TW200812633A - Cosmetic use of whey protein micelles - Google Patents

Description

200812633 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於乳清蛋白質微膠粒作為研磨劑、具體而言 在美容組合物中之用途且係關於獲得該等組合物之方法。 【先前技術】 包含研磨劑之非均相組合物（例如粒狀糊劑或顆粒狀液 體）通常用於健康護理及美容領域。 舉例而言，專利申請案WO 03000215揭示牙膏組合物， 其包含作為研磨劑之無機粉末以去除牙齒表面上形成之蛋 白質膜。 美國專利第6036966號係關於局部組合物，其包含選自 …、機粕末至屬皂或有機粉末（例如用於重新處理皮膚之 微晶纖維素）之稍耐磨粉末狀組合物。 在粒狀產品及其用途之領域中仍有許多未開發領域。 因此’本發明之_目的係提供_種該項技術中所用研磨 介質之替代物。 【發明内容】 、本案之目的係借助獨立請求項之特徵達成。該等獨立請 求項進一步顯現本發明之中心思想。 通常建議使用蛋白質（例如使用乳清蛋

在本發明其他態樣中，提供一 為達成該目的，通常建議使 白質微膠粒或包含乳清蛋白質 介質。具體而言，本發明係關$ 種包含乳清蛋白質微膠粒 119066.doc 200812633 之美各組合物。 本發明之第三態樣係關於一種製造美容組合物之方法。 又一態樣係關於一種藉由該方法獲得之產品。 【實施方式】 根據本發明，諸如乳清蛋白質微膠粒或其聚集體等n 作研磨介質。 可用

結合本發明可使用之乳清蛋白質微膠粒係繪示於圖7 中，其中該等乳清蛋白質係以以下方式排列：該等蛋白質 之親水部分經定向朝向該聚錢之外部部分且該等蛋白= 之疏水部分經定向朝向該微膠粒之内部，，核心"。此能量= 利構型為該等結構在親水環境中提供良好穩定性。 此特定微膠粒結構可自料圖、具體而言圖3、9、㈣ 13中看出’其中本發明所用微膠粒實f上由變性乳清蛋白 質之球形聚集體構成。 、乳清蛋白質微膠粒可藉由首先調節天然乳清蛋白質水溶 液之PH及/或離子強度、且隨後使該溶液經受加熱之方法 來製備。該方法將更詳細地進__步闞述於本文中。 由此製得之乳清蛋白f微膠粒具有雙重特性（親水性及 二Jc !·生）實際上’變性乳清蛋白質排列成微膠粒結構似 乎允許疏水相（例如脂肪滴或空氣）與親水相相互作用。因 此，該等乳清蛋白f微膠粒具有優良乳化及發泡性質。 此外，用於本發明之乳清蛋白質微膠粒係以使其具有極 窄尺寸分佈（參見圖14)之方式製備，以便所製造微膠粒的 嶋以上將具有小於！微米之尺寸。較㈣，本發明所用 119066.doc 200812633 乳清蛋白質微膠粒應具有介於1〇〇奈米與_奈米、更佳介 於100销奈米、最佳介於細奈米與伽奈米之尺寸。 該等微膠粒之平均直徑可使用透射電子顯微鏡（TEM)測 定。為了如此做，將液體微膠粒樣品密封於-瓊月旨凝膠試 官卜固定係藉由浸於2.5%存敎i M (pH 7.4)二甲基肿 酸鹽緩衝液中之戊二磐溶液中達成且利用2%存於相同緩 衝液中之四氧化餓後固冑’兩種溶液皆含有請％舒紅。 樣品在梯度乙醇系列（7〇、8〇、9〇、96、刚％乙醇）中脫水 後，將樣品包埋於Spurr樹脂（Spurr/乙醇ι:ι、Μ、1〇㈣） 中。使樹脂聚合（7(tc，48小時）後，制LeicauUr繼t UCT超薄切片機切成半薄及超薄切片。將超薄切片用乙酸 雙氧轴及#板酸錯水溶液染色，並然後藉由透射電子顯微 鏡（Philips CM12，80 kv)檢測。 不期望受限於任何理論，但據認為在微膠粒形成期間， 該等微膠粒達到”最大”尺寸，此乃因該微膠粒之總體靜電 何排斥任何額外蛋白質分子，以致於該微膠粒之尺寸不再 生長。此解釋了所觀察到之窄尺寸分佈（參照圖14)。 本發明所用乳清蛋白質微膠粒可自任何市售乳清蛋白質 分離物或濃縮物（即，藉由該項技術中習知製備乳清蛋白 貝之任何方法獲得之乳清蛋白質）、以及由其製得之乳清 蛋白質部分或蛋白質（例如β_乳球蛋白（BLG)、心乳白蛋白 及血清白蛋白）來製備。具體而言，在乾酪製造中作為副 產物獲得之甜乳清、在酸性酪蛋白製造中作為副產物獲得 之酸性乳清 '藉由乳微濾獲得之天然乳清及在皺胃酪蛋白 119066.doc 200812633 製造中作為副產物獲得之凝乳乳清所有皆可用作乳清蛋白 貝來源該乳清蛋白質可來自單一來源或來自任何來源之 混合物。 用於製備本發明所用乳清蛋白質微膠粒之乳清分離物並 不限於該等牛源，而且包括來自所有哺乳動物物種（例如 來自錦羊、山羊、馬及駱駝）之乳清分離物。而且，該等 礼清製品可經礦化、去礦物質或稍微礦化。，，稍微礦化"係 _ 彳日除去可凑析或滲濾之游離礦物質後之任何乳清製品，但 在（例如）製彳于乳清蛋白質濃縮物或分離物後會由於天然 礦化而仍含有與其結合之礦物質。該等”稍微礦化，，乳清製 品必須不富含特定礦物。 為製造乳清蛋白質微膠粒，乳清蛋白質以該溶液之總重 量計可以〇·1糾.％至12 wt·%、較佳以0.1 ^.%至8 wt·%之 里、更佳0.2 wt·%至7 wt·%之量、甚至更佳〇·5 _%至6 Wt.%之量、最佳1 wt.%至4 wt·%之量存在於水溶液中。 • 微膠粒化步驟之前呈現之乳清蛋白質製品水溶液亦可包 含額外化合物，例如各乳清製造製程之副產物、其他蛋白 貝樹膠、角又菜膠或碳水化合物。該溶液亦可包含其他 ‘ 食品成份（脂肪、碳水化合物、植物提取物等）。該等額外 化合物之量通常不超過該溶液總重量的5〇 wt %、較佳 20%、且更佳不超過10 wt.%。 該乳清蛋白質、以及其部分及/或主要蛋白質皆可以純 化形式或另外以粗製品形式使用。為製造乳清蛋白質微膠 粒，該乳清蛋白質中二價陽離子之含量可小於25%、較佳 119066.doc 200812633 小於0.2%。最佳地’該乳清蛋白質已完全去除礦物質。 PH值及離子強度係製造乳清蛋白質微膠粒中之重要因 子因此，對於貝際上全無《已消耗掉游離陽離子（例如 Ca、K、Na、Mg)經廣泛透析之樣品而言，當在pH低於5·4 下時實施加熱處理Η)秒至2小時期間時獲得凝乳，而在ρΗ 超過6·8時’獲得可溶性乳清蛋白f (參見叫。因此，僅 在此相當窄pH窗口内將獲得直徑小於m米之乳清蛋白質 微膠粒。該等微膠粒將帶有總體貞電荷。在對稱地低於等 電點PH(即，3.5至5.〇、更佳3.8至45)下亦可獲得相同微膠 粒开> 式，此使得微膠粒帶正電荷（參見圖6)。 因此’為獲得帶正電荷微膠粒，乳清蛋白質之微膠粒化 可在無鹽溶液中於經調節介於3.8與44之間之阳值（此取決 於該蛋白質來源之礦物質含量）下實施。 或者，為獲得帶負電荷之微膠粒，對於在乳清蛋白質粉 末中所包合二價陽離子含量介於〇 2%與2 5%之情況而言， 該PH可經調節介於6·3至9.0。 〇 更特疋而s，為獲得帶負電荷之微膠粒，對於低二價陽 離子s里（例如小於初始乳清蛋白質粉末的〇 2%)而古，該 ΡΗ隸調節介於5.6至“、或甚至58至6()。該辦增加 至局達8广此取決於該乳清蛋白質來源(濃縮物或分離物) 之礦物貝合1。具體而言，為在存在大量游離礦物質之情 況下獲得帶負電荷微膠粒，該可介於7 5至以、較佳μ 至8.0，且為在存在中等量游離礦物質之情況下獲得帶負 電荷微膠粒，該ΡΗ可介於6·4至7.4、較佳6.6至7.2。通 119066.doc 200812633 常’該初始乳清蛋白質粉末之鈣及/或鎂含量越高，微膠 粒化之pH越高。 形成礼清蛋白質微膠粒之條件可藉由使液體天然乳清蛋 白質之任何來源脫礦物質_藉由任何習知脫礦物質技術（透 析、超濾、、反渗透、離子交換層析等）_來標準化，該等來 源具有介於甜乳清、乳之微濾滲透物或酸性乳清（〇·9%蛋 白質含量）至30%蛋白質含量之濃縮物間之蛋白質濃度。該 透析可針對水（蒸餾、去離子或軟化水）來實施，但由於此 僅去除弱鍵結至乳清蛋白質之離子，故通常針對低於 4.0之8文（有機或無機）透析以更好的控制該乳清蛋白質之離 子、、且成。如此將使乳清蛋白質微膠粒形成之低於 7·〇，通常介於5.8至6.6。 加熱該乳清蛋白質水溶液之前，通常藉由添加酸（例如 鹽酸 '磷酸、乙酸、檸樣酸、葡萄糖酸或乳酸）來調節 Ρ11田礦物質含1較高時，通常藉由添加驗性溶液（例如 氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化銨）來調節pH。 -或者若不期望PH調節步驟，則可在保持該pH恆定的 5寺凋谛該乳’月蛋白質製品之離子強度。然後，可藉由有 機或無機離子以允許在恆定阳值7下微膠粒化之方式調節 離子強度。圖4繪示微膠粒係在恒定姆7()下同時藉由添 加πιο mM精胺酸HC1來改變離子強度而形成。 、可將-緩衝液進一步添加於乳清蛋白質之水溶液中以便 避免該PH值在該乳清蛋白質熱處理期間之實質變化。原則 上’該緩衝液可選自任何緩衝系統，gp，乙酸及其鹽(例 119066.doc 200812633 如乙酸鈉或乙酸鉀）、磷酸及其鹽（例如NaH2p〇4、 NazHPO4、ΚΗβΟ4、Κ2ΗΡ〇4)或檸檬酸及其鹽等。 加熱之前調節該水溶液之pH及/或離子強度獲得一受控 製程，此獲得尺寸介於100奈米-900奈米、較佳1〇〇_7⑽奈 米、最佳200-400奈米之微膠粒。較佳地，當實施本文所 述方法時，尺寸介於100-700奈米之微膠粒的分佈係大於 80%(參見圖14)。

