TW200521134A - Steroids having a mixed androgenic and progestagenic profile - Google Patents

Description

200521134 (1) 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關具有混合之雄激素和孕激素活性寫照之 化合物，有關包括此等化合物的藥學組成物及有關彼等在 治療中之用途。 【先前技術】 雄性避孕係尋求透過促性腺激素促黃體激素（LH)和促 卵泡激素（FSH)的壓制來壓抑精子發生。此導致睪九睪酮 之耗乏及精子發生之停止。 孕激素的給用導致腦下垂體促性腺激素之劑量依賴性 壓抑反因而睾酮含量之減少與精子發生之可逆性抑制。需 要外源雄激素來彌已減低的睾酮含量。 以相同的方式，雄性激素替代法（HRT)即可完成，導 致以外源雄激素替代睾酮，對於前列腺而言比內源睪酮更 安全。 對於雄性避孕和雄性HRT而言，採用有混合之雄激 素和孕激素活性寫照的化合物，亦即在一分子內同時內在 地擁有雨種活性之化合物，可能爲特別有用者。目標在於 提供具有最優效力，口服活性，和安全性之化合物。有關 安全性，特別重要者爲使骨質流失和肝毒性的風險減到最 小。 同時具有雄激素和孕激素兩種性質的化合物皆爲技藝 中已知者。例如，7 a ，1 7 α -二甲基諾龍（7 α ，17α- -5- 200521134 (2) dimethylnandrolone(Mibolerone)爲一種也具有孕激素活性 的高活性雄激素（參看，例如L.Markiewicz et al.,Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology ( 1 9 9 7)，19(4)，2 1 5 -2 22)。其具有口服活性但有嚴重肝毒 性之缺點（參看，例如，J.Seaman，Toxicologic Pathology (1985) ， 13(3) ， 177-180)。 某些D-同D環固醇類也已知爲擁有混合之雄激素和 孕激素寫照。例如，（17a冷）-13 -乙基-17a-羥基-D-homogon-4-烯-3-酮，（17ayS)-13-乙基-17a-羥基-17a-甲基-D-homogon-4-烯-3-酮，及（l7ayS)-13，17a-二乙基-17a-羥 基-D-homogon-4 -烯-3 -酮，等都載於 US3,959,322 中者， 都據稱同時攤有雄激素和孕激素活性。不過，我們已證明 此等化合物都不具口服活性。 7α-甲基-19·去甲-D-同D環睪醇經在WO 85/0 5361中 揭示爲合成中間體。我們證明此化合物擁有混合之雄激素 和孕激素寫照。不過，我們也證明其他不具口服活性。 (17aa)-甲基]9-去甲-D-同D環睪酮，顯示出擁有合 成代謝活性’且就我們所知也具有孕激素活性，如由 S.U. Ananchenko et al·，在 Tetrahedron( 1 962)，18，1 3 5 5 - 67中所述者。不過，我們證明過該化合物的缺點在於同時 有在口服後低活性且不能防止小梁骨礦物質密度（BMD)減 損之組合。 【發明內容】 -6 - 200521134 (3) 業經發現，意外者，在一系列1 9 -去甲-D _同D環固類 中’存在者具口服活性的混合之雄激素/孕激素類固醇， 彼等可防止小梁骨礦物質密度的減損，且沒有肝毒性。因 而，於第一方面中，本發明提供一系列式I化合物·· OR3

