TW200848053A - P70 S6 kinase inhibitors - Google Patents

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200848053 九、發明說明： 【先前技術】 p70 S6激酶係磷脂醯肌醇3激酶（PI3K)/AKT7哺乳動物雷 帕黴素（rapamycin)把蛋白（mTOR)信號傳導路徑之下游效 應因子且p70 S6激酶經常在許多人類實體瘤中被激活。 p70 S6激酶活性可響應促有絲分裂刺激而調節核糖體生物 w 合成、細胞生長及細胞週期進展。同樣地，抑制p70 S6激 酶活性可阻斷核糖體生物合成、選擇蛋白之合成、細胞生 ( 長及細胞週期進展。因此，p70 S6激酶之作用在於腫瘤細 胞增生及防止細胞凋亡。進而言之，p7〇 S6激酶之抑制劑 可闡述為用於治療感染、炎症及腫瘤形成以及代謝疾病及 病症。（WO 2005/117909、WO 2006/071819、WO 2006/046024、 WO 2007/125321 及 WO 2008/012635)。本發明提供可抑制 p70 S6激酶活性之令人感到吃驚的強效化合物。另外，本 發明之特定化合物具有高生物利用度。 【發明内容】 本發明提供具有式I之化合物：

其中： Y係N或CR6 ; Z!&Z2獨立地為CR3或N，限制條件為Z】&Z2二者不可均 130520.doc 200848053 為N ; R1係Η或（CVC4)烷基； R2係視情況經選自CVC4烷氧基、氰基、n〇2、南素、一 氟甲基及二氟甲氧基之第一取代基取代且視情況進一+名一 選自由鹵素組成之群之第二取代基取代的苯基； & R3係氫、齒素、（VC4烷基、c3-C6環烷基或cvq炔義， 其中CrC6块基視情況經經基取代； R4及R5獨立地為氫或（^-CU烷基；

R係氫或基’或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供如下式I化合物，其中·· Y係N或CR6 ; Z!&Z2獨立地為CR3*N，限制條件為匕及心二者不可 為N ; 句 R1係Η或（C】-C4)烷基； 係視情況經選自Cl_C4院氧基、氰基、n〇2、幽素、三 il甲基及二甲氧基之第―取代基取代且視情況進—步經 選自3由幽素組成之群之第二取代基取代的苯基； α R3係氫、i素或(：3-(：6環烷基； R及R5獨立地為氫或C]_C4烷基； r6係氫或羥基；或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供-種抑制哺乳動物p7Q S6激酶方法其包 括對需要此治療之喝乳動物投與有效量之式【或认之化合 物或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供-種抑制哺乳動物血管新生之方法，其包 130520.doc 200848053 括對需要此治療之哺乳動物投與有效量 醫藥上可接受之鹽。 式I化β物或其 法另二治療哺乳動物結腸腺癌之方 合物或其醫藥上可接乳動物投與有效量之式- 另外’本發明亦提供_ Λ # . ’、 /α療哺乳動物非小細胞肺癌之 方法，其包括對需要此治療 η 化合物或其醫藥上可接受之鹽。南礼動物技與有效量之式1 方提供—種治療哺乳動物多形性膠質母細胞瘤之 / 括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式Ϊ 化合物或其醫藥上可接受之鹽。 之式1 本發明進—步提供—種治療哺乳動物_巢癌瘤之方法， 其包括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式Hti物 或其醫藥上可接受之鹽。 σ物 本發明進—步提供一種治療哺乳動物白Α病之方法，其 包括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式J化 其醫藥上可接受之鹽。 初汊 本發明進一步提供一種治療哺乳動物胰腺癌瘤之方法， 其包括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式！化合物 或其醫藥上可接受之鹽。 本發明另外提供一種治療哺乳動物前列腺癌之方法，其 包括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式Z化人 其醫藥上可接受之鹽。 本發明進一步提供一種治療哺乳動物乳房癌瘤之方法， 130520.doc 200848053 ι括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式i化合物 或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供—種治療哺乳動物淋巴管平滑肌增多症之 方法其包括對需要此治療之哺乳動物投與有效量之式j 化合物或其醫藥上可接受之鹽。 本發明亦提供—種醫藥調配物，其包括式I化合物或其 醫藥上可接受之鹽與醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形 劑的組合。 本發明亦提供式丨或“之化合物或其醫藥上可接受之鹽 的用途，其用於製造用於抑制P70 S6激酶之藥物。另外， 本發明提供-種式1化合物或其醫藥上可接受之鹽，呈用 於抑制哺乳動物之p70 S6激酶。進而言之，本發明提供_ 種適合於抑制p70 S6激酶之醫藥組合物，該醫藥調配物包 括式^化合物或其醫藥上可接受之鹽與—種或多種其醫率 上可接受之賦形劑、載劑或稀釋劑的組合。 △本發明亦提供式1化合物或其醫藥上可接受之鹽的用 2 ’其用於製造用於抑制血管新生之藥物。另外，本發明 ^供一種式！化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於抑制 哺礼動物血管新生。進而言之， ^月如供一種適合抑制 ^ <醫藥、组合物’其包括式I化合物或其醫藥上 接受之鹽與一種或多種其醫藥上可接受 稀釋劑的組合。 N彳或 田本發明進—步提供式1化合物或其醫藥上可接受之睡的 用途’其心製造心治療結腸腺癌之藥物。另外，= 130520.doc 200848053 明提供一種用於治療哺乳動物結腸腺癌的式〗化合物或其 西藥上可接受之鹽。進而言之，本發明提供一種適合治療 結腸腺癌之醫藥組合物，其包括式〗化合物或其醫藥上可 接受之鹽與一種或多種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或 稀釋劑之組合。 本發明亦提供式I化合物或其醫藥上可接受之鹽的用 途其用於製造用於治療非小細胞肺癌之藥物。另外，本 發明提供一種用於治療哺乳動物非小細胞肺癌的式j化合 物或其醫藥上可接受之鹽。進而言之，本發明提供一種適 合治療非小細胞肺癌之醫藥組合物，其包括式〗化合物或 其醫藥上可接受之鹽與一種或多種其醫藥上可接受之賦形 劑、载劑或稀釋劑之組合。 本發明進一步提供式〗化合物或其醫藥上可接受之鹽的 用返其用於11用於治療多形性勝質母細胞瘤之藥物。 另外，本發明提供一種用於治療哺乳動物多形性膠質母細 胞瘤的，式I化合物或其醫藥上可接受之鹽。進而言之，本 發明提供一種適合治療多形性膠質母細胞瘤之醫藥組合 物’其包括式I化合物或其醫藥上可接受之鹽與一種或多 種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或稀釋劑之組合。 本發明進一步提供式I化合物或其醫藥上可接受之鹽的 用途，其用於製造用於治療卵巢癌瘤之藥物。另外，本發 明提供一種用於治療哺乳動物卵巢癌瘤的式〗化合物或其 醫藥上可接受之鹽。進而言之，本發明提供一種適合治療 卵巢癌瘤之醫藥組合物，其包括式I化合物或其醫藥上可 130520.doc -10- 200848053 受之賦形劑、載劑或 接受之鹽與一種或多種其醫藥上可接 稀釋劑之組合。 本發明進-步提供式！化合物或其醫藥上可接受之 用途，其用於製造用於治療白血孤、 ^ m 柰物。另外，本發明 /、 於治療哺乳動物白血病之式I化合物或1醫藥 ΐ:!:之鹽。進而言之，本發明提供-種適合治療白血 西樂，、且合物，纟包括式1化合物或其醫藥上可接典之 鹽與一種或多種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或稀：劑 之組合。 本發明進—步提供式1化合物或其醫藥上可接受之鹽的 料’其用於製造用於治療騰腺癌瘤之藥物。另外，本發

月提供一種用於治療哺乳動物騰腺癌瘤的式I化合物或A 醫藥上可接受之鹽。進而言之，本發明提供—㈣合治療 胰腺癌瘤之醫藥組合物’其包括式I化合物或其醫藥上可 接受之鹽與一種或多種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或 稀釋劑之組合。 本發明進一步提供式1化合物或其醫藥上可接受之鹽的 用逆，其用於製造用於治療前列腺癌之藥物。另外，本發 明提供一種用於治療哺乳動物前列腺癌的式丨化合物或其 醫藥上可接受之鹽。進而言《，本發明提供一種適合治療 别列腺癌之醫藥組合物，其包括式！化合物或其醫藥上可 接文之鹽與一種或多種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或 稀釋劑之組合。 本發明進一步提供式J化合物或其醫藥上可接受之鹽的 130520.doc 200848053 用途，其用於製造用於治療乳房癌瘤之藥物。另外，本發 明提供一種用於治療哺乳動物乳房癌瘤之式!化合物或： 醫藥上可接受之鹽。進而言之，本發明提供一種適合治療 乳房癌瘤之醫藥組合物，其包括式！化合物或其醫藥上可 接受之鹽與-種或多種其醫藥上可接受之賦形劑、載劑或 稀釋劑之組合。 本發明進一步提供式1化合物或其醫藥上可接受之鹽的 用途’其用於製造用於治療淋巴管平滑肌增多症之藥物。 另外’本發明提供一種用於治療哺乳動物淋巴管平滑肌增 多症之式I化合物或其醫藥上可接受之鹽。進而言之，^ 發明提供-種適合治療淋巴管平滑肌增多症之醫藥組合 物，其包括式I化合物或其醫藥上可接受之鹽與—種或多 種其t藥上可接受之賦形劑、載劑或稀釋劑之組合。 另外，本發明提供式1化合物在治療中之用途。 【實施方式】 以上各式中所用-般化學術語具有其常用含義。舉例而 言，術語Ά院基"係指具有㈣以個碳原子之直鍵或具 支鏈、單價、飽和脂肪族鏈，例如，甲基、乙基、丙基、 異丙基、丁基、異丁基和第三_丁基及諸如此類。同樣 地，術語"Cl-c3烧基，，包括甲基、乙基和異丙基及諸如此 類。 本文所用術語"cvc：4烷氧基”係指具有丨個至4個碳原子且 連接至一氧原子的直鏈或具支鏈烷基鏈。 基基團包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、= 130520.doc 200848053 基、第三-丁氧基及諸如此類。 除非本文另有說明，否則本文所用術語，，鹵素”係指氣、 溴、碘或氟原子。 本文所用術語”c^c：6環烷基，，意指包括碳及氫原子之完全 飽和環且包括環丙基及環丁基。 本文所用術語"CyC：6炔基，，係具有2個至6個碳原子及1個 二鍵之直鏈或具支鏈炔基鏈，包括但不限於乙炔基、丙炔 基、丁炔基、戊炔基及諸如此類。 本發明之化合物係鹼且因此可與許多有機酸及無機酸中 的任一種反應以形成醫藥上可接受之鹽且本發明包括式I 或IA化合物之醫藥上可接受之鹽。本文所用術語”醫藥上 可接叉之鹽”係指實質上對活有機體無毒之式〗化合物之 鹽。此等鹽包含在 Journal of Pharmaceutical Science，66, 2-19 (1977)中所列示為熟習此項技術者已知的醫藥上可接 又之鹽。氫氣酸鹽、甲磺酸鹽及甲苯磺酸鹽（亦稱作對_曱 苯％酸鹽）係較佳的鹽。氫氣酸鹽及甲苯磺酸鹽為最佳。 某些本發明化合物具有一個或多個對掌性中心且可以各 種立體異構體構型存在。鑒於此等對掌性中心，本發明之 化合物可作為外消旋異構體、對映異構體之混合物及個別 對映異構體以及非對映異構體及非對映異構體之混合物出 現j所有此等外消旋異構體、對映異構體及非對映異構體 均屬於本發明之範圍。式〗化合物之特定立體異構體及對 映異構體可由一名普通技術者利用諸如彼等揭示於下列中 者等熟知技術及方法來製備：j· Jacques等人， 130520.doc -13 - 200848053 "Enantiomers, Racemates，and Resolutions’丨，John Wiley and Sons，Inc·，1981 及 E.L· Eliel和 S.H· Wilen，’’Stereochemistry of Organic Compounds”，(Wiley-Interscience 1994)及區欠洲 專利申請案第EP-A-838448號，在1998年4月29曰出版。拆 分方法之實例包括重結晶技術或對掌性層析。 熟習此項技術者亦應理解其中R1係氫或其中Zl*Z2均為 N之式I化合物可作為互變異構體存在。儘管互變異構體在 結構上不同，但熟習此項技術者應理解該等可以平衡狀態 存在且在普通條件下可容易且迅速地相互轉變。（泉見

March，Advanced Organic Chemistry，第 3 版，Wiley

Interscience，New York，New York (1985)，第 66-70頁；及

Allinger，〇rganic Chemistry，第2版，w〇rth 卜心如％ New York，New York，（1976)，第 173頁）Q 同樣地，以單獨 的互變異構體形式表示式Hb合物涵蓋個別互變異構體形 式及其混合物。同樣地，式丨化合物（其中，舉例而言，… 係氫）之命名（作為1H+坐或3H♦坐）涵蓋兩種互變異構體 形式。 且 某些類別之式I化合物係較佳p70S6激酶抑制劑。下列各 段闡述此等較佳類別： a) Y係 CR6 ; b) Y係 CH ; c) R1係 Η ; c^R1 係 CH3 ; e) ZJCR3 ; 130520.doc -14 - 200848053 f) ZACH ; g) z2係]S!; h) R1 2係經選自由_素及三氟甲基組成 的 取代且視情況進—步群之弟-取代基 苯基； H取代基取代 i) R2係經選自鹵素及三 步經作為齒素之第二取代—取代基取代且進-2 取代基取代的笨基· Γ W係在3位或4位經選自㈣素及三& 第一取代基取代且視情 土、、且成之群之 L ^ 兄進一步經作為鹵素之箆-雨 代基取代的苯基； /、 弟一取 k) R2係在3位或4位經選白士 a 外 自由_素及三氟甲基組成之群之 弟一取代基取代且進一步 子之 代的苯基； 〜作為齒素之第二取代基取 130520.doc -15- 1 R2係在3位經選自由_素及三氟甲基組叙群之第一 取代基取代且視情況進一牛 度兄進步在4位經作為南素之第二 取代基取代的苯基； 2 m) R5係 Η ; 3 η)該式I化合物係游離鹼； ‘ 4 〇)該式I化合物係鹽； 5 Ρ)該式I化合物係氫氣酸鹽； q)該式I化合物係甲苯績酸鹽。 200848053 第一取代基取代且視情況進一 取代的苯基。 步經作為鹵素之第二取代基 較佳式1化合物亦包括彼等如下者：其中Y係CRlR、 Η或CH3 ; R2係經選自丨^素及^甲基組成之群之第一 取絲取代且視步輯為i素之第二取代基取代 的苯基；R5係Η ;冗！係CR3且冗2係^[。 其他較佳者係彼等如下式！化合物：其中H…健

或CH3; R2係經選自由幽素及三氟甲基組成之群之第—取 隸取代且視情況進-步經作為_素之第二取代基取代的 苯基；R5 係Η ; Z^CH ;且 ZJ、N。 另外，較佳者係彼等如下式j化合物··其中丫係cH ; r 係Η或CH3; R2係經選自由鹵素及三氟甲基組成之群之第 一取代基取代且進-步經作為㈣之第二取代基取代的苯 基；R5係Η ; 2】係CH ;且Z2係N。 更佳式I化合物係彼等如下者··其中丫係CH ;尺！係Η或 CH3 ; R2係在3位經選自由鹵素及三氟甲基組成之群之第一 取代基取代且視情況進一步在第4位經作為鹵素之第二取 代基取代的苯基；R5係η ; ;且冗2係1^。 另外，更佳式I化合物係彼等如下者··其中y係· r1 係Η或CH3 ; R2係在3位經選自由鹵素及三氟甲基組成之群 之第一取代基取代且進一步在4位經作為鹵素之第二取代 基取代的苯基；R5係Η ; z^CH ;且。 特別佳者係彼等如下式了化合物··其中γ係CH，2!係CH 且Z2係N。 130520.doc -16- 200848053 下列化合物4·{4-[4-(3-(三氟甲 六氣吼^基}_1Η_并二=基）.紗叫

或其醫藥上可接受之鹽’為特別最佳者。

1Η?/化合物4仰·(4_氣-三氣甲基-苯基甲基 基]_六氫吼咬小基ΗΗ “比唾并[3,4脅密。定：

或其醫藥上可接受之鹽亦為特別最佳者。

口亥等式I化e物係p70 S6激酶之抑制劑且因此可用於治療 諸如下列等哺乳動物代謝疾病及病症：肥胖症、糖尿病:、 代謝症候群、㉟島素抵抗、高血糖症、高氨基酸血症及高 血脂症及增生型病纟’尤其是多形性膠質母細胞瘤、結腸 直腸癌、肝細胞癌、肺癌、乳癌、印巢癌及腎細胞癌瘤。 另外，已、纟發現ρ 7 0 S 6激轉通路在諸如彼等與淋巴管平滑 肌增多症（LAM)相關者等良性腫瘤細胞中被激活。參見

Journal of Bological Chemistry, 277:34, 30958-30967 (2002)及 Modern Pathology 19, 839-846 (2006)。因此，p70 130520.doc 17 200848053 S6激酶抑制蜊亦可用於治療Lam。p7〇 %激酶之抑制劑亦 為哺乳動物血管新生之有用的抑制劑。較佳地，擬治療之 哺乳動物係人。

該等式I化合物可藉由一名普通技術者按照業内確定的 技術及程序加以製備。更具體而言，式][化合物可按照在 下文中所述反應圖、方法及實例中所述來製備。一名熟習 此項技術者應理解：下列各反應圖之個別步驟可有所變化 以提供式I或IA之化合物。一名普通業内人員可容易地獲 得該等試劑及起始材料。除非另有說明，否則所有取代基 係如先前所界定。為了清楚起見，某些取代基在下列各反 應圖中已被消除且此並非意欲以任一方式限制該等反應圖 之教示。 式I化合物可按照下列反應圖所示加以製備，其中R1、 R2、R4、R5、Z!、乙2及Y係如先前所界定且L係適宜離去基 團，例如，卣素。 反應圖1

使式（a)之經取代吡唑并嘧啶（或嘌呤或吡咯并嘧啶）化合 130520.doc -18- 200848053 物14式（b)之經取代哌嗪或六氫吡啶反應以形成式i或μ之 化合物。舉例而言，將式⑷化合物、旅噪⑻及適宜驗（例 如，三乙胺、二異丙基乙基胺或沭甲基嗎啉）在適宜溶劑 (例如，丙醇或異丙醇）中之溶液加熱至約7〇它_1〇〇它以提 供式I或IA之化合物’隨後，可使用諸如層析等此項技術 中熟知的技術來分離及（倘若必要且需要）純化該等化合 物。

式（a)化合物有市售或可藉由熟習此項技術者已知的方法 來合成。舉例而言’其中匕係…且^係歲式⑷化合物 可藉由使別嘌呤醇與諸如磷醯氯等氣化劑反應並加熱至約 8(TC-9G°C來製備。進而言之，倘若需要，則式⑷化合物 可在業内熟知條件下經取代。舉例而言，其中&或心係 CR3之式（a)化合物在暴露於存於適宜溶劑或適宜溶劑之混 合物（例如，乙腈及乙酸）中的適當氟化劑（例如，[1_(氯甲 基）-4•氟-1，4-二氮鏽二環[2.2·2]辛烷雙（四氟硼酸鹽）])時會 經氧化。而且，可藉由業内已知方法來合成其中r3係烷基 或環烧基之式⑷化合物。舉例而言，於諸如lda等強驗存 在下，使一氯嘧啶與環丙烷曱醛在諸如THF等溶劑中於冷 部溫度下反應以產生需要的醇。於氧化鉻（VI)存在下在〇 。(：下於諸如丙酮等適宜溶劑中實施氧化反應，提供所需要 的酮，隨後使該顯I與水合肼在諸如THF等適宜溶劑中於室 溫下反應以提供環燒基取代之式⑷m密咬化合物。 另外’產生其中R3係炔基之化合物的方法為熟習此項技術 者所知。舉例而言，使用肆（三苯基膦）鈀（〇)(pd(ph3Ph)作 130520.doc -19- 200848053 為觸媒催化存於三乙胺及諸如DMF及/或丁 hf等適宜溶劑中 之、、二氯化式（a)二甲基甲矽烷基乙炔化合物以提供乙炔基取 代之式（a)化合物。 可按照在下列反應圖中所示來製備需要的六氫吡啶/哌 秦化口物（b)，其中R ' R2、R4、…及^系如先前所述且％ 係適宜保護基團。 反應囷2

R2 o 人/Br R\ R2 (m)

PG N HO、

V PG (n) ⑹ boc 使胺（C)與經保護六氫吡啶在適宜偶合劑（例如，氯甲酸 異丁基S曰、氫氣酸丨_乙基二曱基胺基丙基]-碳化二亞 胺（EDC)*1-丙烷膦酸環狀酸酐（ppA))及適當鹼（例如， 曱基嗎啉或二乙胺）存在下在適宜溶劑（例如，THF、二氣 甲：k或Ν,Ν _甲基曱醯胺（dmf))中於低溫下反應以形成式 (d)之月女化合物。當在密封容器中將化合物⑷暴露於乙 酉文叙或氯化錢時’形成其中Y係CR6之後續咪唑六氫吼0定 130520.doc -20- 200848053 (bl)，或在壓力下暴露於微波加熱時形成其中…係^之化 合物。或者，可藉由使脒（e)與適當_素_在諸WDmf或丙 酮等適宜溶劑中於諸如碳酸鉀或碳酸鈉等鹼存在下反應， 繼而在熟習此項技術者熟知的條件下實施去保護來形成式 (bi)之化合物。亦可藉由在加熱時使式（111)溴苯乙酮與甲醯 胺反應來合成式（bl)之羥基六氫咄啶。隨後向諸如thF等 適宜溶劑中添加咪唑（η)，冷卻並在氫化鈉存在下用諸如 2,2-(三甲基甲矽烷基）乙氧基_甲基氯等氮保護基團處理之 同日π使5亥反應混合物升溫至室溫以提供式（〇)之中間體。隨 後可在諸如THF等惰性溶劑中在低溫下及在惰性氛圍中用 諸如正-丁基鋰等金屬化劑處理後續經保護咪唑。用經適 δ取代之六鼠^比°定嗣處理此混合物並使之升溫至室溫約1 h以獲得（ρ)型化合物。用諸如1 N HC1等水性酸在高溫下處 理中間體（P)，獲得（bl)。 可按照在反應圖3中所述合成需要的脒，其中pg係適宜 保護基團· 反應圖3

