JPS63122681A - ノルフロキサシンの水溶性付加物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、Ｉ−エチル−６−フルオロ−１，４−ジヒド
ロ−４−オキソ−７−（ピペラジニル）＝３−カルボン
酸し以下、ノルフロキサシン（ＮｏｒＮｏｘａｃｉｎ）
と称する］の水溶性付加物（本文中に示される）に関す
るものである。

［用語の説明］ 本発明に関連して用いる付加生成物の語は、咳密な意味
での付加物、塩（付加塩を含む）、複合体等を包含する
。

［従来の技術およびその欠点コ 米国特許第４．１４６，７１９号および第４．２９２．
３１４号明細書に記載され、請求されているノルフロキ
サシンは広範囲の活性スペクトルをもっている非常に有
効な抗生物質である。しかしながら、ノルフロキサシン
は、普通に用いられるｐｌ（域すなわち、ｐＨ６〜１０
では非常に低い水溶性しかもたない。

多くの場合に、注射薬、溶液、注入液などとして、薬剤
を用いることが有効である。その上、家畜または家禽か
病気である時、薬剤を飲料水に入れて投与することが有
効なことがよく知られている。ノルフロキサシンが低水
溶性であるため、先に示した方法によるノルフロキサシ
ンの使用はかなり限定され、不可能な場合さえある。

ある種のノルフロキサシン塩類は、特に次の特許から既
知である： 米国特許第４，５３０，９２８号明細書は炭酸グアニジ
ュームとノルフロキサシンの複合体を記載し、請求する
。しかしながら、水中でのこの複合体の溶解度もまたか
なり低い、 イスラエル特許第６６，０２６号明細書は、ノルフロキ
サシンのガラクトウロン酸塩、アスパラギン酸塩、グル
タミン酸塩およびグルコン酸塩を記載し、請求する。上
記の塩類の水溶性ははるかに良好である。しかしながら
、上記の塩類の製造は凍結乾燥によるものであり、費用
がかかる。

上記のイスラエル特許明細書は、またノルフロキサシン
の他の塩を記載する。しかしながら、上記の他の塩が非
経口目的に使用され得ないこと、すなわち、それらのあ
る乙のは所望のｐＩ−１域で十分に水溶性でなく：ある
ものは凍結乾燥による製造には困難であるか（酢酸塩）
または酸の部分が満足のゆく品質として常には得られな
い（乳酸塩）ことが、はっきりと記述されている。

西独特許第３．３３３，７１９号公開明細書により、沈
殿を引き起さない別の酸と共にノルフロキサシンの乳酸
塩を含んでいる水溶性組成物が知られている。この組成
物もまた、上記の理由に加えて、それらの製造を複雑に
する別の使用を必要とすることから、満足すべきもので
はない。

それ故、上記の欠点を克服する水溶性のノルフロキサシ
ン誘導体を見い出すことが好ましいことである。上記の
誘導体は、中でも獣医学の分野において、たとえば家禽
の処置に適合しなければならない。誘導体は、比較的製
造が安価で、容易であり、水に溶解したとき生物学的安
定性を育し、所望によりさらに希釈し得る商業生産可能
な水性濃縮液を製造できる程度に高度の溶解度をもたな
ければならない。その上、上記の誘導体は、体内投与さ
れた後、十分な血中濃度を示さなければならない。

たとえば、エノキサシン（Ｅ　ｎｏｘａｃｉｎ）および
ベフロサキシン（Ｐｅｒｌｏｘａｃｉｎ）の付加物のよ
うな、類縁酸化合物とニコチン酸の付加物か製造されて
いる。しかしながら、上記の付加物は非常に低い水溶性
しか乙たない。

「発明の記載」 それ故、ニコチン酸・ノルフロキサシン付加物（本文中
に示される）、特に１：１の付加物が上記の欠点を克服
することは、驚くべきことである。

上記付加物は、ノルフロキサシンの広い活性スペクトル
を保っており、非常に良好な水溶性を何し、経口投与し
たとき十分な血中濃度を示す。その上、それは毒性か低
い。上記の付加物は、かなり安価で、それ自身が天然の
ビタミンとして知られているニコチン酸を用いるという
別の利点をもっている。

