TW448180B - Sulfated pentasaccharide(s) - Google Patents

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經："部屮-欠樣^^,-^:1,消於""^卬^, A7 B7 五、發明説明（1 ) 本發明關於一種糖類衍生物，含彼之藥學組成物，以 及該糖類衍生物在生產藥品上的用途。 肝素是一種來自生物源（如：小腸黏膜）的常用抗凝 劑。肝素可加速由抗_凝血酶m(AT_m)所引起之凝 血酶的去活化作用，在複合作用時所牽涉到的改變包括了 肝素及A T — ]I[二者的結構變化。凝血酶可調節血液凝結 之串聯反應中的最後一個步驟。凝血酶的主要功能是使纖 維蛋白原分解以產生纖維蛋白單體，此種單體可經由交叉 連結形成一種不溶於水的凝膠，一層纖維蛋白凝塊。 許多硏究都曾對在肝素中需要用來與AT—Π交互作 用的構造之特徵進行檢查。在肝素聚合物中有些部分對 AT — m僅具有低親和性，然而其它部分對肝素與AT -ΠΙ的聯結作用更爲重要。對片段型肝素的硏究結果是：鑑 定出具有連結至A T -瓜之具有最小的高親和性構造的五 糖片段（見，如：生理回顧’ 71 (2) ，488/9， 1 9 9 1 )。在此高親和性的片段中具有8個硫酸酯基團 。硫酸酯基圑中有四個基圑被認爲是片段連結至A T — m 上所必須有的構造（糖類化學及生化學的進展；

Vo 1 43 ;由R . S .狄普生，D .哈頓所編輯；哈寇 特布雷斯裘瓦*諾奇公司出版；B, Casu (第51〜127頁 )第6段），而其它成分則促成了更高的親和性。此發現 已在五糖片段的合成類似物中獲得了確認（見，如：

Angew. Chem. 32(12), 1671-1818, 1993 )。 對高親和性五糖片段的鑑定結果促成了合成其類似物 本紙張尺度適用中國國家摞準（CNS ) Α4規格（2丨0 X 297公釐） 4 - (諳先閱讀背面之注意事項再*Λ舄本頁) ,束. 訂 44 8 1 8 u A7 B7 五、發明説明（2 ) 之製備法的硏發。 被發現爲是有效的 洲專利8 4，9 9 :許多種這些分子 良的藥學性質，如 E P 4 5 4-2 類衍生物。這些糖 團：游離的羥基圑 所有在這些稍晚的 氨基葡聚糖型的小型合成糖類分子已經 及選擇性的抗-X a抑制劑，參見：歐 9。較晚提出之專利/專利申請中顯示 的變體具有類似甚至更高的活性以及改 :在 EP 529，715 及 2 0中所揭示的與氨基葡聚糖相關的糖 類衍生物缺乏氨基葡聚糖的特殊官能基 ，N —硫酸酯及N —乙醯基團。還有， 部 中 Jk ll X 消 人、 ii 卬 m 7個硫酸酯 ，一般認爲 可以得到臨 然而， 糖相關的糖 衍生物仍可 明的化合物 流血的危險 發的血小板 作用，有可 物半生期可 ，一天治療 療一次可使 病人複雜的 療法對醫院 基團。 :在五 床上可 令人意 類衍生 顯現出 顯示出 性且其 稀少症 專利申請案中所揭示之五糖都 因此，在抗血栓寡瀹類衍生物 糖化合物中至少需要7個硫酸 接受之抗血栓活性。 外的是：目前已發現有一組與 物僅具有4至6個硫酸酯基團 臨床上有效的抗血栓活性。另 其副作用較少。例如：該化合 中之低硫酸酯含量不會引起由 (HIT) 〔HIT是一種很 能會使病人死亡〕。還有，本發明化 帶有至少 的領域中 酯基團才 氨基葡聚 ，但此組 外，本發 物可降低 肝素所誘 嚴重的副 合物的生 況需要時 ，—天治 允許一天進行一次治療。如病人的情 一次要比一星期治療一次較佳。因爲 醫學治療得到較快的效果。由於可不需要給予 給藥計劃來進行治療，所以此種一天一次的治 的計算學來說較爲簡單。 (請先閱讀背面之註意事項再^寫本頁j 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -5 · 1 4 4 8 1 8 090· L 3α Α7 ----Β7 五、發明說明（3 ) 因此，本發明之化合物顯示出令人意外且精細平衡的 藥學剖面圖。 所以’本發明關於一種具有式（I )之糖類衍生物：

其中R 1爲（1 一 4 C )烷氧基；R 2和R 3係獨立地爲（ 1 一 4 C )烷氧基或◦ S 0 3 ;硫酸酯基團的全部數目爲 4，5或6個；且扭轉線所代表的化學鏈是在它們所附著 之6 -員環的平面上或平面下；或一種其藥學上可接受的 鹽。 本發明之化合物在治療及預防由凝血酶居間及與凝血 ®S相關的疾病上很有效。這包括了許多血栓性及前血栓性 狀態，在此種狀態中凝血串聯反應，包括但不倜限於：深 部靜脈血塞，肺部栓塞，在血管整形術或血栓溶解術後的 動脈再阻塞，在動脈損傷或侵襲性心臟手術之後的再狹窄 ，手術後靜脈栓塞或血塞，急性或慢性動脈粥狀硬化，中 風，心肌梗塞，癌症及轉移及神經退化疾病。本發明的糖 衍虫物也可做爲平滑肌細胞增生的抑制劑並可用於血管生 成，癌症及逆轉錄病毒感染（如：Η I V )的治療。 還有，本發明化合物可做爲在體外血液循環中的抗凝 劑及抗凝劑包膜，這種試劑在透析及外科手術中是必須的 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -6 - (請先間讀背面之注意事項再填寫本1·) -----κ---訂---------^ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 -448180 ___B7__ 五、發明說明（4 ) 本發明之化合物也可做爲玻管內或體外的抗凝劑。 根據本發明之較佳的糖衍生物具有式（I ) I其中之 D _單位具有下式：

R 1爲甲氧基；且R 2，R 3及R 4獨立地爲甲氧基或 〇 S 0 3 。 更佳之糖衍生物爲那些其中R 2爲甲氧基者。特別好的 糖衍生物爲R 3是甲氧菡者。最佳之糖衍生物爲其中R 4是 甲氧基者。 在（i - 4 C )烷氧基一詞中（1 — 4 C )烷基團是 一個帶有1至4個碳原子的側鏈型或直鏈型烷基團，如： 甲基，乙基，異丙基，特-丁基及此類物。最佳之烷基團 爲甲基。 補償帶電部分所用的平衡離子需爲藥學上可接受的平 衡離子如：氫，或是以鹼金屬或鹼土金屬離子（如：鈉， 鈣，或鎂）更佳。根據本發明的糖衍生物可依所說明之廣 爲人知的方法來製備並可用來合成寡糖。在這方面來看， 較佳之參考資料爲前述之歐洲專利E P 5 2 9 ，7 1 5 。一種適合用來製備式（I )所示之糖衍生物的方法，其 特徵是將帶有不同構造之受保護的單糖加以偶合以產生受 保護的雙糖，然後： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐） I ^---I------- ^ -—111·---訂--I--!_鍵 T (請先閱讀背面之注意事項再填寫本I·), 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 t t Je ^ ^ A7 ___________________ B7 五、發明説明（5 ) (a )將一種類型之受保護的雙糖偶合至另一類型之 受保護的雙糖上以產生受保護的四糖，此四糖再偶合至一 個受保護的單糖上以產生受保護的五糖；或 (b)將受保護的單糖偶合至受保護的雙糖以產生受 保護的三糖，此三糖再進一步偶合至受保護的雙糖上以產 生受保護的五糖； 然後，該受保護的基團被裂解開且游離的羥基團被硫 酸化，如此得到的化合物可再隨意地轉化成一種藥學上可 接受的鹽。. 這些單糖爲那些以所需要之烷基團來適當地加以官能 化或是被暫時性保護基團適當地加以官能化的D _葡萄糖 ，D—甘露糖，L-艾杜糖，D —葡糖醛酸或L 一艾杜糖 醛酸。 合適的保護基團爲本領域中所熟知的。較佳的保護基 團包括適用於羥基團之苄基和乙醯基，適用於糖醛酸中之 羧酸酯基團的苄基。其它保護基團如：苯醯，乙醯丙基， 烷氧苯基，氯乙醯基，三苯甲基，及此類基團使用時都可 有相同的成功率。糖類的偶合作用可依本領域中所已知的 方法來進行，如：將糖基-給予體之1 -位置進行去保護 作用，及/或將此位置進行活化作用（如：藉著製造一個 溴，戊烯基，氟，硫苷，或三氯乙醯亞胺衍生物）及以一 種隨意地受保護的糖基-接受體偶合該活化的糖基一給予 體。 本發明之化合物可以腸道內或腸胃道外的途徑給予以 本紙张尺度適用中圈國家標準（CNS > A4規格（2】0X297公釐} -8- (誚先閱讀背面之注意事項再填(ΪΤ本頁：>

I 4 481 8 Ο 部 中 火 準 Λ .Τ 消 t； 4- 竹 a 卬 對人類而言，每 毫克較佳。當與 ，「吉那洛等人 刷公司， 它們的生產）中 成固體劑量單位 藉著藥學上合適 乳液或噴霧（如 使用傳統添加劑 此類物質。一般 藥學上可接受之 之乳糖，澱粉， Α7 Β7 五、發明説明（6 ) 治療靜脈血栓或抑制平滑肌細胞的增生。 天每公斤體重之劑量爲〇 . 0 0 1〜1 0 藥學上合適的佐劑（如：在標準參考資料 著，雷明頓藥物科學」（1 8版，馬克印 1990，尤其是第8部分：藥學製品及 所說明的佐劑）混合時，該化合物可壓製 ，如：藥九，錠片，或製成膠束或栓劑。 的液體，此化合物也可以溶液，懸浮液， :鼻噴霧）等形式的注射製品來使用。 製備劑量單位（如：錠片）時可考慮 ，如：裝塡劑，調色劑，聚合物聯結劑及 而言，任何不會干抗活性化合物之功能的 添加劑均可使用。 可與組成物一起使用的載體包括適量 纖維素衍生物及此類物，或其混合物。 本發明以下列實施例做進一步說明。 實施例 實施例1(化合物32)的製法 GH雙糖16 (圖表1 + 2)的製法 化合物2 將化合物( 6 0克；可購買得到）與苄基溴（ 50 . 5毫升）一起溶於N，N —二甲基甲醯胺（858 毫升）中。在冷卻至+10 °C後，將氫氧化鈉之20%水 本紙张尺度適川中圃國家標率（CNS ) A4規格（230X 297公釐） -9 - (請先閱讀背面之注意事硬再填寫本1}

