgh、PA）により分析し、そして尿タ
ンパク質濃度を測定した。測定期間の最後に、腎臓を組
織学的分析用に取り出した。３つのCDDP投与したラット
（CDDPを4mg/kgで腹腔内）における腎機能へのEX−２の
種々の処置用量の影響を表Ｖに要約する。データは、本
発明のサイトカイン調節剤が、糸球体濾過速度、腎血漿
流量、および腎血流量を増加させ、それによりガン化学
療法剤の腎毒性を低減させることを示す。
実施例XVI 酸化窒素およびサイトカインにより媒介される疾病の処
置 この実施例は、誘導性酸化窒素シンターゼ（iNOS）を
阻害すること、ならびにストレプトゾトシン（streptoz
otozin）誘導糖尿病においておよび糸球体腎炎の減少し
たアルブミンレベルにおいてグルコースを減少させるこ
とについての、EX−２の効果を記載する。
A.誘導性酸化窒素シンターゼ（iNOS）： ラットの大動脈平滑筋細胞（RASMC）を、Gelsterfer
ら、Circ.Res.62:749−756（1988）（これは参考として
本明細書中に援用されている）の既に公表されている手
順を用いて雄ラット（325〜350g）から単離した。細胞
を、マウス抗α−アクチン抗体および抗マウスIgG FITC
複合体を用いて、抗α−アクチンについての間接免疫蛍
光染色により陽性のものを平滑筋細胞として同定した。
細胞を、Ｔ−75組織培養フラスコ（Corning Delbelco's
Glass,Inc.;Corning、NY）中、50％F12ならびに10％ウ
シ血清、0.2g/lのＬ−グルタミン、ペニシリン（100U/m
l）、およびストレプトマイシン（0.1mg/ml）を追加し
た50％ダルベッコの改変イーグル培地（DMEM）で培養さ
せた。
１〜５継代中の細胞を以下のビヒクル、LPS（１μg/m
l）、IL−１β（10U/ml）、またはTNF−α（100U/ml）
のうちの１つで６時間前処置した。同様の群において、
EX−２の0.1または１μＭを、LPS、IL−１β、またはTM
F−αの添加の10分前に加えた。６時間後、細胞をEarle
の平衡化塩類溶液で洗浄し、100μＭのＬ−ニトロアル
ギニンメチルエステル（Ｌ−NAME）のビヒクルとともに
30分間インキュベートした。1mM L−アルギニンの存在
または非存在下において、cGMPの蓄積を、0.3mM 3−イ
ソブチル−１−メチルキサンチン（IBMX）への曝露後に
測定した。次いで、培地を迅速に吸引し、500μｌの0.1
N HClを各ウエルに添加して反応を停止し、cGMPを抽出
した。30分後、HCl抽出物を採取し、そして1.0Nの熱NaO
Hを加え、ゴム冠ポリスマンを用いてウエルから掻き取
ることによって、細胞残余物をウエルから取り出した。
HCl抽出物をRIAによりcGMPについて分析し、NaOH可溶化
細胞残余物をタンパク質測定用に用いた。
雄Sprague−Dawleyラットに55mg/kgのペントバルビタ
ールの腹腔内投与により麻酔をかけた。カテーテルを、
血液の回収および薬物投与のために、それぞれ頚動脈お
よび頚静脈中に挿入した。EX−２または生理食塩液を１
つの群の６匹のラットに与えた。１時間後、ラットはま
だ麻酔下であったが、血液をヘパリン処置したシリンジ
中に回収し、血漿を遠心分離により得た。RASMCを、コ
ントロールまたはEX−２処置動物からの血漿とともにイ
ンキュベートし、そしてLPSまたはIL−１βによるINOS
の誘導を阻害する血漿成分の能力を上記のように測定し
た。
放射性リガンド（125I−スクシニルcGMP−チロシンメチ
ルエステル）を、HunterおよびGreenwood Nature、94:4
95−496（1962）（これは本明細書中に参考として援用
されている）の方法により、キャリアを含まない125Iを
用いて調製した。ヨウ化反応産物を、PatelおよびLinde
nt、Anal.Biochem.168:417−425（1988）（これは参考
として本明細書中に援用されている）の手順に従ってRP
−HPLCにより分離した。cGMPに対するモノクローナル抗
体を用いて、Brookerら、Science191:270−276（1976）
（これは本明細書中に参考として援用されている）に開
示されるようなGammaflowTM自動RIAシステムで、RIAを
行った。cGMPの標準ストック溶液（20μＭ）を、0.1N H
Clに調製し、そしてこの溶液の吸光度を日常的に分光光
度計（Shimadzu、UV160U）によりモニターした。標準希
釈物（0.63〜80nM）をストック溶液から作成した。cGMP
を含むHCl抽出物を直接的にRIAに用いた。結果は以下の
表Ｖに要約され、そして、EX−２が誘導性酸化窒素シン
ターゼを阻害し得、それによりNO産生のレベルおよびこ
れに関連するネガティブな効果（例えば、糖尿病または
糸球体腎炎）を低減し得ることを示す。
B.誘導された糖尿病 雄Sprague−Dawleyラットに65mg/kgのストレプトゾト
シン（STZ）を尾静脈を介して静脈内投与した。ラット
を２つの群に分けた。第１群にはEx−２、150μg/kgを
８時間毎に72時間投与し、そして第２群はコントロール
であった。血液サンプルを、最初の72時間については８
時間毎に、次いで、観察期間の最後までは12時間または
24時間毎エーテル麻酔下で回収した。血漿サンプルを、
グルコースアッセイキット（Trinder、Sigma Chemical
Co.）を用いてグルコースについてアッセイした。以下
の表VIに示すように、EX−２は血中グルコースレベルの
72％低下をもたらす。
C.遺伝性糖尿病： 雄Zuckerラットは、例えば、Wardら、Ann.Clin.Lab.S
ci.、24:266−277（1994）（これは本明細書中に参考と
して援用されている）に記載されるような、遺伝性イン
スリン非依存性糖尿病（NIDDM）の十分に樹立されたラ
ットモデルである。18匹の雄Zuckerラットを用いて慢性
疾患であるNIDDMへのEX−２の効果を研究した。ラット
を２つの群に配し、生理食塩液または25μg/kgのEX−２
のいずれかを約３カ月間８時間毎に投与した。血液サン
プルを、尾のクリップにより採取し、そして尿サンプル
を、24時間代謝ケージ中に動物を入れることにより採取
した。血漿インスリンをRIAキット（Amersham Life Sci
ences、Arlington Heights、IL）を用いてアッセイし
た。尿タンパク質を市販のタンパク質アッセイキット
（Coomassie Plus、Pierce、Rockford、IL）を用いてア
ッセイした。体重測定をMettler Toledo上載天秤を用い
て行った。表VIに示すように、EX−２は、インスリンの
39％低下、尿タンパク質の87％低下、および体重の約10
0グラム減少（32％低下；実施例XXを参照のこと）をも
たらした。
D.糸球体腎炎： 雄Sprague−Dawleyラット（体重194〜248g）を、フロ
イントの完全アジュバント（Sigma Chemical Co.）中の
1mgの正常ウサギIgG（Sigma Chemical Co.）の皮下注射
によって免疫した。EX−２を、実験期間全体にわたり１
