TW505657B

TW505657B - Dolastatin 15 derivatives and pharmaceutical composition containing same

Info

Publication number: TW505657B
Application number: TW087103515A
Authority: TW
Inventors: Kurt Ritter; Teresa Barlozzari; Andreas Haupt; Bernd Janssen; Wilhelm Amberg
Original assignee: Basf Ag
Priority date: 1997-03-10
Filing date: 1998-03-10
Publication date: 2002-10-11
Also published as: IL131596A0; EP0981539A1; CA2297164A1; HUP0001758A3; AU744511B2; HRP980124A2; AU6448298A; NO994364D0; BR9808017A; KR20000076099A; US5965537A; CO4950525A1; ZA981957B; AR011957A1; CN1252806A; NO994364L; HUP0001758A2; JP2001518084A; WO1998040400A1

Description

505657 A7 B7_ 五、發明説明（1 ) 發明背景許多具細胞生長抑制劑之顯著活性的短肽已分離自印度洋海兔截尾海兔短腕蟲等人， Biochem. Pharmacology, 40: 1859-1864 (1990); Beckwith等人，J. Natl. Cancer Inst。85: 483-488 (1993)及在此中所引述之參考文獻）。此等包含遒拉斯德汀（Dolastatin) 1 -10(美國專利第4,816,444號，頒給Pettit等人）及遒拉斯德汀 15(歐洲專利申請號第398558號）。遒拉斯德汀15，例如，顯著抑制國際癌症組織（National Cancer Institute)之 P388淋己性白血病（PS系統）細胞株，爲對抗各種類型之人類惡性腫瘤之功效的強預測者〇極少量之各種道拉斯德 ί丁肽存於截尾海兔短腕蟲（Da/ahe//a anr/cii/ar/a)(每100公斤海兔約1毫克）且因此純化許估及使用之足夠量是困難的，而賦與合成此等化合物的努力動機（R〇UX等人^ Tetrahedron, 50:5345-5360 (1994); Shioiri 等人，

Tetrahedron, 49:1913-24 (1993); Patino 等人，經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

Tetrahedron, 48:4115-4122 (1992)及在此中所引述之參考文獻）。然而，合成的道拉斯德汀15遭遇包括在水性系統之差溶解度及其合成需要昂貴起始物的難題。此等’輪流，導致結構上修飾之遒拉斯德汀1 5的合成與許估 [Bioorganic & Med. Chem. Lett,, 4:1947-50 (1994); WO 93 03054; JPK36234790, WO 93 23 424] 〇然而，具遒拉斯德i丁 15之生物活性的合成性化合物是有需要的，其具有用的水性溶解性且可效率性及經濟性製造。 _為μ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 505657 經濟部中央榡準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（2 ) 發明概述本發明化合物包括式I之肽， A-B-D-E-F-G (夏）及其酸鹽° A，B，D及E每一爲一個胺基酸殘基，且a在胺基端。在一具體實施例，F爲氮環烷羧酸殘基。在此具體實施例，G爲單價基，例如，氫原子，统基，芳基，環烷基，雜芳基，烷氧烷基，羧基，羧烷基，胺羰烷基，芳烷基，雜芳烷基，烷氧羰烷基，芳氧羰烷基，烷亞磺醯烷基，芳亞磺醯烷基，烷磺醯烷基，芳磺醯烷基，烴基，芳氧羰基，烷-或芳亞續醯基或燒-或芳横醯基。在另一具體實施例，F爲氮環燒基及G爲藉碳*碳键連接至j?之雜芳基。本發明另一觀點包含包括式I化合物及醫藥上可接受載劑之醫藥組合物。本發明另一具體實施例爲治療哺乳動物癌症之方法，如人類，包括投藥含有效量式I化合物之醫藥可接受組合物至哺乳動物。發明詳細説明本發明係關於具抗贅瘤活性之肽。其亦包含包括此等治療哺乳動物癌症，如人類，之化合物及方法的醫藥組人物，藉投藥此等組合物至哺乳動物。 -5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本育)

、tT 505657 A7 B7 五、發明説明（3 ) 道拉斯德汀15，係分離自海兔截尾海兔短腕蟲心//a awr/cWar/a)之肽，爲細胞生長之有效抑制劑。然而，此化合物在海兔中只存在少量，因此難以分離〇且合成筇貴並遭遇差水性溶解度之難題。然而，如此中所示，遒拉斯德汀15可作爲發展克服此等缺點之化合物的起使點，而保有抗贅瘤活性或較天然物表現較大的抗贅瘤活性。本發明已發現遒拉斯德汀15的特定結構修飾物與遒拉斯德汀10及15比較，提供了對贅瘤疾病具令人驚訝的改良性治療潛力之化合物。遒拉斯德汀1 5衍生物甚至在多發抗藥性腫瘤系統仍表現活性及在水性溶劑表現未預期的高溶解度。進一步，本發明化合物可便利的合成，如下所詳述。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 爲本發明之目的，用語”單價基"係指可與第二個中性分子片段形成一個共價鍵的電中性分子片段。單價基包括氫原子，烷基如甲基、乙基及丙基，齒原予如氟、氣及溴原子，芳基如苯基及莕基，及嫁氧基如甲氧及乙氧基。連接 σ -鍵原子的二個單價基國亦可在連接原子之間一起形成π 鍵。二個單償基圈也可連接在一起，例如，藉聚伸甲基單元形成環狀結構。例如，單元_N(R)Rf，其中汉及R，每一爲單價基，可一起與氮原子形成雜環。此外，兩個單價基團結合至相同原子亦可一起形成二價基，如亞烷基，例如，亞丙基或氧原子。爲本發明之目的，用語"殘基"係指自分子去除水分子的元素（一個氧原子，二個氫原子）之後殘餘的分子片段，如本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明説明（4 ) 胺基酸或羥酸。爲本發明之目的，用語"正烷基"係爲不分枝或直鏈燒基，例如，正丙基（η-丙基，_Ci|2CH2CH3) 0 本發明化合物可以式I代表， A-B-D-E-F-G (I)，其中A，B，D及E每一爲α_胺基酸殘基。在一具體實施例，F爲氮環烷羧酸殘基。在此具體實施例，^爲選自氫原予，烷基，烷氧烷基，羧烷基，胺羰烷基，芳烷基，烷氧羰烷基，胺烷基，芳氧羰烷基，烷亞磺醯烷基，芳亞磺醯烷基，烷磺醯烷基，芳磺醯烷基，烴基，芳氧羰基，烷 -或芳亞磺醯基及烷-或芳磺醯基所組成之群的單價基團ό 在另一具體實施例，F爲氮環烷基及〇爲係藉碳_碳鍵而連接至F之雜芳基。式I之肽一般由L-胺基酸組成，但彼等可含有一或多個 D-胺基酸。彼等亦可存在如顰與生理上可耐受酸，包括氫氣酸’檸檬酸，酒石酸，乳酸，磷酸，甲磺酸，醋酸，甲酸，順-丁缔二酸’反-丁烯二酸，蘋果酸，琥珀酸，丙二酸’破酸，L-麩胺酸，L-天門冬胺酸，丙酮酸，黏液酸’苯甲酸，葡萄糖酸酸，草酸，抗壞血酸及Ν_乙醯甘胺酸。下列爲本發明之敘述，包括各別成分及使用所請化合物方法之詳述。 • 7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣.

、1T 川5657 A7 B7 五 '發明説明（ 5 本發明化合物 A之性質在一具禮實施例，A爲11，的脯胺酸衍生物

ου. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣· 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製其中na爲整數，較佳爲〇，1，2或3。1爲單價基，如氫原子或烷基其可爲正、分支或環狀及可經1至約3個氟原子取代；適合的實例包括甲基、乙基、異丙基、2-氟乙基、2,2,2 -三氣乙基、1-甲基-2-氣乙基、1-氣甲基-2_氣乙基或環丙基；甲基、乙基或異丙基係爲較佳。在此具體實施例，11\爲單價基，如氫原子或甲基、乙基、丙基或苯基。苯基爲可經取代；適合的取代基包含一或多個鹵原子，氟、氯及溴爲較佳，c^cu烷基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基或梢基。 R2a，R3a，11\及R5a每一，各別的，爲單價基，如氫原子或甲基。1及11、爲一起可形成伸丙基橋。在另一具體實施例，A爲式IIIa的經取代甘胺酸衍生物，R6a R1， R?a N I Ra

CII 〇 (Nla), 訂 8- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（6 ) 其中Ra具有如述於IIa之定義’尺、爲單價基，例如，氫原子或低級烷基，較佳爲甲基、乙基或丙基。在此具體實施例’ R a爲單價基，如氣原子、正或分支 Ci-C 8燒基其可被多至六個鹵原子取代，較佳爲氟，或c3-Cg·環燒基或C3-C8-環跪基-CrCf燒基，Ci-C4 -氧燒基如甲氧甲基，1-甲氧乙基或1，1-二甲羥甲基，（：2-(：5烯基如乙晞基及1-甲基乙缔基，或經取代或未經取代的苯基。適合的苯基取代基包含一或多個鹵原子，較佳爲氟、氣或溴，及燒基，甲氧基，乙氧基三氟甲基或硝基。尺7&爲爲單價基’較佳爲甲基或乙基。在另一具體實施例，A爲式IVa之α-胺基酸殘基， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中ma爲整數，較佳爲1或2。Ra&R'具有如述於式nla之意義。在另一具體實施例，A爲式Vaia-胺基酸殘基，

(V3) 本紙張尺度適用中國®家標準（CNS ) Α4驗（21()>< 297公髮） )吣657 A7 B7 五、發明説明（7 ) 其中Ra&R7a具有如述於式卩^之意義。在進一步具體實施例，A爲式VIa之經取代脯胺酸衍生物，

(Via) 〇其中Ra及具有如述於式IIa之意義，及乂3爲單價基，較佳爲羥基，甲氧基或乙氧基或氟原子。在另一具體實施例，A爲式VIIai硫脯胺醯基衍生物，

(Vila) illi — 4! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製 II 〇其中Ra，R\，R2a，R3a，R4a及R5a具有如述於式IIa之意義。在另一具體實施例，A爲式Villa之1，3·二氫異峭哚衍生 -10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇x 297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（ 8 物

Ν——Ra (Viiy 其中Ra具有如述於式113之意義。在另一具體實施例，A爲式IXai 2-氮雙環[2.2.1]庚烷 3-羧酸衍生物，

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中Za是單或雙键及Ra具有如述於式113之意義。3-羰基取代基可具有外或内方向。 B之性質 B爲纈胺醯基，異白胺醯基，別異白胺醯基，去纈胺醯基，2·第三-丁基甘胺.醯基或2-乙基甘胺醯基殘基。B亦可爲式叫之殘基， -11- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 A7 一____ _ _1、發明説明（9 )

〇其中&\及&%每一爲單價基，R\較佳爲氫原子及汉、爲例如，環丙基，正或分支丁基，較佳爲三級芳丁基5馬，氧甲基，1-曱氧乙基或1-甲基乙烯基。此外，尺〜與汉、二一起爲亞異丙基。 D之性質 Ε»爲N-烷基纈胺醯基，N-烷基-2-乙基甘胺醯基，基-2-三級-丁基甘胺醯基，烷基-去白胺醯基，N-烷基-異白胺醯基，N-烷基-別-異白胺醯基或N-烷基-去纈胺醯基殘基，其中烷基較佳爲甲基或乙基。在另一具體實施例，D爲式IId之α-胺基酸羧酸衍生物， {請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁J . .¾衣. -丁 -、a 麵濟、邢中央榡準局員工消費合作、社印製

其中Rd具有如述於式11込中1之意義，尺〜是單價基，較佳爲氫原子及R2d是單價基如環丙基，甲氧甲基，1-甲氧乙 -12-

505657 A7 B7 五、發明説明（10 基或甲基乙埽基。此外，起可形成亞異丙基基。或者，D可爲式1114之脯胺酸衍生物，

R3d 〇 (Hid), 其中nd是整數，例如，丨或2，及R%具有如述於式中 R、之意義。义(1是單價基，較佳爲氫原子，及，在此例中當心等於1，亦可爲羥基，甲氧基或乙氧基或氟原子。 E之性質 E爲式IIe之脯胺醯基，四氫嘧唑基羰基，高脯胺醯基或羥基脯胺醯基殘基或環狀α·胺基酸羧酸衍生物， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 衣、-口經濟部中央標準局員工消費合作社印製