調節該pH及/或離子強度之後，使起始乳清蛋白質水溶 液經受熱處理。就此而言，為獲得乳清蛋白質微膠粒，重 要的是使溫度於約80-約98。〇之範圍、較佳約82_約89。〇、 更佳約8仁約87t、最佳約85°C。 達到合意溫度後，將此溶液於此溫度下保持最短1〇秒且 最長2小時。較佳地，將乳清蛋白f水溶液保持於合意溫 度下期間之時期於12·25分鐘之範圍、更佳12_2()分鐘、或 最佳約1 5分鐘。 該熱處理亦可在I波爐或任何允許藉由微波加教之類似 設備中以U)秒m毫升之時間/數量比實施以使在测絲 置中加熱之+4 wt%蛋白質溶液達_點（在海拔阳米處98 亦可藉由在可旎藉由夾持試管延長之玻璃試管周 圍添加8或更多磁好來❹連續製㈣增加保溫時間。 如圖2中所示’濁度量測結果係微膠粒形成之指示。對 蛋白質溶液而言’由在细奈米下之吸光度所量測之 =通常至少3個吸光度單位，但當微膠粒化高於嶋時 可達到16個吸光度單位（參見圖2)。 119066.doc • 12 - 200812633 為自物理化學觀點進一步脅示微膠粒形成之效應，將i Wt% BiproiE)之分散液在85它下於pH 6 〇及6 8下在MilHQ水 中加熱15分鐘。熱處理後所獲得聚集體之流體動力學直徑 係藉由動態光散射量測。該聚集體之表觀分子量係藉由靜 恶光散射使用所謂的Debye圖測定。表面疏水性係使用疏 水ANS探針來探測且游離可及硫醇基團係藉由dtNB方法 使用半胱胺酸作為標準胺基酸來探測。最後，該等聚集體 之形態係藉由負染色ΊΈΜ來研究。該等結果呈現於下表1 中。 根據表1，很明顯，與在相同條件下但pH為6.8下加熱之 未微膠粒化乳清蛋白質相比，在pH 6·0下所形成乳清蛋白 質微膠粒使得蛋白質其特異性ANS表面疏水性降低二分之 一。對於未微膠粒化蛋白質而言，在27x106 g.mor1之極高 分子量（與〇.64xl06 g.mol·1相比）下亦可看到形成微膠粒， 此表明該微膠粒内部之物質呈極為黏稠狀態（少量水）。有 趣的是，該等微膠粒之ζ-電位甚至較未經微膠粒化之蛋白 質更負，即使後者係在較微膠粒更鹼性pH下形成。此係該 微膠粒之更親水表面暴露於溶劑之結果。最後，人們應注 意到，由於不同pH之熱處理，該等微膠粒之硫醇反應性遠 較未經微膠粒化之蛋白質為低。 表1 :在存在或不存在NaCl之情況下藉由1 wt%蛋白質分 散液之熱處理（85°C，15分鐘）所獲得可溶性乳清蛋白質聚 集體之物理化學性質。 119066.doc -13- 200812633 pH 流體動 分子量 形態 ζ-電位 蛋白質表面 可及SH基團 力學直徑 Mw(xl06 (mV) 疏水性 （mnolSILmg·1 (nm) g.moF1) (pg.mmor1 ANS) 蛋白質） 6.0 120.3+9.1 27.02±8.09 球形微膠粒-31.8±0·8 105.4 3.5±0.4 6.8 56.2±4·6 0.64±0·01 直線型聚集體-27·9±1.2 200·8 6.8±0.5 當在pH調節及熱處理之前初始蛋白質濃度增加時，天然 乳清蛋白質至微膠粒之轉化率降低。舉例而言，當利用乳 清蛋白質分離物Prolacta 90(批號673，自Lactalis獲得）起 始時，乳清蛋白質微膠粒之形成率自85°/。（當利用4%蛋白 質起始時）降至50%(當利用12%蛋白質起始時)。為使乳清 蛋白質微膠粒之形成達到最大程度（大於起始蛋白質含量 的85%)，較佳利用蛋白質濃度低於12%、較佳低於4%之乳 清蛋白質水溶液。端視期望最終應用而定，可在熱處理之 前調節蛋白質濃度以控制最佳乳清蛋白質微膠粒產率。 端視合意應用而定，微膠粒濃縮前之產率為至少50%、 較佳至少80%且殘餘可溶聚集體或可溶蛋白質含量較佳低 於20%。平均微膠粒尺寸之特徵在於多分散指數低於 0.200。因此，所獲得之白色懸浮液穩定且在pH 2-8之大範 圍内具有乳狀外觀。已經觀察到，乳清蛋白質微膠粒在約 pH 4.5處可形成聚集體，其中即使在4°C下至少12小時後 亦無宏觀相分離跡象。 乳清蛋白質微膠粒之純度可藉由製得後測定殘餘可溶性 蛋白質之量來獲得。微膠粒係藉由在20 °C及26900 g下離 心15分鐘來去除。上清液用於在石英試管中於280奈米（1 公分光程）下測定蛋白數量。數值係以熱處理前初始值的 百分數表示。 119066.doc •14- 200812633 微膠粒之比例=(初始蛋 ^ θ 貝之里〜可溶性蛋白質之量）/初始 赏曰貝之量 幕白耕4方法相反’藉由使用本文所述之方法，該等乳清 微膠粒在形成期間並未經受任何導致粒徑減小之機 =。該方法包括在熱處理期間在無剪切之情況下誘發 孔β蛋白質之自發微膠粒化。 該等微膠粒可作為在协_ a目士 為存於一液體中之懸浮液或分散液獲得 且八有介於100-900奈米之間、較佳1〇 200-400奈米之尺寸。 不卞敢仏 ^本文所述方法可獲得之微膠粒係極為穩定、不溶性 、、Ό ，其根據本發明可用作研磨介質。 =微膠粒可如此用於本發明或可在保持其研磨性質的 :叉進一步處理（例如濃縮、噴霧劑乾燥等）。 八，，，、處理後可獲得微膠粒分散液之一 發'離心、沉降或微滤來實施。mm 备集乳清蛋白質微膠粒來製備1 辰鈿物k供以先前不可 度獲得富蛋白質產品之優點。因此，該微膠粒 大於20%。蛋白貝η大於㈣、較佳大於⑽、更佳 藉由將微膠粒分散液進給至在真空下溫度介於50 或乳霜之中來實施。所得產物通常具有凝膠 如)研磨介Λ，：:18中所示。該微膠粒產物可用作(例 貝或用作吴容剤、或用於本發明美容組合物 。此外’藉由蒸發獲得之乳清蛋白f微膠粒的卿^白 119066.doc -15- 200812633 質濃縮物可藉由使用乳酸酸化來組織化處理成可塗敷結 構。 離心可於低於5、較佳4.5之pH下酸化該乳清蛋白質微膠 粒分散液後以高加速度（大於2000 g)或低加速度㈠、於5〇〇 g)實施。 亦可藉由酸化使該乳清蛋白質微膠粒分散液實施自發沉 降。較佳地，該pH應為4,5且沉降時間大於小時。

