TW202100556A

TW202100556A - 使用her2 t細胞依賴性雙特異性抗體之治療

Info

Publication number: TW202100556A
Application number: TW109108416A
Authority: TW
Inventors: 提姆Ｔ強提拉; 史都華盧茲克
Original assignee: 美商建南德克公司
Priority date: 2019-03-14
Filing date: 2020-03-13
Publication date: 2021-01-01
Also published as: EP3938403A1; CN113631578A; JP2022524074A; MX2021010996A; US20220098325A1; AU2020236015A1; MA55296A; KR20210141555A; CA3130446A1; WO2020186176A1; CR20210467A; IL286337A; JP2024012314A; SG11202109424RA

Abstract

本發明提供使用HER2抗體諸如HER2 T細胞依賴性雙特異性抗體(TDB)與額外HER2抗體(例如，曲妥珠單抗)之組合治療HER2陽性癌症(諸如HER2陽性乳癌及HER2陽性胃癌)之方法。

Description

使用HER2　T細胞依賴性雙特異性抗體之治療

本發明係關於使用HER2抗體諸如HER2 T細胞依賴性雙特異性抗體(HER2 TDB)與另一種HER2抗體之組合治療HER2陽性癌症。

癌症之特徵為細胞亞群的不受控制之生長。癌症為已開發世界中之死亡之主要病因，且為開發中國家中之死亡之第二大病因，其中每年診斷出超過1400萬例新癌症病例，且發生800萬例癌症死亡。根據美國癌症協會(American Cancer Society)，估計2019年美國將發生1,762,450例新癌症病例及606,880例癌症死亡。隨著老年人口增長，癌症之發生率同時上升，因為發展癌症之概率在70歲後高兩倍多。因此，癌症護理代表顯著且日益增加之社會負擔。

人類表皮生長因子受體2 (HER2)陽性癌症諸如乳癌及胃癌代表世界上最常見癌症中之一些癌症。局部晚期及轉移性HER2陽性乳腺癌及腎癌大部分仍為不可治癒疾病，其中大部分患者在接受HER2靶向療法後進展。雖然已在引入新抗癌劑之情況下達成重要的進展，但總體存活僅略微改良，且患有HER2陽性癌症並在一線治療方案期間或之後經歷疾病進展之患者的長期預後仍較差。

因此，在該領域中迫切需要開發用於治療HER2陽性癌症之安全且有效的治療方案。

本發明係關於使用HER2靶向T細胞依賴性雙特異性(TDB)抗體治療患有HER2陽性癌症之個體的方法。

在一個態樣中，本發明提供一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體(例如，非HER2 T細胞依賴性抗體(TDB)之HER2抗體，諸如單特異性HER2抗體，例如單特異性二價HER2抗體，例如曲妥珠單抗)及包含抗HER2臂及抗CD3臂之HER2 TDB (例如，BTRC4017A)的治療方案，其中HER2抗體及HER2 TDB二者結合HER2之域IV，且其中與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，該治療方案導致HER2 TDB之治療指數增加。在一些實施例中，與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，治療指數增加與經歷中靶(on-target)/非腫瘤(off-tumor)作用之可能性減小相關聯。在一些實施例中，中靶/非腫瘤作用為肺部毒性症狀(例如，間質性肺病、急性呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咳嗽、疲乏、及肺部浸潤)、肝酶水準升高、口腔乾燥、乾眼症、黏膜炎、食道炎、或尿路症狀。在一些實施例中，與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，治療指數增加與經歷免疫原性副作用之可能性減小相關聯。免疫原性副作用可包括例如抗藥物抗體水準升高、輸注/投與相關反應(ARR)、心功能障礙、肺部反應、或細胞介素釋放症候群(CRS)。

在一些實施例中，HER2 TDB及HER2抗體競爭性結合至HER2之域IV。在一些實施例中，HER2抗體包含：(i)互補決定區(CDR)-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1；(ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2；(iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3；(iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4；(v) CDR -L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及(vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 6。在一些實施例中，HER2抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:7具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之可變重鏈域(V_H )及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:8具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之可變輕鏈域(V_L )。在具體實施例中，V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7且/或V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:8。

在一些實施例中，HER2抗體(例如，非HER2 TDB之額外HER2抗體)為單特異性及/或HER2二價的。在一些實施例中，HER2抗體為包含Fc區之全長抗體(例如，曲妥珠單抗)。在一些實施例中，HER2抗體為Fc修飾之曲妥珠單抗變異體，例如具有減小效應子功能之一或多個胺基酸修飾(例如，一或多個取代突變，例如在胺基酸殘基L234、L235、及/或P329 (EU編號)處)之Fc修飾之曲妥珠單抗變異體。舉例而言，在一些實施例中，一或多個胺基酸修飾包含取代突變L234A、L235A、及P329G (LALAPG)。

在任一前述方法之一些實施例中，HER2 TDB之抗HER2臂包含有包含以下之HER2結合域：(i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1；(ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2；(iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3；(iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4；(v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及(vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 6。在一些實施例中，HER2結合域包含與胺基酸序列SEQ ID NO:7具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之V_H 及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:8具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之V_L 。在一些實施例中，HER2結合域之V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7且/或HER2結合域之V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:8。

在一些實施例中，HER2 TDB之抗CD3臂包含有包含以下之CD3結合域：(i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 9；(ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 10；(iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 11；(iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 12；(v) CDR -L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 13；及(vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 14。在一些實施例中，CD3結合域包含與胺基酸序列SEQ ID NO:15具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之V_H 及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:16具有至少95%序列一致性(例如，至少96%、97%、98%、99%、或100%序列一致性)之可變V_L 。在一些實施例中，CD3結合域之V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15且/或CD3結合域之V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:16。

在一些實施例中，(i) HER2 TDB之抗HER2臂包含HER2結合域，其包含有(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之V_H 及(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之V_L ，且(ii) HER2 TDB之抗CD3臂包含CD3結合域，其包含有(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15之V_H 及(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之V_L 。在一些實施例中，HER2 TDB為BTRC4017A。

在本文所述之任一方法之一些實施例中，HER2 TDB為包含經修飾Fc區之全長抗體。經修飾Fc區可包括減小HER2 TDB之效應子功能的一或多個取代突變。在一些實施例中，一或多個取代突變包含在胺基酸殘基L234、L235及/或D265 (EU編號)處之突變。在一些實施例中，一或多個取代突變為L234A、L235A、及D265A。另外或替代地，一或多個取代突變包含非糖基化(aglycosylation)位點突變(例如，在胺基酸殘基N297 (EU編號)處之非糖基化位點突變，例如N297G或N297A之非糖基化位點突變。在一些實施例中，經修飾Fc區包含N297G、L234A、L235A、及D265A取代突變。在一些實施例中，HER2 TDB包含一或多個重鏈恆定域，其中該一或多個重鏈恆定域選自第一CH1 (CH1 ₁ )域、第一CH2 (CH2 ₁ )域、第一CH3 (CH3 ₁ )域、第二CH1 (CH1 ₂ )域、第二CH2 (CH2 ₂ )域、及第二CH3 (CH3 ₂ )域。在一些實施例中，一或多個重鏈恆定域中之至少一者與另一個重鏈恆定域配對，其中：(i) CH3 ₁ 及CH3 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中CH3 ₁ 域中之該突出或空穴可分別定位在CH3 ₂ 域中之空穴或突出中；或(ii) CH2 ₁ 及CH2 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中CH2 ₁ 域中之突出或空穴可分別定位在CH2 ₂ 域中之空穴或突出中。

在另一態樣中，本發明提供一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症(例如，HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌)或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體及HER2 TDB之治療方案，其中(a) HER2抗體為曲妥珠單抗或Fc修飾之曲妥珠單抗變異體，且(b) HER2 TDB包含抗HER2臂及抗CD3臂，其中抗HER2臂包含有包含以下之HER2結合域：(i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1；(ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2；(iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3；(iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4；(v) CDR -L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及(vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 6；且其中抗CD3臂包含有包含以下之CD3結合域：(i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 9；(ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 10；(iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 11；(iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 12；(v) CDR -L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 13；及(vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 14；其中與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，該治療方案導致HER2 TDB之治療指數增加。與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，治療指數增加可能與經歷中靶/非腫瘤作用之可能性減小相關聯。在一些實施例中，中靶/非腫瘤作用為肺部毒性症狀(例如，間質性肺病、急性呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咳嗽、疲乏、及肺部浸潤)、肝酶水準升高、口腔乾燥、乾眼症、黏膜炎、食道炎、或尿路症狀。在一些實施例中，與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，治療指數增加與經歷免疫原性副作用之可能性減小相關聯。免疫原性副作用可包括例如抗藥物抗體水準升高、輸注/投與相關反應(ARR)、心功能障礙、肺部反應、或細胞介素釋放症候群(CRS)。

在任一前述態樣之一些實施例中，HER2抗體在投與HER2 TDB之前投與。

在一些實施例中，HER2抗體以約5 mg/kg至約10 mg/kg (例如，5 mg/kg至10 mg/kg或6 mg/kg至8 mg/kg，例如約5 mg/kg、約6 mg/kg、約7 mg/kg、約8 mg/kg、約9 mg/kg、或約10 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，HER2抗體係約每三週投與一次(Q3W)。

在一些實施例中，HER2 TDB以0.001 mg至500 mg (例如0.003 mg至250 mg、0.005 mg至200 mg、0.01 mg至150 mg、0.05 mg至120 mg、0.1 mg至100 mg、0.5 mg至80 mg或1.0 mg至50 mg，例如0.001 mg至0.005 mg、0.005 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、150 mg至200 mg、200 mg至250 mg、250 mg至300 mg、300 mg至350 mg、350 mg至400 mg、400 mg至450 mg、或450 mg至500 mg，例如約0.003 mg、約0.005 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、約200 mg、或約250 mg，例如0.003 mg、0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.24 mg、0.72 mg、1.08 mg、1.51 mg、2.2 mg、2.3 mg、4.0 mg、4.6 mg、6.6 mg、8.0 mg、9.2 mg、12 mg、13.2 mg、14.8 mg、18.4 mg、19.8 mg、26.4 mg、36.8 mg、51.5 mg、52.8 mg、61.3 mg、72.1 mg、105.6 mg、147.8 mg、176 mg、或207 mg)之劑量投與。在一些實施例中，HER2 TDB係約每三週投與一次(Q3W)。

在上文所述之任一方法的一些實施例中，治療方案包含：(a)第一劑量HER2抗體；(b)在第一劑量HER2抗體之後的第一給藥週期(C1)，該C1包含第一劑量HER2 TDB (C1D1)及第二劑量HER2 TDB (C1D2)，其中C1D2大於C1D1；(c)在C1之後的第二給藥週期(C2)，該C2包含：(i)第二劑量HER2抗體；及(ii)在第二劑量HER2抗體之後的額外劑量HER2 TDB (C2D1)，其中C2D1等效於C1之最高劑量HER2 TDB。

在本發明之另一態樣中，本文提供一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體及HER2 TDB之治療方案，其中HER2 TDB包含抗HER2臂及抗CD3臂，其中HER2抗體及HER2 TDB二者結合HER2之域IV，其中治療方案包含：(a)第一劑量HER2抗體；(b)在第一劑量HER2抗體之後的第一給藥週期(C1)，該C1包含第一劑量HER2 TDB (C1D1)及第二劑量HER2 TDB (C1D2)，其中C1D2大於C1D1；(c)在C1之後的第二給藥週期(C2)，該C2包含：(i)第二劑量HER2抗體；及(ii)在第二劑量HER2抗體之後的額外劑量HER2 TDB (C2D1)，其中C2D1等效於C1之最高劑量HER2 TDB。

在一些實施例中，第一劑量HER2抗體在C1D1之前一日投與，且其中在第一劑量HER2抗體與C1D1之間監測該個體達30分鐘至24小時(例如30分鐘至2小時，例如30分鐘至90分鐘，例如30分鐘、60分鐘、90分鐘、或120分鐘)之時間段。

在一些實施例中，HER2抗體之第一劑量為5 mg/kg至10 mg/kg (例如，約6 mg/kg或約8 mg/kg)。在一些實施例中，HER2抗體之第一劑量為6 mg/kg。在其他實施例中，HER2抗體之第一劑量為8 mg/kg。在一些實施例中，HER2抗體之第二劑量為5 mg/kg至10 mg/kg (例如，約6 mg/kg)。在一些實施例中，HER2抗體之第二劑量為6 mg/kg。在一些實施例中，第一劑量及/或第二劑量HER2抗體藉由在至少30分鐘之時間段內輸注來投與。

在一些實施例中，第二劑量HER2抗體與C2D1在同一日投與。在一些實施例中，C1D2為C1D1之劑量的至少兩倍(例如，C1D1之劑量的至少三倍)。在一些實施例中，C1D1為0.003 mg至50 mg (例如0.003 mg至50 mg、0.005 mg至20 mg、0.01 mg至10 mg、0.05 mg至8 mg、或0.1 mg至5 mg，例如0.001 mg至0.005 mg、0.005 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、或40 mg至50 mg，例如約0.003 mg、約0.005 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、或約50 mg)。在一些實施例中，C1D1為0.003 mg、0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.12 mg、0.24 mg、0.48 mg、0.72 mg、1.0 mg、2.0 mg、2.2 mg、4.0 mg、6.6 mg、8.0 mg、12 mg、18 mg、27 mg、或40.5 mg。

在一些實施例中，C1D2為0.009 mg至200 mg (例如0.01 mg至150 mg、0.05 mg至100 mg、0.1 mg至50 mg、0.5 mg至20 mg、或1 mg至10 mg，例如0.009 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、或150 mg至200 mg，例如約0.009 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、或約200 mg)。在一些實施例中，C1D2為0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.24 mg、0.4 mg、0.72 mg、0.08 mg、1.6 mg、2.2 mg、2.3 mg、3.2 mg、4.6 mg、6.4 mg、6.6 mg、9.2 mg、12.8 mg、14.8 mg、18.4 mg、19.8 mg、25.6 mg、36.8 mg、38.4、51.5 mg、57.6 mg、72.1 mg、86.4 mg、61.3 mg、或129.6 mg。

在一些實施例中，例如在一步分次中，C2D1及C1D2為等效的。

在一些實施例中，C1進一步包含第三劑量HER2 TDB (C1D3)，其中C1D3大於C1D2。在一些實施例中，C1D1、C1D2、及C1D3累積大於在一步分次的劑量遞增給藥方案之第一給藥週期中HER2 TDB之最高清除劑量(例如，其中最高清除劑量在約0.01 mg與約30 mg之間，例如0.5 mg至25 mg、1 mg至20 mg、或2 mg至10 mg)。在一些實施例中，C1D2為C1D1之劑量的兩倍至十倍(例如，約兩倍、約三倍、約四倍、約五倍、約六倍、約七倍、約八倍、約九倍、或約十倍)。在一些實施例中，C1D3為C1D2之劑量的兩倍至三倍。在一些實施例中，C2D1及C1D3為等效的。

在一些實施例中，C1D1為0.01 mg至20 mg (例如0.05 mg至15 mg、0.1 mg至10 mg、或0.5 mg至5 mg，例如0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至15 mg、或15 mg至20 mg，例如約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、或約20 mg)。

在一些實施例中，C1D2為0.1 mg至100 mg (例如0.1 mg至80 mg、0.5 mg至50 mg、或1 mg至10 mg，例如0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、或90 mg至100 mg，例如約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、或約100 mg)。

在一些實施例中，C1D3為1 mg至400 mg (例如10 mg至300 mg、20 mg至200 mg、或50 mg至100 mg，例如1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、150 mg至200 mg、200至250 mg、250 mg至300 mg、300 mg至350 mg、或350 mg至400 mg，例如約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、或約400 mg)。在一些實施例中，C1D3為1.1 mg、2.2 mg、4.4 mg、6.6 mg、8.8 mg、13.2 mg、17.6 mg、26.4 mg、35.2 mg、52.8 mg、70.4 mg、105.6 mg、147.8 mg、158.4 mg、176 mg、207 mg、237.6 mg、或356.4 mg。

在一些實施例中，該方法包含分別在C1之約第1日、第8日、及第15日向個體投與C1D1、C1D2、及C1D3。在一些實施例中，C1為約21日。在一些實施例中，C2為約21日。

在一些實施例中，該方法包含在C2之第1日向個體投與C2D1。在一些實施例中，治療方案包含一或多個額外給藥週期(例如，多至15個額外給藥週期，例如一、二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二、十三、十四、或十五個額外給藥週期)。在一些實施例中，一或多個額外給藥週期中之各者之長度為約21日。在一些實施例中，一或多個額外給藥週期中之各者包含單一劑量HER2抗體及單一劑量HER2 TDB (例如，其中HER2抗體在各額外給藥週期中在HER2 TDB之前投與，例如在各額外給藥週期之第1日投與)。在一些實施例中，該方法包含在一或多個額外給藥週期中之各者的第1日向個體投與HER2抗體及HER2 TDB。

在另一態樣中，本發明提供一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2 TDB之治療方案，其中該治療方案包含：(a)第一週期(C1)，其包含第一劑量HER2 TDB (C1D1)及第二劑量HER2 TDB (C1D2)，其中C1D2大於C1D1；及(b)第二週期(C2)，其包含額外劑量HER2 TDB (C2D1)，其中C2D1等效於C1之最高劑量HER2 TDB。在一些實施例中，C1D2為C1D1之劑量的至少兩倍(例如，C1D1之劑量的至少三倍)。

在一些實施例中，C1D1為0.003 mg至約10 mg (例如0.005 mg至9 mg、0.01 mg至8 mg、0.05 mg至7 mg、或0.1 mg至5 mg，例如0.003 mg至0.005 mg、0.005 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、或5 mg至10 mg，例如約0.003 mg、約0.005 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、或約10 mg)。

在一些實施例中，C1D2為0.009至約20 mg (例如0.01 mg至15 mg、0.05 mg至10 mg、或0.1 mg至5 mg，例如0.009 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至15 mg、或15 mg至20 mg，例如約0.009 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、或約20 mg)。

在一些實施例中，C2D1及C1D2為等效的。在其他實施例中，C1進一步包含第三劑量HER2 TDB (C1D3)，其大於C1D2。在一些實施例中，C1D1、C1D2、及C1D3累積大於在一步分次的劑量遞增給藥方案之第一給藥週期中HER2 TDB之最高清除劑量。在一些實施例中，最高清除劑量在約0.01 mg與約30 mg之間。在一些實施例中，C1D2為C1D1之劑量的兩倍至十倍(例如，C1D1之劑量的約三倍、約四倍、約五倍、約六倍、約七倍、約八倍、約九倍、或約十倍)。在一些實施例中，C1D3為C1D2之劑量的兩倍至三倍。在一些實施例中，C2D1及C1D3為等效的。

