JP2002516873A - 炎症性自己免疫疾患の処置におけるサイクロスポリン類の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリン、特に[MeIle]⁴−シクロスポリンは、関節リウマチのような炎症性自己免疫疾患の処置および予防に有効である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、サイクロスポリン(cyclosporins)の類の新規使用、および、特に、
非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリン類の新規薬学的使用に関す
る。

【０００２】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリン類ならびにAIDSおよびAI
DS−関連疾患の処置および予防におけるそれらの使用は、欧州特許第４８４２８
１号に記載され、それはサイクロスポリンのクラスの化合物、それらの命名法お
よび作用形態の一般的記載を含む。EP0,484,281Bの記載、特に、上記に関する一
般的記載および以下に関連する記載の他の部分を、本発明の教示に引用して包含
させる。

【０００３】 驚くべきことに、シクロフィリンに結合するが、免疫抑制性ではないサイクロ
スポリン類が炎症性自己免疫疾患およびその状態に阻害作用を示すことが判明し
た。

【０００４】 サイクロスポリン化合物は、Quesniaux, Eur. J. Immunol. 1987, 17, 1359-1
365に記載の競合ELISA試験において、シクロスポリン(Ciclosporin)(サイクロス
ポリンＡとも呼ぶ)と同様に、その少なくとも５分の１がヒト組換えシクロフィ
リンに結合する場合に、シクロフィリンに結合すると考えられる。本試験におい
て、試験するサイクロスポリン化合物を、シクロフィリンの被覆ＢＳＡ−シクロ
スポリンとのインキュベーション中に添加し、競合剤なしでコントロール反応の
５０％阻害をもたらすのに必要な濃度を計算する(ＩＣ₅₀)。結果は結合比(ＢＲ)
として示し、これは試験化合物のＩＣ₅₀と、試験するサイクロスポリンの代わり
にシクロスポリンを使用した同様の試験のＩＣ₅₀の比率の基底１０に対する対数
である。即ち、１.０のＢＲは、試験化合物がシクロフィリンにシクロスポリン
よりも１×１０倍低く結合することを示し、負の値はシクロスポリンよりも強い
結合を示す。

【０００５】 炎症性自己免疫疾患の阻害剤として働くサイクロスポリンは、０.７より低い
ＢＲ(log₁₀５＝約０.７のため)を有し、好ましくは０かそれ以下である。

【０００６】 サイクロスポリンは、混合リンパ球反応(ＭＲＬ)においてシクロスポリンより
も５％より多くない、好ましくは２％より多くない活性を有するとき、非免疫抑
制性であるとみなされる。混合リンパ球反応は、T. Meo "Immunological Method
s", L. Lefkovits and B. Peris, Eds., Academic Press, N.Y. pp. 227-239 (1
979)により記載されている。Balb/cマウス(雌、８−１０週齢)からの脾臓細胞(
０.５×１０⁶)を、５日間、ＣＢＡマウス(雌、８−１０週齢)由来の０.５×１０ ⁶ 照射(２０００ラド)またはマイトマイシンＣ処理脾臓細胞と共インキュベート
する。照射同種異系細胞はBalb/c脾臓細胞に増殖反応を誘発し、それはＤＮＡに
取りこまれる標識前駆体により測定できる。刺激細胞が照射(またはマイトマイ
シンＣ処理)されているため、それらはBalb/c細胞に増殖により応答しないが、
抗原性は保持する。ＭＲＬにおける試験化合物で見られるＩＣ₅₀を、平行実験で
シクロスポリンで見られたものと比較する。

【０００７】 上記ＭＬＲで非免疫抑制性と判断された化合物が、しばしば、IL-2 Reporter
Gene Assayで不活性であり、したがって、IL-2 Reporter Gene Assayを、本発明
で使用するための非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリン化合物の
、例えば、一次スクリーニングに使用し得る。