本発明の付加物は、広範な種類の治療用用量府警の形で
、たとえば錠剤またはカプセルの形またはシロップとし
て飲料水に溶かした形での経口投与により、筋肉注射、
静脈注射または注入により、目薬または軟膏として、局
所および耳の感染に用いる噴霧剤として投与され得る。

本発明の付加物は、適当な溶媒、好ましくは沸とうする
エタノール中でニコチン酸とノルフロキサシンを反応さ
せることにより製造するのが適当である。

最終生産物である付加物は、所望により任意の他の適合
する化合物と担体の双方またはいずれか一方と混合して
もよい。

本発明の付加物の使用を以下家禽について説明する。し
かしながら、この用途に限定されるものではない。

以下、本発明を実施例について説明するが、それらによ
り限定されるものではない。

実施例１ ノルフロキサシン１０ｇをエタノール２０ｍｆ２に添加
した。次に、得られた混合物を撹拌し、加熱還流した。

あらかじめ高温のエタノール５ｍｇに溶解したニコチン
酸４．２ｇを上記の混合物に一度に加え、全固型分が溶
解するまで生成懸濁液を加熱還流した。短時間還流後、
付加物は分離しはじめた。混合物を撹拌し、室温に、次
いで水浴で冷却し８８％の収率で融点２３２°−２３３
℃のニコチン酸ノルフロキサシンｌ：ｌの付加物を得た
。

元素分析：　Ｃｔ　ｔ　Ｈｘ　ｓ　Ｆ　Ｎ　−Ｏｓ計算
値：　　Ｃ：５９．７２％；Ｈ：５．２Ｑ％；Ｎ：１２
．６６％ 実験値：　　Ｃ：５９．４２％；Ｈ：５．２６％；Ｎ：
１２．７０％ 赤外スペクトル（臭化カリ錠、ｃｍ”）：３０７５　。

３０００．２９８０．２９６０，１７１５，１６８０．
１４８０，１３５０，１２８０，１０３０゜９８０．９
１０，８３０，８１０，７５５，７１０．７００，６３
５゜ 核磁気共鳴スペクトル（重水）： δ＝３．６０（８１−ｆ、Ｓ）：Ｉ　、５（３１Ｌｔ）
；４．３（２）１．ｇ）；６．８４　（１ｔｌ、ｄ、Ｊ
　Ｆ　）ｉ、７　、Ｈｚ）；７　。

２２（１１−１，ｄｊ　Ｆ）、Ｉ　ｌ　３．５．Ｈｚ）
；７．４６（Ｉ　Ｈ，ｄｄ）：８．２２（Ｉ　Ｈ，ｄｄ
ｄ）；８．４４（＋１−１．Ｓ）；８．５４（１）１．
ｄｄ）；８．８５（１１ｆ、ｄｄ）。

質量スペクトル（化学イオン化）： ｍ／ｅ３２０（プロトン化ノルフロキザシン）ｍ／ｅ１
２４（プロトン化ニコチン酸）５０％致死ｆｆ１（マウ
ス　　経Ｃ１）＞　１０ｇ／ｋｇ５０％致死量（チキン
　経口）＞　１０　ｇ／ｋｇ水中２５℃での付加物の溶
解度は２５０ｏ（ノルフロキサシン塩基１８０．４ｘｙ
に等量）／ｍ１２゜１５％水溶性はｐＨ５、８を示す。

４％水溶性はｐ）（６、０を示す。

実施例２ 次の水溶性粉末を充分混合して製造した：実施例１の付
加物３０ｇ 蔗糖６ｇ アスコルビン酸６ｇ 実施例３ 次の水溶性粉末を充分混合して製造した：実施例１の付
加物３０ｇ アスコルビン酸１２ｇ ニコチン酸０．３９ｇ 実施例１４ 広範囲の鳥類病原性細菌に対ずろいくつかの抗菌性キノ
ロン類の最小発育阻止濃度（Ｍ［Ｃ）の比較。