在一些實施例中，C1D1為0.01 mg至20 mg (例如0.01 mg至15 mg、0.05 mg至10 mg、或0.1 mg至5 mg，例如0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至15 mg、或15 mg至20 mg，例如約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、或約20 mg)。

在一些實施例中，C1D3為1 mg至200 mg (例如10 mg至150 mg、20 mg至120 mg、或50 mg至100 mg，例如1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、或150 mg至200 mg，例如約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、或約200 mg)。

在一些實施例中，該方法包含分別在C1之約第1日、第8日、及第15日向個體投與C1D1、C1D2、及C1D3。在一些實施例中，C1為約21日。另外或替代地，在一些實施例中，C2為21日。在一些實施例中，該方法包含在C2之第1日向個體投與C2D1。治療方案可包括一或多個額外給藥週期(例如，多至15個額外給藥週期，例如一、二、三、四、五、六、七、八、九、十、十一、十二、十三、十四、或十五個額外給藥週期)。在一些實施例中，各額外給藥週期為約21日。在一些實施例中，各額外給藥週期包含單一劑量HER2 TDB。在一些實施例中，該方法包含在一或多個額外給藥週期中之各者的第1日向個體投與HER2 TDB。在任一前述態樣之一些實施例中，HER2抗體及/或HER2 TDB藉由靜脈內輸注(例如藉由IV袋)投與。在一些實施例中，與對照治療方案(在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療或無分次給藥之治療方案)相比，該治療方案導致HER2 TDB之治療指數增加。

在任一前述態樣之一些實施例中，該方法進一步包括投與一或多種額外治療劑。舉例而言，該一或多種額外治療劑可為托珠單抗、皮質類固醇、PD-1軸拮抗劑、或抗體-藥物結合物。在一些實施例中，PD-1軸結合拮抗劑選自由以下組成之群：PD-L1結合拮抗劑(例如，MPDL3280A (阿特珠單抗)、YW243.55.S70、MDX-1105、或MEDI4736)、PD-1結合拮抗劑(例如，MDX-1106 (納武單抗)、MK-3475 (派姆單抗)、及AMP-224)、及PD-L2結合拮抗劑(例如，PD-L1結合抗體或免疫黏附素)。

在一些實施例中，在先前治療方案(例如，作為用於HER2陽性癌症之治療)中，已向個體投與曲妥珠單抗。

在一些實施例中，HER2陽性癌症為HER2陽性實體腫瘤。另外或替代地，HER2陽性癌症可為局部晚期或轉移性HER2陽性癌症。在一些實施例中，HER2陽性癌症為HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌(例如，HER2陽性胃腸接合部癌症或HER2陽性結腸直腸癌。在一些實施例中，HER2陽性癌症選自由以下組成之群：HER2陽性胃腸接合部癌症、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性肺癌(例如，HER2陽性非小細胞肺癌)、HER2陽性胰腺癌、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性膀胱癌、HER2陽性唾液管癌、HER2陽性卵巢癌(例如，HER2陽性上皮卵巢癌)、或HER2陽性子宮內膜癌。

序列表

本申請案含有序列表，該序列表已以ASCII格式以電子方式提交且由此以引用之方式整體倂入。該ASCII複本於2020年3月9日創建，名為50474-197TW2_Sequence_Listing_3.9.20_ST25，且大小為8,354位元組。I. 定義

除非另外定義，否則本文使用的所有技術術語、符號\及其他科學術語意欲具有本發明所屬技術領域的技術人員通常理解的含義。在一些情況下，為了清楚及/或為了便於參考而在本文中定義了具有通常理解的含義的術語，並且在本文中包括此等定義不應該被解釋為表示與此項技術中通常理解的實質差異。

如本文所用之術語「約」係指為此項技術中之熟練技術人員容易知曉的相應值之常見誤差範圍。在本文中提及「約」值或參數包括(且描述)涉及該值或參數本身之實施例。

如本文所用，除非上下文另外明確說明，否則單數形式「一個/種(a/an)」、及「該/該等(the)」包括複數指示物。舉例而言，提及「經單離肽」意指一或多種經單離肽。

在整個說明書及申請專利範圍中，詞語「包含(comprise)」或諸如「包含(comprises)」或「包含(comprising)」的變化形式將被理解為暗示包括所述整數或整數群，但不排除任何其他整數或整數群。

術語「抗體」在本文中以最廣泛含義使用且涵蓋多種抗體結構，包括但不限於單株抗體、多株抗體、多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)及抗體片段，只要其展現所需之抗原結合活性。

「抗體片段」係指除完整抗體以外之分子，其包含完整抗體之一部分，該部分結合完整抗體所結合之抗原。抗體片段之實例包括但不限於Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')₂ ；雙功能抗體；線性抗體；單鏈抗體分子(例如scFv)；及由抗體片段形成之多特異性抗體。

「抗原結合部分」意指化合物或分子中特異性結合於靶標抗原決定基、抗原、配位體、或受體之部分。具有抗原結合部分之分子包括但不限於抗體(例如，單株、多株、重組、人源化及嵌合抗體)、抗體片段或其部分(例如，Fab片段、Fab'2、scFv抗體、SMIP、域抗體、雙功能抗體、微型抗體、scFv-Fc、親和體、奈米抗體、及抗體之VH及/或VL域)、受體、配位體、適體、及具有經鑑別結合搭配物之其他分子。「親和力成熟」抗體係指與在一或多個高變區(HVR)中不具有一或多個改變之親本抗體相比具有此類改變之抗體，此等改變使抗體對抗原之親和力得到改良。

「結合域」意指化合物或分子中特異性結合於靶標抗原決定基、抗原、配位體、或受體之部分。結合域可為諸如以下分子的一部分：抗體(例如，單株、多株、重組、人源化、或嵌合抗體)、抗體片段或其部分(例如，Fab片段、Fab'2、scFv抗體、SMIP、域抗體、雙功能抗體、微型抗體、scFv-Fc、親和體、奈米抗體、及抗體之VH及/或VL域)、受體、配位體、適體、及具有經鑑別結合搭配物之其他分子。

如本文所用，術語「互補決定區」(CDR；亦即，CDR1、CDR2、及CDR3)係指抗體可變域之胺基酸殘基，其存在對於抗原結合而言為必需的。各可變域通常具有經鑑別為CDR1、CDR2、及CDR3之三個CDR區。各互補決定區可包含來自如由Kabat定義之「互補決定區」之胺基酸殘基(亦即，輕鏈可變域(V_L )中之約殘基24-34(L1)、50-56(L2)、及89-97(L3)，及重鏈可變域(V_H )中之31-35(H1)、50-65(H2)、及95-102(H3)；Kabat等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest , 第5版Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991))及/或來自「高變環」之彼等殘基(亦即，輕鏈可變域(V_L )中之約殘基26-32(L1)、50-52(L2)、及91-96(L3)，及重鏈可變域(V_H )中之26-32(H1)、53-55(H2)、及96-101(H3)；Chothia及LeskJ. Mol.Biol .196:901-917 (1987))。在一些情況下，互補決定區可包括來自根據Kabat所定義之CDR區及高變環的胺基酸。舉例而言，抗體4D5之重鏈的CDRH1包括胺基酸26至35。

術語「Fc區」在本文中用於定義含有恆定區之至少一部分的免疫球蛋白重鏈之C端區。該術語包括天然序列Fc區及變異體Fc區。在一個實施例中，人類IgG重鏈Fc區自Cys226或自Pro230延伸至該重鏈之羧基端。然而，Fc區之C端離胺酸(Lys447)可存在或不存在。除非本文中另外指定，否則Fc區或恆定區中胺基酸殘基之編號係根據EU編號系統，該系統亦稱為EU索引，如Kabat等人(出處同上)。

術語「全長抗體」、「完整抗體」、及「全抗體」在本文中可互換使用且係指結構基本上類似於天然抗體結構或具有含有如本文所定義之Fc區之重鏈的抗體。

「效應子功能」係指可歸因於抗體Fc區之彼等生物活性，其隨抗體同型變化。抗體效應子功能之實例包括：C1q結合及補體依賴性細胞毒性(CDC)；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細胞表面受體(例如B細胞受體)之下調；及B細胞活化。

「架構」或「FR」係指除高變區(HVR)殘基以外之可變域殘基。可變域之FR一般由四個FR域組成：FR1、FR2、FR3及FR4。因此，CDR及FR序列一般依以下順序出現於VH (或VL)中：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。

相對於參考多肽序列之「胺基酸序列一致性百分比(%)」或「序列一致性百分比(%)」定義為在比對參考多肽序列與候選序列且必要時引入間隙以達成最大序列一致性百分比之後，且在不將保守性取代視為序列一致性之一部分之情況下，候選序列中與參考多肽序列中之胺基酸殘基一致的胺基酸殘基之百分比。為測定胺基酸序列一致性百分比所進行之比對可用熟習此項技術者已知之各種方法完成，例如，使用公眾可獲得之計算機軟體，諸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign (DNASTAR)軟體。熟習此項技術者可確定適用於比對序列之參數，包括在所比較之序列之全長上達成最大對準所需之任何算法。然而，為此目的，胺基酸序列一致性%值係使用序列比較計算機程式ALIGN-2產生。該ALIGN-2序列比較計算機程式由Genentech公司創造，且源代碼已由美國版權局(U.S. Copyright Office), Washington D.C., 20559之用戶文檔歸檔，其中其登記在美國版權登記號TXU510087下。該ALIGN-2程式可公開獲自Genentech公司, South San Francisco, California，或可由源代碼編譯。該ALIGN-2程式應經編譯用於UNIX操作系統，包括數位UNIX V4.0D。所有序列比較參數皆由ALIGN-2程序設定且不變化。

在ALIGN-2用於胺基酸序列比較之情形中，既定胺基酸序列A相對於、與或針對既定胺基酸序列B之胺基酸序列一致性%(其另選可表述爲具有或包含相對於、與或針對既定胺基酸序列B之某一胺基酸序列一致性%的既定胺基酸序列A)計算如下： 100乘以分率X/Y 其中X為在A及B之程式比對中藉由序列比對程式ALIGN-2評分為相同配對之胺基酸殘基之數目，且其中Y為B中胺基酸殘基之總數目。應瞭解，在胺基酸序列A之長度不等於胺基酸序列B之長度時，A與B之胺基酸序列一致性%將不等於B與A之胺基酸序列一致性%。除非另外特別說明，否則本文所用所有胺基酸序列一致性%值如前一段落中所述使用ALIGN-2計算機程式來獲得。

術語「嵌合」抗體係指重鏈及/或輕鏈之一部分源於特定來源或物種，而重鏈及/或輕鏈之其餘部分源於不同來源或物種之抗體。

抗體之「類別」係指其重鏈所具有之恆定域或恆定區的類型。存在五種主要免疫球蛋白類別：IgA、IgD、IgE、IgG、及IgM，且此等類別中之數種可進一步分為亞類(同型)，例如IgG₁ 、IgG₂ 、IgG₃ 、IgG₄ 、IgA₁ 、及IgA₂ 。對應於不同類別之免疫球蛋白的重鏈恆定域分別稱為α、δ、ε、γ、及μ。

「受試者」、「患者」、或「個體」為哺乳動物。哺乳動物包括但不限於馴化動物(例如母牛、綿羊、貓、狗及馬)、靈長類動物(例如人類及非人類靈長類動物，諸如猴)、兔、及齧齒動物(例如小鼠及大鼠)。在某些實施例中，受試者、患者、或個體為人類。

術語「HER2陽性」癌症包含具有高於正常水準的HER2的癌細胞。HER2陽性癌症之實例包括HER2陽性乳癌及HER2陽性胃癌。在一些實施例中，HER2陽性癌症選自由以下組成之群：HER2陽性胃腸接合部癌症、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性肺癌(例如，HER2陽性非小細胞肺癌)、HER2陽性胰腺癌、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性膀胱癌、HER2陽性唾液管癌、HER2陽性卵巢癌(例如，HER2陽性上皮卵巢癌)、或HER2陽性子宮內膜癌。在一些實施例中，HER2陽性癌症為局部晚期或轉移性癌症。視情況，HER2陽性癌症具有2+或3+之免疫組織化學(IHC)評分及/或≥2.0之原位雜交(ISH)擴增比率。在一些實施例中，HER2陽性乳癌係根據Breast Cancer Guideline: 2018 Focused Update(Wolff等人.J. Clin. Oncol . 2018, 36(20):2105-2122)中的HER2測試來定義。

化合物例如HER2抗體(例如，HER2 TDB、曲妥珠單抗、或其組合)之「有效量」至少為達成所要治療或預防結果諸如特定病症(例如，HER2陽性癌症，例如HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌)之可量測改良或預防所需要之最小量。本文中之有效量可根據諸如患者之疾病狀態、年齡、性別及體重、及抗體於個體中引發所要反應之能力之因素而變化。有效量亦為治療上有益的作用超過治療之任何毒性或有害作用的量。關於預防性用途，有益或所需結果包括諸如以下的結果：消除或降低疾病(包括疾病之生物化學、組織學及/或行為症狀、其倂發症、及在疾病之發展期間呈現之中間病理學表型)之風險、減輕疾病之嚴重程度、或延遲疾病之發作。關於治療性用途，有益或所需結果包括諸如以下的臨床結果：減少由疾病產生之一或多種症狀、增加患疾病者之生活品質、減少治療疾病所需要之其他藥物之劑量、諸如經由靶向輸送來增強另一種藥物之作用、延遲疾病之進展、及/或延長存活。在癌症或腫瘤之情形下，有效量之藥物可具有在以下方面的作用：減少癌細胞(例如，HER2陽性癌細胞)之數目；減小腫瘤大小；抑制(亦即在某種程度上減慢且理想地停止)癌細胞浸潤至外周器官中；抑制(亦即在某種程度上減慢且理想地停止)腫瘤轉移；在某種程度上抑制腫瘤生長；及/或在某種程度上減輕與癌症相關之一或多種症狀。有效量可以在一或多次投與中投與。出於本發明之目的，藥物、化合物、或醫藥組成物之有效量為足以直接或間接地實現預防性或治療性治療之量。如臨床背景中應瞭解，藥物、化合物、或醫藥組成物之有效量可或可不聯合另一藥物、化合物、或醫藥組成物來實現。因此，「有效量」可在投與一或多種治療劑的情況下考慮，且單一劑若聯合一或多種其他劑可實現或實現所要結果，則可被視為以有效量給予。

術語「治療指數」係指治療劑(例如，HER2 TDB，例如，BTRC4017A)之引發毒性作用(例如，非腫瘤毒性作用)的劑量與治療劑(例如，HER2 TDB，例如，BTRC4017A)足以達成所要治療作用之劑量之間的比率。當(a)足以達成所要治療作用之劑量相對於參考治療方案有所減小且/或(b)治療劑引發毒性作用之劑量(例如，最大耐受劑量)相對於參考治療方案有所增加時，可達成增加的治療指數。在確定治療指數時，足以達成所要治療作用之劑量可根據個體對治療方案之客觀反應來確定。在一些實施例中，客觀反應為根據RECIST v.1.1.之完全反應(CR)或部分反應(PR)。另外或替代地，足以達成所要治療作用之劑量可根據個體反應持續時間(DOR)來確定。在一些實施例中，根據RECIST v.1.1.，DOR為自經記錄客觀反應之首次發生至首次經記錄疾病進展或由於任何原因之死亡(無論哪個首先發生)之時間的時間。在確定治療指數時，治療劑引發毒性作用之劑量可以根據劑量限制性毒性(DLT)之存在來確定，該劑量限制性毒性根據美國癌症研究所不良事件通用術語標準(National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events，NCI CTCAE) v5.0來分級，其中例外情況為細胞介素釋放症候群(CRS)，其根據改良細胞介素釋放症候群分級體系(Modified Cytokine Release Syndrome Grading System)來分級(參見部分II-治療方法中之表1及2)。

「存活」係指患者維持活著，且包括無進展存活(PFS)及總體存活(OS)。存活可藉由Kaplan-Meier方法評估，且存活之任何差異係使用分層對數秩檢驗來計算。

「無進展存活(PFS)」係指自治療(或隨機化)至首次疾病進展或死亡之時間。舉例而言，其為個體自治療開始或自初始診斷起維持活著而無癌症重返例如達諸如1個月、1.2個月、2個月、2.4個月、2.9個月、3個月、3.5個月、4個月、6個月、7個月、8個月、9個月、1年、約2年、約3年等之經定義時間段的時間。在發明之一個態樣中，PFS可藉由實體腫瘤之反應評價標準(RECIST v.1.1)來評定。

「總體存活(OS)」係指個體自治療開始或自初始診斷起維持活著達諸如約1年、約2年、約3年、約4年、約5年、約10年等之經定義時間段。

如本文所用，術語「中靶/非腫瘤作用」係指與治療劑與健康細胞上所表現之疾病相關靶標分子之結合相關聯的作用(例如，與HER2 TDB (例如，BTRC4017A)與健康細胞上所表現之HER2分子的結合相關聯之作用，例如，其中該作用為針對健康細胞之T細胞細胞毒性的結果)。在一些實施例中，中靶/非腫瘤作用為肺部毒性症狀(例如，間質性肺病、急性呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咳嗽、疲乏、或存在肺部浸潤)、肝酶水準升高、口腔乾燥、乾眼症、黏膜炎、食道炎、或尿路症狀。另外或替代地，中靶/非腫瘤作用可為HER2表現健康細胞或組織(亦即，非癌細胞或組織)之異常功能所引起之任何作用，其中該異常功能可歸因於投與HER2抗體(例如，在額外HER2抗體不存在下投與之HER2 TDB抗體(例如，其中HER2 TDB抗體及額外HER2抗體結合HER2之域IV)。在一些實施例中，中靶/非腫瘤作用為免疫原性作用，諸如CRS，其根據改良細胞介素釋放症候群分級體系來分級(參見部分II-治療方法中之表1及2)。

