HRP980124A2 - Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the c-terminus - Google Patents

Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the c-terminus

Info

Publication number
HRP980124A2
HRP980124A2 HR08/814,577A HRP980124A HRP980124A2 HR P980124 A2 HRP980124 A2 HR P980124A2 HR P980124 A HRP980124 A HR P980124A HR P980124 A2 HRP980124 A2 HR P980124A2
Authority
HR
Croatia
Prior art keywords
group
formula
alkyl
hydrogen atom
substituted
Prior art date
Application number
HR08/814,577A
Other languages
English (en)
Inventor
Andreas Kling
Original Assignee
Basf Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Ag filed Critical Basf Ag
Publication of HRP980124A2 publication Critical patent/HRP980124A2/hr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1027—Tetrapeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Stanje tehnike
Brojni kratki peptidi sa značajnim djelovanjem kao inhibitori rasta stanice bili su izolirani iz gastropoda iz Indijskog oceana Dolabella auricularia (Bai et al., Biochem. Pharmacology, 40: 1859-1864); Beckwith et al., J. Natl. Cancer Inst., 85: 483-488 (1993) i tamo citirana literatura). Oni uključuju dolastatine 1-10 (U.S. patent br. 4,816,444, koji su izdali Pettit et al.) i dolastatin-15 (Europska patentna prijava br. 398558). Dolastatin 15, na primjer, značajno inhibira rast stanične linije limfocitne leukemije National Cancer Institute's P388 (PS sistema), jakog sredstva koje predskazuje učinkovitost protiv raznih tipova humanih malignacija.
Izvanredno male količine raznih dolastatinskih peptida prisutnih u Dolabella auricularia (otprilike 1 mg na svakih 100 kg morskog gastropoda) i s tim povezane teškoće kod čišćenja količina dovoljnih za ispitivanje i upotrebu, potakle su napore za sintezom tih spojeva (Roux, et al., Tetrahedron, 50: 5345-5360 (1994); Shioiri, et al., Tetrahedron, 49: 1913-24 (1993); Patino, et al., Tetrahedron, 48: 4115-4122 (1992) i tamo navedena literatura). Međutim, sintetički dolastatin 15 ima nedostatke koji uključuju slabu topivost u vodenim sistemima i potrebne skupe polazne materijale za njegovu sintezu. To je opet dovelo do sinteze i ispitivanja strukturno modificiranih derivata dolastatina 15 [vidi: Bioorganic & Med. Chem. Lett., 4: 1947-50 (1994); WO 93 03054; JP-A-06234790, WO 93 23 424].
Međutim, postoji potreba za sintetičkim spojevima s biološkom aktivnošću dolastina 15 koji imaju korisnu topivost u vodi i koji se mogu proizvesti učinkovito i ekonomično.
Kratki opis izuma
Spojevi predloženog izuma uključuju peptide formule I,
A - B - D - E - F - G (I)
i njihove kiselinske soli. Svaki od A, B, D i E je ostatak α-amino kiseline, i A je amino kraj. U jednoj izvedbi F je ostatak azacikloalkankarboksilne kiseline. U toj izvedbi G je jednovalentni radikal, na primjer, vodikov atom, alkilna skupina, arilna skupina, cikloalkil, heteroarilna skupina, alkoksialkilna skupina, karboksilna skupina, karboksialkilna skupina, aminokarbonilalkilna skupina, arilalkilna skupina, heteroarilalkilna skupina, alkoksikarbonilalkilna skupina, ariloksikarbonilalkilna skupina, alkilsulfinilalkilna skupina, arilsulfinilalkilna skupina, alkilsulfonilalkilna skupina, arilsulfonilalkilna skupina, hidrokarbonilna skupina, ariloksikarbonilna skupina, alkil- ili arilsulfinilna skupina ili alkil- ili aril-sulfonilna skupina. U drugoj izvedbi F je azacikloalkilna skupina, a G je heteroarilna skupina povezana na F vezom ugljik-ugljik.
U drugom aspektu predloženi izum uključuje farmaceutske sastave koji sadrže spoj formule I i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Dodatna izvedba predloženog izuma je metoda za liječenje raka u sisavaca, kao čovjeka, koja uključuje davanje sisavcu učinkovite količine spoja formule I u farmaceutski prihvatljivom sastavu.
Opis izuma u pojedinostima
Predloženi izum odnosi se na peptide koji imaju antineoplastično djelovanje. On također uključuje farmaceutske sastave koji sadrže te spojeve i metode za liječenje raka u sisavca, kao čovjeka, davanjem tih spojeva sisavcu.
Dolastatin 15, peptid izoliran iz morskog gastropoda Do1abella auricu1ari a, je jaki inhibitor rasta stanica . Taj je spoj, međutim prisutan u morskom gastropodu samo količinama u tragovima, i stoga ga je teško izolirati. Također je skupa njegova sinteza i ima pati od skromne topivosti u vodi. Kako je ovdje prikazano, međutim, dolastatin 15 može poslužiti kao polazište za razvoj spojeva koji prevladavaju te nedostatke, a zadržavaju antineoplastičko djelovanje ili pokazuju veće antineoplastičko djelovanje nego prirodni proizvod.
Izumitelji su otkrili da određene strukturne modifikacije dolastatina osiguravaju spojeve s iznenađujuće poboljšanim terapeutskim mogućnostima za liječenje neoplastičnih bolesti u usporedbi s dolastatinima 10 i 15. Derivati dolastatina 15 pokazuju djelovanje čak i u tumorskim sistemima koji su višestruko otporni prema lijeku i nepredvidljivu visoku topivost u vodenim otapalima. Nadalje, spojevi predloženog izuma mogu se sintetizirati na uobičajen način, kako je dolje opisano u pojedinostima. Za svrhe predloženog izuma pojam "monovalentnog radikala" odnosi se na srednji električno neutralan molekulski fragment koji je sposoban oblikovati jednu kovalentnu vezu sa sekundarnim neutralnim molekulskim fragmentom. Jednovalentni radikali uključuju vodikov atom, alkilne skupine, kao što su metilna, etilna i propilna skupina, halogene atome kao fluorove, klorove i bromove atome, arilne skupine, kao fenilne i naftilne skupine, i alkoksi skupine, kao što su metoksi i etoksi skupine. Dva jednovalentna radikala na susjednim sigma-povezanim atomima također mogu zajedno oblikovati pi vezu između susjednih atoma. Dva jednovalentna radikala mogu također biti povezani zajedno, na primjer, pomoću polimetilenske jedinice, tako da oblikuju cikličku strukturu. Na primjer, jedinica -N(R)R’, u kojoj je svaki od R i R’ jednovalentan radikal, mogu zajedno s dušikovim atomom oblikovati heterociklički prsten. K tome, dva jednovalentna radikala povezana na isti atom mogu također zajedno oblikovati dvovalentan radikal, kao što je alikilidenska skupina, na primjer, propilidenska skupina, ili kisikov atom.
U svrhe predloženog izuma pojam “ostatak” odnosi se na molekulski fragment koji ostaje nakon odstranjivanja elemenata molekule vode (jedan kisikov atom, dva vodikova atoma) iz molekule, kao što je amino kiselina ili hidroksi kiselina.
U svrhe predloženog izuma pojam “normalni alkil” odnosi se na nerazgranatu ili alkilnu skupinu ravnog lanca, na primjer normalni (n-propil), -CH2-CH2-CH3) .
Spojevi predloženog izuma mogu se prikazati formulom I,
A-B-D-E-F-G (I),
u kojoj svaki od A, B, D i E predstavlja ostatak α-amino kiseline. U jednoj izvedbi F je ostatak azacikloalkankarboksilne kiseline. U toj izvedbi G je jednovalentni radikal odabran iz skupine koju čine vodikov atom, alkilne skupine, alkoksialkilne skupine, karboksilne skupine, aminokarbonilalkilne skupine, arilalkilne skupine, alkoksikarbonilalkilne skupine, aminoalkilne skupine, ariloksikarbonilalkilne skupina, alkilsulfinilalkilne skupine, arilsulfinilalkilne skupine, alkilsulfonilalkilne skupine, arilsulfonilalkilne skupine, hidrokarbonilne skupine, ariloksikarbonilne skupine, alkil- ili aril-sulfinilne skupine i alkil- ili arilsulfonilne skupina. U drugoj izvedbi, F je azacikloalkilna skupina, a G je heteroarilna skupina povezana na F vezom ugljik-ugljik.
Peptidi formule I su općenito sastavljeni od L-amino kiselina, ali oni mogu sadržavati jednu ili više D-amino kiselina. Oni također mogu biti prisutni kao soli s fiziološki podnošljivim kiselinama, uključiv klorovodičnu kiselinu, limunsku kiselinu, vinsku kiselinu, mliječnu kiselinu, fosfornu kiselinu, metansulfonsku kiselinu, octenu kiselinu, mravlju kiselinu, maleinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, jabučnu kiselinu, sukcinsku kiselinu, malonsku kiselinu, sumpornu kiselinu, L-glutaminsku kiselinu, L-aspartinsku kiselinu, piruvinsku kiselinu, mucinsku kiselinu, benzojevu kiselinu, glukuronsku kiselinu, oksalnu kiselinu, askorbinsku kiselinu i N-acetilglicin.
U nastavku opis predloženog izuma uključuje opis pojedinačnih komponenata u pojedinostima i metode upotrebe spojeva koji su predmet patentne zaštite.
Spojevi predloženog izuma
Identitet skupine A
U jednoj izvedbi A je derivat prolina formule IIa,
[image]
u kojoj na predstavlja cijeli broj, ponajprije 0, 1, 2 ili 3. Ra je jednovalentni radikal, kao vodikov atom ili C1-C3-alkilna skupina koja može biti normalna, razgranata ili ciklička i može biti supstituirana s jednim do tri fluorova atoma; prikladni primjeri uključuju metil, etil, izopropil, 2-fluoretil, 2,2,2-trifluoretil, 1-metil-2-fluoretil, 1-fluormetil- 2-fluoretil ili ciklopropil; prednosni su metil, etil ili izopropil.
U toj izvedbi, R1a je jednovalentni radikal, kao vodikov atom ili metilna, etilna, propilna ili fenilna skupina. Fenilna skupina može biti supstituirana; prikladni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, pri čemu se prednost daje fluoru, kloru i bromu, C1-C4-alkilne skupine, metoksi, etoksi, trifluormetilnu ili nitro skupine.
Svaki od R2a, R3a, R4a i R5a neovisno predstavlja jednovalentni radikal kao što je vodikov atom ili metilna skupina. Ra i R1a također mogu zajedno tvoriti propilenski most.
U drugoj izvedbi, A je supstituirani derivat glicina formule IIIa,
[image]
u kojoj Ra ima značenje utvrđeno u formuli IIa, R1a je jednovalentni radikal, na primjer, vodikov atom ili niža alkilna skupina, ponajprije metilna, etilna ili propilna skupina.
U toj izvedbi, R6a je jednovalentni radikal, kao vodikov atom, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, koja može biti supstituirana sa do šest halogenih atoma, ponajprije s fluorom, ili C3-C8-cikloalkilna ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina, C1-C4-oksoalkilna skupina, kao metoksimetilna, 1-metoksietilna ili 1,1-dimetilhidroksimetilna, C2-C5-alkenilna skupina, kao vinil ili 1-metilvinil, ili supstituirana ili nesupstituirana fenilna skupina. Prikladni supstituenti za fenilnu skupinu uključuju jedan ili više halogenih atoma, ponajprije fluor, klor ili brom, i alkil, metoksi, etoksi trifluormetil, ili nitro skupine. R7a je jednovalentni radikal, ponajprije metilna skupina ili etilna skupina.
U drugoj izvedbi A je ostatak α-amino kiseline formule IVa,
[image]
u kojoj ma predstavlja cijeli broj, ponajprije 1 ili 2. Ra i R7a imaju značenja navedena za formulu IIIa.
U drugoj izvedbi A je ostatak α-amino kiseline formule Va,
[image]
u kojoj Ra i R7a imaj u značenja navedena za formulu I I Ia.
U daljnjoj izvedbi A je derivat supstituiranog prolina formule VIa,
[image]
u kojoj Ra i R1a imaju značenja navedena za formulu IIa, a Xa je jednovalentan radikal, ponajprije hidroksil, metoksi ili etoksi skupina ili fluorov atom.
U drugoj izvedbi A je derivat tiaprolila formule VIIa,
[image]
u kojoj Ra, R1a, R2a, R3a, R4a i R5a imaju značenja navedena za formulu IIa.
U drugoj izvedbi A je derivat 1,3-dihidroizoindola formule VIIIa,
[image]
u kojoj Ra ima značenje navedeno za formulu IIa.
U drugoj izvedbi A je derivat 2-azabiciklo[2.2.1]-heptan-3-karboksilne kiseline formule IXa,
[image]
u kojoj Za predstavlja jednostruku ili dvostruku vezu, a Ra ima značenje navedeno za formulu IIa. 3-karbonilni supstituent može imati ekso ili endo orijentaciju.
Identitet skupine B
B je valilni, izoleucilni, alo-izoleucilni, norvalilni, 2-terc.butilglicilni ili 2-etilglicilni ostatak. B također može biti ostatak formule IIb,
[image]
u kojoj svaki od R1b i R2b predstavlja jednovalentan, radikal. R1b je ponajprije vodik, a R1b je, na primjer ciklopropilna skupina, normalna ili razgranata butilna, ponajprije tercijarna butilna skupina, metoksimetilna skupina, 1-metoksietilna skupina ili 1-metilvinilna skupina. K tome, R1b i R2b mogu zajedno tvoriti izopropilidensku skupinu.
Identitet skupine D
D je N-alkilvalilni, N-alkil-2-etilglicilni, N-alkil-2-terc.butilglicilni, N-alkil-norleucilni, N-alkil-izo-leucilni, N-alkil-alo-izoleucilni ili N-alkil-norvalilni ostatak, gdje je alkilna skupina ponajprije metilna ili etilna skupina.
U drugoj izvedbi D je ostatak α-amino karboksilne kiseline formule IId,
[image]
u kojoj Rd ima značenje navedeno za Ra u formuli IIIa, R1d je jednovalentan radikal, ponajprije vodikov atom, a R2d je jednovalentan radikal, kao ciklopropilna skupina, metoksimetilna skupina, 1-metoksietilna skupina ili 1-metilvinilna skupina. K tome, R1d i R2d mogu zajedno tvoriti izopropilidensku skupinu.