130520.doc -21 - 200848053 自腈可容㈣產生料e)。更具體而言，使溶於諸 適宜溶劑中之氫氯酸經基胺與氛基六氯n比 鈉等鹼存在下在適宜溶劑中（例如，在；座厌馱 ^ . 知中）反應並暴露 於熱以提供經基甲肺基-六氯鄉)。隨後藉由趣觸媒於 _存在下在屢力下氫化存於諸如乙酸等適宜溶劑中之 羥基甲脒基六氫吡啶（h)以提供脒（e)。 或者’藉由將氰基六氫吡啶⑷溶於諸如甲醇等適宜溶 劑中，冷卻，隨後與氯化氫氣體反應來形成甲亞胺酸⑴: 隨後藉由用存於甲醇中之氨來處理甲亞胺酸⑴，隨後向該 作匕合物中通入氨氣達飽和來產生月米。 熟習此項技術者應理解並非式以匕合物之所有取代基可 承受合成該等化合物所用某些反應條件。此等部分在該合 成中可在便捷點引入或可按照需要或期望經保護且隨後實 加去保蠖。熟習此項技術者亦應理解該等保護基團可在合 成本發明化合物之任一便捷點去除。用於導入及去除氮保 濩基團之方法為此項技術所熟知；參見，例如，Greene

Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis，第 3 版 John Wiley and Sons，New York，第 7章（1999)。進而 言之，熟習此項技術者應理解：在許多情況下，其中導入 各°卩分之順序並非是關鍵的。產生式I化合物所需各步驟 疋順序取决於所合成特定化合物、起始化合物及經取 代部分之相對不穩定性。 在各實例及分析中所用各縮寫、符號及術語具有下列含 義· Bu0H==丁醇，DCM=二氯甲烷，dMF=N，N-二甲基曱 130520.doc -22- 200848053 醯胺，EtOAc=乙酸乙醋，EtOH=乙醇，MeOH=甲醇， Pd(OH)2/C=碳載氫氧化鈀（Pearlman’s觸媒），h=小時， LDA=二異丙基醯胺鋰，EDCI=氫氯酸1-(3-二曱基胺基丙 基）-3-乙基碳化二亞胺，Et2〇=二乙醚，EtsN (或TEA)=三 乙胺，NaBH(OAc)3 =三乙醯氧基石朋氫化納，TBAF=四丁基 氟化銨，Tf20=三氟甲烷磺酸酐，THF=四氫呋喃。 製備1 2-溪·1-(2_氟三氟曱基_苯基）-丙-1·嗣

邊攪拌邊向2-氟-5-(三氟甲基）苯丙酮（5 g，22.03 mmol) 存於二氣甲烷（8〇 mL)之溶液中緩慢地添加溴（3·34 g，0.95 S畺）存於二氣甲烧（80 00 mL)中之溶液以便溴之褐色恰好 消失。用飽和NaHC〇3洗滌該反應混合物，經Na2S〇4乾燥 並濃縮以提供6·22 g粗製材料。 MS(ES): m/z=301.2 [M+2H]。 製備2-5-D之化合物基本上可按照製備丨中所述來製備。 製備 化合物 MS(ES): m/z [M+2H] 2 -1-(4_氟三氟甲基-苯基> 丙_ r酮 301.2 3 __臭―1〆2-氣三氟甲基-笨基)-乙酮 285.2 4 漠-1-0氟三氟曱基-笨基乙酮 287.2 ^臭小Ο氟_5-三氟甲基·笨基)_乙酮 287.2 130520.doc -23- 200848053 製備 化合物 MS(ES): m/z [M+2H] 5-A 2-漠-1-(4-三氟甲基-苯基)-丙-1-酮 281 5-B 2-溪-H3-三氟甲基-苯基)-丙小酮 281.2 5-C 2-澳-1 -(3 -氯-4-1苯基)-丙-1 -酮 265.2 5-D 臭-1-(3-說苯基)-丙-1-嗣 231.2 製備6 氫氣酸2_胺基-1_(3·(三氟甲基）苯基）乙酮 向六亞甲基四胺（ΗΜΤΑ)(5·80 g，4 1.3 mmol)存於四氯化 碳（100 mL)之溶液中添加3-(三氟甲基）溴苯乙酮（10 g， 3 7.4 mmol)。在室溫下攪拌過夜。過濾出沉澱並將濾餅懸 浮於乙醇（200 mL)中。用濃氫氯酸（28 mL)稀釋該混合物並 在室溫下將該混合物攪拌過夜。過濾出沉澱並在真空中濃 縮濾液以獲得灰白色固體。自熱的1°/〇濃氫氣酸存於2-丙醇 中之混合物重結晶該等固體，注意不要冷卻至低於室溫以 提供氫氣酸2-胺基-1-(3-(三氟甲基）苯基）乙酮（7.67 g， 86%) ° MS(APCI): m/z=204 [M+H]。 製備7-16之化合物基本上可按照製備6中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 7 氫氣酸2-胺基小(4-(三 氟曱基> 苯基)乙酮 MS (APCI): m/z=204 [M+H] 8 氫氣酸2-胺基-1-苯基乙 酮（用熱丙醇滴定） lU NMR (500 MHz, DMSO-d6) 58.80-8.10 (br s，3H)，8.02 (dd，J=1.0, 8·5 Hz， 2H)，7.75_7.72(m，1H)，7.61-7.58 (m，2H)， 4.59 (s，2H) 130520.doc -24- 200848053 製備 化合物 —-~~~.—. 物理數據 9 ^氯酸2-胺基小…氯 苯基)乙lig lU NMR (DMSO-d6) 58.05-8.02 (m? 2H), 7.69-7.66 (m，2H)，4.59 (s，2H) 10 氫氯酸2-胺基-1-(4-氟_ 3_(二氟甲基)苯基)乙_ !H NMR (DMSO-d6) 58.44-8.35 (m, 2H)? 7.98-7.80 (m，1H)，5.11-4.90 (m，2H)， 4.73-4.68 (m, 2H) 11 鼠氣酸2-胺基-1-(3-就_ 4_(三氟甲基)苯基)乙酮 NMR (DMSO-d6) δ 8.55-8.40 (br s, 2H)，8.15 (d，J=18 Hz，2H)，7.98-7.80 (m， 1H)，5.11-4.90 (m，2H)，4.73-4.68 (m，2H) 12 氫氯酸2-胺基小(3-氟_ 5-三氟甲基-苯基)-乙酮 ]H NMR (DMSO-d6? 400 MHz): δ: 3.93 (2H，s)，7·41(1Η，d，】=8·8Ηζ)，8·10 (1H， s)，8.16 (lH，s)，8.18 (3H，s). 13 氫氯酸2-胺基-1-(2-氯一 5-三氟甲基-苯基)-乙_ MS(ES): m/z=238.2 [M+H] 14 氣氣酸2-胺基-1 -(2-氣_ 5_三氟甲基-苯基)-乙_ MS(ES): m/z=222.2 [M+H] 15 氫氯酸3-(2-胺基·•乙醯 基)-苄腈 lR NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ: 4.62 (2H，s)，7.81-7.77 (1H，m)，8.18 (1H，d， J=7.6Hz)，8·28 (1H，d，J=8.4Hz)，8.50 (1H5 s), 8.56 (3H? s). 16 氫氣酸4-(2-胺基-乙酿 基)-苄腈 ]H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ: 4.62 (2H，s)，8·06 (2H，d，J=8.4Hz)，8·16 (2H， d，J=8.4Hz), 8·54 (3H，s). 製備17 2-胺基-1-(3-(三氟甲氧基）苯基）乙酮 向3-(三氟甲氧基）->臭笨乙酮（2.17 g，7.66 mmol)存於甲 醇（20 mL)t>谷液中添加疊氮化納（583 mg，8.96 mmol)。 在室溫下攪拌2 h。在真空中濃縮該混合物。將殘留物溶 於EtOAc (20 mL)中並用水〇〇 mL)洗滌。乾燥（Na2S04)有 130520.doc •25- 200848053 機層、過濾並在真空中濃縮濾液以提供2-疊氮基- ^(3-(三 氟甲氧基）苯基）乙顚](1·7〇 g，91%)。i-NMR (CDCI3): δ7·83 (m，1H)，7.77 (s，1H)，7·56 (m，1H)，7·49 (m，1H)， 4.55 (s，2H) 〇 向2_疊氮基三氟甲氧基）苯基）乙酮（1·7〇 g，6·93 mm〇1)存於乙醇（15 mL)之充氮溶液中添加碳載鈀（720 mg ’ 10% Pd/C，50重量％水）。向該燒瓶中通入氫（氣球）。 在室溫下攪拌過夜。經由Celite⑧過濾該混合物，用乙醇 (3x3 0 mL)沖洗該Celite®並在真空中濃縮濾液以提供粗製 2-胺基-1-(3-(三氟甲氧基）苯基）乙酮（156 g，88〇/〇)。 NMR (DMSO-d6) δ 8.56 (br s，2H)，8·07 (m，1H)，7·95 (s， 1H)，7·76 (m，2H)，4·63 (s，2H)。 製備18 2-胺基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基丙β1_酮甲苯磺酸鹽 向2_溴4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-丙-1-酮（2.78 g; 1.00 當量；9·30 mmoles)存於四氫呋喃（15 mL)之溶液中添加一 份疊氮化鈉（640.94 mg ; 1.05當量；9.76 mmoles)。將該混 合物在室溫下攪拌過夜。過濾出固體並用THF洗滌。在20 C下’向二本基膦（1.06當量；9.86 mmoles; 2.61 8)及對-曱苯磺酸（2.2當量；20.47 mmoles ; 3.56 g)存於四氫呋喃 (15 mL)之溶液中添加粗製疊氮化物（1〇〇當量；9 3〇 mmoles ; 2.43 g)。將該混合物攪拌過夜。過濾出固體，隨 後用THF洗滌以獲得920 mg (24%)標題化合物。 MS(ES): m/z=236.2 [M+H] 〇 130520.doc -26- 200848053 製備18A至18-D之化合物基本上可按照製備18中所述來 製備。 製備 化合物 MS(ES): m/z [M+H] 18-A 2-胺基-1-(4-三氟^曱基苯基丙-1-酮甲苯·4-石黃酸鹽 217.2 18-B 2-胺基小(3_二氟甲基苯基)_丙小阔甲苯-4-石黃酸鹽 217 18-C 2-胺基小(3-氣冬1苯基)-丙小嗣甲苯-4-石黃酸鹽 210 18_D 2-胺基氣苯基)-丙-1-嗣曱苯-4·石黃酸鹽 167 製備19 4-(2-氧代基-2-(3-(三氟甲基）苯基）乙基胺基曱醯基）六氫吼 咬-1-甲酸第二-丁基醋