除非另外指示，否則如本文所用之術語「分化簇3」或「CD3」係指來自任何脊椎動物來源之任何天然CD3，該脊椎動物來源包括哺乳動物，諸如靈長類動物(例如人類)；及齧齒動物(例如小鼠及大鼠)，該術語包括例如CD3ε、CD3γ、CD3α及CD3β鏈。該術語涵蓋「全長」未加工CD3(例如，未加工或未修飾之CD3ε或CD3γ)，以及由細胞中之加工所產生之任何形式之CD3。該術語亦涵蓋CD3之天然存在之變異體，包括例如拼接變異體或對偶基因變異體。CD3包括例如207個胺基酸長之人類CD3ε蛋白(NCBI RefSeq No. NP_000724)及182個胺基酸長之人類CD3γ蛋白(NCBI RefSeq No. NP_000064)。

除非另外指示，否則如本文所用，術語「HER2」係指來自任何脊椎動物來源之任何天然HER2，包括哺乳動物，諸如靈長類動物(例如，人類)及齧齒動物(例如，小鼠及大鼠)。該術語涵蓋「全長」未加工HER2以及由細胞中之加工產生的任何形式之HER2。該術語亦涵蓋HER2之天然存在之變異體，包括例如拼接變異體或對偶基因變異體。HER2包括例如1240個胺基酸長之人類HER2蛋白(參見例如NCBI RefSeq No. NP_001276865)。HER2之域IV為定位成最接近於細胞膜之細胞外蛋白區。域IV具有胺基酸序列SEQ ID NO: 17。

如本文所用，「治療(treatment)」(及其語法變化形式，諸如「治療(treat)」或「治療(treating)」)係指臨床介入以試圖改變所治療個體之自然病程，且可為實現預防或在臨床病理學病程中進行。所需治療作用包括但不限於防止疾病發生或復發、減輕症狀、減弱疾病之任何直接或間接病理學結果、阻止轉移、降低疾病進展速率、改良或緩解疾病狀態及緩和或改良預後。在一些實施例中，本發明之抗體用於延遲疾病發展或減慢疾病進展。

如本文所用，「延遲病症或疾病之進展」意指推遲、阻礙、減慢、阻止、穩定及/或延緩疾病或病症(例如，HER2陽性癌症，例如，HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌)之發展。根據病史及/或正治療的個體，此延遲可為不同時間長度。如熟習此項技術者顯而易知，足夠或顯著延遲可事實上涵蓋預防，只要個體未發展該疾病。例如，可延遲晚期階段癌症，諸如轉移之發展。

「減少」或「抑制」意指導致例如20%或更大、50%或更大，或75%、85%、90%、95%或更大之總體減少之能力。在某些實施例中，減少或抑制可指相對於在額外HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療(例如，使用或不使用分次給藥方案)，在使用HER2 TDB及額外HER2抗體治療(例如，使用本發明之分次之劑量遞增給藥方案)之後，減少或抑制不需要的事件(例如，中靶/非腫瘤作用或免疫原性作用)，諸如經細胞介素驅動之毒性(例如，細胞介素釋放症候群(CRS))、輸注相關反應(IRR)、巨噬細胞活化症候群(MAS)、神經毒性、嚴重腫瘤裂解症候群(TLS)、嗜中性球減少症、血小板減少症、肝酶升高、及/或中樞神經系統(CNS)毒性。在其他實施例中，減少或抑制可指由抗體Fc區介導之抗體之效應子功能，此等效應子功能尤其包括補體依賴性細胞毒性(CDC)、抗體依賴性細胞毒性(ADCC)及抗體依賴性細胞吞噬作用(ADCP)。

如本文所用，「腫瘤」係指所有贅瘤細胞生長及增殖(無論惡性抑或良性)及所有癌前及癌細胞及組織。如本文所提及，術語「癌症」、「癌性」、「細胞增殖性病症」、「增殖性病症」、及「腫瘤」並非互斥的。

如本文所用，一「週」為7日±2日。

如本文所用，「投與」意指向個體給予一定劑量化合物(例如，HER2抗體或額外HER2抗體)或組成物(例如，醫藥組成物，例如，包括HER2抗體之醫藥組成物)的方法。用於本文所述之方法中之化合物及/或組成物可例如靜脈內(例如，藉由靜脈內輸注)、皮下、肌肉內、皮內、經皮、動脈內、腹膜內、病變內、顱內、關節內、前列腺內、胸膜內、氣管內、鼻內、玻璃體內、陰道內、直腸內、經表面、腫瘤內、經腹膜、結膜下、囊內、經黏膜、心包內、臍內、眼內、經口、經表面、經局部、藉由吸入、藉由注射、藉由輸注、藉由連續輸注、直接地藉由局部灌注浸泡靶標細胞、藉由導管、藉由灌洗、以乳膏形式或以脂質組成物形式經投與。投與方法可視多種因素(例如，正在投與之化合物或組成物及正在治療之病狀、疾病或病症之嚴重程度)而變化。

術語「包裝插頁」用於指治療産品之商業包裝中慣常包括的說明書，其含有關於適應症、用法、劑量、投與、組合療法、禁忌症及/或有關該等治療產品的用途之警告之資訊。II. 治療方法

本發明提供投與HER2抗體(例如，包括投與HER2 TDB (例如，BTRC4017A)及額外HER2抗體(例如，非TDB之HER2抗體，諸如曲妥珠單抗))之改良方法。此等方法可提供增加的對HER2陽性腫瘤之特異性，從而減少不需要的作用，諸如中靶/非腫瘤作用。本發明部分基於以下發現，治療指數增加可藉由使用HER2抗體(例如，二價單特異性HER2抗體，諸如曲妥珠單抗)及結合與HER2抗體(例如，HER2之域IV)相同之HER2域的HER2 TDB (例如，BTRC4017)共同治療個體來達成。與在HER2抗體不存在下使用HER2 TDB之治療相比，治療指數增加可與經歷中靶/非腫瘤作用之可能性減小相關聯。另外或替代地，與在第一HER2抗體不存在下使用第二HER2之治療相比，治療指數增加可與經歷免疫原性副作用之可能性減小相關聯。

中靶/非腫瘤作用可因HER2 TDB與非腫瘤細胞(例如，健康細胞)所表現之HER2結合而發生。中靶/非腫瘤作用可為肺部毒性症狀，諸如間質性肺病、急性呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咳嗽、疲乏、或存在肺部浸潤。另外或替代地，中靶/非腫瘤作用可能與具有低或中度HER2表現之健康細胞或組織諸如胃腸道、呼吸道、生殖道、泌尿道、皮膚、乳房、及胎盤中之上皮細胞的功能障礙相關聯。可藉由本文所述之方法減少或抑制之此等中靶/非腫瘤作用包括例如肝酶水準升高、口腔乾燥、乾眼症、黏膜炎、食道炎、或尿路症狀。

在確定治療指數時，足以達成所要治療作用之劑量可根據個體對治療方案之客觀反應(OR)來確定。在一些實施例中，OR為根據RECIST v.1.1.之完全反應(CR)或部分反應(PR)。另外或替代地，足以達成所要治療作用之劑量可根據個體反應持續時間(DOR)來確定。在一些實施例中，根據RECIST v.1.1.，DOR為自經記錄客觀反應之首次發生至首次經記錄疾病進展或由於任何原因之死亡(無論哪個首先發生)之時間的時間。因此，在一些實施例中，本發明之方法增加DOR且/或延長個體之存活(例如，總體存活(OS)或無進展存活(PFS))。

在一些實施例中，由本發明之治療方案引起的治療指數增加與相比於治療經歷免疫原性副作用(例如，抗藥物抗體水準升高、輸注/投與相關反應(ARR)、心功能障礙、肺部反應、及細胞介素釋放症候群)之可能性減小相關聯。

在確定治療指數時，治療劑引發毒性作用之劑量可根據劑量限制性毒性(DLT)之存在來確定，劑量限制性毒性係根據NCI CTCAE v5.0來分級(其中例外情況為細胞介素釋放症候群(CRS))。在一些實施例中，DLT為在評定時間段期間(例如，第一給藥週期)發生的任何以下不良事件： (a) 左心室射出分率(LVEF)自基線減小≥ 15%或者≥ 10%減小至小於50% LVEF； (b)肝功能異常，例如，如藉由以下項所確定： (i) AST或ALT ＞ 3 × 正常值上限(ULN)且總膽紅素＞ 2 × ULN，其具有以下例外情況：若以上情況在≤ 2級CRS (如藉由Lee等人Blood 2014, 124:188-195建立之標準所定義)之情況下發生，在＜ 3日內消退至≤ 1級，且無個別實驗室值為＞ 3級，則不將其視為DLT； (ii)任何3級AST或ALT升高，其具有以下例外情況：若以上情況在≤ 2級CRS (如藉由Lee等人Blood 2014, 124:188-195建立之標準所定義)之情況下發生，在＜ 3日內消退至≤ 1級，則不將其視為DLT。在患有轉移性肝病變之患者中，不將在輸注之後開始且在1週內恢復至≤ 2級或基線的膽紅素、轉胺酶、及/或γ-麩胺醯轉移酶(GGT)之3級短暫增加視為DLT； (c) ≥ 3級淋巴球減少症，持續＞ 7日； (d) ≥ 4級嗜中性球減少症(ANC ＜ 500個細胞/µL)，持續＞7日； (e) ≥ 3級發熱性嗜中性球減少症； (f) ≥ 4級貧血； (g) 與臨床上顯著的出血相關聯的≥ 4級血小板減少症或3級血小板減少症；及/或 (h) 不歸因於另一種明確可鑑別原因之≥ 3級非出血性非肝臟不良事件，其具有以下例外情況：(i) 3級噁心或嘔吐，其在≤ 3日內使用標準護理療法消退至≤ 2級；(ii) 3級腹瀉、結腸炎、或胃腸炎，其在7日內使用適當治療消退至≤ 1級；(iii) 3級疲乏，其在≤ 7日內消退至≤ 2級；(iv) 3級發熱(如藉由＞ 40℃達≤ 24小時所定義)；(v)3級實驗室異常，其為無症狀的且被調查者視為臨床上顯著的；(vi) 3級皮疹，其在≤ 7日內使用等效於潑尼松10 mg/日或更少之療法消退至≤ 2級；(vii) 3級關節痛，其可使用支持性護理適當管理或者在7日內消退至≤ 2級；(viii)定義為位於已知或疑似腫瘤部位處之局部疼痛、刺激、或皮疹之3級腫瘤加劇(tumor flare)，其在輸注24小時內開始且在≤ 7日內消退至≤ 2級；(ix) 3級缺氧，其在輸注24小時內開始且在事件開始後2日內消退至≤ 2級；或(x)在患有轉移性肺病變之患者中，繼發於局部性肺水腫之3級呼吸困難，其在輸注24小時內開始且在事件開始後2日內恢復至1級或基線，及支氣管痙攣，其在24小時內消退。

CRS係根據Russell等人N. Engl. J. Med . 2008, 358:877-887及Lee等人Blood 2014, 124:188-195中所述之改良細胞介素釋放症候群分級體系來分級，且匯總於以下表1及2。表 1 ：改良細胞介素釋放症候群分級體系

等級	毒性
1級	症狀未威脅生命且僅需要症狀治療 (例如，發熱、噁心、疲乏、頭痛、肌痛、不適)
2級	症狀需要適度介入且對該介入有反應需氧量＜40%；或對流體或低劑量^a 的一種血管加壓藥有反應之低血壓；或 2級器官毒性
3級	症狀需要積極介入且對該介入有反應需氧量≥40%；或需要高劑量^b 或多種血管加壓藥之低血壓；或 3級器官毒性或4級轉胺酶升高(transaminitis)
4級	威脅生命之症狀需要呼吸機支持或 4級器官毒性(不包括轉胺酶升高)
5級	死亡

^a 低劑量血管加壓藥：劑量低於以下表2所示之劑量的單一血管加壓藥。^b 高劑量血管加壓藥：如以下表2所定義。表 2 ：高劑量血管加壓藥 ( 持續時間 ≥ 3 小時 )

加壓藥	劑量
正腎上腺素單一療法	≥20 mcg/min
多巴胺單一療法	≥10 mcg/kg/min
去氫腎上腺素單一療法	≥200 mcg/min
腎上腺素單一療法	≥10 mcg/min
若是血管加壓素	血管加壓素＋正腎上腺素當量≥10 mcg/min^a
若是組合血管加壓藥 (非血管加壓素)	正腎上腺素當量≥20 mcg/min a

^a 正腎上腺素當量劑量= [正腎上腺素(mcg/min)]+[多巴胺(mcg/kg/min)]+[去氫腎上腺素(mcg/min) / 10]

在一些情況下，使用本文所述之方法、藉由投與HER2 TDB (例如，HER2 TDB與額外HER2抗體之組合及/或在分次劑量遞增給藥方案之情況下之HER2 TDB)之治療導致不需要的事件諸如前述事件中之任一或多者在本發明之治療方案之後相對於對照治療方案(例如，HER2 TDB單一療法(在額外HER2抗體不存在下)或在未分次給藥方案中之HER2 TDB治療)減少(例如，減少了20%或更大、25%或更大、30%或更大、35%或更大、40%或更大、45%或更大、50%或更大、55%或更大、60%或更大、65%或更大、70%或更大、75%或更大、80%或更大、85%或更大、90%或更大、95%或更大、96%或更大、97%或更大、98%或更大、或99%或更大)或完全抑制(100%減少)。

在一些情況下，由本發明之方法引起的治療指數增加為相對於對照組增加至少1% (例如，增加1%至1,000% (10倍)、增加2%至5,000%、增加3%至4,000%、增加4%至3,000%、增加5%至2,000%、增加10%至1,000%、增加20%至500%、或增加50%至100%，例如增加1%至5%、增加5%至10%、增加10%至20%、增加20%至30%、增加30%至40%、增加40%至50%、增加50%至60%、增加60%至70%、增加70%至80%、增加80%至90%、增加90%至100%、增加100%至150%、增加150%至200%、增加200%至300%、增加300%至400%、增加400%至500%、或增加500%至1,000%)。HER2 陽性癌症

本文所述之方法可用於治療HER2陽性癌症。在一些情況下，HER2陽性癌症為HER2陽性實體腫瘤。另外或替代地，HER2陽性癌症可為局部晚期或轉移性HER2陽性癌症。在一些情況下，HER2陽性癌症為HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌。在一些實施例中，HER2陽性癌症選自由以下組成之群：HER2陽性胃腸接合部癌症、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性肺癌(例如，HER2陽性非小細胞肺癌)、HER2陽性胰腺癌、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性膀胱癌、HER2陽性唾液管癌、HER2陽性卵巢癌(例如，HER2陽性上皮卵巢癌)、或HER2陽性子宮內膜癌。使用 HER2 TDB 及額外 HER2 抗體之共同治療

本文所述之方法包括向患有癌症(例如，HER2陽性癌症)之個體投與HER2 TDB (例如，結合至HER2及CD3之TDB，諸如BTRC4017)及HER2抗體(例如，結合至HER2之額外抗體，例如非HER2 TDB之HER2抗體，諸如HER2單特異性抗體(例如，單特異性二價HER2抗體))。在一些實施例中，HER2 TDB及HER2抗體二者結合HER2之域IV。舉例而言，HER2 TDB及HER2抗體可競爭性結合至HER2之域IV。在一些實施例中，HER2 TDB及HER2抗體在相同抗原決定基或在重疊抗原決定基結合HER2(例如，HER2之相同抗原決定基或重疊抗原決定基)。在一些實施例中，HER2 TDB所具有之HER2結合親合力低於額外HER2抗體，這可至少部分由於HER2 TDB的HER2效價(valency)相對於額外抗體更低(例如，其中HER2 TDB單價結合至HER2且額外HER2抗體二價結合至HER2)。另外或替代地，HER2 TDB之HER2結合域與額外HER2抗體具有大約相同的HER2結合親和力(例如，HER2 TDB及額外HER2抗體可共有一個、兩個、三個、四個、五個、或全部六個CDR；或一個或兩個可變區)。在一些實施例中，HER2 TDB所具有之V_H 及/或V_L 與額外HER2抗體之V_H 及/或V_L 共有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%、或100%胺基酸序列一致性。在一些實施例中，HER2 TDB及HER2抗體共有相同HER2結合域(例如，4D5之HER2結合域(例如，hu4D5)，諸如在HER2 TDB為BTRC4017A且HER2抗體為曲妥珠單抗或其Fc修飾之變異體的情況下。

在一些情況下，本文所述之任何方法可包括投與HER2 TDB，其包括具有包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個、或六個互補決定區(CDR)的HER2結合域之抗HER2臂：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 1)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 2)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO:3)；(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 4)；(e) CDR -L2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 5)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 6)。在一些情況下，HER2 TDB包含有包含HER2結合域之抗HER2臂，該結合域包含有(a)包含與SEQ ID NO:7具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:7之重鏈可變域(V_H )；(b)包含與SEQ ID NO:8具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:8之輕鏈可變域(V_L )；或(c)如(a)中之VH域及如(b)中之VL域。因此，在一些情況下，HER2結合域包含有包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之V_H 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之V_L 。具有以上CDR及可變區序列之示範性HER2結合域為例如WO 2015/095392中所述之hu4D5的HER2結合域，該專利以引用方式整體併入本文。

在一些情況下，本文所述之任何方法包括投與HER2 TDB，其包括具有包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個、或六個CDR的CD3結合域之抗CD3臂：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 9)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 10)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 11)；(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 12)；(e) CDR-L2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 13)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)。在一些情況下，雙特異性抗體包含有包含CD3結合域之抗CD3臂，該結合域包含有(a)包含與SEQ ID NO:15具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:15之V_H ； (b)包含與SEQ ID NO:16具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:16之V_L 域；或(c)如(a)中之VH域及如(b)中之VL域。因此，在一些情況下，CD3結合域包含有包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15之V_H 域及包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之V_L 域。具有以上CDR及可變區序列之示範性CD3結合域為例如WO 2015/095392中所述之40G5c的CD3結合域，該專利以引用方式整體併入本文。

在一些情況下，本文所述之任何方法包括投與HER2 TDB，其包括(i)具有包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個、或六個互補決定區(CDR)的HER2結合域之抗HER2臂：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 1)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 2)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO:3)；(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 4)；(e) CDR -L2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 5)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 6)；及(ii)具有包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個、或六個CDR的CD3結合域之抗CD3臂：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 9)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 10)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 11)；(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 12)；(e) CDR-L2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 13)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 14)。在一些情況下，HER2 TDB包含有(i)包含HER2結合域之抗HER2臂，該結合域包含有(a)包含與SEQ ID NO:7具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:7之重鏈可變域(V_H )；(b)包含與SEQ ID NO:8具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:8之輕鏈可變域(V_L )；或(c)如(a)中之VH域及如(b)中之VL域；及(ii)包含CD3結合域之抗CD3臂，該結合域包含有(a)包含與SEQ ID NO:15具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:15之V_H ；(b)包含與SEQ ID NO:16具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:16之V_L 域；或(c)如(a)中之VH域及如(b)中之VL域。因此，在一些情況下，HER2結合域包含有包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之V_H 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之V_L ，且CD3結合域包含有包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15之V_H 域及包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之V_L 域。示範性此等HER2 TDB為BTRC4017A，其為在與具有40G5c CD3結合域之抗CD3臂配對之抗HER2臂中具有hu4D5 HER2結合域之全長「孔中結」抗體。

