JPS6143120A - シクロスポリン誘導体の新規医薬用途 - Google Patents

Abstract

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め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 この発明は、現在の命名法により明細書にはそれぞれジ
ヒドロ−（Ｖａｌ）”−シクロスポリンおよび（Ｎｖａ
）”−シクロスポリンとして言及されている、ジヒドロ
シクロスポリンＤおよびシクロスポリンＧの新規用途、
特に新規医薬用途並びにこれらの化合物を含有する医薬
組成物、またはこの用途に関連して用いられる医薬組成
物の製造における上記化合物の使用に関するものである
。

〔先行技術および発明の経緯〕

ジヒドロ−（Ｖａｎ）″−シクロスポリンは、下記式（
■）： 〔式中、Ａは下式（■）： ＣＨ２Ｘ （式中、−Ｘ−）’−は−ＣＨｔ　−ＣＨｔ−である）
で示される残基を表わし、Ｂは−Ｖａｔ−である〕で示
される構造を有し、また、（Ｎｖａ）”−シクロスポリ
ンは上記式（■）〔ここでＡは上記式（ＩＩ）の残基（
ここで−ｘ−ｙ−は−ＣＩ　＝　ＣＨ−（トランス）で
ある）を表わし、ＢはＮｖａを示す〕で示される構造を
有しており、これらは公知であり、さらにその製造方法
および様々な医薬用途も含めて例えば米国特許明細書第
４２２０６４１および４２８８４３１号にそれぞれ記載
されている。

化学的にこれらはジクロスポリン類として集合的に指称
される天然産および合成または半合成ウンデカペプチド
類の明確かつ実質的な分類に属する［例えば米国特許第
４１１７１１８号（シクロスポリンＡまたは「シクロス
ポリン」）、米国特許第４１０８９８５号および４２１
０５８１号（シクロスポリンＣまたは（Ｔｈｒ）″−ン
クロスボリンおよび誘導体）、ヨーロッパ特許公開第０
０５．８１３４　８１号およびヘルベティカ・ノミ力・
アクタ（Ｉ−１ｅｌｖ、　Ｃｈｉｍ、　Ａｃｔａ、　）
６５巻分冊第５．１６５５−１６７７頁（１９Ｂ２Ｘた
だしこれらは更にとりわけ（Ｌｅｕ）”−シクロスポリ
ン、［（Ｄ）Ｓｅｔ］’−シクロスポリンおよび（Ｖａ
ｌ）”−シクロスポリンを含めた天然および合成または
半合成シクロスポリン類を開示している）参照］。

シクロスポリン類のうち、粗化合物であるシクロスポリ
ンＡまたは「シクロスポリン」はこれまで最も注目を浴
びてきた。前述の米国特許第４１１７１１８号で開示さ
れているように、このシクロスポリンは抗炎症および抗
関節炎特性並びに免疫抑制特性を有しており、これらの
特性を有する化合物は臓器移植手術後の拒絶阻止および
自己免疫疾患の処置に特に有用とされる。

「シクロスポリン」に関する臨床研究の第１分野は、例
えば心臓、肺、合併心肺、肝臓、腎臓、ひ臓、骨髄、皮
膚および角膜移植および特に異型的臓器移植などの臓器
受容者に対する適用にあった。

現在シクロスポリンは臓器移植用として商業的に入手可
能であり科学文献だけでなく世界的な印刷物においても
この化合物は非常に広範にわたる注目を受けていること
から顕著な成功をおさめたといえる。同時に様々な自己
免疫疾患の処置におけるシクロスポリンの適用に関して
熱心に研究がなされており、試験管内、動物モデルおよ
び臨床試験の研究結果が文献に幅広く記載されている。

自己免疫疾患は事実かなり多くの種類にわたっている。

確かに報告されたシクロスポリンの成果は、例えば自己
免疫疾患ごとにそれぞれ程度の差が見られがちであるが
、広範な有用性は確実なものであり、若干の例で得られ
た成果はますます世界中に広がる専門家の注目を充分集
めるものとなっている。

「シクロスポリン」処置における研究や提案の対象であ
る特異的自己免疫疾患には多発性硬化症、ギャンーバレ
ー症候群、ブドウ膜炎、重症筋無力症、ハイマン腎炎、
グレージス病、橋本甲状腺炎、若年型糖尿病■型、全身
性エリテマトーデス（紅斑性狼癒）、再生不良性貧血、
赤芽球ろう、特発性血小板減少症、多発性硬化症、強皮
症（ｓｃｌｅｒｏｄｏｍａ）、ベグネル顆粒球増加症、
皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、自己免疫男性不妊症、乾癖
および乾癖性関節炎、ステイーブン−ジョンソン症候群
、特発性スプルー、クローン病、類肉腫症、糸球体腎炎
、介在性肺線維症ならびに原発性胆汁性肝硬変がある。

