TW202210077A

TW202210077A - 非人類之動物用抗菌劑

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Publication number: TW202210077A
Application number: TW110120158A
Authority: TW
Inventors: 四釜洋; 樋口浩司; 渥美省吾; 井村貴之
Original assignee: 日商石原產業股份有限公司
Priority date: 2020-06-03
Filing date: 2021-06-03
Publication date: 2022-03-16
Also published as: EP4162938A1; KR20230035027A; BR112022024697A2; CA3181148A1; AU2021282645A1; MX2022015290A; EP4162938A4; WO2021246453A1; US20230255939A1; JPWO2021246453A1; CN115768517A

Abstract

本發明係提供新穎的抗菌劑，並將式(I)或(II)所示之化合物或其鹽用作非人類之動物用抗菌劑。

Description

非人類之動物用抗菌劑

本揭示係關於非人類之動物用抗菌劑。 [相關申請的參照]

本專利申請案係伴隨基於在2020年6月3日申請之日本專利申請案2020-097174號之優先權的主張，該先前的專利申請案中之所有揭示內容係藉由引用而成為本說明書的一部分。

已知馬拉色菌屬菌為常駐於動物的皮膚之擔子菌系酵母，由於其以脂質作為營養源而進行增殖，故定居於皮脂的許多部分，成為花斑癬、脂漏性皮膚炎、毛囊炎、異位性皮膚炎或尋常性乾癬等皮膚疾患的原因。

作為以往的針對於源自馬拉色菌屬菌之皮膚疾患之治療劑，可列舉二硫化硒、2-巰基吡啶-N-氧化物鋅、吡羅克酮乙醇胺鹽(piroctone olamine)、咪康唑硝酸鹽(miconazole nitrate)或酮康唑(ketoconazole)等咪唑系化合物、伊曲康唑(itraconazole)或氟康唑(fluconazole)等三唑系化合物。

通常，皮膚常駐菌持有防止皮膚的雜菌的繁殖所伴隨之頭皮臭之效果或藉由適度分解皮脂而保持弱酸性狀態之效果等所謂的屏障效果，但以往的動物用治療劑不僅會殺死病原菌，甚至會殺死皮膚常駐菌，因而會有破壞皮膚的屏障效果之疑慮。此外，二硫化硒已被指出經口毒性或脫毛、肌膚發炎、衰弱、倦怠感、毛髮變色等副作用，2-巰基吡啶-N-氧化物鋅則已被指出硫臭或環境激素之疑慮。再者，雖然咪康唑硝酸鹽等咪唑系化合物或伊曲康唑等三唑系化合物具有阻礙菌類的脂質合成之作用，但在藉由阻礙菌的細胞膜的生合成而表現出抗菌活性之性質上，直至表現出充分的效果為止需要時間，並需要長期投予。已知若長期地連續投予相同的藥劑，耐性菌的產生風險會明顯地上升。

如上述，脂質合成阻礙劑係由於即便投予藥劑亦不會即效地表現出抗菌活性，因而不適合於在抗菌活性表現上要求即效性之投予方法，例如藉由醫療用洗髮精預防或治療動物皮膚疾患。於是，正謀求開發出安全性較高，與以往的治療劑具有不同的作用機制，且即效地發揮出抗菌活性之動物用治療劑。

例如，在非專利文獻1中，已記載屬於氰基咪唑系化合物之氰唑磺菌胺(cyazofamid)的作用機制為呼吸阻礙。

在專利文獻1中，已記載包含氰唑磺菌胺在內之咪唑系化合物有用於作為有害生物防除劑，在專利文獻2中，已記載含有包含氰唑磺菌胺在內之咪唑系化合物作為有效成分之防除劑對源自於寄生蟲之動物疾患，例如諸如球蟲(coccidium)之寄生蟲係有用。然而，在此等公報中並未記載化合物的抗菌活性或抑制源自於馬拉色菌屬菌之動物的皮膚疾患之方法。

[專利文獻1] 特開平1-131163號公報 [專利文獻2] 國際公開公報WO 01/14341

[非專利文獻1] Pesticide Biochemistry and Physiology, 2001, vol.71：107-115

本揭示者等人發現可將後述之式(I)或(II)所示之氰基咪唑系化合物(以下，亦稱為本揭示之化合物)使用作為新穎的非人類之動物用抗菌劑。

從而，本揭示係提供新穎的非人類之動物用抗菌劑。

即，本揭示係提供含有式(I)或(II)所示之化合物或其鹽之非人類之動物用抗菌劑。

[式中， R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子、羥基、硝基、氰基、硫代氰酸酯基、三甲基矽基、可經取代之烷基、可經取代之烯基、可經取代之炔基、可經取代之烷氧基、可經取代之烯氧基、可經取代之炔氧基、可經取代之芳基、可經取代之芳氧基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、

(R³ 為可經取代之烷基、可經取代之烯基、可經取代之炔基、可經取代之芳基、可經取代之5～6員芳香族雜環基或-NR⁴ R⁵ 基(R⁴ 及R⁵ 為可經取代之烷基)，m為0～2的整數)，或下式所示之基：

(式中， W¹ 為氧原子或硫原子， W² 為氧原子、硫原子或-NH-， n為0～1的整數， R⁶ 為可經取代之烷基或可經取代之芳基)； X為氫原子、羥基或-OY； Y為下式：

(式中， R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之烷氧基、可經取代之烯基、可經取代之烯氧基、可經取代之芳基、可經取代之芳氧基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、 -NR⁸ R⁹ 基(R⁸ 及R⁹ 各自獨立地為氫原子、可經取代之烷基或可經取代之烯基，或者與彼此鄰接之氮原子共同形成5～7員飽和雜環，惟，排除R⁸ 及R⁹ 同時為氫原子之情況)或 -CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基、可經取代之烯基或可經取代之芳基))]。

根據本揭示，使用式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，便可提供新穎的非人類之動物用抗菌劑。式(I)或(II)所示之化合物或其鹽在對以馬拉色菌屬菌為首之真菌即效地發揮出優異的抗菌活性上可有利地加以利用。此外，式(I)或(II)所示之化合物或其鹽在對以葡萄球菌屬菌為首之細菌即效地發揮出優異的抗菌活性上可有利地加以利用。

在本說明書中，所謂「鹵素」，係意味氟、氯、溴、碘，較佳為氟、氯、溴。

此外，在本說明書中，作為基團或基團的一部分之「烷基」、「烯基」或「炔基」之用語在沒有特別定義之前提下，係各自意味基團為直鏈狀、分枝鏈狀、環狀或該等之組合之烷基、烯基或炔基。此外，例如作為基團或基團的一部分之「碳數1～6的烷基」之情況之所謂「碳數1～6」，係意味該烷基的碳數為1～6個。

此外，在本說明書中，所謂烷基「可經取代」，係意味烷基上之1個或其以上的氫原子可被1個或其以上的取代基(可相同或不同)所取代。熟習該項技術者將明白取代基的最大數量可依烷基上之能夠取代之氫原子的數量而決定。此等針對烷基以外之官能基亦相同。