在-10°C下向1-(第三-丁氧基羰基）六氫咄啶-4-甲酸（11.2 g，48.8 mmol)存於THF (400 mL)之溶液中添加N-甲基嗎啉 (13.0 mL，11 8 mmol)並攪拌5 min。添加氣甲酸異丁基酯 (5.1 mL，3 8.8 mmol)並在-10°C下持續攪拌2 h。添加氫氯 酸2-胺基三氣甲基）苯基）乙酮（9.35 g，39.0 mmol)並 繼續攪拌1 h。向該混合物中添加二氯曱烷（5〇〇 mL)並過 濾。用飽和碳酸氫鈉水溶液（400 mL)洗滌該濾液並在真空 中濃縮。藉由矽膠層析（330 g RediSep管柱，藉助〇%至 100%之乙酸乙酯：己烷梯度，6.0 L進行洗脫）純化該殘留 130520.doc -27- 200848053 物以提供4-(2-氧代基-2-(3-(三氟甲基）苯基）乙基胺基曱醯 基）六氫吼啶-1-甲酸第三-丁基酯（9.72 g，60%)。 備0 MS (APCI): m/z=315 [M-C5H802+H]+。 製備20-25之化合物基本上可按照製備19中所述來製 製備 化合物 物理數據 MS(APCI) 20 4-(2-氧代基-2-(4-(三氟甲基)苯基)-乙基胺基甲 醯基)六氫吡啶-1-甲酸第三· 丁基酯 m/z=315 [M-C5H802+H]+ 21 4-(2-氧代基-2-苯基乙基胺基甲酿基)_六氫TJ比σ定_ 1-甲酸第三-丁基酯 m/z=247 [M-c5H8o2+H]+ 22 4-(2-(4_氣苯基)-2-氧代乙基胺基曱隨基)六氫tj比 啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z-280 [M-C5H802+H]+ 23 4-(2-(2,4-二氯苯基)·2·氧代乙基胺基曱醯基)六 氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=315 [M-C5H802+H]+ 24 4-(2-(4-氟各(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基胺基 甲醯基)六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=433 [M+H] 25 4-(2_(3·氟-4-(三氟甲基)苯基)-2-氧代乙基胺基 曱醯基)六氫吡啶-1·甲酸第三-丁基酯 m/z=433 [M+H] 製備26 4-(2-氧代基_2-(3-(三氟甲氧基）苯基）乙基胺基甲醯基）六氩 吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 在〇°C下，向2-胺基-1-(3-(三氟甲氧基）苯基）乙酮（1,56 g，6.10 mmol)及1-(第三-丁氧基羰基）六氫吡啶-4-甲酸 (1·66 g，7.24 mmol)存於 Ch2C12 (15 mL)之溶液中添加三 乙胺（1.1 mL，7·89 mm〇i)及氫氣酸二甲基胺基丙 130520.doc •28- 200848053 基）-3-乙基碳化二亞胺（EDC)( 1.51 g，7.87 mmol)。在（TC 下攪拌3 h，隨後在室溫下攪拌過夜。在真空中濃縮該混 合物。藉由矽膠層析（80 g Si02，用50%乙酸乙酯/己烷，1 L洗脫）純化該殘留物以提供4-(2·氧代基-2-(3-(三氟甲氧基） 苯基）乙基胺基甲醯基）六氫吼啶-1-甲酸第三-丁基酯（1·5〇 g，57%)。 MS (APCI)·· m/z=331 [M-C5H802+H]+。 製備27 4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）·1-甲基_2_氧代基-乙基胺基甲 醜基]•六氫0比咬-1-甲酸第三-丁基酯 在室溫下向2-胺基-1-(4 -氟-3-三氟曱基-苯基）-丙-1-酮甲 苯-4-續酸鹽（900 mg ; 1·00 當量；2.21 mmoles)及 1-Boc-六 氫口比口定-4-甲酸（ΒοοΙηρ-ΟΗ)(613·96 mg，1.20當量；2·65 mmoles)之混合物中添加二甲基甲醯胺（20 mL)。在〇°C下 向以上溶液中依次添加N-甲基嗎啉（6.00當量；13·26 mmoles ; 1.46 mL)以及1 -丙烧膦酸環狀酸酐（1 ·50當量； 3·3 1 mmoles ; 862· 14 pL)。將該混合物升溫至室温同時授 拌一小時。用EtOAc稀釋該混合物，用水、1 Μ檸檬酸、 水、飽和NaHC03及飽和氣化鈉水溶液洗滌且經Na2S04乾 燥。藉由溶於CH2C12中，裝載至矽膠管柱上並用EtOAc洗 脫來純化殘留物以獲得500mg (51%)標題化合物。 MS(ES): m/z=445.2 [M-Η]。 製備28-32之化合物基本上可按照製備27中所述來製 備。 130520.doc -29- 200848053 製備 化合物 MS(ES) 28 4-[2-(4-氰基-苯基)-2-氧代基-乙基胺基甲醯基]-六氫 吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=372 [M++H] 29 4-[2-(3-氰基-苯基)-2-氧代基-乙基胺基甲醯基]-六氫 吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=372 [M++H] 30 4-[2-(2-氯-5-三氟甲基·苯基)冬氧代基-乙基胺基甲醯 基]-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=449 [M++H] 31 4-[2-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-2-氧代基-乙基胺基曱醯 基]-六氫11比σ定小甲酸第三-丁基酯 m/z=433 [M++H] 32 4-[2-(2-氟-5-三氟曱基-苯基)-2-氧代基-乙基胺基甲醯 基]-六氫ΰ比淀小甲酸第三-丁基酯 m/z=433 [M++H] 32-A 4_(1_氧代基-1-(4-(三氟曱基)苯基）丙-2-基胺基甲酉I 基]-六氫0比咬-1·曱酸第三-丁基酉旨 m/z=428.2 [M++H] 32-B 4-(1-氧代基小(3_(三氟甲基)苯基）丙冬基胺基甲醯 基]-六氮°比咬"'卜甲酸弟二-丁基酉曰 m/z=428 [IVT+H] 32-C 32-D 4-(1-氧代基小(3-氯斗"氟苯基)丙1基胺基甲酿基]•六 氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 m/z=412 [Nf+H] 4-(1-氧代基小氟苯基)丙1基胺基甲酿基]-六氫外匕 咬-1-曱酸第三-丁基_ - _ 一 m/z=378 [M++H] 製備33 4 (4 (3-(三氟甲基）苯基味嗤-2"·基）六氮°比咬 在CEM DisC0Ver微波裝置中於300W、120°C及200 PSI下 將4_(2_氧代基-2-(3-(三氟甲基）苯基）-乙基胺基甲醯基）六 氮σ比淀]•甲酸第三-丁基酯（2·5 g，6.09 mmol)及NH4C1 -30- 130520.doc 200848053 (1·68 g，31.4 mmol)存於乙醇（2〇 mL)之混合物微波加熱i6 h。將該混合物冷卻至室溫。利用相同微波及加熱過程藉 助第二份4-(2-氧代基-2-(3-(三氟甲基）苯基）乙基胺基甲醯 基）-六氫吡啶-1-曱酸第三_丁基酯（2·35 g，5·67 mm〇1)及 NH4C1 (1·8 g ’ 33.6 mmol)存於乙醇（2〇 mL)中之混合物重 複該程序。將該混合物冷卻至室溫。在微波裝置中於 300W、160°C及200 PSI下對第三份4气2-氧代基-2_(3_(三氟 曱基）苯基）-乙基胺基曱醯基）六氫吡啶-；^甲酸第三_丁基酯 (2·0 g，4.82 mmol)及 NH4C1 (1.34 mg，25.0 mmol)存於乙 醇（15 mL)之混合物重複以上程序12 h。將該混合物冷卻至 室溫。混合各批料，吸附至矽膠上並在真空中濃縮。藉由 矽膠層析（120 g RediSep管柱，藉助〇%至100。/。之CMA:二 氯曱烷梯度，3 L洗脫）純化該殘留物以提供4-(4-(3-(三氟 曱基）苯基）-1Η-咪峻-2-基）六氫η比咬（3.40 g，75%)。 MS (APCI): m/z=296 [M+H]。 製備34-35之化合物基本上可按照製備33中所述來製 備0 製備 化合物 物理數據 34 4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑1 基)六氫°比咬 MS (APCI): m/z=296 [M+H] 35 4-(4-(2,4-二氣苯基)-1H-咪唑-2-基） 六氫σ比。定 MS (ES): m/z-296 [M+H] 製備36 氫氣酸4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基）六氫吡啶 130520.doc -31- 200848053 在 Personal Chemistry微波儀中在 300W、160°C 及 14 bar 下將4-(2-氧代基-2-苯基乙基胺基甲醯基）·六氫咄啶甲 酸第二-丁基酯（1·〇 g，2.88 mmol)及 NH4C1 (0.462 g，8,65 mmol)存於乙醇（12 mL)之混合物微波加熱n h。將該混合 物冷卻至室溫，添加矽膠（5 mL)並在真空中濃縮該混合 物。藉由石夕膠層析（80 g RediSep管柱，藉助〇%至1〇〇%之 CMA/一氯甲烧梯度進行洗脫6〇 min，6〇 mL/min)純化該殘 留物以提供灰白色固體狀4_(4_苯基·丨H-咪唑_2_基）六氫吡 咬（0.418 g，64%)。向二氯甲烷（15 mL)及濃氫氯酸（28叫） 中添加4-(4·苯基-1H-咪唑-2-基）六氫吡啶（0.060 g，0.26 mmol)。將該混合物攪拌45 min，隨後在真空中濃縮該混 合物以提供氫氣酸4-(4-苯基-1H-味唾-2-基）六氫吼啶 (0.070 g，99%) 〇 MS (APCI): m/z=228 [M+H]。 製備37之化合物基本上可按照製備36中所述來製備。 製備 -------------- 化合物 物理數據 37 氣氣酸4-(4_(4_氣苯基)-1 HH2·基)六氫 σ比咬 工 MS (APCI): m/z-262 [M+H] 製備38 氫氣酸4-(4_(4-氟-3_(三氟甲基）苯基）_1H-咪唑-2_基）六氫”比啶 在 Personal Chemistry微波儀中在 3〇〇w、16〇χ：&14 bar 下將4-(2-氧代基-2-(4-(三氟甲基）笨基）_乙基胺基曱醯基） 六氫叽啶-1·甲酸第三-丁基酯（1·7 g，3·92 mm〇1)&NH4Ci (0.579 g，1〇·8 mmol)存於乙醇（17 mL)之混合物微波加熱 130520.doc -32- 200848053 1 2 h。將該混合物冷卻至室溫並添加石夕膠（2〇 g)。藉由石夕 膠層析（330 g RediSep管柱，藉助〇%至1〇〇%之CMA/二氣 甲烷梯度洗脫30 min並在100% CMA下再保持30 min，100 mL/min)純化該殘留物以提供4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基）苯 基）-1Η-咪唑-2-基）六氫吡啶（600 mg，51%)。MS (APCI): m/z=3 1 4 [M+H]。 將4-(4-(4 -氟- 3-(三氟甲基）苯基）-1 Η-味唾-2-基）六氫°比咬 (25 0 mg，0.80 mmol)懸浮於甲醇（20 mL)中並添加氣化氫 (2 Μ，存於二乙醚中，0.798 mL，0.80 mmol)。在室温下 攪拌30 min。在真空中濃縮該混合物並添加水（15 mL)及乙 腈（5 mL)。凍乾該混合物以提供灰白色固體。在真空中於 1 00°C下將該固體乾燥2 h，以提供灰白色固體狀氫氯酸 4-(4-(4-氟·3-(三氟曱基）苯基）-1Η-咪唑-2-基）六氫吼啶（220 mg ， 79%)。 MS (APCI): m/z=314 [M+H] 0 製備39 氮氣酸4-(4-(3-氟-4-(三氟甲基）苯基）-1Η-味哇-2-基）六氫σ比咬 在 CEMDiscover 微波儀中在 300W、120°C 及 200 PSI 下， 於最大功率時將4-(2-(3-氟-4-(三氟曱基）苯基）-2-氧代乙基 胺基甲酿基）六氫口比。定-1-甲酸第二-丁基g旨（517 mg，1.19 mmol)及 NH4C1 (350 mg，6.54 mmol)存於乙醇（2 mL)之混 合物微波加熱1 2 h。將該混合物冷卻至室溫並添加矽膠（〜5 g)。藉由矽膠層析（40 g RediSep管柱，藉助〇〇/。至1〇〇%之 CMA/二氣甲烷梯度洗脫60 min，40 mL/min)純化該殘留物 130520.doc -33- 200848053 以提供灰白色固體狀4_(4-(4-氟-3-(三氟甲基）苯基）-1Η-咪 口坐-2-基）六氫 u比咬（228 mg，61%)。MS (APCI): m/z=3 14 [M+H] 〇 將該產物（29 mg)溶於曱醇（2 mL)中並添加氯化氫（2 μ， 存於二乙醚中，95 μί)且在室溫下攪拌30 min。在真空中 濃縮該混合物，添加水（1 〇 mL)並凍乾以獲得灰白色固體 狀氫氣酸4-(4-(3-氟-4-(三氟甲基）苯基）-111-咪唾-2-基）六氫 口比唆（29 mg)。 MS (APCI): m/z=314 [M+H]。 製備40 4-(4-(3-(三氟甲氧基）苯基）-lH-哺唑-2·基）六氫吼啶 向乙酸銨（1.40 g，18.1 mmol)及冰醋酸（10 mL)之混合物 中添加4-(2-氧代基-2-(3-(三氟甲氧基）苯基）乙基胺基甲醯 基）-六氫吡啶-1-曱酸第三-丁基酯（1·50 g，3.48 mmol)並在 回流下加熱1 5 h。將該混合物冷卻至室溫並在真空中濃 縮。將殘留物溶於乙酸乙酯（50 mL)中並用飽和NaHC03調 節至pH 8。用乙酸乙酯（2x50 mL)萃取水性層。組合各有 機層，乾燥（Na2S04)、過濾並在真空中濃縮。藉由矽膠層 析（80 g，藉助10%至20%之曱醇/乙酸乙酯梯度洗脫，1.5 L)純化該殘留物以提供4-(4-(3-(三氟甲氧基）苯基）-1Η-咪 唑-2-基）六氫吡啶（491 mg，45%)。 MS (APCI): m/z=312 [M+H]。 製備41 羥基甲脒基）-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 130520.doc -34- 200848053 將氫氣&^基胺（1·65 g; 4·99當量匪〇ι㈣溶於 K(产）中並添加碳酸納（2·53 g ; 23.87 mmoles) 〇將4-氰 基-六氫吡啶-1 -甲酸笛- _ ^ 夂弟二-丁基酯（1 g ; 1.00當量；4·76 es)(Astatech)置於小航中並溶於甲醇（6 ▲ ; 148·25 . _0㈣中，隨後添加至含有經基胺之燒瓶中。邊授拌便 L亥此口物加熱至回流並保持3 h。藉由蒸發去除甲醇並 用乙酸乙酉旨（2xl〇〇 mL)萃取水性層。用水（ixi〇〇 mL)洗滌 纟併有機部分’經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮成白色固體。 、在低壓下乾燥以獲得L05 g (91%)白色固體狀標題化合 物。 LCMS: m/z=188.2 [M-tBu5 M+H] 製備42 4-甲脒基-六氫吡啶-1-甲酸第三·丁基酯 將4-(N-經基甲脉基）-六氫η比咬-1-甲酸第三-丁基酯（9·? g 1.00當量；39·9 mmoles)溶於甲醇（300 mL)中並添加乙酸（2 £ 當量，79.73 mmoles ; 4.6 mL)及經曱醇洗滌之拉尼鎳 (Raney Nickel)(2.7 g)。將該反應物加熱至50°C，隨後用1 ATM氫氣實施氫化4.5小時。經由矽藻土過濾該反應混合 . 物並在低壓下濃縮。將固體懸浮於二乙醚中，過濾並在低 壓下乾燥以獲得1〇·39 g 4-曱脒基-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁 基S旨。 MS (ES): m/z=228 [M+H]。 製備43 4-甲脒基-六氫吡啶-1·甲酸第三-丁基酯乙酸鹽 130520.doc -35- 200848053 向存於乙酸（151111^;261.77 111111〇163)及乙酸酐（0.5111[; 5·29 mmoles)中之4-(N-羥基甲肺基）·六氫吡啶甲酸第三-丁基 S曰（805 mg，1.00 當量；3.31 mmoles)添加 10% Pd/C (0·079 g ; 37.12 pmoles)。在室溫、20 PSI下，實施氫化 7 小時。向該燒瓶中通入氮以提供丨·2 g泡沫。用乙腈濕磨並 過濾以提供270mg (28%)白色固體狀產物。 MS (ES): ηι/ζ=228·0 [M+H]。 製備44 Μ4-(3-氣苯基）-1Η_咪唑-2-基】-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 將4-二胺基甲基-六氫吡啶_ 1 -甲酸第三-丁基酯乙酸鹽 (685 mg; 1·〇〇當量；2.38 mmoles)懸浮於二甲基甲醯胺（1〇 mL; 129.33 mmoles)中並添加粉末狀碳酸鉀（14〇〇 mg; 10.13 mmoles)。在室溫下，攪拌1〇分鐘，隨後在室溫下向 該脉中逐滴添加溶於4 mL DMF中之2·溴-1-(3-氣-苯基）-乙 酮（1400 mg ; 6·00 mmoles)。在3 h後，用乙酸乙酯稀釋該 反應物並用50%碳酸氫鈉水溶液洗滌。用硫酸鈉乾燥有機 層，過濾並濃縮為粗製油狀物。使用ISCO層析（經biotage 40M管柱，藉助DCM至6%MeOH/DCM之梯度洗脫）進行純 化。ί辰細適當部分以獲得產率為20%之4-[4-(3 -氣-苯 基）·1Η_咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯。MS (ES): m/z=262.0 [M+H] 〇 將4-[4-(3-氯-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶_丨_甲酸第 三-丁基酯（171 mg ; 472.54 pmoles)溶於二氯甲垸（3 mL · 46·80 mmoles)中並在室溫下緩慢地添加氯化氫（4 mL · 130520.doc -36- 200848053 16.00 mmoles)(4 M HCl，存於二噁烷中）。將該溶液攪拌1 h。在真空中（2xDCM)濃縮以獲得4-[4-(3-氯-苯基）-1Η-咪 °坐-2-基]-六氫吼咬氫氯酸鹽。 MS (ES): m/z=262.0 [M+H]。 製備45-47之化合物基本上可按照製備44中所述來製 備0 製備 化合物 MS (ES): m/z= [M+H] 45 4-[4-(2,4-二敦·苯基)·1Η·咪唑-2-基]-六氫吼啶 氫氣酸鹽 264.0 46 鼠氣酸4_[4-(3-氣-5-氣-苯基坐-2-基]- 六氫0比咬 280.0 47 氫氣酸4-[4-(3•硝基-苯基>1Η-咪唑-2-基]-六 氫°比咬 273.2 47-A 4-(4-(3-溴苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫吼啶小甲 酸第三-丁基酯 408.0 製備48 向存於四氫σ夫喃（43 5 mL)之2%(v/v)乙酸中添加4-氰基六 氫吡啶（7·19 g ; 1.00當量；65.269 mmoles);苯甲醛（1·〇5 當量；68·533 mmoles ; 7.0 mL)隨之三乙醯氧基硼氫化鈉 (1.3當量，84.85 mmoles; 18.73 g)並迅速地攪拌直至完全 混合。用乙酸乙酯稀釋並用飽和碳酸氫納、飽和氯化鈉水 溶液洗滌，經MgS04乾燥、過濾、在低壓下蒸發以獲得 13.0 g油狀物。溶於醚（〜3〇〇 mL)中，過濾並緩慢地添加60 mL 1 M HC1(存於醚中）。在冰浴中冷卻。過濾，用醚沖 洗，在真空下乾燥並收集13.616 g (57·5 1 mmol，88%) 1- 130520.doc -37- 200848053 苄基-六氫°比淀-4-甲腈。 MS (ES): m/z=201 [Μ+Η]。 製備49 氫氣酸1-苄基-六氫°比咬-4-甲亞胺酸甲基g旨 將氫氯酸1-苄基-六氫吼。定-4-甲腈（1〇〇當量；57.3 mmoles ; 13.57 g)溶於75 mL MeOH中並在冰浴中冷卻。用 HC1氣體飽和25分鐘，隨後去除冰浴並攪拌3小時。在低壓 下蒸發以獲得17.47 g (65.0 mmol，113%)氫氣酸1-苄基-六 k 氫σ比。定-4-甲亞胺酸甲基g旨。 MS (ES): m/z=233 [M+H] 〇 製備50 二氫氣酸1-苄基-六氫吡咬-4-甲肺 將氫氣酸1-苄基-六氫吡啶-4-甲亞胺酸甲基酯（17 47 g 1.00當量；65 mmoles)溶於存於甲醇（〜350 mL)之2M氨 中。用氨氣飽和15 min。攪拌1 8小時並蒸發。用乾燥甲醇 , 共蒸發。在高真空下乾燥以獲得18.29 g (63 〇3 mm〇1， 97%)淺黃色固體狀二氫氯酸卜苄基-六氫吡啶甲肺。 MS (ES): m/z=218 [M+H]。 製備51 1-节基_4_[5-(3-氣-4-氟苯基）-1Η_味嗤-2-基】六氩π比淀 將二氫氣酸1-苄基-六氫咄啶·4·甲脒（2 g; ι·〇〇當量； 6·89 mmoles)溶於二甲基甲醯胺（9〇 mL)中。添加粉末狀碳 酸鉀（4當量；27.56 mmoles ; 3.8095 g)並升溫至〜45°c。經 40分鐘逐滴添加存於8 mL DMF中之3-氯-4-氟-溴苯乙酮 130520.doc -38- 200848053 (2·00當量；13.782 mmoles ; 3.5366 g)。用 5〇 mL乙酸乙酯 稀釋，攪拌5 min並過濾。蒸發並藉助乙酸乙酯/飽和碳酸 氫納分層’依次用水及飽和氣化鈉水溶液洗滌有機層。用 MgSCU乾燥，過濾並蒸發至紅色泡沫。藉由急驟矽膠及 0-10% MeOH/CAN純化。彙集各部分以獲得ι ·9772 g (5.346 mmo 卜 78%) 1-苄基-4-[5-(3-氯 _4_ 氟-苯基）-1Η-咪 峻-2 -基]-六氫°比咬。 MS (ES): m/z=370 [M+H]。 製備52-53之化合物基本上可按照製備5 1中所述來製 備0 製備 化合物 MS (ES): m/z=[M+H] 52 1-卞基-4-[5-(3,4·二氣-苯基)-1Η-口米。坐-2_ 基]-六氫°比咬 368 53 1-苄基-4-[4-(4-氟-苯基)-1Η_咪唑基]-六 氫吼咬 336.0 製備54 二氮氣酸4-[5-(3 -氣-4-氣-苯基）-1Η -味嗤-2-基】"·六氮11比咬 將1-苄基-4-[5-(3-氣-4-氟-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫口比 口定（1.00當量；1.595 mmoles ; 590 mg)、N，N，N’，N’-四甲基-1，8-萘二胺（1當量；1.595 mmoles ; 341.8 mg)溶於 1，2-二氣 乙统（12 mL)中並在冰浴中冷卻。添加氣甲酸卜氯乙基酯（3 當量；4.785 mmoles ; 5 1 7 pL)並升溫至回流達1小時。冷 卻至RT並經由1 cm石夕膠過濾、塞過渡，用DCM沖洗。蒸發 以獲得760 mg泡沫。溶於MeOH中並加熱至回流6小時。蒸 130520.doc -39- 200848053 發以獲得556.3 mg (99%)黃色泡沫狀二氫氣酸‘[、（弘氯一· 氟-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫吼啶。 MS (ES): m/z=280 [M+H]。 製備55-56之化合物基本上可按照製備54中所述來製 備0 製備 化合物 MS (ES): m/z=[M+H] 55 一氲氯酸4-[5-(4-氣-3-三氟曱基-苯基)_ 1H-11 米唆-2-基]-六氮外匕淀 330 56 '一氮氣酸4-[5-(3,4-二氣"·苯基米唾-2_ 基]六氫°比0定 297 製備57 4_[4_(4·氟-苯基）-1Η_咪唑-2·基卜六氫”比啶 在 30°C 及 60 PSI 下將存於 20% Pd(〇H)2/C (Pearlman，s 觸 媒）（0.15gm)中之1-苄基-4-[4-(4_氟-笨基）-lH-咪唑-2_基]-六氫吼啶在125 mL 2B EtOH中氫化23 h。過濾並濃縮以獲 得油狀標題化合物。 MS (ES): m/z=246.0 [M+H] 〇 製備58-59之化合物基本上可按照製備57中所述來製 備。 製備 化合物 MS (ES): m/z= [M+H] 58 4-[4-(4-M乙氧基-苯基）-iH-味。坐·2· 基]-六氫σ比咬 258.0 59 4-[4-(3,4-二氟-苯基）-1^1-咪唾-2-基]-六氫吡啶（nh4co2) 264.0 130520.doc -40· 200848053 製備60 4-(4-(3-(三氟曱基）苯基）_1H[•咪唑_2-基）六氩吡啶-1-甲酸第 三·丁基S旨 在氮氣氛下向CH2C12 (25 mL)及THF (25 mL)之溶液中依 次添加4-(4-(3-(三氟曱基）苯基）-iH-咪唑-2-基）六氫吼。定 (795 11^，2.69 111111〇1)以及三乙胺（0.985 1111^，5.64 111111〇1)及 二碳酸二第三丁基酯（650 mg，2.96 mmol)。將該混合物在 室溫下攪拌過夜。在真空中濃縮該混合物並藉由矽膠層析 (120gRediSep管柱，藉助〇%至1〇〇%之乙酸乙酯/己烷的梯 度洗脫，經過35 min，85 mL/min)純化該殘留物以提供灰 白色固體狀4-(4-(3-(三氟曱基）苯基）-1Η-_σ坐-2-基）六氫口比 啶·1-甲酸第三-丁基酯（550 mg，51%)。 MS (APCI): m/z=396 [M+H]。 製備6 1之化合物基本上可按照製備60中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 61 4-(4-(4·(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫吼 啶-1-甲酸第三··丁基酯 MS (APCI): m/z= 396 [M+H]. 製備62 4-(1_甲基_4-(3-(三氟甲基）苯基）-1Η-咪唑-2·基）六氫吼啶- 1-甲酸第三-丁基酯 向二乙醚（100 mL)中添加4-(4-(3-(三氟甲基）苯基）-1Η-咪 唑-2-基）六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯（540 mg，1.36 mmol)並冷卻至〇 °C。向該混合物中依次添加氫化鈉（55 mg，1 ·5 mmol，60%，存於礦物油中）以及蛾甲烧（0· 142 130520.doc -41 - 200848053 mL，2.72 mmol)。將該混合物在0°C下攪拌1 h並升溫至室 溫。添加THF (40 mL)並將該混合物攪拌12 h。濃縮該混 合物並藉由石夕膠層析（120 g RediSep管柱，藉助〇。/。至iq〇〇/〇 之乙酸乙酯：己烷梯度洗脫’經過40 min，85 mL/min)純化 該殘留物以提供4-(1-甲基_4-(3-(三氟曱基）苯基）-1]9-咪。坐-2_基）六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯（425 mg，76%)。 MS (APCI): m/z=410 [M+H]。 製備6 3之化合物基本上可按照製備6 2中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 63 4-(1-甲基-4-(4-(三氟甲基)-苯基)_1Η-_嗤-2_ 基)六氫吡啶小甲酸第三-丁基酯 MS (APCI): m/z= 410 [M+H] 63-A 4-(4-(3-溴苯基)小甲基-1H-咪唑-2-基)六氫吼 啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS(ES):m/z= 422(M+H) 製備64 二氫氣酸4-(1-甲基-4-(3-(三敗甲基）苯基）喃嗤_2_基）六 氩吡咬 C 在0 C及氮氣氛下，向4-(1-曱基-4-(3-(三氟甲基）苯基）_ 1H-咪峻-2-基）六氫吼啶-1-甲酸第三-丁基酯（4〇〇 mg，11〇 mmol)存於CH2C12 (10 mL)之溶液中添加氯化氫（4 M，存於 1，4-二噁烷中，5 mL，20 mmol)並攪拌2 h。在真空中濃縮 该此合物以^^供一鼠氣酸4-(1 -甲基- 4- (3-(三氣曱其）苯美） ΙΗ-咪嗅-2-基）六氫吡啶（435 mg，>99%)。MS (APCI): m/z=3 1 0 [M+H]。 製備65之化合物基本上可按照在製備64中所述來製備。 130520.doc -42- 200848053 製備 化合物 物理數據 65 二氫氯酸4-(1-甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪 η坐-2-基)六氮0比。定 MS (APCI): m/z= 310 [M+H] 製備66 4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1Η-咪唑_2_基卜六氫啦啶-1- 甲酸第三·丁基酯 . 向4-(2-氧代基-2-(4-(三氟甲基）苯基）乙基胺基甲酸基）六 氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯（600 mg，1.00當量；1·39 ^ mmoles)存於1- 丁醇（7 mL)之溶液中依次添加乙酸銨（3.24 g，41.63 mmoles)以及三乙胺（1當量；193.40 μίν)。將該混 合物在1 60 °C下於密封試管中攪拌2小時。藉由用甲苯及 CH2C12共蒸發來在真空中去除溶劑。將殘留物重新溶於 EtOAc中，用水洗滌，經Na2S04乾燥並濃縮。藉由矽膠層 析純化殘留物，用EtOAc :己烷（6··4)洗脫以獲得280 mg (49%產率）標題化合物。 LCMS: MS(IS): m/z=314.2 [M+H]。 I 製備67-73之化合物基本上可按照製備66中所述來製 備0 製備 化合物 物理數據 67 4-[4-(4-氣-3-二氣曱基-苯基)-1Η- 口米°坐-2-基]-3-甲基-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS(IS): m/z=428.2 [M+H] 68 4-[4-(4-鼠基-苯基)-1H-17米σ坐-2-基]-六鼠°比 啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS (ES): m/z= 353.2 [M+H] 69 4-[4-(4-亂-3-二氣甲基-苯基)-5·甲基-1Η-口米 唑-2-基]-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS (ES): m/z= 428.2 [M+H] 130520.doc -43 - 200848053 製備 化合物 物理數據 70 4-[4-(3-氣基-苯基米嗤-2-基]-六鼠ϋ比 啶-1·甲酸第三-丁基酯 MS (ES): m/z= 353.2 [M+H] 71 4-[4-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六鼠ϋ比σ定-1-曱酸弟二-丁基酉旨 MS (ES): m/z= 430.2 [M+H] 72 4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2- 基]-六鼠°比咬-1-甲酸第二-丁基酉旨 MS (ES): m/z= 414.2 [M+H] 73 4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六藏^比17定-1-甲酸弟二"丁基酉旨 MS (ES): m/z= 414.2 [M+H] 73-A 4-(5-曱基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑 -2-基]-六藏/比唆-丨-甲酸第二-丁基酉旨 MS(IS): m/z= 409.2 [M+H] 73-B 4-(5-甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑 -2-基]六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS(IS): m/z^ 409.2 [M+H] 73-C 4-(5-甲基-4-(3-氯-4-氟苯基)·1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 MS(IS): m/z= 393.2 [M+H] 73-D 4-(5-甲基-4-(3-氟苯基)_1Η-咪唑-2-基]-六氫 吡啶-1-曱酸第三-丁基酯 MS(IS): m/z= 359.2 [M+H] 製備74 4·[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1-甲基_1Η·咪唑-2-基]-六氫 吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 在Ν2下，將4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫°比°定-1_甲酸第三-丁基酯（860 mg，2.08 mmoles)溶於 二乙醚（100 mL)中。將該溶液在冰浴中冷卻至0°C並添加 氫化鈉（1.1當量；2.29 mmoles ; 91.52 mg)，繼而注射峨曱 烧（2,00當量；4.16 mmoles; 259.12 μί)。將該混合物在0 °C下攪拌1小時且隨後升溫至室溫。向以上混合物中注入 四氫呋喃（40 mL)且隨後在室溫下攪拌過夜。在低壓下濃 130520.doc -44- 200848053 縮該混合物且隨後將殘留物溶於Et〇Act。用飽和氣化鈉 水溶液洗滌。藉由矽膠層析純化殘留物，用Et〇Ac:己烷 (7:3)洗脫以獲得270 mg (30%產率）標題化合物。 MS (IS): m/z=428.2 [M+H]。

