TW531421B - Depigmenting composition - Google Patents

Description

531421 A7 B7 五、發明説明（1 本發明係關於化妝或皮膚用的除色素組成物，其中含 新穎的除色素活性化合物，以及其供淡色化皮膚或處理色 素沈著標記之用途。 因爲社會文化及美學之因素，皮膚色素現象之控制在 化妝品硏究上的重要性逐漸增加，增加對於將皮膚顏色淡 化或1¾藏或減淡色素沈者失g周造成的標記之化妝產品的需 求。 哺乳動物且尤其是人類的皮膚及外骨骼之色素沈著是 由於存在黑色素，其爲複雜的聚合物色素，顏色範圍從棕 黑（黑色素）至紅色（微黑色素），黑色素生成之黑色素 生物合成是經由可大量在眼睛、髮球及皮膚發現的稱爲黑 色素細胞之特定細胞負責，不同階段的黑色素生成現在已 經相當熟悉。 在不同階段的黑色素生成中，只有最初的兩個反應是 在稱爲酪胺酶之金屬酵素控制之下，其將酪胺酸氧化成二 氫苯基丙胺酸（D 0 P A )且然後成爲多巴醌（ dopaqinnone)，全部的後續步驟同時發生且沒有牽涉酵素 ，因此，需要抑制或刺激黑色素生成，最容易的控制是經 由改變酪胺酶之活性。 經由作用在酪胺酶而防止黑色素生物合成之部份除色 素用藥劑爲已知，其中部份例如麴酸，經由螯合酪胺酶功 能所必需的銅離子而抑制酪胺酶之合成或成熟，其他經由 作爲類似物質而佔據酵素之活性部位並競爭酪胺酸或 D〇P又，直接抑制酪胺酶之活性，此可能是在氫醌之情 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 請 先 閱 讀 背 意 事 項 再 填 頁 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4- 531421 Α7 Β7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（2 ) 形，其爲一種熟知的除色素用活性劑，其用途目前因爲其 高胞毒性而嚴格地限制，以及熊果苷（4 -羥基苯基- β-D -葡糖吡喃苷），其爲一種從某些植物萃取之除色素用 化合物（見法國專利9 4 / 0 8 7 5 0 )。 曰本專利申請案6 3 - 8 3 1 7號揭示一種供外部使 用具有皮膚淡色化能力之藥劑，其含白屈菜酸作爲活性成 份，其存在於多種植物中且可尤其是從白屈菜萃取，其可 經長時間經由有機合成從丙酮及乙二酸乙酯製備此酸（Ε. R. Riegel and M. C. Reinhard, Jpurnal of American Chemical Society ( 1926)，48，1334-1344 頁，及 J. Duclaux and J. Barbiere, Bulletin de la Societe Chimique de France (1933), 53, 564-569 頁）。 本案發明者不預期地觀察到主要的合成中間物化合物 丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯具有抑制酪胺酶之性質，且 其適合作爲除色素用組成物之活性成份。 因此本發明之主題是一種化妝或皮膚除色素用的組成 物，其中含丙酮一 α，α’一二乙二酸酯型之化合物作爲活性 成份，以及其供淡色化皮膚或處理色素沈著標記之用途。 本發明之另一主題是使用上述定義之化合物供淡色化 皮膚之方法或供化妝或皮膚處理色素沈著標記之方法。 本發明之另一主題經由下列的說明及實例將更淸楚。 本發明化妝或皮膚用組成物之特徵是在生理上可被接 受之介質中含通式（I )之化合物 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填頁) Ν— 、1Τ· 線— 531421 A7 B7 五、發明説明（3 (I) R-ooc^c=ch-c-ch-c«coo-r·