例えば米国特許明細書第４２２０６４１号で開示されて
いるように、ジヒドロ−（Ｖａｔ）２−シクロスポリン
もまた抗炎症および抗関節炎特性並びに免疫抑制特性を
有する。免疫抑制に関して述べると、ジヒドロ−（Ｖａ
ｌ）”−シクロスポリンの特異的免疫抑制プロフィール
は、明らかに純粋な体液免疫応答に影響をそれほど及ぼ
さないという点でシクロスポリンと異なることがわかっ
た。したがって「シクロスポリン」と同様にジヒドロ−
（Ｖａｌ）！−シクロスポリンに対して自己免疫疾患の
処置における適用性の発見が予期されてはいるが、臨床
用途は例えば前述のような純粋な体液応答よりもむしろ
細胞性の抑制が重要である特定の状態の処置を指向する
。この発明は部分的には、ジヒドロ−（Ｖａｌ）’−シ
クロスポリンをこの後者のタイプである２つの特異状態
、すなわちａ）ブドウ膜炎およびｂ）若年型糖尿病Ｉ型
に適用すると驚くべきかつ予想外の優れた有用性が得ら
れるという発見に存する。

特に、上記特異的自己免疫疾患に関してジヒドロー（Ｖ
ａｌ）″−シクロスポリンが、以前に提案された例えば
「シクロスポリン」を用いる療法と比較して例えば活性
レベルおよび／または望ましくない副作用の減少または
欠如という点で特別の予想外な有益性を示すことがわか
る。

例えば米国特許明細書第４２８８４３１号で開示されて
いるように、（Ｎｖａ）’−シクロスポリンもまた「シ
クロスポリンｊに以前適用した試験方法において抗炎症
および抗関節炎特性並びに免疫抑制特性を有し、「シク
ロスポリン」と同じ用途プロフィールおよび臨床用途を
有する。したがって、「シクロスポリン」と同様に（Ｎ
　ｖａ）　’−シクロスポリンの場合、まず移植拒絶の
阻止および自己免疫疾患の処置における適用性の発見が
予期される。

さらにこの発明は部分的に（Ｎ　ｖａ）　’−ンクロス
ポリンが、広い分類として臓器移植拒絶の阻止および自
己免疫疾患の処置における適用性という点で「シクロス
ポリン」と同じ一般的有用性を有することが確認される
が、その活性の特別なプロフィール、特にその免疫抑制
効果に関するプロフィールにより、広範な自己免疫疾患
すなわちａ）ブドウ膜炎およびｂ）若年型糖尿病■型（
すなわちこの発明によるジヒドロ−（Ｖａｔ）”−シク
ロスポリンの有用性に関する前述の２つの特異的疾患）
、Ｃ）重症筋無力症、ｄ）多発性硬化症、ｅ）全身性エ
リテマトーデス、ｆ）溶血性貧血およびｇ）糸球体腎炎
からなる群に含まれるある種の特異的疾患に適用すると
驚くべきかつ予想外の有益性を化合物がもたらすという
発見に存する。

特に、上記特異的自己免疫疾患に関して（Ｎｖａ）’−
シクロスポリンが、以前に提案された例えば「シクロス
ポリン」を用いる療法と比較して例えば活性レベルおよ
び／または望ましくない副作用の減少または欠如という
点で特別の予想外な有益性を示すことがわかる。

さらに、化合物「シクロスポリン」、ジヒドロ−（Ｖ　
ａｌ）’−シクロスポリンおよび（Ｎｖａ）”−シクロ
スポリンはすべて明らかに非常に密接に関連した化学構
造をしているが、例えばこの発明により確定した自己免
疫疾患の処置に関するこれらの各Ｈ用件は明らかにお互
いに似通っているが重大な相異を示すことがわかる。特
に、（Ｎｖａ）′−シクロスポリンの方は７種の特異的
自己免疫疾患型の処置において特に有用であることが見
出だされており、一方ジヒドロ−（Ｖａｌ）”−シクロ
スポリンはこれら７種のうち２種の疾患に特に有用であ
ることが見出だされている。したがって、この発明によ
ると構造上の類似性は対象発明に関して対応する有用性
を予言する性質のものではない。

〔試験例および実施例〕

前述の特異的自己免疫疾患の処置における化合物ジヒド
ロ−（Ｖａｌ）２−シクロスポリンおよび（Ｎｖａ）　
”−シクロスポリンの特定の有益な用途については、以
下の試験例で行なわれる必要標準動物モデルおよび臨床
試験で確証できる。