日当たり３回（１回の注射につき100μg/kg）投与し
た。７日後、ラットに、陰茎背静脈を介して静脈内に1.
5mlの腎毒性血清を注射した。尿、血漿、および血清
を、腎毒性血清注射の前、注射後４、６、24、48、およ
び96時間に採取した。全ラットは、24時間アルブミン排
出により示されるように、４時間から96時間まで漸増す
るタンパク尿を有する急性糸球体腎炎を発生した。タン
パク尿を免疫電気泳動により測定した。結果は表VIの下
方に要約され、そして、本発明のサイトカイン調節剤
が、糸球体腎炎に見られるアルブミンレベルの上昇を緩
和することを示し、これは糖尿病状態の改善の徴候であ
る。
要約として、上記データは、本発明のサイトカイン調
節剤が誘導性酸化窒素シンターゼレベルを阻害し、それ
によりNOの産生を減少させることを示す。サイトカイン
調節剤はまた、糖尿病、糸球体腎炎、アテローム硬化
症、および多発性硬化症のような酸素窒素が組織損傷の
一因になる特定の疾病の処置に有用である。
実施例XVII マウスにおけるIL−10のレベルの上昇 この実施例は、哺乳動物におけるIL−10のレベルの上
昇におけるEX−２の効果を、例証実施例として、EX−２
投与後のマウス血漿での上昇を用いて記載する。
図２は、マウス血漿中でも示された、EX−２のIL−10
誘導効果を示す。EX−２を、1.0μg/マウス〜1000.0μg
/マウスの範囲の用量で、19匹のマウスに腹腔内投与し
た。結果は、5.0pg/ml〜23.0pg/mlの範囲のIL−10レベ
ルにおいて用量依存的上昇を示した。
実施例XVIII ヒトにおけるIL−10のレベルの上昇 この実施例は、ヒト被験体におけるサイトカイン調節
剤EX−２のサイトカイン増強効果を示す。
EX−２を、８名の健康な男性ボランティアに200また
は500μg/kgのいずれかの用量で静脈内注入により投与
した。血漿IL−10レベルは、200μg/kgのEX−２の投与
後、４名中２名のボランティアで上昇し（図3a）、そし
て500μg/kgのEX−２の投与後、４名中４名のボランテ
ィアで上昇した（図3b）。結果は、200μg/kgのEX−２
を受けた被験者においてIL−10の85％上昇を、そして50
0μg/kgのEX−２を受けた被験者において230％の上昇を
示す。
実施例XIX ヒトにおいてガン化学療法により生じる有害な副作用の
処置 この実施例は、サイトカインの産生を誘導かつ増強す
るシスプラチン、Taxol 、またはAdriamycin を用い
るガン化学療法に関連する有害な副作用を緩和すること
における、EX−２のようなサイトカイン調節剤の有用性
を記載する。
例えば、EX−２は、化学療法を行っているまたは化学
療法を行いかけている患者に、静脈内注入により投与さ
れ得る。例えば、患者は、シスプラチン、Taxol 、Adr
iamycin 、または他の適切な化学療法剤、あるいは放
射線処置を受けるように予定され得る。EX−２は、約１
〜1000μg/kgの用量で、好ましくは500μg/kgの注入用
量で投与され得る。用量は、連続点滴によりまたは断続
的なボーラスにより投与され得る。
実施例XX サイトカイン調節剤の投与による体重の減少 この実施例は、サイトカイン調節剤の投与が被験体の
体重の減少を引き起こし得ることを示す。
成熟Zucker脂肪過多ラット（fa/fa;325〜350g）また
は非肥満Zuckerラット（Fa/＋;250〜275g）のそれぞれ
を２つの群に分けた。fa/faおよびFa/＋ラットのそれぞ
れの１つの群は250μg/kgのEX−２を、１日３回、86日
間、次いで１日２回の処置をさらに29日間腹腔内（ip）
注射により受けた。fa/faおよびFa/＋ラットの他の群
は、同じスケジュールで生理食塩液を受けた。
EX−２の投与は、fa/faおよびFa/＋ラットの体重増加
における有意な減少を引き起こした（図４を参照のこ
と）。具体的には、生理食塩水液処置fa/faラットは105
日の処置の間に約360g増加したが、EX−２処置fa/faラ
ットは275gのみの増加であり、これは体重増加の24％の
減少を示す。明らかに、この体重の減少は精巣上体の脂
肪パッド重量の減少に相関し、これは、やせた筋肉量で
はなく、脂肪重量がEX−２の投与により減少することを
示した。Fa/＋ラットでは、体重増加量の低下はより適
度であったが、さらに、やせた筋肉量よりもむしろ脂肪
量に相関していた。これらの結果は、サイトカイン調節
剤が、脂肪の蓄積を減少させることにより、正常および
肥満の被験体において体重増加量を低下させ得ることを
示す。
他の実験では、fa/faラットは、0.5〜10mg/kgのEX−
２を、１日２回、14日間（１〜20mg/日）受けた。体重
増加量の低下率を各群で観察した。さらに、20mg EX−2
/日で処置したラットは体重の約10％減少を示した。こ
の体重の消失は、コントロールと比較して、EX−２処置
ラットによる消費の増加に相関した。これらの結果は、
サイトカイン調節剤が被験体の体重を減少させるに有用
であることを示す。
上に提供した実施例を参照して本発明を記載したが、
種々の改変が本発明から逸脱することなく当業者により
行われ得ることが理解されるべきである。従って、本発
明は以下の請求の範囲に述べられる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＤＤ Ｃ０７Ｋ 7/06 ＡＤＰ 7/64 ＡＧＺ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＢＡ 45/00 ＡＤＵ ＡＣＤ Ｃ０７Ｋ 5/087 ＡＧＺ 5/117 ＡＢＮ 5/12 ＡＣＶ 7/06 ＡＤＰ 7/64 ＡＤＤ 早期審査対象出願 (72)発明者 バス， アマレシュ アメリカ合衆国 カリフォルニア 92129， サン ディエゴ，ビア ホン ドナド ナンバービー 15058 (72)発明者 ファーガン， パトリック アメリカ合衆国 カリフォルニア 92025， エスコンディード，ガム ト リー グレン 3738 (72)発明者 ホーテン， リチャード エイ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 92014， デル マー，ランチョ ビエ ジョ 4939 (72)発明者 ローリス， コスタス シー. アメリカ合衆国 カリフォルニア 92007， カーディフ バイ ザ シー, ラグーン ビュー ドライブ 2363 (72)発明者 オムホルト， ポール アメリカ合衆国 カリフォルニア 92128， サン ディエゴ，シャロン レーン 11988 (72)発明者 スート， マーク ジェイ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 92121， サン ディエゴ，ピクラス ストリート 12465 (72)発明者 ウェーバー， パトリシア エイ. アメリカ合衆国 カリフォルニア 92119， サン ディエゴ，ベル ブル フ アベニュー 6556 (72)発明者 テューティル， ロナルド アール. アメリカ合衆国 カリフォルニア 92025， エスコンディード，ビスタ デル セムブラド 2704 (56)参考文献 特表 平８−508299（ＪＰ，Ａ) 米国特許5049547（ＵＳ，Ａ) 米国特許5420109（ＵＳ，Ａ) 国際公開95／13086（ＷＯ，Ａ１) 欧州公開427458（ＥＰ，Ａ１) 欧州公開292291（ＥＰ，Ａ２) Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．