#-"•部中^"•^^♦、^^消於合竹私印^ 4481 8 〇 A7 __B7 五、發明説明（7 ) 溶液一滴滴地加入其中。攪拌1小時後，使溫度上升至 2 0 °C並將混合物再攪拌2 0小時。然後，將溶液倒入冰 水和甲苯的混合物中再加以萃取。將有機層加以濃縮並以 結晶化作用將粗產物純化以產生3 〇 . 〇克之化合物。 TLC : Rf=0 . 60 ’ 甲苯 / 醋酸乙酯·· 7/3，v 化合物3 將化合物_§_( 2 6 . 4克）溶於N，N -二甲基甲醯 胺（2 1 1毫升）中並於冰中加以冷卻。在氮氣下加入氫 化鈉（2.5克）。然後，將4 —甲氧基苄基氯（ 1 3 . 3克）一滴滴地加入其中並將混合物在室溫下攪拌 1小時。以醋酸乙酯稀釋該混合物，再以水（2 X )淸洗 之然後加以濃縮以產生粗化合物1 40. 7克。 -TLC : Rf = 〇 . 8 ◦，甲苯 / 醋酸乙酯：7/3，v 化合物4 將化合物K 3 4 . 9克）溶於6 0 %醋酸水溶液中 並在6 0°C下攪拌4小時。以甲苯稀釋該混合物並濃縮之 。以矽膠色層分析法加以純化後可產生2 6 . 4克之化合 物上。 TLC : Rf=〇 . 〇7，甲苯/醋酸乙酯：7/3，v 本紙張尺度適州中國國家摞準（CNS ) Λ·4規格（210X297公釐）-1〇 (讀先間讀背面之注意事項再頊寫本頁)

448180 Μ Β7 -------------------------------- ---------- 五、發明説明（8 ) 化合物5 (請先閱讀背面之注意事項再硝、"本頁) 在氮氣下，將化合物Κ 2 6 . 4克）溶於二氯甲院 〔2 6 3毫升）中。在室溫下將四氟硼酸三甲基氧鐡酯（ 1 1 . 6克）及2，6_二一特一丁基一4 一甲基吡啶（ 1 7 - 4克）加入其中。4小時後，將混合物倒入冰水中 並以二氯甲烷萃取之。以碳酸氫鈉淸洗該有機層並蒸發之 。以矽膠色層分析法將粗產物加以純化以產生1 8 . 5克 之化合物。 TLC:Rf = 〇 . 25 ，甲苯/醋酸乙酯：7/3，v 化合物7 將化合物旦_(3-甲基一 1，2，4，6_四乙醯基 一艾杜糖）（48. 4克）溶於甲苯（175毫升）中。 在氮氣下，將乙二醇（2 0毫升）及三氟化硼醚酸二乙酯 (1 Μ，溶於甲苯中；1 3 4毫升）加入其中。攪拌1小 時後，加入碳酸氫鈉水溶液（4 0 0毫升）並將混合物再 攪拌1小時。然後，將混合物倒入醋酸乙酯中。以水淸洗 有機層二次並濃縮之。以矽膠層分析法加以純化後可產生 29.6克之化合物1。 TLC :Rf=〇 ♦ 45，甲苯/醋酸乙酯：6/4，ν / v 本用中國國家摞準（CNS ) A4規格（2丨0 X 297公釐） 11 - Α7 448 1 8 Ο __Β7 • "» ' *. — ·‘—— — — ·一< - . - ... ~ -· ·_ΙΙΙΙΙ 一 __·._ 丨_|圓·· _ — ____ 五、發明説明（9 ) 化合物8 在氮氣下，將化合物K 1 7 · 5克）及化合物2_( 28.2克）溶於甲苯（525毫升）中。加入粉狀的分 子篩（4 A )後將反應冷卻至2 0 °C。新鮮製備一種 0 . 1M之含有N —碘化琥珀醯亞胺（1 7 · 4克）及三 氟甲磺酸（1 · 3 8毫升）的二噁烷/二氯甲烷（1/1 ，v / v )溶液’並於連續的氮流下將它一滴滴地加入前 述之反應物中。1 0分鐘後，過濾該紅色反應混合物並以 硫代硫酸鈉水溶液及碳酸氫鈉水溶液連續淸洗之。於真空 器中將有機層加以濃縮，可分離出3 0 . 0克之化合物 〇 TLC : Rf=0 . 45，二氯甲烷/醋酸乙酯：8/3 1 v / v •化合物9 將化合物K 3 0 ‘ 0克）溶於4 6 0毫升甲醇/二 噁烷（1/1，v/v)中並加入丁醇酸鉀加以皂化。 15分鐘後，以"杜威士 50WX8H + —形# ( Dowex 50W X 8H + -form )中和該混合物並於真空器中加以濃縮。 以砂膠層析法進行純化可產生1 7 . 4克之化合物9 。 TLC : Rf 二 0 . 25 ，二氯甲烷/甲醇：95/5 ，

V / V 化合物1 0 本紙张尺政诚用中國國家標丰{ CNS ) Λ4規格（210X 297公釐）_ 12 - — _^---^----—— (讀先閲讀背面之注^^項再楨鸿本頁) 訂 赶-'',;;;部屮^打^-而^^丁，消4=;合作^-印5^ 448 18 A7 B7 五、發明説明（彳〇 ) 在氮氣下，將化合物κ 1 7 . 4克）溶於N，N — 二甲基一甲醯胺（77毫升）中。將1 ，2 —二甲氧基丙 烷（2 6毫升）及對-甲苯磺酸加入其中並將混合物攪拌 3 0分鐘。以碳酸氫鈉水溶液稀釋該混合物並以醋酸乙酯 萃取之’在蒸發掉溶劑後可產生19 . 7克之化合物J_Q_ 〇 TLC : Ri=〇 · 45 ，二氯甲烷 / 甲醇·· 95/5 ， 化合物1 1 將化合物1 0溶於N，N-二甲基甲醯胺（24 . 4 毫升）中並將其冷卻至0 °c。在氮氣下，將氫化鈉（ 1 .47克：60%分布於油中）及職甲院（2 . 36毫 升）加入其中。1小時後，將過量的氫化鈉中和掉並以二 氯甲烷萃取該混合物再加以濃縮以產生2 0 . 0克之化合 物1 1。 TLC : Rf=〇，85 ’ 二氯甲院/甲醇：95/5， v / v 化合物1 2 將化合物11 (18 . 4克）溶於二氯甲烷（838 毫升）及水（168毫升）中。加入2，3 —二氯基—5 ，6 —二氰基_1 ’ 4 一苯並醌（7 . 1克）。然後，將 混合物在4 °C下攪拌1 8小時。將混合物倒入碳酸氫鈉水 本紙張尺度適州中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 13

(請先間讀背面之注意事項忑^湾本頁；T

448180 A7 B7 五、發明説明（11) 溶液中並以二氯甲烷萃取之。將有機層加以濃縮以產生 12.7克之化合物1 2。 TLC : Ri=〇 . 40，二氯甲烷 / 甲醇· 95/5， v / v 化合物1 3 根據化合物1 1之製備方法的相同步驟來將化合物 12轉化成標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 48，甲苯/醋酸乙酯：1/1 ，v / v 化合物1 4 將化合物13 (2 .5克）溶於醋酸（14. 6毫升 )及水（6 . 1毫升）中，並將混合物在室溫下攪拌一整 夜。與甲苯一同蒸發之並以矽膠色層分析法加以純化以產 生1 · 9克之化合物14。 TLC:Rf=〇 . 31，醋酸乙酯，v/v 化合物1 5 在含化合物14 (1 . 7克）的二氯甲烷（9毫升） 溶液中加入2，2，6，6 —四甲基一 1 一哌啶氧基（5 毫克），飽和的碳酸氫鈉溶液（5.8毫升），溴化鉀（ 32毫克）及四丁基銨化氯（42毫克）。將混合物冷卻 至0°C並在1 5分鐘內將含下列物質的混合物加入其中： 本紙張尺度適用中囤國家標率（CNS ) A4規格（210 X 29<7公釐）-14- {請先閱讀背面之注意事項再填将本頁} -5 448 18 A7 B7 五、發明説明（12) 飽和的氯化鈉溶液（6 . 5毫升），飽和的碳酸氫鈉溶液 (3 · 2毫升）及次氯酸鈉（1 , 3M; 7 . 3毫升）。 將混合物攪拌1小時後以水稀釋之，並以二氯甲烷萃取之 (3次）。以鹽水淸洗有機層，並於硫酸鎂上加以乾燥， 過濾後蒸發至乾燥以產生1 . 7 4克的粗化合物15。 TLC : Ri = 〇 _ 14，二氯甲烷/甲醇：9/1 ，v / v 甲基鄰（苄基2，3 —二一鄰_甲基一a — L—吡喃艾杜 糖基糖醛酸酯）（1 — 4) _2_鄰-苄基—3，6 —二 —鄰一甲基一 α — D -吡喃葡糖16。 在氮氣下，將1 _ 6 8毫升之苄基溴及1 . 1克之碳 酸氫鉀加入含1 _ 7 4克化合物1 5的Ν，Ν —二甲基甲 醯胺溶液中。將溶液攪拌9 0分鐘後，加入水並以醋酸乙 酯萃取該混合物。將有機層蒸發後以矽膠層析法加以純化 ’可分離出1 6 4克之化合物16。 TLC :Rf = 〇 . 50，甲苯/醋酸乙酯：1/1 ，ν X ν EF -雙糖2 5的合成（圖表2 + 3) 化合物1 7 在氮氣下，將化合物1 2 (10 .5克）溶於乾N， N—二甲基甲醯胺（1 7 8毫升）中並將其冷卻至0°C。 將氫化鈉（1 . 9 1克；6 0 %分佈於油中）加入其中再 本纸張尺度適州巾國國家標準（CNS ) Α4规格（2】0X 297公釐）-15- (誚先閲讀背面之注意事項再填寫本I)

