CN116457003A

CN116457003A - 抗cd20/抗cd3双特异性抗体的皮下给药

Info

Publication number: CN116457003A
Application number: CN202180074613.8A
Authority: CN
Inventors: 李奇中; C·E·奥赫; 王红; B·C·本德; I·胡塞尼
Original assignee: Genentech Inc
Current assignee: Genentech Inc
Priority date: 2020-11-04
Filing date: 2021-11-02
Publication date: 2023-07-18

Abstract

本发明涉及治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症，如非霍奇金淋巴瘤)的受试者。更具体地，本发明涉及通过皮下施用抗CD20/抗CD3双特异性抗体治疗患有B细胞增殖性病症的受试者。

Description

抗CD20/抗CD3双特异性抗体的皮下给药

序列表

本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式以电子方式提交，并以引用方式以其全部内容并入本文。该ASCII复本创建于2021年11月1日，命名为50474-235WO4_Sequence_Listing_11_1_21_ST25，并且大小为35,329字节。

技术领域

本发明涉及对CD20阳性细胞增殖性病症的治疗。更具体地，本发明涉及通过皮下施用与抗分化簇20(CD20)和抗分化簇3(CD3)结合的双特异性抗体来治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者。

背景技术

癌症以细胞亚群不受控制的生长为特征。癌症是发达国家的主要死亡原因，并且是发展中国家的第二大死亡原因，每年诊断出新癌症病例超过1400万例，并且癌症死亡人数超过800万。因此，癌症护理是巨大且日益沉重的社会负担。

CD20阳性细胞增殖性病症，诸如B细胞增殖性病症，是癌症相关死亡的主要原因。例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)进展迅速，并且如果不治疗是致命的。在美国，B细胞淋巴瘤约占所有NHL病例的80％-85％。弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的NHL类型，约占所有NHL诊断的30％-40％，其次是滤泡性淋巴瘤(FL；所有NHL诊断的20％-25％)和套细胞淋巴瘤(MCL；占所有NHL诊断的6％-10％)。B细胞慢性淋巴细胞白血病(CLL)是成人中最常见的白血病，在美国每年约有15,000例新病例(美国癌症协会2015年)。

双特异性抗体能够同时结合细胞毒性细胞(例如，T细胞，经由结合到分化簇3(CD3))和癌细胞(例如，B细胞，经由结合到CD20)上的细胞表面抗原，目的是结合的细胞毒性细胞将会破坏结合的癌细胞。然而，此类基于抗体的免疫疗法可能会受到不良影响的限制，此类不良影响包括细胞因子驱动的毒性(例如，细胞因子释放综合征(CRS))、输注相关反应(IRR)、严重的肿瘤溶解综合征(TLS)和中枢神经系统(CNS)毒性。

因此，在该领域中存在对开发用于治疗CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的治疗性双特异性抗体(例如，结合到CD20和CD3的双特异性抗体)的有效给药方法的需求，该方法会获得更有利的收益-风险特征。

发明内容

本发明涉及通过皮下施用与抗分化簇20(CD20)和抗分化簇3(CD3)结合的双特异性抗体来治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症)的受试者的方法。

在一个方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如从约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

在一些实施例中，C1D1小于C1D2。在一些实施例中，C1D2在量上等同于C1D3。在一些实施例中，(a)C1D1为从约2mg至约8mg，C1D2为从约10mg至约75mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约20mg至约75mg(例如，从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约45mg)；并且(b)C2D1为从约20mg至约75mg(例如，从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约45mg)。在一些实施例中，C1D1为约5mg。在一些实施例中，C1D3为从约25mg至约75mg。在一些实施例中，C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C2D1为从约40mg至约75mg。在一些实施例中，C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；C1D1为约5mg，C1D2为约10mg，C1D3为约30mg，C2D1为约30mg；C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，C2D1为约45mg；C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约40mg，C2D1为约40mg；或者C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。

在一些实施例中，C1D1等于C1D2(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg)。在一些实施例中，C1D1等于C1D2(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg)。在其他实施例中，C1D2等于C1D3(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约60mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg)。在其他实施例中，C1D2等于C1D3(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg)。

在一些实施例中，该方法包括在C1D1之后约七天向受试者施用C1D2。在一些实施例中，该方法包括在C1D2之后约七天向受试者施用C1D3。在一些实施例中，该方法包括在C1D3之后约七天向受试者施用C2D1。在一些实施例中，该方法包括分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天和第15天向受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。在一些实施例中，该方法包括在第二给药周期的第1天向受试者施用C2D1。

在一些实施例中，第一给药周期和第二给药周期是21天给药周期。

在一些实施例中，第一给药周期和第二给药周期是28天给药周期。在一些实施例中，第一给药周期是21天给药周期，并且第二给药周期是28天给药周期。

在另一方面，本发明提供一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包括双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约60mg；并且(b)第二给药周期包括双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D3为约45mg。

在一些实施例中，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C1D2为约15mg。在一些实施例中，C1D2为约45mg。在一些实施例中，第一给药周期和第二给药周期是21天给药周期。在一些实施例中，该方法包括分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天和第15天向受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。在一些实施例中，该方法包括在第二给药周期的第1天向受试者施用C2D1。在一些实施例中，第一给药周期和第二给药周期是21天给药周期。在一些实施例中，第一给药周期和第二给药周期是28天给药周期。在一些实施例中，第一给药周期是21天给药周期，并且第二给药周期是28天给药周期。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包含在第一给药周期的第1天双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)、以及在第一给药周期的第15天双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg，(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包含在第二给药周期的第1天双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包含在第一给药周期的第1天双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)、以及在第一给药周期的第15天双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg，(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约60mg；并且(b)第二给药周期包含在第二给药周期的第1天双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D3为约45mg。

在一些实施例中，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C1D2为约15mg。在一些实施例中，C1D2为约45mg。在一些实施例中，额外给药周期中的每一者是21天给药周期。在一些实施例中，额外给药周期中的每一者是28天给药周期。

在一些实施例中，该一个或多个额外给药周期中的每一者包含双特异性抗体的单次皮下剂量。在一些实施例中，该方法包括在该一个或多个额外给药周期中每一者的第1天向该受试者施用单次皮下剂量。

在任何前述方法的一些实施例中，CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症)是非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。在一些实施例中，NHL是弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。在一些实施例中，NHL是既往未治疗的(1L)NHL。在一些实施例中，NHL是复发性或难治性NHL(R/R NHL)。在一些实施例中，DLBCL是1L DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为复发性或难治性DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为里希特转化(Richter’stransformation)。在一些实施例中，FL是1L FL。在一些实施例中，FL是复发性或难治性FL。在一些实施例中，FL是转化FL。在一些实施例中，NHL是高级别B细胞淋巴瘤。在一些实施例中，NHL是Ann Arbor III期或IV期NHL。在一些实施例中，先前已向受试者施用至少一种(例如，至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种、至少十种或更多种)前线系统性疗法。在一些实施例中，已向受试者施用一种至九种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法。在一些实施例中，已向受试者施用三种前线系统性疗法。在一些实施例中，至少一种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法包含抗CD20抗体。在一些实施例中，抗CD20抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗。在一些实施例中，包含抗CD20抗体的前线系统性疗法另外包含烷基化剂或蒽环类药物。在一些实施例中，烷基化剂是环磷酰胺或苯达莫司汀。在一些实施例中，蒽环类药物为柔红霉素或阿霉素。在一些实施例中，包含抗CD20抗体的前线系统性疗法另外包含：(i)环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松(R-CHOP)；(ii)环磷酰胺、长春新碱和强的松(CVP)；(iii)氟达拉滨；或(iv)苯达莫司汀。在一些实施例中，至少一种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法包含布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。

在本发明的另一方面，提供了一种治疗患有DLBCL的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一21天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二21天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些实施例中，DLBCL是1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为里希特转化(Richter’s transformation)。在一些实施例中，该方法包括在C1D1之后约七天向受试者施用C1D2。在一些实施例中，该方法包括在C1D2之后约七天向受试者施用C1D3。在一些实施例中，该方法包括在C1D3之后约七天向受试者施用C2D1。在一些实施例中，该方法包括分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天和第15天向受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有FL的受试者所述的方法，该方法包括以至少包含第一28天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一28天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如，约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二28天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些实施例中，FL是既往未治疗的(1L)FL或复发性或难治性FL。在一些实施例中，FL是既往未治疗的(1L)FL。在一些实施例中，FL是转化FL。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有FL的受试者所述的方法，该方法包括以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一21天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如，约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二28天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些实施例中，FL是既往未治疗的(1L)FL或复发性或难治性FL。在一些实施例中，FL是既往未治疗的(1L)FL。在一些实施例中，FL是转化FL。

在一些实施例中，该方法包括在C1D1之后约7-10天向受试者施用C1D2。在一些实施例中，该方法包括在C1D2之后约7-10天向受试者施用C1D3。在一些实施例中，该方法包括在C1D3之后约7-10天向受试者施用C2D1。在一些实施例中，C1D1小于C1D2。在其他实施例中，C1D2的量约等于或小于C1D3。在一些实施例中，(a)C1D1为从约2mg至约8mg(例如约5mg)，C1D2为从约10mg至约75mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg,或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约20mg至约75mg(例如，从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约45mg)；并且(b)C2D1为从约20mg至约75mg(例如，从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约45mg)。在一些实施例中，C1D1为约5mg。在一些实施例中，C1D3为从约25mg至约75mg。在一些实施例中，C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C2D1为从约40mg至约75mg(例如，约30mg、约45mg或约60mg)。在一些实施例中，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约10mg，C1D3为约30mg，并且C2D1为约30mg；C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，且C2D1为约45mg；C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约40mg，并且C2D1为约40mg；C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg；或者C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D1等于C1D2。在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。在一些实施例中，C1D2等于C1D3(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约60mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg或例如，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg)。在一些实施例中，该方法包括在第二给药周期的第1天向受试者施用C2D1。

在一些实施例中，给药方案包含一个或多个(例如，一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三、十四或十五个)额外给药周期(例如，一个至十五个额外给药周期、八个至十七个额外给药周期、或六个至十五个额外给药周期)。在一些实施例中，给药方案包含六个额外给药周期。在一些实施例中，给药方案包含十五个额外给药周期。在一些实施例中，给药方案进一步包含总计两个至十七个(两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个、十三个、十四个、十五个、十六个、或十七个)给药周期。在一些实施例中，给药方案包含总计八个给药周期。在一些实施例中，给药方案包含总计十七个给药周期。在一些实施例中，每个额外给药周期是21天给药周期。在一些实施例中，每个额外给药周期是28天给药周期。在一些实施例中，每个额外给药周期包含施用双特异性抗体的另外的剂量。在一些实施例中，双特异性抗体的每个额外剂量约在量上等同于C2D1。在一些实施例中，双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。在一些实施例中，该方法包括在每个各自的额外给药周期的第1天向受试者施用双特异性抗体的每个额外剂量。

在前述任一方面的一些实施例中，双特异性抗体以单一疗法向受试者施用。

在前述任一方面的其他实施例中，双特异性抗体以联合疗法向受试者施用。在一些实施例中，双特异性抗体与一种或多种额外治疗剂向受试者同时施用。在一些实施例中，双特异性抗体在施用一种或多种额外治疗剂之前向受试者施用。在一些实施例中，双特异性抗体在施用一种或多种额外治疗剂之后向受试者施用。在一些实施例中，额外治疗剂是CD79b抗体药物缀合物(ADC)，例如泊洛妥珠单抗(polatuzumab vedotin)或抗CD79b-MC-vc-PAB-MMAE。在一些实施例中，额外治疗剂是PD-1轴结合拮抗剂(例如，PD-L1拮抗剂抗体)。在一些实施例中，额外治疗剂是奥滨尤妥珠单抗在一些实施例中，额外治疗剂是来那度胺(lenalidomide)。

在前述任一方面的一些实施例中，受试者患有细胞因子释放综合征事件，并且该方法进一步包含在停止用该双特异性抗体进行的治疗的同时治疗该细胞因子释放综合征事件的症状。在一些实施例中，该方法进一步包含向该受试者施用有效量的托珠单抗以治疗该细胞因子释放综合征事件。在一些实施例中，托珠单抗以约8mg/kg的单次剂量经静脉向受试者施用。在一些实施例中，该细胞因子释放综合征事件在治疗该细胞因子释放综合征事件的症状的24小时内未消退或恶化，并且该方法进一步包含向该受试者施用一个或多个另外的剂量的托珠单抗以管理该细胞因子释放综合征事件。在一些实施例中，一个或多个另外的剂量的托珠单抗以约8mg/kg的剂量经静脉向受试者施用。在一些实施例中，托珠单抗的每个剂量不超过800mg/剂量。在一些实施例中，该方法进一步包含向受试者施用有效量的皮质类固醇(例如甲基泼尼松龙(methylprednisolone)或地塞米松(dexamethasone))。在一些实施例中，皮质类固醇(例如甲基泼尼松龙或地塞米松)经静脉向受试者施用。在一些实施例中，甲基泼尼松龙以每天约2mg/kg的剂量施用。在一些实施例中，地塞米松以从约10mg至约100mg(例如，约10mg)的剂量施用。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向此类受试者中的一者或多者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)、以及第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)、以及第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg或约60mg；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg或约60mg。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)第一给药周期包含在第一给药周期的第1天双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)、以及在第一给药周期的第15天双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg，(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg或约60mg；并且(b)第二给药周期包含在第二给药周期的第1天双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg或约60mg。

在一些实施例中，CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症)是非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。在一些实施例中，NHL是弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。在一些实施例中，NHL是既往未治疗的(1L)NHL。在一些实施例中，NHL是CLL。在一些实施例中，DLBCL是1L DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为复发性或难治性DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为里希特转化(Richter’s transformation)。在一些实施例中，FL是1L FL。在一些实施例中，FL是复发性或难治性FL。在一些实施例中，FL是转化FL。在一些实施例中，NHL是高级别B细胞淋巴瘤。在一些实施例中，NHL是Ann Arbor III期或IV期NHL。在一些实施例中，先前已向受试者施用至少一种(例如，至少两种、至少三种、至少四种、至少五种、至少六种、至少七种、至少八种、至少九种、至少十种或更多种)前线系统性疗法。在一些实施例中，已向受试者施用一种至九种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法。在一些实施例中，已向受试者施用三种前线系统性疗法。在一些实施例中，至少一种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法包含抗CD20抗体。在一些实施例中，抗CD20抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗。在一些实施例中，包含抗CD20抗体的前线系统性疗法另外包含烷基化剂或蒽环类药物。在一些实施例中，烷基化剂是环磷酰胺或苯达莫司汀。在一些实施例中，蒽环类药物为柔红霉素或阿霉素。在一些实施例中，包含抗CD20抗体的前线系统性疗法另外包含：(i)环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松(R-CHOP)；(ii)环磷酰胺、长春新碱和强的松(CVP)；(iii)氟达拉滨；或(iv)苯达莫司汀。在一些实施例中，至少一种(例如，一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种或九种)前线系统性疗法包含布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有DLBCL的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向此类受试者中的一者或多者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中：(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些实施例中，DLBCL为复发性或难治性DLBCL。在一些实施例中，DLBCL是既往未治疗的(1L)DLBCL。在一些实施例中，DLBCL为里希特转化(Richter’s transformation)。在一些实施例中，完全缓解率为至少约10％(例如，至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、或至少约65％；例如，约10％至约60％、约10％至约50％、约10％至约40％、约10％至约30％、约10％至约20％、约20％至约60％、约20％至约50％、约20％至约40％、约20％至约30％、约30％至约50％、约30％至约60％或约40％至约60％；例如，约15％、约20％、约25％、约30％、约35％或约40％)。在一些实施例中，完全缓解率在约10％至约90％之间(例如在约10％至约80％、约10％至约70％、约10％至约60％、约10％至约50％、约10％至约40％、约10至约30％、约20至约80％、约30至约80％、约40至约80％、约50至约80％、约30至约70％、约30至约60％、约40％至约60％、约30％至约50％、约15％至约40％、约20％至约40％、约60％至约90％、约45％至约55％、或约45％至约50％；例如，约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、或约95％)。在一个具体实施例中，患有1LDLBCL的受试者群体的完全缓解率为约40％。在另一个具体实施例中，患有R/R DLBCL的受试者群体的完全缓解率为约20％。

在一些实施例中，中位无进展生存期大于约四个月(例如，至少约4.5个月、至少约5个月、至少约5.5个月、至少约6个月、至少约6.5个月、至少约7个月、至少约7.5个月、至少约8个月、至少约8.5个月、至少约9.0个月、至少约9.5个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月、至少约54个月或更多；例如，在约4个月和约48个月之间、在约4个月和36个月之间、在约4个月和约24个月之间、在约4个月和约12个月之间、在约4个月和约10个月之间；在约4个月和约8个月之间、在约8个月和约24个月之间、在约12个月和约24个月之间或在约8个月和约16个月之间；例如，约4.5个月、约5个月、约5.5个月、约6个月、约6.5个月、约7个月、约7.5个月、约8个月、约8.5个月、约9.0个月、约9.5个月、约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。在一些实施例中，患有R/R FL的受试者群体的中位无进展生存期大于约4个月(例如，至少约4.5个月、至少约5个月、至少约6个月、至少约7个月、至少约8个月、至少约9个月、至少约10个月、至少约11个月或至少约12个月；例如，在约4与约12个月之间、在约4与约10个月之间、在约4与约8个月之间、在约4与约6个月之间、在约8与约12个月之间、在约6与约10个月之间、在约6与约12个月之间、或在约5与约9个月之间；例如，约4个月、约4.5个月、约5个月、约5.5个月、约6个月、约7个月、约8个月、约9个月、约10个月、约11个月或约12个月)。在一具体实施例中，患有R/RFL的受试者群体的中位无进展生存期大于约4个月。

在一些实施例中，中位无进展生存期大于约一个月(例如，至少约1.5个月、至少约两个月、至少约2.5个月、至少约三个月、至少约3.5个月、至少约四个月、至少约4.5个月、至少约5个月或至少6个月；例如，在约一个月与约六个月之间、在约一个月与约五个月之间、在约一个月与约四个月之间、在约一个月与约三个月之间、在约一个月与约两个月之间、在约两个月与约四个月之间、在约三个月与约五个月之间、在约四个月与约六个月之间、或在约三个月与约六个月之间；例如，约一个月、约两个月、约三个月、约四个月、约五个月或约六个月)。在一些实施例中，患有DLBCL的受试者群体的中位无进展生存期大于约两个月(例如，大于约2.5个月、约3个月、约3.5个月、约4个月、约4.5个月、约5个月、或约6个月)；例如，在约2与约12个月之间、在约2个月与约6个月之间、在约2个月与约5个月之间、在约2与约4个月之间、在约2与约3个月之间、在约3与约5个月之间、或在约4与约6个月之间；例如约2.1个月、约2.5个月、约3个月、约3.5个月、约4个月、约4.5个月、约5个月、约5.5个月、或约6个月)。在一个实施例中，患有R/R DLBCL的受试者群体的中位无进展生存期大于2个月。在一具体实施例中，患有R/R DLBCL的受试者群体的中位无进展生存期为约2.5个月。

在一些实施例中，中位总生存期大于约9.5个月(例如，至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月，至少约54个月、或更多；例如，在约9个月与约48个月之间、在约9个月与约36个月之间、在约9个月与约24个月之间、在约9个月与约12个月、在约10个月与约18个月之间；在约12个月与约24个月之间、在约18个月与约36个月之间、在约12个月与约36个月之间、或在约24个月与约48个月之间；例如，约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。在一些实施例中，第一给药周期是21天给药周期，并且第二给药周期是21天给药周期。

在另一方面，本发明的特征在于一种治疗患有FL的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向此类受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如，约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如，约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些实施例中，FL是复发性或难治性FL。在一些实施例中，FL是转化FL。在一些实施例中，完全缓解率为至少约40％(例如，至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、或至少约75％；例如，约40％至约80％、约40％至约70％、约40％至约60％、约40％至约50％、约50％至约70％、约60％至约80％、或约50％至约80％；例如约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％或约80％)。在一具体实施例中，患有R/R FL的受试者群体的完全缓解率在约45％至约50％之间。

在一些实施例中，治疗开始后约20个月的客观缓解率为至少约70％(例如，至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，约70％至约80％、约70％至约90％、约70％至约95％、或约70％至约100％；例如约70％、约75％、约80％、约85％或约90％)。在一些实施例中，治疗开始后约24个月的客观缓解率为至少约75％(例如，至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，约75％至约80％、约75％至约90％、约75％至约95％、约75％至约100％、约80％至约100％或约90％至约100％；例如，约75％、约80％、约85％、或约90％)。在一些实施例中，治疗开始后约12个月的客观缓解率为至少约60％(例如，至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，约60％至约70％、约60％至约80％、约60％至约90％、或约60％至约100％；例如，约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％或约95％)。

在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％(例如，至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或更多；例如，在34％-95％之间、在34％-85％之间、在34％-75％之间、在34％-65％之间、在34％-55％、在35％-60％之间、在35％-75％之间、在55％-95％之间、在75％-95％之间、在40％-50％之间、在45％-64％之间、在34％-45％之间或在34％-40％之间；例如约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％、约50％、约51％、约52％、约53％、约54％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、或约95％)。在一些实施例中，客观缓解率为至少44％。在一些实施例中，客观缓解率在35％-55％之间。在一些实施例中，客观缓解率为约45％。

在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率为至少70％(例如，至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、或至少95％；例如，70％至80％、70％至90％、70％至95％、或70％至100％；例如，约70％、约71％、约72％、约73％、约74％、约75％、约75％、约76％、约77％、约78％、约79％、约80％、约81％、约82％、约83％、约84％、约85％、约86％、约87％、约88％、约89％、约90％或约95％)。在一些实施例中，客观缓解率为至少80％。在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率在70％-90％之间。在一些实施例中，客观缓解率为约80％。

在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性DLBCL或转化FL，并且其中客观缓解率为至少25％(例如，至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或更多；例如，在25％-95％之间、在25％-75％之间、在25％-55％之间、在25％-50％之间、在25％-45％之间、在25％-40％之间、在25％-35％之间、在25％-30％之间、在30％-75％之间、在35％-75％之间、在40％-75％之间、在30％-40％之间、在30％-45％之间、在30％-50％之间、或在50％-70％之间；例如约25％、约26％、约27％、约28％、约29％、约30％、约31％、约32％、约33％、约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、或约95％)。在一些实施例中，客观缓解率为至少35％。在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性DLBCL，并且其中客观缓解率在25％-45％之间。在一些实施例中，客观缓解率为约35％。

在一些实施例中，受试者群体在施用双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中受试者群体中细胞因子释放综合征的比率小于或等于约40％(例如，小于或等于约35％、小于或等于约30％、小于或等于约25％、小于或等于约20％、小于或等于约15％、小于或等于约10％、小于或等于约5％、或小于或等于约3％；例如，在约0％与约40％之间、在约0％与约30％之间、在约0％与约20％之间、在约0％与约10％之间、在约0％与约5％之间、在约10％与约20％之间、在约10％与约30％之间、在约20％与约40％之间、在约15％与约35％之间、或在约5％与约15％之间；例如，约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％、约7％、约5％、约4％、约3％、约2％、约1％或约0％)。在一些实施例中，患有2级或更高(由美国移植与细胞疗法学会，2018年；ASTCT定义)的细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％(例如，小于或等于约7％、小于或等于约5％、小于或等于约3％、或小于或等于约1％；例如，在约0％与约10％之间，在约0％与约7％之间、在约0％与约5％之间、在约0％与约3％之间、在约1％与约3％之间、在约3％与约5％之间、在约5％与约7％之间、在约5％与约10％之间、在约3％与约7％之间；例如约10％、约7％、约5％、约4％、约3％、约2％、约1％或约0％)。

在本发明的另一方面，提供了一种降低患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症)、被施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体的受试者群体中某些不良事件的比率的方法，该方法包括使用分步给药方案皮下施用双特异性抗体，其中与经静脉施用双特异性抗体的受试者参考群体相比，受试者群体中不良事件的比率降低。在某些实施例中，分步给药方案选自由以下组成的组：(I)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：(a)该第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至从约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)；(II)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：(a)该第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；(iii)C1D3为约45mg或约60mg；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg或约60mg；并且(III)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：(a)该第一给药周期包含在第一给药周期的第1天的双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天的双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)以及在第一给药周期的第15天的双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中：(i)C1D1为约5mg，(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；(iii)C1D3为约45mg或约60mg；并且(b)第二给药周期包含在第二给药周期的第1天双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg或约60mg。

在一些实施例中，受试者群体在施用双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中受试者群体中细胞因子释放综合征的比率小于或等于约40％(例如，小于或等于约35％、小于或等于约30％、小于或等于约25％、小于或等于约20％、小于或等于约15％、小于或等于约10％、小于或等于约5％、或小于或等于约3％；例如，在约0％与约40％之间、在约0％与约30％之间、在约0％与约20％之间、在约0％与约10％之间、在约0％与约5％之间、在约10％与约20％之间、在约10％与约30％之间、在约20％与约40％之间、在约15％与约35％之间、或在约5％与约15％之间；例如，约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％、约7％、约5％、约4％、约3％、约2％、约1％或约0％)。在一些实施例中，患有2级或更高(由美国移植与细胞疗法学会，2018年；ASTCT定义)的细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％(例如，小于或等于约7％、小于或等于约5％、小于或等于约3％、小于或等于约1％；例如，在约0％与约10％之间，在约0％与约7％之间、在约0％与约5％之间、在约0％与约3％之间、在约1％与约3％之间、在约3％与约5％之间、在约5％与约7％之间、在约5％与约10％之间、在约3％与约7％之间；例如约10％、约7％、约5％、约4％、约3％、约2％、约1％或约0％)。

在一些实施例中，完全缓解率为至少约10％(例如，至少约11％、至少约12％、至少约13％、至少约14％、至少约15％、至少约16％、至少约17％、至少约18％、至少约19％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％或更多；例如，约10％至约40％、约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约10％至约30％、约15％至约30％、约20％至约40％或更多；例如，约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％，约18％、约19％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％或更多)。在一些实施例中，完全缓解率为至少约42％(例如，至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或更多；例如，42％至45％、45％至50％、约50％至约55％、约55％至约60％、约60％至约65％、约65％至约70％、约70％至约75％或更多；例如，约42％、约45％、约50％、约55％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或更多)。在一些实施例中，完全缓解率为至少约20％。在一些实施例中，完全缓解率为至少约40％。在一些实施例中，完全缓解率为至少约55％。在一些实施例中，治疗开始后约24个月的客观缓解率为至少约75％(例如，至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，约75％至约80％、约75％至约90％、约75％至约95％、约75％至约100％、约80％至约100％或约90％至约100％；例如，约75％、约80％、约85％、或约90％)。在一些实施例中，治疗开始后约20个月的客观缓解率为至少约70％(例如，至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，70％至80％、70％至90％、70％至95％、或70％至100％；例如，约70％、约75％、约80％、约85％或约90％)。在一些实施例中，进行治疗后约12个月的客观缓解率为至少约60％(例如，至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、或至少约95％；例如，约60％至约70％、约60％至约80％、约60％至约90％、或约60％至约100％；例如，约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％或约95％)。

在先前任何方面的一些实施例中，该双特异性抗体包含抗CD20臂，该抗CD20臂包含第一结合域，该第一结合域包含以下六个高变区(HVR)：(a)HVR-H1，其包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含VVYYSNSYWYFDV(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含APSNLAS(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。在一些实施例中，双特异性抗体包含抗CD20臂，该抗CD20臂包含第一结合域，该第一结合域包含(a)重链可变(VH)域，其包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)轻链可变(VL)域，其包含与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少95％的序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的VH域和如(b)中所述的VL域。在一些实施例中，第一结合域包含VH域，其包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列；和VL域，其包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。在一些实施例中，该双特异性抗体包含抗CD3臂，该抗CD3臂包含第二结合域，该第二结合域包含以下六个HVR：(a)HVR-H1，其包含NYYIH(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含DSYSNYYFDY(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，其包含TQSFILRT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列。在一些实施例中，双特异性抗体包含抗CD3臂，该抗CD3臂包含第二结合域，该第二结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ ID NO:15的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ ID NO:16的氨基酸序列具有至少95％的序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中所述的VH域和如(b)中所述的VL域。在一些实施例中，第二结合域包含VH域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列；和VL域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。在一些实施例中，双特异性抗体包含(a)抗CD20臂，其包含(i)重链，该重链包含与SEQ ID NO:51的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，和(ii)轻链，该轻链包含与SEQ ID NO:52的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；以及(b)抗CD3臂，其包含(i)重链，该重链包含与SEQ ID NO:53的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，和(ii)轻链，该轻链包含与SEQ ID NO:54的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。在一些抗体中，(a)抗CD20臂包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的轻链，并且(b)抗CD3臂包含含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的轻链。

在先前任何方面的一些实施例中，双特异性抗体是人源化抗体。在一些实施例中，双特异性抗体是嵌合抗体。在一些实施例中，双特异性抗体是结合CD20和CD3的抗体片段。在一些实施例中，该抗体片段选自由Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')₂片段组成的组。

在一些实施例中，双特异性抗体为全长抗体。在一些实施例中，双特异性抗体为IgG抗体。在一些实施例中，IgG抗体为IgG₁抗体。在一些实施例中，IgG抗体在氨基酸残基N297(EU编号)处包含导致糖基化缺失的突变。在一些实施例中，氨基酸残基N297处的突变是取代突变。在一些实施例中，氨基酸残基N297处的突变降低Fc区的效用子(effector)功能。在一些实施例中，突变为N297G或N297A突变。在一些实施例中，双特异性抗体在Fc区中包含减少效应子功能的突变。在一些实施例中，该突变为取代突变。在一些实施例中，取代突变位于氨基酸残基L234、L235、D265和/或P329(EU编号)处。在一些实施例中，取代突变选自由以下组成的组：L234A、L235A、D265A和P329G。在一些实施例中，双特异性抗体包含一个或多个重链恒定域，其中，该一个或多个重链恒定域选自：第一CH1(CH1₁)域、第一CH2(CH2₁)域、第一CH3(CH3₁)域、第二CH1(CH1₂)域、第二CH2(CH2₂)域和第二CH3(CH3₂)域。在一些实施例中，该一个或多个重链恒定域中的至少一者与另一个重链恒定域配对。在一些实施例中，CH3₁和CH3₂域分别包含一个突起或空腔，其中，CH3₁域中的突起或空腔分别位于CH3₂域的空腔或突起中。在一些实施例中，CH3₁和CH3₂域在该突起和空腔之间的界面处相接。在一些实施例中，CH2₁和CH2₂域分别包含一个突起或空腔，其中，CH2₁域中的突起或空腔分别位于CH2₂域的空腔或突起中。在一些实施例中，CH2₁和CH2₂域在该突起和空腔之间的界面处相接。

在一些实施例中，双特异性抗体的抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变(EU编号)。在一些实施例中，双特异性抗体的抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。在一些实施例中，(a)该抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变并且(b)该抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

在一些实施例中，受试者为人。在一些实施例中，受试者群体为人受试者群体。

附图说明

本申请文件中包含至少一张彩色附图。专利局将根据要求提供带有彩色附图的本专利或专利申请的副本并收取必要的费用。

图1是显示了GO29781研究的剂量递增部分的设计的示意图。最初，莫苏妥珠单抗在每个周期的第1天(A组)以单一非分次静脉内(IV)剂量给药。随后修改第1周期给药，使得停止A组剂量递增并且如下进行莫苏妥珠单抗剂量递增：B组：使用第1周期递增IV给药方案递增莫苏妥珠单抗剂量；D组：使用第1周期非分次皮下(SC)给药方案递增莫苏妥珠单抗剂量；F组：使用第1周期递增SC给药方案递增莫苏妥珠单抗剂量。C＝周期；D＝天；DL＝剂量水平；MAD＝最大评估剂量。

图2是显示了GO29781研究的非霍奇金淋巴瘤(NHL)扩展定群和慢性淋巴细胞白血病(CLL)剂量递增/扩展定群的设计的示意图。DLBCL＝弥漫大B细胞淋巴瘤；FL＝滤泡性淋巴瘤；MCL＝套细胞淋巴瘤；NHL＝非霍奇金淋巴瘤；RP2D＝推荐的II期剂量；R/R＝复发性/难治性；trFL＝转化滤泡性淋巴瘤。^a可以测试基于A、B、D和F组剂量递增的多个扩展定群。^bR/R DLBCL/trFL中的扩展定群招募了多达约20个患者，但基于B组RP2D的扩展定群招募了多达约80个患者。^cR/R FL中的扩展定群招募了多达约20个患者，但基于B组RP2D的扩展定群招募了多达约80个患者。^d仅测试基于B组剂量递增的扩展定群。^e剂量递增与NHL相似(参见图1)。^f可以测试基于B、D和F组剂量递增的多个扩展定群。

图3是显示了GO29781研究的B组评估窗口的示意图。

图4是显示了在GO29781研究中在第1周期剂量递增(F组)中观察DLT的三个示例性场景的一组示意图。图代表了说明在6个患者的剂量递增定群中两个DLT的时间安排的实例，并不代表所有可能的情况。

图5是显示了GO29781研究中初始研究治疗的持续时间和再治疗或继续研究治疗的选择的示意图。CR＝完全缓解；PD＝进行性疾病；PR＝部分缓解；SD＝稳定疾病。^a按照用于初始治疗的治疗流程允许进行另外的再治疗。^b应安排扫描以尽可能避免/最小化周期8和9之间的任何剂量延迟。

图6是显示了在GO29781研究的D组中测试的SC莫苏妥珠单抗剂量的示意图。D＝剂量。N＝患者数量

图7是显示了在指定剂量和时间点患者血清样品中莫苏妥珠单抗(μg/mL)的浓度之一对图。左视图显示了来自GO29781研究的B组的样品(IV递增给药)。右视图显示了来自GO29781研究的D组的样品(SC给药)。虚线表示经由IV施用递送的1mg剂量的C_max。

图8是显示了在指定剂量和时间点患者外周血样品中IL-6的浓度(以pg/mL计)的一组图表。左视图显示了来自GO29781研究的A组的样品(IV给药)。右视图显示了来自GO29781研究的D组的样品(SC给药)。PD：给药前。EoI：输注结束。

图9是显示了在指定时间点患者外周血样品中IL-6的浓度(以pg/mL计)的一组图表。左视图和中视图显示了来自GO29781研究(递增IV给药)的B组的样品，B组在第1周期的第1天接受了1mg剂量的莫苏妥珠单抗(C1D1)(左视图：来自剂量递增阶段的资料；中视图：来自剂量扩展阶段的资料)。右视图显示了来自GO29781研究的D组的样品(SC给药)，D组接受了1.6mg、2.4mg、3.6mg或7.2mg剂量。

图10是显示了在指定剂量和时间点皮下施用的患者外周血样品中IL-6的浓度(以pg/mL计)的一组图表。箭头表示患者1。PRE：给药前。

图11是显示了食蟹猴血液中IL-2(左上)、IL-6(右上)、IFNγ(左下)和TNFα(右下)的浓度(以pg/mL计)，此类食蟹猴静脉内接受媒介物，以在0.01mg/kg至1mg/kg范围内的剂量静脉内接受莫苏妥珠单抗或以1mg/kg的剂量皮下接受莫苏妥珠单抗的一组图表。

图12是显示了静脉内或皮下施用莫苏妥珠单抗后T细胞活化的一组图。顶部视图：CD4+/CD69+/CD25+T细胞的定量；底部视图：CD8+CD69-CD25+T细胞的定量

图13是显示了在1mg/mL单一静脉内施用莫苏妥珠单抗后食蟹猴中的B细胞耗竭的一组图。顶部视图：循环B细胞(CD40+)；底部视图：脾B细胞。

图14是显示了血清中循环B细胞活化因子(BAFF)的动力学的图。在所有剂量组中至第8天，并且在对照组和1mg/kg静脉注射组中至第57天评估BAFF。

具体实施方式

本发明涉及通过以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL，或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)的受试者(或受试者群体)的方法。第一给药周期包括三个皮下剂量，其中第一皮下剂量(C1D1)不大于第二皮下剂量(C1D2)且小于第三皮下剂量(C1D3)，并且C1D2不大于C1D3。在一些情况下，C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如，约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如，约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如，约30mg、约45mg、或约60mg)。第二给药周期包括双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

本发明部分地基于以下发现：涉及在多个给药周期(例如，其中第一给药周期是递增、分次给药周期)皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)可以有效治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)的受试者，同时降低毒性(例如细胞因子释放综合征或CNS毒性)。

I.一般技术

本领域技术人员通常容易理解并且通常使用常规方法来使用本文描述或参考的技术和程序，例如，Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual 3d edition(2001)Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.；CurrentProtocols in Molecular Biology(F.M.Ausubel等人主编(2003))；丛书Methods inEnzymology(Academic Press,Inc.)：PCR 2:A Practical Approach(M.J.MacPherson，B.D.Hames和G.R.Taylor主编(1995))，Harlow和Lane主编(1988)Antibodies,ALaboratory Manual，和Animal Cell Culture(R.I.Freshney主编(1987))；Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait主编，1984)；Methods in Molecular Biology,Humana Press；Cell Biology:A Laboratory Notebook(J.E.Cellis主编，1998)AcademicPress；Animal Cell Culture(R.I.Freshney主编，1987)；Introduction to Cell andTissue Culture(J.P.Mather和P.E.Roberts，1998)Plenum Press；Cell and TissueCulture:Laboratory Procedures(A.Doyle，J.B.Griffiths和D.G.Newell主编，1993-8)J.Wiley and Sons；Handbook of Experimental Immunology(D.M.Weir和C.C.Blackwell主编)；Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells(J.M.Miller和M.P.Calos主编，1987)；PCR:The Polymerase Chain Reaction(Mullis等人主编，1994)；CurrentProtocols in Immunology(J.E.Coligan等人主编，1991)；Short Protocols inMolecular Biology(Wiley and Sons,1999)；Immunobiology(C.A.Janeway和P.Travers，1997)；Antibodies(P.Finch，1997)；Antibodies:A Practical Approach(D.Catty.主编，IRL Press，1988-1989)；Monoclonal Antibodies:A Practical Approach(P.Shepherd和C.Dean主编，Oxford University Press，2000)；Using Antibodies:A Laboratory Manual(E.Harlow和D.Lane(Cold Spring Harbor Laboratory Press，1999)；The Antibodies(M.Zanetti和J.D.Capra主编，Harwood Academic Publishers，1995)；和Cancer:Principles and Practice of Oncology(V.T.DeVita等人主编，J.B.LippincottCompany，1993)。

II.定义

应当理解，本文所述的发明的方面和实施例包括“包含”、“由以下组成”及“基本上由以下组成”所指的方面和实施例。

如本文所用，单数形式的“一”、“一个”和“该”包括复数指示物，除非上下文另外明确指出。

如本文所用，术语“约”是指本技术领域技术人员容易知晓的相应值的常见误差范围。在本文中提及“约”值或参数包括(且描述)涉及该值或参数本身的实施例。

术语“癌症”和“癌性”是指或描述哺乳动物中通常以细胞生长/增殖不受控制为特征的生理状况。癌症的实例包括但不限于血液学癌症，诸如成熟B细胞癌，不包括霍奇金淋巴瘤，但包括非霍奇金淋巴瘤(NHL)，诸如可能是复发或难治性DLBCL的弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)或里希特转化。癌症的其他具体实例还包括生发中心B细胞样(GCB)弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、活化B细胞样(ABC)DLBCL、滤泡性淋巴瘤(FL)、转化FL、套细胞淋巴瘤(MCL)、急性髓系白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、边缘区淋巴瘤(MZL)、高级别B细胞淋巴瘤、原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)、小淋巴细胞白血病(SLL)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LL)、转化LL、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia，WM)、中枢神经系统淋巴瘤(CNSL)、伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma，BL)、前体B细胞淋巴细胞白血病、脾边缘区淋巴瘤、毛细胞白血病、脾淋巴瘤/白血病(不能分类)、脾弥漫性红髓小B细胞淋巴瘤、变异型毛细胞白血病、重链病(α重链病、γ重链病、μ重链病)、浆细胞骨髓瘤、骨孤立性浆细胞瘤、骨外浆细胞瘤、黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、淋巴结边缘区淋巴瘤、小儿淋巴结边缘区淋巴瘤、小儿滤泡性淋巴瘤、原发性皮肤滤泡中心淋巴瘤、富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤、CNS的原发性DLBCL、原发性皮肤DLBCL(腿型)、老年人EBV阳性DLBCL、与慢性炎症相关的DLBCL、淋巴瘤样肉芽肿、血管内大B细胞淋巴瘤、ALK阳性大B细胞淋巴瘤、浆母细胞性淋巴瘤、HHV8相关多中心卡斯尔曼病(Castleman disease)引起的大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤：B细胞淋巴瘤(不能分类，具有介于DLBCL与伯基特淋巴瘤之间的特征)，以及B细胞淋巴瘤(不能分类，具有介于DLBCL与经典型霍奇金淋巴瘤之间的特征)。癌症的另外的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴样恶性肿瘤，包括B细胞淋巴瘤。此类癌症的更具体实例包括但不限于多发性骨髓瘤(MM)；低度恶性/滤泡性NHL；小淋巴细胞(SL)NHL；中度恶性/滤泡性NHL；中度恶性弥漫NHL；高级别免疫母细胞性NHL；高级别淋巴母细胞NHL；高级别小型非裂解细胞NHL；巨大肿块(bulky disease)NHL；AIDS相关淋巴瘤；和急性淋巴细胞白血病(ALL)；慢性粒细胞白血病；和移植后淋巴增殖性病症(PTLD)。

如本文所用，术语“肿瘤”是指所有赘生性细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，以及所有癌前细胞和组织和癌性细胞和组织。如本文所提及，术语“癌症”、“癌性”、“细胞增殖性病症”、“增殖性病症”和“肿瘤”不相互排斥。

“病症”为可以从治疗中受益的任何病况，其包括但不限于慢性和急性病症或疾病，包括使哺乳动物易患相关病症的病理性病况。

术语“细胞增殖性病症”和“增殖性病症”是指与某种程度的异常细胞增殖相关的病症。在一个实施例中，细胞增殖性病症为癌症。在另一个实施例中，细胞增殖性病症为肿瘤。

术语“B细胞增殖性病症”或“B细胞恶性肿瘤”是指与某种程度的异常B细胞增殖相关的疾病，并且包括例如淋巴瘤、白血病、骨髓瘤和骨髓增生异常综合征。在一个实施例中，B细胞增殖性病症是淋巴瘤，诸如非霍奇金淋巴瘤(NHL)，包括例如弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如复发性或难治性DLBCL或里希特转化)、FL(例如，复发性和/或难治性FL或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤或PMLBCL)。在另一个实施例中，B细胞增殖性病症为白血病，诸如慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

如本文所用，“治疗(treatment)”(及其语法变体，诸如“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)，是指试图改变受治疗的受试者的自然病程的临床干预，并且可以被执行以用于预防或在临床病理过程中执行。期望的治疗效果包括但不限于预防疾病的发生或复发、减轻症状、减轻疾病的任何直接或间接病理后果、预防转移、降低疾病进展速率、改善或减轻疾病状态、缓解或改善预后。在一些实施例中，本发明的抗体用于延迟疾病的发展或减缓疾病的进展。

如本文所用，病症或疾病的“延迟进展”意旨延缓、阻碍、减缓、延迟、稳定和/或推迟疾病或病症(例如CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症，例如NHL，例如DLBCL或FL)的发展。此延迟可具有不同时间长度，取决于所治疗的疾病和/或个体的病史。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著延迟实际上可以涵盖预防，因为个体不会罹患该疾病。例如，可延迟晚期癌症，诸如癌转移发展。

“降低或抑制”意指引起总体减少(例如20％或更大、50％或更大、或75％、85％、90％、95％或更大)的能力。在某些实施例中，减少或抑制可以指相对于用双特异性抗体静脉施用，使用本发明的分次剂量递增给药方案用抗CD20/抗CD3双特异性抗体进行治疗后，减少或抑制不希望的事件，诸如细胞因子驱动的毒性(例如，细胞因子释放综合征(CRS))、输注相关反应(IRR)、巨噬细胞活化综合征(MAS)、神经毒性、严重肿瘤溶解综合征(TLS)、中性粒细胞减少症、血小板减少症、肝酶升高和/或中枢神经系统(CNS)毒性。在其他实施例中，减少或抑制可涉及经抗体Fc区介导的抗体效应子功能，此类效应子功能具体包括补体依赖性细胞毒性(CDC)、抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)。

如本文所用，“施用”意指向受试者给予一定剂量的化合物(例如，双特异性抗体)或组合物(例如，医药组合物，例如，包括双特异性抗体的医药药物)的方法。在本文所述的方法中使用的化合物和/或组合物可以皮下施用(例如，通过皮下注射)。

本文的治疗剂(例如，双特异性抗体)的“固定”或“统一”剂量是指在不考虑患者的体重或体表面积(BSA)情况下施用于患者的剂量。因此，固定剂量或统一剂量不以mg/kg剂量或mg/m²剂量提供，而以治疗剂的绝对量(例如，mg)提供。

“受试者”或“个体”为哺乳动物。哺乳动物包括但不限于灵长类动物(例如人类和非人类灵长类动物例如猴子)、驯养动物(例如牛、羊、猫、狗和马)、兔和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。在某些实施例中，受试者或个体为人类。

“个体缓解”或“缓解”可以使用任何表明对受试者有益的终点来评估，包括但不限于，(1)在某种程度上抑制进行性疾病(例如，CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL，或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤、或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)的进展，包括减慢和完全停止；(2)肿瘤大小减小；(3)抑制(即，减少、减缓或完全停止)癌细胞浸润到邻近的外周器官和/或组织；(4)抑制(即，减少、减缓或完全停止)转移；(5)在一定程度上反应与CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)相关的一种或多种症状；(6)增加或延长生存期，包括总生存期和无进展生存期；和/或(9)降低治疗后给定时间点的死亡率。

如本文所用，“完全缓解”或“CR”是指所有靶标病变(即，所有疾病迹象)消失。

如本文所用，“部分缓解”或“PR”是指靶标病变的最长直径之和(SLD)相比于基线SLD减小至少30％，或靶标病变的直径的乘积(SPD)相比于基线SPD减小至少50％。

如本文所用，“客观缓解率”(ORR)是指完全缓解(CR)率与部分缓解(PR)率之和。

如本文所用，“客观缓解持续时间”(DOR)被定义为从记录的对疾病进展的客观缓解首次出现到发生疾病进展或末次接受治疗后30天内因任何原因死亡(以先到者为准)的时间。

“持续缓解”是指停止治疗后对减少肿瘤生长的持续作用。例如，与施用阶段开始时的尺寸相比，肿瘤尺寸可保持不变或减小。在一些实施例中，持续缓解的持续时间至少与治疗持续时间相同，或为治疗持续时间的至少1.5倍、2.0倍、2.5倍或3.0倍。

患者对药物和治疗的“有效应答”或患者的“应答性”和类似措词是指赋予处于患疾病或病症诸如癌症的风险下或患有该疾病或病症的患者的临床或治疗益处。在一个实施例中，这种益处包括以下中的一者或多者：延长生存期(包括总生存期和/或无进展生存期)；导致客观缓解(包括完全缓解或部分缓解)；或改善癌症的体征或症状。