, ｖｅｌ．15，Ｎｏ．４（1967）Ｐ．504 −510 Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａ ｃｔａ．ｖｏｌ．127（1966）Ｐ．545− 549 Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉ ｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ ｙ，ｖｏｌ．269，Ｎｏ．47，（1994) Ｐ．29846−29854 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 123；103078 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 117；40660 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 107；109706 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ 105；184376 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) A61K 38/06 - 38/08 C07K 5/087,5/117,5/12 C07K 7/06,7/64 A61K 38/12 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (58)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】X5−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp−X3で表
    されるペプチド： ここで、X5は、ＨまたはCOCH3であり； X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」はC6H5であり；そして「ｎ」は、
    ０、１、２または３である。
  2. 【請求項２】X5がCOCH3である、請求項１のペプチド。
  3. 【請求項３】ＹがH2またはＳである場合を除いてR5がOH
    ではない、請求項１に記載のペプチド。
  4. 【請求項４】以下からなる群から選択されるアミノ酸配
    列で表されるペプチド：
  5. 【請求項５】変化したまたは異常なサイトカイン活性に
    より特徴付けられる状態を有する被験体におけるサイト
    カイン活性を増強するための薬学的組成物であって、該
    サイトカイン活性がIL−６、TNF、IL−１およびIL−８
    以外の少なくともひとつのサイトカインの活性であり、
    そして該組成物が以下のペプチドの有効量を含有する、
    組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  6. 【請求項６】前記サイトカイン活性がIL−10活性であ
    る、請求項５に記載の薬学的組成物。
  7. 【請求項７】前記状態が炎症応答である、請求項５に記
    載の薬学的組成物。
  8. 【請求項８】前記状態が悪液質である、請求項５に記載
    の薬学的組成物。
  9. 【請求項９】前記状態が病原免疫原性応答である、請求
    項５に記載の薬学的組成物。
  10. 【請求項１０】前記状態が成人呼吸窮迫症候群である、
    請求項５に記載の薬学的組成物。
  11. 【請求項１１】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体における廃用性体調偏移の影響を減少させるため
    の薬学的組成物であって、以下のペプチドの有効量を含
    む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  12. 【請求項１２】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の器官を器官損傷から保護するための薬学的組成
    物であって、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  13. 【請求項１３】前記器官損傷が、器官移植、免疫抑制剤
    の投与、および虚血−再潅流からなる群から選択される
    状態の結果である、請求項12に記載の薬学的組成物。
  14. 【請求項１４】前記免疫抑制剤がサイクロスポリンであ
    る、請求項13に記載の薬学的組成物。
  15. 【請求項１５】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体におけるガン化学療法の有害な副作用を改善する
    ための薬学的組成物であって、以下のペプチドの有効量
    を含む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  16. 【請求項１６】前記有害作用が、ガン化学療法剤の腎毒
    作用である、請求項15に記載の薬学的組成物。
  17. 【請求項１７】前記ガン化学療法剤が、シスプラチン、
    タキソール（登録商標）およびドキソルビシンからなる
    群から選択される、請求項16に記載の薬学的組成物。
  18. 【請求項１８】サイトカイン活性を調節することにより
    酸化窒素およびサイトカインにより媒介される疾患を有
    する被験体を処置するための薬学的組成物であって、以
    下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  19. 【請求項１９】前記疾患が、糖尿病および糸球体腎炎か
    らなる群から選択される、請求項18に記載の薬学的組成
    物。
  20. 【請求項２０】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の体重を減少させるための薬学的組成物であっ
    て、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  21. 【請求項２１】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の酸素消費量を増加させるための薬学的組成物で
    あって、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X1は ＨまたはCOCH3であり； X2は であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり；