１、ブドウ膜炎 実験的自己免疫ブドウ膜炎（ＥＡＶ）の調整ヌーセンプ
ラットら記載〔アーカイブズ・オフ・オフタルモロジー
（Ａｒｃｈ、　０ｐｈｔｈａ＋、　）１００巻、１１４
６−１１．４９頁（１９８２））の一般的方法により試
験を実施する。体重的１５０−２００ｇのルイス（雌）
ラット６〜ｌＯ匹の群において２　、５　ｘｇ／酎、の
マイコバクテリウム・ラベルクロシスＣＭｙｃｒｏｈａ
ｃｔｅＢｕｍ　　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）ひと結核
菌Ｈ３７１Ｎ八で強化したフロイント完全アジュバント
に乳化（１：　ｌＰ、ｐ、ｗ、）したウシのＳ抗原３０
μ９を後ろ足かかとに注射することにより免疫化する。

試験物質すなわちジヒドロ−（Ｖａｌ）２−シクロスポ
リンまたは（Ｎ　ｖａ）　！−シクロスポリンを免疫後
７日目に開始して連続７日間２５〜５０Ｈ／ｋｇ／日の
用量で投与する。対照群には試験物質の代わりにオリー
ブ油を与える。免疫後１４４日目ラットを殺し、直ちに
眼を除去し、ホルムアルデヒドに浸し、パラフィン蝋に
包埋し、ヘマトキシリン−エオシンおよびパラアミノサ
リヂル酸で染色する。板面式で、０（炎症無し）〜４（
汎眼球炎）の尺度により炎症程度を組織病理学的に評価
する。症例を選択し、透過型および走査型電子顕微鏡に
より検査する。実験的自己免疫ブドウ膜炎（ＥＡＶ）の
症状を示す動物から取り出された眼球には、全体的に広
がった網膜および脈絡膜の炎症が見られ、繊維状のしん
出物で網状になった炎症細胞が硝子体腔、網膜下部腔お
よび前眼房に生じている。

ジヒドロ−（Ｖａｌ）”−シクロスポリンまたは（Ｎｖ
ａ）　’−シクロスポリンを前記の用量で投与すると、
対照群の場合の結果と較べてＥＡＶを示す動物数の実質
的減少が見られる。

２、若年型糖尿病Ｉ型 ＢＢ／ウオルセスター（Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ）ラットモ
デル ライクらの記載〔アメリカン・ジャーナル・オブ・パソ
ロジー（Ａｍ、　Ｊ　、ＰａＬｈｏｌ、）　１１７巻９
２−９７頁（＋９８４））の一般的方法により試験を行
う。この試験のためには、６０日令のＢＢ／Ｗ（雄およ
び雌）ラット群（若年型糖尿病■型の自己免疫糖尿病を
自然に発症する系統）を用いる。試験群には試験物質す
なわちジヒドロ−（Ｖａｌ）’−シクロスポリンまたは
（Ｎｖａ）”−シクロスポリンをｌＯ日間５〜２５ｍ９
７に９７日の用量で経口投与する。対照群には試験物質
の代わりにオリーブ油を与える。全試験動物における糖
尿の発生を定期的にスクリーンする。

ジヒドロ−（Ｖ　ａｔ戸−シクロスポリンまたは（Ｎｖ
ａ）　’−シクロスポリンを前記の用量割合で投与する
と、対照群と較べて、糖尿病の症状が現われ例えば異常
に高い血液グルコースレベル／糖尿を示す動物数の顕著
な減少が見られる。

３、重症筋無力症 実験的アレルギー性重症筋無力症（Ｅ、５ＭＧ）レノン
ら記載〔ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メデ
ィスン（Ｊ　、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、）　１４１巻、！３６
５−１３７５頁（１９７５））の一般的方法により試験
を行う。体重的１５０−２００ｇのルイスラット（雌）
８〜１２匹の群にフロイント完全アジュバント〔ディフ
コ（Ｄｉｒｃｏ）０６３８−６０）１部および精製アセ
チルコリン受容体（トルベト・カリフォルニアラットか
ら採取）１０μ９を含有する溶液１部からなる混合物を
皮下注射することにより、実験的アレルギー性重症筋無
力症（ＥＡＭＧ）を誘発させる。さらにアジュバント（
百日咳、１ｘｌＯ１０単位）を後ろ足のかかとに皮下投
与する。−週間毎に固相酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）
を用いて自己抗体力価を測定する。

３．１　　予防活性 ２５〜５０　ｎ／に９部日の用量で（Ｎｖａ戸−シクロ
スポリンを免疫の日に始まり一週間のうち５日間経口投
与すると、プラセボを与えた対照と比べて抗体形成抑制
が観察された。

３．２　治療活性 自己抗体がすでに形成された（一般に免疫倹約１４日）
後から始め、２５〜５０１ｇ／に９部日の用量で１週間
に５日、（Ｎｖａ）”−シクロスポリンを経口投与する
と、自己抗体力価が、プラセボを与えた対照群と比較し
てかなり減少していることがわかる。