对治疗“无有效应答”的受试者是指不具有以下项中任一者的受试者：延长生存期(包括总生存期和无进展生存期)、产生客观缓解(包括完全缓解或部分缓解)；或改善癌症的体征或症状。

如本文所用，“生存期”指患者还活着，包括总生存期和无进展生存期。

如本文所用，“总生存期(overall survival)”(OS)是指一组受试者在特定时间段(例如，从诊断或治疗开始算起的1年或5年)后仍然生存的百分比。

如本文所用，“无进展生存期”(PFS)是指治疗期间和之后的时间长度，期间正在治疗疾病(例如，CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤或PMLBCL)或CLL))不会变得更糟。无进展生存期可包括患者发生完全缓解或部分缓解的时间以及患者疾病稳定的时间。

如本文所用，“疾病稳定”或“SD”是指以自治疗开始以来最小的SLD为参考，既不显著缩小靶标病变以使其符合PR，又不充分增加以使其符合PD。

如本文所用，“进行性疾病”或“PD”是指以自治疗开始或一个或多个新病变的存在以来记录的最小SLD为参考，靶标病变的SLD之和增加至少20％，或靶标病变的SPD之和增加至少50％。

如本文所用，疾病或疾病的“延迟进展”是指推迟、阻碍、减缓、延迟、稳定和/或推迟疾病或疾病(例如，CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤或PMLBCL)或CLL))的发展。该推迟可具有不同的时间长度，取决于疾病和/或被治疗的受试者的病史。对于本领域技术人员显而易见的是，充分或显著延迟实际上可以涵盖预防，因为受试者不会罹患该疾病。例如，在晚期癌症中，中枢神经系统(CNS)转移的发展可能发生延迟。

如本文所用，术语“减少或抑制癌症复发”是指减少或抑制肿瘤或癌症复发或肿瘤或癌症进展。

“减少或抑制”是指导致总体降低20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更大的能力。减少或抑制可以指正在治疗的疾病(例如，CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1LDLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤、或PMLBCL)或CLL))的症状、转移的存在或大小或原发肿瘤的大小。

如本文所用，术语“Ann Arbor分期”或“Ann Arbor分期”是指用于对淋巴瘤(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)；例如，DLBCL、FL、MCL、高级别B细胞淋巴瘤、PMLBCL或CLL)的分期进行分类的系统。淋巴瘤(例如，NHL)可归类为四个Ann Arbor分期之一。I期是指表现出单个淋巴结区或单个淋巴外器官或部位侵犯的淋巴瘤。II期是指在横膈膜的同一侧上表现出2个或更多淋巴结区侵犯的淋巴瘤。III期是指表现出在横膈膜两侧上淋巴结区受累的淋巴瘤(III)，也可能伴有局部淋巴外器官或部位侵犯，或脾侵犯，或两者兼而有之。IV期是指表现为弥漫或弥散性累及1个或多个淋巴外器官或组织淋巴瘤，伴有或不伴有淋巴结肿大。肝脏侵犯总是被认为是弥漫的，并且因此，总是被认为是Ann Arbor IV期。淋巴结构包括淋巴结、胸腺、脾脏、阑尾、韦氏环和培氏斑。见Carbone,P.P.等人，Cancer Res.1971,31(11):1860-1861。

“延长生存期”是指接受治疗的患者相对于未治疗的患者(例如，相对于未经药物治疗的患者)、或相对于未以指定水平表达生物标志物的患者和/或相对于接受已批准的抗肿瘤药物治疗的患者，增加了总生存期或无进展生存期。“客观缓解”是指可测量的缓解，包括完全缓解(CR)或部分缓解(PR)。

本文的术语“抗体”以最广泛的含义使用，并且包括各种抗体结构，包括但不限于单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)和抗体片段，只要它们表现出所需的抗原结合活性即可。

“抗体片段”是指除了完整抗体以外的分子，其包含完整抗体的一部分且结合完整抗体结合的抗原。抗体片段的实例包括(但不限于)Fv、Fab、Fab’、Fab’-SH、F(ab’)₂、二价抗体、线性抗体、单链抗体分子(例如scFv)和自抗原片段形成的多特异性抗体。

术语“全长抗体”、“完整抗体”及“全抗体”在本文中可互换地用于指代具有基本上类似于天然抗体结构的结构或具有含有如本文所定义的Fc区的重链的抗体。

“结合域”意指与靶标表位、抗原、配体或受体特异性结合的化合物或分子的一部分。结合域包括但不限于抗体(例如，单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体、人源化抗体和嵌合抗体)、抗体片段或其部分(例如，Fab片段，Fab’₂、scFv抗体、SMIP、域抗体、双抗体、微抗体、scFv-Fc、亲和体(affibody)、纳米抗体以及抗体的VH和/或VL域)、受体、配体、适体、适体和其他具有鉴定出的结合配偶体的分子。

本文的术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C末端区，该C-末端区含有恒定区的至少一部分。该术语包括天然序列Fc区和变体Fc区。在一个实施例中，人IgG重链Fc区从Cys226或Pro230延伸至重链的羧基末端。然而，Fc区的C末端赖氨酸(Lys447)可以存在或可以不存在。除非本文另外指明，否则Fc区或恒定区中氨基酸残基的编号为根据EU编号系统(也称为EU索引)，如在Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD,1991(同样参见上文)中所描述的。

抗体的“类别”是指抗体的重链所具有的恒定域或恒定区的类型。有五大类抗体：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些类别中的若干可以进一步分为“亚类”(同种型)，例如IgG₁、IgG₂、IgG₃、IgG₄、IgA₁和IgA₂。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定域分别称为α、δ、ε、γ和μ。

如本文所用，术语IgG“同种型”或“亚类”是指由免疫球蛋白恒定区的化学和抗原特征定义的免疫球蛋白的任何亚类。

“框架(framework)”或“FR”是指除高变区(hypervariable region)(HVR)残基之外的可变域残基。可变域的FR通常由四个FR域组成：FR1、FR2、FR3和FR4。因此，HVR和FR序列通常以如下顺序出现在VH(或VL)中：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。

“人共有框架”是表示在人免疫球蛋白VL或VH框架序列的选择中最常存在的氨基酸残基的框架。通常，人免疫球蛋白VL或VH序列的选择来自可变域序列的亚组。通常，序列的亚组是如Kabat等人在Sequences of Proteins of Immunological Interest(第5版，NIH Publication 91-3242，Bethesda MD(1991)，第1-3卷)中所述的亚组。在一个实施例中，对于VL，亚组是如Kabat等人在上述文献中所述的亚组κI。在一个实施例中，对于VH，亚组是如Kabat等人在上述文献中所述的亚组III。

出于本文目的的“受体人框架”是这样的框架，其包含来源于如下所定义的人免疫球蛋白框架或人共有框架的轻链可变域(VL)框架或重链可变域(VH)框架的氨基酸序列。“来源于”人免疫球蛋白框架或人共有框架的受体人框架可包含与所述人免疫球蛋白框架或人共有框架相同的氨基酸序列，或者其可以包含氨基酸序列变化。在一些实施例中，氨基酸变化的数量为10或更少、9或更少、8或更少、7或更少、6或更少、5或更少、4或更少、3或更少、或2或更少。在一些实施例中，VL受体人框架在序列上与VL人免疫球蛋白框架序列或人共有框架序列相同。

“人源化(humanized)”抗体是指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施例中，人源化抗体将基本上包括所有的至少一个(且通常两个)可变域，其中所有或基本上所有的HVR(例如CDR)对应于非人抗体的HVR，并且所有或基本上所有FR对应对于人抗体的FR。人源化抗体任选地可包含来源于人抗体的抗体恒定区的至少一部分。“人源化形式”的抗体，例如，非人抗体，是指已经进行过人源化的抗体。

“人抗体(human antibody)”是具有的氨基酸序列与由人或人细胞产生的或来源于利用人抗体库或其他人抗体编码序列的非人来源的抗体的氨基酸序列相对应的抗体。人抗体的该定义特别地排除了包含非人抗原结合残基的人源化抗体。可以使用本领域已知的各种技术产生人类抗体，包括噬菌体展示文库。Hoogenboom和Winter，J.Mol.Biol.，227:381(1991)；Marks等人J.Mol.Biol.222:581(1991)。还可用于制备人单克隆抗体的方法如Cole等人，Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R.Liss，第77页(1985)；Boerner等人，J.Immunol.，147(1):86-95(1991)所述。另参见van Dijk和van de Winkel,Curr.Opin.Pharmacol.,5:368-74(2001)。可以通过向转基因动物施用抗原来制备人类抗体，该转基因动物已经修饰以对抗原攻击产生应答而产生此类抗体，但其内源性基因座已失效，例如，免疫异种小鼠(参见，例如，关于XENOMOUSE^TM技术的美国专利号6,075,181和6,150,584)。另参见，例如，Li等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,103:3557-3562(2006)关于通过人B细胞杂交瘤技术产生的人抗体。

术语“可变区”或“可变域”是指抗体重链或轻链的参与抗体与抗原结合的域。天然抗体的重链和轻链的可变域(分别为VH和VL)通常具有相似的结构，且每个域包含四个保守框架区(FR)和三个高变区(HVR)。(参见例如Kindt等人，Kuby Immunology，第6版，W.H.Freeman and Co.，第91页(2007)。)单个VH或VL域可足以赋予抗原结合特异性。此外，可以使用VH或VL域从结合抗原的抗体中分离结合特定抗原的抗体，以分别筛选互补VL或VH域的文库。参见，例如，Portolano等人，J.Immunol.150:880-887(1993)；Clarkson等人，Nature 352:624-628(1991)。

如本申请所用，术语“高变区”或“HVR”是指以下项中的每一种：抗体可变域的在序列中高变(“互补决定区”或“CDR”)和/或形成结构上限定的环(“高变环”)和/或含有抗原接触残基(“抗原接触点”)的区域。通常，抗体包含六个HVR；三个在VH中(H1、H2、H3)，及三个在VL中(L1、L2、L3)。本文中的示例性HVR包括：

(a)存在于氨基酸残基26-32(L1)、50-52(L2)、91-96(L3)、26-32(H1)、53-55(H2)和96-101(H3)处的高变环(Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917(1987))；

(b)存在于氨基酸残基24-34(L1)、50-56(L2)、89-97(L3)、31-35b(H1)、50-65(H2)和95-102(H3)处的CDR(Kabat等人，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，第5版，Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD(1991))；

(c)存在于氨基酸残基27c-36(L1)、46-55(L2)、89-96(L3)、30-35b(H1)、47-58(H2)和93-101(H3)处的抗原接触点(MacCallum等人，J.Mol.Biol.262:732-745(1996))；以及

(d)(a)、(b)和/或(c)的组合，包括HVR氨基酸残基46-56(L2)、47-56(L2)、48-56(L2)、49-56(L2)、26-35(H1)、26-35b(H1)、49-65(H2)、93-102(H3)、和94-102(H3)。

除非另外指明，否则可变域中的HVR残基和其他残基(例如，FR残基)在本文中根据Kabat等人，出处同上编号。

“免疫缀合物”是指与一种或多种异源分子(包括但不限于细胞毒性剂)缀合的抗体。

术语“分离的抗体”在用于描述本文所公开的各种抗体时，是指已经从表达它的细胞或细胞培养物中得到鉴定、分离和/或回收的抗体。其自然环境中的污染物组分通常干扰多肽的诊断或治疗用途，并且可以包括酶、激素以及其他蛋白质或非蛋白质溶质。在一些实施例中，通过例如电泳(例如，SDS-PAGE、等电聚焦(isoelectric focusing,IEF)、毛细管电泳)或色谱(例如，离子交换或反相HPLC)测定，将抗体纯化至大于95％或99％的纯度。关于评估抗体纯度的方法的综述，参见例如Flatman等人，J.Chromatogr.B 848:79-87(2007)。在优选的实施例中，将抗体纯化至(1)足以获得N末端或内部氨基酸序列的至少15个残基的程度(例如通过使用旋转杯测序仪)，或(2)均质(在还原或非还原条件下进行SDS-PAGE，使用例如考马斯蓝或银染)。经分离的抗体包括重组细胞内的原位抗体，因为不存在多肽天然环境中的至少一种成分。然而，通常，经分离的多肽将通过至少一个纯化步骤进行制备。

如本文所用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即，除了可能的变体抗体(例如，含有天然存在的突变或在单克隆抗体制剂的生产过程中产生，此类变体通常以少量形式存在)之外，包括该群体的单个抗体是相同的和/或结合相同表位。与通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂相反，单克隆抗体制剂中的每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。因此，修饰语“单克隆”表示抗体的特征是从基本上同质的抗体群体获得的，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生抗体。例如，根据本发明的单克隆抗体可以通过多种技术制备，包括但不限于杂交瘤方法、重组DNA方法、噬菌体展示方法，以及利用含有全部或部分人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法，在本文中描述了用于制备单克隆抗体的此类方法和其他示例性方法。

“亲和力”是指分子(例如，抗体)的单个结合位点与其结合配偶体(例如，抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指明，否则如本文所用，“结合亲和力”是指反映结合对成员(例如抗体和抗原)之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X与其配偶体Y的亲和力通常可以用解离常数(Kd)表示。亲和力可以通过本领域已知的常规方法测量，包括本文所述的那些方法。下文描述了用于测量结合亲和力的具体说明性和示例性实施例。

术语“亲和力成熟”的抗体是指在一个或多个高变区(HVR)中具有一种或多种变化的抗体，与不具有此类变化的亲本抗体相比，此类变化引起该抗体对抗原的亲和力的改善。

术语“抗CD3抗体”和“结合CD3的抗体”是指能够以足够亲和力结合CD3，使得该抗体可用作靶向CD3的诊断剂和/或治疗剂的抗体。在一个实施例中，例如通过放射免疫测定(RIA)所测量的，抗CD3抗体与不相关的非CD3蛋白的结合程度小于该抗体与CD3的结合程度的约10％。在某些实施例中，结合CD3的抗体具有解离常数(K_D)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM、或≤0.001nM(例如，10^-8M或更小，例如10^-8M至10^-13M，例如，10^-9M至10^-13M)。在某些实施例中，抗CD3拮抗剂抗体结合至CD3的表位，其在来自不同物种的CD3中是保守的。

除非另外指明，否则如本文所用的术语“分化簇3”或“CD3”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然CD3，所述脊椎动物来源包括诸如灵长类动物(例如，人)和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)，包括，例如，CD3ε、CD3γ、CD3α和CD3β链。该术语涵盖“全长”的、未加工的CD3(例如未处理或未修饰的CD3ε或CD3γ)以及在细胞加工中得到的任何形式的CD3。该术语还涵盖CD3的天然存在变体，例如，剪接变体或等位基因变体。CD3包括例如长度为207个氨基酸的人CD3ε蛋白(NCBI RefSeq No.NP_000724)以及长度为182个氨基酸的人CD3γ蛋白(NCBI RefSeq No.NP_000064)。

术语“抗CD20抗体”和“结合CD20的抗体”是指能够以足够亲和力结合CD20，使得该抗体可用作靶向CD20的诊断剂和/或治疗剂的抗体。在某些实施例中，例如通过放射免疫测定(RIA)所测量的，抗CD20抗体与不相关的非CD20蛋白的结合程度小于该抗体与CD20的结合程度的约10％。在某些实施例中，结合CD20的抗体具有解离常数(Kd)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM、或≤0.001nM(例如，10^-8M或更小，例如10^-8M至10^-13M，例如，10^-9M至10^-13M)。在某些实施例中，抗CD20抗体结合至CD20的表位，其在来自不同物种中的CD20是保守的。

除非另外指明，否则如本文所使用的术语“血管生成素20”或“CD20”是指来自任何脊椎动物来源的任何天然CD20，该脊椎动物包括诸如灵长类动物(例如人)的哺乳动物，以及啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。术语涵盖“全长”的未经加工CD20以及在细胞中加工产生的任何形式的CD20。该术语还涵盖CD20的天然存在变体，例如，剪接变体或等位基因变体。CD20包括例如人CD20蛋白(参见例如NCBI RefSeq Nos.NP_068769.2和NP_690605.1)，其长度为297个氨基酸并且可以例如产生自缺少5'UTR的一部分的变体mRNA转录物(参见，例如，NCBI RefSeq No.NM_021950.3)或更长的变体mRNA转录物(参见，例如，NCBI RefSeqNo.NM_152866.2)。

术语“抗CD20/抗CD3双特异性抗体(anti-CD20/anti-CD3 bispecificantibody)”、“双特异性抗CD20/抗CD3抗体(bispecific anti-CD20/anti-CD3 antibody)”以及“结合到CD20和CD3的抗体(antibody that binds to CD20 and CD3)”或其变体是指能够以足够亲和力结合到CD20和CD3，从而使得该抗体可用作靶向CD20和/或CD3的诊断剂和/或治疗剂的多特异性抗体(例如，双特异性抗体)。在一个实施例中，例如通过放射免疫测定(RIA)所测量的，结合到CD20和CD3的双特异性抗体与不相关的非CD3蛋白和/或非CD20蛋白的结合程度小于该抗体与CD3和/或CD20的结合程度的约10％。在某些实施例中，结合到CD20和CD3的双特异性抗体具有解离常数(Kd)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM、或≤0.001nM(例如，10^-8M或更小，例如10^-8M至10^-13M，例如，10^-9M至10^- ¹³M)。在某些实施例中，结合到CD20和CD3的双特异性抗体与在来自不同物种的CD3之间保守的CD3抗原决定簇和/或在来自不同物种的CD20之间保守的CD20抗原决定簇结合。在一个实施例中，结合到CD20和CD3的双特异性抗体是莫苏妥珠单抗。

如本文所用，术语“莫苏妥珠单抗”是指具有国际非专利药品名称(INN)清单117(WHO药品信息，第31卷，第2期，2017年，第303页)或CAS登记号1905409-39-3的抗CD20/抗CD3双特异性抗体。

如本文所用，术语“结合”、“特异性结合”或“具有特异性”是指可测量和可再现的相互作用，诸如靶标与抗体之间的结合，在存在分子(包括生物分子)的异质群体的存在下，其确定靶标的存在。例如，与靶标(其可以是表位)结合或特异性结合的抗体是与其结合其它靶标相比具有更大亲和力、亲合力、更容易和/或持续时间更长的结合该靶标的抗体。于一个实施例中，例如通过放射免疫测定(RIA)所测得的，抗体与不相关的靶标的结合程度低于抗体与靶标的结合程度的约10％。在某些实施例中，与靶标特异性结合的抗体具有≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM或≤0.1nM的解离常数(K_D)。在某些实施例中，抗体与蛋白上的表位特异性结合，该表位在不同物种的蛋白之间具有保守性。在另一实施例中，特异性结合可以包括但不要求排他结合。如本文所用的术语可例如表现为对靶标具有10^-4M或者10^-5M或更低、或者10^-6M或更低、或者10^-7M或更低、或者10^-8M或更低、或者10^-9M或更低、或者10^-10M或更低、或者10^-11M或更低、或者10^-12M或更低之K_D或在10^-4M至10^-6M或10^-6M至10^-10M或10^-7M至10^-9M范围内的K_D的分子。本领域的技术人员将理解，亲和力与K_D值成反比。对抗原的高亲和力通过低K_D值来测量。在一个实施例中，术语“特异性结合”是指分子结合至特定多肽或特定多肽上的表位而基本上不结合任何其他多肽或多肽表位的结合。

相对于参考多肽序列的“氨基酸序列同一性百分比(％)”，是指在比对候选序列与参考多肽序列并引入空位(如果必要的话)以实现最大的序列一致性百分比之后，并且出于比对的目的在不考虑将任何保守取代作为序列一致性的组成部分的情况下，候选序列中的氨基酸残基与参考多肽序列中的氨基酸残基相同的百分比。用于确定氨基酸序列同一性百分比的比对可以以本领域技术范围内的各种方式实现，例如使用可公开获得的计算机软件，诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或软件。本领域技术人员可确定用于测量比对的适当参数，包括在所比较的序列的全长上实现最大比对所需的任何算法。然而，为了本文的目的，使用序列比较计算机程序ALIGN-2来生成氨基酸序列同一性％的值。ALIGN-2序列比较计算机程序由Genentech,Inc.编写，并且源代码已经与用户文档一起提交到U.S.Copyright Office,Washington D.C.,20559，在那里以美国版权登记号TXU510087注册。ALIGN-2程序可从Genentech,Inc.,South San Francisco,California公开获得，或者可以从源代码编译。ALIGN-2程序应经编译以在UNIX操作系统上使用，操作系统包括数字V4.0D。所有序列比较参数均由ALIGN-2程序设置并且不变。

在采用ALIGN-2进行氨基酸序列比较的情况下，给定氨基酸序列A与给定氨基酸序列B的氨基酸序列同一性％(其可以替代地表达为给定氨基酸序列A具有或包含与给定氨基酸序列B的某一氨基酸序列同一性％)，计算如下：

100乘以分数X/Y

其中X是序列比对程序ALIGN-2在A与B程序比对中评分为同一匹配的氨基酸残基数，Y是B中氨基酸残基的总数。应当理解的是，在氨基酸序列A的长度不等于氨基酸序列B的长度的情况下，A与B的氨基酸序列同一性％将不等于B与A的氨基酸序列同一性％。除非另有特别说明，否则如前一段所述，使用ALIGN-2计算机程序获得本文使用的所有氨基酸序列同一性％。

术语“药物制剂”是指处于允许包含在其中的活性成分的生物活性有效的形式，并且不含对于将被施用制剂的受试者具有不可接受的毒性的另外组分的制剂。

“药用载体”是指药物制剂中除活性成分外的对受试者无毒的成分。药用载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂，或防腐剂。

如本文所用，术语“化疗剂”是指可用于治疗癌症的化合物，癌症为例如CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，复发性或难治性B细胞增殖性病症)，例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL；例如，弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL；例如，里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL；例如，1级FL、2级FL、3级FL(例如3a级FL、3b级FL)或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)或边缘区淋巴瘤(MZL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)，例如复发性或难治性NHL(例如，复发性或难治性DLBCL、复发性或难治性FL、复发性或难治性MCL或边缘区淋巴瘤(MZL))或复发性或难治性CLL)。化疗剂的实例包括EGFR抑制剂(包括小分子抑制剂(例如厄洛替尼(Genentech/OSI Pharm.))；PD 183805(CI 1033，2-丙烯酰胺、N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-，二盐酸盐，辉瑞公司)；ZD1839，吉非替尼(4-(3’-氯-4’-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉，阿斯利康)；ZM 105180((6-氨基-4-(3-甲基苯基-氨基)-喹唑啉，捷利康公司(Zeneca))；BIBX-1382(N8-(3-氯-4-氟-苯基)-N2-(1-甲基-哌啶-4-基)-嘧啶基[5,4-d]嘧啶-2,8-二胺，勃林格殷格翰(Boehringer Ingelheim))；PKI-166((R)-4-[4-[(1-苯乙基)氨基]-1H-吡咯烷酮[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚)；(R)-6-(4-羟苯基)-4-[(1-苯乙基)氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶)；CL-387785(N-[4-[(3-溴苯基)氨基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔酰胺)；EKB-569(N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲基氨基)-2-丁烯酰胺)(惠氏)；AG1478(辉瑞)；AG1571(SU 5271；辉瑞)；以及双重EGFR/HER2酪氨酸激酶抑制剂，诸如拉帕替尼(GSK572016或N-[3-氯-4-[(3氟苯基)甲氧基]苯基]-6[5[[[2甲基磺酰基)乙基]氨基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺))；酪氨酸激酶抑制剂(例如EGFR抑制剂；小分子HER2酪氨酸激酶抑制剂，诸如TAK165(武田)；CP-724,714，ErbB2受体酪氨酸激酶的口服选择性抑制剂(辉瑞和OSI)；优先结合EGFR但同时抑制过表达HER2和EGFR细胞的双重HER抑制剂，诸如EKB-569(商购自惠氏)；PKI-166(诺华公司)；泛HER抑制剂，诸如卡奈替尼(canertinib)(CI-1033；法玛西亚公司(Pharmacia))；Raf-1抑制剂，诸如可从ISIS制药公司获得的抑制Raf-1信号传导的反义剂ISIS-5132；非HER靶向的酪氨酸激酶抑制剂，诸如甲磺酸伊马替尼(可从葛兰素史克公司获得)；多重靶向酪氨酸激酶抑制剂，诸如舒尼替尼(可从辉瑞获得)；VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂，诸如瓦他拉尼(PTK787/ZK222584，可从诺华/先灵公司(Schering AG)获得)；MAPK细胞外调节的激酶I抑制剂CI-1040(法玛西亚公司)；喹唑啉类，诸如PD 153035,4-(3-氯苯胺基)喹唑啉；吡啶并嘧啶类；嘧啶并嘧啶类；吡咯并嘧啶类，例如CGP 59326、CGP 60261和CGP 62706；吡咯并嘧啶类、4-(苯氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶；姜黄素(二氟甲酰甲烷，4,5-双(4-氟苯胺基)邻苯二甲酰亚胺)；含有硝基噻吩部分的酪氨酸酪氨酸；PD-0183805(华纳-兰伯特公司(Warner-Lamber))；反义分子(例如与HER编码核酸结合的分子)；喹噁啉类(美国专利号5,804,396)；酪氨酸磷酸化抑制剂(美国专利号5,804,396)；ZD6474(阿斯利康)；PTK-787(诺华/先灵公司)；泛HER抑制剂，诸如CI-1033(辉瑞)；Affinitac(ISIS 3521；Isis/礼来制药公司(Lilly))；甲磺酸伊马替尼PKI 166(诺华公司)；GW2016(葛兰素史克公司)；CI-1033(辉瑞)；EKB-569(惠氏)；塞马替尼(Semaxinib，辉瑞)；ZD6474(阿斯利康)；PTK-787(诺华/先灵公司)；INC-1C11(Imclone)；和雷帕霉素(西罗莫司，)；蛋白酶体抑制剂，诸如硼替佐米(MillenniumPharm.)；双硫仑；表没食子；盐孢子酰胺A；卡非佐米(carfilzomib)；17-AAG(格尔德霉素(geldanamycin))；根赤壳菌素(radicicol)；乳酸脱氢酶A(LDH-A)；氟维司群(阿斯利康(AstraZeneca))；来曲唑(诺华(Novartis))；非那沙酯(诺华)；奥沙利铂(赛诺菲(Sanofi))；5-FU(5-氟尿嘧啶)；甲酰四氢叶酸(SCH 66336)；索拉非尼(拜耳实验室(BayerLabs))；AG1478，烷基化剂诸如噻替哌(thiotepa)和环磷酰胺；烷基磺酸酯，诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷类，诸如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙亚胺类和甲基蜜胺类，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；番荔枝内酯类(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括拓扑替康和伊立替康)；苔藓抑素；卡利他汀(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；念珠藻素(cryptophycin)(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；肾上腺皮质类固醇(包括泼尼松和泼尼松龙)；醋酸环丙孕酮；5α-还原酶(包括非那雄胺和度他雄胺)；伏立诺他(vorinostat)、罗米地辛(romidepsin)、泛比司他(panobinostat)、丙戊酸、莫西司他(mocetinostat dolastatin)；阿地介白素、滑石、杜卡霉素(包括合成类似KW-2189和CB1-TM1)；五加苷素(eleutherobin)；水鬼蕉碱；匍枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海绵抑素；氮芥类，诸如苯丁酸氮芥、氯苯哌嗪(chlomaphazine)、氯磷酰胺、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、甲氮芥(mechlorethamine)、盐酸甲氧氮芥、美法仑(melphalan)、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼氮芥(prednimustine)、曲洛磷胺(trofosfamide)、乌拉莫司汀(uracil mustard)；亚硝基脲(nitrosourea)，诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲霉素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和拉尼莫斯汀(ranimustine)；抗生素，诸如烯二炔抗生素(例如卡奇霉素(calicheamicin)，尤其是卡奇霉素γ1I和卡奇霉素ω1)；达内霉素(dynemicin)，包括达内霉素A；双磷酸盐，诸如氯膦酸盐(clodronate)；艾司米星(esperamicin)；以及新抑癌菌素(neocarzinostatin)发色团和相关的发色蛋白烯二炔类抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素(actinomycin)、氨茴霉素(authramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、放线菌素(cactinomycin)、卡柔比星(carabicin)、洋红霉素(caminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycinis)、放线菌素D(dactinomycin)、地托比星(detorubicin)、6-叠氮-5-氧代-L-正亮氨酸、吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-吡咯啉合-阿霉素和脱氧阿霉素(deoxydoxorubicin))、表柔比星(epirubicin)、伊索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、马塞罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)，诸如丝裂霉素C、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、甲基丝裂霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链脲佐菌素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，诸如甲氨喋呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨喋呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲蝶呤(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖孢苷(cytarabine)、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，诸如卡普睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolonepropionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素类药物，诸如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛斯坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；倍曲布西(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；亚胺醌(diaziquone)；依洛尼塞(elfomithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃博霉素(epothilone)；乙环氧啶(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidainine)；美登木素生物碱(maytansinoid)，诸如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamnol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基肼；甲基苄肼；多糖铁复合物(JHS天然产物公司(JHS Natural Products))；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；裂裥菌素(sizofuran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺(trichlorotriethylamine)；单端孢霉烯族毒素素(trichothecene，尤其是T-2霉素、维拉库林A(verracurin A)、漆斑菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine))；尿烷(urethan)；长春地碱(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；加西托星(gacytosine)；阿拉伯糖苷(arabinoside)(“Ara-C”)；噻替派(thiotepa)；苯丁酸氮芥(chloranmbucil)；(吉西他滨(gemcitabine))；6-硫鸟嘌呤(thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨喋呤；依托泊苷(etoposide，VP-16)；异环磷酰胺(ifosfamide)；米托蒽醌(mitoxantrone)；诺万隆(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依达曲塞(edatrexate)；柔红霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；卡培他滨(capecitabine，)；伊班膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；维甲酸类(retinoid)，诸如视黄酸(retinoic acid)；以及上述任何一者的药用盐、酸、前药和衍生物。

化疗剂还包括(i)起到调节或抑制激素作用于肿瘤作用的抗激素剂，诸如抗雌激素剂和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(tamoxifen)(包括枸橼酸他莫昔芬(tamoxifen citrate))、雷洛昔芬(raloxifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、碘氧芬(iodoxyfene)、4-羟基他莫昔芬(hydroxytamoxifen)、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和(枸橼酸托瑞米芬(toremifine citrate))；(ii)抑制酶芳香酶的芳香化酶抑制剂，其可调节肾上腺的雌激素产生，例如4(5)-咪唑类(imidazole)、氨基戊二酰亚胺、(醋酸甲地孕酮(megestrol acetate))、(依西美坦(exemestane)；辉瑞)、福美他尼(formestanie)、法曲唑、(伏罗唑)、(来曲唑；诺华)和(阿那曲唑；阿斯利康)；(iii)抗雄激素类，诸如氟他米特(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)；布舍瑞林(buserelin)、曲普瑞林(Tripterelin)、醋酸甲羟孕酮(medroxyprogesterone acetate)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、倍美力(premarin)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、所有反式维甲酸(transretionic acid)、芬维A胺(fenretinide)以及曲沙他滨(troxacitabine，1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是那些抑制受异常细胞增殖牵连的信号传导通路中的基因表达的寡核苷酸，诸如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶，诸如VEGF表达抑制剂(例如，)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，诸如基因疗法疫苗，例如和(ix)生长抑制剂，包括长春花生物碱(vincas)(例如长春新碱和长春碱(vinblastine))、(长春瑞滨(vinorelbine))、紫杉烷类(例如紫杉醇、nab紫杉醇和多西紫杉醇(docetaxel))、拓扑异构酶II抑制剂(例如阿霉素、表柔比星、柔红霉素、依托泊苷和博来霉素)和DNA烷基化剂(例如他莫昔芬、达卡巴嗪、氮芥、顺铂、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶和ara-C)；以及(x)上述任何一者的药用盐、酸、前药和衍生物。

如本文所用，术语“细胞毒性剂”是指对细胞有害(例如，引起细胞死亡、抑制增殖或以其他方式抑制细胞功能)的任何试剂。细胞毒性剂包括但不限于放射性同位素(例如，At²¹¹、I¹³¹、I¹²⁵、Y⁹⁰、Re¹⁸⁶、Re¹⁸⁸、Sm¹⁵³、Bi²¹²、P³²、Pb²¹²和Lu的放射性同位素)；化疗剂；酶及其片段，诸如溶核酶；以及毒素，诸如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶活性毒素，包括其片段和/或变体。示例性细胞毒性剂可以选自抗微管剂、铂配位络合物、烷基化剂、抗生素剂、拓扑异构酶II抑制剂、抗代谢物、拓扑异构酶I抑制剂、激素和激素类似物、信号转导通路抑制剂、非受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂、免疫治疗剂、促凋亡剂、LDH-A抑制剂、脂肪酸生物合成抑制剂、细胞周期信号传导抑制剂、HDAC抑制剂、蛋白酶体抑制剂和癌症代谢抑制剂。在一种情况下，细胞毒性剂是铂基化疗剂(例如，卡铂或顺铂)。在一种情况下，细胞毒性剂是EGFR拮抗剂，例如，N-(3-乙炔基苯基)-6,7-双(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(例如，厄洛替尼)。在一种情况下，细胞毒性剂是RAF抑制剂，例如，BRAF和/或CRAF抑制剂。在一种情况下，RAF抑制剂是维莫非尼(vemurafenib)。在一种情况下，细胞毒性剂是PI3K抑制剂。

术语“PD-1轴结合拮抗剂”是指抑制PD-1轴结合配偶体与其一个或多个结合配偶体的相互作用的分子，以消除由PD-1信号传导轴上的信号传导引起的T细胞功能障碍，其结果是恢复或增强T细胞功能(例如，增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤)。如本文所用，PD-1轴结合拮抗剂包括PD-1结合拮抗剂、PD-L1结合拮抗剂和PD-L2结合拮抗剂。

术语“PD-1结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与其一个或多个结合配偶体(诸如PD-L1、PD-L2)相互作用产生的信号传导的分子。在一些实施例中，PD-1结合拮抗剂为抑制PD-1与其一个或多个结合配偶体结合的分子。在具体方面中，PD-1结合拮抗剂抑制PD-1与PD-L1和/或PD-L2的结合。例如，PD-1结合拮抗剂包括抗PD-1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽以及其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-1与PD-L1和/或PD-L2相互作用产生的信号传导。在一个实施例中，PD-1结合拮抗剂可减少由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的通过PD-1的信号传导所介导的或通过其的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞功能障碍更少(例如，提高效应子对抗原鉴定的应答)。在一些实施例中，PD-1结合拮抗剂为抗PD-1抗体。在具体方面中，PD-1结合拮抗剂为MDX-1106(纳武单抗(nivolumab))。于另一个具体方面中，PD-1结合拮抗剂为帕博利珠单抗(pembrolizumab)(原名派姆单抗(lambrolizumab)(MK-3475))。在另一具体方面中，PD-1结合拮抗剂为AMP-224。在一些实施例中，PD-1结合拮抗剂为MDX-1106(纳武单抗(nivolumab))。在一些实施例中，PD-1结合拮抗剂为MK-3475(帕博利珠单抗)。在一些实施例中，PD-1结合拮抗剂为MED1-0680。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为PDR001(斯巴达珠单抗(spartalizumab))。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为REGN2810(西米单抗(cemiplimab))。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为BGB-108。在其他情况下，PD-1结合拮抗剂为普罗格单抗(prolgolimab)、卡瑞利珠单抗(camrelizumab)、信迪利单抗(sintilimab)、替雷利珠单抗(tislelizumab)或特瑞普利单抗(toripalimab)。

PD-1轴结合拮抗剂的更多实例包括西米单抗、普罗格单抗、卡瑞利珠单抗、信迪利单抗、替雷利珠单抗、特瑞普利单抗、多塔利单抗、Retifanlimab、斯巴达珠单抗、萨善利单抗、派安普利单抗、CS1003、HLX10、SCT-I10A、SHR-1316、CS1001、恩沃利单抗、TQB2450、ZKAB001、LP-002、赛帕利单抗、巴替利单抗、Genolimzumab、BI 754091、Cetrelimab、YBL-006、BAT1306、HX008、CX-072、IMC-001、KL-A167、Budigalimab、CX-188、JTX-4014、609A、Sym021、LZM009、F520、SG001、APL-502、Cosibelimab、lodapolimab、GS-4224、INCB086550、FAZ053、TG-1501、BGB-A333、BCD-135、AK-106、LDP、GR1405、HLX20、MSB2311、MAX-10181、RC98、BION-004、AM0001、CB201、ENUM 244C8、ENUM 388D4、AUNP-012、STI-1110、ADG104、AK-103、LBL-006、hAb21、AVA-004、PDL-GEX、INCB090244、KD036、KY1003、LYN192、MT-6035、VXM10、YBL-007、ABSK041、GB7003、JS-003和HS-636。

术语“PD-L1结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与其一个或多个结合配偶体(诸如PD-1或B7-1)相互作用产生的信号传导的分子。在一些实施例中，PD-L1结合拮抗剂是抑制PD-L1与其结合配偶体结合的分子。在具体方面中，PD-L1结合拮抗剂抑制PD-L1与PD-1和/或B7-1的结合。在一些实施例中，PD-L1结合拮抗剂包括抗PD-L1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L1与其一个或多个结合配偶体(诸如PD-1或B7-1)相互作用产生的信号传导的分子。在一个实施例中，PD-L1结合拮抗剂可减少由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的通过PD-L1的信号传导所介导的或通过其的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞功能障碍更少(例如，提高效应子对抗原鉴定的应答)。在一些实施例中，PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1抗体。在一个具体实施例中，抗PD-L1抗体是阿托珠单抗(CAS登记号：1422185-06-5)，也称为MPDL3280A，并在本文中描述。在另一个具体实施例中，抗PD-L1抗体是本文所述的MDX-1105。在又一个具体方面中，抗PD-L1抗体是本文所述的MEDI4736。

如本文所用，术语“阿托珠单抗(atezolizumab)”是指具有国际非专利药品名称(INN)清单112(WHO药品信息，第28卷，第4期，2014年，第488页)或CAS登记号1380723-44-3的抗PD-L1拮抗剂抗体。

术语“PD-L2结合拮抗剂”是指减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与其一个或多个结合配偶体(诸如PD-1)的相互作用产生的信号传导的分子。在一些实施例中，PD-L2结合拮抗剂为抑制PD-L2与其一个或多个结合配偶体结合的分子。在具体方面中，PD-L2结合拮抗剂抑制PD-L2与PD-1的结合。在一些实施例中，PD-L2拮抗剂包括抗PD-L2抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他减少、阻断、抑制、消除或干扰由PD-L2与其一个或多个结合配偶体(诸如PD-1)的相互作用引起的信号传导的分子。在一个实施例中，PD-L2结合拮抗剂可减少由T淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导的通过PD-L2的信号传导所介导的或通过其的负共刺激信号，从而使功能障碍的T细胞功能障碍更少(例如，提高效应子对抗原鉴定的应答)。在一些实施例中，PD-L2结合拮抗剂为免疫粘附素。

术语“包装插页”用于指治疗用产品的商业包装中通常包括的说明书，其含有涉及此类治疗用产品的使用的有关适应症、用法、剂量、施用、联合疗法、禁忌症和/或警告的信息。

III.治疗方法

本文提供了治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症，例如NHL(例如DLBCL或FL)或CLL)的受试者的方法，此类方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体。在一些情况下，第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，并且第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)。在一些情况下，C1D1不大于C1D2且小于C1D3，并且C1D2不大于C1D3。在一些情况下，C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、从约4mg至约6mg；例如，约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如，约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如，约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，本文提供的方法包括治疗患有CLL的受试者，其中该治疗包含以包含0.1mg的C1D1的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体。

本文还提供了治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症，例如NHL(例如DLBCL或FL)或CLL)的受试者群体的方法，此类方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体。在一些情况下，第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，并且第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)。在一些情况下，C1D1不大于C1D2且小于C1D3，并且C1D2不大于C1D3。在一些情况下，C1D1为从约0.1mg至约10mg(例如，从约0.1mg至约7mg、从约0.2mg至约10mg、从约0.5mg至约10mg、从约1mg至约9mg、从约2mg至约8mg、从约3mg至约7mg、或从约4mg至约6mg；例如，约5mg)，C1D2为从约5mg至约80mg(例如，从约20mg至约75mg、从约25mg至约75mg、从约30mg至约75mg、从约35mg至约75mg、或从约40mg至约75mg；例如，约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，且C1D3为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如，约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，本文提供的方法包括治疗患有CLL的受试者群体，其中该治疗包含以包含0.1mg的C1D1的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体。

A.抗CD20/抗CD3双特异性抗体的给药治疗方法

本发明提供了治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1LDLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)的受试者的方法，此类方法包括例如在分次、剂量递增给药方案或例如在第一给药周期中的分次递增给药方案向受试者施用抗CD20/抗CD3双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)。在一些情况下，本发明方法用于治疗患有复发性和/或难治性NHL(例如，侵袭性NHL(例如，复发性和/或难治性DLBCL、或复发性和/或难治性FL))的受试者。在一些情况下，在治疗完成后的持续时间中具有至少6个月的有记录的反应历史(例如，完全缓解或部分缓解)为受试者对一种或多种(例如，一种、两种、三种或更多种)既往疗法(例如，一种或多种前线系统性疗法，例如一种或多种前线系统性化学疗法(例如，一种或多种涉及施用蒽环类药物的前线系统性疗法)、一种或多种既往干细胞疗法、或一种或多种既往CAR-T细胞疗法)为复发的。在一些情况下，受试者对任何既往疗法都难治(例如，对既往疗法没有反应，或在完成最后一剂疗法后的6个月内出现进展)。因此，在一些实施例中，本给药方案是二线(2L)疗法。在一些实施例中，本给药方案是三线(3L)疗法。在一些实施例中，受试者患有转化FL，其对于转化FL的标准疗法是难治的。在一些实施例中，FL是分级FL(例如，1级FL、2级FL、3a级FL或3b级FL)。在一些实施例中，本方法用于治疗患有非复发性和非难治性NHL的受试者，并且本给药方案是一线(1L)疗法。

在一些情况下，本发明涉及治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤、或PMLBCL)或CLL)的受试者，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；和(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(例如，从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，C1D1小于C1D2。在一些情况下，C1D1在量上约等于C1D3。在一些情况下，C1D1为约2mg至约8mg(例如约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约10mg至约75mg(例如，约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约20mg至约75mg(例如，约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)；并且C2D1为约20mg至约75mg(例如，约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)。在特定实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，并且C1D3为约45mg。在其他实施例中，C2D1为约45mg；C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。在其他实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约10mg，C1D3为约30mg，并且C2D1为约30mg。在其他实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约40mg，并且C2D1为约40mg。在又一些其他实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。在又一些其他实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。

在一些情况下，C1D1等于C1D2(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg或60mg，并且C2D1为约45mg或60mg)。

在其他情况下，C1D2等于C1D3(例如，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg或60mg，C1D3为约45mg或60mg，并且C2D1为约45mg或60mg)。在一些情况下，该方法包括在C1D1之后约七天向受试者施用C1D2。在一些情况下，该方法包括在C1D2之后约七天向受试者施用C1D3。在一些情况下，该方法包括在C1D3之后约七天向受试者施用C2D1。例如，在本发明的一些实施例中，该方法包括分别在或约在该第一给药周期的第1天、第8天和第15天向该受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。在一些情况下，该方法包括在第二给药周期的第1天向受试者施用C2D1。在一些情况下，第一给药周期和第二给药周期是21天给药周期。在一些情况下，第一给药周期是21天给药周期并且第二给药周期是28天给药周期。替代性地，在一些情况下，第一给药周期和第二给药周期是28天给药周期。

在一些情况下，本发明涉及治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL)、DLBCL(例如，1L DLBCL)、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤、或PMLBCL)或CLL)的受试者，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不低于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg。第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。在一些情况下，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg或约45mg。在一些情况下，第一给药周期和第二给药周期是21天给药周期(例如，其中C1D1、C1D2和C1D3分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天和第15天施用，并且C2D1在第二给药周期的第1天施用的21天给药周期)。在一些情况下，第一给药周期是21天给药周期并且第二给药周期是28天给药周期。在一些情况下，第一给药周期和第二给药周期是28天给药周期。

在一些情况下，本发明涉及治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL)、DLBCL(例如，1L DLBCL)、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤，或PMLBCL)或CLL)的受试者，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含在第一给药周期的第1天的双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天的双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)和在第一给药周期的第15天的双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg。第二给药周期包含在第二给药周期的第1天的双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。31.在一些情况下，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C1D2为约15mg。在一些实施例中，C1D2为约45mg。

在一些情况下，额外给药周期中的每一者是21天给药周期。在一些情况下，第一给药周期是21天给药周期并且第二给药周期是28天给药周期。替代性地，额外给药周期中的每一者是28天给药周期。

在一些情况下，该一个或多个额外给药周期中的每一者包含双特异性抗体的单次皮下剂量，例如在一个或多个额外给药周期中的每一者的第1天的单次皮下剂量。

在特定情况下，本文提供一种治疗患有DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一21天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；和(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。第二21天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，该方法包括在C1D1之后约七天向受试者施用C1D2。在一些情况下，该方法包括在C1D2之后约七天向受试者施用C1D3。在一些情况下，该方法包括在C1D3之后约七天向受试者施用C2D1。在一些情况下，该方法包括分别在或约在第一给药周期的第1天、第8天和第15天向受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。

在其他情况下，本文提供一种治疗患有FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL或转化FL)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一28天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一28天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.5mg至约10mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。第二28天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

在其他情况下，本文提供一种治疗患有FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL或转化FL)的受试者的方法，该方法包括以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一21天给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.5mg至约10mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。第二28天给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

在一些情况下，C1D1小于C1D2。在一些情况下，C1D2在量上约等于C1D3。在一些情况下，C1D1为约2mg至约8mg(例如约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约10mg至约75mg(例如，约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约20mg至约75mg(例如，约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)；并且C2D1为约20mg至约75mg(例如，约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)。在特定实施例中，C1D1为约5mg。在一些实施例中，C1D3为约25mg至约75mg。在一些实施例中，C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C2D1为从约40mg至约75mg。在一些实施例中，C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。在一些实施例中，C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、或约60mg。在一些情况下，(a)C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；(b)C1D1为约5mg，C1D2为约10mg，C1D3为约30mg，并且C2D1为约30mg；(c)C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；(d)C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约40mg，并且C2D1为约40mg；(e)C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg；或(f)C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约60mg，并且C2D1为约60mg。

在特定实施例中，C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。在一些实施例中，C1D1等于C1D2，例如C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg或约60mg，并且C2D1为约45mg或约60mg。

在其他情况下，C1D2等于C1D3，例如C1D1为约5mg，C1D2为约45mg或约60mg，C1D3为约45mg或约60mg，并且C2D1为约45mg或约60mg。

