TW200808336A - Agent for preventing arteriosclerosis, agent for inhibiting vascular intimal thickening, agent for improving vascular endothelial function, and functional food - Google Patents

Agent for preventing arteriosclerosis, agent for inhibiting vascular intimal thickening, agent for improving vascular endothelial function, and functional food Download PDF

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Teppei Nakamura
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Akihiro Masuyama
Toshiaki Takano
Toshikazu Yoshikawa
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Hiroshi Ichikawa
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Description

200808336 (1) 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於顯示血管內膜增厚抑制作用或血管內皮 功能改善作用，可期待抗動脈硬化作用之動脈硬化預防劑 、血管內膜增厚抑制劑、血管內皮功能改善劑及顯示如此 作用之功能性食品。 • 【先前技術】 心肌梗塞或腦梗塞等之動脈硬化性疾病係顯示與癌症 並列之曰本國內死因中之最大比率。作爲動脈硬化之危險 因子，可舉例如高脂血症、高血壓、糖尿病、抽煙、肥胖 、高尿酸血症、年紀增長、壓力等，此等互相影響，引起 血管障礙。因此，即使各個危險因子的程度爲輕度，仍因 此等之重複而危險度相加、相乘地增加。 傳統上，發現許多發酵乳、乳酸菌或乳的酵素分解物 Φ 中之生理功能。例如特開2003-3 06436號公報及特開 2002-65203號公報中記載具有降低膽固醇作用，特開 2005-52090 號公報及 American Journal of Clinical Nutrition 64 ( 1 996 ) p767-77 1中記載具有降低血壓作用 ，特開平1 0-4 5 6 1 0號公報中記載具有抗壓力作用，進一 步，於W〇2〇05_ 1 02542號手冊中記載將獸乳酪蛋白水解 成平均鏈長爲胺基酸殘基數爲2.1以下，得到含有游離胺 基酸及胜肽之酪蛋白水解物係具有高血壓蛋白寧（ angiotensin ) I轉換酵素抑制活性或降低血壓作用。亦即 200808336 (2) ，於此等文獻中，記載減輕對動脈硬化之各 發現。 另一方面，認爲僅使上述之一種危險因 不至於預防動脈硬化發病。例如於食之科I )p 2 0 - 2 5 )或 Atherosclerosis ( 1 5 1 ( 2 0 0 0 ) ~ ，血中膽固醇濃度與動脈硬化發病並
Circulation 1 04 ( ( 200 1 ) p23 9 1 -23 94 )中 • 血壓狀態，仍未發現動脈硬化程度的變4 International Journal of Cardiology 81 ( 115)中記載，即使投予高血壓蛋白寧I轉 (Enalapril )，仍未發現動脈硬化抑制作用 因此，於上述 W02005- 1 02542號手冊 定酪蛋白水解物中，即使得到減輕對於動脈 險因子之發現，仍不能斷言因此該特定水解 硬化作用。 • 然而，動脈主要係由具有外膜與進行血 之平滑肌層之中膜，以及與血液直接接觸且 之平滑肌層發出指令之內皮細胞層之內膜所 逐漸明瞭該內膜中之內皮細胞係掌管關於血 固、血管之舒張·收縮、炎症之抑制·進展 •衰退等之血管功能之各種指令，認爲該內 動脈硬化爲首之各種疾病有關者。因此，改 能，可期待預防動脈硬化等。 另外，動脈硬化係動脈壁增厚而變得無 個危險因子之 子作用降低， I ( 257 ( 1999 P501-508)中 無相關，於 ，即使抑制高 匕，另外，於 ：2 00 1 ) p 1 0 7 - 換酵素抑制劑 〇 中所記載之特 硬化之各個危 物具有抗動脈 管舒張、收縮 對於上述中膜 構成。近年來 液之線溶·凝 、血管之增殖 皮功能係與以 善血管內皮功 彈性之病態， -6- (3) 200808336 狀增厚（粥 化。近年， 損傷或功能 預防粥狀動 皮功能之診 Journal of 積描記法（ 止動脈血流 量，利用暫 功能之方法 物質之釋出 機能、可期 脈硬化等之 用，可期待 有改善血管 的用劑及動 其中粥狀動脈硬化係於動脈之內膜下顯示斑點 狀）爲特徵之減少或阻止血流之症狀之動脈硬 作爲如此症狀之要因，可舉例血管內皮細胞之 降低。 因此，可期待抑制血管內膜增厚，緩和、 脈發病之作用。 作爲以對人體非破壞條件測定上述血管內 斷測定方法，已知例如 The American Cardiology 87( (2001) pl21-125)所示之體