ａ、細菌の原培養物をそれらの生存率を確認するため、
栄養寒天培地上に維持し、周期的に継代培養した。

ｂ、　　５Ｒ９／ｍ１２原液を各薬剤から製造した。水
溶性薬剤は滅菌蒸留水に溶解し、非水溶性薬剤は温（６
０℃）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した。

検定を行った日に、溶液を製造した。

Ｃ１各薬剤のＭＩＣを、連続希釈法およびｐＨ７゜２で
ミュレルーヒントン（Ｍｕｅｌｌｅｒ　−Ｈ１ｎｔｏｎ
）寒天（デフィコノを用いてレネテイ（Ｌ　ｅｎｎｅｔ
　ｔｅ）、バロウス（Ｂａｌｏｗｓ）、ハウザー（Ｈａ
ｕｓｅｒ）およびトルアント（’ｒｒｕａｎｔ）共著、
「マニュアル・オブ・クリニカル・ミクロバイオロジー
（Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＣｌｉｎｉｃａｔ　ｌ　Ｍ　ｉｃ
ｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）第３版、４５０−４５３頁、米国
微生物学会、ワシントン・コロンビア特別区、の中のワ
シントン、ジュニア（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、　Ｊ　ｒ
）およびシュター（Ｓｕｔｔｅｒ）“希釈感受性試験：
寒天およびマクロ−ブロス希釈方法“で記述された方法
によって測定した。試験した温度の範囲は５０μｇ／ｍ
Ｑと０．０１μｇ／ｍσの間であった。各細菌分離株か
らの一夜の栄養ブロス（デイイコ）培養液を滅菌生理食
塩水でＩ：１００に希釈し、改良したステールス接種装
置を用いて希釈された培養液０゜０１ｍ１２を寒天の上
に置いた。細菌接種物は５ｘｌＯ’−ＪＸＩＯ５数の微
生物を含存した。接種した寒天板を１８時間３７℃で好
気的に培養した。

ＭＩＣを、培養後視覚観察で完全に発育阻止した寒天中
の最小薬剤濃度から記録した。

ＭＩ　０価を次に示す第工表のカラム中に一覧表にした
： Ａ：微生物およびアメリカン・タイプ・カルチャー・コ
レクション（ＡＴＣＣ）コード番号Ｂ；実施例１の化合
物のＭ　Ｉ　Ｃ Ｃ：シノキサシン（ｃｉｎｏｘａｃｉｎ）のＭＩＧＤ：
ビペミデ酸のＭＩＣ Ｅ：フルメキンのＭＩＣ Ｆ：ノルフロキサシンのＭＩＣ Ｇ：オキソリン酸のＭＩＣ （Ｓｔｒｅｐ、ｆａｅｃａｌｉｓ）（３３１８６）　　
　　　３１２　アシノパクテル・フルコ７セチクス（Ｃ
ｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ−Ｆｒｅｕｎｄ）（８０９０）　
　　Ｓ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ　ｆｌｅｘｎｅｒ）（１２０
２２）　　　　６１６　シゲラ・ソネイ （Ｓｈｉｇｅｌｌａ　５ｏｎｎｅｉ）（２Ｓ　９３１　
）　　　　　３１７　ストレプトコッカス・７エカリス
（Ｓｔｒｅｐ、ｆａｅｅａｌｉｓ）　ｌ　１９４３３　
）　　　　　３１８　ストレプトコッカス・アガラクチ
ェ（Ｓ　ｔｒｅｐ、ａｇａｌａｅｔｉａｅ）　　　　　
　　　　　３２０　スタフィロコッカス・アウレウス（
Ｓｔａｐｈ、ａｕｒｅｕｓ）（２５１７８）　　　　　
　　０．８２１　スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓ
ｔａｐｈ、ａｕｒｅｕｓ）（８０９６）　　　　　　　
０．８２２　パスツレア・ムルトシダ （Ｐａｓｔ　　　ｍｕｌｔｏｃｉｄａ）　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　＞　　０．０　１２３　　〃
　　　　　　　　　　　　　　　　　　６２４　　　＃
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．０２２５
　　　＃　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．
０２３　　３　　　　１２　　　０．２　　１２５０＞
５０　　０．８　　６　　　　０．８Ｓｏ＞５０　　０
．２　　６　　　　０．８６　　６　　　　０．８　　
０．０５０．４５０＞５０　　０．２　　６　　　　０
．８２５５０　　　０．２　　３　　　　０．４＞５０
　＞６０　２５　３　　　□５１＞５０　　＞５０　　
２５　　　３　　　　５０２５＞５０　　０．２　　６
　　　　０．４＞５０　１２　　　１．５　　　０．４
　　　１．５＞５０　１２　　　１．５　　　０．８　
　　１５６　　　１．５　　　０，１　　　０．０２　
０．２実施例５ 生後５週間のイスラエル市販優良種で大きい品質のチキ
ンを添加物と抗生物質を欠く飼料と水で、実験の面１週
間自由給餌により飼った。