    そして R6は、ＨまたはR3であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  22. 【請求項２２】変化したまたは異常なサイトカイン活性
    により特徴付けられる状態を有する被験体におけるサイ
    トカイン活性を増強するための薬学的組成物であって、
    該サイトカイン活性がIL−６、TNF、IF−１およびIL−
    ８以外の少なくともひとつのサイトカインの活性であ
    り、そして該組成物が以下のペプチドの有効量を含む、
    組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  23. 【請求項２３】前記サイトカイン活性がIL−10活性であ
    る、請求項22に記載の薬学的組成物。
  24. 【請求項２４】前記状態が炎症応答である、請求項22に
    記載の薬学的組成物。
  25. 【請求項２５】前記状態が悪液質である、請求項22に記
    載の薬学的組成物。
  26. 【請求項２６】前記状態が病原免疫原性疾患である、請
    求項22に記載の薬学的組成物。
  27. 【請求項２７】前記状態が成人呼吸窮迫症候群である、
    請求項22に記載の薬学的組成物。
  28. 【請求項２８】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体における廃用性体調偏移の影響を減少させるため
    の薬学的組成物であって、以下のペプチドの有効量を含
    む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  29. 【請求項２９】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の器官を器官損傷から保護するための薬学的組成
    物であって、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  30. 【請求項３０】前記器官損傷が、器官移植、免疫抑制剤
    の投与、および虚血−再潅流からなる群から選択される
    状態の結果である、請求項29に記載の薬学的組成物。
  31. 【請求項３１】前記免疫抑制剤がサイクロスポリンであ
    る、請求項30に記載の薬学的組成物。
  32. 【請求項３２】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体におけるガン化学療法の有害な副作用を改善する
    ための薬学的組成物であって、以下のペプチドの有効量
    を含む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  33. 【請求項３３】前記有害な副作用が、腎毒性である、請
    求項32に記載の薬学的組成物。
  34. 【請求項３４】前記化学療法が、シスプラチン、タキソ
    ール（登録商標）、およびドキソルビシンからなる群か
    ら選択される化学療法剤を投与する工程を包含する、請
    求項32に記載の薬学的組成物。
  35. 【請求項３５】サイトカイン活性を調節することにより
    酸化窒素およびサイトカインにより媒介される疾患を有
    する被験体を処置するための薬学的組成物であって、以
    下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  36. 【請求項３６】前記疾患が、糖尿病および糸球体腎炎か
    らなる群から選択される、請求項35に記載の薬学的組成
    物。
  37. 【請求項３７】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の体重を減少させるための薬学的組成物であっ
    て、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1はＨ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2PhまたはCO
    O−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  38. 【請求項３８】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の酸素消費量を増加させるための薬学的組成物で
    あって、以下のペプチドの有効量を含む、組成物： ここで： X4は H,COCH3であるか、または存在せず X5はHis,H,またはCOCH3であり；そして X3は またはR5であり； ここで、Ｙは、Ｏ、H2またはＳであり； R1は、Ｈ、COCH3、C2H5、CH2Ph、COPh、COOCH2Phまたは
    COO−ｔ−ブチルであり； R2は、ＨまたはCOCH3であり； R4は、（CH2）ｍ−CONH2または（CH2）ｍ−CONHR1であ
    り； R5は、OH、OR3、NH2、SH、NHCH3またはNHCH2Phであり； R6は、ＨまたはR3であり；そして R3は、１個〜６個の炭素原子を有する直鎖または分枝ア
    ルキル基、あるいは３個〜６個の炭素原子を有する環状
    アルキル基であり； そして、ここで「Ph」は、C6H5であり；「ｍ」は、１、
    ２または３であり；そして「ｎ」は、０、１、２または
    ３である。
  39. 【請求項３９】変化したまたは異常なサイトカイン活性
    により特徴付けられる状態を有する被験体におけるサイ
    トカイン活性を調節するための薬学的組成物であって、
    請求項４に記載のペプチドの有効量を含有する、薬学的
    組成物。
  40. 【請求項４０】変化したまたは異常なサイトカイン活性
    により特徴付けられる状態を有する被験体におけるサイ
    トカイン活性を増強するための薬学的組成物であって、
    ペプチドシクロ（His−（Ｄ）Phe−Arg−（Ｄ）Trp）の
    有効量を含有する、組成物。
  41. 【請求項４１】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体における廃用性体調偏移の影響を減少させるため
    の薬学的組成物であって、以下の配列で表されるペプチ
    ドの有効量を含有する、組成物：
  42. 【請求項４２】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の器官を器官損傷から保護するための薬学的組成
    物であって、以下の配列で表されるペプチドの有効量を
    含有する、組成物：
  43. 【請求項４３】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体におけるガン化学療法の有害な副作用を減少する
    ための薬学的組成物であって、以下の配列で表されるペ
    プチドの有効量を含有する、組成物：
  44. 【請求項４４】サイトカイン活性を調節することにより
    酸化窒素およびサイトカインにより媒介される疾患を有