其中 R1爲◦，或NOR，其中R爲氫，（C】_6)烷基或（Cl6)醯基， R2爲甲基或乙基，且 R3爲氫或（CbI5)醯基。 於一具體實例中，本發明提供式I中r 1爲〇之化合 物。 於一具體實例中，本發明提供式I中R1爲0且R3爲 氫之化合物，亦即化合物（7 a，1 7a /3 )-17a-羥基-7，1 7a-二甲基-D-同D環雌-4·燒.3 -酮和（7α ，17a/5)-I7a -乙基-17a -經基一 7 -甲基-D-同D環雌- 4-；)：希-3-酮，特別是化合物 (7α，17a/3)-17a-羥基-7，17a-二甲基-D-同 D 環雌.4-烯- 3 -酮。 術語'、（C6)烷基〃表有1 - 6個碳原子的分支或未分支 烷基。（C6)烷基的例子包括甲基，乙基，丙基，異丙基 ，丁基和第三丁基。 * 7 - 200521134 (4) 術語''(Cm)醯基〃和（CuO醯基表從分別有1-6和1-1 5個碳原子的羧酸衍生之醯基。該醯基可包括可爲分支， 未分支，飽和或不飽和的烴。（C! _6)醯基的例子包括甲醯 基，乙醯基，丙醯基，丙烯醯基和三甲乙醯基，且（匕_15) 醯基的例子包括癸醯基和十一烷醯基。於（C!-6)和5) 醯基的定義中也包括從二羧酸衍生的醯基如半·丙二醯基 ，半-丁二醯基和半-戊二醯基。 式I中R1爲NOR，R爲氫，（Cl_6)烷基或（Cl-6)醯基， 之化合物爲式I中R1爲0的化合物之前體藥物。類似地 ，式I中R3爲（Cm 5)醯基的化合物前相應的式I中R3爲 氫的化合物之前體藥物。該等前體藥物常爲母化合物的不 活性衍生物，彼等可在活體內（in vivo)轉化成活性形式。 本發明19-去甲-D-同D環類固醇衍生物具有天然構型 8冷，9α ，10/3 ，13冷和14α。在C-7的構型爲7α且在 C-17a的構型爲17ayS。 本發明化合物可根據普通有機化學技藝中熟知的方法 且特別是類固醇化學技藝中熟知的方法予以合成。參看， 例如 ’ Fried，[and Edwards，J.A·，’Organic Reactions in Steroid Chemistry，Volumes I and II，van Nostrand Reinhold Company，New York，1 972。製備式 I 中 R]爲 Ο ，R2具有上述意義，且R3爲氫的化合物所用的一種方便 起始物爲，例如，（7α)-3 -甲氧基-7-甲基雌-1，3，5(10) -三烯· 1 7 -酮（亦即，式丨】化合物）。此化合物可以使用技 藝中熟知的方法予以合成，參看，例如F R 1 4 3 4 ] 7 2。 200521134 (5)

(7α )-3-甲氧基-7-甲基雌-1，3，5(10) 一三烯-17-酮的D_環 同系化反應可用多種方法完成。例如，其可轉化成（7 α ) — 17-(胺基甲基）-3-甲氧基-7-甲基雌·1，3，5(1〇) _三烯-17_ 醇，接著用例如NaNOVAcOH處理製成（7α)-3-甲氧基-7-甲基-D-同D環雌-l，3，5(10)-三烯-l7a-酮（參看，例如 Avery，Μ·Α·，e t al ·, S t e r o i d s，1 9 9 0，5 5，5 9 )。或者，可 將其轉化成（7α ，17/3 )-3-甲氧基-7-甲基-16，17·亞甲基-17-[(三甲基矽烷基）氧基]-雌-1，3，5(10)-三烯，接著用 例如氯化鐵（III)處理而製成（7a )-3 -甲氧基-7-甲基-D-同D 環雌-1，3，5(10)，16-四烯-17a -酮（參看，例如j〇hns， W.F.et al.，J.Org.Chem·，1971，36，1952 and Ito，Y.et al.，J.Org.Chem.，1976，41，2073)。後者可用，例如催化 氫化而轉化爲（7α )-3 -甲氧基-7-甲基-D-同D環雌-l，3, 5(10) -三燃-17a -酮。 (7a )-3-甲氧基-7-甲基-D-同D環雌-1，3，5(10)-三 燃-17a -酮可用甲基鋰或乙基鋰或對應的Grignard試劑， 視需要在氯化鈽（ΠΙ)存在中處理而製成（7a， 烷基·3-甲氧基-7-甲基-D-同 D環雌·1，3，5(10)-三烯-1 7 a -醇衍生物。