I 其中ne是整數，較佳爲0，1或2。Rie具有如述於式nia中 13- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 A 7 B7 五、發明説明（11 R a之意義。R2e&R3e每一是單價基，及各別地，可爲，原子或甲基。尺、是單價基，較佳爲氫原子，羥基，甲氧基或乙氧基或氟原子^尺\爲單價基，較佳爲氫原子。在此例，其中ne具有値1，尺\與尺％—起可形成雙鍵或R、與R5e可一起爲雙鍵的氧基。在此例，其中〜具有値1或6 2，一起可形成雙鍵。在另一具體實施例，E爲式IIIe之2·或3·胺·環戊烷羧酸殘基，

R1 lie), (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、-=" 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中1是單價基，如甲基或中汉^之意義。 F之性質本發明之一具體實施例，F爲式IIf之氮環烷瘦酸殘基

NV\J (CH2)a f C——GII 〇 14- (Nf), 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（12 ) 及3£爲整數，較隹爲〇, 1或2。羰基係在相對於氮原子之位置1或位置2，位置1爲較佳。在此具體實施例，G可爲氫原子，直鏈或分支(^烷基，其可經多至6個鹵素取代較佳爲氟原子，或c3_Cs環烷基或C3-Cs環燒基-CVC4-燒基。 G亦可爲式1“之芳烷基，雜芳烷基，芳基或雜芳基， -(CH2)ag-RS (1Ig), 其中ag是整數，較佳爲〇，1或2。尺^爲單價基，如經取代或未經取代芳基，較佳爲苯基或萘基^適合的芳基取代基包括一或多個鹵素，較佳爲氟，溴或氣原子，Ci_C4_烷基’甲氧基’乙氧基或二氣甲基’二氧伸甲基，硝基或氛基’ Ci-C7-烷氧羰基，CVC”烷磺醯基，或胺基，或 Cf二烷胺基，其中烷基亦可一起形成5_或6_員雜環。亦可爲未經取代或經取代雜芳基，其可爲5_或6_員環系統’較佳含有氮，氧或硫，其也可稠合成苯環實例包括經氫原子的去除而衍生自咪唑，吡咯，碟吩，呋喃，嶁峻’崎味’峨岐，1，2,4·或三竣，4二峻，，塞二唑，異崎唑，異嘧唑，吡，井，嗒哜，嘧啶，吡啶，苯并咮喃，苯幷嘧吩，苯并咪唑，笨幷嘍唑，苯幷哌喃，啕哚，異峭哚，嘀唑或喹啉殘基之雜芳基。較佳的雜芳基取代基爲一或多個Ci-C6-燒基’輕基或苯基。本發明化合物另一次類化合物包括式I化合物其中G爲式 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） " (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印t A7 B7 五、發明説明（13 ) IIIg之烷氧羰烷基，芳氧羰烷基，烷氧羰基或芳氧羰基， -(CH2)bg-(C=0)cg-0R21 (nig) 5 bg是整數，較佳爲1，2或3，&Cg是整數，較佳爲〇或1。 bg&cg二者不同時爲〇。尺^是單價基，如氫原子，正或分支匕^8·烷基其可經多至六個鹵素取代，較佳爲氟原子，尤其是CF2部分，C3-C8-環烷基，C3-C8-環烷基-CVC4烷基，或經取代或未經取代芳基，較佳爲苯基或萘基。適合的芳基取代基包括一或多個鹵素，較佳爲氟、溴或氣原子，CrCU烷氧基，甲氧基、乙氧基或三氟甲基，二氧伸甲基’硝基或氰基，CrCr烷氧羰基，CfCr烷續醯基，胺基或二烷胺基其烷基也可一起與氮原子形成5-或 6-員雜環。 G亦可爲式IVgi胺羰烷基或胺羰基，产 ~(CH2)d—(C=0)eg-N (1Vg)’ 、 V, 其中dg是整數，較佳爲丨，2或3，及eg是整數，較佳爲〇或 1 °礼與68二者不同時爲〇。 R3i及R%每一爲單價基，其各別係選自氫原子，正或分 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（21〇χ 297公釐）：：«衣—丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} -訂 - 505657 Μ ______7 五、發明説明（14 ) — - 支<^-(：8-烷基其可經多至六個鹵素取代，較佳爲氟原手，尤其是CF2部分，CVCV環烷基；CrCf環烷基_C1_C4烷基，或經取我或未經取代芳基，較佳爲苯基或蓁基。適合的芳基取代基包拓一或多個鹵素，較佳爲氟、溴或氧原子’或一或多個(^-(:4-跪氧基，三氟甲基，二氧伸甲基，硝基或氰基，烷氧羰基，Ci-C”烷磺醯基，胺基或 Ci-C6_二fe-胺基，其中，在後者，燒基也可一起與氮原子形成5-或6-員雜環。NCR%)!!、另外可形成式N(CH2)fg< 環系統其中fg係選自4，5或6的聱數。本發明化合物的另一次類包括式j化合物其中G是式Vg之烷-或芳亞磺醯烷基，烷▲或芳磺醯烷基，烷-或芳磺醯基或燒-或芳亞續酿基， -(cH2)gg,S(0)hg-R5t (Vg)，其中gg是整數，例如1或2。hg是1或2，此時尺^是單價基較佳爲甲基，三氟甲基，乙基或苯基。 G亦可爲式VIg之烷-或芳羰烷棊或烴烷基，經濟部中央標準局員工消費合作社印製 '(GH2)ig.(C=0)-R6i (VIg)，其中ig是整數，例如，1或2 ;及R6!是單價基，如氫原子，玉或分支烷基其爲未經取代或可經多至六個_ 素取代，較佳爲氟原子；C3-C8▲環烷基；C3-C8-環烷基、 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -c、 N- 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 kl 一 —^______ B7 五、發^7^T~~ --— --- 〇\ 广4燒基；或經取代或未經取代的芳基或雜芳基，較佳爲笨基或莕基。適合的芳基及雜芳基取代基包括一或多個 ^素，較佳爲氟、氣或溴原子，一或多個C1-Cf烷氧基， —氟甲基，二氧伸甲基，硝基或氰基，Ci_C7_烷氧羰基，匕-^”烷磺醯基，胺基二烷胺基，其中烷基可視需要與氮原子形成5-或6-員雜環。本發明另一具體實施例，F爲式nif之氮環烷衍生物， (CH2)b < _

V\J

G 其中bf是整數，如〇,丨或二。在此具體實施例，G雜芳基在相對於氮原子的1或2,較佳爲1位置藉碳-碳鍵連接至F。例如，G可爲式VII之雜芳基， .R| (viy 、R8丨其中X是NH基’氧原子或硫原子。與R%每一爲單價基，及各別的可爲氫原子，正或分支Ci-Cr烷基其可經鹵素取代，較佳爲氟原子，c3_C8-環烷基或C3-C8_環烷基_ CVC4烷基。 -18 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 505657 A7 B7 五、發明説明（16 ) R71與R%每一可，各別地，爲式川之單價基， -(CH2)a1-R91 (ID，其中ai是整數，較佳爲〇，1或2, r%*單價基，如經取代或未經取代的芳基，其中芳基較佳爲苯基或茬基。適合的芳基取代基爲一或多個鹵素，較佳爲氟，溴或氣原子， C^C：4·燒基，甲氧基，乙氧基或三氟甲基，二氧伸甲基，硝基或氰基’ C^C7·烷氧羰基，烷磺醯基，胺基或一燒胺基，其中後者之燒基亦可一起與氮原子形成 5-或6·員雜環。R'亦可爲未經取代或經取代雜芳基，例如，5-或6-員環系統，較佳含有氮，氧或硫，其也可稠合至苯環。例如，經氫原子的去除，衍生自咪唑，吡咯，嘧吩，呋喃，〃塞唑，呤唑，吡唑，U2,牡或丨，2,3•三唑，哼一唑，嘍二唑，異嘮唑，異嶁唑，吡"井，嗒畊，嘧啶，吡啶，苯幷呋喃，苯幷嘍吩，苯幷咪唑，苯并噻唑，苯弁哌喃，啕哚，異啕哚，吲唑或喹啉基團。較佳的雜芳基取代基包括一或多個（^-0：6-烷基，羥基或苯基。 G亦可爲式vnig之雜芳基， (请先閱讀背面之注意事項存填寫本頁)

'IT 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

-19- 本紙張尺度適财國^^^( CNS ) A4規格（2lQx297公餐) ^05657 五、發明説明（17 ) 其中X是NR12i基團及Ri、*氳原子，正或分支Ci_Cf烷基其可經多至六個鹵素取代，較佳爲氟原子，環烷基’ C3-C8-環燒基-CrC*烷基，或X是氧原子。r'kr1、每一’各別地，爲氫原子，正或分支Ci_Cv烷基，經鹵素取代的正或分支Ci-Cr烷基，（：3-(：8_環烷基，C3-C8-環烷基-CrC4燒基；或，各別地，每一爲如上所述的式II!之單價基。 <3亦可爲式ixg之芳香重氮基， (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣· —c' rr

-N (IXg) 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中X是NH基，氧原子或硫原子，及Ri%是單價基，例如’氫原子，正或分支Cl-c8-烷基其可經多至六個鹵素取代’較佳爲氟原子，c3-c8-環烷基，或C3_c8-環烷基-Ci· C4燒基。R1'亦可爲如上所述的式Πι之單價基。化合物之合成本發明化合物可藉習知的肽合成方法製備。因此，肽可自各別胺基酸或藉連接適合的小肽片段而連續的組合。在連續組合，肽鏈係起始於C-端藉每步驟一個胺基酸而逐步延伸。在片段偶合，不同長度片段可連接在一起，且片段可自胺基酸連續組合或短肽之片段偶合而輪流獲得。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 Μ Β7 五、發明説明（18 ) 在連續組合與片段偶合二者，藉形成醯胺鍵連接而連接單元爲必需的，其可經各種酶及化學方法完成。用於形成醯胺鍵連接的化學方法係詳述於肽化學中標準參考文獻’ 包括 Miiller，Methoden der organischen ’ ^ XV/2 册，1-364 頁，Thieme Verlag，Stuttgart，（1974); Stewart及 young，Solid Phase Peptide synthesis，31-34 頁及 71-82 頁，Pierce 化學公司，Rockford，IL (1984); Bodanszky 等人，Peptide Synthesis· 85-128 頁，John Wiley & Sons ’ 紐約（1976)。較佳方法包括疊氮化物法，對稱及混合酐法，就地產生或達成活化酯之使用，胺基酸的胺基甲酸酯保護的N -羧基酐之使用及使用偶合劑形成醯胺連接，如羧酸活化劑，尤其是二環己基羰二亞胺（DCC)，二異丙基羰二亞胺（DIC)，b乙氧羰基-2-乙氧-1，2-二氫喳琳（EEDQ)，乙基-3-(3-二甲基胺丙基）羰二亞胺氣化氫（EDC)，正-丙烷-膦酸酐（PPA)，N，N-雙（2-氧-3-噚唑啶）亞胺基-氧氣化嶙（B0P-C1)，溴-參比洛邊鱗六氟構酸鹽（PyBrop)，二苯基磷疊氮化物（DPPA)，卡斯楚試劑（Castrols reagent)(BOP，PyBop)，鄰-苯幷三唑基-N，N，N、N，-四甲基錁鹽（HBTU)，二乙基磷氰化物（DEPCN)，2,5-二苯基-2,3-二氫-3-氧-4-羥基-，塞吩二氧化物（史泰格林氏試劑 Steglich’s reagent，HOTDO)，及 1，Γ-羰基-二咪唑（CDI) 〇偶合劑可單獨進行或與如Ν，Ν_二甲基-4_胺吡嚎（DMAP)， Ν-羥基苯并三唑（HOBt)，Ν-羥基苯幷三畊（HOOBt)，Ν-羥基琥珀亞胺（HOSu)，N-羥基氮苯幷三峡（HOAt)，氮苯 -21· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 505657 A7 B7 五、發明説明（19 ) 幷三唑基-四甲基錁鹽（HATU，HAPyU)或2-羥基吡啶等添加劑結合。雖然保護基的使用一般不需要酶的肽合成，在化學合成上對反應物二者而言，不牵涉形成醯胺键連接的反應基可逆性保護係爲需要的。化學性肽合成的較佳三個一般保護基技術爲：芊氧羰基（Ζ)，t-丁氧羰基（Boc)及9-篥甲氧羰基（Fmoc)技術。辨識在每一例中，倮護基在鏈延長單元的胺基。胺基酸保護基之詳述係得自Miiller，Methoden der organischen Chemia ^ 第 XV/1 册，20-906 頁，Thieme Verlag，Stuttgart, (1974)。用於組合肽鏈的單元可反應於溶液’懸浮液或藉類似於馬瑞福dm. C/re/w. Sdc·，85:2149 (1963)的方法進行。特佳的方法爲彼等其中肽係連續或藉使用Z，Boc或Fmoc保護基技術片段偶合而組合，與該馬瑞福（Merrifield)技術的反應物之一而鍵結至不溶性聚合支持物（於此後稱樹脂）。此種典型地需要使用Boc或Fmoc保護基技術連續組合肽於聚合支持物上’與成長肽鏈在C端共價結合至不溶性樹脂粒子。此程序允許藉過濾去除試劑及副產物，消去再結晶中間體的需要性。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經保護胺基酸可連接至任何適合的聚合物，其必須不溶於所使用溶劑且具有安定物理形式而允許過滤。聚合物必須含有可共價結合至第一個保護胺基酸之官能基。適合此固的的各種聚合物包括纖維素，聚乙晞醇，聚甲基丙烯醋，磺醯化聚苯乙烯，氣甲基化苯乙婦/二乙烯基苯共聚 -22· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210x297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（2〇 ) 物（馬瑞福（Merrifield)樹脂），4-甲基二苯甲胺樹脂 (MBHA-樹脂），苯基乙醯胺甲基樹脂（pam_樹脂），對·爷基氧·苄基-醇-樹脂，二苯甲基-胺-樹脂（BHA-樹脂）， (¾甲基-)_苄醯基-氧甲基-樹脂，Breip〇hl等人之樹脂 (Tetrahedron Letters，28:565 (1987); BACHEM提供），4- (2,4 - 一甲乳苯基胺甲基）苯氧基樹脂（Novabiochem提供）或鄰-氯三苯甲基-樹脂（BiaheUas提供>。適合於肽合成的溶劑包括在反應條件下爲惰性的任何溶劑，尤其是水，N，N-二甲基甲醯胺（DMF)，二甲亞職 (DMSO)，乙醯腈，二氣甲烷（DCM)，！，仁二吟燒，四氧吱喃（THF)，N-甲基-2-吡咯啶酮（NMP)及此等溶劑之混合物。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衆合物支持物上之肽合成可在適合的惰性有機溶劑中進行其中胺基酸衍生物起始物爲可溶的。然而，較佳溶劑額外具有樹脂-膨脹性質，如DMF，DCM，NMP，乙醯腈及 DMSO ’及此等溶劑之混合物。接著合成，肽自聚合支持物去除。裂解條件係以揭示於文獻中之各釋樹脂類型而完成。大部分一般使用的裂解反應係爲酸或鋤催化，前者進行於’例如，液體無水氟化氫，無水三氟甲烷磺酸，稀釋或濃縮的三氟醋酸，及醋酸/二氣甲烷/三氟乙醇混合物。後者在弱驗如嗎啉存在下可於Thf或THF-DCM-混合物中進行。特定保護基在此等狀沉下亦可切除。在特定衍生化反應前，可能需要肽之部分去保護。例如’肤在N-端二烷基化之製備可在溶液中藉偶合適當的 -23- 本紙張尺度適用中關家標準（CNS ) A4規格（21()><297公幻 505657 A7 B7 五、發明説明（21 ) N，N-二-烷胺酸至肽，在DMF/1%醋酸與NaCNBH3及適當的醛藉樹脂結合肽之還原性烷化，或在醛或酮存在下藉與 Pd/C之氫化。