-、1T 4 4 8 1 8 0 A7 ______________________________ B7 五、發明説明（彳3 ) ~ 將苄基溴（3 . 3鼋升）一滴滴地加入其中。經過3 〇分 金里使反應兀成後’將過量的氫化鈉加以中和。加入水並以 醋酸乙醋卒取該混合物。將溶劑蒸發掉可產生1 3 . 6克 之化合物17。 TLC : Rf= = 〇 _ 50，甲苯/醋酸乙酯：]_/工，

V / V 化合物1 8 根據製備化合物1 4的相同步驟將化合物1 7轉化成 標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 68，二氯甲烷/甲醇：9/1 ，v 化合物1 9 ' 根據製備化合物15的相同步驟將化合物18轉化成 標題化合物。 TLC : Rf = 〇 · 14，二氯甲烷/甲醇：9/1 ，v 館，"部中呔^^^，-"1-消扑"竹"卬^

Hi -Ϊ — I I HI -I 1-i--f HI ί n .- -- —If . II Τ» . , i /1: \ (請先閲讀背面之注意事項再磧打本7TC / v 化合物2 0 根據製備化合物1 6的相同步驟將化合物1 Q轉化成 標題化合物。 TLC : Ri=0 . 38，二氯甲烷/ 甲醇：85/1 5 本纸张尺度適中囤國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）_ 16 - 1 8 0 Α7 Β7 克、發明説明（14 ) 化合物2 1 (諳先閱讀背面之注意事項再磧寫本頁) 將化合物2 0 (9 . 9克）溶於300毫升甲醇（乾 式）中並於氮氣下進行回流。將1 Μ甲氧化鈉溶液（ 6 5 . 2毫升）一滴滴地加入其中並攪拌3小時。然後， 將溫度冷卻至室溫並加入1 Ν氫氧化鈉（2 2 . 2毫升.） ，苒攪伴9 0分鐘°以Dowex 50W X 8H + -form (杜威士 5 〇 W X 8 Η +形）中和之，將溶劑蒸發後可產生粗剩餘物 〇 在氮氣下將Ν，Ν —二甲基甲醯胺（192毫升）及 粉末狀的分子篩（4 A )加入其中。然後，將碳酸氫鉀（ 3 . 2克）及苄基溴（4 . 8毫升）加入其中並將混合物 潰拌5小時，接著，再加入醋酸乙酯並以水清洗混合物。 將溶劑蒸發掉再以矽膠層析法純化該粗產物以產生 .6 . 1 9克之化合物2 1及1 . 88克回收的化合物20 〇 TLC : Ri = 〇 · 74，二氯甲烷/ 甲醇：9/1 ，ν 化合物2 2 將化合物2 1 ( 6 · 2克）溶於4 0毫升之二噁烷中 。將乙醯丙酸（2 . 1克），二環己基碳化二亞胺（ 3 . 7 5克）及4_二甲胺基吡啶（0 · 2克）加入其中 ，並在氮氣下將混合物攪拌2小時。加入醚（9 5毫升） 本紙張尺度诮用中國國家榇準（CNS ) A4規格（210X297公釐）-17 _ 448 1 8 A7 B7 五、發明説明（15 ) 並將沈澱物過濾除去。以碳酸氫鈉水溶液淸洗有機層並加 以濃縮。自二乙醚/庚烷中進行結晶化作用以產生6 . 2 克之化合物22。 TLC : Rf=0 . 26，二氯甲烷/丙酮 95/5，v 化合物2 3 在氮氣下將化合物22 (6 . 1克）溶於醋酸酐（ 2 5 6毫升）中並將其冷卻至-2 0°C。在3 0分鐘內將 含硫酸（4 . 9毫升）的醋酸酐（49毫升）混合物一滴 滴地滴入其中。6 0分鐘後，將醋酸鈉加入其中直至混合 物之p Η値被中和。加入醋酸乙酯及水並將有機層加以濃 縮。以矽膠層析法將產物加以純化以產生4 . 2克之化合 物2 3。 丁 LC : Rf = 〇 . 63 ，二氯甲烷/丙酮：9/1 ，ν 化合物2 4 部 屮 夾 η _τ II- 合 竹 卬 ίί 先間讀背面之註意寧項典楨寫本頁) 將化合物23 (4 . 2克）溶於四氫呋喃（4 2毫升 )中並加入哌啶（4 . 1毫升）。在室溫下將混合物攪拌 —整夜。加入醋酸乙酯並以0.5Ν氫氯酸淸洗該混合物 。將有機層加以濃縮後以矽膠層析法將剩餘物加以純化以 產生化合物2 4 3 . 2克。 TLC : Rf=〇 . 33，二氯甲烷/醋酸乙酯：1/1 本紙張尺度適扣中國國家標準（CNS ) Λ4规格（2〗Ο X 2们公釐）-18-

448 1 BO A7 B7 五、發明説明（16 ) (#先閱讀背面之注意事項再功轉本商) 鄰一（苄基2 ，3 —二一鄰—甲基—4 —鄰一乙醯丙醯基 一；S — D—吡喃葡糖基糖醛酸酯）一（1 — 4) 一 3 —鄰 一乙醯基一 2 —鄰一苄基一 6 _鄰一甲基一 D —吡喃葡糖 基三氯乙醯亞胺酯25 在氮氣下，將化合物2 4 (1.59克）溶於二氯甲 烷中。將三氯乙腈（1 . 1毫升）及碳酸鉋（72毫克） 加入其中並將混合物攪拌1小時。將碳酸鉋過濾除去並將 濾液加以濃縮。以矽膠層析法加以純化後可產生1 . 5 7 克之化合物25。 TLC ·· Rf = 0 . 60，甲苯 / 醋酸乙酯：3/7，v E FGH —四糖2 7的合成（圖表4) 化合物2 6 將化合物1 6 (0 . 530毫克）及化合物25 ( 0 . 5 9 8毫克）的混合物與乾甲苯一起蒸發至乾燥並將 剩餘物溶於8.2毫升的乾二氯甲烷中。加入粉未狀的分 子篩（4A)並在氮氣下將混合物冷卻至一 20 °C，再攪 拌3 0分鐘。在所產生的懸浮液中加入三氟甲磺酸三甲矽 烷酯（相對於化合物2 5爲15莫耳％)。攪拌10分鐘 後，將碳酸氫鈉加入其中，再將混合物過濾後，將水和二 氯甲烷加入其中。然後，將有機層加以萃取，濃縮，以矽 本紙张尺度適州中國國家標隼{ CMS ) A4规格（2丨0 X 297公釐）-19 - 448 18 0 A7 B7 五、發明説明（17 ) 膠層析法將粗產物加以純化以產生0 . 6 2克之化合物 2 6° TLC : Rf = 0 47，甲苯/醋酸乙酯：3/7，v / v 甲基一鄰一（苄基2，4 —二一鄰一二甲基一；S — D —哦 喃葡糖基糖醛酸酯）—（1 — 4)—鄰一（苄基2，3 — 二—鄰一甲基—α — L—吡喃艾杜糖基糖醛酸酯）一（1 —4) — 2—鄰一爷基一3，6 —二一鄰—甲基—a — D 一咄喃葡糖苷2 7 在含化合物26 ( 0 . 5 8克）的吡啶溶液中加入含 如下群體之混合物：2 . 76毫升醋酸，0 . 32毫升水 合肼及2 . 1毫升D[t π定。9分鐘後，加入水和二氯甲院並 以1 N氫氯酸及碳酸氫鈉淸洗有機層。以矽膠層析法加以 純化以產生0 _ 2 7克之化合物2 7。 TLC : Rf = 〇 . 45，甲苯/醋酸乙酯：3/7，v / v #τ;ί,•部屮夾"^而··^;-7消於合作打印家 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) DEFGH -五糖3 2的合成方法（圖表4 + 5)實施例 Ϊ 化合物2 9 將由化合物2 7 (1 50毫克）及化合物28 (76 毫克）（參考資料：生物有機及醫學化學，第2冊，11 號’ 1267〜1280，1994)所組成的混合物與 本紙张尺度適州中囤國家標準（CNS > Α4规格（210Χ297公釐） -20- A7 4481 8 u B7 f« I, ··_· I 111 — J I -- ’ ， ' 1 " -— 丨· _ 「- |_ - — - _·Μ 五、發明説明（18 ) 乾甲苯一同蒸發並將剩餘物溶於7·5毫升之乾二氯甲烷 中》在氮氣下將粉末狀的分子篩（4 A )加入其中再將混 合物冷卻至—2 0°C。攪拌2 0分鐘後，將三氟甲磺酸三 甲矽烷酯（相對於化合物2 8爲1 5莫耳％)加入其中。 攪拌3 0分鐘後，將碳酸氫鈉水溶液加入其中。過濾該混 合物並以水淸洗有機層。濃縮該溶劑後將產生的粗產物以 矽膠層析法加以純化以產生1 3 6毫克之化合物29。 TLC : Rf=0 . 33，甲苯/醋酸乙酯：4/6，v 化合物3 0 以由特一丁醇（8毫升）和水（1毫升）所組成的混 合物稀釋化合物29。在此溶液中加入1 2 2毫克之1 〇 %碳上鈀並在氫氣下將混合物攪拌一整夜。將碳上鈀過濾 去除並將溶液加以濃縮以產生8 4 . 5毫克之化合物30 〇 TLC ·· Ri=0 . 49，醋酸乙酯/吡啶/醋酸/水： 13/7/1. 6/4，v/v 化合物3 1 將化合物3 0 (84. 5毫克）溶於5毫升之 0 · 3 N氫氧化鈉中並攪拌3小時。然後，將反應混合物 以0 . 5N氫氯酸中和並蒸發之。在SephadexG25分析注 ("塞佛得斯"G 2 5分析柱）上以水/乙腈：9 / 1 ( ϋ张尺度適用中國國家標隼（CNS ) Α4規格（210X297公釐） .21 . (諳先間讀背面之註意事項再填巧本頁) 訂 耔妒部屮夾^^-^々-1···"於合".^印 4481 8 0 A7 B7 五、發明説明（19 ) v/v )將剩餘物脫鹽並將它通過一個短的杜威士 5 0W X 8H + —型（Dowex50WX 8H+ —型）分析柱。蒸發後可 分離出7 5 . 6毫克之化合物3 1。 TLC : Rf=0 . 43，醋酸乙酯/吡啶/醋酸/水： 8/7/1. 6/4，v/v 甲基鄰-(2，3，4 一三一鄰一甲基一 6 —鄰一磺基一 a— D —吡喃葡糖基）一（1 — 4) 一鄰一（2，3 —二 一鄰一甲基一沒一D —吡喃葡糖基糖醛酸）一（1 — 4) —鄰-(6 —鄰一甲基2，3—二一鄰一磺酸一a — D — 吡喃葡糖基）一（1 — 4)—鄰一（2，3 —二一鄰—甲 基一 α — L—吡喃艾杜糖基糖醛酸）_ (1 — 4) 一 3， 6 —二—鄰—甲基一2 —鄰—擴基一 α — D — D比喃葡糖苔 ，六鈉鹽3 2 - 將化合物31 (30 . 6毫克）溶於2 . 15毫升之 Ν，Ν-二甲基甲醯胺（蒸餾的；乾式）中並在氮氣下將 三乙胺化硫三氧化物複合物（1 2 0毫克）加入其中。在 5 5 °C下，將混合物攪拌一整晚。將碳酸氫鈉的水懸浮液 加入其中。在室溫下將混合物攪拌1小時再將溶劑蒸發掉 。將剩餘物溶於水（2毫升）中並於 '' 塞佛得斯"G — 25分析柱上以水/乙腈：9/1(v/v)將它脫鹽。 在"杜威士 〃 5 0 W X 8 N a + —分析柱上以水爲洗堤液將 分離出的產物進行洗堤可產生42.5毫克之戊糖化合物 3 2° 本紙张尺度通用中闽國家榇準（CNS ) Λ4規格（2〗0 X 297公釐）-22 - (請先間讀背面之注f項再¾¾本頁) 訂 448180 A7 B7 _________.…---- . _________ ----- - 五、發明説明（2〇 ) C α ] 2 0 D = + 5 6 . 8 ( c - 1，Η2〇）