在R¹ ～R¹² 所表示之烷基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，直鏈狀或分枝鏈狀烷基的碳數較佳為1～12，更佳為1～6，再更佳為1～3。作為直鏈狀或分枝鏈狀烷基，可列舉例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、正己基、庚基、辛基、壬基或癸基等，較佳為甲基、乙基、正丙基或異丙基，更佳為甲基或乙基。

在R¹ ～R¹² 所表示之烷基為環狀之情況，環狀烷基(環烷基)的碳數較佳為3～7，更佳為3～6。作為環烷基，可列舉例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基等。

烷基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在烷基為環狀(環烷基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

在R¹ 、R² 及R⁷ 所表示之烷氧基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，烷氧基的碳數較佳為1～12，更佳為1～6，再更佳為1～3。作為直鏈狀或分枝鏈狀烷氧基，可列舉例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、異丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、正己氧基、庚氧基、辛氧基、壬氧基或癸氧基等，較佳為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基，更佳為甲氧基或乙氧基。

在R¹ 、R² 及R⁷ 所表示之烷氧基為環狀之情況，環狀烷氧基(環烷氧基)的碳數較佳為3～7，更佳為3～6。作為環烷氧基，可列舉例如環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基或環己氧基等。

上述烷氧基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在烷氧基為環狀(環烷氧基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

在R¹ 、R² 、R³ 、R⁷ 、R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 所表示之烯基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，直鏈狀或分枝鏈狀烯基的碳數較佳為2～12，更佳為2～6，再更佳為2～4。作為直鏈狀或分枝鏈狀烯基，可列舉例如烯丙基或香葉基(geranyl)等。

在R¹ 、R² 、R³ 、R⁷ 、R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 所表示之烯基為環狀之情況，環狀烯基(環烯基)的碳數較佳為5～8，更佳為5～6。作為環烯基，可列舉例如環戊烯基、環己烯基或環辛烯基等。

上述烯基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在烯基為環狀(環烯基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

在R¹ 、R² 及R⁷ 所表示之烯氧基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，直鏈狀或分枝鏈狀烯氧基的碳數較佳為2～12，更佳為2～6，再更佳為2～4。作為直鏈狀或分枝鏈狀烯氧基，可列舉例如2-丙烯氧基等。

在R¹ 、R² 及R⁷ 所表示之烯氧基為環狀之情況，環狀烯氧基(環烯氧基)的碳數較佳為5～8，更佳為5～6。作為環烯氧基，可列舉例如環戊烯氧基、環己烯氧基或環辛烯氧基等。

上述烯氧基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在烯氧基為環狀(環烯氧基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

在R¹ 、R² 及R³ 所表示之炔基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，直鏈狀或分枝鏈狀炔基的碳數較佳為2～12，更佳為2～6，再更佳為2～4。作為直鏈狀或分枝鏈狀炔基，可列舉例如2-丙炔基等。

在R¹ 、R² 及R³ 所表示之炔基為環狀之情況，環狀炔基(環炔基)的碳數較佳為6～10。作為環炔基，可列舉例如環辛炔基等。

上述炔基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在炔基為環狀(環炔基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

在R¹ 及R² 所表示之炔氧基為直鏈狀或分枝鏈狀之情況，直鏈狀或分枝鏈狀炔氧基的碳數較佳為2～12，更佳為2～6，再更佳為2～4。作為直鏈狀或分枝鏈狀炔氧基，可列舉例如2-丙炔氧基等。

在R¹ 及R² 所表示之炔氧基為環狀之情況，環狀炔氧基(環炔氧基)的碳數較佳為6～10。作為環炔氧基，可列舉例如環辛炔氧基等。

上述炔氧基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。在炔氧基為環狀(環炔氧基)之情況，作為取代基，除了前述者以外，尚可列舉可經鹵素原子取代之烷基。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

R¹ 、R² 、R³ 、R⁶ 、R⁷ 、R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 所表示之芳基的碳數較佳為6～14，更佳為6～10。作為芳基，可列舉例如苯基、萘基等，較佳為苯基。

R¹ 、R² 、R³ 、R⁶ 、R⁷ 、R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 所表示之芳氧基的芳基部分的碳數較佳為6～14，更佳為6～10。作為芳氧基，可列舉苯氧基、萘氧基等，較佳為苯氧基。

上述芳基或芳氧基可經取代，作為取代基，可列舉鹵素原子；可經鹵素原子取代之烷基；可經鹵素原子取代之烷氧基；可經鹵素原子取代之烷硫基；可經鹵素原子取代之苯基；經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基；羥基等。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。

R¹ 、R² 、R³ 及R⁷ 所表示之5～6員芳香族雜環基較佳為具有1或複數個相同或不同的選自由氮、氧及硫所組成之群組之雜原子之芳香族雜環。上述5～6員芳香族雜環基中之雜原子的數量較佳為1～4個，更佳為1～3個，再更佳為1或2個。作為上述5～6員芳香族雜環基，可列舉例如噻吩基、呋喃基、噻唑基或吡啶基等。

上述5～6員芳香族雜環基可經取代，可列舉鹵素原子、硝基、氰基、可經鹵素原子取代之烷基、烷氧烷基、可經鹵素原子取代之烷氧基、可經鹵素原子取代之亞甲二氧基、-NR¹³ R¹⁴ 基(R¹³ 及R¹⁴ 為氫原子、可經鹵素原子取代之烷基或烷醯基)、-SOpR¹⁵ 基(R¹⁵ 為可經鹵素原子取代之烷基，p為0～2的整數)等。此等取代基的個數較佳為0～5個，更佳為1或2個。另外，R¹³ ～R¹⁵ 中所包含之烷基部分可與上述R¹ ～R¹² 中之烷基部分相同。

作為R⁸ 及R⁹ 基與彼此鄰接之氮原子共同地形成之5～7員飽和雜環，較佳為具有1或複數個相同或不同的選自由氮、氧及硫所組成之群組之雜原子之飽和雜環。上述5～7員飽和雜環中之雜原子的數量較佳為1～4個，更佳為1～3個，再更佳為1或2個。作為上述5～7員飽和雜環，可列舉例如哌啶基、吡咯啶基、嗎啉基或硫代嗎啉基等。

根據本揭示之較佳態樣，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子、羥基、硝基、氰基、硫代氰酸酯基、三甲基矽基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷基、可經取代之環烷基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烯基、可經取代之環烯基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀炔基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷氧基、可經取代之苯氧基、可經取代之苯基、可經取代之萘基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、-SO_m R³ (R³ 為可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷基、可經取代之環烷基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烯基、可經取代之環烯基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀炔基、可經取代之芳基、可經取代之吡啶基、-NR⁴ R⁵ 基(R⁴ 及R⁵ 為直鏈狀或分枝鏈狀烷基)，m為0～2的整數)或下列基：