在一些情況下，本文所述之任何方法可包括投與如WO 2015/063339中所述之HER2 TDB。在一些情況下，本文所述之任何方法可包括投與HER2 TDB GBR1302。

在一些情況下，本文所述之任何方法可包括投與具有單價臂及二價臂之HER2 TDB。單價臂可包括CD3結合域且二價臂可包括兩個HER2結合域，且各臂可具有另一Fc亞基締合(例如，透過孔中結組態)以形成Fc域之Fc亞基。在此實施例中，CD3結合域之C端稠合至Fc亞基之N端，一個HER2結合域之C端稠合至第二HER2結合域之N端，且第二HER2結合域之C端稠合至另一Fc亞基之N端。在一些情況下，具有單價臂及二價臂之HER2 TDB結合HER2之域IV。舉例而言，HER2結合域可具有hu4D5序列(例如，曲妥珠單抗)且/或CD3結合域可具有40G5c序列。此等二價HER2 TDB之實例描述於國際專利申請案第PCT/US2019/17251號中。

用於與HER2 TDB共同治療之HER2抗體包括單特異性HER2抗體及多特異性(例如，雙特異性) HER2抗體(例如，其中雙特異性HER2抗體不為T細胞依賴性雙特異性抗體)。在一些實施例中，HER2抗體為HER2之多價(例如，二價)。另外或替代地，供本文所述之共同治療中使用的HER2抗體包括全長HER2抗體及其HER2結合片段。在涉及全長HER2抗體之情況下，Fc區可包括一或多個修飾，例如以減小效應子功能。示範性Fc修飾在以下部分5.c中進一步論述。

在一些情況下，本文所述之任何方法可包括投與HER2抗體(例如，除了HER2 TDB以外)，其包括包含選自以下之至少一個、兩個、三個、四個、五個、或六個互補決定區(CDR)之HER2結合域：(a) CDR-H1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 1)；(b) CDR-H2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 2)；(c) CDR-H3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO:3)；(d) CDR-L1，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 4)；(e) CDR -L2，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 5)；及(f) CDR-L3，其包含胺基酸序列(SEQ ID NO: 6)。在一些情況下，HER2抗體包含HER2結合域，該結合域包含有(a)包含與SEQ ID NO:7具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:7之重鏈可變域(V_H )；(b)包含與SEQ ID NO:8具有至少90%序列一致性(例如，至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列一致性)之胺基酸序列或包含序列SEQ ID NO:8之輕鏈可變域(V_L )；或(c)如(a)中之VH域及如(b)中之VL域。因此，在一些情況下，HER2結合域包含有包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之V_H 及包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之V_L 。具有以上CDR及可變區序列之示範性HER2結合域為hu4D5之HER2結合域。在一些實施例中，HER2抗體為曲妥珠單抗。在其他實施例中，HER2抗體為Fc修飾之曲妥珠單抗變異體(，例如曲妥珠單抗-LALAPG)。

HER2 TDB及/或額外HER2抗體可使用例如美國專利第4,816,567號中所述之重組方法及組成物來產生，該專利以引用方式整體併入本文。

在一些情況下，根據上文所述之以上實施例中任一項之HER2 TDB及/或額外HER2抗體可單一或以組合方式合併如以下部分1至5中所述之特徵中任一者。1. 抗體親和力

在某些實施例中，關於HER2結合域、CD3結合域、或二者，本文之HER2 TDB及/或額外HER2抗體之解離常數(K_D ) ≤1μM、≤100 nM、≤10 nM、≤1 nM、≤0.1 nM、≤0.01 nM、或≤0.001 nM (例如，10^-8 M或更小，例如，10^-8 M至10^-13 M，例如，10^-9 M至10^-13 M)。

在一個實施例中，藉由放射性標記之抗原結合檢定(RIA)量測K_D 。在一個實施例中，RIA以Fab型式之感興趣之抗體及其抗原來執行。舉例而言，藉由以下方法量測Fab對抗原之溶液結合親和力：在未標記抗原之滴定系列存在下，以最小濃度之(¹²⁵ I)標記抗原平衡Fab，隨後以塗有抗Fab抗體之盤捕獲結合之抗原(參見例如Chen等人,J. Mol. Biol. 293:865-881(1999))。為了確立檢定條件，將MICROTITER^® 多孔盤(Thermo Scientific)以在50 mM碳酸鈉(pH 9.6)中之5 μg/ml捕獲抗Fab抗體(Cappel Labs)塗佈隔夜，隨後在室溫(約23℃)下以在PBS中之2% (w/v)牛血清白蛋白阻斷二至五小時。在非吸附盤(Nunc #269620)中，將100 pM或26 pM [¹²⁵ I]-抗原與感興趣之Fab之連續稀釋液混合(例如與Presta等人,Cancer Res. 57:4593-4599 (1997)中抗VEGF抗體Fab-12之評定一致)。隨後培育感興趣之Fab隔夜；然而，培育可持續較長時間段(例如65小時)以確保達至平衡。此後，在室溫下將混合物轉移至捕獲盤中以用於培育(例如達一小時)。然後移除溶液，且以在PBS中之0.1%聚山梨酯20 (TWEEN-20^® )洗滌盤8次。當盤已乾燥時，添加150微升/孔之閃爍體(MICROSCINT-20^TM ；Packard)，且在TOPCOUNT^TM γ計數器(Packard)上對盤計數十分鐘。選擇給出小於或等於20%最大結合之各Fab之濃度以用於競爭性結合檢定。

根據另一實施例，使用BIACORE^® 表面電漿子共振檢定來量測K_D 。舉例而言，使用BIACORE^® -2000或BIACORE^® -3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ)之檢定在25℃下使用約10個反應單位(RU)之固定抗原CM5晶片來執行。在一個實施例中，根據供應商之說明書，用N -乙基-N' -(3-二甲胺基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)及N -羥基丁二醯亞胺(NHS)來活化羧基甲基化葡聚糖生物感測器晶片(CM5，BIACORE, Inc.)。以10 mM乙酸鈉(pH 4.8)稀釋抗原至5 μg/ml (約0.2 μM)，隨後以5 μl/min之流速注射，以達成約10個反應單位(RU)之偶聯蛋白。在注射抗原後，注射1 M乙醇胺以阻斷未反應之基團。對於動力學量測，在25℃下將Fab之兩倍系列稀釋液(0.78 nM至500 nM)以約25 μl/min之流速注入到具有0.05%聚山梨酯20 (TWEEN-20^TM )界面活性劑的PBS (PBST)中。藉由同時擬合締合及解離感測圖，使用簡單的一對一朗繆耳結合模型(BIACORE^® 評估軟體3.2版)計算締合速率(k_on )及解離速率(k_off )。平衡解離常數(K_D )以比率k_off /k_on 來計算。參見例如Chen等人,J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)。如果藉由以上表面電漿子共振檢定的締合速率超過10⁶ M-¹ s-¹ ，則可藉由使用螢光淬滅技術來確定締合速率，該螢光淬滅技術量測在如在分光計(諸如停流配備分光光度計(Aviv Instruments)或具有攪拌比色皿的8000系列SLM-AMINCO^TM 分光光度計(ThermoSpectronic))中所量測的在遞增濃度之抗原存在下，在25℃下於PBS (pH 7.2)中的20 nM抗抗原抗體(Fab形式)之螢光發射強度(激發= 295 nm；發射= 340 nm，16 nm帶通)的增加或降低。2. 抗體片段

在某些實施例中，HER2 TDB及/或額外HER2抗體為抗體片段，例如HER2 TDB之抗體片段結合至HER2及CD3。抗體片段包括但不限於Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')₂ 、Fv及scFv片段、及下文所述之其他片段。關於某些抗體片段之評述，參見Hudson等人Nat. Med. 9:129-134 (2003)。關於scFv片段之評述，參見例如Pluckthün,The Pharmacology of Monoclonal Antibodies , 第113卷, Rosenburg及Moore編, (Springer-Verlag, New York), 第269-315頁(1994)；亦參見WO 93/16185；及美國專利第5,571,894號及第5,587,458號。關於包含救助受體結合抗原決定基殘基且具有延長之活體內半衰期之Fab及F(ab')₂ 片段的論述，參見美國專利第5,869,046號。

雙功能抗體爲具有兩個抗原結合位點之抗體片段，其可爲二價或雙特異性抗體片段。參見例如EP 404,097；WO 1993/01161；Hudson等人Nat. Med. 9:129-134 (2003)；及Hollinger等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448 (1993)。三功能抗體及四功能抗體亦描述於Hudson等人Nat. Med. 9:129-134 (2003)中。

單域抗體為包含抗體之全部或一部分重鏈可變域或全部或一部分輕鏈可變域之抗體片段。在某些實施例中，單域抗體為人類單域抗體(Domantis, Inc., Waltham, MA；參見例如美國專利第6,248,516 B1號)。

抗體片段可藉由各種技術製成，包括但不限於蛋白水解消化完整抗體以及藉由重組宿主細胞(例如大腸桿菌或噬菌體)產生，如本文所述。3. 嵌合及人源化抗體

在某些實施例中，供根據本文所述之方法使用的HER2 TDB及/或額外HER2抗體為嵌合抗體。某些嵌合抗體描述於例如美國專利第4,816,567號；及Morrison等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 81:6851-6855 (1984))中。在一個實例中，嵌合抗體包含非人類可變區(例如，來源於小鼠、大鼠、倉鼠、兔或非人類靈長類動物(諸如猴)之可變區)及人類恆定區。在另一實例中，嵌合抗體為「類別轉換」抗體，其中類別或亞類已自親本抗體之類別或亞類改變。嵌合抗體包括其抗原結合片段。

在某些實施例中，嵌合抗體為人源化抗體。通常，將非人類抗體人源化以降低對人類之免疫原性，同時保持親本非人類抗體之特異性及親和力。通常，人源化抗體包含一或多個可變域，其中HVR例如CDR (或其部分)來源於非人類抗體，且FR (或其部分)來源於人類抗體序列。人源化抗體視情況亦將包含人類恆定區之至少一部分。在一些實施例中，人源化抗體中之一些FR殘基經來自非人類抗體(例如，HVR殘基所來源之抗體)之對應殘基取代以例如恢復或改良抗體特異性或親和力。

人源化抗體及其製備方法評述於例如Almagro及Fransson,Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)，且進一步描述於例如Riechmann等人, Nature 332:323-329 (1988)；Queen等人,Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86:10029-10033 (1989)；美國專利第5, 821,337號、第7,527,791號、第6,982,321號、及第7,087,409號；Kashmiri等人,Methods 36:25-34 (2005) (描述特異性決定區(SDR)接枝)；Padlan,Mol. Immunol. 28:489-498 (1991) (描述「表面重構(resurfacing)」)；Dall'Acqua等人,Methods 36:43-60 (2005) (描述「FR改組」)；及Osbourn等人,Methods 36:61-68 (2005)及Klimka等人,Br. J. Cancer , 83:252-260 (2000) (描述FR改組之「經引導選擇」方法)。

可用於人源化之人類架構區包括但不限於：使用「最佳擬合」方法選擇之架構區(參見例如Sims等人J. Immunol. 151:2296 (1993))；來源於輕鏈或重鏈可變區之特定子組的人類抗體之共有序列的架構區(參見例如Carter等人Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 89:4285 (1992)；及Presta等人J. Immunol. , 151:2623 (1993))；人類成熟(體細胞突變)架構區或人類生殖系架構區(參見例如Almagro及Fransson,Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008))；及來源於篩選FR文庫之架構區(參見例如Baca等人,J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997)及Rosok等人,J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996))。4. 孔中結雙特異性抗體工程改造

HER2 TDB及/或額外HER2抗體可經製備為全長抗體或抗體片段。用於製備雙特異性抗體之技術包括但不限於重組共表現具有不同特異性之兩個免疫球蛋白重鏈-輕鏈對(參見Milstein及Cuello,Nature 305: 537 (1983))，WO 93/08829，及Traunecker等人,EMBO J. 10: 3655 (1991))，及「孔中結」工程改造(參見例如美國專利第5,731,168號)。雙特異性抗體之「孔中結」工程改造可用於產生含有結之第一臂及含有孔的第二臂，第一臂之結可結合至該孔中。在一個實施例中，TDB之結可處於抗CD3臂上。替代地，本發明之TDB之結可處於抗HER2臂上。在一個實施例中，本發明之TDB之孔可處於抗CD3臂上。替代地，本發明之TDB之孔可處於抗HER2臂上。在一些實施例中，使用孔中結技術產生之HER2 TDB及/或額外HER2抗體可包含一或多個重鏈恆定域，其中該一或多個重鏈恆定域選自第一CH1 (CH1 ₁ )域、第一CH2 (CH2 ₁ )域、第一CH3 (CH3 ₁ )域、第二CH1 (CH1 ₂ )域、第二CH2 (CH2 ₂ )域、及第二CH3 (CH3 ₂ )域。在一些情況下，一或多個重鏈恆定域中之至少一者與另一個重鏈恆定域配對。在一些情況下，CH3 ₁ 及CH3 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中CH3 ₁ 域中之突出或空穴可分別定位在CH3 ₂ 域中之空穴或突出中。在一些情況下，CH3 ₁ 及CH3 ₂ 域在該突出與空穴之間的介面處交會。在一些情況下，CH2 ₁ 及CH2 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中CH2 ₁ 域中之突出或空穴可分別定位在CH2 ₂ 域中之空穴或突出中。在一些情況下，CH2 ₁ 及CH2 ₂ 域在該突出與空穴之間的介面處交會。

雙特異性抗體(例如，TDB)亦可使用免疫球蛋白交叉(亦稱為Fab域交換或CrossMab形式)技術來工程改造(參見例如WO2009/080253；Schaefer等人,Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 108:11187-11192 (2011))。雙特異性抗體亦可藉由工程改造靜電轉向效應以用於製備抗體Fc-異二聚體分子(WO2009/089004A1)；使二或更多個抗體或片段交聯(參見例如美國專利號4,676,980，及Brennan等人, Science , 229: 81 (1985))；使用白胺酸拉鍊產生雙特異性抗體(參見例如Kostelny等人J. Immunol. , 148(5):1547-1553 (1992))；使用「雙功能抗體」技術以用於製備雙特異性抗體片段(參見例如Hollinger等人,Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 90:6444-6448 (1993))；及使用單鏈Fv (sFv)二聚體(參見例如Gruber等人,J. Immunol. ,152:5368 (1994))；及如例如Tutt等人J. Immunol. 147: 60 (1991)所述製備三特異性抗體來製成。

HER2 TDB及/或額外HER2抗體或其抗體片段亦可包括包含結合至除了HER2以外的靶標(例如，在HER2 TDB情況下為CD3)以及HER2之抗原結合位點的「雙重作用FAb」或「DAF」(參見例如美國公開案第2008/0069820號，該公開案以引用方式整體併入本文)。5. 變異體

在一些情況下，設想上文所述之HER2 TDB及/或額外HER2抗體之胺基酸序列變異體。舉例而言，可能需要改良HER2 TDB及/或額外HER2抗體中之一者或二者的結合親和力及/或其他生物特性。抗體之胺基酸序列變異體可藉由將適當修飾引入至編碼該抗體之核苷酸序列中或藉由肽合成來製備。此類修飾包括例如抗體之胺基酸序列內的殘基之缺失、及/或插入、及/或取代。可進行缺失、插入、及取代之任何組合以獲得最終構築體，其限制條件為最終構築體具有所要特徵，例如抗原結合。a. 取代、插入、及缺失變異體

在某些實施例中，提供具有一或多個胺基酸取代之抗體變異體。用於取代誘變之所關注之位點包括HVR及FR。保守取代展示於表3之標題「較佳取代」下。更多實質性改變在表3中之標題「示範性取代」下且如下文中參考胺基酸側鏈類別進一步描述來提供。胺基酸取代可經引入至感興趣之抗體中且針對所需活性篩選產物，例如經保持/經改良之抗原結合、減少的免疫原性或經改良之ADCC或CDC。表 3. 示範性及較佳胺基酸取代

初始殘基	示範性取代	較佳取代
Ala (A)	Val；Leu；Ile	Val
Arg (R)	Lys；Gln；Asn	Lys
Asn (N)	Gln；His；Asp, Lys；Arg	Gln
Asp (D)	Glu；Asn	Glu
Cys (C)	Ser；Ala	Ser
Gln (Q)	Asn；Glu	Asn
Glu (E)	Asp；Gln	Asp
Gly (G)	Ala	Ala
His (H)	Asn；Gln；Lys；Arg	Arg
Ile (I)	Leu；Val；Met；Ala；Phe；正白胺酸	Leu
Leu (L)	正白胺酸；Ile；Val；Met；Ala；Phe	Ile
Lys (K)	Arg；Gln；Asn	Arg
Met (M)	Leu；Phe；Ile	Leu
Phe (F)	Trp；Leu；Val；Ile；Ala；Tyr	Tyr
Pro (P)	Ala	Ala
Ser (S)	Thr	Thr
Thr (T)	Val；Ser	Ser
Trp (W)	Tyr；Phe	Tyr
Tyr (Y)	Trp；Phe；Thr；Ser	Phe
Val (V)	Ile；Leu；Met；Phe；Ala；正白胺酸	Leu

可根據常見側鏈特性將胺基酸分組： (1)疏水性：正白胺酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile； (2)中性親水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln； (3)酸性：Asp、Glu； (4)鹼性：His、Lys、Arg； (5)影響鏈取向之殘基：Gly、Pro； (6)芳族：Trp、Tyr、Phe。

