TW201309210A - 抑制耐熱性嗜酸菌增殖之方法 - Google Patents
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Abstract
本發明係提供一種經除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子之糖液之調製方法,該耐熱性嗜酸菌增殖因子會使耐熱性嗜酸菌增殖,而耐熱性嗜酸菌即是造成飲食品變質腐敗之主要成因菌。本發明經由下述步驟來調製糖液:(a)於原料糖液加入酸之步驟;(b)將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及,(c)將濾液作為上述目的糖液來回收之步驟。
Description
本發明係有關於一種使用作為飲食品之原料的糖液之調製方法。更詳細地說,本發明係有關於一種調製糖液之方法,該糖液係經過除去或減少了耐熱性嗜酸菌增殖因子,其會造成使飲食品變質腐敗的主要原因菌之耐熱性嗜酸菌增殖。又,本發明係有關於一種將耐熱性嗜酸菌增殖因子自糖液除去或減少之方法。
以往對於各種加工食品來說,自原材料混入之耐熱性嗜酸菌所導致的汙染一直被視為是個問題。耐熱性嗜酸菌主要是屬於Alicyclobacillus屬,可好氣或兼性厭氣地生長且能形成表現出格蘭陽性或格蘭可變性之耐熱性芽孢的桿菌,其特徵為在40℃~70℃之相對高溫的溫度範圍或pH2~6的酸性pH範圍亦能良好地生長。該等耐熱性嗜酸菌之中,Alicyclobacillus acidoterrestris與Alicyclobacillus acidocaldarius係即使用100℃以下的短時間殺菌,其芽孢亦不會被殺死的格蘭陽性有芽孢細菌,喜在pH4左右的酸性環境下生長。因此,該等耐熱性嗜酸菌在通常食品製造所採用的60℃~95℃左右之加熱處理下並不會完全被殺死,若在飲食品中增殖,會生成癒創木酚或2,6-二溴酚等異臭成份與產生腐敗臭,因此在保存與流通的過程中,飲食品的風味或品質會顯著地受損而造成相當大的問題。
作為抑制此等耐熱性嗜酸菌的增殖之方法,可舉出如在耐熱性嗜酸菌會死亡的條件下殺菌之方法,但是對飲料,特別是含果汁或蔬菜汁的酸性飲料來說,在該條件下的殺菌處理會有造成其風味和香味與外觀顯著低下的問題。因此,已有提出並非殺死耐熱性嗜酸菌本身,而是讓該菌存活但抑制增殖,也就是對耐熱性嗜酸菌進行制菌之各種方法。
作為對耐熱性嗜酸菌進行制菌之方法,可舉例如添加維生素C十六酯、二甘油肉豆蔻酸酯、啤酒花萃取物、醋酸鹽、黑醋栗花青素、紫蘿蔔汁、乳酸或其鹽等具有制菌作用之成份的方法(參照專利文獻1~7)。但該等制菌劑之添加常會影響飲食品的風味、味道或外觀,並不是廣範適用於飲食品的方法。又,作為其他方法,可考慮使用除菌濾網或常用的純化法來除去耐熱性嗜酸菌本身,但因需要複雜的步驟或成本仍然太高等等,仍未開發出汎用的方法。
專利文獻1:日本專利特開第2002-65231號公報
專利文獻2:日本專利特開第2003-160411號公報
專利文獻3:日本專利特開第2005-137241號公報
專利文獻4:日本專利特開第2002-315546號公報
專利文獻5:日本專利特開第2009-209098號公報
專利文獻6:日本專利特開第2009-72165號公報
專利文獻7:日本專利特開第2007-159454號公報
本發明係添加或摻合至飲食品等製品所使用的糖液之調製方法,其係以提供一種糖液之調製方法為目的,該糖液係經過除去或減少了會促使令該等製品變質腐敗的原因菌之耐熱性嗜酸菌增殖的「耐熱性嗜酸菌增殖因子」後製成。又,本發明係以提供一種有效率與簡便地將上述耐熱性嗜酸菌增殖因子從添加或摻合至飲食品等所使用的糖液中除去或減少之方法為目的。
本發明者為解決上述課題而進行深入研究,發現砂糖等糖類溶於水中之糖液即使利用具有各種ξ電位(zeta potential)之荷電過濾膜來過濾,仍然不能除去耐熱性嗜酸菌增殖因子,相對於此,在糖液中加入酸來調整pH後,將其用具有正ξ電位之荷電過濾膜來過濾,已確認到可使耐熱性嗜酸菌增殖因子明顯地被除去或降低,耐熱性嗜酸菌之增殖會明顯地被抑制。由此看來,發現欲從糖液中除去或減少,有必要如後所述:(a)藉由添加酸之pH調整,及(b)用荷電過濾膜之過濾。
本發明係基於該等見解,加上反覆研討後所開發者,具有下述之實施形態。
(I-1) 一種耐熱性嗜酸菌增殖因子經除去或減少而製成之糖液的調製方法,其具有下述步驟:
(a) 於原料糖液中加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液作為上述目的糖液來回收之步驟。
(I-2) 如(I-1)記載之調製方法,其中(a)步驟係於原料糖液中加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
(I-3) 如(I-1)或(I-2)記載之調製方法,其中(a)步驟所使用的酸係可將原料糖液之pH調整成為2.5~4,且可使用於飲食品之無機酸或有機酸。
(I-4) 如(I-1)至(I-3)中任一項記載之調製方法,其中(a)步驟所使用的酸是選自於由檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、L-抗壞血酸、乳酸所構成群組中之至少1種有機酸。
(I-5) 如(I-1)至(I-4)中任一項記載之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
(I-6) 如(I-1)至(I-5)中任一項記載之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中ξ電位為5mV以上,較佳為10mV以上,更佳為15mV以上之荷電過濾膜。
