TW200948361A - Method for synthesizing Biolimus A9 and the like and method for improving stability of the same - Google Patents

Description

200948361 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 拜耳莫司A9 (BiolimusA9)之化學結構如式（^)所示.

在美國專利72207S5與7193078中，皆發表拜耳莫司A9[式⑴] 是一種免疫抑制劑（immunosuppressant)，同時也具有抗腫瘤 (antitumor)與抗霉菌（antifungal)的藥效。 【先前技術】 在美國專利722〇755中發表拜耳莫司A9[式⑴]的製造方法 係利用西羅莫司（SiroHmus )在2 6_二曱基。比咬 (2’6-Dimethylpyddine )的催化下與2_乙氧基乙基三氟甲烷磺酸鹽 (2-Ethy〇xyethyl trifluor⑽ethanesuifonate)進行親核性取代反應 而成。 在美國專利7胸78巾發表拜耳莫司A9[式⑴]的製造方法 200948361 Z用西_在乙基二（異丙基）胺（_一。Pylamine) 占化下與2-乙乳基乙基三氟子炫石黃酸鹽進行親核性取代反應而 成0 雖然在美國專利7193078中發表的製程產率可以達到46%， 於在美國專利722G755中發表的製程（19%)，但是，在其實 也例中僅述及生產岐應，而未提及製織大後是否能維持 ❹該製程高產率的優勢，經模擬該製程進行放大反應⑽倍量冰， 並树到相對高產率的結果（僅27%)，明顯顯示該製程在放大後 缺乏向產率的再現性，不利於工業化的生產。 入該製程中所使㈣2_乙氧基乙n曱闕酸鹽為高活性化 。物將其與2_乙氧基乙基五氣笨續酸鹽同時置放於室溫下儲 存星期後’ 2-乙氧基乙基五氟笨石黃酸鹽仍為無色透明液體，而 • 2_乙氧基乙基三氟甲烧猶鹽則由無色透明液體轉變成黑色黏稠 ο μ狀物卩核磁共振光譜儀分別對此二化合物進行彳貞測後，確 涊2-乙氧基乙基域苯石黃酸鹽仍然穩定存活，而2_乙氧基乙基三 氟曱烧石黃酸鹽則已完全分解成未知的化合物；此外，2_乙氧基乙基 -氣曱烧％酸鹽不具有紫外線吸㈣雜亦相當不利於反應製程 之追蹤。 【發明内容】 在製ie拜耳莫司Α9[式（1 )]及其類似物的反應中，西羅莫司[式 (2 )]疋相當弱的親核基（nude〇phUe )，倘若親電基（） 6 200948361 上的離去基（ieavingg_p)活性轴，往往會導麟反應的產率 太低或不進行’因此，要找尋穩定性高、活性強又具可追蹤性的 親電基以兼顧原料儲存、高產率及可製程追縱等特點誠屬不易。 本發明即是利用西羅莫司[式（2)]，

與具有高穩定性、高活性及可追蹤性等特點的烷基苯磺酸鹽（Alkyl benzenesuifonate)[式（3)]，

其中：R,係選自烷基（alkyl)、矽基（Silyi)、烯基（aikeny)、烯 烷基（alkenylalkyl)、炔基（alkynyl)、炔烷基（aikynylalkyi)、芳 香基（aryl)、芳香烷基（aiylalkyl)、雜環芳香基（heteroaryl)、雜 環芳香烷基（heteroarylalkyl) ; R2、R3、r4、r5、，係分別選自 氫（hydrogen)、鹵素（halogen)、硝基（nitro groUp)等取代基。 R5 7 200948361 在有機鹼三炼基胺[式（4)]或°比°定[式（5)]的催化下， n-r9 r/ (4) 其中：R7、R8、R9係分別選自Cj〜c10等院基取代基。