Alternativno, D može biti derivat prolina formule IIId,
[image]
u kojoj nd predstavlja cijeli broj, na primjer 1 ili 2, R3d ima značenje utvrđeno za R1a u formuli IIIa. Xd je jednovalentan radikal, ponajprije vodikov atom, a u slučaju da nd predstavlja broj 1, on također može biti hidroksilna, metoksi ili etoksi skupina ili flurov atom.
Identitet skupine E
E je prolil, tiazolidinil-4-karbonil, homoprolil ili hidroksiprolilni ostatak ili ostatak cikličke α-amino karboksilne kiseline formule IIe,
[image]
u kojoj ne predstavlja cijeli broj, ponajprije 0, 1 ili 2. R1e ima značenje utvrđeno za R1a u formuli IIIa. Svaki od R2e i R3e predstavlja jednovalentan radikal i neovisno može biti vodikov atom ili metilna skupina. R4e je jednovalentan radikal, ponajprije vodikov atom, hidroksilna, metoksi ili etoksi skupina ili fluorov atom. R5e je jednovalentan radikal, ponajprije vodikov atom. U slučaju da ne ima vrijednost 1, R3e i R4e zajedno mogu tvoriti dvostruku vezu ili R4e i R5e mogu zajedno biti dvostruko vezani kisikov radikal. U slučaju da ne ima vrijednost 1 ili 2, R1e i R2e zajedno mogu tvoriti dvostruku vezu.
U drugoj izvedbi E je ostatak 2- ili 3-amino-ciklopentankarboksilne kiseline formule IIIe,
[image]
u kojoj Re predstavlja jednovalentan radikal, kao što je metilna ili etilna skupina, a R1e ima značenje navedeno za R1e u formuli IIIa.
Identitet skupine F
U jednoj izvedbi izuma F je ostatak azacikloalkankarboksilne kiseline formule IIf,
[image]
u kojoj af predstavlja cijeli broj, ponajprije 0, 1 ili 2. Karbonilna skupina se nalazi na položaju 1 ili položaju 2 u odnosu prema dušikovom atomu, pri čemu se daje prednost položaju 1.
U toj izvedbi G može biti vodikov atom, ravna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, koja može biti supstituirana sa do šest halogenih, ponajprije fluorovih atoma, ili C3-C8-cikloalkilna ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina.
G također može biti arilalkilna, heteroarilalkilna, arilna ili heteroarilna skupina formule IIg,
-(CH2)ag-R11 (IIg)
u kojoj ag predstavlja cijeli broj, ponajprije 0, 1 ili 2, R11 je jednovalentan radikal, kao što je supstituirana ili nesupstituirana arilna, ponajprije fenilna ili naftilna skupina. Prikladni supstituenti arilne skupine uključuju jedan li više halogenih, ponajprije atoma fluora, broma ili klora, C1-C4-alkilne skupine, metoksi, etoksi ili trifluormetilne skupine, dioksimetilenske, nitro ili cijano skupine, C1-C7-alkoksikarbonilne, C1-C7-alkil-sulfonilne ili amino skupine, ili C1-C6-dialkilamino skupine, gdje alkilne skupine mogu također zajedno tvoriti petero- do šesteročlani heterocikl. R11 također može biti nesupstituirana ili supstituirana heteroarilna skupina, koja može biti petero- ili šesteročlana, ponajprije sistem prstena koji sadrži dušik, kisik ili sumpor, koji može biti fuzioniran na benzenski prsten. Primjeri uključuju heteroarilne skupine derivirane odstranjivanjem vodikovog atoma s imidazolnog, pirolnog, tiofenskog, furanskog, tiazolnog, oksazolnog, pirazolnog, 1,2,4- ili 1,2,3-triazolnog, oksadiazolnog, tiadiazolnog, izoksazolnog, izotiadiazolnog, pirazinskog, piridazinskog, pirimidinskog, piridinskog, benzofuranskog, benzotiofenskog, benzimidazolnog, benzotiazolnog, benzopiranskog, indolnog, izoindolnog, indazolnog ili kinolinskog ostatka. Prednosni supstituenti heteroarilne skupine jesu jedan ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
Drugi podrazred spojeva ovog izuma uključuje spojeve formule I u kojoj G predstavlja alkoksikarbonilalkilnu, ariloksikarbonilalkilnu, alkoksikarbonilnu ili ariloksikarbonilnu skupinu formule IIIg,
-(CH2)bg-(C=O)cg-R21 (IIIg)
u kojoj bg predstavlja cijeli broj, ponajprije 1, 2 ili 3, a cg je cijeli broj, ponajprije 0 ili 1. bg i cg ne mogu obadva istovremeno biti 0. R21 je jednovalentan radikal, kao što je vodikov atom, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, koja može biti supstituirana sa do 6 halogenih, ponajprije fluorovih atoma, naročito CF2-jedinica, C3-C8-cikloalkilna skupina, C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina, ili supstituirana ili nesupstituirana arilna, ponajprije fenilna ili naftilna skupina. Prikladni supstituenti arilne skupine uključuju jedan ili više halogenih, ponajprije atoma fluora, broma ili klora, C1-C4-alkoksi skupine, metoksi, etoksi ili trifluormetilne skupine, dioksimetilenske, nitro ili cijano skupine, C1-C7-alkoksikarbonilne skupine, C1-C7-alkilsulfonilne skupine, amino skupine ili C1-C6-dialkilamino skupine, gdje alkilne skupine mogu zajedno s dušikovim atomom tvoriti također i petero- ili šesteročlani heterocikl.
G također može biti aminokarbonilalkilna ili aminokarbonilna skupina formule IVg,
[image]
u kojoj dg predstavlja cijeli broj, ponajprije 1, 2 ili 3, a eg je cijeli broj, ponajprije 0 ili 1. dg i eg ne mogu obadva istovremeno biti 0.
Svaki od R31 i R41 predstavlja jednovalentan radikal koji mogu biti međusobno neovisno odabrani između vodikovog atoma, normalne ili razgranate C1-C8-alkilne skupine, koja može biti supstituirana sa do 6 halogenih, ponajprije fluorovih atoma, naročito CF2-jedinica, C3-C8-cikloalkilne skupine, C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilne skupine, ili supstituirane ili nesupstituirane arilne, ponajprije fenilne ili naftilne skupine. Prikladni supstituenti arilne skupine uključuju jedan ili više halogenih, ponajprije atoma fluora, broma ili klora, C1-C4-alkoksi, trifluormetilne, dioksimetilenske, nitro ili cijano, C1-C7-alkoksikarbonilne, C1-C7-alkilsulfonilne, amino ili C1-C6-dialkilamino skupine, gdje u potonjim, alkilne skupine mogu zajedno s dušikovim atomom tvoriti također i petero- ili šesteročlani heterocikl. N(R31)R41 može dodatno tvoriti sistem prstena formule N(CH2)fg gdje fg predstavlja cijeli broj odabran izmedu 4, 5 ili 6.
Drugi podrazred spojeva ovog izuma uključuje spojeve formule I u kojoj G predstavlja alkil- ili arilsufinilalkilnu, alkil- ili arilsulfonilalkilnu, alkil- ili arilsulfonilnu ili alkil- ili arilsulfinilnu skupinu formule Vg,
-(CH2)gg-S(O)hg-R51 (Vg),
u kojoj gg predstavlja cijeli broj, ponajprije 1 ili 2. hg je 1 ili 2, dok R51 predstavlja jednovalentan radikal, ponajprije metilnu, trifluormetilnu, etilnu ili fenilnu skupinu.
G također može biti alkil- ili arilkarbonilna skupina ili hidroksikarbonilalkilna skupina formule VIg,
-(CH2)ig-(C=O)-R61 (VIg)
u kojoj ig predstavlja cijeli broj, na primjer 1 ili 2; R61 predstavlja jednovalentan radikal, kao što je vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, koja može biti nesupstituirana ili supstituirana sa do šest halogenih, ponajprije fluorovih atoma, C3-C8-cikloalkilna skupina; C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili supstituiranu ili nesupstituiranu arilnu ili heteroarilnu skupinu, ponajprije fenilnu skupinu ili naftilnu skupinu. Prikladni supstituenti za arilnu i heteroarilnu skupinu uključuju jedan ili više halogenih, ponajprije flurovih, klorovih ili bromovih atoma, jednu ili više C1-C4-alkoksi skupina, trifluormetil, dioksimetilen, nitro ili cijano skupinu, C1-C7-alkoksikarbonilne skupine, C1-C7-alkilsulfonilne skupine, amino skupine ili C1-C6-dialkilamino skupine, pri čemu alkilne skupine mogu po potrebi s dušikovim atomom oblikovati petero- ili šesteročlani heterocikl.
U drugoj izvedbi predloženog izuma F je ostatak derivata azacikloalkana formule IIIf,
[image]
u kojoj bf predstavlja cijeli broj kao 0, 1 ili 2. U toj izvedbi G je heteroarilna skupina povezana na F vezom ugljik-ugljik na položaju 1 ili 2, ponajprije položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu. Na primjer, G može biti heteroarilna skupina formule VIIg,
[image]
u kojoj X predstavlja skupinu NH, kisikov atom ili atom sumpora. Svaki od R71 i R81 predstavlja jednovalentan radikal, i koji međusobno neovisno može biti vodikov atom, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, koja može biti supstituirana s halogenim, ponajprije atomima fluora, C3-C8-cikloalkilna skupina ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina.
Svaki od R71 i R81 također može predstavljati, neovisno, jednovalentan radikal formule II1,
-(CH2)al-R91 (II1)
u kojoj al predstavlja cijeli broj, ponajprije 0, 1 ili 2, R91 je jednovalentan radikal kao što je supstituirana ili nesupstituirana arilna skupina, gdje je aril ponajprije fenil ili naftil. Prikladni arilni supstituenti jesu jedan ili više halogenih, ponajprije atoma fluora, brom ili klora, C1-C4-alkilne skupine, metoksi, etoksi ili trifluormetilne skupine, dioksimetilenske, nitro ili cijano skupine, C1-C7-alkoksikarbonil, C1-C7-alkilsulfonil, amino ili C1-C6-dialkilamino skupine, gdje u potonjim alkilne skupine zajedno s dušikovim atomom mogu tvoriti petero- ili šesteročlani heterocikl. R91 također može biti nesupstituirana ili supstituirana heteroarilna skupina, na primjer, petero- ili šesteročlani sistem prstena koji ponajprije sadrži dušik, kisik ili sumpor, koji može biti fuzioniran na benzenov prsten, kao na primjer skupine koje su derivirane odstranjivanjem vodikovog atoma s imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina. Prednosni supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
G također može biti heteroarilna skupina formule VIIIg,
[image]
u kojoj X predstavlja skupinu NR121, gdje R121 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, koja može biti supstituirana sa do šest halogenih, ponajprije fluorovIh atoma, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili X predstavlja kisikov atom. Svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja jednovalentan radikal formule II1, kako je gore opisan.
G također može biti aromatska diazo skupina formule IXg,
[image]
u kojoj X predstavlja skupinu NH, kisikov ili sumporni atom, a R131 predstavlja jednovalentni radikal, kao što je, na primjer, vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, koja može biti supstituirana sa do šest halogenih, ponajprije fluorovih atoma, C3-C8-cikloalkilnu skupinu, ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu. R131 također može biti jednovalentni radikal formule II1, kako je gore opisan.
Sinteza spojeva
Spojevi predloženog izuma mogu se proizvesti metodama poznatim u sintezi peptida. Tako se peptidi mogu sastaviti sekvencno iz pojedinačnih amino kiselina ili povezivanjem prikladnih malih peptidnih fragmenata. Kod sekvencnog sastavljanja peptidni lanac se postupno produljuje počevši na C-kraju s jednom amino kiselinom po stupnju. Kod fragmentog povezivanja fragmenti različitih duljina mogu se povezati zajedno, a fragmenti se mogu dobiti po redu sekvencnim povezivanjem od amino kiselina ili fragmentnim povezivanjem još uvijek kraćih peptida. U obadva slučaja, kod sekvencnog povezivanja i kod fragmentnog povezivanja, treba povezati jedinice tvorbom amidne veze, koja se može ostvariti pomoću mnogih enzimskih i kemijskih metoda. Kemijske metode za tvorbu amidne veze opisane su u pojedinostima u standardnoj literaturi peptidne kemije, uključiv Muller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/2, 1-364, Thieme Verlag, Stuttgart, (1974); Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 31-34 i 71-82, Pierce Chemical Company, Rockford, IL (1984); Bodanszky, et al., Peptide Synthesis, 85-128, John Wiley & Sons, New York, (1976). Prednosne metode uključuju azidne metode, simetrične metode i metode miješanih anhidrida, upotrebu in situ stvorenih ili prednosnih aktivnih estera, upotrebu uretanski zaštićenih N-karboksi anhidrida amino kiselina i tvorbu amidne veze upotrebom reagenata za povezivanje, kao što su aktivatori karboksilnih kiselina, posebno dicikloheksilkarbodiimid (DCC), diizopropilkarbodiimid (DIC), 1-etoksikarbonil-2-etoksi-1,2-dihidrokinolin (EEDQ), 1-etil-3-(3-dimetil-aminopropil)karbodiimid hidroklorid (EDC), anhidrid n-propan-fosfonske kiseline (PPA), N,N-bis(2-okso-3-oksazolidinil)imido-fosforil klorid (BOP-Cl), brom-tris-pirolidin-fosfonijev heksafluorfosfat (PyBrop), difenil-fosforil azid (DPPA), Castrov reagent (BOP, ByBop), O-benzotriazolil-N,N,N’, N’-tetrametiluronijeve soli (HBTU), dietilfosforil cijanid (DEPCN), 2,5-difenil-2,3-dihidro-3-okso-4-hidroksi-tiofen dioksid (Steglichov reagent; HOTDO), i 1,1’-karbonil-diimidazol (CDI). Reagenti za povezivanje mogu se upotrijebiti sami ili u kombinaciji s dodacima kao što su N,N-dimetil-4-aminopiridin (DMAP), N-hidroksi-benzotriazol (HOBt), N-hidroksibenzotriazin (HOOBt), N-hidroksisukcinimid (HOSu) N-hidroksiazabenzo-triazol (HOAt), azabenzotriazolil-tetrametiluronijeve soli (HATU, HAPyU) ili 2-hidroksipiridin.