Plethysmography )。該體積描記法係暫時地停 時，增大內皮細胞產生·釋出血管擴張物質的 時地增加血流量，由血管舒張性測定內皮細胞 ，基於內皮細胞功能若受傷害，因爲血管舒張 量降低，所以血流量亦降低之方法。 【發明內容】 發明之揭示 本發明之課題係提供可改善血管內皮相關 待預防血管內皮功能相關之各種疾病’例如動 作用，以及顯示緩和、預防血管內膜增厚之作 預防粥狀動脈硬化等之作用之安全性優異之具 內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少一種作用 脈硬化預防劑。 本發明之其他課題係提供日常上可連續使用’安全性 200808336 (4) 優異之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少 一種作用的功能性食品。 依據本發明，提供含有含Xaa Pro Pro之獸乳酪蛋白 之水解物或其濃縮物作爲有效成份之具有改善血管內皮功 能及抑制血管內膜增厚中至少一種作用之用劑。 另外，依據本發明，提供含有Xaa Pro Pro作爲有效 成份之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少 # 一種作用之用劑。 進一步，依據本發明，含有由屬於瑞士乳桿菌（ Lactobacillus helveticus)種之菌株，使含乳蛋白質之原 料發酵所得之含lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之發酵物作 爲有效成份，具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚 中至少一種作用之用劑。 進一步，依據本發明，提供含有上述任一種用劑作爲 有效成份之動脈硬化預防劑。 ® 另外，依據本發明，提供含有含Xaa Pro Pro之獸乳 酪蛋白之水解物或其濃縮物作爲有效成份之具有改善血管 „ 內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少一種作用之功能性食 _ 品。 進一步，依據本發明，提供含有Xaa Pro Pro作爲有 效成份之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚中至 少一種作用之功能性食品。 進一步，依據本發明，提供含有由屬於瑞士乳桿菌（ Lactobacillus helveticus)種之菌株，使含乳蛋白質之原 -8- 200808336 (5) 料發酵所得之含lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之發酵物作 爲有效成份，具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚 中至少一種作用之功能性食品。 另外，依據本發明，提供用以製造具有改善血管內皮 功能及抑制血管內膜增厚中至少一種作用之用劑或功能性 食品之含有含Xaa Pro Pro之獸乳酪蛋白之水解物或其濃 縮物、Xaa Pro Pro、或由屬於瑞士乳桿菌（Lactobacillus • helveticus )種之菌株，使含乳蛋白質之原料發酵所得之 含lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之發酵物之使用。 進一步，依據本發明，提供用以製造動脈硬化預防劑 之含有含Xaa Pro Pro之獸乳酪蛋白之水解物或其濃縮物 、Xaa Pro Pro、或由屬於瑞士 乳桿菌（Lactobacillus helveticus )種之菌株，使含乳蛋白質之原料發酵所得之 含lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之發酵物。 本發明之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚 ® 中至少一種作用之用劑或功能性食品，因爲含有特定的酪 蛋白之水解物或其濃縮物、Xaa Pro Pro、或含lie Pro Pro 及/或Val Pro Pro之特定的發酵物或Xaa pro Pro作爲有 效成份，所以安全性優異，尤其功能食品時係可日常中連 續使用。因此，有關血管內皮功能之改善慢性高血壓症、 或抑制動脈硬化症、血管內膜增厚，尤其抑制因年齡增長 、生活習慣等而血管內皮細胞功能降低或損傷而形成粥狀 ，可期待緩和、預防粥狀動脈硬化發病。 本發明之動脈硬化預防劑，因爲含有本發明之上述用 -9 - 200808336 (6) 劑作爲有效成份，所以可期待預防動脈硬化之作用。 用以實施發明之最佳型態 以下係更詳細地說明本發明。 本發明之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚 中至少一種作用之用劑及功能性食品係含有（a )含Xaa Pro Pro (以下稱爲（a)成份）' 或（b)含Xaa Pro Pro • 之獸乳酪蛋白之水解物或其濃縮物（以下稱爲（b )成份 )、（c)由屬於瑞士 乳桿菌（Lactobacillus helveticus) 種之菌株，使含乳蛋白質之原料發酵所得之含lie Pro Pro 及/或Val Pro Pro之發酵物（以下稱爲（c)成份）作爲有 效成份。亦即，（b )及（c )成份係包含（a )成份，以 (a)成份，尤其以lie Pro Pro及/或Val Pro Pro作爲有 效成份係有效的，可由後述實施例等而理解。 作爲（a)或（b)成份之Xaa Pro Pro係以含lie Pro • Pro及/或Val Pro Pro爲宜。（b )成份係以更含有Xaa P r o尤佳。 (b )成份中所含Xaa Pro Pro之含有比率係相對於（ b )成份中之胜肽及游離胺基酸之合計量，通常爲1重量％ 以上，以1至5重量％爲宜。藉由使該含有比率爲1重量 %以上，可期待更高的作用。另外，（b )成份中所含之 lie Pro Pro或Val Pro Pro之含有比率係相對於成份中之 胜肽及游離胺基酸之合計量，各單獨爲〇·3重量％以上’ 或lie Pro Pro及Val Pro Pro之合計量爲0.3重量％以上’ -10- (7) (7)200808336 可期待高的效果。進一步，分別含有0.3重量％以上之lie Pro Pro及Val Pro Pro時，可期待更高的效果。 (b )成份中所含之xaa pro之含有比率係相對於（b )成份中之胜肽及游離胺基酸之合計量，通常爲5重量％ 以上，以5至25重量％爲宜。