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209169 經濟部中央標準工消"合作社印31 Λ 6 Η 6 五、發明説明j() 晚里JL景._ 本發明是有關黃瞟昤在製備對抑制人類反轉錄病遨 ，如人類免疫不金病毒型1< HI V-1)複製有效之藥的用途 0 後天免疫不全症（A IDS >目前為北美.歐洲，及中非 主要重大病害。A I DS之病原據信是一種逆轉錄病毒，稱 為HIV-1。最近評估顯示至少有150萬美國人暴露於稱為 HIV-1之AIDS病毒中，並且，在1991年前，美國將有 150萬人會感染這種病毒，..遭感染的値人呈現嚴重免疫 缺乏性，接箸可能開始罹患變質性甚至致命性疾病η 第一艏AIDS逆轉錄病毒係習名的LAV,隨後又稱為 ，其分離及恃激由F. Barre-Slnoussi等人，

LAV 在科學雜誌220 :868-871 ( 1 983 )中曾作過敘述。使用此 病毒之某些提取物及其蛋白質來偵測有關此病毒的抗體 在美國專利第4 , 7 0 8 , 8 1 8號中曾有敍述。 之後，有不同研究人員報導了數柿A I D S逆轉錄病毒 分離株，此分離株在文獻中是以不同名稱表示.，因前筲 偏認為過去命名為淋巴腺病柑關病毒（LAV >,免疫不ΐ 柑關病毒（IDAV1及IDAV2,人類Τ淋巴性病毒型III < HTLV- I 11),及A IDS相關病靡（AliV )皆是相同的逆轉錄病 毒的變種。 由病毒分類學國際性協會授權的委a會提議·· a I ο s 本紙张尺度边用中Η困家棕半(CHS) TM規格(210X297公款) (請先閱讀背而之注意事項孙構裒本頁) 裝· 線· 209169 Λ6 Η 6 經濟部中央標準妁β工消"合作社印製 五、發明説明（2) 逆轉錄病毒正式命名為··人類免疫不芏病毒”，其習知的 縮寫為” HI V '人類逆轉錄病毒分離株雖然具有明顯， 但是與Η IV分離株的關係有限（例如，超邊20¾但少於 50¾之核酸序列相同性），故不稱為Η I V ,除非其具有與 此組中現存者具有相當程度之生物與結構類似性（刊絨 於科學雜誌；697 (1986)., 其它病原性人類逆轉錄病毒，名稱為HIV — 2 先前稱爲 LAV -2 )者，是由西非罹患A I.DS之患者中 分離出來的[Clavel等人，科學雜誌，233:346 (1986) U HIV-2感染柑關之免疫不全症，在臨床上.與 由原型AIDS病毒，HIV-1者所引致者無法區分n HIV-2與 Η IV - 1有關，但可予以區別，其誘發免疫不全症狀具明 顆的較低頻率[Guyader等人.自然雜誌，326:662-669 (1987) J 〇 與Η IV在遣傳上相關，並且在生物性上相類似之逆 轉錄病毒己由近似類的镊長類動物中分離出來。這呰逆 轉錄病毒命名為適合宿主品種之免疫不全病毒，例如， 壊免疫不金病毒（S IV )。S [ V首先由捕獲的恆河猴 rhesus macaques(獮猴屬 Macaca mulatta 丨，於新英格 蘭區域菝長類動物研究中心（NERPRC)分離出來丨Kank丨等 人，自然雜m 228： 11 99 (I985 > ]。不久，接著由非洲綠 猴分離出稱為STLV-III之SIVUanki等人，科學雜誌 -4 - (請先閲讀背而之注意事項孙蜞寫木頁) 裝· 訂- 線- 本紙張尺度边用中KS家標咿（CNS)lMyitM210x29/公:《:) 2〇91^9 經濟部屮央楳準Λβ工消"合作社印5i 五、發明説明（3) 230:951 (1985 )]。HIV-2與SIV間存在箸廣泛之血清突 叉活性。 Η IV常藉著性接觸傳播，使用麻醉品靜脈注射的人 也是高危險群。許多人輸送披污染之血液或血液産品而 罹患Η IV。此外，遭Η IV感染的兒童患者由感染Η IV的' 母親生下。據信，此種病毒由受感染的母親傳遞到胎兒 上。 多種人類免疫不全病毒，如HIV-1及HIV-2的存在呈 現複雜的流行病學的情況。目前，Η IV感染是美國首號 公共健康威脅，以及某些高密度人口地區主要的死亡原 因。目前，已産生開發有效對抗HIV感染之疫苗或藥物 組成物以扼阻這種逆轉錄病毒散播的共識。對於發展疫 苗的工作進展，目前為止，尚未開發出有效的藥劑。因 而，在本技Μ中存在著抑制人類逆轉錄病毒活性方法的 霈求。 支發..明_摘皇_ 本發明有肋於滿足本技鉍的需求。詳言之，本發明 提供一種抑制以抑制人類逆轉錄病毒，如人類免疫不t 病毒（丨丨IV)複製的方法。本方法包對人類宿主投予呈現 保護效果或防止逆轉錄病毒複製的黃嘌昤。 詳言之，本發明是一種包括對人類投予至少一種如 下化學式之7-(氣烷基）1 , 3-二烷荘黃嘌昤的方法： -5 - 本紙張尺度逍扣+ ®國家捣準规格(21〇><29/公龙） (請先閲請背而之注意事項#蜞寫本頁) 裝· 訂_ 線-

五、發明説明（4) 〇 N Ν-Λ 1 J Ν Ν •C—CH. II Ο (I) 式中，fU與R2為相同或相異.並且各選自2到6個 硝原子之直鏈或支鏈烷基，環己基，直鏈或支鐽烷氣烷 基與羥烷基；及A為逹4個磺原子之烴基，其可由甲基 取代。化學式（I)黃嘌呤以有效量投予以抑制逆轉錄病 毒之複製。 本發明亦提供一種抑制在人類中之逆轉錄病毒複製 的方法.其中此方法包括投予患者如下化學式（11)之化 合物 R3 (請先閱誚背而之注意事項孙填寫木頁) 裝< 線· 〇

Ν (II) 經濟部屮央榣準局只工消作合作社印5i 其中，R1與R3中至少有一為： (a )如下化學式之支鏈羥烷基

R I -(CH2)n-j>CH3, OH 本紙5JL尺度边Λ1中8»租家標孕(邙5)1»4規怙（210父297公址） 209169 Λ 6 Η 6 經濟部屮央榀準局只工消奸合作社印51 五、發明説明a ) 係一叔醇官能蕋，式中li4代表具有1到3個碳原子之烷 基，η代表2到5之整數，可選擇存在之丨丨1或R3代表氫 原子，或脂族烴基护為具有逹6個磺原子，其硕鍵可被 達2個氣原子所間斷或可被羥基或氧基取代，或 (b ) R1或胪中至少有一為下化學式之氧烷蕋 0 6 K R6 -C-(CH2)p-/ 式中，Re為C! -Ce烷基，並且P為2 , 3或4 ; R1或沪 如上所定義，R2代表具有1到4値磺原子之烷基。 投予有效量化學式（II)黃瞟昤用來抑制逆轉錄病毒 之複製。習知之藥物化合物Pentoxifylline為通式 (II)中之化合物的一項賁旅例。Pentoxifyl 1 ine為口服 Η劑型式，其商品名為Trenta 。雖然此化合物是用 作改進血液流動性質之藥物【1971年作臨床試驗），但並 未有作為逆轉錄病毒複製之抑制劑的報導。 Η IV之侵襲與變異性使治療顯得相當困難。本申謓 栗提出能有助於防止Η IV感染擴散與治療此種感染的藥 劑與方法，偽對人體投予有效量之黃嘌昤去預防或至少 對於體内Η IV之複製進行抑制。 , 較佳具餺例：> 詳紬紗沭 依據本發明，用某些黃嘌昤抑制人類逆轉錄病毒之 -7 - (請先閲讀背而之注意事項#项寫木頁) 裝· 訂- 本紙張尺度边用中a «家棕iMCNS) f 4規格（210x297公釐） 209169 Λ 6 Η 6