４、多発性硬化症 ４．１　　実験的アレルギー性脳を髄炎（ＥＡＥ）にお
ける予防活性 ボレルら記載〔エイジエンツ・アンド・アクション（Ａ
ｇｅｎｔｓ　　ａｎｄ　　ＡｃＬｉｏｎ）　６巻、４６
８頁（＋９７６）〕の一般的方法により試験を実施する
。各々体重的１５０〜２００ｇのウィスター（雌）また
はルイス（雌）ラット８〜１２匹からなる群において、
ウシを髄（凍結乾燥し、＋２ｊ＋ｆｆのＨｔ　Ｏを加え
て元に戻した）２．５ｇ、アルラセル（Ａ　ｒｌａｃｅ
ｌ）Ａ１　、５　ｍ（１，ヌジョール（Ｎ　ｕｊｏｌ）
　８　、　Ｏｙ（ｌおよび殺して乾燥したマイコバクテ
リウム・フレイ（ＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕＩＩｌｐｈ
ｌｅｉ）　２０　ｍｇを含有する食塩水０　、２　ｙＱ
からなる乳液０　、　Ｉ　ｙｔＱを後ろ足のかかとに皮
内注入することにより、ＥＡＥを誘発させる。感作した
日から始めて３週間継続して１週間に５日、２５〜５０
１１ｇ／に９部日の用量で（Ｎｖａ）’−シクロスポリ
ンを経口投与する。薬物処理をしていない対照群の場合
、感作後９ないし１６日間でＥＡＥの兆候が始まり、後
ろ足および尾に麻痺症状が表れる。試験動物における疾
病の症状を毎日検査し、後ろ足および尾の両方が完全に
罹患ずろのを見届けてから、疾病発生を陽性として計算
する。２５日にわたる全期間試験動物を観察下におく。

前記の指示用量割合で（Ｎｖａ）’−シクロスポリンを
投与した場合、プラセボを与えた対照群と比べると試験
期間にわたってＥＡＥの発生の実質的減少が観察される
。

４．２　確定ＥＡＥにおける活性 ４．１と同様に試験を実施するが、ただし感作後８〜９
日目から（すなわち、病気の症状が現れる直前に）２５
〜５０１９７に９の用量で（Ｎｖａ）”−シクロスポリ
ンを毎日または１日おきに経口投与し、約１４日間続け
る。処置期間中、動物における病気の徴候を毎日検査し
、４．１と同様に計算する。

前記の指示に用量割合で（Ｎｖａ）’−シクロスポリン
を投与すると、プラセボを与えた対照群の場合と比べて
、ＥＡＥ病状の発現の実質的減少が試験期間中観察され
る。

５、全身性エリテマトーデス （黒色系／白色系ニューシーラントマウス）Ｆｌマウス
モデル シュタインベルクらにより記載論争された〔ブレティン
・オン・ザ・リューマチイック・ディシーズ（Ｂｕｌｌ
ｅｔｉｎ　　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ　　Ｄ
ｉｓｅａｓｅｓ）２８巻４〜５番、９４０〜９４６頁（
１９７７〜７８）、ジ・アースライテイス・ファウンデ
ーション、アトランタ、ジョーシア）、（ＮＺＢ／ＮＺ
Ｗ）Ｆ　１マウス系統に基づいて試験する。この系統の
雌は、約５〜７．５ケ月令で抗ＤＮＡおよび抗赤血球自
己抗体並びに蛋白尿の形成を含むＳＬＥ症候群の特徴を
自然に発現する。最終的にこの状態で死亡する。

この試験のために６〜８匹の雌マウスの群を用いる。週
５回の割合で約８〜１０週間継続して５０〜１００肩ｇ
／ｋｌＦ／日の用量で（Ｎｖａ）’−ンクロスボリンを
経口投与する処置を、１）自己抗体の自然発生以前、例
えば約５か月、およびｌＩ）自己抗体の自然発生後、例
えば約８〜９か月令に開始する。ＥＬＩＳＡ技術を用い
て試験期間中および（Ｎｖａ）″−ンクロスポリン投与
前約１週間から始まる試験期間中、一定間隔で抗ＤＮＡ
および抗赤血球抗体力価を測定する。さらに対照群に必
要なパラメータは、蛋白尿の発生（週１回測定）および
寿命である。上記（ｉ）および（１−）の条件で処置し
た群の結果からそれぞれ予防上および治療上有効である
ことがわかる。

前述の指示用量レベル（Ｎｖａ）’−シクロスポリンを
投与した場合、プラセボを投与した対照群と比較すると
、予防および治療処置領域の両方において自己抗体力価
および蛋白尿発生の減少ならびに平均寿命の増加が認め
られる。

６、溶血性貧血 ラット赤血球誘発性抗マウス赤血球抗体モデルネイスミ
スら記載〔イムノロジカル・レビューズ（Ｉ　ｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｉｃａｌ　　Ｒｅｖ、　）　５５巻、５４〜８
６頁（１９８１））の一般的方法により試験を実施する
。約１０”の充分洗浄したラット赤血球をそれぞれ含有
する４つの注入液を、試験の第０．７．１４および２１
日目位若年の正常／健康なマウス群に腹腔内投与する。