【０００８】 炎症性自己免疫状態の阻害剤として活性な非免疫抑制性、シクロフィリン結合
サイクロスポリン化合物を、以後、活性化合物と呼ぶ。

【０００９】 活性化合物は、特に、自己免疫疾患および炎症状態、特に、関節炎(たとえば
、関節リウマチ、慢性進行性関節炎および変形性関節炎)およびリウマチ疾患の
ような、病因が自己免疫要素を含む炎症性状態の処置、予防、または軽減に有用
である。活性化合物を用い得る具体的自己免疫疾患は、自己免疫血液学的疾患(
例えば、溶血性貧血、無形成性貧血、真正赤血球性貧血および特発性血小板減少
症)、全身性エリテマートーデス、ポリコンドリティス、スクレロドーマ、ヴェ
グナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スティーブ
ｎ−ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫性炎症性大腸疾患(例えば、
潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む)、膵臓炎、内分泌性眼科疾患、グレーヴ
ズ病、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、糖尿病、例えば
、若年性糖尿病(Ｉ型糖尿病)、ブドウ膜網膜炎(uveoretinitis)(ベーチェット病
)、ブドウ膜炎(前部および後部)、乾性角結膜炎およびを春季角結膜炎、間質性
肺繊維症、乾癬性関節炎および糸球体腎炎(ネフローゼ症候群ありおよびなし、
特発性ネフローゼ症候群または最小変化ネフローゼを含む)、喘息および自己免
疫要素を含む他の炎症性気道疾患、甲状腺炎(橋本Ghoto病)、脳脊髄炎、中枢神
経系の炎症性状態および類似の自己免疫疾患を含む。

【００１０】 サイクロスポリンの炎症性自己免疫状態の阻害剤としての活性は、以下の試験
系で証明し得る： 実験的自己免疫ブドウ膜炎 雌ルイスラット、１２週齢(ＢＲＬ、Basel)に右足肉趾に５０μgの精製ウシ網
膜Ｓ−抗原を注射する。抗原をリン酸緩衝化食塩水で希釈し、フロインド完全ア
ジュバントおよびBactgo M Tuberculosis H37 RA(DiFco)で５０：５０(v/v)に乳
化する。注射する用量は０.１mlであり、５０μl完全アジュバントおよび１.１
４mg Mycobacterium tuberculosisを含む。注射１０日後に開始して、目を毎日
細隙灯を使用して検査する。目の炎症の程度を、０−４のスケールを使用した半
定量的方法で採点する： ０ 可視的変化なし １ 脈管構造にわずかな変化、虹彩および結膜血管の一定の拡張 ２ 中程度の変化、血管透明性の欠失、拡張した虹彩および血管、濁った中膜 ３ 著しい変化、目の突出、濁った瞳孔、血管構造の明らかな損失、一定の凝血
４ 重篤な変化、著しい目の突出、構造の完全な損失、拡散した凝血 参考文献：Wacker W. B., Donoso L. A., Kalsow C. M., Yakeelov J. A. Jr.,
Organisciak D. T.: Experimental Allergic Uveitis. Isolartion, Characteri
sation and Locallization of a soluble Uveitopathogenic antigen from bovi
ne retina. J. Immunol. 119 (1977) 1949-1958

【００１１】 ラットにおける実験的自己免疫脳脊髄炎(ＥＡＥ) 雄ウィスターラットに、後足にウシ脊髄および完全フロインドアジュバントの
混合物を注射する。疾病の症状(尾および両後足の麻痺)が通常１６日以内に発症
する。疾病の動物の数および疾病の発症の時間を記録する。上記試験モデルにお
ける疾病発症の阻害は薬学的有用性の指標である。 参考文献：Levine et al., Am. J. Path. 47 (1965) 61; McFarlin et al., J.
Immunol. 113 (1974) 712; Borel, Transplant. & Clin. Immunol. 13 (1981) 3
]。