經濟部屮央#準局ΗΪ工消作合作社印M 五、發明説明έ ) 複製。本文開始時，將對本發明中所牽涉到之生物作用 的性質予以敘述，接著詳細敘述黃嘌昤及製備黃喋昤的 方法，随後提出體外測試所得到之結果。 較佳具體例之詳細敍i 可用本發明的方法去抑制人類逆轉錄病毒之複製， 此種病毒是包摂箸單服RNA的病毒，含有逆轉錄_ (RT),用來催化病毒之RNA基因組轉錄成前病毒之DNA 形式。此DNA形式典型上會併入宿主細胞之DNA中。較 佳為用本發明中所述之黃瞟昤去抑制包含HIV-1及 HIV-2之人類免疫不金病毒。 本發明方法對於治療已感染丨丨IV ,或對於Η IV具冇 感受力的人很有用。本發明對於抑制遭感染之人體中的 Η IV -1或Η IV -2的活性尤為有用。本發明所述有關文獻中 經鑑定之分離株是LAV-1, HTLV-III及LAV-II,要了解 的事實是，本發明所述之分離株涵蓋了柑同或等價之逆 轉錄病毒，這些病毒據信是AIDS之病原。 本發明目的之病毒若是實質符合下列標準，就視為 與LAV/HTLV-III相同或等價： (a) 此病毒對於T-淋巴球，尤其是T-助細胞（CI)i ) 具有趨性； (b) 此病毒對於受感染之CD$細胞有細胞致病性； U)此病毒有RNA相關DHA聚合酶（逆轉錄酶）之编 (請先間请背而之注意事項#褀¾本1Ϊ) 裝· -訂 線· 本紙張尺度边用中SB·冬榀iMCNS)TM規格(210X297公;¢) 經濟部屮央梂準局β工消#合作社印ft'14 2〇9ΐ*69 五、發明説明（7) 碼，逆轉錄時需要Mg2+ ,並且使用p〇ly (A) 〇1 igo (dT) i2 -18作為模板/引子； (d)此病毒與LAV/HTLV-III之ga與env區域編碼的 蛋白質會實質産生免疫性交叉反應；及 (e>此病毒與LAV或HTLV-III具有實質核酸相似性 (約75-100：«)，以及胺基酸序列相似性（約75-100!〇。 本發明方法中使用之主要藥物活性成分為一種黃嘌 昤。這裹所用名稱為”黃嘌昤”者包含化學式（I)及化學 式（II)之化合物，其對於HIV感染具有保護性（預防性 )效果，¾對於Η IV感染具有治療性效果。黃瞟昤包含在 HIV感染發生前或HIV感染變得明顯前所使用之化合物 ，以便預防或降低感染的發生。黃嘌昤也包含作為經 Η IV感染之治療用化合物。此外，黃嘌昤包含預防人類 被Η IV病媒感染之化合物，包含在人類宿主中對於Η IV 複製循環進行中斷或干擾之黃嘌昤。 本發明黃瞟昤對於體外Η IV複製之抑制機制並不全 然被明瞭。黃嘌昤呈現對遭感染培養基中上澄液中RT活 性之抑制作用，因而抑制H IV-1之複製。雖然如此，人 類逆轉錄病毒活性之抑制機制可能是由一因素或許多因 素之結合，如改變逆轉錄病毒之一或多個基因型或表現 型持撳，或改變病毒或細胞之過程。雖然如此，仍有證 據顯示此逆轉錄病毒進到細胞中；此黃嗦昤可能改變進 Λ 6 Η 6 (諳先間讀背而.之注意事項孙填寫木頁) 裝· 線- 經濟部屮央榣準局A工消贽合作杜印製 五、發明説明（8) 入之過程。此外，控制病毒複製所需之産物表現的基因 要素可能被改變，或是其功能可能被黄噤昤所影溢。因 而，例如，黃嘌昤可能改變逆轉錄病毒之膜套糖蛋白質 的性質或抑制不同基因之表現。此黃崾呤可能也會在 HIV感染前或後，藉箸調節網狀内質糸統進行作用。此 黃嘌昤在遭感染之罹病細胞上也呈現對Η IV繁殖之抑制 作用。要了解的是此黃嘌昤可能是以這些方式中任一者 或是其組合，或其它並非一般了解的方式發揮其功能。 無論如何，對患者投予有效量之黃嘌昤能達成一或多項 這些效果。 依據本發明對罹患AIDS之患者投多\予此黃嘌昤預 期會對HIV複製予以抑制，將導致宿主免疫糸統之再生 ，以及至少會降低進一步的惡化。可探用體内分析法證 明黃嘌昤對於防止或抑制病毒複製及細胞感染之效果 。例如，黃嘌昤對於丨丨IV之感染及複製的抑制效果，能 藉著在黃嘌昤存在下或不存在下進行培養之，並且比較 結果而予以證明。 黃噤昤對於人類逆轉錄病毒複製之抑制能力可铋躬 測定體外逆轉錄酶活性而證明。例如，能由聚乙二醇沈 澱法或以離心法濃縮被逆轉錄病毒感染之細胞而得到良 好狀況培養基。含有12到18個DNA引子氮基之合成模板 引子能退火成為具有300個氮基之RHA模板。含有RT之 -10 - (請先閲讀背而之注意事項#填¾本頁) 裝· 本紙尺度逍用中S B家標準（CHS) 規格（2丨公灌^ 經濟部屮央榀準局β工消伢合作社印3i 2〇9ί69 _ί\β 五、發明説明θ ) 病毒粒子能以清潔劑.如Tr i ton S- 1 00打破。在適合標 示的核苷三磷酸，如放射線標示的鳥苷三磷酸存在下，雙 價陽離子（通常為Mga+),及鉀，RT能依RNA股的核苷酸 序列而將經標示的核苷酸併入DHA股中，導致生成酸性 可沈澱具放射性標示之RNA:DNA雜化物。此産物能在液 體閃爍計數器中進行分析，得到的結果是以每單位時間 單磷酸核苷酸之徹莫耳數表示，或將此結果與標準物， 如RT單位進行比較。一般在此分析中使用二特別合成的 模板與引子：poly (A)n〇lig〇(dT)12-i8 及 poly (C) oligo(dG)。模板 / 引子 poly (C) oligo (dG)i2_i8 對 逆轉錄病毒具專一性的，在Mgz+存在下，人類逆轉錄病 毒逆轉錄酶作有效利用。 免疫分析中使用單源或多源抗體也能偵測Η IV - 1複 製的抑制作用。詳言之，某些免疫分析法能在體外或體 内篩選本發明黃嘌昤以使作有效率的研究。 也可以使用聚合酶鏈反應（PCR)對體外人類逆轉錄 病毒小段區域，如RT或Gog區域作酵素擴大，以便測試 其對H IV-1複製之抑制作用的分析。由於己知悉與RT相 對應之核酸序列，因而能依此序列之資訊合成20到30個 氮鹼基物寡核酸，作為PCR中DNA合成的引子。可將研究 用之細胞DNA,在4種核苷三磷酸、熱穩定DNA相關DNA 聚合酶及適合緵衝液存在下，加到引子寡核酸中。随後 -11 - 本紙5民尺度逍m中S Η家樣準（CNS)TM規格（210X297公《') (請先閲誚背而之注意事項#埸寫本頁) 裝· 線· 2091^9 Λ 6 η 6