Iako u enzimskoj sinezi peptida upotreba zaštitnih skupina općenito nije potrebna, reverzibilna zaštita reaktivnih skupina koje nisu uključene u tvorbu amidnih veza je nužna za obadva reaktanta u kemijskoj sintezi. Tri uobičajena postupka sa zaštitnim skupinama preporučaju se za kemijsku sintezu peptida: postupak s benziloksikarbonilom (Z), s t-butoksikarbonilom (Boc) i 9-fluorenil-metoksikarbonilom (Fmoc). U svakom slučaju zaštitna skupina identificirana je na α-amino skupini jedinice koja produljuje lanac. Pregled zaštitnih skupina amino kiselina u pojedinostima dat je u Muller, Methoden der organischen Chemie Vol. XV/1, str. 20-906, Thieme Verlag, Stutgart (1974). Upotrijebljene jedinice za povezivanje peptidnog lanca mogu reagirati u otopini, u suspenziji ili metodama sličnim onima koje je opisao Merrifield u J. Am. Chem. Soc., 85: 2149 (1963). Posebnu prednost daje se onim metodama po kojima se peptidi povezuju sekvencno ili po kojima se pri povezivanju fragmenata primjenjuje postupak sa zaštitnom skupinom Z, Boc ili Fmoc, pri čemu se jedan od reaktanata po spomenutom Merrifieldovom postupku povezuje na netopivu polimernu podlogu (koju se u nastavku također naziva smola). On tipično uključuje povezivanje peptida sekvencno na polimernu podlogu primjenom postupka sa Fmoc zaštitnom skupinom, s rastućim peptidnim lancem kovalentno vezanim C-krajem na netopive čestice smole. Taj postupak omogućuje odstranjivanje reagenata i sporednih proizvoda filtracijom, pri čemu nije potrebna prekristalizacija intermedijata.
Zaštićene amino kiseline mogu se povezati na bilo koji prikladan polimer, koji mora biti netopiv u upotrijebljenim otapalima i mora imati postojan fizički oblik koji omogućuje filtraciju. Polimer mora sadržavati funkcionalnu skupinu na koju se najprije može kovalentno vezati zaštićena amino kiselina. U tu svrhu prikadan je velik broj različitih polimera, uključiv celulozu, polivinil alkohol, polimetakrilat, sulfonirani polistiren, klormetilirani kopolimer stirena i divinilbenezena (Merrifieldova smola), 4-metilbenzhidrilaminska smola (MBHA-smola), fenilacetamidometilna smola (Pam-smola), p-benziloksibenzil-alkoholna smola, benzhidril-aminska smola (BHA-smola), 4-(hidroksimetil)-benzoil-oksimetilna smola, smola prema Breipohl-u et al., (Tetrahedron Letters, 28: 565 (1987); koju isporučuje BACHEM), 4-(2,4-dimetoksifenilaminometil)fenoksi smola (koju isporučuje Novabiochem) ili o-klortritilna smola (koju isporučuje Biohellas).
Otapala prikladna za sintezu peptida uključuju svako otapalo koje je inertno pod reakcijskim uvjetima, posebno vodu, N,N-dimetilformamid (DMF), dimetil sulfoksid (DMSO), acetonitril, diklormetan (DCM), 1,4-dioksan, tetrahidrofuran (THF), N-metil-2-pirolidon (NMP) i mješavine tih otapala.
Sinteza peptida na polimernoj podlozi može se provesti u prikladnom inertnom organskom otapalu u kojem su topivi derivati polaznih amino kiselina. Međutim, prednosna otapala uz to moraju imati svojstvo da u njima smola bubri, kao što j e DMF, DCM, NMP, acetonitril i DMSO i mješavina ovih otapala. Nakon sinteze, peptid se skida s polimerne podloge. Uvjeti pod kojima se vrši odcjepljivanje za različite tipove smola opisani su u literaturi. Reakcije odcjepljivanja, koje se najčešće primjenjuju, katalizirane su s kiselinom ili s paladijem, a provode se, na primjer, u tekućem bezvodnom fluorovodiku, bezvodnoj trifluormetansulfonskoj kiselini, razrjeđenoj ili koncentriranoj trifluoroctenoj kiselini i mješavini octena kiselina/diklormetan/trifluoretanola. Posljednje se može provesti i u THF-u ili u mješavinama THF-DCM u prisutnosti slabe baze, kao što je morfolin. Određene zaštitne skupine se također odcjepljuju pod tim uvjetima.
Djelomična zaštita peptida također može biti potrebna prije određenih reakcija derivatizacije. Na primjer, peptidi dialkilirani na N-kraju, mogu se proizvesti povezivanjem odgovarajuće N,N-dialkilamino kiseline na peptid u otopini redukcijskim alkiliranjem peptida vezanog na smolu u DMF/1%-tnoj octenoj kiselini s NaCNBH3 i odgovarajućim aldehidom ili hidrogeniranjem s Pd/C u prisutnosti aldehida ili ketona.
Tri slijedeće sheme prikazuju sintezu spojeva predloženog izuma s više pojedinosti.
Shema I
[image]
Ovdje se tetrapeptid A-B-D-E-OH povezuje s derivatom azacikloalkila, F-G, primjenom metode za gore spomenuto peptidno povezivanje.
Shema II
[image]
Ovdje se N-terminalno zaštićen tetrapeptid A’-B-D-E-OH povezuje na derivat azacikloalkila F-G, čime se dobije intermedijarni spoj A’-B-D-E-F-G primjenom metode gore opisanog peptidnog povezivanja. Zatim se N-zaštitna skupina odstranjuje uobičajenim metodama kako je gore opisano. Skupine Ra i R7a mogu se zatim povezati na amino kraj redukcijskim alkiliranjem kako je gore opisano.
Shema III
[image]
U shemi 3 tetrapeptid se povezuje s F’, zaštićenim oblikom dogradnog bloka F. F se također može povezati na prekurzor skupine G. Intermedijat A-B-D-E-F’ se zatim pretvara u krajnji proizvod reakcijom oksidacije ili reakcijom redukcije. U jednoj izvedbi, F’ je pirolidinilni alkohol, a intermedijat A-B-D-E-F’ se oksidira u krajnji proizvod blagom oksidacijom, kao što je Swernova oksidacija, ili oksidacijom s Dess-Martinovim reagentom.
Dogradni blokovi koji se upotrebljavaju u sintezi spojeva patentne zaštite mogu se proizvesti po slijedećim općim metodama:
(a) Pirolidinil-ketoni i piperidinil-ketoni
Nekoliko puteva do pirolidinil-ketona opisano je u literauri. Racemični pirolidinil-ketoni mogu se dobiti hidrogeniranjem odgovarajućih pirolil ketona s oksidom platine kao katalizatorom (Kaiser et al., J. Org. Chem., 49; 4203 (1984)). Za kiralne pirolidinil-ketone kao polazni materijal se mora upotrijebiti L- ili D-prolin. Kao zaštitna skupina za prsten s dušikom može se upotrijebiti terc.butilkarbonilnu skupinu (Boc skupinu), benziloksi karbonilnu (Z skupinu) ili floreniloksikarbonilnu skupinu (Fmoc skupinu).
N-Boc-zaštićeni pirolidinil-ketoni mogu se dobiti obradom derivata prolina, posebno N-Boc-prolin-2-tiopiridil estera ili N-Boc-prolin N-metoksi-N-metilamida, s organometalnim reagentima, kao što su Grignargovi reagenti ili litijevi reagenti. Nekoliko primjera navedeno je u literaturi, uključiv -N-Boc-pirolidinil metil keton iz N-Boc-prolin N-metoksi-N-metilamida (Trost, J. Am. Chem. Soc., 111; 4988 (1989)); N-Boc-pirolidinil-pentafluoretil-keton iz N-Boc-prolin N-metoksi-N-metilamida (Angelastro, M.R., et al., Tetrahedron Letters, 33: 3265 (1992)); i -N-Boc-pirolidinil metil keton iz N-Boc-prolin 2-tiopiridil estera (Conrow, R., et al., J. Org. Chem., 51: 938 (1986)).
Odstranjivanje Boc-zaštitne skupine može se postići obradom s jakim kiselinama kao što je HCl (vidi, na primjer, Angelastro, M.R., et al., Tetrahedron Letters, 33: 3265 (1992)), ili s trifluoroctenom kiselinom (vidi, na primjer, Goldstein, S. W., et al., J. Org. Chem., 57: 1179 (1992)). Alkil i aril-pirolidinil-ketoni proizvedeni su tom metodom.
Drugi pristup za tu gradnju blokova uključuje obradu Boc-zaštićenog prolin aldehida s nukleofilnim reagentom da se dobije odgovarajući alkohol. Taj alkohol se može deprotektirati i povezati na peptid na uobičajeni način. Oksidacija alkohola može se postići postupkom blage oksidacije, kao što je Swernova oksidacija ili oksidacija s Dess-Martinovim reagentom. Primjer sinteze peptida koji sadrži pirolidino-tiazolil keton obznanili su Tsutsumi, S., et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 4: 831 (1994). Alternativno, alkohol se može oksidirati najprije u keton, nakon čega se odstrani N-zaštitnu skupinu. Trifluometiliranje aldehida s komercijalno dostupnim trifluor-metil-trimetilsilanom katalizira se s tetrabutilamonijevim fluoridom (Olah, G., J. Am. Chem. Soc., 111: 393 (1989)). Nakon deprotekcije i povezivanja na tetrapeptid alkohol se može oksidirati u keton postupkom blage oksidacije kao što je Swernova oksidacija ili oksidacija s Dess-Martinovim reagentom.
Bili su opisani različiti α-, β- i γ-dikarbonilni derivati prolina. Tako je (S)-1-pirolidinil)-1,2-propandion dihidroklorid dobiven iz Boc-zaštićenog derivata obradom s HCl (Conrow, R., at al., J. Org. Chem., 51: 938 (1986)). Etil N-Boc-pirolidinil-β-ketoacetat dobiven je dodatkom litijevog etilacetata k N-Boc zaštićenom prolinalu i zatim oksidacijom, na primjer s kromovim trioksidom. (Hansen, G.J., et al., Tetrahedron Letters, 27: 3577 (1986)). Također je opisano pripravljanje β-keto-difluorestera iz derivata amino kiseline (J. med. Chem., 35: 4795 (1992)), a slično je gore opisanom postupku za ketoester, upotrebom Reformatsky-jevog reagenta brom-difluoracetata u prvom stupnju, a Dess-Martinovog reagenta za stupanj oksidacije.
Metode slične ovima gore opisanim za pirolidinil-ketone mogu se primijeniti za sintezu piperidinil-ketona i ketona sa sedmeročlanim azaheterociklom. Polazni materijali za te sinteze uključuju pipekolinsku kiselinu, čija su sva tri izomera komercijalno dostupna, kao i enantiomeri 2-pipekolinske kiseline. Na primjer, metil keton je proizveden obradom N-Boc-((2-piridiltio)karbonil)-piperidina s metil Grignardovim reagentom (J. Am. Chem. Soc., 115: 11393 (1993)).
(b) Pirolidinil-oksazoli i piperidinil-oksazoli
Nekoliko pristupa sintezi oksazola deriviranih od amino kiselina opisano je u literaturi. Općenito, N-zaštićene amino kiseline se povezuju s amoniketonima ili s drugim 2-amino-karbonilnim derivatima primjenom uobičajenih metoda za gore opisanu sintezu peptida. Na primjer, Z- ili Boc-zaštitna skupina može se upotrijebiti za zaštitu amino dušika. Zatim, iz β-ketoamida amino kiseline odstranjuje se vodu, čime se dobije odgovarajući oksazol. Za dehidrataciju tih spojeva upotrijebljeno je nekoliko reagenata, uključiv fosforni pentoksid, fosforni triklorid, fosforni pentaklorid i tioni klorid. Po drugoj prednosnoj metodi upotrebljava se fosfin kao što je trialkil- ili triarilfosfin, ponajprije trifenilfosfin, u kombinaciji s halogeniranim ugljikovodikom, ponajprije kloro- ili bromougljukovodikom, kao što su tetraklormetan, tetrabrommetan, kloroform i pentakloretan u prisutnosti baze kao što je trietilamin, diazabicikloundekan, metil-morfolin ili piridin u polarnim otapalima kao što je acetonitril. Na primjer, triptofan-deriviran oksazol proizveden je po ovoj metodi (Gordon, T.D., et al., Tetrahedron Letters, 34: 1901 (1993)). Za dobivanje oksazola iz literature je također poznata i kombinacija trifenilfosfina, joda i trietilamina (Wipf, P., et al., J. Org. Chem., 58: 3604 (1993)).
Druga metoda za tvorbu oksazola uključuje povezivanje amino kiseline s 2-amino alkoholom primjenom uobičajenih metoda tvorbe amidne veze u sintezi peptida. Ciklizacija u oksazoline može se postići upotrebom Burgessovog reagenta, (metil N-(trietilamonij-sulfonil)karbamata) (Wipf, P., et al., Tetrahedron Letters, 33: 907 (1992); Wipf, P., et al., J. Am. Chem. Soc., 114: 01975 (1992); Wipf, P., et al., J. Org. Chem., 58: 1575 (1993)) ili Mitsunobu reakcijom (trifenilfosfin/diizopropil azodikarboksilat) (Wipf, P., et al., Tetrahedron Letters, 33: 6267 (1992). Oksidacija u oksazol može se provesti upotrebom niklovog peroksida (Evans, D.L., et al., J. Am. Chem., 44: 497 (1979) .
Te metode se također mogu primijeniti za sintezu odgovarajućeg pirolidinil-oksazola počevši s N-zaštićenim D- ili L-prolinom, i odgovarajućeg piperidinil-oksazola, počevši od N-zaštićene D- ili L-pipekolinske kiseline.
Nakon tvorbe oksazola N-zaštitna skupina se može odstraniti, na primjer obradom Boc-zaštićenog spoja s kiselinom kao što je klorovodična kiselina ili trifluoroctena kiselina. Dobivenu sol ili slobodnu bazu može se zatim upotrijebiti za povezivanje u slijedećem stupnju.
(c) Pirolidinil-tiazoli i piperidinil-tiazoli
Opća metoda za sintezu tiazola je Hantzschova sinteza, koja uključuje kondenzaciju N-zaštićenog tioamida amino kiseline sa supstituiranim halo-piruvatima. Ta je reakcija, međutim, obično popraćena racemizacijom na jedinici amino kiseline. Da se izbjegne racemizaciju razvijene su blaže metode. Prvo, N-zaštićene amino kiseline povezuju se s aminoketonima ili s drugim 2-aminokarbonilnim derivatima primjenom uobičajenih metoda za sintezu peptida, kako je gore opisano. Tionacija, ciklizacija i dehidratacija mogu se postići reakcijom u jednoj posudi upotrebom Lawessonovog reagenta (Gordon, T.D., et al., Tetrahedron Letters, 34: 1901 (1993)) pri visokim temperaturama, na primjer pri temperaturi refluksa tetrahidrofurana.