【００１２】 フロインドアジュバント誘発関節炎 ＯＦＡおよびウィスタ−ラット(雄または雌、体重１５０ｇ)に、尾の付け根ま
たは後足に、０.６mgの凍結乾燥加熱殺菌Mycobacterium smegmatisを含む０.１m
lをi.c.注射する。関節炎の発症のモデルにおいて、処置をアジュバント注射直
後に開始する(日１−１８)；確立した関節炎モデルにおいて、処理を、２次炎症
が十分に発症した１４日目に開始する(日１４−２０)。実験の最後に、関節の腫
脹をマイクロキャリパーの手段で測定する。 参考文献：Winter & Nuss, Arthritis and Rheumatism 9 (1966) 394; Billingh
am & Davies, Handbook of Experimental Pharmacology (Vane & Ferreira Eds,
Springer Verlag, Berlin) 50/II, (1979) 108-144]

【００１３】 コラーゲン誘発関節炎 ラットを、尾の付け根の回りに皮内投与したタイプIIコラーゲンで免疫化する
。１０−１２日後、関節炎の発症が起こり、紅斑および関節の腫脹により類型化
する。動物の、通常、二つの異なる投与量の１日２回の試験化合物のp.o.による
処置を腫脹の発症の直後に開始し、１０日まで続ける。コントロール関節炎動物
および登録商標COX阻害剤で処理するラットを実験に包含させる。後足の腫脹を
定期的に評価する。実験の最後に、動物を殺し、関節を組織学的パラメーターの
評価のために調製する。腫脹の良好な阻害、例えば、登録商標COX阻害剤の約５
０％またはそれ以上の効果を示す試験化合物を更なる実験のために選択する。

【００１４】 インビトロ走化性(例えば、ボイデンチャンバーを使用した)およびシクロフィ
リン誘発好中球浸潤および類似のアッセイも使用し得る。 多くの活性化合物が、シクロスポリンと、特に４および／または５位で異なる
構造を有することが判明した。活性化合物の構造がシクロスポリンのものと異な
り得る他の位置は６位および７位である。

【００１５】 活性化合物の他のグループは、４位のMeLeu基が異なるＮ−メチル化アミノ酸
、例えば、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyrまたは
MeTyr(O-PO(OH)₂)またはProで置換されているサイクロスポリン類である。MeIle
およびMeThrに加えて、アロ形のMeaIleおよびMeaThrも使用し得る。アロ形にお
いて、β位の立体化学は、天然アミノ酸ものもと逆の配置になっており、正常形
およびアロ形はジアステレオ異性体の対を成す。

【００１６】 活性化合物の更なるグループは、５位のValがＮ−アルキル−、好ましくはＮ
−メチル−、アミノ酸で置換されているものである。好ましくは、Ｎ−アルキル
化されているアミノ酸はValまたはLeuである。好ましくは、[Val]⁵は非分枝鎖Ｃ _1-6 アルキル基、好ましくはメチル、エチル、ｎ−プロピル、特にメチルで置換
されている。後者の活性化合物の好ましいグループは全て新規である。

【００１７】 加えてまたは代替として、ある活性化合物は、シクロスポリンと１、２、３お
よび／または６位が異なり得る。

【００１８】 本発明で使用する活性化合物の特定のクラスは、式Ａ

【化５】 [式中、Ｂは式Ｂ

【化６】 〔式中、ａは２位のαAbuへの結合を意味する； ｂは５位におけるＣ残基への結合を意味する； Alkは２から６個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキレンまたは３から６
個の炭素原子を含むシクロアルキレン、および Ｒは カルボキシまたはアルキルオキシカルボニル残基； 基−ＮＲ₁Ｒ₂ (式中、Ｒ₁およびＲ₂は同じまたは異なって水素、アルキル、Ｃ_2-4アルケニル
、Ｃ_3-6シクロアルキル、フェニル(所望によりハロゲン、アルコキシ、アルコキ
シカルボニル、アミノ、アルキルアミノまたはジアルキルアミノで置換されてい
てもよい)またはベンジルまたは、５または６個の環原子および１から３個のヘ
テロ原子を含む飽和または不飽和へテロ環式基、またはＲ₁およびＲ₂は、それら
が結合している窒素原子と共に４から６個の環原子を含み、所望により窒素、酸
素または硫黄からなる群から選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよく、
所望によりアルキル、フェニルまたはベンジルで置換されていてもよい飽和また
は不飽和ヘテロ環を意味する)； 式