下列三流程圖呈現本發明化合物合成的詳細敘述。流程圖I

A-B-D-E-OH

丄偶合劑；F - G爲自由驗 A_B-D-E-F‘G 在此，四肽A-B-EUE-OH係與氮環烷基衍生物，F-G，使用上述之肽偶合方法。

流程圖II

AHE-OH

4 偶合劑；F-G爲自由鹼 AHE-F-G 1.A’之去保護；經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、< 2.Ra&R7a之引入 A-B-D-E-F-G 在此，N端經保護的四肽A^B-D-E-OH係與氮環烷基衍生物F-G偶合，使用上述肽偶合方法而得中間體化合物ΑΛΒ- -24- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 --------B7 五、發明説明（22 ) ~~域—~ D-E-F-G。N-保護基接著藉上述的一般方法去除。基團及R\接著經由上述還原性烷化連接至胺基端。

流程圖III

A-B-D-E-OH 丄偶合劑；F，爲自由鹼 A-B-D^E-Fr 1.F'之去保護； ▽ 2.G之引入

A-B-D-E-F-G 在流程圖3，四肽與F，偶合，爲建構區塊保護形式。F亦可連接至基團g之先驅物p中間體a_b_d-E-F，接著藉如氧化反應或還原反應之反應而轉移至終產物。在一具體實施例，P爲吡咯啶醇，且中間體A_B-D_E-F，係藉溫和氧化方法氧化成終產物，如史宛（Swern)氧化或與德斯_ 馬丁（Dess-Martin)試劑氧化。用於合成所請化合物的建構區塊可藉下列一般方法製得： (a)说洛淀基-酮及六氫u比淀基-酮得到吡咯啶基·酮之數種路線已敘埤於文獻a外消旋吡洛淀基-酮可藉對應峨略基酮以氧化鉑作爲催化劑之氫化作用而製得（Kaiser 等人，J. 49:4203 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣·

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 _____ B7 ___ 五、發明説明（23 ) (1984))。對掌吡咯啶基-酮，可以L-或D-脯胺酸作爲起始物質。三級丁氧羰基（boc-基），芊氧羰基（Z-基）或苐氧-羰基（fmoc基）可作爲環氮之保護基。 N-Boc-保護的p比洛淀基酮可藉處理脯胺酸衍生物而製得’尤其是N-Boc_脯胺酸-2-硫说旋基酯或N-Boc，脯胺酸 N -甲氧基-N -甲醯胺，與有機金屬試劑，如格林納 (Grignard)試劑或鋰試劑。數個實例已報告於文獻，包括自N-Boc-脯胺酸N-甲氧基-甲醯胺得N-Boc-吡咯啶基甲基酮（Trost, J. 乂所· Ac.，1 1 1:4988 (1989));自 N- B〇c-脯胺酸N-甲氧基-甲醯胺得N-Boc-吡咯啶基-五氟乙基 -酮（Angelastro，M.R.等人，33:3265 (1992));及自N-Boc-脯胺酸2-硫吡啶基酯得N-Boc-吡咯啶基甲基酮（Conrow，R.等人，J. 〇rg. 51:938 (1986))。

Boc-保鐵基之去除可藉強酸如j|Cl(見例如Angelastro, M.R.等人，⑽ ieiiers，33:3265 (1992))或三氟醋見例如 Golgstein，S.W.等人，JOrg. CAem，57:1179 (1992))處理而達成。烷基及芳基-吡咯啶基-酮已藉此法製得。製得此等建構區塊之第二種方法牵涉以親核性試劑處理Boc-倮護的脯胺酸酸而製得對應醇。醇可以常用方法去保護並偶合至肽。醇之氧化可藉如Swern氧化或Dess-Martirt試劑氧化的溫和氧化方法達成。含吡咯啶-碟唑基酮之肽的合成實例係揭示於Tsu〗surni，s ·，等人，价oorg. -26 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X^9_'7^J7 ----：---：--«1衣II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 _____ B7____ 五、發明説明（24 ) C/ie/w· ί^ίί·，4:831 (1994>。或者，醇可首先氧化成酮接著去除Ν -保護基。醛與商業可用的三氟甲基-三甲矽烷之三氟甲基化可藉氟化四丁銨催化（〇!ah，G，，J· dm. 1 1 1:393 (1989))。去保護並偶合至四肽後，醇可藉如Swern氧化或Dess-Martin試劑之溫和氧化過程氧化成酮。脯胺酸的不同α-，及γ-二羰基衍生物已被描述。因此’（S)-l-p比略喊基-1，2 -两燒二酮氣化氫已自Boc-保護的衍生物藉HC丨處理而製得（Conrow，R.等人’ ， 51··938 (1986)) 6乙基N-Boo吡咯啶基-β-酮醋酸鹽藉添加 6酸乙酯鋰至N-Boc-倮護的脯胺醛並隨後氧化而製得，例如與三氧化鉻（Hason，G· J.等人， 27:3577(1986))。β-酮二氟酯自胺基酸衍生物之製備已被描述（X met/· c/iern” 35:4795 (1992))，及係類似於上述酮酯之程序，使用溴二氟醋酸酯之雷弗馬斯基（Ref〇rmatsky) 試劑在第一步驟中及Dess-Martin-試劑於氧化步骤。類似於彼等上述被啥遠基-綱之方法可用於六氮峨淀基_ 酮及具七員氮雜環的酮之合成。此等合成之~始物包括 2-羧六氫吡啶及其商業可獲得之所有三種異構物，及2_幾六氩峨哈以及鏡像異構物。例如，甲基酮已可藉N_]3〇c>e ((2-吡啶硫）·羰基）六氫吡啶與甲基格林那試劑處理而製得（上 CAe讲‘ Soc?·，115:11393 (1993))。 (b)峨略喊基-崎峻及六氧咏喊基嗤數種合成衍生自胺基酸的嘮唑已描逑於文獻中。通 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨〇><297公釐） '^ ' ----^---^---MW— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、π 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（25 ) 常’ N-保護的胺基酸與胺基酮或其它胺基“羰基衍生物使用上述肽合成一般方法偶合。例如，z或B〇c-保護基可用於保護胺基態氮。接著，水自胺基酸之卜酮醯胺去除產生對應4峻。數種試劑已用於此等化合物之脱水作用，包括五氧化二嶙’三氯化嶙，五氣化磷及盃硫醯氯。另一較佳方法爲膦之使用如三烷基-或三芳基膦，較佳爲三苯基鱗’結合經鹵化fe ’較佳爲氣-或溴煙如四氣甲燒，四溴甲烷，氣仿及過氣乙烷，在蜍存在如三乙基胺，二氮雙環十一晞，甲基-嗎啉或吡啶在極性溶劑如乙醯腈。例如，色胺酸·衍生的哼唑已根據此方法製得（G〇rd〇n，τ D ? Tetrahedran Letters, 34:1901 (1993)) 〇已報導三笨基膦，硪及三乙基胺的結合可得吟嗤之高產率（Wipf，p.等人 ’《/· Org· C/?em·，58:3604 (1993))。形成嘮吱的另一方法奪涉使用肽合成中形成醯胺鍵之常用方法與2-胺基醇偶合胺基酸。形成噚吱啉之環化作用可藉使用伯吉斯（Burgess)試劑（甲基N-(三乙基銨-磺醯基）胺甲醯酯）（Wipf5 P.等人，jLeiZers， 33:907(1992); Wipf，l>.等人，义 d所· CA州.，心c.， 114:01975 (1992) ; Wipf，P.等人，又〇rg· d請·，58:1575 (1993))或米玆諾伯（1^]^$1111〇1)11)反應（三苯基膦/二異丙基氮二羧酯（Wipf，Ρ·等人，TVirahdr仙 33:6297 (1992))達成。氧化成噚唑可使用過氧化鎳（Evans，D,L.等人，义 Ο客，44:497(1979))進行。此等方法亦可用於以N-保護的0-或1^脯胺酸起始之對 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 Α7 _ Β7 五、發明説明（26 ) 應吡咯啶基-嘮唑及以N_保護的〇_或^2羧六氫吡啶起始之對應穴鼠峨淀-号峻的合成。 %唑形成接著去除N·保護基i例如，藉酸如氯化氫或二氟醋酸處理Boc-保護的化合物。所得鹽或游離鹼可接著用於下一偶合步骤。 (c) 吡咯啶基-嘍唑及六氫吡啶基〃塞唑 p塞峻合成之一般方法爲漢玆需（合成，其牽涉胺基酸的N-保護硫醯胺與經取代鹵素_丙_酸鹽之縮合。然而，此反應通常藉在胺基酸主體之消旋作用完成。已發展溫和的方法避免消旋作用。首先，N_保護的胺基酸使用上述一般肽合成方法與胺酮或其它2 _胺·羰基衍生物偶合。硫化作用，環化作用及脱水作用在高溫下使用雷溫孫氏（Lawesson’s)試劑（Gordon，T，D·等人，Tetrahedron