(讀先閱讀背面之注意事項再填巧本J 成苷異構體的質子化學移動：5 . 32 ’ 5 · 22，4 . 97，4 . 89 及 4 . 24ppmo 實施例Π (化合物3 8 )的製法 ' EFGH —四糖34的合成（圖表4) 化合物3 3 根據化合物2 6之製法的相同步驟將化合物-25¾化 合物2 0進行偶合以產生標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 47，甲苯/醋酸乙酯：3/7，ν 甲基一鄰一（苄基2 ，4一二一鄰一二甲基-召一D_ti比 喃葡糖基糖醛酸酯）—（1 — 4)—鄰一（3 —鄰一乙醯 基一 2 —鄰一苄基一6 —鄰—甲基一a — D—吡喃葡糖基 )一（1 — 4)—鄰一（苄基 2，3 —二一鄰—甲基 —L 一吡喃艾杜糖基糖醛酸）一（1 — 4) 一 2，3 —二 一鄰一苄基一 6 —鄰一甲基—α — D —吡喃葡糖苷3 4 根據化合物2 7之製法的相同步驟將化合物3 3轉化 成標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 39，庚烷/醋酸乙酯：3/7，ν / v DEFGH —五糖3 8的合成方法（圖表4 + 5)(實施 本紙張尺度適州中國國家標率（CNS ) Μ规格（210X297公釐）-23 - 〇8ΐ8ϋ 射"部屮，欠^if^d;l,i^;合竹.^'印％ Α7 Β7 五、發明説明（21 ) 例]I ) 化合物3 5 根據化合物2 9之製備方法中的相同步驟將化合物 及及化合物2 8進行偶合以產生標題化合物。 TLC : Rf = 0 . 60 ，甲苯/醋酸乙酯：3/7，v / v 化合物3 6 根據化合物3 0之製備方法中所說明的相同步驟將化 合物3 5轉化成標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 39，醋酸乙酯/吡啶/醋酸/水： 13/7/1 , 6/4，v/v 化合物3 7 、 根據化合物31之製備方法中所說明的相同步驟將化 合物_11轉化成標題化合物。 TLC : Rf = 〇 . 32，醋酸乙酯/毗啶/醋酸/水： 1 3/7/1 . 6/4，v/v 甲基鄰_ (2，3 ，4 —二一鄰一甲基一6 -鄰一擴基一 α—D —吡喃葡糖基）—（1 — 4)—鄰—（2，3 —二 —鄰一甲基—沒一 D —吡喃葡糖基糖醛酸酯）一（1 — 4 )—鄰一（6 —鄰—甲基一 2，3 —二一鄰一磺基一α-D —吡喃葡糖基）—（1 — 4)—鄰一（2，3 —二—鄰 本紙张尺度適州中圈國家標準（CNS ) Α4規格（21〇Χ29Χ公釐）-24 - (τί先聞讀背面之注意事項再磧轉本頁) 一丁 、ps 馨， A7 B7 五、發明説明（22 ) —甲基—α — L 一吡喃艾杜糖基糖醛酸酯）一（1 — 4) ~6 —鄰一甲基—2，3 —二—鄰—礎基—〇：— D —批喃 葡糖苷’七鈉鹽38 根據化合物3 2之製法中所描述的相同步驟將化合物 .3 7轉化成標題化合物。 〔a〕20D = +53.6(c = l，H2〇) 成苷異構體的質子的化學移動：5 · 32，5 . 23， 4.99，4.9 及 4.23ppm。 實施例瓜（化合物5 6 )的製法 GH —雙糖5 0的合成方法（圖表1 + 2) 化合物3 9 根據化合物1 1之製法中的相同步驟將化合物轉化 成標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 52，二氯甲烷/丙酮：98/2， v / v 化合物4 0 將化合物3 9 (32 _0克）溶於甲醇（538毫升 )中並加入對一甲苯磺酸（1 · 5 7克）。在室溫下將混 合物攪拌1 . 5小時》以三乙胺中和混合物後再將它加以 濃縮。以矽膠色層分析法將產物純化，可得1 1 . 9克之 化合物40 °TLC :Rf=〇 . 56，二氯甲烷/甲醇 '· 9/1 5 ύ / y 本紙张又度適州中國國家梯準（CNS ) A4规格（210X297公釐）_ 25 - (誚先間讀背面之注意事項再硪寫本頁) -5 經 7;!,.部中士'^^^:^5消於合竹^印—"· 448 1 8 ϋ Α7 _________________________________________Β7_ 五、發明説明（23 ) 化合物4 1 根據化合物之製法中的相同步驟將化合物4 〇轉化 成標題化合物。 TLC : Ri = 〇 . 18，甲苯/醋酸乙酯：7/3，v / v 化合物4 2 根據化合物2,4 .之製法中的相同步驟將化合物旦_轉化 成標題化合物。 化合物4 3 根據化合物ϋ之製法中所描述的相同步驟將化合物 4 2轉化成標顆化合物。 化合物4 4 在相同於化合物,2. 6之製法中所描述的狀況下進行化 合物4 3與化合物4 1的偶合反臏。 TLC : Rf=〇 . 28，甲苯/醋酸乙酯：6/4，ν / v 化合物4 5 根據化合物_2__之製法中的相同步驟將化合物4 4轉化 成標題化合物。 本紙張尺度珀用，卜國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）.2β -

--：---；-----^取------訂 (筇先閱讀背面之注意事項-"填寫本頁)

4 4 8 18 u Α7 Β7_ 五、發明説明（24 ) TLC :Rf=0 . 09，甲苯/醋酸乙酯：3/7，v /v 化合物4 6 根據化合物1 0之製法中的相同步驟將化合物4 5轉 化成標題化合物。 TLC:Rf=0，52，醋酸乙酯 化合物4 7 於氮氣下，將化合物4 6 ( 1 0 . 4克）溶於吡啶（ 乾式〕（1 0 2毫升）中，並在其中加入由如下群體所組 ' 成的混合物：醋酸酐（3 4毫升），吡啶（乾式）（ 1 02毫升）及1 0毫克之4 —二甲胺基毗啶。在室溫下 將反應混合物攪拌一小時並加以濃縮，將剩餘物與乾式甲 苯共同蒸發以產生1 1 _ 9克之化合物4 7。 丁 LC : Rf=〇 . 50 ’ 甲苯/醋酸乙酯：1/1 ，v 化合物4 8 將化合物4_7_ (11. 9克）溶於甲醇（90毫升） 中後再加入1 8 0毫克之對一甲苯磺酸並在室溫下將混合 物攪拌一整夜。以醋酸乙酯稀釋混合物並以水淸洗之（ 2 X )再加以濃縮。以矽膠層析法將粗產物純化以產生 6 . 2克之化合物48 ^ 本紙張尺度適抝中國國家標準（CNS ) Μ規格（21〇17^7^釐) -27- (請先閱讀背面之注意事項再填，"本頁j