或者，本發明所用乳清蛋白質微膠粒之濃縮可藉由微膠 粒分散液之微遽來實施。此富集技術不僅能夠藉由去除溶 劑來'/辰縮乳清蛋白質微膠粒’而且能夠去除未微膠粒化蛋 白質（例如天然蛋白質或可溶性聚集體）。因此，最終產物 實質上僅由微膠粒構成（如藉由透射電子顯微鏡所檢查一參 照圖9及10)。在此情況下’當穿過膜之滲透物的初始流速 降至其初始值的20%後能獲得可達成之濃縮因數。此可獲 得濃度大於80%之微膠粒。 可對使用本文所述方法可獲得之微膠粒分散液實施乳清 蛋白質微膠粒之其他處理。 舉例而言，該等乳清蛋白質微膠粒可用乳化劑（例如与 脂）或其他塗敷劑（例如阿拉伯樹膠）塗敷以調節該等乳清邊 白質微膠粒之功能。較佳地，該覆蓋層係—種選自以^ 乳化劑：硫酸化油酸丁酯、單-及— —甘油酯之二乙醯基2 石酸酯、單甘油酯之檸檬酸酯、硬 咬月日醯乳酸鹽及其混< 物。圖17係具有硫酸化油酸丁 g旨之霜笔 復盍層的示意圖。 亦可對該等乳清蛋白質微膠粒眘 m貫轭其他處理（例如| 119066.doc -16 - 200812633 燥’例如噴霧劑乾燥、冷滚乾燥、旋轉乾燥等卜因此， 該乳清蛋白質濃縮物可在添加或不添加其他成份之情況下 喷霧劑乾燥且可用作一欲用於寬範圍製程(例如消耗品生 產 '化妝品應用等）之遞送系統或結構單元。

圖8展示在未添加任何其他成份之情況下藉由喷霧劑乾 無獲得之粉末，由於在噴霧劑乾燥期間該微膠粒結塊，故 其具有大於i微米之平均顆粒直徑尺寸。該等乳清蛋白質 微膠粒粉末之典型平均體積中值直徑（Do)係介於Μ微米與 55微米之間、較佳51微米。該等粉末之表面中值直徑㈣ 較佳介於3微米與4微米之間，其更佳為38微米。 喷霧劑乾燥後所獲得粉末之水分含量較佳小於跳、更 佳小於4%。 當此一乳清蛋白質微膠粒粉末包含至少9〇%乳清蛋白質 (其中至少80%為微膠粒形式）時，認為其係”純淨的”。、 而且，該等"純淨"乳清蛋白質微膠粒粉末對溶劑（例如 水、甘油、乙醇、油、有機溶劑等)具有高結合容量。該 等粉末對水之結合容量為至少5〇%、較佳至少9〇%、最佳 至少100%。對於諸如甘油及乙醇等溶劑而言該結合容 量係至少50%。乳清蛋白質微膠粒#末之此性質允許該等 粉末與其他選自以下各物之群組之活性劑—起噴射或°用其 填充：肽、植物提取物、蛋白質水解物、生物活性物質，、、 維他命、礦物質、藥品、美容組份等、及其混合物。、 該等活性劑可以0.U50%之量包含在該粉末中。因此， 該粉末可作為其他功能性成份之載體。 119066.doc •17· 200812633 噴霧劑乾燥前可混入該等乳清蛋白質微膠粒或其濃縮物 中之額外成份包括可溶性或不溶鹽、色素、脂肪、乳化 劑、香料、植物提取物、配體或生物活性物質(礦物質、 維他命、藥物等）及其任何混合物。所得混合乳清蛋白質 微膠粒粉末包含重量比於1:1至1:1000之乳清蛋白質微膠粒 與額外成份。此獲得進-步包含料額外成份之團塊，以

便根據本發明料可㈣展示其他功錄及健康優點（此 取決於所用該額外成份)之研磨介質。因此，該混合粉末 可作為生物活性劑之载體，舉例而言。 乳清蛋白質微膠粒粉末之特徵在於極高流動性，此賦予 易於使用及可轉移性優點。該等粉末之靜止角較佳小於 35、更佳小於3G。。舉例而言，此—小靜止角允許該等粉 末在美容應用中用作流動劑。 根據本發明，該等粉末亦可用作（例如）研磨介質、用作 美容劑或用於美容組合物之製造中。 粉末顆粒（即，乳清蛋白質微膠粒聚集體）之尺寸及該等 乳清蛋^微膠粒自身之尺寸展現該等乳清蛋白質微膠粒 或“聚集體4乎不能察覺且當用於局部施用時將用作研磨 劑而不刺激皮膚之優點。 、、無論乳清蛋白f微膠粒之形式（濃縮物、懸浮液、乾燥 私末等）如何’其重要特性在於保持該等乳清蛋白質之基 本，膠粒、、、Ό構。圖15展示經切片之乳清蛋白質粉末顆粒， 藉此可觀察到單獨乳清蛋白質微膠粒。而且，該微膠粒 結構可容易地在溶劑中再構成。舉例而言，已展示，自乳 119066.doc 200812633 、〜戈5代之Γ 物獲得之粉末可容易地重新分散於室 >皿或C之水I與初始濃縮物相比，該等乳 膠粒之尺寸及結構被完全保持。舉例而言，在圖u中，、: 在2〇%蛋白質濃度經喷霧劑乾燥之乳清蛋白質濃縮物以 5〇%之蛋白質濃度重新分散於⑽去離子水中。該等微职 粒之結構已經藉由ΤΕΜ探測且可舆_進行峰。獲得類 似形狀之微膠粒。藉由動態光散射發現該等微膠粒之直徑