Letters，34:19〇1 (1993))以單鍋反應達成，例如在回流四氫呋喃中。喧峡琳可如下合成；首先，對應N -保護胺基酸使用肽合成中醯胺鍵形成之常用方法輿2 -單矽烷氧基乙基胺偶合。藉LawessOn’s試劑硫化醯胺鍵後，去除單矽烷基並使用Burgess試劑（甲基N-(三乙基胺-磺醯基）甲醯胺酯）或 Mitsunobu反應（三苯基-膦/二異丙基氮乓痠酯P、等人，Tetrahedran Letters，33:6ί267(1992))達成嘍唑啉之環化作用。 (d) 吡咯啶基-咪唑及六氫吡啶棊_咪唑咪唑可自對應胺基酸之酮醯胺藉與銨鹽或胺處理接 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（；21〇χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣. 訂 505657 A7 B7 五、發明説明（27 ) 著使用脱水劑或共沸去除水之聪水作用而製備（G〇rd〇n， T.D.^A ? Tetrahedron Letters, 34:1901 (1993)) ° (e) 峨17各旋基-異吟岐及六氫峨淀基-異v号哇異哼唑可藉羥胺與1，3-二酮之反應，3_酮_肪之環化作用或ItN-氧化物之1,3 -雙極性環化加成而製備。5-(N-甲基-吡咯啶基）-3-甲基-異嘮唑之合成已藉使用甲鎵磺醯基 -氣化物及三乙基胺作爲鹼之（N-甲基-吡咯啶_2_基）-4-氧_ 丁基-2-肟）之環化作用而描述（EUiott，R.等人，Synthesis, 7:772 (1950)) 〇腈氧化物及對應異嘮唑之製法係述於K B G Torssell， M i t Γ,ι.Ι c 〇 x ides. Nitrones ηπ.4 Nitronates in Organic

SyjRthegis, VCH VerlagsgeseUschafft，Weinheim o (f) 呐咯啶基-吡唑及六氳吡啶基-吡唑吡唑可藉聯胺或單取代聯胺與對應1，3-二酮或酮乙醯腈在極性溶劑如醇或Ν，Ν·二甲基甲醯胺中反應而製備。吡略啶基-酮之合成已被敘述。例如，2-甲基-5-(1-甲基吡洛淀-2-基）-2Η-0比峡-3-基·胺係自對應之腈及聯胺而製備 (Adahi等人，Cfte/w· 尸/iar/w. Bw//·，35:3235 (1987)) 〇 (g) 说洛 < 基-〃号二唆及六氫峨喊基-吟二嗅經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 吡咯啶基-嘮二唑及六氫吡啶基_噚二唑可藉對應二醯基聯胺與磷酐及微量酶，如甲蟓磺酸或與六甲基二矽伸偶氮及四丁基銨氟化物之脱水作用而製備（Rig〇等人，丄 23:253 (1986); Rigo 等人

Comm.，16:1665(1986))。二醯聯胺之製備係藉對應N，保 _30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 __ __ B7_ 五、發明説明（28 ) 護羧酸及另一羧酸之聯胺偶合（Sheradsky等人，^ 仏， 32:133(1991))。另一溫和方法爲聯胺與亞硫醯氯及吡啶之反應而形成1，2,3,4-嘮，塞二唑-s·氧化物中間體。1，3,4-亏一峻接著籍一乳化硫之熱消除而形成（B〇rg等人，J. Chem., 60:31 12(1995)) ° (h)吡咯啶基_嘧二唑及六氫呲啶基-嘧二峻峨略淀基- l，3,4-tr塞二也及六氳峨旋基- i，3,4-p塞二峻可藉對應亞胼與LawessoA試劑或p4s1(^應製得（Sawtney等人，又 //1 心⑽ CAe亂心e· B，30:407(1991); Lancelot 等人 CAem·，17:625(1980))。醯基聯胺係如上述製備。所請化合物之使用方法在另一具體實施例，本發明包括部分或全部抑制或治療（即逆轉或抑制固體腫瘤之進一步發展）在哺乳動物之固體腫瘤（即肺，乳房，結腸，前列腺，膀胱，直腸之腫瘤或子宮内膜腫瘤）或血液惡性之形成，例如，人類，藉投藥治療上有效量之化合物或式I化合物之組合物。試劑可單獨或以包括試劑及可接受載劑或稀釋劑之組合物投藥。投藥可藉由任何一般醫藥方法，較隹爲腫瘤學的試劑，包括口服及非經腸方法如皮下，靜脈内，肌内及腹膜内，鼻腔或直腸〇投藥至哺乳動物，如人類，之劑量含有治療上有效量之描述在此中之化合物〇如此中所使用，"治療上有效量 ”爲足以抑制（部分或全部）腫瘤或血液惡性之形成，或逆 -31 _ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2l0X297公釐）〔讀先聞讀背面之注意事項再填寫本頁j

If -訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 __—_____B7 五、發明説明（29 ) 轉固體腫瘤或其它惡性之發展，或預防或減少其進一步進展的量。對特殊治療狀況或方法，劑量使用已知方法嚴袼測定，並與如特定化合物所具有的生物活性，投藥方法，年紀，受體之健康及體重，症狀之性質及擴展，治療之頻率，其它治療劑之投藥，及所欲之效果相闕。典型的每日劑量口服投藥爲每公斤體重爲自約1至約50毫克及非經腸投藥爲每公斤體重自约0.5至約20毫克。本發明化合物可以一般固體或液體醫藥投藥形式投藥’如未塗覆或（薄膜-)塗覆錠劑，膠囊，粉末，顆粒，栓劑或溶液。此等係使用習知方法製造。活性物質可爲此目的與一般醫藥助劑加工，如錠劑結合劑，充填劑，防腐劑，錠劑分解劑，流動調節劑，成形劑，溼潤劑，分散劑，乳化劑，溶劑，持續再-釋出組合物，抗氧化劑及/或推進氣體（H. Sucker 等人:Pharmazeutisch^ Thieme-Verlag，Stuttgart，1978)。以此方式得到投藥形式典型上含有約1至約90%以重量計之活性物質。以下實例係用以説明本發明但非爲本發明之限制。實例生成蛋白質之胺基酸在實例中係使用習知三字母密碼縮寫。其它縮寫爲iTFA:二氟醋酸，Ac=r醋酸，dcM:二氣甲燒，DMSO^二甲亞碱，丁基，Et=乙基，甲基，βζ1=苄基。在所列化合物中，所有產生蛋白質之胺基酸，除非另有所述，均爲L-胺基酸。 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 訂 505657 A7 B7 五、發明説明（30 ) 一般材料與方法本發明式A-B-D-E-OH或A*-B_D-E-OH之四肽，其中A’ 指A的N-保護形式，或對應酯係藉使用如上論述的標準或Boc -方法學之典型溶液合成而合成。製得此等四肽之一般路線已揭示於德國專利申請號DE 44 15998，尤其是四肽 Z-Val-Val-MeVal-Pro-OMe ; MeaVal-Val-MeVal-Pro-OMe x HCI ; Z-Ile-Ile-MeVal-Pro-OMe 及 Me2ne-Ile_ MeVal-Pro-OMe ° 此等四肽之酸可藉如述於DE 44 15 998中酯與氫氧化鈉或鋰之鹼水解而製得。進一步，本發明之四肽係藉由APPLIED BIOS YSTEMS 提供的完全自動模型43 1A合成儀之固相合成標準方法而合成。此裝置使用於如下所述的Boc及Fmoc保護基技術之不同合成循環。

Boc保護基技術之合成循環 1. 30%三氟醋酸於DCM 1x3分鐘 2. 50%三氟醋酸於DCM 1x1分鐘 3. DCM清洗 5x1分鐘 4· 5%二異丙基乙基胺於DCM 1x1分鐘經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 5. 5%二異丙基乙基胺於NMP 1x1分鐘 6. NMP清洗 5x1分鐘 7. 預活化經保護胺基酸之添加 (以1當量DCC及1當量HOBt 於NMP/DCM活化）； -33- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 B7 五、發明説明（31 ) 肽偶合（第一部分） 1x30分鐘 8. 添加DMSO至反應混合物直到其含以體積計20%dmso 9. 肽偶合（第二部分） lx 16分鐘 10. 添加3.8當量之二異丙基乙基胺至反應混合物 11·肽偶合（第三部分） 1x7分鐘 12. DCM清洗 3x1分鐘 13. 若轉換不完全，則重複偶合 (回到步驟5) 14. 10%醋酸酐，5%二異丙基乙基胺於DCM 1x2分鐘 15_ 10%醋酸酐於DCM 1x4分鐘 16· DCM清洗 4x1分鐘 17·回到步驟1 BOP-C1及PyBrop係用作偶合胺基酸至N-甲基胺基酸之試劑。反應時間係對應增加。在溶液合成，Boc保護胺基酸NC As(N-三級-丁氧羰基-胺基酸羧基-酐）或Z-保護胺基酸NCAs(N-苄氧羰基-胺基酸羧基-酐）之使用，分別地，最佳用於偶合類型。

Fmoc保護基技術之合成循環 1· DMF清洗 1x1分鐘 2· 20%六氫吡啶於DMF 1x4分鐘 -34· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 505657 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（32 ) 3. 20%六氫吡啶於DMF 1x16分鐘 4. D M F清洗 5 X 1分鐘 5. 預活化經保護胺基酸之添加 (以1當量TBTU及1.5當量DIPEA 於DMF活化）；肤偶合 1x61分鐘 6. DMF清洗 3x1分鐘 7. 若轉換不完全，則重複偶合 (回到步驟5) 8. 10%醋酸酐於DMF 1x8分鐘 9. DMF清洗 3x1分鐘 10. 回到步驟2 BOP-C1及PyBrop係用作偶合胺基酸至Ν-甲基胺基酸之試劑。反應時間係對應增加。 N端之還原性烷化作用如上述製備之肽-樹脂在N端去保護並接著與超過3倍莫耳濃度的醛或酮溶於DMF/1%醋酸與添加3當量NaCNBH3 反應。完全反應之後（負凱薩（Kaiser)試驗），樹脂以水，異丙醇，DMF及二氣甲烷清洗數次。肽-樹脂之逐步製成經由Boc保護基法製得的肤-樹脂在減壓:下乾燥並轉移至鐵氟龍HF(TEFLON HF)裝置（PENINSULA提供）之反應容器。清除劑，通常爲苯基甲基醚（1亳升/克樹脂）接著添加並添補，在含色胺酸肽之例中，硫醇（0.5毫升/克樹 35 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ----;---;----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 505657 ΑΊ Β7___ 五、發明説明（33 ) 脂），較佳爲乙二硫醇，可去除峋哚甲醯基。其接著在液態N2浴中在氟化氫（10亳升/克樹脂）中濃縮。混合物允許加溫至0°C並在此溫度下攪拌45分鐘。氟化氫接著在減壓下脱除，且殘餘物以乙酸乙酯清洗去除任何留存之清除劑。肽以30%醋酸萃取並過濾，並冷凍乾燥過濾物。經Fmoc保護基法製得的肽-樹脂在減壓下乾燥且進行下列清除過程之一，其係相關於胺基酸組合物（Wade， Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne 1985)。肽-樹脂在適合TFA混合物的懸浮液在室溫下攪捽規定時間，並接著濾去樹脂且以TFA及DCM清洗。濃縮過濾物及清洗物，並添加二乙基醚沈澱肽。在冰浴中冷卻後，濾出沈澱物，溶解於30%醋酸中並冷凍乾燥。當使用鄰-氣三苯甲基-樹脂（Biohellas提供）時，肽-樹脂於醋酸/三氟乙醇/二氣甲烷混合物（1:1:3)之懸浮液在室溫下攪拌1小時。懸浮液接著以抽氣過濾且肽-樹脂以清除液徹底清洗。合併的過濾物在眞空下濃縮並以水處理。沈澱:的固體藉過遽或離心去除，以二乙基酸清洗並在減壓下乾燥。肽之純化與特化藉具或不具隨後中壓色層分析（固定相：HD-SIL C-18, 20-45m5 100又：流動相：Α=0·1% TGA/MeOH，B=0.1% TFA/H2〇之梯度）之凝膠色層分析（SEPHDEX G-10，G-15/10% HOAc，SEPHADEX LH20/MeOH)進行純化。所得 -36· 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 505657 A7 _________B7 五、發明説明（34 ) 產物之純度藉分析型HPLC(固定相：！〇〇 2.1mm VYDAC CN 18，513 300A;流動相：CH3CN/H20梯度，以〇 i%TFA， 400/〇C緩衝）。聚肽藉快速原子攻擊質譜儀特化。實例1 峨洛淀酮之合成 (a) N -甲基-N -甲氧基-(Boc-脯胺酸）-醯胺之合成