【化７】 (式中、Ｒ₁およびＲ₂は上記で定義の意味、Ｒ₃は水素またはアルキル基を意味
し、ｎは２から４の整数を意味する) の基〕 のアミノ酸残基である； ＣはMeLeuまたは４−ヒドロキシ−MeLeuである] のシクロスポリン誘導体およびその薬学的に許容される塩である。

【００１９】 このクラスのシクロスポリン誘導体は、更に、公開国際特許出願WO98/28328、
WO98/28329およびWO98/28330に記載されている。このクラスの特に好ましい化合
物は、式中Ｂがアミノ酸残基Ｂ'

【化８】 であり、Ｃがアミノ酸残基４−ヒドロキシ−MeLeuである式Ａの化合物である。

【００２０】 活性化合物の特に好ましいグループは、式Ｉ：

【化９】 〔式中、ＷはMeBmt、ジヒドロ−MeBmtまたは８'−ヒドロキシ−MeBmt； ＸはαAbu、Val、Thr、NvaまたはＯ−メチルスレオニン(MeOThr)； ＲはSarまたは(Ｄ)−MeAla； ＹはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyr、MeT
yr(O-PO(OH)₂、MeaIleまたはMeThrまたはPro； ＺはVal、Leu、N-Alk-ValまたはN-Alk-Leu (式中、AlkはMeまたは、所望によりフェニル、または６環員を含むＮ、Ｓまたは
Ｏヘテロアリール、または所望によりハロゲンで置換されていてもよいフェニル
で置換されていてもよいビニルで置換されているMeである) ＱはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeuまたはMeAlaである〕 の化合物およびその薬学的に許容される塩から成る。

【００２１】 基Ｗ、Ｘ、Ｙ、ＺおよびＱは、独立して以下の好ましい意味を有する： Ｗは好ましくはＷ'であり、Ｗ'はMeBmtまたはジヒドロ−MeBmtである； Ｘｈａ好ましくはＸ'であり、Ｘ'はαAbuまたはNvaであり、より好ましくはＸ"
であり、Ｘ"はαAbuである； Ｙは好ましくはＹ'であり、Ｙ'はγ−ヒドロキシ−MeLeu、MeVal、MeThr、MeAla
またはMeTyr(O-PO(OH)₂)である； Ｚは好ましくはＺ'であり、Ｚ'はValまたはMeValである；そして Ｑは好ましくはＱ'であり、Ｑ'はMeLeuである。

【００２２】 活性化合物の一つの特に好ましいグループは、式中、ＷがＷ'、ＸがＸ'、Ｙが
Ｙ'、ＺがＺ'およびＱがＱ'である式Ｉの化合物である。

【００２３】 特に好ましい式Ｉの活性化合物は： ａ)[ジヒドロ−MeBmt]¹−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｂ)[MeVal]⁴−シクロスポリン、 ｃ)[MeIle]⁴−シクロスポリン、 ｄ)[MeThr]⁴−シクロスポリン、 ｅ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｆ)[Nva]²−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｇ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁶−シクロスポリン、
ｈ)[MeVal]⁵−シクロスポリン、 ｉ)[MeOThr]²−[(D)MeAla]³−[MeVal]⁵−シクロスポリン、 ｊ)[８'−ヒドロキシ−MeBmt]¹−シクロスポリン、 ｋ)[MeAla]⁶−シクロスポリン、 ｌ)[DMeAla]³−[MeTyr(OPO(OH)₂)]⁴−シクロスポリン、 ｍ)[Ｎ−ベンジル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｎ)[Ｎ−５−フルオロ−ベンジル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｏ)[Ｎ−アリル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｐ)[Ｎ−３−フェニル−アリル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｑ)[Pro]⁴−シクロスポリンである。

【００２４】 特に好ましい活性化合物は、[MeIle]⁴−シクロスポリンおよび[γ−ヒドロキ
シ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、最も特には[MeIle]⁴−シクロスポリンである。 式Ｉの化合物に加えて、好ましい活性化合物は、例えば ｒ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁹−シクロスポリンを含む。