為315不米’同時多分散指數為G.2。圖16亦展示經冷;東乾 燥乳清蛋白質微膠粒粉末之分散液，其中該等微膠粒經 構成。 經喷霧劑乾燥或冷;東㈣粉末在再構錢可在溶液中觀 察到乳清蛋白質微膠粒及僅少量聚集體部分之事實證明乳 清蛋白質微膠粒對於喷霧劑乾燥、冷凍乾燥等係物理上穩 定的。 … 亦感興趣的注意到，若將該濃縮物調節至蛋白質含量為 10%，則具有在85。(：下在pH 7.0下在（例如）高達〇15 M氯化 納之存在下經受隨後熱處理15分鐘之能力，如圖u中所 示。為比較起見，以天然乳清蛋白質分散液（來自乙“…“ 之Prolacta90，批號500658)在0.1 Μ氯化鈉存在下在4%蛋 白質濃度下形成凝膠（參照圖12)。 在濃縮步驟期間亦保持該微膠粒結構之高穩定性。此提 供了該微膠粒結構所賦予之研磨性質在本發明美容組入物 之製造、儲存等期間將不會損失之優點。 根據本發明，乳清蛋白質微膠粒或其聚集體可用作研磨 119066.doc -19- 200812633 w θ蛋白貝微膠粒之聚集體可呈經喷霧劑乾燥或冷 '乾，泰末之形式。該等可包含選自可溶性或不溶鹽、色 素月曰肪、礼化劑、香料、植物提取物、配體或生物活性 物質（礦物質、維他命、華 杀物寺）及其任何混合物之群之額 外成份。 根據本發明，礼清蛋白質微膠粒或該等其聚集體可用作 美容劑或用於製造美容組合物。 该等可與選自肽、植物提取物、蛋白f水解物、生物活 性物質、維他命、躺f、藥品、美容組份及其混合物之 群之其他活性劑組合。 較佳地’該乳清蛋白質微膠粒或其聚集體係以至少 W、較佳大於5%.、更佳大於跳、甚i更佳大於鳩、最 佳南達50%之量存在於該組合物中。 該等乳清蛋白質微膠粒可以液體分散液、懸浮液、凝 膠、乳霜或粉末形式存在。較佳地，乳清蛋白質在該液體 分散液、懸浮液、凝膠、乳霜或料中之濃度大於4%、 較佳大於10%。 本發明所用乳清蛋白質微膠粒之平 卞构尺寸可介於100奈 米至900奈米之間、較佳介於ι〇〇-77 水之間、更佳介於 200-400奈米之間。 方面，本發明利乳清蛋白質聚集體可具有大於ι 被米之平均尺寸。 該等乳清蛋白質微膠粒或其聚集體可精、 沐浴凝膠等。 119066.doc -20 200812633 該等亦可用於局部施用，其中該等乳清蛋白質微膠粒呈 液體分散液、懸浮液、乳霜、凝膠或粉末形式。 該等乳清蛋白質微膠粒可納入用於局部施用之美容組合 物中。 根據一實施，本發明提供一種研磨皮膚粒子之方法，該 方法包括將乳清蛋白質微膠粒施加於皮膚之步驟。該等乳 /月蛋白貝被膠粒可呈液體分散液、懸浮液、乳霜、凝膠或 Φ 粉末形式或可在施加之前納入一組合物中。 本發明之組合物可包含數量至少1 %、較佳大於、更 佳大於10%、甚至更佳大於20%、最佳高達5〇%之微膠 粒。 較佳地，乳清蛋白質在該組合物中之濃度大於1%、較 佳大於10%、更佳大於2〇%、最佳大於 該組合物可呈溶液、乳霜、凝膠、糊劑、發泡體、噴霧 劑等形式。 • 根據一實施例，該組合物係一種頭髮護理產品（例如洗 髮精）。其亦可為沐浴凝膠或體用及/或洗髮洗髮精。 本發明亦提供一種製造美容組合物之方法，該方法包括 - 以下步驟： 、 a.製備乳清蛋白質微膠粒或其聚集體，及 b·將該等微膠粒或其聚集體納入一組合物中。 藉由本發明方法獲得之乳清蛋白質微膠粒或其聚集體及 組合物係（例如）該等上文所闞述者。 根據本發明，該等乳清蛋白質微膠粒之研磨性質允許其 119066.doc -21- 200812633