製備74-A 4-(1，5_二甲基_4_(4-(三氟曱基）笨基）_1Η-咪唑基】六氫 吡啶-1_甲酸第三-丁基酯 向4-(5-二曱基-4-(4-(三氟甲基）苯基）_1Η-咪唑_2_基]_六 氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯（300 mg，〇·73 mm〇les)存於二 曱基亞石風（2 mL)之溶液中添加新鮮的粉末狀氫氧化鉀 (193·45 mg，2_93 mmols，4當量）。將該混合物在室溫下 授拌1小時並添加一份峨甲烧（1 5 6 mg，1 · 5當量）。在授拌3 小時後，用AcOEt稀釋，用飽和氯化鈉水溶液洗滌並經 Na2S〇4乾燥。藉由矽膠層析純化殘留物，用Et〇Ac :己烷 (6:4)洗脫以獲得210 mg (68%產率）標題化合物。MS (IS): m/z=423.2 [Μ+Η] 〇 製備74-B至74-F之化合物基本上可按照製備74-A中所述 來製備。 製備 化合物 MS (IS):m/z= [M+H] 74 - B 4-(1,5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1沁咪唑-2-基]-六氯吼17定-1-甲酸第三-丁基酉旨 423.2 74-C 4-(4-(3 -氯-4-(氟苯基)-1，5-二甲基 基]-六鼠°比咬-1·甲酸弟二-丁基酉旨 407.2 130520.doc -45- 200848053 製備 化合物 MS (IS):m/z= [M+H】 74-D 4-(4-(3-亂苯基)-1，5-二甲基-1H-味嗤-2-基]-六 氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯 373.2 74-E 4-(4-(3,4-二氣苯基)-1·異丙基-1H-^嗤-2-基） 六氮ϋ比σ定-1-甲酸弟二-丁基酉旨 74-F 4-(1-異丙基-4-(3-(二氣甲基)苯基)-1Η-口米唾-2_ 基)六鼠°比17定-1-甲酸第二-丁基酉旨 製備75 氮氣酸4-[4-(4 -氣-3-二氣甲基-苯基）-1Η -味嗤-2 -基]-六氮吼咬 向4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫。比 0定-1-甲酸第三-丁基酯（275 mg; 665.19 μ moles)存於甲醇 (1 0 mL)之溶液中添加氣化氫（2 mL，12 Μ水溶液）。將該 混合物在室溫下攪拌過夜且隨後濃縮並乾燥以獲得21 0 mg (90%產率）標題化合物。 MS (IS): m/z=314.2 [M+H]。 製備76-83F之化合物基本上可按照製備75中所述來製 備。 製備 化合物 MS (IS): m/z= [M+H] 76 二氫氣酸4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-3-甲基-六鼠17比17定 328.2 77 氮氯酸4-[4-(4-氣-3-二氣曱基-苯基)-1-甲基-1H-口米°坐-2-基]-六氮0比咬 328.2 78 4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-咪唑-2- 基]六氮吼17定二氮氯酸鹽 328.2 79 4-(2-六氮ϋ比咬-4-基-1H-味嗤-4-基)-卡猜二鼠氣 酸鹽 253.2 130520.doc -46- 200848053 製備 化合物 MS (IS): m/z= [M+H] 80 3-(2-六氫吡啶-4-基-1H-咪唑-4-基)-苄腈二氫氯 酸鹽 253.2 81 4-[4-(2-氣-5-二氣甲基-苯基)-1Η-口米σ坐_2_基]-六 氫吼啶二氫氯酸鹽 330.2 82 4-[4-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六 氫°比°定二氫氯酸鹽 314.2 83 4-[4-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)·1Η-咪唑-2-基]•六 氫吼咬二氫氯酸鹽 314.2 83-A 4-(1，5-二甲基-4-(4-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑-2- 基]-六氫。比啶氫氣酸鹽 323.2 83-B 4-(1，5-二甲基-4-(3-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑-2- 基)六氫σ比σ定氫氣酸鹽 323.2 83-C 4-(4-(3-氯-4-氟苯基)-1，5-二甲基-1Η-咪唑-2-基） 六氫°比咬氫氯酸鹽 307.2 83-D 4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)六氫 °比°定氫氯酸鹽 273.2 83-E 4·[4-(3,4-二氣-苯基)·1-異丙基-1H-^。坐-2-基]_ 六氫ϋ比咬氫氯酸鹽 83-F 4-(L·異丙基-4-(3-(三氟甲基）苯基)-1Η·咪唑-2- 基)六氫吼啶氫氯酸鹽 83-G 氫氯酸4-(4-(3-溴苯基)小甲基-1Η-咪唑-2-基)六 氫吡啶 322 製備84 i-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-哌嗪 將4-苄基哌嗪-1-甲脒半硫酸鹽（500 mg，1·00當量； 1·580 mmoles);碳酸納（4當量，6.321 mmoles);二甲基甲 醯胺（10.5 mL)及丙酮（110. mL)加熱至回流。經15分鐘逐 滴添加存於4 mL丙酮中之2-溴-1-[4-氟-3(三氟甲基）苯基]- 130520.doc -47- 200848053 1-乙酮（1·00當量；1.580 mmoles ; 450 mg)並將該反應物攪 拌30分鐘，隨後冷卻至室溫。過濾該反應物並在低壓下濃 縮，用乙酸乙酯稀釋，用20%飽和碳酸氫鈉、水及飽和氯 化鈉水溶液洗滌。經MgS04乾燥，過濾並在低壓下蒸發。 藉助矽膠及2-5% 1M NH3-MeOH/DCM純化以獲得262.0 mg (〇·678 mmol，43%) 1-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1H-咪唑_2_基]-哌嗪。 MS (ES): m/z=405 [M+H]。 製備85 1-[5-(4-氟-3_三氟甲基·苯基）-1Η-咪唑-2-基】-哌嗪 組合1-苄基-4-[5-(4-氟-3-三氟曱基-苯基）-1Η-咪唑-2_ 基]-哌嗪（260 mg，1·00 當量；0.643 mmoles)、20 wt%

Pd(OH)2/C Degussa E101NE/W (250 mg);甲醇（10 mL)、 曱酉夂、I女鹽（20當置’ 12.8 mmoles; 810 mg)並加熱至50 C ’ 2小時，隨後冷卻至室溫。經由ceiite⑧過濾該反應混 合物，在低壓下蒸發並藉助甲醇共蒸發一次以獲得195·2 mg (0·621 mmol，97%)黃色泡沫狀三氟甲基_ 本基）-1Η-咪唾-2-基]-派嗪。 MS (ES): m/zyiS [M+H]。 製備86 1_节基_4_丨4_(3_氣-4-氟苯基）q_乙基」H_咪唑士基】-六氫吡啶 向粉末狀氫氧化鉀（1.5當量，1217 mm〇les ; 68 mg)中 添加二甲基亞颯（0·3 Μ，2·7 mL)。添加^苄基_4_[5_(3_氯_ 4-氟-苯基）_1H-咪唑-2_基]-六氫吡啶（3〇〇 mg，ΐ·〇〇當量； 130520.doc -48- 200848053 0.8 11 mmoles)，經8 min逐滴添加礙乙烧（i · 1當量，〇 892 mmoles ; 71 μί)。將該反應物擾拌60分鐘，隨後用水（120 mL)及飽和氯化鈉（25 mL)稀釋且用DCM萃取四次。依次用 水及飽和氯化鈉水溶液洗滌有機萃取物並用MgS04乾燥。 過慮並用石夕膠及1 0%甲醇/乙腈純化以獲得262 mg (0.659 mmol’ 81%) 1-节基-4-[4·(3 -氯-4-氟-苯基）·ι_ 乙基口米 峻-2-基]-六氫吼α定。 MS (ES): m/z=398 [Μ+Η]。 製備87-89之化合物基本上可按照製備86中所述來製 備。 製備 化合物 MS (ES): m/z= [M+H] 87 1 -苄基冰[4-(3-氯·4·氟-苯基)小甲基-1H-咪唑-2- 基]-六氫吼唆 384 88 1-苄基-4-[4-(3-氣-4-氟-苯基)小異丙基-1Η-咪 σ坐-2-基]-六鼠0比0定 412 89 1-苄基-4-[4-(3,4-二默-苯基)小甲基-1Η_咪唑-2-基]-六氫吼唆 412 製備90 氮氣酸4-[4·(3-氣-4 -襄-苯基）-1-乙基-1H-味嗤-2-基】-六氮11比咬 將1-苄基_4-[4-(3-氣-4-氟-苯基）-1-乙基-1H-咪唑-2-基]-六氫 σ比咬（263.3 mg 5 1.00 當量；0.662 mmoles)及 N，N，N’，N’-四甲基-1，8-萘二胺（0.05當量，0.033 mmoles， 7.0 mg)溶於1，2-二氯-乙烷（5 mL)中並在冰浴中冷卻。添加 氯甲酸1-氯乙基酯（1·2當量，0.794 mmol ; 〇·〇86 mL)。將 130520.doc •49- 200848053 該反應物在冰浴中攪拌10分鐘，隨後加熱至回流，20分鐘 並蒸發至乾燥。將殘留物溶於甲醇（5 mL)中並回流45分鐘 且蒸發至乾燥以獲得268 mg (0.779 mmol，11 8%)氫氯酸4-[4-(3 -氣-4-氣-苯基）-1 -乙基-1Η·味°坐-2-基]-六鼠°比σ定。 MS (ES): m/z=308 [Μ+Η]。 製備91-93之化合物基本上可按照製備90中所述來製 備0 製備 化合物 MS (ES): m/z= [M+H] 91 氫氯酸4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)小甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫0比17定 294 92 氫氣酸4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)小異丙基-1H-咪唑-2-基]-六鼠吼咬 440.2 93 4-[4-(3,4-二氟-苯基)小甲基-1H_咪唑-2-基]-六 氫17比咬 278.0 製備94 4 -氣-5-氣- 7H -π比哈并[2,3-d]^咬 組合 4-氯 σ比嘻并[2,3-d]口密唆（2.985 g，19.40 mmol)、[1-(氯曱基）-4-氟-1，4-二氮鏽二環[2·2.2]辛烷雙（四氟硼酸鹽）] (Selectfluoro)(10.523 g，29.704 mmol)]、乙腈（200 mL)及 乙酸（40 mL)並加熱至70°C，24小時。藉由HPLC監測初始 材料損失，隨後濃縮。添加兩份甲苯（50 mL)並蒸發。經 由矽藻土墊過濾粗製材料，用1:1 EtOAc/CH2Cl2洗滌。最 後，濃縮該濾液並藉助矽膠管柱進行層析，用 CH2Cl2/MeOH [0-10% MeOH梯度]洗脫。藉由MS檢查各部 130520.doc -50- 200848053 分並組合產物部分以提供1.931 g (5 8%) 4-氣-5_氟-7H-吡咯 并[2,3-dp密咬。 MS (ES): m/z=172 [M+H] 〇 製備95 4-氣_111-0比嗤并[3,4_(1]峨咬 向別嘌呤醇（20 g，146.94 mmoles)存於甲苯（205.71 mL) 之溶液中添加磷醯氯（68.27 mL，734.68 mmoles)及二異丙 基乙基胺（56.38 mL，3 23.26 mmoles)並將該混合物在8〇 下加熱2小時。在真空中去除一半溶劑並在4°c下將該混合 物注入2 Μ填酸氫二钟（734.68 mL，1.47 moles)存於水之 混合物中。將該混合物在室溫下攪拌過夜。經由矽藻土墊 過濾出沉澱且接下來用EtOAc洗滌之。分離濾液，用更多 EtOAc洗滌水性層，結合有機層，經MgSCU乾燥之，過濾 並在真空中濃縮以獲得黃色固體狀4-氯-1H-吡唑并[3,4-d] 嘧啶（16 g，70·45%產率）。 MS (APCI): m/z=155.1 [Μ+Η]。

製備9S-A 4,6-二氣嘧啶·5-甲醛 在圓底燒瓶中填充DMF (8.9 mL，1.3 eq)並冷卻至〇。〇。 在0°C下向該反應物中逐滴添加P〇Cl3 (32.6 mL，4_0 eq>。 將該反應物質在〇 °C下攪拌1 h。向該反應物質中填充4，6 —二 羥基嘧啶（10.0 g，1·〇 eq)並使其緩慢地到達室溫。將該反 應物質回流4 h並藉由TLC監測該反應（1〇%丙酮，存於 DCM中）。在真空下》辰縮该反應物質並將該濃縮反應物質 130520.doc -51 - 200848053 傾倒至碎冰上。用二乙醚萃取該產物並用飽和氣化鈉水溶 液洗滌。用無水硫酸鈉乾燥有機層並在真空下濃縮之以獲 取淺黃色固體狀產物（6.2 g，40%)。

製備95-B 1-(4,6-二氣嘧啶-5-基）丙-1-醇 在圓底燒瓶中填充4,6-二氯·嘧啶-5-甲醛（2.5 g，1.0 eq) 及甲苯（50 mL)。將該反應物質冷卻至-l〇°C。在-10°C下， 逐滴添加乙基溴化鎂（3 M)之THF溶液（5.1 mL，1.1 eq)。 ^ 在1 h内使該反應物質緩慢地到達RT。向該反應物質中填 充冷氯化銨溶液並用二乙醚萃取。用飽和氣化鈉水溶液洗 滌醚層。用無水硫酸鈉乾燥醚層並在低壓下濃縮之以獲得 期望產物（2.3 g，79.3%)。 製備95-C之化合物基本上可按照製備95-B中所述來製 備。 製備 化合物 95-C 1-(4,6-二氣0密0定-5-基)乙醉

製備95-D 4-氣-3-碘-1H·吡唑并[3,4-d】嘧啶 在圓底燒瓶中填充4-氯_1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶（6.1 g， 1.0 eq)、N-碘琥珀醯亞胺（NIS)(2155 g，2·〇 eq)及 DMF (213.5 mL)。將該反應物質在5(rc下攪拌16 h。藉由 TLC(10%丙酮，存於DCM中）監測該反應。在低壓下濃縮 該反應物質。填充乙酸乙酯並用水及飽和氯化鈉水溶液洗 滌。用無水硫酸鈉乾燥有機層並在低壓下濃縮有機層以獲 130520.doc -52- 200848053 得心氯-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶（6.8 g，61.43%)。

製備95-E 4-氣-3-((三甲基甲矽烷基）乙炔基）-1]Η-吡唑并[3,4-d】嘧啶 在圓底燒瓶中於氬氣氛中填充4-氯-3-碘-1Η-σΛ唑并[3,4-引口密咬（5.4§，1.0^、三甲基甲矽烷基乙炔（1 1.347 §、 6·〇 eq)、Cul (1.833 g、0.5 eq)、TEA (2.68 mL、1.0 eq)、 DMF (67.5 mL)及THF (202.5 mL)。將該反應物質在氬氣氛 中攪拌30 min。填充（PPh3)4Pd (2.225 g，0.1 eq)並將該反 應物質在35°C下攪拌3 h。藉由TLC (10%丙酮，存於DCM 中）監測該反應。在低壓下濃縮該反應物質。填充乙酸乙 酉曰並用飽和碳酸氫納溶液、水及飽和氣化納水溶液洗滌。 用無水硫酸鈉乾燥有機層並在低壓下濃縮有機層。藉由管 柱層析（石夕石100 — 200目，DCM-丙酮）純化該化合物以獲得 期望產物（1.81 g，36.14%)。 製備96 環丙基-(4,6-二氣·嘧啶-5-基）-甲醇 在-78°C下，於氮氣氛中，向二異丙基胺（3 72 g，36 () mmol)存於50.0 mL THF之冷卻溶液中緩慢地添加n_BuU (2·37 g，36·0 nmol)。將該反應混合物在相同溫度下授拌 30 min，隨後添加溶於15 m]L thF中之4,6-二氯嘧咬（5 〇 g，33·〇 mm〇l)。將所得反應混合物在_78°C下再攪拌3〇 min ’隨後添加環丙烷甲醛（2·58 g，36 8 mm〇1)。使該反應 此合物升溫至室溫。添加5 〇·〇 mL水並用乙酸乙酯（3 χ 〇 mL)萃取有機部分，用飽和氣化鈉水溶液洗滌，隨後經無 130520.doc •53- 200848053 水硫酸納乾燥。在低壓下於真空中濃縮以獲得環丙基· (4,6-—氯-%口定-5-基）-甲醇（4.0§，54%產率）。]^8(八？(1!1): m / z=2 2 0 [ N1+Η ] 〇 製備97 環丙基-(4,6-二氣_嘧啶-5-基）-甲酮 在〇°C下向環丙基-(4,6-二氣_嘧啶-5-基）·甲醇（4 〇 g， 1 8·2 mmoles)存於80.0 mL丙酮之混合物中逐份添加氧化鉻

(VI)(5.84 g，58.4 mmoles)並在（TC 下攪拌 30 min。接下 來’添加異丙醇以淬滅過量試劑且在室溫下再攪拌U min。冷卻至（TC並傾倒入飽和NaHC〇3溶液中。經由 Celite®床過濾，用乙酸乙酯（3x50 mL)萃取並用飽和氯化 鈉水溶液洗滌合併有機層。乾燥並在低壓下濃縮以獲得無 色油狀標題化合物（2.0 g，產率50%，9.2 mmol)。MS (ES): m/z=218 [M+H]。 下列製備基本上可按照製備97中所述來製備。 製備 化合物 97-A 1-(4,6-二氣嘧啶冰基)丙+酮 97-B 1-(4,6-二氯。密唆-5-基)乙酮 製備98 虱-3-環丙暴 在室溫下，向溶於300 mL THF中之環丙基_(4,6_二氯嘧 咬-5-基）_甲嗣（9_66 g，44·5 mm〇1)緩慢地添加水合和. g, 53.4 mmol)並攪拌4小時。在完成該添加時，使該反應 混合物在水與乙酸乙醋之間分配，收集有機層，用飽和氣 130520.doc -54- 200848053 化鈉水溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且在真空中濃縮。藉 由使所得標題化合物經過短矽膠（60-120網目）墊來純化 之，使用氣仿/甲醇（97:3)作為洗脫劑。 MS (ES): m/z=195 [M+H]。 製備99 4-(3·三氟甲基_苯基）_1H咪唑 向密封試管中添加甲醯胺〇 5 mL ; 32,72當量；376.99 mmoles ; 15·00 mL ; 16.98 g)及 2-溴-1-(3-三氟甲基-苯基）一 乙酿1(3.077 g, 1·〇〇 當量；η」] mm〇les ; 3.08 g)並加熱至 185°C ’ 3小時。將該反應物傾倒入NaHC〇3中並用Et〇A_ 釋，用水、飽和氯化鈉水溶液洗滌並經NajO4乾燥，過濾 且濃縮至乾燥。獲取粗製混合物並藉由急驟矽膠層析純 化，用二氣甲烷（DCM)/甲醇(M〇%洗脫。收集產物部分並 去除溶劑以獲得4-(3-三氟甲基_苯基）_1H_咪唑（1373 g ; 0·56當量；6.47 mmoles ; 1.37 g ; 56· 16%產率）。 MS (ES): m/z=213.0 [M+H]。 製備1 00之化合物基本上可按照製備99中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 100 4-(4-三敗甲基-苯基)-1 Η-味嗤 MS (ES): m/z=213.0 [Μ+Η] 製備101 4-(3·三氟甲基-苯基）-1-(2-三甲基矽烷氧基-乙氧基甲基）_ 1H-咪唑 向250 mL圓底燒瓶（配備有橡膠隔片及氮氣層及攪拌棒） 中添加四氫 σ夫喃（30 mL ’ 368.66 mmoles ; 30.00 mL ; 130520.doc -55- 200848053 26·5 8 g)、4_(3-三氟甲基-苯基）_1H_咪唑（1〇47 g ; } 〇〇 當 量，4·93 mmoles ; 1 ·05 g)並邊擾拌邊將該混合物冷卻至〇 C且保持5 min。向該燒瓶中添加氫化鈉（0.1 38 g; in當 量；5.46 mmoles; 138.00 mg)並將該反應物攪拌2〇 min。 添加2-(二甲基甲碎烧基）乙氧基甲基氣（1.15 mL ; 1 ·3 1當 量；6.49 mmoles ; 1.15 mL ; 1.08 g)並使反應物升溫至室 溫。用水稀釋該反應物並用乙酸乙酯萃取該混合物兩次且 丟棄水性相。用NajO4乾燥該材料，過濾、並濃縮至乾燥。 藉由石夕膠急驟層析純化粗製混合物，用乙酸乙酯/己烧（自 10%至60% EtOAc)洗脫。組合適當部分並濃縮以獲得4_(3_ 二氟甲基-苯基）-1-(2-三甲基石夕烧氧基-乙氧基甲基）jh-味 嗤（1.178 g ; 0·70當量；3.44 mmoles ; 1.18 g ; 69.71%產 率）。 M S (E S): (m / ζ ) = 3 4 3 · 2 [ Μ+Η ] 〇 製備102之化合物基本上可按照製備1〇1中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 102 4-(4-三氟甲基-苯基)-1-(2-三甲基矽烷_基_乙氧 基甲基)-1Η-咪唑 MS(ES): (m/z)-343.2 [M+H] 製備103 4-羥基-4-[4-(3-三氟曱基-苯基）>β1_(2_三甲基矽烷氧基乙氧 基甲基）-1Η-咪唑基卜六氫吡啶甲酸第三-丁基酯 向1 00 mL圓底燒瓶（配備有冷卻浴，攪拌棒及氮氣層）中 添加4-(3-二氟曱基-苯基三甲基矽烷氧基-乙氧基甲 基）-1Η_ 咪唑（0.995 g ; 1·00 當量；2 91 _〇les ; 995 〇〇 130520.doc -56- 200848053 mg)、正-丁基鋰（2·8 mL ; 1.54 當量；4·48 mmoles ; 2.80 mL ; 1 ·90 g)及四氫吱喃（30 mL ; 368.66 mmoles ; 30.00 mL ; 26.5 8 g)並邊攪拌邊將該混合物冷卻至-78°C且保持3〇 min。添加N-第三-丁氧基羰基-4-哌啶酮（〇·706 g ; 1.22當 量；3.54 mmoles ; 706.00 mg)並使反應物升溫至室溫。用 CHWl2稀釋該反應物，用水洗條，用Na2S〇4乾燥，過濾並 濃縮至乾燥。藉由矽膠急驟層析純化粗製混合物，用乙酸 乙酯/己烷（自10%至50% EtOAc)洗脫。組合適當部分並濃 縮以獲得4-羥基-4-[4-(3-三氟甲基-苯基）-1-(2-三甲基矽燒 氧基-乙氧基甲基）-]^-咪嗤-2 -基]-六氫吼咬-1-曱酸第三-丁 基酯（1.248 g ; 〇·79 當量；2.30 mmoles ; 1.25 g ; 79.29% 產 率）。 MS(ES): (m/z)=542.2 [M+H]。 製備1 04之化合物基本上可按照製備丨〇3中所述來製備。 製備 化合物 物理數 104 4-羥基·4_[4-(4-三氟甲基-苯基)小(2-三甲基矽烷 氧基-乙氧基甲基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吼啶小甲 酸第三-丁基酯 ~^ MS(ES): (m/z)= 542.2 [M+H] 製備105 4-丨4-(3_三氟甲基-苯基）-lH_咪唑基卜六氫吡啶-4_醇 向微波小瓶中添加4-羥基-4-[4-(3-三氟甲基-苯基 二甲基石夕丈元氣基-乙氧基甲基）_iH -口米吐-2 -基]-六氫吼π定 甲酸第三-丁基酯（0.453 g ; 1.00 當量；836.28 pmoles ; 453.00 mg)、乙醇（5 mL ; 85.88 mmoles ; 5.00 mL ; 3.96 130520.doc -57- 200848053 g)及氣化氫（5 mL ; 5·00 mmoles ; 1 N水溶液）並在攪拌時 在微波中加熱至70°C且保持4 h。濃縮該反應混合物以獲 得4-[4-(3-三氟甲基-苯基）_1H-咪唑-2·基]•六氫吼啶_4_醇鹽 (0.32 g ; 1.00當量；832,84 pmoles ; 320.00 mg ; 99.59%產 率）0 MS(ES): (m/z) = 312.2 [M+H]。 製備106之化合物基本上可按照製備ι〇5中所述來製備。 製備 化合物 物理數據 106 4_[4_(4-三氟甲基苯基)_1H—咪唑冬基]_六氫吼 啶-4-醇 MS(ES): (m/z)= 312.2 [M+H] 製備107 I-甲基-4-苯基-1H-味峻 向粉末狀氫氧化鉀（20.81 mmoles; 1·17 g)中添加20 mL 二甲基亞石風（35 mL ; 492.74 mmoles)。在室溫下添加5 -苯 基-1H-咪唑（13.87 mmoles ; 2·00 g)且固體迅速地溶解，獲 得燈色溶液。在撥拌5 min後，添加一份蛾甲烧（1 5.26 mmoles ; 95 0.36 jliL)。在室溫下攪拌4 h。用水稀釋並用乙 酸乙酯（2x)萃取，隨後用飽和氯化鈉水溶液/水（2χ)溶液洗 滌有機部分，經MgSCU乾燥，過濾，蒸發以獲得h71 §黃 色固體。藉由使用ISCO層析（使用biotage 40 Μ管柱）純化 粗製物，藉助0.5% MeOH/DCM至5% MeOH/DCM之梯度進 行洗脫’流速為40 mL/min。乾燥產物部分以獲得1.43 g (65%產率）灰白色固體。（7%之不期望的區域異構 體）MS(ES): (m/z)=159_0 [M+H]。 130520.doc -58 - 200848053 製備108 二氫氣酸4-(1-甲基-4-苯基_1 Η-咪唑-2-基）-六氫吼啶_4_醇 將1-甲基-4-苯基-1H-口米唾（9.05 mmoles ; 1.43 g)溶於無 水四氫呋喃（30·00 mL)中並將該混合物冷卻至-78°C。緩慢 地添加正-丁基鋰（1.30當量；11.77 mmoles ; 7.35 mL)(1.6 Μ，存於己烷中）並將該反應物在_78°C下攪拌30分 鐘，隨後經20 min逐滴添加N_第三-丁氧基羰基-4-哌啶酮 (11.77 mmoles ; 2.34 g)之 THF (20 mL)溶液。攪拌過夜同 時升溫至室溫。用DCM及飽和氯化鈉水溶液/水（50/50)、 (2xDCM)稀釋，隨後經MgS04乾燥。過濾、並濃縮至3·8 g粗 製黃色油狀物。藉由使用ISCO層析經Biotage 40 Μ管柱純 化該反應物，用50:50 EtOAc:Hex洗脫，流速為40 mL/min。將產物部分濃縮成2.00 g白色固體狀4-羥基-4-(1-曱基-4-苯基-1H-咪唑-2-基）-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基 酯。ES-MS (Μ+Η)=3 5 8·3。將其溶於5 mL二氣甲烷中並在 室温下緩慢地添加氣化氫（20.00 mmoles ; 5.00 mL)(4 Μ， 存於二噁烷中）。在大約5 min後，該溶液變得渾濁並添加3 mL甲醇以再次獲得該反應物之溶液。在1 h後，該反應完 成95%。添加1 mL 4 M HC1(存於二噁炫中）並擾拌i 5 min。濃縮成2·1 g淺黃色固體狀二氫氣酸4-(1-甲基-4-苯 基-1H -味嗤-2 -基）-六氫°比咬-4 -醇。]VIS(ES): (m/z)=258,3 [M+H]。 製備109 4_氣-5-蛾-7H-吡略并[2,3_d]嘧啶 130520.doc -59- 200848053 將6 -氣-7-脫氮嘌吟（10.75 g，70 mmol)及N-埃琥珀醯亞 胺（1 6.8 g，75 mmol)溶於400 mL乾燥DMF中並在環境溫度 下置於黑暗中過夜。蒸發該溶劑。使該黑色殘留物在5〇〇 mL乙酸乙酯與150 mL 10% Na2S03之間分配。用1〇〇/0 Na2S03 (2x1 00 mL)、飽和氯化鈉水溶液（1 50 mL)洗腺有機 部分，經Na2S04乾燥並蒸發。自乙醇結晶該黃色殘留物以 產生16.2 g (83%)灰白色晶體狀4-氣-5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]哺咬。蒸發該母液，溶於甲苯中並藉由石夕膠（7χ4 cm)急 驟層析純化。用曱苯洗滌該管柱直至洗脫液為無色，隨後 用存於曱苯中之5%乙酸乙酯洗脫標題化合物以獲得另外 3·5 g產物。 製備110 4·(4_氣-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶基）_2_甲基丁-3_炔_2-醇 在RT下，於氬氣氛中填充4-氣-5-碘-7H-咄咯并[2,3-d]。密 咬（5.0 g，1.0 當量）、2-甲基-3-丁炔-2-醇（9.02 g，6.0 當 置）、TEA (1.68 g，0·93 當量）、Cul (1.36 g，〇·4 當量）、 DMF (62.5 mL)及THF (187.5 mL)。將該反應物質在尺丁下 於氬氣氛中攪拌5 min。填充Pd(PPh3)4 (1.03 g，〇·〇5當量） 並將该反應物質在45 C下攪拌16 h。藉由TLC (65% CHCU: 23%己烷：12%丙酮）監測該反應。在真空下濃縮該 反應物質。填充乙酸乙酯並用水及飽和氣化納水溶液洗 滌。用無水NaeCU乾燥有機層並在真空下濃縮之。在65% CHCh : 23%己烷：12°/。丙酮中結晶該化合物以獲得期望化 合物（3.35 g，79.7%)。 130520.doc -60 - 200848053 製備111-112之化合物基本上 了知:照製備11〇中所述來製 備