A7 ________________________________________________________B7 五、發明説明（25 ) TLC : Rf = 0 . 2δ，甲苯/醋酸乙酯：3/7 , y / v 化合物4 9 根據化合物丄i之製法中的相同步驟將化合物4 8轉 化成標題化合物。 TLC : Rf = 0 . 24，二氯甲烷/甲醇：9/1 ，v / ν 甲基鄰一（苄基2 —鄰一3 —鄰一甲基一a — L〜吡喃艾 杜糖基糖醛酸酯）—（1 — 4) — 2 —鄰—苄基~3，6 一二一鄰一甲基~ α —ϋ —吡喃葡糖苷5 0 根據化合物H之製法的相同歩驟將化合物4 9轉化 成標題化合物。 TLC : Rf = 〇 . 37，二氯甲烷 / 甲醇·· g/ι ，ν / ν 經沪部t^-if:ifXJd消抡合作幻卬¥ EFGH —四糖5 2的合成（圖表4) 化合物5 1 根據化合物ϋ之製法的相同步驟將化合物25¾化 合物且1加以偶合以產生標題化合物。 TLC : Rf=〇 , 52，二氯甲烷 / 甲醇·· 98/2， ν / ν -28- 本紙張尺度適圯中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公麓） :¾¾，部 t^^ί?·",Α τ,·;ί1贽合作"卬^ 448180 A7 —· _ _ _ ---—— 五、發明説明（26) ~~ 甲基一鄰一（苄基2 ，4 —二-鄰—二甲基一召—D—d比 喃葡糖基糖醛酸酯）—（1 — 4)—鄰一（3 —鄰—乙醯 基-2 —鄰—苄基一 6 —鄰一甲基一 a__D 一吡喃葡糖基 )—(1~>4) 一鄰—（苄基2 —鄰—乙醯一 3_鄰一甲 基-甲型—L—吡喃艾杜基糖醛酸酯）一— 4) 一2 一鄰—苄基一3 ，6 —二—鄰—甲基一 a_D —吡喃葡糖 苷5 2 根據化合物之製法中的相同步驟將化合物5 1轉 化成標題化合物。 yLC : Rf=〇 . ,二氯甲烷/甲醇：’ V / Υ DEFGH -五糖5 6的合成方法（圖表4 + 5 )(實施 例瓜） 化合物5 3 根據化合物2 9之製法中的相同步驟將化合物2 8及 化合物5 2加以偶合以產生標題化合物。 TLC : Rf=〇 . 63 ’ 二氯甲烷/甲醇：98/2， v / v 化合物5 4 根據化合物3 0之製法中的相同步驟將化合物5 3轉 化成標題化合物。 TLC : Rf=0 . 51 ，二氯甲院/甲醇：8/2，v 本紙張尺度適扣中圃國家標牟（CNS ) A4规格（2l〇X297公缝）-29 - (1£先閱讀背面之注意事項再填"本頁) 訂 fr. 4 ^ § - Α7 Β7 五、發明説明（27)

/ V 化合物5 5 根據化合物3 1之製法中的相同步驟將化合物5 4轉 化成標題化合物。 TLC : Rf = 〇 · 32，醋酸乙酯/吡啶/醋酸/水： 10/7/1. 6/4，v/v 甲基鄰一（2，3 ，4一三—鄰一甲基一6 —鄰一磺基一 α — D — 吡喃葡糖基）—（1-4)—鄰一（2，3 —二 一鄰一甲基—吡喃葡糖基糖醛酸）一（1->4) 一鄰一（3 -鄰一甲基一 2 -鄰一擴基一 α — L — D比喃艾 杜糖基糖醛酸）—（1 — 4) 一3，6 —二一鄰一甲基一 2 —鄰—磺基一 ct — D -吡喃葡糖苷，七鈉鹽5 6 根據化合物3 2之製法的相同步驟將化合物5 5轉化 成標題化合物。 [λ } 2 0 〇 = + 5 0 . 2 ( c = 1 . 〇 5 > Η 2 Ο ) 經".部中^"-^^.-";^消'],!、合作^印5^ (誚先閱讀背而之注意事項再填寫本頁) 成苷異構體的質子的化學移動：5 . 32，5 . 29及 4 · 8 9 ρ p m。 實施例IV (化合物8 0 )的製法 化合物5 8 將Et3N(43毫升，0.3莫耳），4 一二甲胺基 吡啶（156毫克，1 · 3毫莫耳）及Ac2〇 (23毫升 本紙張尺及適中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2〗0Χ 297公釐）-30 - A7 __二—___ _____Β7 五、發明説明（28 ) 1 0.29 莫耳）加入含—5 7 (56.2 克，0.128 莫耳）（比洛尼等人著，澳洲化學期刊，1 9 8 8，4 1 ，9 1〜102)的CHsC 12 (360毫升）溶液中。 3 0分鐘後，以5%KHS〇4，H2〇，飽和 NaHCOs水溶液’ H2〇及乾（Na2S〇4)連續淸洗 該混合物。蒸發後可得粗58 ;TLC-Rf〇.41* 3 _ 1 己院/ EtOAc。 化合物5 9 在4 T：下’將乙醇胺（4 · 9毫升，80毫莫耳）加 入一含有粗,5 8, (11 . 8克，32毫莫耳）的THF ( 2 2 0鼋升）溶液中。在4 °C下經過1 6小時後，在籠I氣 下將三氯乙腈（6 5毫升，6 4 4毫莫耳）及K2CO3 ( 8 . 3克’ 64 . 4毫莫耳）加入上述混合物中。在室溫 下1 6小時後，過濾該溶液並加以濃縮。經分析柱層析法 (4:1環己烷/EtOAc)。 t · 化合物6 1 將三氟酸三甲矽烷酯的溶液（〇 . 〇 4M，溶於 CH2C12中；9 6毫升，3 8毫莫耳）在氬氣下，一 滴滴地加入一冷卻的（一 2 0°C)溶液中，此溶液是由提 供者亞胺酸酯5 9 (1 1 . 93克，25毫莫耳）及接受 者6_0 (9.2克，19. 8毫莫耳）（P.J.嘉格， H.哈特伯，、、糖硏究1961，93，C10)")溶 ^ . ~ -- - — 圓__ 圓 u|| _________ _ ___ _ ___ _ __ 本紙張尺度.適州中國國家標準（CNS ) A4规格（2丨0 X 297公釐）-31 _ --;---.------- (謂先Μ讀背面之注意事項再填寫本裒} -6 -考· 448 t B 0

A B 五、發明説明（29 ) 於含4A粉未狀分子篩的CH2C I 2 ( 1 9 0毫升）中所 組成的。3 0分鐘後，將固態N a H C Ο 3加入其中再將溶 液加以過濾，以水淸洗，乾燥之（N a，S ◦ 4 )並加以濃 縮將此剩餘物在E t 2〇中進行結晶可產生6 1 (產量8 2 % )。 熔點：1 3 8 °C。 化合物6 2 將化合物61 (1克，1 . 3毫莫耳）溶於2 : 1甲 醇/CH2C12( )中，再將鈉（373毫克， 0 . 6 5毫莫耳）加入其中。將混合物在室溫下攪拌1小 時後以a杜威士 5 Ο Η +及（Dowex 50H+)樹脂中和之，過 濾並濃縮後可得粗62。 化合物6 3 將NaH(40.5毫克，1.68毫莫耳）一部分 一部分加入一冷卻的（0 °C ) D M F ( 9毫升）溶液，此 溶液中含有粗6 2 (950毫克）及Mel (0.1毫升 ，1 _ 5 5毫莫耳）。在室溫下2小時後加入M e Ο Η並 將混合物倒入Η 2 〇中。以E t ◦ A c萃取產物並以水淸洗 ，乾燥（N a 2 S 0 4 )後濃縮之。將剩餘物進行分析柱色 層分析法（3 : 1環己烷/ E t Ο A c )以產生純63 ( 自6 2的產量爲86%):熔點137°C(Et2〇)。 本紙张尺度趟扣中國國家榇準（CNS ) A4规格（2!〇Χ297公釐）-32 - (請先閱讀背面之注意事项再填ΐ?本頁) Γ --" ' I». _ 448180 A7 ____ B7 五、發明説明（3〇) 化合物6 4 將化合物且i ( 1 1 6克，1 . 5 6毫莫耳）溶於 1 : 3H2〇/MeOH (40毫升）中&將此溶液在有對 —甲苯磺酸（2 3 0毫克’ 1 · 5 6毫莫耳）的存在下於 8 〇 °C下加熱。3小時後’以N a H C 〇 3中和該混合物並 加以濃縮。將剩餘物進行分析柱層析法（3 : 1環Β院/ 丙酮）以產生64 (產量89%) :TLc Rf 0.28，2:1環己烷/丙酮。 甲基鄰一（苄基2，3 —二一鄰一甲基一/3 — d —吡喃葡 糖基糖醛酸）—（1 — 4) — 2，3，6 —三一鄰—苄基 — a— d — Dft喃葡糖普6 6。 在含6 4 (860毫克’ 1 _ 3毫莫耳）的 CH2C 12 (4毫升）溶液中加入2，2，6，6~四甲 基—1 一哦陡氧基（2 . 3毫克+)，飽和的N a HC〇3水 溶液（2 . 5毫升），KBr (13 · 5毫克）及四丁基 銨化氯（18毫克）。將由飽和NaCl水溶液（2.8 毫升），飽和NaHC〇3水溶液（1 . 4毫升）及 NaOC 1 (1 . 3M，3 · 2毫升）所組成的混合物溶 液加入上述之冷卻（0 °c )溶液中。1小時後’以 C Η 2 C 1 2萃取該混合物，以水淸洗之，乾燥（ N a 2 S 0 4 )後加以濃縮以產生粗酸65。 將含上述未精製之酸的DMF溶液以B nB r ( 1 . 6毫升，13毫莫耳）及KHC〇3 (650毫升’ 本紙張尺度適用中國國家摞準（CNS ) A4规格（210 X 297公釐）-33 - (誚先閱讀背面之注意亊项再填?·?本頁) 訂 fes;:部中·ΛΙΙ^·:^只工消4^仓作ii卬妒 Α7 Β7 五、發明説明（31 ) 6.5毫莫耳）加以處理。16小時後，以EtOAc萃 取產物再以水淸洗之，乾燥（N a 2 S 0 4 )後加以濃縮以 產生6 6，產量爲7 7 %。 DEF —三糖70的合成（圖表7) 化合物6 7 將含三氟酸三甲矽烷酯（0 . 〇 4M，溶於 CH£C12*; 1 . 88毫升，0 . 075毫莫耳）的溶 液在氬氣下一滴滴地加入一冷卻之溶液（一 2 0°C)中， 此冷卻溶液是由6 —鄰一乙醯基~2，3，4 一三一鄰一 甲基-D -吡喃葡糖三氯乙醯亞胺酸酯2 8 ( 2 9 0毫克 ，0 > 7 1 1毫莫耳）（P .魏斯特德等人著，載於生物 有機層用化學1994，2，1267〜83)及接受者 6 6 (300毫克，0 . 4毫莫耳）溶於含4A粉末狀分 子篩的CH2C 12 (20毫升）中所構成的。30分鐘後 ，加入固體N a H C 0 3並將溶液加以過濾，濃縮。將剩餘 物進行分析柱層析法（3:1甲苯/EtOAc)以產生 純 6 7 (產量 56%) '· T L C R f 0.32 ’3: 2 甲苯/E t OAc 。 化合物6 8 在—2 0°C下，將含濃硫酸之醋酸酐（1 _ 5毫升， 0·1:1 ν/ν)混合物加入一含6 7 ( 2 0 1毫克 ，〇 · 20毫莫耳）的醋酸酐（7 . 6毫升）溶液中。經 (請先閱讀背面之注意事项再填湾本頁) 、1T. %y^! 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐} , 34 - «48180 Α7 Β7 五、發明説明（32) 過1小時的攪拌後再加入醋酸鈉（7 8 0毫克）。以 E t ◦ A c稀釋該混合物並以水淸洗之，乾燥後（ (邻先閱讀背面之注意事項再峨{的本页) N a 2 S 0 4 )加以濃縮，再進行分析柱層析法（1 : 1 甲苯/ E t 0 A c )以產生純6 8 (產量8 2 % ) ·_ TLC R f 0.32，1:1甲苯/£七0六〇。 化合物6 9 將苄基胺（0 . 58毫升，5 . 26毫莫耳）加入含 6_8„, (125 · 4毫克）的THF (5毫升）溶液中。在 室溫下7小時後，1M HC 1水溶液，H2〇淸洗之，乾 燥後加以濃縮。經分析柱層析法（3 ·· 2 甲苯/ E t 0 A c )可產生純69 (產量75%) :TLC R f 〇·33，2:3 甲苯/EtOAc。 '鄰一（6 -鄰—乙醯基一 2，3，4 一三-鄰—甲基一α 一 D —吡喃葡糖基）—（1 — 4)—鄰一（苄基2，3 — 二一鄰—甲基一万一D —毗喃葡糖基糖醛酸酯）一（1 — 4) 一3，6 —二一鄰一乙醯基—2 —鄰一苄基一三氯乙 醯亞胺酸吡喃葡糖酯7 0。 在氬氣下將三氯乙腈（69微升，0 . 675毫莫耳 )及碳酸鉋（66毫克，0 . 202毫莫耳）加入含6 _9 (89 . 2 毫克，〇 . 112 毫莫耳）的 CH2C12 (2 毫升）溶液中。2小時後，將溶液過濾並加以濃縮。將剩 餘物進行分析柱色層分析法（1 : 1 甲苯/ E t 0 A c 中國國家榇芈（CMS ) A4规格（210 X 297公簸） _ 35 - Α7 Β7 五、發明説明（33) )可產生 7 0 (產量 88%) :TLC R f 0.44 ’ 1 : 1 甲本/EtOAc。 —二糖7 6的合成（圖表2 ) 化合物7 2 將化合物7 1 (2· 5克，3. 53莫耳）（M.派 特多等人著，醫學化學期刊1997，40，1600〜 1607)溶於1:1 甲醇/CH2C12(35毫升） 中’再將甲氧化鈉（570毫克，106毫莫耳）加入此 溶液中。2小時後，加入杜威士 5 0 Η +樹脂直至溶液被中 和並加以過濾。濃縮後，將剩餘物進行分析柱色層分析（ 2:1 ，環己烷/EtOAc)可得7 2 (產量1 0 0 % ) : T L C R f 0.32，2:1 環己烷/ E t 〇 A c。 化合物了 3 在〇°C下，將Me I (0 . 41毫升，6 . 61毫莫 耳）加入一含有7 2 (2克，3 . 3毫莫耳）及NaH ( 〇 . 12克，5毫莫耳）的THF (20毫升）溶液中。 2小時後，將Me 0H —滴滴地加入其中並在1 5分鐘後 以CH2C 12萃取產物=以H2〇淸洗溶液，乾燥後（ N a 2 S 〇 4 )再加以濃縮。經分析柱色層分析法（5 : 1 環己烷/EtOAc)可產生純73 (產量89%):〔 «3 〇 ' 1 2 ° ( c 1 ; C Η 2 C 1 2 )。 紙张尺度適HTiFiil家標隼（C:NS〉Α4規格（2]0Χ29?々ϊ ΐ - 36 - (請先間讀背面之注意事項再填一：?本頁)