用於一種研磨皮膚粒子之方法中。此可藉由局部施用呈懸 浮液、分散液、乳霜、凝膠或粉末形式之乳清蛋白質微膠 粒來實施，該等微膠粒可如此使用或與其他活性劑組合使 用。該等活性劑係選自肽、植物提取物、蛋白質水解物、 生物活性物質、維他命、礦物質、藥品、美容組份等。而 且，該等乳清蛋白質微膠粒或其聚集體亦可在施加之前納 入一組合物中。其中納入乳清蛋白質微膠粒之組合物可自 基本乳霜組合物至精製清潔溶液、肥皂、凝膠、發泡體、 牙膏、喷霧劑、洗髮精等。 藉由使用乳清蛋白質微膠粒作為美容劑所展現之優點在 於不僅研磨態樣係去除（例如）死皮膚細胞所關心的，而且 完全天然之微膠粒使其具有其他功能。除機械研磨性質 外同度▼負電荷或帶正電荷之乳清蛋白質微膠粒還可與 來自皮膚帶相反電荷之雜質形成靜電錯合物以促進其特定 去除。以相同方式，微膠粒之天然疏水性可有助於清除來 自皮膚之親油雜質，而決不會侵蝕及刺激皮膚^ 而且’乳清蛋白質微膠粒已展示理想地適於作為乳化 劑、增白劑、脂肪替代物 '初妓膠粒酪蛋白或發泡劑之替代 物，此乃因其能夠穩定存於一 ^ 水性糸統中之脂肪及/或空 氣延長時期。該發泡體穩定极在 一 %疋丨生係展不於圖5中，其比較了 未微膠粒化乳清蛋白質與本、 如乃所用礼清蛋白質微膠粒之 使用。 因此，乳清蛋白質微膠粒 J用作礼化劑，該材料之戶 理想地適用係由於其具有φ 有中性味道且使用該材料不會』 119066.doc -22« 200812633 異味。 此外，本發明乳清蛋白質微膠粒仍能夠用作增白劑，以 ^利用#化合物即可完成若干任務。由於乳清係一種豐 昌地可用材料，故其使用降低需要乳化劑、填充劑、增白 劑或發泡劑之產品的成本。 曰 而且’在其作為乳化劑之情況下，乳清蛋白f微膠粒既 可用作（例如）乳液或發泡體之穩定劑，其還可有助於去除 油性殘餘物、提供完全清潔效果。此外，該等乳清蛋白質 微膠粒可與其他活性成份組合使用，例如乳鐵傳遞蛋白、 3抗病毋劑、消，炎劑、藥物、抗生素物質、酸、玫魂 路甘油等。該等可用於洗髮精中作為清潔劑、增白劑或 甚至作為著色劑。該等亦可用於沐浴凝膠中。 因此，呈任何形式乳清蛋白質微膠粒之應用包括皮膚護 理口 L蔓理(例如牙膏、漱口水、齒銀清潔劑等）及頭髮 護理。該等乳清蛋白質微膠粒或其濃縮物可端視該應用而 如此使用或經稀釋使用。 因此，本發明亦提供一種製造美容組合物之方法，藉此 根據（例如）上述方法製造該等乳清蛋白質微膠粒，且其 該等微膠粒進一步納入一組合物中。 、 其中納入該等乳清蛋白質微膠粒之組合物可自基本乳命 、、且口物至精製清潔溶液、肥皂、凝膠、發泡體、牙膏 務』洗髮精等。該等亦可包含其他活性成份，例如乳鐵 傳遞蛋白、保濕劑、潤膚劑、鎮痛劑、收斂劑、抗氧化 119066.doc -23- 200812633 劑、抗微生物劑、抗病毒劑、消炎劑、藥物、抗生素物 質、酸、玫魂水蒸餾液、甘油、磺基琥珀酸酯、磺酸烷基 酯、可可甜菜鹼、黃原膠、EDTA、山梨酸鉀、大豆油、 杏仁油、丙基二甲基銨、希特瑞斯（ceteareth) 2〇、十六烷 醇、香精油、植物油、氫化蓖麻油、乳化劑、穩定劑、 … Paraben-DU、香水、月桂基葡糖苷、月桂基硫酸銨、月桂 基硫酸鈉、丁二醇、月桂醯基肌胺酸鈉、peg_2硬脂酸 _ 醋、鯨臘醇、cleth-12、硬脂醇、二甲聚矽氧烷 (mieticone)、尿囊素、EDTA二鈉、EDTA四鈉、甲氧基肉 桂酸乙基己基酯、甘草次酸、甲基椰油醯基牛膽酸鈉、 bht、氯化鈉、咪唑啶基脲、心異曱基紫羅蘭酮、水揚酸苄 基酯、丁苯基甲基丙醛、羥基異己基3_環已烯基甲醛、水 揚酸、聚乙烯、三乙醇胺、黃原膠、peg-6〇氫化菌麻油、 二苯甲酮-4、咪唑啶基脲、癸基葡糖苷、二甲基乙醇胺、 椰油醯胺丙基甜菜鹼、乙醇酸、ppg_2羥乙基椰子醯胺、 • glyCeTeth-7、Peg·120甲基葡萄糖二油酸酯、椰油醯基肌胺 酸鈉、苯氧基乙醇、對羥基笨甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙 酯、對羥基苯甲酸丁酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲 -豸異丁酯、香水薄荷醇、香茅醇、香葉醇、己基肉桂醛、 檸檬油精等。 通常，該組合物將包含數量為至少1%、5%、1〇%、 20%、高達50%呈粉末之乳清蛋白質微膠粒或其聚集體。 以下實例將闡述本發明，而非對其進行限制。 實例 119066.doc 24- 200812633 將參考以下詳細闡述本發明微膠粒之製備的實例進一步 界定本發^本文所闡述及所主張之本發明並不欲受限於 本文所揭示特定實_之範圍’此乃因該等係意欲闡述本 發明若干態樣。任何等效實施❹意欲屬於本發明範圍。 實際上，除彼等本文所展示及所闡述者，根據以上說明本 毛明之各種修改對彼等熟悉該項技術者將顯而易見。該等 修改亦易於屬於隨附請求項範圍内。

實例1 : P-乳球蛋白之微膠粒化 β-乳球蛋白（批⑽ 002_8·922, 13_12_2刪）係自 Davisc〇 8.85% 水分、I%% 灰分（〇 〇79% 0-097% K+、0.576% Na+、〇·〇5〇〇/0 (Le Su:，MN，職)獲彳卜該蛋白f係自甜乳清藉由超遽 及離子乂換層析純化。該粉末之組成係89.蛋白質、