經濟部屮央標準而κϊ工消设合作杜印M 五、發明説明（10) 可將此反應混合物經由傳統三階段擴大步驟循環進行， 包含使DNA變性，使引子退火為生成的單股DHA ,以及 引子形成多份的目標序列。每一循環生成雙倍之目標 DNA ,使目標序列作幾何倍數擴張。 有數種用來定量增幅産物的方法。一般樣品中，引 子對中有最少量之DNA合成，可使用放射性標示之核苷 三磷酸作基質，並使增幅的産物作酸性沈澱，之後在液 體閃爍計數器中對此産物進行分析。若給予引子對，在 一般D Ν Α中會産生明顯的D H Α合成作用，此産物以小規 模作分離，並且使用一光密度計對恃別區域帶作定量。 依據本發明，其它用來證明黃嘌昤對逆轉錄病毒複 製效力的方法包含將培養之正常周邊血液單核細胞或其 它培養的細胞接觸此病毒。感染力之测定可使用無病毒 或被病毒感染的細胞，使其與具敏感性之指示細胞共同 培養。此病毒在指示細胞中複製。藉著比較在缺乏黃_ 下與在此藥物存在下病毒之複製情形，可證明黃喋昤 對Η IV之抑制效果。 依據本發明，逆轉錄病毒複製抑制作用也能藉電子 顯撤鏡檢査病毒所産生之顆粒及多種病毒蛋白質，而非 以RT予以證實。利用在許多動物品種中製備的標準抗體 可建立病毒蛋白質之多種偵測調査書。免疫螢光法能快 速偵測病毒，並能製備敏感性超免疫血清。放射免疫法 * 12 - 本紙張尺度边用中因Η家標毕（CNS) TM«ltM210x297公货） (請先閲讀背而之注意事項孙塡寫本页) 裝- 訂 線. Λ 6 Π 6 £09169 五、發明説明（15* 及EL ISA分析法能用來測量病毒蛋白質的存在.偽藉箸 在一糸統中之競争作用，其中，放射性檫示或比色法可 鑑定抗原與抗體糸統，可能會因添加反應性抗原受到撤 擾。 依據本發明，其它用來證明黃嘌昤效力的方法包含 藉著偵測未併入及併入之病毒DNA與病毒mRNA以偵測病 毒。自然雜誌，112_:166-169 (1984)。詳言之，在典型 試驗中，將細胞與不含細胞之病毒顆粒接觸，使每値細 胞中有許多病毒顆粒，並且在缺乏黃嘌昤下進行培養。 在不同時間提取高分子量DNA,並且使用放射性標示之 Η IV探針分析病毒DN A之含量。在培養條件缺乏黃嘌昤 下偵測病毒之DNA。相比較下，由細胞來的DNA完金為 黃嘌昤保護，未偵測出未併入或併入的DNA。 南方及北方吸墨雜合技術對於判知遛病毒感染之細 胞及組織的病毒DNA及RNA的相對量很有用。[自然雜 誌，2L^: 177-182 ( 1985)]。使用分子選殖標示之前病 毒DNA ,可用來重新構築併人之前病毒.因而可以雜合 法判知是否有前病毒基因併入細胞DNA中。這些技術能 用來證明黃瞟昤對於逆轉錄病毒複製抑制的效力。 也有可能藉#判定是否RNA在目標ΐ細胞中與病毒 接觸，並且在使用或不使用黃嘌昤下進行培養而對於病 毒之複製進行偵測。此試驗中.細胞是暴露於Η IV中. -13 - 冬紙張尺度邮中a a糾糾⑽11*14讎(21Qx2·^) (請先閲讀背而之注意事項#填¾木育) 裝. -線， 經濟部中央檩準而贝工消设合作社印5i 2〇9i-69 A 6 H 6 經濟部十央榀準而只工消奸合作社印製 五、發明説明（1^ 並且，RNA是由細胞提取。随後以放射性標示的Η IV抗 血清RNA探針，藉著北方吸墨法對病毒mRNA進行分析（ 自然雜誌，221:177-182 (1985)]。抑制劑不存在下， 病毒nRNA可偵測到。在黃瞟昤存在下，這些培養持缠廣 泛的期間，細胞中病毒R N A的表現並未偵測到，或若是 偵測到亦為為低的量。本分析条統使得與病毒接觸的T 細胞，得以對黃嘌昤抑制Η IV核酸合成及ibRHA表現作分 析。 此外，遣HIV-1感染的細胞糸MT2及NT4對於病毒使 細胞致病的效果敏慼。因而，這些細胞能作為生成斑點 分析之用途，以證明對受到HIV感染或繁殖之抑制效果 [自然雜誌，Ζ2_3_:563-566 ( 1985)。] 黃嘌昤抑制Η IV感染或Η IV複製的效力也能在試管 内予以證明，這是由判知此_物對Η9細胞之病毒Ρ24诳 白質所表現的抑制效果，對於HIV之細胞病害效果的部 分抗性而達成。[M. Popov ic等人，科學雜誌，224: 497-500 (1984Π。抗HIV之活性也能以黃嘌昤對於 Η IV之細胞病害效果的抑制作用予以證明（Μ· H iroaki等 人，科學雜誌，2姐：646-649 (1988)]。 最後，黃嘌昤的活性也能在試管中的正常T細胞中 顯示。在此分析中，正常選殖之助細胞與誘導之T細胞 ，如對於正常破傷風類毒素具特異性之助細胞/誘導之 -14 - (請先閲誚背而之注意事項孙蜞究本頁) -裝- -線- 本《•張尺度边用中囯國家標肀規格（210><297公龙） 經濟部屮央標準灼Α工消你合作杜印製 2〇9^θ Α6__Π_6__ 五、發明説明（Η 選殖Τ細胞（ΤΜ Π細胞）是作為偵測黃嘌昤對於抗原誘導增生 反應的效果。本技術之詳述請參考Η. Mistsnya等人， 科學雜誌，^1企：646-649 ( 1988)上所登載者。 黃嘌昤對防止或抑制Η V I感染或複製之效力能在經 過重新構築人類免疫糸統細胞之猩握或Chiraer iC SC ID 鼠中獲得證實。雖然未顯示出AIDS狀之疾病，這些遨長 類動物經證明特續感染了NIV。可比較經過治療或未予 以治療的猩猩，其血清轉變成具HI抗原之情形而證實 黃嗦昤的效力，係將具感染性的病竃由罹患可證明之淋 巴腺病的動物中再抽離出具感染性的病毒，改變T4或 T8淋巴細胞或組合這些測定而進行。 需用來進行這些分析的HIV能用習知的技術由傳統 來源處獲得。例如，由患者及損贈者之周邊血液，骨髄 及其它組織製得之單核細胞能以促細胞分裂劑（植物血 球凝集素）作48到72小時刺激，並且使用生長培養基加 入T細胞生長因子（TCGF)進行細胞培養。可由以下方式 進行病毒偵測：（1)偵测病毒逆轉錄酶活性之上澄液； (2 )將病毒傳遞到新鮮正常人類T淋巴球中（以臍索血液 ,成人周邊血液，或骨餸淋巴細胞中）或建立T細胞条； M. Popovic等人，科學雜誌，224:497 (1984); (3)以 電子顯微鏡觀察固定及切Η之細胞；（4)使用由血清里 陽性反應损贈者之血清，以間接免疫螢光法或西方吸墨 -15 - 本紙5良尺度遑用屮a Η家樣毕(CNS) ΊΜ規格（210x297公放） (請先閲讀背而之注意事項孙堝究本頁) 裝· 訂 -線· 209169 經濟部十央標準局A工消赀合作社印製 五、發明説明（Η 法測試抗原之表現。能使用對於HIV具待異性之免疫試 劑及核酸探針，進行病毒分離株對對呈陽性病毒細胞之 偵測，及對於病毒分離株定出待性與作比較。[F . Barre-Sinoussi 等人，科學雜誌.2_2L0_:868-871 (1983〉； R.C. Gallo 等人，科學雜誌，Z2_d:865-867 (1983)〇 許多建立之細胞糸經測試得知其為Η IV - 1感染的可 能目標物。這些細胞条也能作為上述分析中黃嘌昤效力 之證明。由罹患淋巴白血病成人所得到之赘生非神經狀 (aneuploid) Τ細胞条及稱為ΗΤ者對於HTLV-III之感染 具敏感性。將親代細胞重複與罹患淋巴病症或AIDS患者 處得到之短期培養T-細胞（在TCGF中生長）中之濃縮細胞 培養液重覆接觸HT細胞持鑛産生HTU-III。當細胞增生 降低時，通常是在與培養液接觸1 0到20天之後，將此新 鮮（未遭感染）之HT親代細胞加入培養物中。為了改良 Η IV,並且使病毒永久生長及持續産生，曾大量選殖HT 細胞族群。這些選殖的ΗΤ細胞有數種仍持缡作細胞培養 Ο 除了 ΗΤ之外，尚有數種其它可被Η IV感染並持續産 生HIV的Τ或前Τ人類細胞集。這些細胞条的例子有Η4, Η9 , HUT 78, CEM, MolU,及 Ti 7,4(美國專利第 4,652,599號）。此外，某些{}淋巴母細胞糸也能被Η IV -16 - (請先fiijlfl背而之注意事項#蜞¾本頁) 裝< -線 本紙張尺度边用中®困家梂半（CNS)甲Ί规怙（210X297公釐）

五、發明説明（¥ 感染[Montagnier等人，科學雜誌，^21:63-66 (1984)]〇 總之，前述步驟為用於證明黃瞟昤對於抑人類逆鞞 錄病毒複製具有效力的例子，也包括黃嘌昤對逆轉錄病 毒複製的詳細説明例。 2.對人额串者枵予音瞟昤 一種黃嘌昤或黃嘌昤的混合物，將其投予足以降低 人類逆轉錄毒複製之有效量去治療患者。雖然能使用黃 嘌昤混合物，但未見到投予此混合物具特殊優點。 黃昤及其藥物之可接受鹽類能適用於哺乳類，包含 但並不限於人，類，係以九劑，Μ劑，藥K ,膠囊，栓 劑，可注射或攝取之溶液及其類似物治療人類及具感受 性非人類盔長類因免疫糸統障礙引起之病症。 經濟部十央標準而A工消许合作社印rt-14 就效力而言，黃嘌昤能依穩定性，結晶方便性，增 加溶解度及其類而配製及投予。較佳藥物可接受的加成 鹽包含礦物酸鹽類，例如，氫氯酸，硫酸，硝酸，及其 類；羧酸一元酸，如醋酸，丙酸及其類；羧酸二元酸鹽 類，如順式丁烯二酸，反式丁烯二酸，草酸及其類；羧 酸三元酸鹽類如羧琥珀酸，擰様酸及其類。 黃嘌昤能以口服投予，例如，使用惰性稀釋劑或以 可食用載劑。可將其封裝於膠囊中或壓製成片劑。作口 服治療投予時，可將此物與賦形劑混合，並且以Η -17 - 本紙烺尺度边用中S ®家榀卒規怙凹丨公址） 扒69 Α6 Β 6 五、發明説明（16) 劑，栓劑，膠囊，懸浮體，糖漿，乾膠Η、 口香糖及其 類化物之形式使用。這些製劑要含有至少0.5¾活性化合 物，但是量則需依其持殊形式而定，一般，每單位重含 4.0¾到約70¾之間，此種組成物中黃嘌昤的量方為適合 的劑量。依據本發明較佳組成物及製劑，其製備為口服 劑量單位形式含有約1.0克到約400毫克活性化合物。 片劑，九劑，膠囊，栓劑及其類似物可能含有下列 成分：黏合劑，如撤晶纖雒素，黃蓍膠或明膠；賦形劑 ，如澱粉或乳糖；分解劑，如藻酸，Pri mol膠，玉米澱 粉及其類似物；潤滑劑，如硬脂酸鎂或Sterotes;滑動 劑，如膠體二氣化硅，增甜劑，如蔗糖或糖精；增味劑 ,如薄筒、水揚酸甲酯或橙增味劑。劑量單位形式為膠 囊時，除了上述形式物質外，能含有液體載劑，如脂 肪酸油。 經濟部十央#準局Α工消许合作社印製 (請先WJ讀背ΙΓΠ之注意事項#塡艿木頁) % 其它劑量形式能含有改良劑量單位物理形式之其它 物質，例如，塗層。因而，Η劑或丸劑能塗糖，蟲膠或 其它腸塗覆劑。糖漿除了含有活性化合物之外能含有蔗 糖作增甜劑及保存劑，染料，色素與增味劑。用於製備 這些組成物之物質為藥物純度級並且為非毒性的。 作為非經賜治療投藥目的時，如以靜脈内或肌内注 射，可將黃瞟昤混到溶液中或懸浮體中。這些製劑需含 有至少0.U前述化合物，但是，可依其重量而異，含有 -18 - 本紙張尺度边用+ 家炫堆(CNS)IM规怙（210x297公；«：) 17 方 經 濟 部 屮 央 準 局 X 消 ft·， 合 杜 印 51 Λ 6 Π 6 五、發明説明（ 0.5到約50%。此種組成物中活性化合物的量達此， 為適合之劑量。依據本發明，較佳之組成物及製劑是製 備成非經腸給藥之劑置單位，其含有〇. 5毫克到100毫克 之活性化合物。 黃嘌昤溶液或懸浮液也能包含下列之成分：無菌稀 釋劑，如供注射用水，生理食食鹽水溶液，油.聚乙醇 ，甘油，聚丙醇或其它合成溶劑，抗菌劑如，苄醇或對 苯磺酸甲酯；抗氣化劑，如抗痰血酸或二硫化鈉；螯合 劑，如乙二胺四醋酸；緩衝液，如醋酸，檸檬酸或磷酸 ;調整強度劑，如氣化鈉或葡萄糖。靜脈製備物能封裝 在針藥管，可棄式注射器或由玻璃或塑膠製成之多劑量管 瓶中。 化學式（I)或化學式（11)黃嘌昤，以每天0 . 1到25毫 克/公斤體重之有效口服或靜脈或靜脈内劑量投予需要 此種治療的患者，劑量值依情況有所差異方可得到良好 效果。 尤佳之有效量為每天1.0毫克/公斤體重。一般而言，每 日劑量由10-5000毫克，較佳為1600-3200毫克。 然而，需要明瞭的是：要依各別對象去調整各別劑 量範圍以合乎個體所豁，並且依拣個人職業判斷投予或 監督黃瞟昤的投予。另外要了解的是，前述劑量僅為筲 施例，不應據以限制本發明或本發明的實施。 -19 - 本紙張尺度边用中as家炫平(哪)1*很格(210χ29ί公货)