(W¹ 為氧原子或硫原子，W² 為氧原子、硫原子或-NH-，n為0～1的整數，R⁶ 為可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷基或可經取代之苯基)。

此外，根據本揭示之另一較佳態樣，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子、硝基、氰基、可經鹵素原子取代之烷基、經可經鹵素原子取代之烷氧基取代之烷基、經苯基取代之烷基、經被烷基、鹵素原子或羥基取代之苯基取代之烷基、可經鹵素原子取代之烯基、可經鹵素原子取代之烷氧基、可經鹵素原子取代之苯基、經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基、經可經鹵素原子取代之烷氧基取代之苯基、可經鹵素原子取代之噻吩基、吡啶基、呋喃基、 -S(O)_m R³ 基(R³ 為可經苯基經取代之烷基、可經鹵素原子取代之苯基、可經被鹵素原子取代之烷基取代之吡啶基、烯基或-NR⁴ R⁵ 基(R⁴ 及R⁵ 為烷基)，m為0～2的整數)或 -C(＝O)-(NH)_n R⁶ (R⁶ 為可經鹵素原子取代之烷基或可經鹵素原子取代之苯基，n為0～1的整數)。

此外，根據本揭示之另一較佳態樣，R¹ 為未經取代之烷基、經鹵素原子取代之烷基、經可經鹵素原子取代之苯基取代之烷基、可經鹵素原子取代之烯基、烷硫基、未經取代之苯基、經鹵素原子取代之苯基、經可經鹵素原子取代之烷基取代之苯基、經可經鹵素原子取代之烷氧基取代之苯基，R² 為鹵素原子。

此外，根據本揭示之另一較佳態樣，R¹ 為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正戊基、3-氯正丙基、4-氯正丁基、烯丙基、乙硫基、苯基、2-氯苯基、2-氟苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2-氯-4-甲基苯基、3-氯-4-甲基苯基、4-氯-3-甲基苯基、苄基或2-氟苄基，R² 為氯原子或溴原子。

此外，根據本揭示之更佳態樣，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子或可經取代之苯基。

此外，根據本揭示之更佳態樣，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。

此外，根據本揭示之更佳態樣，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經碳數1～6的烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。

此外，根據本揭示之再更佳態樣，R¹ 及R² 為彼此不同的基。

此外，根據本揭示之更佳態樣，X為氫原子、羥基或-OY，較佳為氫原子或羥基，更佳為氫原子。

根據本揭示之更佳態樣，Y為下式所示之基：

(式中，R⁷ 為可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷基、可經取代之環烷基、可經取代之苯基、可經取代之噻吩基、可經取代之呋喃基或-NR⁸ R⁹ 基(R⁸ 及R⁹ 各自獨立地為氫原子、可經取代之烷基或可經取代之烯基，或者與彼此鄰接之氮原子共同形成5～7員飽和雜環，惟，排除R⁸ 及R⁹ 同時為氫原子之情況)。

此外，根據本揭示之另一較佳態樣，R⁷ 為可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷基、可經取代之直鏈狀或分枝鏈狀烷氧基、可經取代之環烷基、可經取代之苯基、可經取代之苯氧基、-NR⁸ R⁹ 基(R⁸ 及R⁹ 各自獨立地為氫原子、可經取代之烷基或可經取代之烯基，或者與彼此鄰接之氮原子共同形成5～7員飽和雜環，惟，排除R⁸ 及R⁹ 同時為氫原子之情況)或-CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基或可經取代之苯基)。

此外，根據本揭示之另一較佳態樣，R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之苯基、可經取代之烷氧基、可經取代之苯氧基或-CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基或可經取代之苯基)。

此外，根據本揭示之特佳態樣，式(I)或(II)所示之化合物係選自下列者： 5-氯-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(4-氯-3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-1-羥基-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈及 4-氯-1-羥基-5-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈。

另外，式(I)或(II)所示之化合物或其鹽可依照日本專利特開平8-283243號公報及日本專利特開平 8-225539號公報等所記載之方法予以製造。

本揭示之化合物可單獨使用，亦可組合2種以上使用。

根據較佳態樣，本揭示之化合物亦可呈鹽的形態。上述鹽較佳為藥學上或化妝上可容許的鹽。上述所謂藥學上或化妝上可容許的鹽，係表示可使用作為醫藥之鹽。就式(I)或(II)所示之化合物而言，在具有酸性基或鹼性基之情況，可藉由與鹼或酸進行反應，而使其成為鹼性鹽或酸性鹽。

作為酸性鹽之例，可列舉鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽等無機酸鹽，醋酸鹽、丙酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等有機酸鹽。此外，作為鹼性鹽之例，可列舉鈉鹽、鉀鹽等鹼金屬鹽，及鈣鹽、鎂鹽等鹼土族金屬鹽等。

本揭示之化合物或其鹽有時會因在大氣中放置或進行再結晶而吸收水分並附有吸附水，或者成為水合物，本揭示之化合物或其鹽亦含括該各種水合物、溶媒合物及多晶型化合物。

本揭示之化合物或其鹽可依原樣使用作為藥劑，亦可視需要組合上述載體、有效成分、藥理成分、化妝成分等其他追加成分，並依常法加以製劑化。

根據本揭示之較佳態樣，在上述製劑中，本揭示之化合物的含量通常為0.00001～30質量%，較佳為0.0001～10質量%，更佳為0.001～0.05質量%。

根據本揭示之較佳態樣，作為使用於上述製劑之載體，較佳為藥學上或化妝上可容許的載體，可列舉例如賦形劑、皮膜劑、黏合劑、增量劑、崩解劑、潤滑劑、稀釋劑、滲透壓調整劑、pH調整劑、分散劑、乳化劑、防腐劑、安定化劑、抗氧化劑、著色劑、紫外線吸收劑、保濕劑、增黏劑、活性增強劑、香料、矯味劑、矯臭劑等通常可使用之載體。

此外，作為其他追加成分，亦可使用例如保濕劑、抗炎症劑、殺菌劑、抗菌劑、紫外線保護劑、細胞賦活劑、化妝成分等。

含有本揭示之化合物或其鹽之製劑可以醫藥品、醫藥部外品、動物藥或化妝料之形式提供。

根據較佳態樣，作為含有本揭示之化合物或其鹽之製劑的形態，可製成例如乳霜、乳液、洗劑、懸浮液、凝膠、粉末、面膜、薄片、貼片、棒狀物、餅狀物等可使用於化妝料之任意的形態，但並不特別限定於此等。

此外，作為上述製劑的更具體的形態，從皮膚炎等的治療之觀點而言，可列舉洗劑、洗髮精、乳霜、乳液、軟膏、貼片等外用藥，除此以外，洗髮精、沐浴乳等頭部或身體用的洗淨劑、潤絲精、護髮素、護髮乳、髮膜、養髮液、髮霜，以及頭部或身體用的洗劑、乳霜、乳液等頭部或身體用的化妝料等，但並不特別限定於此等。