Ca2+、〇·〇13〇/ο Mg2+、 cr)。所用所有其他試 劑皆為分析級（Merck Darmstadt，Gennany>。 蛋白質溶液係以0.2%濃度藉由β_乳球蛋白在刪聊水 (MilliP〇re)中溶劑化並於2(rc下攪拌2小時來製備。然後， 藉由添加HC1將等份試樣之PH調節至5.0、5.2、5.4、5.6、 5/' 6_〇、6·2、6.4、6·6、6·8、7.〇。將該等溶液填充於 20 笔升玻璃小瓶（Agilent Technologies)中並用包含一個矽/ρτρΈ 密封之鋁囊密封。將該等溶液於85t：下加熱15分鐘（達到 該溫度之時間為2.30-3.00分鐘）。熱處理後，將樣品在冰 水中冷卻至20。(：。 產物之目視外觀（圖丨）表明微膠粒化之最佳1)11為5.8。 實例2 :乳清蛋白質分離物之微膠粒化 119066.doc •25- 200812633 乳清蛋白質分離物（WPI) (Bipro®，Batch JE 032-1-420) 係自Davisco (Le SueiiT，MN，USA)獲得。該粉末之組成報 告於下表2中。 蛋白質溶液係以3.4%蛋白質藉由乳清蛋白質粉末在 MilliQ®水（Millipore)中溶劑化並於20°C下攪拌2小時來製 備。初始pH為7.2。然後’藉由添加0.1 n HC1將等份試樣 之pH調節至 5.6、5.8、6.0、6.2、6.4及 6.6。 將該等溶液填充於20毫升玻璃小瓶（Agilent Technologies)中並用包含一個矽/!>丁!^密封之鋁囊密封。 將該等溶液於85 °C下加熱1 5分鐘（達到該溫度之時間為 2.30-2.50分鐘）。熱處理後’將樣品在冰水中冷卻至。 經加熱乳清蛋白質之濁度係於500奈米及25 °C下測定， 將試樣稀釋以使量測值介於〇· 1-3吸光度單位之間（分光光 度計Uvikon 810, Kontron lnstrument)。針對初始蛋白質濃 度3.4%計算該等值。 當於500奈米下在10分鐘時間間隔内針對相同樣品所量 測之吸光度穩定（小於初始值5%的變化）時（如圖2所繪示）， 認為達到微膠粒化之pH。對於此產品而言，微膠粒化之最 佳pH為6·0至6.2。對於此於熱處理前調節的pH而言，穩定 濁度為21且離心後藉由於280奈米下之吸光度估計殘餘可 溶性蛋白質為i.9%。我們可得出結論··在pH 6g下45%的 初始蛋白質轉化成微膠粒。 119066.doc -26 - 200812633 表2 : WPI之組成及微膠粒化後之樣品特性 供應商 Davisco 產品名稱 Bipro 批號 JE 032-1-420 組成(mg/100 g) 鈉 650 鉀 44 氯*10若仝40 10 鈣 82 鱗 49 鎂 6 初始pH 7.2 pH微膠粒化 6.0 3.4%蛋白質存於溶液中之濁度(500奈米） 21 藉由280奈米下之濁度估計之殘餘可溶性蛋白質(％) 1.9 實例3 ··微膠粒之顯微鏡觀察 微膠粒之製備： 蛋白質溶液係以2%蛋白質藉由乳清蛋白質粉末（WPI 90 批號 98972， Lactalis， Retier, France)在 MilliQ® 水 (Mmipore)中溶劑化並於20°C下攪拌2小時來製備。然後， 使用HC1 0·1 N或NaOH 0·1 N調節等份試樣之pH。 將該等溶液填充於20毫升玻璃小瓶（Agilent Technologies)中並用包含一個石夕/PTFE密封之铭囊密封。 將該等溶液於85 °C下加熱15分鐘（達到談溫度之時間為 2.30-2.50分鐘）。熱處理後，將樣品在冰水中冷卻至20 °C。對於此產品而言，微膠粒化之最佳pH為7.4。 119066.doc -27- 200812633 顯微鏡觀察： 將液體微膠粒樣品密封於瓊脂凝膠試管中。固定係藉由 浸於2·5%存於Ο.1 M (PH 7.4)二甲基胂酸鹽緩衝液中之戊 二醛溶液中達成且利用2%存於相同緩衝液中之四氧化鐵 後口疋兩種/谷液皆含有0.04%舒紅。樣品在梯度乙醇系 -列（70、80、90、96、1〇〇%乙醇）中脫水後，將樣品包埋於 补抓樹脂（Spurr/乙醇1:1、2:1、1〇〇%)中。使樹脂聚合（7〇 φ C，48小時〕後，利用Leica ultracut UCT超薄切片機切成 半薄及超薄切片。將超薄切片用乙酸雙氧触及捧樣酸錯水 溶液染色，並在透射電子顯微鏡（Philips CM12，80 kV)中 檢測。 TEM顯微照片呈現於圖3中。所獲得微膠粒呈現直徑為 200奈米之球形。 粒徑分佈 對藉由在85 C下於pH 4.25(帶正電荷，其中ζ電位約+25 • mV)及在ρΗ 6·0(帶負電荷，其中ζ電位約-30 mV)丁熱處理 1 wt /。β乳球蛋白分散液丨5分鐘所獲得之彼等微膠粒量測 微膠粒基於強度之尺寸分佈。該等微膠粒之乙平均流體動 力學直位於pH 4·25下為229.3奈米且在pH 6.0下為227.2奈 „ 米P LG及乳巧蛋白質聚集體係使用動態光散射跟蹤。使 用一個配備有以633奈米發射之雷射及具有4·0 mW功率之 Nanosizer ZS裝置（Malvern Instruments，υκ)。該設備係用 於反向散射構造中，其中係以173。之散射角實施檢測。此 可發現混濁樣品中多次散射信號明顯減少。將樣品放置於 119066.doc -28- 200812633 正方形石英池（Hellma’光程1公分）中。該光束之光程係由 該裝置端視樣品濁度（衰減）而自動設定。自相關函數係根 據散射強度之振幅來計算結果展示於圖6中。其表明， 平均粒子之特徵在於一極狹窄多分散指數（<0 200)。因 此，藉由本發明獲得之白色懸浮液穩定且在ρΗ 3·8之大範 圍内具有乳狀外觀。 實例4: β-乳球蛋白在恆定pH下之微膠粒化 重複實例1中所闡述之方法，其中限制條件是使用2%卜 乳球蛋白水溶液。添加精胺酸HC1溶液後，將此溶液之 調節至7.0以獲得介於5_2〇〇 mM之間之最終鹽濃度及1%之 最終卜乳球蛋白濃度。隨後實施熱處理（80。(：，10分鐘，約 2分鐘升溫）以製備微膠粒。 該等結果展示於圖4中且清晰地表明，僅在離子強度範 圍為約50-70 mM時可觀察到實質混濁，此表明存在乳清蛋 白質微膠粒。 實例5 :製備一種增白劑 根據實例2處理天然乳清蛋白質（WPI 95批號848, Lactalis; 8 wt_%水溶液）。所得產物之亮度（l)係以透反射 模式使用配備有2毫米量測池之MacBeth CE-XTH D65 10。 SCE裝置量測。所得亮度為L=74 8，其可與全脂奶粉之值 Ε=74·5相當。 實例6 :製備一種水性發泡邋 將天然β-乳球蛋白（Biopure，Davisco，批號JE 002-8- 922，2 wt-%水溶液）與120 mM精胺酸HC1溶液混合以便最 119066.doc -29- 200812633 終13•乳球蛋白濃度為1 wt.%且精胺酸HC1為60 mM。然後藉 由添加1 N HC1將pH調節至7.0。然後將混合物於8〇°c下加 熱處理10分鐘以便90%的初始卜乳球蛋白轉化成z_平均直 徑為130奈米之微膠粒。在此情況下，該等微膠粒之直徑 係使用 Nanosizer ZS裝置（Malvern Instruments，UK)测定。 將樣品傾倒於石英試管中並自動記錄反射光之變化。所獲 得自相關函數係使用累積方法擬合以便可使用Stokes_ Einstein定律計算該等粒子之擴散係數且由此計算&平均流 體動力學直徑。對於此量測而言，將溶液之折射率視為 1.33且微膠粒為145。然後使用標準化F〇amscanTM (ITConcept)裝置藉由使氮氣鼓泡通過玻璃料產生12_16微 米氣泡使50毫升體積所得^乳球蛋白微膠粒分散液發泡， 以產生體積為180 cm3之發泡體。然後，於26 °C下使用圖 像分析追蹤發泡體隨時間流逝之體積穩定性並與利用在 相同條件下處理、但無精胺酸HC1之卜乳球蛋白所獲得 發泡體（其中未形成微膠粒）之穩定性相比。圖5展示，發 泡體體積穩定性因β-乳球蛋白微膠粒之存在而極大改 良。 實例7 :藉由喷霧劑乾燥所獲得粉末狀乳清蛋白質微膠粒 材料 蛋白質含量為90%之乳清蛋白質分離物（wpi，來自