在一些情况下，该方法包括在第二给药周期的第1天向受试者施用C2D1。

在一些情况下，给药方案包括一个或多个额外给药周期(除第二给药周期外的额外给药周期)(例如，两个或更多个、三个或更多个、四个或更多个、五个或更多个、六个或更多个、七个或更多个、八个或更多个、九个或更多个、10个或更多个、11个或更多个、12个或更多个、13个或更多个、14个或更多个、15个或更多个、16个或更多个、或17个或更多个额外给药周期，例如一个、两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个或17个额外给药周期)。在某些情况下，给药方案包括八至17个额外给药周期(例如，总计10-19个给药周期)。在某些情况下，给药方案包括六至15个额外给药周期(例如，总计八至17个给药周期)。

本发明还提供了通过根据本文所述的任何给药方案向一个或多个受试者施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)来治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法。在一些情况下，本文提供一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤、或PMLBCL)或CLL)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者中的一者或多者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(例如约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、约20mg至约100mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)。第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(例如，约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、约20mg至约100mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)。

在一些情况下，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL)、DLBCL(例如，1L DLBCL)、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤，或PMLBCL)或CLL)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg。在一些情况下，第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

在一些情况下，本发明的特征在于一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL)、DLBCL(例如，1L DLBCL)、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤，或PMLBCL)或CLL)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含在第一给药周期的第1天的双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天的双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)和在第一给药周期的第15天的双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg。在一些情况下，第二给药周期包含在第二给药周期的第1天的双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

在一些情况下，本发明提供一种治疗患有DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者中的一者或多者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。在一些情况下，第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

在其他情况下，本发明提供了一种治疗患有FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)的受试者群体的方法，该方法包括以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，其中第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、或约40mg至约100mg、或约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为从约10mg至约300mg(从约25mg至约300mg、从约50mg至约300mg、从约100mg至约300mg、从约200mg至约300mg、从约50mg至约250mg、从约100mg至约250mg、从约100mg至约200mg、从约10mg至约250mg、从约10mg至约200mg、从约10mg至约180mg、从约10mg至约160mg、从约10mg至约150mg、从约10mg至约140mg、从约20mg至约130mg、从约30mg至约120mg、或从约40mg至约100mg、或从约25mg至约75mg；例如约30mg、约45mg、或约60mg)。

本文提供的给药方案还可以降低患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如，B细胞增殖性病症(例如，NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL)、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤，或PMLBCL)或CLL)的受试者群体中的某些不良事件的比率。例如，在一些情况下，本发明包括降低患有CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症(例如NHL(例如，既往未治疗的(1L)NHL、DLBCL(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、FL(例如，1L FL、复发性和/或难治性Fl、或转化FL)、MCL、高级别B细胞淋巴瘤或PMLBCL)或CLL)的受试者群体中的某些不良事件的比率的方法，此类受试者被施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体(例如，莫苏妥珠单抗)，该方法包括使用分步给药方案皮下施用双特异性抗体，其中与在统一给药(即，不是逐步给药)情况下静脉内施用双特异性抗体的受试者参考群体或皮下施用双特异性抗体的受试者参考群体相比，受试者群体中的不良事件的比率降低。在一些情况下，分步给药方案至少包括第一给药周期和第二给药周期，其中：(a)第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1不大于C1D2且小于C1D3；(ii)C1D2不大于C1D3；并且(iii)C1D1为约0.1mg至约10mg(例如，约0.1mg至约7mg、约0.2mg至约10mg、约0.5mg至约10mg、约1mg至约9mg、约2mg至约8mg、约3mg至约7mg、约4mg至约6mg；例如约5mg)，C1D2为约5mg至约80mg(例如约20mg至约75mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、或约75mg)，并且C1D3为约10mg至约300mg(例如约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、约20mg至约100mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)，并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体之单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3且为约10mg至约300mg(例如约25mg至约300mg、约50mg至约300mg、约100mg至约300mg、约200mg至约300mg、约50mg至约250mg、约100mg至约250mg、约100mg至约200mg、约10mg至约250mg、约10mg至约200mg、约10mg至约180mg、约10mg至约160mg、约10mg至约150mg、约10mg至约140mg、约20mg至约130mg、约30mg至约120mg、约40mg至约100mg、约20mg至约100mg、约25mg至约75mg、约30mg至约75mg、约35mg至约75mg、或约40mg至约75mg；例如约45mg)。

在一些情况下，分步给药方案至少包括第一给药周期和第二给药周期，其中：(a)第一给药周期包含双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)、以及第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg；(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

在一些情况下，分步给药方案包括：至少第一给药周期和第二给药周期，其中(a)第一给药周期包含在第一给药周期的第1天双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在第一给药周期的第8天双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)、以及在第一给药周期的第15天双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中(i)C1D1为约5mg，(ii)C1D2不小于C1D1且不大于C1D3；并且(iii)C1D3为约45mg；并且(b)第二给药周期包含在第二给药周期的第1天双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

本文所述的任何方法可包括监测受试者的细胞因子释放综合征(CRS)，例如在开始上述任何方法后的CRS事件。目前的临床管理侧重于治疗个体体征和症状，从而提供支持性护理，并尝试使用高剂量皮质类固醇来抑制炎症反应。然而，该方法并非总是成功的，尤其在后期干预的情况下。本文所述方法使用的CRS分级标准由美国移植和细胞治疗学会(ASTCT)发布，用于定义轻度、中度、重度或危及生命的CRS，并协调跨临床试验的报告，以便快速鉴定和治疗CRS(Lee等人，Biology of Blood and Marrow Transplantation.25(4):625-638,2019)。ASTCT标准旨在客观、易于应用，并且更准确地对CRS的严重程度进行分类。此修订后的CRS分级系统示于下表1中。

表1.CRS分级系统

ASTCT＝美国移植和细胞治疗学会；BiPAP＝双相气道正压；CPAP＝持续气道正压通气；CRS＝细胞因子释放综合征；CTCAE＝不良事件通用术语标准。

发烧被定义为体温≥38℃，不能归因于任何其他原因。在患有CRS的受试者随后接受解热或抗细胞因子疗法(例如托珠单抗或类固醇)时，不再需要发烧来对后续的CRS严重程度进行分级。在此种情况下，CRS分级由低血压和/或缺氧决定。

CRS等级由不能归因于任何其他原因的更严重的事件：低血压或缺氧决定。例如，体温为39.5℃、低血压需要1种血管加压药并且缺氧需要低-流量鼻插管的受试者被归类为3级CRS。

低流量鼻插管被定义为以≤6L/分钟的速度输送氧气。低流量还包括通过氧气输送吹气-，有时用于儿科。高-流量鼻插管被定义为以>6L/分钟输送氧气。

CRS与多种细胞因子的升高有关，包括IFN-γ、IL-6和TNF-α含量的显著升高。新出现的证据表明IL-6特别是作为CRS的中心介质。IL-6是由多种细胞类型产生的促炎性多功能细胞因子，其已被证明参与多种生理过程，包括T细胞活化。无论激发剂如何，CRS都与高IL-6含量相关(Nagorsen等人，Cytokine.25(1):31-5,2004；Lee等人，Blood.124(2):188-95,2014)；Doesegger等人，Clin.Transl.Immunology.4(7):e39,2015)，并且IL-6与CRS的严重程度相关，与未经历CRS或经历较轻CRS(0-3级)的受试者相比较，经历4级或5级CRS事件的受试者患有更高的IL-6含量(Chen等人，J.Immunol.Methods.434:1-8,2016)。

因此，使用抑制IL-6介导的信号传导的药剂阻断IL-6的炎症应答，以管理在两步分级、剂量递增给药方案期间在受试者中观察到的CRS，此种阻断是类固醇治疗的替代方案，该类固醇治疗将不期望负面影响T细胞功能或降低抗CD20/抗CD3双特异性抗体疗法在治疗CD20阳性细胞增殖性病症(例如B细胞增殖性病症)中的疗效或临床益处。

托珠单抗是重组人源化抗人单克隆抗体，针对可溶性和膜结合IL-6R，其抑制IL-6介导的信号传导(参见，例如，WO 1992/019579，其全文以引用方式并入本文)。

如果受试者在施用双特异性抗体后发生细胞因子释放综合征(CRS)事件，则该方法可进一步包括向受试者施用有效量的介白素6受体(IL-6R)拮抗剂(例如抗IL-6R抗体，例如托珠单抗来管理事件。在一些情况下，托珠单抗以约8mg/kg的单次剂量经静脉向受试者施用。在一些情况下，每剂托珠单抗不超过800mg/剂。可替代或与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利姆单抗(sarilumab)、沃巴利珠单抗(vobarilizumab)(ALX-0061)、萨特利珠单抗satralizumab)(SA-237)及其变体。

如果受试者具有在施用IL-6R拮抗剂以治疗CRS事件的症状24小时内没有消退或恶化的CRS事件，则该方法可以进一步包括向受试者施用一个或多个另外的剂量的IL-6R拮抗剂(例如抗IL-6R抗体，例如托珠单抗)来管理CRS事件。如果CRS事件未通过施用IL-6R拮抗剂来管理，则可以向受试者施用皮质类固醇，诸如甲基泼尼松龙或地塞米松。

CRS事件的管理可以根据CRS的阶段和合并症的存在进行定制。例如，如果受试者在施用双特异性抗体后不存在合并症或存在最小合并症的情况下患有2级细胞因子释放综合征(CRS)事件，则该方法可以进一步包括治疗2级CRS事件的症状同时暂停用双特异性抗体进行治疗。如果随后至少连续三天2级CRS事件解决为≤1级CRS事件，则该方法可以进一步包括在不改变剂量的情况下恢复用双特异性抗体进行治疗。另一方面，如果2级CRS事件在治疗2级CRS事件的症状的24小时内未消退或恶化为≥3级CRS事件，则该方法可进一步包括向受试者施用有效量的介白素6受体(IL-6R)拮抗剂(例如抗IL-6R抗体，例如托珠单抗)来管理2级或≥3级CRS事件。在一些情况下，托珠单抗以约8mg/kg的单次剂量经静脉向受试者施用。在一些情况下，每剂托珠单抗不超过800mg/剂。可替代或与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利姆单抗(sarilumab)、沃巴利珠单抗(vobarilizumab)(ALX-0061)、萨特利珠单抗satralizumab)(SA-237)及其变体。

如果在施用双特异性抗体后受试者在存在广泛合并症的情况下患有2、3或4级CRS事件，则该方法可以进一步包括本领域理解的减轻CRS事件的方法，诸如向受试者施用第一剂量的IL-6R拮抗剂(例如抗IL-6R抗体，例如托珠单抗)以管理CRS事件，同时暂停用双特异性抗体进行治疗。可替代或与托珠单抗组合使用的其他抗IL-6R抗体包括沙利姆单抗、沃巴利珠单抗(ALX-0061)、萨特利珠单抗(SA-237)及其变体。在一些情况下，该方法进一步包括向受试者施用有效量的皮质类固醇，诸如甲基泼尼松龙或地塞米松。

在一些情况下，本发明的给药方案导致受试者群体的中位无进展生存期(PFS)大于约一个月(例如，至少约1.5个月、至少约2个月、至少约2.5个月、至少约3个月、至少约3.5个月或更多；例如，约1个月至约5个月、约1个月至约4个月、约1个月至约3个月、约1个月至约2个月、约3个月至约5个月、约2个月至约4个月、约2个月至约5个月或约2个月至约3个月；例如约1个月、约1.5个月、约2个月、约2.5个月、约3个月、约3.5个月、约4个月或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致受试者群体的中位无进展生存期(PFS)大于约四个月(例如，至少约4.5个月、至少约5个月、至少约5.5个月、至少约6个月、至少约6.5个月、至少约7个月、至少约7.5个月、至少约8个月、至少约8.5个月、至少约9.0个月、至少约9.5个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月、至少约54个月、或更多；例如，约4至约60个月、约8至约60个月、约12至约60个月、约24至约60个月、约48至约60个月、约4至约48个月、约4至约24个月、约4至约18个月、约4至约12个月，约4至约8个月、约8至约24个月、约8至约18个月、约8至约12个月、约4至约6个月、约6至约8个月、约6至约12个月、或约6至约10个月；例如，约4.5个月、约5个月、约5.5个月、约6个月、约6.5个月、约7个月、约7.5个月、约8个月、约8.5个月、约9.0个月、约9.5个月、约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有FL(例如复发性和/或难治性FL)的受试者群体的中位PFS大于约四个月(例如，至少约4.5个月、至少约5个月、至少约5.5个月、至少约6个月、至少约6.5个月、至少约7个月、至少约7.5个月、至少约8个月、至少约8.5个月、至少约9.0个月、至少约9.5个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月、至少约54个月、或更多；例如，约4至约60个月、约8至约60个月、约12至约60个月、约24至约60个月、约48至约60个月、约4至约48个月、约4至约24个月、约4至约18个月、约4至约12个月，约4至约8个月、约8至约24个月、约8至约18个月、约8至约12个月、约4至约6个月、约6至约8个月、约6至约12个月、或约6至约10个月；例如，约4.5个月、约5个月、约5.5个月、约6个月、约6.5个月、约7个月、约7.5个月、约8个月、约8.5个月、约9.0个月、约9.5个月、约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS大于约一个月(例如，至少约1.5个月、至少约2个月、至少约2.5个月、至少约3个月、至少约3.5个月或更多；例如，约1个月至约5个月、约1个月至约4个月、约1个月至约3个月、约1个月至约2个月、约3个月至约5个月、约2个月至约4个月、约2个月至约5个月或约2个月至约3个月；例如约1个月、约1.5个月、约2个月、约2.5个月、约3个月、约3.5个月、约4个月或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的PFS大于约四个月(例如，至少约4.5个月、至少约5个月、至少约5.5个月、至少约6个月、至少约6.5个月、至少约7个月、至少约7.5个月、至少约8个月、至少约8.5个月、至少约9.0个月、至少约9.5个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月、至少约54个月、或更多；例如，约4至约60个月、约8至约60个月、约12至约60个月、约24至约60个月、约48至约60个月、约4至约48个月、约4至约24个月、约4至约18个月、约4至约12个月，约4至约8个月、约8至约24个月、约8至约18个月、约8至约12个月、约4至约6个月、约6至约8个月、约6至约12个月、或约6至约10个月；例如，约4.5个月、约5个月、约5.5个月、约6个月、约6.5个月、约7个月、约7.5个月、约8个月、约8.5个月、约9.0个月、约9.5个月、约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS大于约一个月(例如，至少约1.5个月、至少约2个月、至少约2.5个月、至少约3个月、至少约3.5个月或更多；例如，约1个月至约5个月、约1个月至约4个月、约1个月至约3个月、约1个月至约2个月、约3个月至约5个月、约2个月至约4个月、约2个月至约5个月或约2个月至约3个月；例如约1个月、约1.5个月、约2个月、约2.5个月、约3个月、约3.5个月、约4个月或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约1个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约1.5个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约2个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约2.5个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约3个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS大于约6.3月(例如，至少约6.5个月、至少约6.7个月、至少约7个月、至少约7.3个月、至少约7.5个月、至少约8个月、至少约8.5个月、至少约9.0个月、至少约9.5个月、至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月、至少约54个月、或更多；例如，在约6个月和约48个月之间、在约6个月和36个月之间、在约6个月和约24个月之间、在约6个月和约12个月之间、在约6个月和约10个月之间；在约6个月和约8个月之间、在约8个月和约24个月之间、在约12个月和约24个月之间或在约8个月和约16个月之间；例如，约6.3个月、约6.5个月、约7个月、约7.5个月、约8个月、约8.5个月、约9.0个月、约9.5个月、约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约6.7个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约7.3个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位PFS为至少约8.0个月。

在一些情况下，本发明的给药方案导致受试者群体的中位总生存期(OS)大于约9.5个月(例如，至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月，至少约54个月、或更多；例如，在约9个月与约48个月之间、在约9个月与约36个月之间、在约9个月与约24个月之间、在约9个月与约12个月、在约10个月与约18个月之间；在约12个月与约24个月之间、在约18个月与约36个月之间、在约12个月与约36个月之间、或在约24个月与约48个月之间；例如，约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有FL(例如复发性和/或难治性FL)的受试者群体的中位OS大于约9.5个月(例如，至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月，至少约54个月、或更多；例如，在约9个月与约48个月之间、在约9个月与约36个月之间、在约9个月与约24个月之间、在约9个月与约12个月、在约10个月与约18个月之间；在约12个月与约24个月之间、在约18个月与约36个月之间、在约12个月与约36个月之间、或在约24个月与约48个月之间；例如，约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位OS大于约9.5个月(例如，至少约10个月、至少约11个月、至少约12个月、至少约13个月、至少约14个月、至少约15个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月，至少约54个月、或更多；例如，在约9个月与约48个月之间、在约9个月与约36个月之间、在约9个月与约24个月之间、在约9个月与约12个月、在约10个月与约18个月之间；在约12个月与约24个月之间、在约18个月与约36个月之间、在约12个月与约36个月之间、或在约24个月与约48个月之间；例如，约10个月、约11个月、约12个月、约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位OS大于约12.5个月(例如，至少约13个月、至少约14个月、至少约14.6个月、至少约15个月、至少约15.8个月、至少约16个月、至少约17个月、至少约17.3个月、至少约18个月、至少约20个月、至少约24个月、至少约30个月、至少约36个月、至少约42个月、至少约48个月，至少约54个月、或更多；例如，在约13个月与约48个月之间、在约13个月与约36个月之间、在约13个月与约24个月之间、在约16个月与约60个月、在约24个月与约36个月之间；在约12个月与约24个月之间、在约18个月与约36个月之间、在约24个月与约36个月之间、或在约24个月与约48个月之间；例如，约13个月、约14个月、约15个月、约16个月、约17个月、约18个月、约20个月、约24个月、约30个月、约36个月、约42个月、约48个月、约54个月或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位OS大于约14.6个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位OS大于约15.8个月。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体的中位OS大于约17.3个月。

在一些情况下，本发明的给药方案导致受试者群体中的完全缓解(CR)率为至少约10％(例如，至少约11％、至少约12％、至少约13％、至少约14％、至少约15％、至少约16％、至少约17％、至少约18％、至少约19％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％或更多；例如，约10％至约40％、约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约10％至约30％、约15％至约30％、约20％至约40％、或更多；例如，约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％，约18％、约19％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致受试者群体中的CR率为至少约42％(例如，至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或更多；例如，约42％至约45％、约45％至约50％、约50％至约55％、约55％至约60％、约60％至约65％、约65％至约70％、约70％至约75％或更多；例如，约42％、约45％、约50％、约55％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有FL(例如，1L FL或复发性和/或难治性FL)的受试者群体中的CR率为至少约20％(例如，至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％或更多；例如，约20％至约50％、约20％至约30％、约30％至约40％、约40％至约50％、约20％至约40％、约30％至约50％或更多；例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约45％、约50％或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有FL(例如，1L FL或复发性和/或难治性FL)的受试者群体中的CR率为至少约55％(例如，至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或更多；例如，约55％至约60％、约60％至约65％、约65％至约70％、约70％至约75％或更多；例如约42％、约45％、约50％、约55％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或更多)。在一具体实施例中，患有R/R FL的受试者群体的完全缓解率在约45％至约50％之间。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的完全缓解(CR)率为至少约10％(例如，至少约11％、至少约12％、至少约13％、至少约14％、至少约15％、至少约16％、至少约17％、至少约18％、至少约19％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％或更多；例如，约10％至约40％、约10％至约20％、约20％至约30％、约30％至约40％、约10％至约30％、约15％至约30％、约20％至约40％、或更多；例如，约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％，约18％、约19％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约42％(例如，至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或更多；例如，约42％至约45％、约45％至约50％、约50％至约55％、约55％至约60％、约60％至约65％、约65％至约70％、约70％至约75％或更多；例如，约42％、约45％、约50％、约55％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或更多)。

在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约50％(例如，至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约65％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、或更多，例如，50％至55％、55％至60％、60％至65％、65％至70％、70％至75％、或更多，例如约42％、约45％、约50％、约55％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、或更多)。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约15％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约20％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约25％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约30％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约35％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约40％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约45％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约50％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约55％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约60％。在一些情况下，本发明的给药方案导致患有DLBCL(例如，1L DLBCL或复发性和/或难治性DLBCL)的受试者群体中的CR率为至少约65％。

在一些实施例中，受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％(例如，至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、或更多；例如，在34％-95％之间、在34％-85％之间、在34％-75％之间、在34％-65％之间、在34％-55％、在35％-60％之间、在35％-75％之间、在55％-95％之间、在75％-95％之间、在40％-50％之间、在45％-64％之间、在34％-45％之间或在34％-40％之间；例如约34％、约35％、约36％、约37％、约38％、约39％、约40％、约41％、约42％、约43％、约44％、约45％、约46％、约47％、约48％、约49％、约50％、约51％、约52％、约53％、约54％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、或约95％)。在一些实施例中，客观缓解率为至少44％。在一些实施例中，客观缓解率在35％-55％之间。在一些实施例中，客观缓解率为约45％。B.结合到CD20和CD3的双特异性抗体

本发明提供结合到CD20和CD3的双特异性抗体(即抗CD20/抗CD3抗体)，其用于治疗CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或难治性FL、或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

在一些情况下，本发明提供一种双特异性抗体，其包括抗CD20臂，该抗CD20臂具有选自以下各项的至少一个、两个、三个、四个、五个、或六个高变区(HVR)的第一结合域：(a)HVR-H1，其包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含VVYYSNSYWYFDV(SEQID NO:3)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含APSNLAS(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；以及(f)HVR-L3，其包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含分别包含SEQ ID NO:17-20的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，和/或分别包含SEQ ID NO:21-24的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一者(例如1、2、3或4者)。在一些情况下，双特异性抗体包含抗CD20臂，该抗CD20臂包含第一结合域，该第一结合域包含(a)重链可变(VH)域，其包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:7的氨基酸序列；(b)轻链可变(VL)域，其包含与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:8的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。因此，在一些情况下，第一结合域包含：VH域，其包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列；以及VL域，其包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列。

在一些情况下，本发明提供一种双特异性抗体，其包括抗CD3臂，该抗CD3臂具有选自以下各项的至少一个、两个、三个、四个、五个、或六个HVR的第二结合域：(a)HVR-H1，其包含NYYIH(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含DSYSNYYFDY(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；以及(f)HVR-L3，其包含TQSFILRT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含分别包含SEQ ID NO:25-28的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，和/或分别包含SEQ ID NO:29-32的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一者(例如1、2、3或4者)。在一些情况下，双特异性抗体包含抗CD3臂，该抗CD3臂包含第二结合域，该第二结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ ID NO:15的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:15的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ ID NO:16的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:16的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。因此，在一些情况下，第二结合域包含：VH域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列；以及VL域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。

在一些情况下，本发明提供一种双特异性抗体，其包括(1)具有第一结合域的抗CD20臂，该第一结合域包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个HVR，其选自(a)包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ IDNO:2)的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含VVYYSNSYWYFDV(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含APSNLAS(SEQ IDNO:5)的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列的HVR-L3；以及(2)具有第二结合域的抗CD3臂，该第二结合域包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个HVR，其选自(a)包含NYYIH(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含DSYSNYYFDY(SEQ IDNO:11)的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含WASTRES(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含TQSFILRT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列的HVR-L3。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含(1)分别包含SEQ ID NO:17-20的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，和/或分别包含SEQ ID NO:21-24的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，以及(2)分别包含SEQ ID NO:25-28的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，和/或分别包含SEQ ID NO:29-32的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3和FR-L4中的至少一者(例如1、2、3或4者)。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含(1)抗CD20臂，该臂包含第一结合域，该第一结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:7的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:8的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域和如(b)中的VL域；以及(2)抗CD3臂，该臂包含第二结合域，该第二结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ ID NO:15的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:15的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ ID NO:16的氨基酸序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列或SEQ ID NO:16的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含(1)第一结合域，该第一结合域包含VH域，其包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列，以及VL域，其包含SEQ ID NO:8的氨基酸序列，以及(2)第二结合域，该第二结合域包含VH域，其包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列，以及VL域，其包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。

在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体是莫苏妥珠单抗，具有国际非专利药品名称(INN)清单117(WHO药品信息，第31卷,No.2,2017,p.303)或CAS登记号1905409-39-3，并且具有(1)抗CD20臂，其包含分别为SEQ ID NO:51和52的重链序列和轻链序列；以及(2)抗CD3臂，其包含分别为SEQ ID NO:53和54的重链和轻链序列。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含(1)包含第一结合域的抗CD20臂，该第一结合域包含(a)重链，其包含与SEQ ID NO:51的序列具有至少90％的序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性)或具有该序列的氨基酸序列；(b)轻链，其包含与SEQ ID NO:52的序列具有至少90％的序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性)或具有该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中的重链和如(b)中的轻链，以及(2)包含第二结合域的抗CD3臂，该第二结合域包含(a)重链，其包含与SEQ ID NO:53的序列具有至少90％的序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性)或具有该序列的氨基酸序列；(b)轻链，其包含与SEQ ID NO:54的序列具有至少90％的序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性)或具有该序列的氨基酸序列；或(c)如(a)中的重链和如(b)中的轻链。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含(1)含有第一结合域的抗CD20臂，该第一结合域包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的轻链；以及(2)包含第二结合域的抗CD3臂，该第二结合域包含含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的轻链。

莫苏妥珠单抗的氨基酸序列总结在下表2中

表2.莫苏妥珠单抗的序列ID

可以使用重组方法和组合物来产生抗CD20/抗CD3双特异性抗体，例如，如美国专利号4,816,567中所述。

在一些情况下，根据上述任何实施例的抗CD20/抗CD3双特异性抗体可单独或以组合的方式并入如以下第C节所述的任何特征。

C.抗体型式和特性

本文所述的方法可进一步包括上述任何抗体，其中该抗体单独或组合包含如下所述的任何特征。

1.抗体亲和力

在某些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体具有的解离常数(K_D)是≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM、或≤0.001nM(例如10^-8M或更小，例如从10^-8M至10^-13M，例如从10^-9M至10^-13M)。

在一种情况下，通过放射性标记的抗原结合测定(RIA)测量K_D。在一种情况下，在一个实例中，采用目的抗体的Fab形式及其抗原进行RIA。例如，通过在一系列未标记的抗原滴定存在下用最小浓度(¹²⁵I)标记的抗原平衡Fab，然后用抗Fab抗体包被的板捕获结合的抗原，来测量Fab对抗原的溶液结合亲和力(参见，例如，Chen等人，J.Mol.Biol.293:865-881(1999))。为了确定用于测定的条件，在用含5μg/ml捕获抗Fab抗体(Cappel Labs)的50mM碳酸钠(pH 9.6)包被多孔板(Thermo Scientific)过夜，且随后在室温(约23℃)下在含2％(w/v)牛血清白蛋白的PBS封闭二至五小时。在非吸附板(Nunc#269620)中，将100pM或26pM[¹²⁵I]-抗原与目的Fab的系列稀释液混合(例如，与Presta等人在Cancer Res.57:4593-4599(1997)中所述的抗VEGF抗体Fab-12的评估结果一致)。接着将目的Fab孵育过夜；然而，孵育可持续更长时间(例如，约65小时)以确保达到平衡。此后，将混合物转移至捕获板以在室温孵育(例如，1小时)。随后移除溶液并且用含0.1％聚山梨酯20的PBS洗涤该板八次。当板已干燥时，添加150μl/孔的闪烁体(MICROSCINT-20^TM；Packard)，并且在TOPCOUNT^TMγ计数器(Packard)上对板计数10分钟。选择给出小于或等于20％最大结合的每个Fab的浓度以用于竞争性结合测定中。

根据另一种情况，使用表面等离子体子共振测定法测量K_D。例如，使用-2000或-3000(BIAcore,Inc.,Piscataway,NJ)在25℃下用固定的抗原CM5芯片以约10个响应单位(RU)进行测定。在一种情况下，根据供应商说明书，用N-乙基-N'-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐(EDC)及N--羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化羧甲基化的葡聚糖生物感测器芯片(CM5,BIACORE,Inc.)。将抗原用10mM醋酸钠pH 4.8稀释至5μg/ml(约0.2μM)，之后以5μl/分钟的流速进行注射以获得大约10个响应单位(RU)的偶联蛋白。注射抗原之后，注射1M乙醇胺以阻断未反应的基团。关于动力学测量，在25℃，以约25μl/min的流速，注射在含有0.05％聚山梨酯20)表面活性剂(PBST)的PBS中的Fab的两倍连续稀释液(0.78nM至500nM)。通过同时拟合缔合和解离传感图，使用简单的一对一朗缪尔结合模型(评估软件3.2版)计算缔合速率(k_on)和解离速率(k_off)。平衡解离常数(K_D)计算为比率k_off/k_on。参见，例如：Chen等人，J.Mol.Biol.293:865-881(1999)。若通过上述表面等离子体共振测定得出缔合速率超过10⁶M-¹s-¹，则可通过使用荧光淬灭技术测定缔合速率，即如在分光计诸如配备止流装置的分光光度计(AvivInstruments)或8000系列SLM-AMINCO^TM分光光度计(ThermoSpectronic)中用搅拌比色杯所测得的，在浓度渐增的抗原存在下，测量在25℃下PBS pH 7.2中的20nM抗原抗体(Fab形式)的荧光发射强度(激发＝295nm；发射＝340nm，16nm带通)的增加或减少。

2.抗体片段

在某些情况下，本文提供的抗CD20/抗CD3双特异性抗体是抗体片段。抗体片段包括但不限于Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')₂、Fv和scFv片段以及下文所述的其他片段。关于某些抗体片段的综述，参见Hudson等人，Nat.Med.9:129-134(2003)。关于scFv片段的综述，参见例如Pluckthün，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，第113卷，Rosenburg和Moore编，Springer-Verlag，New York，第269-315页(1994)；还可参见WO 93/16185；以及美国专利号5,571,894和5,587,458。关于对包含补救受体结合表位残基并具有增加的体内半衰期的Fab和F(ab')₂片段的讨论，请参见美国专利号5,869,046。

双体抗体是具有两个抗原结合位点的抗体片段，其可以是二价或双特异性的。参见例如，EP 404,097；WO 1993/01161；Hudson等人，Nat.Med.9:129-134(2003)；以及Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:6444-6448(1993)。Hudson等人(Nat.Med.9:129-134，2003)中还描述了三体抗体(Triabodies)和四体抗体(tetrabodies)。

单域抗体是包含抗体的全部或部分重链可变域或全部或部分轻链可变域的抗体片段。单域抗体为人单域抗体(Domantis,Inc.，Waltham，MA；参见，例如，美国专利号6,248,516B1)。

抗体片段可以通过各种技术制备，包括但不限于完整抗体的蛋白水解消化以及由重组宿主细胞(例如大肠杆菌或噬菌体)产生，如本文所述。

3.嵌合和人源化抗体

在某些情况下，本文提供的抗CD20/抗CD3双特异性抗体是嵌合抗体。某些嵌合抗体描述于例如，美国专利号4,816,567；以及Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，81:6851-6855，1984。在一个实例中，嵌合抗体包括非人可变区(例如，来源于小鼠、大鼠、仓鼠、兔或非人灵长类动物(诸如猴)的可变区)和人恒定区。在另一个实例中，嵌合抗体为其中类别或亚类已经与亲本抗体的类别或亚类改变的“类别转换”抗体。嵌合抗体包括其抗原结合片段。

在某些情况下，嵌合抗体是人源化抗体。通常，将非人抗体为人源化抗体以降低对人的免疫原性，同时保留亲本非人抗体的特异性和亲和力。通常，人源化抗体包括一个或多个可变域，其中HVR(例如(CDR(或其部分))来源于非人抗体，而FR(或其部分)来源于人抗体序列。人源化抗体任选地将包含人恒定区的至少一部分。在一些情况下，人源化抗体中的一些FR残基被来自非人抗体(例如，HVR残基所来源于的抗体)的相应残基置换，例如以恢复或改善抗体特异性或亲和力。

人源化抗体及其制备方法在例如Almagro和Fransson,Front.Biosci.13:1619-1633(2008)中综述，并且进一步描述于例如Riechmann等人，Nature 332:323-329(1988)；Queen等人，Proc.Nat’l Acad.Sci.USA 86:10029-10033(1989)；美国专利号5,821,337、7,527,791、6,982,321和7,087,409；Kashmiri等人，Methods 36:25-34(2005)(描述了特异性决定区(SDR)移植)；Padlan,Mol.Immunol.28:489-498(1991)(描述了“表面再塑”)；Dall’Acqua等人，Methods 36:43-60(2005)(描述了“FR改组”)；以及Osbourn等人，Methods 36:61-68(2005)和Klimka等人，Br.J.Cancer,83:252-260(2000)(描述了用于FR改组的“指导选择”方法)中。

可以用于人源化的人框架区域包括但不限于：使用“最佳拟合”方法选择的框架区(参见，例如，Sims等人J.Immunol.151:2296(1993))；来源于轻链或重链可变区的特定亚组的人抗体共有序列的框架区(参见，例如，Carter等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89:4285(1992)；和Presta等人J.Immunol.，151:2623(1993))；人成熟(体细胞突变)框架区或人种系框架区(参见，例如，Almagro和Fransson，Front.Biosci.13:1619-1633(2008))；以及来源于筛选FR文库的框架区(参见，例如：Baca等人，J.Biol.Chem.272:10678-10684(1997)；和Rosok等人，J.Biol.Chem.271:22611-22618(1996))。

4.人抗体

在某些情况下，本文提供的抗CD20/抗CD3双特异性抗体是人抗体。可以使用本领域已知的各种技术来产生人抗体。人抗体一般性描述于：van Dijk和van de Winkel，Curr.Opin.Pharmacol.5:368-74(2001)；以及Lonberg，Curr.Opin.Immunol.20:450-459(2008)。

可以通过以下方式来制备人抗体：将免疫原施用于转基因动物，该转基因动物已被修饰以应答抗原激发而产生具有人可变区的完整人抗体或完整抗体。此类动物通常含有全部或部分人免疫球蛋白基因座，该全部或部分人免疫球蛋白基因座替代内源性免疫球蛋白基因座，或者在动物的染色体外存在或随机整合至动物的染色体中。在此类转基因小鼠中，内源性免疫球蛋白基因座通常已被灭活。关于从转基因动物获得人抗体的方法的综述，参见Lonberg，Nat.Biotech.23:1117-1125(2005)。另见，例如，描述XENOMOUSE^TM技术的美国专利号6,075,181和6,150,584；描述技术的美国专利号5,770,429；描述K-M技术的美国专利号7,041,870，以及描述技术的美国专利申请公开号US2007/0061900)。可以进一步修饰来自由此类动物产生的完整抗体的人可变区，例如，通过与不同的人恒定区组合。

人抗体也可通过基于杂交瘤的方法制备。已经描述了用于产生人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人杂交骨髓瘤细胞系。(参见例如：Kozbor J.Immunol.，133:3001(1984)；Brodeur等人，Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications，pp.51-63(Marcel Dekker，Inc.，New York，1987)；以及Boerner等人，J.Immunol.，147:86(1991)。)经由人B细胞杂交瘤技术产生的人抗体也描述于Li等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，103:3557-3562(2006)。其他方法包括描述于例如以下文献中的那些：美国专利号7,189,826(描述了由杂交瘤细胞系生产单克隆人IgM抗体)，以及Ni，Xiandai Mianyixue，26(4):265-268(2006)(描述了人-人杂交瘤)。人杂交瘤技术(Trioma技术)也描述于以下文献中：Vollmers和Brandlein，Histology and Histopathology，20(3):927-937(2005)；以及Vollmers和Brandlein，Methods and Findings inExperimental and Clinical Pharmacology，27(3):185-91(2005)。

人抗体也可以通过分离选自人源噬菌体展示文库的Fv克隆可变域序列来产生。然后可以将此类可变域序列与期望的人恒定域结合。下文描述了从抗体文库中选择人抗体的技术。

5.来源于文库的抗体

本发明的抗CD20/抗CD3双特异性抗体可通过筛选组合库中具有一种或多种期望活性的抗体来分离。例如，本领域已知多种方法用于产生噬菌体展示文库并筛选此类文库以获得具有所需结合特征的抗体。此类方法综述于例如：Hoogenboom等人，收录于Methodsin Molecular Biology 178:1-37(O'Brien等人主编，Human Press，Totowa，NJ，2001)中，并且进一步描述于例如：McCafferty等人Nature 348:552-554；Clackson等人Nature352:624-628(1991)；Marks等人J.Mol.Biol.222:581-597(1992)；Marks和Bradbury，收录于Methods in Molecular Biology 248:161-175(Lo主编，Human Press，Totowa，NJ，2003)；Sidhu等人J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004)；Lee等人J.Mol.Biol.340(5):1073-1093(2004)；Fellouse,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101(34):12467-12472(2004)；以及Lee等人J.Immunol.Methods 284(1-2):119-132(2004)。

在某些噬菌体展示方法中，将VH和VL基因的所有组成成分通过聚合酶链式反应(PCR)单独克隆，并在噬菌体文库中随机重组，然后可以从所述噬菌体文库中筛选抗原结合噬菌体，如在Winter等人,Ann.Rev.Immunol.,12:433-455(1994)中所述。噬菌体通常将抗体片段展示为单链Fv(scFv)片段或Fab片段。来自经免疫的来源的文库提供针对免疫原的高亲和力抗体，而无需构建杂交瘤。替代性地，可以克隆所有天然组成成分(例如，来自人的所有天然组成成分)以提供针对广泛的非自身抗原和自身抗原的抗体的单一来源，而无需任何免疫，如Griffiths等人,EMBO J.,12:725-734(1993)中所述。最后，还可通过以下方式来合成制得初始文库：克隆来自干细胞的未重排的V基因区段；以及使用含有随机序列的PCR引物来编码高度可变的CDR3区域并完成体外重排，如Hoogenboom和Winter,J.Mol.Biol.,227:381-388(1992)中所述。描述人抗体噬菌体文库的专利公开包括例如：美国专利号5,750,373和美国专利公开号2005/0079574、2005/0119455、2005/0266000、2007/0117126、2007/0160598、2007/0237764、2007/0292936和2009/0002360。

从人抗体文库中分离出的抗CD20/抗CD3双特异性抗体或抗体片段在本文中被认为是人抗体或人抗体片段。

6.抗体变体

在某些情况下，考虑了本发明的抗CD20/抗CD3双特异性抗体的氨基酸序列变体。如本文所详述，可基于期望的结构和功能特性来优化抗TIGIT拮抗剂抗体和PD-1轴结合拮抗剂抗体(例如，抗PD-L1拮抗剂抗体)和/或抗VEGF抗体。例如，可能期望改善抗体的结合亲和力和/或其他生物学特性。抗体的氨基酸序列变体可以通过向编码抗体的核苷酸序列中引入适当的修饰或通过肽合成进行制备。此类修饰包括例如在抗体的氨基酸序列内的残基的删除和/或插入和/或取代。可以进行缺失、插入和取代的任何组合以实现最终构建体，前提条件是最终构建体具有期望特征，例如,抗原结合。

a.取代、插入和缺失变体

在某些情况下，提供了具有一个或多个氨基酸取代的抗CD20/抗CD3双特异性抗体变体。取代突变的目的位点包括HVR和FR。保守取代列于表3的“优选取代”标题下。保守取代在表3中表头“示例性取代”下提供，并在下文中参考氨基酸侧链类别分类进一步描述。可以将氨基酸取代引入目的抗体中，并且对产物进行所需活性(例如，保留/改善的抗原结合、降低的免疫原性，或改善的ADCC或CDC)筛选。

表3.示例性和优选的氨基酸取代

原始残基	示例性取代	优选的取代
			Ala(A)	Val；Leu；Ile	Val
Arg(R)	Lys；Gln；Asn	Lys
			Asn(N)	Gln；His；Asp；Lys；Arg	Gln
Asp(D)	Glu；Asn	Glu
			Cys(C)	Ser；Ala	Ser
Gln(Q)	Asn；Glu	Asn
			Glu(E)	Asp；Gln	Asp
Gly(G)	Ala	Ala
			His(H)	Asn；Gln；Lys；Arg	Arg
Ile(I)	Leu；Val；Met；Ala；Phe；正亮氨酸	Leu
			Leu(L)	正亮氨酸；Ile；Val；Met；Ala；Phe	Ile
Lys(K)	Arg；Gln；Asn	Arg
			Met(M)	Leu；Phe；Ile	Leu
Phe(F)	Trp；Leu；Val；Ile；Ala；Tyr	Tyr
			Pro(P)	Ala	Ala
Ser(S)	Thr	Thr
			Thr(T)	Val；Ser	Ser
Trp(W)	Tyr；Phe	Tyr
			Tyr(Y)	Trp；Phe；Thr；Ser	Phe
Val(V)	Ile；Leu；Met；Phe；Ala；正亮氨酸	Leu

可根据共同的侧链特性将氨基酸分组：

(1)疏水性：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；

(2)中性亲水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；

(3)酸性：Asp，Glu；

(4)碱性：His，Lys，Arg；

(5)影响链取向的残基：Gly、Pro；

(6)芳族：Trp、Tyr、Phe。

非保守性取代将需要用这些类别中的一个的成员交换另一类别。

一种类型的取代变体涉及取代亲本抗体(例如，人源化抗体或人抗体)的一个或多个高变区残基。通常，为进一步研究而选择的一种或多种所得变体相对于亲本抗体将在某些生物特性(例如，提高的亲和力、降低的免疫原性)上具有修饰(例如，改善)和/或将基本上保留亲本抗体的某些生物特性。示例性取代变体是亲和力成熟抗体，其可例如使用诸如本文所述的那些基于噬菌体展示的亲和力成熟技术方便地生成。简言之，将一个或多个HVR残基突变并且将变体抗体展示在噬菌体上并针对特定生物活性(例如结合亲和力)进行筛选。

可以在HVR中进行改变(例如，取代)，例如，以改善抗体亲和力。此类改变可发生于HVR“热点”中，即由体细胞成熟过程中发生高频突变的密码子编码的残基(参见例如：Chowdhury，Methods Mol.Biol.207:179-196(2008))和/或与抗原接触的残基(检测所得变体VH或VL的结合亲和力)通过构建并自二级文库重新选择而实现的亲和力成熟已被例如Hoogenboom等人在Methods in Molecular Biology 178:1-37(O'Brien等人编，HumanPress,Totowa,NJ,(2001))中进行描述。在亲和力成熟的一些实例中，通过多种方法(例如，易错PCR、链改组或寡核苷酸定向突变)中的任一者将多样性引入出于成熟目的而挑选的可变基因中。接着创建二级文库。随后对该文库进行筛选以鉴别具有所需亲和力的任何抗体变体。引入多样性的另一种方法涉及HVR定向方法，其中将若干HVR残基(例如，每次4-6个残基)随机化。参与抗原结合的HVR残基可例如使用丙氨酸扫描突变或建模来特异性地鉴别。具体而言，常常靶向CDR-H3和CDR-L3。

在某些情况下，取代、插入或缺失可出现在一个或多个HVR内，只要此类改变基本上不降低抗体结合抗原的能力。例如，可在HVR中进行基本上不降低结合亲和力的保守性改变(例如，如本文提供的保守性取代)。例如，此类改变可以在HVR的抗原接触残基之外。在以上提供的变体VH和VL序列的某些实例中，每个HVR未改变，或含有不超过一个、两个或三个氨基酸置换。

如Cunningham和Wells(1989)(Science，244:1081-1085)所述，可用于鉴别可被靶向诱变的抗体残基或区域的方法称作“丙氨酸扫描诱变”。在此方法中，鉴定残基或一组靶残基(例如，带电残基，诸如Arg、Asp、His、Lys和Glu)并用中性或带负电的氨基酸(例如，丙氨酸或多丙氨酸)替换以确定抗体与抗原的相互作用是否受到影响。可在对初始取代展示功能敏感性的氨基酸位置引入其他取代。替代性地或另外地，可使用抗原-抗体复合物的晶体结构来鉴定抗体与抗原之间的接触点。可靶向或消除作为取代的候选的此类接触残基和相邻残基。可筛选变体以确定它们是否具备期望的特性。

氨基酸序列插入包括长度范围为一个残基至含有一百个或更多个残基的多肽的氨基和/或羧基末端融合，以及一个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的实例包括具有N末端甲硫氨酰残基的抗体。抗体分子的其他插入变体包括与增加抗体的血清半衰期的酶(例如，对于ADEPT)或多肽的抗体的N末端或C末端的融合。

b.糖基化变体

在某些情况下，可改变本发明的抗CD20/抗CD3双特异性抗体以增加或降低抗体糖基化的程度。本发明的抗CD20/抗CD3双特异性抗体中添加或缺失糖基化位点可通过改变氨基酸序列以产生或去除一个或多个糖基化位点而方便地实现。

在抗体包括Fc区的情况下，与其附接的糖类可以被改变。哺乳动物细胞产生的天然抗体通常包含具有支链的双触角寡糖，该双触角寡糖与Fc区的CH2域的Asn297附接。参见，例如，Wright等人，TIBTECH15:26-32(1997)。寡糖可包括各种糖类，例如，甘露糖、N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖和唾液酸以及附接至双触角寡糖结构的“主干”中的GlcNAc的岩藻糖。在一些情况下，对本发明的抗体中的寡糖进行修饰，以产生具有某些改善的特性的抗体变体。

在一种情况下，提供了抗CD20/抗CD3双特异性抗体变体，其具有缺乏与Fc区附接(直接或间接)的岩藻糖的糖类结构。例如，此类抗体中的岩藻糖含量可为1％至80％、1％至65％、5％至65％或20％至40％。岩藻糖的量是通过计算Asn297处的糖链中岩藻糖的相对于通过MALDI-TOF质谱法测得的附接至Asn 297的所有糖结构(例如，复合物、杂合和高甘露糖结构)的总和的平均量来确定的，例如，如WO 2008/077546中所述。Asn297是指位于Fc区中约297位的天冬酰胺残基(Fc区残基的Eu编号)；然而，由于抗体中的微小序列变化，Asn297也可位于297位上游或下游约±3个氨基酸，即在294位和300位之间。此类岩藻糖基化变体可具有改善的ADCC功能。参见，例如，美国专利公开号US 2003/0157108(Presta,L.)；US2004/0093621(Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd)。与“去岩藻糖基化”或“岩藻糖缺陷型”抗体变体有关的出版物的实例包括：US 2003/0157108；WO 2000/61739；WO 2001/29246；US2003/0115614；US 2002/0164328；US 2004/0093621；US 2004/0132140；US 2004/0110704；US 2004/0110282；US 2004/0109865；WO 2003/085119；WO 2003/084570；WO 2005/035586；WO 2005/035778；WO2005/053742；WO2002/031140；Okazaki等人，J.Mol.Biol.336:1239-1249(2004)；Yamane-Ohnuki等人，Biotech.Bioeng.87:614(2004)。能够产生去岩藻糖基化抗体的细胞系的实例包括蛋白质岩藻糖基化缺陷的Lec13 CHO细胞(Ripka等人，Arch.Biochem.Biophys.249:533-545(1986)；美国专利申请号US 2003/0157108 A1，Presta,L；和WO 2004/056312 A1，Adams等人，特别是实例11)；以及敲除基因的细胞系，诸如敲除α-1,6-岩藻糖基转移酶基因FUT8的CHO细胞FUT8(参见，例如，Yamane-Ohnuki等人，Biotech.Bioeng.87:614(2004)；Kanda,Y.等人，Biotechnol.Bioeng，94(4):680-688(2006)；和WO2003/085107)。