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 在0°C下添加26·73克1-乙基-3-(3-二甲胺丙基）羰二亞胺氣化氫，18·83克N-羥基-苯幷三唑及49.39克N-甲基-嗎啉於30克Boc-脯胺酸及13.6克Ν，0-二甲羥基胺於250毫升二氣甲烷之溶液。混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物以飽和破酸氫鈉，5%檸檬酸溶液及鹽液連續清洗。有機相以硫酸鈉乾燥。過濾後，在眞空下去除溶劑得到22.9克Ν-甲基甲氧基-(Boc-脯胺酸）-醯胺。 ^-NMR (CDC13? 270MHZ) d = 1.4? 1.45 (s59H)3 1.8-2.3 (m，4H)，3.2 (s，3H)，3.3-3.6(m，2H)，3.7 (s，3H)，3.8(s，3H)， 4.6, 4.7(d，lH) ppm (b) (s)-Boc-吡咯啶-2-基-甲基酮之製備 -37 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） )U5657 A7 ________B7 五、發明説明（35 )

在-40°C逐步添加3毫升之3M氣化甲鎂於四氫呋喃至2.0 克N·甲基甲氧基-(Boc-脯胺酸醯胺於7〇毫升四氫吱喃之溶液。混合物接著允許升溫至室溫並攪拌過夜。溶液以二乙基醚稀釋，鹽液清洗並以硫酸鈉乾燥。過濾後，在眞空下去除溶劑。殘餘物藉矽膠色層分析（庚烷/乙酸乙酯 2:1)純化產生1.66克（s)-Boc-峨洛嗓-2-基-甲基酮 'H-NMR (CDC135 270MHZ) d-1.4, 1.45 (s,9H), 1.75-1.9 (ni，4H)，2.1，2.15 (s，3H)，3,4-3.6 (m，2H)，4.2，4.3(d，lH)， 4.6,4.7(d，lH) ppm (c) (S)-吡咯啶-2-基-甲基酮三氟醋酸鹽之製備 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、!: 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

o CF3COOH CH2C12 o

o 添加25毫升之三氟醋酸於1·66克（S)-Boc-吡咯咬·2•基-甲基酮於25毫升二氣甲烷之溶液。所得混合物在室溫擾 -38 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 A7 ______ B7 _ 五、發明説明（36 ) 拌3小時。去除溶劑得到〇 8〇克粗（s)·吡咯啶-2-基-甲基酮三氟醋酸鹽。 iH-NMR (DMSO, 270MHZ) d=1.75-2.0 (m，4H)，2.2 (s，3H)， 3.1 (m，2H)，4.5 (d，lH)，8.7 (m，1H)，10.4 (m5 1H) ppm 實例2吡咯啶基雜環之製備 (a) N-(1ST-B0C-吡咯啶基）甲基苯基酮之合成

經濟部中央標準局負工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) BOC-pro-OH(6.2 克，29 毫莫耳）及 2-胺-苯6_hC1(5.0 克，29毫莫耳）溶解於290毫升乾燥CH2C12，且所得溶液冷卻至0 °C。添加Η0ΒΤ·Η20(1·4克，9.6毫莫耳） EDC.HC1，接著添加ΝΜΜ(3.8毫升，35毫莫耳）。反應混合物在室溫下揽拌過夜，接著以飽和後酸氫納（3 X)，水 (3Χ)，5%檸檬酸及水清洗。以硫酸鈉乾燥後，在減壓下去除溶劑，產生9.5克黃色油。油溶解於二異丙基醚中，產物爲白色結晶沈殿’乾燥產物並在下一步驟直接使用。產率：8·6 克（89%)。 lU NMR (DMSO-d6)：8.1-8.25, m, 1H; 8.0? d5 2H; 7.65, t9 1H; 7.5, t，2H; 4·5-4·7, ni，2H; 4.1-4.25, m5 1H; 3.2-3.5, -39 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇><297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（37 ) m，2H; 2.0-2.2, m，1H; 1.7-1.9, m，3Η;1·3 及 1.4, s，一起爲 9Η、 (b) 2-(N-B0C-吡咯啶基）-4-苯基崎唑之製備

PPh3 NEt, Percn loroethane

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣. 在氮氣下溶解N-(N匕BOC-吡咯啶基）甲基苯基酮（2.5 克，7.5毫莫耳）於40毫升乾燥乙醯腈。混合物冷卻至-20 °C，接著添加三苯基膦（4.0克，15毫莫耳），六氣乙烷（3.6 克，15毫莫耳）及三乙基胺（4.3毫升，30毫莫耳）。在室溫下攪拌過夜後，反應混合物以乙酸乙指稀釋並以飽和碳酸氫鈉水溶液，5%檸檬酸及鹽液清洗。以硫酸鈉乾燥後，在減壓下去除溶劑，所得粗固體藉在矽膠之色層分析純化，產生1.5克（64%)淡棕色固體。 ln NMR (DMSO-d6): 7.6-7.8, m, 3H; 7.5? t5 2H; 7.4, t5 1H; 4.8-5.0，m5 1H; 3.45-3,6，m，1H; 3·3·3·45，m，1H; 2.2-2.4, m，1H; 1·8-2·1，m，3H; 1·2及 1.4，s，一起爲 9H· (c) 2-(N-BOC-峨洛症基）-4 -苯基〃号咬之去保護 40· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐）

、1T # 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（38 )

BOC保護之化合物3(100毫克，0·3毫莫耳）溶解於10毫升乾燥二乙基醚，並以12毫升HC1-飽和的醚處理。所得懸浮液在室溫下授摔5天。接著以2Ν NaOH溶液調整pH至 11。分離有機層，以硫酸鈉乾燥並在減壓下蒸發而產生 69.2毫克之無色油。實例 3 (S)_(Me2Val-Val-MeVal-Pr〇4比洛淀-2·基）甲基酮 (化合物1-1)之合成 (这）（8)_2-\^1-\^1-]^0\^1-?1*〇-峨洛咬-2-基）甲基酮之合成

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣、-口 505657 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（39 ) 在0°C下添加1.03克1-6基-3-(3-二甲基胺丙基）羰二亞胺氣化氫，〇·72克N-羥基苯幷三唑及2.16克N-甲基嗎琳至3.0克：^-\^1-¥31-1^€\^141*〇-011及0.89克（3)-吡咯啶_2、基甲基酮三氟醋酸鹽於二氣甲烷之溶液。混合物在室溫下檀拌過夜。反應混合物接著以二氯甲烷稀釋並以飽和碳酸氧鈉水溶液，5%檸檬酸水溶液及鹽液連續清洗。有機相以硫酸鈉乾燥。接著過濾，在眞空下去除溶劑。殘餘物藉沙膠色層分析（二氯甲烷/異丙醇/三乙基胺94:5:1)純化得到 1.03克（（8)-(2-\^1-\^1-1^€\^1-?1*〇4比略淀-2-基）甲基晒。 FAB-MS: 656.9 (Μ+Η+) (b) (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pr〇4比洛淀-2-基）甲基酮之合成添加38毫克在焦碳上之鈀（i〇%pd以重量計）至1 〇3克 ((S)_(Z-Val-Val-MeVal-Pro-峨洛咱>2-基）甲基酮於 150 亳升甲醇之溶液。所得懸浮液在大氣壓，室溫下氫化3小時。添加1_0亳升甲醛水溶液（37%以重量計）及0.226克在焦碳上之鈀。混合物在大氣壓，室溫下氫化過夜。過濾後在眞空下去除溶劑。殘餘物藉矽膠色層分析（乙酸乙酯/異丙醇/三乙墓胺94:5:1)純化提供0.64克（S)-(Me2Val-Val· MeVal-Pro-吡咯啶_2_基）甲基-酮。 FAB_MS: 550.8 (M+H + ) ^-NMR (DMS〇.d6? 270MHZ) 6=0.7 (m,6H)? 0.8-1.0 (m，12H)， 1.75.2,05 (m，7H)， 2.0 (s，3H)， 2.2(s，6H)， 2.6(d，lH)，3.05 (s，3H)，3.55 (m，lH)，3.7 (m，lH)，4-35 -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規桔（21 OX 297公釐） ^---Μ--衣-- C請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 訂 505657

B7 五、發明説明（4〇 ) (m，lH)，4.5-4.6 (m，2H)，4·95 (d，lH)，8.05 (d，iH) ppm 實例 4 2-[(SHMe2Val-Val，MeVal-Pro-吡卷遠-2•基）]·5 苯基嘮唑（化合物III-12)之合成 +

---J---：——Φ―丨 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

HOBt EDC N-Methylmorpholine U

、\d •Ί 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Me2-Val-MeVal-Pro-OH(1.72 克，3.8毫莫耳）及2-(吡咯啶-2-基）-4-苯基-嘮唑（0.8克，3.8毫莫耳）溶解於4〇毫升二氣甲烷及所得溶液冷卻至0°C。接著添加HOBT.H2O(0.5 克，3.8毫莫耳）及丑0(：.11(：丨（〇.7克，3.8亳莫耳），接著爲 NMM(0·5毫升，4.5毫莫耳）。在室溫下攪拌過夜後，反應混合物以2N NaOH及水清洗。以硫酸鈉乾燥後，在減壓 -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 A7 _ 五、發明説明（41 ) 下去除溶劑且所得粗物質藉在矽膠之色層分析純化。產率：1.85克 FAB-MS: 651(M+H + ) 下列化合物係經如上揭示之方法製備： 1-5 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-叶b 略淀-2 -基）丁基酮 FAB-MS :592.5 (M+H + ) 1-12 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-峨洛淀-2 -基）甲氧基 _ 甲基酮 FAB-MS; 581 (M+H+) 1-14 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-峨哈喊-2 -基）苄基酮 FAB-MS: 626 (M+H+) I-1 5 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-叶匕洛淀-2 -基）苯基酮 FAB-MS: 612 (M+H+) I_ 1 9 (S)-(Me2Val-Val_MeVal-Pro-峨洛淀-2-基）-(4.三氟甲基苯基）-酮 FAB-MS: 680 (M+H+) 1-20 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro -峨哈淀-2-基）-(2_ 甲氧苯基）酮 FAB-MS: 642 (M+H + ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ----^---^---^^衣-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1-22 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-吡略啶-2 -基）-(4•甲氧苯基）酮 FAB-MS: 642.5 (M + H+) 1-32 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-峨洛淀 _2·基）-(仁氣苯基）酮 -44- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) ' _ ~ 505657 A7 B7