7 . 4毫克），飽和的 軤"部屮-JA^;1,-AB乂消贤合竹"^f

448 1 G A7 B7 琴·ι· I »* 丨·_._ . , .一 |_" | mil·· | - I— I· ,L,n ________ | 五、發明説明（34 ) 化合物7 4 將CF3COOH (70%，3 · 14毫升）水溶液加 入含7 3 (1 76克，2 . 84毫莫耳）的CH2C12 (1 6毫升）的溶液中。在室溫下5 0分鐘後，以 CH2C 12稀釋該溶液，再以冷的NaHC〇3飽和水溶 液/ Η 2 0淸洗之並加以乾燥（N a 2 S ◦ 4 )。濃縮後， 將剩餘物進行分析柱層析法（11 : 2 CH2Cl2 /丙 酮）以產生 7 4 (產量 88%): 〔a〕D+l〇。 （cl ；C Η 2 C 1 2 )。 甲基鄰—（卡1基2，3~二一鄰一甲基— L— P(t_喃艾 杜糖基糖醛酸酯）（1 — 4) — 2，6—二一鄰一苄基 一 3 -鄰一甲基一 a — D—吡喃葡糖苷7 6 。 在一含有.7 4 (1 . 39克，2 . 4毫莫耳）的 THF (8毫升）溶液中加入下列各項物質：2，2，6 6 —四甲基一 1 一哌啶氧基

NaHCO3水溶液（l4·4毫升），KBr(120毫 克）及四丁基銨化氯（1 8 0毫克）。在經冷卻後之上述 溶液C 0 C )中加入由下列各項所組成的混合物：飽和的 N a C 1水溶液（2 . 8毫升），飽和的N a H C 0 3水溶 液（1 _ 4毫升）及Na〇C L (1 . 3Μ，3 . 2毫升 )〇 1小時後，以CH2C 1 2萃取混合物並以幵2〇淸洗 之’乾燥後C N a 2 S 0 4 )加以濃縮以產生粗酸7 5

—τ--.-----I. (諳先聞讀背面之ii意事項再¾¾本頁J 訂 本紙乐尺度適用中國固家椋準（CNS ) Λ4規格（210X297公邀） -37- 443 1 A7 B7 五、發明説明（35 ) 將上述之粗酸7—5〜溶於DMF (3 1毫升）中再以 BnBr(2.84 毫升，23.9 毫莫耳）及 K H C 0 3 (1 ‘ 2克’ 12毫莫耳）處理之。16小時後，以 E t OAc萃取產物’再以水淸洗，乾燥（Na2S〇4) 後加以濃縮。將產物進行分析柱色層分析（3 : 2 環己 烷/ E t 0 A c )可得7 6 (自7 4所得之產量爲7 8% ):〔a〕D+7，3° (cl.l;CH2Cl2)。 DEFGH —五糖80的合成（圖表8)(實施例IV) 化合物7 7 在氬氣下，將三氟酸三甲矽烷酯（1 7 0微升， 0 . 0 0 6 8毫莫耳）加入一攪拌中之冷卻的（0°C)溶 液中，此冷卻溶液是由亞胺酸酯7 0 ( 9 1毫克， ◦ - 0 9 7毫莫耳），及7 6 ( 6 6 . 2毫克， 怒·ϊ;5'部中呔"^^,-只^消价告竹^卬^ {讀先閱讀背面之注意事項再^^本") Ό . 097毫莫耳）溶於含4A分子篩的CH2C 12 (2 毫升）中所構成的。30分鐘後，加入固體NaHC〇3 ( 0 . 1克）並延長攪拌一整夜。過濾該溶液後，以H2〇淸 洗之，乾燥後加以濃縮。將剩餘物進行分析柱色層分析法 (2:1 環己烷/丙酮）可提供五糖7 7 (產量7 1 . 6 % ) T L C R f 0.4，2:1 環己烷/丙酮。 甲基鄰—（2，3，4 —三一鄰一甲基一 6 —鄰一磺基一 a — D—吡喃葡糖基）—（1 — 4) 一鄰一（2，3 —二 —鄰—甲基一；3 — D —吡喃葡糖基糖醛酸）一（1^4) 本纸張尺度遶用中國國家標準< CNS ) Α4规格（210 X 297公釐} -38- ^ 448 1 8 A7 B7 .¾¾部中头佑準為貝，消於合作社印^ 五、發明説明（36 ) —鄒—（2，3，6 -三一鄰一磺基一 a— D —吡喃葡糖 基）—（1->4) 一鄰一（2 ’ 3 —二一鄰—甲基一 α — L~吡喃艾杜糖基糖醛酸）~ (1 — 4) 一 3 —鄰一甲基 —2，6 -二一鄰一磺基—-吡喃葡糖苷，八鈉鹽 8 0° 在有1 0%P d/C催化劑的存在下，於弱的氫流下 ，將含7 7 (50毫克，〇 . 032毫莫耳）的DMF ( 5毫升）溶液攪拌1 6小時。過濾後，濃縮該溶液以產生 7 8。 將水溶性NaOH (5M，0 . 46毫升）加入含上 述粗化合物的甲醇溶液中° 5小時後，加入"杜威士 5 0 Η +， （ Dowex 5 0H+)直至P Η被中和。濃縮該溶液後 ，將剩餘物置於塞佛德斯G 2 5分析柱〃 （Sephadex G25 Column )的上層，以Η 2 0洗堤之。將收集到之分液加 •以濃縮後可得粗79。 將Et3N/S〇3複合物（174毫克，〇 . 96毫 莫耳）加入含有上述化合物之DMF (6毫升）溶液中’ 並將溶液在5 5 t下加熱2 0小時。然後，將含 NaHC〇3 (0 33毫克）的DMF (6毫升）溶液加 入其中再將此溶液置於一''、塞佛德斯G 2 5分析柱"（ SephadexG25Column) ( 1 . 6 X 1 〇 〇 公分）的上層’ 並於0.2M NaC1中進行平衡。收集該分液’濃縮 後在同一凝膠過濾管柱上脫鹽，並於Η 2 0中加以平衡。進 行冷凍乾燥法可得五糖80 (自7 7可得產量9 5 % ): ^紙張尺度,適Μ 1卜國國家標举 ( CNS >Α4規格（2] 0 X 297公釐〉-39 - (讀先閱讀背面之注意事項再蛾寫本頁)