% 09169 Λ 6 II 6 經济部屮央榀準局工消炸合作社印¾ 五、發明説明Χ8 ) 可以瞭解的是：黃嘌昤能在抑制逆轉錄病毒之前， 後或同時使用，因而，以HIV之例子來説，黃嘌昤能與 3叠氮基-2·-3’-二去氧胸腺啶（AZT), 2·,3·-二去氧 次黃苷（<1心），2’，3’-二去氣腺苷（(^八），2',3’-二去氣 次黃苷（ddl)共同使用，或這些藥的組合。除了二去氣 核苷，有許多其它試劑能用來與本發明黃瞟昤混用，例 如，黃嗦昤能與化合物ΗΡΑ 23,硫代甲酸（foscarnet) ,ribavirin及rifabutin為主的治療共同投予。同樣地 ,本發明黃嘌昤能使用集落刺激因子，如顆粒性白血球 集落刺激因子（G-CSF),顆粒性白血球巨噬集落刺激因 子（GM-CSF),或是這些藥物的組合。也能依據本發明將 黃嘌昤與其它藥物，如acyclovir, α干擾素或這些橥 物或不與二去氧核苷，如A ΖΤ共同使用。文中所敘述 之抗病毒治療劑也能與治療共用以強化個體之免疫糸統 。例如，可以骨_移植達成免疫剌激或免疫再生，使用 藥物amp ligen或間白血球素-2投予患者。此外，黄嘌昤 也能與其它組合治療劑共用，例如，AZT與afflp li gen, ddc或GM-CSF之組合。也可以以黃嘌呤與胜肽類共用， 防止HIV感染或複製。 本發明也能用來治療人類個體中逆轉錄病毒的感染 ，或作為此感染的預防藥。本發明藉箸抑制逆轉錄病毒 的複製而改進患者之狀況，使患者存活率提高。 -20 - (請先閲讀背ΙΓΠ之注意事項典项寫本頁) 裝· 線· 本紙張尺度边用中S Η家樣iMCNS) Ή規格（210X297公;in Λ 6 Η 6 五、發明説明（IS) 3 .仆璺式（Π莆卩栗昤之敘沭與製備 一組本發明中使用的黃嘌昤，其化學式如下：

化學式（I)中之取代基R1與R2為相同或相異，並且是選 自具有2到6値碳原子之直鏈或支鏈烷基，環己基，烷 氣烷基及羥烷基。取代基Α代表具有達4個硪原子之烴 基，可由甲基取代。 化學（I)中化合物，據信對於抑制HIV-1逆轉錄酶的 活性很有效果者為：1.3-二丁基7-·(2-氣丙基 > 黃嘌昤。 此化合物簡寫為”DBOPX”，化學式如下：

I 《CHihCHj DBOPX ·· (請先閲讀背而之注意事項再项荈本頁) 裝< 訂一 線< 經濟部中央槛準局貝工消费合作社印Μ 化合物（111)對於抑制逆轉錄酶之活性的能力能予以證 明。 DBOPX為本發明尤佳之黃嘌昤，其它多種化合物也 能使用。例如，化學式（I)黃嘌昤能被其它烷基取代或 -21 - 本紙張尺度边用中a B家標準(CNS) >F4規格(2丨0X297公:《：) A 6 H6 經濟部屮央楳準局Α工消赀合作社印3i 五、發明説明（20) 披烷氧基或羥烷基取代。適合之烷基包含支鏈或直鏈基 ,如乙基，丙基，異丙基，丁基，第二丁基，第三丁基 ，戊基，己基及其類似物。被烷基取代之烷氣基包括在 組合之烷氣基與烷基中，含有2到6値硝原子之支鏈及 直鍵基，包含甲氧甲基，戊氣甲基，甲氣乙基，丁氣乙 基，丙氧丙基及其類似物。含有1到6個磺原子之羥烷 基如羥甲基，羥乙基，羥丙基，羥己基及其類似物。 由A所代表之化學或（I)烴基為雙價飽和脂族烴基 .即亞甲基，次乙基，次丙基，及次丁基，其在鄰近狨 基處能被甲基取代。此種甲基取代基包含亞乙基， 1 ,2-丙烯及1 ,3-丁烯。 要瞭解的是：本發明方法之簧施，包活在體内轉變 成前述化學式（I)黃瞟昤之其中一項化合物，以及此化 合物在體内産生與前述化學式（I)黃嘌昤類似代謝物的 化合物。 本發明所使用之化學（I)化合物能以留知的技術合 成。例如•在加溫，選擇溶劑存在下，使其與相關化學 式（III)取代之1,3-二烷基黃嘌昤反應，以製備此化合 物 (III) (請先IU1讀背而之注意事項#填寫本頁)

22 - 本紙張尺度边用中K ®家楳準（CNS) 4規怙（210x297公龙） 五、發明説明立1 ) 式中，Rt與R2同上定義，與下化學式（IV)相對應之α , /9 -不飽和甲基酮 h2c = C - C - ch3 R Ο (IV) 化學式（IV)中取代基R代表氳或是甲基。此反應能在鹼 性媒質中進行。 另外之製備方法包括使通式II之1,3-二烷基黃喋昤 衍生物之鹼金屬鹽與下列化學式（V)之氣烷基鹵化物相 反應，式中1^及1同上所定義 CH3 CII 〇 A - Hal (V) (請先閱讀背而之注意事項再填窍木頁) 裝- 訂- 線- 經濟部屮央槛準局只工消仲合作社印^ 式中，A如上所定義，Hal代表鹵原子，較佳為氛或禊 這些反應較佳是在40¾到80 t溫度進行，選擇在增 溫加壓，但通常是在大氣壓下進行。能使用組成量或過 量之各起始物。另一製備方法中的鹼鹽能在事前製造或 是在反應時製造。 反應中適用的溶劑為水溶性化合物，尤其是低级醇 類，如甲醇，丙自I ,異丙醇，及多種丁醇；以及丙酮； 吡啶；三乙胺，聚羥醇類，如乙二醇及乙二醇單甲_或 -23 - 本紙尺度边用中ffl Η家楳準（CNS)甲4規怙（210x297公;«：) A 6 It 6 五、發明説明¢2 ) 單乙醚。 化學式（Π為習知能明顯降低骨骼肌血液流量效果 及低毒性的化合物。 依據本發明，這些化合物中最具有活性者為1, 3-二 丁基7-(2-氧丙基）黃嘌昤，即，DBPOX。 本發明中所使用化合物及製備方法之更詳盡敘述在 美國專利第4,242,345號中有敘述，在此一併提供作為 參考。 4.仆.SI忒Π T)黃瞍脍钓沭趄靱備 為了抑制人類逆轉錄病毒活性，可投予人類患者如 下化學式之黃瞟B令： (請先閲讀背而之注意事項孙填寫本頁) 裝. R1 0 R3 訂- N , 式中，R1與R3至少有一為（a), (b)二者之 a)化學式如下之支鏈羥烷基 經濟部中央櫺準；员工消设合作社印5Ϊ- (II) -(CH2)n-C-CH3#