Lactalis，RStiers，France之pr〇lacta9〇⑧) 可食用乳糖 麥芽糊精DE39 119066.doc -30- 200812633 去離子水 可食用鹽酸1 Μ 方法 使用一個雙夾套100公升槽，將Prolacta90⑧粉末在緩慢 攪拌下以10 wt%之蛋白質濃度分散於50°C去離子水中以避 免形成發泡體，即，將11公斤Prolacta90®分散於89公斤去 離子水中。分散1小時後，藉由添加HC1將分散液之pH調 節至微膠粒化pH(在此情況下約6.3)。使該分散液之溫度升 高至85°C並維持15分鐘以產生乳清蛋白質微膠粒。15分鐘 後，使溫度降至50°C並將10 wt%乳清蛋白質微膠粒分散液 分成兩份50公斤的批料。在第一試驗中，與50°C下將20公 斤乳糖分散於50公斤微膠粒分散液中並攪拌30分鐘。同 樣，將20公斤麥芽糊精DE39添加於其餘50公斤乳清蛋白 質微膠粒分散液中。 然後將兩個混合物以15公升/小時之流速在NIRO SD6.3N 塔中喷霧劑乾燥。空氣輸入溫度為140°C且空氣輸出溫度 為80°C。所獲得粉末之水含量低於5%。 該等乳清蛋白質微膠粒之尺寸係在乳糖及麥芽糊精 (DE39)之存在下在水中使用動態光散射在噴霧劑乾燥之前 及之後測定。總蛋白質濃度係藉由稀釋喷霧劑乾燥前之分 散液或使粉末再構成而設定為0.4 wt%以便符合乳清蛋白 質微膠粒黏度稀釋方案。使用Nanosizer ZS裝置（Malvern Instruments)且微膠粒直徑係根據20個量測值求平均。 在乳糖及麥芽糊精（DE39)存在下乳清蛋白質微膠粒之測 119066.doc -31- 200812633 定粒徑分別為310.4奈米及3〇6·6奈米。粉末再構成後，發 現相應直徑分別為265.3奈米及268.5奈米。該等量測結果 證明：乳清蛋白質微膠粒係關於喷霧劑乾燥物理穩定的。 該等結果係在1% pH 7磷鎢酸之存在下使用負染色藉由〇1 wt%存於水中之乳清蛋白質微膠粒分散液之tem顯微鏡觀 • 察來確證。使用以80 kV運作之Philips CM12透射電子顯微 鏡。在噴霧劑乾燥之前及噴霧劑乾燥粉末再構成之後於溶 液中觀察乳清蛋白質微膠粒。未檢測到形態及結構差異。 實例8 :藉由蒸發濃縮 於15 C下將來自Lactalis之乳清蛋白質分離物Pr〇lacta 9〇(批號500648)在軟水中以4〇/。之蛋白質濃度再構成至達到 最終批買大小為2500公斤。藉由添Mi M鹽酸調節？11以便 最終pH值為5.90。將該乳清蛋白質分散液藉助板-板Apv_ 作t* a熱父換器以5 0 0公升/小時之流速抽出。於6 〇。〇下預 熱，隨後於85°C下熱處理15分鐘。藉由使用動態光散射量 • 測粒徑以及於500奈米下量測濁度來檢驗乳清蛋白質微膠 粒之形成。所獲得4%乳清蛋白質微膠粒分散液之特徵在 於粒子之流體動力學半徑為250奈米、多分散指數為〇13 ， 且濁度為80。然後通常將該乳清蛋白質微膠粒分散液以 500公升/小時之流速進給至Scheffers蒸發器。該蒸發器中 之溫度及真空係經調節以便製得約5 〇 〇公斤蛋白質濃度為 2 0 %乳 蛋白質微膠粒濃縮物並將其冷卻至4。〇。 μ 實例9 ··藉由微濾富集 於15C下將來自Lactalis之乳清蛋白質分離物pr〇i_列 119066.doc -32- 200812633 (批號500648)在軟水中以4%之蛋白質濃度再構成至達到最 終批里大小為2500公斤。藉由添加i m鹽酸調節以便最 終pH值為5.90。將該乳清蛋白質分散液藉助板-板Apv-混 合熱交換器以500公升/小時之流速抽出。於，。下預熱， P逍後於85 C下熱處理15分鐘。藉由使用動態光散射量測粒 . 徑以及於500奈米下量測濁度來檢驗乳清蛋白質微膠粒之 形成。所獲得4%乳清蛋白質微膠粒分散液之特徵在於粒 φ 子之流體動力學半徑為260奈米、多分散指數為0.07且濁 度為80。該蛋白質之微膠粒形式亦藉由tem檢測，且明顯 看到平均直徑為150_200奈米之微膠粒結構（圖9)。將該乳 清蛋白質微膠粒分散液於4。(：下冷卻並通常以ι8〇公升/小 時之流速進給至配備有6.8 m2 Carbosep Μ14膜之過濾單 兀。在此情況下，於1〇。〇下實施乳清蛋白質微膠粒之濃縮 直至參透流速達到7 〇公升/小時為止。在此情況下，該最 終乳清蛋白質濃縮物包含2〇%蛋白質。藉由tem檢測該濃 φ 縮物中該等微膠粒之結構，且很明顯與微濾前4%乳清蛋 白質分散液相比，未看到明顯變化（圖1〇)。 實例10 :包含至少90%乳清蛋白質之乳清蛋白質微膠粒 粉末 ~ 將200公斤藉由微濾以20%蛋白質獲得之乳清蛋白質微 膠粒濃縮物（參見以上實例）使用霧化喷嘴（0=〇5毫米，喷 射角=65。，壓力=40巴）以25公斤/小時之產物流速注入Niro SD6.3N塔中。產物之入口溫度為i5〇°c且出口溫度為75 °C。該塔中之氣流為丨50 m3/h。該粉末中之水分含量小於 119066.doc -33- 200812633 4%且該粉末之特徵在於極高流動性。該粉末之掃描電子 顯微鏡展示表觀直徑介於10-100微米之間之完全球形粒子 (圖 8) 〇 實例11 :混合乳清蛋白質微膠粒粉末 - 將20公斤乳清蛋白質微膠粒濃縮物與1.7公斤DE為39之 . 麥芽糊精混合以便粉末中最終乳清蛋白質微膠粒與麥芽糊 精比例為70/30。將此混合物使用霧化噴嘴（0 = 0.5毫米，喷 射角=65。，壓力=40巴）以25公斤/小時之產物流速注入Niro • SD6.3N塔中。產物之入口溫度為150°C且出口溫度為75 fC。該塔中之氣流為150 m3/h。該粉末中之水分含量小於 4%且該粉末之特徵在於極高流動性。 當將實例10及11之粉末在水中再構成時，其包含具有與 乳清蛋白質微膠粒濃縮物相同之結構及形態之實質微膠 粒。 實例12:包含3.8%乳清蛋白質微膠粒之美容組合物的配 血 方。磨砂沐浴凝膠。 成份 百分數 玫瑰水蒸餾液 35-40 20%經濃縮的WPM 15-25 石黃基號ίό酸酯 10-20 磺酸烷基酯 10-15 甘油 5-10 可可甜菜鹼 1-10 黃原膠 0.1-2 EDTA 0.1-1 山梨酸鉀 0.1-1 香水 0.1-1 119066.doc -34- 200812633 方法： 將20%經濃縮WPM及玫瑰水蒸餾液加熱至40°C，然後添 加甘油及黃原膠。向此摻合物中添加績酸烧基自旨、可可甜 菜鹼、磺基琥珀酸酯及EDTA。將所有成份藉由攪拌混 合，然後添加山梨酸卸及香水。 實例17 :包含11.8%乳清蛋白質微膠粒之美容組合物的配 方。WPM去角質洗液。

成份 % 經濃縮的20% WPM 55-65 杏仁油 15-20 甘油 5-10 香水 1-10 鯨蠟醇 1-5 硬脂酸 1-5 聚山梨醇酯60 1-5 丙基三曱基銨 1-5 Paraben-DU 0.1-5 方法： 將20%經濃縮WPM加熱至70°C，然後添加甘油。添加熔 融（70°C )油相（杏仁油、鯨蠟醇硬脂酸及聚山梨醇酯60)並 攪拌直至獲得均勻分散液為止。將摻合物於室溫下冷卻並 然後添加Paraben-DU及香水。 實例18 :包含14%乳清蛋白質微膠粒之美容組合物的配 方。WPM去角質洗液。 119066.doc -35- 200812633 成份 % 20%經濃縮WPM 60-80 甘油 5-10 大豆油 5-10 丙基三甲基銨 2-8 可可甜菜鹼 1-5 CreamMaker Wax 1-5 希特瑞斯-20 1-5 蘇壤醇 1-5 Paraben-DU 0.1-2 香水 0.1-1 方法：

將20%經濃縮WPM加熱至70°C，然後添加甘油及丙基三 曱基铵。添加溶融（70 °C )油相（大豆油、Cream Maker WAX、希特瑞斯-20、可可甜菜鹼、鯨蠟醇）並攪拌直至獲 得均勻分散液為止。將摻合物於室溫下冷卻並然後添加 Paraben-DU及香水。 【圖式簡單說明】 下文將參考以下隨附圖中所展示之一些較佳實施例進一 步闡述本發明，其中： 圖1展示一證明pH及熱處理對β-乳球蛋白微膠粒化之影 響的試驗結果。 圖2展示一種使用於500奈米下之濁度量測結果對商業製 品（Bipro®，Batch JE 032-1-420)之微膠粒化pH進行測定之 手段。 圖3係於pH 7.4下乳清蛋白質微膠粒（2 wt·%，WPI 95， 119066.doc -36- 200812633