(I-7) 如(I-1)至(I-6)中任一項記載之調製方法,其中(c)步驟獲得之糖液不僅耐熱性嗜酸菌增殖因子被除去或減少,連原料糖液所含之著色成份亦被除去或減少。
(II-1) 一種耐熱性嗜酸菌增殖因子經除去或減少而製成之糖液,其係用如(I-1)至(I-7)中任一項記載之調製方法所製得。
(II-2) 一種耐熱性嗜酸菌之增殖經抑制而製成之糖液,其係用如(I-1)至(I-7)中任一項記載之調製方法所製得。
(II-3) 如(II-1)或(II-2)記載之糖液,上述糖液係再從原料糖液中除去或減少著色成份而製成者。
(II-4) 一種摻合如(II-1)至(II-3)中任一項記載之糖液來調製飲食品之方法。
(II-5) 一種使用如(II-1)至(II-3)中任一項記載之糖液來調製而成之飲食品。
(III-1)一種從受驗糖液除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子之方法,其具有下述步驟:
(a) 於受驗糖液中加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液回收之步驟。
(III-2) 如(III-1)記載之方法,其中(a)步驟係於原料糖液中加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
(III-3) 如(III-1)或(III-2)記載之方法,其中(a)步驟所使用的酸係可將原料糖液之pH調整成為2.5~4,且可使用於飲食品之無機酸或有機酸。
(III-4) 如(III-1)至(III-3)中任一項記載之方法,其中(a)步驟所使用的酸是選自於由檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、L-抗壞血酸、乳酸所構成群組中之至少1種有機酸。
(III-5) 如(III-1)至(III-4)中任一項記載之方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
(III-6) 如(III-1)至(III-5)中任一項記載之方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中ξ電位為5mV以上,較佳為10mV以上,更佳為15mV以上之荷電過濾膜。
(III-7) 如(III-1)至(III-6)中任一項記載之方法,其中不僅耐熱性嗜酸菌增殖因子被除去或減少,連原料糖液所含之著色成份亦被除去或減少。
(IV-1) 一種抑制糖液中耐熱性嗜酸菌增殖之方法,其具有下述步驟:
(a) 於受驗糖液加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液回收之步驟。
(IV-2) 如(IV-1)記載之方法,其中(a)步驟係於原料糖液加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
(IV-3) 如(IV-1)或(IV-2)記載之方法,其中(a)步驟所使用的酸係可將原料糖液之pH調整成為2.5~4,且可使用於飲食品之無機酸或有機酸。
(IV-4) 如(IV-1)至(IV-3)中任一項記載之方法,其中(a)步驟所使用的酸是選自於由檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、L-抗壞血酸、乳酸所構成群組中之至少1種有機酸。
(IV-5) 如(IV-1)至(IV-4)中任一項記載之方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
(IV-6) 如(IV-1)至(IV-5)中任一項記載之方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中ξ電位為5mV以上,較佳為10mV以上,更佳為15mV以上之荷電過濾膜。
(IV-7) 如(IV-1)至(IV-6)中任一項記載之方法,其係抑制耐熱性嗜酸菌增殖時,亦除去或減少原料糖液所含著色成份之方法。
藉由本發明之方法,透過將添加酸調整後之糖液用荷電過濾膜過濾,可從糖液中有效率且簡便或便宜地除去或減少耐熱性嗜酸菌之增殖因子。如此調製的糖液能令耐熱性嗜酸菌之增殖受到明顯地抑制,即使添加至飲食品亦不使其變質,又,與添加制菌劑作為第3成份之糖液有所不同,不會影響飲食品之風味。本發明之方法係與作為原料的糖之純化度或原產國之不同、又或原料糖所含成份之不同無關,而能從糖液中明顯地除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子,抑制耐熱性嗜酸菌增殖之方法,有高度汎用性。又,藉由本方法,不僅可除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子,還可除去或減少著色成份。
因此藉由本方法調製之糖液可適宜利用於各種飲食品,特別是不適合在高熱下的殺菌處理之飲料,特別是酸性飲料。
第1圖係顯示對於將精製白糖之糖液作為受驗糖液1-1(僅陽離子交換樹脂處理)、受驗糖液1-2(僅陰離子交換樹脂處理)、及受驗糖液1-3(陽離子交換樹脂及陰離子交換樹脂處理)、受驗糖液1-4(無處理)所得之糖液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例1)。縱軸表示發光量(RLU:Relative Light Unit)、橫軸表示菌接種後靜置保管期間(日)(以下,第2~10圖亦同)。