OH 式中，R4代表一逵1到3個碳原子之烷基，及n代 本紙张尺度边用中S Η家梂毕(CNS)TM規怙(210X297公放) A 6 Π 6 五、發明説明) 表2到5之整數，可選擇存在之R1或R3代表氫原子，或 脂族烴基R5為具有達6値硪原子，其磺鍵可被逹2 掴氣原子所間斷或可被羥基或氣基取代者，或 b)化學式如下之一種氧烷基 0 ,I! R〇 -C-(CH2)p-/ 式中，沪為匕-^烷基，並且，p為2,3或4, R1或R3 如上所定義，R2為一烷基（^-(：4。化學式（ii)黃瞟 昤以有效量投予以抑制逆轉錄病毒之活性。這些化 合物中已商品化者有pentoxifylline (Trental^ 。通式（11)糸之其它化合物能用於抑制人類逆轉錄 病毒之活性。這些化合物將列於下表中。 (請先闖讀背而之注意事項外填寫本頁) 裝· 線· 經濟部屮央檁準局cs：工消^:合作社印5i -25 - 本紙張尺度边用中SH家標1MCHS)T4規怙(2丨0父297公龙> 切一 Λ 6 Η 6 經濟部十央榣準灼KX工消费合作杜印製 五、發明説明（巧/·) 通錄病_活件拙制仆.公物 Compound R1 R2 R3 Number 0 II 2 CH3-C-(CH2)4- -ch3 -CH2-CH2-CH3 OH | 3 CH3-C-(CH2)4- -CH3 -ch2- CH2-O-CH3 ch3 4 " H -CH2- 0-(CH2)2-O-CH3 5 " II -H 6 • 1 II -ch2- CH2-CH3 OH 7 (( M -CH2- CH-CH3 DH 8 " " —CH2 ~ CH-(CH3)2 9 M -CH2-CH3 -CH2-0-CH2-CH3 ch3 10 -·. II -ch3 -(CH2)4-C-CH3 OH 11 " II -ch2- 0-CH2-CH3 -26 - (請先W誚背而之注意事項-in-填寫本頁) 本紙5民尺度逍用中® S家^iMCNS) »Γ 4規岱（210父297公徒） 裝· 訂- Λ 6 Η 6 經试部中央榡準而员工消"合作社印κ 五、發明説明65 ) 化合物7 -乙氣甲基-1-(5 -翔基_5-甲己基）-3-甲基 黃嘌昤，即化合物编號11者為本發明中較適用的化合物 0 要瞭解的是：本發明方法之實施，包括在體内轉變 成前述化學式（I)黃嘌昤之其中一項化合物，以及此化 合物在體内産生與前述化學式（I)黃嘌昤類似代謝物的 化合物。 例如，以口服或靜脈投予之後，pentoxifylline幾 乎完全被代謝掉，下列七種代謝物布人類尿中被鑑定出 來，其為代謝物排泄之優勢路徑： 代謝物I 1-(5-羥己基）-3,7-二甲基黃嘌昤 代謝物II 1-(5-二羥己基）-3, 7-二甲基黃嘌昤 代謝物III 1-(4,5 -二羥己基）-3,7 -二甲基黃喋昤 代謝物IV 1-(4-羧丁基）-3, 7-二甲基黃瞟昤 代謝物V 1-(3-羧丙基）-3, 7-二甲基黃嘌昤 代謝物VI 1-(5 -氧己基）-3 -甲基黃嘌昤 代謝物VII 1-(5 -羥己基）-3 -甲基黃嘌昤 代謝物I與V為主要的代謝物。代謝V是主要的尿代 謝物， 佔投予劑量約50-6-¾。在尿中僅發現少量的 pentoxifylline與代謝物 I。pentoxifylline(代謝物 II與III)之二羥基衍生物約佔排泄物之12*：,及代謝物 IV約佔85C。 -27 - 本紙張尺度边用中a B家《iMCNS) ΊΜ規格（210X297公;«：) (請先閲請背而之注意事項外项寫本頁) 裝- % A 6 Π 6 五、發明説明（2f 化學式（II)化合物依據美國專利第3, 7 3 7,43 3號及 比利時專利第831,05 1號製備（其中，R1 /R3為氣烷丙基 >。本例子中，式中，R1 / R3至少有一為叔醇，可參考國 際申案 PCT/EP86/00401, filed July 8, 1986, claiming german priority of July 8， 1985。本申請 案中提出許多合成化學式（u)黃噤昤之合成路徑的具體 實施例。 本發明具體實施例由.下所組成： a)使化學式（VI 1)3-烷基黃嘌昤與化學式（VIII)烷 化劑相反應：

式中，R3代表達4個硕原子之烷基， R' (VII) (VIII) (請先閲誚背而之注意枣項#塡莴本頁) 裝< 線< 經濟部中央楳苹局只工消赀合作社印51 X-(CH2)n-C-CH3 OH 式中，X代表鹵原子，較佳為氯，溴，或碘，或磺 酸酯基，或磷酸酯基，其中，R4及η意義同上，得 到化學式（IX)化合物

-28 (IX) 表紙張尺度边用+ ® ®家標準規格（210x29/公； 209169 Λ 6 Η 6 五、發明説明G 7 ) 此化合物在R3位置具有第三羥烷基，並且在R1在位置上 為氫及 al)使其與化學式（V 111)之相同或相異烷化劑進行 烷化，得到本發明化學式（X)之化合物 C 3 Η

4 RICIM

X (請先閲讀背而之注意事項#塡究本5 裝· 此化合物在R1及R3位置上具有相同或相異之第三羥烷基 ，或 a2)將其以下式化合物（Xa)轉變成（XI)化合物 R5 -X (Xa) 式中，X之意義與化學式（V 111)相同，並R5之意義同上 所述，

這些例子中，以在鹼性媒質存在下，或使用黃螵昤之鹽 -29 - 本紙張尺度通用中ffl Η家標毕(CNS) TM規格(2丨0X297公址) 線· 經濟部肀央標準而Α工消讣合作杜印5i 2〇9^·69 Λ 6 Η 6 五、發明説明¢8 ) 類形式較佳。 另外一具體實施例由下所列示者組成： b)化學式（XII)之1,3 -二烷基化黃噤昤

在其第7位置上，較佳是在鹼性媒質存在下，或是 為其鹽類之形式下，以一步驟反應，使其與化學式 (V 111)化合物相反應，得到化學式U I)之化合物。 另外一具體實施例由下所列示者組成： c)首先使化學式（VII)之3-烷基黃嘌昤，同樣地， 以在鹼性媒質存在下，或為其鹽類之形式，與化學式 (X 11 I)化合物相反應， R15 -X (XIII) 得到化學式（X IV )之3 , 7 -雙取代黃嘌昤 (請先閲讀背而之注意事項#塡寫木頁) 裝- 訂- 線· 經濟部4-央楳準^cs:工消许合作社印51 ο Η

V I X 後 随 基 甲 苯 二 或 基 ¥ 表 代 或 同 R5 與 15 中 式 在 本紙尺度边用中8 S家樣準（CNShM規怙（210X297公龙） % Λ 6 Π 6 五、發明説明（31) 其第一値位置，同樣地，較佳是在鹼性媒質存在下， 或為其鹽類之形式時以化學式（VIII)化合物進行取代 ，得到化學式（XV)之化合物 0

(XV) 式中，胪代表苄基或二苯甲基，在還原或水解之條 件下，將化學式（XV)之化合物，或中，R15代表苄基 或二苯甲基，或烷氧甲基或烷氧烷氧甲基予以轉變成本發 明化學式（XVI)

0 H3C_C-(CH2)n^ OH N Η (XVI) (請先間請背而之注意事項再填筠本页) 裝· 經濟部屮央標準工消伢合作社印製 若需要，使用化學式（（VIII)或（Xa)化合物再度進行反 應，得到本發明化學式（X)或（XV)化合物 另一具體實施例由下所示所組成 d )將化學式（X I)或（XV )化合物還原成本發明化合物 ，其中，R5或R15代表氣烷基，係以習知的還原劑將酮基 -31 - 本紙張尺度边用中SS家樣準(CNS)*^規格（2丨0x297公货） 經濟部屮央捃準局Μ工消作合作社印製 五、發明説明（30) 還原得到本發明之羥烷基化黃嚼昤。 此處是以化學式（VII)或（XII)之3-烷基-或1,3-二 烷基黃嗦昤作為起始物，且，化學式（VIII), (Xa)及 (XIII)之烷化劑為習知，或是能易於以文獻中所掲示的 方法製備者。因而，如化學式（VIII)第三醇能以化學 (XV II)之非立體障礙鹵酮進行有機金屬合成而製得， Hal- (CH2 )n-C0-CH3 (XVII) 在合成反應中，於一般條件下，用烷基金屬化合物R4-Μ ，尤其是鎂，鋅或鋰，在如鹵化烷基鎂（格里那化合物 )之形式下，或烷化鋰化合物之形式下，使羧基進行還 原性烷化反應（例如，參考Houben-Weyl, Vol. VI/la, Part II ( 1980), pp. 928-40,尤其是 pp. 1021 ff.及 1104-1112)〇 同樣地，化學式（XV 111)之鹵酮與鹵化甲基鎂或甲 基鋰反應，同樣會得到目標産物。 Hal-(CH2 )n-C0-R4 (XVIII) 化學式（XVIII)之羥基酮類，也能以一般方式，直 接或暫時將羥基保護住，例如，以5 , 6-二羥基喃 生成乙縮醛，再用烷基金鹛化合物緩慢將其轉變成雙_ 類（例如，參考 Houben-Weyl, Vol. VI/la, Part II (1980), pp. 1113-1124),較佳是在鹼性媒質存在下， 用磺醯或磷酸鹵化物或酐，對末端一级羥基作選擇地酯 -32 - Λ 6 Π 6 (請先閏讀背而之注意事項孙蜞筠木頁) 裝. 線- 本紙5艮尺度边用肀a Η家楳準(CHS) ΤΜ执怙(210X2974*) A 6 Η 6 經濟部中央榀準局Μ工消仪合作杜印Μ - 五、發明説明（31) 化，生成化學式（VIII)化合物。 另一合成化學式（VIII)第三醇衍生物之合成法是由 下组成：使ω-氛-1-溴烷類單金屬化（Houben-Weyl， Vol. XIII/2a(1973), pp. 102 及 319),隨後與 _R4-C【） -CH3反應，由於傾向閉環反應，由烷醇生成中間副産物 ,藉箸適合之溫度控制，仗金屬鹽之脫去最小，或是使 用ω-鹵素-1-烷醇類作為起始物質，將其以一般方式金 屬化，較佳為以四氫吡喃基- (2)醚，或以任何目標之烷 基金屬化合物，使羥基（卩0-(112)11-1131)生成烷醇物後（ 例如，參考 Houben-Weyl, Vol. XIII/2a (1973),随後 ，將其與酮R4〇C〇-CH3反應，得到上述表中之二醇類 (Houben-Weyl, Vol, VI/la, Part II (1980), P. 1029),接箸，使用適合之磺酸或磷酸衍生物，選擇地 酯化此第一羥基》 一種生成化學式（viii),其中R4代表甲基之路徑為 可經由使ω-鹵烷酸烷酯（Ha卜（CH2 )n-C00-烷基）與二當 量甲基金屬化合物相反應，經由謂使酯反應生成第三醇 並且導入二個甲基（Houben-Weyl, Vol. VI/la, Part II (1980), pp. 1171-1174)〇 同時，ω -羥基-羧 酸酯，在保護或不保護羥基下，使其與甲基金屬化合物 反應，能轉變成二醇類，例如，以四氫呋喃基-(2)或甲 氣甲基酯的形式或選擇地為環酯之内酯（例如，參考 (請先閲讀背而之注意事項#蜞寫本頁) 裝· -線· 本紙張尺度边用屮a Β家樣準(CNS)TM規格(210x297公货） A 6 Η 6 經濟部中央榣準局β工消"合作社印" 五、發明説明（32) (Houben-Wey 1 , Vol. VI/la, Part II (1980), pp.-1 174-1 179)，以磺酸或磷酸鹵化物或酐使第一羥基酯化 ，由此可得到化學式（V 11 Π之活性烷化劑。 以上述方法所能製備之化學式UIII)的適合化合物 有：[(ω-l)-羥基-(ω-l)-甲基]丁基，戊基，己基及庚 基，[(ω-2)-羥基-(o>-2h甲基]戊基，己基，庚基及辛 基，與[(ω -3卜羥基-(ω -3)-甲基]己基，庚基，辛基及 壬基氣化物，溴化物，碑化物，磺酸及磷酸。 適合將R5導入黃嘌昤之第1或7個位置，及胪導入 第7位置者為护-%(\3)或胪-父以111)化合物，烷氣 甲基及烷氣烷氣甲基衍生物由於位置待殊，致其鹵化物 能作為良好的反應劑，但是可能産生毒性之問題，至少 在大量使用時為然。基於此理由，使用其磺酸化合物較 佳是在特別之情況下，例如，易於使脂族羧酸及脂族或 芳族磺酸之混合酐類進行反應之情況下（M.H. Karger et al. J. Org. Chem. 36 (1971), ρρ· 528-531),使 其與甲醛二烷基乙縮醛或二烷氧烷基乙縮醛進行平緩且 幾乎為定量之反應（（M.H. Karger et al. J. Org. Chem. 91 (1969)， pp. 5663/5665: -34- 本紙张尺度逍用中a S家炫準(CNS) V 4規格(210X297公；《：) (請先聞讀背而之注意事項孙填寫本頁)