第087103515號專利申請案中文說明書修正頁(91年4月）五、發明説明（42 ) FAB-MS: 630.5 (M + H+) 1-37 (8)-(1^2\^1-\^1-1^\^1-?1*〇-?比哈淀-2-基）-(2,4-雙 (甲氧基）苯基）-酮 FAB-MS: 672 (M+H+) 1-39 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro- p比 p各咬 _ 2 -基）-(3,4,5-參（甲氧基）苯基）-酮 FAB-MS: 702 (M+H + ) 1-49 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-吡嘻咬 _2-基）-(2-嘧峻）-酮 FAB-MS: 619 (M + H + ) 1-54 (SHMe2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）-三氟甲基-酉同 FAB-MS: 621.5 (Μ + Η30 + ) 1-63 乙基（SHMe2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）-3- 氧-丙酸酯 FAB-MS: 622 (M+H + ) 1-7 9 ^[-芊基-(8)-(4)-(]^^2¥&1-¥&1-1^^¥&1-?1：〇-吡咯啶-2- 基）-4-氧-丁醯基醯胺 FAB-MS: 711 (M + H + ) III-26 2-[(SHMe2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）]-4- 甲基-噻唑 FAB-MS: 605 (M+H + ) III-28 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）]-3,4-二甲基-噻唑 -45- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 505657 A7 B7 五、發明説明（43 ) FAB-MS: 619 (M + H + ) III-32 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）]-5-第三-丁基-嘧唑 FAB-MS: 647 (M + H + ) III-35 2-[(SHMe2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）]-4- 苯基-嘧唑 FAB-MS: 667 (M + H+) III-3 6 2-[(SHMe2Val-Val-MeVal-Pro-吡咯啶-2-基）]-5-苯基噻唑 FAB-MS: 667 (M + H + ) III-46 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-吡洛啶-2-基）]-4-羧基乙氧基嘧唑 FAB-MS 663 (M + H + ) 列於下面表1 -8之化合物可使用上述方法及如上概述之各種建構區塊合成之方法如下製備；化合物 1-1 至 1-103 及 II-1 至11-103 : 叶匕咯淀基酮及六氫峨淀基酮；化合物 III-1 至 III-24 及 IV4 至 IV-24 : 經濟部中央標準局員工消費合作社印f (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 口比洛淀基-崎咬及六氫峨淀基-崎峻；化合物 III-25 至 III-48 及 IV-25 至 IV-48 : 口比洛淀基-碟吐及六氫峨淀基-邊嗤；化合物 III-49 至 ΙΓΙ-72 及 IV-49 至 IV-72 : 峨洛淀基-咪嗤及六氫吡啶基-咪吐； -46- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 五、發明説明（44 化合物ν·1至V-24及VI-1至VI-24 : 哺咯啶基-異哼唑及六氫吡啶基-異噚唑；化合物 V-25 至 V-48 及 VI-25 至 VI-48 ·· 吡咯啶基·吡唑及六氫吡啶基-吡唑；化合物 VII-1 至 VII-9 及 VIII-1 至 VIII_9 : 峨洛徒基·1，3,4-〃号二峻及六氫说症基-1，3,4-$二也；化合物 VII-10至 VII-1 7及 VIII-10至 VIII-17 : 峨洛淀基-1，3,4_ρ塞二也及六氫？比淀基-1，3,4-，塞二嗤；表 1 : Α爲 Me2Val，Β爲 Val，D爲 MeVal，Ε爲 Pro及 F爲式 IIf，af爲1及-(OO)-G基圏在式IIf中相對於氮原子之位置 1 〇 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 經濟部中央標準局員工消費合作社印製编辑 -C(=0)~G 工-1 -(C=0) -ch3 1-2 -(c=〇）-c2h5 1-3 -(C=〇）-nC3H7 工-4 -(C=〇）-is〇C3H7 1-6 -(C=〇）-tertC4H3 1-7 -(C=0) -cycloC3H5 工-8 -(C=〇）-cycl〇C4H7 1-9 -(C=〇）-cycloC5H9 1-10 ^ (C=0) -cycloC6Hu 工-11 -(C=0) -cycloC7H12 工-13 .-(C=0) -ch2-ch2-o-ch3 工-16 -(C=0) - (4-HO-C6H5) 工-17 -[(C=0)-(2-CF3-C6Hj 工-18 -[(C=0) - (3-CF3-C6Hj 1-21 -[(C=0) - (3-OCH3-C6Hj 工-23 - [(C=〇）-(2-SCH3-CsH4] 工-24 -[(C=0) - (3-SCH3-C6Hj 工-25 -[(C=0) - (4-SCH3-C6Hj 工-26 -[(C=0)-(2-N(CH3)2-C€H4] #1 -47- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（45 編號 1-27 工-28 1-29 5 1-30 工-31 1-33 工-34 工-35 10 1-36 工-38 1-40 工-41 15 1-42 工-43 I - 44 1-45 工-46 1-47 20 1-48 1-50 1-51 1-52 25 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 30 1-53 1-55 1-56 1-57 工-58 I - 59 工-6〇工- 61 工-62 工-64 工-65 -C(=Q) -G -[(C=0) - (3~N(CH3)2-C6HJ -[(C=0) - (4-N(CH3)2-C€Hj -[(C=〇)-(4-CN-C6Hj -[(C=0)-(4-Cl-C6Hj --[(C=0)-(4-Br-C6Hj -[(C=0) - (4-CH3-C6Hj -[(C=0) - (2-N02-C6Hj -[(C=〇）-(3-N〇2-C6Hj 一 [(C=〇）—（4一N〇2-C6H4] -[(C=〇）-(3,4-〇CH3-C6H3] -[(C=0) - (3,4-CH2OCH2-C6H3] 一 [(C=〇）一（2,3 —CH2〇CH2-CsH3] -（C=0) -2-吡啶基 -(C=0) -2-呋喃基 -（00)-2-喳吩基 -(C=0)-3-峨咬基 -（C=Q卜3-啥喃基 -（00)-3-^ 令基--（C=0)-4-吡啶基--（C=0) -2-哼唑基 _ -(C=0)-3-異嘮唑基 -(C=0)-4- 異嘮唑基 -(C=0)-5-:異噚唑基 - (C=〇）-C2F5 一（C=〇）一（C=〇）-ch3 -(C=0) - (C=0) -c2h5 -(C=0) - (C=0) -nC3H7 -(C=0) - (C=0) -tertC4H9 一（C=〇）一（C=〇）一CH2-C6H5 -(C=0)-(C=0)-C6H5 一（c=〇）一ch2_c〇〇ch3 -(C=0) -cf2-cooch3 -(C=0) -CF2-COOC2H5 -4S- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----^---^---Φ _ — (讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 .__ 505657 A7 B7 五、發明説明（46 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製编號工-66 1-67 工-68 5 工-69 1-70 工-71 1-72 工-73 10 1-74 工-75 工-76 丄-ΊΊ 1-78 15 1-80 工-81 工-82 工-83 工-84 工-85 工-86 1-87 1-88 工-89 1-90 1-91 工-92 工-93 工-94 1-95 1-96 工-97 工-98 20 30 -Cf=Q) -G 一（C=〇）一CH2-C〇NH2 一（C=〇）一CH2—C〇NHCH3 * j Λ -(C=0)~CH2-C0N(CH3)2 -(C=0) -ch2-conh-ch2-c6h5 -(C=0) -CH2-CONH-C6H5 -(C=0) -CH2-CONH(CH2-C6H5)2 -(C=0) -CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-) -(C=0) -CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2) -(c=〇）-ch2-ch2-c〇〇ch3 -(C=0) -CH2-CH2-COOC2H5 -(c=〇) -ch2-ch2-conh2 -(C=0) -ch2-ch2-conhch3 -(C=0) -ch2-ch2-con(ch3)2 -(C=0) -CH2-CH2~CONH-C6H5 -(C=0) -CH2-CH2-CONH (CH2-C6H5) 2 -(c=〇）-ch2-ch2-c〇n(-ch2-ch2-ch2-ch2--) -(C=0) -CH2-CH2~CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2) -(C=0) -ch2-coch3 -(C=0) -ch2-ch2-coch3 -(C=0) -CH2-COC2H5 -(C=0) -CH2-CH2-COC2H5 -(C=0) -CH2-CO-C6H5 -(C=0) -CH2-CH2-CO-C6H5 -(c=〇) -CH2-CO-CH2-C6H5 -(c=〇）一ch2-ch2-c〇-ch2-csh5 -(C=0) -CH2-SOC6H5 -(C=0) -ch2-soch3 -(C=0) -CH2-S0(4-CH3-C6HJ 一（c=〇）一 CH2-S〇2CsH5 -(c=〇）一 ch2-s〇2ch3 -(C=0) -CH2~S02(4-CH3-C6H4) -(c=〇）-ch2 - ch2 - s〇c6h5 ‘ (讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ⑽657 kl _ _ B7 五、發明説明（47 ) -G 工-99 -(C=0) -CH2-CH2-SOCH3 1-100 -(C=0) -CH2-CH2-SO(4-CH3- C6H4) 1-101 -(C=0) -ch2>ch2-so2c6h5 1-102' -(C=0) -CH^CH^SO^Hi 1-103 一（C=〇）一CH2-CH2-S〇2 (4 — CH3, -c6hj 表2 : A爲 Me2Val，B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro 及 f 爲式 IIf，af爲2及-(C=0)-G基團在式11£中相對於氮原子之位置

；—J— Γ請先閲讀背面之«事3填寫本畜C 經濟部中央標準局員工消費合作社印製编號 f=0)-G II-l _(c=〇）-ch3 工1-2 -(〇〇）- C2Hs II-3 -(C=〇）-nC3H7 II-4 -(C=〇）-is〇C3H7 工工-5 -(C=0) -nC4H9 工工-6 -(C=0) -tertC4H9 工1-7 -(C=0) -cycloC3H5 工工-8 -(C=0) -cycloCHH7 1工-9 -(C=〇）一cycl〇C5H3 11-10 -(C=0) -cycloCgHi! 工工-11 -(C=0) ~cycloC7H12 II -12 -(C=0) -ch2-o-ch3 11-13 -(c=〇）一ch2-ch2-〇—ch3 工工-14 -(C=0) -ch2-c6h5 I 工-15 -(C=0) -c6h5 11-16 -(C=0) - (4-HO-C6H5) 工工-17 - [(C=〇）-(2-CF3-C况] 工工-18 -[(C=0) - (3-CF3-C6Hj 11-19 -[(C=0) - (4-CF3-C6Hj 11-20 -[(C=0) - (2-OCH3-C6Hj 11-21 -[(C=0) - (3-OCH3-C6Hj 11-22 -[(C=0) - (4-OCH3-C,Hj

、1T 鮮· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（48 ) 經濟部中央標率局員工消費合作社印製编號 -C(=0)-G 工工-23 - [(C=〇）-(2-SCH3-C况] 工工-24 -[(C=0) - (3-SCH3-C6Hj 工工-25 -[(C=0) - (4-SCH3-C6Hj 5 工工-26 -[(C=0) - (2-N(CH3)2-C6Hj 工工-27 -[(C=0)-(3-N(CH3)2-C6Hj 11-28 -[(C=0)-(4-N(CH3)2-C6Hj 11-29 -[(C=0) - (4-CN-C6Hj 11-30 -[(C=0) - (4-Cl-C6Hj 10 工工-31 -[(C=0) - (4-Br-C6Hj 工工-32 -[(C=0) - (4~F-C6HJ 工工-33 -[(C=0) - (4-CH3-C6Hj 11-34 -[(C=0) - (2-N02-C6Hj 工工-35 -[(C=0) - (3-N02-C6Hj 15 11-36 -[(C=0) - {4-N02-C6Hj 11-37 - [(C=〇）-(2,4-〇CH3-CsH3] 工工-38 - [(C=〇）-(3,4-〇CH3-CsH3] 工工-39 -[(C=〇）-(3,4,5-〇CH3-C6H2] 工工-40 -[(C=〇）-(3,4-CH2〇CH2-C6H3] 20 11-41 -[(C=〇）-(2,3-CH2〇CH2-C6H3] 工工-42 -(C=0) -2-吡啶基工工-43 -(C=0)-2-呋喃基工工-44 -(▽=0) -2-ff塞吩基工工-45 -（C=0) -3-v比淀基 25 工工-46 -（C=0卜3-呋喃基工工-47 -(C=0卜3-嘍吩基工工-48 -（C=〇）-4- P比咬基 11-49 -(C=0) -2-P塞峻基工工-50 -(C=0) -2-呀唑基 30 工工-51 -（C=0) -3-異哼唑基 11-52 -（C=0)_4_異嘮唑基 11-53 _(C=0)-5_異嘮唑基工工-54 -(C=〇）-cf3 工工-55 -(c=〇）-c2f5 35 11-56 一（c=〇）—（c=〇）一ch3 -51 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----—I — -I41 — (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 505657 A7 B7 五、發明説明（49 經濟部中央標準局員工消費合作社印製編號 -C(=〇）-G 工工-57 - (C=〇）-(C=〇）-C2H5 工工-58 - (C=〇）一（C=〇）-nC3H7 Λ y 工工-59 - (C=0) - (C=0) -tertC4H9 5 工工-60 -（C=〇）-(C=〇）一CH2-C6Hs . 工工-61 - (C=0) - (C=0) -CeH5 工工一62 -（C=〇）一CH2-C〇〇CH3 工工一63 - (C=0) -CH2-COOC2H5 工工一64 -（C=〇）一CF2-C〇〇CH3 10 工工一65 - (C=〇）一CF2-C〇〇C2H5 工工一66 - (C=0) -CH2~CONH2 工工-67 —（C=〇）-CH2-C〇NHCH3 II一68 - (C=0) -CH2-CON(CH3)2 工工一69 -（C=〇）-CH2-C〇NH-CH2-CsH5 15 工工一70 - (C=0) -CH2-CONH-C6H5 工工一 71 ——（C=〇）-CH2-C〇NH(CH2-CsH5)2 工工-72 - (C=〇）一CH2-C〇N (-CH2-CH2-CH2-CH2-） - 工工-73 - (C=0) -CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2) 工工一74 - (C=0) -CH2-CH2-COOCH3 20 工工一75 - (C=〇）一CH2-CH2-C〇〇C2Hs 工工一76 - (C=0) -CH2-CH2-CONH2 工工-77 - (C=0) -CH2-CH2-CONHCH3 工工-78 - (C=0) -CH2-CH2-CON(CH3)2 工工一79 - (C=0) -CH2-CH2-CONH-CH2-C6H5 25 工工一80 - (C=0) -CH2-CH2-CONH-C6H5 工工-81 - (C=0) -CH2-CH2-CONH (CH2-C6Hs) 2 工工-82 - (C=0) -CH2-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2~CH2-) 工工-83 - (C=0) - CH2 - CH2 - CON (- CH2 - CH2 - CH2 - CH2 - CH2 ；工工一84 - (C=0) -CH2~COCH3 30 工工一85 -（C=〇）一CH2-CH2_C〇CH3 工工-86 - (C=〇）-CH2-C〇C2H5 工工一87 - (C=0) -CH2-CH2-COC2H5 工工-88 - (C=〇）一CH2-C〇-C6H5 ‘ 工工-89 - (C=0) -CH2-CH2-CO-C6H5 35 工工一90 - (C=0) -CH2-CO-CH2-C6H5-52· ----Ί--ΊI-φ -I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T _· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（50 编號 -C(=〇）-G 工工-91 - (C=0) -CH2-CH2-CO-CH2-C6Hs 工工-92 - (C=0) -CH2-SOC6H5 工工一93 - (C=0) -CH2-SOCH3