1 |l I

OH O OH 其中R及R ’基彼此獨立地代表C χ - 6烷基或氫原子， 或此化合物在生理上可被接受之鹽類。 在本發明之一個較佳具體實施例中，可相同或不同的 兩個R及R ’基代表烷基，其較宜爲C i - 6 ,丙酮一 α , α，一 二乙二酸二乙酯也就是其中兩個R基代表乙基之式（I ) 化合物特別較佳。 根據本發明之組成物較宜爲乳液、乳膏或膠質形式。 其較宜在媒介化形式中含活性成份，也就是含載體例 如脂質體。 本發明組成物中存在的式（I )活性成份濃度爲 〇·1至5重量％,較宜爲0.25至3重量％ 。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 供組成物之在生理上可被接受之介質主要爲水，其中 可加入化妝品或皮膚藥劑慣用的添加劑，這些添加劑爲例 如植物或礦物油（脂質體）、乳化劑、稠化劑、防腐劑、 染料、香料、抗腐敗劑、ρ Η調節劑等。 在試管內測試本發明新穎活性成份之功效，測量其抑 制酪胺酶-酪胺酸酵素反應及酪胺酶- D Ο Ρ Α反應之能 力，以及評定其在人類皮膚移植物上除色素的能力。 活體內的除色素效應是根據測量黑鼠尾色素沈著之標 準方法測定。 對☆在活物體上的活體內及試管內測試，使用的對照 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -6 - 531421 A7 B7 五、發明説明（4 ) 物質爲氫醌，其爲具有某些程度胞毒性之已知除色素用活 性劑，在全部情形下，本發明之較佳除色素用活性成份在 低於氫醌之濃度下，結果相等或優於氫醌之效應。 評定本發明活性成份之毒性時，口服用藥至大田鼠， 得到大於2 0 0 0毫克/公斤之5 0 %致死劑量（L D 5 〇 )，因此丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯不是分類爲有危害 之產品。 除了其滿意的效應及沒有毒性之外，本發明較佳活性 成份之另一優點是其容易製備，因爲此牽涉一個簡單的有 機合成步驟，在單一容器內使用便宜的化學化合物例如丙 酮及乙二酸乙酯，並得到良好的產率（7 0 % )，在此， 從植物萃取的物質例如熊果苷之除色素用活性成份，其萃 取需要很大的裝置且只提供少量的活性成份。 下列實例是用於說明本發明，但是不能作爲其限制。 製備實例 製備丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 將58克丙酮、150克乙二酸二乙酯及273克得 自溶解1 3 6克乙醇鈉於4 1 0克無水乙醇之溶液（溶液 A )依序加入配備攪拌系統及迴流冷凝管之2升反應器內 並用水浴加熱，將反應混合物加熱至7 5 °C，經數分鐘後 溶液變成渾濁，再加入1 6 0克乙二酸二乙酯，然後加入 剩餘的溶液A且如果需要時加熱至6 〇 °C，持續激烈攪拌 混合物壶使溫度保持在7 5 °C，大量綠黃色的沈澱物形成 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 531421 Α7 Β7 五、發明説明（5 ，其導致幾乎形成固體，將反應混合物放置冷卻，然後在 其中加入3〇0毫升濃氫氯酸（d = l . 18)及8〇〇 克碎冰之混合物，將此混合物攪拌至少2小時，以便ψ和 乙醇鈉。 在燒結漏斗過濾沈澱物並用1升弱酸性（ρ Η == 6 ) 冰冷的水淸洗三次，用ρ Η = 7的1升冰冷的水淸洗一次 〇 將沈澱物放在室溫下乾燥一週。 如此得到1 8 0克米黃色沈澱物（產量7 0 % 。 1 Η N M R ： 相對於Τ Μ S之化學位移ρ ρ m ( 2 5 Ο Μ Η ζ C D C 1 40(611，三裂峰），4.30 4 · 4 5 ( 4 Η，四裂峰） 3 8 ( 2 Η，單峰）； (請先閱讀背面之注意事項再填頁) 裝· 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 C Ν Μ R ： 相對於 TMS 之 δ(300ΜΗζ ，CDCls 4.147，62.849，104.100, • 6 2 4 9 6 調製物實例 實例1 除色素用乳瞢τ 丙酮 α， α’一 每1 Ο 0克中的克數 乙酯 3 .〇0 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） -8 - 531421 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（6 ) 去礦物質水 7〇 •〇〇 芝麻油 17 • 0〇 鯨蠟基葡萄糖苷 3 · 〇〇 鯨鱲醇 2 · 0 0 羊毛脂 1 . 5 0 氫化可可油 1 . 5 0 山梨糖醇P E G — 9油酸酯 1 . 2 0 防腐劑 0 · 5 0 西黃蓍膠 0 . 3 0 香料 g · s . 實例2 除色素用乳液I I 每1 0 0克中的克數 含5 %劑量活性劑之脂質體 2 0 .00 去礦物質水 6 1 • 70 凡士林液體 15 .〇〇 鯨蠟醇 2 . 0 0 防腐劑 0 . 5〇 香料 Q · s . 實例3 除色素用乳液I I I 每1〇 〇克中的克數 含5 %劑量活性劑之脂質體 5.00 去礦物A水 6 1.30 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X M7公釐） 531421 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 __________B7 五、發明説明（7 ) 凡士林液體 山梨糖醇聚氧乙撐甘油異硬脂酸酯 蜂蠘 丙二醇 硫酸錶 山梨糖醇P E G — 7油酸酯 防腐劑 香料 實例4 除色素用乳液I V 含5 %劑量活性劑之脂質體 去礦物質水 凡士林液體 山梨糖醇聚氧乙撐甘油異硬脂酸酯 羊毛脂 凡士林 防腐劑 卡波姆 三乙醇胺 香料 2