經濟部屮央榣準历貝工消坨合作社印M 2〇⑽9 五、發明説明（33) R7-S〇2-0-CO-)Alkyl + R8-0-CH2_0-R8 -(C χ-C4)Alkyl~C〇2R8 -r7-s〇2-o-ch2-o-r8 在此反應式中，R7代表脂族基，如甲基，乙基，或三氟 甲基，或芳族基，例如，苯基，4 -甲苯基，及R8代表與 R5或R15相同定義之烷基或烷氧烷基。 此反應能在對於反應劑為惰性之物質或無水非質子 溶劑中，於-20X：及+401C ,較佳是在ου及20*C間進行 反應。並不需要分離出高反應性磺酸中間物，由於其對 於水解及熱敏感，較佳是不需要添加齡性猎縮劑，而立 即使用其粗製産物取代黃嘌昤上之氮。 單或雙取代黃嘌昤衍生物，（IX), (XVI), (VII), (VIII)或（Xa)或（XIII)之反應，一般是在對此反應劑為 惰性之分配劑或溶劑中進行，實施之代表例子，尤其是 雙極性，非質子溶劑，例如，甲醯胺，二甲基甲醯胺， 二甲基乙醯胺，N -甲基毗咯啶酮，四甲基脲，六甲基磷 酸三醛胺，二申基亞硕，丙酮或丁酮；然而，也可以使 用醇類，如甲醇，乙二醇，及具有1到4個硪原子之烷 基，但二者合計最多有5個原子之單或二烷基酯，乙醇 ，丙醇，異丙醇，及多種丁醇；烴類，如苯，甲苯或二 甲苯；鹵化烴類，如二氯甲烷或氯仿；紕啶，及所述 -35 - Λ 6 Π 6 (請先閲讀背而之注意事項洱墳寫本頁) 裝 訂- 線· 本Μ·51ι尺度遑用中as家楳华(CHS)TM規怙(2〗0χ29_ί公徒） 經试部中央櫺準：工消代合作社印λ,,4 咖 9 Λ6 _Π_6_ 五、發明説明岌4 ) 之溶劑混合物或其與水的混合物。 烷化反應適合在鹼性濃縮劑存在下進行。適合此用 途之物質的例子有：鹼金屬，鹼土金屬氫氣化物，硪酸 化物，氫化物，醇化物及有機鹼，如三烷基胺（如，三 乙基或三丁基胺），季铵或辚酸氫氧化物及具有固定， 選擇地取代之銨或燐酸基之交鏈樹脂。黃嘌昤衍生物也 能以其各別之製備鹽形式，如鹼金屬，鹼土金屬，或選 擇之取代銨或辚酸鹽之形式，直接進行烷化反應、單及 雙取代黃嘌昤衍生物也能在前述無機濃縮劑或其驗金屬 或鹼土鹽之形式下，藉箸所謂之相轉移催化劑，例如， 第三胺，季銨或燐酸鹽或冠醚，較佳是在相轉移催化之 條件下，以二相条統進行烷化。一般商品化之適用相轉 移催化劑為四（G -C4 )烷基-及甲基三甲銨與璘酸鹽類， 甲基十四烷基，一苯基及苄基三（(^-(：4)烷基及十 六烷基三甲銨及（G-Ck)烷基及苄基三苯基辚酸鹽， 具有較大及更具對稱性結構陽離子之此種化合物一般較 具效力。 以上述步驟導入I a, R5 3及R15基，一般是在反應溫 度為使用媒質的溫度是0¾與沸點之間，較佳是在201 及1 30 〇之間，選擇地增或降壓下進行反應，其反應時 間可少於1小時或達數小時。 3 -烷基黃嘌昤（V 111)反應生成依據本發明化學式 -36 - 本紙張尺度逍用中Η «家樣率(CNS) T4規怙（210X297公;it) (請先閱讀背而之注意事項孙碭寫本頁) 裝* 訂* 經濟部+央#準而S3：工消赀合作社印51 Λ 6 ____Π_6_ 五、發明説明金5 ) (X)之化合物需要導入二個第三羥烷基。相同或相異之 取代基能依鑲連接在黃嘌昤之骨架上，或二相同羥烷基 能在不分離單釜反應之中間物下連接在黃嘌昤之骨架上 〇 化學式（XV)，於已發展出之生物鹼及胜肽合成保護 基技術的標準條件下，進行苄基及二苯甲基之還原性裂 解反應，在第7位置上生成黃嘌昤，此為一習知扳術。 除了化學還原反應外，尤其是苄基化合物與鈉在液體氮 中（Houben-Weyl, Vol. XI (1957)， pp. 974-975),以 催化性氫解反應脱去二個前述之芳烷基，使用貴金屬催 化劑亦很實用（Houben-Weyl, Vol. X/1 (1957), pp. 968-97 1 及 Vol· IV"lc, Part I ( 1980), pp. 400-404)。低级醇在這褢一般是作為反應媒質（選擇地 加入甲酸或氨），或一非質子溶劑，例如，二甲基甲醛 胺或冰醋酸；然而，也可用其與水之混合物。尤其適用 之氫化催化劑為把黑與活性磺或硫酸鋇，而其它之貴金 屬，如鉑，姥與钌常會因競争性環氫化反應，導致副反 應産生.因而只能有條件地使用。氳解反應較佳是在 20 C及10010溫度間，大氣壓下或較佳為稍撤超lObar 之壓力下進行，其所需反應時間由數分鐘到數小時。 在位置R15上為烷氣甲基或烷氣烷氣甲基之化學式 (父坫）1,3,7-三取代黃嘌昤是一種0,卜乙縮醛。因而，在 -37 - (請先閲讀背而之注意事項#墙寫木頁) 裝- 線- 本紙尺度逍用中國Η家標平（CNS) TM規怙（210x297公设） 20916^ Λ 6 Η 6

經濟部屮央榀準劝β工消炖合作杜印M 五、發明説明（36) 第7位置上之取代基能在一般酸性水解之條件下分裂（ 參考，Houben-lieyl, Vol. VI/lb (1984), PP. 741-746),得到化學式（xv i)般之7H化合物。能水解脱去之 較佳基有甲氧基，乙氣基及丙氣甲基，與甲氧乙氣基及 乙氣乙氧甲基。此反應以在稀礦物酸，如氫氣酸或硫酸 ，選擇地加入冰醋酸，二噁烷，四氫呋喃，或低级醇作 為溶液促進削，並予以加熱下較易進行。 高氛酸或有機酸，如三氟酯酸，甲酸或醋酸混合催 化量礦物酸也很有用。烷氣烷氣甲基化合物尤其能以路 易士酸，如溴化鋅或四氛化鈦，在無水煤質，較佳是在 二氣甲烷或氣仿中裂解，在水性條件下自發水解為7-溴 甲基或7-溴鋅衍生物之中間物，在礪物酸溶液中裂解， 反應溫度必需予以選擇，使第1位置上之第三羥烷基上 並無明顯脱氫反應，因而，一般是在100它以下進行。 R5或R15位置為氣烷基之化學式（XI)及（XV)黃嘌呤， 將其還原成相關之羥烷基化合物，在原理上能以鹼金屬 或以催化性氫化反應達成，但是所選擇的方法是以反應 在非溫和之條件下，並且以簡單之氫化金屬（ΜΗη),複 雜之氳化金屬（Μ[Μ12 Hn]m或氫化有機金屬使反應發生 者（Houben-Wely, Vol. IV/ld (1981), ρρ·267-282 and Vol. VI/lb (1984), pp. 141-55)。許多能作為還 原_類之複合氫化金屬，最常用到之試劑，如丙胺酸鋰 -38 - (請先nil誚背而之注意事項#填寫本頁) 裝- 線. 本紙5艮尺度边用中a s家樣準(CNS)T4規怙（210X297公;«：) 〇9l^9 Λ 6 Π 6 五、發明説明6 7 ) ，氫硼化鋰，尤其是氫硼化鈉.由於其低反應性，尤其 是能在醇，或醇之水性與純水性溶液或懸浮液中作用，: 因而易於操作。除此之外.其它習用之惰性溶劑，如醚 類（例如，二乙醚，四氫呋喃，1,2-二甲氧乙烷），烴類 及毗啶，腈類，如乙腈也能作為反應媒質，氳化反應. 適合在各別溶劑之溫度是在〇 〇及沸點間.較佳爲在室 溫下快速産生，並且在數分鐘到數小時之期間完成。 化學式（II)第三羥烷基黃嘌昤也能以化學式（XIX) 之經取代黃瞟昤進行製備，