【００２５】 活性化合物は： １)発酵 ２)バイオトランスフォーメーション ３)誘導体化 ４)部分合成 ５)全合成 を含む方法により得られ得る。

【００２６】 これらの方法は、EP0484281Bの実施例に一般的におよびより具体的に記載され
る。この一般的記載およびこれらの実施例の教示は、本発明に引用して包含させ
る。EP0484281Bの実施例１１は、シクロスポリンに対する代表的活性化合物の免
疫抑制およびシクロフィリン結合活性の測定を記載し、この実施例の教示もまた
本発明の記載に包含させる。

【００２７】 活性化合物は、患者の炎症性自己免疫状態および疾患の予防および処置の両方
への使用が指示される。 このように、本発明は、炎症性自己免疫疾患または状態の処置または予防のた
めの医薬の製造における非自己免疫、シクロフィリン結合サイクロスポリンの使
用を提供する。

【００２８】 本発明は、更に、有効量の本発明の活性化合物を投与することを含む、炎症性
自己免疫状態および疾患の、このような疾患または状態に罹患しているまたは危
険のある患者の処置または予防のための方法を提供する。

【００２９】 活性化合物は、慣用の経路で、特に、経腸的に、例えば、経口的に、例えば、
飲用溶液、錠剤またはカプセルの形で、または非経腸的に、例えば、注射用溶液
または懸濁液の形で投与し得る。静脈内経路により指示される一日量は１から２
０mg／kg、好ましくは３から１０mg／kg、経口投与では１から５０mg／kg、好ま
しくは１０から３０mg／kgであり得る。

【００３０】 活性化合物の毒性は、シクロスポリンより低いと考えられる。活性化合物が免
疫抑制性でないため、免疫抑制に関連するシクロスポリンの副作用は避けられる
。シクロスポリンに付随する他の副作用、特に長期間使用による腎臓毒性および
中枢神経系毒性は、簡便にはシクロスポリンより低い。

【００３１】 活性化合物は、炎症性自己免疫疾患の処置および予防に、単独でまたは他の治
療剤、例えば、抗炎症性化合物および／または免疫抑制化合物と組合わせて使用
し得る。特に好ましい態様において、活性化合物は、カルシニューリン活性を阻
害しない免疫抑制性、シクロフィリン結合化合物の最近同定されたクラスである
サングリフェーリンsと組合わせて使用する。活性化合物と組合わせた使用に特
に好ましいサングリフェーリンsは、サングリフェーリンs AからL、特にサング
リフェーリンs A、B、CおよびDである。

【００３２】 このように、好ましい態様において、本発明は、有効量の本発明の活性化合物
およびサングリフェーリンを含む組合わせを投与することを含む、炎症性自己免
疫状態および疾患の、このような疾患または状態に罹患しているまたは危険のあ
る患者の処置または予防のための方法を提供する。

【００３３】 本発明は、本発明の活性化合物およびサングリフェーリンを含む、例えば、炎
症性自己免疫疾患または状態の処置または予防のための医薬組成物も提供する。 本発明の医薬組成物は、簡便には治療における同時、別々または連続した使用
のための組合わせ製剤の形である。このように、活性化合物およびサングリフェ
ーリンは、固定された組成物の形で一緒に投与し得、または別々に異なる時間に
投与し得る。典型的に、組成物は有効量の組合わせ製剤を含む単位投与形であり
得る。

【００３４】 活性剤のための好ましいガレヌス製剤は、局所および経口形を含む、英国特許
出願第2222770Aに記載のようなマイクロエマルジョンに基づくものである；また
英国特許出願第2209671Aに記載のような、脂肪酸サッカライドモノエステル、例
えば、サッカロースモノラウレートを含む固体溶液から得る経口および注射用形
を含む。経口投与用の適当な単位投与形は、例えば、調剤当たり２５から２００
mgの活性化合物を１回量当たりに含む。

【００３５】 EP0484281Bの製剤実施例Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは引用して本明細書に包含させる
： これらの製剤の個々の成分およびその製造法は、その内容を本明細書に引用し
て包含させる英国特許出願2222770に完全に記載されている。