藉由使該含有比率爲5重量 %以上，可期待更高的作用。 (c )成份中所含之lle pro pro及/或Val Pro Pro之 含有比率係於l〇〇g之發酵物之冷凍乾燥物中，換算爲 l〇mg以上，以15mg以上爲宜時，可期待所需之效果。 (b )成份中之Xaa Pro Pro及Xaa Pro之Xaa可爲任 意的胺基酸即可。例如作爲Xaa Pro Pro，可舉例如Ser Pro Pro、Leu Pro Pro、lie Pro Pro、Val Pro Pro，作爲 Xaa Pro，可舉例如 lie Pro、Glu Pro、Arg Pro、Gin Pro 、Met Pro、Tyr Pro。作爲（b )成份，可舉例如含有上述 舉例之Xaa Pro Pro中之至少1種或2種以上爲宜，進一 步，含有1種或2種以上之上述舉例之Xaa pro之酪蛋白 水解物爲宜。 (b )成份或（c )成份係除了胜肽以外，亦可含有游 離胺基酸’進一步，除了上述胜肽及游離胺基酸以外，亦 可含有例如市售之獸乳酪蛋白、乳蛋白質中通常所含之脂 質、灰分、碳水化合物、食物纖維、水分等，另外，因應 需要，可除去部份或全部此等中之適當成份。 製造（b )成份時，例如使用可得到上述Xaa Pro Pr〇 ’進而Xaa Pro之酵素群，水解獸乳酪蛋白之方法，由麴 -11 - 200808336 (8) 菌使獸乳酪蛋白發酵之方法而可得之。 獸乳酪蛋白係含有許多P r 〇之食品等所使用之經確認 安全性之蛋白質，可舉例如牛奶、馬奶、山羊奶、羊奶等 之酪蛋白，尤其可適合使用牛奶酪蛋白。 使獸乳酪蛋白水解或發酵時之酪蛋白濃度雖無特別的 限制，但爲有效率地產生（b )分解物，以3至1 9重量％ 爲宜。 Φ 作爲上述酵素群，可舉例如以含有可切斷Xaa Pro
Xaa或Xaa Pro Pro Xaa之羧基末端之Xaa Pro序列之胜肽 分解酵素之酵素群（X)爲宜。 酵素群（X )係以含有具有絲胺酸作爲活性中心之絲 胺酸型蛋白質分解酵素、或具有金屬作爲活性中心之金屬 蛋白質分解酵素爲宜。作爲金屬蛋白質分解酵素，可舉例 如中性蛋白質分解酵素（protease ) I 、中性蛋白質分解 酵素Π及白胺酸胺基肽酶（leucine aminopeptidase)等， ® 更含有此等中之至少1種時，可將所需之水解物，效率佳 且短時間，進而以1階段反應而可得之觀點上係適宜的。 另外，作爲上述可切斷Pro Xaa序列之胜肽分解酵素係以 顯示等電點爲酸性範圍之酵素爲宜。 作爲上述酵素群或酵素群（X)，可舉例如來自米麴 菌（Aspergillus oryzae)等之麴菌之酵素群。如此之酵素 群係可舉例如以適當的培養基培養菌體，水抽出所產生之 酵素群等，可舉例如來自米麴菌之酵素群中之顯示等電點 爲酸性範圍之酵素群尤佳。 -12- 200808336 (9) 作爲來自米麴菌之酵素群，可使用市售品，可舉例如 Smizyme FP、LP或MP (以上之註冊商標，新日本化學（ 股）製）、Umamizyme (註冊商標，天野酵素素（股）製 )、Sternzyme B11024、PROHIDROXY AMPL (以上爲商 品名，樋口商會股份有限公司製）、orientaseONS (註冊 商標，阪急 bioindustry (股）製）、Denatyme AP (註冊 商標，Nagase生化學社製），以使用 Smizyme FP (註冊 • 商標，新日本化學（股）製）爲宜。 使用此等市售之酵素群時，通常設定最適合之條件， 但可因應使用的酵素群，可將如上述可得到酪蛋白水解物 之條件，例如使用酵素量或反應時間等以進行適當改變。 水解上述獸乳酪蛋白時酵素群之添加量係於溶解獸乳 酪蛋白之水溶液中，酵素群/獸乳酪蛋白之重量比成爲 1 /1 000以上，以1 / 1 000至1/10爲宜，以1/100至1/10尤 佳，以1/4 0至1/10更好之比率的量。 ® 反應條件係因應酵素群，適當地選擇以可得到目的的 酪蛋白水解物，溫度通常爲25至60°c，以45至55°c爲 宜，pH爲3至10，以5至9爲宜，以5至8尤佳。另外 . ’酵素反應時間通常爲2至4 8小時，以7至1 5小時爲宜 〇 結束酵素反應係可藉由使酵素失活而進行，通常以60 至U 〇°c使酵素失活，可使反應停止。 酵素反應停止後，因應需要，將沈澱物藉由離心分離 @去或各種過濾器除去爲宜。 -13- 200808336 (10) 另外，因應需要，亦可自所得之水解物除去具有苦味 或臭味之胜肽。除去如此之苦味成份或臭味成份係可使用 活性碳或疏水性樹脂等而進行。例如於所得之水解物中， 對於使用之酪蛋白量，添加1至2 0重量％，使反應1至 1 〇小時而可實施。除去所之使用活性碳係可由離心分離或 膜處理操作等之已知方法而進行。 含所得（b )成份之反應液係可直接添加於飲料等之 液體製品，利用於功能性食品。另外，爲提高（b )成份 中之酪蛋白水解物之泛用性，以濃縮上述反應液後，製成 乾燥之粉末形態爲宜。製成粉末時，可賦予血管內膜增厚 抑制作用、血管內皮功能改善作用、預防動脈硬化作用中 至少一種作用於各種食品等，可形成功能性賦予劑。 對於如此之粉末，爲改善營養均衡或風味等，亦可使 含有各種補助添加劑。可舉例如各種碳水化合物、脂質、 維生素類、礦物質類、甘味料、香料、色素、質地改善劑 等。 本發明之具有改善血管內皮功能及/或抑制血管內膜 增厚作用之用劑中’以（b )成份作爲有效成份時之投予 量係對人時，作爲（b)成份中之xaa pro pro、或xaa Pro Pro及Xaa Pro之合計量，通常每天爲lo^g至i〇g， 以Img至5g爲宜，以3mg至lg程度尤佳，亦可1天分 成數次攝取。 投予期間係可依該疾病之症狀等調整，通常爲1天以 上，以7天至3 65天爲宜，以經常性攝取爲宜。 -14- 200808336 (11) 製造（C)成份所使用之瑞士乳桿菌（Lactobacillus helveticus)種之菌株，雖可單獨瑞士乳桿菌，但發酵時 ，於不損害本發明所需效果之範圍，亦可含有其他的乳酸 菌等。 ' 作爲屬於瑞士乳桿菌種之菌株，作爲可生產高量之具 ' 有改善血管內皮功能作用及/或抑制血管內膜增厚作用之 lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之產生菌，以使用適合之菌 φ 體外蛋白質分解酵素活性高者爲宜。例如依據以Twining 等之方法（Twining，S. Anal. Biochem. 143 3410 ( 1984) )爲基礎之 Yamamoto等之方法（Yamamoto，Ν·等，J. Biochem. ( 1 993 ) 1 1 4,740 )所測定 U/OD590 之値，表示 400以上之菌株爲宜。