(XIX) (請先閱讀背而之注悉事項祚质窩本萸) 經试部十央桴準，^Α工消讣合作社印5i e)含有如下學式之二柑同或相異基 -(CH2)n-CO-CH3 (XX)； -(CH2)n-CO-R4 (XXI), 或僅有化學式（XX)或（XXI)之一的取代基，與氫或R5或 RIS基在R9與RID位置上者，將其與（Ct -C3 )烷基或甲基金 屬化合物進行羰基烷化反應.得到依據本發明（IX)到 (XVI)之黃嘌昤類，或 -39 - 本紙張尺度逍用中a Η家榀準（CNS) Ή規怙（2】0χ297公;it) Λ 6 Η 6 經濟部屮央桴準局A工消赀合作社印5i 五、發明説明（38) f>具有相同或相異，化學式為_(CH2 )n-Hal(XVIIl 之基的化學式（XIX)黃瞟昤，其Hal較佳為氮或溴，或 在其它位置，在末端位置上僅有一個此種基及氫，或取 代基R5或R15 ,随後將其與化學式（XV 111)相反應，使羰 基進行還原性烷化反應，得到本發明化學式πχ)到 (XVI)之嘌昤。 IU -CO-CH3 (XVIII) g) 使r3及/或r位置為(XXiv)之基，及選擇地氫， 或R5或RIS在其它位置之化學式（X IX)黃嘌昤，以每份烷 氧羰基使用二當量甲基金屬化合物將其轉變成化學式 (IX)到（XVI)之黃嘌昤，式中R4代表甲基， -(CH2 ) n-COO- (Ct -C4 )烷基 （XXIV) 或 h) 使具有二相同或相異化學式（XXV)之基，或僅有 一個此種基與氫，或R5或R15是在R9與R»之位置之黃嘌呤 ，以酸性氫化反應，依馬可尼可夫規則，轉變成依據本 發明化學式（IX)到（XVI)之黃嘌昤，若需要，随後將其 轉變成化學式lb ’之第三羥烷基黃嘌昤，以方法e)到 h),若製得本發明化合物，其在1-或7-位置上有氫原子 ，選擇地在鹼性媒質存在下.或為其鹽類之形式下，使 用化學式（VIII)或（Xa>或（XIII)之烷化劑一轉變成化學 式（X)或（XI)或UV)之三取代化合物，或中，R2,把， -40 - 本紙5fc尺度边用中SH家棕準(哪）'174規格(210><29/公址） (請先M讀背而之注意事項孙填¾本頁) 裝- Λ 6 Π 6 五、發明説明尽9 ) R5 , RIS及η與上所定義者相同 ,R, (CH2)n·

-CH==CH (XXV) •CH. 此處需用來作起始原料之3-烷基化單或二氣烷基 _(XIXa), _(ω_ 齒院基）（XIXb), -(ω_ 院氣欺院基）-( XIXc)及-烯基黃嘌昤（XlXd)為習知，並且易於製備，例 如，其製膪可由3-烷基-黃瞟昤（VII)及磺醯氣基-或鹵酮 類（XVII)及（XVIII), ω-鹵烷基磺酸，或1’…二鹵烷類 (c f . for example： V.B. Balcheva e t a 1 ., Journal (請先閲誚背而之注意事項#填寫木頁) 裝. •礎 ur Prakt. Chem ie 327 (2985) pp . 165-168), 醯氣基或ω-鹵羧酸烷酯或與化學式（XXV)相關之磺醯氣 基或鹵烯，在先前詳述，使用化學式（V 11 I)及（Xa ),使 黃嘌昤進行單及雙取代烷化反應條件下製得。 黃瞟昤（XlXa)及（XIXc)之有機金鳐反應，在R3及Rm '基上官能化，其反應步驟之原理與製備作為烷化劑之化 學式（V 111)第三醇相同。因而，使用如烷基鉀，鈉，鋰 ，鎂，鋅，鎘，鋁及錫化合物使酮（（XlXa)及酯（XIXc) 産生還原性烷化反應。最近推Μ之烷基鈦及結化合物 (D. Seebach et al., Agnew, Chem. 95 (1983), pp. 12-16)也可以使用。然而，由於納及鉀之烷基金羼化合 —41 ** 表紙張尺度边用中SH家標準(CNS)TM規格(210X297公址） 線< 經濟部屮央標準局A工消赀合作杜印奴 Λ 6 Π 6 209169 五、發明説明（40.) 物之高反應性，有産生副反應之傾向，鋅與鎘又為相 當惰性的，故一般較偏好烷基鋰及鎂化合物（格里纳試 劑）。 強親核性有機金饜化合物對於水解及氣化作用很敏 感。因而，安全處理需在無水媒質，選擇地在惰性氯體 環境下進行。一般溶劑或分配劑主要為適合製備烷基金 屬化合物者。實施例尤以具有1或多値其它氣原子之醚 類，如二乙®，二丙醚，二丁醚，或二異戊醚.1,2-二 甲氣乙烷，四氩呋喃，二噁烷，四氫Btt喃，呋喃，及苯 甲_與脂族或芳族烴類，如石油醚，環己烷，苯，甲苯 ，二甲苯，二乙基苯及四氫萘；然而，也能使用第三肢 ，如三乙胺，或雙極性非質子溶劑，如六甲基磷酸三醛 胺及上述溶劑之混合物。羰基化合物（XI Xa)及（XIXc)與 化學式為R4 MgHa 1之格里纳得化合物反應，也能採將有 機金屬化合物置於中，並逐滴加入溶於二甲烷或1,2-二 氮乙烷之酮或酷中進行之。常推簏使用溴化鎂，由於其 參與複合之環過渡狀態，因而能增加有機金屬化合物的 親核性。 、 嗣或酯及有機金屬化合物，竹般是在-20¾及ιοου, 較佳是在Ot：及60¾間，或在無外部冷卻之室溫下，與撤 過量之一般所使用的烷基金屬化合物混合。隨後，此反應 一般是在短暫加熱下完成，一般需要數分鐘.到數小時進 -42 — 本紙尺度边用中®困家炫準（CNS)lM規格(210x297公;《：) (請先閲讀背而之注意事項#填寫本頁) 裝- 線.

經濟部屮央榡準><0只工消许合作杜印M A 6 η 6 經濟部屮央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（40.a) 行數次。所生成的鹵醇較佳Μ水性氯化銨溶液台稀醋酸予 Μ分解。 金羼鎂及鋰最適〇>-鹵烷基黃瞟呤（XIXb>之金屬化。 換言之，也能使用有機鋰試劑，以鋰取代鹵原子，一般採 用卜丁基2-丁基特丁基或苯基鋰作輔助用，格 里纳得化合物之製備法較佳是在醚，烴類，第三胺，或非 質子適合使黃瞟呤（XlXa)與（XISc)與烷基金属化合物反應 者之溶劑中，於20°到125¾間，較佳在低於lOOC下進行 反應。 若是金屬化反應是在烴中進行，隨後以組成量添加醚 ，如四氫蚨喃，或第二胺，如三乙胺常顯示很有效。 使用如丁醇，氣化鋁，四氯化硅，四氯甲烷，及醇化 鋁或鎂亦很有幫助。鹵與金屬之交換反應，通常氣的反應 較相關的溴與碘還缓慢，但是，其通常得到較佳產率的有 機金屬化合物。為了加速反應開姶，常推薦添加一些溴化 鎂，一些碘顆粒，或數滴溴，四氯甲烷，或碘化甲烷，Μ 及稍徹加熱。一般並不分離得到之格里納得化合物，但是 立即使其與化學式（XXIII)酮類，在使黃瞟昤（XlXa)及 (XIXc)作用還原性烷化之反應條件下進行作用。 將水加到具有化學式（XXV)結構要素之烯基黃瞟呤 (XlXd)之C = C雙鍵上，依據馬可尼可夫法則，羥基加到侯氫 原子較少的碳上，生成第三醇，其通常是在強酸存在下，如 硫酸，硝酸或磷酸之水溶液或懸浮體中進行。也可Μ使用 鹵化氫及磺酸，如三氟甲磺酸，酸性交換樹脂，三氟化硼 複合物或草酸作為催化劑。然而，以在硫酸中，酸性濃度 為50至65%,溫度在Ot：到10¾之間最佳。有時候也能使用 -42 a - (請先閲讀背而之注意事項再填寫本頁) 本紙5fc尺Α边用中國8家標準((：胳）肀4規格(210父297公址) ^〇9i^ Λ 6 Η 6 五、發明説明《1 ) 較低或較高之酸濃度及/或反應溫度。不論如何，反應 溫度要儘可能地低.因為在約6〇υ以上，逆脱氫反應生 成烯類可能很明顯。 添加對於酸為惰性的溶劑，如1,4-二噁烷，苯或甲 苯時也很有利，因為在酸性氫化反應中，可能生成酯中 間物，尤其是使用高濃度酸時，推餺在酸作用之後，使 用大量的水與進行短暫地加熱，以合乎酯水解的目的或 使此混合物在鹺性的範圔作用。 選擇地將依據本發明之卜及7Η-化合物（IX)或 (XVI),以合物（VI ΙΠ或（XI II)之（Xa)進行H-烷化反應 ,轉變成化學式（X)或（XV)之三取代黃嘌昤已在上文中 詳述過了。依烷基R4 (至少C2 )及/或取代i R5 (例如， 2-羥丙基）之結構，化學式（II)第三羥烷基黃嘌昤可能 會有1或2個不對稱碩原子，因而能以立體異構物的形 式存在。因而，本發明是有關純粹之立體異構化合物以 及其混合物。 述 敘 地 盡 詳 更 作 例 施 實 列 下 以 將 明 發 本 (請先閲讀背而之注意事項#项寫木頁) 裝- 訂_ -線· 經濟部屮央#準局ΕΪ工消赀合作社印製 本紙5良尺度边用中因Η家標準（CNS)TM規tM210x297公龙） 五、發明説明（4包 實施例.. 為了證明本發明化合物的效力，以化學式（11)化合 物證明其具有抑制體内逆轉錄病毒的活性。通式（I)及 (II)之多種化合物。雖然具有效果，其中，以 Pentoxifylline為本發明較佳之形式。 窖掄例1 人類Jurkat細胞（CDi T细胞淋巴瘤条）在加入牛胎 兒血清，盤尼西林，鐽谳素及L-麩胺酸之RPMI-1640中 進行培養。在指數生長期，得到不具有细胞的上澄液， 測試其RT活性（欣據Dayton等人的方法，Cell 1986, 44:941-947),並將其整分於-70Ό下冷凍備用。

