TW562927B - Agent for the diagnosis of C-type hepatitis virus infection - Google Patents

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TW562927B
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Junichi Shiraishi
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Description

562927 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7五、發明説明（2 ) 因此，能以較高蚕敏度迅速測定大量樣品之HCV感染 症診斷劑及診斷法廣受需求。 解決锞頴：> 方法 為了逹成上述目的，經刻意檢討結果，發現使用戊二 醛法使載體蛋白質與各種C型肝炎病毒之核心抗原、N S3抗 原、NS4抗原、以及HS5抗原進行化學結合而成的複合抗體 連結在担體顆粒上，則能達成高靈敏度化。而且，使用複 合抗原也能使顆粒之安定性大幅改.善。 本發明提供將HCV抗原以及由HCV抗原與載體蛋白質經 化學結合製成之複合抗原連結在固態材料而得之C型肝炎 病毒感染症診斷劑。 作為載體蛋白質之材料，只要是水溶性蛋白質即可， 並無特殊限制，其分子量以10,〇〇〇〜1,000,〇〇〇為宜，以 30,000〜150,000較宜。具體而言例如牛血清白蛋白（BSA) 、卵白蛋白、血藍質蛋白等都能適用。其他尚有水溶性合 成高分子，例如聚乙烯醇、糊精等都能使用。 固態材料可使用担體顆粒、徹孔滴盤、試管等。其中 以使用担體顆粒較佳。作為担體顆粒之材料，可使用被用 於通常顆粒凝集法診斷劑之習知顆粒。例如聚苯乙烯乳膠 等疏水性顆粒、顆粒表面有胺基、羧基等親水團基之共聚 合乳膠顆粒、紅血球、明膠顆粒等都能使用。其中以使用 聚苯乙烯乳膠較佳。 本發明之診斷劑使用之HCV抗原蛋白質，包括習知之 HCV構造性蛋白質及非構造性蛋白質。構造性蛋白質可使 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4 38845 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝·
、1T _争 562927 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（3 ) 用核心蛋白質。非構造性蛋白質可使用NS3蛋白質、NS 4蛋 白質、以及NS5蛋白質。這些抗原蛋白質之胺基酸及核# 的序列，已記載於文獻上（特表平5-508219號）。至於抗原 蛋白質之來源，只要是具有HCV抗原活性者即可，並無特 殊限制。由天然材料分離而得者、化學合成者、以及由1 傳基因重組法製成者都能使用。作為抗原蛋白質之材料$ 以使用這些範疇之蛋白質中各種長度之胜肽，其中以彳吏用 由8値以上之胺基的構成且含有至少一個抗體結合位置之 胜肽為宜，而以使用分子量1,〇〇〇〜5,000之合成胜肽較佳 。胜肽可以採用相關業界習知之方法，例如固態合成法、 片段縮合法、或是沿用多時的溶液合成法等進行合成，其 中依照文獻（Merrifield， J· Am· Chem· Soc· 85:2149’ 1963)記載之固態胜肽合成法製造者較佳。在本發明中， 核心、HS3、NS4、HS5等各種抗原蛋白質，經與含有至少 1値以上不同抗原決定部位之抗原互相組合，即可直接或 以與載體蛋白質形成複合抗原之型式連結在担體穎粒上。 後述實施例中，使用特表平5-508219號記載之核心範_中 含有第49〜68胺基酸的胜肽作為核心抗原，使用特表平5-508219號記載之NS4範除中含有第1706〜1725、 1718〜 1737、以及1724〜1743胺基酸之胜肽作為NS4胜肽，使用 特表平5-508219號記載之NS5範醻中含有第2287〜2306、 2299〜2318、以及2311〜2330胺基酸之胜肽作為MS5胜肽， 此外，使用特表平5-508219號記載之NS3範赙中含有第 1192〜1457胺基酸之胜肽作為NS3抗原，但並不限於此。 .裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、?τ 参 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 5 3 8 8 4 5 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 562927 A7 B7 五、發明説明（7 ) 體積之核心抗原溶液（胺基酸49〜68之胜肽溶於10aM、pH 7.0之PBS調製成0.1%w/v濃度者），再加人10mM、PH7.0之 PBS使總董成為9倍體稹，然後加入1%戊二醛水溶液使開 始反應。30¾反應30分鐘後加入1倍體積之20%甘胺酸水 溶液使反應停止。 