作爲適合之瑞士乳桿菌，可舉例如瑞士乳桿菌CM4 株（獨立行政法人產業技術綜合硏究所專利生物寄存中心 日本國茨城縣筑波市東1-1-1中央第6寄存號碼：FERM φ BP-6060，寄存日1997.8.15)(以下稱爲CM4株）。此 CM4株係以上述寄存號碼登記於專利手續上之微生物寄存 國際上承認相關之布達佩斯條約，該株已經專利認可。 (c)成份係添加含屬於瑞士乳桿菌（Lactobacillus helveticus )種之菌株之發酵乳菌酝於含乳蛋白質之原料 ，適當地選擇發酵溫度等之發酵條件，藉由使其發酵而可 得之。 有效成份之（c )成份係包含將所得之（c )成份之濃 縮物等，由冷凍乾燥、噴霧乾燥等而成粉末者° -15- 200808336 (12) 屬於瑞士乳桿菌種之菌株係以使用作爲預先前培養t 活性非常高之菌翫爲宜。開始菌數係以1〇5至1〇9個/ml 程度爲宜。 (C )成份係例如使用於特定保健用食品等之功能性 飲食品時，爲使風味良好，使嗜好性良好，亦可倂用酵母: ' 於上述屬於瑞士乳桿菌種之菌株而使發酵。酵母的菌種雖 無特別的限制，但可舉例如適合之釀酒酵母（ _ Saccharomyces cerevisiae )等之酵母菌（Saccharomyces ) 屬酵母等。酵母之含有比率係因應該目的而可適當選擇。 作爲含乳蛋白質之原料，可舉例如牛奶、馬奶、羊奶 、山羊奶等之動物奶、及豆漿等之植物奶，此等加工乳之 脫脂奶、還原奶、奶粉、煉乳，以牛奶、豆漿、此等之加 工乳爲宜，以牛奶或其加工乳尤佳。 乳之固形物濃度並無特別的限制，例如使用脫脂奶時 之無脂乳固形物濃度，通常爲3至1 5重量％程度，生產性 • 上以6至15重量％爲宜。 上述發酵通常係藉由靜置或攪拌發酵，例如發酵溫度 爲25至45 °C，以30至45°C爲宜，發酵時間爲3至72小 時，以12至36小時爲宜，乳酸酸度成爲1.5 %以上時使 發酵停止之方法而進行。 本發明之具有改善血管內皮功能作用及/或抑制血管 內膜增厚作用之用劑中，以（c )成份作爲有效成份時之 投予量係對人時，作爲（c )成份之乾燥量，通常每天爲1 至100g，以2至50g之程度爲宜，亦可1天分成數次攝取 -16- 200808336 (13) 。另外，作爲（c )成份中之vai pro pro及/或lie pro pro 的量，通常爲10/zg至10g，以lmg至5g爲宜，以3mg 至1 g程度尤佳，亦可1天分成數次攝取。 投予期間係可依該疾病之症狀等調整，通常爲1天以 上，以7天至3 65天爲宜，以經常性攝取爲宜。 本發明之動脈硬化預防劑係包含上述具有改善血管內 皮功能作用及/或抑制血管內膜增厚作用之用劑。尤其具 有抑制血管內膜增厚作用時，可有效地作爲粥狀動脈硬化 預防劑。 本發明之動脈硬化劑之投予量係對人時，上述（a ) 至（c)成份中之 Xaa Pro Pro、或 Xaa Pro Pro 及 Xaa Pro 之合計量，或Val Pro Pro及/或lie Pro Pro的量，通常每 天爲1 0 /z g至1(^’以1111!至5§爲宜，以311^至1§程度 尤佳，亦可1天分成數次攝取。 動脈硬化預防劑之投予期間係可考量攝取人或動物之 年齢或該人或動物對動脈硬化危險因子之環境等，而進行 各種調整，通常爲1天以上，以7天至3 65天爲宜，以經 常性攝取爲宜。 本發明之具有改善血管內皮功能作用及/或抑制血管 內膜增厚作用之用劑，以及動脈硬化預防劑之投予方法， 通常爲經口投予。 本發明用劑之形態係可爲經口投予用之製劑形態。可 舉例如錠劑、九劑、硬膠嚢劑、軟膠囊劑、微膠囊、散劑 、顆粒劑、液劑等。 17-
200808336 (14) 製劑化係例如因應適當的需要，使用作爲藥 之載體、助劑、賦形劑、補形劑、防腐劑、安定 合劑、pH調節劑、緩衝劑、增黏劑、凝膠化劑 、抗氧化劑等，可以一般所認可之製劑實施上所 位用量形態製造。 本發明之功能性食品係含有作爲本發明之具 管內皮功能作用及/或抑制血管內膜增厚作用之 效成份之上述（b )或（c )成份，可製成具有改 皮功能及/或抑制血管內膜增厚作用之特定保健 之健康食品。 爲得到如此效能之攝取量係可連續使用功會g 若有鑑於連續地或間斷地長期間攝取時，對人時 述（b)成份中之 Xaa Pro Pro、或 Xaa Pro Pro】 之合計量，以及作爲上述（c )成份中之Val Pro lie Pro Pro的量，通常每天爲l〇；/g至l〇g，以 爲宜，以3mg至lg程度尤佳，亦可因應每天之 ，使功能性食品中每次的攝取量比上述量更低。 本發明之功能性食品之攝取期間並無特別的 以長期間攝取爲宜，但爲得到上述效能，通常1 尤其以7天至3 65天程度，常用之攝取爲宜。 本發明之功能性食品係除了上述有效成份二 (c )成份之外，因應需要，亦可添加瑞士乳桿 乳酸菌之發酵物、或飲食品使用之其他成份，例 蛋白質、脂質、維生素、礦物質、香料、或此等 劑所容許 化劑、結 、保存劑 要求之單 有改善血 用劑之有 善血管內 用食品等 性食品， ，作爲上 i Xaa Pro Pro及/或 1 mg 至 5g 攝取次數 限制，雖 天以上， :(b )或 菌以外之 如糖類、 之混合物 -18- 200808336 (15) 等之添加物。 