    する被験体を処置するための薬学的組成物であって、以
    下の配列で表されるペプチドの有効量を含有する、組成
    物：
  45. 【請求項４５】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の体重を減少させるための薬学的組成物であっ
    て、以下の配列で表されるペプチド有効量を含有する、
    組成物：
  46. 【請求項４６】サイトカイン活性を調節することにより
    被験体の酸素消費量を上昇させるための薬学的組成物で
    あって、以下の配列で表されるペプチドの有効量を含有
    する、組成物：
  47. 【請求項４７】被験体におけるサイトカインのレベルを
    上昇させるための薬学的組成物であって、以下の配列で
    表されるペプチドの有効量を含有する、組成物：
  48. 【請求項４８】前記サイトカインがIL−10である、請求
    項47に記載の薬学的組成物。
  49. 【請求項４９】R5がNH2である、請求項３に記載のペプ
    チド。
  50. 【請求項５０】R1およびR2が同時にＨではない、請求項
    ５、11、12、15、18、20、21、22、28、29、32、35、37
    または38に記載の薬学的組成物。
  51. 【請求項５１】R1およびR2の少なくとも１つがCOCH3で
    ある、請求項５、11、12、15、18、20、21、22、28、2
    9、32、35、37または38に記載の薬学的組成物。
  52. 【請求項５２】ＹがH2またはＳである場合を除いてR5が
    OHではない、請求項５、11、12、15、18、20、21、22、
    28、29、32、35、37または38に記載の薬学的組成物。
  53. 【請求項５３】R5がNH2である、請求項５、11、12、1
    5、18、20、21、22、28、29、32、35、37または38に記
    載の薬学的組成物。
  54. 【請求項５４】R1が、Ｈ、C2H5およびCH2Phからなる群
    から選択される、請求項５、11、12、15、18、20、21、
    22、28、29、32、35、37または38に記載の薬学的組成
    物。
  55. 【請求項５５】R1およびR2がそれぞれＨである、請求項
    ５、11、12、15、18、20、21、22、28、29、32、35、37
    または38に記載の薬学的組成物。
  56. 【請求項５６】X1がノルロイシン、ノルバリン、ロイシ
    ンまたはイソロイシンからなる群から選択される、請求
    項５、11、12、15、18、20、または21に記載の薬学的組
    成物。
  57. 【請求項５７】R5がX1と共有結合し、これにより環状ペ
    プチドを形成する、請求項５、11、12、15、18、20、ま
    たは21に記載の薬学的組成物。
  58. 【請求項５８】R5がX4と共有結合し、これにより環状ペ
    プチドを形成する、請求項22、28、29、32、35、37、ま
    たは38に記載の薬学的組成物。
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Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5420109A (en) * 1993-11-12 1995-05-30 Houghten Pharmaceuticals, Inc. Cytokine restraining agents
AU5813098A (en) * 1997-01-09 1998-08-03 G.D. Searle & Co. Attenuation of opioid tolerance by inhibiting inducible nitric oxide synthase pathways in the treatment of pain
US20020197250A1 (en) * 2001-04-10 2002-12-26 Renal Tech International Biocompatible devices, systems, and methods for reducing levels of pro-inflammatory or anti-inflammatory stimulators or mediators in the blood
US20020197249A1 (en) * 2001-04-10 2002-12-26 Renal Tech International Devices, systems, and methods for reducing levels of pro-inflammatory or anti-inflammatory stimulators or mediators in blood products
US20020159995A1 (en) * 1997-07-30 2002-10-31 Renal Tech International Devices, systems, and methods for reducing levels of pro-inflammatory or anti-inflammatory stimulators or mediators in the blood, generated as a result of extracorporeal blood processing
US8329388B2 (en) 1997-07-30 2012-12-11 Cytosorbents, Inc. Biocompatible devices, systems, and methods for reducing levels of proinflammatory of antiinflammatory stimulators or mediators in the blood
US20020198487A1 (en) * 2001-04-10 2002-12-26 Renal Tech International Devices, systems, and methods for reducing levels of pro-inflammatory or anti-inflammatory stimulators or mediators in physiologic fluids
US6242253B1 (en) 1997-10-09 2001-06-05 Regents Of The University Of California IkB kinase, subunits thereof, and methods of using same
US6350430B1 (en) 1997-10-27 2002-02-26 Lion Bioscience Science Ag Melanocortin receptor ligands and methods of using same