第2圖係顯示對於將精製白糖之糖液以各種荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 30S、50S、60S、90S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例2)。
第3圖係顯示將添加酸調整pH(pH3)後之糖液以各種荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 30S、50S、60S、90S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例3)。
第4圖係顯示對於將精製白糖之糖液(pH4.95),以及其添加酸調整成各種pH(1.8、2.6、3.0、4.0)後之糖液以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液,以及過濾未處理之糖液(pH4.95)進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例5)。
第5圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後之糖液以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液,以及過濾未處理之糖液(pH4.95)使用A. acidoterrestris作為耐熱嗜酸菌進行菌接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例6)。
第6圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖1的受驗糖液2進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第7圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖2的受驗糖液3進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第8圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖3的受驗糖液4進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第9圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖4的受驗糖液5進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第10圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖5的受驗糖液6進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
本發明係耐熱性嗜酸菌增殖因子(以下,亦稱為「TAB增殖因子」)經除去或減少而製成之糖液的調製方法,特徵在於具有下述(a)~(c)之步驟。
(a) 於原料糖液中加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液作為上述目的糖液來回收之步驟。
以下,將依序說明各步驟。
本步驟係於原料之糖液中加入酸之步驟。
關於本發明之調製方法,作為原料糖液所使用的糖,可舉例如使用甘蔗、甜菜(紅菜頭)、糖楓、桄榔、果實、玉蜀黍、馬鈴薯等薯類、及麥芽等天然植物作為原料所製造的糖,以及由該糖透過酵素處理所製造的轉化糖或還原糖。作為該種糖(原料糖),具體而言可舉例如由甘蔗或甜菜製造的砂糖(雙糖類)、由甜菜調製而成的棉子糖(寡糖)、由果實調製而成的果糖(果糖)、由玉蜀黍或馬鈴薯製造的葡萄糖(葡萄糖)、及由麥芽製造的麥芽糖(麥芽糖)。
較佳為砂糖。又,砂糖之轉化糖為巴拉金糖,而巴拉金糖之還原糖為益壽糖(palatinit)。
又,砂糖可分類為含蜜糖(黑砂糖、白下糖(shiroshita-to)、紅砂糖(cassonade)、和三盆糖)和分蜜糖(粗糖、精製糖),精製糖可再分類為顆粒砂糖(白砂糖、中砂糖、砂糖)、車糖(棉糖、三溫糖)及加工糖(方糖、冰糖、粉砂糖)。以本發明為對象之原料糖並不受限制,但在砂糖中係以分蜜糖(粗糖、精製糖),且以精製糖為佳。亦即,本發明係以能夠除去或減少在純化後仍作為不純物殘留於糖中的TAB增殖因子,換言之,通常的糖純化方法無法完全除去之TAB增殖因子,而作為有意義且有價值之糖液的製造方法。
作為原料糖之製造原料的植物來源(原產國)、以及原料糖之製造及純化方法和製造廠商並不特別限制,且可為日本產亦可為國外產。
本發明之調製方法所使用的原料糖液係上述原料糖溶於水所調製而成者,其濃度並不特別限制,溶液中之固型成份濃度(Brix%)可舉出通常為65%以下,較佳為62%以下。從本發明效果的觀點來看,雖然糖濃度下限並無特別限制,但糖濃度越低,在製造上就越需要勞力和時間,由此觀點來看,雖不特別限制,但可設定糖濃度之下限為10%以上,較佳為20%以上。
又,原料糖液在經過(a)步驟添加酸調整pH後之Brix亦大致上調整為上述範圍為宜。又,糖液之Brix可使用折射糖度計、旋光糖度計、或近紅外線糖度計來測定,而以使用折射糖度計測定之Brix值作基準為佳。