Tiazolini se mogu sintetizirati kako slijedi: prvo, odgovarajuća N-zaštićena amino kiselina povezuje se s 2-siloksietilaminom primjenom uobičajenih metoda za tvorbu amidne veze u sintezi peptida. Nakon tionacije amida s Lawessonovim reagentom, sililnu skupinu se odstranjuje i vrši se ciklizaciju upotrebom Burgessovog reagenta (metil N-(trietilamino-sulfonil)karbamat) ili Mitsunobu reakcijom (trifenil-fosfin/diizopropil azodikarboksilat) (Wipf, P., et al., Tetrahedron Letters, 33: 6267 (1992)).
(d) Pirolidinil-imidazoli i piperidinil-imidazoli
Imidazoli se mogu proizvesti iz α-ketoamida odgovarajuće amino kiseline obradom s amonijevom soli ili s aminom i zatim dehidratacijom upotrebom sredstva za dehidrataciju ili azeotropnim odstranjivanjem vode (Gordon, T.D., et al., Tetrahedron Letters, 34: 1993)).
(e) Pirolidinil-izoksazoli i piperidinil-izoksazoli
Izoksazoli se mogu proizvesti reakcijom hidroksilamina s 1,3-diketonom, ciklizacijom 3-keto-oksima ili 1,2-dipolarnom cikloadicijom N-oksida na alkine. Opisana je sinteza 5-(N-metil-pirolidinil)-3-metil-izoksazola ciklizacijom 5-(N-metil-pirolidinil)-2-il)-4-okso-butil-2-oksima upotrebom metansulfonil-klorida i trietilamina kao baze (Elliott, R., et al., Synthesis, 7: 772 (1950)).
Metode za pripravljanje nitrilnih oksida i odgovarajućih izoksazola opisane su u K.B.G. Torssell, Nitrile Oxides, Nitrones and Nitronates u Oranic Synthesis, VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim.
(f) Pirolidinil-pirazoli i piperidinil-pirazoli
Pirazoli se mogu proizvesti reakcijom hidrazina ili monosupstituiranih hidrazina s odgovarajućim 1,3-diketonom ili 3-ketoacetonitrilom u polarnom otapalu kao što je alkohol ili N,N-dimetilformamid. Opisana je sinteza pirolidinil-ketona. Na primjer, 2-metil-5-(1-metil-pirolidin-2-il)-2H-pirazol-3-il-amin je proizveden iz odgovarajućeg nitrila i hidrazina (Adachi, et al., Chem. Pharm. Bu1l. , 35: 3235 (1987)).
(g) Pirolidinil-oksadiazoli i piperidinil-oksadiazoli
Pirolidinil-oksadiazoli i piperidinil-oksadiazoli se mogu proizvesti dehidratacijom odgovarajućih diacil-hidrazina s anhidridom fosforne kiseline i tragovima kiseline kao što je metansulfonska kiseline ili s heksametildisilanom i tetrabutilamonijevim fluoridom. (Rigo, et al., J. Heterocycl. Chem., 23: 253 (1986); Rigo, et al., Synth. Comm., 16: 1665 (1986)). Diacilhidrazini su proizvedeni povezivanjem odgovarajućih N-zaštićenih karboksilnih kiselina i hidrazida druge karboksilne kiseline. (Sheradsky, et al., Tet. Lett., 32: 133 (1991)). Druga blaga metoda je reakcija hidrazina s tionil kloridom i piridinom, čime se dobije intermedijat 1,2,3,4-oksatia-diazol-S-oksid. 1,3,4-oksadiazol se zatim dobije terminalnim odstranjivanjem sumpornog dioksida (Borg, et al., J. Org. Chem., 60: 3112 (1995)).
(h) Pirolidinil-tiodiazoli i piepridinil-tiodiazoli
Pirolidinil-1,3,4-tiadiazoli i piperidinil-1,3,4-tiadiazoli se mogu dobiti reakcijom odgovarajućeg hidrazona s Lewissonovim reagentom ili P4S10 (Sawtney, et al., J. Indian Chem. Soc. B., 30: 407 (1991); Lancelot, et al., J. Heterocycl. Chem., 17: 625 (1980)). Acilhidrazini su proizvedeni kako je gore opisano.
Metode upotrebe spojeva patentne zaštite
U drugoj izvedbi predloženi izum obuhvaća metodu za djelomičnu ili potpunu inhibiciju stvaranja, ili drugačijeg liječenja (npr. reverznom inhibicijom daljnjeg razvoja) tvrdih tumora (npr. tumora pluća, dojke, debelog crijeva, prostate, mjehura, rektuma ili endometrijalnih tumora) ili hematoloških malignacija (npr. leukemije, limfoma) u sisavaca, na primjer, čovjeka, davanjem sisavcu terapeuski učinkovite količine spoja ili kombinacije spojeva formule I. Sredstvo se može dati samo ili u farmaceutskom sastavu koji sadrži sredstvo i prihvatljiv nosač ili sredstvo za razrjeđenje. Davanje se može provesti na bilo koji način koji je uobičajen za farmaceutska, ponajprije onkološka sredstva, uključiv oralan i parenteralan način kao što je subkutano, intravenski, intramuskularno i intraperitonealno, nazalno ili rektalno.
Doziranje koje se daje sisavcu, kao čovjeku, sadrži terapeutski učinkovitu količinu ovdje opisanog spoja. Kako se ovdje rabi, “terapeutski učinkovita količina” je količine dovoljna za inhibiciju (djelomičnu ili potpunu) stvaranja tumora ili hematološke malignacije ili za reverzan razvoj tvrdog tumora ili drugih malignacija ili za sprečavanje ili smanjenje njegove buduće progresije. Za određeno stanje ili metodu liječenja, doziranje se određuje empirijski primjenom poznatih metoda i ovisi o faktorima kao što je biološko djelovanje dotičnog upotrijebljenog spoja, način davanja, starost i tjelesna težina pacijenta, priroda i raširenost simptoma, učestalost liječenja, davanje drugih terapija, te željeni učinak. Tipična dnevna doza kreće se od pribl. 1 do pribl. 50 miligrama po kilogramu tjelesne težine kod oralnog davanja i od pribl. 0,5 do pribl. 20 miligrama po kilogramu tjelesne težine kod parenteralnog davanja.
Spojevi predloženog izuma mogu se dati u uobičajenim krutim ili tekućim oblicima farmaceutskog davanja, npr. kao neprevučene ili tablete prevučene s filmom, kapsule, puderi, granule, čepići ili otopine. Oni se proizvode primjenom poznatih metoda. Aktivne tvari se u tu svrhu mogu preraditi s uobičajenim farmaceutskim pomoćnim sredstvima kao što su veziva za tablete, punila, konzervansi, sredstva za rastvaranje tableta, sredstva za regulaciju tecivosti, plastifikatori, sredstva za vlaženje, sredstva za dispergiranje, emulgatori, otapala, sastavi za trajno oslobađanje, antioksidanti i/ili potisni plinovi (vidi H. Sucker et al.: Pharmazeutische Technologie, Thieme-Verlag, Stuttgart, 1978). Oblici davanja dobiveni na ovaj način tipično sadrže od pribl. 1 do 99 mas. % aktivne tvari.
Svrha slijedećih primjera je ilustracija izuma i ne smije ih se smatrati ograničenjima izuma.
Primjeri
U primjerima se proteinogene amino kiseline navode pisane kraticama upotrebom poznatog troslovnog koda. Ostale upotrijebljene kratice jesu: TFA - trifluoroctena kiselina, Ac = octena kiselina, DCM = diklormetan, DMSO = dimetilsulfoksid, Bu = butil, Et = etil, Me = metil, Bzl = benzil. Ako nije navedeno drugačije u navedenim spojevima sve proteinogene amino kiseline su L-amino kiseline.
Opći materijali i metode
Tetrapeptidi formule A-B-D-E-OH ili A’-B-D-E-OH predloženog izuma, u kojima A’ predstavlja N-zaštićeni oblik skupine A, ili odgovarajućeg estera, sintetizirani su klasičnom sintezom iz otopine primjenom standardne gore spomenute Z- ili Boc-metodologije. Opći put do tih tetrapeptida je bio opisan u njemačkoj patentnoj prijavi br. DE 4415998, posebno tetrapeptidi Z-Val-MeVal-Pro-OMe; Me2Val-Val-MeVal-Pro-OMe x HCl; Z-Ile-Ile-MeVal-Pro-OMe i Me2Ile-Ile-MeVal-Pro-OMe.
Kiseline ovih tetrapeptida mogu se dobiti bazičnom hidrolizom estera s natrijevim ili litijevim hidroksidom kako je opisano u DE 4415998. Nadalje, tetrapeptidi predloženog izuma sintetizirani su standardnim metodama sinteze na krutoj fazi na potpuno automatskom modelu 431A sintetizera kojeg isporučuje APPLIED BIOSYSTEMS. Aparat koristi različite sintetičke cikluse za Boc i Fmoc zaštitne postupke, kako je dolje opisano.
Ciklus sinteze za postupak Boc zaštitne skupine
30% trifluoroctena kiselina u DCM-u, 1 x 3 min,
50% trifluoroctena kiselina u DCM-u, 1 x 1 min,
DCM, ispiranje, 5 x 1 min,
5% diizopropiletilamin u DCM-u, 1 x 1 min,
5% diizopropiletilamin u NMP-u, 1 x 1 min,
NPM, ispiranje, 5 x 1 min,
Dodatak prethodno aktivirane zaštićene amino kiseline (aktivacija s 1 ekvivalentom DCC-a i 1 ekvivalentom HOBt-a u NMP/DCM-u);
Peptidno povezivanje (prvi dio), 1 x 30 min,
Dodavanje DMSO k reakcijskoj smjesi toliko da ona sadrži 20 vol. % DMSO-a,
Peptidno povezivanje (drugi dio), 1 x 16 min,
Dodatak 3,8 ekvivalenata diizopropiletilamina k reakcijskoj smjesi,
Peptidno povezivanje (treći dio), 1 x 7 min,
DCM, ispiranje, 3 x 1 min,
Ako pretvorba nije potpuna povezivanje se ponavlja (ponovno od stupnja 5),
10% octeni anhidrid, 5% diizopropiletilamin u DCM-u, 1 x 2 min,
10% octeni anhidrid u DCM-u, 1 x 4 min,
DCM, ispiranje, 4 x 1 min,
Ponovno od stupnja 1.
Za povezivanje amino kiseline na N-metilamino kiselinu kao reagenti su upotrijebljeni BOP-Cl i PyBrop. Vrijeme reakcije je odgovarajuće dulje. Kod sinteze u otopini, za povezivanje ovog tipa najbolje je upotrijebiti Boc-zaštićenu amino kiselinu NCAs (n-tercbutiloksi-karbonil-amino kiselina-N-karboksi-anhidrid) ili Z-zaštićenu amino kiselinu NCAs (N-benziloksokarbonil-amino kiselina-N-karboksi-anhidrid).
Ciklus sinteze za postupak s Fmoc zaštitnom skupinom
DMF, ispiranje, 1 x 1 min,
20% piperidin u DMF-u, 1 x 4 min,
20% piperidin u DMF-u, 1 x 16 min,
DMF, ispiranje, 5 x 1 min,
Dodatak prethodno aktivirane zaštićene amino kiseline (aktivacija s 1 ekvivalentom TBTU i 1,5 ekvivalenta DIPEA u DMF);
peptidno povezivanje, 1 x 61 min,
DMF, ispiranje, 3 x 1 min,
Ako pretvorba nije potpuna, povezivanje se ponavlja (ponovno od stupnja 5),
10% octeni anhidrid u DMF-u, 1 x 8 min,
DMF, ispiranje, 3 x 1 min,
Ponovno od stupnja 2.
Za povezivanje amino kiseline na N-metilamino kiselinu kao reagenti su upotrijebljeni BOP-Cl i PyBrop. Vrijeme reakcije je odgovarajuće dulje.
Reduktino alkiliranje N-kraja
Peptidna smola, pripravljena kako je gore opisano, deprotektirana je na N-kraju i zatim reagira s trostrukim molnim suviškom aldehida ili ketona u DMF/1% octenoj kiselini s dodatkom 3 ekvivalenta NaCNBH3. Po završetku reakcije (negativan Kaiserov test), smola se ispere nekoliko puta s vodom, izopropanolom, DMF-om i s diklormetanom.
Obrada peptidnih smola
Peptidna smola, dobivena metodom Boc zaštitne skupine, osuši se pod smanjenim tlakom i prenese u reakcijsku posudu TEFLON HF aparata (isporučuje PENINSULA). Zatim se doda sredstvo za čišćenje, obično anisol (1 mg/1 smole), i dodatno, u slučaju peptida koji sadrže triptofan, doda se (0,5 ml/g smole), ponajprije etanditiolne, za odstranjivanje indolne formilne skupine. Zatim se kodenzira u fluorovodiku (10 ml/g smole) u kupelji tekućeg dušika. Smjesu se pusti zagrijati na 0°C i miješa se pri toj temperaturi 45 minuta. Zatim se pod smanjenim tlakom odstrani fluorovodik i ostatak se ispere s etil acetatom da se odstrani zaostalo sredstvo za čišćenje. Peptid se ekstrahira s 30%-tnom octenom kiselinom, profiltrira i filtrat se liofilizira.
Peptidna smola, dobivena metodom s Fmoc zaštitnom skupinom, osuši se pod smanjenim tlakom i zatim se podvrgne slijedećim postupcima cijepljenja ovisno o sastavu amino kiselina (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne 1985). Suspenzija peptidne smole u prikladnoj TFA smjesi miješa se utvrđeno vrijeme pri sobnoj temperaturi i zatim se smolu odfiltrira i ispere s THF-om i DCM-om. Filtrat i eluati se zgusnu i peptid se istaloži dodatkom dietil etera. Nakon hlađenja na ledenoj kupelji talog se odfiltrira, preuzme u 30%-tnu octenu kiselinu i liofilizira.
Ako se upotrebljava o-klor-tritilnu smolu (koju isporučuje Biohellas) suspenziju peptidne smole u mješavini octena kiselina/trifluoretanol/diklormetana (1:1:3) se miješa 1 sat pri sobnoj temperaturi. Suspenziju se zatim filtrira odsisavanjem i peptidnu smolu se temeljito ispere s otopinom za čišćenje. Sjedinjeni filtrati se zgusnu u vakuumu i obrade s vodom. Istaložena kruta tvar se odvoji filtracijom ili centrifugiranjem, ispere s dietil eterom i osuši pod smanjenim tlakom.
Čišćenje i karakterizacija peptida
Čišćenje se provodi gel kromatografijom (SEPHADEX G-10, G-15/10% HOAc, SEPHADEX LH20/MeOH) sa ili bez naknadne srednjetlačne kromatografije (stacionarna faza: HD-SIL C-18, 20-45 m, 100 Å; mobilna faza: gradijent s A - 0,1% TFA/MeOH, B = 0,1% TFA/H2O). Čistoća dobivenih proizvoda određena je analitičkom HPLC (štacionarna faza: 100 2,1 mm VYDAC C-18, 5 1, 300 Å; mobilna faza: CH3CN/H2O gradijent, puferirano s 0,1% TFA, 40%).
Polipeptidi su karakterizirani masenom sprektroskopijom bombardiranjem s brzim atomima.
Primjer 1
Sinteza pirolidinil ketona
(a) Sinteza N-metil-N-metoksi-(Boc-prolin)-amida
[image]