US6673807B1 (en) * 1998-04-06 2004-01-06 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Immunosuppressive imidazole derivatives and their combination preparations with tacrolimus or cyclosporins
WO1999055339A1 (en) * 1998-04-24 1999-11-04 Biogen, Inc. Adenosine a1 receptor antagonist containing composition and method for restoring diuretic and renal function
US6284735B1 (en) 1998-04-28 2001-09-04 Lion Bioscience Ag HP-3228 and related peptides to treat sexual dysfunction
WO1999055679A1 (en) 1998-04-28 1999-11-04 Trega Biosciences, Inc. Isoquinoline compound melanocortin receptor ligands and methods of using same
US6534503B1 (en) 1998-04-28 2003-03-18 Lion Bioscience Ag Melanocortin receptor-3 ligands to treat sexual dysfunction
GB9816234D0 (en) * 1998-07-24 1998-09-23 William Harvey Research Limite Compounds for use in the treatment of inflammation
US6015804A (en) * 1998-09-11 2000-01-18 The Research Foundation Of State University Of New York Method of using tetracycline compounds to enhance interleukin-10 production
US6716810B1 (en) 1998-12-09 2004-04-06 Eleanor Roosevelt Institute Composition and method for regulation of body weight and associated conditions
US9006175B2 (en) 1999-06-29 2015-04-14 Mannkind Corporation Potentiation of glucose elimination
WO2001005401A1 (en) * 1999-07-16 2001-01-25 Trega Biosciences, Inc. Melanocortin receptor-3 ligands to treat sexual dysfunction
RU2002102868A (ru) * 1999-08-09 2004-01-27 Трипеп Аб (Se) Ингибиторы полимеризации белка и способы их использования
US7169603B2 (en) * 2000-07-14 2007-01-30 Mgi Pharma Biologics, Inc. α-MSH related compounds and methods of use
AU2000275771B2 (en) 2000-09-11 2006-06-29 Therapro Technologies, Inc. Thionin as an antineoplastic and immunostimulant
AU2001292658A1 (en) * 2000-09-13 2002-03-26 Eleanor Roosevelt Institute Method for treatment of insulin resistance in obesity and diabetes
AU2002241859B2 (en) 2001-01-10 2007-07-19 St. Vincent's Institute Of Medical Research sFRP and peptide motifs that interact with sFRP and methods of their use
US20030022856A1 (en) * 2001-01-30 2003-01-30 The Regents Of The University Of Michigan Method for sustained release local delivery of drugs for ablation of unwanted tissue
US6878127B2 (en) 2001-04-10 2005-04-12 Renaltech International, Llc Devices, systems, and methods for reducing levels of pro-inflammatory or anti-inflammatory stimulators or mediators in the blood
US20020197252A1 (en) * 2001-04-10 2002-12-26 Renal Tech International Selective adsorption devices and systems
US6593455B2 (en) 2001-08-24 2003-07-15 Tripep Ab Tripeptide amides that block viral infectivity and methods of use thereof
WO2003024995A1 (en) 2001-09-19 2003-03-27 Tripep Ab Molecules that block viral infectivity and methods of use thereof
ATE385193T1 (de) 2002-03-20 2008-02-15 Mannkind Corp Inhalationsgerät
US7034004B2 (en) * 2002-05-07 2006-04-25 University Of Florida Peptides and methods for the control of obesity
CA2543132A1 (en) * 2003-10-23 2005-05-19 Celgene Corporation Methods of using and compositions comprising selective cytokine inhibitory drugs for treatment, modification and management of pain
TW200518768A (en) * 2003-11-17 2005-06-16 Pepgen Corp Methods for treatment of obesity and for promotion of weight loss