非保守取代將需要用另一類別更換此等類別中之一類之成員。

一種類型之取代型變異體涉及取代親本抗體(例如人源化抗體或人類抗體)之一或多個高變區殘基。通常，所得經選擇用於進一步研究的變異體將相對於親本抗體具有某些生物特性之修飾(例如，改良) (例如，增加之親和力、減少之免疫原性)且/或將具有實質上經保持的親本抗體之某些生物特性。示範性取代變異體為親和力成熟抗體，其可例如使用基於噬菌體顯示之親和力成熟技術諸如本文所述之技術便利地產生。簡言之，一或多個CDR殘基發生突變且該等變異體抗體在噬菌體上顯示且針對特定生物活性(例如，結合親和力)進行篩選。

可在CDR中進行改變(例如取代)，例如以改良抗體親和力。可在CDR「熱點」(亦即由在體細胞成熟過程期間以高頻率經受突變之密碼子編碼之殘基(參見例如Chowdhury,Methods Mol.Biol. 207:179-196 (2008))及/或接觸抗原之殘基)中進行此等改變，且測試所得變異體VH或VL之結合親和力。藉由構築及自二級文庫再選擇進行之親和力成熟已例如描述於Hoogenboom等人,Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien等人編, Human Press, Totowa, NJ, (2001).)中。在親和力成熟之一些實施例中，藉由多種方法(例如易錯PCR、鏈改組、或寡核苷酸定點誘變)中之任一者將多樣性引入至所選用於成熟之可變基因中。然後創建二級文庫。隨後篩選該文庫以鑑別具有所要親和力之任何抗體變異體。引入多樣性的另一方法涉及HVR定點方法，其中使若干HVR殘基(例如一次4-6個殘基)隨機化。參與抗原結合之HVR殘基可例如使用丙胺酸掃描誘變或建模來特異性地鑑別。通常尤其靶向CDR-H3及CDR-L3。

在某些實施例中，取代、插入、或缺失可出現於一或多個CDR內，只要該等改變不會實質上降低該抗體結合抗原之能力。例如，可在CDR中產生不會實質上降低結合親和力之保守改變(例如，如本文所提供之保守取代)。該等改變可例如在CDR中之抗原接觸殘基外部。在以上提供之變異體VH及VL序列之某些實施例中，各CDR未改變或含有不超過一個、兩個或三個胺基酸取代。

用於鑑別抗體中可經靶向而進行誘變之殘基或區的適用方法稱為「丙胺酸掃描誘變」，如由Cunningham及Wells (1989)Science , 244:1081-1085所述。在此方法中，鑑別一殘基或一組標靶殘基(例如帶電荷之殘基，諸如Arg、Asp、His、Lys、及Glu)且置換為中性或帶負電荷之胺基酸(例如丙胺酸或聚丙胺酸)以確定抗體與抗原之相互作用是否受影響。可在對初始取代展示功能敏感性之胺基酸位置處引入其他取代。替代地或另外，可確定抗原-抗體複合物之晶體結構以鑑別抗體與抗原之間的接觸點。此類接觸殘基及相鄰殘基可經靶向或消除以作為取代之候選物。可篩選變異體以確定其是否含有所要特性。

胺基酸序列插入物包括長度範圍自一個殘基至含有一百或更多個殘基之多肽的胺基端及/或羧基端融合物以及單個或多個胺基酸殘基之序列內插入物。末端插入物之實例包括具有N端甲硫胺醯基殘基之抗體。該抗體分子之其他插入變異體包括該抗體之N端或C端與酶(例如用於ADEPT)或延長該抗體之血清半衰期的多肽的融合物。b. 醣化變異體

在一些情況下，本發明之方法涉及向個體投與HER2 TDB及/或額外HER2抗體變異體(例如，在分次之劑量遞增給藥方案之情況下)，該抗體變異體經修飾以增加或減小雙特異性抗體經醣化之程度。對本發明之HER2 TDB及/或額外HER2抗體添加醣化位點或使醣化位點缺失可藉由改變胺基酸序列以使得產生或移除一或多個醣化位點來便利地達成。

在HER2 TDB及/或額外HER2抗體包含Fc區之情況下，其所連接之碳水化合物可發生改變。由哺乳動物細胞產生之天然抗體典型地包含分支鏈、雙觸角寡醣，該寡醣一般藉由N-鍵聯連接至該Fc區之CH2域的Asn297。參見例如Wright等人TIBTECH 15:26-32 (1997)。寡醣可包括各種碳水化合物，例如甘露糖、N-乙醯基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖、及唾液酸，以及連接於雙觸角寡醣結構之「主幹」中之GlcNAc的海藻糖。在一些實施例中，可對本發明之抗體中的寡醣進行修飾以便產生具有某些經改良特性之抗體變異體。

在一些情況下，該等方法涉及投與具有缺乏連接(直接地或間接地)至Fc區的海藻糖之碳水化合物結構的HER2 TDB及/或額外HER2抗體變異體。例如，此類抗體中海藻糖的量可為1%至80%、1%至65%、5%至65%、或20%至40%。海藻糖之量藉由計算糖鏈內Asn297處之海藻糖相對於如藉由MALDI-TOF質譜分析所量測的連接於Asn 297之所有醣結構(例如複合、雜交及高甘露糖結構)之總和的平均量來確定，如例如WO 2008/077546中所述。Asn297係指位於Fc區中之約位置297處的天冬醯胺殘基(Fc區殘基之EU編號)；然而，Asn297亦可由於抗體中之微小序列變異而位於位置297上游或下游約± 3個胺基酸處，亦即在位置294與300之間。該等海藻糖化變異體可具有經改良之ADCC功能。參見例如美國專利公開案第US 2003/0157108號(Presta, L.)；第US 2004/0093621號(Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd)。與「去海藻糖化」或「海藻糖缺乏」抗體變異體相關之公開案之實例包括：US 2003/0157108；WO 2000/61739；WO 2001/29246；US 2003/0115614；US 2002/0164328；US 2004/0093621；US 2004/0132140；US 2004/0110704；US 2004/0110282；US 2004/0109865；WO 2003/085119；WO 2003/084570；WO 2005/035586；WO 2005/035778；WO2005/053742；WO2002/031140；Okazaki等人J. Mol. Biol. 336:1239-1249 (2004)；Yamane-Ohnuki等人Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)。能夠產生去海藻糖化抗體之細胞株的實例包括缺乏蛋白海藻糖化之Lec13 CHO細胞(Ripka等人Arch. Biochem. Biophys. 249:533-545 (1986)；美國專利申請案第US 2003/0157108 A1號, Presta, L；及WO2004/056312 A1, Adams等人，尤其在實例11處)，及敲除型細胞株，諸如α-1,6-海藻糖基轉移酶基因FUT8 敲除型CHO細胞(參見例如Yamane-Ohnuki等人Biotech. Bioeng. 87: 614 (2004)；Kanda, Y.等人, Biotechnol. Bioeng ., 94(4):680-688 (2006)；及WO2003/085107)。

鑒於以上實例，在一些情況下，本發明之方法涉及向個體投與HER2 TDB及/或額外HER2抗體變異體(例如，在分次劑量遞增給藥方案之情況下)，該抗體變異體包含非糖基化位點突變。在一些情況下，該非糖基化位點突變減小HER2 TDB及/或額外HER2抗體之效應子功能。在一些情況下，該非糖基化位點突變為取代突變。在一些情況下，該雙特異性抗體包含Fc區中之取代突變，該突變減小效應子功能。在一些情況下，該取代突變在胺基酸殘基N297、L234、L235及/或D265 (EU編號)處。在一些情況下，該取代突變選自由N297G、N297A、L234A、L235A、D265A、及P329G組成之群。在一些情況下，該取代突變在胺基酸殘基N297處。在一較佳實施例中，該取代突變為N297A。

在其他情況下，具有平分寡醣之變異體根據本發明方法加以使用，例如其中連接至該抗體之Fc區的雙觸角寡醣由GlcNAc平分。該等抗體變異體可具有降低之海藻糖化及/或經改良之ADCC功能。此類抗體變異體之實例描述於例如WO 2003/011878 (Jean-Mairet等人)；美國專利第6,602,684號(Umana等人)；及US 2005/0123546 (Umana等人)中。亦提供在連接至Fc區之寡醣中具有至少一個半乳糖殘基之抗體變異體。該等抗體變異體可具有經改良之CDC功能。此類抗體變異體描述於例如WO 1997/30087 (Patel等人)；WO 1998/58964 (Raju, S.)；及WO 1999/22764 (Raju, S.)中。c. Fc 區變異體

在一些情況下，可根據本發明之方法將具有經引入至雙特異性抗體之Fc區中的一或多個胺基酸修飾的HER2 TDB及/或額外HER2抗體變異體(亦即，Fc區變異體(參見例如US 2012/0251531))投與至患有HER2陽性癌症之個體。Fc區變異體可包含在一或多個胺基酸位置處包含胺基酸修飾(例如，取代)之人類Fc區序列(例如，人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc區)。

在一些情況下，Fc區變異體具有一些但不是所有效應子功能，這使其成為其中抗體的活體內半衰期至關重要而某些效應子功能(諸如補體及ADCC)非必需或有害之應用的所需候選物。可進行活體外及/或活體內細胞毒性檢定以確認CDC及/或ADCC活性的降低/消耗。舉例而言，可進行Fc受體(FcR)結合檢定以確保抗體缺乏FcγR結合(因此可能缺乏ADCC活性)，但保留FcRn結合能力。用於介導ADCC之原代細胞NK細胞僅表現Fc(RIII，而單核球表現Fc(RI、Fc(RII、及Fc(RIII。造血細胞上之FcR表現概述於Ravetch及Kinet,Annu. Rev. Immunol. 9:457-492 (1991)第464頁之表3中。評定感興趣之分子之ADCC活性的活體外檢定之非限制性實例描述於美國專利第5,500,362號(參見例如Hellstrom, I.等人Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 83:7059-7063 (1986))及Hellstrom, I等人,Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 82:1499-1502 (1985)；5,821,337 (參見Bruggemann, M.等人,J. Exp. Med. 166:1351-1361 (1987))。替代地，可採用非放射性檢定方法(參見例如流動式細胞量測術之ACTI™非放射性細胞毒性檢定(CellTechnology, Inc. Mountain View, CA)；及CytoTox 96^® 非放射性細胞毒性檢定(Promega, Madison, WI))。適用於該等檢定之效應細胞包括外周血單核細胞(PBMC)及自然殺手(NK)細胞。替代地或另外，感興趣之分子之ADCC活性可例如在動物模型、在諸如Clynes等人Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 95:652-656 (1998)中揭示之動物模型中進行活體內評估。亦可進行C1q結合檢定以確認抗體不能結合C1q且因此缺乏CDC活性。參見例如WO 2006/029879及WO 2005/100402中之C1q及C3c結合ELISA。為了評定補體活化，可進行CDC檢定(參見例如Gazzano-Santoro等人J. Immunol. Methods 202:163 (1996)；Cragg, M.S.等人Blood. 101:1045-1052 (2003)；及Cragg, M.S.及M.J. GlennieBlood. 103:2738-2743 (2004))。亦可使用此項技術中已知之方法(參見例如Petkova, S.B.等人,Int'l. Immunol. 18(12):1759-1769 (2006))進行FcRn結合及活體內清除率/半衰期確定。

具有降低之效應子功能之抗體包括具有Fc區殘基238、265、269、270、297、327及329中的一或多者之取代之彼等抗體(美國專利第6,737,056號及第8,219,149號)。該等Fc突變體包括在胺基酸位置265、269、270、297及327中之二或更多處具有取代之Fc突變體，包括殘基265及297取代為丙胺酸的所謂「DANA」Fc突變體(美國專利第7,332,581號及第8,219,149號)。

在某些情況下，抗體中之野生型人類Fc區之位置329處的脯胺酸經甘胺酸或精胺酸或足夠大以破壞Fc/Fcγ受體界面內之脯胺酸夾心的胺基酸殘基取代，該界面在Fc之脯胺酸329與FcgRIII之色胺酸殘基Trp 87及Trp 110之間形成(Sondermann等人Nature . 406, 267-273 (2000))。在某些實施例中，該雙特異性抗體包含至少一種其他胺基酸取代。在一個實施例中，該其他胺基酸取代為S228P、E233P、L234A、L235A、L235E、N297A、N297D或P331S，且在另一實施例中，該至少一種其他胺基酸取代為人類IgG1Fc區之L234A及L235A或人類IgG4Fc區之S228P及L235E (參見例如US 2012/0251531)，且在另一實施例中，該至少一種其他胺基酸取代為人類IgG1Fc區之L234A及L235A及P329G。

描述了具有經改良或減弱之與FcR之結合的某些抗體變異體。(參見例如美國專利第6,737,056號；WO 2004/056312；及Shields等人,J. Biol. Chem. 9(2): 6591-6604 (2001)。)

在某些情況下，HER2 TDB及/或額外HER2抗體包含具有一或多種改良ADCC之胺基酸取代的Fc區，例如在Fc區之位置298、333及/或334處(殘基之EU編號)的取代。

在一些情況下中，在Fc區中進行引起C1q結合及/或補體依賴性細胞毒性(CDC)改變(亦即改良或減弱)之改變，例如如美國專利第6,194,551號、WO 99/51642、及Idusogie等人, J. Immunol. 164:4178-4184 (2000)中所述。

具有增加之半衰期及經改良之與新生兒Fc受體(FcRn)的結合之抗體描述於US2005/0014934A1 (Hinton等人)中，該新生兒Fc受體(FcRn)負責將母體IgG轉移至胎兒(Guyer等人,J. Immunol. 117:587 (1976)及Kim等人,J. Immunol. 24:249 (1994))。彼等抗體包含其中具有一或多種取代之Fc區，該等取代改良Fc區與FcRn之結合。該等Fc變異體包括在Fc區殘基中之一或多者處具有取代之彼等變異體：238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434，例如Fc區殘基434處的取代(美國專利第7,371,826號)。

亦參見Duncan及Winter,Nature 322:738-40 (1988)；美國專利第5,648,260號；美國專利第5,624,821號；及WO 94/29351，其涉及Fc區變異體之其他實例。d. 半胱胺酸工程改造抗體變異體

在某些實施例中，可需要產生經半胱胺酸工程改造之HER2 TDB及/或額外HER2抗體(例如「硫代MAb」)，其中雙特異性抗體之一或多個殘基經半胱胺酸殘基取代。在具體實施例中，經取代殘基出現於抗體之可及位點處。藉由以半胱胺酸取代彼等殘基，反應性硫醇基由此定位於雙特異性抗體之可及位點且可用於使抗體與其他部分(諸如藥物部分或連接子-藥物部分)結合，以產生免疫結合物。在某些實施例中，以下殘基中之任一者或多者可以半胱胺酸取代：輕鏈之V205 (Kabat編號)；重鏈之A118 (EU編號)；及重鏈Fc區之S400 (EU編號)。可如例如美國專利第7,521,541號中所述産生半胱胺酸工程改造抗體。

因此，特別涵蓋結合於一或多種細胞毒性劑之HER2 TDB及/或額外HER2抗體之免疫結合物，該等細胞毒性劑諸如化學治療劑或藥物、生長抑制劑、毒素(例如蛋白毒素；細菌、真菌、植物或動物來源之酶活性毒素；或其片段)或放射性同位素。

在一些情況下，免疫結合物為其中雙特異性抗體與一或多種藥物結合之抗體-藥物結合物(ADC)，該一或多種藥物包括但不限於美登木素(參見美國專利第5,208,020號、第5,416,064號及歐洲專利EP 0 425 235 B1)；奧瑞他汀(auristatin)，諸如單甲基奧瑞他汀藥物部分DE及DF (MMAE及MMAF) (參見美國專利第5,635,483號及第5,780,588號、及第7,498,298號)；尾海兔素；卡其黴素(calicheamicin)或其衍生物(參見美國專利第5,712,374號、第5,714,586號、第5,739,116號、第5,767,285號、第5,770,701號、第5,770,710號、第5,773,001號、及第5,877,296號；Hinman等人,Cancer Res. 53:3336-3342 (1993)；及Lode等人,Cancer Res. 58:2925-2928 (1998))；蒽環類(anthracycline)，諸如道諾黴素或多柔比星(參見Kratz等人,Current Med. Chem. 13:477-523 (2006)；Jeffrey等人,Bioorganic & Med. Chem. Letters 16:358-362 (2006)；Torgov等人,Bioconj. Chem. 16:717-721 (2005)；Nagy等人,Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:829-834 (2000)；Dubowchik等人,Bioorg. & Med. Chem. Letters 12:1529-1532 (2002)；King等人,J. Med. Chem. 45:4336-4343 (2002)；及美國專利第6,630,579號)；甲胺喋呤；長春地辛；紫杉烷，諸如多西他賽(docetaxel)、紫杉醇(paclitaxel)、拉洛他賽(larotaxel)、替司他賽(tesetaxel)、及奧他賽(ortataxel)；新月毒素；及CC1065。

在一些情況下，免疫結合物包含與酶活性毒素或其片段結合之HER2 TDB及/或額外HER2抗體，該酶活性毒素或其片段包括但不限於白喉A鏈、白喉毒素之非結合活性片段、外毒素A鏈(來自綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa))、蓖麻毒素A鏈、相思子素A鏈、蒴蓮素A鏈、α-帚麯黴素(alpha-sarcin)、油桐(Aleurites fordii)蛋白、石竹毒素蛋白、美洲商陸(Phytolaca americana)蛋白(PAPI、PAPII及PAP-S)、苦瓜(momordica charantia)抑制劑、薑黃素、巴豆毒素、肥皂草(sapaonaria officinalis)抑制劑、白樹毒素(gelonin)、米托格林(mitogellin)、局限麴菌素(restrictocin)、酚黴素(phenomycin)、新黴素(enomycin)及新月毒素。

在另一個實施例中，免疫結合物包含與放射性原子結合以形成放射性結合物的HER2 TDB及/或額外HER2抗體。多種放射性同位素可供用於產生放射性結合物。實例包括At²¹¹ 、I¹³¹ 、I¹²⁵ 、Y⁹⁰ 、Re¹⁸⁶ 、Re¹⁸⁸ 、Sm¹⁵³ 、Bi²¹² 、P³² 、Pb²¹² 、及Lu之放射性同位素。當放射性結合物用於偵測時，其可包含用於閃爍攝影研究之放射性原子，例如tc99m或I123；或用於核磁共振(NMR)成像(亦稱磁共振成像，mri)之自旋標記，諸如碘-123、碘-131、銦-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、釓、錳或鐵。