第２１８目から５〜７日の一定間隔でくえん酸素塩水中
に動物からの採血を行う。また、広域スペクトルひつし
抗マウス免疫グロブリン抗血清を用いて直接クームズ試
験を行う。試験中約第３〜４週目に薬物を与えられてい
ない対照動物の場合、一般にクームズ試験における陽性
反応がみとめられる。この試験は、約ｌＯ〜１２週間続
ｃノる。

６．１　予防活性 試験の第０１目に開始し、約４〜６週間続けて、（Ｎｖ
ａ）’−ンクロスボリンを週５日、５０５０−１Ｏ０／
　ｋｇ／　ＩＪの用…で経口投与した場合、オリーブ油
だけを与えた対照群と比較するとクームズ試験における
陽性反応を起こす動物数が試験完了までに著しく減少す
ることがわかる。

６．２治療活性 抗体が形成された後（クームズ試験における陽性反応、
一般に第θ日目後約２１〜２８日）から始め、４〜６週
間続けて週５日５０〜１００ｉｙ／ｋｇ／日の用量で（
Ｎｖａ）’−シクロスポリンを経０投与すると、オリー
ブ油しか与えていない対照群と比べてクームズ試験にお
ける応答か顕蕃に減少していることがわかる。

７、糸球体腎炎 （背景） 雌の黒色系／白色系ニューシーラントマウスにおいて、
約６か月からの組織的糸球体腎炎および蛋白尿をともな
う３〜６か月食での免疫グロブリン（Ｉ　ｇ）および補
体（Ｃ）沈積に特徴を有する腎臓病を自然発生させると
、ひとが発病する場合と同様な糸球体腎炎病状の適当な
動物モデルが得られる。

（方法） それぞれ１０匹のマウスからなる対照群と処置群として
雌の黒色系／白色系ニューシーラントマウスを無作為に
分ける。各マウスの耳に印をつけて個別に識別できるよ
うにする。マウスが１２．２４または３６週令になった
ときに実験を開始し、処置を１２週間続ける。週５回５
０〜１００ＮＩＦ／ｋｇの用量で（Ｎｖａ）”−シクロ
スポリンを胃管を通す経口投与を行なう。

ｌＯμＱの尿意をブロムフェノールブルーで濾紙上に染
めることにより蛋白尿の程度を測定する。

積分コンピュータに連結した薄層クロマトグラフィース
キャナーを用いて染色された尿意の強さを定量化し、ウ
ノ血ｔＩ４＃アルブミンの系列希釈液と比較する。蛋白
質レベルが１００ｉ９％を越えると、異常かつ陽性とみ
なす。

各実験の終イつりにマウスを殺し、常用手順で組織的試
験に用いる腎臓を準備する。マウスＬｇおよび補体Ｃ３
（北欧産）に対する抗血清を用いて直接免疫蛍光検査法
を行う。糸球体腎炎を、（１）軽い内皮糸球体間質の病
変、（＋１）さらに重い文節性増殖型、および（ｉｉｉ
）非常に重い膜状増殖型に区分する。無病変から漸次重
い病変までを記録する。

皆無から強までの範囲で免疫蛍光記録を行う。得られる
結果を、プラセボ（オリーブ油）しか与えていない対照
群と比較する。実験中蛋白尿を有する動物が死亡した場
合は陽性とみなす。

上記指示用量で（Ｎｖａ）″−シクロスポリンを投与し
た場合、ブラセポしか与えていない対照群と比較すると
、免疫反応物の沈積および糸球体腎炎の組織的形跡が顕
著に減少していることがわかる。

まｔこ、前述のように、この発明によるジヒドロ−（Ｖ
ａｌ）’−シクロスポリンおよび（Ｎｖａ）’−シクロ
スポリンは、臨床試験、例えば次のように行う若年型糖
尿病夏型の処置をする場合にも有効なことが明らかにさ
れ得る。

若年型糖尿病夏型であると診断されたインシュリン依存
の糖尿病患者のボランティアを用いて試験を実施する。

確立した高血糖症を患う非肥満の患者を臨床的根拠に基
づき診断する〔ナショナル・ダイアビーテイーズ・デー
タ・グループ、ダイアビーティーズ（Ｄ　１ａｂｅｔｅ
ｓ）　２．８巻、１０３９頁（ｌ（Ｊ　７９））。患者
はすべて正常な絶食時範囲内の血清免疫−反応性Ｃ−ペ
プチド濃度を何しており、グルカゴン刺激をともないな
がら、またはともなわずに絶食状態で試験され、１２か
月より短い間インシュリン療法を受けた。