化合物 3 H7H-吡咯并[2>d]哺 醇 、 I氯_5-三甲基矽 [2,3-d]-嘧啶 製備113 物理數據

4_氣_5_(3_甲基！（三甲基甲梦燒基氧基）丁-1-炔基）_7Η·吼 咯并[2,3-d]嘧咬 在RT下，填充4-(4j_7H-吼咯并[2,3-d]喷啶-5-基）-2-甲 基丁-3_炔-2_醇（3·35 g，1·0當量）、咪唾（2 9 g，3 〇當量）、 TEA (2.16 g，1.5當量）及二乙醚（84mL)。將該反應物質冷 卻至〇°c並添加三甲基曱矽烷基氣（1·53 g，1〇當量）。將該 反應物質在RT下攪拌4 h。藉由TLC監測該反應（5% MeOH，存於DCM中）。填充冷dm水並用二乙醚萃取。用 飽和氯化鈉水溶液洗滌醚層。用無水^^^…乾燥有機層並 在真空下濃縮之以獲得期望化合物（3.00 g，70%)。 製備 化合物 物理數據 114 4-氯_5-(3_(三甲基甲石夕;j；完基氧基)丙小快基)_7Η_ 吡咯并[2,3-d]嘧啶 —-—-_ 實例1 氩氣酸4-(4-(5-(2,4-二氣苯基）《:^-咪 唑-2-基）六氫吡啶-1-基）_1H-吡唑并[3,4-d】-嘧啶 將4 (4 (2,4_ 一氣本基ϋ坐-2-基）六氫°比咬（270 130520.doc -61 - 200848053 mg，0.91 mmol)、4-氯-1H-咣唑并[3,4-d]嘧啶（280 mg， 1·82 mmol)、Et3N (0.63 mL，4·5 mmol)及 2-丙醇（10 mL)之 混合物在90°C下於N2中加熱過夜。將該混合物冷卻至室溫 並傾倒入水（100 mL)中。用CH2C12 (2x200 mL)萃取該混合 物’組合各有機層並用水（5〇 mL)洗滌。乾燥（Na2S04)有機 層’過濾該混合物並在真空中濃縮該濾液。藉由矽膠層析 (25 g Si02，用 CH2C12/CMA 4:1 洗脫，1000 mL)純化該殘 留物以提供4-(4·(5·(2,4-二氯苯基）-1Η-咪唑-2-基）六氫吡 啶-1-基）-1Η-吡唑并[3,4-d]嘧啶（304 mg，80%)。向 4-(4-(5-(2,4-二氣苯基）-1Η-咪唑-2-基）六氫吼啶-1-基）-1Η·吼唑 并[3，4-d]嘧啶（3 00 mg，0.72 mmol)存於甲醇（7 mL)之懸浮 液中添加氫氯酸（2·0 Μ水溶液，0.36 mL，0.72 mmol)。在 真空中將該混合物濃縮至乾燥。將殘留物溶於曱醇（2 mL) 中並添加二乙醚（50 mL)以形成沉澱。過濾出沉澱並用 Et20洗滌濾餅。將該固體溶於甲醇（10 mL)中並在真空中 去除溶劑至乾燥以提供灰白色固體狀氫氯酸4-(4-(5-(2,4-一氣苯基吐-2-基）六氫啦17定-1-基）·1Η-σ比0坐弁[3,4-d]嘧啶（210 mg，65%)。MS (APCI): m/z=414 [Μ+Η]。 基本上可按照在實例1中所述來製備實例2-33之化合 物0 實例 化合物 物理數據 2 氫氣酸4-(4-(4-(4-(三氟曱基)苯基)-1凡咪唑-2-基)六氫叱啶-1-基)_1H-吼唑并[3,4-dh密啶 MS (APCI): m/z= 414 [M+H] 130520.doc -62- 200848053 實例 化合物 物理數據 3 氫氯酸4-(4-(4-苯基-1H-咪唑-2-基)六氫吼啶-1-基)-1Η-。比唑并[3,4-d]嘧啶 MS (APCI): m/z= 346 [M+H] 4 氫氣酸4-(4-(4-(4-氣笨基)-1Η-咪唑-2-基)六氫 口比口定-1 -基)-1H- °比嗤并[3，4-d] 0密口定 MS (APCI): m/z二 380 [M+H] 5 氫氯酸4-{4-[4-(3-(三氟甲基)-苯基)-1H-咪唑-2_基]-六氫吼啶-1-基}-11^比唑并[3,4-d]嘧啶 MS (APCI): m/z= 414 [M+H] 6 氫氯酸4-(4-(4-(4-氟-3-三氟甲基)苯基)-1Η-咪 唑-2-基)六氫吼啶-1-基)-1Η-吼唑并[3,4-d]嘧 啶 MS (APCI): m/z= 432 [M+H] 7 氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1Η-口米。坐-2-基]-六風^比17定_1-基}-7^1-11比略并[2,3-(1] 嘧唆 MS (IS): (m/z)= 431.41 [M+H] 8 氫氯酸6-{4-[5-(4氟-3-三氟曱基-苯基)-1Η-口米峻_2-基]-六鼠 MS (IS): (m/z)= 431.41 [M+H] 9 氫氯酸5·氟-4-{4·[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-711-吡咯并 [2,3-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 449.40 [M+H] 10 氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)小甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶小基丨-ΙΗ-吡唑 并[3,4-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 446.2 [M+H] 11 氫氯酸4-(4-(1-甲基-4-((3-三氟甲基）苯基)-1H-咪唑-2-基）六氫吡啶-1-基>1Η-吼唑并 [3,4-d] 口密咬 MS (APCI): m/z= 428 [M+H] 12 氫氯酸4-(4-(1-甲基-4-((4-三氟甲基）苯基)-1H-咪唑-2-基）六氫吡啶小基)-1Η-吡唑并 [3,4-d]嘧啶 MS (APCI): m/z= 428 [M+H] 13 氫氯酸4-(4-(4-(3-氟-4-(三氟曱基)苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫吼啶-1-基)-1Η-吼唑并[3,4-d] σ密咬 MS (APCI): m/z= 432 [M+H] 14 氫氯酸4_{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1Η-口米嗤-2-基]-3-甲基-六氫吼咬-1-基}-111-。比嗤 并[3,4-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 446.2 [M+H] 130520.doc -63 - 200848053 實例 化合物 物理數據 15 氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基)-1Η-口米。坐-2-基J-3-甲基-六氣ϋ比。定-1-基}-71^-0比洛 并[2,3-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 445.2 [M+H] 16 二氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基)-5· 甲基-1H- 口米σ坐-2-基]-六氮吼。定-1 -基} -7H-σ比 咯并[2,3-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 445.2 [M+H] 17 二氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基)-5_ 甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-111-吡 唑并P，4-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 446.2 [M+H] 18 二氫氯酸6-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-5-甲基-1H-口米°坐-2-基]-六鼠11比17定-1-基}-911-17票 口令 MS (IS): (m/z)= 446.2 [M+H] 19 二氫氯酸4-{2-[1-(3-環丙基-1H』比唑并[3,4-d] ϋ密17定-4-基)-六鼠17比σ定-4_基]-3H-11 米17坐-4-基}_ 苄腈 MS (IS): (m/z)= 411.2 [M+H] 20 二氫氯酸4-{2-[1-(1Η-吼唑并p，4-d]嘧啶-4-基)-六氫吼啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈 MS (IS): (m/z)= 371.2 [M+H] 21 二氫氯酸3-{2-[1-(1Η-吼唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)-六氫吼啶-4-基]-3H-咪唑-4-基}-苄腈 MS (IS): (m/z)= 371.2 [M+H] 22 二氫氯酸3-{2-[1-(3-環丙基-1H-。比唑并p，4-d] 口密°定-4-基)-六鼠°比0定-4-基]-3H-味°坐-4-基}- 苄腈 MS (IS): (m/z)= 411.22 [M+H] 23 二氫氣酸4-{4-[5-(2-氯-5-三氟甲基-苯基)-1 Η-σ米。坐-2-基]-六鼠σ比σ定-1 -基} -1H- °比。坐弁 [3,4-d] 口密咬 MS (IS): (m/z)= 448.2 [M+H] 24 二氫氯酸4-{4-[5-(3-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-味吐-2_基]-六鼠°比°定-1 -基} -1 Η-ϋ比坐弁 [3,4-d]。密咬 MS (IS): (m/z)= 432.2 [M+H] 25 二氫氯酸4- {4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-7沁吡咯并 [2,3-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 432.2 [M+H] 130520.doc -64- 200848053 實例 化合物 物理數據 26 二氫氯酸4- {4-[5-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-111-吡唑并 [3,4-d]嘧啶 MS (IS): (m/z)= 432.2 [M+H] 27 二氫氯酸6-{4-[5-(2-氟-5-二敗曱基-苯基)_ 1H-咪唑-2·基]-六氫吡啶-1-基卜9H-嘌呤 MS (IS): (m/z)= 432.2 [M+H] 28 二氫氯酸3-環丙基-4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基 苯基)·1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-111-吡 唑并[3,4-d>密啶 MS (IS): (m/z)= 472.2 [M+H] 29 二氫氣酸K1H-。比唑并p，4-d]嘧啶-4-基)-4-[4-(3-二氣甲基-苯基)-111-味0坐-2-基]-六氮11比 啶-4-醇 MS (ES): (m/z)= 430.0 [M+H] 30 二氫氯酸1-(1H_吼唑并P，4-d]嘧啶-4-基)-4-[4-(4-三氟曱基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫。比 啶-4-醇 MS (ES): (m/z)1^ 430.0 [M+H] 30-A 二氫氯酸1 -(7Η-吡咯并[2,3 -d]嘧啶-4-基)-4-(4-(3-(三氟曱基)苯基)-1Η_咪唑-2-基)六氫。比 啶-4-醇 ES-MS (M+H)= 429.0 30-B 二氫氯酸1 -(9H-嘌呤-6-基)-4-(4-(3-(三氟甲 基)苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫吼啶-4-醇 ES-MS (M+H)= 430.0 30-C 二氫氯酸1 -(7H」比咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-4-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫。比 啶-4-醇 ES-MS (M+H)= 429.2 30-D 二氫氯酸1 -(9H-嘌呤-6·基)-4-(4-(4-(三氟甲 基)苯基)-1Η-咪唑-2-基)六氫吼啶-4-醇 ES-MS (M+H)= 430.0 31 氫氯酸6-{4-[4-(4-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吼啶小基}-9H-嘌呤 MS 〇ES): (m/z)= 414.0 [M+H] 32 氫氯酸6-{4-[4-(3-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-911-嘌呤 MS (ES): (m/z)= 414.0 [M+H] 33 氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基)小甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-711-吡咯 并[2,3-d]嘧啶 MS (ES): (m/z)= 445.0 [M+H] 130520.doc -65 - 200848053 實例 化合物 物理數據 33-A 二氫氯酸4-(4-(1，5-二甲基-4-(4-三氟甲基)苯 基)-1Η-味嗤-2-基)六氫°比0定-1-基)-1 H-吼。坐 并[3，4-d]嘧啶(二曱基甲醯胺與二異丙基乙基 胺之偶合反應） MS (APCI): m/z= 441 [M+H] 33-B 二氫氯酸4-(4-(1,5-二甲基_4-(3_三氟甲基)苯 基)-1Η·^米嗤-2-基)六氫ϋ比17定-1-基)-1凡°比嗤 并[3,4-d]嘧啶(二甲基曱醯胺與二異丙基乙基 胺之偶合反應） MS (APCI): m/z= 441 [M+H] 33-C 二氫氣酸4-(4-(4-(3-氣-4-氟苯基)-1，5-二甲基-1H-味嗤-2-基）六氫σ比ϋ定小基)_1 坐并 [3，4-d]嘧啶(二曱基甲醯胺與二異丙基乙基胺 之偶合反應） MS (APCI): m/z= 425 [M+H] 33-D 二氫氯酸4-(4-(4-(3-氟苯基)-1，5-二甲基_ 1H-咪唾-2-基)六氫吼17定小基)-1 坐并[3,4-d] 嘧啶 (之偶合反應二甲基甲S胜胺與一異丙基乙基 胺） MS (APCI): m/z= 391 [M+H] 33-E 氫氯酸6-{4-[4-(3,4_二氟-苯基)小異丙基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶小基卜9H_嘌呤 MS (APCI): m/z= 424 [M+H] 33-F 氫氯酸4-{4-[4-(3,4_二氟-苯基)小異丙基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶小基}-1H_吡唑并[Hd] 口密。定 MS (APCI): m/z= 424 [M+H] 33-G 氫氣酸4-{4-[1-異丙基三氟甲基-苯基)-1Η-咪σ坐-2-基]-六氫比咬小基卜比洛并 [2,3-d]嘧啶 MS (APCI): m/z= 455 [M+H] 33-H 氫氣酸4-{4-[1-異丙基三氟曱基-苯基)-1H-咪σ坐-2-基]-六氫0比咬-1-基比嗤并 [3,4-d]嘧啶 MS (APCI): m/z二 456 [M+H] 實例34 氫氣酸4-{4-[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）_1H-咪唑-2-基]-哌 嗪-1-基}-111-。比唑并[3,4_d]嘧啶 130520.doc -66- 200848053 組合l-[5_(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-ΐη-咪唑-2-基]-哌嗪 (195 mg，1.00當量；〇·620 mmoles) ; 4-氯比唾并[3，心 d]嘧啶（1.00 當量；0.620 mmoles ; 96 mg);異丙醇（3 mL);二異丙基乙基胺（1 mL)並在微波反應器中於8〇°c下 加熱60 min。蒸發該反應混合物並藉助矽膠及5% MeOH/DCM純化。組合各部分以獲得213.2 mg (0.494 mmo卜80%) 4-{4_[5-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）_1H-咪唑_2_ 基]-哌嗪吡唑并[3,4-d]嘧啶。將該游離鹼溶於 DCM/MeOH中並添力口 1·〇當量存於_中之1 μ HC1 〇濃縮該 混合物以獲得237.2 mg氫氯酸4-{4-[5-(4-敗-3-三氟甲基-笨 基）-出-咪唑-2-基]-旅嗪-1_基}-111-吼嗤并[3,4-〇1；^密咬。 MS (ES): m/z=443 [M+H]。 基本上可按照在實例34中所述來製備下列化合物。 實例 化合物 物理數據 MS (ES) 35 風氣酸4-{4-[5-(3-氯-4-氟-苯基)_1H-味嗤-2_ 基]-六風定-1 -基} -1 Η-ϋ比唾并[3，4-d]嘴σ定 m/z=398 [M++H] 36 氫氯酸4-{4-[5-(4-氣-3-三氟甲基-苯基)-ΐΗ-咪 嗤-2-基]-六氫口比口定-1-基}-1凡口比。坐并[3,4-d]哺 啶 m/z=348 [M++H] 37 氫氣酸4-{4-[5-(3,4-二氯-苯基)-iH-咪唑-2-基]- 六鼠ϋ 比 0定-1-基}- 坐弁[3,4_d]^^ - m/z=414 [M++H] 38 氫氯酸4-{4-[4-(4-氟-苯基>1H-咪唑-2-基]-六 氫吼啶小基}-1Η-ϋ比唑并[3,4-d]嘧啶 "--- m/z=364.2 [M++H] 39 氫氣酸4-{4-[4-(3-氣-4-氟-苯基)-1_乙基-1H-口米 唑-2-基]•六氫吡啶-1-基}-1沁吡唑并[3,4-d]嘧 啶 --- m/z=426 [M++H] 130520.doc -67- 200848053 實例 化合物 物理數據 MS (ES) 40 鼠氣酸4-{4-[4-(3-氣-4-氣·苯基)-1-甲基-1H-口米 唑-2-基]-六氫吼啶小基丨-ΙΗ-吼唑并[3,4-d]嘧 口定 m/z=412 [M++H] 41 鼠氣酸6-{4-[4-(3-氣-4-氣-苯基)-1-甲基-1H-口米 唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-9沁嘌呤 m/z=412 [M++H] 41-A 3-ί哀丙基-4-(4-(4-(4-氣_3-(二氣甲基)苯基)-1_ 甲基-1H-咪唑-2-基)六氫吡啶-1-基)-1Η-吡唑并 [3,4-d]。密口定 MS (M+H): m/z =486.5 41-B 3-ί展丙基·4-(4·(4-(3,4-二氣苯基)-1-甲基-ΙΗ-11 米 唑-2-基)六氫吼啶-1-基)-1Η-吼唑并[3,4-d]嘧啶 MS (M+H): m/z =436.4 42 鼠氣酸4-{4-[4-(3-氣·苯基)-111-17米嗤-2-基]-六 氫吼啶-1-基}-1Η-吼唑并[3,4-d]嘧啶 m/z=380.2 [M++H] 43 4-{4-[4-(2,4-二氣-苯基)-1Η-味°坐-2-基]-六氣σ比 啶小基}-1Η-吡唑并[3,4-d]嘧啶氫氯酸鹽 m/z=382.0 [M++H] 44 氫氯酸4-{4-[4-(3-氯-5-氟-苯基)-1H-咪唑-2-基]-六氫吼啶-1-基}-1Η-吼唑并[3,4-d]嘧啶 m/z=398.0 [M++H] 44-A 雙氫氯酸4-{4-[4-(3,4-二氣-苯基)小甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶小基}-711-吡咯并[2,3-d] U密Π定 MS (APCI): m/z =395 [M+H] 44-B 雙氫氯酸6-{4-[4-(3,4-二氟-苯基)小甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-9沁嘌呤 MS (APCI): m/z =396 [M+H] 44-C 雙氳氯酸4_{4-[4-(3-氯-4-氟-苯基)小甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫吼啶-1-基}-711-吼咯并[2,3-d] 口密咬 MS (APCI): m/z =411 [M+H] 45 氫氣酸4-{4-[4-(3-氣-4-氟-苯基)小異丙基-1H-咪唑-2-基]•六氫吼啶-1-基}-1沁吼唑并[3,4-d] 。密咬 111^440.2 [M++H] 130520.doc -68- 200848053 實例 化合物 物理數據 MS (ES) 46 氫氯酸4-{4-[4-(3,4-二氟-苯基)-1-甲基-1H-咪 唑-2-基]•六氫吼啶-1-基}-111-吼唑并[3,4-d]嘧 啶 m/z=396.0 [M++H] 47 氩氯酸4-{4-[4-(3,4-二氟-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶吡唑并[3,4-d]嘧啶 m/z=382.0 [M++H] 48 氫氣酸4-{4-[4-(3-三氟曱基·苯基)·1Η-咪唑-2-基]-六氫吼啶比咯并[2,3-d]嘧啶 m/z=413 [M++H] 49 氫氯酸4-{4-[1-甲基-4-(3-三氟曱基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吼啶-1-基卜7H-吼咯并[2,3-d] 口密17定 m/z=427 [M++H] 50 氫氯酸6-{4-[1-甲基·4_(3-三氟甲基-苯基)-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-9沁嘌呤 m/z=428 [M++H] 50-A 4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(1Η-吼唑并 [3，4-d]σ密咬-4-基)六氫σ比唆-4-醇(游離鹼） ES-MS (M+H) =376.3 50-B 4-(1-甲基-4-(3-(三氟甲基）苯基)-1Η_咪唑-2-基)·1-(1Η-吼唑并[3,4-d]嘧啶-4-基)六氫吼啶-4- 醇(游離鹼） ES-MS (M+H) =444.2 50-C 4-(1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)-1-(9Η-嘌呤-6- 基)六氫σ比唆-4-醇(游離驗） ES-MS (M+H) -376.2 50-D 4-(1-甲基-4-苯基-1Η-咪唑-2-基)-1-(7Η-吡咯并 [2,3-d]嘧啶-4-基)六氫吡啶-4-醇(游離鹼） ES-MS (M+H) =375.3 50-E 氫氯酸1-(3 -環丙基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基)-4-(1-曱基-4-苯基-1H-咪唑-2-基)六氫吡咬-4-醇 ES-MS (M+H) =416.3 50-F 氫氯酸6-(4-(4-(3-溴苯基)小甲基-1H-咪唑-2· 基)六鼠°比°定-1-基)-911-。票吟 ES-MS (M+H) =438.0 130520.doc -69- 200848053 實例 化合物 物理數據 MS (ES) 50-G 氣氣酸4-(4-(4-(3_溴苯基)小甲基咪嗤-2- 基)六氫。比唆-1 -基)-1 Η-σ比唾并[3，4-d], σ定 ES-MS (M+H) -438.0 50-Η 氫氯酸4_(4_( 1 _甲基+苯基-1 Η-咪唑基)六氫 呲啶-1 -基)-1Η-咄唑并[3，4-d]嘧啶 ES-MS (M+H) =360.3 50-1 鼠氣酸6-(4-(1-甲基-4-笨基-1H-味峻-2-基)六氫 吡啶-1-基)-9H-嘌呤 工 ES-MS (M+H) =360.3 實例51 6-(4-(4-(3-(三氟甲氧基）苯基）-1H_咪唑-2_基）六氫σ比啶4- 基）-7Η-嘌呤 向2-丙醇（5 mL)中添加4-(4-(3-(三氟甲氧基）苯基）-1Η-咪 唑-2-基）六氫吡啶（200 mg，0.642 mmol)、6-氣嘌呤（105 mg，0.679 mmol)及三乙胺（95 μί，0.681 mmol)。將該混 合物在80°C下加熱3 h。將該混合物冷卻至室溫並在真空 中濃縮。在CH2C12 (10 mL)中濕磨該固體。藉由矽膠層析 (60 g，用40%甲醇/二氣甲烷，0.500 L洗脫）純化殘留固體 以提供6-(4-(4-(3-(三氟曱氧基）苯基）-1Η-咪唑-2-基）六氫吼 唆-l-基）-7Η-σ票吟（179 mg，65%)。 MS (APCI): m/z=430 [M+H] 〇 實例52 4-{4-[4-(4-甲氧基-苯基）-1Η-咪唑-2-基】-六氫吼啶-1·基卜 1H_吡唑并[3,4-d】-嘧啶 將4-氣-1H-呲唑并[3,4-d]嘧啶（135 mg ; 1·1〇當量； 873.45 pmoles)及 4-[4-(4-甲氧基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六 130520.doc -70- 200848053 氫 口比啶（205 mg，1.00 當量；796.63 pmoles ; 205.00 mg)置 於微波小瓶中並使其溶於異丙醇（3 mL ; 39.24 mmoles ; 3·00 mL)中。添加二異丙基乙基胺（〇·5 mL ; 2.87 mmoles ; 500·00 |nL)。在攪拌時於微波中將該混合物加熱 至70°C且保持1 hr。溶於5% MeOH/DCM中並用飽和碳酸 氫納水溶液洗滌之。用硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。使用 ISCO層析（使用biotage 40S管柱）純化，用2.5% MeOH/DCM至10% MeOH/DCM之梯度洗脫，流速為40 mL/min，經過35 min收集。組合各部分以獲得4-{4-[4-(4-甲氧基·苯基）-1Η-η米嗅-2-基]•六氫π比。定小基嗤并 [3,4_d]嘧啶。 MS (APCI): m/z=376.2 [M+H]。 實例53 4-{4-[4-(3_硝基-苯基）-111_咪嗤_2-基】-六氫《比咬_1_基卜111- 0比唑并[3,4-d]-嘧啶 將4-氣-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶（150 mg ; 1.16當量； 970·50 pmoles ; 150.00 mg)及 4_[4-(3-硝基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫吼。定氫氯酸鹽（2 58 mg，1.00當量；835.58 pmoles ; 258.00 mg)置於微波小瓶中並使其溶於異丙醇（3 mL ; 39.24 mmoles ; 3.00 mL)中且添加二異丙基乙基胺 (0.5 mL，2·87 mmoles ; 500.00 pL)。在 Emrys Optimizer微 波儀中將該混合物加熱至70°C，1小時，同時授拌。過渡 並將濾液濃縮成油狀物。組合固體及油狀物並將其溶於 3% MeOH/DCM中。使用ISCO層析經過biotage 40S管柱純 130520.doc 71 200848053 化，用 2·5% MeOH/DCM至 10% MeOH/DCM之梯度洗脫， 流速為40 mL/min。收集各適當的部分，濃縮成油狀物。 將油狀物溶於10% MeOH/DCM中並用碳酸氫鈉水溶液/飽 和氯化鈉水溶液之混合物洗滌3次。用飽和氣化鈉水溶液 洗務合併有機層並用硫酸鈉乾燥。濃縮並在低壓下乾燥以 獲得標題化合物。 MS (APCI): m/z=391.0 [M+H] 〇