可以使用如下多種雙功能蛋白偶聯劑來製備HER2 TDB及/或額外HER2抗體與細胞毒性劑之結合物，諸如N-丁二醯亞胺基-3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(SPDP)、丁二醯亞胺基-4-(N-順丁烯二醯亞胺基甲基)環己烷-1-甲酸酯(SMCC)、亞胺基硫雜環戊烷(IT)、亞胺基酯之雙功能衍生物(諸如己二亞胺酸二甲酯二鹽酸鹽)、活性酯(諸如辛二酸二丁二醯亞胺酯)、醛(諸如戊二醛)、雙疊氮基化合物(諸如雙(對疊氮基苯甲醯基)己二胺)、雙重氮鎓衍生物(諸如雙(對重氮鎓苯甲醯基)-乙二胺)、二異氰酸酯(諸如甲苯2,6-二異氰酸酯)及雙活性氟化合物(諸如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。舉例而言，蓖麻毒素免疫毒素可如Vitetta等人,Science 238:1098 (1987)中所描述來製備。碳-14標記之1-異硫氰酸酯基苯甲基-3-甲基二伸乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)為一種用於使放射性核苷酸結合於抗體之示範性螯合劑。參見WO94/11026。連接子可為促進細胞毒性藥物在細胞中釋放之「可裂解連接子」。舉例而言，可使用酸不穩定連接子、肽酶敏感性連接子、光不穩定連接子、二甲基連接子或含有二硫鍵之連接子(Chari等人,Cancer Res. 52:127-131 (1992)；美國專利第5,208,020號)。

本文之免疫結合物或ADC明確涵蓋但不限於用交聯試劑製備之此類結合物，該等交聯試劑包括但不限於BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、磺基-EMCS、磺基-GMBS、磺基-KMUS、磺基-MBS、磺基-SIAB、磺基-SMCC及磺基-SMPB，及SVSB (丁二醯亞胺基-(4-乙烯基碸)苯甲酸酯)，該等交聯試劑可商購(例如購自Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL., U.S.A)。e. 其他抗體衍生物

在一些情況下，HER2 TDB及/或額外HER2抗體可經修飾以含有此項技術中已知且可容易獲得之額外非蛋白部分且根據本文所述之方法投與至個體。適用於使抗體衍生化的部分包括但不限於水溶性聚合物。水溶性聚合物之非限制性實例包括但不限於聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧基甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯啶酮、聚-1, 3-二氧戊環、聚-1,3,6-三噁烷、乙烯/順丁烯二酸酐共聚物、聚胺基酸(均聚物或無規共聚物)及葡聚糖或聚(n-乙烯基吡咯啶酮)聚乙二醇、聚丙二醇均聚物、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙基化多元醇(例如，甘油)、聚乙烯醇及其混合物。聚乙二醇丙醛由於在水中之穩定性而在製造上具有優勢。該聚合物可具有任何分子量，且可爲分支鏈或無分支鏈的。連接至抗體之聚合物的數目可變化，且若連接多於一種聚合物，則其可為相同或不同分子。一般而言，用於衍生化之聚合物的數目及/或類型可基於多種考慮因素確定，該等考慮因素包括但不限於欲改良之抗體之特定特性或功能、抗體衍生物是否將在規定條件下用於療法等。

在一些情況下，提供抗體與可藉由暴露於輻射來選擇性地加熱之非蛋白部分的結合物。在一種情況下，非蛋白部分為碳奈米管(Kam等人,Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102: 11600-11605 (2005))。輻射可具有任何波長，且包括但不限於不損害普通細胞但將非蛋白部分加熱至殺死抗體-非蛋白部分近側之細胞之溫度的波長。給藥

HER2 TDB及額外HER2抗體以與良好醫療實踐一致之方式給藥及投與。本文所提供之治療方案包括本文所述之任何HER2 TDB與額外HER2抗體(例如，非TDB之HER2抗體，例如曲妥珠單抗)之共同治療，其中額外HER2抗體在投與HER2 TDB前(例如，在第一次投與HER2 TDB前且/或在投與任何後續投與HER2 TDB前)投與。

在一些實施例中，HER2抗體(例如，非TDB之HER2抗體，例如曲妥珠單抗)可以約5 mg/kg至約10 mg/kg (例如，5 mg/kg至10 mg/kg或6 mg/kg至8 mg/kg，例如約5 mg/kg、約6 mg/kg、約7 mg/kg、約8 mg/kg、約9 mg/kg、或約10 mg/kg)之劑量投與。在一些實施例中，HER2抗體(例如，非TDB之HER2抗體，例如曲妥珠單抗)係約每三週投與一次(Q3W)。HER2抗體可在至少約30分鐘(例如，30-90分鐘)之時程內輸注(例如，靜脈內)。在一些情況下，例如在第一次投與HER2抗體時，HER2抗體可以在至少約90分鐘之時程內輸注(例如，靜脈內)，且可例如在投與HER2 TDB前的4-24小時之時程內觀測個體之因HER2抗體之不良反應。替代地，HER2抗可與HER2 TDB在同一日(例如，在輸注HER2抗體後約30-120分鐘)投與。在一些實施例中，第一劑量HER2抗體與第一劑量HER2 TDB之間的持續時間對於第一給藥週期而言長於後續給藥週期。舉例而言，第一劑量HER2抗體可以在藉由投與第一劑量HER2 TDB開始第一給藥週期前24小時投與，而後續給藥週期包括與HER2 TDB劑量在同一日(例如，在HER2 TDB劑量前30分鐘至120分鐘)的HER2抗體劑量。

在一些情況下，HER2 TDB (例如，BTRC4017A)以固定劑量投與。舉例而言，HER2 TDB可以0.001 mg至500 mg (例如0.003 mg至250 mg、0.005 mg至200 mg、0.01 mg至150 mg、0.05 mg至120 mg、0.1 mg至100 mg、0.5 mg至80 mg或1.0 mg至50 mg，例如0.001 mg至0.005 mg、0.005 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、150 mg至200 mg、200 mg至250 mg、250 mg至300 mg、300 mg至350 mg、350 mg至400 mg、400 mg至450 mg、或450 mg至500 mg，例如約0.003mg、約0.005 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、約200 mg、或約250 mg，例如0.003 mg、0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.24 mg、0.72 mg、1.08 mg、1.51 mg、2.2 mg、2.3 mg、4.0 mg、4.6 mg、6.6 mg、8.0 mg、9.2 mg、12 mg、13.2 mg、14.8 mg、18.4 mg、19.8mg、26.4 mg、36.8 mg、51.5 mg、52.8 mg、61.3 mg、72.1 mg、105.6 mg、147.8 mg、176 mg、或207 mg)之固定劑量投與。在一些實施例中，HER2 TDB(例如，BTRC4017A)係約每三週投與一次(Q3W)。

本文所提供之方法包括一步分次治療方案。在具體情況下，一步分次治療方案包括第一劑量HER2抗體(例如，曲妥珠單抗)及隨後第一給藥週期(C1)。C1包括第一劑量HER2 TDB (例如，BTRC2017A) (C1D1)及第二劑量HER2 TDB (C1D2)，其中C1D2大於C1D1 (例如，C1D1之至少兩倍，例如，C1D1之約兩倍至五倍，例如，C1D1之約兩倍或約三倍)。第二給藥週期(C2)在C1之後投與，其中C2包括第二劑量HER2抗體(例如，在C1之第1日)及隨後(例如，在第二劑量HER2抗體之後約30-120分鐘)額外劑量HER2 TDB (C2D1)。在此一步分次中，C2D1可等效於C1D2。

在一些情況下，C1D1為0.003 mg至50 mg (例如0.003 mg至50 mg、0.005 mg至20 mg、0.01 mg至10 mg、0.05 mg至8 mg、或0.1 mg至5 mg，例如0.001 mg至0.005 mg、0.005 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、或40 mg至50 mg，例如約0.003 mg、約0.005 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、或約50 mg)。在一些實施例中，C1D1為0.003 mg、0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.12 mg、0.24 mg、0.48 mg、0.72 mg、1.0 mg、2.0 mg、2.2 mg、4.0 mg、6.6 mg、8.0 mg、12 mg、18 mg、27 mg、或40.5 mg。C1D2可為0.009 mg至200 mg (例如0.01 mg至150 mg、0.05 mg至100 mg、0.1 mg至50 mg、0.5 mg至20 mg、或1 mg至10 mg，例如0.009 mg至0.01 mg、0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、或150 mg至200 mg，例如約0.009 mg、約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、或約200 mg)。在一些實施例中，C1D2為0.009 mg、0.027 mg、0.081 mg、0.24 mg、0.4 mg、0.72 mg、0.08 mg、1.6 mg、2.2 mg、2.3 mg、3.2 mg、4.6 mg、6.4 mg、6.6 mg、9.2 mg、12.8 mg、14.8 mg、18.4 mg、19.8 mg、25.6 mg、36.8 mg、38.4、51.5 mg、57.6 mg、72.1 mg、86.4 mg、61.3 mg、或129.6 mg。

在一步分次治療方案中，C1D1及C1D2在C1內之不同日投與。在例如C1為21日的一些實施例中，C1D1在C1第1日投與，且C1D2在C1第8日投與。

本文進一步提高兩步分次治療方案，其在第一給藥週期(C1D3)中包括第三HER2 TDB劑量。C1D3大於C1D2，C1D2大於C1D1。在一些實施例中，C1D1、C1D2、及C1D3累積大於在一步分次的劑量遞增給藥方案之第一給藥週期中HER2 TDB之最高清除劑量。舉例而言，在使用一步分次劑量遞增給藥方案之研究中，在該研究中最高清除劑量經確定在C1中為20 mg，兩步分次治療方案中C1D1、C1D2、及C1D3之總量可大於20 mg (例如，約25 mg)。在此類兩步分次治療方案中，C1D2可為C1D1之劑量的兩倍至十倍(例如，約兩倍、約三倍、約四倍、約五倍、約六倍、約七倍、約八倍、約九倍、或約十倍)。另外或替代地，C1D3可為C1D2之劑量的兩倍至三倍。在一些情況下，C2D1等效於C1D3。

在兩步分次治療方案之具體情況下，C1D1可為0.01 mg至20 mg (例如0.05 mg至15 mg、0.1 mg至10 mg、或0.5 mg至5 mg，例如0.01 mg至0.05 mg、0.05 mg至0.1 mg、0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至15 mg、或15 mg至20 mg，例如約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、或約20 mg)。另外或替代地，C1D2可為0.1 mg至100 mg (例如0.1 mg至80 mg、0.5 mg至50 mg、或1 mg至10 mg，例如0.1 mg至0.5 mg、0.5 mg至1.0 mg、1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、或90 mg至100 mg，例如約0.01 mg、約0.05 mg、約0.1 mg、約0.5 mg、約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、或約100 mg)。因此，C1D3之範圍可為1 mg至400 mg (例如10 mg至300 mg、20 mg至200 mg、或50 mg至100 mg，例如1.0 mg至5 mg、5 mg至10 mg、10 mg至20 mg、20 mg至30 mg、30 mg至40 mg、40 mg至50 mg、50 mg至60 mg、60 mg至70 mg、70 mg至80 mg、80 mg至90 mg、90 mg至100 mg、100 mg至120 mg、120 mg至150 mg、150 mg至200 mg、200至250 mg、250 mg至300 mg、300 mg至350 mg、或350 mg至400 mg，例如約1.0 mg、約2 mg、約3 mg、約4 mg、約5 mg、約6 mg、約7 mg、約8 mg、約9 mg、約10 mg、約11 mg、約12 mg、約13 mg、約14 mg、約15 mg、約16 mg、約17 mg、約18 mg、約19 mg、約20 mg、約21 mg、約22 mg、約23 mg、約24 mg、約25 mg、約30 mg、約35 mg、約40 mg、約45 mg、約50 mg、約55 mg、約60 mg、約65 mg、約70 mg、約75 mg、約80 mg、約85 mg、約90 mg、約95 mg、約100 mg、約150 mg、約200 mg、約250 mg、約300 mg、約350 mg、或約400 mg)。在一些實施例中，C1D3為1.1 mg、2.2 mg、4.4 mg、6.6 mg、8.8 mg、13.2 mg、17.6 mg、26.4 mg、35.2 mg、52.8 mg、70.4 mg、105.6 mg、147.8 mg、158.4 mg、176 mg、207 mg、237.6 mg、或356.4 mg。

在兩步分次治療方案中，C1D1、C1D2、及C1D3在C1內之不同日投與。在例如C1為21日的一些實施例中，C1D1在C1第1日投與，C1D2在C1第8日投與，且C1D3在第15日投與。

在前述治療方案中任一者之一些情況下，第二給藥週期及任何後續給藥週期之持續時間與第一給藥週期相同(例如，7-42日、14-35日、或21-28日，例如，7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42日、或更長時間)。在一些實施例中，C1、C2、C3、及全部後續週期(例如，C4、C5、C6等)各自為約21日。HER2 TDB及HER2抗體二者可在C1之後各週期第1日投與。

療法之持續時間將持續，只要有醫學指示或直到達成所要治療作用(例如，本文所述之彼等)。在某些實施例中，治療持續達1個月、2個月、4個月、6個月、8個月、10個月、1年、2年、3年、4年、5年、或達多至個體一生之時間段。

對於本文所述之所有方法，一或多種HER2抗體以與良好醫療實踐一致之方式調配、給藥、及投與。在此情況下考慮之因素包括所治療之特定病症、所治療之特定哺乳動物、個別患者之臨床病況、病症起因、藥劑遞送位點、投與方法、投與時程及醫學從業者已知之其他因素。一或多種HER2抗體不一定必須但是視情況與一或多種當前用於預防或治療所討論病症之劑一起調配。此類其他劑之有效量取決於存在於調配物中之HER2抗體的量、病症或治療之類型、及上文所論述之其他因素。一或多種HER2抗體可在一系列治療內以合適方式投與至患者。額外治療劑

在本發明所述之任一治療患有HER2陽性癌症之個體的方法的一些情況下，治療方案可包括投與一或多種額外治療劑。

在一種情況下，額外治療劑為皮質類固醇，其可在投與HER2 TDB或額外HER2抗體前(例如，在投與前約1小時)作為預治療投與。皮質類固醇前置用藥(premedication)可包括投與地塞米松或甲基潑尼松龍。另外或替代地，本文所述之治療方案可包括投與對乙醯氨基酚、撲熱息痛、或苯海拉明(使用其預治療)。

在一些情況下，投與IL-6R拮抗劑，諸如托珠單抗(ACTEMRA®/RoACTEMRA®)，例如在需要管理CRS事件之情況下。在具體實施例中，必要時靜脈內投與例如以1 mg/kg至25 mg/kg (例如，5 mg/kg至10 mg/kg，例如約8 mg/kg)之劑量的IL-6R拮抗劑(例如，托珠單抗)。

在一些情況下，本文所述之任何治療方案包括投與PD-1軸結合拮抗劑(例如，PD-L1結合拮抗劑、PD-1結合拮抗劑、或PD-L2結合拮抗劑)。

在一些情況下，PD-L1結合拮抗劑為選自以下之抗PD-L1抗體：MPDL3280A(阿特珠單抗)、YW243.55.S70、MDX-1105、及MEDI4736(德瓦魯單抗)、及MSB0010718C(納武單抗)。抗體YW243.55.S70為描述於PCT公開案第WO 2010/077634號中之抗PD-L1。MDX-1105 (亦稱作BMS-936559)為描述於PCT公開案第WO 2007/005874號中之抗PD-L1抗體。MEDI4736 (德瓦魯單抗)為描述於PCT公開案第WO 2011/066389號及美國公開案第2013/034559號中之抗PD-L1單株抗體。適用於本發明方法之抗PD-L1抗體及其製備方法之實例描述於PCT公開案第WO 2010/077634號、第WO 2007/005874號、及第WO 2011/066389號中，且亦描述於美國專利第8,217,149號及美國公開案第號2013/034559中，該等專利以引用之方式併入本文中。

在一些情況下，PD-1結合拮抗劑為另一種抗PD-1抗體，諸如選自由以下組成之群的抗PD-1抗體：MDX -1106 (納武單抗)、MK-3475 (派姆單抗)、MEDI-0680 (AMP-514)、PDR001、REGN2810、及BGB-108。MDX-1106 (亦稱作MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558、或納武單抗)為描述於PCT公開案第WO 2006/121168號中之抗PD-1抗體。MK-3475(亦稱作派姆單抗或蘭利珠單抗)為描述於PCT公開案第WO 2009/114335號中之抗PD-1抗體。在其他情況下，PD-1結合拮抗劑為免疫黏附素(例如，包含融合至恆定區(例如，免疫球蛋白序列之Fc區)之PD-L1或PD-L2之細胞外或PD-1結合部分的免疫黏附素)。在其他情況下，PD-1結合拮抗劑為AMP-224。AMP-224 (亦稱作B7-DCIg)為描述於PCT公開案第WO 2010/027827號及第WO 2011/066342號中之PD-L2-Fc融合可溶性受體。

在其他情況下，PD-L2結合拮抗劑為抗PD-L2抗體(例如，人類、人源化、或嵌合抗PD-L2抗體)。在一些情況下，PD-L2結合拮抗劑為免疫黏附素。

在另一個實施例中，額外治療劑為另一種化學治療劑及/或抗體-藥物結合物(ADC)。在一個實施例中，HER2 TDB及/或HER2抗體與選自環磷醯胺、多柔比星、長春新鹼、及潑尼松龍(CHOP)之一或多種額外化學治療劑共同投與。在一個實施例中，HER2 TDB及/或HER2抗體與選自抗CD79b抗體藥物結合物(諸如描述於U.S. 8,088,378及/或US 2014/0030280中之任一者中之抗CD79b-MC-vc-PAB-MMAE或抗CD79b抗體藥物結合物，或維汀-珀拉妥珠單抗(polatuzumab vedotin))之ADC共同投與。

在一些情況下，另一療法包括烷化劑。在一種情況下，烷化劑為4-[5-[雙(2-氯乙基)胺基]-1-甲基苯并咪唑-2-基]丁酸及其鹽。在一種情況下，烷化劑為苯達莫司汀(bendamustine)。

在一些情況下，另一療法包含BCL-2抑制劑。在一個實施例中，BCL-2抑制劑為4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基環己-1-烯-1-基]甲基}哌嗪-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氫-2H-哌喃-4-基甲基)胺基]苯基}磺醯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲醯胺及其鹽。在一種情況下，BCL-2抑制劑為維奈托克(venetoclax)(CAS#：1257044-40-8)。