Α7 Β7 448 五、發明説明（37) 〔a〕D+49° (cl;H20)。

實施例V 本發明之化合物的生物活性可在抗-因子X a分析中 測定出來。 活化的因子X (X a )是凝血串聯反應中的一個因子 。本發明化合物之抗- X a活性是以分光光度分析的方法 測量由X a所引起之生色受質S — 2 2 2 2的水解速率來 評估的。此用來分析抗- X a在緩衝系統中之活性的分析 法可用來評估測試化合物的I C 5 〇値。 參考化合物：苄脒 測試介質：氨基丁三醇一 Na C 1 —聚乙二醇6 0 0 ◦( T N P )緩衝液 佐藥：T N P緩衝液 當下列化合物在最後反應混合物中之濃度在1 % (適 用於D M S 0 )及2 . 5 % (適用於其它溶劑）以下時， 它們可用來增加溶解度，而不會產生副作用：二甲基亞硕 ，甲醇，乙醇，乙腈或特一丁基醇。 技術 試劑* 1 .氨基丁三醇—NaCl (ΤΝ)緩衝液 緩衝液組成物 氨基丁三醇（Tris) 6.057克（50毫莫耳） 本紙張尺度通Λ屮國國家標準（CNS ) Α4规格（2】0Χ297公釐）-*40- (請先閱讀背面之注意事項再硝寫本頁)

448 1 8 A7 B7 五、發明説明（38) N a C 1 5·844 克（100 毫莫耳） 加水至 1升 將溶液的Ρ Η値以H C 1 ( 1 0毫莫耳—升^ 1 ) 調整至37 °C時，ΡΗ値爲7 . 4。 2 . T N P緩衝液 將聚乙二醇6 0 〇 〇溶於TN緩衝液中以使濃度爲 3克.升—1。 3 _ S — 2222 溶液 將一瓶S — 2222 (1 5毫克；卡比檢驗，瑞典 )溶於10毫升水中，使濃度爲1 . 5毫克•毫升 一1 (2毫莫耳.升-1) 4 . X a溶液 將人類因子Xa (7lnKat *via1_1; 卡比檢驗）溶於1 0毫升的TNP緩衝液中。然後 ，再以30毫升TNP稀釋之以使濃度爲1.77 η K a t ·毫升—1。此稀釋液需在使用時才新鮮 配製。 "-使用的所有成分爲分析級的。 -製備水溶液時需使用超純的（'v米里一 Q 〃品 質）（Milli-Q quality ) 測試及參考化合物之製法 將測試及參考化合物溶於，米里-Q "水中以製成貯 存濃度爲1 0 — 2莫耳-升—1的溶液。以賦形劑稀釋貯存溶 (請先閱讀背面之注意事項再硪寫本页)

&张尺度適扪中國國家摞率（CNS ) A4規格（210X297公釐） -41 44818, A7 B7 "··— _______________ ·· 五、發明説明（39 ) (請先閱讀背vg之注意事項再访寫本頁} 液逐步取得下列各濃度.· 1 〇-3，1 〇 - 4及1 〇-5莫耳 -升_1。這些稀釋液’包括貯存溶液，將用於分析中（在 反應混合物中的最後濃度各爲：3 · 10— 3; 10— 3; 3 .10一4; 1〇-4; 3 · 10- 5; 1〇-5; 3 · 10— 6 及1〇—6莫耳.升—y 。 步驟 在室溫下，取0 . 075毫升及0 . 025毫升之測 試化合物或參考化合物的溶液或賦形劑輪流加入一微量滴 定盤的凹槽中並各以〇.115毫升及0.0165毫升 TNP緩衝劑稀釋之。在各凹槽中各加入〇.〇3〇毫升 之S — 2 2 2 2溶液並在一個3 7 °C的溫育箱中（*艾默 生# Amersham )將此培養盤一邊搖動一邊預熱及預先保溫 10分鐘。預先保溫後，接著將〇.〇30毫升凝血酶加 入各凹槽中以起動S — 2 2 2 2的水解作用。在3 7 °C下 溫育該培養盤（一邊搖動3 0秒），在溫育開始1分鐘後 測定各樣本在4 0 5 nm處的吸收，並每隔2分鐘測定一 次’持續9 0分鐘，此種光波的吸收是利用一種動力微量 滴定培養盤讀計來進行的（雙讀計加，流體實驗室）。 以"LOTUS-MEASURE 〃將所有的數據收集在一個 I B Μ個人電腦內。將每一個化合物濃度（以莫耳.升-1 反應混合物來表示）的吸收及空白組吸收對反應時間（以 ''分〃計）畫出圖形。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -42- ά 44δ1b A7 B7 五、發明説明（4〇 ) 反應的評估：自分析圖形中計算出各最終濃度的最大吸收 。根據、霍夫納〃 （Hafner )所著方法（Arzneitn.-Forsch. /藥物硏究 1977 ; 27 (E) : 1871-3)，利 用分對數轉換分析來計算I Cs〇 -値（最終濃度，以微莫 耳•升―1表示，可對空白組之最大吸收產生5 0%的抑制 作用） 抗-因子X a活性 --： - -- (誚先閲讀背面之注意事項馮填巧本s } 部 t 次 a. <：) ΪΙ 化合物（實施例） IC50(微克•升 1 ) - 3 2(1) 2 2 一 3 8(2) 12 — 5 6(3) 1 2 8 0(4) <2 . . 訂 本紙张尺度適用屮國圃家榇準（CNS ) A4规格（210X297公釐）-43 -

好^·部屮，^"^'-^}!-"消卟"作.^卬？?: 44b A7 B7 五、發明説明 縮寫 41 (Pk苯基；Me=甲基；Ac二乙醯基；Im =三氯乙醯亞胺基；Bn =苄基 ;Bz =苯甲醯；Mbn = 4-甲氧苄基；Lev =乙醯丙醯基） 丨圖表1 Η

OCH, OBn

OCHj OBn 3: R=MBn 39: R=CH3 {請先閱讀背面之注意事項再^-寫本頁)

42 43

G OAc

Rt=OAc R^SEthyl R!=OH R,=OIm

H

41: RK：H^

HO

OCH, OBn 4: R=MBi 40: R=CH,

OCHi AcO OBn 8; R-MBn 44: R=CH·, 本紙張尺度適用中囤國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐) -44 - 48 1 A7 B7 五、發明説明（料 圖表2 9: R^H, R2=CH3> R3=P 14; R1=R2=R3-CH3 18: Rl-R2==CH3t R3=Bn 45: Rj=H, R2=R3=CH3 48: R产Ac，R2=R3〒CH3 74: R严R3=CH3, k2=Bn 10: Rj=H, R2=CH3, R3=MBn 11： Ri=R2=CH3t Rj^MBn 12; Ri=R2=CH3,R3=H 13: R1=R2-R3=CH3 17: R^Rz^Hj, R3=Bn 46: R^H, R2-R3-CH3 47: R^Ac； R2-R3=CH3 71: R,=Bz, R2=Bn, R3=CH3 72: R丨=Ht R2=Bn，R3=CH3 73: R1=;R3=CH3> R2=Bn 辨 ϊ>!;部·5-·Λ4.Γίΐ-^^

(讀先間讀背面之注意事項再填寫本頁)

15； R|=R，2~R-3~CH3 19: Ri=R2=::CH3, R3=Bn 49: R^Ac, R2=R3-CH3 75: R1=R3=CH3t R2-Bn 16: Ri=R2=^3=CH3 20： R|—R，2=^^3i Ϊ^3~Βπ 50: RfAc, R2=R3=CH3 76: Ri=Rj=CH3, R2=Bn 本紙張尺度適扣中國國家標车（CNS ) A4規格（210X297公釐） -45 - 448 A7 B7 五、發明説明（43圖表3

21

22

OR 23: R=Ac 24: R=H 25: R=Im (諳先閱讀背面之注意事項再蜞"本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 6 • 4 4 4 8 1 b A7 B7 五、發明説明（44 ) 圖表4

56: S03-，R2=R3=CH3 (實施例 m) (讀先閱讀背面之注意事項典填寫本Η ) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4规格（210X297公釐） -47 - 4 4 8 1 8 Ο Α7 Β7 C. N-1?^ 於"^r.^CTT^

(讀先閱讀背面之注意事項再^、"本负) 本纸張尺Α適州中國國家標準（CNS ) Α4規格（2]0Χ297公釐） -48 ^ Α7 Β7 五、發明説明（銲 圖表6

OAc OAc

E

OH OH 57 58 τ £

Olm OAc 59 +

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7 ,^户 (讀先間讀背面之注意事項再禎艿本頁)

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61: R=Ac 62:R=H 63: R=CH3 -41ΠΓΓ ί· 部 屮 準 消t： 合 作 卬

本紙張尺度適用中國國家標隼（CMS ) A4规格（210X297公釐） 64 65: R=H 66: R=Bn 49 - 448 u A7 B7 五、發明説明（47 圖表7

D

28

E F

66 D Ε F OAc COOBn OBn — Ο J-Ov _ J-0 och3 W > 0 C?Bn och3 OCH, OBn OCH3 (讀先間讀背面之注意事項再¾¾本I') 67 -s

68

OH 69

Olm 本紙張尺度適州中國國家標準（CNS ) A4規格（2】0X297公釐） -50 - 五、發明説明（ 圖表8

D

E ,〇Ac OAc 广 COOBn CHjO I Γ OCH3 0CH3

Olm OBn 70 A7 B7 一 OAc OAc

OCUx OCH3 OOn

77

78

IT if'； 部 中 Ail. .1 消 作 杜 卬

實施例IV 本纸张尺度適扣中國國家標隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） -51 -

Claims (1)