CN101010305B (zh) 2004-08-20 2010-08-11 曼金德公司 二酮哌嗪合成的催化反应
DK1791542T3 (en) 2004-08-23 2015-06-15 Mannkind Corp Diketopiperazinsalte for pharmaceutical delivery
US20090214618A1 (en) 2005-05-27 2009-08-27 Schoenfisch Mark H Nitric oxide-releasing particles for nitric oxide therapeutics and biomedical applications
MX358592B (es) 2005-09-14 2018-08-27 Mannkind Corp Método para formulación de fármaco basado en el aumento de la afinidad de superficies de micropartículas cristalinas hacia agentes activos.
RU2403059C2 (ru) 2006-02-22 2010-11-10 Маннкайнд Корпорейшн Способ улучшения фармацевтических свойств микрочастиц, содержащих дикетопиперазин и активный агент
KR101548092B1 (ko) 2008-06-13 2015-08-27 맨카인드 코포레이션 건조 분말 흡입기 및 약물 투여 시스템
US8485180B2 (en) 2008-06-13 2013-07-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery system
ES2421385T3 (es) 2008-06-20 2013-09-02 Mannkind Corp Aparato interactivo y procedimiento para establecer el perfil, en tiempo real, de esfuerzos de inhalación
TWI532497B (zh) 2008-08-11 2016-05-11 曼凱公司 超快起作用胰島素之用途
EP2334279A4 (en) * 2008-10-16 2013-03-20 Novan Inc STAIN OXIDE RELEASING PARTICLES FOR MOUTH CARE APPLICATIONS
US8314106B2 (en) 2008-12-29 2012-11-20 Mannkind Corporation Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents
EP2676695A3 (en) 2009-03-11 2017-03-01 MannKind Corporation Apparatus, system and method for measuring resistance of an inhaler
WO2010144789A2 (en) 2009-06-12 2010-12-16 Mannkind Corporation Diketopiperazine microparticles with defined specific surface areas
EP4249001A3 (en) 2009-08-21 2023-11-29 Novan, Inc. Topical gels
WO2011022680A2 (en) 2009-08-21 2011-02-24 Novan, Inc. Wound dressings, methods of using the same and methods of forming the same
US20110070269A1 (en) * 2009-09-24 2011-03-24 Therapro Technologies, Inc. Lipopolysaccharide isolated from pyrularia tissue and/or pyrularia-associated bacteria and uses thereof
EP2488591A1 (en) * 2009-10-13 2012-08-22 Novan, Inc. Nitric oxide-releasing coatings
JP5784622B2 (ja) 2009-11-03 2015-09-24 マンカインド コーポレ−ション 吸入活動をシミュレートするための装置及び方法
CN102985125A (zh) 2010-06-21 2013-03-20 曼金德公司 干粉药物输送系统和方法
US8591876B2 (en) 2010-12-15 2013-11-26 Novan, Inc. Methods of decreasing sebum production in the skin
WO2012118819A2 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Novan, Inc. Nitric oxide-releasing s-nitrosothiol-modified silica particles and methods of making the same
JP6133270B2 (ja) 2011-04-01 2017-05-24 マンカインド コーポレイション 薬剤カートリッジのためのブリスター包装
WO2012174472A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Mannkind Corporation High capacity diketopiperazine microparticles
JP6018640B2 (ja) * 2011-10-24 2016-11-02 マンカインド コーポレイション 疼痛を緩和するのに有効な鎮痛組成物並びに当該組成物を含む乾燥粉末及び乾燥粉末薬剤輸送システム
RU2650035C2 (ru) 2012-07-12 2018-04-06 Маннкайнд Корпорейшн Системы и способы доставки сухих порошковых лекарств
EP2911690A1 (en) 2012-10-26 2015-09-02 MannKind Corporation Inhalable influenza vaccine compositions and methods
EP3587404B1 (en) 2013-03-15 2022-07-13 MannKind Corporation Microcrystalline diketopiperazine compositions, methods for preparation and use thereof