チキンを各３０羽の３つの群に無作為に分けた。

試験化合物をノルフロキサシン塩基として１２５Ｒ９／
１ＴＩＱの０度で飼料水中に連続投与した。

薬剤を添加した水をＡとＢの群に２４時間毎に、ＣＤに
８時間毎に入れ換えた（以下、ひ照）。

ｔｏ（薬剤添加前）、１２時間後（ｔＩ、）、２４時間
後（１，、）、４８時間後１．ｓ）に採血した。蛍光照
明を実験の間中続けた。毎日の温度のモニターおよび記
録：最高２４℃、最低１５℃。個々のチキンに対する血
清中の抗生物質の濃度を生物検定で測定し、各群のプー
ルした血清につきノルフロキサシンの血清中濃度を高速
液体クロマトグラフィで定量した。統計的分析参考書ニ
ゲラドストン（Ｇ　１ａｄｓｔｏｎｅ）ｒアンダースタ
ンディング・メディカル・スタテイステイツクス」ウィ
リアム　バインマン（Ｗｉｌｌｉａｍ　Ｈｅｉｎｅｍａ
ｎｎ）医学図書会社９．コンド２１９８５年。

群に次の化合物を投与した： Ａｎ　　１７３　Ｒ９／ｍＱのノルフロキサシン・ニコ
チン酸ｌ：１付加物 Ｂｌ　　１７０ｎ／ｍＱのノルフロキサシン・メタンス
ルフォン酸塩！水化物 ０群　１２５　ｍ９／　ｍＱのノルフロキサシン（ノル
フロキサシン２　、５　ｇ、プロピレングリコール４５
．５ｍＣおよびモノエタノールアミン２Ｊを含む組成物
を水に溶解する）Ａ群の結果を第２表に要約した。

３群； ｔｏ”　Ｏ ＬｘおよびｔＩ４　　大部分の鳥類において、血清濃度
は検出されなかった。１４％ の鳥類は０．２μｇ／ｍρ血清の範 囲の血清濃度をもっていた。

プールした血清についての高速液体クロマトグラフィは
０．１５μｇ／ｍＱの血清±１０％であった。

０群： 全Ｌｘでのノルフロキサシンの血清濃度は生物検定の検
出限度以下であった。

プールした血清についての高速液体クロマトグラフィは
０．０５μｇ／ｍ（ｌ血清±ｌＯ％であった。

第２表　（Ａ群） ｔｏ、ｔｉｔ、ｔｆｆｉ４、ｔ４８：薬剤添加後の時間
。μｇ／ｍ（１血清で示すノルフロキサシン・ニコチン
酸（Ｎ。

ＲＮ）の血清濃度。

投与量：飲料水リットル当り活性成分１２５ｍ９Ｎ （３）Ｓ、Ｅ、＝平均値の標準誤差 （４）〇−本検出濃度以下 （５）Ｓ、　Ｄ、　＝標準偏差 （６）Ｎ＝群当りの鳥類の数 （７）ＮＤ−測定せず 実施例６ チキンのエシェリヒア・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）０７８実
験的全身感染に対する実施例１で製造された化合物の予
防的効果。