本揭示之製劑可經口投予，亦可非經口投予。作為用於經口投予之劑型，可列舉例如諸如錠劑、被覆錠劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑之固形投予形態，以及諸如酏劑、糖漿或懸浮劑之液體投予形態。作為非經口投予的劑型，可列舉注射、輸液、局部、外用劑、經皮、經黏膜、經鼻、經腸、吸入、栓劑、快速輸注、貼附劑等。該製劑的較佳形態為諸如外用散劑、擦劑、洗劑、軟膏劑、乳霜劑、凝膠劑、氣溶膠噴霧劑、泵噴霧劑、貼布劑、敷劑之皮膚外用劑。

本揭示之化合物或其鹽可即時地發揮出對以馬拉色菌屬菌為首之真菌之優異的抗菌活性。從而，根據一態樣，本揭示之製劑可用於改善起因於馬拉色菌屬菌之症狀或疾患。在此處，所謂「改善」，不僅包含已確立之病態的治療，亦包含防止或延遲將來有確立之可能性之病態之預防。此外，本揭示中之改善係視為較佳亦包含使皮膚疾患的症狀或狀態好轉，防止或延遲皮膚疾患的症狀或狀態的惡化，逆轉、防止或延遲皮膚疾患的症狀或狀態的進行。

在本揭示中，所謂馬拉色菌屬菌(Malassezia )，係隸屬於馬拉色菌科(Malasseziaceae)之真菌，可列舉例如Malassezia furfur、Malassezia pachydermatis、Malassezia globosa、Malassezia obtusa、Malassezia restricta、Malassezia sympodialis、Malassezia slooffiae、Malassezia dermatis、Malassezia yamatoensis、Malassezia japonica、Malassezia nana等。

在本揭示中，作為小孢癬菌屬菌( Microsporum)，係隸屬於分節癬菌科(Arthrodermataceae)之真菌，可列舉例如Microsporum canis等。

在本揭示中，作為分節癬菌屬菌( Arthroderma)，係隸屬於分節癬菌科(Arthrodermataceae)之真菌，可列舉例如Arthroderma vanbreuseghemii等。

根據較佳態樣，起因於馬拉色菌屬菌之症狀或疾患為皮膚疾患。作為該種起因於馬拉色菌屬菌之皮膚疾患，可列舉例如花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、過敏性皮膚炎等，較佳係可列舉花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、過敏性皮膚炎、犬的馬拉色菌皮膚炎、異位性皮膚炎、馬拉色菌性外耳炎、貓的馬拉色菌皮膚炎、馬拉色菌性外耳炎、馬的馬拉色菌皮膚炎等。

本揭示之化合物或其鹽可即時地發揮出對以葡萄球菌屬菌為首之細菌之優異的抗菌活性。從而，根據一態樣，本揭示之製劑可用於改善起因於葡萄球菌屬菌之症狀或疾患。在此處，所謂「改善」，不僅包含已確立之病態的治療，亦包含防止或延遲將來有確立之可能性之病態之預防。此外，本揭示中之改善係視為較佳亦包含使皮膚疾患的症狀或狀態好轉，防止或延遲皮膚疾患的症狀或狀態的惡化，逆轉、防止或延遲皮膚疾患的症狀或狀態的進行。

在本揭示中，作為細菌，可列舉例如葡萄球菌屬菌、鏈球菌屬菌、巴斯德氏菌屬菌、埃希氏菌屬菌、假單胞菌屬菌、變形桿菌屬菌、克雷伯氏菌屬菌等。

在本揭示中，所謂葡萄球菌屬菌( Staphyocccus)，係隸屬於葡萄球菌科(Staphylococcaceae)之細菌，可列舉例如Staphylococcus pseudintermedius、Staphylococcus intermedius、Staphylococcus schleiferi、Staphy1ococcus delfini、Staphylococcus epidermidis、Staphylococcus xylosus、Staphylococcus aureus等。

在本揭示中，所謂鏈球菌屬菌(Streptococcus )，係隸屬於鏈球菌料(Streptococaceae)之細菌，可列舉例如Streptococcus canis、Streptococcus pyrogenes、 Streptococcus suis、Streptococcus disgalactiae等。

在本揭示中，所謂巴斯德氏菌屬菌( Pasteure11a)，係隸屬於巴斯德氏菌科(Pasteure11aceae)之細菌，可列舉例如Pasteurella multocida等。

在本揭示中，所謂埃希氏菌屬菌( Escherichia)，係隸屬於腸桿菌科(Enterobacteriaceae)之細菌，可列舉例如Escherichia coli等。

在本揭示中，所謂假單胞菌屬菌( Pseudomonaceae)，係隸屬於假單胞菌科(Pseudomonas)之細菌，可列舉例如Pseudomonas aeruginosa等。

在本揭示中，所謂變形桿菌屬菌(Proteus)，係隸屬於腸桿菌科(Enterobacteriaceae)之細菌，可列舉例如Proteus mirabilis等。

在本揭示中，所謂克雷伯氏菌屬菌( K1ebsie11a)，係隸屬於腸桿菌科(Enterobacteriaceae)之細菌，可列舉例如Klebsiella pneumoniae等。

根據較佳態樣，起因於細菌之症狀或疾患為皮膚疾患。作為該種起因於細菌之皮膚疾患，可列舉例如膿皮症及外耳炎。

本揭示之化合物或其鹽的投予對象若考慮到殺死馬拉色菌屬菌等真菌或葡萄球菌屬菌等細菌之必要性等，較佳為非人類之動物。作為更具體的投予對象，可列舉需要抑制馬拉色菌屬菌等真菌或葡萄球菌屬菌等細菌的增殖或改善源自於馬拉色菌屬菌等真菌或葡萄球菌屬菌等細菌之皮膚疾患之動物。更具體而言，較佳係對犬、貓或馬等非人類之動物投予本揭示之化合物或其鹽。本揭示之化合物或其鹽的投予部位並無特別限定，可為對象真菌所存在之皮膚等組織或器官、細胞。

本揭示之化合物或其鹽可藉由以用於產生抗真菌活性之有效量投予至有此需要的對象，而實施抑制真菌的增殖或殺菌。從而，根據本揭示之另一態樣，係提供一種抑制真菌的增殖或殺菌之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的對象而成。根據另一較佳態樣，上述真菌為馬拉色菌屬菌。根據另一較佳態樣，上述真菌為Malassezia pachydermatis。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種改善起因於馬拉色菌屬菌之症狀或疾患之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的對象而成。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種改善起因於Malassezia pachydermatis之症狀或疾患之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的犬、貓或馬等非人類之動物而成。

本揭示之化合物或其鹽可藉由以用於產生抗細菌活性之有效量投予至有此需要的對象，而實施抑制細菌的增殖或殺菌。從而，根據本揭示之另一態樣，係提供一種抑制細菌的增殖或殺菌之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的對象而成。根據另一較佳態樣，上述細菌為葡萄球菌屬菌。根據另一較佳態樣，上述細菌為Staphylococcus pseudintermedius。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種改善起因於葡萄球菌屬菌之症狀或疾患之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的對象而成。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種改善起因於Staphylococcus pseudintermedius之症狀或疾患之方法，其係包含將式(I)或(II)所示之化合物的有效量投予至有此需要的犬、貓或馬等非人類之動物而成。