(a)步驟所使用的酸係可使上述原料糖液調整為較佳為pH4.5以下,更佳為pH2.5~4.5之酸,且係可適用於飲食品之無機酸或有機酸即可,只要是符合上述者則無特別限制。這意味著(a)步驟亦可稱為pH調整步驟。調整pH之範圍只要是上述範圍內則無特別限制,但較佳為pH2.5~4,特佳為pH2.5~3.5。
作為酸,較佳為不太會對所調製的糖液或使用糖液製造之飲食品的味質或風味有影響的酸,具體而言,可例示如檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、L-抗壞血酸、乳酸等有機酸。較佳為檸檬酸及蘋果酸。
(a)步驟中經過添加酸調整pH之糖液可在該階段進行加熱處理,或者可不進行加熱處理。進行加熱處理時,加熱溫度與時間只要在不影響飲食品之味道或風味的條件下即可,並無特別限制。例如,作為溫度調件可為100℃以上或100℃以下皆可。
該步驟係將上述(a)步驟中經調整pH之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟。
在此,使用於糖液之過濾的荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中,亦即(a)步驟所得之糖液中,表現出正荷電之過濾膜。荷電過濾膜是否為該正荷電之荷電狀態係可以測定荷電過濾膜之ξ電位來評價。
在此,ξ電位可以慣用之方法來測定。可以藉由例如使用電泳光散射法的大塚電子有限公司「ξ電位測定系統」等市販測定機器或系統來測定。
如實驗例3及4所示,在10mM氯化鈉水溶液中的ξ電位在9mV以下之荷電過濾膜,其對於耐熱性嗜酸菌增殖因子之除去或減少效果貧乏。因此,作為荷電過濾膜應在10mM氯化鈉水溶液中的ξ電位為15mV以上者為佳。更佳者為在10mM氯化鈉水溶液中的ξ電位為20mV以上,24mV以上的荷電過濾膜更好。
又如實驗例4之表1及2所示,以在糖液中測定取代在10mM氯化鈉水溶液中測定之ξ電位,相較於在氯化鈉水溶液中測定之ξ電位,在糖液中測定者會降低約8.5~10mV左右。考慮到此,作為於步驟(b)所使用的荷電過濾膜,適宜者可例示如在過濾對象糖液中,亦即(a)步驟所得糖液中的ξ電位為5mV以上,較佳者為10mV以上,更佳者為15mV以上。
又,ξ電位之上限並無特別限制,通常可設定100mV為上限。
(b)步驟所使用的荷電過濾膜係合併擁有基於上述ξ電位之吸附過濾能力、以及基於過濾孔徑之機械性過濾能力的機能性過濾膜。作為過濾膜的孔徑並無特別限制,可例示如0.4~1.0μm,較佳為0.6~1.0μm,更佳為0.4~0.8μm。
(b)步驟使用之荷電過濾膜只要是具有上述ξ電位,且較佳地具有上述孔徑者即可,其材質並無特別限制。例如,如同日本專利特開1997-51800號公報記載,以尼龍66、環氧樹脂、聚碸或聚酯等具有正荷電之材質構成的過濾膜;於纖維素或尼龍樹脂構成的濾材表面塗布無機荷電改質劑(例如陽離子性的膠質狀二氧化矽等)或有機荷電改質劑(例如具有第三胺或第四銨基之聚醯胺-氯甲基一氧三環胺聚合物(Polyamide-Polyamine epichlorohydrin)等),使過濾膜表面產生正ξ電位之過濾膜;可例示如於聚碸膜或PAN膜等導入氯化甲基使其成為正電荷之荷電超過濾膜等。又,作為市販的荷電過濾膜,可例示如後述實驗例使用的住友3M有限公司製「CUNO ZetaPlusTM filter」(以纖維素纖維作為主要材料之過濾器)S系列的30S及50S(材質)。
該等荷電過濾膜可為單一層之狀態來使用,為了獲得所要求的過濾效果,亦可為複數個荷電過濾膜形成複層之狀態來使用。
過濾方法只需將(a)步驟調製的糖液通過上述荷電過濾膜即可,並無特別限制,為獲得所要求的過濾效果,係以10m3/hr以下的過濾流量通過為佳。又過濾(通過荷電過濾膜)可只進行一次,亦可將過濾一次回收的濾液再通過荷電過濾膜等2次以上的複數次反複進行。
該步驟係將濾液作為上述目的糖液來回收之步驟,如此可取得TAB增殖因子經除去或減少而製成之糖液。
在此,TAB增殖因子是否被除去或減少,可由分別對於原料糖液與回收濾液測定耐熱性嗜酸菌(TAB:Trermo Acidophilic Bacilli)增殖性並比較來進行評價。
又,本發明中TAB增殖因子係具有誘導或促進對象糖液中耐熱性嗜酸菌增殖之作用者。TAB增殖因子只要是具有該作用即可,並無特別限制,例如可成為TAB增殖因子者,可例示如NO2-(亞硝酸態氮)或NO3-(硝酸態氮)等陰離子、微生物等生物之死骸等有機物、及源自土壤或植物殘渣的有機物。
在此,作為本發明之對象的耐熱性嗜酸菌,主要屬於Alicyclobacillus屬的細菌,例如酸土脂環酸芽孢桿菌(A. acidoterrestris)、酸熱脂環酸芽孢桿菌(A. acidocaldarius)、脂環酸芽孢桿菌(A. hesperidum)、環庚基脂環酸芽孢桿菌(A. cycloheptanicus)等細菌。
關於該耐熱性嗜酸菌(TAB)增殖性之評價,具體而言,分別對於原料糖液及回收濾液在將耐熱性嗜酸菌以外的菌殺菌後,將耐熱性嗜酸菌進行特定數之接種,並於耐熱性嗜酸菌可生長之溫度及pH下靜置培養之方法。
又,耐熱性嗜酸菌以外之菌的殺菌方法並無特別限制,可例示如在調整pH成為酸性領域(例如pH3.5~4.5左右)後,以70℃以上的溫度加熱處理之方法。又,耐熱性嗜酸菌之可生長的溫度及pH係依據耐熱性嗜酸菌之種類而有不同,但通常為35~55℃,較佳為40~53℃;pH2~6,較佳為pH3.5~4.5。因此,可於50℃左右,pH4左右來培養以使耐熱性嗜酸菌生長增殖。
耐熱性嗜酸菌之生長增殖性可用ATP(Adenosine triphosphate)法來測定並評價。ATP係存在於所有植物、動物及微生物細胞內的能量分子。因此與細胞數增加成比例,其量亦會增加。ATP法即為利用此點來評價細胞數的增加,亦即耐熱性嗜酸菌之增殖性。實際上,ATP量是由源自耐熱性嗜酸菌的ATP與螢光素和螢光酵素之反應所生之發光量進行定量化來判斷之。