本發明之功能性飮食品之形態係將上述（b : 成份’以直接、或成粉末或顆粒，添加於各種飮 製成固形物、凝膠狀物、液狀物之任一種形態， 乳酸菌飲料等之發酵乳製品、各種加工飲食品、 、錠劑 '膠囊劑、顆粒劑等，進一步可製成各種 酪乳、流動食品、果凍、糖果、殺菌軟袋食品、 式餅乾（cookie )、長崎蛋糕、麵包、甜餅乾（ 、巧克力等。 【實施方式】 實施例 以下係由實施例、分析例及比較例更詳細地 明，但本發明並不侷限於此等範圍。 製造例1 加入lg之來自牛奶之酪蛋白（日本ZNMP 99g之調整成約80°C之蒸餾水，充分攪拌後，添 氫氧化鈉（和光純藥社製）溶液成pH7.0，並且 整成20°C，調製基質溶液。 於所得之基質溶液中，添加來自米麴菌之至 屬蛋白質分解酵素、絲胺酸蛋白質分解酵素、中 分解酵素I 、中性蛋白質分解酵素Π及白胺酸胺 市售酵素（註冊商標「S m i z y m e F P」，新日本化 或（Ο 食品，可 可舉例如 乾燥粉末 飲料、優 淀果、軟 biscuit ) 說明本發 社製）於 加1N之 將溫度調 少含有金 性蛋白質 基肽酶之 學工業社 -19- 200808336 (16) 製），使酵素/酪蛋白之重量比成爲1/25，以50°C反應14 小時。接著，以110 °C，1〇分鐘進行高壓釜殺菌，使酵素 失活，得到酪蛋白酵素分解物溶液。接著，將所得之酷蛋 白酵素分解物溶液，以噴霧乾燥器乾燥，調製粉末。 對所得之粉末中之含有成份進行分析。以基耶達測氮 ' 法測定蛋白質，胺基酸係以胺基酸分析裝置測定。另外， 自該蛋白質量減去胺基酸的量作爲胜肽量。進而，脂質係 φ 以酸分解法，灰分係以直接灰化法，水分係以常壓加熱軟 燥法，分別測定。另外，自1 00%減去各成份之殘餘量作 爲碳水化合物量。該結果係胺基酸爲3 5 · 8重量％、胜狀爲 45.7重量％、水分爲6·6重量％、脂質爲0.2重量％、灰分 爲4.1重量％及碳水化合物爲7.6重量％。 <測定構成胜肽之胺基酸> 溶解上述調製的粉末於適量的蒸餾水，使用自動胜肽 Φ 分析機（商品名PPSQ-10 (股）島津製作所製）分析，調 查粉末中由Ν端依序排列何種胺基酸。另外，自動胜肽分 析機未檢測出游離胺基酸。 另外，第5殘基胺基酸之合計爲120pmol，第6殘基 胺基酸之合計爲lOOpmol。由此等結果，判定上述粉末中 所含之胜肽幾乎完全爲二胜肽及三胜肽。另外，第2殘基 胺基酸爲Pro之胜肽之比率爲49.5%，明顯上昇。進一步 ，第3殘基胺基酸爲Pro之胜肽之比率亦爲29.8 %之多。 因此，上述粉末中，含有許多XaaPro或XaaProPro -20- 200808336 (17) 素分解 ，推測此等胜肽係對於生體內蛋白質分解酵素之酵 作用之抵抗性高之胜肽。 <測定酵素分解物中所含胜肽> 成標準 二胜肽 對於上述酵素分解物的粉末，使用各種化學合 胜肽，依據常法，求出該粉末所含之如表1所示之 及三胜肽的量。結果如表1所示。
表 1 胜肽序列 粉末lOmg/ml中之存在濃 度(pg/ml) lie Pro 16.0 Glu Pro 7.1 Arg Pro 10.3 Gin Pro 34.5 Met Pro 18.4 Tyr Pro 128.9 其他之XaaPro 299.4 Ser Pro Pro 2.9 Val Pro Pro 29.5 lie Pro Pro 28.1 Phe Pro Pro 27.2 其他之XaaPro Pro 28.8 另外，以蒸餾水稀釋溶解上述粉末之溶液中之 游離胺基酸量爲8.15mg/ml，胜肽量爲4.57mg/ml 肽中之Xaa Pro量爲514.5// g，所以確認Xaa Pro 粉末中之胜肽及游離胺基酸之合計量之比率爲6.3 胜肽及 ，該胜 Pro對 重量％ -21 - 200808336 (18) ，進一步，因爲該胜肽中之Xaa Pro Pro爲1 16·5 // g，所 以確認Xaa Pro Pro對粉末中之胜肽及游離胺基酸之合計 量之比率爲1.4重量％。 實施例1 -1 爲檢討血管內皮功能改善效果，以40歲以上65歲以 下之成人男性中，顯示收縮壓爲140至159mmHg或舒張 φ 壓爲90至99mmHg之各24人之2組爲對象，將充塡 1.25g之製造例1調製之酪蛋白水解物粉末於膠囊之試驗 食或充塡1.25g之酪蛋白鈉粉末於膠囊之安慰劑（piaceb〇 )，於早餐時或早餐後30分鐘以內，1天1次，攝取7天 ，實施兩組間之雙重盲檢（Double Blind Test)交叉（交 叉式）試驗。 試驗係使用體積描記法（Plethysmograph EC6, Pirimetech Co·製），於攝取試驗食及安慰劑之前，以及攝 ® 取7天後，測定安靜時及止血解放後之前腕動脈血流量而 進行。結果係各組平均，如表2所示。 表2 試驗食 攝取前 攝取後 動脈血流量(A) 被驗食 3·4±1·1 3·1±0·8 (ml/min/100ml 組織） 安慰劑 3.4±1·3 3·3±1·2 最大血流量(B) 被驗食 21.5±8.3 30.0110.4 (ml/min/100ml 組織） 安慰劑 21.5±7.1 20·8±6·7 (Β)/(Α)χ100 被驗食 674.2±268,5 1017.01390.3 (%FBF) 安慰劑 689.3±304.5 673.9土266.0 -22- (19) (19)200808336 表2中之檢查値係以各24人之平均値±標準偏差表示 ，FBF係表示前腕血流量（Forearm Blood Flow)。 試驗食組之最大血流量及（B) /(A) χίοο與安慰劑 組之比較，p< 0.001之有意義。試驗食組之最大血流量及 (B) / (A) xlOO與攝取前之比較，ρ<〇·〇〇ι之有意義。 由表2中，安靜時之前腕動脈血流量係於攝取前後， 比較試驗食組及安慰劑組，認爲無有意差。 另一方面，止血解放後之最大流入量，攝取前於兩組 間’雖認爲無有意差，但攝取後與攝取前比較，與安慰劑 組比較，認爲試驗食組皆顯示有意義的高値（任一種之t 檢定，P < 0.0 0 1 )。 另外，對於反應性充血後之最大血流量之安靜時比， 雖認爲攝取前兩組間無有意差，但攝取後與攝取前比較， 與安慰劑組比較，試驗食組皆顯示有意義的高値（任一種 之t檢定’ p< 0.001 )。