Ο 其中：R10、、Rl2、Rl3、Rl4係分別選自氫、CrC10等烷基取代 基。 於有機溶劑中進行親核性取代反應而產生烷基西羅莫司[式（6 )] 〇

其中：R!係選自炫基（alkyl)、石夕基（silyl)、彿基（alkeny)、埽 烧基（alkenylalkyl)、炔基（alkynyl)、炔院基（alkynylalkyl)、芳 200948361 香基（aryl)、芳香烷基（arylalkyl)、雜環芳香基（heter〇aryl)、雜 環芳香烧基（heteroarylalkyl)。 烷基苯磺酸鹽[式（3)]的使用量可由^20當量，以5〜1〇當 量最適合。反應溫度可由40〜80°C ’以55〜65。(：最適合。反應時間 可由12〜72小時，以16〜30小時最適合。 拜耳莫司A9[式（1 )]是一種多烯巨環化合物（p〇lyene macrolide)’在儲存的過程中容易被氧化而分解。在拜耳莫司A9[式 (1)]成品中均勻混入抗氧化劑，可有效提升其在儲存期間的穩定 性。其中，抗氧化劑可以是：. 2,6-二叔丁基對甲紛（Buty丨ated hydroxytoluene，簡稱 BHT)、 生育紛（DL- a -tocopherol)、 梧酸丙醋（propyl gallate )、 維他命 C 综橺酸g旨（ascorbyi paimitate )、 3 叔丁基_4-氣氧基菌香鍵（3-ieri-butyl-4-hydroxyanisole )、 2 叔丁基·4-虱氧基菌香喊（2-ieri-butyl-4-hydroxyanisole )、 反一丁烯二酸（ftjmaric acid)等化合物；其中，以26_二叔丁基 對甲盼最適合。 將經由中效能液相層析儀純化後的拜耳莫司Α9[式（1)]，分 別與0.1%、0.2%、〇.5〇/0、ι.〇〇/ο的2,6_二叔丁基對甲酚均勻混合， 置放於40°C的環境中進行安定性實驗。未添加2,6-二叔丁基對甲 齡的樣品在第六週後拜耳莫司A9的純度已降至69.7%，其他有添 200948361 加2,6·二叙T基對曱_樣品，六週後拜耳莫司A9[式⑴]的純 度均維持在99.4%以上（表丨）。 表1 ·拜耳莫司Α9[式⑴]在桃環境中的安定性 BHT (w/w) 〇 0.0% 0.1% 0.2% 0.5% 1.0% 拜耳莫司A9純度