本揭示之方法可為治療性方法，亦可為非治療性方法。具體而言，可為在美容目的下之使用，或在增進健康之目的下之非治療性使用。從而，根據本揭示之較佳態樣，上述方法不包含醫療行為，即藉由治療而對個體進行處置之行為。

本揭示之化合物或其鹽的有效量係依投予對象的動物種、性別、年齡、體重、狀態或其他因素而變動，其係使成為對象之菌的增殖成為對照的50%以下，較佳為40%以下，更佳為30%以下，再佳為20%以下，再更佳為10%以下之量。

上述投予中之本揭示之化合物的用量、投予途徑、投予間隔係依投予對象的動物種、性別、年齡、體重、狀態或其他因素而變動，故無法一概地規定。例如，在局部投予至犬的患部之情況，本揭示之化合物的投予量就體重10kg的成犬每1隻，每1日之用量而言通常為0.005～350mg/日，就每1週之較佳用量而言為0.01～175mg/週。此外，在局部投予至貓的患部之情況，本揭示之化合物的投予量就體重4kg的成貓每1隻，每1日之用量而言通常為0.002～140mg/日，就每1週之較佳用量而言為0.004～70mg/週。

此外，根據本揭示之另一態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽的使用，其係使用於製造抗真菌劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽的使用，其係使用於製造用於改善起因於馬拉色菌屬菌之症狀或疾患之製劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為皮膚疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、異位性皮膚炎或外耳炎。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述使用為化妝性或非治療性使用。

此外，根據本揭示之另一態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽的使用，其係使用於製造抗細菌劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽的使用，其係使用於製造用於改善起因於葡萄球菌屬菌之症狀或疾患之製劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為皮膚疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為膿皮症或外耳炎。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述使用為化妝性或非治療性使用。

此外，根據本揭示之另一態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，其係用於使用作為抗真菌劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，其係用於改善起因於馬拉色菌屬菌之症狀或疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為皮膚疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、異位性皮膚炎或外耳炎。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述抗真菌劑為動物藥。

此外，根據本揭示之另一態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，其係用於使用作為抗細菌劑。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，係提供一種式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，其係用於改善起因於葡萄球菌屬菌之症狀或疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為皮膚疾患。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述症狀或疾患為膿皮症或外耳炎。此外，根據本揭示之另一較佳態樣，上述抗細菌劑為動物藥。

此外，根據本揭示之一態樣，係提供以下者。 [1] 一種非人類之動物用抗菌劑，其含有式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，

(式中，R³ 為可經取代之烷基、可經取代之烯基、可經取代之炔基、可經取代之芳基、可經取代之5～6員芳香族雜環基或-NR⁴ R⁵ 基(式中，R⁴ 及R⁵ 為可經取代之烷基)，m為0～2的整數)，或下式所示之基：

(式中， R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之烷氧基、可經取代之烯基、可經取代之烯氧基、可經取代之芳基、可經取代之芳氧基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、 -NR⁸ R⁹ 基(式中，R⁸ 及R⁹ 各自獨立地為氫原子、可經取代之烷基或可經取代之烯基，或者與彼此鄰接之氮原子共同形成5～7員飽和雜環，惟，排除R⁸ 及R⁹ 同時為氫原子之情況)或 -CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(式中，R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基、可經取代之烯基或可經取代之芳基))]。 [2] 如[1]所記載之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子或可經取代之苯基。 [3] 如[1]或[2]所記載之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。 [4] 如[1]至[3]中任一項所記載之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經碳數1～6的烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。 [5] 如[1]至[4]中任一項所記載之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 為彼此不同的基。 [6] 如[1]至[5]中任一項所記載之抗菌劑，其中， X為氫原子、羥基或-OY； Y為下式所示之基：

(式中，R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之苯基、可經取代之烷氧基、可經取代之苯氧基或-CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(式中，R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基或可經取代之苯基)。 [7] 如[1]至[6]中任一項所記載之抗菌劑，其中，X為氫原子或羥基。 [8] 如[1]至[7]中任一項所記載之抗菌劑，其中，前述式(I)或(II)所示之化合物係選自下列者： 5-氯-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(4-氯-3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-1-羥基-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈，及 4-氯-1-羥基-5-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈。 [9] 如[1]至[8]中任一項所記載之抗菌劑，其中，前述菌為真菌。 [10] 如[9]所記載之抗菌劑，其中，前述真菌為選自馬拉色菌屬菌(Malassezia)、小孢癬菌屬菌(Microsporum)及分節癬菌屬菌(Arthroderma)中之至少一者。 [11] 如[9]或[10]所記載之抗菌劑，其係用於改善起因於選自馬拉色菌屬菌、小孢癬菌屬菌及分節癬菌屬菌中之至少一者之症狀或疾患。 [12] 如[11]所記載之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為皮膚疾患。 [13] 如[11]或[12]所記載之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、異位性皮膚炎、皮膚絲狀菌症或外耳炎。 [14] 如[1]至[8]中任一項所記載之抗菌劑，其中，前述菌為細菌。 [15] 如[14]所記載之抗菌劑，其中，前述細菌為選自葡萄球菌屬菌(Staphylococcus)、鏈球菌屬菌( Streptococcus)、巴斯德氏菌屬菌(Pasteurella)、埃希氏菌屬菌(Escherichia)、假單胞菌屬菌(Pseudomonaceae)、變形桿菌屬菌(Proteus)及克雷伯氏菌屬菌(Klebsiella)中之至少一者。 [16] 如[14]或[15]所記載之抗菌劑，其係用於改善起因於選自葡萄球菌屬菌、鏈球菌屬菌、巴斯德氏菌屬菌、埃希氏菌屬菌、假單胞菌屬菌、變形桿菌屬菌及克雷伯氏菌屬菌中之至少一者之症狀或疾患。 [17] 如[16]所記載之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為皮膚疾患。 [18] 如[16]或[17]所記載之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為膿皮症或外耳炎。 [19] 如[1]至[18]中任一項所記載之抗菌劑，其中，前述非人類之動物為犬、貓或馬。 [實施例]

其次，記載本發明所涉及之試驗例，但此等並未限定本發明。

製造例1：5-氯-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.1) 按照日本專利特開平8-225539號的實施例1～5所記載之方法製造5-氯-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.1)(CAS編號：120118-14-1)。

製造例2：4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.2) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.2(CAS編號：120118-10-7)。 MS：184.2[M+H]⁺

製造例3：5-氯-4-(3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.3) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.3(CAS編號：120118-18-5)。 MS：218.2[M+H]⁺

製造例4：5-氯-4-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.4) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.4。