另外，認爲試驗期間之血壓無有 意義的改善。 由上述結果，製造例1製造之酪蛋白分解物係藉由攝 取’於使用體積描記法之生理上血管內皮功能評估中，顯 示明顯的改善作用，確認有效地作爲血管內皮功能改善劑 。另外’亦可確認此改善作用並不附於血壓降低作用。 對於上述各組試驗者，噴霧投予〇.3mg之硝酸甘油於 口腔內，後續1 〇分鐘，觀察對血管內皮非依賴性之外因 性NO之血管舒張反應，其中最大血流量作爲測定値。結 -23- 200808336 (20) 果如表3所示。 表3 試驗食 攝取前 攝取後 血管內皮非依賴 性擴張反應(E) (ml/min/100ml 組織) 被驗食 5.7±1.7 5.9±1.7 安慰劑 5.9±2.3 6.0±1.8 (Ε)/(Α)χ100 (%FBF) 被驗食 173.7±36.2 193.9144.5 安慰劑 175.8143.5 187·6±49·6 • 表3中之檢查値係以各24人之平均値±標準偏差表示 ，FBF係表示前腕血流量（Forearm Blood Flow)。 由表3認爲兩組均於攝取前後之比較，及兩組間之比 較無有意義。並且，對於安靜時比較亦爲相同的結果。 由上述結果，確認由製造例1製造之酪蛋白分解物之 反應性血流量之改善效果係與於回應NO之血管中膜之功 能改善並無關聯，直接反映改善血管內皮功能者。 合成例 . 由如下所示之有機化學合成法合成IPP及VPP。合成 . 係由使用島津製作所製之胜肽自動合成裝置（PSSM-8型 )之固相法而進行。 作爲固相載體係2-氯三苯基（2-Chl〇r〇Uityl)型之聚 苯乙烯樹脂，使用5 Omg之鍵結胺基爲芴甲氧羰基（ fluorenylmethyloxycarbonyl， 以下簡稱爲Fmoc )保護之 脯胺酸之樹脂（島津製作所社製，註冊商標SynProPep -24- 200808336 (21)
Resin )。依據上述胺基酸序列，各 1〇〇 // g之胺基爲 Fmoc 保護之 Fmoc-Ile、Fmoc-Pro、Fmoc-Val，依據常法 ，使如胜肽序列依序反應而得胜肽鍵結樹脂。 接著，將此胜肽鍵結樹脂懸浮於1 ml之反應液A ( 1 0 ' 容量％之醋酸、1〇容量％之三氟乙醇、80容量％之二氯甲 ' 烷），於室溫下使進行反應3 0至60分鐘，自樹脂切離胜 肽後，以玻璃過濾器過濾反應液A。減壓除去濾液的溶劑 φ ，立即加入1ml之反應液Β(82·5 %容量之三氟乙酸、3% 容量之乙基甲基硫、5%容量之純水、5%容量之茴香硫醚 、2.5%容量之乙二硫醇、2%容量之苯硫酚），於室溫下使 進行反應6小時，脫去支鏈保護基。加入1 〇ml之無水醚 於其中，使胜肽沈澱，以3000回轉，離心5分鐘而分離 。以無水醚數次洗淨該沈澱後，吹入氮氣乾燥。溶解如此 所得之未精製之合成胜肽總量於2ml之0.1N鹽酸水溶液 後，以使用C 1 8之逆相管柱之HP LC，依據下述條件精製 •。 唧筒：L6200型Intelligent Pump (日立製作所）、偵 測器：L4000型UV偵測器（日立製作所），檢測於 215nm 之紫外線吸收、管柱：Bondasphere5/z C18 ( Waters 社製）、沖提液：A液；0·1重量％TFA (三氟醋酸）水溶 液、B液；加入〇·1重量％TFA之乙腈（B/A + B ) χΙΟΟ ( %) :〇— 40%(60分鐘）、流速：1ml/分。分取顯示最大 吸收之溶出部份，將其冷凍乾燥而得到分別爲5.7mg、 6.5mg之合成胜肽IPP及VPP。由全自動蛋白質一次構造 -25- 200808336 (22) 分析裝置（形式PPSQ-10，島津製作所製），自胜肽之n 端分析精製胜肽，進一步以胺基酸分析裝置（8 0 0型系列 ，曰本分光社製）分析的結果，可確認如設計所示。 實施例1-2 ' 作爲試驗動物係使用Wistar系（7週齡，公），馴化 飼育一週。接著，分別溶解於飲水中，使濃度成爲1 g/L φ 之一氧化氮合成抑制劑之N G-硝基-左旋精胺酸甲酯鹽酸 鹽（L-NAME，Sigma 社製）、及 lg/L 之 L-NAME 與 〇.3g/L 之合成 Val Pro Pro、或 lg/L 之 L-NAME 與 〇.3g/L 之合成例合成之lie Pro Pro，使自由攝取一週。對照組係 使僅攝取未溶解L-NΑΜΕ的水者，作爲無處置。 之後，使大鼠於乙醚麻醉下放血致死，摘出胸部大動 脈血管，切成2mm寬’製作大動脈環。將該環安裝於充 滿 5ml 之 tyroid 液（組成：158.3mM 之 NaCl、4.0mM 之 • KC1、2.0mM 之 CaCl2、1.05mM 之 M g C12、0 · 4 2 mM 之 NaH2P〇4 ' 1 O.OmM 之 NaH C O 3、5.6m M 之葡萄糖（p H 7.4 ，37±0.5°C ))之 Magnus (結索）裝置 (Labo support 社 製，製品名 Micro tissue organ bath MTOB-1Z)，施以 2.0g之靜止張力而使平衡化。接著，以ΐμΜ之去氧腎上 腺素（Phenylephrine )，使大動脈環收縮，將得到安定收 縮之標本，以10# Μ之乙醯膽鹼，觀察血管內皮依賴性舒 張反應。由血管舒張反應之舒張度，求出相對於ΙμΜ之 去氧腎上腺素所引起收縮之比率。結果如表4所示。另外 -26- (23) 200808336 ，各値均爲1組8隻之平均値。 比較例1 取代Val Pro Pro、或lie Pro Pro，使血管收縮素轉換 酵素（ACE)抑制劑之Enalapril之濃度成爲與 Val Pro Pro或lie pro pro顯示相同程度之抑制活性之〇.5mg/L， 使其攝取以外，與實施例1-2同樣地由血管舒張反應測定 舒張度。結果如表4所示。另外，各値均爲1組9隻之平 均値。 表4 試驗物質 舒張度(％) L-NAME 26.1 L-NAME+Val Pro Pro 43.1* L-NAME+Ile Pro Pro 36.8* L-NAME+Enalapril 31.6 無處置 92.4* ；p < 0.0 5