【００３６】 活性化合物を他の化合物、例えば、サングリフェーリンsと共に投与する場合
、活性剤と他の化合物の適当な比率の類似の製剤を使用し得る。このように、例
えば、活性化合物とサングリフェーリンは、好ましくは、投与量当たり約１０か
ら約１００mg／kgの活性化合物で、約５：１から約５０：１(活性化合物po：サ
ングリフェーリン sc)の範囲の重量比で使用する。

【００３７】 代表的活性化合物の活性は、動物モデル生物学的活性アッセイＡ、ＢおよびＣ
で試験し、これは添付の図面を参照する： 図１は、免疫化９−１８日後(ｘ軸)のコントロール動物(Ａ．黒色棒)および[M
eIle]⁴−Cs処理動物(Ｂ．灰色棒)に関するＥＡＥにおける疾病得点(ｙ軸)のグラ
フである； 図２はＡ．−３０mg／kg [MeIle]⁴−Cs p.o.；Ｂ．１mg／kg サングリフェ
ーリン A s.c.；およびＣ． −３０mg／kg [MeIle]⁴−Cs p.o.＋１mg／kg
サングリフェーリン A s.c.で処置した動物のグループのアジュバント関節炎ア
ッセイの発症における腫脹(ｙ軸)の阻害の割合を示すグラフである； 図３は、１２日目に免疫化し、０から９日目に処置した(ｘ軸)、媒体(−□−
；EtOH １０％／コーン油／５mg／kg p.o.、６匹の動物)、[MeIle]⁴−Cs(−○
−；２×１２.５mg／kg／日 p.o.、７匹の動物)、[MeIle]⁴−Cs(−△−；２×
２５mg／kg／日 p.o.、７匹の動物)および登録商標COX阻害剤(−▼−；２×２.
５mg／kg／日 p.o.、４匹の動物)で処置したラットにおけるコラーゲン誘発関
節炎アッセイにおける後足の腫脹(mm −ｙ軸)を示すグラフである。

【００３８】 生物学的アッセイ Ａ．ラットにおける実験的自己免疫ラットにおける実験的自己免疫脳脊髄炎(Ｅ
ＡＥ) 本発明の代表的活性化合物である[MeIle]⁴−シクロスポリンを、３０mg／kgの
投与量で上記のような急性ＥＡＥアッセイで試験し、この疾患の発症を有意に阻
害することが判明する。得られる結果を図１に記載し、これれは免疫化後９から
１８日のコントロール動物および活性化合物処理動物の疾病の重症度を示すグラ
フである。コントロール動物は１１日目に０.５を超える得点を有し、１５およ
び１６日目に得点は２.０に近づく；一方、[MeIle]⁴−Cs処理動物は１２日目ま
で測定可能な得点はなく、１５日から１７日目に約０.５の最大得点となり、そ
の後減少する。

【００３９】 Ｂ．実験的自己免疫ブドウ膜網膜炎(ＥＡＵ) ｉ)[MeIle]⁴−シクロスポリンおよびサングリフェーリン Aを、それ自体または
サングリフェーリン Aとｎ組合わせで、また上記の様にＥＡＵアッセイで試験す
る。得られる結果は下記表Ｉに示す。

【表１】

【００４０】 ii)[MeIle]⁴−シクロスポリン、[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリンお
よび[Ｎ−ベンジル−Val]⁵−シクロスポリンおよび、プラセボとしてのコーン油
中のエタノールをまた本質的に上記のような本ＥＡＵアッセイで試験する。得ら
れる結果を下記表IIに示す。

【表２】

【００４１】 [MeIle]⁴−シクロスポリンおよびサングリフェーリン Aをまたそれ自体および
組合わせで、上記のような発症した関節炎アッセイで氏江Kンする。得られる結
果は図２に示し、これは３０mg／kg p.o.の[MeIle]⁴−シクロスポリン、１mg／
kg s.c.のサングリフェーリン A、または３０mg／kg p.o.の[MeIle]⁴−シクロ
スポリンと１mg／kg s.c.のサングリフェーリン Aの組合わせで処置した５匹の
動物のグループで得られた腫脹の阻害の平均のグラフである。