0週 99.7 99.7 99.6 99.6 99.6 2週 98.2 99.5 99.6 99.5 99.5 4週 88.4 99.5 99.5 99.4 99.4 6週 69.7 99.5 99.5 99.4 99.4 . 【實施方式】 本發明可由以下諸實施彳雜合_諸圖式說明其製程，但本發 明之範圍並非侷限在以下所述之實施例： ❹ 貫多例1 (1)合成2-乙氧基乙基五氟苯磺酸鹽 於反應瓶中加入五氟苯續醯氣（25.〇克，93 8毫莫耳）與四 Α夫鳴（86毫升）並通入氮氣，降溫至，滴加2_乙氧基乙醇 (8.5克’ 94.5毫莫耳）以及三乙基胺（15 〇克，148 5毫莫耳）， 滿加完畢後麟3〇分鐘，過遽、濃縮，殘餘物以石夕膠管柱層析法 分離純化後，得到無色透明油狀產物（26.6克，83丨毫莫耳），產 率 88.6%。 200948361 (2)合成拜耳莫司A9[式（1)] 於反應瓶中加入西羅莫司（1〇克，u毫莫耳）、乙基二（異 丙，）胺（7.8克，60.3毫莫耳）、二氣曱烧（3 5毫升）以及2_ 氧:乙基五氟苯磺酸鹽（2.8克，8.7毫莫耳），加熱反應混合物 祝拌23小時。降溫，加入乙酸乙醋（毫升）與鹽酸 ^奋液（IN ’ 1GG毫升）並同時雜。靜置分層，收集有機磨， ❹刀別以純水（100毫升）、飽和食鹽水（卿毫升）洗，乾燥、濃 縮後，殘餘物以石夕膠管柱層析法分離純化，得到白色固體產物⑽9 克’ 〇·50毫莫耳），產率45.4%。 1 ίΜΆΐ 於反應瓶中加入西羅莫司（1〇 〇克，1〇 9毫莫耳）、乙基二（異 丙基）胺（78·0克，603.5毫莫耳）、二氣甲烧（35毫升）以及2_ .^紅基錢料_ (28.〇克，8X4㈣耳），域反應混合 ❹ 至6〇C ’搜拌24小時。降溫，加入乙酸乙醋（500毫升）與鹽 酸水岭液（1N ’ 5〇〇毫升）並同時授拌。靜置分 分別以純水（獅毫升）、____ == 殘修卿糊料分_化，_色麵物（4 8 毫莫耳）產率44.5^。由此顯見本發明於製程放大時仍具 有减率之再現性。產物經師魏液相層析儀純化後可得到高 純度的拜耳莫司A9[式（丨）]。 200948361 實施例3比較製程 (1) 合成2-乙氧基乙基三氟甲烷磺酸鹽 於反應瓶中加入2-乙氧基乙醇（1〇〇克，ii10毫莫耳）、二 氣甲烷（177毫升）以及2,6·二甲基此啶（23.8克，222.3毫莫耳）， 通入氮氣，降溫至(TC，滴加三氟甲烧續酸酐（37 6克，133 4毫 莫耳），滴加完畢後攪拌1小時，加入飽和氯化銨水溶液（2〇毫 〇 升）’授摔10分鐘，靜置分層，收集有機層，分別以鹽酸水溶液 (1N ’ 100毫升）、純水（1〇〇毫升）、飽和碳酸氫鈉水溶液〇〇〇 毫升）以及飽和食鹽水（100毫升）洗，乾燥、濃縮後，殘餘物以 矽膠管柱層析法分離純化，得到油狀產物（22 5克，1〇1 3毫莫耳）， 產率91.3%。 (2) 合成拜耳莫司A9[式（1)] 於反應瓶中加入西羅莫司（1〇克，丨」毫莫耳）、乙基二（異 ❹ 丙基）胺（7.8克，60.3毫莫耳）、二氣甲烧（3 5毫升）以及2_ 乙氧基乙基三氟甲燒雜鹽（2 G克，8 8毫莫耳），通人氮氣，加 熱反應混合物至6(TC，授拌1小時又2〇分鐘。降溫，加入乙酸乙 8曰（100毫升）與鹽酸水溶液（1N，J⑻毫升）並同時授拌。靜置 分層，收集有機層，分別以純水⑽毫升）、飽和食鹽水（80毫 升）洗，乾燥、濃縮後，殘餘物以雜管柱層析法分離純化，得 到白色固體產物（0.48克，0.49毫莫耳），產率44 5%。[註··本實 施例為模擬先前技術US 7，193,078之製程] 12 200948361 實施例4 比較製程 於反應瓶中加入西羅莫司（1〇.〇克，1〇 9毫莫耳）、乙基二（異 丙基）胺（78.0克，603.5毫莫耳）、二氯曱烷（35 〇毫升）以及 2-乙氧基乙基三氟曱烧績酸鹽（19.5克，87.8毫莫耳）[註：將實 施例3製程進行放大反應(10倍量)]，通入氮氣，加熱反應混合物 至60C，授拌1小時又20分鐘。降溫，加入乙酸乙酯（5〇〇毫升） 與鹽酸水溶液（1N，500毫升）並同時攪拌。靜置分層，收集有 ® 機層，分別以純水（500毫升）、飽和食鹽水（400毫升）洗，乾 燥、濃縮後，殘餘物以矽膠管柱層析法分離純化，得到白色固體 產物（2.9克，2.9毫莫耳）’產率26.8%。由此顯見，將先前技術 之模擬製程放大后，其產率反而降低，其甚不利於工業化量產。 ^圖式簡單說明】 ❹ 拜耳莫司A9之粉末X-射線繞射圖 拜耳莫司A9之高效能液相層析圖 添加0.0% BHT並於40°C環境下置放6週後之拜耳 莫司A9高效能液相層析圖 第4圖：添加0.1% BHT並於40Ό環境下置放6週後之拜耳 莫司A9高效能液相層析圖 第5圖：添加0.2% BHT並於40°C環境下置放6週後之拜耳 莫司A9高效能液相層析圖 第6圖：添加0.5% BHT並於40°C環境下置放6週後之銲耳 莫司A9高效能液相層析圖 第7圖：添加1.0% BHT並於40°C環境下置放6週後之銲耳 莫司A9高效能液相廣析圖 13 200948361 【主要元件符號說明】

Claims (1)