試験の初めに平均的５日間患者を入院さＵる。

基準クレアチニンクリアランス、検尿、血清クレアチニ
ン、血液尿素性窒素、血清グルタミン酸−オキサル酢酸
トランスアミナーゼ（ＳＧＯＴ）およびアルカリホスフ
ァターゼレベルを測定して、これらが正常であることを
確かめる。試験物質すなわちジヒドｏ−（Ｖａｌ）″−
ツクロスボリンまたは（Ｎｖａ）　’−シクロスポリン
を一般にそれぞれ１２時間に１回または分割形態で約５
〜２５ｘｇ／ｋｇ／日／患者の用量で経口投与を開始す
る。ラジオイムノアッセイにより毎日血清濃度を測定し
、個々の用量割合を調整して１２時間で約２００〜２５
００ｎｇ／ｚＱの血液濃度を維持する。退院後２週間は
毎週、それ以後は月毎に患者を通院させる。来院の都度
血液を採取して試験物質レベル、クレアチニンおよび電
解質濃度ならびに血液および肝機能検査を行う。Ｉか月
およびそれ以後３か列間隔で塙底およびグルカゴン−刺
激プラスマＣ−ペプチド濃度を測定する。

試験中患者をすべて精製ブタインシュリン〔イレチン（
Ｉ　１ｅＬｉｎ）　ＩＩ　）で処置し、１日２回投与し
、視覚的比較または試薬ストリップを用いる基準メート
ル法により血液グルコース濃度をモニターする。正常の
体重および活動を維持するのに適した糖尿病食餌療法を
患者に指示する。インンコリン用量を可能な限り調整し
て、主食および夜食前に平均血液グルコースレベルが７
．８ミリモル／リッ“トルとなるようにする。血糖制御
がこれらの目標に相反する場合または低血糖症を避ける
ためにインシュリン用量を減らす。ターゲットコントロ
ールの喪失または病気の進行またはケトン尿症をともな
わずに少なくとも１週間インシュリン投与を完全に停止
し、試験期間中インシュリン処置を再開する必要のない
患者を「以後インシュリンネ必要（ｎｏ　　ｌｏｎｇｅ
ｒ−ｉｎｓｕｌｉｎ−ｒｅｑｕｉｒｉｎｇ）Ｊ（ＮＩＲ
）として分類する。その後ＮＩＲ患者が処置目標を越え
て高血糖を起こした場合、経口用低血糖剤グリベンクラ
マイト（ｇｌｙｂｅｎｃｌａａｉｄｅ）を投与する。

試験結果は、治療を施していない若年型糖尿病患者群に
おいて記録された緩解（すなわち、自然ＮｒＲ緩解）ま
たは別の薬物処方療法を受けている若年型糖尿病患者群
において記録されたＮＩＲ緩解と比較すると、この試験
に参加している患者の場合ＮＩＲ緩解が顕著に増加して
いることを示゛す。さらにこの結果から、例えば試験期
間中に測定された他の生理学的パラメーターの測定結果
から明らかなようにこの治療法は著しく優れた耐性のあ
ることがわかる。

前述したところから明らかなように、この発明は処置を
必要とする対象における、ａ）ブドウ膜炎、ｂ）若年型
糖尿病Ｉ型、Ｃ）重症筋無力症、ｄ）多発性硬化症、ｅ
）全身性エリテマトーデス、ｒ）溶血性貧血およびｇ）
糸球体腎炎からなる群から選ばれた自己免疫疾患の処置
方法であって、（Ｎ　ｖａ）　’−ンクロスボリンまた
は上記疾患ａ）またはｂ）の場合ジヒドロ−（Ｖ　ａｌ
）’−シクロスポリンの有効量を前記対象に投与するこ
とからなる方法を提供するものである。

別の具体例においてこの発明はまた、ａ）ブドウ膜炎お
よびｂ）若年型糖尿病Ｉ型からなる群から選ばれた自己
免疫疾患の処置における（Ｎｖａ）’−シクロスポリン
またはジヒドロ−（Ｖａｌ）’〜ンクロスボリンの使用
、またはＣ）重症筋無力症、ｄ）多発性硬化症、ｅ）全
身性エリテマトーデス、「）溶血性貧血およびｇ）糸球
体腎炎からなる群から選ばれた自己免疫疾患の処置にお
ける（Ｎｖａ）”−シクロスポリンの使用に関するもの
である。

さらに別の具体例においてこの発明はまた、ａ）ブドウ
膜炎およびｂ）若年型糖尿病１型からなる群から選ばれ
た自己免疫疾患の処置に用いる医薬組成物の製造におけ
る（Ｎｖａ）”−シクロスポリンまたはジヒドロ−（Ｖ
ａｌ）’−シクロスポリンの使用、またはＣ）重症筋無
力症、ｄ）多発性硬化症、ｅ）全身性エリテマトーデス
、ｒ）溶血性貧血お上びｇ）糸球体腎炎からなる群から
選ばれた自己免疫疾患の処置に用いる医薬組成物の製造
における（ｌｌｖａ）　’−シクロスポリンの使用に関
するものである。