鉴于上述，在一些情况下，本发明的方法涉及在分次剂量递增给药方案的背景下向受试者施用包含非糖基化位点突变的抗CD20/抗CD3双特异性抗体变体。在一些情况下，去糖基化位点突变降低了抗体的效应子功能。在一些情况下，去糖基化位点突变是一种取代突变。在一些情况下，抗体包含在Fc区的取代突变，其降低了效应子功能。在一些情况下，取代突变位于氨基酸残基N297、L234、L235和/或D265(EU编号)处。在一些情况下，取代突变选自由以下项组成的组：N297G、N297A、L234A、L235A、D265A和P329G(EU编号)。在一些情况下，取代突变位于氨基酸残基N297(EU编号)处。在一个优选情况下，取代突变为N297A(EU编号)。在一些实施例中，抗CD20/抗CD3双特异性抗体的抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变(EU编号)。在一些实施例中，抗CD20/抗CD3双特异性抗体的抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。在一些实施例中，(a)该抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变并且(b)该抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

抗CD20/抗CD3双特异性抗体变体还提供有二等分的寡糖，例如，其中附接于抗体的Fc区的双触角寡糖被GlcNAc二等分。此类抗体变体可具有降低的岩藻糖基化和/或改善的ADCC功能。此类抗体变体的实例描述于例如：WO 2003/011878(Jean-Mairet等人)；美国专利号6,602,684(Umana等人)；以及US 2005/0123546(Umana等人)。还提供了在附接至Fc区的寡糖中具有至少一个半乳糖残基的抗体变体。此类抗体变体可具有改善的CDC功能。此类抗体变体描述于例如WO 1997/30087(Patel等人)、WO 1998/58964(Raju,S.)和WO 1999/22764(Raju,S.)中。

c.Fc区变体

在某些情况下，可将一个或多个氨基酸修饰引入抗CD20/抗CD3双特异性抗体的Fc区，从而生成Fc区变体(参见例如US 2012/0251531)。Fc区变体可包含人Fc区序列(例如，人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc区)，其在一个或多个氨基酸位置包含氨基酸修饰(例如，取代)。

在某些情况下，本发明设想了具有一些但不是所有效应子功能的抗CD20/抗CD3双特异性抗体变体，这使其成为应用的理想候选物，其中抗体在体内的半衰期很重要，但是某些效应子功能(诸如补体和ADCC)是不必要的或有害的。可以进行体外和/或体内细胞毒性测定，以确定CDC和/或ADCC活性的降低/消耗。例如，可以进行Fc受体(FcR)结合测定以确保抗体缺乏FcγR结合(因此可能缺乏ADCC活性)，但是保留FcRn结合能力。介导ADCC的主要细胞NK细胞仅表达Fc(RIII，而单核细胞表达Fc(RI、Fc(RII和Fc(RIII。FcR在造血细胞上的表达总结在Ravetch和Kinet的论文(Annu.Rev.Immunol.9:457-492(1991))的第464页的表3中。用于评估目的分子的ADCC活性的体外测定的非限制性实例描述于美国专利号5,500,362中(参见例如Hellstrom,I.等人，Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 83:7059-7063(1986))和Hellstrom,I.等人，Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 82:1499-1502(1985)；5,821,337(参见Bruggemann,M.等人，J.Exp.Med.166:1351-1361(1987))。替代性地，可采用非放射性测定方法(参见，例如，用于流式细胞术的ACTI^TM非放射性细胞毒性测定(CellTechnology,Inc.Mountain View,CA)；以及CytoTox非放射性细胞毒性测定(Promega,Madison,WI))。用于此类测定的有用效应细胞包括外周血单核细胞(PBMC)和自然杀伤(NK)细胞。替代性地或另外地，可在例如Clynes等人在Proc.Natl Acad.Sci.USA95:652-656(1998)中揭示的动物模型中体内评估目的分子的ADCC活性。还可以进行C1q结合测定以确认抗体无法结合C1q，因此缺乏CDC活性。参见例如WO 2006/029879和WO 2005/100402中的C1q和C3c结合ELISA。为了评估补体活化，可以进行CDC测定(参见，例如，Gazzano-Santoro等人，J.Immunol.Methods 202:163(1996)；Cragg,M.S.等人，Blood.101:1045-1052(2003)；以及Cragg,M.S.和M.J.Glennie Blood.103:2738-2743(2004))。FcRn结合和体内清除/半衰期测定也可以使用本领域已知的方法进行(参见，例如，Petkova,S.B.等人Int’l.Immunol.18(12):1759-1769，2006)。

具有降低的效应子功能的抗体包括具有一个或多个Fc区残基238、265、269、270、297、327和329的取代的那些(美国专利号6,737,056和8,219,149)。此类Fc突变体包括在氨基酸位置265、269、270、297和327中的两个或更多个氨基酸位置处具有置换的Fc突变体，包括具有对残基265和297的丙氨酸置换的所谓“DANA”Fc突变体(美国专利号7,332,581和8,219,149)。

抗体中野生型人Fc区的位置329处的脯氨酸被甘氨酸或精氨酸或足够大的氨基酸残基取代，从而破坏在Fc的脯氨酸329与FcgRIII的色氨酸残基Trp 87和Trp 110之间形成的Fc/Fcγ受体界面内的脯氨酸夹层(Sondermann等人：Nature 406，267-273(2000年7月20日))。在某些情况下，抗体包含至少一个另外的氨基酸取代。在一种情况下，该另外的氨基酸取代为S228P、E233P、L234A、L235A、L235E、N297A、N297D或P331S，并且在又一种情况下，该至少一个另外的氨基酸取代为IgG1 Fc区的L234A和L235A或人IgG4 Fc区的S228P和L235E(参见如US 2012/0251531)；并且在又一种情况下，至少一个另外的氨基酸取代为人IgG1 Fc区的L234A和L235A以及P329G。

其中描述了具有改善的或降低的与FcR的结合的某些抗体变体。(参见，例如，美国专利号6,737,056；WO 2004/056312以及Shields等人，J.Biol.Chem.9(2):6591-6604(2001))。

在某些情况下，抗体变体包括具有改善的ADCC的一个或多个氨基酸取代的Fc区，例如，在Fc区的298、333和/或334位的取代(残基的EU编号)。

在一些情况下，在Fc区中进行改变，导致改变的(即，改善的或减少的)C1q结合和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)，例如，如美国专利号6,194,551、WO99/51642和Idusogie等人J.Immunol.164:4178-4184(2000)所述。

具有延长的半衰期和改善的与新生儿Fc受体(FcRn)结合、负责将母体IgG转移至胎儿(Guyer等人，J.Immunol.117:587(1976)和Kim等人J.Immunol.24:249(1994))的结合的抗体描述于US2005/0014934A1(Hinton等人)中。那些抗体包含这样的Fc区，该Fc区中具有改善的Fc区与FcRn的结合的一个或多个取代。此类Fc变体包括在一个或多个Fc区残基上发生取代的Fc变体：238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434，例如，Fc区残基434的取代(美国专利号7,371,826)。

关于Fc区变体的其他实例，另见Duncan&Winter,Nature 322:738-40(1988)；美国专利号5,648,260；美国专利号5,624,821；和WO 94/29351。

在一些方面中，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含Fc区，其包含N297G突变(EU编号)。

在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体包含一个或多个重链恒定域，其中该一个或多个重链恒定域选自：第一CH1(CH1₁)域、第一CH2(CH2₁)域、第一CH3(CH3₁)域、第二CH1(CH1₂)域、第二CH2(CH2₂)域和第二CH3(CH3₂)域。在一些情况下，一个或多个重链恒定域中的至少一个与另一个重链恒定域配对。在一些情况下，CH3₁和CH3₂域分别包含一个突起或空腔，其中，CH3₁域中的突起或空腔分别位于CH3₂域的空腔或突起中。在一些情况下，CH3₁和CH3₂域在该突起和空腔之间的界面处相接。在一些情况下，CH2₁和CH2₂域分别包含一个突起或空腔，其中，CH2₁域中的突起或空腔分别位于CH2₂域的空腔或突起中。在其他情况下，CH2₁和CH2₂域在该突起和空腔之间的界面处相接。在一些情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体为IgG1抗体。

d.半胱氨酸工程化抗体变体

在某些情况下，期望产生半胱氨酸工程化抗CD20/抗CD3双特异性抗体，例如，“thioMAbs”，其中抗体的一个或多个残基被半胱氨酸残基取代。在特定情况下，取代残基出现在抗体的可接近位点。通过用半胱氨酸取代那些残基，反应性硫醇基团由此定位于抗体的可接近位点，并且可用于将抗体与其他部分，诸如药物部分或接头-药物部分缀合，以产生免疫缀合物，如本文进一步所述。在某些情况下，可用半胱氨酸取代下列残基中的任何一个或多个：轻链的V205(Kabat编号)；重链的A118(EU编号)；以及重链Fc区的S400(EU编号)。可如例如美国专利号7,521,541中所述的方法产生半胱氨酸工程化抗体。

e.抗体衍生物

在某些情况下，本文提供的抗CD20/抗CD3双特异性抗体被进一步修饰以包含本领域已知的并且容易获得的另外的非蛋白质部分。适用于抗体的衍生化的部分包括但不限于水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性实例包括但不限于聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯啶酮、聚-1,3-二氧戊环、聚-1,3,6-三恶烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或随机共聚物)和葡聚糖或聚(n-乙烯吡咯啶酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚环氧丙烷/环氧乙烷共聚物、聚氧乙烯化多元醇(例如,甘油)、聚乙烯醇及其混合物。由于其在水中的稳定性，聚乙二醇丙醛在制造中可具有优势。聚合物可具有任何分子量，并且可以具有支链或不具有支链。附接至抗体的聚合物的数目可变，并且如果附接了多于一个聚合物，那么它们可以为相同或不同的分子。通常，可基于以下考虑因素测定用于衍生化的聚合物的数目和/或类型，包括但不限于抗体待改善的特定特性或功能、抗体衍生物是否将用于限定条件下的疗法等。

在另一种情况下，提供了抗体和可通过暴露于辐射而选择性地加热的非蛋白质部分的缀合物。在一种情况下，非蛋白质部分是碳纳米管(Kam等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA102:11600-11605(2005))。辐射可具有任何波长，并且包括但不限于对普通细胞没有伤害，但是将非蛋白质性部分加热至抗体-非蛋白质性部分附近的细胞被杀死的温度的波长。

7.重组生产方法

本发明的抗CD20/抗CD3双特异性抗体可以使用重组方法和组合物产生，例如，如美国专利第4,816,567号中所述，该专利以引用方式全文并入本文。

为了抗CD20/抗CD3双特异性抗体重组产生，将编码抗体的核酸分离并插入至载体中，以在宿主细胞中进一步克隆和/或表达。可以使用常规程序来容易地对此类核酸进行分离和测序(例如，通过使用能够与编码抗体的重链和轻链的基因特异性结合的寡核苷酸探针)。

用于克隆或表达编码抗体的载体的合适宿主细胞包括本文所述的原核或真核细胞。例如，可以在细菌中产生抗体，特别是当不需要糖基化和Fc效应子功能时。关于在细菌中表达抗体片段和多肽，参见，例如，美国专利号5,648,237、5,789,199和5,840,523。(另见Charlton,Methods in Molecular Biology,第248卷(B.K.C.Lo,ed.,Humana Press,Totowa,NJ,2003),pp.245-254，其描述抗体片段在大肠杆菌中的表达。)抗体可在表达后在可溶性级分中从细菌细胞糊中分离，并且可以进一步纯化。

除了原核生物外，诸如丝状真菌或酵母等真核微生物也是用于编码抗体的载体的合适克隆或表达宿主，包括其糖基化途径已被“人源化”的真菌和酵母菌株，由此导致具有部分或完全人糖基化模式的抗体的产生。参见：Gerngross，Nat.Biotech.22:1409-1414(2004)；以及Li等人，Nat.Biotech.24:210-215(2006)。

用于表达糖基化抗体的合适宿主细胞也来源于多细胞生物(无脊椎动物和脊椎动物)。无脊椎动物细胞的实例包括植物细胞和昆虫细胞。已经鉴定出了可以与昆虫细胞结合使用，特别是用于转染草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞的许多杆状病毒株。

植物细胞培养物也可用作宿主。参见，例如，美国专利号5,959,177、6,040,498、6,420,548、7,125,978和6,417,429(描述了用于在转基因植物中产生抗体的PLANTIBODIES^TM技术)。

脊椎动物细胞也可用作宿主。例如，适于在悬浮液中生长的哺乳动物细胞系可能是有用的。可用的哺乳动物宿主细胞系的其他实例包括：由SV40(COS-7)转化的猴肾CV1系；人胚肾系(如Graham等人，J.Gen Virol.36:59(1977)中所述的293或293细胞)；幼仓鼠肾细胞(BHK)；小鼠塞尔托利氏细胞(如例如在Mather,Biol.Reprod.23:243-251(1980)中所述的TM4细胞)；猴肾细胞(CV1)；非洲绿猴肾细胞(VERO-76)；人宫颈癌细胞(HELA)；犬肾细胞(MDCK)；布法罗大鼠肝细胞(BRL 3A)；人肺细胞(W138)；人肝细胞(Hep G2)；小鼠乳腺肿瘤细胞(MMT 060562)；TRI细胞(如例如在Mather等人,Annals N.Y.Acad.Sci.383:44-68(1982)所述)；MRC 5细胞；以及FS4细胞。其他可用的哺乳动物宿主细胞系包括中华仓鼠卵巢(CHO)细胞，包括DHFR^-CHO细胞(Urlaub,G.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:4216(1980))；以及骨髓瘤细胞系，诸如Y0、NS0和Sp2/0。有关某些适用于抗体生产的哺乳动物宿主细胞克隆的综述，参见例如：Yazaki和Wu，Methods in Molecular Biology，第248卷(B.K.C.Lo主编，Humana Press，Totowa,NJ)，第255-268页(2003)。

8.免疫缀合物

本发明还提供免疫缀合物，其包含与一种或多种细胞毒性剂缀合的抗CD20/抗CD3双特异性抗体，该一种或多种细胞毒性剂为诸如化疗剂或药物、生长抑制剂、毒素(例如细菌、真菌、植物或动物来源的蛋白质毒素、酶活性毒素，或其片段)，或放射性同位素。

在一些情况下，免疫缀合物为抗体-药物缀合物(ADC)，其中抗体缀合至一种或多种药物，包括但不限于美登木素类(参见美国专利号5,208,020、5,416,064和欧洲专利EP 0425 235 B1)；奥瑞他汀(auristatin)，诸如单甲基奥瑞他汀药物部分DE和DF(MMAE和MMAF)(参见美国专利号5,635,483和5,780,588以及7,498,298)；多拉司他汀；卡奇霉素或其衍生物(参见美国专利号5,712,374、5,714,586、5,739,116、5,767,285、5,770,701、5,770,710、5,773,001和5,877,296；Hinman等人，Cancer Res.53:3336-3342(1993)；和Lode等人，Cancer Res.58:2925-2928(1998))；蒽环类药物，诸如柔红霉素或多柔比星(参见Kratz等人，CurrentMed.Chem.13:477-523(2006)；Jeffrey等人，Bioorganic&Med.Chem.Letters16:358-362(2006)；Torgov等人，Bioconj.Chem.16:717-721(2005)；Nagy等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 97:829-834(2000)；Dubowchik等人，Bioorg.&Med.Chem.Letters 12:1529-1532(2002)；King等人，J.Med.Chem.45:4336-4343(2002)；以及美国专利号6,630,579)；甲氨蝶呤；长春地碱；紫杉烷类，诸如多西他赛、紫杉醇、拉罗他赛、替塞他赛和奥他他赛；单端孢霉烯；和CC1065。

在另一种情况下，免疫缀合物包含与酶活性毒素或其片段缀合的抗CD20/抗CD3双特异性抗体，该酶活性毒素或其片段包括但不限于白喉A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来源于铜绿假单胞菌)、蓖麻毒蛋白A链、相思豆毒蛋白A链、蒴莲根毒素A链(modeccin A chain)、α-次黄嘌呤、油桐蛋白、石竹蛋白、美洲商陆蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜抑制剂、姜黄素(curcin)、巴豆毒素(crotin)、肥皂草抑制剂(Sapaonariaofficinalis inhibitor)、明胶(gelonin)、丝林霉素(mitogellin)、局限曲菌素(restrictocin)、酚霉素(phenomycin)、伊诺霉素(enomycin)和单端孢菌素。

在另一种情况下，免疫缀合物(immunoconjugate)包含与放射性原子缀合以形成放射性缀合物的抗CD20/抗CD3双特异性抗体。在另一个实施例中，多种放射性同位素可用于产生放射性缀合物。实例包括²¹¹At、¹³¹I、¹²⁵I、⁹⁰Y、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、¹⁵³Sm、²¹²Bi、³²P、²¹²Pb的放射性同位素。当放射性缀合物用于检测时，它可能包含用于闪烁显像研究的放射性原子，例如^99mTc或¹²³I，或用于核磁共振(NMR)成像(也称为磁共振成像，MRI)的自旋标记物，例如碘-123、碘-131、铟-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、钆、锰或铁。

还可使用多种双功能蛋白偶联剂诸如N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯(SPDP)、4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯(SMCC)、亚氨基硫杂环戊烷(IT)、亚氨基酯的双官能衍生物(诸如己二酸二甲酯盐酸盐)、活性酯(诸如辛二酸二琥珀酰亚胺基酯)、醛(诸如戊二醛)、双叠氮基化合物(诸如双(对叠氮基苯甲酰基)己二胺)、双重氮衍生物(诸如双-(对重氮苯甲酰基)-乙二胺)、二异氰酸酯(诸如甲苯2,6-二异氰酸酯)和双活性氟化合物(诸如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)制备包含抗体和细胞毒剂的免疫缀合物。例如，可以如Vitetta等人,Science 238:1098(1987)中所述制备蓖麻毒蛋白免疫毒素。碳-14标记的1-异硫氰基苄基-3-甲基二亚乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)为一种示例性螯合剂，用于将放射性核苷酸缀合至抗体。参见WO94/11026。接头可以为促进细胞中细胞毒性药物释放的“可切割接头”。例如，可以使用对酸不稳定的接头、肽酶敏感的接头、对光不稳定的接头、二甲基接头或含二硫键的接头(Chari等人，Cancer Res.52:127-131(1992)；美国专利号5,208,020)。

本文的免疫缀合物或ADC明确考虑但不限于用交联剂制备的此类缀合物，包括但不限于市售的(例如，来自Pierce Biotechnology,Inc.,Rockford,IL.,U.S.A)BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、磺基-EMCS、磺基-GMBS、磺基-KMUS、磺基-MBS、磺基-SIAB、磺基-SMCC、磺基-SMPB和SVSB(琥珀酰亚胺基-(4-乙烯基砜)苯甲酸酯)。

D.额外治疗剂

在一些情况下，本文所述的方法包括将双特异性抗CD20/抗CD3抗体与一种或多种其他治疗剂(例如，抗体-药物缀合物(ADC)和/或其他化疗剂和/或)组合施用。在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与选自环磷酰胺、阿霉素、利妥昔单抗和强的松的一种或多种另外的化疗剂联合施用。在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与CHOP联合施用，其中长春新碱被ADC替代。在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与抗CD19抗体、抗CD19抗体药物缀合物、抗CD22抗体药物缀合物、抗CD45抗体药物缀合物及抗CD32抗体药物缀合物联合施用。

在一些情况下，额外治疗剂是抗CD79b ADC，例如，美国专利号8,088,378中描述的任何抗CD79b抗体药物缀合物，该专利以引用方式全文并入本文。在一些情况下，抗79b抗体药物缀合物包含含有选自以下各项中的至少一个、两个、三个、四个、五个、或六个高变区(HVR)的抗CD79b结合域：(a)HVR-H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；以及(f)HVR-L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列。在一些情况下，抗CD79b抗体药物缀合物包括抗79b结合域，其包含以下所有六个HVR：(a)HVR-H1，其包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列；(b)HVR-H2，其包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列；(c)HVR-H3，其包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列；(d)HVR-L1，其包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列；(e)HVR-L2，其包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列；以及(f)HVR-L3，其包含SEQ ID NO:38的氨基酸序列。在一些情况下，抗CD79b抗体药物缀合物包含分别含有SEQ ID NO：39-42的序列的重链框架区FR-H1、FR-H2、FR-H3和FR-H4中的至少一者(例如1、2、3或4者)，和/或分别含有SEQ ID NOs：43-46的序列的轻链框架区FR-L1、FR-L2、FR-L3及FR-L4中的至少一者(例如1、2、3或4者)。在一些情况下，抗CD79b抗体药物缀合物包含：(a)重链可变(VH)域，其包含SEQ ID NO：47的氨基酸序列或与该序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列；(b)轻链可变(VL)域，其包含SEQ ID NO：48的氨基酸序列或与该序列具有至少90％序列同一性(例如，至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、或99％序列同一性)的氨基酸序列；(c)如(a)中的VH域和(b)中的VL域。因此，在一些情况下，第一结合域包含：VH域，其包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列；以及VL域，其包含SEQ ID NO:48的氨基酸序列。

在一些情况下，抗CD79b抗体与诸如单甲基奥瑞他汀E(MMAE，即vedotin)的毒素连接。在一些情况下，抗CD79b抗体药物缀合物是帕罗托珠单抗(免疫球蛋白G1-κ奥瑞他汀(auristatin)E，抗[智人CD79b(免疫球蛋白相关的CD79β)]，与奥瑞他汀E缀合的人源化单克隆抗体；γ1重链(1-447)[人源化VH(智人IGHV3-23*04(76.50％)-(IGHD)-IGHJ4*01)[8.8.10](1-117)–智人IGHG1*03(CH1 R120>K(214)(118-215)，铰链(216-230)、CH2(231-340)、CH3(341-445)、CHS(446-447))(118-447)]，(220-218')-二硫键，具有κ轻链(1'-218')[人源化V-KAPPA(智人IGKV1-39*01(85.90％)-IGKJ1*01)[10.3.9](1'-111')-智人IGKC*01(112'-218')]；二聚体(226-226":229-229")-双二硫键；以平均3至4个半胱胺酰基，经由可裂解的马来酰亚胺己酰基-戊酰基-瓜氨酸基-对氨基芐氧基羰基(mc-val-cit-PABC)型接头，缀合至单甲基奥瑞他汀E(MMAE)；也称为RG-7596或RO5541077-000))，如由国际非专利药品名称(INN)清单110(WHO药品信息，第27卷，第4期，2016年，第443页)所定义的。帕罗托珠单抗也称为IUPHAR/BPS编号8404、KEGG编号D10761或CAS登记编号1313206-42-6。帕罗托珠单抗还可互换地称为“帕罗托珠单抗”、“huMA79bv28-MC-vc-PAB-MMAE”或“DCDS4501A”。在一些情况下，抗CD79b抗体或抗CD79b ADC包括SEQ ID NO:49的重链序列以及SEQ ID NO:50的轻链序列。

在一些情况下，额外治疗剂是生物修饰剂。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与选自下列的一种或多种生物修饰剂联合施用：BCL-2抑制剂(诸如GDC-0199/ABT-199)、来那度胺泊马度胺(pomalidomide)、沙利度胺(thalidomide)、PI3K-δ抑制剂(如艾代拉利司(idelalisib))、PD-1轴结合拮抗剂、tremelimumab(也称为ticilimumab或CP-675,206、urelumab(也称为BMS-663513)、MGA271、针对TGFβ的拮抗剂，例如美替木单抗(metelimumab)(也称为CAT-192)、苏木单抗(fresolimumab)(也称为GC1008)、LY2157299k，以及表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(例如，细胞毒性T细胞或CTL)的过继转移，例如包含显性失活TGFβ受体，例如显性失活TGFβII型受体的T细胞的过继转移。

在本文所述的一些方法中，给药方案可包括施用一种或多种额外治疗剂。例如，在特定情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体可以与奥滨尤妥珠单抗和/或托珠单抗联合施用，其中受试者首先被施用奥滨尤妥珠单抗和/或托珠单抗然后分别施用双特异性抗CD20/抗CD3抗体(例如，受试者用奥滨尤妥珠单抗和/或托珠单抗)进行预处理)。在一些情况下，将托珠单抗作为额外治疗剂施用是为了减少与CRS相关的某些不良反应的影响。在一些情况下，受试者用托珠单抗作为针对CRS的预防方法进行预治疗。在一些情况下，针对CRS的预防性治疗包括施用托珠单抗和/或阿达木单抗。

在一些情况下，额外治疗剂是PD-1轴结合拮抗剂。在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂是PD-1结合拮抗剂。在一些情况下，PD-1结合拮抗剂为抗PD-1抗体。多种抗PD-1抗体可用于本文公开的方法和用途。在本文的任意情况下，PD-1抗体可以结合人PD-1或其变体。在一些情况下，抗PD-1抗体是单克隆抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是选自由以下组成的组的抗体片段：Fab、Fab’、Fab’-SH、Fv、scFv和(Fab’)2片段。在一些情况下，抗PD-1抗体是人源化抗体。在其他情况下，抗PD-1抗体是人抗体。示例性抗PD-1拮抗剂抗体包括纳武单抗(nivolumab)、帕博利珠单抗、MEDI-0680、PDR001(spartalizumab)、REGN2810(西米单抗，cemiplimab)、BGB-108、普罗格利单抗(prolgolimab)、卡瑞利珠单抗(camrelizumab)、信迪利单抗(sintilimab)、替雷利珠单抗(tislelizumab)、特瑞普利单抗(toripalimab)、多塔利单抗(dostarlimab)、瑞弗利单抗(retifanlimab)、萨善利单抗(sasanlimab)、派安普利单抗(penpulimab)、CS1003、HLX10、SCT-I10A、zimberelimab、巴替利单抗(balstilimab)、杰诺单抗(genolimzumab)、BI 754091、西利单抗(cetrelimab)、YBL-006、BAT1306、HX008、布格利单抗(budigalimab)、CX-188、JTX-4014、609A、Sym021、LZM009、F520、SG001、AM0001、ENUM 244C8、ENUM 388D4、STI-1110、AK-103和hAb21。在一些情况下，抗PD-1抗体是纳武单抗(CAS登录号：946414-94-4)。纳武单抗(Bristol-Myers Squibb/Ono)，也称为MDX-1106-04、MDX-1106、ONO-4538、BMS-936558和是WO 2006/121168中所述的抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是帕博利珠单抗(CAS登录号：1374853-91-4)。帕博利珠单抗(Merck)，也称为MK-3475、Merck 3475、派姆单抗、SCH-900475和是WO2009/114335所述的抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是MEDI-0680(AMP-514；AstraZeneca)。MEDI-0680是人源化IgG4抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是PDR001(CAS注册号1859072-53-9；Novartis)。PDR001是人源化IgG4抗PD-1抗体，可阻断PD-L1和PD-L2与PD-1的结合。在一些情况下，抗PD-1抗体是REGN2810(Regeneron)。REGN2810是人抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是BGB-108(BeiGene)。在一些情况下，抗PD-1抗体是BGB-A317(BeiGene)。在一些情况下，抗PD-1抗体是JS-001(Shanghai Junshi)。JS-001是人源化抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是STI-A1110(Sorrento)。STI-A1110是人抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是INCSHR-1210(Incyte)。INCSHR-1210是人IgG4抗PD-1抗体。在一些情况下，抗PD-1抗体是PF-06801591(Pfizer)。在一些情况下，抗PD-1抗体是TSR-042(也称为ANB011；Tesaro/AnaptysBio)。在一些情况下，抗PD-1抗体是AM0001(ARMO Biosciences)。在一些情况下，抗PD-1抗体是ENUM 244C8(Enumeral BiomedicalHoldings)。ENUM 244C8是抗PD-1抗体，可抑制PD-1功能而不阻断PD-L1与PD-1的结合。在一些情况下，抗PD-1抗体是ENUM 388D4(Enumeral Biomedical Holdings)。ENUM 388D4是抗PD-1抗体，可竞争性抑制PD-L1与PD-1的结合。在一些情况下，抗PD-1抗体包含WO 2015/112800、WO 2015/112805、WO 2015/112900、US 20150210769、WO2016/089873、WO 2015/035606、WO 2015/085847、WO 2014/206107、WO 2012/145493、US 9,205,148、WO 2015/119930、WO 2015/119923、WO 2016/032927、WO 2014/179664、WO 2016/106160和WO 2014/194302所述的抗PD-1抗体的六个HVR序列(例如，三个重链HVR和三个轻链HVR)和/或重链可变域和轻链可变域。

在其他情况下，PD-1结合拮抗剂是免疫粘附素(例如，包含与恒定区(例如，免疫球蛋白序列的Fc区)融合的PD-L1或PD-L2的胞外或PD-1结合部分序列的免疫粘附素)。在其他情况下，PD-1结合拮抗剂是AMP-224。AMP-224，也称为B7-DCIg，是PCT公开号WO 2010/027827和WO 2011/066342所述的PD-L2-Fc融合可溶性受体。

在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂是PD-L1结合拮抗剂。在一些情况下，PD-L1结合拮抗剂为抗PD-L1抗体。本文考虑并描述了多种抗PD-L1抗体。在本文的任意情况下，分离的抗PD-L1抗体可以结合人PD-L1，例如，UniProtKB/Swiss-Prot登录号Q9NZQ7-1中所示的人PD-L1，或其变体。在一些情况下，抗PD-L1抗体能够抑制PD-L1和PD-1之间和/或PD-L1和B7-1之间的结合。在一些情况下，抗PD-L1抗体是单克隆抗体。在一些情况下，抗PD-L1抗体是选自由以下组成的组的抗体片段：Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')2片段。在一些情况下，抗PD-L1抗体是人源化抗体。在一些情况下，抗PD-L1抗体是人抗体。示例性抗PD-L1抗体包括阿托珠单抗、MDX-1105、MEDI4736(德瓦鲁单抗)、MSB0010718C(阿维鲁单抗，avelumab)、SHR-1316、CS1001、恩弗利单抗(envafolimab)、TQB2450、ZKAB001、LP-002、CX-072、IMC-001、KL-A167、APL-502、柯希利单抗(cosibelimab)、洛达利单抗(lodapolimab)、FAZ053、TG-1501、BGB-A333、BCD-135、AK-106、LDP、GR1405、HLX20、MSB2311、RC98、PDL-GEX、KD036、KY1003、YBL-007、HS-636、LY3300054(Eli Lilly)、STI-A1014(Sorrento)和KN035(SuzhouAlphamab)。在一些情况下，抗PD-L1抗体包含可切割部分或接头，当被切割时(例如，通过肿瘤微环境中的蛋白酶)，该部分或接头活化抗体抗原结合域以使其能够结合其抗原，例如，通过除去非结合的空间部分。在一些情况下，抗PD-L1抗体是CX-072(CytomXTherapeutics)。在一些情况下，抗PD-L1抗体包含US 20160108123、WO 2016/000619、WO2012/145493、美国专利号9,205,148、WO 2013/181634或WO 2016/061142所述的抗PD-L1抗体的六个HVR序列(例如，三个重链HVR和三个轻链HVR)和/或重链可变域和轻链可变域。可用于本发明方法的抗PD-L1抗体的实例及其制备方法描述于国际专利申请公开号WO 2010/077634和美国专利号8,217,149，其各自通过引用的方式以其整体并入本文。

在一些情况下，PD-1轴结合拮抗剂是PD-L2结合拮抗剂。在其他情况下，PD-L2结合拮抗剂是抗PD-L2抗体(例如，人抗PD-L2抗体、人源化抗PD-L2抗体或嵌合抗PD-L2抗体)。在一些情况下，PD-L2结合拮抗剂是免疫粘附素。

在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗和/或一种或多种化疗剂联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗和CHOP联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗和ADC联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗和CHOP联合施用，其中长春新碱被ADC替代。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与选自抗CD19抗体药物缀合物、抗CD22抗体药物缀合物、抗CD45抗体药物缀合物和抗CD32药物缀合物的ADC联合施用。

在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗和/或选自下列的一种或多种生物修饰剂联合施用：BCL-2抑制剂(诸如GDC-0199/ABT-199)、来那度胺泊马度胺、沙利度胺、PI3K-δ抑制剂(如艾代拉利司)、PD-1轴结合拮抗剂、曲美木单抗(tremelimumab，也称为ticilimumab或CP-675,206、乌瑞芦单抗(urelumab，也称为BMS-663513)、MGA271、针对TGFβ的拮抗剂，例如美替木单抗(也称为CAT-192)、苏木单抗(也称为GC1008)、LY2157299k，以及表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(例如，细胞毒性T细胞或CTL)的过继转移，例如包含显性失活TGFβ受体，例如显性失活TGFβII型受体的T细胞的过继转移。

在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与利妥昔单抗、一种或多种化疗剂和/或选自下列的一种或多种生物修饰剂联合施用：BCL-2抑制剂(诸如GDC-0199/ABT-199)、来那度胺泊马度胺、沙利度胺、PI3K-δ抑制剂(如艾代拉利司)、PD-1轴结合拮抗剂、曲美木单抗(tremelimumab，也称为ticilimumab或CP-675,206、乌瑞芦单抗(urelumab，也称为BMS-663513)、MGA271、针对TGFβ的拮抗剂，例如美替木单抗(也称为CAT-192)、苏木单抗(也称为GC1008)、LY2157299k，以及表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(例如，细胞毒性T细胞或CTL)的过继转移，例如包含显性失活TGFβ受体，例如显性失活TGFβII型受体的T细胞的过继转移。

在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗和/或一种或多种化疗剂联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗和CHOP联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗和ADC联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗和CHOP联合施用，其中长春新碱被ADC替代。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与选自抗CD79b抗体药物缀合物(诸如US 8,088,378和/或US 2014/0030280中任一项所述的抗CD79b-MC-vc-PAB-MMAE或抗CD79b抗体药物缀合物或帕罗托珠单抗)、抗CD19抗体药物缀合物、抗CD22抗体药物缀合物、抗CD45抗体药物缀合物和抗CD32药物缀合物的ADC联合施用。在一种情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗以及选自下列的一种或多种生物修饰剂联合施用：BCL-2抑制剂(诸如GDC-0199/ABT-199)、来那度胺泊马度胺、沙利度胺、PI3K-δ抑制剂(如艾代拉利司)、PD-1轴结合拮抗剂、曲美木单抗(tremelimumab，也称为ticilimumab或CP-675,206、乌瑞芦单抗(urelumab，也称为BMS-663513)、MGA271、针对TGFβ的拮抗剂，例如美替木单抗(也称为CAT-192)、苏木单抗(也称为GC1008)、LY2157299k，以及表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(例如，细胞毒性T细胞或CTL)的过继转移，例如包含显性失活TGFβ受体，例如显性失活TGFβII型受体的T细胞的过继转移。

在一些情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体与奥滨尤妥珠单抗和/或选自下列的一种或多种生物修饰剂联合施用：BCL-2抑制剂(诸如GDC-0199/ABT-199)、来那度胺泊马度胺、沙利度胺、PI3K-δ抑制剂(如艾代拉利司)、PD-1轴结合拮抗剂、曲美木单抗(tremelimumab，也称为ticilimumab或CP-675,206、乌瑞芦单抗(urelumab，也称为BMS-663513)、MGA271、针对TGFβ的拮抗剂，例如美替木单抗(也称为CAT-192)、苏木单抗(也称为GC1008)、LY2157299k，以及表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(例如，细胞毒性T细胞或CTL)的过继转移，例如包含显性失活TGFβ受体，例如显性失活TGFβII型受体的T细胞的过继转移。

在一些情况下，另外的疗法包括烷基化剂。在一种情况下，烷基化剂是4-[5-[双(2-氯乙基)氨基]-1-甲基苯并咪唑-2-基]丁酸及其盐。在一种情况下，烷基化剂是苯达莫司汀。

在一些情况下，另外的疗法包含BCL-2抑制剂。在一个实施例中，BCL-2抑制剂包含4-(4-{[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基}哌-1-基)-N-({3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)氨基]苯基}磺酰基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)苯甲酰胺或其盐。在一种情况下，BCL-2抑制剂是维奈托克(CAS#:1257044-40-8)。

在一些情况下，另外的疗法包含磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂。在一种情况下，PI3K抑制剂抑制PI3K的δ同种型(即P110δ)。在一些情况下，PI3K抑制剂是5-氟-3苯基-2-[(1S)-1-(7H-嘌呤-6-基氨基)丙基]-4(3H)-喹唑啉酮及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是艾代拉利司(CAS#:870281-82-6)。在一种情况下，PI3K抑制剂抑制PI3K的α和δ同种型。在一些情况下，PI3K抑制剂是2-{3-[2-(1-异丙基-3-甲基-1H-1,2-4-三唑-5-基)-5,6-二氢苯并[f]咪唑并[1,2-d][1,4]氧氮杂卓-9-基]-1H-吡唑-1-基}-2-甲基丙酰胺及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是他塞利昔布(taselisib)(CAS#:1282512-48-4)。在一些情况下，PI3K抑制剂是2-氨基-N-[2,3-二氢-7-甲氧基-8-[3-(4-吗啉基)丙氧基]咪唑并[1,2-c]喹唑啉-5-基]-5-嘧啶甲酰胺及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是考班昔布(copanlisib)(CAS#:1032568-63-0)。在一些情况下，PI3K抑制剂是8-氯-2-苯基-3-[(1S)-1-(9H-嘌呤-6-基氨基)乙基]-1(2H)-异喹啉酮及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是杜维昔布(duvelisib)(CAS#:1201438-56-3)。在一些情况下，PI3K抑制剂是(2S)-N¹-[4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基乙基)-4-吡啶基]-2-噻唑基]-1,2-吡咯啶二甲酰胺及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是艾培昔布(alpelisib)(CAS#:1217486-61-7)。在一些情况下，PI3K抑制剂是2-[(1S)-1-[4-氨基-3-[3-氟-4-(1-甲基乙氧基)苯基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基]-6-氟-3-(3-氟苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮及其盐。在一些情况下，PI3K抑制剂是厄布利塞(umbralisib)(CAS#:1532533-67-7)。

在本发明的进一步方面中，另外的疗法包含布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。在一种情况下，BTK抑制剂是1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮及其盐。在一种情况下，BTK抑制剂是依鲁替尼(CAS#:936563-96-1)、阿卡替尼(CAS#:1420477-60-6)、或泽布替尼(CAS#:1691249-45-2)。

在一些情况下，另外的疗法包含沙利度胺或其衍生物。在一种情况下，沙利度胺或其衍生物是(RS)-3-(4-氨基-1-氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)哌啶-2,6-二酮及其盐。在一种情况下，沙利度胺或其衍生物是来那度胺(CAS#:191732-72-6)。

在本文所述的方法涉及组合疗法，诸如上文提及的特定组合疗法的情况下，组合疗法涵盖双特异性抗CD20/抗CD3抗体与一种或多种额外治疗剂的施用，并且此类联合施用可为组合施用(其中两种或更多种治疗剂包含在在相同或单独的制剂中)或单独施用，在此情况下，抗CD20/抗CD3双特异性抗体的施用可以在施用一种或多种额外治疗剂之前、同时和/或之后进行。在一个实施例中，抗CD20/抗CD3双特异性抗体的施用、额外治疗剂的施用或暴露于放射性疗法可彼此在约一个月内，或在约一周、两周或三周内，或在约一天、两天、三天、四天、五天、或六天内发生。在特定情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体可与奥滨尤妥珠单抗联合施用，其中受试者首先施用奥滨尤妥珠单抗然后单独施用双特异性抗CD20/抗CD3抗体(例如，受试者用奥滨尤妥珠单抗预治疗)。在另一种特定情况下，双特异性抗CD20/抗CD3抗体和抗CD79b ADC可以与托珠单抗联合施用，其中受试者首先被施用托珠单抗)，然后单独施用双特异性抗CD20/抗CD3抗体(例如，受试者用托珠单抗预治疗)。在一些情况下，将托珠单抗作为额外治疗剂施用是为了减少与CRS相关的某些不良反应的影响。在一些情况下，受试者用托珠单抗作为针对CRS的预防方法进行预治疗。在一些情况下，针对CRS的预防性治疗包括施用托珠单抗和/或阿达木单抗。

本文所述的方法可导致用抗CD20/抗CD3双特异性抗体治疗的患有CD20阳性细胞增殖性病症，例如B细胞增殖性病症(例如，非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，1L DLBCL、复发性和/或难治性DLBCL、或里希特转化)、滤泡性淋巴瘤(FL)(例如，1L FL、复发性和/或或难治性FL，或转化FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵隔腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL))或慢性淋巴细胞白血病(CLL)的受试者的获益-风险特征得到改善。在一些情况下，在使用本发明的分次、剂量递增给药方案用抗CD20/抗CD3双特异性抗体进行治疗后，相对于使用非分次给药方案用抗CD20/抗CD3双特异性抗体进行治疗，使用本文所述导致在分次、剂量递增给药方案的背景下皮下施用抗CD20/抗CD3双特异性抗体的方法进行治疗导致不期望的事件，例如细胞因子驱动的毒性(例如，细胞因子释放综合征(CRS))、输注相关反应(IRR)、巨噬细胞活化综合征(MAS)、神经系统毒性、严重肿瘤溶解综合征(TLS)、中性粒细胞减少症、血小板减少症、肝酶升高和/或肝毒性减少(例如，20％或更高、25％或更高、30％或更高、35％或更高、40％或更高、45％或更高、50％或更高、55％或更高、60％或更高、65％或更高、70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、96％或更高、97％或更高、98％或更高、或99％或更高；例如，介于20％和100％之间、介于20％与90％之间、介于20％与80％之间、介于20％与70％之间、介于20％与60％之间、介于20％与50％之间、介于20％与40％之间、介于20％与30％之间、介于40％与100％之间、介于60％与100％之间、介于80％与100％之间、介于30％与70％之间、介于40％与60％之间、介于30％与50％之间、介于50％与80％之间、或介于90％与100％之间；例如，约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约97％、约99％、或约100％)或完全抑制(100％减少)。

对于本文所述的所有方法，抗CD20/抗CD3双特异性抗体以符合良好医学实践的方式配制、给药和施用。在此背景中考虑的因素包括待治疗的特定疾病、待治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床状况、病症的原因、药剂递送的部位、施用方法、施用安排以及医疗从业者已知的其他因素。抗CD20/抗CD3双特异性抗体无需但任选地与目前用于预防或治疗所考虑的病症的一种或多种药物同时配制。此类其他药物的有效量取决于制剂中存在的抗CD20/抗CD3双特异性抗体的量、病症或治疗的类型以及上述其他因素。抗CD20/抗CD3双特异性抗体可经一系列治疗适当地施用于受试者。

在一些情况下，可用于本发明中的额外治疗剂包括治疗性抗体诸如阿仑单抗(Campath)、贝伐单抗(Genentech)；西妥昔单抗(Imclone)；帕尼单抗(Amgen)、利妥昔单抗(rituximab)(Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠单抗(2C4，Genentech)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(Genentech)、托西莫单抗(tositumomab)(Bexxar，Corixia)和抗体药缀合物诸如吉妥单抗(Wyeth)。与本发明所述的化合物联用的具有治疗潜力的其他人源化单克隆抗体包括：阿波珠单抗(apolizumab)、阿塞珠单抗(aselizumab)、阿替珠单抗(atlizumab)、巴匹珠单抗(bapineuzumab)、莫比伐珠单抗(bivatuzumab mertansine)、莫坎妥珠单抗(cantuzumab mertansine)、西地珠单抗(cedelizumab)、聚乙二醇结合赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、西弗丝妥珠单抗(cidfusituzumab)、西地妥珠单抗(cidtuzumab)、达利珠单抗(daclizumab)、依库珠单抗(eculizumab)、依法珠单抗(efalizumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、厄立珠单抗(erlizumab)、泛维珠单抗(felvizumab)、芳妥珠单抗(fontolizumab)、奥英妥珠单抗奥佐米星(inotuzumab ozogamicin)、伊匹单抗(ipilimumab)、伊妥木单抗(labetuzumab)、林妥珠单抗(lintuzumab)、马妥珠单抗(matuzumab)、美泊珠单抗(mepolizumab)、莫维珠单抗(motavizumab)、motovizumab、那他珠单抗(natalizumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、诺维珠单抗(nolovizumab)、努维珠单抗(numavizumab)、奥卡利珠单抗(ocrelizumab)、奥马珠单抗(omalizumab)、帕利珠单抗(palivizumab)、帕考珠单抗(pascolizumab)、派弗西妥珠单抗(pecfusituzumab)、帕妥珠单抗(pectuzumab)、培克珠单抗(pexelizumab)、来利珠单抗(ralivizumab)、兰尼单抗(ranibizumab)、来丝利维珠单抗(reslivizumab)、瑞利珠单抗(reslizumab)、来西维珠单抗(resyvizumab)、罗维珠单抗(rovelizumab)、卢利珠单抗(ruplizumab)、西罗珠单抗(sibrotuzumab)、西利珠单抗(siplizumab)、索土珠单抗(sontuzumab)、他珠单抗四西坦(tacatuzumab tetraxetan)、他度珠单抗(tadocizumab)、tafasitamab、他利珠单抗(talizumab)、替非珠单抗(tefibazumab)、托珠单抗(tocilizumab)、托利珠单抗(toralizumab)、西莫白介素单抗(tucotuzumabcelmoleukin)、土库西妥珠单抗(tucusituzumab)、乌玛珠单抗(umavizumab)、乌珠单抗(urtoxazumab)、优特克单抗(ustekinumab)、维西珠单抗(visilizumab)、和布雷奴单抗(briakinumab)。

IV.医药组合物和制剂

本文所述的任何抗体(例如，抗CD20/抗CD3双特异性抗体)可用于医药组合物和制剂。本文所述的抗体和/或其他药剂的医药组合物和制剂可通过将一种、两种或所有三种具有所需纯度的药剂与一种或多种任选的药用载体混合(Remington’s PharmaceuticalSciences 16th edition,Osol,A.Ed.(1980))，制成冻干制剂或水溶液的形式。药用载体在所用的剂量和浓度下对受治疗者一般无毒，并且包括但不限于：缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(诸如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，诸如钠；金属络合物(例如锌蛋白络合物)；和/或非离子表面活性剂，诸如聚乙二醇(PEG)。本申请中的示例性药用载体还进一步包括间质药物分散剂，诸如可溶中性活性透明质酸酶糖蛋白(sHASEGP)，例如人可溶性PH-20透明质酸酶糖蛋白，诸如rHuPH20(Baxter International,Inc.)。某些示例性sHASEGP和使用方法(包括rHuPH20)描述于美国专利公开号2005/0260186和2006/0104968中。在一个方面中，将sHASEGP与一种或多种另外的糖胺聚糖酶(诸如软骨素酶)组合。

示例性的冻干抗体制剂描述于美国专利号6,267,958。水性抗体制剂包括在美国专利号6,171,586和WO2006/044908中描述的那些，后一者中的制剂包含组氨酸-乙酸盐缓冲剂。

本文的组合物和制剂还可含有多于一种对于所治疗的特定适应症是必需的活性成分，优选是具有不会彼此不利地影响的互补活性的活性成分。例如，可以期望进一步提供额外治疗剂(例如，化疗剂、细胞毒性剂、生长抑制剂和/或抗激素剂，诸如上文所述的那些)。此类活性成分适当地以对预期目的有效的量组合存在。