K otopini od 30 g Boc-prolina i 13,6 g N,O-dimetilhidroksilamin hidroklorida u 250 ml diklormetana doda se 26,73 g 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidroklorida, 18,83 g N-hidroksi-benzotriazola i 49,34 g N-metil-morfolina pri 0°C. Smjesu se miješa preko noći pri sobnoj temperaturi. Reakcijsku smjesu se ispere uzastopce sa zasićenim natrijevim bikarbonatom, s 5%-tnom vodenom otopinom limunske kiseline i s otopinom soli. Organsku fazu se osuši preko natrijevog sulfata. Nakon filtracije otapalo se odstrani u vakuumu, čime se dobije 22,9 g N-metil-N-metoksi-(Boc-prolin)-amida.
1H-NMR (CDCl3, 270 MHZ) d = 1,4, 1,45, (s, 9H); 1,8-2,3 (m, 4H) ; 3,2 (s, 3H) ; 3,3-3,6 (m, 2H); 3,7 (m, 3H); 3,8 (s, 3H); 4,6, 4,7 (d, 1H) ppm.
(b) Pripravljanje (S)-Boc-pirolidin-2-il-metilketona
[image]
K otopini od 2,0 g N-metil-N-metoksi-(Boc-prolin)amida u 70 ml tetrahidrofurana doda se 3 M metilmagenzijev klorid u tetrahidrofuranu u obrocima, kap po kap po 3 ml. Zatim se smjesu pusti zagrijati na sobnu temperaturu i miješa se preko noći. Otopinu se razrijedi s dietil eterom, ispere s otopinom soli i osuši preko natrijevog sulfata. Nakon filtracije otapalo se odstrani u vakuumu. Ostatak se očisti kromatografijom na silika gelu (heptan/etil acetat 2:1), čime se dobije 1,66 g (S)-Boc-pirolidin-2-il-metilketona.
1H-NMR (CDCl3, 270 MHZ) d = 1,4, 1,45, (s, 9H); 1,75-1,9 (m, 4H); 2,1, 2,15 (s, 3H); 3,4-3,6 (m, 2H); 4,2, 4,3 (d, 1H) ppm.
(c) Pripravljanje (S)-pirolidin-2-il-metilketon-trifluoracetatne soli
[image]
K otopini od 1,66 g (S)-Boc-pirolidin-2-il-metilketona u 25 ml diklormetana doda se obrok od 25 ml trifluoroctene kiseline. Dobivenu smjesu se miješa tri sata pri sobnoj temperaturi. Odstranjivanjem otapala dobije se 0,80 g sirove (S)-pirolidin-2-il-metilketon-trifluoroacetatne soli.
1H-NMR (DMSO, 270 MHZ) d = 1,75-2,0 (m, 4H); 2,2 (s, 3H); 3,1 (m, 2H); 4,5 (d, 1H); 8,7 (m, 1H); 10,4 (m, 1H) ppm.
Primjer 2
Pripravljanje pirolidinil heterocikla
(a) Sinteza N-(N’-Boc-pirolidinil)metilfenilketona
[image]
Boc-Pro-OH (6,2 g, 29 mmolova) i 2-amino-acetofenon HCl (5,0 g, 29 mmolova) otopi se u 290 ml suhog CH2Cl2 i dobivenu otopinu se ohladi na 0°C. Doda se HOBT · H2O (1,4 g, 9,6 mmolova) I EDC HCl, zatim NMM (3,8 ml, 35 mmolova). Reakcijsku smjesu se miješa preko noći pri sobnoj temperaturi, zatim se ispere sa zasićenim natrijevim bikarbonatom (3x), vodom (3x), 5%-tnom limunskom kiselinom i vodom. Nakon sušenja preko natrijevog sulfata otapalo se odstrani pod smanjenim tlakom, čime se dobije 9,5 g žutog ulja. Ulje se otopi u diizopropil eteru, čime se proizvod istaloži kao bijeli kristali, koji se osuše i izravno upotrebljavaju u slijedećem stupnju. Iskorištenje: 8,6 g (89%).
1H-NMR (DMSO-d6): 8,1-8,25 (m, 1H); 8,0 (d, 2H); 7,65 (t, 1H); 7,5 (t, 2H); 4,5-4,7 (m, 2H); 4,1-4,25 (m, 1H); 3,2-3,5 (m, 2H); 2,0-2,2 (m, 1H); 1,7-1,9 (m, 3H); 1,3 i 1,4 (s, ukupno 9H).
(b) Pripravljanje 2-(N-Boc-pirolidinil)-4-feniloksazola
[image]
N-(N’-Boc-pirolidinil)metilfenilketon (2,25 g, 7,5 mmolova) otopi se u atmosferi dušika u 40 ml suhog acetonitrila. Smjesu se ohladi na -20°C, zatim se doda trifenil-fosfin (4,0 g, 15 mmolova), perkloretan (3,6 g, 15 mmolova) i trietilamin (4,3 ml, 30 mmolova). Nakon miješanja preko noći pri sobnoj temperaturi, reakcijsku smjesu se razrijedi s etil acetatom i ispere sa zasićenim vodenim natrijevim karbonatom, 5%-tnom limunskom kiselinom i s otopinom soli. Nakon sušenja preko natrijevog sulfata otapalo se odstrani pod smanjenim tlakom i dobivenu sirovu krutu tvar se kromatografira na silika gelu, čime se dobije 1,5 g (64%) svjetlo smeđe krute tvari.
1H-NMR (DMSO-d6): 7,6-7,8 (m, 3H); 7,5 (t, 1H); 7,4 (t, 1H); 4,8-5,0 (m, 1H); 3,45-3,6 (m, 1H); 3,3-3,45 (m, 1H); 2,2-2,4 (m, 1H); 1,8-2,1 (m, 3H); 1,2 i 1,4 (s, ukupno 9H) .
(c) Deprotekcija 2-(N-Boc-pirolidinil)-4-feniloksazola
[image]
Boc zaštićeni spoj 3 (100 mg, 0,3 mmola) otopi se u 10 ml suhog dietil etera i pomiješa s 12 ml etera zasićenog s HCl. Dobivenu suspenziju se miješa pet dana pri sobnoj temperaturi. Zatim se pH namjesti na 11 s 2N otopinom NaOH. Organski sloj se odvoji, osuši preko natrijevog sulfata i isperi pod smanjenim tlakom, čime se dobije 69,2 mg bezbojnog ulja.
Primjer 3
Sinteza (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona (spoj I-1)
(a) Sinteza (S)-Z-Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona
[image]
K otopini od 3,0 g Z-Val-Val-MeVal-Pro-OH i 0,89 g (S)-pirolidin-2-il-metilketon-trifluoroacetatne soli u diklormetanu doda se 1,03 g 1-etil-3-(3-dimetilamino-propil)karbodiimid hidroklorida, 0,72 g N-hidroksibenzo-triazola i 2,16 g N-metilmorfolina pri 0°C. Smjesu se miješa preko noći pri sobnoj temperaturi. Reakcijsku smjesu se zatim razrijedi s diklormetanom i ispere uzastopce sa zasićenim vodenim natrijevim bikarbonatom, 5%-tnom vodenom otopinom limunske kiseline i s otopinom soli. Organsku fazu se osuši preko natrijevog sulfata. Nakon filtracije otapalo se odstrani u vakuumu. Ostatak se očisti kromatografijom preko silika gela (diklormetan/ izopropanol/trietilamin 94:5:1), čime se dobije 1,03 g ((S)-Z-Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona.
FAB-MS : 656,9 (M+H+).
(b) Sinteza (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona
K otopini od 1,03 g ((S)-Z-Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona u 150 ml metanola doda se 38 mg paladija na ugljenu (10 mas. % paladija). Dobivenu suspenziju se hidrogenira tri sata pri sobnoj temperaturi pod atmosferskim tlakom. Doda se obrok od 1,0 ml vodene otopine formaldehida (37 mas. %) i 0,226 g paladija na ugljenu. Smjesu se hidrogenira preko noći pod atmosferskim tlakom. Nakon filtracije otapalo se odstrani u vakuumu. Ostatak se očisti kromatografijom na silika gelu (etil acetat/izopropanol/trietilamin 94:5:1), čime se dobije 0,64 g (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-metilketona.
FAB-MS: 550,8 (M+H+).
1H-NMR (DMSO-d6, 270 MHZ) δ = 0,7 (m, 6H); 0,8-1,0 (m, 12H); 1,75-2,05 (m, 7H); 2,0 (s, 3H); 2,2 (s, 6H); 2,6 (d, 1H); 3,05 (s, 3H); 3,55 (m, 1H); 3,7 (m, 1H); 4,35 (m, 1H); 4,5-4,6 (m, 2H); 4,95 (d, 1H); 8,05 (d, 1H) ppm.
Primjer 4
Sinteza 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-5-feniloksazola (spoj III-12)
[image]
Me2Val-Val-MeVal-Pro-OH (1,72 g, 3,8 mmola) i 2-(pirolidin-2-il)-4-fenil-oksazol (0,8 g, 3,8 mmola) otope se u 40 ml metilen klorida i dobivenu otopinu se ohladi na 0°C. Zatim se doda HOBT·H2O (0,5 g, 3,8 mmola) i EDC ·HCl (0,7 g, 3,8 mmola) i zatim NMM (0,5 ml, 4,5 mmola). Nakon miješanja preko noći pri sobnoj temperaturi reakcijsku smjesu se ispere s 2 N NaOH i s vodom. Nakon sušenja s natrijevim sulfatom otapalo se odstrani pod smanjenim tlakom i dobiveni sirov materijal se očisti kromatografijom na silika gelu. Iskorištenje: 1,85 g.
FAB-MS: 651 (M+H+).
Slijedeći spojevi su proizvedeni gore opisanim metodama:
I-5 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)butilketon
FAB-MS: 592,5 (M+H+);
I-12 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)metoksi-metilketon
FAB-MS: 581 (M+H+);
I-14 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)benzilketon
FAB-MS: 626 (M+H+);
I-15 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)fenilketon
FAB-MS: 612 (M+H+);
I-19 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(4-trifluor-metilfenil)-keton,
FAB-MS: 680 (M+H+);
I-20 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(2-metoksi-fenil)-keton,
FAB-MS: 642 (M+H+);
I-25 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(4-metoksi-fenil)-keton,
FAB-MS: 642,5 (M+H+);
I-32 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(4-fluor-fenil)-keton,
FAB-MS: 630,5 (M+H+);
I-37 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(2,4-bis(metoksi)fenil)-keton,
FAB-MS: 672 (M+H+);
I-39 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(3,4,5-tris(metoksi)fenil)-keton,
FAB-MS: 702 (M+H+);
I-49 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-(2-tiazolil)-keton,
FAB-MS: 619 (M+H+);
I-54 (S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-trifluormetil-keton,
FAB-MS: 621,5 (M+H3O+);
I-63 etil-(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-3-okso-propionat,
FAB-MS: 622 (M+H+);
I-79 N-benzil-(S)-(4)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)-4-okso-butanoil amid,
FAB-MS: 711 (M+H+);
III-26 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-4-metil-tiazol,
FAB-MS: 605 (M+H+);
III-28 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-3,4-dimetil-tiazol,
FAB-MS: 619 (M+H+);
III-32 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-5-terc.butil-tiazol,
FAB-MS: 647 (M+H+);
III-35 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-4-fenil-tiazol,
FAB-MS: 667 (M+H+);
III-36 2-[(S)-(Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-5-feniltiazol,
FAB-MS: 667 (M+H+);
III-46 2-[(S)- (Me2Val-Val-MeVal-Pro-pirolidin-2-il)]-4-karboniletoksitiazol,
FAB-MS: 663 (M+H+).
Spojevi navedeni dolje u tablicama 1-8 mogu se proizvesti gore opisanim metodama i gore prikazanim općim metodama za sintezu raznih dogradnih blokova kako slijedi:
Spojevi I-1 do I-103 i II-1 do II-103:
pirolidinil-ketoni i piperidinil-ketoni;
spojevi III-1 do III-24 i IV-1 do IV-24:
pirolidinil-oksazoli i piperidinil-oksazoli;
spojevi III-25 do III-48 i IV-25 do IV-48:
pirolidinil-tiazoli i piperidinil-tiazoli;
spojevi III-49 do III-72 i IV-49 do IV-72:
pirolidinil-imidazoli i piperidinil-imidazoli;
spojevi V-1 do V-24 i VI-1 do VI-24:
pirolidinil-izoksazoli i piperidinil-izoksazoli;
spojevi V-25 do V-48 i VI-25 do VI-48:
pirolidinil-pirazoli i piperidinil-pirazoli;
spojevi VII-1 do VII-9 i VIII-1 do VIII-9:
pirolidinil-1,3,4-oksadiazoli i piperidinil-1,3,4-oksadiazoli;
spojevi VII-10 do VII-17 i VIII-10 do VIII-17:
pirolidinil-1,3,4-tiadiazoli i piperidinil-1,3,4-tiadiazoli.
Tablica 1: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu II2, af je 1 i skupina -(C=O)-G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli II2.
Br. -(C=O)-G
I-1 -(C=O)-CH3
I-2 -(C=O)-C2H5
I-3 -(C=O)-nC3H7
I-4 -(C=O)-izoC3H7
I-6 -(C=O)-terc.C4H9
I-7 -(C=O)-cikloC3H5
I-8 -(C=O)-cikloC4H7
I-9 -(C=O)-cikloC5H9
I-10 -(C=O)-cikloC6H11
I-11 -(C=O)-cikloC7H11
I-13 -(C=O)-CH2-CH2-O-CH3
I-16 -(C=O)-(4-HO-C6H5)
I-17 -[(C=O)-(2-CF3-C6H4]
I-18 -[(C=O)-(3-CF3-C6H4]
I-21 -[(C=O)-(3-OCH3-C6H4]
I-23 -[(C=O)-(2-SCH3-C6H4]
I-24 -[(C=O)-(3-SCH3-C6H4]
I-25 -[(C=O)-(4-SCH3-C6H4]
I-26 -[(C=O)-(2-N(CH3)2-C6H4]
I-27 -[(C=O)-(3-N(CH3)2-C6H4]
I-28 -[(C=O)-(4-N(CH3)2-C6H4]
I-29 -[(C=O)-(4-CN-C6H4]
I-30 -[(C=O)-(4-Cl-C6H4]
I-31 -[(C=O)-(4-Br-C6H4]
I-33 -[(C=O)-(4-CH3-C6H4]
I-34 -[(C=O)-(2-NO2-C6H4]
I-35 -[(C=O)-(3-NO2-C6H4]
I-36 -[(C=O)-(4-NO2-C6H4]
I-38 -[(C=O)-(3,4-OCH3-C6H3]
I-40 -[(C=O)-(3,4-CH2OCH2-C6H3]
I-41 -[(C=O)-(2,3-CH2OCH2-C6H3]
I-42 -(C=O)-2-piridinil
I-43 -(C=O)-2-furanil
I-44 -(C=O)-2-tienil
I-45 -(C=O)-3-piridinil
I-46 -(C=O)-3-furanil
I-47 -(C=O)-3-tienil
I-48 -(C=O)-4-piridinil
I-50 -(C=O)-2-oksazolil
I-51 -(C=O)-3-izoksazolil
I-52 -(C=O)-4-izoksazolil
I-53 -(C=O)-5-izoksazolil
I-55 -(C=O)-C2H5
I-56 -(C=O)-(C=O)-CH3
I-57 -(C=O)-(C=O)-C2H5
I-58 -(C=O)-(C=O)-nC3H7
I-59 -(C=O)-(C=O)-terc.C4H9
I-60 -(C=O)-(C=O)-CH2-C6H5
I-61 -(C=O)-(C=O)-C6H5
I-62 -(C=O)-CH2-COOCH3
I-64 -(C=O)-CF2-COOCH3
I-65 -(C=O)-CF2-COOC2H5
I-66 -(C=O)-CH2-CONH2
I-67 -(C=O)-CH2-CONHCH3
I-68 -(C=O)-CH2-CON(CH3)2
I-69 -(C=O)-CH2-CONH-CH2-C6H5
I-70 -(C=O)-CH2-CONH-C6H5
I-71 -(C=O)-CH2-CONH(CH2-C6H5)2
I-72 -(C=O)-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-)
I-73 -(C=O)-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2)
I-74 -(C=O)-CH2-CH2-COOCH,
I-75 -(C=O)-CH2-CH2-COOC2H5
I-76 -(C=O)-CH2-CH2-CONH2
I-77 -(C=O)-CH2-CH2-CONHCH3
I-78 -(C=O)-CH2-CH2-CON(CH3)2
I-80 -(C=O)-CH2-CH2-CONH-C6H5
I-81 -(C=O)-CH2-CH2-CONH(CH2-C6H5)2
I-82 -(C=O)-CH2-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-)
I-83 -(C=O)-CH2-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2)
I-84 -(C=O)-CH2-COCH3
I-85 -(C=O)-CH2-CH2-COCH3
I-86 -(C=O)-CH2-COC2H5
I-87 -(C=O)-CH2-CH2-COC2H5
I-88 -(C=O)-CH2-CO-C6H5
I-89 -(C=O)-CH2-CH2-CO-C6H5
I-90 -(C=O)-CH2-CO-CH2-C6H5
I-91 -(C=O)-CH2-CH2-CO-CH2-C6H5
I-92 -(C=O)-CH2-SOC6H5
I-93 -(C=O)-CH2-SOCH3
I-94 -(C=O)-CH2-SO(4-CH3-C6H4)
I-95 -(C=O)-CH2-SO2C6H5
I-96 -(C=O)-CH2-SO2CH3
I-97 -(C=O)-CH2-SO2(4-CH3-C6H4)
I-98 -(C=O)-CH2-CH2-SOC6H5
I-99 -(C=O)-CH2-CH2-SOCH3
I-00 -(C=O)-CH2-CH2-SO(4-CH3-C6H4)
I-101 -(C=O)-CH2-CH2-SO2-C6H5
I-102 -(C=O)-CH2-CH2-SO2CH3
I-03 -(C=O)-CH2-CH2-SO2-(4-CH3-C6H4)
Tablica 2: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu II2, af je 2 i skupina -(C=O)-G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli II2.
Br. -(C=O)-G
II-1 -(C=O)-CH3
II-2 -(C=O)-C2H5
II-3 -(C=O)-nC3H7
II-4 -(C=O)-izoC3H7
II-5 -(C=O)-nC4H9
II-6 -(C=O)-terc.C4H9
II-7 -(C=O)-cikloC3H5