【００４２】 Ｃ．コラーゲン誘発関節炎 非免疫抑制性サイクロスポリンである[MeIle]⁴−シクロスポリン(NIM 811とも
呼ぶ)を、ラットコラーゲン誘発関節炎モであるにおける治療的プロトコールに
おいて調査する。ラットを、尾の付け根の回りに皮内投与したタイプIIコラーゲ
ンで免疫化する。１０−１２日後、関節炎の発症が起こり、紅斑および関節の腫
脹により類型化する。動物の１日２回の[MeIle]⁴−シクロスポリン(エタノール
１０％／コーン油媒体中、２つの異なる量)のp.o.による処置を腫脹の発症の直
後に開始し、１０日まで続ける。コントロール関節炎動物および登録商標COX阻
害剤で処理するラットを実験に包含させる。後足の腫脹を定期的に評価する。実
験の最後に、動物を殺し、関節を組織学的パラメーターの評価のために調製する
。

【００４３】 [MeIle]⁴−シクロスポリンは使用した２つの投与量(１日２回 p.o. １２.５
および２５mg／kg)で、９日に登録商標COX阻害剤(１日２回 p.o. ２.５mg／kg
)の効果の６０％までの腫脹の良好な阻害を示す(図３)。シクロスポリン(CyA、
有効ＥＤ₅₀ １０−１５mg／kg p.o.付近 − Smith R. J. and Sly L. M., J
. Pharmacol. Exp. Ther., June 1996; 277(3): 1801-1813参照)とのデータの比
較は、関節リウマチのこのモデルにおける[MeIle]⁴−シクロスポリンと同様の効
果を示す。

【図面の簡単な説明】

【図１】 免疫化９−１８日後(ｘ軸J)のコントロール動物(Ａ．黒色棒)お
よび[MeIle]⁴−Cs処理動物(Ｂ．灰色棒)に関するＥＡＥにおける疾病得点(ｙ軸)
のグラフである；

【図２】 Ａ．−３０mg／kg [MeIle]⁴−Cs p.o.；Ｂ．１mg／kg サング
リフェーリン A s.c.；およびＣ． −３０mg／kg [MeIle]⁴−Cs p.o.＋１mg
／kg サングリフェーリン A s.c.で処置した動物のグループのアジュバント関
節炎アッセイの発症における腫脹(ｙ軸)の阻害の割合を示すグラフである；

【図３】 １２日目に免疫化し、０から９日目に処置した(ｘ軸)、媒体(−
□−；EtOH １０％／コーン油／５mg／kg p.o.、６匹の動物)、[MeIle]⁴−Cs(
−○−；２×１２.５mg／kg／日 p.o.、７匹の動物)、[MeIle]⁴−Cs(−△−；
２×２５mg／kg／日 p.o.、７匹の動物)および登録商標COX阻害剤(−▼−；２
×２.５mg／kg／日 p.o.、４匹の動物)で処置したラットにおけるコラーゲン誘
発関節炎アッセイにおける後足の腫脹(mm −ｙ軸)を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，Ｚ Ａ，ＺＷ