活性成分可以包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊(例如，分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)中，在胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊)中或粗滴乳液中。此类技术公开于Remington's Pharmaceutical Sciences第16版，Osol,A.编(1980)。

可以制备缓释制备物。缓释制剂的合适实例包括含有抗体的固态疏水聚合物的半透性基质，这些基质是例如膜或微胶囊等成型制品的形式。

用于体内施用的制剂通常是无菌的。例如，无菌可以通过无菌过滤膜过滤而容易地实现。

V.试剂盒和制品

在本发明的另一个方面中，提供了一种制品，其含有可用于治疗、预防和/或诊断上述病症的物质。该试剂盒或制品包含在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、IV溶液袋等。容器可以由多种材料诸如玻璃或塑料形成。容器容纳组合物，该组合物单独或与另一种有效用于治疗、预防和/或诊断所述病症的组合物组合，并且容器可具有无菌入口(例如，容器可为具有可用皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)。组合物中的至少一种活性剂为本文所述的抗CD20/抗CD3双特异性抗体。标签或包装说明书表明该组合物用于治疗选择的症状(例如B细胞增殖性病症，例如非霍奇金淋巴瘤(NHL)，例如弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)或滤泡性淋巴瘤(FL)，例如复发性或难治性DLBCL或FL)，并且进一步包括与本文所述的给药方案中的至少一者相关的信息。此外，该试剂盒或制品可包含(a)第一容器，第一容器中含有包含本文所述的抗CD20/抗CD3双特异性抗体的组合物；以及(b)第二容器，该第二容器中含有包含进一步的细胞毒性剂或其他治疗剂的组合物。替代性地或另外地，制品还可包括第二(或第三)容器，该第二(或第三)容器包括药用缓冲液，诸如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和葡萄糖溶液。制品可以进一步包括从商业和用户角度所需的其他物质，包括其他缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头和注射器。

VI.实施例

可根据以下任何编号的实施例来定义本文所述的技术的一些实施例：

1.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第

二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(iii)该C1D1为从约0.1mg至约10mg，该C1D2为约5mg至约80mg，并且该C1D3为从约10mg至约300mg；以及

(b)该第二给药周期包含双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg。

2.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

3.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

4.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

5.如实施例1-4中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1小于C1D2。

6.如实施例1-5中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D2与C1D3相同。

7.如实施例1-6中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(a)该C1D1为从约2mg至约8mg，该C1D2为从约10mg至约75mg，并且该C1D3为从约20mg至约75mg；以及

(b)该C2D1为从约20mg至约75mg。

8.如实施例1-7中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D1为约5mg。

9.如实施例1-8中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D3为从约25mg至约75mg。

10.如实施例9所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。

11.如实施例1-10中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C2D1为从约40mg至约75mg。

12.如实施例11所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。

13.如实施例8-12中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

14.如实施例1-13中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(a)该C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；

(b)该C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；

(c)该C1D1为约5mg，C1D2为约10mg，C1D3为约30mg，并且C2D1为约30mg；

(d)该C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约40mg，并且C2D1为约40mg；或

(e)该C1D1为约5mg，C1D2为约20mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。

15.如实施例1-14中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。

16.如实施例1-4中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1与C1D2相同。

17.如实施例16所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。

18.如实施例16或17所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D2在量上等同于C1D3。

19.如实施例18所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。

20.如实施例1-19中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D1后约七天向受试者施用C1D2。

21.如实施例1-20中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D2后约七天向受试者施用C1D3。

22.如实施例1-21中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D3后约七天向受试者施用C2D1。

23.如实施例1-22中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括分别在或约在该第一给药周期的第1天、第8天和第15天向该受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。

24.如实施例1-23中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在该第二给药周期的第1天向该受试者施用C2D1。

25.如实施例1-24中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期和该第二给药周期是21天给药周期。

26.如实施例1-24中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期为21天给药周期并且该第二给药周期为28天给药周期。

27.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

(b)该第二给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中该C2D1为约45mg。

28.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

29.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

30.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

31.如实施例27-30中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。

32.如实施例27-31中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期和该第二给药周期是21天给药周期。

33.如实施例27-31中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期为21天给药周期并且该第二给药周期为28天给药周期。

34.如实施例27-33中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括分别在或约在该第一给药周期的第1天、第8天和第15天向该受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。

35.如实施例27-33中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在该第二给药周期的第1天向该受试者施用C2D1。

36.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一给药周期包含在该第一给药周期的第1天的该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天的双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天的双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中

(i)C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

(b)该第二给药周期包含在该第二给药周期的第1天的双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg。

37.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

(b)该第二给药周期包含在该第二给药周期的第1天的该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中该C2D1为约45mg。

38.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

39.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

40.如实施例36-39中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。

41.如实施例36-40中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约15mg。

42.如实施例36-40中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约45mg。

43.如实施例36-42中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中给药周期中的每一者为21天给药周期。

44.如实施例36-42中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期为21天给药周期并且该第二给药周期为28天给药周期。

45.如实施例1-44中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

46.如实施例1-45中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该B细胞增殖性病症为非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

47.如实施例46所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

48.如实施例47所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为1LDLBCL或复发性或难治性DLBCL。

49.如实施例47或48所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为里希特转化。

50.如实施例47所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为1L FL或复发性或难治性FL。

51.如实施例47或50所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为转化FL。

52.如实施例47所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

53.如实施例46所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为Ann Arbor第III或IV期NHL。

54.如实施例1-53中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者先前已被施用至少一种前线系统性疗法。

55.如实施例54所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者已被施用介于一种与九种之间的前线系统性疗法。

56.如实施例55所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者已被施用三种前线系统性疗法。

57.如实施例54-56中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中至少一种前线系统性疗法包含抗CD20抗体。

58.如实施例57所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该抗CD20抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗。

59.如实施例57或58所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中包含该抗CD20抗体的前线系统性疗法另外包含烷基化剂或蒽环类药物。

60.如实施例59所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该烷基化剂为环磷酰胺或苯达莫司汀。

61.如实施例59所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该蒽环类药物为柔红霉素或阿霉素。

62.如实施例57所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中包含该抗CD20抗体的该前线系统性疗法另外包含：

(i)环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松(R-CHOP)；

(ii)环磷酰胺、长春新碱和强的松(CVP)；

(iii)氟达拉滨；或

(iv)苯达莫司汀。

63.如实施例54-56中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中至少一种前线系统性疗法包含布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。

64.一种治疗患有DLBCL的受试者所述的方法，其包含以至少包含第一21天给药周期及第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(b)该第二21天给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量

(C2D1)，其中该C2D1等于或大于该C1D3并且为从约10mg至约300mg。

65.一种结合CD20和CD3的双特异性抗体用于治疗患有DLBCL的受试者，其中双特异性抗体被配制用于在给药方案向受试者皮下施用，该给药方案至少包括第一个21天给药周期和第二个21天给药周期日给药周期，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(b)该第二21天给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量

(C2D1)，其中该C2D1等于或大于该C1D3并且为从约10mg至约300mg。

66.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有DLBCL的受试者中之用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(b)该第二21天给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中该C2D1等于或大于该C1D3并且为从约10mg至约300mg。

67.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有DLBCL的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

68.一种治疗患有DLBCL的受试者所述的方法，其包含以至少包含第一21天给药周期及第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

69.一种结合CD20和CD3的双特异性抗体用于治疗患有DLBCL的受试者，其中双特异性抗体被配制用于在给药方案皮下给药至受试者，该给药方案包括至少第一个21天给药周期和第二个28天给药周期，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

70.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有DLBCL的受试者中之用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

71.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有DLBCL的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

72.如实施例64-71中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

73.如实施例64-72中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为里希特转化。

74.如实施例64-73中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D1后约七天向受试者施用C1D2。

75.如实施例64-74中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D2后约七天向受试者施用C1D3。

76.如实施例64-75中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在施用C1D3后约七天向受试者施用C2D1。

77.如实施例64-76中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括分别在或约在该第一给药周期的第1天、第8天和第15天向该受试者施用C1D1、C1D2和C1D3。

78.一种治疗患有FL的受试者所述的方法，其包含以至少包含第一21天给药周期及第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(b)该第二28天给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中该C2D1等于或大于该C1D3并且为从约10mg至约300mg。

79.一种结合CD20和CD3的双特异性抗体用于治疗患有FL的受试者，其中双特异性抗体被配制用于在给药方案皮下给药至受试者，该给药方案包括至少第一个21天给药周期和第二个28天给药周期，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

80.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有FL的受试者中之用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

81.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有FL的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

82.一种治疗患有FL的受试者所述的方法，其包含以至少包含第一21天给药周期及第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(a)该第一21天给药周期包含该双特异性抗体的第一皮下剂量

(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

83.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有FL的受试者，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

84.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有FL的受试者中之用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

85.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有FL的受试者的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一21天给药周期和第二21天给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

86.如实施例78-85中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为1L FL或复发性或难治性FL。

87.如实施例78-86中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL是转化FL。

88.如实施例64-87中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1小于C1D2。

89.如实施例64-87中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D2与C1D3相同。

90.如实施例64-89中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(b)该C2D1为从约20mg至约75mg。

91.如实施例64-90中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D1为约5mg。

92.如实施例64-91中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D3为从约25mg至约75mg。

93.如实施例92所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。

94.如实施例64-93中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C2D1为从约40mg至约75mg。

95.如实施例94所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。

96.如实施例91-95中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

97.如实施例64-96中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(a)该C1D1为约5mg，该C1D2为约45mg，该C1D3为约45mg，并且该C2D1为约45mg；

(b)该C1D1为约5mg，该C1D2为约10mg，该C1D3为约30mg，并且该C2D1为约30mg；

(c)该C1D1为约5mg，该C1D2为约15mg，该C1D3为约45mg，并且该C2D1为约45mg；

(d)该C1D1为约5mg，该C1D2为约20mg，该C1D3为约40mg，并且该C2D1为约40mg；或

(e)该C1D1为约5mg，该C1D2为约20mg，该C1D3为约45mg，并且该C2D1为约60mg。

98.如实施例64-96中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。

99.如实施例64-87中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1与C1D2相同。

100.如实施例99所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约5mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约60mg。

101.如实施例64-87中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D2与C1D3相同。

102.如实施例101所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。

103.如实施例64-102中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在该第二给药周期的第1天向该受试者施用C2D1。

104.如实施例1-103中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含一个或多个额外给药周期。

105.如实施例104所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

106.如实施例104或105所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含六个额外给药周期。

107.如实施例104或105所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含十五个额外给药周期。

108.如实施例104-107中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是21天给药周期。

109.如实施例104-107中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是28天给药周期。

110.如实施例104-109中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期包含施用该双特异性抗体的另外的剂量。

111.如实施例110所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量约在量上等同于C2D1。

112.如实施例110或111所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

113.如实施例110-112中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在各个额外给药周期的第1天向该受试者施用该双特异性抗体的每个额外剂量。

114.如实施例1-113中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体作为单一疗法施用或将施用于该受试者。

115.如实施例1至113中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体作为组合疗法施用或将施用于该受试者。

116.如实施例115所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体与额外治疗剂同时施用或将施用于该受试者。

117.如实施例115所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体在施用额外治疗剂之前施用或将施用于该受试者。

118.如实施例115所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体在施用一种或多种额外治疗剂之后施用或将施用于该受试者。

119.如实施例118所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该额外治疗剂为奥滨尤妥珠单抗

120.如实施例118所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该额外治疗剂为托珠单抗。

121.如实施例1-120中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者患有细胞因子释放综合征事件，并且该方法进一步包含在中止用该双特异性抗体进行治疗的同时治疗该细胞因子释放综合征事件的症状。

122.如实施例121所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法进一步包含向该受试者施用有效量的托珠单抗以治疗该细胞因子释放综合征事件。

123.如实施例122所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中托珠单抗以约8mg/kg的单次剂量经静脉施用该受试者并且其中该单次剂量不超过800mg。

124.如实施例123所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该细胞因子释放综合征事件在治疗该细胞因子释放综合征事件的症状的24小时内未消退或恶化，并且该方法进一步包含向该受试者施用一个或多个另外的剂量的托珠单抗以管理该细胞因子释放综合征事件。

125.如实施例124所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该一个或多个另外的剂量的托珠单抗以约8mg/kg的剂量经静脉向该受试者施用，并且其中该剂量不超过800mg。

126.如实施例124或125所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其进一步包含向该受试者施用有效量的皮质类固醇。

127.如实施例126所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该皮质类固醇经静脉向该受试者施用。

128.如实施例126或127所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该皮质类固醇为甲基泼尼松龙。

129.如实施例128所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中甲基泼尼松龙以每天约2mg/kg的剂量施用。

130.如实施例126或127所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该皮质类固醇为地塞米松。

131.如实施例130所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中地塞米松以从约10mg至约100mg的剂量施用。

132.如实施例131所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中地塞米松以约10mg的剂量施用。

133.如实施例131所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中地塞米松以约20mg的剂量施用。

134.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

135.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

136.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

137.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

138.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

139.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

140.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

141.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

142.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

143.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

144.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

145.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

146.如实施例134-145中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

147.如实施例134-145中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该B细胞增殖性病症为非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

148.如实施例147所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

149.如实施例148所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为1LDLBCL或复发性或难治性DLBCL。

150.如实施例148或149所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为里希特转化。

151.如实施例148所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为1L FL或复发性或难治性FL。

152.如实施例148或151所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为转化FL。

153.如实施例147所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

154.一种治疗患有DLBCL的受试者群体的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

155.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有DLBCL之受试者群体，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

156.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有DLBCL的受试者群体中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

157.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有DLBCL的受试者群体的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

158.如实施例154-157中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

159.如实施例135-139中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为里希特转化。

160.一种治疗患有FL的受试者群体的方法，其包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

161.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于治疗患有FL之受试者群体，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

162.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在治疗患有FL的受试者群体中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

163.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造治疗患有FL的受试者群体的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向该受试者皮下施用，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

164.如实施例160-163中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为1L FL或复发性或难治性FL。

165.如实施例160-164中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL是转化FL。

166.如实施例134-165中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(i)C1D1为约5mg，C1D2为约15mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg；或

(ii)C1D1为约5mg，C1D2为约45mg，C1D3为约45mg，并且C2D1为约45mg。

167.如实施例134-166中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期和该第二给药周期是21天给药周期。

168.如实施例134-167中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期为21天给药周期并且该第二给药周期为28天给药周期。

169.如实施例134-168中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含一个或多个额外给药周期。

170.如实施例169所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

171.如实施例169或170所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含六个额外给药周期。

172.如实施例169或170所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含十五个额外给药周期。

173.如实施例169-172中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是21天给药周期。

174.如实施例169-172中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是28天给药周期。

175.如实施例169-174中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期包含施用该双特异性抗体的另外的剂量。

176.如实施例175所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量约在量上等同于C2D1。

177.如实施例175或176所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

178.如实施例175-177中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在各个额外给药周期的第1天向该受试者群体施用该双特异性抗体的每个额外剂量。

179.如实施例134-178中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中完全缓解率为至少约20％。

180.如实施例134-179中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该完全缓解率大于约40％。

181.如实施例134-180中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该完全缓解率大于约55％。

182.如实施例134-181中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中中位无进展生存期大于约四个月。

183.如实施例134-181中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中中位总生存期大于约9.5个月。

184.如实施例134-181中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在开始治疗后约20个月的客观缓解率为至少约70％。

185.如实施例134-181中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在开始治疗后约12个月的客观缓解率为至少约60％。

186.如实施例134-178中任一项所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％。

187.如实施例186所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少44％。

188.如实施例134-178中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率在35％至55％之间。

189.如实施例188所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约45％。

190.如实施例134-148以及160-178中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率为至少70％。

191.如实施例190所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少80％。

192.如实施例134-148以及160-178中任一项所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率在70％至90％之间。

193.如实施例192所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约80％。

194.如实施例134-148、154-159以及166-178中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性DLBCL或转化FL，并且其中客观缓解率为至少25％。

195.如实施例194所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少35％。

196.如实施例134-148、154-159以及166-178中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性DLBCL，并且其中客观缓解率在25％至45％之间。

197.如实施例196所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约35％。

198.如实施例134-197中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体在施用该双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约30％。

199.如实施例198所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约25％。

200.如实施例199所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约10％。

201.如实施例200所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约5％。

202.如实施例201所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约3％。

203.如实施例134-202中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如美国移植与细胞疗法学会，2018；ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％。

204.如实施例203所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约5％。

205.如实施例204所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约3％。

206.如实施例134-205中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约1％。

207.如实施例206所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率为约0％。

208.一种降低在施用结合到CD20和CD3的双特异性抗体的患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的某些不良事件的比率的方法，该方法包括使用阶梯式给药方案皮下施用该双特异性抗体，其中与经静脉施用该双特异性抗体的参考受试者群体相比，该受试者群体中的某些不良事件的比率是降低的。

209.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体，其用于降低在患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的某些不良事件的比率，其中该双特异性抗体被配制用于使用阶梯式给药方案进行皮下施用，其中与经静脉施用该双特异性抗体的参考受试者群体相比，该受试者群体中的某些不良事件的比率是降低的。

210.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在降低在患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的某些不良事件的比率中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于阶梯式给药方案进行皮下施用，其中与经静脉施用该双特异性抗体的参考受试者群体相比，该受试者群体中的某些不良事件的比率是降低的。

211.一种结合到CD20和CD3的双特异性抗体在制造用于降低在患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的某些不良事件的比率的药物中的用途，其中该双特异性抗体被配制用于使用阶梯式给药方案进行皮下施用，其中与经静脉施用该双特异性抗体的参考受试者群体相比，该受试者群体中的某些不良事件的比率是降低的。

212.如实施例208-211中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该阶梯式给药方案系选自由以下组成的组中的一者：

(I)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(i)该C1D1不大于C1D2并且小于C1D3；

(ii)该C1D2不大于C1D3；以及

(b)该第二给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1等于或大于C1D3并且为从约10mg至约300mg；

(II)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(i)该C1D1为约5mg；

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

(b)该第二给药周期包含该双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中C2D1为约45mg；以及

(III)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(a)该第一给药周期包含在该第一给药周期的第1天的双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在该第一给药周期的第8天的双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)以及在该第一给药周期的第15天的双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)该C1D1为约5mg，

(ii)该C1D2不小于该C1D1并且不大于该C1D3；以及

(iii)该C1D3为约45mg；以及

213.如实施例208-212中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中：

(i)该C1D1为约5mg，该C1D2为约15mg，该C1D3为约45mg，并且该C2D1为约45mg；或

(ii)该C1D1为约5mg，该C1D2为约45mg，该C1D3为约45mg，并且该C2D1为约45mg。

214.如实施例208-213中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期和该第二给药周期是21天给药周期。

215.如实施例208-213中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一给药周期为21天给药周期并且该第二给药周期为28天给药周期。

216.如实施例208-215中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含一个或多个额外给药周期。

217.如实施例216所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

218.如实施例216或217所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含六个额外给药周期。

219.如实施例216或217所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该给药方案包含十五个额外给药周期。

220.如实施例216-219中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是21天给药周期。

221.如实施例216-219中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期是28天给药周期。

222.如实施例216-222中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中每个额外给药周期包含施用该双特异性抗体的另外的剂量。

223.如实施例222所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量约在量上等同于C2D1。

224.如实施例222或223所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

225.如实施例222-224中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该方法包括在各个额外给药周期的第1天向该受试者群体施用该双特异性抗体的每个额外剂量。

226.如实施例208-225中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

227.如实施例226所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中B细胞增殖性病症是非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

228.如实施例227所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为既往未治疗的(1L)NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

229.如实施例228所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为1LDLBCL或复发性或难治性DLBCL。

230.如实施例228或229所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该DLBCL为里希特转化。

231.如实施例228所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为1L FL或复发性或难治性FL。

232.如实施例228或231所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该FL为转化FL。

233.如实施例228所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

234.如实施例228-233中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体在施用双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中该受试者群体中细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约25％。

235.如实施例208-233中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体在施用双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中该受试者群体中细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约30％。

236.如实施例234所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约10％。

237.如实施例236所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约5％。

238.如实施例237所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体中该细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约3％。

239.如实施例208-238中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如美国移植与细胞疗法学会，2018；ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％。

240.如实施例239所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约5％。

241.如实施例240所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约3％。

242.如实施例208-241中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率小于或等于约1％。

243.如实施例242所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的该细胞因子释放综合征的比率为约0％。

244.如实施例208-243中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中完全缓解率为至少约20％。

245.如实施例208-244中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中完全缓解率为至少约40％。

246.如实施例208-245中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中中位无进展生存期大于约两个月。

247.如实施例208-245中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中中位总生存期大于约9.5个月。

248.如实施例208-247中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在开始治疗后约24个月的客观缓解率为至少约75％。

249.如实施例208-247中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在开始治疗后约24个月的客观缓解率为至少约70％

250.如实施例208-247中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在开始治疗后约12个月的客观缓解率为至少约60％。

251.如实施例208-228中任一项所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％。

252.如实施例251所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少44％。

253.如实施例208-228中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率在35％至55％之间。

254.如实施例253所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约45％。

255.如实施例208-228中任一项所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率为至少70％。

256.如实施例255所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少80％。

257.如实施例208-228中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率在70％至90％之间。

258.如实施例257所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约80％。

259.如实施例208-228中任一项所述的方法、供使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性DLBCL或转化FL，并且其中客观缓解率为至少25％。

260.如实施例259所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为至少35％。

261.如实施例208-228中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者群体患有复发性或难治性DLBCL，并且其中客观缓解率在25％至45％之间。

262.如实施例261所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该客观缓解率为约35％。

263.如实施例1-262中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含含有第一结合域的抗CD20臂，该第一结合域包含以下六个高变区(HVR)：

(a)HVR-H1，其包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；

(b)HVR-H2，其包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列；

(c)HVR-H3，其包含VVYYSNSYWYFDV(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列；

(d)HVR-L1，其包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；

(e)HVR-L2，其包含APSNLAS(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；以及

(f)HVR-L3，其包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。

264.如实施例1-263中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含含有第一结合域的抗CD20臂，该第一结合域包含(a)重链可变(VH)域，其包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)轻链可变(VL)域，其包含与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。

265.如实施例264所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第一结合域包含含有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的VH域以及含有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL域。

266.如实施例1-265中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含含有第二结合域的抗CD3臂，该第二结合域包含以下六个HVR：

(a)HVR-H1，其包含NYYIH(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列；

(b)HVR-H2，其包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列；

(c)HVR-H3，其包含DSYSNYYFDY(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；

(d)HVR-L1，其包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；

(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；以及

(f)HVR-L3，其包含TQSFILRT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列。

267.如实施例1-266中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含含有第二结合域的抗CD3臂，该第二结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ IDNO:15的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ IDNO:16的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。

268.如实施例267所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该第二结合域包含含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的VH域以及含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的VL域。

269.如实施例1-268中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含(a)抗CD20臂，其包含(i)含有与SEQ ID NO:51的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的重链，以及(ii)含有与SEQ ID NO:52的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的轻链；以及(b)抗CD3臂，其包含(i)含有与SEQ ID NO:53的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的重链，以及(ii)含有与SEQ ID NO:54的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的轻链。

270.如实施例269所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中(a)该抗CD20臂包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链以及含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的轻链，以及(b)该抗CD3臂包含含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链以及含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的轻链。

271.如实施例1-270中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体为人源化抗体。

272.如实施例1-271中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体为嵌合抗体。

273.如实施例1-272中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体为结合CD20和CD3的抗体片段。

274.如实施例273所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该抗体片段系选自由以下组成的组：Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab’)₂片段。

275.如实施例1-272中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体为全长抗体。

276.如实施例1-272和262中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体为IgG抗体。

277.如实施例276所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该IgG抗体为IgG₁抗体。

278.如实施例276或277所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该IgG抗体包含在氨基酸残基N297(EU编号)处的突变，该突变导致糖基化缺失。

279.如实施例278所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在氨基酸残基N297处的该突变为取代突变。

280.如实施例278或279所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中在氨基酸残基N297处(EU编号)的该突变降低Fc区的效应子功能。

281.如实施例278-280中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该突变为N297G或N297A突变(EU编号)。

282.如实施例277-281中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含该Fc区中的降低效应子功能的突变。

283.如实施例282所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该突变为取代突变。

284.如实施例283所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该取代突变位于氨基酸残基L234、L235、D265和/或P329(EU编号)处。

285.如实施例284所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该取代突变选自由以下组成的组：L234A、L235A、D265A和P329G(EU编号)。

286.如实施例1-272以及实施例275-285中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该双特异性抗体包含一个或多个重链恒定域，其中该一个或多个重链恒定域选自第一CH1(CH₁)域、第一CH2(CH₁)域、第一CH3(CH3₁)域、第二CH1(CH1₂)域、第二CH2(CH2₂)域和第二CH3(CH3₂)域。

287.如实施例286所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该一个或多个重链恒定域中的至少一者与另一重链恒定域配对。

288.如实施例286或287所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CH3₁域和该CH3₂域各包含突起或空腔，并且其中CH3₁域中的突起或空腔分别可定位于CH3₂域中的空腔或突起中。

289.如实施例288所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CH3₁域和该CH3₂域在该突起与空腔之间的界面处相接。

290.如实施例286-289中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CH2₁域和该CH2₂域各包含突起或空腔，并且其中该CH2₁域中的该突起或空腔分别可定位于该CH2₂域中的该空腔或突起中。

291.如实施例290所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该CH2₁域和该CH2₂域在该突起与空腔之间的界面处相接。

292.如实施例264或265所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变(EU编号)。

293.如实施例267或268所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

294.如实施例269或270所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中(a)该抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变及(b)该抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

295.如实施例1-133或263-294中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者为人。

296.如实施例134-262或263-294中任一项所述的方法、使用的双特异性抗体或用途，其中该受试者为人。

VII.实例

以下为本发明的方法的实例。应当理解，鉴于上文给出的一般描述，可以实施各种其他实施例。

实例1.评估递增剂量的莫苏妥珠单抗(BTCT4465A)作为单一药剂在复发性或难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病患者中的安全性、有效性和药代动力学的开放标签、多中心、I/Ib期试验

本实例描述了莫苏妥珠单抗作为单一药剂施用预期表达CD20的R/R血液系统恶性肿瘤(包括B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL))患者的开放标签、多中心的剂量递增I/Ib期研究GO29781。该研究在全球大约45-50个研究地点在剂量递增阶段纳入了大约130-226名患者(100-166名NHL患者以及30-60名CLL患者)，并且在扩展阶段期间纳入了大约290-520名患者。

该研究具有四个组，A、B、D和F。为了本公开的目的，作为经静脉施用莫苏妥珠单抗的定群的A组和B组的结果可用作与经皮下施用莫苏妥珠单抗的D组和F组进行比较的基础。不同组中的CRS比率是通过皮下施用实现不良事件的减轻的量度指标。

A.目标

本研究评估了莫苏妥珠单抗在复发性或难治性(R/R)非霍奇金淋巴瘤(NHL)及慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中的安全性、耐受性和药代动力学，如下所述：

·根据第1周期非分次剂量排程(A组)以单一药剂经静脉(IV)施用；

·根据第1周期递增剂量排程(B组)作为单一药剂IV施用；

·根据第1周期非分次剂量排程(D组)以单一药剂皮下(SC)施用；

·根据第1周期递增剂量排程(F组)以单一药剂SC施用；

本研究确定了莫苏妥珠单抗在R/R NHL以及CLL患者中的最大耐受剂量(MTD)和剂量限制性毒性(DLT)，如下所述：

·根据第1周期非分次剂量排程(A组)IV施用；

·根据第1周期递增剂量排程(B组)IV施用；

·根据第1周期非分次剂量排程(D组)SC施用；

·根据第1周期递增剂量排程(F组)以单一药剂SC施用；

本研究根据安全性、药代动力学(PK)和药效学资料，确定了莫苏妥珠单抗作为单一药剂在R/R NHL和CLL患者中的推荐的II期剂量和排程。此外，本研究评估使用第1周期递增给药排程莫苏妥珠单抗作为单一药剂(B组)在R/R弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)以及转化滤泡性淋巴瘤(FL)患者中的疗效，如根据标准NHL疗效评价标准通过独立审查机构评估的完全缓解(CR)率所测量的。

本研究评估了针对莫苏妥珠单抗之抗药物抗体(ADA)的发生率及其与相关临床结果的关系。

当评估莫苏妥珠单抗作为单一药剂之疗效不是上述主要目标时，本研究对莫苏妥珠单抗作为单一药剂在R/R NHL和CLL患者中的抗肿瘤活性进行了初步评估。

B.研究设计

研究描述

图1提供了研究的剂量递增部分的概述，并且图2描绘了剂量扩展阶段。最初，莫苏妥珠单抗在每个周期的第1天(A组)以单一非分次IV剂量给药。第1周期给药随后被修改，使得A组剂量递增停止并且莫苏妥珠单抗剂量递增如下进行：

·使用第1周期递增IV给药方案(B组)进行莫苏妥珠单抗剂量递增

·使用第1周期非分次SC给药方案(D组)进行莫苏妥珠单抗剂量递增

·使用第1周期递增SC给药方案(F组)进行莫苏妥珠单抗剂量递增

纳入递增组B、D和F可能不一定同时开始。

在确定了单一药剂莫苏妥珠单抗的推荐II期剂量(RP2D)和排程后，在适应症特异性扩展定群中进一步评估莫苏妥珠单抗作为单一药剂的临床活性(图2)。

除了NHL中的剂量递增及扩展之外，单独递增和扩展在CLL中也可以进行。剂量递增和剂量扩展的规则与针对NHL递增和扩展的规则相同。

剂量递增阶段

研究的剂量递增阶段评估通过IV输注或SC注射施用的莫苏妥珠单抗的安全性、耐受性和药代动力学。至多可以纳入五个剂量递增组(图1)：

·A组：第1周期非分次单一药剂莫苏妥珠单抗递增，IV输注(已停止纳入剂量递增组A以优先评估莫苏妥珠单抗的其他给药排程及途径)；

·B组：第1周期单一药剂莫苏妥珠单抗递增，IV输注；

·D组：第1周期非分次单一药剂莫苏妥珠单抗递增，SC注射；

·F组：第1周期单一药剂莫苏妥珠单抗递增，SC注射。

剂量递增组C(奥滨尤妥珠单抗的单次剂量后的第1周期非分次单一药剂莫苏妥珠单抗；IV输注)已被移除。

最初，A组中的剂量递增定群由1名患者组成。转换为标准3+3设计基于此处提供的标准进行。随后，除非根据标准3+3设计，在纳入第三名患者之前在前2名患者中观察到DLT，否则剂量递增定群至少由3名患者组成。

B、D和F组中的剂量递增定群基于开始的标准3+3设计。

对于每个剂量递增定群，用莫苏妥珠单抗的第一剂量进行治疗是错开的，以使得定群中纳入的第二名患者在第一名纳入的患者接受莫苏妥珠单抗的第一剂量后至少72小时接受莫苏妥珠单抗，以评估任何严重和不期望的急性药物或输注/注射相关毒性；每个定群中后续患者的给药从先前患者施用结束起错开至少24小时。在已显示不超过MTD的剂量水平下，纳入另外的患者以获得另外的安全性并且药效学数据不需要错开的患者纳入。

表现出可接受的安全性和临床益处证据(如本文定义)的患者可以每21天继续接受莫苏妥珠单抗，至多8或17个周期，直至确认客观进行性疾病或不可接受的毒性，以先发生者为准。本文详述了基于对初始治疗的临床反应的莫苏妥珠单抗再治疗。

先前在血液系统恶性肿瘤方面的临床试验经验表明，根据所治疗的患者群体，可能会观察到不同的毒性特征。具体而言，由于存在更大量循环肿瘤细胞和/或总体疾病负担的差异，莫苏妥珠单抗在CLL患者中的毒性可能与NHL患者不同。由于CLL患者中毒性特征和/或MTD的此种潜在差异，为NHL和CLL患者提供了单独的剂量递增。在NHL患者中进行初始剂量递增。开始CLL患者中的剂量递增由申办者自行决定，并遵循适用的B组剂量递增规则或D组剂量递增规则。CLL中累积的第1周期起始剂量水平较相应NHL剂量递增中已通过DLT评估窗口的最高累积第1周期剂量低至少一个剂量水平。

莫苏妥珠单抗剂量水平与患者体重无关(固定/统一给药)。50μg的起始剂量系基于在人中的最小预期生物效应水平(MABEL)。

剂量限制性毒性的定义

尽管CRS是根据改良的细胞因子释放综合征分级系统(表4)进行分级，但对于剂量递增决策，与CRS相关的DLT是根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语(NCI CTCAE)v4.0基于个体体征和症状以及实验室数据定义的。剂量限制性毒性(DLT)根据临床实践进行治疗，并且通过其解决方案进行监测。所有不良事件均应被认为与莫苏妥珠单抗有关，除非研究者明确将此类事件归因于另一明确可鉴定的原因(例如，记录的疾病进展、伴随用药或含预先存在的医疗状况)。由于B细胞减少而导致的B细胞减少、淋巴细胞减少症和/或白血球减少症将不被视为DLT，因为其为莫苏妥珠单抗治疗的预期药效学结果。

表4.改良的细胞因子释放综合征分级系统

Lee 2014标准：Lee等人,Blood,124:188-195,2014。

^a低剂量升压药：低于表5所示剂量的单一升压药。

^b高剂量升压药：如表5中所定义。

表5.高剂量升压药

min＝分钟；VASST＝升压素及败血性休克试验。

^aVASST升压药当量方程式：去甲肾上腺素当量剂量＝[去甲肾上腺素(μg/min)]+[多巴胺(μg/kg/min)÷2]+[肾上腺素(μg/min)]+[去羟肾上腺素(μg/min)÷10]。

出于剂量递增的目的，DLT评估期通过以下时间段、根据下列指定剂量递增组来定义：

·A、B、D和F组：第1周期第1天至第1周期第21天。

–对于治疗组B和F，21天DLT评估期细分为三个窗口，如本文所述。

–对于治疗组B和F，在C1D8和/或C1D15给药至剂量延迟情况下，DLT评估期相应地延长至C1D15施用日期后7天。

DLT被定义为在DLT评估期期间发生的以下任何不良事件：

·任何未被研究者认为可归因于另一明确可鉴定的原因的4级不良事件，但以下情况除外：

–4级中性粒细胞减少症，不伴有体温升高(表现为单一口腔温度≥38.3℃(101°F)或口腔温度≥38.0℃(100.4°F)持续≥1小时)并在1周内改善为≤2级(或≥基线值的80％，以较低者为准)。

–4级淋巴细胞减少症，其为疗法的预期结果。

–4级白血球减少症，其为疗法的预期结果。

–仅针对CLL患者：中性粒细胞减少症基于国家癌症研究所发起的工作组(NCI-WG)定义(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)进行分级；由于研究治疗前骨髓侵犯，嗜中性球绝对计数(ANC)<1000/mm³无法基于ANC评估DLT

–仅针对CLL患者：血小板减少症基于NCI-WG定义(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)进行分级；由于研究治疗前骨髓侵犯，血小板计数<20,000/μL将无法基于血小板计数评估DLT。

–仅针对CLL患者：基于NCI-WG定义(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)对贫血进行分级；在进行红血球(RBC)输血情况下，在1周内改善至3级，并在另一周内进一步改善至2级的4级贫血将不是DLT。

·任何未被研究者认为可归因于另一明确可鉴定的原因的3级血液学不良事件，但以下情况除外：

–3级淋巴细胞减少症，其为疗法的预期结果。

–3级白血球减少症，其为疗法的预期结果。

–3级中性粒细胞减少症，不伴有体温升高(表现为单一口腔温度≥38.3℃(101°F)或口腔温度≥38.0℃(100.4°F)持续≥1小时)并在1周内改善为≤2级(或≥基线值的80％，以较低者为准)。仅针对CLL患者：基于NCI-WG慢性淋巴细胞白血病分级量表(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)对中性粒细胞减少症进行分级；由于研究治疗前骨髓侵犯引起的ANC<1000/mm³无法基于ANC评估DLT。

–3级血小板减少症，未转输血小板而在1周内改善至≤2级(或基线值≥80％，以较低者为准)，并且与研究者认为临床显著的出血无关。

针对CLL患者：血小板减少症基于NCI-WG定义(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)进行分级；由于研究治疗前骨髓侵犯，血小板计数<20,000/μL将无法基于血小板计数评估DLT。

–仅针对CLL患者：3级贫血(基于NCI-WG慢性淋巴细胞白血病分级量表(Hallek等人，Blood,111:5446-5456,2008)，在不进行RBC输血情况下在1周内改善至2级。

·任何未被研究者认为可归因于另一明确可鉴定的原因的3级非血液学不良事件，但以下情况除外：

–3级恶心或呕吐，未前置用药，或可用口服或IV止吐药管理，结果为在24小时内缓解至≤2级。不排除需要全胃肠外营养或住院的3级恶心或呕吐，并且应将其视为DLT。

–3级疲劳，持续≤3天。

–在≤2级CRS(表4)背景下发生且持续时间<3天的CRS的3级(NCI CTCAE v4)个体体征和症状将不被视为DLT。

–无症状且研究者认为在临床上无明显意义的第3级实验室异常。

·如下定义的任何肝功能异常：

–天冬氨酸转氨酶(AST)或丙氨酸转氨酶(ALT)>3x正常上限(ULN)以及总胆红素>2x ULN。任何AST或ALT 3 x ULN以及总胆红素>2 x ULN(其中没有个别实验室值超过3级且持续<3天)将不被视为DLT。

–任何3级AST或ALT升高，但以下情况除外：任何持续<3天的3级AST或ALT升高将不被视为DLT。

剂量递增规则以及最大耐受剂量的确定

A、B、D和F组剂量递增的具体规则详述如下。个体组剂量递增的启动由承办人自行决定。在每个剂量递增决定之前，都会审查相关的人口统计学、AE、实验室、剂量施用以及可用PK和药效学数据(例如，血清细胞因子和T细胞活化标志物)。

根据以下规则确定患者是否可进行DLT评估：

·接受研究治疗并通过DLT评估窗口继续研究的患者被视为可评估DLT。

·在完成DLT评估窗口之前由于DLT以外的原因而中止单一药剂莫苏妥珠单抗治疗的患者被视为不可用于剂量递增决定以及MTD确定，并且由相同剂量水平的其他患者替代。

·仅对于纳入B组和F组的患者：对于非DLT不良事件在计划的C1D1、C1D8或C1D15剂量后出现超过7天的剂量延迟的患者可能是DLT无法评估的，并且可能会被替代。对于剂量延迟为7天或更少的患者，DLT窗口将延长至实际C1D15剂量后的7天。

·可能会替代在DLT评估窗口期间接受混淆DLT评估的支持性照护(不包括本文作为DLT定义的一部分描述之支持性照护)的患者。

基于对实时安全性资料以及可用初步PK数据的审查，可酌情停止或修改剂量递增。

为获得另外的安全性和药效学数据以更好地充分告知RP2D，可在以下剂量水平下纳入更多患者：基于上述剂量递增标准已显示不超过MTD，并且存在抗肿瘤活性和/或药效学生物标志物调节的证据。每个剂量水平最多可纳入另外的约3名患者。出于剂量递增决定的目的，此类患者将不包括在DLT可评估群体中。

C.入选标准

患者满足以下研究入组条件：

·年龄≥18岁

·根据研究者的判断，能够依从研究方案

·美国东岸癌症临床研究合作组织体能状态为0或1

·预期寿命至少12周

·下列经组织学证实的预计会表达CD20抗原的血液系统恶性肿瘤中的一者的病史，在对至少一种既往系统性治疗方案后复发或无反应，并且没有预期可提高生存期的可用疗法(例如，标准化疗、自体干细胞移植(SCT)、CAR-T)：

–剂量递增

·1-3b级FL；边缘区淋巴瘤(包括脾、结和结外)；转化和缓性NHL；里希特转化；DLBCL；原发性纵隔腔B细胞淋巴瘤；小淋巴细胞淋巴瘤；或套细胞淋巴瘤。

–剂量扩展

·DLBCL/转化FL定群：患者在至少两种既往系统性治疗方案(至少包括一种含有蒽环类药物的既往方案，以及至少一种含有抗CD20导向疗法的既往方案)后复发或无反应。纳入研究的转化FL患者的数量可能有限。转化FL是纳入DLBCL定群中的合格诊断，但对于转化FL的标准疗法是复发性或难治性的。

·FL定群：1-3a级FL；患者在至少两种前线系统性疗法后复发或对其无反应，并且接受抗CD20导向疗法基烷基化剂既往治疗。FL扩展定群中的患者可能对抗CD20导向疗法和烷基化剂均为难治性的。

·MCL定群：患者在至少一种含有经批准布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂的既往治疗方案后复发或对其无反应。如果在参与临床试验期间接受了BTK抑制剂，则患者已接受治疗剂量水平的治疗。

·里希特转化定群：患者在至少一种既往系统性治疗方案之后复发或对其无反应。患者在既往治疗方案中已接受蒽环类药物和抗CD20导向疗法。

–CLL：

·在不存在DLT的NHL剂量递增定群中观察到药效生物标志物调节和/或抗肿瘤活性的证据后，申办者可自行决定在CLL患者中开始单独的剂量递增。具有里希特转化的CLL是纳入CLL递增定群中的合格诊断。

·NHL患者具有至少一个二维可测量病灶(通过计算机断层摄影(CT)扫描或磁共振成像(MRI)显示，淋巴结病灶的最大尺寸>1.5cm，或结外病灶的最大尺寸>1.0cm)。

·对于DLBCL或转化FL患者，如果可用的话，提供初始组织病理学诊断的病理报告。如果可用，转化FL患者也提供疾病转化时的病理报告。如果完成，将提供在初始诊断时对组织进行的所有测试的结果，此类测试包括但不限于评估起源细胞、B细胞淋巴瘤2和MYC异常的测试。

·同意提供肿瘤样品如下：

–对于NHL患者，其具有多于一个二维可测量病灶(结节病灶的最大尺寸>1.5cm或通过CT扫描或MRI得到的结外病灶的最大尺寸>1.0cm)，同意从安全可及的部位根据研究者的决定进行活检。在上次既往抗癌疗法的最后剂量与莫苏妥珠单抗的第一剂量之间的任何时间获得的活检可能是可接受的。

–对于CLL患者：骨髓活检和抽吸。

–无法接受活检程序的患者可能有资格纳入研究。在此种情况下，应提供存盘的肿瘤组织样品(石蜡块或至少15张未染色的载玻片)。

·既往抗癌疗法的不良事件解决为≤1级。

·仅限CLL患者：循环淋巴细胞计数>5000/μL血液。不需要通过CT扫描可测量的疾病。

·如下的实验室值：

–肝功能

AST和ALT≤3x正常值上限(ULN)

总胆红素≤1.5x ULN；有记录的吉尔伯特综合征(Gilbert syndrome)病史并且总胆红素升高伴有间接胆红素升高的患者符合条件

–血液学功能

在莫苏妥珠单抗的第一剂量之前14天内未输血的情况下血小板计数≥75,000/mm³

ANC≥1000/mm³

在莫苏妥珠单抗的第一剂量前21天内未输血的总血红素≥10g/dL。

由于NHL/CLL广泛的骨髓侵犯和/或疾病相关的血细胞减少症(例如免疫性血小板减少症)而不符合血液学功能标准的患者可以纳入研究。

–通过Cockcroft-Gault方法或其他机构标准方法(例如，基于核医学肾扫描)，血清肌酐≤ULN或估计肌酐CL≥60mL/min。

·在首次莫苏妥珠单抗施用前6个月内用阿仑单抗、氟达拉滨、克拉屈滨或喷司他汀治疗的患者仅在用医学监测器确认后才可入组。

D.排除标准

·符合以下标准中的任何一者的患者将被排除在研究之外：

·无法遵守协议规定的住院和活动限制

·怀孕或哺乳期，或打算在研究期间或在莫苏妥珠单抗的最后剂量后3个月内以及托珠单抗的最后剂量后3个月内怀孕(如果适用)

–非绝经后(≤12个月的非疗法引起的闭经)或手术不育(切除卵巢和/或子宫)的妇女必须在开始研究药物前14天内的血清妊娠试验结果为阴性。如果在接受第一研究治疗之前的14天内未进行血清妊娠试验，则必须提供阴性尿妊娠试验结果(在研究治疗前7天内进行)。

·在首次莫苏妥珠单抗施用之前的4周内曾使用任何单克隆抗体、放射免疫缀合物或抗体-药物缀合物。

·在首次莫苏妥珠单抗输注之前的12周或药物的五个半衰期(以较短时间为准)内用涉及T细胞的作用机制的系统性免疫治疗剂，包括但不限于细胞因子疗法和抗CTLA-4、抗PD-1以及抗PD-L1治疗性抗体进行既往治疗。

·与既往免疫治疗剂(例如免疫检查点抑制剂疗法)相关的治疗出现的免疫相关不良事件如下：

–≥3级不良事件，用替代疗法管理的3级内分泌病除外

–1-2级不良事件，在治疗中止后未消退至基线。

–对于某些既往治疗，诸如CAR-T细胞疗法，在与医疗监督员讨论并确认后，可以允许既往免疫相关≥3级不良事件(例如，CRS)的患者入组。

·在首次莫苏妥珠单抗施用之前的4周或药物的五个半衰期(以较短者为准)内用任何化疗剂进行治疗或用任何其他抗癌剂(研究性或其他)进行治疗。

·首次莫苏妥珠单抗施用前2周内用放射性疗法进行治疗。

·如果患者在首次莫苏妥珠单抗施用前4周内接受过放射性疗法，则患者必须在放射照野外有至少一个可测量的病灶。仅有一个可测量的病灶并且既往接受过照射但随后出现进展的患者具有资格。

·首次莫苏妥珠单抗施用前100天内自体SCT

·首次莫苏妥珠单抗施用前30天内用CAR-T疗法进行既往治疗

·R/R DLBCL或R/R转化FL患者自体SCT的当前资格

·既往同种异体SCT

·既往实体器官移植

·自体免疫疾病病史，包括但不限于心肌炎、肺炎、重症肌无力、肌炎、自体免疫性肝炎、系统性红斑狼疮症、类风湿性关节炎、炎症性肠病、与抗磷脂综合征相关的血管血栓形成、韦格纳肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)、修格连综合征(syndrome)、格林-巴利综合征(Guillain-Barrésyndrome)、多发性硬化症、血管炎或肾丝球肾炎