實例53-A 4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基）苯基）-1_甲基- ijj·味嗤-2_基）六 氫ϋ比咬-1-基）-3 -甲基比嗤并[3,4-d]嘴咬 在微波小瓶十填充4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1_甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶二氫氣酸鹽（〇·5 g，1·〇當量）、 1-(4,6-二氯-嘧啶-5-基）-乙酮（0.22 g，1.0當量）、TEA (1.2 mL，8.0當量）及異丙醇（5 mL)。在微波儀中將該反應物質 在 80°C 下攪拌45 min。藉由 TLC (10% MeOH ,存於DCM 中）監測該反應。將該反應物質冷卻至0 °C並添加水合肼 (0.07 mL，1·2當量）。緩慢地使該反應物質達RT。在微波 儀中，將該反應物質在80°C下攪拌45 min。藉由TLC監測 該反應（10% MeOH，存於DCM中）。在真空下濃縮該反應 物質。填充乙酸乙酯且隨後用水及飽和氣化鈉水溶液洗 滌。有機層經無水Na2S04乾燥並在低壓下濃縮之。藉由管 柱層析（矽膠60-120網目，DCM-甲醇）純化該化合物。在二 乙中結晶該產物並過渡之以獲得4-(4-(4-(4 -氟- 3- (三氟^甲 基）苯基）-1-甲基-1H -味嗤-2-基）六氫11比咬-1-基）-3 -甲基-1H_ 130520.doc •72- 200848053 口比 口坐并[3,4-d]。密咬（0.254 g，50.29%)。MS (Μ+Η): ιη/ζ=460·5。 基本上可按照在實例53-Α中所述來製備下列實例。 實例 化合物 物理數據 53-Β 3-乙基-4-(4-(4-(4-氟-3·(二氟甲基)苯基)小甲 基-ΙΗ-1^吐-2-基）六氮0比咬-1-基)-11^比也并 [3,4-d]嘧啶 MS (M+H): m/z= 474.6

實例53-C 3 -乙块基_4-(4-(4-(4·氟- 3-(三氣甲基）苯基）-1-曱基-1Η-味 唑基）六氫吡啶-1-基）-1Η-吡唑并丨3,4-d]嘧啶 在微波小瓶中，填充4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1_甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶.2HC1 (0.2 g，1.0當量）、4-氣-3-三甲基矽烷氧基乙炔基-1H_吡唑并[3,4-d]嘧啶（〇 151 g， 1·1當量）、二異丙基乙基胺（〇·72 mL，7.6當量）及異丙醇（6 mL)。在微波儀中，將該反應物質在80°c下攪拌45 min。 藉由TLC (30%丙酮，存於DCM中）監測該反應。濃縮該反 應物質。填充乙酸乙酯且隨後用水及飽和氣化鈉水溶液洗 務。有機層經無水NkSCh乾燥並在低壓下濃縮之。藉由管 柱層析（矽膠100-200網目，DCM-丙酮）純化該化合物以獲 得4-{4-[4_(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-1-甲基-咪唑_2_基]_ 六氫吼啶-1·基卜3-三甲基矽烷氧基乙炔基]H_吡唑并[3，4-d]嘧啶（0.18 g，60.56%)。 在圓底燒瓶中，填充4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基_苯基） 甲基-1H -口米唾-2-基]-六氣σ比σ定_1-基}-3_三曱基秒烧氧基乙 炔基-ΙΗ-口比唑并[3,4-d]嘧啶（0·18 g，1.0當量）、K〇H (〇 〇57 -73 - 1 30520.doc 200848053 g ’ 3·0 當；g)、MeOH (3.7 mL)及 DCM (1.85 mL)。將該反應 物貝在RT下攪拌40 min。藉由tlC (30%丙酮，存於DCM 中）監測該反應。在真空下濃縮該反應物質。填充dcm並 用水及飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機層經無水Na2s〇4乾燥 並在真空中濃縮之以獲得3-乙炔基-4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟 曱基）苯基）-1 _曱基-1H-口米吐-2-基）六氫°比°定-1 -基）-1 m嗅 并[3,4-d]嘧啶（0.074 g，46·07%)。LCMS=470.4 (M+1)。 基本上可按照在實例5 3 - C中所述來製備下列化合物。 實例 化合物 物理數據 53-D 4-(冬(4-(3,4-二氟苯基)·1—曱基-1Η·咪唑冬基） 六氫吡啶小基)_3_乙炔基-1Η-吡唑并[3,4-d] 嘧啶 MS (M+H): m/z= 420.5

實例53_E 4·(4-(4_(4_(4·氟-3·(三氟甲基）苯基）-1-甲基_1H_咪唑_2·基) 六氫吡啶-1-基）-7H-吡咯并丨2,3-d】嘧啶-5·基）-2_甲基丁-3- 炔-2-酵

F

在微波小瓶中，填充4-[4-(4-氟-3-三氟甲基·苯基）-1-甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶二氫氯酸（〇·5 g、1·〇當量）、4- 130520.doc -74- 200848053 氯-3-(3-甲基-3-三甲基矽烷氧基氧基-丁-^炔基吡洛 并[3,4-d]嘧啶（0.47 g、1·0當量）、二異丙基乙基胺（2 mL、 7.6當量）及異丙醇（10 mL)。在微波儀中，將該反應物質在 80°C下搜拌1 h。藉由TLC (1 0% MeOH，存於DCM中）監測 該反應。在真空下濃縮該反應物質。填充乙酸乙酯並用水 及飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機層經無水Na2S04乾燥並在 真空下濃縮之。藉由管柱層析（矽膠60-120網目，DCM-MeOH)純化該化合物。在二乙醚中結晶該產物並過濾之以 獲得期望產物4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基）苯基）-1_曱基 咪唑-2-基）六氫吡啶-1·基）-5-(3-曱基-3-(三甲基甲矽烷基 氧基）丁-1-炔基）-711-吡咯并[2,3-〇1]嘧啶（0.218，23%)。 在圓底燒瓶中填充4-(4-(4-(4 -氣-3-(三氟^甲基）苯基）-1-曱 基-1H-咪唑-2-基）六氫吡啶-1-基）-5-(3-甲基-3-(三甲基甲矽 烷基氧基）丁-1-炔基）-7H-吼咯并[2,3-d]嘧啶（〇·21 g，1·0當 量）及THF (2 mL)。將該反應物質冷卻至〇°C。逐滴添加四_ 丁基氟化銨（0.19 mL，2.0當量）。將該反應物質在RT下攪 拌40 min。藉由TLC (10% MeOH，存於DCM中）監測該反 應。填充乙酸乙酯並用飽和碳酸氫鈉溶液及飽和氯化鈉水 溶液洗滌。有機層經無水Na2S04乾燥並在真空下濃縮之。 在二乙醚中結晶產物並過濾之以獲得4-(4-(4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基）苯基）-1-甲基-1H-咪唑-2-基）六氫吼啶-1-基）-7H-。比咯并[2,3-d]嘧啶-5-基）-2-曱基丁-3-炔-2-醇（0.11 g， 64%) 〇 MS (M+H): m/z=474.6 〇 基本上可按照在實例53-E中所述來製備下列化合物。 130520.doc -75- 200848053 實例 化^~—_ 53-F 4-(4-(4-(4-(3,4-二敗^---- 物理數據 六氫吡啶小基V7H-吡咯并「2 3 咪唑丨基） 甲基丁-3-炔_2·醇 斗密啶4基)_2_ MS (M+H): m/z= 475.6 53-G 3-(4-(4-(4-(3,4-二氟苯基s___ 六氫吡啶-1-基K7H-吡咯并[2,3tdlt^^坐-2-基） 2-炔-1-醇 j 基)丙- MS (M+H》m/z二 449.4 53-H 2_基)六氫*定小基Χ7Η』比咯并[2yd_ 基)丙-2-炔小醇 “疋-5- MS (M+H): m/z= 481.4 53-1 5-乙炔基-4-{4·[1-甲基斗 口米唾-2-基]-六5Lσ比σ定_ 1 -基} _7Η-ϋ比略并[2,3 -d] 口密 啶(在密封試管中加熱l〇〇°C過夜，E&N，^ ^ TBAF實施去保護） MS (M+H): m/z二 451 53-J 4-{4-[4-(3,4-二氟-苯基)小曱基-1H-咪唑-2-基]一 六氫吡啶-1 -基}_5_乙炔基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧 啶（在密封試管中加熱l〇〇°C過夜，Et3N ’用 TBAF實施去保護） MS (M+H): m/z= 419 53 - K 5-乙炔基-4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基H-甲 基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1_基}_7H_吡咯并 [2,3-d]嘧啶（在密封試管中加熱l〇0°C過夜， Et3N，用TBAF實施去保護） MS (M+H): m/z= 469 實例54 氩氣酸4-{4-丨4_(3·三氟甲基·苯基）_1H-咪唑-2-基卜六氫《比 啶_1_基卜1H-吡唑并- P，4-d]嘧啶

向22 L 4頸圓底燒瓶（配備有加料漏斗、氮氣層、冷凝 130520.doc -76 - 200848053 器、洗滌器及機械攪拌器）中添加：3-三氟甲基-苯乙酉同 (1500 g，1.00當量；7·97 moles)及二氯甲烷（7·5 [)。在室 溫下授拌所得澄清無色溶液同時在室溫下藉由加料漏斗經 4小時添加溴（1274 g ; ι·〇〇當量；7.97 moles)存於二氯甲 烧中之溶液。藉由緩慢添加飽和NaHC03水溶液（2000 mL)，藉助冰浴將溫度控制在低於25來淬滅該反應。分 離各相並用飽和氯化鈉水溶液（2000 mL)洗滌有機層，隨 後該溶液經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮成澄清無色油狀物。 藉由秒膠層析（分級梯度，20%至50% CH2C12，存於庚烧 中）純化此粗製油狀物以獲得澄清無色油狀2-溴_丨_(3_三氣 甲基-苯基）-乙酮（1667 g，6.24 mol，78%)。 向丨2 L 3頸圓底燒瓶（配備有水冷卻冷凝器、氮氣層、機 械攪拌器及冷卻浴）中填充2_溴_1-[3(三氟甲基）苯基]_丨_乙 酮（1664·7 g, 1.00當置，6.23 moles)及四氫咬喃（7500 mL)。填充一份疊氮化鈉（425,6 g ; 1·〇5當量；6.55 moles)。用水（丨35 mL)洗滌該燒瓶。在rt下於氮中攪拌該 /¾ κ色漿液。在6小時後，添加水（260 mL)並繼續授拌過 仪。經由Celite®薄墊過濾所得橙色漿液並用thf (1L)沖 洗。將所得溶液分成兩等份（每份為5146·5 g)。用三苯基 膦（889 g，3.43 mol，1.1當量）、對_甲苯磺酸單水合物 (1304 g，6·86 m〇1，2·2當量）及丁HF (5 6L)填充兩個等同的 22 L 3頸圓底燒瓶（配備有加料漏斗、水冷卻冷凝器、氮氣 層、機械攪拌器及冷卻浴）。藉由加料漏斗經4小時向各燒 瓶中添加兩份中間體混合物，藉由加料速率控制由氮放出 130520.doc -77- 200848053 形成的泡沫且藉由使用冰浴控制溫度。在完成加料時，將 。亥水液在環i兄溫度下授拌2小時，隨後將來自這兩個反應 器之固體在相同過濾器上進行過濾。這兩個燒瓶及組合濾 餅全部用THF (4 L)洗滌。在真空烘箱中於4(rc下乾燥過夜 以提供白色結晶固體狀（2-胺基―丨兴弘三氟甲基-苯基卜乙 盼對-曱苯石黃酸鹽（1:1)(2340 g，6.23 mo卜72%)。 填充（2-胺基-1气夂三氟甲基_苯基乙酮兴對-甲苯磺酸鹽 (1:1)(91：3 g，2·43 mol)及1-第三-丁氧基羰基異六氫吡啶甲 酸（623 g ’ 2.73 mo卜 ι·12 當量）以及 THF (2·75 L)和 EtOAc (5.5 L)並冷卻至0_5艺。添加ι·2當量之丙基膦酸酐 (Τ3Ρ)(1·2當量，2·91 mo卜 1.512 L 50% EtOAc溶液）且在 加料期間將反應溫度保持在〇_VC。攪拌1〇 min，隨後添加 N-甲基嗎啉（5 66 g，5.6 mol，2.3當量），在加料期間保持 溫度低於5 °C。將該反應物升溫至室溫且在丨〇小時後，在 冰浴中冷卻並添加水（7.3 L)。分離各層並用EtOAc (2.75L) 洗滌水性層。組合各有機層並用〇·5 μ碳酸氫鈉水溶液溶 液（2.75 L)洗滌。用飽和氣化鈉水溶液（2·75 L)洗滌有機 層’隨後用硫酸鈉處理所得有機層並過濾。藉由蒸餾減少 至〜4·6 L來去除溶劑。再次添加庚烷（n L)同時藉由蒸館 去除溶劑直至最終體積達〜丨丨L。冷卻至5〇 t並播種。將 所得漿液保持在50°C下3 h，隨後將該漿液冷卻至室溫並 授拌2 h。過濾、出固體並洗務遽餅，首先用1 〇% Et〇Ac存於 庚烧中之混合物（2 L)，隨後用庚烷（2 L)洗滌。在真空烘箱 中於60°C下乾燥3 h後，獲得800 g (79〇/〇)白色固體狀4_[2_ 130520.doc -78- 200848053 氧代基-2-(3-三氟甲基-苯基）-乙基胺基曱醯基]-六氫叱啶一 1 -甲酸第三-丁基酯。 製備4_[2_氧代基-2-(3-三氟曱基-苯基）-乙基胺基甲酿 基]-六氫吡啶-1-甲酸第三-丁基酯（773.3 g; 1·00當量； 1 ·87 moles)存於甲醇（2300 mL)中之溶液。製備乙酸銨 (75 5.08 g ; 9.80 moles)存於曱醇（3500 mL)中之溶液。以 5:1莫耳比率之乙酸銨與4-[2-氧代基-2-(3-三氟曱基-苯基）-乙基胺基曱醯基]-六氫吡啶-1-曱酸第三-丁基酯泵送這雨 種溶液，滯留時間為45分鐘。在室溫下組合呈T型之雨股 氣流且隨後使其流入熱管反應器中，烘箱溫度為i 7〇°C， 歷時5小時。組合所有收集得產品溶液並在低壓下濃縮， 隨後將溶液變成3500 mL n-BuOH。用3000 mL飽和