II-8 -(C=O)-cikloC4H7
II-9 -(C=O)-cikloC5H9
II-10 -(C=O)-cikloC6H11
II-11 -(C=O)-cikloC7H11
II-12 -(C=O)-CH2-O-CH3
II-13 -(C=O)-CH2-CH2-O-CH3
II-14 -(C=O)-CH2-C6H5
II-15 -(C=O)-C6H5
II-16 -(C=O)-(4-HO-C6H5)
II-17 -[(C=O)-(2-CF3-C6H4]
II-18 -[(C=O)-(3-CF3-C6H4]
II-19 -[(C=O)-(4-CF3-C6H4]
II-20 -[(C=O)-(2-OCH3-C6H4]
II-20 -[(C=O)-(2-OCH3-C6H4]
II-21 -[(C=O)-(3-OCH3-C6H4]
II-22 -[(C=O)-(4-OCH3-C6H4]
II-23 -[(C=O)-(2-SCH3-C6H4]
II-24 -[(C=O)-(3-SCH3-C6H4]
II-25 -[(C=O)-(4-SCH3-C6H4]
II-26 -[(C=O)-(2-N(CH3)2-C6H4]
II-27 -[(C=O)-(3-N(CH3)2-C6H4]
II-28 -[(C=O)-(4-N(CH3)2-C6H4]
II-29 -[(C=O)-(4-CN-C6H4]
II-30 -[(C=O)-(4-Cl-C6H4]
II-31 -[(C=O)-(4-Br-C6H4]
II-33 -[(C=O)-( 4-CH3-C6H4]
II-34 -[(C=O)-(2-NO2-C6H4]
II-35 -[(C=O)-(3-NO2-C6H4]
II-36 -[(C=O)-(4-NO2-C6H4]
II-37 -[(C=O)-(2,4-OCH3-C6H3]
II-38 -[(C=O)-(3,4-OCH3-C6H3]
II-39 -[(C=O)-(3,4,5-OCH3-C6H3]
II-40 -[(C=O)-(3,4-CH2OCH2-C6H3]
II-41 -[(C=O)-(2,3-CH2OCH2-C6H3]
II-42 -(C=O)-2-piridinil
II-43 -(C=O)-2-furanil
II-44 -(C=O)-2-tienil
II-45 -(C=O)-3-piridinil
II-46 -(C=O)-3-furanil
II-47 -(C=O)-3-tienil
II-48 -(C=O)-4-piridinil
II-50 -(C=O)-2-oksazolil
II-51 -(C=)-3-izoksazolil
II-52 -(C=O)-4-izoksazolil
II-53 -(C=O)-5-izoksazolil
II-54 -(C=O)-CF3
II-55 -(C=-O)-C2F5
II-56 -(C=O)-(C=O)-CH3
II-57 -(C=O)-(C=O)-C2H5
II-58 -(C=O)-(C=O)-nC3H7
II-59 -(C=O)-(C=O)-tertC4H9
II-60 -(C=O)-(C=O)-CH2-C6H5
II-61 -(C=O)-(C=O)-C6H5
II-62 -(C=O)-CH2-COOCH3
II-63 -(C=O)-CH2-COOC2H5
II-64 -(C=O)-CF2-COOCH3
II-65 -(C=O)-CF2-COOC2H5
II-66 -(C=O)-CH2-CONH2
II-67 -(C=O)-CH2-CONHCH3
II-68 -(C=O)-CH2-CON(CH3)2
II-69 -(C=O)-CH2-CONH-CH2-C6H5
II-70 -(C=O)-CH2-CONH-C6H5
II-71 -(C=O)-CH2-CONH(CH2-C6H5)2
II-72 -(C=O)-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-)
II-73 -(C=O)-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2)
II-74 -(C=O)-CH2-CH2-COOCH3
II-75 -(C=O)-CH2-CH2-COOC2H5
II-76 -(C=O)-CH2-CH2-CONH2
II-77 -(C=O)-CH2-CH2-CONHCH3
II-78 -(C=O)-CH2-CH2-CON(CH3)2
II-79 -(C=O)-CH2-CH2-CONH-CH2-C6H5
II-80 -(C=O)-CH2-CH2-CONH-C6H5
II-81 -(C=O)-CH2-CH2-CONH(CH2-C6H5)2
II-82 -(C=O)-CH2-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-)
II-83 -(C=O)-CH2-CH2-CON(-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2)
II-84 -(C=O)-CH2-COCH3
II-85 -(C=O)-CH2-CH2-COCH3
II-86 -(C=O)-CH2-COC2H5
II-87 -(C=O)-CH2-CH2-COC2H5
II-88 -(C=O)-CH2-CO-C6H5
II-89 -(C=O)-CH2-CH2-CO-C6H5
II-90 -(C=O)-CH2-CO-CH2-C6H5
II-91 - (C=O)-CH2-CH2-CO-CH2-C6H5
II-92 -(C=O)-CH2-SOC6H5
II-93 -(C=O)-CH2-SOCH3
II-94 -(C=O)-CH2-SO(4-CH3-C6H4)
II-95 -(C=O)-CH2-SO2C6H5
II-96 -(C=O)-CH2-SO2CH3
II-97 -(C=O)-CH2-SO2(4-CH3-C6H4)
II-98 -(C=O)-CH2-SOC6H5
II-99 -(C=O)-CH2-CH2-SOCH3
II-100 -(C=O)-CH2-CH2-SO(4-CH3-C6H4)
II-101 -(C=O)-CH2-CH2-SO2-C6H5
II-102 -(C=O)-CH2-CH2-SO2CH3
II-103 -(C=O)-CH2-CH2-SO2-(4-CH3-C6H4)
Tablica 3: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu VIIg, bf je 1, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. X R7 R8
III-1 O H H
III-2 O H CH3
III-3 O CH3 H
III-4 O CH3 CH3
III-5 O H C2H5
III-6 O C2H5 H
III-7 O C2H5 C2H5
III-8 O H t-C4H9
III-9 O t-C4H9 H
III-10 O t-C4H9 t-C4H9
III-11 O H C6H5
III-12 O C6H5 H
III-13 O C6H5 CH3
III-14 O CH3C6H5
III-15 O C6H5 C6H5
III-16 O H CH2-C6H5
III-17 O CH2-C6H5 H
III-18 O CH2-C6H5 CH2-C6H5
III-19 O H COOCH3
III-20 O COOCH3 H
III-21 O COOCH3 COOCH3
III-22 O H COOC2H5
III-23 O COOC2H5 H
III-24 O COOC2H5 COOC2H5
III-25 S H H
III-27 S CH3 H
III-29 S H C2H5
III-30 S C2H5 H
III-31 S C2H5 C2H5
III-33 S t-C4H9 H
III-34 S t-C4H9 t-C4H9
III-37 S C6H5 CH3
III-38 S CH3 C6H5
III-39 S C6H5 C6H5
III-40 S H CH2-C6H5
III-41 S CH2-C6H5 H
III-42 S CH2-C6H5 CH2-C6H5
III-43 S H COOCH3
III-44 S COOCH3 H
III-45 S COOCH3 COOCH3
III-47 S COOC2H5 H
III-48 S COOC2H5 COOC2H5
III-49 NH H H
III-50 NH H CH3
III-51 NH CH3 H
III-52 NH CH3 CH3
III-53 NH H C2H5
III-54 NH C2H5 H
III-55 NH C2H5 C2H5
III-56 NH H t-C4H9
III-57 NH t-C4H9 H
III-58 NH t-C4H9 t-C4H9
III-59 NH H C6H5
III-60 NH C6H5 H
III-61 NH C6H5 CH3
III-62 NH CH3 C6H5
III-63 NH C6H5 C6H5
III-64 NH H CH2-C6H5
III-65 NH CH2-C6H5 H
III-66 NH CH2-C6H5 CH2-C6H5
III-67 NH H COOCH3
III-68 NH COOCH3 H
III-69 NH COOCH3 COOCH3
III-70 NH H COOC2H5
III-71 NH COOC2H5 H
III-72 NH COOC2H5 COOC2H5
Tablica 4: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu VIIg, bf je 2, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. X R71 R81
IV-1 O H H
IV-2 O H CH3
IV-3 O CH3 H
IV-4 O CH3 CH3
IV-5 O H C2H5
IV-6 O C2H5 H
IV-7 O C2H5 C2H5
IV-8 O H t-C4H9
IV-9 O t-C4H9 H
IV-10 O t-C4H9 t-C4H9
IV-11 O H C6H5
IV-12 O C6H5 H
IV-13 O C6H5 CH3
IV-14 O CH3 C6H5
IV-15 O C6H5 C6H5
IV-16 O H CH2-C6H5
IV-17 O CH2-C6H5 H
IV-18 O CH2-C6H5 CH2-C6H5
IV-19 O H COOCH3
IV-20 O COOCH3 H
IV-21 O COOCH3 COOCH3
IV-22 O H COOC2H5
IV-23 O COOC2H5 H
IV-24 O COOC2H5 COOC2H5
IV-25 S H H
IV-26 S H CH3
IV-27 S CH3 H
IV-28 S CH3 CH3
IV-29 S H C2H5
IV-30 S C2H5 H
IV-31 S C2H5 C2H5
IV-32 S H t-C4H9
IV-33 S t-C4H9 H
IV-34 S t-C4H9 t-C4H9
IV-35 S H C6H5
IV-36 S C6H5 H
IV-37 S C6H5 CH3
IV-38 S CH3 C6H5
IV-39 S C6H5 C6H5
IV-40 S H CH2-C6H5
IV-41 S CH2-C6H5 H
IV-42 S CH2-C6H5 CH2-C6H5
IV-43 S H COOCH3
IV-44 S COOCH3 H
IV-45 S COOCH3 COOCH3
IV-46 S H COOC2H5
IV-47 S COOC2H5 H
IV-48 S COOC2H5 COOC2H5
IV-49 NH H H
IV-50 NH H CH3
IV-51 NH CH3 H
IV-52 NH CH3 CH3
IV-53 NH H C2H5
IV-54 NH C2H5 H
IV-55 NH C2H5 C2H5
IV-56 NH H t-C4H9
IV-57 NH t-C4H9 H
IV-58 NH t-C4H9 t-C4H9
IV-59 NH H C6H5
IV-60 NH C6H5 H
IV-61 NH C6H5 CH3
IV-62 NH CH3 C6H5
IV-63 NH C6H5 C6H5
IV-64 NH H CH2-C6H5
IV-65 NH CH2-C6H5 H
IV-66 NH CH2-C6H5 CH2-C6H5
IV-67 NH H COOCH3
IV-68 NH COOCH3 H
IV-69 NH COOCH3 COOCH3
IV-70 NH H COOC2H5
IV-71 NH COOC2H5 H
IV-72 NH COOC2H5 COOC2H5
Tablica 5: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu VIIIg, bf je 1, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. X R10 R11
V-1 O H H
V-2 O H CH3
V-3 O CH3 H
V-4 O CH3 CH3
V-5 O H C2H5
V-6 O C2H5 H
V-7 O C2H5 C2H5
V-8 O H t-C4H9
V-9 O t-C4H9 H
V-10 O t-C4H9 t-C4H9
V-11 O H C6H5
V-12 O C6H5 H
V-13 O C6H5 CH3
V-14 O CH3 C6H5
V-15 O C6H5C6H5
V-16 O H CH2- C6H5
V-17 O CH2- C6H5 H
V-18 O CH2- C6H5 CH2- C6H5
V-19 O H COOCH3
V-20 O COOCH3 H
V-21 O COOCH3 COOCH3
V-22 O H COOC2H6
V-23 O COOC2H5 H
V-24 O COOC2H5 COOC2H5
V-25 NH H H
V-26 NH H CH3
V-27 NH CH3 H
V-28 NH CH3 CH3
V-29 NH H C2H5
V-30 NH C2H5 H
V-31 NH C2H5 C2H5
V-32 NH H t-C4H9
V-33 NH t-C4H9 H
V-34 NH t-C4H9 t- C4H9
V-35 NH H C6H5
V-36 NH C6H5 H
V-37 NH C6H5 CH3
V-38 NH CH3 C6H5
V-39 NH C6H5 C6H5
V-40 NH H CH2- C6H5
V-41 NH CH2- C6H5 H
V-42 NH CH2- C6H5 CH2- C6H5
V-43 NH H COOCH3
V-44 NH COOCH3 H
V-45 NH COOCH3 COOCH3
V-46 NH H COOC2H5
V-47 NH COOC2H5 H
V-48 NH COOC2H5 COOC2H5
Tablica 6: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu VIIIg, bf je 2, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. VI-1 O H H VI-2 O H CH, VI-3 O CH, H VI-4 O CH, CH, V I - 5 O H CZHs
Br. X R10 R11
VI-1 O H H
VI-2 O H CH3
VI-3 O CH3H
VI-4 O CH3CH3
VI-5 O H C2H5
VI-6 O C2H5H
VI-7 O C2H5 C2H5
VI-8 O H t-C4H9
VI-9 O t-C4H9 H
VI-10 O t-C4H9 t-C4H9
VI-11 O H C6H5
VI-12 O C6H5 H
VI-13 O C6H5 CH3
VI-14 O CH3 C6H5
VI-15 O C6H5 C6H5
VI-16 O H CH2-C6H5
VI-17 O CH2-C6H5 H
VI-18 O CH2-C6H5 CH2-C6H5
VI-19 O H COOCH3
VI-20 O COOCH3 H
VI-21 O COOCH3 COOCH3
VI-22 O H COOC2H5
VI-23 O COOC2H5 H
VI-24 O COOC2H5 COOC2H5
VI-25 NH H H
VI-26 NH H CH3
VI-27 NH CH3 H
VI-28 NH CH3 CH3
VI-29 NH H C2H5
VI-30 NH C2H5 H
VI-31 NH C2H5 C2H5
VI-32 NH H t-C4H9
VI-33 NH t-C4H9 H
VI-34 NH t-C4H9 t-C4H9
VI-35 NH H C6H5
VI-36 NH C6H5 H
VI-37 NH C6H5 CH3
VI-38 NH CH3 C6H5
VI-39 NH C6H5 C6H5
VI-40 NH H CH2-C6H5
VI-41 NH CH2-C6H5 H
VI-42 NH CH2-C6H5 CH2-C6H5
VI-43 NH H COOCH3
VI-44 NH COOCH3 H
VI-45 NH COOCH3 COOCH3
VI-46 NH H COOC2H5
VI-47 NH COOC2H5 H
VI-48 NH COOC2H5 COOC2H5
Tablica 7: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu IXg, bf je 1, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. X R131
VII-1 O H
VII-2 O CH3
VII-3 O C2H5
VII-4 O C3H7
VII-5 O t-C4H9
VII-6 O COOCH3
VII-7 O COOC2H5
VII-8 O C6H5
VII-9 O CH2-C6H5
VII-10 S CH3
VII-11 S C2H5
VII-12 S C3H7
VII-13 S t-C4H9
VII-14 S COOCH3
VII-15 S COOC2H5
VII-16 S C6H5
Tablica 8: A je Me2Val, B je Val, D je MeVal, E je Pro i F ima formulu IIIf, G ima formulu IXg, bf je 2, i skupina G se nalazi u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu u formuli IIIf.
Br. X R131
VIII-1 O H
VIII-2 O CH3
VIII-3 O C2H5
VIII-4 O C3H7
VIII-5 O t-C4H9
VIII-6 O COOCH3
VIII-7 O COOC2H5
VIII-8 O C6H5
VIII-9 O CH2-C6H5
VIII-10 S CH3
VIII-11 S C2H5
VIII-12 S C3H7
VIII-13 S t-C4H9
VIII-14 S COOCH3
VIII-15 S COOC2H5
VIII-16 S C6H5
VIII-17 S CH2-C6H5
Ispitivanje biološkog djelovanja
Metodologija in vitro
Citotoksičnost je izmjerena primjenom standardne metodologije za adherentne stanične linije, kao što je pokus tetrazolijeve mikrokulture (MTT). Pojedinosti ispitivanja su objavljene (Alley, M.C., et al., Cancer Research, 48: 589-601, (1988)). Za izradu mikrotitarske ploče kultura upotrijebljene su kulture eksoonencijalnog rasta HT-29 stanica karcinoma debelog crijeva. Stanice su zasađene pri 5000-20.000 stanica po jamici u ploče s 96 jamica (u 150 ml medija) i rasle su preko noći pri 37°C. Dodani su ispitini spojevi u deseterostrukim razrjeđenjima u rasponu od 10-4 M do 10-10 M. Stanice su zatim inkubirane 48 sati. Za određivanje broja za život sposobnih stanica u svaku jamicu dodana je MTT boja (50 ml 3 mg/ml otopine 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolijev bromid u otopini soli). Ta je smjesa inkubirana 5 sati pri 37°C i zatim je u svaku jamicu dodano 50 ml 25%-tnog SDS-a, pH 2. Nakon inkubacije preko noći za svaku jamicu je očitana apsorbancija pri 550 nm upotrebom ELISA čitača. Za ponovljene jamice izračunate su vrijednosti prosjeka +/-SD podataka pomoću formule % T/C (% stanica sposobnih za život od obrađenih/kontrolnih). Koncentracija spoja koja daje T/C od 50% inhibicije rasta označena je kao IC50.
U donjoj tablici 9 prikazane su vrijednosti određene u sistemu stanica HT-29.
Tablica 9:
Spoj, br. IC50 (mol/l)
I-1 > 10-6
I-5 > 10-6
I-12 4 x 10-7
I-14 4 x 10-7
I-15 1.7 x 10-6
I-19 > 10-6
I-20 2.8 x 10-7
I-22 > 10-6
I-32 > 10-6
I-37 3 x 10-7
I-39 > 10-6
I-49 > 10-6
I-54 > 10-6
I-63 4 x 10-8
III-12 9 x 10-7
III-26 > 10-6
III-28 4 x 10-7
III-32 > 10-6
III-35 > 10-6
III-36 4 x 10-7
III-46 6 x 10-7
V-2 3 x 10-6
Metodologija in vivo
Spojevi ovog izuma mogu se nadalje ispitati bilo kojim od raznih predkliničkih pokusa za djelovanje in vivo, koji su indikativni za kliničku upotrebljivost. Takvi pokusi su izvršeni na bezdlakim miševima u koje je presađeno ("ksenograftirano") tkivo tumora, ponajprije humanog podrijetla, kako je to dobro poznato na tom području. Ispitni spojevi su procijenjeni u pogledu njihove anti-tumorske učinkovitosti nakon davanja miševima koji su nosili ksenograft.
Gore navedeni spoj I-15 ispitan je modelom limfocitne leukemije murine P388. Stanice P388 su skupljene iz miševa davatelja peritonealnim ispiranjem 7 dana nakon transplantacije i lijekovi su dati intravenski 5 uzastopnih dana. Period preživljavanja neliječenih miševa bio je u rasponu od 11 do 13 dana. Podaci u donjoj tablici 9 izraženi su kao prosječno vrijeme preživljavanja (MST i povišenje vremena preživljavanja u usporedbi s kontrolom kao T/C % (liječeni/kontrolni %). Sukladno smjernicama National Cancer Institute, T/C% u rasponu od 128-190% dokazuje lijek blage do dobre učinkovitosti.
Tablica 10: Učinkovitost spoja I-15 protiv leukemije P388 murine.
Doza (mg-kg) MST (dani) T-C%
0 11 100
50 15 136
60 16 145
75 17 155
K tome, humani tumori koji su rasli u atimičnim bezdlakim miševima mogu se transplantirati u nove životinje primaoce, upotrebom fragmenata tumora veličine približno 50 mg. Dan presađivanja označen je kao dan 0. Šest dana kasnije miševi su obrađeni s ispitnim spojevima datim intravenskom ili intraperitonealnom injekcijom, u skupinama od 5-10 miševa za svaku dozu. Spojevi su davani svaki dan tijekom 5 dana, 10 dana ili 15 dana dozama od 10-100 mg/kg tjelesne težine. Promjeri tumora i tjelesne težine mjerene su dva puta tjedno. Mase tumora su izračunate mjerenjem promjera s Vernierovim kaliperom i pomoću formule:
(duljina x širina2)/2 = mg težine tumora
Za svaku liječenu skupinu izračunate su prosječne težine tumora i za svaku skupinu određene su vrijednosti T/C u usporedbi s neobrađenim kontrolnim tumorima.
Ekvivalenti
Stručnjak će vidjeti ili moći utvrditi, primjenom ne više od rutinskih pokusa, mnoge ekvivalenate za specifične izvedbe ovdje opisanog izuma. Smatra se da su takvi ekvivalenti obuhvaćeni okvirom slijedećih patentnih zahtjeva.