–有远期病史或自体免疫疾病控制良好法患者，在与医疗监督员讨论并确认后，可能有资格纳入。接受胰岛素治疗的1型糖尿病受控患者有资格进行研究。

–有自体免疫相关甲状腺功能低下病史并且接受稳定剂量甲状腺替代激素治疗的患者可能有资格参加此研究。

–有疾病相关免疫性血小板减少性紫癜或自体免疫溶血性贫血病史的患者可能有资格参加本研究。

–仅满足以下所有条件的湿疹、干癣、单纯性扁平苔藓或具有皮肤病学表现的白癜风患者(例如，排除牛皮癣性关节炎的患者)有资格参加研究：

皮疹必须覆盖身体表面积的<10％

疾病在基线时得到了很好的控制，仅需使用低效的外用皮质类固醇

在过去的12个月内，未发生需要补骨脂素加紫外线A辐射、胺甲喋呤、类视色素、生物制剂、口服钙调神经磷酸酶抑制剂、高效药或口服皮质类固醇的基础疾病的急性加重

·有巨噬细胞活化综合征(MAS)/噬血细胞淋巴组织细胞增生症(HLH)病史的患者

·经确诊为进行性多灶性白质脑病病史的患者。

·对单克隆抗体疗法(或重组抗体相关融合蛋白)的严重过敏或过敏性反应史

·可能影响方案依从性或结果解释的其他恶性肿瘤病史

–允许有根治性皮肤基底癌或鳞状细胞癌或宫颈原位癌病史的患者。

–若恶性病变在首次莫苏妥珠单抗施用之前≥2年未治疗而处于缓解期，则也将允许具有已接受治愈性治疗的恶性病变的患者。

·当前或过去的CNS淋巴瘤病史

·当前或过去的CNS疾病史，诸如中风、癫痫、CNS血管炎或神经退行

性疾病

–允许有中风病史，在过去2年内未经历中风或短暂性脑缺血发作，并且根据研究者的判断不患有残留神经功能缺损的患者。

–有癫痫病史且在过去2年内没有癫痫发作但未接受任何抗癫痫药物治疗的患者仅允许进入扩展定群。

·重大心血管疾病，诸如纽约心脏协会III或IV类心脏病、过去6个月内的心肌梗塞、不稳定性心律失常或不稳定性心绞痛)

·严重的活动性肺病(例如支气管痉挛和/或阻塞性肺病)

·研究纳入时已知活性细菌、病毒、真菌、分枝杆菌、寄生虫或其他感染(不包括甲床真菌感染)，或在首次莫苏妥珠单抗施用前4周内需要IV抗生素治疗或住院治疗(与抗生素疗程完成有关)的任何重大感染发作

·已知或疑似慢性活动性爱泼斯坦巴尔病毒感染

·在首次莫苏妥珠单抗施用前4周内的最近重大手术

–允许协议规定的程序(例如，肿瘤活检和骨髓活检)。

·急性或慢性B型肝炎病毒(HBV)感染的血清学或聚合酶链反应(PCR)检测结果呈阳性

–无法通过血清学测试结果确定HBV感染状态的患者(www.cdc.gov/hepatitis/hbv/pdfs/serologicchartv8.pdf)必须通过PCR确定为HBV阴性才有资格参与研究。

急性或慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染

–HCV抗体阳性的患者必须通过PCR确定为HCV阴性才有资格参加研究。

·HIV感染的阳性血清学检测结果

·在研究治疗的第一剂量之前4周内施用减毒活或预期研究期间将需要此种减毒活疫苗

–在接受研究治疗期间或最后剂量后，患者不得接受减毒活疫苗(例如)，直至B细胞恢复至正常范围。应在研究治疗的第一剂量前至少4周给予灭活疫苗或类毒素，以产生足够的免疫力。

–灭活流感疫苗应仅在流感季节进行。

–研究人员应审查被考虑参加本研究的潜在研究患者的疫苗接种状况，并在研究前遵循美国疾病控制和预防中心关于成人接种任何其他非活疫苗以预防传染病的指南。

药品

莫苏妥珠单抗

莫苏妥珠单抗使用与体重无关的统一给药。每名患者的莫苏妥珠单抗剂量将取决于方案中详述的剂量水平分配。

莫苏妥珠单抗通过IV输注或SC注射使用标准医用注射器和注射泵或适用的IV袋向患者施用。兼容性测试表明，莫苏妥珠单抗在延伸装置和聚丙烯注射器中是稳定的。药品在IV输注时通过注射泵经由IV输液器或IV袋递送，最终莫苏妥珠单抗体积由剂量决定。药品在SC施用时，通过医用注射器递送，最终莫苏妥珠单抗体积不超过2.0mL。

莫苏妥珠单抗在可立即接触到训练有素的重症监护人员和设施的环境中施用，此类人员和设施能够应对及管理医疗紧急情况。

莫苏妥珠单抗向水分充足的患者施用。由地塞米松20mg IV或甲基泼尼松龙80mgIV组成的皮质类固醇前置用药在施用每个莫苏妥珠单抗剂量前1小时施用。根据研究者的评估，对于B、D和F组患者可任选地在第3周期和以后或在第4周期施用此种皮质类固醇前置用药。然而，如果患者出现CRS，在后续剂量中施用具有类固醇的前置用药，直至没有观察到另外的CRS事件。对于经由SC注射接受莫苏妥珠单抗的患者，可以在施用每个莫苏妥珠单抗剂量前2小时代替IV施用而口服施用由20mg地塞米松或80mg甲基泼尼松龙组成的皮质类固醇前置用药。此外，在施用莫苏妥珠单抗之前，可以按照标准机构实践施用口服对乙酰氨基酚或扑热息痛(例如，500-1000mg)和/或50-100mg苯海拉明之前置用药。将根据IMC的建议做出修改皮质类固醇前置用药要求的决定。

推荐的CRS管理详见表6。

表6.接受莫苏妥珠单抗治疗的患者的细胞因子释放综合征的管理

BiPAP＝双相气道正压；CPAP＝持续气道正压通气；CRS＝细胞因子释放综合征；G-CSF＝粒细胞集落刺激因子；HLH＝噬血细胞性淋巴组织细胞增生症。

^aCRS grading per Lee等人,Blood,124:188-195,2014。

^b托珠单抗应以8mg/kg静脉注射的剂量施用(仅体重≥30kg的参与者为8mg/kg；体重<30kg的参与者为12mg/kg；不推荐每次输注剂量超过800mg)；根据需要每8小时重复一次(最多4剂)。

^cRiegler等人,Ther Clin Risk Manag,15:323-335,2019。

^d接受类固醇治疗CRS的患者应强烈考虑抗真菌预防。

^e例如，甲基泼尼松龙IV 1000mg/天，连续3天，然后快速减量，每12小时250mg，连续2天，每13小时125mg，连续2天，以及每12小时60mg，连续2天。

^f如果在第1周期第1天或第1周期第8天莫苏妥珠单抗施用后在递增给药定群中发生3级CRS，则应与医学监察员讨论下一个莫苏妥珠单抗剂量，并应考虑减少剂量。基于个人风险-获益评估，可以考虑重复相同的递增剂量的例外情况。

^g对于正在获益并已从不良事件中完全康复的患者，可以考虑恢复使用莫苏妥珠单抗。仅在研究者(或适当的代表)和医疗监督员都记录批准后，患者才能再次接受莫苏妥珠单抗治疗。除非满足以下所有标准，否则不会考虑进一步治疗：

·主要研究者/治疗医师的个人风险-获益评估有利于继续治疗；

·患者已从既往的毒性中恢复，并有足够的器官功能/储备接受后续剂量；

·患者已充分同意与继续治疗相关的风险，并决定接受后续剂量；

·与承办人讨论了上述风险-获益评估及患者评估；

·后续剂量计划良好并采取预防措施，包括减少剂量、将输液速率减慢至50％或更低、强制住院及加强前置用药。

对于IV莫苏妥珠单抗施用，最初，莫苏妥珠单抗在4小时±15分钟内输注。对于经历输注相关症状的患者，可减慢或中断输注。在每个莫苏妥珠单抗剂量后，观察患者至少90分钟是否发烧、寒战、僵硬、低血压、恶心或CRS的其他体征和症状。在没有输注相关不良事件的情况下，第2周期和以后的莫苏妥珠单抗的输注时间可减少至2小时±15分钟。接受患者内剂量递增的患者应在至少4小时内接受第一更高剂量的莫苏妥珠单抗输注。

对于SC施用，莫苏妥珠单抗由合格人员在30秒至2分钟内施用。注射部位反应的推荐管理详见表7。在至少前两个周期，所有患者在莫苏妥珠单抗SC施用之前都具有适当的静脉注射通路。对于D组和F组的患者，在第3周期和以后的周期中，静脉注射通路之放置可能是可选的，并且对于继续经历或仍处于CRS风险中的患者应考虑。

表7.注射部位反应的管理指南

托珠单抗

托珠单抗是根据标准做法配制、制备和处理的。

E.联合疗法

联合疗法包括患者从筛选前7天至研究完成/中止访问所用的任何药物(例如，处方药、非处方药、草药或顺势疗法药物、营养补品)。

使用口服避孕药、激素替代疗法或其他维持疗法的患者应继续使用。

从筛选期开始至DLT评估完成，在没有DLT的情况下不应开始同时使用造血生长因子，如促红血球生成素、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(沙格司亭)或血小板生成素(奥瑞维金、艾曲波帕)或增加剂量。DLT评估期完成后或DLT被记录后，造血生长因子的开始或剂量以及排程修改允许根据包装说明书、机构实践和/或已发布的指南中提供的说明进行。

G-CSF(非格司亭、聚乙二醇非格司亭)的预防性和治疗性使用是允许根据包装说明书、机构实践和/或已发布的指南(Smith等人，2015年)中提供的说明进行的。当绝对嗜中性球计数(ANC)<500/mm³时，应开始生长因子支持，除非有医学禁忌；如果禁用生长因子，则应与医疗监督员讨论。

允许对病毒、真菌、细菌或肺孢子虫感染进行抗感染预防，并应根据机构实践进行。

经历莫苏妥珠单抗输注相关症状的患者可以如本文所述进行对症治疗。允许根据已发表的建议和/或机构惯例治疗严重CRS或HLH。

鉴于莫苏妥珠单抗的预期药理学，细胞因子的瞬时释放可能会抑制CYP450酶并引起药物相互作用。基于非临床模型，细胞因子含量可能在第一周期之前24小时内最高。在后续周期中，随着CD20细胞数量的减少，预计细胞因子含量将显著降低。接受CYP450底物并具有窄治疗指数的合并用药的患者可能具有最高的药物相互作用风险(表8)。应监测此类合并用药的毒性，并相应地调整剂量。

表8.具有窄治疗范围的敏感体内CYP底物和CYP底物的实例

AUC＝浓度-时间曲线下面积；P-g＝P-糖蛋白。

^a敏感CYP底物是指当与已知的CYP抑制剂联合施用时，其血浆AUC值已显示增加5倍或更高之药物。

^b具有窄治疗范围的具有窄治疗范围的CYP底物是指暴露-反应关系表明伴随使用CYP抑制剂其暴露含量的小幅增加可能导致严重安全问题的药物(例如，尖端扭转)。

^c使用CYP2B6抑制剂时，该等底物的AUC没有增加5倍或更多，但它们代表了迄今为止用可用抑制剂研究的最敏感底物。

^d瑞格列奈亦是OATP1B1的底物，并且仅在研究药物对OATP1B1的抑制作用已被排除时，它才适合作为CYP2C8底物。

^e由于许多CYP3A底物(例如地瑞纳韦、马拉韦罗)也是P-gp的底物，因此观察到的暴露增加可能是由于CYP3A及P-gp的抑制。

^f出于安全原因退出美国市场。

肝脏中的CYP450酶被感染和炎症刺激下调，包括细胞因子，如IL-6。相较于未接受托珠单抗治疗的患者，接受托珠单抗治疗的类风湿性关节炎患者抑制IL-6信号传导可能会使CYP450活性恢复至更高水平，从而导致作为CYP450底物的药物代谢增加。体外研究表明，托珠单抗有可能影响多种CYP酶的表达，包括CYP1A2、CY2B6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4。托珠单抗对CYP2C8或载体蛋白的影响未知。奥美拉唑(经CYP2C19和CYP3A4代谢)和辛伐他汀(经CYP3A4代谢)的体内研究显示，单剂量托珠单抗后1周，暴露量分别下降28％和57％。

托珠单抗对CYP酶的影响可能与具有窄治疗指数的CYP450底物临床相关(表8)，其中剂量单独调整：

·在接受该等类型医药产品治疗的患者中开始或停止使用托珠单抗后，应进行疗效(如华法林)或药物浓度(如环孢素或茶碱)的治疗监测，并根据需要调整医药产品的个体剂量。

·当托珠单抗与CYP3A4底物药物(如口服避孕药、洛伐他汀、阿托伐他汀)组合施用时，如果不需要降低疗效，则开处方者应谨慎。

·托珠单抗对CYP450酶活性的影响可能在停止疗法后持续数周。

F.使用修改的CRS分级量表的基本原理

在本研究中，莫苏妥珠单抗治疗引起的CRS不良事件的分级和治疗基于Lee等人,Blood,124:188-195,2014发表的标准，并在表4中进行了描述。对于剂量递增决策，根据NCICTCAE v4.0，基于个体体征和症状以及实验室数据来定义与CRS相关的DLT。

NCI CTCAE v4.0 CRS分级量表基于用单克隆抗体治疗后CRS的特征(Lee等人,Blood,124:188-195,2014)。T细胞定向疗法包括双特异性药物(诸如莫苏妥珠单抗)以及过继性细胞疗法(诸如表达CAR的工程化T细胞)导致T细胞活化释放的细胞因子的药效学情形与常规单克隆抗体相关的不同。因此，NCI CTCAE v4.0定义的CRS的临床特征可能不适用于T细胞定向疗法后的患者。

已经提出且发布了几种替代分次量表，其专门用于评估T定向疗法的CRS(Davila等人,Sci Transl Med,6:224ra25,2014；Lee等人,Blood,124:188-195,2014；Porter等人,Sci Transl Med,7:303ra139,2015)。Lee等人的分级系统系基于由CD19定向CAR-T细胞和博纳吐单抗(blinatumomab)治疗产生的CRS。其为对NCI CTCAE v4.0的修改，提供了进一步的诊断细节，包括考虑在CRS环境中可能发生的肝脏转氨酶瞬时升高。除了诊断标准外，实例7C还提供了并且引用基于严重程度的CRS管理建议，包括使用皮质类固醇和/或抗细胞因子疗法进行早期干预。因此，纳入CRS分级量表允许使已公布及广泛采用的报告与管理指南保持一致。

G.结果指标

安全性结果指标

使用以下主要安全性结果指标评估莫苏妥珠单抗的安全性和耐受性：

·当莫苏妥珠单抗作为单一药剂IV或SC给予时DLT的发生率和性质。

使用以下二级安全性结果指标另外评估安全性及耐受性：

·不良事件(AE)的发生率、性质及严重程度

·针对莫苏妥珠单抗的抗药物抗体(ADA)的发生率及其与临床结果的关系。

·生命体征及临床实验室值的变化。

药代动力学结果指标

在数据允许的情况下，适当时可自莫苏妥珠单抗施用后的血清浓度-时间曲线得出以下PK参数：

·总暴露量(浓度-时间曲线下面积[AUC])

·最大血清浓度(C_max)

·最小血清浓度(C_min)

·通过率(CL)

·稳态分布容积(V_ss)

在适用的情况下，汇总了托珠单抗的血清谷值和最大浓度，视情况而定并在数据允许的情况下进行。可考虑房室、非房室和/或群体方法。还可计算其他参数，诸如蓄积比、t_1/2和剂量比率。

活性结果指标

本研究的活性结果指标如下：

·研究者评估的客观缓解，定义为部分缓解(PR)或完全缓解(CR)，由研究者使用NHL(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586 2007)以及CLL(Hallek等人,Blood,111:5446-5456,2008)的规范标准评估。

·研究者评估的客观缓解持续时间，定义为首次出现记录的客观缓解，直至研究者评估的进行性疾病或复发、或任何原因导致的死亡的时闲，以先发生者为准。

·研究者评估的PFS，定义为从第一研究治疗至研究者评估的进行性疾病首次发生或任何原因导致的死亡的时间，以先发生者为准。

B组R/R DLBCL和转化FL扩展定群以及R/R FL扩展定群中的另外的活动结果指标如下：

·独立审查机构(IRF)的客观缓解，定义为PR或CR，由IRF使用NHL的规范标准(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586 2007)评估。

·IRF评估的客观缓解持续时间，定义为首次出现记录的客观缓解，IRF评估的进行性疾病或复发、或任何原因导致的死亡的时闲，以先发生者为准。

·IRF评估的CR持续时间，定义为首次出现记录的CR，IRF评估的进行性疾病或复发、或任何原因导致的死亡的时闲，以先发生者为准。

·研究者评估的CR持续时间，定义为首次出现记录的CR，直至研究者评估的进行性疾病或复发、或任何原因导致的死亡的时闲，以先发生者为准。

·IRF评估的PFS，定义为从第一研究治疗至IRF评估的进行性疾病首次发生或任何原因导致的死亡的时间，以先发生者为准。

·Os，定义为从第一研究治疗至任何原因导致的死亡日期的时间。

患者报告的结果指标

NHL扩展定群中用于评估患者报告结果(PRO)的健康相关生活质量(HRQoL)及健康状况指标如下：

·基于欧洲癌症研究和治疗组织生活质量问卷核心30(EORTC QLQ-C30)的HRQoL汇总统计资料和基线变化。

·基于癌症治疗淋巴瘤功能评估(FACT-Lym)分量表的疾病相关症状的汇总统计资料和基线变化。

·患者参与研究期间EQ-5D-5L资料的描述性结果。

实例2.研究设计

A组：第1周期非分次单一药剂莫苏妥珠单抗递增(IV输注)

纳入GO29781研究的剂量递增组A的患者在每个21天周期的第1天通过IV输注接受莫苏妥珠单抗。莫苏妥珠单抗施用应在每个周期的第1天进行，但出于逻辑/排程原因，可以从预定日期起最多±2天(即，两次剂量之间至少间隔19天)给药。

基于MABEL，A组中莫苏妥珠单抗的起始剂量为50μg。剂量递增取决于DLT评估窗口期间的临床观察，并将按以下步骤进行：

A组剂量递增继续直至达到不高于约12.8mg的剂量水平或达到在≥6名患者中观察到≥17％的DLT的剂量水平，以较低者为准。

基于累积的安全性数据，并优先评估第1周期递增或SC给药以减轻细胞因子驱动的毒性，已停止纳入剂量递增A组，并且随后接受单一药剂莫苏妥珠单抗治疗的患者将被纳入剂量递增组B和组D。

D组：第1周期非分次单一药剂莫苏妥珠单抗递增(SC输注)

GO29781研究中的D组剂量递增独立于B组剂量递增进行。纳入剂量递增D组的患者在每个21天周期的第1天接受皮下(SC)莫苏妥珠单抗。出于逻辑/排程原因，莫苏妥珠单抗可从预定日期起最多±2天(即，两次剂量之间至少间隔19天)给予。

D组递增使用标准的3+3剂量递增设计，使用为A组3+3剂量递增定义的剂量递增规则。莫苏妥珠单抗的初始剂量为1.6mg SC，该剂量水平先前在A组递增中评估，并证明在治疗患者中是安全且可耐受的。DLT评估期是从莫苏妥珠单抗治疗的第1周期第1天至第1周期第21天，并且剂量递增继续直至确定MTD或MAD。基于审查实时安全性数据及可用的初步PK数据，IMC可能基于对剂量递增和扩展的数据总体的审查来推荐剂量增量，只要推荐的剂量水平不超过B组莫苏妥珠单抗的最大评估累积第1周期剂量。

如果个体患者在SC施用莫苏妥珠单抗后在任何时间出现不可接受的局部注射部位反应毒性，则在与医疗监督员讨论并获得批准后，可以考虑转换为IV莫苏妥珠单抗。在该等情况下，IV给药将遵循基于最高通过剂量的B组剂量递增排程和B组递增排程。

F组：第1周期递增、单一药剂莫苏妥珠单抗递增(SC注射)

GO29781研究的F组作为独立的剂量递增组进行，以测试递增给药与皮下注射的组合，以进一步减轻细胞因子驱动的毒性。

纳入剂量递增组F的患者在第1周期的第1天、第8天和第15天通过皮下注射接受莫苏妥珠单抗(图3)。在第2周期和以后，莫苏妥珠单抗在每个21天周期的第1天给药，第2周期第1天是第1周期第15天剂量后7天。出于逻辑/排程原因，莫苏妥珠单抗可从第2周期的预定日期起被给予最多±1天(即，在第1周期第15天给药后至少6天)，以及从第3周期和以后的预定日期起±2天(即，两次剂量之间至少间隔19天)。

F组起始剂量根据以下定义的规则确定。第1周期第1天和第1周期第8天剂量可以不超过第1周期第15天剂量水平。第1周期第15天剂量也是在后续周期(第2周期和以后)的第1天施用的剂量水平。

F组中的剂量递增使用标准的3+3设计。在第1周期的第1天、第8天和第15天施用的莫苏妥珠单抗剂量递增是根据下文和图4以及表9和10中描述的规则进行。基于对实时安全性数据和初步PK数据的审查，承办人可酌情停止或修改剂量递增。IMC可以基于对剂量递增和扩展的数据总体的审查来推荐剂量递增增加，只要每个推荐的第1周期剂量水平不超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估第1周期第15天剂量。如果递增超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估第1周期、第15天剂量，则IMC可能建议剂量递增增加至先前剂量水平的100％。

表9.第1周期递增莫苏妥珠单抗递增、皮下注射(F组)A的剂量递增规则：在给定定群中≥3<17％观察到DLT

注：剂量调整是基于每个定群进行。C＝周期；D＝天。

^aC1D1剂量和/或C1D8剂量可以基于在D组和F组递增期间观察到的安全性、PK和药效学数据的总体固定。

^bDLT可评估患者是接受C1D1、C1D8和C1D15剂量的患者。在完成C1给药之前停止研究治疗的患者无法评估DLT。

^c.IMC可以基于对剂量递增和扩展中的数据总体的审查推荐剂量递增增量，只要每个推荐的第1周期剂量水平不超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估C1D15剂量。如果递增超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估C1D15剂量，则IMC可能会推荐剂量递增增加至100％的既往剂量。

表10.第1周期递增莫苏妥珠单抗递增、皮下注射(F组)A的剂量递增规则：在给定定群中≥6名DLT可评估患者中，≥17％观察到DLT

场景在图4中描述。AE＝不良事件；C＝周期；D＝天；DLT＝剂量限制性毒性；IMC＝内部监督委员会；MTD＝最大耐受剂量；SC＝皮下。注：剂量调整是基于每个定群进行。^aDLT可评估患者是接受C1D1、C1D8和C1D15剂量或出现DLT的患者。在完成C1给药之前停止研究治疗且没有DLT的患者无法评估DLT。如果患者在完成C1给药之前出现DLT并停止研究治疗，并且尚未超过C1D1与C1D8组合的MTD，则可以纳入另外的患者以评估累积C1 MTD。^b通过后验概率方法(Thall and Simon,Biometrics,50(2):337-349,1994)。例如，如果在2/4、2/5、2/6、3/7、3/8、3/9、3/10、4/11、4/12、4/13、4/14或5/15名患者中观察到DLT，则存在≥80％的机会使真实DLT率≥20％。^c.IMC可以基于对剂量递增和扩展中的数据总体的审查推荐剂量递增增量，只要每个推荐的第1周期剂量水平不超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估C1D15剂量。如果递增超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估C1D15剂量，则IMC可能会推荐最多为既往剂量水平的100％的剂量递增增量。

第1周期剂量递增根据以下规则基于3+3剂量递增设计发生，并总结在图4以及表9和10中：

·每个定群最初纳入至少3名患者，除非在纳入第三名患者之前已超过MTD。

·如果前3位DLT可评估的患者中有1位经历了DLT，则该同类组将扩展到6位患者。在做出任何剂量递增决定之前，对所有患者进行DLT评估。

·每个第1周期剂量的评估基于在第1周期期间的三个间隔中观察到的安全事件(DLT窗口A、B和C；图3)。第1周期、第1天、第1周期、第8天及第1周期、第15天剂量可以基于图4以及表9和10中总结的规则独立地递增、固定或递减。

·F组MTD被定义为F组中最高评估第1周期剂量，其中基于图4以及表9和10中定义的规则，第1周期、第1天、第1周期、第8天和第1周期、第15天剂量水平均不超过MTD。

·只要没有超过F组MTD，就可以并行开放多于一个剂量递增定群。

·如果个体患者在SC施用莫苏妥珠单抗后在任何时间出现不可接受和/或不耐受的局部注射部位反应毒性，则在与医疗监督员讨论并获得批准后，可以考虑转换为IV莫苏妥珠单抗。在此类情况下，IV给药遵循基于最高通过剂量的B组剂量递增排程和B组递增排程。

剂量递增和中期扩展：

剂量递增正在进行中，采用3+3设计，并且起始剂量为5/15/45mg，经由SC注射。除非超过最大耐受剂量，否则计划继续剂量递增至5/45/45mg。计划的剂量递增将探索不同的第1周期第8天剂量，由此为通过增加第1周期第8天剂量潜在地进一步增强莫苏妥珠单抗治疗窗口的假设提供有用的见解。

除了每个剂量递增定群中纳入的3-6名患者外，每个通过剂量水平的最多20名DLBCL/trFL患者和最多20名FL患者可以纳入中期扩展定群，以提供PK和临床安全数据并指导SC靶剂量的选择。

靶SC剂量的单臂扩展定群(预计5/45/45mg SC)：

50名接受过至少两种既往系统性疗法的R/R FL患者入组，以提供提议的莫苏妥珠单抗SC方案的PK、疗效和安全数据，该方案在与1/2/60/30mg剂量的IV单臂扩展定群相同的GO29781研究中在同一患者群体中进行测试。

在研究的扩展阶段，R/R FL>2既往疗法中的两个扩展定群可以分别使用IV配制物(1/2/60/30mg Q3W IV剂量)和SC配制物(计划为5/45/45mg Q3W SC剂量)来测试。一此种方式，两个定群将在相同的研究部位以完全相同的资格标准集进行纳入，并且数据将收集到相同的数据库中，并由相同的研究团队和测定进行分析。关键纳入标准(与R/R FL>2既往疗法治疗中的IV和SC扩展定群相同)包括：

·组织学上记录的1-3a级滤泡性淋巴瘤，没有预期提高生存期的可用疗法(例如，标准化疗、自体干细胞移植(SCT))。

·患者必须在至少两种前线系统性疗法后复发或对其无反应，并且必须接受抗CD20导向疗法和烷基化剂既往治疗。

·患者必须患有可测量的疾病，定义为至少一个二维可测量的淋巴结病灶，其最长尺寸为>1.5cm，或至少一个二维可测量的结外病灶，其最长尺寸>1.0cm。

莫苏妥珠单抗皮下给药的基本原理(D组和F组剂量排程)

评估莫苏妥珠单抗的SC剂量排程的基本原理类似于评估第1周期递增给药排程的基本原理，主要目标是在初始莫苏妥珠单抗给药时将细胞因子驱动的毒性最小化。

在食蟹猴中进行的非临床试验评估了IV递送的1mg/kg莫苏妥珠单抗以及SC递送的1mg/kg莫苏妥珠单抗的安全性、耐受性和药效学作用。在莫苏妥珠单抗的SC给药情况下，与1小时静脉输注相比，C_max降低了72％。相较于T_max为0.5小时的IV给药，在SC给药后使用莫苏妥珠单抗的C_max(T_max)时间也延迟至24小时。给予莫苏妥珠单抗SC的动物细胞因子释放和T细胞活化减少并略微延迟。最后，SC施用较IV输注具有更佳的耐受性，此乃因未观察到临床症状并且未出现血压持续下降。

为进一步支持使用莫苏妥珠单抗的SC给药方案的提议，类似地支持用于B组递增的第1周期递增莫苏妥珠单抗给药排程的探索性QSP模型用于仿真在NHL患者中经由IV和SC途径施用单一药剂莫苏妥珠单抗后的统性细胞因子(IL-6)以及活化T细胞谱的时间过程。比较IV和SC给药方案的两个周期的单一药剂莫苏妥珠单抗治疗后循环细胞因子的基于模型的预测表明，在等效PK暴露下，SC给药后的最高细胞因子峰值低于IV给药的最高细胞因子峰值。此外，该模型表明，相较于IV给药，SC给药导致细胞因子含量降低是由于SC给药中PK的C_max降低以及PK的T_max增加。类似地，SC给药的预测峰值T细胞活化略低于IV给药。预测与上文所述在食蟹猴中使用莫苏妥珠单抗的临床前观察一致。综上所述，探索性建模及模拟支持通过皮下给药方案实现更有利的获益-风险特征的可能性。

将在D组中测试的第一剂量是1.6mg，该剂量水平之前在A组递增中评估过，并被证明是安全且可耐受的。与IV给药相比，食蟹猴中SC给药后莫苏妥珠单抗的生物利用度为60.4％，该生物利用度与SC施用人时单克隆IgG抗体的绝对生物利用度一致(综述于Wang等人,Clin Pharmacol Ther,84:548-558,2008中)。考虑到SC施用于人时莫苏妥珠单抗的生物利用度预计小于IV施用时的100％，预计初始剂量1.6mg将为初始SC给药定群提供可接受的安全裕度。

在D组中经治疗的23名患者中，截至2020年1月15日，6名患者报告了1级CRS事件，并且2名患者报告了2级CRS事件。为了进一步将CRS事件比率以及严重程度最小化，在F组中评估了递增的莫苏妥珠单抗SC给药方案。初始F组剂量递增定群的起始剂量基于以下标准：

·第1周期的第1天剂量为5mg。选择该剂量是因为经由SC注射5mg莫苏妥珠单抗的预计C_max类似于经由IV输注的1mg莫苏妥珠单抗，该剂量已被证明在B组剂量递增和扩展中是安全且可耐受的。该起始第1周期第1天剂量也远低于D组剂量递增中的最高通过SC剂量。

·第1周期第8天和第1周期第15天剂量组合在一起，可能不超过B组中的最高通过第1周期第15天剂量。

截至2020年1月15日，已经通过了D组中高达20mg剂量水平的DLT评估且无任何DLT事件，并且D组MTD未被超过。在也评估了莫苏妥珠单抗作为单一药剂的安全性和耐受性的B组剂量递增中，1.0mg/2.0mg/60.0mg作为第1周期、第1天/第1周期、第8天/第1周期、第15天剂量通过了未观察到任何DLT事件的DLT评估期。鉴于B组中较高的IV剂量水平已经通过了其DLT评估，并且鉴于初步临床PK数据证实了相较于IV，皮下给药后莫苏妥珠单抗PK的C_max降低及T_max延迟，IMC可基于IL-6、药代动力学和安全性的累积数据推荐剂量增量，只要推荐的剂量水平(或F组的每个第1周期剂量)不超过B组中莫苏妥珠单抗的最大评估第1周期、第15天剂量。

实例3.患者体内剂量递增和持续给药

A.剂量限制毒性观察期后继续给药的规则

在DLT观察期内未经历DLT的患者有资格接受如下另外的研究治疗周期：

·对于纳入剂量递增组A和D的患者，每21天经由相同施用途径以相同剂量水平给予莫苏妥珠单抗(施用日为每个周期的第1天)。

·对于纳入剂量递增组B和F的患者，从第1周期第15天剂量(研究第22天)后7天开始，每21天(输注日为每个周期的第1天)以与第1周期第15天剂量相同的剂量水平给予莫苏妥珠单抗。

·在每个治疗组中，申办者保留在第3周期的第1天或的后测试较低剂量水平的选项，以确定后期周期中的较低剂量是否足以维持临床疗效。

如果满足以下标准，可以给予莫苏妥珠单抗的另外的剂量：

·持续的临床受益：患者无进行性疾病(PD)的临床体征或症状；不需要在DLT窗口结束时进行放射学肿瘤评估，以将不必要的辐射暴露最小化。在每个周期的第1天对患者的进行性疾病进行临床评估。

–对于NHL患者，进行性疾病应通过放射线摄影术确认，如修订的恶性淋巴瘤疗效评价标准所定义(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)。在完成研究治疗期之前，患有放射线摄影进行性疾病的NHL患者通常没有资格接受进一步莫苏妥珠单抗治疗。然而，在有限的情况下，可能允许在明显的放射线摄影进行性疾病后进行治疗。

–在完成研究治疗期之前经历NCI-WG指南(Hallek等人,Blood,111(12):5446-5456,2008)定义的进行性疾病的CLL患者没有资格接受进一步莫苏妥珠单抗治疗。

·可接受的毒性：经历4级非血液学不良事件(4级肿瘤溶解综合征(TLS)可能除外)的患者应停止研究治疗，并且不得进行再治疗。经历4级TLS的患者可考虑继续研究治疗。来自既往研究治疗的所有其他研究治疗相关的不良事件在下一次施用之前降低至≤1级或基线级。在由研究调查者仔细评估及与患者讨论获益-风险并获得医疗监督员的批准后，可以允许基于持续总体临床益处的例外。若确定可根据本文概述的规则维持临床益处，则可允许减少莫苏妥珠单抗的剂量。

表现出上述可接受的安全性和临床益处证据的患者可以继续接受本文所述的研究治疗。在无进行性疾病的情况下完成研究治疗的患者将继续接受监测，包括定期安排的肿瘤评估，直至自治疗后随访中止(例如，由于进展)。如本文所述，患者选择对复发疾病的发展进行再治疗。

实例4.进行性疾病的治疗

A.进行性疾病后非霍奇金淋巴瘤的治疗

实性瘤的癌症免疫疗法经验表明，由于免疫细胞的涌入，反应肿瘤最初可能会增大，此种现象称为“伪进展”(Wolchok等人,Clin Can Res,15(23):7412-7420,2009)。在淋巴瘤免疫疗法的背景下尚未描述伪进展，但莫苏妥珠单抗疗法最初可能通过诱导T细胞涌入肿瘤来增加肿瘤大小和代谢活性。鉴于此，如果观察到临床进行性疾病，则强烈鼓励重复肿瘤活检。此外，如果研究调查者认为尽管存在由修订的恶性淋巴瘤疗效评价标准(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)定义的进行性疾病的放射线摄影证据，但NHL患者仍获得临床益处，则该患者可以继续研究治疗，前提是满足以下标准：

·不存在表明疾病明确进展的症状和体征(包括实验室值的恶化)。

·美国东岸癌症临床研究合作组织(ECOG)体能状态没有下降。

·包括中央气道、大血管以及其他器官或组织的关键解剖部位不存在肿瘤进展，其中继发于肿瘤进展的功能受损将导致严重和/或不可逆的残疾或死亡。

强烈鼓励尽管放射线摄影进展明显但仍继续接受研究治疗的患者接受重复肿瘤活检，以评估肿瘤体积增加是否是归因于免疫细胞浸润或肿瘤增殖，前提是此类活检可在非靶病变上安全进行。如果基于研究者的判断、临床因素或与肿瘤增生一致的活检发现怀疑为真实进展，或如果在随后的肿瘤评估中确认了放射线摄影进行性疾病，则患者没有资格在当前分配的治疗组下接受进一步研究治疗。

B.莫苏妥珠单抗治疗持续时间及进行性疾病后的再治疗

根据对初始治疗的抗肿瘤反应，最初对莫苏妥珠单抗作为单一药剂有反应或有稳定疾病的患者可能会受益于超过最初8个研究治疗周期的另外的周期。

为验证此种假设，患者有资格在本文所述之最初八个周期后接受莫苏妥珠单抗再治疗或继续研究治疗。研究再治疗剂量及排程是先前已在剂量递增中证明是安全者，前提是满足以下标准：

·在重新开始莫苏妥珠单抗治疗时满足相关的资格标准，但以下情况除外：

–允许使用莫苏妥珠单抗进行既往疗法

–除非有临床指征，否则无需重复血清学测试以证明人类免疫缺陷病毒(HIV)、C型肝炎病毒(HCV)和B型肝炎病毒(HBV)状态。重复EBV和巨细胞病毒(CMV)定量聚合酶链反应(PCR)。

–初始研究治疗的可管理和可逆的免疫相关不良事件是允许的，并且不构成自体免疫疾病的排除病史。

·患者没有经历过研究者认为在初始研究治疗期间不可归因于另一明确可鉴定原因的4级非血液学不良事件，TLS可能除外。

·经历了研究者认为在初始治疗期间可归因于另一明确可鉴定原因的2级或3级AE的患者已将此类毒性解决至≤1级。

·在第一次再治疗施用后，患者可能需要住院治疗。

·在完成初始研究治疗与重新开始研究治疗之间未进行干预性全身抗癌疗法。

强烈鼓励在进行性疾病后进行再治疗的患者从安全可及部位进行重复肿瘤活检以评估：1)CD20表达状态以及2)肿瘤和免疫微环境的变化/状态。在研究调查者与医疗监督员讨论后，在进行性疾病时提供书面知情同意书但没有适合活检的病灶的患者仍可考虑接受研究药物再治疗。

将向接受再治疗的患者施用的研究治疗的剂量和排程由医疗监督员确定，并采用已通过DLT观察期的先前测试的剂量和排程。

初始研究治疗的持续时间以及在研究治疗的最初8个周期之后再治疗或继续研究治疗的选择在图5中描述。表11中描述了基于研究治疗的性质及时间的莫苏妥珠单抗的剂量和施用排程/途径。

对于最初接受单一药剂莫苏妥珠单抗的患者：

·除非在完成8个周期之前观察到PD或不可接受的毒性，否则莫苏妥珠单抗给药8个周期。

·6个月(±2周)时的肿瘤评估应安排在第8周期第1天之后但在第9周期第1天之前，以确定研究治疗的持续时间。

·接受8个周期的治疗后实现完全缓解(CR)的患者不接受任何另外的莫苏妥珠单抗周期并接受监测；如果在完成初始单一药剂莫苏珠单抗治疗后观察到PD，则可以开始单一药剂莫苏珠单抗再治疗。使用莫苏妥珠单抗治疗可继续至少8个另外的周期。

·除非观察到PD或不可接受的毒性，否则在接受8个周期的治疗后实现PR或保持稳定疾病(SD)的患者将单一药剂莫苏妥珠单抗继续最多总计17个周期。

–如果在17个周期的治疗后实现CR，则按照对使用莫苏妥珠单抗实现CR的患者所述进行监测。

–如果在17个周期的治疗后实现PR或SD，则继续监测患者。

表11.莫苏妥珠单抗治疗/再治疗：剂量和排程/施用途径

对于不可接受的毒性，可以随时停止研究治疗。由医疗监督员自行决定并与研究者协商，如果继续满足上述再治疗标准，则患者可能有资格接受另外的研究再治疗。

接受再治疗的患者的评估排程遵循目前在剂量递增或扩展中实施的评估排程。例如，遵循第1周期双步分次方案再治疗的患者遵循B组评估方案。

研究治疗持续时间和再治疗的规则适用于剂量递增和剂量扩展定群。

实例5.剂量扩展阶段

本研究的剂量扩展阶段设计用于通过以最高MTD/最大评估剂量(MAD)的剂量进行研究性治疗，获得另外的安全性、耐受性、PK和初步临床活性资料。

持续评估来自扩展定群的所有可用的安全性资料，以评估所研究剂量水平的耐受性。在扩展阶段研究的莫苏妥珠单抗剂量水平在任何时候都不会超过适合作为剂量递增阶段MTD的最高剂量水平。此外，对于每个扩展定群，都进行了中期分析，以指导在出现过度毒性时可能提前停止纳入。

对于表现出可接受的安全性和方案中描述的临床益处证据的患者，可以继续每21天施用一次莫苏妥珠单抗，最多8或17个周期(参见图3)，直至记录记录了客观进行性疾病或出现不可接受的毒性，以先发生者为准。

根据评估排程进行安全性和疗效评估。对于因进行性疾病以外的原因中断研究治疗的患者，包括完成初始莫苏妥珠单抗治疗的患者，在研究治疗的最终剂量后进行另外的评估，如治疗后评估排程所概述。完成研究治疗的患者继续进行肿瘤评估直至进行性疾病并且有资格进行本文所述的莫苏妥珠单抗再治疗。

A.NHL中单一药剂莫苏妥珠单抗剂量扩展

在以下单独的适应症特异性扩展定群中，患者被纳入接受莫苏妥珠单抗治疗：

·R/R DLBCL和转化FL：可以纳入测试A、B、D和F组递增中MTD或低于其的剂量的扩展定群。每个定群可纳入至多约20名患者，但基于B组RP2D的扩展定群除外，假设本文定义的足够安全性及活动性，则该定群可纳入约80名患者。

·R/R FL：可以纳入测试A、B、D和F组递增中MTD或低于其的剂量的扩展定群。每个定群可纳入至多约20名患者，但基于B组RP2D的扩展定群除外，假设本文定义的足够安全性及活动性，则该定群可纳入约80名患者。

·R/R MCL：可以纳入测试A、B、D和F组递增中MTD或低于其的剂量的扩展定群。假设本文定义的足够安全性和活动性，每个定群可以纳入至多约20名患者。

·R/R里希特转化：可以纳入在B组递增的MTD或低于其的扩展定群测试剂量。假设本文定义的足够安全性和活动性，该定群可以纳入约10-20名患者。

在审查剂量递增的累积安全性资料后，由IMC与研究者协商确定将在剂量递增中评估的莫苏妥珠单抗剂量和排程(如有必要并且从时间角度看可能)。可以评估多于一种莫苏妥珠单抗剂量水平和排程。在确定RP2D之前，可以按照之前确定为安全并且在剂量递增期间表现出临床活动性证据的剂量启动扩展定群。承办者可以基于对临床数据的持续审查来决定启动或暂停任何给定扩展定群(图2)的纳入。

B.CLL中的剂量递增和扩展

用于CLL患者的剂量递增规则与用于NHL患者的那些相同。CLL患者的起始剂量不高于低于对应NHL剂量递增中通过DLT评估窗口的一个剂量水平。

可对至多约10名患者的扩展定群进行测试，此类患者在CLL中按确定为安全并在CLL B、D和F组剂量递增期间表现出临床活动性的剂量评估莫苏妥珠单抗。CLL扩展定群独立地并且可能以与NHL患者的那些剂量和排程不同的剂量和排程进行。

实例6.安全评估

以下描述安全问题管理的信息是基于预期的药理学和作用机制、非临床研究的结果、单药剂量递增研究的初步安全性发现以及关于类似分子的已发表数据。

已采取措施以确保参与本试验的患者的安全，包括使用严格的入选和排除标准以及对患者进行密切监测，如下所述。为DLT评估目的而纳入患者是错开的，以便每个剂量递增定群中的前2名患者分别进行第1周期、第1天治疗，施用间隔≥72小时。每个定群中的后续患者是错开的，使得他们的第1周期第1天治疗间隔开≥24小时进行施用。

密切监测所有患者的毒性。除非另外指明，否则在每个剂量前使用NCI CTCAEv4.0分级量表对患者进行临床毒性评估。CRS严重程度根据修改的细胞因子释放综合征分级系统进行分级(表4)。所有不良事件和严重不良事件均在试验期间以及研究治疗的最后剂量后或开始另一次系统性抗癌疗法前至多90天(以先发生者为准)进行记录。为了减轻潜在的未知风险，第1周期后的给药至少部分地受限于未表现出不可接受的毒性或有确凿证据表明进行性疾病的患者。

下文描述了与施用莫苏妥珠相关的特定预期或潜在毒性，以及此试验中为避免或最小化此类毒性而采取的措施。

A.莫苏妥珠单抗施用和住院治疗

莫苏妥珠单抗的施用是在临床环境中进行的，可立即联系重症监护病房以及经过训练以监测并对医疗紧急情况作出反应的工作人员。神经病学咨询服务应随时可用，以解决可能因莫苏妥珠单抗治疗而引起的任何神经系统不良事件，并且应随时提供具有急性透析能力的肾脏病学咨询服务，以解决可能伴随肿瘤溶解综合征(TLS)的任何肾毒性。

纳入A组和D组剂量递增的所有患者，需要对第一莫苏妥珠单抗施用至第1周期第1天完成莫苏妥珠单抗施用后至少72小时进行住院监测，包括在莫苏妥珠单抗施用期间或之后的住院治疗。

纳入B组剂量递增定群中所有根据两步分次方案接受莫苏妥珠单抗的患者，需要对莫苏妥珠单抗输注至莫苏妥珠单抗输注完成后至少72小时、对超过任何先前测试剂量水平的任何个体剂量进行住院监测，包括在莫苏妥珠单抗施用期间或之后的住院治疗。

该剂量通常对应于在第1周期第15天施用的莫苏妥珠单抗的剂量。除非研究者自行决定并与医疗监督员协商有临床指征，否则不需要因施用先前评估的剂量而住院。可能需要此种住院治疗的实例包括但不限于先前观察到的可能归因于相同或类似剂量的莫苏妥珠单抗的≥2级不良事件(例如CRS、HLH、肝酶升高(例如，天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)或与CRS或HLH一致的体征或症状同时发生的总胆红素升高，并且在72小时内没有消退，并且研究者认为不可归因于另一明确可鉴定的原因)、神经毒性、TLS、中性粒细胞减少症和/或血小板减少症恶化)以及TLS监测和预防。

基于现有的临床安全数据，对于接受经测试为安全且可耐受的剂量水平的莫苏妥珠单抗的患者，在任何给药日后均不强制住院。这适用于纳入B组剂量递增回填槽、B组扩展定群的患者以及接受研究需要住院治疗的那些患者，并且患者应在有临床指征时在莫苏妥珠单抗施用后住院治疗。

纳入F组剂量递增定群中根据第1周期递增给药排程接受莫苏妥珠单抗的所有患者，在第1周期第15天完成莫苏妥珠单抗注射后至少72小时内接受住院监测，包括在莫苏妥珠单抗施用期间或之后的住院监测(参见上文)。此外，如果第1周期第1天和/或第1周期第8天剂量超过任何先前在D组或F组中测试的最高剂量水平，则在第1周期第1天和/或第1周期第8天注射完成后需要住院72小时。

后续周期的住院要求基于第一周期期间临床病程确定；在第1周期期间具有3级CRS、注射部位反应或TLS的患者也可以在后续剂量施用结束后至少72小时住院治疗，并考虑如本文所述减少剂量。

对于所有治疗组，基于IMC的建议并与研究调查人员协商(如有必要并且从时间角度可能)，决定修改或停止扩展定群中的住院要求。对于纳入F组剂量扩展定群中的患者，如果在F组剂量递增期间未观察到3级CRS并且经IMC批准，则在任何给药日后不强制住院。研究者将积极评估住院的需要，并且每当有临床指征时，患者应在莫苏妥珠单抗施用后住院。

B.剂量和排程修改

仅当患者的临床评估和实验室测试值可接受时，才会进行莫苏妥珠单抗给药。如果指定给药与排除给药的假期重合，则给药应在最近的下一个日期开始，随后的给药按适用的21天排程继续。

为管理毒性，可以根据情况延迟研究治疗。单一药剂莫苏妥珠单抗疗法剂量调整的具体指南如下所述。

下文描述了管理指南包括针对特定不良事件的研究治疗剂量和排程修改。

莫苏妥珠单抗剂量和排程修改

·对于在莫苏妥珠单抗的第一剂量时出现CRS或在后续剂量出现CRS复发性风险增加的患者，输注时间可延长至多8小时。

·出现符合DLT定义的不良事件、3级不良事件或严重不良事件的患者

允许将莫苏妥珠单抗给药延迟至多2周，以自毒性中恢复。

–在B组和F组中的第1周期双步分次期间，如果不存在临床显著症状，尽管血液学实验室异常，仍可施用莫苏妥珠单抗；对于贫血和血小板减少症，不需要输血。

–对于研究者认为不可归因于另一明确可鉴定原因的那些不良事件(例如，记录的进行性疾病、伴随用药或既往存在的医疗状况)，患者可以继续接受另外的剂量的莫苏妥珠单抗，前提是在上述时间段内，毒性已消退为≤1级。