在一些情況下，另一療法包含磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制劑。在一種情況下，PI3K抑制劑抑制δ同功型PI3K (亦即，P110δ)。在一些情況下，PI3K抑制劑為5-氟-3-苯基-2-[(1S)-1-(7H-嘌呤-6-基胺基)丙基]-4(3H)-喹唑啉酮及其鹽。在一些情況下，PI3K抑制劑為艾代拉裡斯(idelalisib) (CAS#：870281-82-6)。在一種情況下，PI3K抑制劑抑制PI3K之α及δ同功型。在一些情況下，PI3K抑制劑為2-{3-[2-(1-異丙基-3-甲基-1H-1,2-4-三唑-5-基)-5,6-二氫苯并并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮雜環庚烷-9-基]-1H-吡唑-1-基}-2-甲基丙醯胺及其鹽。

在本發明之另一態樣中，另一療法包含布魯頓酪胺酸激酶(BTK)抑制劑。在一種情況下，BTK抑制劑為1-[(3R)-3-[4-胺基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮及其鹽。在一種情況下，BTK抑制劑為依魯替尼(CAS#：936563-96-1)。

在一些情況下，另一療法包含沙立度胺或其衍生物。在一種情況下，沙立度胺或其衍生物為(RS)-3-(4-胺基-1-側氧基-1,3-二氫-2H-異吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮及其鹽。在一種情況下，沙立度胺或其衍生物為來那度胺(CAS#: 191732-72-6)。醫藥組成物及調配物

上文所述之HER2 TDB及/或HER2抗體之醫藥組成物及調配物可藉由將具有所要純度之此等劑與一或多種視情況選用之醫藥學上可接受之載劑混合來製備(Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A.編 (1980))，其呈凍乾調配物或水溶液形式。醫藥學上可接受之載劑通常在所用劑量及濃度下對接受者無毒，且包括但不限於：緩衝液，諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽、及其他有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(諸如十八烷基二甲基苯甲基氯化銨；氯化六烴季銨；苯紮氯銨；苄索氯銨；苯酚、丁基或苯甲基醇；對羥基苯甲酸烷基酯，諸如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；及間-甲酚)；低分子量(小於約10個殘基)多肽；蛋白，諸如血清白蛋白、明膠、或免疫球蛋白；親水性聚合物，諸如聚乙烯吡咯啶酮；胺基酸，諸如甘胺酸、麩醯胺、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸、或離胺酸；單醣、二醣、及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖、或糊精；螯合劑，諸如EDTA；糖，諸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖、或山梨糖醇；成鹽相對離子，諸如鈉；金屬錯合物(例如，Zn-蛋白錯合物)；及/或非離子性界面活性劑，諸如聚乙二醇(PEG)。本文之示範性醫藥學上可接受之載劑進一步包括間質藥物分散劑，諸如可溶性中性活性玻尿酸酶醣蛋白(sHASEGP)，例如人類可溶性PH-20玻尿酸酶醣蛋白，諸如rHuPH20 (HYLENEX^® ，Baxter International, Inc.)。某些示範性sHASEGP (包括rHuPH20)及使用方法描述於美國專利公開案第2005/0260186號及第2006/0104968號中。在一個態樣中，sHASEGP與一或多種額外醣胺聚糖酶(諸如軟骨素酶)組合。

示範性凍乾抗體調配物描述於美國專利第6,267,958號中。水性抗體調配物包括美國專利第6,171,586號及WO2006/044908中所述的調配物，後述調配物包括組胺酸-乙酸鹽緩衝液。

本文之調配物亦可含有多於一種爲所治療之特定適應症所必需之活性成分，較佳爲具有不會對彼此産生不利影響之補充活性的活性成分。舉例而言，可能需要進一步提供額外治療劑(例如，化學治療劑、細胞毒性劑、生長抑制劑、及/或抗激素劑，諸如本文在以上列舉之彼等)。該等活性成分合適地以有效用於預期目的之量組合存在。

活性成分可截留於微膠囊中，例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合法所製備之微膠囊，例如分別為羥甲基纖維素或明膠微膠囊及聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊；截留於膠態藥物遞送系統(例如脂質體、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊)中或巨乳液中。該等技術揭示於Remington's Pharmaceutical Sciences 第16版, Osol, A.編 (1980)中。

可製備持續釋放製劑。持續釋放製劑之適合實例包括含有抗體之固體疏水性聚合物之半透性基質，該等基質呈成形物品例如膜或微膠囊之形式。

欲用於活體內投與之調配物一般為無菌的。無菌性可容易地藉由例如經由無菌過濾膜過濾來實現。III. 製造物品

本發明進一步提供含有適用於治療或預防HER2陽性癌症之材料的製造物品。該製造物品包含容器及在該容器上或與該容器結合之標籤或包裝插頁。適合容器包括例如瓶、小瓶、注射器、IV溶液袋等。容器可由多種材料諸如玻璃或塑膠形成。容器容納單獨組成物或與有效治療或預防病狀之另一種組成物組合的組成物，且可具有無菌接取口(例如容器可為具有可由皮下注射針刺穿之塞子的靜脈內溶液袋或小瓶)。組成物中之至少一種活性劑為本文所述之HER TDB。標籤或包裝插頁指示該組成物用於治療所選HER2陽性癌症(例如，HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌)且進一步包括與本文所述之給藥方案中至少一者相關之信息。此外，製造物品可包括(a)其中含有組成物之第一容器，其中該組成物包含HER2 TDB；及(b)其中含有組成物之第二容器，其中該組成物包含另一種HER抗體(例如，多價(例如，二價) HER2結合抗體，例如，曲妥珠單抗)。替代地或另外，該製造物品可進一步包括一或多個額外容器，其包含(a)額外治療劑及/或(b)醫藥學上可接受之緩衝液，諸如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸鹽緩衝鹽水、林格氏溶液(Ringer's solution)及右旋糖溶液。容器可進一步包括自商業及使用者觀點來看合乎需要之其他材料，包括其他緩衝液、稀釋劑、過濾器、針及注射器。IV. 實例

以下為本發明之方法的實例。應理解，鑒於上文所提供之一般描述，可實施各種其他實施例。實例 1.BTRC4017A 及曲妥珠單抗共同治療之臨床前功效

結合HER2及CD3之全長IgG1 TDB，BTRC4017A使用「孔中結」工程改造來生成(參見例如美國專利第5,731,168號)，且具有包括4D5 HER2結合位點之抗HER2臂及包括40G5c CD3結合位點之抗CD3臂(參見例如WO 2015/095392)。BTRC4017A之4D5 HER2-結合位點來源於曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)且結合HER2之域IV中之相同抗原決定基，如圖1所示。曲妥珠單抗與BTRC4017A競爭結合至HER2且可因此干擾BTRC4017A活性。 BTRC4017A與曲妥珠單抗(Herceptin)之組合的活體外藥理學

曲妥珠單抗對BTRC4017A活性之影響在活體外及活體內使用表示HER2陽性癌症之HER2擴增KPL4細胞株測試。該組合之影響亦使用表現類似於正常人類組織HER2水準的低水準HER2之HT55細胞株建模。HT55腫瘤用於在表現低水準HER2之正常細胞/組織上建模中靶活性，而KPL4腫瘤細胞表示HER2過表現腫瘤。MCF7為HER2 IHC0乳癌細胞株，其作為陰性對照包括在內。細胞株模型中之HER2表現水準展示於圖2中。

為了評價曲妥珠單抗對BTRC4017A之活體外活性之作用，在230 µg/mL及60 µg/mL曲妥珠單抗存在下進行劑量-反應實驗。該等曲妥珠單抗濃度表示在推薦劑量下(8或6 mg/kg，每3週[Q3W])在乳癌中之臨床最大血清濃度(C_max )及最小血清濃度(C_min )。經純化人類CD8⁺ T細胞用作效應子以使藉由曲妥珠單抗經由細胞介導之ADCC進行之靶標細胞殺滅最小化。曲妥珠單抗在兩種細胞株中抑制BTRC4017A之活性(圖3A及圖3B)，且在曲妥珠單抗存在下需要600倍至2000倍更多BTRC4017A來達成KPL4 (圖3A)殺滅之50%有效濃度。當靶向HT55細胞時曲妥珠單抗對BTRC4017A活性之抑制作用處於類似範圍內，但在高濃度下，BTRC4017A在兩種細胞株中能夠克服曲妥珠單抗之抑制作用。 BTRC4017A與曲妥珠單抗-LALAPG之組合的活體內藥理學

Fc受體介導之效應子功能在曲妥珠單抗之活體內活性中起主要作用且可干擾解決曲妥珠單抗對BTRC4017A活性之抑制作用的活體內實驗。因此藉由引入一組減輕人類IgG₁ 之效應子功能之胺基酸取代來修飾曲妥珠單抗之Fc區以生成曲妥珠單抗-LALAPG變異體。LALAPG突變為L234A、L235A、及P329G。由於在曲妥珠單抗-LALAPG變異體中未修飾曲妥珠單抗中之抗HER2 Fab，所以修飾不會改變HER2結合，如使用流動式細胞量測術HER2結合檢定(圖4)所確認。

為了測試曲妥珠單抗/LALAPG對BTRC4017A活性之作用，使用基於高度免疫受損NOD scid γ (NSG)小鼠之雙重腫瘤小鼠模型。藉由腹膜內注射人類外周單核細胞(PBMC)來向NSG小鼠補充人類T細胞。在各小鼠中，在一個側腹上移植KPL4腫瘤，且在相反的側腹上移植HT55腫瘤。KPL4為HER2擴增細胞株且表示HER2過表現腫瘤，而HT55腫瘤用於在表現低水準HER2 (圖2)之正常細胞/組織上建模中靶/非腫瘤活性。

如圖5A所示，在≥ 0.05 mg/kg下之單一劑量BTRC4017A誘導KPL4腫瘤消退。需要大十倍劑量之BTRC4017A來誘導HT55腫瘤消退(圖 5B)，這指示基於HER2在HER2陽性腫瘤中之高表現，治療指數可有所增加。

在共同治療組中，在投與BTRC4017A前四小時投與5.0 mg/kg曲妥珠單抗-LALAPG。曲妥珠單抗-LALAPG在所測試之任何BTRC4017A劑量水準下對BTRC4017A在靶向KPL4腫瘤中之功效無影響。相比之下，曲妥珠單抗-LALAPG預治療在HT55腫瘤中在所有BTRC4017A劑量水準下均消除BTRC4017A活性。該等資料表明曲妥珠單抗-LALAPG預治療對BTRC4017A活性之影響在表現不同水準之HER2的腫瘤之間顯著不同。具體而言，活性在KPL4腫瘤(HER2擴增)中所有保留，但在表現與正常人類組織類似水準之HER2的HT55腫瘤中經消除。

該等資料表明在BTRC4017A投與前使用曲妥珠單抗之治療可以減小BTRC4017A在表現低水準HER2之正常組織上之中靶/非腫瘤毒性之風險，同時在HER2過表現腫瘤中保持抗腫瘤活性。在活體內小鼠功效研究中曲妥珠單抗與BTRC4017A之共同投與不會損壞BTRC4017A在HER2陽性腫瘤上之抗腫瘤活性，但完全消除了低HER2表現腫瘤上之BTRC4017A抗腫瘤活性，該等低HER2表現腫瘤代表正常組織上之HER2表現水準。不希望受到理論約束，曲妥珠單抗可在低表現HER2正常組織中使HER2飽和(從而預防BTRC4017A結合)，而在表現更高密度HER2之腫瘤中不能使HER2飽和。因此，在各劑量BTRC4017A之前共同投與曲妥珠單抗可減輕BTRC4017A在HER2表現正常組織中之非腫瘤/中靶毒性，同時不會顯著影響BTRC4017A在患有HER2陽性腫瘤之患者中的抗腫瘤活性。以這種方式，曲妥珠單抗之共同投與可增加BTRC4017A之治療指數。實例 2. 用於使用 BTRC4017A 及曲妥珠單抗治療 HER2 陽性癌症之分次劑量遞增給藥方案

為了減輕潛在細胞介素驅動之毒性，在分次給藥方案中在第1週期(C1)中投與BTRC4017A，其中第一劑量小於第二劑量。在兩步分次給藥方案中，C1中之第二劑量小於第三劑量。第2週期及任何必要後續週期涉及單次投與等效於C1中之最高劑量BTRC4017A的BTRC4017A劑量。

為了適當區分可能與BTRC4017A相對於曲妥珠單抗相關聯之任何輸注相關反應(IRR)，在C1之第-1日投與曲妥珠單抗。在該週期第1日投與第2週期(C2)及後續週期的全部後續曲妥珠單抗劑量，之後投與BTRC4017A。曲妥珠單抗投與程序之概述提供在下表4中：表 4 ：曲妥珠單抗輸注時間及觀測時間段

在C1第1日前最後一次曲妥珠單抗劑量之時間	C1第-1日曲妥珠單抗劑量/輸注時間	C1第1日在BTRC4017A給藥前曲妥珠單抗輸注後之觀測時間	C2第1日及之後曲妥珠單抗劑量/輸注時間	C2第1日及之後在BTRC4017A前曲妥珠單抗輸注後之觀測時間
＞ 4週	8 mg/kg經 90分鐘	4-24小時	6 mg/kg經 30-90分鐘	0.5-2小時
3週 (+ 7日)	6 mg/kg經 30-60分鐘	0.5-2小時	6 mg/kg經 30-90分鐘	0.5-2小時

C1第-1日=第1週期第-1日； C1第1日=第1週期第1日； C2第1日=第2週期第1日

在第一個21日週期期間且在多至17個週期之各後續週期的第一日經由分次給藥投與BTRC4017A。BTRC4017A投與係藉由獨立於體重之平坦(固定)給藥、藉由在適合時使用標準醫學注射器及注射泵或靜脈袋靜脈內輸注來進行。藉由經由靜脈內輸注組之注射泵或具有由該劑量所確定之最終BTRC4017A體積的靜脈袋遞送藥物產品。對於初始低劑量，BTRC4017A將僅經由外周導管投與。特定BTRC4017A劑量確定適當給藥濃度、體積、輸注時間，且亦指示欲使用之特定投與裝置(例如，外周導管對注射泵對IV袋)。

在C1之第1日開始，分別地，對於一步分次方案及兩步分次方案，個體在第1日及第8日或在第1日、第8日、及第15日接受遞增劑量的BTRC4017A。在第2週期及後續週期中，BTRC4017A僅在各21日週期之第1日作為單一劑量給予。出於邏輯/排程原因，可自排程日期± 2日(亦即，各劑量之間至少19日)給予BTRC4017A。

在第1週期中投與各BTRC4017A劑量之前一小時投與由地塞米松(20 mg靜脈內)或甲基潑尼松龍(80 mg靜脈內)組成之皮質類固醇前置用藥。另外，除非禁忌，否則在投與BTRC4017A之前根據標準機構實踐投與使用口服乙醯胺酚(acetaminophen或paracetamol)(例如，500-1000 mg)及/或25-50 mg苯海拉明之前置用藥。必要時可向患者靜脈內投與8 mg/kg托珠單抗。

在劑量限制性毒性(DLT)、不可接受之毒性、或疾病進展不存在下，每21日向得到臨床益處之患者提供使用BTRC4017A作為單一劑或其與曲妥珠單抗之組合的持續治療達最大17個週期，直至出現進展或不可耐受之毒性(無論哪種首先發生)。

使用實體腫瘤反應評估標準(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors；RECIST v1.1)評估疾病狀態。患者在篩選時、在直至治療中斷之研究期間、及在研究終止時經歷腫瘤評估。免疫改良RECIST標準亦用於表徵與癌症免疫療法相關之反應模式。免疫改良RECIST標準可補充標準RECIST v1.1標準以允許整體評估對於患者的益處及風險。一般而言，在BTRC4017A及雙特異性抗體之情況下可觀測到假進展。這樣，儘管存在如藉由標準RECIST v1.1標準所定義之進展性疾病的放射攝影證據，但得到臨床益處之患者可繼續進行研究治療。

不良事件係根據美國癌症研究所不良事件通用術語標準第5.0版(NCI CTCAE v5.0)來分級，其中例外情況為細胞介素釋放症候群(CRS)，其係根據改良細胞介素釋放症候群分級體系來分級(參見以上表1及2)。其他實施例

雖然前述發明出於理解清楚之目的經由說明及實例較詳細地描述，但該等描述及實例不應被視為限制本發明之範圍。本文所引用之所有專利及科學文獻的揭露內容明確地以引用之方式整體倂入。

該申請文件包含以彩色執行的至少一個附圖。具有彩色附圖之本專利或專利申請之副本將在請求並支付必要費用之後由專利局提供。

圖1為藉由HER2結合域4D5 (曲妥珠單抗)、2C4 (培妥珠單抗)、及7C2結合之HER2細胞外域(ECD)的結晶結構之示意圖。

圖2為展示MCF7細胞、HT55細胞、及KPL4細胞對HER2蛋白之相對表現的免疫墨點。

圖3A為展示隨著BTRC4017A濃度(ng/mL)變化的單獨BTRC4017A (紅色圓圈)；BTRC4017A + 230 µg/mL曲妥珠單抗(藍色正方形)；及BTRC4017A + 60 µg/mL曲妥珠單抗(棕色三角形)對KPL4細胞之相對殺滅的曲線圖。

圖3B為展示隨著BTRC4017A濃度(ng/mL)變化的單獨BTRC4017A (紅色圓圈)；BTRC4017A + 230 µg/mL曲妥珠單抗(藍色正方形)；及BTRC4017A + 60 µg/mL曲妥珠單抗(棕色三角形)對HT55細胞之相對殺滅的曲線圖。N.D. =未確定。

圖4為展示隨著濃度變化的曲妥珠單抗(紅色圓圈)及曲妥珠單抗-LALAPG (藍色正方形)與HER2表現SKBR3細胞之結合的曲線圖。使用山羊抗人類-FITC二級抗體偵測結合，該二級抗體之存在藉由使用流式細胞術之平均螢光強度(MFI)來量化。

圖5A為展示在小鼠模型中在不同治療時程中的KPL4腫瘤體積之網格圖。頂部行展示對照治療之作用；左側圖展示回應於媒劑投與之腫瘤生長；中間圖展示回應於無外周血單核細胞(PBMC)之曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之腫瘤生長；且右側圖展示回應於有PBMC之曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之腫瘤生長。中間行及底部行分別展示在使用單獨BTRC4017A及其與曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之組合的治療時程中的腫瘤生長。在中間行及底部行中，左側圖展示回應於0.05 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長；中間圖展示回應於0.5 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長；且右側圖展示回應於5.0 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長。粗體實線表示各組之經擬合腫瘤體積。虛線表示媒劑對照組之經擬合腫瘤體積。灰色線表示個別動物。