2 2 〇 〇 0 Q • 0 ( 5 0 5 〇ο 〇 7 〇 5 〇 〇 1 〇· 〇 0 6 9.50 1 0 · 〇 0 5 . 5 〇 2.0° 2 · 〇 〇 0.50 0.25 0.25 Q · 使用製備乳化液之標準方法製備這四種乳化產物，將 水及脂也物質分別加熱至8 0 °C，然後將兩組份攪拌混合 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -10- 531421 Α7 Β7 五、發明説明（8 ) 在攪拌器內（例如渦輪攪拌器或行星式攪拌器）且同時冷 卻，當溫度達到3 0 °C - 4 0 °C時，加入純的形式（除色 素用乳膏I )或在載體上的形式（除色素用乳液I I 一 _LX_)之活性劑以及香料，持續攪拌至混合物完全冷卻。 所得的產物爲淡黃色至淡米黃色。 供調製物實例2至4使用的含5 %丙酮一 α，α，—二乙 二酸二乙酯之脂質體含下列成份：. 每1 0 0克中的克數 5 6.30 3 0.5 5 . 0 5 . 0 2 . 0 0 . 5 0 . 5 0 . 2 成份 去礦物質水 丁二醇 大豆卵磷脂 丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯 麥蛋白質Β Ρ Μ 酣尼（phenonip ) 西黃蓍膠

ColeUca殺微生物劑 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 性 二乙二酸二乙酯在試管內對酪胺酶之抑制活 抑制L — D〇Ρ A -酪胺酶ΜΛ 經由薄層層析法顯示在L -巴醌時，使用丙酮一 α，α’—二乙 乙酯對酪胺酶之抑 制性。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） -11 - 531421 A7 B7 五、發明説明（9 ) 將1 0微升丙酮—α，α’—二乙二酸二乙酯在乙醇（ 9 6 % )中的1 %溶液沈積在G 6 Q矽膠板上，移動的溶 劑爲丁醇/水/乙酸混合物（4 / 1 / 1，體積/體積/ 體積）且移動至1 0公分之高度，乾燥後，將L -D〇Ρ Α溶液（1莫耳濃度）噴灑在整個板上，然後噴上 酪胺酶溶液（2 3 8 I U /毫升），暴露在日光後在棕色 背景下顯現R f在0 · 8 0範圍之白色光譜，此白點是由於 缺少酪胺酶活性將L 一 D Ο P A物質轉化成多巴醌，在日 光下此分子會自動轉化成棕色色素（棕色背景），因此丙 酮一 α，α’—二乙二酸二乙酯可有效抑制D Ο P A —酪胺酶 反應。 II ·抑制酪胺酸-酪胺酶反應 在可見光範圍經由吸收光度法顯示在酪胺酸之羥基化 反應成爲D〇P A時，使用丙酮一 a，oc，一二乙二酸二乙酯 對酪胺酶之抑制性，此爲從酪胺酸物質在試管內產生的黑 色素之光度測試法（在4 7 7毫微米吸收）。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 爲了在硏究濃度範圍顯示在4 7 7毫微米的吸收直接 與酪胺酶之活性成正比，使用增加已知量的酪胺酶建立校 正曲線。 對此，製備下列酵素及物質溶液： -酪胺酶儲備溶液： 酪胺酶 1 0毫克 1毫升 雙5Tns緩衝液（〇 · 1莫耳濃度， -12- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 531421 A7 B7 五、發明説明（10 ) p Η 6 · 5 )