置m製備連結HCV抗原之乳膠 粒徑0.78u m之聚苯乙烯乳膠顆粒（積水化學工業公司 製造）於10mM、PH4.0之PBS中調製成濃度之懸浮液， 對該乳膠懸浮液1ml加入實施例1中製成之NS3複合抗原、 NS4複合抗原、HS5複合抗原50/i 1,於4¾反應24小時。然 後進行離心（1 2 0 0 0 r p m、1 0分鐘），對沈澱物添加與離心前 同量之含lmg/al BSA之0.1M、pH7.0 PBS缓衝液使顆粒均 勻分散。再度離心處理，再使分散於相同缓衝液中，作為 連結HCV抗原之乳膠。 實施例3 ：凝集反應 實施例2中製成之HCV抗原連結乳膠（5% )10u 1加入 10/i 1之檢體樣品（被驗者血液）中，加入80/i 1含有lmg/inl CSA之0.1M磷酸缓衝液，於4510反應15分鐘後測定乳膠顆 粒之凝集度。此一反應及測定偽使用全自動免疫测定装置 PAMIA-30(東亞翳用電子公司製造）测定前方之散射光。 凝集度傺以凝集顆粒數目對全部顆粒數目之百分比（ P/T % )表示之。 測定結果示如表1。由表1可明白顯示對HCV抗體呈陽 性反應之檢體中可得到充分之凝集度，在對HCV抗體呈陰 •裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
、1T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 9 3 8 8 45 562927 A7 B7五、發明説明（8 ) 性反應·之檢體中，乳膠則不發生凝集現象。由於在含有 HCV抗體之檢體樣品中確認有凝集反應，可知像由連結HCV 抗原之乳膠顆粒與HCV抗體反應而發生凝集現象。 HCV抗體陽性檢體 HCV抗體陰性撿體 [表1] 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ABCDEFGH I J 72. 52 54. 56 44. 89 43. 02 73. 00 0. 95 0. 90 0. 82 0,82 0.92 區分值 2 . 7 9 % 實施例A:早期檢出靈敏度 使用對同一人在HCV抗體漸呈陽性化之過程中定時採 血所得數個樣品所構成的市售HCV血清型轉變套組（ Seroconversion PaneUPHV 901、PHV 9 0 2、以及 PHV 903 (協和Medics公司輸入販賣，Boston Biomedica公司製造） ，測試HCV抗體轉呈陽性之早期檢出靈敏度。使用實施例 2中製成之診斷劑之本發明的計數免疫分析法（CIA),依照 以下方法與其他公司製品比較： A公司：使用紅血球之被動血球凝集法（PHA) 使用H C V抗原：核心、N S 3、N S 4 Β公司：酵素免疫分析法（Ε ΙΑ) 使用H C V抗原··核心、H S 3、N S 4 C公司：酵素免疫吸附分析法（ELISA) 使用H C V抗原··核心、N S 3、H S 4 凝集度 (Ρ/Τ % ) 裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ：297公釐） 10 3 8 8 45 562927 A7 B7 五 發明説明（9 ) 所得結果示於表2、表3、及表4(表中B公司與C公司之 :據像血清套組中附記之數據）。使用本發明之診斷劑及 :斷法，在血清套組PHV902及PHV903(這些套組之受驗人 :探血第1天起之PCR法檢體檢査已呈陽性）中，能比其他 :司之任一種診斷劑更早期檢出HCV感染。 表2]HCV血清型轉變套組PHV901 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ID 採血曰期 日致 PHVQO^Ol i 93/09/23 0 PUV901-02 93/11/27 ；72 PHV901-03 . 1 93/12/29 104 1 侧01·04 93/21/31 1 106 PHV901-05 94/01/05 PfP/901-06 94/01/07 113 1 PF：V90I-07 94/02/01 138 1 PHV901-08 94/02/09 146 P_l-09 93/03/01 165 PHV90M0 94/03/08 173 PHV9Q1-1I 94/04/14 209 判定 m 麵 ϋίΐΐί? 喊辦 繼_l 轉
P/T A公司 PHA 判定 附記值 B公司 E I ΑΠ 判定cai 1.0 Ιϋϋ麵瞧 75.3 本發明 C [ A
74.6 區分值 1.75% 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 1 1 3 8 845 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝_ 訂 562927 A7 B7 五、發明説明（10 [表3] HCV血清型轉變套組PHV902
(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝.