MX2020009878A (es) 2013-07-18 2022-07-27 Mannkind Corp Composiciones farmaceuticas en polvo seco estables al calor y metodos.
EP3030294B1 (en) 2013-08-05 2020-10-07 MannKind Corporation Insufflation apparatus
US10307464B2 (en) 2014-03-28 2019-06-04 Mannkind Corporation Use of ultrarapid acting insulin
US10561806B2 (en) 2014-10-02 2020-02-18 Mannkind Corporation Mouthpiece cover for an inhaler

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4457864A (en) * 1981-10-23 1984-07-03 University Patents, Inc. Synthetic analogues of α-melanotropin
US4485039A (en) * 1982-06-11 1984-11-27 University Patents, Inc. Synthetic analogues of α-melanotropin
US4649191A (en) * 1984-05-10 1987-03-10 Gibson-Stephens Neuropharmaceuticals, Inc. Conformationally constrained alpha-melanotropin analogs with specific central nervous system activity
US5157023A (en) * 1984-08-21 1992-10-20 Lipton James M Antipyretic and anti-inflammatory lys pro val compositions and method of use
US5028592A (en) * 1986-08-08 1991-07-02 Lipton James M Antipyretic and anti-inflammatory peptides
US5462927A (en) * 1985-04-30 1995-10-31 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Peptides aiding nerve regeneration
DE3783541T2 (de) * 1986-02-03 1993-06-17 University Patents Inc Verfahren zur stimulierung von melanozyten durch lokales anbringen von alpha-msh-analogen, sowie zusammensetzungen.
ATE109793T1 (de) * 1987-05-22 1994-08-15 University Patents Inc Lineare und zyklische analoge von alpha-msh- fragmenten mit ausserordentlicher wirkung.
US5049547A (en) * 1988-02-11 1991-09-17 University Patents, Inc. Composition for stimulating integumental melanocytes
ZA908610B (en) * 1989-11-03 1991-08-28 Univ Tulane Peptides aiding nerve regeneration
US5408038A (en) * 1991-10-09 1995-04-18 The Scripps Research Institute Nonnatural apolipoprotein B-100 peptides and apolipoprotein B-100-apolipoprotein A-I fusion peptides
IL101769A (en) * 1992-05-03 2007-02-11 Yeda Res & Dev Modulation of TNF receptor action
FR2691465B1 (fr) * 1992-05-25 1995-08-11 Pf Medicament Complexes comprenant au moins un peptide derive de l'alpha msh, peptide, microsphere, medicament et composition galenique les comprenant.
JPH08500290A (ja) * 1993-06-16 1996-01-16 シェブロン リサーチ アンド テクノロジー カンパニー 水性石油廃液流からの有毒物質の除去法
US5420109A (en) * 1993-11-12 1995-05-30 Houghten Pharmaceuticals, Inc. Cytokine restraining agents

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．ｖｏｌ．１２７（１９６６）Ｐ．５４５−５４９
Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｅｌ．１５，Ｎｏ．４（１９６７）Ｐ．５０４−５１０
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １０５；１８４３７６
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １０７；１０９７０６
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １１７；４０６６０
Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ １２３；１０３０７８
Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２６９，Ｎｏ．４７，（１９９４）Ｐ．２９８４６−２９８５４

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Publication number Publication date
CA2189250C (en) 2000-08-01
EP0759770A1 (en) 1997-03-05
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CA2189250A1 (en) 1996-09-12
JPH10509737A (ja) 1998-09-22
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