０．９％生理食塩水中の滅菌５％ブタ胃ムチイに懸濁し
たエシェリヒア・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）０７８の体重ｋ
ｇ当りＱ、５ＭｃＦ（マクロファージ走化因子）単位の
腹腔内注射により、感染を誘導した。

実験の前に、チキン（雄、各３６０−７００ｇの体重の
ある生後３週間の重い品種）を無作為に３０−３１羽の
群に分け、正確な接種液を決定するため、６鳥を個々に
体重をｍっな。感染をはじめる前１週間チキンを順応し
、抗生物質を除いた食餌を続けた。水を自由に供給した
。

薬剤を飲料水槽に溶解し、毎日入れ換えた。全群への投
与量を水１リットル当り実施例１の化合物１７３ｔｆｌ
（／　／ｌ／７　ＣＩ牛ササシン塩基２５ｏ）に調節し
た。

薬剤を感染誘導後、直ちに投与した。水槽を空にし、水
道水で詰替えた後処置を３週間続けた。

死亡を毎日記録した。感染誘導後６日間で、試験を終了
した。

結果を、 Ａが感染し、処置しなかった対照、鳥数＝３１を意味し
、 Ｂが実施例２の化合物、鳥数＝３１を意味し、Ｃが実施
例１の化合物、鳥数＝３０を意味し、Ｄが実施例３の化
合物、鳥数＝３０を意味する 第３表に要約した。

第　　３　　表 ８１寸　　　　　　　　　ＡＢＣＤ １９８６年６月２４日　　試験開始の日１９８６年６月
２５日　　６　２　０　２１９８６年６月２６日　　３
　０　０　１１９８６年６月２７日　　ｉｏｏ。

１９８６年６月２８日　　３０００ １９８６年６月２９日　　２　０　０　０全死亡数　　
　　　１５　　２　　０　　３死亡％　　　　　　４８
６０１０ 上記の表は、実施例１により製造した化合物を単独でま
たは製剤化したものがエシェリヒア・コ１バＥ、ｃｏｌ
ｉ）感染からチキンを効果的に（呆護することを明確に
証明する。

試験の終りに、各群からの５羽の生存しているチキンを
安楽死させ、死後剖検を行った。腹膜腔から綿棒で分泌
物を採取し、直ちにエオシン−メチレン青（ＥＭＢ）寒
天培地上に適用した。処置した（Ｂ−Ｄ群）鳥類の腹腔
内に、エシェリヒア・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）０７８を見
い出せなかった、感染した無処理の対照（Ａ群）におい
てはエシェリヒア・コリ（Ｅ、ｃｏｌｉ）を分離した。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）ニコチン酸・ノルフロキサシン付加物。
2. （２）ニコチン酸・ノルフロキサシンの１：１付加物
3. （３）ノルフロキサシンを適当な溶媒中で、目的とする
   比率でニコチン酸と反応させることからなる、請求の範
   囲第１項または第２項記載の付加物の製造方法。
4. （４）溶媒が沸とうしているエタノールである、特許請
   求の範囲第３項記載の方法。
5. （５）特許請求の範囲第１項または第２項記載の付加物
   を活性化合物として含む医薬組成物。
6. （６）別の活性化合物と担体の双方またはいずれか一方
   を含む特許請求の範囲第５項記載の医薬組成物。
7. （７）水に溶解されているものである、特許請求の範囲
   第５項または第６項記載の医薬組成物。
8. （８）特許請求の範囲第１項または第２項記載の付加物
   を含む水溶液。
9. （９）特許請求の範囲第１項または第２項記載の付加物
   の治療有効量の投与を含む細菌感染の処置方法。
10. （１０）付加物が水に溶解されたものである、特許請求
    の範囲第７項記載の方法。