1. 200948361 十、申請專利範圍： ⑵]耳莫司A9及其類似物之合成方法，係利用西羅莫司[式

   與具有性、高滩及可追雜等特關錄苯雜鹽(Alkyl benzenesulfonate)[式（3)]，

   其中：Ri係選自烧基（alkyl)、梦基（silyl)、埽基（alkeny)、歸 烷基（alkenylalkyl)、炔基（alkynyl)、炔烷基（alkynylalkyl)、芳 香基（aryl )、芳香烧基（arylalkyl )、雜環芳香基（heteroaryl )、雜 環芳香烧基（heteroarylalkyl) ; R2、R3、R4、R5、Re，係分別選自 氫（hydrogen)、鹵素（halogen)、硝基（nitro group)等取代基， 在有機鹼，選自三烷基胺[式（4)]、冰b啶[式（5)]或其混合物， 的催化下， 15 200948361 R' rTR9 (4) 其中：R7、Rs、R9係分別選自Cl〜Ci〇等烷基取代基，

   其中：R10、R„、R12、R13、R14係分別選自氫（hydr〇gen)、C广Cl〇 等烷基取代基， 於有機溶劑中進行親核性取代反應而產生烷基西羅莫司[式（6)]，

   其中.Ri係選自烧基（alkyl)、梦基（silyl)、稀基（alkeny)、稀 烧基（alkenylalkyl)、炔基（alkynyl)、炔烧基（alkynylalkyl)、芳 香基（aryl )、芳香烧基（arylalkyl )、雜環芳香基（heteroaryl )、雜 16 200948361 環芳香烧基（heteroarylalkyl)。 2. 如申請專利範圍第1項之拜耳莫司A9及其類似物之合成方 法，其中該烧基苯績酸鹽[式（3)]的使用量是每莫耳西羅莫司 [式（2)]的1〜20倍。 3. 如申請專利範圍第i項之拜耳莫司A9及其類似物之合成方 法’其中該有機鹼的使用量是每莫耳西羅莫司[式（2)]的2〇〜8〇 倍。 4·如申請專利範圍第1項之拜耳莫司A9及其類似物之合成方 法，其中該烧基苯猶鹽[式⑴]即為2_乙氧基乙基五氟苯續 酸鹽（2-Ethoxyethylpentafluorobenzenesulfcmate)。 5·如申請專職圍第i歡料莫司A9及其_物之合成方 法，其中該有機鹼係選自三烷基胺[式（4)]、吡咬[式（5)] 與其混合物。 ❹&如申請專娜圍第5項之拜耳莫司A9及其_物之合成方 法，其中該三烷基胺[式⑷]即為乙基二（異丙基）胺。 7. 如申請專職圍第5項之拜耳莫司A9及其_物之合成方 法’其中該此咬[式⑸]即為2, 6-二曱基此啶。 8. -種提升拜耳莫司A9及其_物之歡性之方法係令如申請 專利範圍第i項所製之拜耳莫司A9及其類似物與抗氧化劑混 合儲存’以提高其穩定性。 9·如申請專利第8項之提升拜耳莫司A9及其類似物之穩定 17 200948361 性之方法，其中該抗氧化劑係選自： 2, 6-二叔丁基對甲紛（Butylatedhydroxytoluene，簡稱 βητ)、 生育盼（DL-a-tocopherol)、 掊酸丙酯（propyl gallate)、 維他命C棕櫚酸醋（ascorbyl palmitate)、 3- 叔丁基 -4- 氩 氧 (3~ ieri-butyl-4-hydroxyanisole) ' 基 茴 香 醚 2_ 叔丁基 - 4- 氮 氧 (2-ieri-butyl-4-hydroxyanisole)、與 基 茴 香 醚 反一丁稀二酸（fumaric acid)等化合物。 10. 如申請專利範圍第8項之提升拜耳莫司A9及其類似物之穩定 性之方法，其中該抗氧化劑的含量為拜耳莫司A9[式（丨）] 的0. 01 %〜1.0% (重量百分率）。 11. 如申請專利範圍第8項之提升拜耳莫司A9及其類似物之穩定 性之方法’其中該抗氧化劑即為2, 6-二叔丁基對甲紛 (Butylated hydroxy toluene ’ 簡稱 BHT)。 18