¹ H-NMR(DMSO-d6):δ7.45-7.31(m, 4H), 3.45-3.28(br, 1H), 2.23(s, 3H) MS：218.1[M+H]⁺

製造例5：5-氯-4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.5) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.5(CAS編號：2167064-69-7)。 MS：252.2[M+H]⁺

製造例6：5-氯-4-(3-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.6) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.6(CAS編號：120118-82-3)。 MS：252.1[M+H]⁺

製造例7：5-氯-4-(4-氯-3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.7) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.7。

¹ H-NMR(DMSO-d6):δ7.73(s, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 3.80-3.00(br, 1H), 2.40(s, 3H) MS：251.0[M+H]⁺

製造例8：4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.8) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.8。

¹ H-NMR(DMSO-d6):δ8.10-7.93(br, 1H), 7.93-7.77(br, 1H), 7.38(s, 1H), 7.24(d, 1H, J＝8.0Hz), 3.32(s, 1H), 2.34(s, 3H) MS：218.1[M+H]⁺

製造例9：5-氯-1-羥基-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.9) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.9。

¹ H-NMR(DMSO-d6):δ7.72(d, 2H, J＝8.0Hz), 7.26(d, 2H, J＝8.0Hz), 3.45-3.15(br, 1H), 2.31(s, 3H) MS：234.1[M+H]⁺

製造例10：4-氯-1-羥基-5-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈(化合物No.10) 除了使用對應於製造目標物之原料化合物以外，按照與日本專利特開平8-225539號的記載同樣的手法製造化合物No.10(CAS編號：177762-70-8)。 MS：234.1[M+H]⁺

試驗例1 抗菌活性試驗供試菌株：Malassezia pachydermatis(IFM56528株千葉大學分讓株)

使在已添加0.5%Tween40(聚氧乙烯山梨糖醇酐單棕櫚酸酯：關東化學股份有限公司製)之Sabouraud培養基(蛋白腖1%、糊精4%、瓊脂1.5%)中培養5〜7日而得之馬拉色菌(Ma1assezia pachydermatis)懸浮於生理食鹽水中，以在吸光度550nm下成為0.25之方式進行調製。以成為最終濃度500ppm之方式於其中加入已溶解於DMSO中之試驗化合物，1分鐘後，將懸浮液10μL及生理食鹽水10mL裝入注射器中並進行攪拌，連接至37mm質量監測器(Pall公司製)，進行過濾洗淨。依原樣使已添加1%Tween80(聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯：關東化學股份有限公司製)之Sabouraud培養基浸透膜過濾器，於32℃培養72小時，計測於其中所形成之菌落數(本發明區的菌落數)及未添加試驗化合物之溶媒中之菌落數(藥劑未處理區的菌落數)，依照下述式求出菌落形成阻礙率(%)。菌落形成阻礙率(%)=[(藥劑未處理區的菌落數-本發明區的菌落數)/藥劑未處理區的菌落數]×100

其結果，化合物No.1〜10皆100%阻礙菌落形成。已確認化合物No.1〜10對馬拉色菌即效性地發揮出抗菌活性。

試驗例2 對各種馬拉色菌屬菌之抗菌活性試驗供試化合物：化合物No.1(最終濃度500ppm) 供試菌株：Malassezia pachydermatis(IFM56528株)、M. furfur(IMF55951株)、M. sympodialis(IMF48588株)、M. g1obosa(IMF51946株)、M. restricta(IMF55992株)

藉由與試驗例1同樣的手法求出對供試菌株之菌落形成阻礙率。試驗結果係示於表1。

[表1]

供試菌	菌落形成阻礙率(%)
M. pachydermatis	100
M. furfur	100
M. sympodialis	100
M. g1obosa	97
M. restricta	100

試驗例3：馬拉色菌性外耳炎效果試驗(犬) 供試品種：米格魯犬(19〜20個月齡) 供試菌株：Malassezia pachydermatis(ATCC14522株)

使在Sabouraud瓊脂培養基中進行前培養(7日，30℃)而得之馬拉色菌的菌落懸浮於已滅菌完成之生理食鹽水中(菌濃度1.0×10⁶ 個/mL)，接種0.1mL於供試動物的兩耳。接種7日後，將已將試驗化合物的濃度調製成500ppm之藥液(已滅菌完成之生理食鹽水，添加5%DMSO)5mL填充至兩耳，1分鐘後，以已滅菌完成之生理食鹽水充分地洗淨。在藥液處理7日後，針對發紅、耳垢、搔癢感、皮疹此4個項目觀察檢體的耳的狀態，將可看出各症狀之情況定為1，將未看出各症狀之情況定為0，予以得分化，求出症狀的改善率。將結果示於表2。

亦一併藉由以下方法針對存在於檢體的耳內部之馬拉色菌數進行調查。以棉棒對耳道表面刮3次而採取菌，所採取之菌係每個棉棒使其懸浮於已添加1%v/v Tween80(聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯：關東化學股份有限公司製)之PBS(在1000mL中各相當含有氯化鈉8g、磷酸氫二鈉2.9g、氯化鉀0.2g、磷酸二氫鉀0.2g)1mL中。將該懸浮液以前述PBS階段稀釋成10倍，將其0.1mL塗佈於CHROMagar馬拉色菌/念珠菌培養基(商品名；蛋白腖、特殊酵素基質混合物、氯黴素、橄欖油、瓊脂)，於30℃培養4日。然後，對呈現出粉紅色〜紫色之菌落進行計數，算出菌數得分，求出改善率。將結果示於表3。

試驗例4：抗菌活性試驗供試化合物：化合物No.1 供試菌株：Microsporum canis(TIMM20080株)

將菌株在含有環己醯亞胺500μg/mL及氯黴素50μg/mL之Sabouraud培養基中於28℃培養8日後，以含有Tween80(0.05%(v/v))之生理食鹽水採取孢子，以細胞濾網(ϕ40μm)進行過濾，從濾液中將孢子以離心分離(3500 rpm，5分鐘)進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製孢子懸浮液(1×10⁷ 個/mL)。將前述孢子懸浮液10μL接種於以成為多種濃度之方式加入已溶解於DMSO中之化合物No.1而得之Sabouraud培養基。於28℃培養72小時後，調查菌的發育量，求出最小發育阻止濃度。其結果，化合物No.1的最小發育阻濃度為10ppm。

試驗例5：抗菌活性試驗供試化合物：化合物No.6 供試菌株：Microsporum canis(NBRC7863)

將菌株以Sabouraud培養基進行培養後，懸浮在含有Tween80(1%(v/v))之PBS中，以細胞濾網(ϕ40μm)進行過濾，從濾液中將孢子以離心分離(3500rpm，5分鐘)進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製孢子懸浮液(1×10⁶ 個/mL)。將孢子懸浮液50μL接種於以成為多種濃度之方式加入已溶解於DMSO中之化合物No.6而得之Sabouraud培養基。於25℃培養120小時後，調查菌有無發育，求出最小發育阻止濃度。其結果，化合物No.6的最小發育阻濃度為125ppm。