由表4之結果可知，同時攝取Val Pro Pro或lie Pro Pro組比單獨攝取L-NAME組之血管舒張比率爲有意義增 加，Val Pro Pro及lie Pro Pro具有血管內皮功能改善作 用。另一方面，使用具有ACE抑制活性之Enalapril之比 較例1中，與單獨攝取L-NΑΜΕ組相比較，認爲無血管舒 張的有意差。因此，可知具有A CE抑制活性之物質，稱 不上具有血管內皮功能改善作用。 -27- 200808336 (24) 實施例2-1 (調製CM4發酵乳飼料） 以蒸飽水ί谷解市售之脫脂奶粉，使固形率成爲( w/w)，以高壓釜l〇5°C，10分鐘高溫加熱殺菌後，冷卻 至室溫’接種3¼ ( v/w)之CM4株菌翫發酵液（菌數爲$ xlO8個/ml)，於37°C，24小時靜置狀態發酵，而得CM4 發酵乳。 # 將所得之CM4發酵乳，以8(TC殺菌後，由冷凍乾燥 而得粉末。將所得之冷凍乾燥粉末與市售之粉末飼料（商 品名「CE-2」，日本Clea股份有限公司製），以質量比 1 〇 : 90混合，作成固型飼料，作爲CM4發酵乳飼料。於 此飼料中，含有來自CM4發酵乳之34.1mg/kg之Val Pro Pro 及 17.1mg/kg 之 ne pr〇 ρΓ〇。 (不依賴改善血中脂質之血管內膜增厚抑制效果之確認試 φ 驗） 預備飼育1週之載體蛋白E(Apolipoprotein E，簡稱 Apo E )欠缺之小鼠，上述調製之CM4發酵乳飼料、或自 未配合CM4發酵乳之冷凍乾燥粉末之市售粉末飼料（商 品名「CE-2」，日本Clea股份有限公司製）調製固型飼 料之對照飼料，自由攝取31週（各組5隻）。 由上述攝取後小鼠之心臟採取血液，由血液生化學檢 查’測定總膽固醇量、LDL膽固醇量、HDL膽固醇量及中 性脂肪量。結果如表5所示。 -28- 200808336 (25) 另外，採取小鼠胸部大動脈，進行蘇木紫-伊紅染色 (Hematoxylin-Eosin stain)，算出血管內膜/外膜之面積 比。將該値圖形狀之結果如圖1所示。 比較例2 以蒸餾水溶解市售之脫脂奶粉，使固形率成爲9% ( w/w )，以高壓釜1 0 5 °C，1 0分鐘高溫加熱殺菌後，冷卻 至室溫，添加乳酸以使與實施例2-1調製之CM4發酵乳相 同酸度（2.3%)，而得未發酵乳。 將所得之未發酵乳，以8 0 °C殺菌後，由冷凍乾燥而得 粉末。將所得之冷凍乾燥粉末與市售之粉末飼料（商品名 「CE-2」，日本Clea股份有限公司），以質量比10:90 混合，作成固型飼料，作爲未發酵乳飼料。於此未發酵乳 飼料中，未含有XaaProPro及XaaPro。 使用所得之未發酵乳飼料，與實施例2-1同樣地使小 鼠攝取後，與實施例2-1同樣地進行血液生化學檢查及算 出血管內膜/外膜之面積比。結果分別如表5及圖1所示 表5 總膽固醇 (mg/dl) LDL膽固醇 (mg/dl) HDL贍固醇 (mg/dl) 中性脂肪 (mg/dl) 平均 SE 平均 SE 平均 SE 平均 SE 對照 678.6 37.1 544.8 42.7 332.7 22.7 91.2 17.0 比較例2 632.0 12.2 429.7 80.7 315.1 5.5 79.0 15.1 實施例2-1 610.2 49.1 485.2 43.0 289.4 11.8 111.4 9.3 -29- 200808336 (26) 由表5的結果可知含Val Pr〇 Pr〇及ne Pr〇 Pr0之 CM4發酵乳相對於對照飼料及未發酵乳飼料，不具高脂血 症改善作用。另一方面，由圖1的結果可知含Val Pro Pro 及lie Pro pro之CM4發酵乳相對於對照飼料及未發酵乳 飼料中任一種，有意義地抑制血管內膜增厚。由未發酵乳 飼料亦含有與CM4發酵乳相同以上之乳成份，可知本發 明之功效係不僅來自乳成份之功效。 因此，可知CM4發酵乳之血管內膜增厚抑制效果係 依據與改善高脂血症不同的機制，對於包含人類之動物之 因高脂血症以外所引起之粥狀動脈硬化亦有效。 實施例2 - 2 將由合成例所合成之Val Pro Pro及lie pro Pr〇，以 及實施例2-1所調製之CM4發酵乳、及製造例1調製之酷 蛋白水解物之粉末，分別於市售之粉末飼料（商品名「 CE-2」，日本Clea股份有限公司製），如表6所示之比 率混合，製作固型飼料。另外，亦準備市售之粉末飼料{乍 爲對照。 (血管內膜增厚抑制作用之確認試驗） 分別使載體蛋白E欠缺之小鼠（6週齡，公，1 ,組g 隻）自由攝取31週之如表6所示之飼料1至7。接著，摘 出小鼠之胸部大動脈，以10%之中性緩衝甲醛固定後，富 -30 - 200808336 (27) 施Elastica van Gieson stain染色。讀取顯微鏡下拍攝組 織標本之影像於電腦，由影像處理軟體（Image J )算出血 管內膜增厚度（內膜/中膜之面積比（％ ))。結果如表6 所示。另外，內膜增厚度的値係各組之平均値。 表6 對飼料之添加試 料 添加試料於飼 料之配合率 (重量〇/〇、 Val Pro Pro 含量 (mg/kg 飼料) lie Pro Pro 含量 (mg/kg 飼料) 內膜 增厚度 (%) SE 飼料1 Val Pro Pro 0.0034 34.1 0.0 21.8 4.7 飼料2 Val Pro Pro 0.0340 341.0 0.0 18.7 3.2 飼料3 lie Pro Pro 0.0017 0.0 17.1 25.3 5.4 飼料4 lie Pro Pro 0.0170 0.0 171.0 20.5 4.6 飼料5 CM4發酵乳 10.0000 34.1 17.1 18.5 5.0 飼料6 製造例1之粉末 0.8700 20.9 24.9 18.7 4.0 飼料7 無(對照） 0.0 0.0 0.0 38.0 6.2