後者可能與相應的1 7 a α - Ο Η，1 7 a /5 -烷基 異構物一起產生，於此情況中，係以層析術或結晶化將合 -9 - 200521134 (6) 意的1 7 a沒· 〇 η，1 7 a α -烷基異構物從不想要的後述化合物 分離出。或者，可將（7 α )_3-甲氧基-7-甲基-〇-同D環雌-1，3 ’ 5(1〇)-三烯·17a-酮與，例如，碘化三甲鱗與酸反應 而得1 7 a-環氧化物，其隨即可分別與環原劑（如氫化鋰鋁 或三乙基硼酸鋰）或甲基酮化合物（如Me2CuLi)反應而轉化 成17a冷-OH，I7aa-甲基化合物或I7aa-0H，17a冷-乙基 化合物。所得（7 α ，17&石）-17&-烷基-3-甲氧基-7-甲基-D-同D環雌-1，3，5(10)_三烯」7a-醇衍生物的Birch還原 後 Caine，D.〇rg.reacti〇ns，Wiley，New York，1 97 6，23 ，l之中所述者，如此所得△ 2 ’ 5(1Q)二烯衍生物再經水解 即得（7a ，17ay9)-17a·羥基-7，17a-二甲基-D-同 D 環雌-4-烯-3-酮或（7a ，17a/S)-17a-乙基-17a-羥基-7-甲基-D-同 D環雌-4-烯-3-酮。 本發明式I中R】爲NOR，R爲氫（Cm)烷基或（C 1.6)醯 基的化合物及本發明式I中R3爲（C ! ^ 5)醯基的化合物可用 技藝中熟知的方法順利獲得。例如，本發明式I中R3爲 (C!」5)醯基的化合物可經由將相應的式I中R3爲氫的先質 使用，例如，醯基化劑如合意的酸氯化物在鹼例如三乙胺 的存在中予以醯化而順利得到。 本發明19-去甲-D-同D環固醇類適合用於治療中，例 如，與其他一起者，雄性避孕和雄性HRT。雄性HRT意 指雄激素補充及睪酮替代。 本發明化合物的給用可由藥學組成物的製造給予大幅 幫助。本發明因而有關一種藥學組成物，其包括本發明化 •10- 200521134 (7) 合物混合著藥學可接受的賦形劑，例如在 Gennaro et al. 5 Remmington : The Science and Practice of Pharmacy， 20th Edition，Lippincott，Williams and Wilkins，2000 中 戶斤述者；特別參閱 part 5 : pharmaceutical manufacturing 。適當的賦形劑可在例如the Handbook of Pharmaceutical Excipients 5 2nd Edition ； Editors A.Wade and P.J.Weller ，American Pharmaceutical Association， Washington， The Pharmaceutical Press，London，1994之中得知。本發 明化合物與藥學上可接受的賦形劑之混合物可經壓縮成固 體劑量單位，例如片劑，或加工成膠囊或栓藥。對於劑量 單位，如片劑之製造，可涵蓋習用添加劑如塡充劑，著色 劑與聚合物型黏合劑之使用。一般而言，不會干擾活性化 合物的功能之任何藥學上可接受之添加劑都可以使用。製 備和服用藥學組成物可用到的適當塡充劑包括適當用量的 乳糖、澱粉、纖維素和其衍生物，或彼等的混合物。 雄性避孕常據稱包括一種給用激素之服藥法，其中孕 激素係用來達到避孕效用且雄激素用來補充所導致的減低 睪酮水平。本發明化合物的組合雄激素/孕激素本質可用 來透過根據在單一化合物基礎上的孕激素-雄激素系統達 到雄性避孕。 如此，本發明也有關本發明類固醇化合物對於製造具 有避孕活性的醫藥品（其在技藝中也採用、、避孕劑〃之術 語）之用途。 本發明也有關一種避孕方法，包括給有生育力雄性， • 11 - 200521134 (8) 顯著者人類，服用本發明化合物，其劑量和服藥法足以使 該化合物本身具避孕效用，且同時可使接受此避孕法的雄 性維持充足的雄激素水平。