NaHC〇3水溶液及1〇〇〇 之混合物洗滌此溶液。再次用 飽和氯化鈉水溶液（3000 mL)洗滌，繼而藉由蒸餾1L n_ BuOH來實施共沸乾燥（浴溫為45)。過濾出在蒸餾期間沉 展C的固體。將該濾、液填充至位於冷卻浴中之$ L 4頸燒瓶 中。向該溶液中緩慢地通入無水HC1氣體，用冰水浴將溫 度控制在<55 °C。在反應完成時，藉由加料漏斗緩慢地添 加庚烷（4000 mL)，隨後將所得漿液在冰浴中冷卻至<5 °c，保持15 min。過濾出固體並用庚烷（2x6〇〇 mL)洗滌濾 餅。在40°c真空烘箱中乾燥固體以獲得白色固體狀（4_[4_ (3-三氟曱基-苯基）·1Η_咪唑_2_基]_六氩吼啶）_，氫氣酸 (1:1)(619.1 g，1.87 mo卜 92%)。 向5000 mL 4頸圓底燒瓶（配備有氮氣層、橡膠隔片、機 130520.doc -79- 200848053 械攪拌益、加熱夾套、冷凝器及熱電偶探頭）中填充4_ 氯-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶（93·3 g ;丨〇〇當量；6〇3 66 mm〇les; 93·30 g)、（4_[4_(3_三氟甲基-苯基）_ih_ 咪唑冬 基]-六氫吡啶）-，氫氣酸（1:1)(20(M g ;丨〇〇當量；6〇3 13 mmoles)及甲醇（1800 mL)。藉由加料漏斗經大約i5 min添 加三乙胺（280 mL ; 2.01 m〇les)。將所得澄清橙色溶液加 熱至5(TC並在50。(：下保持15 min。當藉由HpLc確實反應 完成時，在50°C下藉由加料漏斗添加水（2〇〇〇 mL)。在此 添加水期間添加種晶且結晶出產物。在加料完成時，將漿 液加熱至回流，丨小時。冷卻至室溫，隨後過濾並用2〇% MeOH水溶液（2x250 mL)洗滌固體。在真空烘箱中於45χ： 下將該等固體乾燥過夜以獲得茶色固體狀4_{4·[4_(3_三氟 曱基-苯基）-1Η-咪唑-2-基]-六氫吡啶小基）_1Η_π比唑并 [3,4-d] 口密咬（211.5 g，0.603 mol，85%)。 m.p.=281〇C ; MS m/z=414 [M+H] 〇 填充4-{4-[4-(3-三氟曱基-苯基）_1H_咪唑-2-基]_六氫〇比 啶吡唑并[3,4-d]嘧啶（442.9 g，1.07 m〇i)以及 IPA (4.43 L)並在RT下攪拌所得漿液。緩慢地添加HCi (214 mL 5M水溶液，1·〇7 mol，1·〇當量）並加熱至5(rc。攪拌3〇 分鐘並添加丙酮（4.43 L)且持續加熱4 h。冷卻至i5°c 2 hr，隨後過濾出固體。用丙酮（800 mL)洗滌濾餅且在真空 烘箱中於60°C下將所得固體乾燥3 h以獲得茶色至灰白色 固體狀標題化合物（458 g，94%)。M.p. = 306。(3 ; MS (£扑 m/z=4 1 4 [M+H] 〇 130520.doc -80- 200848053 實例55 氫氣酸4-{4-【4-(4-氟-3-三氟甲基_苯基-甲基_ih_咪唑_2_ 基]-六氫σ比咬-1-基卜1Η-σ比嗤并[3,4-d】峨咬

向4-亂-3-(二氣甲基）漠苯乙g同（6〇 〇〇 g’ ι·〇〇當量； 210.50 mmoles)存於乙酸乙酯（450 mL ; 4.60 moles)之溶液 中添加六亞曱基四胺（1.10當量；231.55 mmoles ; 32.46 g)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。在真空中去除溶劑並 在MTBE中濕磨該固體。過濾並在低壓下乾燥。依次添加 乙醇（450 mL ; 7.73 moles)及氣化氫（150 mL ; 8.30當量； 1·75 moles)並在室溫下將該混合物攪拌過夜。在真空中去 除溶劑並在真空中於5 0 C下乾燥一周以獲得白色固體狀2 _ 胺基-1-(4-氟-3 -三氟甲基_苯基）_乙酮氫氯酸（5423 1 00%產率）。 向六氫吡啶-1，4-二甲酸單第三-丁基酯（12〇當量； 252.61 mm〇les; 57.92 g)存於 THF (4〇〇 mL)之溶液中添加 N-甲基嗎啉（3當量；63 1.52 mmoles ; 69.66 mL)。用乾冰· 丙鋼洛將該混合物冷卻至-UTC。逐滴添加氣甲酸異丁基 醋（1.1當量；23 1.56 mmoles; 30_26 mL)同時保持溫度低 於-5°C。在-5°C -l〇°C 下 30 min後，添加懸浮於thf (3〇〇 130520.doc -81 · 200848053 mL)中之氫氯酸2-胺基-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）-乙酮 (54·23 g; ΐ·〇〇當量；210.51 mmoles)並將該混合物在該浴 中於-5 °C下攪拌20 min。在室溫下攪拌1小時。添加水及 EtOAc ’ 後用水及飽和氣化鈉水溶液洗務有機層。經 MgSCU乾燥，過濾並在真空中去除溶劑。將粗製物懸浮於 MTBE中並攪拌2小時。過濾出固體並在真空中乾燥以獲得 1-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）_2_氧代基-乙基胺基甲醯 基]-六氫吼啶-4-曱酸第三-丁基酯（64.44 g ; 70.79%產率）。 向1 [2 (4-氟-3-二氟甲基-本基）-2-氧代基-乙基胺基甲酷 基]-六氫吼啶-4-甲酸第三-丁基酯（29.4 g ; 1.00當量； 67.99 mmoles)存於 1-丁醇（150 mL; 1.64 moles)之溶液中 添加乙酸銨（15當量；1.02 moles ; 78.61 g)，隨後添加三 乙胺（1當量；67·99 mmoles ; 9.48 mL)。將該混合物在160 °C下於密封試管中攪拌3 h。添加EtOAC及水，隨後用更多 水及飽和氣化鈉水溶液洗滌有機層並在真空中濃縮。在 ΜTBE中濕磨粗製物，過滤並在低壓下乾燥以獲得白色固 體狀4-[4-(4-氟-3-三氟甲基·苯基）_1Η•咪唑-2_基]_六氫吼 口定-1-甲酸弟二-丁基酉旨（18.23£;44.1〇111111〇165，64,86%產 率）。 向氫氧化 If (1.5當量；58.16 mmoles ; 3.26 g)存於 200 mL二甲基亞石風之溶液中添加4-[4-(4-氟-3·三氟甲基-苯 基）-lH-咪嗤-2 -基]-六氲Π比σ定-1-甲酸第三-丁基_(16.〇3 g ; 1，〇〇當量；38.77 mmoles)存於40 mL二甲基亞砜中之混 合物。在室溫下5 min後，添加一份鐵甲烧（1,1當量； 130520.doc -82- 200848053 42·65 mmoles ; 2.66 mL)。在室溫下攪拌兩小時，隨後將 該混合物傾倒入冰水中。過渡出固體，用水洗滌並在低壓 下乾燥。在熱庚烷中濕磨該固體，過濾並在低壓下乾燥以 獲得白色固體狀4-[4-(4-氟-3-三氟甲基_苯基）小甲基_ih_ 咪唑-2-基]-六氫吡啶小甲酸第三_丁基酯(87 52观產 率）〇 在室溫下，向4-[4-(4_氟_3_三氟甲基_苯基）_卜甲基_1Η· η:唑-2-基]-六氫吡啶小曱酸第三_ 丁基酯(87 】⑻當 ，·’ 20.35 inmoles)存於二氯甲院〇〇1刀叫之溶液中添加 氣化氫（4.00當量；81.41 mmoles ; 20.35 mL)。將該溶液在 室溫下攪拌1小時。在低壓下，去除溶劑並將粗製物溶於 異丙醇（101.77 mL)中。添加4_氯_出_〇比唾并[3,4_d]㈣ (1.65當量；33·58 _les ; 5 19 g)及三乙胺…當量； mmoles，28.3 7 mL)。將該混合物在回流下攪拌i小 時。在低屢下去除溶劑並在水中將粗製物濕磨過夜。㈣ 出口體並在熱乙腈中濕磨，過濾並在真空中乾燥。獲得淺 黃色固體狀4-{4例4-氟-3_三氟甲基·苯基）_3_甲基-味 唑-2-基]-六虱吼咬小基卜…比。坐并[3,4_d]㈣（8 c g; 18·86 mmoles ; 92.66%產率）。 向{4 [4 (4就-3-二I甲基.苯基）小甲基味嗤_2_ :氫比疋基}·1Η·σ比哇并[3,4_d] 口密咬（7 $ Π⑼當 _ _es)存於二氯甲院（5〇叫之懸浮液中添加 風化乳0·1田里’ 18.52 mm〇】es ; 4.63叫並在室溫下將該 混合物授拌！小時。在真空中去除溶劑並在劃財將該粗 130520.doc -83 - 200848053 製物濕磨1小時。過濾出固體並在真空中乾燥過夜以獲得 白色固體狀氫氣酸4-{4-[4-(4-氟-3-三氟曱基-苯基）_3-甲基_ 1H』米唑-2-基]-六氫吼啶小基卜1H-吡唑并[3,4-d],咬（7.99 g ; 16.58 mmoles ; 98.47%產率）。h-NMR (3〇〇 MHz， DMSO): δ14·01-13.99(m，lH)，8.57-8.54(m，2H)，8 26-8·19 (m，3Η)，7.72-7.63 (m，1Η)，5·23-5·20 (m，2Η)，3·89 (s，3H)，3.41 (m，2H)，2.15-2.07 (m，3H)，1·1〇 (s，2H)。 實例56 結晶氫氣酸4-{4-[4-(3·三氟甲基_苯基）_1H_咪唑_2基卜六 氫 11 比咬- 嗤并[3,4_d],咬 將4-{4_[4_(3_三氟甲基_苯基）-1Η-咪唑基]_六氫吡咬_ 吼唑并[3,4-d]嘧啶（134 mg)懸浮於丙酮（2 mL) 中。將該懸浮液加熱至77°C，隨後添加甲醇（1 mL)。向該 洛液中添加0 · 2 5 Μ H C1 (1 · 2 8 m L)並緩慢地冷卻。依次添 加庚烷（2 mL)及丙酮（6 mL)。在室溫下，蒸發過夜。向所 得油狀物中添加丙酮（3 mL)且經4小時將所得白色固體在 丙酮中製成漿液。過濾該懸浮液並實施空氣乾燥以提供98 mg產物，在真空烘箱中於45。(：下在真空中乾燥。該形式在 294 C下開始吸熱。 用配備有CuKa光源（λ=1·54056 A)且在40 kV及50 mA下 操作之D4 Endeaver繞射儀實施X-射線粉末繞射分析。在 2Θ為4。至40。時掃描該試樣，2Θ之步長為〇·009。且掃描速率 為21，5秒/步。使用NIST標準SRM675(在2Θ為8.8。時出現標 準峰）校正試樣偏移誤差。 130520.doc -84- 200848053

,t發明提供結晶 咪…]-六氣化-基一柳,4-d]:= 徵在於在X-射線R查 其特 琛圖案令有至少一個峰位於 21.7。土°，1之⑼繞射角處。本發明亦提供包括結晶d 4-{4-[4-(3-三氟甲其婪^、 日日氧氣醆 既甲基-本基)·1Η_咪唑_2-基] 基ΗΗ-W并[3,崎密咬之醫藥調配物 21·7。进1之观射角處。本發明進-步提供…或 4-{4·[4_(3·三氟甲基.苯基）_mm卜。㈣氟酸 基卿蝴3,4物之用途，該結晶二 射線圖案中有至少—個峰位於7.1。现1或21.7。±〇. i之2θ繞 射角處，該結晶用於製造用於抑制血管新生或治療結腸腺 130520.doc -85- 200848053 癌之藥物。 用於製備鹽及晶體之一般程序 藉由向位於96孔板中之所有孔中添加250 pL標題化合物 游離鹼存於甲醇中之混合物（〇,；[ M)來製備母板。將一系列 酸以化學計量莫耳當量分配給每個孔。使用Genevac Series II蒸發器自所有96個孔蒸發溶劑，在母板中留下固 體殘留物或油狀物。透過密封墊片將一系列溶劑分配給此 等孔的每個孔且隨後邊攪拌邊加熱至55〇c且在約55^下使 其平衡60-90分鐘。隨後熱過濾每一試樣並將其轉移至蒸 發板、沉澱板及冷卻板之對應孔中。藉由使用55〇c加熱之 注射器將200 濾液自母板轉移至開孔滴定板來製備該蒸 發板且隨後在室溫及環境濕度下將該蒸發板蒸發至乾燥， 過夜。藉由使用55°C加熱之注射器將1〇〇 pL來自母板之濾 液添加至墊片密封之96孔滴定板中來製備沉澱板，其中每 個孔含有200 pL庚烧或水反溶劑。在室溫下平衡9小時 後，使用預切割之Whatman濾紙吸取過量溶液。藉由使用 5 5 C加熱之注射器將2 〇 〇 μ L濾液自母板轉移至墊片密封之 滴疋板的各孔中來製備冷卻板且經8小時自5 5 指數冷卻 至l〇C。使用具有2.5X物鏡之Zeiss Axiovert 200M反向入 射光顯微鏡收集96孔板之每個孔之材料的顯微照片。倘若 該材料為結晶，則其呈現雙折射，在黑色背景下顯示為白 色非曰曰型固體或油狀物顯得暗淡或為不透明小滴或環。 實例57 4-{4_[4气4_氟-3_三氟甲基-苯基）_1-甲基_111-咪唑_2_基]_六 130520.doc -86- 200848053 氫吡啶-1-基卜1Η-吡唑并[3,4-d]嘧啶對-甲苯磺酸鹽 在冰令中，將4_氟_3-(三氟甲基）溴苯乙酮（藉由HpL(：分 析得純度為93%，l_ g; 3.51 mQles)及四氫D夫喃（5 L)之 冷液冷邠至<5它。在<5它下經i小時逐滴添加疊氮化鈉 (239 g 3.68 m〇les，L05當量）存於水（8〇〇紅）中之溶液。 在<5 C下攪拌1小時後，分離並丟棄水性層。仍在冷狀態 下，經3小時向三苯基膦（92〇 2 g，3 51 m〇les，1〇當量）、

對-曱苯磺酸單水合物（1335 g，7〇2 m〇les，2〇當量）及 THF (5 L)之溶液中缓慢地添加有機層。在此加料期間將溫 度保持在< 1 5 C且在加料期間沉殿出固體。 將该反應混合物在<20 °C下攪拌2小時且隨後過濾出固 體，用THF (3x2 L)洗滌且在5(rc下於真空中乾燥以獲得 1167.4 g (85%，針對初始材料純度校正為92%)白色結晶固 體狀2-胺基-1-(4-氟-3-三氟甲基_苯基）_乙酮對_甲苯磺酸 組合2-胺基-1-(4-氟-3-三氟甲基_苯基）_乙酮對_甲苯磺酸 鹽（1133 g ; 2.88 moles)、1-(第三_丁氧基羰基）六氫吡咬_心 甲酸（795 g; 3.47 moles，L20當量）、四氫呋喃（345〇 mL) 及乙酸乙酯（7500 mL)以形成白色稀漿液。在冰浴中將該 漿液冷卻至<5°C並添加2-丙烷膦酸酐（T3p)(5〇%溶液，存 於 EtOAc 中）（2385 g ; 3·75 m〇les，13 當量）。隨後經 i 小時 添加N-甲基嗎琳（795 mL ; 7.21 moles，2.5當量），將溫产 保持在<l〇°C。將所得漿液升溫至環境溫度並攪拌2小時。 藉由添加水來泮滅該反應。分離有機相，隨用用 130520.doc -87- 200848053 _〇3水溶液、NaCI水溶液絲。藉助旋轉蒸發器將有 機相升溫至5(TC並添加正庚烧。在真空中蒸餘溶劑直至最 終漿液體積為大約5 L。將該漿液冷卻至室溫並過濾出固 體，用正庚燒（2x1 L)洗務且隨後在真空供箱中於抓下乾 燥過夜，產生白色固體狀W2♦說_3_三氟甲基-苯基）二 氧代基-乙基胺基甲醯基]_六氫吡咬I甲酸第三_丁^基酉旨 (1124.8 g，90%)。 土曰 組合1-[2-(4|3_三氟甲基_苯基）_2_氧代基_乙基胺基甲 醯基]-六氫吡啶_4_甲酸第三_ 丁基酯（ι〇〇 §，23ι mmoles)、乙酸銨（178.3 g; 2.31 m〇Ies，1〇 當量）及甲醇 (―刪mL)。此轉化所用反應器係螺旋狀ι/ΐ6" 1〇不錢鋼 管（管道在烘箱中之總内部體積係541 m〇 反應器加熱至峨。#由調節器將此試管之背== 250 psig以將溶液加熱至高於其正常沸點之超高溫度。在 壓力下藉由加熱管以6.01 mL/min連續地泵送上文所製備 得溶液（該加熱管之總滞留時間應為9G分鐘）。當該溶液離 開供箱時，在套管式熱交換器中將其冷卻回至紙。當全 部溶液經過該反應器時（總處理時間為8小時），在真空中於 3〇°C下將所得橙色溶液濃縮成6〇〇 mL總體積。添加乙腈 (200 mL)並將該溶液加熱至抓。逐滴添加水（叫同 時經2小時播種以結晶產物。將所得漿液冷卻至抓並過 濾'出固體，隨後用2G% Me〇H水溶液（2χ2⑽社）洗務。在 真工中於50 C下乾燥所得固體。在5(Γ(：下將該固體在乙猜 (200 mL)中ί新製成漿&。將豸漿液冷卻至環境溫度，過 130520.doc -88 - 200848053 濾出固體並用乙腈（100 mL)洗滌以提供灰白色固體狀4—[4_ (4-氟-3-二氟甲基-本基）-1Η-味嗤-2 -基]-六氫。比咬_1_甲酸 第三-丁基酯（54.43 g，132 mmoles，57%)。 將4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）_1H-咪唾_2_基]·六氮吼 啶-1-甲酸第三-丁基酯（80.02 g，1 83.69 mm〇les)溶於二甲 基亞颯（1060 mL)中。添加一份 KOH (18.47 g ; 279.82 mmoles ; 1.5當量）。在25QC下經30分鐘添加碘甲烧（27.74 g ; 193.48 mmoles，1.05當量）。將該溶液在2yc下攪拌j 小時。經5分鐘向該溶液中添加4-[4-(4_氟-3-三氟甲基-苯 基）-1-甲基-1H-咪唑-2-基；μ六氫吡啶甲酸第三-丁基酯種 晶（0.17 g)及水（80 mL)之混合物。將所得稀漿液在 攪拌30分鐘。在25°C下經30分鐘再添加水（240·73 mL)。過 滤出固體並依次用20% DMSO存於水之混合物（2X 1 2〇 mL) 及水（120 mL)洗滌。在真空中於60°C下乾燥該固體。在5〇 °C下將所得乾燥固體溶於乙醇（480 mL)中。經5分鐘添加 水（240 mL)。隨後經30分鐘添加4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯 基）-1-甲基-1H-咪唾-2-基]六氫吡啶_i_甲酸第三-丁基酯種 晶（0.03 8 g)及更多的水（240 mL)。經2小時將所得漿液冷卻 至25 °C。過濾出固體並用20% EtOH水溶液洗滌濾、餅。在 60°C下於真空中乾燥固體，獲得白色固體狀4_[4-(扣氟-3- 二氟甲基-苯基）-1-甲基-1H-咪唾-2-基]-六氫吼。定_ 1 -甲酸第 三-丁基酯（72.36 g，92%)。 藉由在<5°C下經45分鐘向甲醇（1160 mL)中緩慢地添加 乙醯氣（193· 14 mL ; 2·71 moles，4.00當量）來製備無水HC1 130520.doc -89- 200848053 溶液。在20 C下’經9〇分鐘將所得溶液添加至含有4^4-(4·氟-3-三氟甲基-苯基卜卜甲基-咪唑_2-基]_六氫^比 啶-1-甲酸第二-丁基酯（29〇 g ; 678.46 mmoles)存於甲醇 (2320 mL)之溶液的另一燒瓶中。將該反應混合物在2〇ι 下攪拌過夜。在30°C下於真空中濃縮該反應混合物。添加 二甲基亞砜（1080 mL; 15.20 moles ; 1.08L; 1.19 kg)且繼 續蒸餾直至内部溫度在20 mm Hg壓力下達50°C。添加 DMSO直至總體積為2030 mL。隨後藉由加料漏斗經30分 4里添加二乙胺（473 mL ; 3.39 moles，5當量）。經30分鐘以 相等時間間隔及相等份量填充固體比唑并[3，4-引 口密啶（110.29 g ; 713·58 mmoles，1.05 當量）。將所得漿液 在20 C下擾拌過夜。將該漿液加熱至go。添加水（229 mL)以提供澄清溶液。播種反應物並經4小時緩慢地添加更 多的水（1273 mL)以完全結晶產物。將該漿液冷卻至5〇t 並過濾出固體。依次用30%水存於DMSO中之混合物 (2x290 mL)及水（290 mL)洗滌濾餅。在60°C下於真空中乾 燥該等固體以提供灰白色固體狀4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基）-1-甲基-1H-咪唑-2-基]-六氫吡啶-1-基}-111_吡唾 并[3,4-d]嘧啶（301 g，99%)。 將4-{4-[4-(4-氟-3_三氟甲基-苯基甲基-1H-咪唑_2_ 基]-六氫吡啶-l-基 }-1Η-吡唑并[3,4-d]嘧啶（2〇 g，44.9 mmoles)溶於20:1 H20··丙酮混合物（360 mL)中。在2〇。〇下 經20分鐘向該反應物中添加對-甲苯磺酸單水合物（1〇 25 g ’ 53.9 mmoles，1.2 當量）存於 20:1 H20:丙酮混合物（4〇 130520.doc -90- 200848053 mL)中之溶液。將該反應混合物加熱至5yc，保持卜】、時， 隨後經1小時冷卻至25°C。過濾出固體並用水（4〇 mL)洗務 濾餅。在50C下於真空中乾燥’獲得白色固體狀心 (4-氟-3-三氟甲基-苯基）·1_甲基_1H_咪唑-2-基]_六氫吡啶· 1-基}-1Η·吡唑并[3,4-d]嘧啶對-甲苯磺酸鹽（23 9 g， 86%) 〇 實例58 結晶4-{4-丨4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基卜甲基_1H咪唑_2_ 基】-六氫吨啶-1_基卜1H-。比唑并[3,4_d】嘧啶對甲苯磺酸鹽 向具有頂置式攪拌器之1-L圓底燒瓶依次填充6〇12g 4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基）β1_甲基_1H_咪唑_2_基]•六 氫吡啶-1-基卜1Η-咄唑并[3,4-d]嘧啶及250 mL 5% MeOH水 洛液。攪拌所得漿液並添加對_甲苯磺酸單水合物（26·88 g)，繼而用殘餘50 mL 5% MeOH水溶液沖洗。攪拌所得漿 液並將晶體冷卻至5°C。在5t下1 h後，停止攪拌並使用 Buchner漏斗過濾該漿液。用75mL冷5%Me0H水溶液沖洗 該燒瓶且使用此沖洗液洗滌濾餅。將該等固體轉移至稱重 盤並在50°C下於真空中乾燥一天一夜，用空氣緩慢地沖 掃。最終重量係71.44 g。