圖5B為展示在小鼠模型中在不同治療時程中的HT55腫瘤體積之網格圖。頂部行展示對照治療之作用；左側圖展示回應於媒劑投與之腫瘤生長；中間圖展示回應於無外周血單核細胞(PBMC)之曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之腫瘤生長；且右側圖展示回應於有PBMC之曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之腫瘤生長。中間行及底部行分別展示在使用單獨BTRC4017A及其與曲妥珠單抗(HERCEPTIN®)之組合的治療時程中的腫瘤生長。在中間行及底部行中，左側圖展示回應於0.05 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長；中間圖展示回應於0.5 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長；且右側圖展示回應於5.0 mg/kg BTRC4017A之腫瘤生長。粗體實線表示各組之經擬合腫瘤體積。虛線表示媒劑對照組之經擬合腫瘤體積。灰色線表示個別動物。

Claims

一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體及HER2 T細胞依賴性雙特異性抗體(TDB)之治療方案，該HER2 TDB包含抗HER2臂及抗CD3臂，其中該HER2抗體及該HER2 TDB二者結合HER2之域IV，且其中與在該HER2抗體不存在下使用該HER2 TDB之治療相比，該治療方案導致該HER2 TDB之治療指數增加。
如請求項1之方法，其中與在該HER2抗體不存在下使用該HER2 TDB之治療相比，該治療指數增加與經歷中靶/非腫瘤作用之可能性減小相關聯。
如請求項2之方法，其中該中靶/非腫瘤作用為肺部毒性症狀。
如請求項3之方法，其中該肺部毒性症狀選自由以下組成之群：間質性肺病、急性呼吸窘迫症候群、呼吸困難、咳嗽、疲乏、及肺部浸潤。
如請求項2之方法，其中該中靶/非腫瘤作用選自由以下組成之群：肝酶水準升高、口腔乾燥、乾眼症、黏膜炎、食道炎、或尿路症狀。
如請求項1至5中任一項之方法，其中與在該HER2抗體不存在下使用該HER2 TDB之治療相比，該治療指數增加與經歷免疫原性副作用之可能性減小相關聯。
如請求項6之方法，其中該免疫原性副作用選自由以下組成之群：抗藥物抗體水準升高、輸注/投與相關反應(ARR)、心功能障礙、肺部反應、及細胞介素釋放症候群。
如請求項1至7中任一項之方法，其中該HER2 TDB及該HER2抗體競爭性結合至HER2之域IV。
如請求項1至8中任一項之方法，其中該HER2抗體包含： (i) 互補決定區(CDR)-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1； (ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2； (iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3； (iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4； (v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及 (vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:6。
如請求項1至9中任一項之方法，其中該HER2抗體包含與胺基酸序列SEQ ID NO:7具有至少95%序列一致性之可變重鏈域(V_H )及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:8具有至少95%序列一致性之可變輕鏈域(V_L )。
如請求項10之方法，其中該V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7且/或該V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:8。
如請求項1至11中任一項之方法，其中該HER2抗體為單特異性抗體。
如請求項1至12中任一項之方法，其中該HER2抗體為包含Fc區之全長抗體。
如請求項1至13中任一項之方法，其中該HER2抗體為曲妥珠單抗。
如請求項1至13中任一項之方法，其中該HER2抗體為Fc修飾之曲妥珠單抗變異體。
如請求項15之方法，其中該Fc修飾之曲妥珠單抗變異體包含減小效應子功能之一或多個胺基酸修飾。
如請求項16之方法，其中該一或多個胺基酸修飾為取代突變。
如請求項17之方法，其中該取代突變係在胺基酸殘基L234、L235、及/或P329(EU編號)處。
如請求項18之方法，其中該一或多個胺基酸修飾包含取代突變L234A、L235A、及P329G (LALAPG)。
如請求項1至19中任一項之方法，其中該HER2 TDB之該抗HER2臂包含有包含以下之HER2結合域： (i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1； (ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2； (iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3； (iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4； (v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及 (vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:6。
如請求項20之方法，其中該HER2結合域包含與胺基酸序列SEQ ID NO:7具有至少95%序列一致性之V_H 及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:8具有至少95%序列一致性之V_L 。
如請求項21之方法，其中該HER2結合域之該V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7且/或該HER2結合域之該V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:8。
如請求項1至22中任一項之方法，其中該HER2 TDB之該抗CD3臂包含有包含以下之CD3結合域： (i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 9； (ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 10； (iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 11； (iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 12； (v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 13；及 (vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO:14。
如請求項23之方法，其中該CD3結合域包含與胺基酸序列SEQ ID NO:15具有至少95%序列一致性之V_H 及/或與胺基酸序列SEQ ID NO:16具有至少95%序列一致性之可變V_L 。
如請求項24之方法，其中該CD3結合域之該V_H 包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15且/或該CD3結合域之該V_L 包含胺基酸序列SEQ ID NO:16。
如請求項25之方法，其中(i)該HER2 TDB之該抗HER2臂包含HER2結合域，其包含有(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 7之V_H 及(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:8之V_L ，且(ii)該HER2 TDB之該抗CD3臂包含CD3結合域，其包含有(a)包含胺基酸序列SEQ ID NO: 15之V_H 及(b)包含胺基酸序列SEQ ID NO:16之V_L 。
如請求項1至26中任一項之方法，其中該HER2 TDB為包含經修飾Fc區之全長抗體。
如請求項27之方法，其中該經修飾Fc區包含減小該HER2 TDB之效應子功能之一或多個取代突變。
如請求項28之方法，其中該一或多個取代突變包含在胺基酸殘基L234、L235、及/或D265(EU編號)處之突變。
如請求項29之方法，其中該一個或多個取代突變為L234A、L235A、及D265A。
如請求項28之方法，其中該一或多個取代突變包含非糖基化(aglycosylation)位點突變。
如請求項31之方法，其中該非糖基化位點突變係在胺基酸殘基N297 (EU編號)處。
如請求項31之方法，其中該非糖基化位點突變為N297G。
如請求項31之方法，其中該非糖基化位點突變為N297A。
如請求項27至33中任一項之方法，其中該經修飾Fc區包含N297G、L234A、L235A、及D265A取代突變。
如請求項1至35中任一項之方法，其中該HER2 TDB包含一或多個重鏈恆定域，其中該一或多個重鏈恆定域選自第一CH1 (CH1 ₁ )域、第一CH2 (CH2 ₁ )域、第一CH3 (CH3 ₁ )域、第二CH1 (CH1 ₂ )域、第二CH2 (CH2 ₂ )域、及第二CH3 (CH3 ₂ )域。
如請求項36之方法，其中該一或多個重鏈恆定域中之至少一者與另一個重鏈恆定域配對，其中： (i) 該CH3 ₁ 域及該CH3 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中該CH3 ₁ 域中之該突出或空穴可分別定位在該CH3 ₂ 域中之該空穴或突出中；或 (ii) 該CH2 ₁ 域及該CH2 ₂ 域各自包含突出或空穴，且其中該CH2 ₁ 域中之該突出或空穴可分別定位在該CH2 ₂ 域中之該空穴或突出中。
一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體及HER2 TDB之治療方案，其中(a)該HER2抗體為曲妥珠單抗或Fc修飾之曲妥珠單抗變異體，且(b)該HER2 TDB包含抗HER2臂及抗CD3臂，其中該抗HER2臂包含有包含以下之HER2結合域： (i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 1； (ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 2； (iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 3； (iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 4； (v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 5；及 (vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 6；且其中該抗CD3臂包含有包含以下之CD3結合域： (i) CDR-H1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 9； (ii) CDR-H2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 10； (iii) CDR-H3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 11； (iv) CDR-L1，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 12； (v) CDR-L2，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 13；及 (vi) CDR-L3，其包含胺基酸序列SEQ ID NO: 14；其中與在該HER2抗體不存在下使用該HER2 TDB之治療相比，該治療方案導致該HER2 TDB之治療指數增加。
如請求項1至38中任一項之方法，其中該HER2抗體在投與該HER2 TDB之前投與。
如請求項1至39中任一項之方法，其中該HER2抗體係以5 mg/kg至10 mg/kg之劑量投與。
如請求項1至40中任一項之方法，其中該HER2抗體係約每三週投與一次。
如請求項1至42中任一項之方法，其中該HER2 TDB係以0.001 mg至500 mg之固定劑量投與。
如請求項1至42中任一項之方法，其中該HER2 TDB係約每三週投與一次。
如請求項1至43中任一項之方法，其中該治療方案包含： (a) 第一劑量該HER2抗體； (b) 在該第一劑量該HER2抗體之後的第一給藥週期(C1)，該C1包含第一劑量該HER2 TDB (C1D1)及第二劑量該HER2 TDB (C1D2)，其中該C1D2大於該C1D1； (c) 在該C1之後的第二給藥週期(C2)，該C2包含： (i) 第二劑量該HER2抗體；及 (ii) 在該第二劑量該HER2抗體之後的額外劑量該HER2 TDB (C2D1)，其中該C2D1等效於該C1之最高劑量該HER2 TDB。
一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2抗體及HER2 TDB之治療方案，其中該HER2 TDB包含抗HER2臂及抗CD3臂，其中該HER2抗體及該HER2 TDB二者結合HER2之域IV，其中該治療方案包含： (a) 第一劑量該HER2抗體； (b) 在該第一劑量該HER2抗體之後的第一給藥週期(C1)，該C1包含第一劑量該HER2 TDB (C1D1)及第二劑量該HER2 TDB (C1D2)，其中該C1D2大於該C1D1； (c) 在該C1之後的第二給藥週期(C2)，該C2包含： (i) 第二劑量該HER2抗體；及 (ii) 在該第二劑量該HER2抗體之後的額外劑量該HER2 TDB (C2D1)，其中該C2D1等效於該C1之最高劑量該HER2 TDB。
如請求項44或45之方法，其中該第一劑量該HER2抗體在該C1D1之前一日投與，且其中在該第一劑量該HER2抗體與該C1D1之間監測該個體達30分鐘至24小時之時間段。
如請求項44至46中任一項之方法，其中該HER2抗體之該第一劑量為5 mg/kg至10 mg/kg。
如請求項47之方法，其中該HER2抗體之該第一劑量為6 mg/kg或8 mg/kg。
如請求項44至48中任一項之方法，其中該HER2抗體之該第二劑量為5至10 mg/kg。
如請求項49之方法，其中該HER2抗體之該第二劑量為6 mg/kg。
如請求項44至50中任一項之方法，其中該第一劑量及/或該第二劑量之該HER2抗體藉由在至少30分鐘之時間段內輸注來投與。
如請求項44至51中任一項之方法，其中該第二劑量該HER2抗體與該C2D1在同一日投與。
如請求項44至52中任一項之方法，其中該C1D2為該C1D1之劑量的至少兩倍。
如請求項53之方法，其中該C1D2為該C1D1之劑量的至少三倍。
如請求項44至54中任一項之方法，其中該C1D1為0.003 mg至50 mg。
如請求項44至55中任一項之方法，其中該C1D2為0.009 mg至200 mg。
如請求項44至56中任一項之方法，其中該C2D1及該C1D2為等效的。
如請求項44至56中任一項之方法，其中該C1進一步包含第三劑量該HER2 TDB (C1D3)，其中該C1D3大於該C1D2。
如請求項58之方法，其中該C1D1、該C1D2、及該C1D3累積大於在一步分次的劑量遞增給藥方案之第一給藥週期中該HER2 TDB之最高清除劑量。
如請求項59之方法，其中該最高清除劑量在約0.01 mg與約30 mg之間。
如請求項58至60中任一項之方法，其中該C1D2為該C1D1之劑量的兩倍至十倍。
如請求項58至61中任一項之方法，其中該C1D3為該C1D2之劑量的兩倍至三倍。
如請求項58至62中任一項之方法，其中該C2D1及該C1D3為等效的。
如請求項58至63中任一項之方法，其中該C1D1為0.01 mg至20 mg。
如請求項58至64中任一項之方法，其中該C1D2為0.1 mg至100 mg。
如請求項58至65中任一項之方法，其中該C1D3為1 mg至200 mg。
如請求項58至66中任一項之方法，其中該方法包含分別在該C1之約第1日、第8日、及第15日向該個體投與該C1D1、該C1D2、及該C1D3。
如請求項44至67中任一項之方法，其中該C1之長度為21日。
如請求項44至68中任一項之方法，其中該C2之長度為21日。
如請求項44至69中任一項之方法，其中該方法包含在該C2之第1日向該個體投與該C2D1。
如請求項44至70中任一項之方法，其中該治療方案包含一或多個額外給藥週期。
如請求項70之方法，其中該治療方案包含多至15個額外給藥週期。
如請求項71或72之方法，其中該一或多個額外給藥週期中之各者之長度為21日。
如請求項71至73中任一項之方法，其中該一或多個額外給藥週期中之各者包含單一劑量該HER2抗體及單一劑量該HER2 TDB。
如請求項71至74中任一項之方法，其中該方法包含在該一或多個額外給藥週期中之各者的第1日向該個體投與該HER2抗體及該HER2 TDB。
如請求項75之方法，其中該HER2抗體在該一或多個額外給藥週期中之各者的第1日在該HER2 TDB之前投與。
一種在有需要之個體中治療HER2陽性癌症或延遲其進展的方法，該方法包含向該個體投與包含HER2 TDB之治療方案，其中該治療方案包含： (a) 包含第一劑量該HER2 TDB (C1D1)及第二劑量該HER2 TDB (C1D2)之第一週期(C1)，其中該C1D2大於該C1D1；及 (b) 包含額外劑量該HER2 TDB (C2D1)之第二週期(C2)，其中該C2D1等效於該C1之最高劑量該HER2 TDB。
如請求項77之方法，其中該C1D2為該C1D1之劑量的至少兩倍。
如請求項78之方法，其中該C1D2為該C1D1之劑量的至少三倍。
如請求項77至79中任一項之方法，其中該C1D1為0.003 mg至約10 mg。
如請求項77至80中任一項之方法，其中該C1D2為0.009至約20 mg。
如請求項77至81中任一項之方法，其中該C2D1及該C1D2為等效的。
如請求項77至81中任一項之方法，其中該C1進一步包含第三劑量該HER2 TDB (C1D3)，其大於該C1D2。
如請求項83之方法，其中該C1D1、該C1D2、及該C1D3累積大於在一步分次的劑量遞增給藥方案之第一給藥週期中該HER2 TDB之最高清除劑量。
如請求項84之方法，其中該最高清除劑量在約0.01 mg與約30 mg之間。
如請求項83至85中任一項之方法，其中該C1D2為該C1D1之該劑量的兩倍至十倍。
如請求項83至86中任一項之方法，其中該C1D3為該C1D2之劑量的兩倍至三倍。
如請求項83至87中任一項之方法，其中該C2D1及該C1D3為等效的。
如請求項83至88中任一項之方法，其中該C1D1為0.01 mg至20 mg。
如請求項83至89中任一項之方法，其中該C1D2為0.1 mg至100 mg。
如請求項83至90中任一項之方法，其中該C1D3為1 mg至200 mg。
如請求項83至91中任一項之方法，其中該方法包含分別在該C1之約第1日、第8日、及第15日向該個體投與該C1D1、該C1D2、及該C1D3。
如請求項77至92中任一項之方法，其中該C1之長度為21日。
如請求項77至93中任一項之方法，其中該C2之長度為21日。
如請求項77至94中任一項之方法，其中該方法包含在該C2之第1日向該個體投與該C2D1。
如請求項77至95中任一項之方法，其中該治療方案包含一或多個額外給藥週期。
如請求項96之方法，其中該治療方案包含多至15個額外給藥週期。
如請求項96或97之方法，其中該一或多個額外給藥週期中之各者之長度為21日。
如請求項96至98中任一項之方法，其中該一或多個額外給藥週期中之各者包含單一劑量該HER2 TDB。
如請求項96至99中任一項之方法，其中該方法包含在該一或多個額外給藥週期中之各者的第1日向該個體投與該HER2 TDB。
如請求項45至100中任一項之方法，其中與對照治療方案相比，該治療方案導致該HER2 TDB之治療指數增加。
如請求項1至101中任一項之方法，其中該HER2抗體及/或該HER2 TDB藉由靜脈內輸注來投與。
如請求項1至102中任一項之方法，其進一步包含投與一或多種額外治療劑。
如請求項103之方法，其中該一或多種額外治療劑選自由以下組成之群：托珠單抗、皮質類固醇、PD-1軸拮抗劑、及抗體-藥物結合物。
如請求項104之方法，其中該PD-1軸結合拮抗劑選自由以下組成之群：PD-L1結合拮抗劑、PD-1結合拮抗劑、及PD-L2結合拮抗劑。
如請求項105之方法，其中該PD-1軸結合拮抗劑為PD-L1結合拮抗劑。
如請求項106之方法，其中該PD-L1結合拮抗劑選自由以下組成之群：MPDL3280A(阿特珠單抗)、YW243.55.S70、MDX-1105、及MEDI4736。
如請求項105之方法，其中該PD-1軸結合拮抗劑為PD-1結合拮抗劑。
如請求項108之方法，其中該PD-1結合拮抗劑選自由以下組成之群：MDX-1106 (納武單抗)、MK-3475(派姆單抗)、及AMP-224。
如請求項105之方法，其中該PD-1軸結合拮抗劑為PD-L2結合拮抗劑。
如請求項110之方法，其中該PD-L2結合拮抗劑為抗體或免疫黏附素。
如請求項1至111中任一項之方法，其中在先前治療方案中已向該個體投與曲妥珠單抗。
如請求項1至112中任一項之方法，其中該HER2陽性癌症為HER2陽性實體腫瘤。
如請求項1至113中任一項之方法，其中該HER2陽性癌症為局部晚期或轉移性HER2陽性癌症。
如請求項1至114中任一項之方法，其中該HER2陽性癌症為HER2陽性乳癌或HER2陽性胃癌。
如請求項1至114中任一項之方法，其中該HER2陽性癌症選自由以下組成之群：HER2陽性胃腸接合部癌症、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性肺癌、HER2陽性胰腺癌、HER2陽性結腸直腸癌、HER2陽性膀胱癌、HER2陽性唾液管癌、HER2陽性卵巢癌、或HER2陽性子宮內膜癌。
如請求項116之方法，其中該HER2陽性肺癌為HER2陽性非小細胞肺癌。
如請求項116之方法，其中該HER2陽性卵巢癌為HER2陽性上皮卵巢癌。