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 炎症性自己免疫疾患または状態の処置または予防のための医
   薬の製造における、非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンの使用
   。
2. 【請求項２】 患者に有効量の非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロ
   スポリンを投与することを含む、炎症性自己免疫状態および疾患の、このような
   疾患または状態に罹患しているまたは危険のある患者の処置または予防のための
   方法。
3. 【請求項３】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが式Ａ 【化１】 [式中、Ｂは式Ｂ 【化２】 〔式中、ａは２位のαAbuへの結合を意味する； ｂは５位におけるＣ残基への結合を意味する； Alkは２から６個の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖アルキレンまたは３から６
   個の炭素原子を含むシクロアルキレン、および Ｒは カルボキシまたはアルキルオキシカルボニル残基； 基−ＮＲ₁Ｒ₂ (式中、Ｒ₁およびＲ₂は同じまたは異なって水素、アルキル、Ｃ_2-4アルケニル
   、Ｃ_3-6シクロアルキル、フェニル(所望によりハロゲン、アルコキシ、アルコキ
   シカルボニル、アミノ、アルキルアミノまたはジアルキルアミノで置換されてい
   てもよい)またはベンジルまたは、５または６個の環原子および１から３個のヘ
   テロ原子を含む飽和または不飽和へテロ環式基、またはＲ₁およびＲ₂は、それら
   が結合している窒素原子と共に４から６個の環原子を含み、所望により窒素、酸
   素または硫黄からなる群から選択される更なるヘテロ原子を含んでいてもよく、
   所望によりアルキル、フェニルまたはベンジルで置換されていてもよい飽和また
   は不飽和ヘテロ環を意味する)； 式 【化３】 (式中、Ｒ₁およびＲ₂は上記で定義の意味、Ｒ₃は水素またはアルキル基を意味
   し、ｎは２から４の整数を意味する) の基〕 のアミノ酸残基である； ＣはMeLeuまたは４−ヒドロキシ−MeLeuである] の化合物およびその薬学的に許容される塩である、請求項１記載の使用または請
   求項２記載の方法。
4. 【請求項４】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが、式
   Ｉ： 【化４】 〔式中、ＷはMeBmt、ジヒドロ−MeBmtまたは８'−ヒドロキシ−MeBmt； ＸはαAbu、Val、Thr、NvaまたはＯ−メチルスレオニン(MeOThr)； ＲはSarまたは(Ｄ)−MeAla； ＹはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeu、MeIle、MeVal、MeThr、MeAla、MeTyr、MeT
   yr(O-PO(OH)₂、MeaIleまたはMeThrまたはPro； ＺはVal、Leu、N-Alk-ValまたはN-Alk-Leu (式中、AlkはMeまたは、所望によりフェニル、または６環員を含むＮ、Ｓまたは
   Ｏヘテロアリール、または所望によりハロゲンで置換されていてもよいフェニル
   で置換されていてもよいビニルで置換されているMeである) ＱはMeLeu、γ−ヒドロキシ−MeLeuまたはMeAlaである〕 の化合物およびその薬学的に許容される塩である、請求項１記載の使用または請
   求項２記載の方法。
5. 【請求項５】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが ａ)[ジヒドロ−MeBmt]¹−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｂ)[MeVal]⁴−シクロスポリン、 ｃ)[MeIle]⁴−シクロスポリン、 ｄ)[MeThr]⁴−シクロスポリン、 ｅ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｆ)[Nva]²−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリン、 ｇ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁶−シクロスポリン、
   ｈ)[MeVal]⁵−シクロスポリン、 ｉ)[MeOThr]²−[(D)MeAla]³−[MeVal]⁵−シクロスポリン、 ｊ)[８'−ヒドロキシ−MeBmt]¹−シクロスポリン、 ｋ)[MeAla]⁶−シクロスポリン、 ｌ)[DMeAla]³−[MeTyr(OPO(OH)₂)]⁴−シクロスポリン、 ｍ)[Ｎ−ベンジル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｎ)[Ｎ−５−フルオロ−ベンジル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｏ)[Ｎ−アリル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｐ)[Ｎ−３−フェニル−アリル−Val]⁵−シクロスポリン、 ｑ)[Pro]⁴−シクロスポリン、または ｒ)[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁹−シクロスポリン からなる群から選択される、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
6. 【請求項６】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンが[MeI
   le]⁴−シクロスポリンまたは[γ−ヒドロキシ−MeLeu]⁴−シクロスポリンである
   、請求項１記載の使用または請求項２記載の方法。
7. 【請求項７】 患者に有効量の非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロ
   スポリンおよびサングリフェーリンを含む組合わせを投与することを含む、炎症
   性自己免疫状態および疾患の、このような疾患または状態に罹患しているまたは
   危険のある患者の処置または予防のための方法。
8. 【請求項８】 非免疫抑制性、シクロフィリン結合サイクロスポリンおよび
   サングリフェーリンを含む、例えば、炎症性自己免疫疾患または状態の処置また
   は予防のための医薬組成物。