5 工工-94 - (C=0) -CH2-S0(4-CH3-C6HJ 工工一95 - (C=〇）一CH2-S〇2C6H5 工工一96 - (C=〇）一CH2-S〇2CH3

工工一97 - (C=0) -CH2-S02(4-CH3-C6HJ 工工-98 - (C=0) -CH2-CH2-SOC6H5 10 工工-99 - (C=0) -CH2-CH2-SOCH3 工工一 1〇0 工工-101 - (C=〇）-CH2-CH2 —S〇2CsH5 工工-102 - (C=0) -ch2-ch2-so2ch3 工工一 103 - (C=〇）一CH2-CH2 —S〇2 (4-CH3-C6H4) 表 3 : A爲 Me2Val，B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro及 F爲式 15

Illf，G爲式Vllg，bf=l，及G爲基圓在式IIIf中相對於氮原子之位置1。 ----^-------- (讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}

、1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製编取 X Ell 工工工-1 〇 Η H 20 工工1-2 〇 Η ch3 工工工-3 〇> ch3 H 工工工-4 〇 ch3 ch3 工工工-5 〇 H c2h5 ΙΙΙ-6 〇 c2h5 H 25 I工工-7 〇 c2h5 c2h5 工工I - 8 〇 H t-C4H9 工工工-9 〇 t-C,H9 H 工工工-10 〇 t - C4H9 t-C4H9 工工工-11 〇 H c6h5 30 ΙΙΙ-12 〇 c6h5 H ΙΙΙ-13 〇 c6h5 ch3 53- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210'乂297公釐） 505657 • . - ' A7 B7 五、發明説明（51 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製編號 Eli 工工工-14 〇 ch3 c6H5 III-15 〇 c,h5 c€h5 工工工-16 〇 Η ch2-c6h5 5 III-17 〇， ch2-c6h5 H 工工工-18 〇 ch2-c6h5 ch2-c6h5 工工工-19 〇 H COOCH3 III-20 〇 COOCH3 H 工工工-21 〇 COOCH3 COOCH3 10 工工1-22 〇 H c〇〇c2h5 工工工-23 〇 COOC2H5 H I工工-24 〇 cooc2h5 C〇〇C2H5 III-25 S H H 工工工-27 S ch3 H 15 III-29 S H C2H5 1工工-3〇 S C2H5 H 工工工-31 S c2h5 C2H5 工工工-33 S t-C4H9 H III-34 S t - C4H9 t - C4H9 20 工工工-37 S c6h5 ch3 工工工-38 S ch3 c6h5 工工工-39 S C6Hs c6h5 工工1-40 S 、 H ch2-c6h5 工工工-41 S ch2-c6h5 H 25 工工工-42 S ch2-c6h5 ch2-c6h5 工工工-43 S H COOCH3 工工工-44 S COOCH3 H 工11-45 S COOCH3 COOCH3 III-47 S COOC2H5 H 30 工工1-48 S cooc2h5 c〇〇c2h5 工工工-49 NH H H III-50 NH H ch3 工工工-51 NH ch3 H 工工工-52 NH ch3 ch3 ----；---.----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T .__ -54- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（52 ) 編號 X Ell ΙΙΙ-53 ΝΗ Η c2Hs 工11-54 ΝΗ C2H5 H 工工工-55 ΝΗ c2h5 c2h5 工工工-56 ΝΗ Η t-C4H9 工工工-57 ΝΗ t *- C4H9 H 工工I-58 ΝΗ t-CHH9 t - ChH3 工工工-59 ΝΗ Η c6h5 工工:[-60 ΝΗ c6h5 H 工工工-61 ΝΗ c6h5 ch3 ΙΙΙ-62 ΝΗ ch3 c6h5 ΙΙΙ-63 ΝΗ c6h5 / c6h5 工ΙΙ-64 ΝΗ H . ch2-c6h5 工工工-65 ΝΗ CH2-C6H5 H 工工工-66 ΝΗ ch2-c6h5 ch2-c6h5 工工工-67 ΝΗ H COOCH3 工工工-68 ΝΗ COOCH3 H 工工工-69 ΝΗ COOCH3 COOCH3 工工工-70 ΝΗ H c〇〇c2h5 工工工-71 ΝΗ COOC2H5 H 工工工-72 ΝΗ cooc2h5 c〇〇c2h5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 表 4 : A爲 Me2Val，B 爲 Val，E)爲 MeVal，E爲 Pro，F爲式 mf，g爲式viig，bf=2，及g爲基圏在式mf中相對於氮原子之位置1。

編號 Eii IV-1 〇 Η H IV-2 .〇 Η ch3 IV-3 〇 ch3 H IV-4 〇 ch3 ch3 IV-5 〇 Η c2h5 IV- 6 〇 c2h5 H -55- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） — 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 B7 五、發明説明（53 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製编號 Σ Ell Eli IV-7 〇 C2Hs c2h5 IV-8 〇 Η t-C,H9 IV-9 〇 t-C4H9 H 5 IV-10 〇, t-C,H9 t-C4H9 IV-11 〇 H c6h5 IV-12 〇 c6h5 H 工 V-13 〇 c6h5 ch3 工 V-14 〇 ch3 c6h5 10 IV-15 〇 c6h5 c6h5 IV-16 〇 H ch2-c6h5 IV-17 〇 ch2-c6h5 H IV-18 〇 ch2-c6h5 ch2-c6h5 1 IV-19 〇 H COOCH3 15 IV-2 0 〇 COOCH3 H 工 V-21 〇 COOCH3 COOCH3 IV-22 〇 H COOC2H5 工 V-23 〇 C〇〇C2H5 H IV-24 〇 cooc2h5 C〇〇C2H5 20 IV-2 5 S H H IV-26 S H ch3 IV-27 S ch3 H IV-28 S > ch3 ch3 IV-29 S H c2h5 25 IV-3 0 S c2h5 H IV-31 S c2h5 c2h5 IV-3 2 S H t-C4H9 IV-3 3 S t-C4H9 H 工 V-34 S t-C4H9 t-C4H9 30 IV-3 5 S H c6h5 IV-36 S c6h5 H 工 V-3 7 S c6h5 ch3 IV-38 S ch3 c6h5 IV-39 S c6h5 c6hs -56- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ---J---_----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 鮮·

Eh Eh Η ch2-c6h5 ch2-c6h5 H ch2-c6h5 ch2-c6h5 Η COOCH3 c〇〇ch3 H COOCH3 COOCH3 Η C〇〇C2H5 COOC2H5 H c〇〇c2h5 C〇〇C2H5 H H H ch3 ch3 H ch3 ch3 H C2Hs C2H5 H C2Hs c2h5 H t-C4H9 t-C4H9 H t-C4H9 t-C4H9 H c6h5 c6h5 H c6h5 ch3 ch3 c6h5 c6h5 c6h5 H ch2-c6h5 ch2-c6h5 H ch2-c6h5 ch2-c6h5 H COOCH3 COOCH3 H COOCH3 COOCH3 H C〇〇C2H5 COOC2H5 H c〇〇c2h5 C〇〇C2H5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 505657 A7 ， ' a B7 五、發明説明（54 )