对于降低的实验室值，异常应已消退至≤1级的下限，或返回至≥基线值的80％，以较低者为准。

对于中性粒细胞减少症，ANC应消退至≤2级或返回至基线值的≥80％，以较低者为准。

对于增加的实验室值，异常应已消退至≤1级的上限，或返回至≥基线值的120％，以较高者为准。

在此类患者中随后施用莫苏妥珠单抗的剂量通常应降低，例如，降低至剂量递增期间评估的下一个最高通过剂量水平。如果降低至没有莫苏妥珠单抗药效学活性证据的剂量水平，例如，没有血清细胞因子含量变化的证据，则患者可以停止研究治疗。

–在DLT或其他与研究治疗相关的3级毒性后，应在研究者与患者一起仔细评估和讨论风险与获益并获得医疗监督员批准后，再决定是否继续进行降低的剂量治疗，但以下情况除外：

若在持续<3天的≤2级CRS(表4)的背景下出现AST或ALT之升高>3X ULN和/或总胆红素>2X ULN，但无个别实验室值超过3级，则经医疗监督员批准可继续莫苏妥珠给药而无需降低剂量。

对于3级CRS(表4)，应减少下一次莫苏妥珠单抗剂量，并且如果耐受较低剂量，则可以增加后续剂量。如果在第1周期第1天或第1周期第8天莫苏妥珠单抗施用后在递增给药定群中发生3级CRS，则应与医学监察员讨论下一个莫苏妥珠单抗剂量，并应考虑减少剂量(表6)。

对于在持续时间<3天的≤2级CRS(表4)之背景下发生的3级(NCI CTCAE v4)个体CRS体征和症状，经医疗监督员批准，可继续莫苏妥珠单抗给药而无需减少剂量。

对于纳入扩展定群的患者，在研究者进行个体获益-风险评估并与医疗监督员协商后，做出关于剂量和排程修改的决定。

任何在剂量降低时再次出现类似毒性的患者均应停止进一步的莫苏妥珠单抗治疗。

患者可能不以发生不良事件时的莫苏妥珠单抗剂量再治疗，除非不良事件归因于另一个明确可鉴定的原因。

·在另外的2周后不满足给药标准的患者停止研究治疗并随访安全性结果。在研究者对风险对比获益作出评估且经医疗监督员批准之后可允许基于正在进行的临床益处的许多例外情况。在研究者对风险对比获益作出评估并经医疗监督员批准后，可能不需要中断因非莫苏妥珠单抗的毒性而延迟疗法。

–对于B组和F组患者，如果剂量延迟导致6周或更长时间的无治疗间隔，则需要在剂量延迟后的第一周期的第1天、第8天和第15天对莫苏妥珠单抗进行双步分次。

·对于根据第1周期递增排程(B组和F组递增或扩展)接受莫苏妥珠单抗的患者，如果在第1周期、第1天、第1周期、第8天和/或第1周期、第15天给药之后发生严重不良事件或特别关注的不良事件，莫苏妥珠单抗之治疗延迟至多14天和/或后续莫苏妥珠单抗剂量的修改可能在医疗监督员在与治疗研究医师协商后自行决定是否进行。

如果患者在第1周期出现毒性需要莫苏妥珠单抗中断>7天，则应通知医疗监督员，并且患者可能需要在恢复计划的治疗排程之前以既往耐受的最高剂量重复莫苏妥珠单抗。

因PD以外的原因停止研究治疗的患者应继续随访。

C.与莫苏妥珠单抗相关的风险

基于迄今为止使用莫苏妥珠单抗的临床数据，下文描述了以下已知和疑似风险。

与莫苏妥珠单抗相关的已知风险

细胞因子释放综合征

莫苏妥珠单抗之作用机制为针对CD20阳性细胞的免疫细胞活化；因此，可能会发生一系列事件，涉及输注相关反应(IRR)、靶标介导的细胞因子释放，和/或过敏症，伴有或未伴有紧急ADA。其他CD20导向疗法和免疫调节疗法与IRR、细胞因子释放综合征(CRS)和/或过敏症有关(美国包装说明书(USPI)；USPI；USPI)。研究GO29781中报告了莫苏妥珠单抗施用后的CRS。

虽然CRS是与莫苏妥珠单抗相关的已知风险，但随着临床数据的积累，正在进行全面的表征。迄今为止，使用莫苏妥珠单抗观察到的CRS的严重程度大多为轻度至中度，且包括诸如发烧、头痛和肌痛等症状，并对根据指示用镇痛药、解热药和抗组胺药的对症治疗有反应。

CRS之严重或危及生命之表现，诸如低血压、心搏过速、呼吸困难或胸部不适等应当根据指示通过支持性与复苏性措施加以积极治疗，包括按照机构惯例使用托珠丹康和/或高剂量皮质类固醇、静脉输液、以及其他支持性措施。严重CRS可能与其他临床后遗症有关，诸如弥散性血管内凝血、微血管渗漏综合征或巨噬细胞活化综合征(HLH)，或者可能表现为噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)。基于免疫的单克隆抗体疗法导致的严重或危及生命的CRS的护理标准尚未建立；CD19 CAR-T的病例报告和建议已经发表(Teachey等人，Blood,121(26):5154-5157,2013；Lee等人,Blood,124(2):188-195,2014；Maude等人,NewEngl J Med,371(16):1507-1517,2014；Neelapu等人,Nat Rev Clin Oncol,15:47-62,2018；另参见FDA批准的两种描述CRS风险管理的产品(USPI；USPI))。

可能与嵌合抗原受体(CAR)-T细胞疗法后严重CRS风险增加相关的疾病相关因素，并且因此，潜在的其他T细胞参与疗法包括(但不限于)淋巴瘤骨髓侵犯、结外疾病、里希特转化、B细胞淋巴细胞增生症以及循环外周恶性细胞的存在。

中性粒细胞减少症

中性粒细胞减少症具有与其他CD20导向疗法以及博纳吐单抗(USPI)相关的已知类别效应，并且是莫苏妥珠单抗的已知风险。在研究GO29781中观察到莫苏妥珠单抗治疗后出现可逆性中性粒细胞减少症。一些发生中性粒细胞减少症的患者已接受生长因子支持和/或临时搁置治疗。

应密切监测出现3-4级中性粒细胞减少症的患者，并酌情进行更频繁的评估。对于3级或更高级别的治疗出现的中性粒细胞减少症事件，应考虑如本文所述的剂量延迟和/或剂量修改。

与莫苏妥珠单抗相关的潜在风险

噬血细胞淋巴组织细胞增生症

已经报导了使用博纳吐单抗和CAR过继T细胞疗法治疗患有成人发病继发性或反应性巨噬细胞活化综合征/噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(MAS/HLH)特征的CRS(USPI；Teachey等人，Blood,121(26):5154-5157,2013；Lee等人,Blood,124(2):188-195,2014)。(注意：就GO29781协议而言，MAS和HLH被视为同义词。)研究GO29781中报告了致命的继发性HLH病例，患者有慢性活动性EBV感染证据(通过EBV编码的小RNA原位杂交评估为EBV阳性)。

虽然严重的CRS和继发性HLH具有重迭的表现和症状，但继发性HLH可能由其他疾病引起，包括感染、自体免疫疾病和恶性肿瘤(Ramos-Casals等人,Lancet,383:1503-1516,2014)。此类疾病在研究患者群体中的流行使得区分严重CRS与HLH以及鉴定诱发因素具有挑战性。例如，在一个系列中，B细胞恶性肿瘤是与反应性HLH相关的最常见的恶性肿瘤(Rivière等人,Am J Med,127:1118-1125,2014)。此外，EBV活动性感染是HLH最常见的感染原因之一(Hashemi-Sadraei等人,Case Rep Hematol2015,491567,2015；Schram andBerliner,Blood,125:2908-2914,2015)，同时重新活化潜伏EBV可能发生在CLL患者中(Rath等人,Haematologica,93:1424-1426,2008)，其进而可导致HLH(Lim等人,LeukLymphoma,55:2938-2941,2014)。尚不清楚莫苏妥珠单抗治疗是否可进一步增加具有另外的危险因素的患者发生HLH的风险。

在包括莫苏妥珠单抗在内的T细胞参与疗法的设置中，与继发性HLH相比，CRS的可能性要大得多。考虑到症状的重叠表现，对此类患者的管理应主要集中在CRS的治疗上(参见表6)。

在非典型病例中，诸如迟发性CRS(过去完成了莫苏妥珠单抗的递增给药)或难以治疗的CRS，应开始对HLH进行检查

HLH的支持管理大体上与CRS相似。HLH的具体诊断、监测和管理指南如下所述。

如果满足以下八项标准中的五项，则患者应被归类为患有HLH：

·发烧≥38.5℃

·脾肿大

·外周血血细胞减少症至少由以下两项组成：

·血红素<90g/L(9g/dL)(<4周龄婴儿<100g/L(10g/dL))

·血小板计数<100x 10⁹/L(100,000/μL)

·ANC<1.0x 10⁹/L(1000/μL)

·空腹甘油三酯>2.992mmol/L(265mg/dL)和/或纤维蛋白原<1.5g/L(150mg/dL)

·骨髓、脾脏、淋巴结或肝脏中的噬血作用

·自然杀伤细胞活性低或不存在

·铁蛋白>500mg/L(500ng/mL)

·可溶性介白素2(IL-2)受体(可溶性CD25)升高≥2个标准偏差，高于年龄调整的实验室特异性规范

患者住院时应采取以下诊断和监测措施发起：

·频繁(例如每4小时)生命体征和体格检查，包括评估脾肿大；

·连续(至少每天)监测血清化学、全血细胞计数、肝功能测试(LFT)、铁蛋白、PT/PTT、纤维蛋白原、D-二聚体和甘油三酯；

·考虑骨髓和/或淋巴结活检以评估噬血作用和活动性感染，包括评估T/B/NK细胞中EBV蛋白的定位；

·完整的传染病检查包括：

–血培养(细菌和真菌)

–尿液培养和尿液分析

–放射线摄影评估(例如，胸部X光或CT扫描)

–评估活动性病毒感染，包括但不限于EBV和CMV

·如果可用，评估可溶性CD25并评估NK细胞功能

·应考虑使用DNA对可能与HLH相关的突变进行探索性基因测试，例

如PRF1、MUNC13-4、STXBP2(Zhang等人,Blood,118:5794-5798,

2011)。

疑似HLH的患者应根据表12中的指南进行治疗。在确诊为HLH的情况下，应永久停止研究治疗。

表12.疑似噬血细胞性淋巴组织细胞增生症的管理指南

注射部位反应

已经观察到SC施用抗CD20单克隆抗体抗体利妥昔单抗后的局部注射部位反应(Assouline等人,Lancet Haematol,c128-338,2016)。其中大部分的严重程度为轻度至中度(MABTHERAEuropean Medicines Agency,Summary of Product Characteristics(EMASPC))。由于CD4和CD8 T细胞(Mueller等人,Frontiers in Immunology,332,2014)以及B细胞(Egbuniwe等人,Trends Immunol,36:102-111,2015)存在于皮肤中，可能会在莫苏妥珠单抗SC施用后发生局部反应。因此，使用莫苏妥珠单抗注射部位反应的风险是未知的。SC施用莫苏妥珠单抗后出现局部注射部位反应的患者应根据表7中详述的指南进行管理。

神经毒性

在莫苏妥珠单抗治疗后在CRS和/或肝功能测试(LFT)升高的情况下，已观察到脑病。

据报导，施用莫苏妥珠单抗之食蟹猴会出现神经系统毒性，并经常在用博纳吐单抗和CD19 CAR T细胞疗法治疗的患者中报导(USPI；Kochenderfer等人,JClin Oncol,published online before print August 25,2014；Maude等人,New Engl JMed,371(16):1507-1517,2014)。用博纳吐单抗或CAR T细胞疗法治疗的患者报告的症状包括头痛、意识模糊、失语、脑病、震颤、癫痫和其他神经系统事件。在该等情况下，毒性的病因尚不确定，并且可能对细胞因子定向疗法(如托珠单抗)没有反应，但在治疗中断和皮质类固醇的情况下通常得到改善(USPI；Viardot et al.,American Societyof Hematology Annual Meeting 2010,Abstract2880,2010；Kochenderfer等人,J ClinOncol,published online before print August 25,2014)。在接受博纳吐单抗治疗的B细胞ALL患者中，约50％的患者观察到神经毒性；在大约15％的患者中观察到≥3级的神经毒性。大多数神经系统不良事件在博纳吐单抗中断后得到解决，一些患者需要停止治疗(USPI)。基于现有的临床数据，使用莫苏妥珠单抗观察到的神经系统不良事件的严重程度较轻，且发病较早。最常见的神经系统事件包括头痛、头晕和失眠。

肿瘤溶解综合征

肿瘤溶解综合征(TLS)是抗肿瘤疗法在包括NHL在内的血液系统恶性肿瘤中的已知药效学效应。报告了TLS与博纳吐单抗、CAR T细胞疗法和其他CD20定向疗法(USPI；USPI；USPI；Porter等人,N Engl JMed,365(8):725-733,2011)。TLS的固有风险取决于所治疗的恶性肿瘤和个体患者特征(Coiffier等人，J Clin Oncol,26:2767-2778,2008)。如果使用莫苏妥珠单抗治疗导致大量肿瘤细胞快速破坏，则理论上存在TLS风险。

对于具有体积庞大疾病(在TLS的上下文中定义为筛选CT扫描上任何≥10cm的病变)和治疗前乳酸脱氢酶(LDH)含量升高的那些患者，特别是在存在脱水或肾功能受损的情况下，预测NHL患者使用莫苏妥珠单抗进行TLS的风险最高。在CLL患者中，预测在绝对淋巴细胞计数≥25x10⁹/L的患者或任何淋巴结病变≥10cm的那些患者中，尤其是在脱水或肾功能受损的情况下，使用莫苏妥珠单抗进行TLS的风险最高。尽管相较于滤泡性、边缘性和小细胞淋巴瘤，DLBCL、转化淋巴瘤和MCL发生TLS的风险更高(Cairo等人，Br J Haematol,149:578-586,2010)，基于肿瘤类型的任何风险分层均与疗法的有效性一起考虑(Howard等人,New Engl J Med,364(19):1844-1854,2011)。

由于莫苏妥珠单抗具有强大的B细胞毒杀潜力，所有患者均基于以下预防指南接受TLS预防。

在第1周期研究治疗施用入院或剂量递增后住院时，应获取并审查患者的血清化学和血液学实验室样品，并根据下述指南启动预防措施。

所有患者均将在每次莫苏妥珠单抗施用前接受TLS预防治疗，A组和D组为C1D1，B组和F组为C1D1、C1D8和C1D15。预防指南包括以下内容：

·水化作用，由在莫苏妥珠单抗的第一剂量前24-48小时开始摄入约2-3L/天的流体组成。

–如果患者因施用研究治疗而住院，则应在莫苏妥珠单抗施用结束时以150–200mL/小时的速率开始静脉补液，并在此后持续至少24小时。

–如果患者在门诊接受研究治疗，则在莫苏妥珠单抗施用后，流体体摄入量应维持在2-3L/天，至少持续24小时。

–对于有特殊医疗需求的个人，应考虑改变流体速率。

·施用降低尿酸的药剂：

–根据研究者的判断，对于被判定为具有低度或中度TLS发生风险的那些患者，施用别嘌醇(例如，从剂量前72小时开始口服300mg/天，之后持续3-7天)。

–对于在莫苏妥珠单抗治疗前尿酸含量升高或被认为有TLS高风险的患者，除非有禁忌，否则应施用拉布立酶(例如，在第一剂量莫苏妥珠单抗前30分钟内每天0.2mg/kg IV，此后至多5天)(USPI)。

–应按照上述规定或如果观察到TLS的实验室证据直至血清尿酸或其他实验室参数正常化，则继续使用别嘌醇/拉布立酶进行治疗。

–如果研究者认为禁止使用别嘌醇或拉布立酶治疗或在其他方面不合适，则应联系医疗监督员以获得进一步指导。

感染

由于其预期的作用方式会导致B细胞严重耗竭，因此莫苏妥珠单抗可能与感染风险增加有关。报导了接受其他CD20定向治疗以及博纳吐单抗的患者发生感染(USPI；USPI；USPI)。因此，不应在存在活动性严重感染的情况下施用莫苏妥珠单抗。

研究者在考虑对有复发性或慢性感染史或可能使患者易于感染的潜在状况的患者使用莫苏妥珠单抗时应小心谨慎。在开始抗生素或其他治疗之前，感染的体征和症状应导致迅速评估和适当的样品进行细菌学调查。

应特别注意既往接受过显著免疫抑制治疗(如高剂量化疗)的患者。进行性多灶性白质脑病(PML)与CD20定向疗法(包括利妥昔单抗和奥滨尤妥珠单抗)的治疗有关。任何有新发神经系统表现的患者均应考虑PML诊断，并咨询神经科医生，并且诊断程序(包括脑部MRI和腰椎穿刺)应按照临床指示进行。然而，请注意，由于与利妥昔单抗相关的PML病通常发生在长期暴露之后，因此在莫苏妥珠单抗初始剂量后新发的神经系统不良事件可能更可能是由于新发单抗的急性作用所致(Carson等人,Blood,113(20):4834-4840,2009)。

血小板减少症

血小板减少症与其他CD20定向疗法以及博纳吐单抗(USPI)相关。在研究GO29781中观察到莫苏妥珠单抗治疗后出现可逆性血小板减少症。

在食蟹猴中进行的莫苏妥珠单抗非临床测试中，血液学发现包括在莫苏妥珠单抗暴露的第一天内WBC、淋巴细胞、单核球、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和血小板计数短暂下降，然后在第4-8天之间恢复或反弹恢复。

应密切监测患者的血小板减少症；应定期进行实验室测试，直至事件解决。根据机构惯例输注血液制品(例如，输注血小板)由主治医师自行决定。还应考虑使用所有可能使血小板减少症相关事件恶化的伴随疗法，如血小板抑制剂和抗凝剂。

对于3级或更高级别的治疗中出现的血小板减少事件，应考虑延迟剂量和/或调整剂量。

肝酶升高和肝脏事件

据报导，使用博纳吐单抗(USPI)时肝酶升高，通常但不仅限于CRS。约6％的非CRS患者出现≥3级肝酶升高。几乎所有肝酶升高均在博纳吐单抗治疗中断或治疗继续时消退。一些肝酶升高消退的患者被成功再激发，表明是第一剂量效应而非直接毒性(Drug Approval Package)。在莫苏妥珠单抗治疗后观察到2级CRS环境下的瞬时3级AST升高以及3级肝性脑病/LFT 4级升高。

在食蟹猴中进行的莫苏妥珠单抗非临床试验中，观察到血清总胆红素以及CRP、纤维蛋白原、PT和aPTT呈剂量依赖性升高，与莫苏妥珠单抗诱导的细胞因子释放和急性期蛋白反应一致，凝血系统活化最小。肝脏中可能的药物相关显微镜检查发现包括门静脉区域的单细胞肝细胞变性/坏死和免疫细胞浸润。所有的发现均表明

可逆性的证据。

免疫原性(抗药物抗体)

与任何重组抗体一样，莫苏妥珠单抗可能引发免疫反应，并且患者可能会产生针对该分子的抗体。密切监测患者对莫苏妥珠单抗的任何潜在免疫反应，这可能会影响该药剂的获益-风险状况。

肿瘤炎症/耀斑

研究GO29781中报告了与肿瘤炎症/耀斑相关的不良事件。与莫苏妥珠单抗的作用机制一致，肿瘤耀斑可能是由于在莫苏妥珠单抗施用后T细胞流入肿瘤部位，并且可能与伪进展有关。迄今为止观察到的与肿瘤耀斑相关的不良事件在初始莫苏妥珠单抗施用后发生的时间很短。在进行性疾病后用莫苏妥珠单抗再治疗的患者中可能还会出现肿瘤耀斑。基于新出现的安全数据，肿瘤耀斑已表现为肿瘤疼痛、通过临床或放射线摄影评估已知的淋巴结或结外病变的大小增加，以及新的或恶化的胸腔积液。此外，根据肿瘤大小和解剖位置，肿瘤耀斑可能会对重要结构(包括气道、主要血管、胃肠道(穿孔和出血的风险)和/或主要器官)产生潜在的质量效应。如果此类表现在时间上与早期莫苏妥珠单抗给药相关，则治疗医师/研究调查员应将那些事件视为肿瘤耀斑并报告为“肿瘤耀斑”或“肿瘤炎症”。对于在关键解剖部位出现肿瘤的患者，治疗医师/研究调查者应联系医疗监督员，在莫苏妥珠单抗治疗前讨论风险评估和缓解策略，并应密切监测患者的肿瘤耀斑。

D.不良事件严重程度和因果关系的评估

除非另外指明，否则NCI CTCAE(v4.0)的不良事件严重程度分级量表用于评估不良事件严重程度。表13用于评估NCI CTCAE中未具体列出的不良事件的严重程度。

表13 NCI CTCAE中未具体列出的事件的不良事件严重程度分级量表

NCI-CTCAE＝美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准。注：基于最新版本的NCI CTCAE(v5.0)。

^a日常生活的工具性活动是指准备饭菜买杂货或衣服使用电话管理钱财等。

^b日常生活中的自我保健活动的实例包括洗澡、穿衣服和脱衣服、自己进食、上厕所和服药，该些均是由非卧床不起的患者进行的。

研究者应利用他们对患者的了解、事件周围的情况以及对任何潜在替代原因的评估来确定不良事件是否被认为与研究药物有关，并相应地指出“是”或“否”。应考虑以下指导(另参见表14)：

·事件发生与开始研究药物的时间关系

·事件的进程，特别考虑到剂量减少、停止研究药物或重新引入研究药物(如适用)的影响

·事件与研究药物或类似治疗的已知关联

·该事件与所研究疾病的已知关联

·患者存在危险因素或使用已知会增加事件发生率的合并用药

·存在已知与事件发生率相关的非治疗相关因素

表14.因果归因指导

对于接受组合治疗的患者，针对每个协议规定的疗法单独评估因果关系。

实例7.统计考虑和分析计划

A.样品大小的确定

GO29781试验的样品量系基本文中描述的剂量递增规则。该研究之计划纳入是在剂量递增阶段大约130-226名患者(100-166名NHL患者和30-60名CLL患者)，并且在扩展阶段期间大约290-520名患者。大约80名患者分别纳入B组的R/R DLBCL/trFL和R/R FL扩展定群中。

B.剂量递增阶段

该研究的剂量递增阶段主要被设计成评估安全性、耐受性和药代动力学。该试验最初采用单患者剂量递增定群，但基于上述标准转换为标准3+3设计。鉴于不同的潜在DLT率，表15提供了在3名患者中未观察到DLT或在6名患者中观察到≤1个DLT的概率。例如，如果真实潜在DLT率为20％，则在3名患者中未观察到DLT的概率为51％，并且在6名患者中观察到≤1DLT的概率为66％。

表15.观察到具有不同潜在DLT率的DLT的概率

C.剂量扩展阶段

该研究的剂量扩展阶段被设计成评估安全性和疗效信号。表16提供了当不良事件的真实潜在概率在1％-20％范围内时，在10、20、40和80名患者中观察到至少一种不良事件的概率。例如，如果真实潜在不良事件比率为5％，则在40名患者中观察到至少一种不良事件的概率为87％，并且在80名患者中为98％。

对于B组之R/R DLBCL/trFL和R/R FL扩展定群，将估计完全缓解率，以和Clopper-Pearson精确95％ CI。

对于B组之R/R DLBCL/trFL扩展定群：观察到30％的CR率，80名患者之样品量将导致(20％,41％)的95％ CI，即真实CR率低于20％被排除在外。此外，在5％的双侧显著性水平下，80名患者将提供85％的能力来检测CR率自20％增加至35％的15％增加。

对于B组的R/R FL扩展定群：观察到24％的CR率，80名患者的样品量将导致(15％,35％)的95％ CI，即真实CR率低于14％被排除在外。此外，在5％的双侧显著性水平下，80名患者将提供83％的能力来检测CR率自14％增加至28％的14％增加。

承办者可能会在B组的R/R FL扩展定群中纳入多于80名患者，以从至少60名对抗CD20疗法和烷基化剂均难治的R/R FL患者中获取资料以进行统计分析。观察到25％的CR率，60名患者的样品量将导致(15％,38％)的95％ CI；即真实CR率低于8％被排除在外。

将在研究的扩展阶段进行中期分析，以针对不可接受的毒性和无效性暂停或停止患者纳入。总而言之，在每个扩展定群中，进行了持续的安全监测，并定期进行中期分析以确认无效性至少一次。如果在扩展定群中出现不可接受的毒性或缓解率低于预期，则可能会停止纳入。

表16.10、20、40和80名患者的扩展定群的安全信号检测概率

D.治疗组可比性总结

人口统计学和基线特征(如年龄、性别、体重、恶性肿瘤类型、恶性肿瘤持续时间和基线ECOG表现状态)使用连续变量的均值、标准偏差、中位数和范围以和分类变量的比率进行总结。所有总结均按剂量水平和组整体介绍。

研究药物施用数据按剂量水平和组进行总结。

最终分析基于透过研究中止的时间收集的患者资料。所有分析均基于可评估安全性的群体，定义为接受任何量之研究治疗之所有患者。所有总结均根据指定的剂量水平介绍。

E.安全性分析

安全性分析包括接受任何量的研究治疗的所有患者。

经由不良事件概述、实验室测试结果变化、ECG变化、ADA变化和生命体征变化来评估安全性。

所有收集的不良事件数据均按指定的剂量水平和患者编号列出。在第1周期第1天治疗时或治疗后发生的所有不良事件均按映像术语、适当的词库水平和NCI CTCAE v4.0毒性等级进行总结。此外，单独列出并总结了所有严重不良事件(包括死亡)。导致治疗中断的DLT和不良事件也单独列出。

F.药代动力学分析

莫苏妥珠单抗的个体和平均血清浓度对时间的数据是以表格形式列出，并按剂量水平绘制。通过估计总AUC、C_max、C_min、CL、和V_ss(如根据所收集的资料而定)来总结莫苏妥珠单抗的药代动力学。此类参数的估计值被制成表格并总结。评估患者之间的变异性和药物蓄积。

在适用的情况下，总结了托珠单抗的血清谷值和最大浓度，视情况而定并在数据允许的情况下进行。可考虑房室、非房室和/或群体方法。酌情进行另外的的PK分析。

G.活性分析

均由研究者评估的反应评估数据、PFS以及反应持续时间按剂量水平、排程和组对所有患者进行总结。估计客观缓解率(ORR)。研究者评估的客观缓解定义为CR或PR，由研究者使用规范标准的评估确定。缺少或无反应评估的患者被归类为无反应者。

在具有研究者评估的客观缓解的患者中，反应持续时间定义为从初始CR或PR的时间至由研究者确定的进行性疾病或死亡时间。若患者在研究结束前未经历进行性疾病或由任何原因导致之死亡，则反应持续时间在最后一次肿瘤评估当天进行审查。

研究者评估的PFS定义为自研究治疗的第一天(第1周期，第1天)至研究者确定的进行性疾病或死亡的时间，以先发生者为准。如果患者没有经历PD或死亡，则PFS在最后一次肿瘤评估的当天被审查。

H.R/R DLBCL和转化FL扩展定群以及B组RP2D的R/R FL扩展定群的活性分析

主要疗效终点

主要疗效终点是独立审查机构(IRF)评估的CR率，定义为使用NHL规范标准基于IRF评估，最佳总体反应为CR的患者比率(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)。缺少或无反应评估的患者被归类为非完全缓解者。

测试了治疗患者群体与历史对照之间关于CR率的比较。R/R DLBCL和转化FL扩展定群的对照CR率假定为20％(历史对照见表17)，并且R/R FL扩展定群假定为14％(历史对照见表18)。

表17.R/R DLBCL/转化FL患者中的临床试验资料总结

CR：完全缓解为最佳反应；CRu：未确认的完全缓解为最佳反应；CT：计算机断层摄影；DLBCL：弥漫大B细胞淋巴瘤；FL：滤泡性淋巴瘤；NHL：非霍奇金淋巴瘤；ORR：客观缓解率；PET：正子发射断层摄影术；PR：部分缓解；R/R DLBCL：复发性/难治性弥漫大B细胞淋巴瘤。

^aMounier等人,Haematologica,98:1726-1731,2013。

^bPettengell等人,Lancet Oncol,13:696-706,2012。包括53名DLBCL患者、10名转化和缓性淋巴瘤患者和1名3级FL患者。

^cDang等人,Br J Haematol,doi：10.1111/bjh.14820[Epub ahead of print],2017。

^dViardot等人,Blood,127:1410-1416,2016。

^eGoebeler等人,J Clin Oncol,34:1104-1111,2016。

^fNeelapu等人,Blood,128:LBA-6,2016。

^gPOLIVY^TM USPI。经修订的Lugano 2014PET-CT疗效评价标准。需要进行PET-CT CR的骨髓确认。PET-CT PR需要满足PR的PET标准和CT标准。

表18.既往用两种或更多种前线系统性疗法治疗的R/R FL患者的临床试验数据汇总

CR：完全缓解为最佳反应；mDOR：反应持续时间的中位数；FL：滤泡性淋巴瘤；ORR：客观缓解率；mPFS：无进展生存期的中位数；USPI：美国处方信息。

^a (艾代拉利司)USPI。

^b ALIQOPA^TM(考班昔布)USPI。

^c基于总体缓解率，该适应症获得加速批准。对该适应症之持续批准可能取决于验证性试验中对临床益处之验证和描述。

^d Gopal等人,N Engl J Med,370:1008-1018,2014。

^e Dreyling等人,Ann Oncol,25:76-82,2017。

以下假设在B组RP2D的每个R/R DLBCL和转化FL扩展定群中以0.05的显著性水平进行测试：

H₀:CR率＝20％对H_a:CR率≠20％

以下假设在B组RP2D的每个R/R FL扩展定群中以0.05的显著性水平进行测试：

H₀:CR率＝14％对Ha：CR率≠14％

提供了使用Clopper-Pearson方法计算CR率的精确95％置信区间。精确二项式检验用于评估B组RP2D的单一药剂莫苏妥珠单抗治疗是否导致CR率的统计学显著增加。

次要疗效终点

次要疗效终点包括：

·研究者评估的CR率，定义为使用NHL规范标准基于研究者评估，最佳总体反应为CR的患者比率(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)。提供了使用Clopper-Pearson方法计算CR率的精确95％置信区间。

·ORR，定义为使用NHL规范标准，最佳总体反应为PR或CR的患者比率(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)。ORR由IRF和研究者评估。提供了使用Clopper-Pearson方法计算ORR的精确95％置信区间。

·完全缓解持续时间，定义为从记录的CR初次发生至记录的进行性疾病或因任何原因导致的死亡(以先发生者为准)之间的时间。完全缓解持续时间将由IRF和研究者使用NHL规范标准进行评估。提供了卡普兰-梅尔(Kaplan-Meier)估计。Brookmeyer-Crowley方法用于构建完全缓解的中位持续时间的95％置信区间。

·反应持续时间，定义为从记录的PR或CR初次发生至记录的进行性疾病或因任何原因导致的死亡(以先发生者为准)之间的时间。反应持续时间由IRF和研究者使用NHL规范标准进行评估。提供卡普兰-梅尔估计值。Brookmeyer-Crowley方法用于构建反应的中位持续时间之95％置信区间。

·PFS，定义为从第一研究治疗至进行性疾病首次发生或任何原因导致的死亡的时间，以先发生者为准。PFS由IRF和研究者使用NHL规范标准进行评估。提供了卡普兰-梅尔(Kaplan-Meier)估计。Brookmeyer-Crowley方法用于构建中位PFS的95％置信区间。卡普兰-梅尔方法用于估计6个月PFS和1年PFS，以及使用格林纳达式的标准误差以及相应的95％ CI。

·Os，定义为从第一研究治疗至任何原因导致的死亡日期的时间。提供了卡普兰-梅尔(Kaplan-Meier)估计。Brookmeyer-Crowley方法用于构建中位OS的95％置信区间。卡普兰-梅尔方法用于估计6个月OS和1年OS，以及使用格林纳达式的标准误差以及相应的95％ CI。

I.患者报告的结果分析

对于所有问卷，患者报告的结果(PRO可评估群体包括NHL扩展定群中具有基线评估和至少一个基线后评估的所有患者。EORTC QLQ-C30和FACT-Lym分量表根据使用者手册进行评分。计算所有时间点的总结统计资料和基线得分的变化。重复测量混合模型用于检查每个定群的纵向剖面。每个定群中还报告了报告从基线变化达到或超过每项测量的最小重要差异的患者比率。对于EQ-5D-5L，根据VAS和指标效用得分相对于基线的变化计算了健康状态的总结统计资料。结果用于更完整的卫生经济资料分析。

J.探索性药效学分析

探索性药效学分析包括评估肿瘤组织和血液中的药效学生物标志物(若有)。酌情进行另外的的药效学分析。

K.中期分析

对研究的扩展部分进行持续安全监测和中期分析，以指导在任何给定扩展定群中出现不可接受的毒性或扩展定群中的缓解率低于预期的情况下可能提前停止纳入。

后验概率方法(Thall和Simon,Biometrics,50(2):337-349,1994)用于评估扩展定群中的毒性，包括在剂量递增定群的DLT评估期间发生的DLT率。如果在任何扩展定群中的任何时间，观察到的DLT数量表明存在约80％的机会使真实DLT率≥20％，则可以暂停该定群的累积，并且IMC将满足以确定是否应停止该定群中的进一步纳入和/或提供本文所述的其他建议。

还定期进行中期分析，以确保在每个扩展定群中至少进行一次无效分析。如果中期分析表明研究治疗的ORR低于历史对照，则可能会停止纳入扩展定群。具体而言，如果使用具有非信息先验之后验概率方法，存在大约80％的机会使真实ORR≤25％，则可以停止纳入。在所有情况下，均应与研究者协商，基于无效性决定停止入扩展定群。

L.免疫原性分析

在使用莫苏妥珠单抗治疗之前、期间和之后，采用经过验证的筛选、滴定和确证测定来评估ADA。免疫原性分析群体由具有至少一项ADA评估的所有患者组成。如果患者在所有时间点均呈ADA阴性，则认为患者对ADA呈阴性。如果患者在基线时呈ADA阳性，但没有任何基线后滴度至少比基线样品的滴度高4倍的基线后样品，则认为患者未受治疗影响。如果患者在基线时呈ADA阴性或资料缺失，然后在研究药物施用后出现ADA反应，则认为患者具有治疗诱导的ADA反应。如果患者在基线时呈ADA阳性并且一个或多个基线后样品的滴度至少比基线样品的滴度高4倍(即至少0.60滴度单位)，则认为患者患有治疗增强的ADA反应。

可以任选地评估ADA状态与安全性、疗效、PK和生物标志物终点之间的关系，并经由亚组分析以描述性方式进行报告。

实例8.莫苏妥珠单抗临床资料总结

研究GO29781中莫苏妥珠单抗的评估正在进行中。在本研究中，莫苏妥珠单抗在A、B和D组中根据以下给药排程进行了研究(注：没有C组)。

·根据第1周期非分次剂量排程(A组)以单一药剂经静脉施用。

·在第1周期递增剂量排程中作为单一药剂静脉内施用，递增第1周期第1天、第1周期第8天和第1周期第15天剂量水平，然后在后续周期的第1天施用最高剂量水平(B组)。

·在第1周期非分次剂量排程(D组)中作为单一药剂皮下施用。

A.安全性

已根据A组给药排程测试了0.05mg至2.8mg的剂量。根据D组给药排程的剂量递增正在进行中。根据剂量递增组中的任何给药排程，尚未达到莫苏妥珠单抗的最大耐受剂量(MTD)。

截至2020年1月21日，研究GO29781中共有432名患者接受了莫苏妥珠单抗治疗。最常观察到的与莫苏妥珠单抗相关的不良事件是CRS，发生在31％的安全性可评估患者中。大多数该等事件是使用经修订的CRS分级系统(Lee等人,Blood,124(2):188-195,2014)分为1-2级，除了在B组以1.0/2.0/13.5mg、1.0/2.0/27.0mg和1.0/2.0/60.0/30.0mg治疗的患者中观察到的4个3级事件，以及在B组以1.0/2.0/60.0/30.0mg治疗的患者中观察到的一个4级事件。174名患者(40％)中报告了严重不良事件；在90名患者(21％)中，研究者评估的严重不良事件与莫苏妥珠单抗有关。50名患者经历了患有致死性预后的不良事件：45名患者经历了恶性肿瘤进展(报告为不良事件)，1名患者患有噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)，1名患者患有肺炎，2名患者患有败血症，并且1名患者患有念珠菌败血症。

截至2020年1月21日，在研究GO29781中治疗的B组患者中，未观察到治疗相关AE或3级AE患者与莫苏妥珠单抗剂量水平之间的明显关联，其中使用第1周期递增给药方案作为单一药剂施用莫苏妥珠单抗。这表明递增给药可能是有效的安全缓解策略，其可以提供非剂量依赖的暴露安全概况。

此外，在D组中观察到的不良事件表明，在迄今为止测试的剂量水平下，皮下施用莫苏妥珠单抗时的总体安全性概况并不比B组中观察到的安全性基本上更差。基于目前的资料，在D组中未观察到与单一药剂莫苏妥珠单抗显著不同的意外或无法管理的毒性。为了进一步减轻急性细胞因子驱动的毒性并优化莫苏妥珠单抗治疗的获益-风险特征，引入了新的治疗组(F组)，以按照第1周期递增给药方案经由皮下注射施用莫苏妥珠单抗。

基于总体安全性、疗效和PK特征，B组第1天的莫苏妥珠单抗剂量水平已固定为1mg，第8天的剂量水平已固定为2mg，并且仅第15天的剂量水平在剂量上持续升级。截至2019年5月6日，1mg/2mg/60mg剂量水平已通过剂量限制性毒性(DLT)评估期。

B.活性

在截至2020年1月21日的临床截止日期的研究GO29781中，在所有治疗组的主要疗效群体的415名患者中，60名患者(39％)具有研究者评估的客观缓解(CR或部分缓解(PR))。总体而言，110名患者(27％)有CR，76名患者(18％)有PR，52名患者(13％)有稳定疾病(SD)，并且160名患者(39％)有进行性疾病(PD)作为研究人员使用经修订的恶性淋巴瘤疗效评价标准评估的最佳总体反应(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586,2007)。在和缓性和侵袭性NHL组织学中观察到客观缓解，包括FL、DLBCL、转化FL、MCL、边缘区淋巴瘤(MZL)和里希特转化。

C.临床药代动力学和免疫原性

来自A组(0.05至2.8mg固定剂量，每3周(Q3W)给药)和B组(在第1/8/15天0.4/1/2.8至1/2/60mg第1周期递增剂量，然后是Q3W给药)的临床PK数据在正在进行的I/Ib期(GO29781)研究中进行了分析。

莫苏妥珠单抗血清药物浓度在输注结束时(约4小时)达到C_max并以多阶段方式下降，α半衰期为约3-4天，并且表观半衰期(t_1/2)为约6至11天。表观t_1/2估计值较IgG1抗体21天的典型t_1/2短，并且可能反映了在所有测试剂量水平下由于靶点介导的药物处置对药物通过率的影响。在测试的剂量范围内，莫苏妥珠单抗PK暴露以近似剂量成比率的方式增加。观察到中等药代动力学变异性。通过具有时间依赖性通过率的2室PK模型很好地描述了莫苏妥珠单抗IV给施用后的群体PK。莫苏妥珠单抗SC施用后的PK与相对高的生物利用度(约90％，根据群体PK模型估计)和约3天的中位T_max相关。

在迄今为止测试的352名患者中，在1名患者中检测到针对莫苏妥珠单抗的抗药物抗体(ADA)。

实例9.莫苏妥珠单抗皮下和静脉施用的比较

在GO29781研究的D组(非分次皮下(SC)剂量递增)中测试了1.6mg与20mg之间的莫苏妥珠单抗剂量(图6)。

A.T_max和C_max

相对于IV施用，SC施用延迟了T_max：对于IV施用，T_max发生在输注结束(EOI)时，且对于SC，发生在72小时。

相较于IV施用，SC施用在等效剂量水平上减弱了C_max：SC施用的C_max为IV施用的C_max的约30％。SC施用的血清浓度在C_max后以较慢的速率下降，表明吸收速率受限的PK。莫苏妥珠单抗的表观半衰期对于SC施用为15-43天，并且对于IV施用为6-11天。

SC剂量递增(7.2mg和以上)与比经由IV施用递送的1mg剂量更高的C_max相关(图7)。

通过皮下注射递送的莫苏妥珠单抗的估计生物利用度很高(约90％)。

B.IL-6概况和CRS

与静脉施用莫苏妥珠单抗相比，在用皮下莫苏妥珠单抗治疗的患者中观察到较低的IL-6含量和延迟的IL-6峰。

图8显示了来自GO29781研究的A组(IV给药)和D组(SC给药)的患者的IL-6概况。观察到SC给药使IL-6诱导最小化。IL-6表现的增加(如果有的话)在D组(24-48小时)中较在A组(30分钟至6小时)中发生得更晚。两组均未观察到明显的剂量依赖性。

图9显示了在第1周期的第1天接受1mg剂量莫苏妥珠单抗的GO29781研究的B组(IV)患者与接受1.6mg、2.4mg、3.6mg或7.2mg剂量的D组(SC)患者的IL-6含量之间的比较。皮下给药7.2mg比静脉给药1mg的C_max高40％，与1mg IV给药比较，皮下给药对IL-6的诱导最小。

在较高的SC剂量水平下观察到较高的IL-6含量(图10)。在以7.2mg或更低剂量治疗的患者中，峰值IL-6低于100pg/mL。观察到的最高IL-6含量出现在患者1中(约600pg/mL)：该患者经历了2级细胞因子释放综合征(CRS)。

在GO29781研究的SC组中观察到的CRS事件总结在表19和20中。

表19.SC组(D组)与IV组(B组)的细胞因子释放综合征

表20.SC组(D组)与IV组(B组)的细胞因子释放综合征时间

C.所有不良事件

对于IV第1周期递增给药组(n＝350)中的所有NHL患者、接受1/2/60/30mg剂量静脉注射莫苏妥珠单抗的所有NHL患者(n＝153)以及接受固定剂量SC莫苏妥珠单抗治疗的所有NHL患者(n＝23)，最常报告的不良事件(AE)、严重AE(SAE)和3级AE、致死性AE(不包括进行性疾病)以及导致停止莫苏妥珠单抗治疗的AE的总结显示在表21中。AE的频率在三个患者组中通常是一致的。接受在1.6mg至20mg范围内的固定剂量SC莫苏妥珠单抗的患者(26.1％)中，SAE总体频率在数值上低于以第1周期递增给药接受IV莫苏妥珠单抗的那些患者(所有NHL患者以范围为0.4/1.0/2.8mg至1/2/60/30mg的剂量(42.3％)，NHL患者以1/2/60/30mg剂量(41.8％))。在接受SC莫苏妥珠单抗治疗的患者(4.3％)中，严重CRS事件的频率(使用ASTCT共识标准分级，Lee等人，2019年)在数值上低于以第1周期递增给药接受IV莫苏妥珠单抗的患者(所有NHL患者(11.4％)，NHL患者以1/2/60/30mg剂量(17.6％))。

接受SC莫苏妥珠单抗治疗的患者(39.1％)中≥3级中性粒细胞减少症事件(包括PT中性粒细胞减少症和PT嗜中性球计数降低)的频率高于以第1周期递增给药接受IV莫苏妥珠单抗的患者(所有NHL患者(22.9％)，NHL患者以1/2/60/30mg剂量(19.6％)。在用SC莫苏妥珠单抗治疗的5名患者(21.7％，均为1级)中报告了注射部位反应，而在用IV莫苏妥珠单抗治疗的患者中未观察到注射部位反应。

表21.研究GO29781中最常报告的不良事件，IV第1周期递增给药组和SC固定剂量治疗组中安全性可评估患者

AE＝不良事件；CRS＝细胞因子释放综合征；IV＝静脉内；NHL＝非霍奇金淋巴瘤；SAE＝严重不良事件；SC＝皮下

^a使用ASTCT共识标准分级的所有CRS事件(Lee等人，2019年)

^b中性粒细胞减少症及嗜中性球计数减少；

^c致命AE：败血症(n＝2)、肺炎(n＝1)、念珠菌败血症(n＝1)，

^d致命败血症，

临床截止日期：2020年1月21日

实例10.复发性或难治性B细胞淋巴瘤中的皮下莫苏妥珠单抗：剂量递增定群中的安全性和疗效结果

如上所述，GO29781是针对R/R B-NHL的莫苏妥珠单抗的I/Ib期、开放标签、多中心剂量递增和扩展研究。本报告中包括的患者在每个21天周期(Q3W)之第1天接受单一药剂莫苏妥珠单抗SC，对于完全缓解(CR)的患者为8个周期，并且在部分缓解或疾病稳定的患者中至多为17个周期。剂量递增采用标准3+3设计；评估了1.6-20mg的剂量。关键结果指标包括最佳客观缓解、耐受性和最大耐受剂量(MTD)。

结果：23名患者接受了莫苏妥珠单抗SC(弥漫大B细胞淋巴瘤，n＝10；滤泡性淋巴瘤(FL)，n＝5；边缘区淋巴瘤(MZL)，n＝3；原发性纵隔腔大B细胞淋巴瘤，n＝2；转化(tr)FL，n＝1；trMZL，n＝1；tr结节性淋巴细胞为主的霍奇金淋巴瘤，n＝1)。既往系统性疗法的中位数为4(范围：1-8)；5名患者(22％)接受既往嵌合抗原受体T细胞疗法。13名患者(57％)对最后既往疗法为难治性的，并且16名(70％)对既往抗CD20治疗为难治性的。

未达到MTD。在1.6mg剂量下观察到一种剂量限制性毒性(4级中性粒细胞减少症；已消退)。在23名安全性可评估患者中，22名(96％)经历了≥1次AE；没有AE导致治疗中断。与莫苏妥珠单抗SC相关的常见(>20％)AE为CRS(n＝8,35％)、头痛(n＝5，22％；均为1级)和注射部位反应(n＝5，22％；均为1级)。根据Lee标准(Lee等人，Blood 124:188,2014)分级的所有CRS事件发生在第1周期期间，并且为1级(n＝6,26％)或2级(n＝2,9％)。与Q3W固定给药IV定群(A组)相比，15％的患者在剂量0.05-2.8mg时出现2级CRS，而SC定群(D组)在剂量<13.5mg时未发生2级CRS。在SC患者中，CRS事件无需托珠单抗治疗、入住重症监护室或使用血管加压药即可解决。一名患者需要低流量氧气。没有报告与CRS相关的神经系统症状(定义为神经系统疾病和精神疾病系统器官类别中的任何较佳术语)。9名患者(39％；均为1级)出现了与CRS无关的神经系统症状，头痛(n＝5,22％)和耳鸣(n＝2,9％)是最常见的AE。