具體來說,分別對原料糖液及回收濾液在殺菌後接種特定數之耐熱性嗜酸菌並靜置培養時,存在於原料糖液之耐熱性嗜酸菌之增殖性,若在回收濾液中消失或減少,則可判斷為藉由本發明之方法,上述耐熱性嗜酸菌所對應之增殖因子(TAB增殖因子)自原料糖液中被除去或減少。
如此調製之糖液會因TAB增殖因子被除去或減少,使得該TAB增殖因子所對應之耐熱性嗜酸菌之增殖被抑制。因此,該糖液即使添加摻合至以飲食品為首之各種製品,皆不會汙染該製品,可防止該製品起因於耐熱性嗜酸菌之增殖導致的變質。
又,原料糖液若含有著色成份時,透過上述方法,可將TAB增殖因子和著色成份除去或減少。因此透過上述方法,可調製出TAB增殖因子及著色成份從原料糖液經除去或減少而製成的糖液,該糖液即便使用來添加摻合至以飲食品為首之各種製品,可防止造成對該製品之顏色有不好的影響。
又,以添加摻合糖液之飲食品為首的製品,只要是將糖液作為原料之一來調製者即可,並無特別限制。較佳為不適合過度加熱處理的飲食品,且需顧慮耐熱性嗜酸菌之增殖的飲食品,例如飲料,特別是酸性(pH6以下)之清涼飲料,具體而言,可例示如使用了天然果汁或蔬菜汁的果實飲料、添加果汁的飲料、蔬菜飲料;以各種酸味料賦予酸味之似水飲料(near water)、運動飲料、乳酸飲料;又或將碳酸附加至該等飲料製成之碳酸飲料。又,透過使用了以上述本發明之方法調製的糖液,不須另外使用制菌劑等第三成份,即可抑制耐熱性嗜酸菌之增殖,這對不能變更摻合成份的飲食品來說相當適宜。
為本發明之對象的該等飲食品,可將用上述本發明方法所製造的糖液作為原料之一來添加摻合,並依各飲食品之既定製法來製造。糖液之摻合比例並無特別限制,可依飲食品的種類或味道來適宜地設定。
又,本發明係有關於從受驗糖液除去或減少TAB增殖因子之方法。
該方法與前述「(I)糖液之調製方法」相同,係將受驗糖液提供至下述步驟(a)~(c)而實施之。
(a) 於受驗糖液中加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液回收之步驟。
此處之(a)~(c)步驟中的各個處理皆與前述本發明「(I)糖液之調製方法」所採用的(a)~(c)步驟中的處理相同,在此可援用(I)中的說明。
又,本發明係有關於抑制糖液中耐熱性嗜酸菌增殖之方法。
該方法與前述「(I)糖液之調製方法」相同,係將受驗糖液提供至下述步驟(a)~(c)而實施之。
(a) 於受驗糖液中加入酸之步驟;
(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及
(c) 將濾液回收之步驟。
此處之(a)~(c)步驟中的各個處理皆與前述本發明「(I)糖液之調製方法」所採用的(a)~(c)步驟中的處理相同,在此可援用(I)中的說明。
(c)步驟所回收的濾液(糖液)係於該糖液中耐熱性嗜酸菌增殖因子經除去或減少,因此該糖液之耐熱性嗜酸菌增殖受到抑制。
以下,將利用實驗例具體地說明本發明,但本發明並不因該等實驗例而受任何限制。
對經陽離子交換樹脂及/或陰離子交換樹脂處理之各精製白糖以及無處理之精製白糖進行接種耐熱性嗜酸菌並測定菌的增殖性,評價耐熱性嗜酸菌增殖因子之除去能力。
作為離子交換樹脂,分別使用弱酸性陽離子交換樹脂(WK40L(H形),三菱化學社製)及鹼性陰離子交換樹脂(AMBERLITETM IRA67,ORGANO社製),將各樹脂40ml填充至內徑20mm、高400mm之層析管,調製出陽離子交換樹脂填充管柱及陰離子交換樹脂填充管柱。
將精製白糖60g溶於100ml去離子水調製而成的糖液(Brix:60,pH4.95)分別作成4檢體(受驗糖液1-1:陽離子交換樹脂處理;受驗糖液1-2:陰離子交換樹脂處理;受驗糖液1-3:陽離子交換樹脂及陰離子交換樹脂處理;受驗糖液1-4:無處理),將受驗糖液1~3以SV=3之速度通過各離子交換樹脂填充管柱。接著,將回收之管柱溶出液(受驗糖液1-1~1-3)及受驗糖液1-4分別以去離子水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。將該等糖液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,於各受驗糖液中以4個/50ml之比例接種來自於精製白糖之耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius),並在50℃條件下靜置保管9天。其後,依據規定方法對各受驗糖液進行ATP測定,測定發光量(RLU:Relative Light Unit),評價菌增殖造成的汙染度。
結果如第1圖所示。如第1圖所示,僅進行陽離子交換處理的受驗糖液1-1相較於無處理的受驗糖液1-4,可確認到耐熱性嗜酸菌急遽的增加,菌增殖造成的汙染度高。相對於此,進行陰離子交換處理的受驗糖液1-1與進行陰離子交換處理及陽離子交換處理的受驗糖液1-3沒有確認到菌之增殖,確認到菌增殖受到抑制。
由此可知,精製白糖所含的不純物(不論有機物及無機物之分別)中,陰離子性之物質會促進耐熱性嗜酸菌增殖,陽離子性之物質會抑制耐熱性嗜酸菌之增殖,此一可能性被提示出來。
使糖液通過具有各種ξ電位之荷電過濾膜,對所得之各濾液進行接種耐熱性嗜酸菌並測定菌的增殖性,評價藉由荷電過濾膜處理之耐熱性嗜酸菌增殖因子之除去能力。