編號 X

IV-40 S

IV-41 S IV-4 2 S

5 IV-4 3 S IV-44 S IV-45 S IV-46 S IV-47 S 10 IV-48 S

IV-49 NH IV-50 NH IV-51 NH 工V-52 NH 15 IV-53 NH

IV-54 NH IV-55 NH IV-56 NH 工V-57 NH 20 IV - 58 NH 工V-59 NH IV-60 NH IV- 61 NH、 IV-62 NH 25 IV- 63 NH •IV-G4 NH IV-65 NH IV-66 NH IV-67 NH 30 工 V-68 NH IV_69 NH 工V-70 NH 工V-71 NH IV-72 NH -57- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 505657 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（55 ) 表 5 : A爲 Me2Val，B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro，F爲式 IIIf，G爲式VIIIg，bf=l，及G爲基團在式IIIf中相對於氮原子之位置1。编號 X , Ei£i V-1 〇 Η H V-2 〇 Η ch3 V-3 〇 ch3 H V-4 〇 ch3 ch3 V-5 〇 H c2h5 V-6 〇 c2h5 H V-7 〇 ^ c2h5 c2h5 V- 8 〇 H t-C4H9 V-9 〇 t - C4H3 H V -10 〇 t - c4h9 t-C4H9 V -11 〇 H c6h5 V -12 〇 c6h5 H V-13 〇 c6hs ch3 V-14 〇 ch3 c6h5 V-15 〇 c6h5 c6h5 V-16 〇 H ch2-c6h5 V-17 〇 ch2-c6h5 H V-18 〇、 ch2-c6h5 ch2-c6h5 V-19 〇 H cooch3 V - 20 〇 C00CH3 H V - 21 〇 COOCH3 COOCH3 V - 22 〇 H COOC2H5 V-23 〇 COOC2H5 H V-24 〇 cooc2h5 COOC2H5 V-25 NH H H V-26 NH H ch3 V-2 7 NH ch3 H V - 28 NH ch3 ch3 -58- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) •衣. 訂. 505657 kl B7 五、發明説明（56 ) 编號 X Εϋι Eiii V-29 NH Η C2H5 V-30 NH c2h5 H V-31 NH c2h5 c2h5 V-32 NH Η t - C4H9 V-33 NH t-C4H9 H V-34 NH t-C,H9 t-C4H9 V-35 NH H c6h5 V - 36 NH c6h5 H V-37 NH c6h5 ch3 V-38 NH ch3 c6h5 V-39 NH c6h5 c6h5 V - 40 NH H .ch2-c6h5 V-41 NH CH2>C6H5 H V-42 NH ch2-c6h5 CH2-C6H5 V-43 NH H COOCH3 V-44 丽 C00CH3 H V-45 NH COOCH3 COOCH3 V - 46 NH H COOC2H5 V-47 NH COOC2H5 H V-48 NH cooc2h5 COOC2H5 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製表 6 : A爲 Me2Val，B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro，F爲式 IIIf，G爲式VIIIg，bf=2，及G爲基團在式IIIf中相對於氮原子之位置1。编號 X Eiii VI-1 ·〇 H H VI-2 〇 H ch3 VI-3 〇 ch3 H VI-4 〇 ch3 ch3 V工-5 〇 H c2h5 -59· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規枱（210X 297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（57 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印f- 编翠 X R10， VI-6 〇 c2h5 H V工-7 〇 C2Hs C2H5 V工-8 〇 Η t-C,H9 5 V工-9 〇 t-C4H9 H . VI-10 〇 t-C,H9 t-C4H9 VI-11 〇 H c6h5 VI-12 〇 c6h5 H VI-13 〇 c6h5 ch3 10 VI-14 〇 ch3 c6h5 VI-15 〇 c6h5 c6h5 VI-16 〇 H ch2-c6h5 VI-17 〇 ch2-c6h5 H VI-18 〇 ch2-c6h5 ch2-c6h5 15 VI-19 〇 H COOCH3 VI-20 〇 COOCH3 H VI-21 〇 COOCH3 COOCH3 VI-22 〇 H COOC2H5 VI-23 〇 C〇〇C2H5 H 20 VI-24 0 cooc2h5 c〇〇c2h5 VI-25 NH H H VI-26 NH H ch3 VI-27 NH > ch3 H VI-28 NH ch3 ch3 25 VI-29 NH H c2h5 VI-30 NH .c2h5 H VI-31 NH c2h5 C2H5 VI-32 NH H t-C,H9 V 工-33 NH t-C4H9 H 30 V 工-34 NH t-C4H9 t-C4H9 VI-35 NH H c€hs VI-36 NH c6h5 H VI-37 NH c6h5 ch3 VI-38 NH ch3 c6h5 -60- ----Ί--；----- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁') 、11 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 A7 B7 五、發明説明（56 ) 编號 X Εϋι VI-39 NH c6h5 c6h5 VI-40 NH Η ch2-c6h5 VI-41 NH ch2-c6h5 H VI-42 NH ch2-c6h5 ch2-c6hs VI-43 NH Η COOCH3 VI-44 NH c〇〇ch3 H VI-45 NH COOCH3 COOCH3 VI-46 NH Η C〇〇C2H5 VI-47 NH COOC2H5 H VI-48 NH cooc2h5 c〇〇c2h5 表 7 : A爲 MesVal ’ B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro，F爲式 IIIf，G爲式IXg，bf=l，及G爲基團在式111£中相對於氮原子之位置1。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製編號 VII- 1 〇 H VII- 2 〇 ch3 VII- 3 〇 c2h5 VII - 4 〇 c3h7 VII- 5 〇 t-C,H9 VII_ 6 〇 COOCH3 VII- 7 ' 〇 C〇〇C2H5 VII- 8 〇 c6h5 VII- 9 〇 ch2-c6h5 VII-10 S ch3 VII-ll S c2h5 VII-12 s c3h7 VII-13 s t-C4H9 VI工-14 s COOCH3 VII-15 s c〇〇c2h5 VII-16 s c6h5 -61 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）訂 505657 A7 B7五、發明説明（59 )编號 X £ii VH-17 S CH2-C6H5表 8 : A爲 Me2Val，B爲 Val，D爲 MeVal，E爲 Pro，F爲式 Illf，G爲式IXg，bf=2，及G爲基團在式IIIf中相對於氮原子之位置1。编號 X VIII- • 1 〇 Η VIII- 2 〇 ch3 VIII_ 3 〇 c2h5 VIII- 4 〇 c3h7 VIII- 5 〇 t-C4H9 V工工工- 6 〇 C00CH3 VII 工- 7 〇 C〇〇C2H5 VIII- 8 〇 c6h5 VIII- 9 〇 ch2-c6h5 VII工- 10 S ch3 VIII- 11 S c2h5 VI工工- 12 S C3H7 VIII- 13 S t-C4H9 VIII- 14 ' S COOCH3 VIII- 15 S c〇〇c2h5 VIII- 16 S C6H5 V工工工- 17 S ch2-c6h5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、-口經濟部中央標準局員工消費合作社印製生物活性之評估體外方法學使用標準方法學測定附著細胞株之細胞毒性，如微培 -62- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 505657 kl B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（60 ) 養四銼分析（MTT)。此分析之細節已出版（Alley，M.C,等人，Cawar 48:5 89-601,(1988))。ΗΤ·29結腸癌細胞之對數生長培養物係用於製造微滴定盤培養物。在 96-孔盤（150毫升培養基）中，每孔接種細胞5〇〇-20,000個細胞並在37 °C下生長過夜。加入1〇倍稀釋度之受測化合物，濃度差異自10·4莫耳濃度至莫耳濃度。細胞接著培養4 8小時。爲測定每一孔中存活細胞的數目，加入 MTT染劑（50毫升之3毫克/亳升3-(4,5-二甲，塞唑-2-基）_ 2,5-二苯四銼溴於生理鹽液）。混合物在37χ：培養5小時，並接著添加50毫升的25% SDS，ρΗ2至每一孔。整夜培養後’使用ELISA讀取儀讀取每一孔在550nm之吸收度。使用式％T/C(%經處理存活細胞/控制組）計算得自重複孔數據之平均+/- SD之値。提供50%生長抑制τ/C的受測化合物濃度稱爲IC5〇。下列表9，表現測定於HT-29細胞系統之1<：5〇値：表9 : 也舍物編號 IC」mol/Ti) 1-1 1-5 工-12 1-14 _ 工-15 工-19 1-20 1-22 工-32 1-37 1-39 •63· > 1〇-6 > 1〇-6 4 X 1〇-7 4 X ΙΟ·7 1.7 X 1〇-6 > 1〇-6 2.8 X 1〇-7 > 10*6 > 1〇-6 3 X 1〇-7 > ίο-6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} 、^ —— 505657 A7 B7 五、發明説明（61 物編號 1-49 1-54 1-63 工工1~12 工11 -2 6 工工工-28 III-32 工I工~ 3 5 III-36 III-46 V-2 l£s〇 (mol /ΊΛ > 10-6 > 1〇-6 4 χ ΙΟ-8 9 x 10-7 >10·« 4 χ 1〇-7 > 10'6 > 1〇-6 4 χ 1〇-7 6 χ 1〇-7 3 X 1〇-6 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製體内方法學本發明化合物可進一步測試於任何各種臨床前分析之在體内活性，其可作爲臨床利用之指標。此種分析進行於赤裸無毛小鼠之腫瘤組織，較佳爲人類來源，其係經轉殖 (經異種移殖），爲此領域所習知者。受測化合物投藥至攜有異種移殖物之小鼠後評估其抗腫瘤功效。上列化合物1-15測試於P3 88鼠淋巴球性白血病檢視模型。在轉殖後第7天及靜脈内連續投藥5天，藉腹腔灌洗法自提供小鼠收取P388細胞。未處理小鼠之存活期間爲 11至13天之範圍。數據顯示於下面表9，且以平均存活時間（MST及相對於控制組之壽命增加以T/C%(經處理/控制組％))表示。根據國際癌症組織（National Cancer • 64- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公麓） 505657 A7 _____ B7 五、發明説明（62 )

Institute)指標，τ/C%在128-190%範圍指出藥劑具中度至佳之活性。表1 〇 :化合物Μ 5對抗P3 88鼠白血病之活性〇劑量（亳支/公斤） MST(天） T/C% 0 11 100 50 15 136 60 16 145 75 17 155 ----J---.——ΑΨ—— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁〕

-、1T 此外’已生長於無胸腺赤裸無毛小氣之人類腫瘤可轉殖入新受體動物，使用約50毫克大小之腫瘤片段。轉殖當天稱爲第0天。6至1 0天後，在每一劑量，小鼠以靜脈内或腹膜内注射供給之受測化合物處理5-1 0隻小鼠群組。化合物每日供給5天，10天或15天，劑量自1〇_1〇〇毫克/公斤體重。腫瘤直徑及體重每週測定二次。使用游標尺彎腳規（Vernier calipers)測定之直徑及下式計算腫瘤質量： (長度X寬度2)/2 =毫克腫瘤重量經濟部中央標準局員工消費合作社印f r - - JJ—. 自每一處理群組計算平均腫瘤重量，及自每一群組相對於未處理控制組腫瘤測定T / C値。同等者彼等熟習此技藝者可只使用例行實驗認知或確定許多相等於描述於此中之本發明特定具體實施例。此種同等者 -65- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 505657 A7 B7 63 經滴部中央標準局員工消費合作社印f. 五、發明説明係包含於下列申請專利範圍之範圍 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -66 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐）

Claims

505657 罘〇871〇3515號專利申請案中文申請專利範圍修正本（91年4月）申請專利範圍

年 1一種式八-3-〇4^之化合物，其中 A為N，N -二甲基纈胺醯基（μ e 2 V a 1 ) ; v B為纈胺醯基（v a 1 ); D為N -曱基纈、胺醯基（μ e V a 1 ) ;v E為捕胺酿基（Pr〇); F為式（11 f )之氮環烷羧酸

〜、(CH2)af Γ (Ilf) 其中a f為1，或式（Π I f )之氮環烷衍生物其中bf為1 ;及 NC^(CH2)bf G (IHf) G為選自下列組群之單價基：可經卣素取代的Ci— ^烷基， 1 式（IIg )之芳烷基或雜芳烷基 dig) ——(CH2)ag—Rij 其中ag為0或1 ’及為可經鹵素、甲氧基或三氣甲基取代的苯基，或p塞唑基，-式（111 g )之烷氧羰烷基 —(CH2)bg—(C=〇)Cg—响 ⑴" 其中、為1或2，，及為氫原子或Ci-c4 烷基，本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公董)

式 Ivg.)之胺羰烷基 - (CH2)dg—(C=0)eg—N Λ31 、R4i (IV 其中dg為1、2或3，eg為1，及每一，各別的’為氫原子，及式（v.ng)之雜芳基 V 、R8i (VII '中X為氧原子或硫原子’及R 7 i及R 8 1每一，各別的’為氫原子、Cl_C8烷基、c「c5烷氧羰基或式 (111 )之單價基 —(CH2)al—R9! 其中&1為〇，及尺^為苯基；或其具醫藥上可接受酸類之酸鹽。 2·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中該醫藥上可接受酸類係選自氫氯酸，擰檬酸，酒石酸，乳酸，鱗故’甲確酸，醋酸，曱酸，順-丁晞二酸，反-丁晞二酸，蘋果酸，琥珀酸，丙二酸，硫酸，L -麩胺酸，l _ 天門冬胺酸，丙酮酸，黏液酸，苯甲酸，葡萄糖駿酸，草酸，抗壞血酸及乙醯甘胺酸所組成之群。 3.根據申請專利範圍第1項之化合物，其中F - G為式（ηf) 之氮環烷羧酸， (III) 2- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 申請專利範圍 V( CH2)af Γ 根二：f ΐ! ί:對於氮原子之位置i或位 ,™卞之位w (llf) 4. 根據申請專利範词第3項之化合、置1或位置2。取代的正或分支Κ8烷基。〇、其中G為可經函素 5. 根據申請專利範圍第3項之化芳烷基或雜芳烷基，其中 G為式（IIg)之 "(CH2)ag-R] 其中ag為0或1，及反、為可經南素二取代的苯基，或口塞嗤基。土或二氟甲基 6·根據申請專利範圍第3 ^之化合物烷氧羰烷基，、中G為式（IIIg)之 (CH2)bg-(c=：〇)cg-.〇R2i bg為1或2，Cg為〇或1，及r: C 4 -燒基為氫原子或正或分支 C,. 7.=:專利範圍第3項之化合物’其中W ~(CH2)dg—(c=〇)eg— R31 dg為1，2或3，eg為1，及^及r'每一，原子。 (IVg) 各別的，為氫 8· —種用於治療哺乳動物癌症之醫藥組合物，包括式 B-D-E-F-G之化合物作為活性成分，其中 -3- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） A8 B8 C8 D8 申請專利範園 A為N，N -二甲基纈胺醯基（Me2Val) B為類胺總基（V a 1 ); D為N -曱基纈胺醯基（MeVal); E為脯胺癌基（Pro); F為式（11 f )之氮環烷羧酸 NQCH2)af (Π Ο 其中af為1，或式（111 f )之氮環烷衍生物

(CH2)bf G 其中bf為1 ;及 G為選自下列組群之單價基：可經_素取代的C j - C 8垸基，式（IIg )之芳烷基或雜芳烷基 —(CH2)ag—Rl1 (IIg) 其中ag為0或1，及R、為可經自素、甲氧基或三氟甲基取代的苯基，或噻唑基，式（111 g )之烷氧羰烷基一 ——(CH2)bg—(C=0)cg-〇R21 (Hlg) 其中\為1或2，^為〇或1，及為氫原子或c”c 烷基， 4 式（I V g )之胺羰烷基 -4- 本紙張尺度適财g @家標準(CNS) A4規格(21QX297公爱）六、申請專利範圍 9. A8 B8 C8 D8 R3i —~(CH2)dg—(C=0)eg—N〆 R4! 其中dg為1、2或3，^為1，及及每一的，為氫原子，及式（vng)之雜芳基 /XYR71 —C 其中X為氧原子或硫原子，及尺^及尺％每一的’為氫原子、c i - C 8烷基、C ! - c 5烷氧羰 (IM之單價基 -(CH2)al—R9j (ivg) ，各別其中&丨為〇，及尺9丨為苯基；或其具醫藥上可接受酸類之酸鹽。如申請專利範圍第1項之化合物，其中A為N，N 、纈胺醯基（M e 2 V a 1 ) ; B為纈胺醯基（v a 1 ) N-甲基纈胺醯基（MeVal) (P r ο ) ; F 為式（11 f )NQCH2>f C-G ;E為脯上 (VIIg) ，各別基或式 (Hi) 二甲基 ;D為妄醯基其中af為1，及G為選自燒基、苯基、；氧曱基、丙酸酯及丁醯基醯胺組群之單價基。 (Hf) 基、曱 -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公爱)