水一〇_ · s · 5 〇毫升 酪胺酸儲備溶液： L 一酪胺酸 0 . 0 4克 水一Q · S · 10 0毫升 將2 . 0毫升雙Tns緩衝液（0 . ,1莫耳濃度 ,pH 6 . 5 )及5 · 0毫升酪胺酸儲備溶液添加至0毫升、 1 · 2毫升、2 · 0毫升及2 · 5毫升之酪胺酶溶液並將 各混合物用水調整至總體積爲1 0 · 0毫升。 將這些混合物在3 7 °C之水浴中培養1小時3 0分鐘 ，然後快速冷卻至4 °C，在4 7 7毫微米下測量溶液之 吸收並與沒有酪胺酶之溶液比較，畫出曲線程式y = 0 · 8 1 3 X + 1 · 2 7 X 1 0 — 3且相關係數等於 0 . 9 9 9之校正曲線。 然後製備下列溶液： 對照組溶液(1 〇 〇 %酪胺酶活性）

經濟部中央標準局員工消費合作社印I 酪胺酸儲備溶液 5 · 〇毫升 酪胺酶儲備溶液（9 6 I U /毫升）2 · 〇毫升 雙Tns緩衝液（0 · 1莫耳濃度， 2 · 〇毫升 p Η 6 · 5 ) . 水一Q · S . 1〇· 〇毫升 硏秦的溶液·· -13- 本紙張尺度適用中國國家標準,（CNS ) Α4規格（2丨0 X 297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 抑 效 有 可 醋 。 乙素 二色 酸黑 二生 乙產 二內 ，一 管 a試 α 在 I 酶 酮胺 丙酪 示之 顯酸 果胺 結酪 此一 I i 這 L 從 ,ηυ 帋 531421 Α7 Β7 五、發明説明（11 ) 2 · 58%在乙醇中丙酮一α，α，一二 2 · 0毫升 乙二酸二乙酯 酪胺酸儲備溶液 5 · 〇毫升 酪胺酶儲備溶液（9 6 I U /毫升） 2 · 〇毫升 雙Tns緩衝液（0 · 1莫耳濃度， 2 · 〇毫升 P Η 6 · 5 ) 將這兩種溶液在3 7 °C之水浴中培養1小時3 0分鐘 ，然後將溶液快速冷卻至4 °C，然後在λ= 4 7 7毫微米讀 取吸收値，用沒有酪胺酶之空白作爲對照組，在這些情形 下進行五次相同測試之結果列在下表1中。 測試 對照組溶液在4 7 7毫微 米之吸收値 測試溶液在4 7 7毫微 米之吸收値 1 1.23 «0 2 1.16 «〇 3 1.16 «〇 4 1.23 -0 5 1.16 -0 平均 «1.16 «0 ___ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐）