Claims (37)

1. Spoj opće formule I A-B-D-E-F-G (I) naznačen time, da svaki od A, B, D i E predstavlja ostatak α-amino kiseline; F je ostatak azacikloalkankarboksilne kiseline i G je jednovalentan radikal odabran iz skupine koju čine vodikov atom, alkilna, cikloalkilna, cikloalkilalkilna, aminokarbonilalkilna, arilalkilna, alkoksikarbonilalkilna, ariloksikarbonilalkilna, alkilsulfinil alkilna, alkilsulfonilalkilna, arilsulfinilalkilna, arilsulfonilalkilna, alkil- ili arilsulfinilna ili alkil- ili arilsulfonilna skupina; ili F predstavlja azacikloalkilnu skupinu, a G je heteroarilna skupina; ili njegove kiselinske soli.
2. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je kiselina odabrana iz skupine koju čine klorovodična kiselina, limunska kiselina, vinska kiselina, mliječna kiselina, fosforna kiselina, metansulfonska kiselina, octena kiselina, mravlja kiselina, maleinska kiselina, fumarna kiselina, jabučna kiselina, sukcinska kiselina, malonska kiselina, sumporna kiselina, L-glutaminska kiselina, L-aspartinska kiselina, piruvinska kiselina, mucinska kiselina, benzojeva kiselina, glukuronska kiselina, oksalna kiselina, askorbinska kiselinu ili N-acetilglicin.
3. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A derivat prolina formule IIa, [image] u kojoj na je 0, 1, 2 ili 3; Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R1a je vodikov atom ili metilna, etilna, propilna ili fenilna skupina ili supstituirana fenilna skupina, pri čemu supstituenti uključuju jednu ili više alkilnih, alkoksi, trifluormetilnih ili nitro skupine; ili Ra i R1a zajedno tvore propilenski most; R2a je vodikov atom ili metilna skupina; R3a je vodikov atom ili metilna skupina; R4a je vodikov atom ili metilna skupina; i R5a je vodikov atom ili metilna skupina.
4. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A α-amino kiselina formule IIIa, [image] u kojoj Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R1a je vodikov atom ili C1-C4-alkilna skupina; R6a je vodikov atom ili normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina supstituirana s halogenim, C3-C8-cikloalkilna skupina, C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina, C1-C4-oksoalkilna skupina, C2-C5-alkenilna skupina, fenilna skupina, ili supstituirana fenilna skupina, pri čemu fenilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, jednu ili više alkilnih, metoksi, trifluormetilnih ili nitro skupina; i R7a je metilna skupina ili etilna skupina.
5. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A ostatak α-amino kiseline formule IVa, [image] u kojoj ma predstavlja 1 ili 2; R7a je etilna skupina ili metilna skupina; Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina.
6. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A ostatak α-amino kiseline formule Va, [image] u kojoj R7a je etilna skupina ili metilna skupina i Ra je vodikov atom, ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina.
7. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A α-amino kiselina formule VIa, [image] u kojoj Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R1a je vodikov atom ili metilna, etilna, propilna ili fenilna skupina ili supstituirana fenilna skupina, pri čemu supstituenti uključuju jednu ili više alkilnih, alkoksi, trifluormetilnih ili nitro skupina; ili Ra i R1a zajedno tvore propilenski most; Xa je hidroksilna, metoksi ili etoksi skupina ili fluorov atom.
8. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A α-amino kiselina formule VIIa, [image] u kojoj Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R1a je vodikov atom ili metilna, etilna, propilna ili fenilna skupina ili supstituirana fenilna skupina, pri čemu supstituenti uključuju jednu ili više alkilnih, alkoksi, trifluormetilnih ili nitro skupina; ili Ra i R1a zajedno tvore propilenski most; R2a, R3a, R4a i R5a međusobno neovisno predstavljaju vodikov atom ili metilnu skupinu.
9. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A ostatak α-amino kiseline formule VIIIa, [image] u kojoj Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina.
10. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je A derivat 2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline formule IXa, [image] u kojoj 3-karbonilna jedinica može imati ekso ili endo položaj, Za predstavlja jednostruku ili dvostruku vezu, a Ra je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina.
11. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je B valilni ostatak, izoleucilni ostatak, alo-izoleucilni ostatak, norvalilni ostatak, 2-terc.butilglicilni ostatak ili 2-etilglicilni ostatak.
12. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je B ostatak formule IIb, [image] u kojoj R1b predstavlja vodikov atom, a R2b je ciklopropilna skupina, normalna, izobutilna, terc.butilna, metoksimetilna, 1-metoksietilna ili 1-metilvinilna skupina, ili R1b i R2b zajedno tvore izopropilidensku skupinu.
13. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je D N-alkilvalilni ostatak, N-alkil-2-etilglicilni ostatak, N-alkil-2-terc.butilglicilni ostatak, N-alkil-norleucilni ostatak, N-alkil-izoleucilni ostatak, N-alkil-alo-izoleucilni ostatak ili N-alkil-norvalilni ostatak, a N-alkilna skupina je metilna ili etilna skupina.
14. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je D ostatak α-amino kiseline formule IId, [image] u kojoj Rd je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R1d je vodikov atom, a R2d je ciklopropilna, metoksimetilna, 1-metoksietilna ili 1-metilvinilna skupina; ili R1d i R2d zajedno tvore izopropilidensku skupinu.
15. Spoj formule I prema zahtjevu 1, naznačen time, da je D α-amino kiselina formule IIId, [image] u kojoj nd je 1 ili 2, R3d je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; i Xd je vodikov atom, ili nd predstavlja broj 1, a Xd je atom fluora, ili hidroksilna, metoksi ili etoksi skupina.
16. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, da je E propilni ostatak, tiazolidinil-4-karbonilni ostatak, homopropilni ostatak ili hidroksipropilni ostatak.
17. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, da je E α-amino karboksilna kiselina formule IIe, [image] u kojoj ne predstavlja 0, 1 ili 2, R1e je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina; R2e je vodikov atom ili metilna skupina; R3e je vodikov atom ili metilna skupina; R4e je vodikov atom, ili fluorov atom ili hidroksilna, metoksi ili etoksi skupina; i R5e je vodikov atom; ili ne je 1, a R3e i R4e zajedno tvore dvostruku vezu; ili ne je 1, R4e i R5e zajedno tvore dvostruko vezan kisikov diradikal; ili ne je 1 ili 2, a R1e i R2e zajedno tvore dvostruku vezu.
18. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, da je E ostatak aminociklopentankarboksilne kiseline formule IIIe, [image] u kojoj Re predstavlja metilnu skupinu ili etilnu skupinu, a R1e je vodikov atom ili nesupstituirana ili s fluorom supstituirana metilna, etilna, normalna propilna, izopropilna, ili ciklopropilna skupina.
19. Spoj prema zahtjevu 1, naznačen time, da je F azacikloalkankarboksilna kiselina formule IIf, [image] u kojoj af predstavlja 0, 1 ili 2, a karbonilna skupina se nalazi u položaju 1 ili položaju 2 u odnosu prema dušikovom atomu.
20. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da je G vodikov atom, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, supstituirana normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, C3-C8-cikloalkilna ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina.
21. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da je G arilalkilna ili heteroarilalkilna skupina formule IIg, -(CH2)-ag-R11 (IIg) u kojoj ag predstavlja 0, 1 ili 2, R11 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, pri čemu supstituenti arilne skupine uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiadiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; gdje supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
22. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da G predstavlja alkoksikarbonilalkilnu ili ariloksikarbonil-alkilnu skupinu IIIg, -(CH2)bg-(C=O)cg-R21 (IIIg) u kojoj bg predstavlja 1, 2 ili 3, a cg je 0 ili 1, i R21 je vodikov atom, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina, normalna ili razgranata C1-C8-alkilna skupina supstituirana s halogenim, C3-C8-cikloalkilna skupina, C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilna skupina, arilna skupina ili supstituirana arilna skupina, pri čemu supstituenti arilne skupine uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C6-dialkilamino skupina.
23. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da G predstavlja aminokarbonilalkilnu skupinu formule IVg, [image] u kojoj dg predstavlja 1, 2 ili 3, a eg je 0 ili 1, svaki od R31 i R41 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, s halogenim supstituiranu normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, C3-C8-cikloalkilnu skupinu, C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu, arilnu skupinu, supstituiranu arilnu skupinu, pri čemu supstituenti arilne skupine uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili R31, R41 i dušikov atom tvore sistem prstena koji sadrži osam ili manje ugljikovih atoma.
24. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da G predstavlja alkilsulfinilalkilnu ili arilsufinilalkilnu skupinu formule Vg, -(CH2)gg-S(O)hg-R51 (Vg) u kojoj gg 1 ili 2, hg je 1 ili 2, a R51 predstavlja metilnu, trifluormetilnu, etilnu ili fenilnu skupinu.
25. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da G predstavlja alkil- ili arilkarbonilalkilnu skupinu formule VIg, -(CH2)ig-(C=O)-R61 (VIg) u kojoj ig 1 ili 2; R61 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, koja može biti nesupstituirana ili supstituirana sa do šest halogenih ponajprije fluorovih atoma, C3-C8-cikloalkilnu skupinu; C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili supstituiranu ili nesupstituiranu arilnu ili heteroarilnu skupinu.
26. Spoj prema zahtjevu 19, naznačen time, da je F azacikloalkilna skupina formule IIIf, [image] u kojoj bf 0, 1 ili 2 i G je heteroarilna skupina u položaju 1 u odnosu prema dušikovom atomu ili u položaju 2 u odnosu prema dušikovom atomu.
27. Spoj prema zahtjevu 26, naznačen time, da je G heteroarilna skupina formule VIIg, [image] u kojoj X predstavlja skupinu NH, kisikov atom ili atom sumpora, a svaki od R71 i R81 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili svaki od R71 i R81 neovisno predstavlja jednovalentni radikal formule II1, -(CH2)al-R91 (II1) u kojoj al predstavlja 0, 1 ili 2, R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkil-sulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
28. Spoj prema zahtjevu 26, naznačen time, da je G heteroarilna skupina formule VIIIg, [image] u kojoj X predstavlja skupinu NR121, gdje R121 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu koja može biti supstituirana sa do šest halogenih, ponajprije fluorovih atoma, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili X je kisikov atom; svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja jednovalentni radikal formule II1, -(CH2)al-R91 (II1) u kojoj a1 je 0, 1 ili 2, a R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
29. Spoj prema zahtjevu 26, naznačen time, da je G aromatska diazo heterociklička skupina formule IXg, [image] u kojoj X predstavlja skupinu NH, kisikov atom ili sumporni atom, a R131 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu, ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili R131 predstavlja jednovalentni radikal formule II1, -(CH2)a1 –R91 (II1) u kojoj a1 je 0, 1 ili 2, a R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
30. Spoj opće formule I A-B-D-E-F-G naznačen time, da A predstavlja N,N-dimetilvalil, B je valil, D je N-metilvalil, E je prolil, F je skupina formule IIf, [image] u kojoj a1 je 1 ili 2, G je jednovalentni radikal odabran iz skupine koju čine vodikov atom, alkilna, cikloalkilna, cikloalkilalkilna skupina, aminokarbonilalkilna, arilalkilna, heteroarilalkilna, alkoksikarbonilalkilna, ariloksi karbonil alkilna, alkilsulfinilalkilna, alkilsulfonilalkilna, arilsulfinilalkilna, arilsulfonilalkilna, alkil- ili aril sulfinilna, alkil- ili arilsulfonilna skupina, supstituirana ili nesupstituirana arilna i supstituirana ili nesupstituirana heteroarilna skupina.
31. Spoj prema zahtjevu 30, naznačen time, da af je 1, a G je fenil.
32. Spoj formule A-B-D-E-F-G naznačen time, da A predstavlja N,N-dimetilvalil, B je valil, D je N-metilvalil, E je prolil, F je skupina formule IIIf, [image] u kojoj bf je 1 ili 2, i G je heteroarilna skupina formule VIIg, [image] u kojoj X predstavlja NH, kisik ili sumpor, a svaki od R71 i R81 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili svaki od R71 i R81 neovisno predstavlja radikal formule III1, -(CH2)a1-R91 (II1) u kojoj a1 je 0, 1 ili 2, a R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
33. Spoj formule A-B-D-E-F-G naznačen time, da A predstavlja N,N-dimetilvalil, B je valil, D je N-metilvalil, E je prolil, F je skupina formule IIIf, [image] u kojoj cf je 1 ili 2, i G je heteroarilna skupina formule VIIIg, [image] u kojoj X predstavlja skupinu NR121 a R121 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu koja može biti supstituirana s do šest halogenih, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupinu; ili X predstavlja kisikov atom; svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupina; ili svaki od R101 i R111 neovisno predstavlja jednovalenti radikal formule II1, -(CH2)a1-R91 (II1) u kojoj a1 je 0, 1 ili 2, a R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
34. Spoj formule A-B-D-E-F-G naznačen time, da A predstavlja N,N-dimetilvalil, B je valil, D je N-metilvalil, E je prolil, F je skupina formule IIIf, [image] u kojoj cf je 1 ili 2, i G je aromatska diazo skupina formule IXg, [image] u kojoj X predstavlja skupinu NH, kisik ili sumpor, a R131 predstavlja vodikov atom, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu, normalnu ili razgranatu C1-C8-alkilnu skupinu supstituiranu s halogenim, C3-C8-cikloalkilnu skupinu ili C3-C8-cikloalkil-C1-C4-alkilnu skupina; ili R131 predstavlja jednovalentni radikal formule II1, -(CH2)a1-R91 (II1) u kojoj a1 je 0, 1 ili 2, a R91 je arilna skupina, supstituirana arilna skupina, gdje arilni supstituenti uključuju jedan ili više halogenih atoma, ili jednu ili više metoksi, etoksi, trifluormetilnih, dioksimetilenskih, nitro, cijano, C1-C7-alkoksikarbonilnih, C1-C7-alkilsulfonilnih, amino ili C1-C7-dialkilamino skupina; ili heteroarilna ili supstituirana heteroarilna skupina derivirana od imidazola, pirola, tiofena, furana, tiazola, oksazola, pirazola, 1,2,4- ili 1,2,3-triazola, oksadiazola, tiadiazola, izoksazola, izotiazola, pirazina, piridazina, pirimidina, piridina, benzofurana, benzotiofena, benzimidazola, benzotiazola, benzopirana, indola, izoindola, indazola ili kinolina; pri čemu supstituenti heteroarilne skupine uključuju jednu ili više C1-C6-alkilnih, hidroksilnih ili fenilnih skupina.
35. Farmaceutski sastav koji sadrži spoj opće formule I A-B-D-E-F-G naznačen time, da svaki od A, B, D i E predstavlja ostatak α-amino kiseline; F je ostatak azacikloalkan-karboksilne kiseline i G je jednovalentni radikal odabran iz skupine koju čine vodikov atom, alkilna, cikloalkilna, cikloalkilalkilna skupina, aminokarbonilalkilna, arilalkilna, alkoksikarbonilalkilna, ariloksikarbonilalkilna, alkilsulfinilalkilna, arilsulfonilalkilna, arilsulfinilalkilna, arilsulfonilalkilna, alkil- ili arilsulfinilna ili alkil- ili arilsulfonilna skupina; ili F je azacikloalkilna skupina, a G je heteroarilna skupina; ili njegovu kiselinsku sol; i farmaceutski prihvatljiv nosač ili sredstvo za razrjeđenje.
36. Metoda za liječenje raka u sisavaca koja uključuje davanje sisavcu terapeutski učinkovite količine spoja opće formule I A-B-D-E-F-G naznačen time, da svaki od A, B, D i E predstavlja ostatak α-amino kiseline; F je ostatak azacikloalkan-karboksilne kiseline i G je jednovalentni radikal odabran iz skupine koju čine vodikov atom, alkilna, cikloalkilna, cikloalkilalkilna skupina, aminokarbonilalkilna, aralkilna, alkoksikarbonilalkilna, ariloksikarbonilalkilna, alkilsulfinilalkilna, alkilsulfonilalkilna, arilsulfinilalkilna, arilsulfonilalkilna, alkil- ili arilsulfinilna ili alkil- ili arilsulfonilna skupina; ili F je azacikloalkilna skupina, a G je heteroarilna skupina; ili njegove kiselinske soli.
37. Metoda prema zahtjevu 36, naznačena time, da je sisavac čovjek.
HR08/814,577A 1997-03-10 1998-03-10 Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the c-terminus HRP980124A2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/814,577 US5965537A (en) 1997-03-10 1997-03-10 Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HRP980124A2 true HRP980124A2 (en) 1998-12-31