將精製白糖60g溶於100ml去離子水調製而成的糖液(Brix:60,pH4.95)分別作成4檢體,將其用具有正ξ電位之荷電過濾膜(商品名:「CUNO ZetaPlusTM filter」S系列:30S、50S、60S、90S;住友3M有限公司製)過濾。接著,將回收之各濾液(糖液)分別以去離子水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。將該液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,在此,以6個/50ml之比例接種耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius),並在50℃條件下靜置保管。在保管前(0日後)及保管5日後以及10日後,對各糖液進行ATP測定,透過發光量(RLU)測定耐熱性嗜酸菌之增殖狀況。
結果如第2圖所示。如第2圖所示,於所有的荷電過濾膜都確認到耐熱性嗜酸菌之增殖,故明白上述處理無法除去耐熱性嗜酸菌增殖因子,亦即在上述條件下,使用荷電過濾膜亦無法除去耐熱性嗜酸菌增殖因子。
用有機酸使糖液之pH調整成pH3後,使其通過具有各種ξ電位之荷電過濾膜,對所得之各濾液進行接種耐熱性嗜酸菌並測定菌的增殖性,評價耐熱性嗜酸菌增殖因子之除去能力。
將精製白糖60g溶於100ml去離子水後,使用檸檬酸將pH調整為3.0而成的糖液(Brix:60)分別作成4檢體,將其用具有正ξ電位之荷電過濾膜(商品名:「CUNO ZetaPlusTM filter」S系列:30S、50S、60S、90S;住友3M有限公司製)過濾。過濾後,將所得之各濾液(糖液)分別以去離子水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。將該液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,在此,以6個/50ml之比例接種耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius),並在50℃條件下靜置保管。在保管前(0日後)及保管5日後以及10日後,對各糖液進行ATP測定,透過發光量(RLU)測定耐熱性嗜酸菌之增殖狀況。
結果如第3圖所示。如第3圖所示,荷電過濾膜之中,使用了ZetaPlusTM filter 60S及90S時,確認到耐熱性嗜酸菌之增殖,相對於此,使用了ZetaPlusTM filter 30S及50S時,確認到耐熱性嗜酸菌之增殖受到明顯地抑制。
由此結果與實驗例2之結果可知,將糖液之pH調整為較通常糖液pH4.95為低後(實驗例3為調整成pH3),藉由以荷電過濾膜「ZetaPlusTM filter 30S」和「ZetaPlusTM filter 50S」過濾,確認到可有效地除去耐熱性嗜酸菌之增殖因子。
承接實驗例3的結果,欲調查對於耐熱性嗜酸菌之除去為有效的ξ電位,測定了實驗例3使用的各荷電過濾膜(商品名「ZetaPlusTM filter」S系列:30S、50S、60S、90S;住友3M有限公司製)之ξ電位。
將各荷電過濾膜(商品名「ZetaPlusTM filter」S系列:30S、50S、60S、90S;住友3M有限公司製)分別浸透於10mM-NaCl水溶液(pH5.9)、白糖60g溶於100ml水調製成的糖液(pH4.95)、和白糖60g溶於100ml水後,以檸檬酸調整為pH3之糖液,利用電泳光散射光度計(商品名「ELSZ-2plus」,大塚電子社製)測定膜的ξ電位。
分別將浸透於10mM-NaCl水溶液後所測定之荷電過濾膜的ξ電位表示於表1,浸透於各糖液(pH4.95、pH3)後所測定之荷電過濾膜的ξ電位表示於表2。
由表1及表2所示「ZetaPlusTM filter 50S」之ξ電位可知,相較於浸透於10mM-NaCl水溶液之荷電過濾膜的ξ電位,浸透於糖液的ξ電位約減少10mV。由此可知,使用糖液(pH3)之實驗例3中,經過ZetaPlusTM filter 60S與90S處理而無法除去耐熱性嗜酸菌之增殖因子是因為具有浸透於糖液而造成正ξ電位減少10mV左右而消失的可能性,預想此即為其原因。此結果提示了欲除去耐熱性嗜酸菌之增殖因子,至少正ξ電位係有必要以10mV以上之電位為宜,以15mV以上之電位為佳。
另一方面,糖液之pH由4.95變更為3.0,然而ξ電位無法確認到有明顯變動。由此看來,對於除去耐熱性嗜酸菌之增殖因子,確認到不僅荷電過濾膜之ξ電位需設為正(以10mV以上為宜,以15mV以上為佳),如實驗例3所示,提供給荷電過濾膜之受驗糖液的pH亦屬重要,受驗糖液的pH有必要調整為比4.95更低的偏酸性。
將提供給荷電過濾膜之受驗糖液的pH作多種改變,評價耐熱性嗜酸菌之增殖因子的除去能力。
將精製白糖60g溶於100ml去離子水後,用檸檬酸調整糖液(Brix:60,pH4.95)之pH成為pH1.8、2.6、3.0、4.0、4.95(pH4.95為未調整之pH)。將該等提供予荷電過濾膜(商品名「ZetaPlusTM filter 50S」,住友3M有限公司製)並分別過濾。接著,將回收之各濾液(糖液)用與實驗例3相同之方法,分別以去離子水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。將該液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,在此,以6個/50ml之比例接種耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius),並在50℃條件下靜置保管。在保管前(0日後)及保管7日後,對各糖液進行ATP測定,透過發光量(RLU)測定耐熱性嗜酸菌之增殖狀況。又,對於沒有通過荷電過濾膜之糖液(Brix:60,pH4.95)亦同樣地進行,測定耐熱性嗜酸菌之增殖狀況(過濾無處理糖液)。