-14- 531421 A7 B7 五、發明説明（12 ) 丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯在試管內的皮膚移植物上的 去色素能力 在皮膚移植物上經由組織學硏究評定丙酮- α，α’-二 乙二酸二乙酯對黑色素細胞的酪胺酶之抑制活性。 解凍並在1 0 % (重量/體積）甲醛溶液中停留3 0 分鐘後，從腹整型術得到的人類皮膚移植物在3 7 °C及 0 · 0 0 5莫耳濃度L 一 D Ο P A與測試產物存在下培養 1 5小時。 使用濃度爲0 · 5 %、1 %及2 % (重量/體積）於 10% (體積/體積）DMSO在水中的溶液之丙酮一 α， α’一二乙二酸二乙酯。 使用濃度爲1 · 1 % (重量/體積）於1 0 % (體積 /體積）D M S〇在水中的溶液之已知酪胺酶抑制劑之氫 醌作爲對照組產品。 平ί了製備只在0 · 0 0 5臭耳濃度L 一 DO Ρ Α存在 下培養之對照組移植物。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 對於組織學測試，從包含在石蠟中的移植物取出4微 米的厚片並將厚片印染鯨鱲基紫。 在白光下的光學顯微鏡可目視評定黑色素細胞反射酪 胺酶活性之顏色，其結果總結在下表2。 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） 531421 A7 B7 五、發明説明（13 ) 表2 產品 酪胺酶活性 對照組（沒有抑制劑） + + + 1 · 1 %氫醌 + 丙酮二乙二酸二乙酯 在 0 · 5 °/〇 〇 在 1 · 0 % 〇 在 2 · 0 % 0 + + + : D〇P A之非常強的氧化反應 〇：沒有D Ο P A之氧化反應 在測試情形下，可看出在0 . 5 %、1 . 0 %及2 % 比例下的丙酮一 oc，α’一二乙二酸二乙酯可完全抑制酪胺酶 活性。 丙酮一 α，α’--二乙二酸二乙酯在活體內黑鼠尾上的去 色素能力 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 含在脂質體上的載體化形式活性成份之兩種組成物與 含氫醒的號稱有效之商業化產品（Correcteuranti-taches L i έ r a c [ L i έ r a c b 1 e m i s h c 〇 r r e c t 〇 r ] - r e f. L 9 0 8 /1 )比較，測試 丙酮一 α，α’一二乙二酸二乙酯之去色素功效。 組成物1 :膠質，含9 9 · 0 %脂質體及含0 · 5 % 劑量之丙酮一α，α’一二乙二酸二乙酯 組成物2 :乳化液，含1 0 . 0 %脂質體及含0 . 5 %劑量乏丙酮一α，α，—二乙二酸二乙酯 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） 531421 A7 B7 五、發明説明（彳4 ) 對照組產品：含2 %氫醌之組成物 每天將各組成物應用在四隻黑鼠的尾部歷時2 8天， 在D 〇、D 1 5及D 2 8天使用顏色計測量每隻老鼠之淡 色參數L *。 根據下式計算各產品之功效（％ )： E % = ( (Ed Y— Ed〇)/E. DO) 10 0 下表3顯示得自各產品之參數L *値，以及處理1 5及 2 8天厚的功效（％ ),各値代表4隻老鼠之平均値:t標準 偏差。 表3 對照組產品（2 %氫醌） 組成物1(0.05 %活性成份） 組成物2(0.5 %活性成份） 天 DO D15 D28 DO D15 D28 DO D15 D28 平均LM直 43.2 45.5 44.6 42.8 45.8 46.8 39.8 45.3 47.1 土標準偏差 +1.5 +1.9 +2.1 +0.8 +0.4 +0.8 +1.0 +0.6 +0.8 Ε% 5.3 3.2 7.1 9.5 13.8 18.3 這些結果顯示含本發明活性成份之兩種組成物比先前 技藝可得到較佳的結果，且可有較低的使用濃度，也發現 丙酮一 0C，α’一二乙二酸二乙酯以劑量相關的方式作用，因 爲十倍λ的濃度其效應增加兩個因子。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 請 先 閱 讀 背 5 意 事 項 再

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -17- 531421 A7 B7 五、發明説明（15 ) 很明白地了解先前敘述純粹只供說明之目的且沒有隱 含任何限制，且在本發明之範圍內可進行變化及修改。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

C -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 531421 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 附件A 第87 1 20967號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國8 9年6月修正 1·一種化妝或皮膚用的組成物，其特徵是在生理上 可被接受之介質中含通式（I )之化合物 (I) R-OOC-C=CH-C-CH==C-COO-R, W ! 11 、1 ΟΗ Ο OH 其中R及R ’基彼此獨立地代表C i 6烷基.或氫原子， 或此化合物在生理上可被接受之鹽類。 2 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是兩個 R及R’基代表C 1-6院基。 3 ·如申請專利範圍第2項之組成物，其特徵是兩個 R及R ’基代表乙基。 4 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是爲乳 液、乳膏或膠質形式。 5 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是含在 脂質體上的載體化形式之式（I )化合物。 6 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是式（ I )化合物的含量比例從0 · 1至5重量％ ° 7 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是式（ 冢紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -1 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) — ---I I I I I ^ ·11111---▲ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 531421 A8 B8 C8 ____ D8 六、申請專利範圍 I )化合物的含量比例從〇 · 2 5至3重量％。 8 ·如申請專利範圍第1項之組成物，其特徵是該生 理上可被接受之介質由水組成且可含其他化妝或皮膚用的 輔劑例如植物或礦物油、乳化劑、增稠劑、防腐劑、染料 、香料、防腐敗劑、p Η調節劑或其他類似的輔劑。 ------I 丨 — -----0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -2- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）