、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 12 3 8 8 45 562927 Α7 Β7 五、發明説明（11 ) [表4 ] HCV血清型轉變表組PHV903
(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 管掄例5 :與直接連結HCV抗原之診斷劑比較 使用本發明之診斷劑以及直接連結相同HCV抗原製成 之診斷薄I,進行HCV抗體之檢出蚕敏度試驗。 使NS3抗原（由遣傳基因重組法製得者）、核心抗原（由 合成法製得之胜肽）、HS4抗原（由合成法製得之胜肽）、以 及NS5(由合成法製得之胜肽）分別與BSA製成複合抗原後， 依照實施例2之方法進行連結，製成連結H CV複合抗原之乳 膠。 以相同抗原、相同連結條件進行直接連結所製成之 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 13 3 8 8 4 5 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 562927 A7 B7 五、發明説明（12 ) HCV抗原直接連結乳膠作為對照。 使用這些乳膠，依照實施例3之方法，測定HCV抗體呈 陽性之檢體樣品（A〜E)及HCV抗體呈陰性之撿體（F〜J)之 凝集度（P/T/%)。考慮區分值（cutoff value,連結複合 抗原之乳膠為1.95%;直接連結抗原之乳膠為1.01%)後， 判定各檢體之HCV抗體呈陽性或陰性。所得結果示於表5。 [表5] 檢體樣品 連結複合抗原之乳膠 凝集度（％ ) 判定 直接連結抗原之乳膠 凝集度（％ ) 判定 A 15 · 87 陽性 0.34 陰 性 B 66.28 陽性 24.36 陽 性 C 35.28 陽性 6.35 陽 性 D 50.98 陽性 15.56 陽 性 E 17.88 陽性 0.55 陰 性 F 0 . 46 陰性 0.34 陰 性 G 0.56 陰性 0.36 陰 性 Η 0.79 陰性 0.35 陰 性 I 0.62 陰性 0 . 56 陰 性 J 0.65 陰性 0.55 陰 性 樣品A與E等兩件HCV抗體呈陽性之檢體，以直接連結 抗原之診斷劑無法檢出HCV抗體，但以本發明之連結複合 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •裝·
、1T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 14 3 8 8 4 5 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 562927 A7 B7 五、發明説明（1 3 ) 抗原之診斷劑則能夠檢出。 實直_例—6 :長期保存安定性試驗 將實施例5之連結HCV抗原之乳膠於0.1M、pH7.0 PBS 中之5% U/v)懸浮液冷藏保存，以試驗試劑之保存安定性 。所得結果示於表6。 [表6] HCV抗體呈陰性之集結（pool)血清 HCV抗體呈陽性之集結血清 -- - - - - |_ «« - - - I —II I - - II !. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 璩銪捃会杭鹿 首栳镩結 璩结捃会抗鹿 首栳菌結 0値月 0.71% 0.75¾ 41.90% 12.46¾ 1値月 0·71% 0.72% 40.85% 11.56% 3個月 0.75¾ 1-02¾ 46.83% 10.79% 6個月 0.78¾ 1.22% 43.47 % 10.62¾ 9個月 0.82¾ 1.50¾ 43.86% 9.79¾ 12値月 0.75¾ 1·62% 41.62% 8.62% 13個月 0.78% 1-97% 43.35% 8.65% 區分值 璩結複合抗 原 首 掩 溥結 0個月 2.35% 1 . 25 % 1個月 2 · 5 1 % 1 · 3 5 % 3個月 2.56¾ 1 . 5 6 % 6個月 2.55% 1 . 82 % 9個月 2.25% 2 . 10 % 12個月 2.33% 2 · 32 % 13個月 2.44% 2 . 57 % 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐j 3X8T5 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 562927 A7 五、發明説明（14 ) 由以上結果明顯可見，連結複合抗原之乳膠經13個月 長期保存後，凝集度依舊安定。另一方面，直接連結抗原 之乳膠則被發現在使用HCV抗體呈陰性之集合血清之試驗 中，凝集度在長期保存過程中徐徐上舁；在使用HCV抗體 呈陽性之集結血清之試驗中，凝集度徐徐下降。此外，區 分值也徐徐上昇。 實施例7 :製造連結HCV抗原之乳膠（2) 使用實施例1之相同材料作為H CV抗原，除了 NS3抗原 並不製成複合抗原而直接使用外，其他與實施例2進行同 樣操作，製成連結HCV抗原之乳膠。 實施例8 :製造連結HCV抗原之乳膠（3) 使用實施例1之相同材料作為NS3抗原，使用前述公報 (特表平5-508219號）記載之49〜68胺基酸之胜肽作為核心 抗原，使用同樣1706〜1725、 1718〜1737、1724〜1743胺 基酸之胜肽作為NS4抗原，使用同樣2287〜2306、2299〜 2318、2311〜2330胺基酸之胜肽作為NS5抗原，與實施例 1同樣以1倍體積之1%(兄^)854溶液與1〜8倍體積之0.1% U/v)HCV抗原溶液進行反應以製備HCV複合抗原，再與實 施例2同樣製備連結HCV抗原之乳膠。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 【裝· 、11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 16 3 8 8 4 5