結果如第4圖所示。如第4圖所示,關於沒有調整pH之糖液(pH4.95),經荷電過濾膜過濾之糖液相較於未經荷電過濾膜過濾之糖液(過濾無處理糖液),耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius)之增殖受到促進。另一方面,使用檸檬酸將pH設成偏酸性,具體而言係調整成為pH1.8~4.0之範圍的糖液,若以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S)過濾時,耐熱性嗜酸菌之增殖受到明顯地抑制。特別是,經調整為pH2.6~4.0之範圍的糖液藉由通過荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S),可確認到耐熱性嗜酸菌之增殖特別地受到抑制。
本實驗係將上述作為耐熱性嗜酸菌而使用的A. acidocaldarius以A. acidoterrestris替代使用,依據實驗例3所述方法,調查在酸性條件下源自於荷電過濾膜處理的耐熱性嗜酸菌之增殖因子的除去能力。
將精製白糖60g溶於100ml去離子水後,使用檸檬酸將pH調整為3.0而成的糖液(Brix:60),將其用荷電過濾膜(商品名「CUNO ZetaPlusTM filter 50S」;住友3M有限公司製)過濾。過濾後,將所得之各濾液(糖液)以去離子水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。將該液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,在此,以6個/50ml之比例接種耐熱性嗜酸菌(A. acidoterrestris),並在50℃條件下靜置保管。又,為比較對照,將精製白糖60g溶於100ml水,未經通過荷電過濾膜過濾之無處理糖液(pH4.95),對其同樣經10分鐘70℃處理後接種耐熱性嗜酸菌(A. acidoterrestris),並在50℃條件下靜置保管。
在保管前(0日後)及保管4日後以及10日後,對各糖液進行ATP測定,透過發光量(RLU)確認耐熱性嗜酸菌之增殖狀況。
結果如第5圖所示。如第5圖所示,對於無處理之糖液,有確認到耐熱性嗜酸菌之增殖,相對於此,對於在低酸性(pH3)條件下經荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S)過濾處理的糖液,確認到耐熱性嗜酸菌之增殖明顯地受到抑制,耐熱性嗜酸菌之增殖因子被除去。
使用5種類之精製白糖1~5(受驗糖液2~6),用與實驗例3相同之方法,在低酸性(pH3)條件下用荷電過濾膜過率處理,評價耐熱性嗜酸菌之增殖因子的除去效果(在此,5種類的精製白糖係與實驗例1使用的精製白糖不同的糖)。
將精製白糖1~5(60g)分別溶於100ml水後,使用檸檬酸將pH調整為3.0而成的糖液(Brix:60)(受驗糖液2~6),將其等用具有正ξ電位之荷電過濾膜(商品名「CUNO ZetaPlusTM filter 50S」,住友3M有限公司製)過濾。關於各糖液,係分別將過濾處理前的糖液與過濾處理後的糖液以水稀釋成9倍,最後用檸檬酸調整成pH3.7。接著,將該等糖液經過10分鐘70℃處理來殺死耐熱性嗜酸菌以外的菌,在此,以6個/50ml之比例接種耐熱性嗜酸菌(A. acidocaldarius),並在50℃條件下靜置保管。
在保管前(0日後)及保管4日後及7日後,對各糖液進行ATP測定,透過發光量(RLU)確認耐熱性嗜酸菌之增殖狀況。
結果如第6圖~第10圖所示。如全圖所示,雖有程度的差異,但所有的精製白糖都會因調整pH至偏低酸性(pH3)後再通過荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S),造成耐熱性嗜酸菌受到抑制,可確認到耐熱性嗜酸菌增殖因子被除去減少。又,精製白糖1~5中的精製白糖3及4可能是因為原糖之精製處理不充分,不是完全白色而是呈現若干茶褐色。然而,透過在上述條件下經過荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S)過濾處理,該著色亦被除去,確認到經過上述處理亦能獲得脫色效果。該利用荷電過濾膜過濾處理之著色除去效果係與耐熱性嗜酸菌增殖因子之除去效果相同,受到提供至荷電過濾膜之受驗糖液的pH影響,相較於使用調整至pH4.95,使用調整至pH3.0的受驗糖液可更有效率且有效果地去除糖的著色。
第1圖係顯示對於將精製白糖之糖液作為受驗糖液1-1(僅陽離子交換樹脂處理)、受驗糖液1-2(僅陰離子交換樹脂處理)、及受驗糖液1-3(陽離子交換樹脂及陰離子交換樹脂處理)、受驗糖液1-4(無處理)所得之糖液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例1)。縱軸表示發光量(RLU:Relative Light Unit)、橫軸表示菌接種後靜置保管期間(日)(以下,第2~10圖亦同)。
第2圖係顯示對於將精製白糖之糖液以各種荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 30S、50S、60S、90S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例2)。