使用配備有CuKa光源（λ叫·54〇56 A)且在4〇 kv及％ mA 作業之D4 Endeaver繞射儀實施χ_射線粉末繞射分析。在 2Θ為4。至4〇。時掃描該試樣，2Θ之步長❹·剛。且掃描速率 為21.5秒/步。 130520.doc -91 . 200848053 角度 2-θ(±0.1°) 強度％ 角度 2-θ(±0.1°) 強度％ 6.826 12 23.485 14 10.256 24 23.615 17 12.984 24 23.866 22 13.131 61 24.024 20 ~ 13.431 25 24.667 — ----- 11 13.688 100 24.795 11 — 14.062 24 25.029 8 一 15.745 6 25.552 9 17.121 15 26.234 5 18.599 5 26.556 10 18.919 21 27.031 6 19.38 29 27.693 11 20.603 14 27.97 5 — 21.661 6 28.352 6 21.962 14 28.428 5 22.108 9 38.232 5 本發明提供結晶4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基甲 基-1H-味唾-2-基]-六氫ϋ比U定_1_基卜Ha比嗤并[3,44]哺咬 對-甲苯磺酸鹽，其特徵在於在^射線圖案中有至少一個峰 位於13.7。±〇.1或1〇.3。士〇.1之20繞射角處。本發明亦提供包 括結晶4-{4-[4-(4-氟-3-三氟甲基_苯基）_卜曱基-1H_咪唑_2_ 基l·六氫吡啶]-基}-1札吡唑并[3,4-d]嘧啶對-甲笨磺酸鹽 之醫藥調配物，該結晶之特徵在於在射線圖案中有至少 一個峰位於13.7。士 0.1或1〇.3。±〇1之20繞射角處。本發明進 一步提供結晶4-{4-[4-(‘氟_3_三氟甲基-苯基>;1•甲基 130520.doc -92- 200848053 口米口坐-2-基]-六氫吼咬小基}_1H_。比唾并[π·。定對·甲苯 確酸鹽之用途’該結晶之特徵在於在χ_射線圖案中有至少 一個峰位於13.7。±〇.1或1〇.3〇±〇.1之20繞射角處，該結晶用 於製造用於抑制血管新生或治療結腸腺癌之藥物。 p7〇 S6激酶之抑制 在室溫下於96-孔板中將來自Upstate usa公司 (Charlottesville，VA)之 P70 S6 激酶（T412E)與 1〇 倍濃度之化 合物（15 μΐ^體積）一起預先培育3〇 min。添加來自八⑽外“ (San Jose，CA)之 PKA、PKC、MAPKAP-K1 基質及來自 PerkinElmer (Waltham，MA)之 γ33Ρ-ΑΤΡ以開始反應，該反 應在至下於25 pL表終體積中在下列條件下進行分 鐘：10 mM HEPES pH 7.5，10 mM MgCl2，1.0 mM DTT， 0.082 mM EGTA，0·005ο/〇 TRITON X-100TM，25 μΜ，25 μΜ ATP，40 gCi/mL，4 μΜ基質及 5 nM酵素。用 75 1 0% Η3ΡΟ4終止反應且將85 gL淬滅反應混合物轉移至填酸 纖維素過濾板（Millipore #MAPHN0B50)且使用真空歧管用 k,,.. 0.5% H3P〇4洗滌之。將 100 pL Microscint 20 (Packard #601 13621)添加至每個孔中且使用Wallac Beta Counter計 數具有襯層之板。藉由非線性四參數擬合計算相對IC50數 值。基本上可按照在上文中所述來測試所列示化合物且發 現該等化合物具有小於或等於0·75 μΜ之IC5〇數值。基本上 可按照在上文中所述來測試下列化合物且發現該等化合物 具有下列活性： 130520.doc -93- 200848053 實例 ------- IC5〇 (μΜ) 5 , 0.0294 7 0.0103 8 0.00758 10 0.00379 57 0.0127 此表明本發明之化合物係強效p70 S6激酶抑制劑。 血管新生脊髓形成分析 在第一天將人類新生兒皮膚成纖維細胞（neo Nhdf)播種 於Parkard 96孔板中且在37°C及5% C〇2培育箱中培育。隨 後將人類臍靜脈内皮細胞（HUVEC)置於neo NHDF細胞之 上在第二天開始，於20 ng/mL血管内皮生長因子（vegf) 存在下’用一系列（8個劑量）測試化合物（以2〇 μΜ開始， 1:3連續稀釋）處理該共培養物。每隔兩天至三天補充化合 物及VEGF。經12天時間實施該分析。在第12天藉由7〇% 冷乙醇將該等細胞固定30分鐘且進行抗人類CD31螢光免 疫k驗用小机抗人類CD3 1抗體培育培養物且隨後藉由 山羊抗小鼠alexa 488二級抗體染色。亦藉由H〇echst染色 細胞以顯現細胞核。在染色後，捕獲所形成脊髓且使用

Cellomics Arrayscan® VTI高含量影像分析平臺（其採用 tube f0rmati0n BioApplication)進行定量。使用兩個參數， 脊髓面積及血管新生指標來計算測試化合物在此血管新生 分析中之相對效力。基本上可按照上文中所述來測試及分 析實例5及1〇之化合物。 130520.doc -94- 200848053 實例 IC50 (_ 5 2.92 10 4.78 此表明本發明之化合物可用於抑制血管新生。 細胞分析 * 維持細胞，隨後胰蛋白酶化之且將其懸浮於杜貝克氏改 ^ 良鷹氏培養基（Dulbecco’s modified Eagle’s medium) (DMEM—含有10%胎牛血清（FBS)、25 mM 4-(2-羥基乙 (基）·1-哌嗪乙磺酸（HEPES)、1.0 mM丙酮酸鈉及0.1 mM非 必需胺基酸（NEAA))中。可將lxlO3 HCT116及2xl03細胞以 50 μι播種於96孔板中且在37°C下於5% C02中培育過夜。 以期望起始濃度製備化合物且在DMSO中進行連續稀釋。 將4 μί經稀釋化合物轉移至1 mL 10% FBS DMEM中以達 成2X濃度，如同向存在投與細胞之50 μι中添加50 pL — 般。將該等板在37°C下於5% C02中培育72小時。在培育期 結束時，添加10 μι Alamar Blue且在反應2小時後在 ( CytoFluor中於530 nm激發波長，580 nm發射波長及Gain 45下確定量測值。基本上可按照上文所述在下列細胞系中 測試下列化合物。 實 例 U87MG ic5〇 (μΜ) Α549 ic5〇 (μΜ) Α2780 IC5〇 (μΜ) NCI- Η460 IC5〇 (μΜ) PANC-1 ICso (μΜ) Rat 13762 IC5〇 (μΜ) PC3 IC5〇 (μΜ) Κ562 ic5〇 (μΜ) 5 14.6 22 ΝΑ ΝΑ ΝΑ ΝΑ ΝΑ ΝΑ 57 27.52 10.28 25.05 23.99 30.24 51.62 31.92 16.46 130520.doc -95 - 200848053 此表明本發明之化合物可藉由涉及P 7 〇 s 6激酶之作用機 制來用於抑制此等細胞系的增生。 卩7〇861<：活體内目標抑制（|1(^116)之測定 將存於0.2 mL基質膠中之HCT 116人類結腸癌瘤細胞* (5 X 1 〇 )經皮下植入無胸腺裸小鼠之肋腹中。在植入後兩 周，按照在一段時間過程内，單一劑量/單一時間點或劑 1響應協議以PO方式對小鼠進行投藥以測定TMED5G(最小 閾值有效劑量）。在收穫時迅速冷凍腫瘤且採集血液以在 劑量響應研究中測定母體化合物血漿暴露並計算TMEC5() (农小閾值有效濃度）。在Xγ溶胞緩衝液（1 〇 pg/mL亮抑蛋 白酶肽、1 0 pg/mL胰蛋白酶-胰凝乳蛋白酶抑制劑、；[〇 pg/mL甲苯磺醯基苯基丙胺醯基氯甲基酮（TPcK)、1〇 pg/mL抑肽酶、60 mM β-甘油磷酸酯、1% Triton X100、 25 mM Tris pH 7·5、2·5 mM焦磷酸鹽、150 mM NaC卜 2 mM對-甲苯基-L-精胺酸甲基酯（TAME)、15 mM磷酸對-硝 基苯基酿（pNPP)、5 mM苯甲月米、1 mM飢酸納、10 mM NaF、50 pg/mL 苯基甲烷磺醯氟（PMSF)、1 mM DTT、15 mM EDTA pH 8.0、5 mM EGTA pH 8·0、1 μΜ微囊藻毒 素、1 μΜ黑軟海綿素及1 Roche Complete蛋白酶抑制劑小 片每 10 mL)中使用 Lysing Matrix A 管（MP Biomedicals， Solon，OH，cat# 6910-500)及 BIO101 Thermo Savant Fast Prep FP12勻質化腫瘤或組織。將裂解物等分成若干等份 並立即分析或在-80 °C下儲存以供後期測試。利用Meso Scale Discovery (Gaithersburg，MD) ELISA技術量測 p7〇 130520.doc -96- 200848053 S6K之活體内目標抑制以評定化合物對下游效應子86111>之 絲胺酸240/244位點之磷酸化的影響。亦使用此技術以多 重格式評定p70 S6K(T389)及Akt(S473)之鱗酸化。概言 之，將20盹裂解物添加至用適當捕獲抗體預先沾點之碳 電極96-孔板上使用釕標記之檢測抗體探測相關蛋白。當 於含有共反應物TPA之讀出緩衝液存在下電流經過電極 日寸’電化學發光產生光’使用MSD Sector 6000儀器定量 並圯錄該光。對於每個研究而言，計算相對於媒劑對照組 之百分比抑制且使用JMP軟體包來實施AN0VA分析以確定 統計學顯著性。基本上按照在上文中所述來測試下列化合 物且基於血漿暴露，該等化合物具有下列效能。 實例 IC50 (μΜ) 5 7.3 7 1.92 8 47.7 10 1.97 *或者’ U87MG細胞可用於上述程序。 此表明本發明之化合物能夠在活體内抑制p7〇 S6激酶。 p70 S6K活體内功效之測定 將存於0.2 mL基質膠中之HCT 116人類結腸癌瘤細胞* (5x1 〇6)經皮下植入無胸腺裸小鼠之肋腹中。在植入後一 周，按照藥物動力學，以p〇方式對小鼠進行投藥且該分子 之藥物動力學在24小時内應可維持在30 — 50%或60-90% pS6 抑制。繼續投藥至少2 ]天。每兩周量測腫瘤體積以評定利 130520.doc •97- 200848053 用標準方法可達成的藥物相關之腫瘤生長減少。在研究結 束時，在收穫時迅速冷凍腫瘤且採集血液以測定母體化合 物血漿暴露。基本上可按照上文中所述來測試實例5之化 合物。 媒劑 30 mg/kg PO (BID x 21) 60 mg/kg PO (BID x 21) 60 mg/kg ΡΟ (QD χ 21) 天數 腫瘤體積a 腫瘤體積a 腫瘤體積a 腫瘤體積& 8 38.5土4.1 36.5±3.1b 28.8±2.6b 30.6±3.4b 13 100.9±13.7 58·7±4·8** 42.1±6.2*** 57.8±10.7** 16 163.1±25.7 90·9±9·4*** 72·1±11·8*** 85·0±13·3*** 20 287.1±31.9 134.6±13.2*** 139.0±26.4*** 142.5±18.4*** 23 ----- 402.2±43.1 192.7土13.5*** 188.4±25.9*** 194.5±25.7*** 27 545.0土 41.1 296·3±30.1*** 280·0±36·1*** 252.7±34.4*** 10只動物之平均體積土標準偏差。 b 相對於媒劑治療組之差異並不明顯。 **0·001<Ρ^0·01，相對於媒劑治療組。 w^SO.OOl，相對於媒劑治療組。 表月本务明之化合物可用於降低腫瘤生長速率。 車乂佳經口投與本發明之化合物。然而，經口投與並非唯 逆徑或甚至是唯一的較佳途徑。舉例而言，對於易忘或 極不惴願經口服用藥物之患者而言，可能十分需要經皮投 藥且為了方便起見或避免與經口投與相關之潛在併發症， 車乂佳可經靜脈途徑投與。在特殊情況下，式〗化合物亦可 藉由絰皮、肌内、鼻内或直腸内途徑投與。投藥途徑可以 任一方式加以變化，此受限於藥物之物理性質、患者及看 130520.doc -98- 200848053 遵者之方便性及其他才目關情況（Remingt〇n,s ^^順ceuticai

Sciences，第 18版，Mack Publishing Co. (1990))。 々該等醫藥組合物可以醫藥技術熟知的方式加以製備。該 等載劑或賦形劑可為可用作活性成份之媒劑或介質之固 體、半固體或液體材料。適宜載劑或賦形劑為此項技術所 熟知。該醫藥組合物適於以經口、吸入、非經腸或局部方 式使用且其可以鍵劑、膠囊、氣溶膠、吸入劑、栓劑、溶 液、懸淨液或諸如此類之形式投與至患者。 本^明之化合物-單獨或視情況與抗癌劑、細胞毒性劑 或治療劑組合-通常以醫藥調配物形式投與，該等醫藥啁 配物可經口投與，例如，與惰性稀釋劑一起或以膠囊形式 或[成錠』&便於經口治療投與，該等化合物可與賦形 劑一起納入並以鍵杳丨丨、H| ^ 片W、膠囊、馳劑、懸浮液、糖 聚、糯米紙囊劑、口香糖以及諸如此類形式使用。該等製 劑應含有至少4%之本發明化合物（活性成份），但其可視特 疋形式而义化且其可方便地佔單位重量之介於4%至約 之間存於組合物中化合物之量應可獲得適當用藥劑量。 本發明之較佳組合物及製劑可藉由熟習此項技術者熟知的 方法來確定。 該等鍵劑、丸劑、勝量、μ h 吵襄片劑及諸如此類亦可含有一 或多種下列佐劑：點纟士添,ϊ y , 〆、、、σ d，例如，帕維酮（povidone)、 丙基纖維素、微晶_维去+ nn 纖4、、隹素或明膠；賦形劑或稀釋劑， 如，殿粉、乳糖、微晶孅他 日纖維素或磷酸氫鈣；崩解劑， 如’交聯甲基纖維素、交 又I維_、羥基乙酸澱粉鈉、玉 種 羥 例 例 米 130520.doc -99- 200848053 版称及舔如此類；潤 石粉或氫化植物油；滑動南丨 曰&鎮、硬脂酸、滑 …’例如，牌狀一斤 劑，例如，月桂基硫酸鈉及甲, >狀—虱化矽；潤濕 如，可添加蔗糖、天冬甜素或V；梨=二甜味劑，例 荷、水揚酸甲醋或橙味矯味劑 ：’例如，薄 時，除上述類型之物質外，農飞人1里早位形式為膠囊

' x、〇J含有流體載南I ,办,B 乙二醇或脂肪油。其他劑量單位形式：各二二

飾該劑量單位之物理形式⑼如 /、他各種可修 此，錠劑或丸劑可塗佈有糖、經丙基甲基V維甲： 丙烯酸醋或其他塗佈劑。除本發明化合物之外，； 含有作為甜味劑之_及某些防腐劑、_和著色劑及許 味劑。用於製備此等不同組合物之材料應為； 用量下無毒性。 你尸n 式工化合物通常在寬劑量範圍内有效。例如，每曰劑量 -般介於約0.01至約10 mg/kg體重之fa1。在某些情況下， 低於上述範圍下限之劑量水平可能為過量的，而在其他情 形下可採用更大劑量而不會引起任何有害的副作用，且因 此以上劑量範圍並非意欲以任何方式限制本發明之範圍。 應瞭解，該化合物之實際投與量將由内科醫師根據包括下 列之相關情況確定··欲治療之病況、所選投與途徑、實際 投與之化合物、個體患者之年齡、體重及反應及患者症狀 之嚴重程度等。 舉例而言，一種形式可包含式1化合物及2.223 |UL 1 N NaOH/mg化合物，及按照下列算式計算之i〇/〇 hec/o.25% 130520.doc -100- 200848053

Tween 80/0.05% Antifoam 1510-US媒劑：欲添加媒劑之 mL^化合物之mg/理論mg/mL)-(化合物之mg/1200 mg/mL 所評定化合物密度）-所添加1 N NaOH之mL。另一調配物 可包含5°/。維他命E-TPGS、1°/。羥基乙基纖維素及0.05% Dow Corning Antifoam(存於純淨水中）。 可藉由熟習此項技術者已知的方法來量測本發明化合物 之生物利用度。舉例而言，式I化合物可以1 mg/kg (IV)或 1 0 mg/kg (經口管飼）之劑量以習用調配物形式投與斯普拉-1 道來氏大鼠。口服調配物可包含含有經研磨式I化合物之 懸浮液（0.25% PS80，1% HEC，0.05°/。Antifoam，存於水 中）。獲得血漿試樣並量測式I化合物之濃度。以實質上與 上文所述方法相似之方法評定實例57之化合物且發現該化 合物具有>100%之口服生物利用度。 130520.doc -101 -

Claims (1)

1. 200848053 十、申請專利範圍： 1· 一種具有下式之化合物 R\ R:

   其中： Y係N或CR6 ; ζι及Z2獨立地gCR3*N，限制條件為匕及匕二者不可 均為N ; Rl係Η或CVC4烷基； 步經選自由_素組成之群之第 R3係氫、_素、（^-(：4烷篡 R2係視情況經選自Cl_C4烷氧基、氰基、N〇2、鹵素、 一氟甲基及三氟甲氧基之第一取代基取代且視情況進一 基，其中CyC6炔基視情況經羥基取代； R4及R5獨立地為氫或C1_C4烷基； R6係氫或羥基；或其醫藥上可接受之鹽。 2·如請求項丨之化合物，其具有下式： 么之砰之弟二取代基取代的苯基； Cl-C4燒基、c3-c6環烷基或c2-C6^ 其中： 130520.doc R\ R2

   200848053 Y係N或CR6 ; Z〗&Z2獨立地為CR3或N，限制條件為21及1二者不可 均為N ; R1 係 Η4(^-ί：4 烷基； R2係視情況經選自Cl-c4烷氧基、氰基、Ν〇2、_素、 三氟甲基及三氟甲氧基之第一取代基取代且視情況進一 步經選自由鹵素組成之群之第二取代基取代的苯基； 3 y R係氫、鹵素或C3_C6環烧基； R及R5獨立地為氫或Crq院基； R係虱或經基，或其醫藥上可接受之鹽。 3.如請求項1或2之化合物，其中wcr6，或其醫藥 受之鹽。 4·如請求項丨至3中任一項 ^ ^ ^ — % <化合物，其中，或其醫 藥上可接受之鹽。 八_ 5.如請求項1之化合物，其係MW♦氟-3_三氟甲基-苯 土）f基-1H-咪唑-2-基卜六氫吡啶_卜基卜1H_吡唑并 6. [3,4_d]嘧啶，或其醫藥上可接受之鹽。 一種醫藥調配物，其包衽 匕栝如请未項丨至$中任一項之化人 物與醫藥上可接受之載齊 ^ H 稀釋劑或賦形劑之組合。 如請求項1至5中任一頊 ^ 項之化合物或其醫藥上可接受之 鹽’其用於治療。 8. 種如請求項1至5中任— 、生員之化合物的用途，其用於製 k用於抑制血管新生之藥物。 9. 種如請求項1至5中任_ 項之化合物的用途，其用於製 130520.doc -2- 200848053 ie·用於/ □療結腸腺癌之藥物。 10. —種抑制哺乳動物血管新生之方法， 哺乳動物投與有效量之如請求項〗至 物。 11. 一種治療哺乳動物結腸腺癌之方法，^ 療之哺乳動物投與有效量之如請求項i 合物。 ，、包括對有需要之 ;中任一項之化合 匕包括對需要此治 至5中任一項之化 130520.doc 200848053 七、指定代表圖： •(一)本案指定代表圖為：（無） (二)本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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