由表6之結果可知Val Pro Pro及lie Pro Pro係依濃 度而抑制血管內膜增厚。另外，可知含Val Pro Pro及lie Pro Pro之CM4發酵乳、或含Xaa Pro Pro及Xaa Pro之製 造例l製造之獸乳酪蛋白水解物之粉末亦抑制血管內膜之 增厚。因此，含至少1種Val Pro Pro及lie Pro Pro之胜 肽之用劑或食品係抑制血管內膜增厚，有效地預防粥狀動 脈硬化症。 實施例3 -1至3 -2、比較例3及4 將CM4株（實施例3])、瑞士乳桿菌JCM1 004 ( L· -31 - 200808336 (28) helveticus JCM1 004 )(實施例 3-2 )、加氏乳酸桿菌 JCM1131 ( L. gasseri JCM1 13 1 )(比較例 3 )或市隹 & 冷凍乾燥菌酝CH-1 ( Chr-Hansen社製，含嗜熱鏈球菌（ Streptococcus thermophilus )、保加利亞乳桿菌 < Lactobacillus delbrueckii sp. bulgaricus ))，採用表 7〒 之菌酝液添加率及發酵時間之條件，依據實施例2- ；!，_ 製發酵乳，分別得到該冷凍乾燥物。 φ 將所得之冷凍乾燥粉末與市售之粉末飼料（商@ $ Γ C E - 2」，日本C1 e a股份有限公司），分別以質量比丨〇 ·· 90混合，製造固型飼料。此飼料中之Val pr0 Pro及Ue P r ο P r 〇量如表7所示。 接著，使用製造各固型飼料，與實施例2 - 2同樣地進 行血管內膜增厚抑制效果之確認試驗，算出內膜增厚度（ 內膜/中膜之面積比（％))。結果如表7所示。另外，內 膜增厚度的値係各組之平均値。 表7 菌翫液添 加率(％) 發酵時間 (hr) Val Pro Pro 含量 (mg/kg 飼料） lie Pro Pro 含量 卡g/kg飼料、 內膜 增厚度 (%) SE 對照 - - 0.0 0.0 \/Χβ/ 28.0 4.5 實施例3-1 3.0 24 33.1 14.1 13.5* 1.5 實施例3-2 3.0 24 16.2 3.5 11.7* 3.1 比較例3 10.0 48 0.0 1.9 25.5 4.4 比較例4 3.0 24 6.0 2.4 19.4 4.2 * ； ρ<0.05 -32- 200808336 (29) 由表7之結果顯示瑞士乳桿菌發酵物係具有由其他菌 種調製之發酵物所沒有的血管內膜增厚抑制效果。 【圖式簡單說明】 * 圖1係表示實施例2 -1及比較例2所進行之血管內膜 ' 增厚抑制效果之確認試驗之結果圖。
-33-

Claims (1)

  1. 200808336 (1) 十、申請專利範圍 1· 一種用劑，其特徵爲，含有含Xaa Pro Pro之獸乳 酪蛋白之水解物或其濃縮物作爲有效成份之具有改善血管 內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少一種作用。 * 2·如申請專利範圍第1項之用劑，其中xaa Pro pr0 * 之含有比率係相對於獸乳酪蛋白之水解物中之胜肽及游離 胺基酸之合計量爲1重量％以上。 φ 3·如申請專利範圍第1項之用劑，其中Xaa Pro Pro 係包含 lie Pro Pro 及/或 Val Pro Pro。 4. 如申請專利範圍第3項之用劑，其中lie Pro Pro 及/或Val Pro Pro之含有比率係相對於獸乳酪蛋白之水解 物中之胜肽及游離胺基酸之合計量爲0.3重量％以上。 5. 如申請專利範圍第1項至第4項中任一項之用劑 ，其中獸乳酪蛋白之水解物係含Xaa Pro。 6. 如申請專利範圍第5項之用劑，其中Xaa Pro係 φ 含有至少 1 種選自 lie Pro、Glu Pro、Arg Pro、Gin Pro、 Met Pro、Tyr Pro及此等之混合物所成群。 7. 如申請專利範圍第5項之用劑，其中Xaa Pro之 含有比率係相對於獸乳酪蛋白之水解物中之胜肽及游離胺 基酸之合計量爲5重量％以上。 8. 如申請專利範圍第1項之用劑，其中獸乳酪蛋白 之水解物係將獸乳酪蛋白以麴菌發酵而得之發酵物。 9. 如申請專利範圍第1項之用劑’其中獸乳酪蛋白 之水解物係將獸乳酪蛋白以來自麴菌之酵素進行酵素分解 -34- 200808336 (2) 而得之分解物。 1 0 ·如申請專利範圍第9項之用劑，其中來自麴菌之 菌體外酵素係來自米麴菌（Aspergillus oryzae)之酵素。 H· —種用劑，其特徵爲，含有以Xaa Pr〇 Pro作爲 ’ 有效成份之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚中 • 至少一種作用。 12.如申請專利範圍第11項之用劑，其中 Xaa Pro ^ Pro 係包含 lie Pro Pro 及 / 或 Val Pro Pro。 1 3 . —種用劑，其特徵爲，含有由屬於瑞士乳桿菌（ Lactobacillus helveticus)種之菌株，使含乳蛋白質之原 料發酵所得之含lie Pro Pro及/或Val Pro Pro之發酵物作 爲有效成份，具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚 中至少一種作用。 14.如申請專利範圍第13項之用劑，其中瑞士乳桿 菌係瑞士乳桿菌CM4株（獨立行政法人產業技術綜合硏 • 究所專利生物寄存中心寄存號碼：FERM BP-6060 )。 1 5 . —種動脈硬化預防劑，其特徵爲，含有如申請專 利範圍第1項、第1 1項及第1 3項中任一項之用劑作爲有 效成份。 1 6. —種功能性食品，其特徵鳥，含有如申請專利範 圍第1項、第1 1項及第1 3項中任一項之用劑作爲有效成 份之具有改善血管內皮功能及抑制血管內膜增厚中至少一 種作用。 17. —種功能性食品，其特徵爲，含有如申請專利範 -35- 200808336 (3) 圍第1 5項之用劑作爲有效成份，具有動脈硬化預防作用
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