1. 4 Ιί8,!.·水 年月 f·正ί > t » S;mJL· C8 )8 六、申請專利範園 附.件c : 第87U 9398號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國90年1月修正 1 . 一種具有式（I )之硫酸化五糖類，

   - - I 11 - I - - —^n <I^Jl ΓΙ UK u I '孑 (請先/¾¾¾^之注意寧項再填寫本頁) ⑴ 0 S 0 3 -; 硫酸酯基團的全部數目爲4，5或6 ; 且扭轉的線所代表的化學鍵是在它們所附著之6 —員環的 平面上或平面下； 或其藥學上可接受的鹽。 經濟部智葸財是^^:工消脅合作社印製 2 ·如申請專利範圍第1項的硫酸化五糖類，其中式 (I )之D —單位具有下列構造：

   R1是甲氧基：且R2 ’ 3及R4係獨立地爲甲氧基或 Ο S 〇 3 。 恭紙張尺度適用中國囷家標牟（CNS > A4規格（；；10X 297公埯） 8 4 4 1 80 AS B8 C8 p—--⑽ I六、申請專利範園 ί 3 .如申請專利範圍第2項的硫酸化五糖類，其中R 是甲氧基。 ί 4 _如申請專利範圍第3項的硫酸化五糖類，其中R 是甲氧基。 ί 5 ·如申請專利範圍第4項的硫酸化五糖類，其中R 是甲氧基。 6 · —種用於治療或預防血栓或抑制平滑肌細胞增生 之藥學組成物，它含有如申請專利範圍第1項至第5項中 任一項之硫酸化五糖類及藥學上合適的佐劑。 7 如申請專利範圍第1項至第5項中任一項之硫酸 化五糖類’係用於生產用來治療或預防血栓或抑制平滑肌 細胞增生之藥品。 ίΐτ先閱筇背面之注意寧項再4-寫本頁) ，裝_ 訂 經濟.邵智葸財4-/¾¾工消#'合作社印製 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS >A4规格（210 x 297公嫠）-2 - A

   Ψ Π η 23 0 87H9398 第87119398號專利申請案中文说明書修正贸民禺89年 3月县

   Λ4 4 棚由本局填註）

   II專利説明書他咖 發明 新型 名稱 中文 --------英文 姓 名 硫酸化五糖類 Sulfated pentasaccharide(s) (1)康絲坦 * 凡柏凱爾 van Boeckel, Constant Adr丨aan Anton ¢2)莫里斯 * 派特徒 Petiton, Maurice(3)菲利普•杜柯索伊 Duchaussoy，Philippe 國 發明 創作 人 住、 姓 籍 居所 ⑴荷蘭 ¢2 法國 (3) 法國(1) 荷蘭奧Η ·摩古暾街三二號 Mercuriusstraat 32, 5345 LX Oss, The Netherlands(2) 法國巴黎哈維洛待路六十五號 65 Rue du Javelot, 75645 Paris cedex 13, France(¾法國土魯斯拉根三十t號 37, Rue Laganne, 31300 Touiouse, France 裝 訂 名 鲆^;'部43.'1^4 "、工.^)^'合忭.T-i印製 三、申請人 (名稱） 國 籍 住、居所 (事務所） 代表人 姓 名 (1)艾克佐諾貝爾公司 Akzo Nobel N.V, 0薩諾菲公司 Sanofi(1)荷蘭 (2)法國 (1)荷蘭六八二四亞漢維普路七十六號 Velperweg 76, 6824 BM Arnhem, The Netherlands 0 法國巴黎法蘭西路一七四號 174, Avenue de France, 75013 Paris, France (1) 佛 * 插曼 Hermans, F· G* Μ· 奋*瑞爾印克Reerink, E.H. (2) 吉 * 雷棒 Wright, G. - 本紙張纽適用中國國家裙準（CNS ) M規格（2丨〇χ297公趁 4 4 8^ B u 申請曰期 δ7 年 11 月 23 日 案 號 87119398 類 別 (以上各欄由本局填柱） A4 C4 一濟部智.^!'|4-,---;::::工-/|骨合作社印製 霧墨專利説明書 發明々/ 一、ν…名稱 新型 中 文 英 文 • 姓 名 W)柯尼拉♦崔夫一川普 Dreef-T「〇mp, Cornelia Maria © 爱罕斯♦ Μ斯汀 Basten, Johannes Egbertus Maria id)荷蘭 ©荷蘭 ^ 發明 一、創作人 國 籍 wj荷蘭維肯史路斯坎普三十一之六十二號 Sluiskamp 31-62, 6605 SN Wijchen, the Netherlands 住 '居所 (9 荷蘭艾芬登聖維克多路四十一號 St+ Victorstraat 41, 6654 AV Afferden, the Netherlanc 姓 名 (名稱） 國 籍 三、申請人 住、居所 (事務所） 代表人 姓 名 r ^^^^1 1-11 in r ^1 m. _ ^------------ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规袼（210X297公釐） --訂—— 1 4 4 8 1 8 090· L 3α Α7 ----Β7 五、發明說明（3 ) 因此，本發明之化合物顯示出令人意外且精細平衡的 藥學剖面圖。 所以’本發明關於一種具有式（I )之糖類衍生物：

   其中R 1爲（1 一 4 C )烷氧基；R 2和R 3係獨立地爲（ 1 一 4 C )烷氧基或◦ S 0 3 ;硫酸酯基團的全部數目爲 4，5或6個；且扭轉線所代表的化學鏈是在它們所附著 之6 -員環的平面上或平面下；或一種其藥學上可接受的 鹽。 本發明之化合物在治療及預防由凝血酶居間及與凝血 ®S相關的疾病上很有效。這包括了許多血栓性及前血栓性 狀態，在此種狀態中凝血串聯反應，包括但不倜限於：深 部靜脈血塞，肺部栓塞，在血管整形術或血栓溶解術後的 動脈再阻塞，在動脈損傷或侵襲性心臟手術之後的再狹窄 ，手術後靜脈栓塞或血塞，急性或慢性動脈粥狀硬化，中 風，心肌梗塞，癌症及轉移及神經退化疾病。本發明的糖 衍虫物也可做爲平滑肌細胞增生的抑制劑並可用於血管生 成，癌症及逆轉錄病毒感染（如：Η I V )的治療。 還有，本發明化合物可做爲在體外血液循環中的抗凝 劑及抗凝劑包膜，這種試劑在透析及外科手術中是必須的 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -6 - (請先間讀背面之注意事項再填寫本1·) -----κ---訂---------^ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 -448180 ___B7__ 五、發明說明（4 ) 本發明之化合物也可做爲玻管內或體外的抗凝劑。 根據本發明之較佳的糖衍生物具有式（I ) I其中之 D _單位具有下式：

   R 1爲甲氧基；且R 2，R 3及R 4獨立地爲甲氧基或 〇 S 0 3 。 更佳之糖衍生物爲那些其中R 2爲甲氧基者。特別好的 糖衍生物爲R 3是甲氧菡者。最佳之糖衍生物爲其中R 4是 甲氧基者。 在（i - 4 C )烷氧基一詞中（1 — 4 C )烷基團是 一個帶有1至4個碳原子的側鏈型或直鏈型烷基團，如： 甲基，乙基，異丙基，特-丁基及此類物。最佳之烷基團 爲甲基。 補償帶電部分所用的平衡離子需爲藥學上可接受的平 衡離子如：氫，或是以鹼金屬或鹼土金屬離子（如：鈉， 鈣，或鎂）更佳。根據本發明的糖衍生物可依所說明之廣 爲人知的方法來製備並可用來合成寡糖。在這方面來看， 較佳之參考資料爲前述之歐洲專利E P 5 2 9 ，7 1 5 。一種適合用來製備式（I )所示之糖衍生物的方法，其 特徵是將帶有不同構造之受保護的單糖加以偶合以產生受 保護的雙糖，然後： 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐） I ^---I------- ^ -—111·---訂--I--!_鍵 T (請先閱讀背面之注意事項再填寫本I·), 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 448 f 附件A :第87119398號專利申請案中文說明書修正頁民國90年1月修正 四、中文發明摘要（發明之;g稱：硫酸化五糖類 本發明關於一種具有式（I )之糖類衍生物：

   爲（1 — 4 C )烷氧基或〇S ◦ 3 _ ;硫酸酯基團的全部數 目是4 ’ 5或6 ;且該扭轉的線所代表的化學鍵是在它們 所附著之6 -員環的平面上或平面下；或一種其藥學上可 接受的鹽。 本發明之化合物具有抗血栓活性且可用來治療或預防 血栓以及抑制平滑肌細胞的增生。 (請先閱讀背面之注意事項蒋填寫本頁各櫊) 袭------ 荚文發明摘要（發明之名稱： The invention relates to a carbohydrate derivative having formulafi)

   (I) 訂 I 線 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 wherein R1 is (!-4C)aIkoxy; R?, R3 and K4 are independently (l-4C)alkoxy or OSOj'； the total number of suffate groups is 4t 5 or 6; and the twisted lilies represent bonds either above or below the plane of the six-membered ring to wiiicli they are atlaclied; or a pharmaceutically acceptable salt thereof. The compounds of the invention have antithrombotic activity and may be used for treating or preventing (hrornbosrs and for inhibiting smooth imtscle cell proliferation. ^^尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格< 210X297公釐广2 4 Ιί8,!.·水 年月 f·正ί > t » S;mJL· C8 )8 六、申請專利範園 附.件c : 第87U 9398號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國90年1月修正 1 . 一種具有式（I )之硫酸化五糖類，

   - - I 11 - I - - —^n <I^Jl ΓΙ UK u I '孑 (請先/¾¾¾^之注意寧項再填寫本頁) ⑴ 0 S 0 3 -; 硫酸酯基團的全部數目爲4，5或6 ; 且扭轉的線所代表的化學鍵是在它們所附著之6 —員環的 平面上或平面下； 或其藥學上可接受的鹽。 經濟部智葸財是^^:工消脅合作社印製 2 ·如申請專利範圍第1項的硫酸化五糖類，其中式 (I )之D —單位具有下列構造：

   R1是甲氧基：且R2 ’ 3及R4係獨立地爲甲氧基或 Ο S 〇 3 。 恭紙張尺度適用中國囷家標牟（CNS > A4規格（；；10X 297公埯）