在所有剂量水平的22名疗效可评估患者中，和缓性NHL患者的总体缓解率和CR率分别为86％(6/7)和29％(2/7)，并且在侵袭性NHL患者中分别为60％(9/15)和20％(3/15)。在4名R/R FL患者(1-3a级)中，所有4名患者均达到客观缓解，其中2名患者实现完全缓解。在对所有SC患者的研究中经过中位6.9个月(范围：1.3–22.1)后，除一名CR患者外，所有患者在截止日期均保持缓解。

莫苏妥珠单抗SC的药代动力学(PK)曲线的特征是吸收速率慢(剂量后72小时观察到的T_max，并且C_max与IV相比降低了约70％)和高生物利用度(>75％)，支持使用SC给药来缓解CRS。与降低的CRS一致，皮下给药观察到较低的峰值IL-6含量，与莫苏妥珠单抗IV相比起效延迟。

结论：莫苏妥珠单抗SC在大量预先治疗的R/R B-NHL患者中表现出可控的安全性特征、令人鼓舞的疗效和有利的PK特征。在第1周期中看到的CRS事件是轻微的、短暂的，并且需要最少的干预，并且没有报告≥3级的CRS事件。值得注意的是，与IV固定给药组相比，以高7倍的剂量水平使用莫苏妥珠单抗SC观察到的2级CRS事件发生频率较低。该结果支持莫苏妥珠单抗SC在R/R B-NHL中的持续剂量递增和优化。

实例11.在食蟹猴中皮下和静脉施用莫苏妥珠单抗的非临床毒理学和安全药理学研究

A.简介

莫苏妥珠单抗在食蟹猴中发生交叉反应并表现出体外效力。莫苏妥珠单抗不与啮齿动物CD20或CD3结合。因此，选择食蟹猴作为毒性试验的适宜动物种。

已经在食蟹猴中进行了单剂量和重复剂量(至多26周)莫苏妥珠单抗的毒性研究，以支持持续的临床开发和注册。毒性研究中纳入了对性成熟动物的安全药理学(心血管、呼吸和神经)终点以及雄性和雌性生殖器官的评估。此外，还完成了人和食蟹猴组织中的组织交叉反应性，以及对人和食蟹猴血液中细胞因子释放的评估。

旨在支持人体临床试验的关键毒理学和安全药理学研究是根据美国FDA GLP法规(21C.F.R.Part 58)进行的，或者是在OECD数据相互接受(MAD)计划成员国的国家根据OECD良好实验室规范原则[C(97)186/Final]进行。其他支持性毒理学、药理学和药代动力学研究作为科学和仔细进行的非GLP研究进行(见表22)。

表22.莫苏妥珠单抗单次剂量和重复给药毒性研究概述

GLP＝良好实验室规范，IV＝静脉注射；NOAEL＝未观察到的不良反应水平；MTD＝最大耐受剂量；SC＝皮下。^a第1天/第2天/第2-4周的剂量水平。^b第1天/第2天/第2-26周的剂量水平。

B.单剂量毒性

在食蟹猴中静脉施用(60分钟输注或缓慢推注)后至多0.1mg/kg和皮下注射后1mg/kg对莫苏妥珠单抗的耐受性良好。1mg/kg IV施用后，两只动物出现急性剂量后临床体征，表现为呕吐、黏液样粪便、活动不足/驼背姿势和体温过低，此类症状或自行消退，或需要支持性照顾。在此两种情况下，症状都在第2天消退。另外的发现包括心血管影响(低血压、心动过速及体温升高)、肝损伤(ALT和AST短暂且轻度升高、轻度至中度肝细胞变性及单细胞坏死，以及门管区中轻度至中度免疫细胞浸润)，以及中枢神经系统(CNS)中血管/血管周围炎症细胞浸润的显微发现。下面在重复剂量毒性部分提供了细节。总体而言，单剂量研究的毒性结果与受试品诱导的细胞因子释放以及继发性急性期蛋白反应、T细胞活化及白细胞转运的变化一致。所有变化都是短暂的、剂量依赖性的并且可逆的。

与提议的作用机制一致，在毒性研究中观察到≥0.1mg/kg血液和淋巴组织中快速和持续B细胞消耗的PD效应，以及瞬时及靶标依赖性T细胞活化及细胞因子释放。细胞因子的增加包括在≥0.01mg/kg下，IL-1RA、IL-2、IL-5、IL-6、IL-13、IL-17、G-CSF、TNF-α和IFN-γ，(代表性图参见图11)。增加发生在剂量后2-6小时，并在剂量后24小时回到基线或接近基线水平。相较于1mg/kg IV组中的动物，1mg/kg SC组中的动物细胞因子释放及T细胞活化减少并略微延迟。

SC施用比IV输注显现为更好的耐受性，这是因为未观察到临床症状并且未出现血压持续下降。这可能是由于与IV给药动物相比，SC给药动物的药物暴露减少以及随后细胞因子释放减少。相较于1小时静脉输注，SC施用显示T_max延迟、C_max降低72％并且AUC降低29％，这可能有助于减少细胞因子释放以及更好的耐受性。临床和解剖病理学评估以及PD效应的其他发现在SC和IV给药的动物中大致相似。

C.重复剂量毒性

已经进行了至多26周的重复剂量毒性研究。表22总结了MTD。为了在低于1mg/kg的剂量水平下减轻高ADA滴度，这可能是由于组织B细胞的不完全耗竭，以及某些动物在第一1mg/kg IV剂量后的耐受性差，在4周的先导研究中通过将第一1mg/kg IV剂量分为第1天的0.2mg/kg以及第2天的0.8mg/kg，然后是每周剂量0.3、1或3mg/kg并入递增给药方法(研究16-2088)。在大多数动物中，递增给药提高了急性耐受性，减轻了ADA并维持了莫苏妥珠单抗暴露。由于在单只动物中观察到1mg/kg的惊厥，GLP慢性毒性研究使用0.2/0.8mg/kg的递增剂量，然后每周剂量为0.1或0.5mg/kg，持续26周(研究16-1815)。

毒性概况：

在每周一次0.1mg/kg IV推注或1mg/kg SC施用后，或在第1天/第2天采用0.2/0.8mg/kg的台阶式给药方案，随后三个每周剂量为0.3mg/kg持续4周或0.1mg/kg持续26周(60分钟静脉输注)后，食蟹猴对莫苏妥珠单抗的耐受性良好。重复剂量研究中的毒性和PD效应与单剂量研究中观察到的相似，并且包括细胞因子以及T细胞活化相关变化、CNS血管/血管周围浸润以及预期的PD效应。除了仅在研究结束时进行评估的CNS显微评估外，其他发现主要与第一剂量有关，并且在后续剂量中表现出减弱或没有影响。为简单起见，下面仅突出显示重复剂量研究独有的那些发现：

·计划外安乐死：在慢性毒性研究中，由于腹泻和/或显著体重减轻后垂死，两只动物被过早地安乐死(研究第96天一只0.1mg/kg动物，研究第158天一只0.5mg/kg动物)。该两只动物的主要发现包括肾脏、膀胱和/或肠道的炎症，此与由于莫苏妥珠单抗诱导的B细胞耗竭导致的免疫抑制继发的机会性上行尿路和/或肠道感染一致。

·急性、给药后临床体征：第一剂量≥0.2mg/kg IV后观察到剂量后临床体征，包括呕吐、粘液样粪便、活动减退/驼背姿势、脸红/肿胀及流涎自然消退。在第2天以0.8mg/kg的第二台阶式剂量后的临床体征很少见，并且在出现时严重程度降低。该等体征在同一天自然消退。在慢性毒性研究中，每周给药阶段的临床体征很少见，包括偶尔出现液体粪便及皮肤隆起，剂量为0.1或0.5mg/kg。

·心血管作用：使用手术植入的遥测设备评估心率和血压。在≥0.2mg/kg时，静脉输注莫苏妥珠单抗与剂量依赖性和短暂性心动过速以及低血压相关。在台阶式给药研究中，在第1天(0.2mg/kg)和第2天(0.8mg/kg)均观察到效果，但在第8天效果减弱或没有效果(该发现与研究中观察到的细胞因子释放以及相关的急性期蛋白质反应一致。除了由于心率增加导致RR、PR和QT间隔减小外，心电图没有出现定量或定性变化。

·炎症反应：在第1天和第2天的第一剂量或台阶使剂量后，大多数动物出现与单一给药研究中观察到的相似的急性期蛋白质反应。在随后的26周研究中，在随后的每周剂量期间，个别动物偶尔会出现表明炎症的轻微变化，包括CRP、纤维蛋白原以及白细胞增加。

·白细胞转运：循环WBC、淋巴细胞、单核球、嗜中性球、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及血小板的短暂减少主要与第一剂量有关，并在第4天与第8天之间显示出恢复或反弹恢复。该等发现与莫苏妥珠单抗对淋巴细胞的直接药理作用(B细胞耗竭和瞬时T细胞活化诱导的边缘化，随后扩展/再分布)以及对细胞因子/趋化因子释放反应的其他血细胞类型(活化和再分布)的继发效应一致。在随后的剂量之后出现最小的变化或没有变化。

·肝损伤：在第2天和/或第3天，在个别动物中观察到ALT及AST的短暂以及轻度升高，可能是由于细胞因子诱导的肝细胞损伤和/或相关的免疫细胞浸润。在随后的剂量后，变化很小或没有变化，并且在4周或26周的研究中，在随后的剂量后没有出现肝损伤的微观证据。

·继发感染：在慢性毒性研究中，除了由于与机会性上行尿路和/或

肠道感染相一致的垂死而早期安乐死的两只动物外，还有证据表明在施用0.1或0.5mg/kg的雄性中上行尿路感染的发生率增加。由于莫苏妥珠单抗诱导的B细胞耗竭，此类感染被认为继发于免疫抑制。

·CNS和系统性血管/血管周围炎症浸润：在所有4周和26周的研

究中，血管/血管周围炎症细胞浸润的显微发现主要存在于大脑中，脊髓和坐骨神经中的发生率较低，并且在26周毒性研究中也很少存在于其他器官，包括心脏、肝脏、肾脏、胃肠道、胆囊。

此类发现显示了发生率和/或严重程度呈剂量依赖性增加的趋势。在显微镜下，此类发现通常以混合亚急性或慢性活动性炎症细胞浸润(即单核细胞及多形核白细胞，特别是嗜酸性粒细胞)为特征，并伴有反应性肥大内皮细胞的存在。在大脑中，此类发现伴随着局部小胶质细胞反应；然而，在评估恢复的动物中，没有观察到神经元变性，并且没有发现，并且因此被解释为是可逆的。在整个研究中未观察到生存期神经系统异常，除了3只动物中的1只在第1天/第2天/第8天进行0.2/0.8/1.0mg/kg莫苏妥珠单抗IV输注后在第11天表现出惊厥，并且因此被安乐死(研究16-2088)。该动物的CNS显微镜检查病灶范围比第25天预定终末期尸体剖检时在其余研究动物的CNS中发现的病灶范围更广，并且被认为是惊厥临床体征的原因。在该剂量水平下，莫苏妥珠单抗的平均C_max以及血清浓度-时间曲线下面积(AUC_Day0-21)值分别为21.9μg/mL和175.0μg x天/mL，其分别为约2倍和4倍，分别超过在第1天/第8天/第15天给予1.0/2.0/60mg的第1周期台阶式剂量患者的平均C_max和AUC_Day0-21

SC施用的效果：

SC施用的总体安全性特征改善可能是由于相较于IV给药动物，SC给药动物的C_max变钝和延迟，以及随后峰值细胞因子释放的减少和延迟。代表性细胞因子特征显示在图11中。与IV施用，SC施用显示T_max延迟(SC为24小时，IV为0.25-0.5小时)，C_max降低72-80％，并且AUC降低29％-40％，细胞因子释放以及T细胞活化减少并略微延迟。图12描绘了T细胞活化资料。

在两项研究中，外周血和淋巴组织中的B细胞耗竭在IV和SC组中相当(见图13)，表明SC给药未影响临床前疗效终点。为了进一步评估组织B细胞耗竭的程度，在所有剂量组直至第8天(终末期尸体剖检)以及在对照组和1mg/kg IV组直至第57天(最终恢复尸体剖检)评估了循环B细胞活化因子(BAFF)(组织B细胞耗竭的生物标志物)。在莫苏妥珠单抗施用后，随着剂量的增加，检测到BAFF含量的剂量依赖性增加。在研究14-1246中，静脉注射0.01、0.1以及1mg/kg和1mg/kg皮下注射的莫苏妥珠单抗与对照组相比，BAFF含量最大增加分别为1.6倍、3.3倍、6.3倍和8.4倍(图14)。BAFF的最大倍数增加发生在第3天。BAFF含量与四组的B细胞耗竭呈负相关。此类资料与B细胞耗竭结果一起表明，尽管莫苏妥珠单抗暴露量较低，但SC施用诱导了相似的(如果不是更好的话)组织B细胞耗竭。

实例12.在复发性/难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤(R/R B-NHL)患者中，采用第1周期递增给药的莫苏妥珠单抗皮下施用是可耐受且有效的：I/II期研究的初始结果

A.方法

所有患者均罹患R/RB-NHL，接受≥1次前线系统性疗法，并且东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态评分≤1。SC莫苏妥珠单抗在21天周期中以两个第1周期递增给药排程给予(第1周期第1天(C1D1剂量)/第1周期第8天(C1D2剂量)/第1周期第15天(C1D3剂量)/后续周期的第1天：5/15/45/45mg或5/45/45/45mg)。仅在剂量递增期间45mg剂量后必须住院治疗。C8后，在实现完全缓解(CR)的患者中停用莫苏妥珠单抗，而在实现部分缓解或疾病稳定的患者中，继续施用莫苏妥珠单抗总计达到17个周期，除非进行性疾病或出现不可接受的毒性。主要目标包括评估安全性、耐受性和药代动力学(PK)。使用Cheson 2007疗效评价标准(Cheson等人,J Clin Oncol,25:579-586 2007)通过研究者对PET/CT扫描的评估来评价反应。CRS是使用ASTCT标准报告的(Lee等人.Biology of Blood andMarrowTransplantation.25(4):625-638,2019)。

B.结果

截至2021年6月21日，已纳入了74名患者(5/15/45/45mg：38名患者；5/45/45/45mg：36名患者)。中位年龄67.0岁(范围：41-88)。最常见的NHL亚型是弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)(31名患者)、滤泡性淋巴瘤(FL)(21)、转化FL(trFL)(10)和套细胞淋巴瘤(MCL)(3)。70.0％的患者具有Ann Arbor III期或IV期疾病。一线疗法的中位数为3(范围：1-9)。79.5％的患者对既往抗CD20疗法(例如，使用奥滨尤妥珠单抗或利妥昔单抗)为难治性的，并且82.4％的患者对他们最后既往疗法是难治性的。

安全性的中位随访时间为2.5个月(范围：0.2-7.2)。在剂量递增期间未观察到剂量限制性毒性。常见AE(≥10％患者)是注射部位反应(52.7％；1级：47.3％；2级：5.4％)、CRS(24.3％)、疲劳(21.6％)、头痛(17.6％)、皮疹(13.5％)及发烧(10.8％)。CRS主要发生在C1并且在所有患者中均为低级别(1级：17.6％；2级：6.8％)；没有发生≥3级CRS。2级CRS在5/15/45/45mg以及5/45/45/45mg定群中发生的频率相似(分别为7.9％和5.6％)。在用5/15/45/45给药排程治疗的患者中，每次C1剂量后发生3次2级CRS事件(C1D1后一次，C1D2后一次，并且C1D3后一次)。在用5/45/45/45给药排程治疗的患者中，两个2级CRS事件均发生在第一45mg剂量(C1D2剂量)之后。CRS之中位持续时间为2天(范围：1-6)，并且所有事件都解决了，没有后遗症。12.2％的患者发生中性粒细胞减少症(2级：2.7％；3级：6.8％；4级：2.7％)。截至首次出现中性粒细胞减少症的中位时间为11天(范围：6–49)，且中位持续时间为7.5天(范围：2-29)。大多数中性粒细胞减少症事件(12/14)在截止点消退。仅一名患者出现发热性中性粒细胞减少症(3级)。3名患者发生严重感染(2例肺炎，均已治愈；1例COVID-19，致死性预后)。没有发生莫苏妥珠单抗相关的5级(致死性)AE或导致莫苏妥珠单抗停药的莫苏妥珠单抗相关AE。

SC莫苏妥珠单抗的药代动力学(PK)曲线与先前报导的一致，具有高生物利用度(>75％)、缓慢吸收速率以及减弱的C_max。血浆中IL-6和IFN-y动力学在两个SC定群中相似，给药后24-48小时观察到适度增加，与静脉给药观察到的更显著并且快速(4-6小时)增加形成对比，而与观察到的CRS的低频率和严重程度一致。

在截止点时，可评估38名患者的疗效。在19名患者(50％)中观察到反应，包括R/RFL的8/10(80％)以及R/R DLBCL/trFL的6/17(35.3％)。

C.结论

在晚期和高度难治性B-NHL患者中，利用第1周期递增给药的SC莫苏妥珠单抗具有有利的安全性特征，并且无需强制住院即可进行门诊治疗。令人鼓舞的是，5/45/45/45mg排程的CRS率低，与5/15/45/45mg排程相似，从而允许更早地达到靶标剂量。早期反应数据表明，皮下(SC)给药不会影响莫苏妥珠单抗的疗效。

VIII.其他实施例

尽管为了清楚理解起见，通过图标和实例的方式对上述发明进行了详细描述，但是这些描述和实例不应被解释为限制本发明的范围。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容均以引用的方式明确纳入其全部内容。

序列表

<110> 基因泰克公司

<120> 抗 CD20/抗 CD3 双特异性抗体的皮下给药

<130> 50474-235WO4

<150> US 63/273,566

<151> 2021-10-29

<150> US 63/188,561

<151> 2021-05-14

<150> US 63/109,777

<151> 2020-11-04

<160> 54

<170> PatentIn 3.5 版

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<223> 合成构建体

<400> 44

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr

1 5 10 15

<210> 45

<211> 32

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 45

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr

1 5 10 15

Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys

20 25 30

<210> 46

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 46

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

1 5 10

<210> 47

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 47

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Gly Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Glu Ile Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Phe Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Arg Val Pro Ile Arg Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 48

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 48

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Glu

20 25 30

Gly Asp Ser Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Glu Asp Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

<210> 49

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 49

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Gly Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Glu Ile Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Phe Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Arg Arg Val Pro Ile Arg Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 50

<211> 218

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 50

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Glu

20 25 30

Gly Asp Ser Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

35 40 45

Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

65 70 75 80

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn

85 90 95

Glu Asp Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105 110

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

115 120 125

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

130 135 140

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

145 150 155 160

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

180 185 190

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

195 200 205

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 51

<211> 452

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 51

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Val Val Tyr Tyr Ser Asn Ser Tyr Trp Tyr Phe Asp Val Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 52

<211> 213

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 52

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Leu Ile Tyr

35 40 45

Ala Pro Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Phe Asn Pro Pro Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 53

<211> 449

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 53

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asp Gly Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ser Tyr Ser Asn Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser

355 360 365

Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 54

<211> 219

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成构建体

<400> 54

Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser

20 25 30

Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln

35 40 45

Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr

65 70 75 80

Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Gln

85 90 95

Ser Phe Ile Leu Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

Claims

1.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(a)所述第一给药周期包含所述双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D1为从约0.1mg至约10mg，所述C1D2为从约5mg至约80mg，并且所述C1D3为从约10mg至约300mg；以及

(b)所述第二给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1等于或大于所述C1D3并且为从约10mg至约300mg。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述C1D1小于所述C1D2。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述C1D2在量上等同于所述C1D3。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中：

(a)所述C1D1为从约2mg至约8mg，所述C1D2为从约10mg至约75mg，并且所述C1D3为从约20mg至约75mg；以及

(b)所述C2D1为从约20mg至约75mg。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述C1D1为约5mg。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述C1D3为从约25mg至约75mg。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述C2D1为从约40mg至约75mg。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。

10.根据权利要求5至9中任一项所述的方法，其中所述C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中：

(a)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg；

(b)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约15mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg；

(c)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约10mg，所述C1D3为约30mg，并且所述C2D1为约30mg；

(d)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约20mg，所述C1D3为约40mg，并且所述C2D1为约40mg；或

(e)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约20mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约60mg。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述C1D1在量上等同于所述C1D2。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约5mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约60mg。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述C1D2在量上等同于所述C1D3。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约60mg。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D1后约七天向所述受试者施用所述C1D2。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D2后约七天向所述受试者施用所述C1D3。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D3后约七天向所述受试者施用所述C2D1。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述方法包含分别在或约在所述第一给药周期的第1天、第8天和第15天向所述受试者施用所述C1D1、所述C1D2和所述C1D3。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述方法包含在所述第二给药周期的第1天向所述受试者施用所述C2D1。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述第一和第二给药周期为21天给药周期。

23.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述第一给药周期为21天给药周期并且所述第二给药周期为28天给药周期。

24.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(a)所述第一给药周期包含所述双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中

(i)所述C1D1为约5mg；

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

(b)所述第二给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1为约45mg。

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。

26.根据权利要求24或25所述的方法，其中所述第一和第二给药周期为21天给药周期。

27.根据权利要求24或25所述的方法，其中所述第一给药周期为21天给药周期并且所述第二给药周期为28天给药周期。

28.根据权利要求24至27中任一项所述的方法，其中所述方法包含分别在或约在所述第一给药周期的第1天、第8天和第15天向所述受试者施用所述C1D1、所述C1D2和所述C1D3。

29.根据权利要求24至28中任一项所述的方法，其中所述方法包含在所述第二给药周期的第1天向所述受试者施用所述C2D1。

30.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(a)所述第一给药周期包含在所述第一给药周期的第1天的所述双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在所述第一给药周期的第8天的所述双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)以及在所述第一给药周期的第15天的所述双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中

(i)所述C1D1为约5mg，

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

(b)所述第二给药周期包含在所述第二给药周期的第1天的所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1为约45mg。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约45mg或约60mg。

32.根据权利要求30或31所述的方法，其中所述C1D2为约15mg。

33.根据权利要求30或31所述的方法，其中所述C1D2为约45mg。

34.根据权利要求30至33中任一项所述的方法，其中所述给药周期中的每一者为21天给药周期。

35.根据权利要求30至33中任一项所述的方法，其中所述第一给药周期为21天给药周期，并且所述第二给药周期为28天给药周期。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述B细胞增殖性病症为非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述NHL为先前未经治疗的(1L)NHL、复发性或难治性NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

39.根据权利要求38所述的方法，其中所述DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

40.根据权利要求38或39所述的方法，其中所述DLBCL为里希特转化。

41.根据权利要求38所述的方法，其中所述FL为1L FL或复发性或难治性FL。

42.根据权利要求38或41所述的方法，其中所述FL为转化FL。

43.根据权利要求38所述的方法，其中所述NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

44.根据权利要求38所述的方法，其中所述NHL为Ann Arbor III或IV期NHL。

45.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中已事先向所述受试者施用至少一种前线系统性疗法。

46.根据权利要求45所述的方法，其中已向所述受试者施用介于一种与九种之间的前线系统性疗法。

47.根据权利要求46所述的方法，其中已向所述受试者施用三种前线系统性疗法。

48.根据权利要求45至47中任一项所述的方法，其中至少一种前线系统性疗法包含抗CD20抗体。

49.根据权利要求48所述的方法，其中所述抗CD20抗体为利妥昔单抗或奥滨尤妥珠单抗。

50.根据权利要求48或49所述的方法，其中包含所述抗CD20抗体的所述前线系统性疗法另外包含烷化剂或蒽环类药物。

51.根据权利要求50所述的方法，其中所述烷化剂为环磷酰胺或苯达莫司汀。

52.根据权利要求50所述的方法，其中所述蒽环类药物为柔红霉素或阿霉素。

53.根据权利要求48所述的方法，其中包含所述抗CD20抗体的所述前线系统性疗法另外包含：

(i)环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和强的松(R-CHOP)；

(ii)环磷酰胺、长春新碱和强的松(CVP)；

(iii)氟达拉滨；或

(iv)苯达莫司汀。

54.根据权利要求45至47中任一项所述的方法，其中至少一种前线系统性疗法包含布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。

55.一种治疗患有DLBCL的受试者的方法，所述方法包含以至少包含第一21天给药周期及第二21天给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(a)所述第一21天给药周期包含所述双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、第二皮下剂量(C1D2)和第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

(b)所述第二21天给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1等于或大于所述C1D3并且为从约10mg至约300mg。

56.根据权利要求55所述的方法，其中所述DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

57.根据权利要求55或56所述的方法，其中所述DLBCL为里希特转化。

58.根据权利要求55至57中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D1后约七天向所述受试者施用所述C1D2。

59.根据权利要求55至58中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D2后约七天向所述受试者施用所述C1D3。

60.根据权利要求55至59中任一项所述的方法，其中所述方法包含在施用所述C1D3后约七天向所述受试者施用所述C2D1。

61.根据权利要求55至60中任一项所述的方法，其中所述方法包含分别在或约在所述第一给药周期的第1天、第8天和第15天向所述受试者施用所述C1D1、所述C1D2和所述C1D3。

62.一种治疗患有FL的受试者的方法，所述方法包含以至少包含第一21天给药周期和第二28天给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

(b)所述第二28天给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1等于或大于所述C1D3并且为从约10mg至约300mg。

63.根据权利要求62所述的方法，其中所述FL为1L FL或复发性或难治性FL。

64.根据权利要求62或63所述的方法，其中所述FL为转化FL。

65.根据权利要求55至64中任一项所述的方法，其中所述C1D1小于所述C1D2。

66.根据权利要求55至64中任一项所述的方法，其中所述C1D2在量上等同于所述C1D3。

67.根据权利要求55至66中任一项所述的方法，其中：

(b)所述C2D1为从约20mg至约75mg。

68.根据权利要求55至67中任一项所述的方法，其中所述C1D1为约5mg。

69.根据权利要求55至68中任一项所述的方法，其中所述C1D3为从约25mg至约75mg。

70.根据权利要求69所述的方法，其中所述C1D3为约30mg、约45mg或约60mg。

71.根据权利要求55至70中任一项所述的方法，其中所述C2D1为从约40mg至约75mg。

72.根据权利要求71所述的方法，其中所述C2D1为约30mg、约45mg或约60mg。

73.根据权利要求68至72中任一项所述的方法，其中所述C1D2为约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约45mg或约60mg。

74.根据权利要求55至73中任一项所述的方法，其中：

(b)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约10mg，所述C1D3为约30mg，并且所述C2D1为约30mg；

(c)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约15mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg；

75.根据权利要求55至73中任一项所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg。

76.根据权利要求55至64中任一项所述的方法，其中所述C1D1在量上等同于所述C1D2。

77.根据权利要求76所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约5mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约60mg。

78.根据权利要求55至64中任一项所述的方法，其中所述C1D2在量上等同于所述C1D3。

79.根据权利要求78所述的方法，其中所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg。

80.根据权利要求55至79中任一项所述的方法，其中所述方法包含在所述第二给药周期的第1天向所述受试者施用所述C2D1。

81.根据权利要求1至80中任一项所述的方法，其中所述给药方案包含一个或多个额外给药周期。

82.根据权利要求81所述的方法，其中所述给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

83.根据权利要求81或82所述的方法，其中所述给药方案包含六个额外给药周期。

84.根据权利要求81或82所述的方法，其中所述给药方案包含十五个额外给药周期。

85.根据权利要求81至84中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为21天给药周期。

86.根据权利要求81至84中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为28天给药周期。

87.根据权利要求81至86中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期包含施用所述双特异性抗体的额外剂量。

88.根据权利要求87所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量在量上约等于所述C2D1。

89.根据权利要求87或88所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

90.根据权利要求87至89中任一项所述的方法，其中所述方法包含在每个各自的额外给药周期的第1天向所述受试者施用所述双特异性抗体的每个额外剂量。

91.根据权利要求1至90中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体作为单一疗法向所述受试者施用。

92.根据权利要求1至90中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体作为组合疗法向所述受试者施用。

93.根据权利要求92所述的方法，其中所述双特异性抗体与额外治疗剂向所述受试者同时施用。

94.根据权利要求92所述的方法，其中所述双特异性抗体在施用额外治疗剂之前向所述受试者施用。

95.根据权利要求92所述的方法，其中所述双特异性抗体在施用一种或多种额外治疗剂之后向所述受试者施用。

96.根据权利要求95所述的方法，其中所述额外治疗剂为奥滨尤妥珠单抗

97.根据权利要求95所述的方法，其中所述额外治疗剂为托珠单抗。

98.根据权利要求1至97中任一项所述的方法，其中所述受试者患有细胞因子释放综合征事件，并且所述方法进一步包含在中止用所述双特异性抗体进行治疗的同时治疗所述细胞因子释放综合征事件的症状。

99.根据权利要求98所述的方法，其中所述方法进一步包含向所述受试者施用有效量的托珠单抗以治疗所述细胞因子释放综合征事件。

100.根据权利要求99所述的方法，其中托珠单抗以约8mg/kg的单次剂量经静脉向所述受试者施用并且其中所述单次剂量不超过800mg。

101.根据权利要求100所述的方法，其中所述细胞因子释放综合征事件在治疗所述细胞因子释放综合征事件的症状的24小时内未消退或恶化，并且所述方法进一步包含向所述受试者施用一个或多个额外剂量的托珠单抗以管理所述细胞因子释放综合征事件。

102.根据权利要求101所述的方法，其中所述一个或多个额外剂量的托珠单抗以约8mg/kg的剂量经静脉向所述受试者施用，并且其中所述剂量不超过800mg。

103.根据权利要求101或102所述的方法，所述方法进一步包含向所述受试者施用有效量的皮质类固醇。

104.根据权利要求103所述的方法，其中所述皮质类固醇经静脉向所述受试者施用。

105.根据权利要求103或104所述的方法，其中所述皮质类固醇为甲基泼尼松龙。

106.根据权利要求105所述的方法，其中甲基泼尼松龙以每天约2mg/kg的剂量施用。

107.根据权利要求103或104所述的方法，其中所述皮质类固醇为地塞米松。

108.根据权利要求107所述的方法，其中地塞米松以从约10mg至约100mg的剂量施用。

109.根据权利要求108所述的方法，其中地塞米松以约10mg的剂量施用。

110.根据权利要求108所述的方法，其中地塞米松以约20mg的剂量施用。

111.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

112.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1为约5mg；

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

113.一种治疗患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1为约5mg，

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

114.根据权利要求111至113中任一项所述的方法，其中所述CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

115.根据权利要求111至113中任一项所述的方法，其中所述B细胞增殖性病症为非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

116.根据权利要求115所述的方法，其中所述NHL为先前未经治疗的(1L)NHL、复发性或难治性NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

117.根据权利要求116所述的方法，其中所述DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

118.根据权利要求116或117所述的方法，其中所述DLBCL为里希特转化。

119.根据权利要求116所述的方法，其中所述FL为1L FL或复发性或难治性FL。

120.根据权利要求116或119所述的方法，其中所述FL为转化FL。

121.根据权利要求116所述的方法，其中所述NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

122.一种治疗患有DLBCL的受试者群体的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

123.根据权利要求122所述的方法，其中所述DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

124.根据权利要求122或123所述的方法，其中所述DLBCL为里希特转化。

125.一种治疗患有FL的受试者群体的方法，所述方法包含以至少包含第一给药周期和第二给药周期的给药方案向所述受试者皮下施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

126.根据权利要求125所述的方法，其中所述FL为1L FL或复发性或难治性FL。

127.根据权利要求125或126所述的方法，其中所述FL为转化FL。

128.根据权利要求111至127中任一项所述的方法，其中：

(i)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约15mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg；或

(ii)所述C1D1为约5mg，所述C1D2为约45mg，所述C1D3为约45mg，并且所述C2D1为约45mg。

129.根据权利要求111至128中任一项所述的方法，其中所述第一和第二给药周期为21天给药周期。

130.根据权利要求111至128中任一项所述的方法，其中所述第一给药周期为21天给药周期，并且所述第二给药周期为28天给药周期。

131.根据权利要求111至130中任一项所述的方法，其中所述给药方案包含一个或多个额外给药周期。

132.根据权利要求131所述的方法，其中所述给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

133.根据权利要求131或132所述的方法，其中所述给药方案包含六个额外给药周期。

134.根据权利要求131或132所述的方法，其中所述给药方案包含十五个额外给药周期。

135.根据权利要求131至134中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为21天给药周期。

136.根据权利要求131至134中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为28天给药周期。

137.根据权利要求131至136中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期包含施用所述双特异性抗体的额外剂量。

138.根据权利要求137所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量在量上约等于所述C2D1。

139.根据权利要求137或138所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

140.根据权利要求137至139中任一项所述的方法，其中所述方法包含在每个各自的额外给药周期的第1天向所述受试者群体施用所述双特异性抗体的每个额外剂量。

141.根据权利要求111至140中任一项所述的方法，其中完全缓解率为至少约20％。

142.根据权利要求111至141中任一项所述的方法，其中完全缓解率大于约40％。

143.根据权利要求111至142中任一项所述的方法，其中完全缓解率大于约55％。

144.根据权利要求111至143中任一项所述的方法，其中中位无进展生存期大于约两个月。

145.根据权利要求111至143中任一项所述的方法，其中中位总生存期大于约9.5个月。

146.根据权利要求111至143中任一项所述的方法，其中在开始治疗后约20个月的客观缓解率为至少约70％。

147.根据权利要求111至143中任一项所述的方法，其中在开始治疗后约12个月的客观缓解率为至少约60％。

148.根据权利要求111至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％。

149.根据权利要求148所述的方法，其中所述客观缓解率为至少44％。

150.根据权利要求111至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率在35％至55％之间。

151.根据权利要求150所述的方法，其中所述客观缓解率为约45％。

152.根据权利要求111至116以及125至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率为至少70％。

153.根据权利要求152所述的方法，其中所述客观缓解率为至少80％。

154.根据权利要求111至116以及125至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率在70％至90％之间。

155.根据权利要求154所述的方法，其中所述客观缓解率为约80％。

156.根据权利要求111至116、122至124以及128至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性DLBCL或转化FL，并且其中客观缓解率为至少25％。

157.根据权利要求156所述的方法，其中所述客观缓解率为至少35％。

158.根据权利要求111至116、122至124以及128至140中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性DLBCL，并且其中客观缓解率在25％至45％之间。

159.根据权利要求158所述的方法，其中所述客观缓解率为约35％。

160.根据权利要求111至159中任一项所述的方法，其中所述受试者群体在施用所述双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约30％。

161.根据权利要求160所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约25％。

162.根据权利要求161所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约10％。

163.根据权利要求162所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约5％。

164.根据权利要求163所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约3％。

165.根据权利要求111至164中任一项所述的方法，其中患有2或更高级别(如美国移植与细胞疗法学会，2018；ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％。

166.根据权利要求165所述的方法，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约5％。

167.根据权利要求166所述的方法，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约3％。

168.根据权利要求111至167中任一项所述的方法，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约1％。

169.根据权利要求168所述的方法，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率为约0％。

170.一种降低在施用与CD20和CD3结合的双特异性抗体的患有CD20阳性细胞增殖性病症的受试者群体中的某些不良事件的比率的方法，所述方法包含使用阶梯式给药方案皮下施用所述双特异性抗体，其中与经静脉施用所述双特异性抗体的参考受试者群体相比，所述受试者群体中的所述某些不良事件的比率是降低的。

171.根据权利要求170所述的方法，其中所述阶梯式给药方案为选自由以下组成的组中的一者：

(I)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(i)所述C1D1不大于所述C1D2并且小于所述C1D3；

(ii)所述C1D2不大于所述C1D3；以及

(b)所述第二给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1等于或大于所述C1D3并且为从约10mg至约300mg；

(II)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(i)所述C1D1为约5mg；

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

(b)所述第二给药周期包含所述双特异性抗体的单次皮下剂量(C2D1)，其中所述C2D1为约45mg；以及

(III)至少第一给药周期和第二给药周期，其中：

(a)所述第一给药周期包含在所述第一给药周期的第1天的所述双特异性抗体的第一皮下剂量(C1D1)、在所述第一给药周期的第8天的所述双特异性抗体的第二皮下剂量(C1D2)以及在所述第一给药周期的第15天的所述双特异性抗体的第三皮下剂量(C1D3)，其中：

(i)所述C1D1为约5mg，

(ii)所述C1D2不小于所述C1D1并且不大于所述C1D3；以及

(iii)所述C1D3为约45mg；以及

172.根据权利要求170或171所述的方法，其中：

173.根据权利要求170至172中任一项所述的方法，其中所述第一和第二给药周期为21天给药周期。

174.根据权利要求170至172中任一项所述的方法，其中所述第一给药周期为21天给药周期，并且所述第二给药周期为28天给药周期。

175.根据权利要求170至174中任一项所述的方法，其中所述给药方案包含一个或多个额外给药周期。

176.根据权利要求175所述的方法，其中所述给药方案包含一个至十五个额外给药周期。

177.根据权利要求175或176所述的方法，其中所述给药方案包含六个额外给药周期。

178.根据权利要求175或176所述的方法，其中所述给药方案包含十五个额外给药周期。

179.根据权利要求175至178中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为21天给药周期。

180.根据权利要求175至178中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期为28天给药周期。

181.根据权利要求175至180中任一项所述的方法，其中每个额外给药周期包含施用所述双特异性抗体的额外剂量。

182.根据权利要求181所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量在量上约等于所述C2D1。

183.根据权利要求181或182所述的方法，其中所述双特异性抗体的每个额外剂量为约45mg。

184.根据权利要求181至183中任一项所述的方法，其中所述方法包含在每个各自的额外给药周期的第1天向所述受试者群体施用所述双特异性抗体的每个额外剂量。

185.根据权利要求170至184中任一项所述的方法，其中所述CD20阳性细胞增殖性病症为B细胞增殖性病症。

186.根据权利要求185所述的方法，其中所述B细胞增殖性病症为非霍奇金淋巴瘤(NHL)或慢性淋巴细胞白血病(CLL)。

187.根据权利要求186所述的方法，其中所述NHL为先前未经治疗的(1L)NHL、复发性或难治性R/R NHL、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、高级别B细胞淋巴瘤或原发性纵膈腔(胸腺)大B细胞淋巴瘤(PMLBCL)。

188.根据权利要求187所述的方法，其中所述DLBCL为1L DLBCL或复发性或难治性DLBCL。

189.根据权利要求187或188所述的方法，其中所述DLBCL为里希特转化。

190.根据权利要求187所述的方法，其中所述FL为1L FL或复发性或难治性FL。

191.根据权利要求187或190所述的方法，其中所述FL为转化FL。

192.根据权利要求187所述的方法，其中所述NHL为高级别B细胞淋巴瘤。

193.根据权利要求170至192中任一项所述的方法，其中所述受试者群体在施用所述双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约25％。

194.根据权利要求170至192中任一项所述的方法，其中所述受试者群体在施用所述双特异性抗体后表现出细胞因子释放综合征，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约30％。

195.根据权利要求193所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约10％。

196.根据权利要求195所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约5％。

197.根据权利要求196所述的方法，其中所述受试者群体中所述细胞因子释放综合征的比率为小于或等于约3％。

198.根据权利要求170至192中任一项所述的方法，其中患有2或更高级别(如美国移植与细胞疗法学会，2018；ASTCT所定义)的细胞因子释放综合征的比率小于或等于约10％。

199.根据权利要求198所述的方法，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约5％。

200.根据权利要求199所述的方法，其中患有2或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约3％。

201.根据权利要求170至200中任一项所述的方法，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率小于或等于约1％。

202.根据权利要求201所述的方法，其中患有3或更高级别(如ASTCT所定义)的所述细胞因子释放综合征的比率为约0％。

203.根据权利要求170至202中任一项所述的方法，其中完全缓解率为至少约20％。

204.根据权利要求170至203中任一项所述的方法，其中完全缓解率为至少约40％。

205.根据权利要求170至204中任一项所述的方法，其中中位无进展生存期大于约四个月。

206.根据权利要求170至204中任一项所述的方法，其中中位总生存期大于约9.5个月。

207.根据权利要求170至206中任一项所述的方法，其中在开始治疗后约24个月的客观缓解率为至少约75％。

208.根据权利要求170至206中任一项所述的方法，其中在开始治疗后约24个月的客观缓解率为至少约70％。

209.根据权利要求170至206中任一项所述的方法，其中在开始治疗后约12个月的客观缓解率为至少约60％。

210.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率为至少34％。

211.根据权利要求210所述的方法，其中所述客观缓解率为至少44％。

212.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性NHL，并且其中客观缓解率在35％至55％之间。

213.根据权利要求212所述的方法，其中所述客观缓解率为约45％。

214.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率为至少70％。

215.根据权利要求214所述的方法，其中所述客观缓解率为至少80％。

216.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性FL，并且其中客观缓解率在70％至90％之间。

217.根据权利要求216所述的方法，其中所述客观缓解率为约80％。

218.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性DLBCL或转化FL，并且其中客观缓解率为至少25％。

219.根据权利要求218所述的方法，其中所述客观缓解率为至少35％。

220.根据权利要求170至187中任一项所述的方法，其中所述受试者群体患有复发性或难治性DLBCL，并且其中客观缓解率在25％至45％之间。

221.根据权利要求220所述的方法，其中所述客观缓解率为约35％。

222.根据权利要求1至221中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含含有第一结合域的抗CD20臂，所述第一结合域包含以下六个高变区(HVR)：

(a)HVR-H1，其包含GYTFTSYNMH(SEQ ID NO:1)的氨基酸序列；

(b)HVR-H2，其包含AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID NO:2)的氨基酸序列；

(c)HVR-H3，其包含VVYYSNSYWYFDV(SEQ ID NO:3)的氨基酸序列；

(d)HVR-L1，其包含RASSSVSYMH(SEQ ID NO:4)的氨基酸序列；

(e)HVR-L2，其包含APSNLAS(SEQ ID NO:5)的氨基酸序列；以及

(f)HVR-L3，其包含QQWSFNPPT(SEQ ID NO:6)的氨基酸序列。

223.根据权利要求1至222中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含含有第一结合域的抗CD20臂，所述第一结合域包含(a)重链可变(VH)域，其包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)轻链可变(VL)域，其包含与SEQ IDNO:8的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。

224.根据权利要求223所述的方法，其中所述第一结合域包含含有SEQID NO:7的氨基酸序列的VH域以及含有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的VL域。

225.根据权利要求1至224中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含含有第二结合域的抗CD3臂，所述第二结合域包含以下六个HVR：

(a)HVR-H1，其包含NYYIH(SEQ ID NO:9)的氨基酸序列；

(b)HVR-H2，其包含WIYPGDGNTKYNEKFKG(SEQ ID NO:10)的氨基酸序列；

(c)HVR-H3，其包含DSYSNYYFDY(SEQ ID NO:11)的氨基酸序列；

(d)HVR-L1，其包含KSSQSLLNSRTRKNYLA(SEQ ID NO:12)的氨基酸序列；

(e)HVR-L2，其包含WASTRES(SEQ ID NO:13)的氨基酸序列；以及

(f)HVR-L3，其包含TQSFILRT(SEQ ID NO:14)的氨基酸序列。

226.根据权利要求1至225中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含含有第二结合域的抗CD3臂，所述第二结合域包含(a)VH域，其包含与SEQ ID NO:15的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；(b)VL域，其包含与SEQ ID NO:16的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列；或(c)如(a)中的VH域以及如(b)中的VL域。

227.根据权利要求226所述的方法，其中所述第二结合域包含含有SEQID NO:15的氨基酸序列的VH域以及含有SEQ ID NO:16的氨基酸序列的VL域。

228.根据权利要求1至227中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含(a)抗CD20臂，其包含(i)含有与SEQ ID NO:51的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的重链，以及(ii)含有与SEQ ID NO:52的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的轻链；以及(b)抗CD3臂，其包含(i)含有与SEQ ID NO:53的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的重链，以及(ii)含有与SEQ ID NO:54的氨基酸序列具有至少95％序列同一性的氨基酸序列的轻链。

229.根据权利要求228所述的方法，其中(a)所述抗CD20臂包含含有SEQ ID NO:51的氨基酸序列的重链以及含有SEQ ID NO:52的氨基酸序列的轻链，以及(b)所述抗CD3臂包含含有SEQ ID NO:53的氨基酸序列的重链以及含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的轻链。

230.根据权利要求1至229中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为人源化抗体。

231.根据权利要求1至230中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为嵌合抗体。

232.根据权利要求1至231中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为结合CD20和CD3的抗体片段。

233.根据权利要求232所述的方法，其中所述抗体片段选自由以下组成的组：Fab、Fab'-SH、Fv、scFv和(Fab')₂片段。

234.根据权利要求1至231中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为全长抗体。

235.根据权利要求1至231以及234中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为IgG抗体。

236.根据权利要求235所述的方法，其中所述IgG抗体为IgG₁抗体。

237.根据权利要求235或236所述的方法，其中所述IgG抗体包含在氨基酸残基N297(EU编号)处的突变，所述突变导致糖基化缺失。

238.根据权利要求237所述的方法，其中在氨基酸残基N297处的所述突变为取代突变。

239.根据权利要求237或238所述的方法，其中在氨基酸残基N297处的所述突变降低Fc区的效应子功能。

240.根据权利要求237至239中任一项所述的方法，其中所述突变为N297G或N297A突变(EU编号)。

241.根据权利要求236至240中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含所述Fc区中的降低效应子功能的突变。

242.根据权利要求241所述的方法，其中所述突变为取代突变。

243.根据权利要求242所述的方法，其中所述取代突变位于氨基酸残基L234、L235、D265和/或P329(EU编号)处。

244.根据权利要求243所述的方法，其中所述取代突变选自由以下组成的组：L234A、L235A、D265A和P329G(EU编号)。

245.根据权利要求1至231以及234至244中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体包含一个或多个重链恒定域，其中所述一个或多个重链恒定域选自第一CH1(CH1₁)域、第一CH2(CH2₁)域、第一CH3(CH3₁)域、第二CH1(CH1₂)域、第二CH2(CH2₂)域和第二CH3(CH3₂)域。

246.根据权利要求245所述的方法，其中所述一个或多个重链恒定域中的至少一者与另一重链恒定域配对。

247.根据权利要求245或246所述的方法，其中CH3₁域和CH3₂域各自包含突起或空腔，并且其中所述CH3₁域中的所述突起或空腔分别可定位于所述CH3₂域中的所述空腔或突起中。

248.根据权利要求247所述的方法，其中所述CH3₁域和所述CH3₂域在所述突起与空腔之间的界面处相接。

249.根据权利要求245至248中任一项所述的方法，其中CH2₁域和CH2₂域各自包含突起或空腔，并且其中所述CH2₁域中的所述突起或空腔分别可定位于所述CH2₂域中的所述空腔或突起中。

250.根据权利要求249所述的方法，其中所述CH2₁域和所述CH2₂域在所述突起与空腔之间的界面处相接。

251.根据权利要求223或224所述的方法，其中所述抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变(EU编号)。

252.根据权利要求226或227所述的方法，其中所述抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

253.根据权利要求228或229所述的方法，其中(a)所述抗CD20臂进一步包含T366W和N297G取代突变，以及(b)所述抗CD3臂进一步包含T366S、L368A、Y407V和N297G取代突变(EU编号)。

254.根据权利要求1至110或222至253中任一项所述的方法，其中所述受试者为人。

255.根据权利要求111至221或222至253中任一项所述的方法，其中所述受试者为人。