試驗例6：抗菌活性試驗供試化合物：化合物No.6 供試菌株：Staphylococcus pseudintermedius(JCM 17571)

使在Luria Broth(LB)瓊脂培養基盤(蛋白腖、酵母萃取物、氯化鈉、瓊脂，Invitrogen)中培養24小時而得之葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)懸浮於生理食鹽水中，以在吸光度600nm下成為0.025之方式進行調製。以成為最終濃度200、100、50、25ppm之方式於其中加入已溶解於DMSO中之試驗化合物，1分鐘後，將懸浮液10μL及生理食鹽水10mL裝入注射器中並進行攪拌，連接至37mm質量監測器(Pall公司製)，進行過濾，以生理食鹽水10mL洗淨2次。依原樣使LB培養基浸透膜過濾器，於30℃培養72小時，調查有無菌落發育，求出最小殺菌濃度(MBC100)。將其結果示於表4。

[表4]

菌種	最小殺菌濃度(MBC100)
S. pseudintermedius	50ppm

試驗例7：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.6 供試菌株：Microsporum canis(IFM63627)

將試驗例5的方法進行一部分變更並對抗真菌活性進行檢討。在1/10 Sabouraud培養基中將 Microsporum canis於32℃培養168小時，使孢子形成後，將生理食鹽液(大塚生食注；在1000mL中相當含有氯化鈉9g)10mL直接加至培養基上，使用拋棄式接種環(1型(1μL))輕擦表面，將包含菌絲之孢子懸浮液進行回收。將包含菌絲之孢子懸浮液以細胞濾網(ϕ40μm)進行過濾。從濾液中將孢子以離心分離(3500rpm，5分鐘)進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製孢子懸浮液(1×10⁷ 個/mL)。將前述孢子懸浮液10μL接種於以成為指定的濃度之方式加入已溶解於DMSO中之試驗化合物而得之Sabouraud培養基。Microsporum canis係於32℃培養72小時後，調查有無菌落發育，求出最小發育阻止濃度(MIC100)。將其結果示於表5。

[表5]

菌種	最小發育阻止濃度 (MIC100)
Microsporum canis	5ppm

試驗例8：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.6 供試菌株：Microsporum canis(IFM63627)

在1/10 Sabouraud培養基中將Microsporum canis於32℃培養168小時，使孢子形成後，將生理食鹽液(大塚生食注；在1000mL中相當含有氯化鈉9g)10mL直接加至培養基上，使用拋棄式接種環(1型(1μL))輕擦表面，將包含菌絲之孢子懸浮液進行回收。將包含菌絲之孢子懸浮液以細胞濾網(ϕ40μm)進行過濾。從濾液中將孢子以離心分離(3500rm，5分鐘)進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製孢子懸浮液(1×10⁷ 個/mL)。將前述孢子懸浮液10μL接種於以成為指定的濃度之方式加入已溶解於DMSO中之化合物No.6而得之90μL生理食鹽液。每經過指定的時間，採取包含孢子之被檢液10μL，以離心分離(3500rpm，5分鐘)將孢子進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製10μL孢子懸浮液。將10μL孢子懸浮液點在Sabouraud培養基上，於32℃培養72小時後，調查有無菌落發育，求出最小殺真菌濃度(MFC100)。將其結果示於表6。

[表6]

菌種	處理時間	最小殺真菌濃度(MFC100)
Microsporum canis	24小時	50ppm
96小時	10ppm

試驗例9：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.1 供試菌株：Arthroderma vanbreuseghemii(TIMM2789)

將菌株在含有環己醯亞胺500μg/mL及氯黴素50μg/mL之Sabouraud培養基中於28℃培養8日後，以含有Tween80(0.05%(v/v))之生理食鹽水採取孢子，以細胞濾網(ϕ40μm)進行過濾，從濾液中將孢子以離心分離(3500 rpm，5分鐘)進行回收，以生理食鹽水洗淨2次後，調製孢子懸浮液(1×10⁷ 個/mL)。將孢子懸浮液10μL接種於以成為多種濃度之方式加入已溶解於DMSO中之化合物No.1而得之Sabouraud培養基。於28℃培養72小時後，調查菌的發育量，求出最小發育阻止濃度(MIC100)。將其結果示於表7。

[表7]

菌種	最小發育阻止濃度 (MIC100)
Arthroderma vanbreuseghemii	10ppm

試驗例10-1：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.6 供試菌株：Malassezia pachydermatis(IFM56528)

使在Sabouraud培養基(蛋白腖1%、糊精4%、瓊脂1.5%)中培養5〜7日而得之馬拉色菌(Malassezia pachydermatis)懸浮於生理食鹽水中，以在吸光度600nm下成為0.025之方式進行調製。以成為最終濃度70、65、64、60、55、45、40、35、32、20、18、8ppm之方式於其中加入已溶解於DMSO中之試驗化合物，1分鐘後，將懸浮液10μL及生理食鹽水10mL裝入注射器中並進行攪拌，連接至37mm質量監測器(Pall公司製)，進行過濾洗淨。依原樣使Sabouraud培養基浸透膜過濾器，於32℃培養72小時，調查有無菌落發育，求出無菌落發育之濃度作為最小殺真菌濃度(MFC100)。在有菌落發育之情況，計測於其中所形成之菌落數(本發明區的菌落數)及未添加試驗化合物之溶媒中之菌落數(藥劑未處理區的菌落數)，依照下述式求出菌落形成阻礙率(%)，求出顯示出菌落形成阻礙率90%之濃度作為90%殺真菌濃度(MFC90)，求出顯示出菌落形成阻礙率50%之濃度作為半數殺真菌濃度(MFC50)。將其結果示於表8。菌落形成阻礙率(%)=[(藥劑未處理區的菌落數-本發明區的菌落數)/藥劑未處理區的菌落數]×100

[表8]

菌種		最小殺真菌濃度
M. pachydermatis	MFC100	40ppm
MFC90	20ppm
MFC50	8ppm

試驗例10-2：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.1 供試菌株：Malassezia pachydermatis(IFM56528)

使在Sabouraud培養基(蛋白腖1%、糊精4%、瓊脂1.5%)中培養5〜7日而得之馬拉色菌(Malassezia pachydermatis)懸浮於生理食鹽水中，以在吸光度600nm下成為0.025之方式進行調製。以成為最終濃度500、250、200、190、180、170、160、150、140、130、125、120、110、100、90、80、70、64ppm之方式於其中加入已溶解於DMSO中之試驗化合物，1分鐘後，將懸浮液10μL及生理食鹽水10mL裝入注射器中並進行攪拌，連接至37mm質量監測器(Pall公司製)，進行過濾洗淨。依原樣使Sabouraud培養基浸透膜過濾器，於32℃培養72小時，調查有無菌落發育，求出無菌落發育之濃度作為最小殺真菌濃度(MFC100)。在有菌落發育之情況，計測於其中所形成之菌落數(本發明區的菌落數)及未添加試驗化合物之溶媒中之菌落數(藥劑未處理區的菌落數)，依照下述式求出菌落形成阻礙率(%)，求出顯示出菌落形成阻礙率90%之濃度作為90%殺真菌濃度(MFC90)，求出顯示出菌落形成阻礙率50%之濃度作為半數殺真菌濃度(MFC50)。將其結果示於表9。菌落形成阻礙率(%)=[(藥劑未處理區的菌落數-本發明區的菌落數)/藥劑未處理區的菌落數]×100