Jurkat細胞在H IV-1 (10 cpm單位RT活性）加到培養液之 後4小時，以不同濃度之pentoxifylline進行預處理4 小時。將此細胞置於適合之Pentoxifylline濃度中7天， 測量不含細胞之上澄液的RT活性。同時將經過不同濃度 pentoxifyl 1 ine處理7天之未感染Turkat細胞，以錐蟲藍 染色測試7天，测試其存活率。結果K對照组百分比表示。 (請先閲讀背而之注意事項再塀寫本頁) 裝·

經濟部屮央標準局貝工消t合作社印M P s n t 〇 X i f v丨丨丨n A f撤尊爾） 祥鸫錄醢（％對照組） 0 100 、 50 84.6 100 72.9 500 69.5 1000 55.0 -44 - 本紙張尺A逍用中闽Η家樣準(CNS)T4規格(210父297公釐) Λ 6 li 6 五、發明説明（43) 細胞在與Pentoxifylline接觸7天之後，存活率大 於 9 5 S：。 由測量遭HIV急性感染之Jurkat細胞，其逆轉錄龅 活性（為HIV-1之複製指標）可知，Pentoxifylline減低 了 H IV-1之複製。 奮旆例2 由正常Η IV-1血清陰性的人损贈的血液，對其作 F ί c ο 1 1 - H y p a g u e梯度離心\得到人類周邊血液單核細胞 (PBM)。PBM在添加20¾牛胎兒血清，盤尼西材，鏈徽素 與L-麩胺酸之RPMI-16 40中進行培養。以15μ1 /ml concanavalin A刺激一夜，將其置於10單位/毫弁間白 血球素-2(IL02)中以備分析。為測試Pentorifylline對 PBM中HIV-1複製之抑制作用，在HIV-1(10 cpm單位之 RT活性）加入培養基之後，以不同濃度Pentoxify Π ine 對PBM作預處理。細胞在適合之藥物濃度中放7天，此 時，是在無細胞之上澄液中測量RT的活性。 (請先閲讀背而之注意事項洱填寫本頁) 裝· 經濟部中央標準^cx工消"合作社印" entoxifyl 1 ine 逆轉錄酶 存活率 (榭葚爾1 (¾對照紐） 1¾對照組」_ 0 100 100 25 75.5 100 50 72.9 93.5 250 30.0 ND -45 - 本紙張尺度边用中a «家榀1MCHS) <f 4规格(210X297公；tt) 9 6 1 9 η C- 66 ΛΗ 五、發明説明) 500 22.7 84.8 1000 18.6 50.0 由測量逋Η IV急性感染之周邊單核細胞的逆轉錄酶 活性（為HIV-1之複製指標）可知，Pentoxifylline減低 了 HIV-1之複製。 經濟部屮央櫺準局貝工·;))&合作社印3i 由HIV-1居間向下諏節基因表現之U38細胞 (Felber BK, Pavlakis GN, Science 1988, 239： 184 -187),將其在10 ng/ml佛爾醇-12-十四烷酸-醋酸鹽 (PMA)之存在下或不存在下進行培養。U38細胞源自細胞 狀人類細胞糸U937,其含有與氱徽素乙醯轉錄酶（CAT) 基因結合之整套HIV-1LTR。這些細胞由Dr. Barbara Felber (National Cancer Institute, Frederick, Maryland, USA)惠予提供。這些細胞以磷酸緩衝鹽水 (PBS)洗滌一次之後二小時，在不同濃度之 Pentoxifylline中進行培養。二天之後，以錐蟲藍測試 細胞的存活率，並且.用先前登載（Sodroski, J. et al.. Science 1985, 277: 171-173)之方法，在使細胞 提取物之蛋白質含量經過標準化校正之後，測量CAT的 活性。 -46 - 本紙張尺度边用中8 B家楳準(CNS)甲4規怙(210 x 297公；«：) (請先W]誚背而之注意事項洱项寫本頁) 裝· -訂 線· Λ 6 η 6 五、發明説明<5 ) 以佛爾醇酯刺激之 Pentoxifylline (撤尊爾） CAT话件 〇 44.3 50 50.4 100 23.9 500 20.3 1000 19.5 未以佛爾醇酯剌激之、 Pentoxifylline(撤尊爾） CAT 话件 〇 4.75 50 4.91 100 3.75 500 2.95 1000 2.81 (請先閲讀背而之注意事項孙塡寫本頁) -裝- 線* 經濟部十央楳準而员工消仰合作社印^

Pentoxifylline降低U38細胞之氮徽素乙醛基轉移 酶的活性（CAT),不論是否以佛爾醇酯處理皆為然。 CAT分析常用來作為判知試劑對於作用於HIV-1長末端 重覆片段（LTR)之基因活化因子的效果。 總之，黃嘌昤尤其適合作為人類治療之抗病毒藥劑 。黃嗦呤為預防及治療逆轉錄病毒在人類之感染之有價 值治療藥劑，對於AIDS病毒呈現抗病毒活性，與先前技 薛之有限及具專一性之抗病毒活性相比較，里現非比尋 -47 - 本紙張尺度边用中Η Η家標準(CNS)肀4規怙(2丨0X297公；it) Λ 6η 6 五、發明説明（） 常與令人意想不利的效果。黃嗦昤能在動物及人類細胞 組織中呈現對病毒誘發細胞之傷害予以抑制。 黃嗦昤也能明顯降低人類之死亡率與罹病率，包含 減低與AIDS與Η IV對於中央神經糸統之侵II ,變性作用及 相閟之機會性感染作用。 (請先Μ]1?背而之注意事項孙填¾本頁) 裝- 訂· 線. 經濟邡中央榀準局A工消费合作社印51 本紙張尺度边用+ ΗΗ家樣準（CNS)T4规格（2】0Χ297公；¢) 209169 本曰 A 6 B6 五、發明説明（） 專利申請案第81100520號 ROC Patent Appln No. 81100520 補充之試驗資料'中本文-附件（一） Supplemental Test Data in Chinese - Enel. I (民國82年6月1日送呈） (Submitted on June 1, 1993) 依舆測定pentoxifylline相同之方法，測定化合物卜 (5-羥基‘-5-甲基-己基）-3-甲基黃瞟昤（HWA 138)和7-乙氧 基甲基-1-(5-羥基-5-甲基己基）-3-甲基-黃瞟昤（HWA 448) 治療HIV-1病毒的藥理活性。其結果顯示經急性感染人體 中HIV-1後製的降低百分率： 浪度（撤克/毫升） u !.------------{--------裝------訂----一線 (請足5?,-!背而之;±*?項再塡.罵本頁) 經濟部中央搮準房8工龙!?舍作社印裝 -49 - 1 3,3 10 33 150 350 HWA 138 HWA 448 Γ" 3 % 1 % 10 % 8 % 38 % 12 % 65 % 40 % 70 % 60 % 82 % 80 % 本纸張又度运中®國家桴準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐〉

Claims (1)

1. 3L- 六、申請專利苑a 專利申請泵第81 100520號 ROC Patent Appln No. 81100520 修正之申請專利範圍中本文-附件（二） Amended Claims in Chinese - Enel. 〇 (民國82年6月1日送呈） (Submitted on June 1, 1993) 1. 一種對於抑制人類反轉錄病毒複製有效之藥學M成物 含有至少一锺如下化學式（II)之化合物 (汸先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) R1 〇 R]

   經 濟 部 t 央 標 準 局 員 工 消 費 合 社 印 製 式中， R1為如下化學式之一種支鐽羥烷基 V CH3 I -(CfU)n - C - CH3 I OH -50 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格(210x497公爱) 2〇θ^69 A B c D 六、申請專利範園 其中 1為 3,4或5, R2為C：L-Ce-烷基，且 R3為氫原子或被一氧原子插入之脂族烴基團。 2. 如申諳專利範圍第1項之藥學纽成物.其中，此種人類 反轉錄病毐為人類免疫不全病骞第1型（HIV-1)。 3. 如申請專利範圍第1項之’第學组成物，其中，化學式^ 之化合物為1-(5-羥基-5-甲基-己基）-3-甲基黃瞟呤（ HVA 138)或7-乙氧基甲基-1-(5-羥基-5 -甲基己基）-3-甲基-黃嫘昤（HWA 448)。 (請先聞讀背面之>±意事項再蜞商本頁) ,装· -訂· 51 - .綠. 經 濟 部 中 央 搮 準 局 貝 工 消 費 合 作 社 印 製 本紙張尺度逍用中國國家標準(CNS)甲4規格(210X297公釐）