前記定義で用いられている［処置（ｔｒｅａｔｓｅｎｔ
）　ｊの語は適当である限り治療処置および予防処置の
両方を指すもので適当な例としては前述の動物モデル試
験法で示したようなものである。

勿論、この発明方法による臨床用途に適した用量は、例
えば投与方法、治療を受ける対象の特定の自己免疫疾患
または特異的状態および所望の効果により異なる。さら
に一般に適切な長期薬物血清濃度を一定にするために、
たとえば常用ＲＩＡでモニターすることにより測定され
た到達血清濃度にしたがい第１日月から出発または「ロ
ーディングｊ投与を行ない、後で用量を調節（一般に減
少）することにより処置を受ける個々の対象に対して用
量を調整しなければならない。しかしながら一般に一日
１回、または２もしくは３回の分割用量として、約３〜
約３０．例えば約ｌθ〜約２５ｊＩｇ／体重＆９／［Ｅ
＋の用量範囲で、ジヒドａ　−（Ｖａｌ）”−シクロス
ポリンおよび（Ｎｖａ）″−シクロスポリンの両者とも
、患者に経口的に投与すると満足すべき結果が得られる
。例えば処置の第１段階において、静脈内投与を指示さ
れた場合、例えば約１〜約１０　ｍ９／に９／日のオー
ダー、例えば約３〜５ｍｙ／に９／日の低用量を一般に
適用する。従って、例えば成人患者に対する好適な経口
−日用量は、約２２５〜約２０００、例えば約７５０〜
約１８００ｉｙ／日からなるオーダーであり、経口投与
用単位用量形態の場合は、ジヒドロ＝（Ｖ　ａｌ）’−
ンクロスボリンまたは（Ｎｖａ）”−シクロスポリン約
７５〜約２０００、例えば約２５０〜約１５００肩９を
医薬的に許容し得る希釈剤または担体と組み合わせたも
のが好適である。

この発明の用途に適した用量ならばジヒドロ−（Ｖ　ａ
ｌ）’−シクロスポリンは充分に耐性がある。

例えばラットおよびピーグル犬における２６週間の毒性
試験によると、それぞれ〈８および３２ｘｇ／に９／日
の用量レベルでは非毒性であることがわかる。

また（　Ｎ　ｖａ）　’−シクロスポリンもこの発明の
用途に適した用量ならば耐性がある。実際驚くべきこと
に（Ｎｖａ）”−シクロスポリンは一般に高オーダーの
免疫抑制活性を有しており、前述したようなこの発明に
よる免疫抑制用途に関連する特に有利な特性を示すが、
予想外にも副作用、特に従来医薬としてシクロスポリン
を用いる際に見られた肝臓および腎臓毒作用を起こさな
いことが判明した。例えば標準短期間毒性試験により、
望ましくない副作用を比較的起こさないことがわかる。

５匹のＨＡＮウィスターラットからなる３つの群を用い
てこのような試験を実施する。第１群には（Ｎｖａ）’
−シクロスポリン１００ｍ９／ｋｙ／日を与え、第２群
にはシクロスポリン１００１ｇ７に９７日を与え、第３
群（対照）は未処置のままにしておく。（Ｎ　ｖａ）　
’−シクロスポリンおよびシクロスポリンの両方をオリ
ーブ油の溶液に溶かし、胃管を通して投与する。次のパ
ラメーターを測定する；体重、死亡率、血清および尿分
析、腎臓および肝臓分析、肉眼検査および組織構造（尿
量、腎臓重量、クレアヂンクリアランス、ナトリウムお
よびカリウム濃度、５ＧＰＴおよび５ＧＯＴ濃度など）
、神経病的徴候。第１群における神経病的徴候、死亡率
、腎臓の生化学的組成および組織構造（特に尿細管」−
皮細胞の腫脹／再生および管壊死）および肝臓の生化学
的組成で得られた結果はあらゆる場合に第３対照群で得
られた結果と比肩し得るものであり、第２群で得られた
結果と比べてすべて著しく優れていることがわかる。測
定された他のパラメーターに関しても第２群と比較する
と第１群では副作用は見られない。

現在商業的に入手可能なシクロスポリン飲用液を含めた
シクロスポリン投与用の好ましい製剤についてはＤＯ９
２９０７４６０（特開昭５４−１３２２２３号＝特願昭
５４−２７２２８号、英国特許明細舎弟２０１５３３９
　　Ｂ号および米国特許第４３８８３０７号）に記載さ
れている。

この発明の用途に用いる医薬組成物は、活性成分として
ジヒドロ−（Ｖａｌ）”−シクロスポリンまたは（Ｎｖ
ａ）”−シクロスポリンを用い、上記出願に開示されて
いる方法と全く同様にして製造される。