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  1. 562927 公告^ 一 r「.— ·細丨丨丨丨丨•丨咖_ι__· _丨丨，__·，_ — | 亭Λ 第86105490號專利申請案 咚!:_以補冬丨 申請專利範圍修正本
    (92年9月24日） 1· 一種C型肝炎病毒感染症診斷劑，是使3種以上之HCV抗 原與載體蛋白質經化學結合而製成之複合抗原連結於固 態材料而成者，其中，各複合抗原中之HCV抗原與載體 蛋白質之分子數比爲1: 3至1: 20，各複合抗原上只結合 一種之HCV抗原，以及各HCV抗原係由核心抗原、NS3抗 原、NS4抗原、以及NS5抗原中選出者。 2·如申請專利範圍第1項之C型肝炎病毒感染症診斷劑，是 由 a·核心抗原與載體蛋白質經化學結合製成之複合抗原、 b.NS3抗原或NS 3抗原與載體蛋白質經化學結合製成之複 合抗原、 C.NS4抗原與載體蛋白質經化學結合製成之複合抗原、 d.NS5抗原與載體蛋白質經化學結合製成之複合抗原、之 中逢擇3種以上之HCV抗原，使之連結於固態材料而成 者。 3·如申請專利範圍第1項或第2項之C型肝炎病毒感染症診 斷劑，其中，HCV抗原爲1種以上之具有HCV抗原活性並 含有至少1個以上不同抗原表位（epitope)者。 4·如申請專利範圍第丨項或第2項之C型肝炎病毒感染症診 斷劑，其中，載體蛋白質係自牛血淸白蛋白（BSA)、卵白 白蛋白、以及血藍質蛋白中選出者。 1 38845 562927 5. 如申請專利範圍第1項或第2項之C型肝炎病毒感染症診 斷劑，其中，固態材料爲担體顆粒者。 6. 如申請專利範圍第5項之C型肝炎病毒感染症診斷劑，其 中，担體顆粒爲疏水性顆粒者。 7. 如申請專利範圍第6項之C型肝炎病毒感染症診斷劑，其 中，疏水性顆粒爲聚苯乙烯乳膠者。 8. —種C型肝炎病毒感染症之檢測法，是由將申請專利範圍 第5項之C型肝炎病毒感染症診斷劑加入檢體樣品中，再 測定担體顆粒之凝集度等步驟所構成者。 9. 如申請專利範圍第8項之c型肝炎病毒感染症檢測法，其 中，凝集度係以流動式細胞計（flowcytometer)數器測定 者。 10. 如申請專利範圍第9項之C型肝炎病毒感染症檢測法，其 中，流動式細胞計數器係測定前方散射光者。 2 38845
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Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3715027B2 (ja) 1996-05-07 2005-11-09 シスメックス株式会社 Ｃ型肝炎ウイルス感染症診断薬
KR20010106684A (ko) * 2000-05-22 2001-12-07 김주호 혈액 스크리닝과 확인진단이 동시에 가능한 새로운 ｃ형간염 진단시약
US20030152942A1 (en) * 2001-05-09 2003-08-14 Lance Fors Nucleic acid detection in pooled samples
PL1658302T3 (pl) 2003-07-25 2011-03-31 Idenix Pharmaceuticals Inc Analogi nukleozydów purynowych do leczenia chorób spowodowanych przez Flaviviridae obejmujących zapalenie wątroby typu C
US8865398B2 (en) 2006-09-01 2014-10-21 Abbott Laboratories Combination hepatitis C virus antigen and antibody detection method
JP4975601B2 (ja) * 2007-03-16 2012-07-11 シスメックス株式会社 Ｈｃｖ抗体測定用試薬キット及びｈｃｖ抗体測定方法
JP4975600B2 (ja) * 2007-03-16 2012-07-11 シスメックス株式会社 Ｈｃｖ抗体測定用試薬キット及びｈｃｖ抗体測定方法
CN101101297B (zh) * 2007-07-24 2011-07-20 华中农业大学 一种适用于1型鸭肝炎病毒抗体乳胶凝集检测试剂盒及应用
CN102161716B (zh) * 2010-12-30 2014-03-05 北京九强生物技术股份有限公司 胶乳致敏的方法及试剂
FR2984328B1 (fr) 2011-12-20 2016-12-30 Bio-Rad Innovations Procede de detection d'une infection par le virus de l'hepatite c
FR3003353B1 (fr) * 2013-03-14 2015-03-06 Horiba Abx Sas Nouvelle methode de dosage en flux d'un objet d'interet
CN104849460A (zh) * 2015-05-29 2015-08-19 山东博科生物产业有限公司 一种稳定的丙型肝炎病毒核心抗原酶结合物稀释液
CN112986563A (zh) * 2021-02-04 2021-06-18 斡得霈克(武汉)医疗科技有限责任公司 狂犬病毒elisa抗体检测试剂盒