Family

ID=25215470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HR08/814,577A HRP980124A2 (en) 1997-03-10 1998-03-10 Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the c-terminus

Country Status (17)

Country Link
US (1) US5965537A (hr)
EP (1) EP0981539A1 (hr)
JP (1) JP2001518084A (hr)
KR (1) KR20000076099A (hr)
CN (1) CN1252806A (hr)
AR (1) AR011957A1 (hr)
AU (1) AU744511B2 (hr)
BR (1) BR9808017A (hr)
CA (1) CA2297164A1 (hr)
CO (1) CO4950525A1 (hr)
HR (1) HRP980124A2 (hr)
HU (1) HUP0001758A3 (hr)
IL (1) IL131596A0 (hr)
NO (1) NO994364L (hr)
TW (1) TW505657B (hr)
WO (1) WO1998040400A1 (hr)
ZA (1) ZA981957B (hr)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2266607A3 (en) 1999-10-01 2011-04-20 Immunogen, Inc. Immunoconjugates for treating cancer
HU230376B1 (hu) 2000-10-30 2016-03-29 Janssen Pharmaceutica N.V Tripeptidil peptidáz inhibitorok
US7256257B2 (en) * 2001-04-30 2007-08-14 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
US6884869B2 (en) * 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
DK2357006T3 (en) * 2002-07-31 2015-12-21 Seattle Genetics Inc Drug conjugates and their use for treating cancer, an autoimmune disease or an infectious disease
DE10240818A1 (de) * 2002-08-30 2004-05-13 Grünenthal GmbH Substituierte 2-Pyrrolidin-2-yl-[1,3,4]-oxadiazol-Derivate
FR2856685B1 (fr) * 2003-06-25 2005-09-23 Merck Sante Sas Derives de thiazolylpiperidine, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
CN1938046B (zh) 2003-11-06 2014-03-19 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
JP4954983B2 (ja) 2005-05-18 2012-06-20 ファーマサイエンス・インコーポレイテッド Ｂｉｒドメイン結合化合物
CN101535300B (zh) 2006-05-16 2014-05-28 埃格拉医疗公司 Iap bir域结合化合物
ATE543835T1 (de) 2007-07-16 2012-02-15 Genentech Inc Anti-cd79b-antikörper und immunkonjugate und anwendungsverfahren
MX341687B (es) 2010-02-10 2016-08-30 Immunogen Inc "anticuerpos cd20 y su utilización".
SG182724A1 (en) 2010-02-12 2012-08-30 Pharmascience Inc Iap bir domain binding compounds
ES2701076T3 (es) 2012-11-24 2019-02-20 Hangzhou Dac Biotech Co Ltd Enlazadores hidrofílicos y sus usos para la conjugación de fármacos a las moléculas que se unen a las células
WO2015127685A1 (en) 2014-02-28 2015-09-03 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Charged linkers and their uses for conjugation
WO2016086357A1 (en) * 2014-12-02 2016-06-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Methyl oxazole orexin receptor antagonists
US9987255B2 (en) 2014-12-19 2018-06-05 Merck Sharp & Dohme Corp. 5,5-bicyclic oxazole orexin receptor antagonists
CN104952808A (zh) * 2015-06-12 2015-09-30 广州先艺电子科技有限公司 一种预置金锡盖板及其制造方法
CN113350518A (zh) 2015-07-12 2021-09-07 杭州多禧生物科技有限公司 与细胞结合分子的共轭偶联的桥连接体
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
CN116143678A (zh) 2016-11-14 2023-05-23 杭州多禧生物科技有限公司 偶联连接体，含有此连接体的细胞结合分子-药物偶联物及其制备和应用
CN109776342A (zh) * 2019-02-26 2019-05-21 北京大学深圳研究生院 顺式β-氨基酸及其衍生物的合成方法
US20240132487A1 (en) * 2019-10-17 2024-04-25 Givaudan Sa Substituted azacyles as trmp8 modulators
CA3230737A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for cancer treatment and/or prevention

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816444A (en) * 1987-07-10 1989-03-28 Arizona Board Of Regents, Arizona State University Cell growth inhibitory substance
US4879278A (en) * 1989-05-16 1989-11-07 Arizona Board Of Regents Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15
US5091368A (en) * 1990-08-08 1992-02-25 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Biologically active compounds from blue-green algae
DE69230824T2 (de) * 1991-08-09 2000-07-27 Teikoku Hormone Mfg Co Ltd Neue tetrapeptidderivate
US5831002A (en) * 1992-05-20 1998-11-03 Basf Aktiengesellschaft Antitumor peptides
JP3523253B2 (ja) * 1992-05-20 2004-04-26 アボット ゲーエムベーハー ウント カンパニー カーゲー ドラスタチン誘導体
PL178766B1 (pl) * 1992-12-16 2000-06-30 Basf Ag Nowe peptydy
US5504191A (en) * 1994-08-01 1996-04-02 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters
US5530097A (en) * 1994-08-01 1996-06-25 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Human cancer inhibitory peptide amides
US5554725A (en) * 1994-09-14 1996-09-10 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Synthesis of dolastatin 15
US5807984A (en) * 1995-11-09 1998-09-15 Basf Aktienegesellschaft Oligopeptides, the preparation and use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CN1252806A (zh) 2000-05-10
US5965537A (en) 1999-10-12
CO4950525A1 (es) 2000-09-01
EP0981539A1 (en) 2000-03-01
CA2297164A1 (en) 1998-09-17
NO994364D0 (no) 1999-09-09
ZA981957B (en) 1999-09-09
HUP0001758A3 (en) 2001-12-28
WO1998040400A1 (en) 1998-09-17
BR9808017A (pt) 2000-03-08
AU6448298A (en) 1998-09-29
TW505657B (en) 2002-10-11
AR011957A1 (es) 2000-09-13
NO994364L (no) 1999-11-09
IL131596A0 (en) 2001-01-28
KR20000076099A (ko) 2000-12-26
HUP0001758A2 (hu) 2001-05-28
JP2001518084A (ja) 2001-10-09
AU744511B2 (en) 2002-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5965537A (en) Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus
US8163698B2 (en) Dolastatin 15 derivatives
WO2000002906A1 (en) Dolastatin 15 derivatives
US5741892A (en) Pentapeptides as antitumor agents
CZ376597A3 (cs) Derivát dolastatinu, způsob jeho přípravy a jeho použití
JP2002524570A (ja) Ｍｄｍ２および５３間相互作用の阻害剤としてのピペラジン−４−フェニル誘導体
US20100113305A1 (en) Oxazole and thiazole combinatorial libraries
US5939527A (en) Tetrapeptides as antitumor agents
JP2020500943A (ja) 抗菌ペプチド
MXPA99008067A (en) Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the c-terminus
CZ321399A3 (cs) Deriváty dolastatinu 15 s karbonylovými a heterocyklickými funkčními skupinami na Ckonci
CZ200168A3 (cs) Deriváty dolastatinu 15
Gomez-Paloma et al. S. Khochbin, M. Rodriquez, M. Taddei,* S. Terracciano, K. Sadoul 1511–1519 Design and Synthesis of Cyclopeptide
MXPA01000033A (en) Dolastatin 15 derivatives

Legal Events

Date Code Title Description
A1OB Publication of a patent application
AIPI Request for the grant of a patent on the basis of a substantive examination of a patent application
ODRP Renewal fee for the maintenance of a patent

Payment date: 20020310

Year of fee payment: 5

ODBI Application refused