Lactalis)之透射電子顯微鏡顯微照片。標度條為200奈米。 圖4展示一評價於恆定pH 7.0下離子強度（精胺酸HC1)對 蛋白質微膠粒之形成影響之試驗結果。 圖5展示與未經微膠粒化β-乳球蛋白相比發泡體之體積 穩定性（FVS)，該發泡體係於pH 7.0下在60 mM精胺酸HC1 之存在下藉由1 wt.% β-乳球蛋白微膠粒（Davisco)穩定。 圖6展示乳清蛋白質基於強度之等效流體動力學直徑， 該乳清蛋白質係藉由1 wt% β-乳球蛋白分散液於85°C下於 介於2-8之間之pH下熱處理15分鐘獲得。乳清蛋白質微膠 粒係於pH 4.25(帶正電荷，其中ζ電位約+25 mV)及於pH 6.〇(帶負電荷，其中ζ電位約-30 mV)下獲得。該等微膠粒 之Z-平均流體動力學直徑於pH 4.25下為229.3奈米且在pH 6.0下為227.2奈米。展示負染色後藉由TEM所獲得該等微 膠粒之相應顯微照片。標度條為1微米。 圖7展示乳清蛋白質微膠粒之高度示意性結構。 圖8展示微濾後喷霧劑乾燥20%蛋白質含量分散液所獲 得乳清蛋白質微膠粒粉末之SEM(掃描電子顯微鏡）顯微照 片。 圖9係以4%蛋白質含量所獲得乳清蛋白質微膠粒分散液 之負染色TEM顯微照片。 圖10係微濾後以20%蛋白質含量所獲得乳清蛋白質微膠 粒分散液之負染色TEM顯微照片。 圖11展示一乳清蛋白質微膠粒分散液之熱穩定性，該分 散液係在85°C下加熱15分鐘後於pH 7.0下於NaCl存在下微 119066.doc -37- 200812633 濾後以10%蛋白質含量獲得。 圖12展示一乳清蛋白質分散液之熱穩定性，該分散液係 在85。(：下加熱15分鐘後於pH 7_0下於NaCl存在下以4%蛋白 質含量獲得。 ' 圖13係4%乳清蛋白質微膠粒分散液之負染色Tem顯微 _ 照片，該分散液係基於於50°C下分散於去離子水中後之純 乳清蛋白質微膠粒噴霧劑乾燥粉末。 ❿ 圖14係一展示微膠粒尺寸分佈之照片，該等微膠粒係藉 由本發明方法使用4 wt% pr〇lacta 90乳清蛋白質分離物於 pH 5.9下處理獲得。 圖15係一 SEM顯微照片，其展示切割圖8所呈現喷霧劑 乾燥粉末顆粒後之内部結構。 圖16係4%乳清蛋白質微膠粒分散液之負染色TEM顯微 照片’該分散液係在室溫下由純淨經冷凍乾燥之乳清蛋白 質微膠粒粉末存於去離子水中形成。標度條為〇 5微米。 φ 圖17係當在PH 3.0下增加混合比例時被SB〇(硫酸化油酸 丁酯）包覆之WPM示意圖。灰色圓：帶有正表面電荷之 WPM。黑色頭部+尾部·· SB〇之帶負電荷頭部及疏水尾 ， 部。 • 圖18係蒸發後所獲得2〇%乳清蛋白質微膠粒濃縮物之照 片，其中添加4% NaCl。 119066.doc -38-

Claims (1)

1. 200812633 十、申請專利範圍： L 一種蛋白質微膠粒、尤其乳清蛋白質微膠粒或其聚集體 作為研磨介質之用途。 2·如請求項〗之用途，其中該等聚集體包括選自可溶性或 • 不溶性鹽、色素、脂肪、乳化劑、香料、植物提取物、 諸如礦物質、維他命、藥物之配體或生物活性物質、及 其任何混合物之群組的額外成份。 3. —種乳清蛋白質微膠粒或其聚集體作為美容劑之用途。 _ 4· 一種乳清蛋白質微膠粒或其聚集體用於製造美容組合物 之用途。 5.如上述請求項中任一項之用途，其中該等乳清蛋白質微 膠粒或其聚集體係與其他活性劑纟且合。 6·如睛求項5之用途，其中該等活性劑係選自肽、植物提 取物、蛋白質水解物、生物活性物質、維他命、礦物 質、藥品、美容組份、及其混合物之群組。 _ 7·如請求項4至6之用途，其中該等乳清蛋白質微膠粒或其 t集體係以至少1 %、較佳至少5 %、更佳至少1 〇 %、甚至 更佳至少20%、最佳高達50%之量包含於該組合物中。 ， 8 ·如請求項1至7中任一項之用途，其中該等乳清蛋白質微 膠粒係以液體分散液、懸浮液、凝膠、乳霜或粉末形式 存在。 9.如請求項5之用途，其中該乳清蛋白質之濃度係大於 4%、較佳大於1 〇%。 10·如上述請求項中任一項之用途，其中該等乳清蛋白質微 119066.doc 200812633 膠粒具有100奈米至900奈米之平均尺寸。 U·如請求項10之用途，其中該等瓒、生 寻孔用蛋白質微膠粒具有 100-770奈米、較佳200-400奈米之平均尺寸。 12. 如上述請求項中任—項之用途，其中該等乳清蛋白質微 膠粒聚集體具有大於1微米之平均尺寸。 13. 如請求項4至12中任—項之用途，其中該美容組合物係 洗髮精。

   14·如請求項4至12中任一項之用途， 沐浴凝膠。 /、中該美容組合物係 15.-種諸如乳清蛋白質或酪蛋白微膠粒等蛋白質微膠粒之 局部施用。 %如請求項15之局部施用’其中該等乳清蛋白質微膠粒係 呈液體分散液、懸浮液、乳霜、凝膠或粉末形式。 17.如請求項15或16中任一項之局部施用，其中該等乳清蛋 白質微膠粒係納入組合物中。 18·種研磨皮膚粒子之方法，其包括將乳清蛋白質微膠粒 施加於皮膚之步驟。 19·如叫求項18之方法，其中該等乳清蛋白質微膠粒係呈液 體分散液、懸浮液、乳霜、凝膠或粉末形式。 2〇·如請求項18或19中任一項之方法，其中該等乳清蛋白質 微膠粒係在施加之前納入組合物中。 21 · —種美容組合物，該組合物包含一種研磨介質，該研磨 介質包含諸如乳清蛋白質或酪蛋白質微膠粒或其聚集體 之蛋白質。 H9066.doc 200812633 22·如請求項21之組合物’其中該等乳清蛋白質微膠粒係以 至少1%、較佳至少5%、更佳至少1〇%、甚至更佳至少 20%、敢佳南達50%之量包括在該組合物中。 擎 2 3 ·如請求項21及2 2之組合物，1中讀擎受丨主 ，、甲忑导礼清蛋白質微膠粒 具有100奈米至900奈米之平均尺寸。 24. 如請求項21至23之組合物，其中該等乳清蛋白質微膠粒 聚集體具有大於1微米之平均尺寸。 25. 如請求項21至24之組合物，其中乳清蛋白質之濃度大於 1%、較佳大於10%、更佳大於2〇%、最佳大於5〇%。 26. 如請求項21至25中任_項之組合物，該組合物係為溶 液、乳霜、凝膠、糊劑、發泡體、噴霧劑、洗髮精等形 式。 27. 如請求項21至26中任-項之組合物，其為身體及/或頭髮 護理產品。 28. 如請求項27之組合物，其為一種洗髮精。 29. 如請求項2 1至26中任一頊夕έ日人私 甘从》 項之組合物，其為沐浴凝膠產 3〇_ -種製造美容組合物之方法，該方法包括以下步驟: a. 製備乳清蛋白質微膠粒或其聚集體；及 b. 將該等微膠粒或其聚集體納入組合物中。 31. 如請求項3G之方法’其中該等乳清蛋白f微膠粒具有 100及900奈米之平均尺寸。 32. 如請求項3G之方法’其中該等乳清蛋白f微膠粒聚集體 具有大於1微米之平均尺寸。 119066.doc 200812633 33·如請求項30至32之方法，其中該等乳清蛋白質微膠粒係 呈懸浮液、分散液、乳霜、凝膠或乾燥粉末形式。 34·如請求項30至33之方法，其中該納入有該等乳清蛋白質 微膠粒或其聚集體之組合物係溶液、糊劑、凝膠、乳 霜、發泡體或噴霧劑等。 35. 如請求項30至34中任一項之方法，其中該納入有該等乳 /月蛋白貝械膠粒或其聚集體之組合物係洗髮精。

   36. -種藉由如請求項3G至35中任_項之方法獲得之美容组

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