第3圖係顯示將添加酸調整pH(pH3)後之糖液以各種荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 30S、50S、60S、90S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例3)。
第4圖係顯示對於將精製白糖之糖液(pH4.95),以及其添加酸調整成各種pH(1.8、2.6、3.0、4.0)後之糖液以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液,以及過濾未處理之糖液(pH4.95)進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例5)。
第5圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後之糖液以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾回收之濾液,以及過濾未處理之糖液(pH4.95)使用A. acidoterrestris作為耐熱嗜酸菌進行菌接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例6)。
第6圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖1的受驗糖液2進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第7圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖2的受驗糖液3進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第8圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖3的受驗糖液4進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第9圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖4的受驗糖液5進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
第10圖係顯示對於將添加酸調整成pH(pH3)後且以荷電過濾膜(ZetaPlusTM filter 50S:住友3M有限公司製)過濾前後之精製白糖5的受驗糖液6進行耐熱嗜酸菌(A. acidocaldarius)接種實驗,以ATP法對於菌之增殖性隨時間經過進行評價之結果(實驗例7)。
Claims (15)
- 一種經除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子而製成之糖液的調製方法,具有下述步驟:(a) 於原料糖液加入酸之步驟;(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及(c) 將濾液作為上述目的糖液來回收之步驟。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(a)步驟係於原料糖液加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(a)步驟所使用的酸係可將原料糖液之pH調整成為2.5~4且可使用於飲食品之無機酸或有機酸。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(a)步驟所使用的酸是選自於由檸檬酸、蘋果酸、酒石酸、L-抗壞血酸及乳酸所構成群組中之至少1種有機酸。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中ξ電位為5mV以上,較佳為10mV以上,更佳為15mV以上者。
- 如申請專利範圍第1項之調製方法,其中(c)步驟獲得之糖液不僅耐熱性嗜酸菌增殖因子被除去或減少,連原料糖液所含之著色成份亦被除去或減少。
- 一種經除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子而製成之糖液,係使用如申請專利範圍第1項之調製方法所製得者。
- 一種調製飲食品之方法,係摻合如申請專利範圍第8項之糖液以調製飲食品者。
- 一種從受驗糖液除去或減少耐熱性嗜酸菌增殖因子之方法,具有下述步驟:(a) 於受驗糖液加入酸之步驟;(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及(c) 將濾液回收之步驟。
- 如申請專利範圍第10項之調製方法,其中(a)步驟係一於原料糖液加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
- 如申請專利範圍第10項之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
- 一種抑制糖液中之耐熱性嗜酸菌增殖之方法,具有下述步驟:(a) 於受驗糖液加入酸之步驟;(b) 將前述(a)步驟所調製之糖液用荷電過濾膜來過濾之步驟;及(c) 將濾液回收之步驟。
- 如申請專利範圍第13項之調製方法,其中(a)步驟係於原料糖液加入酸來調整pH至2.5~4之步驟。
- 如申請專利範圍第14項之調製方法,其中(b)步驟使用之荷電過濾膜係於過濾對象之糖液中表現出正荷電之荷電過濾膜。
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