ジヒドロ−（Ｖａｌ）”−シクロスポリンおよび（Ｎｖ
ａ）２−シクロスポリンの両者を含有する液体経口用組
成物（例えば飲用液）は、シクロスポリン飲用液と同様
に、チョコレート香味料と共に投与するのが好ましい（
例えば上記米国特許第４３８８３０７号の実施例１に記
載）。

〔実施例〕

以下にジヒドロ−（Ｖａｔ）”−シクロスポリンおよび
（Ｎｖａ）’−シクロスポリンの投与に適する液体医薬
製剤の製造の実施例を示す。パーセントは総て重量パー
セントである。

実施例１ ジヒドロ−ｆｖａｌ）”−シクロスポリン飲用液り分　
　　　　　　　　　　　監 ｉ）ジヒドロ−（Ｖａｌ）−５〜１０％、シクロスポリ
ン　　　　　　　　例、７０％ｉｉ）エタノール（無水
）　　　　　　　　１０〜１２％例、１０．５％ １ｉｉ）クレモフｙ　−（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ、　　　
　約４％商標）、ＲＨ４０例、２８％ １ｖ）ｖイシン（Ｍａｉｓｉｎｅ、商標）３０〜４０％
、例、６５．０％ Ｖ）ラブラフイル（ＬａｂｒａＮｌ、　　　　　適量加
えて合計商標）、２１２５　　　　　　　　１００％に
するしクレモフｙ　−（Ｃｒｅａ＋ｏｐｈｏｒ、商標）
、ＲＨ４０＝水素化ひまし油および酸化エチレン（モル
比的１：４０）からなる反応生成物、ドイツ国ルドビー
クシャーフェン、ＢＡＳＦ社市販。マイシン（Ｍａｉｓ
ｉｎｅ、商標）−トランス−エステル化とうもろこし油
、フランス国ブロー二ューブリャンクール、ＥＴＳ、ガ
トゥフォッセ社市販。ラブラフイル（Ｌａｂｒａｆｉｌ
　、商略２１２５−ポリオキンエチレン化果実油、フラ
ンス国ブローニューブリャンクール、ＥＴＳ、ガトウフ
ォッセ社市販。］ｉ）の所望量を常法により成分ｉｉ）
〜ｉｖ）に溶解し、この溶液にＶ）を加えることにより
１００％の最終容量にし、生成する混合物を小さなバイ
アルに充填する。投与目的の場合、投与前にこの溶液を
香味マスキング組成物、例えばチョコレート味のミルク
中に混合するのが好都合である。

実施例２ ジヒドロ−ｆｖａｌ）’−シクロスポリンゼラチン軟カ
プセル 収−外　　　　　　　　　　　　　亀 ｉ）ジヒドロ−（Ｖａｌ）”− シクロスポリン　　　　　　　　１５〜２５％ｉｉ）エ
タノール（無水） ２〜５％ １ｉｉ）インビトール（Ｉ　ｍｖｉＬｏｒ商標）、７４
２　　　　　　　　　１０〜４０％ｉｖ）マイシン（Ｍ
ａｉｓｉｎｓ、商標）４０〜６０％ ［インビトール（Ｉ　ｍｗｉｔｏｒ、商標）−グリセリ
ンエステル、スウェーデン国トロイスドルフーオベルラ
ール、ダイナマイト・ノーペル社市販］。

従来技術により単一用量としてのｉ）を成分ｉｉ）〜ｆ
ｖ）に溶解し、ゼラチン軟カプセル中へ充填するのに適
した溶液を得る。

実施例３ （ＮＶＡ）’−シクロスポリン飲用液 成、−列　　　　　　　　　　　　量（肩９／ｘＱ）ｉ
ＸＮ　ｖ　Ａ）ｔ−シクロスポリン　　　　ｌ　ＯＯ，
Ｏｆ＋）エタノール（無水）　　　　　　　　　　１５
０．０ｉｉｉ）ラブラフイル（Ｌａｂｒａｒｉｌ、商標
）、２１２５　　　　　　　　　３５０．０ｉｖ）とう
もろこし油　　適量加えて合計９２２．０（言ｔ　ａｒ
ｔ＞ 各成分を実施例１と同様に配合し、ｉ）の必要量を包含
する量で得られた溶液を各容器に充填する。

溶液を希釈せずに摂取するのが好ましい。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）ａ）ブドウ膜炎、ｂ）若年型糖尿病Ｉ型、ｃ）重
   症筋無力症、ｄ）多発性硬化症、ｅ）全身性紅斑性狼瘡
   、ｆ）溶血性貧血およびｇ）糸球体腎炎からなる群から
   選ばれる自己免疫疾患の処置に用いる組成物であって、
   （Ｎｖａ）＾２−シクロスポリン、また上記疾患ａ）ま
   たはｂ）の場合にはジヒドロ−（Ｖａｌ）＾２−シクロ
   スポリンの有効量を含有する組成物。