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5582199A (en) * 1978-12-15 1980-06-20 Lion Fat Oil Co Ltd Preparing light colored and uniform aqueous solution of alphaaolefin sulfonic acid
US4968742A (en) 1987-11-09 1990-11-06 Miles Inc. Preparation of ligand-polymer conjugate having a controlled number of introduced ligands
CN1074422C (zh) * 1987-11-18 2001-11-07 希龙股份有限公司 制备含有hcv表位的分离多肽的方法
US5683864A (en) * 1987-11-18 1997-11-04 Chiron Corporation Combinations of hepatitis C virus (HCV) antigens for use in immunoassays for anti-HCV antibodies
JP2656995B2 (ja) 1989-03-17 1997-09-24 カイロン コーポレイション Ｎａｎｂｖの診断用薬
US5747239A (en) * 1990-02-16 1998-05-05 United Biomedical, Inc. Synthetic peptides specific for the detection of antibodies to HCV, diagnosis of HCV infection and preventions thereof as vaccines
KR940000755B1 (ko) 1990-02-16 1994-01-29 유나이티드 바이오메디칼 인코오포레이티드 Hcv에 대한 항체 검출, hcv 감염의 진단 및 백신으로서의 그 예방에 특히 적합한 합성 펩티드
US5106726A (en) * 1990-02-16 1992-04-21 United Biomedical, Inc. Synthetic peptides specific for the detection of antibodies to HCV
US5164299A (en) * 1990-03-20 1992-11-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Use of a mixture of conjugated and unconjugated solid phase binding reagent to enhance the performance of assays
HU217025B (hu) 1990-04-04 1999-11-29 Chiron Corp. Hepatitis C vírus-(HCV) antigénkészítmények az anti-HCV-antitestek kimutatására immunoassay-kben
CA2047792C (en) 1990-07-26 2002-07-02 Chang Y. Wang Synthetic peptides specific for the detection of antibodies to hcv, diagnosis of hcv infection and prevention thereof as vaccines
JPH058219A (ja) 1991-07-02 1993-01-19 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd 重合体溶液の調製方法
AU2679492A (en) * 1991-09-16 1993-04-27 Abbott Laboratories Hepatitis c assay
CA2079647A1 (en) * 1991-10-11 1993-04-12 Grover L. Farrar In-line silicone coated polyester film and a process for coating the film
JP3193146B2 (ja) 1992-09-18 2001-07-30 株式会社トクヤマ Ｃ型肝炎診断用免疫学的凝集反応試薬
JP3274743B2 (ja) * 1993-07-02 2002-04-15 株式会社トクヤマ 診断用キット
JPH07198723A (ja) * 1993-12-29 1995-08-01 Nippon Zeon Co Ltd Ｃ型肝炎ウイルス感染症診断薬
GB2294690B (en) * 1994-11-01 1998-10-28 United Biomedical Inc Peptides effective for diagnosis and detection of hepatitis C infection
US5705330A (en) * 1995-04-14 1998-01-06 Abbott Laboratories Chemiluminescent immunoassay for antibody detection
KR0158434B1 (ko) * 1995-10-06 1998-11-16 허영섭 C형 간염 바이러스에 대한 항체 검출 및 면역원으로 유용한 합성 펩타이드
JP3715027B2 (ja) 1996-05-07 2005-11-09 シスメックス株式会社 Ｃ型肝炎ウイルス感染症診断薬

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