[表9]

菌種		殺真菌濃度
Malassezia pachydermatis	MFC100	160ppm
MFC90	130ppm
MFC50	64ppm

試驗例11：抗真菌活性試驗供試化合物：化合物No.1、化合物No.6 供試菌株：Malassezia pachydermatis(IFM56528)

使在Sabouraud右旋糖培養基(蛋白腖1%、右旋糖4%)中培養5〜7日而得之馬拉色菌(Malassezia pachydermatis)懸浮於生理食鹽水中，以在吸光度600nm下成為0.0025之方式調製馬拉色菌懸浮液。在96孔盤中各裝入馬拉色菌懸浮液190μL，以成為最終濃度500、250、125、62.5、31.25、16、8、4、2、1、0.5ppm之方式於其中加入已溶解於DMSO中之試驗化合物10μL，於32℃培養72小時。在培養後，各添加WST-8(活細胞數測定試劑，Nacalai Tesque公司製)20μL，並於32℃保溫5小時，使其進行顯色。使用微量盤讀取器(SpectraMax M2，Molecular Devices公司製)測定450nm的吸光度。計測已於其中添加試驗化合物之孔的吸光度(本發明區的吸光度)及未添加試驗化合物之溶媒中之孔的吸光度(藥劑未處理區的吸光度)，依照下述式求出馬拉色菌的生存率(%)，將生存率成為0%之藥劑濃度作為最小發育阻止濃度(MIC100)。此外，將生存率成為50%之藥劑濃度作為半數發育阻止濃度(MIC50)。將其結果示於表10。馬拉色菌的生存率(%)=[(藥劑未處理區的吸光度-本發明區的吸光度)/藥劑未處理區的吸光度]×100

[表10]

菌種		發育阻止濃度
化合物No.1	化合物No.6
M. pachydermatis	MIC100	16ppm	4ppm
MIC90	16ppm	4ppm
MIC50	8ppm	2ppm

Claims

一種非人類之動物用抗菌劑，其含有式(I)或(II)所示之化合物或其鹽，
[式中， R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子、羥基、硝基、氰基、硫代氰酸酯基、三甲基矽基、可經取代之烷基、可經取代之烯基、可經取代之炔基、可經取代之烷氧基、可經取代之烯氧基、可經取代之炔氧基、可經取代之芳基、可經取代之芳氧基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、
(式中，R³ 為可經取代之烷基、可經取代之烯基、可經取代之炔基、可經取代之芳基、可經取代之5～6員芳香族雜環基或-NR⁴ R⁵ 基(式中，R⁴ 及R⁵ 為可經取代之烷基)，m為0～2的整數)，或下式所示之基：
(式中， W¹ 為氧原子或硫原子， W² 為氧原子、硫原子或-NH-， n為0～1的整數， R⁶ 為可經取代之烷基或可經取代之芳基)； X為氫原子、羥基或-OY； Y為下式：
(式中， R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之烷氧基、可經取代之烯基、可經取代之烯氧基、可經取代之芳基、可經取代之芳氧基、可經取代之5～6員芳香族雜環基、 -NR⁸ R⁹ 基(式中，R⁸ 及R⁹ 各自獨立地為氫原子、可經取代之烷基或可經取代之烯基，或者與彼此鄰接之氮原子共同形成5～7員飽和雜環，惟，排除R⁸ 及R⁹ 同時為氫原子之情況)或 -CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(式中，R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基、可經取代之烯基或可經取代之芳基))]。
如請求項1之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子、鹵素原子或可經取代之苯基。
如請求項1或2之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。
如請求項1至3中任一項之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 各自獨立地為氫原子或鹵素原子，或者為可經碳數1～6的烷基及鹵素原子中之至少1個基取代之苯基。
如請求項1至4中任一項之抗菌劑，其中，R¹ 及R² 為彼此不同的基。
如請求項1至5中任一項之抗菌劑，其中， X為氫原子、羥基或-OY； Y為下式所示之基：
(式中，R⁷ 為可經取代之烷基、可經取代之苯基、可經取代之烷氧基、可經取代之苯氧基或-CR¹⁰ R¹¹ R¹² 基(式中，R¹⁰ 、R¹¹ 及R¹² 各自獨立地為可經取代之烷基或可經取代之苯基)。
如請求項1至6中任一項之抗菌劑，其中，X為氫原子或羥基。
如請求項1至7中任一項之抗菌劑，其中，前述式(I)或(II)所示之化合物係選自下列者： 5-氯-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(3-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-4-(4-氯-3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 4-(2-氯-4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈、 5-氯-1-羥基-4-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈，及 4-氯-1-羥基-5-(4-甲基苯基)-1H-咪唑-2-甲腈。
如請求項1至8中任一項之抗菌劑，其中，前述菌為真菌。
如請求項9之抗菌劑，其中，前述真菌為選自馬拉色菌屬菌(Malassezia)、小孢癬菌屬菌(Microsporum)及分節癬菌屬菌(Arthroderma)中之至少一者。
如請求項9或10之抗菌劑，其係用於改善起因於選自馬拉色菌屬菌、小孢癬菌屬菌及分節癬菌屬菌中之至少一者之症狀或疾患。
如請求項11之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為皮膚疾患。
如請求項11或12之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為花斑癬、毛囊炎、脂漏性皮膚炎、尋常性乾癬、異位性皮膚炎、皮膚絲狀菌症或外耳炎。
如請求項1至8中任一項之抗菌劑，其中，前述菌為細菌。
如請求項14之抗菌劑，其中，前述細菌為選自葡萄球菌屬菌(Staphylococcus)、鏈球菌屬菌(Streptococcus)、巴斯德氏菌屬菌(Pasteurella)、埃希氏菌屬菌(Escherichia)、假單胞菌屬菌(Pseudomonaceae)、變形桿菌屬菌(Proteus)及克雷伯氏菌屬菌(Klebsiella)中之至少一者。
如請求項14或15之抗菌劑，其係用於改善起因於選自葡萄球菌屬菌、鏈球菌屬菌、巴斯德氏菌屬菌、埃希氏菌屬菌、假單胞菌屬菌、變形桿菌屬菌及克雷伯氏菌屬菌中之至少一者之症狀或疾患。
如請求項16之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為皮膚疾患。
如請求項16或17之抗菌劑，其中，前述症狀或疾患為膿皮症或外耳炎。
如請求項1至18中任一項之抗菌劑，其中，前述非人類之動物為犬、貓或馬。