或者，本發明所提出的避孕方 法包括給有生育力雄性，顯著者人類，給用一避孕有效量 的絕育劑，例如孕激素，與本發明化合物之組合。有關一 第二種替代法，該避孕法包括包括給用本發明化合物作爲 (孕激素型）絕育劑，其中充足雄激素水平的維持係部份由 本發明化合物的雄激素活性所負責，而由加添的雄激素的 補充。 本發明也有關一種雄性避孕所用套組，包括給用孕激 素之工具及給用雄激素之工具，其特徵在於該等工具之一 爲一種包括本發明化合物之藥學組成物。 本發明雄激素性/孕激素性化合物也可用於部份雄激 素缺乏（老年）雄性之睪酮補充。 本發明雄激素/孕激素性化合物也可以用來（部份）替代 內源性睪酮。其孕激素活性可導致本發明化合物的一項優 點，其中可壓制內源睪酮之產生，雄激素性活性係用來補 償所導致的睾酮缺乏。此可促成以外源性雄激素替代睪酮 ，此比內源性睾酮更安全。內源性睪酮會被5 α -還原酶轉 化成更強力的5 α -二氫畢酮而導致熟知的有害效應例如前 列腺問題，痤瘡和掉髮。 因此，藉由本發明雄激素性/孕激素性化合物，可以 有利地減低內源性睾酮的內在有害效應。所以，且更特定 言之，本發明化合物可用來治療良性前列腺肥大（ΒΡΗ)。 -12- 200521134 (9)

視需要者，本發明雄激素性/孕激素性化合物可與技 藝中已知不是5 α -可還原的雄激素’例如 ΜΕΝΤ，或在 WO 99/6727 1 ， WO 00/5 3 6 1 9 ， WO 00/5 9920 或 WO 0 1 /0 5 8 0 6中所揭示的雄激素，或技藝中已知的孕激素相組 合。 如此，本發明也有關本發明化合物對於製造治療雄激 素不足性所用醫藥品，或用於睪酮替代的醫藥品之用途。 諳於此技者都了解此用途可包括本發明化合物與雄激素的 組合給用或者本發明化合物與孕激素之組合使用。因此之 故，本發明也包括一種在雄性激素替代療法領域中的治療 方法，包括給一雄性給用前文所述化合物（於適當的藥學 劑型）。 本發明也有關一種治療方法，包括給需要雄激素補充 或睾酮替代的雄性給用一治療有效量的本發明化合物，視 需要與技_中熟知的雄激素，或技藝中已知的孕激素組合 〇 本發明要用下面諸實施例予以闡明。 【實施方式】 實施例1 (h ，17a 冷）-i7a-羥基-7，17a-二甲基-〇-同 D 環雌 _4·烯· 3 ·酮之製備 (7a ’ 17a々）-i7a -羥基-7，17a -二甲基-D-同 d 環雌-4-烯_ 3-酮 -13- 200521134 (10) i)-將二異丙基胺（42·4毫升）在無水四氫呋喃（294毫升） 中的溶液冷卻到-3 0 °C。滴加η - B u L i (1 . 6 Μ溶液，己烷中 ，：173毫升）（T<-l〇°C)且在-3(TC下繼續攪拌1〇分鐘。將反 應混合物冷卻到-7 8 °C且滴加（7 α ) - 3 -甲氧基-7 -甲基雌-1， 3，5(10)_三烯-17·酮[參閱FR 1434172; 25.0克]在無水四 氫呋喃（3 9 8毫升）中之溶液。在-78 t下繼續攪拌1小時。 加入氯三甲基矽烷（3 1.5毫升，從CaH新蒸餾過）且使溫度 上升到室溫。於加入TM SCI之後攪拌混合物30分鐘，冷 卻到〇 t，然後用飽和氯化銨水溶液驟止反應。用乙酸乙 酯萃取混合物，將合倂有機相用食鹽水萃洗，以硫酸鈉脫 水及在減壓下濃縮而得)-3 -甲氧基-7 -甲基-17-[(三甲 基矽烷基）氧基]雌-1，3，5(10)，16-四烯（35.5克）。產物 不再純化即用於下面步驟中。 ii)_將前一步驟所得產物（35.5克）和二碘甲烷（27.3毫升）在 無水二氯甲烷（5 0 3毫升）中的溶液冷卻到〇°C。加入二乙基 鋅在己烷中的溶液（1 5重量％，3 0 5毫升），移開冰浴且在室 溫下攪拌反應混合物〗小時。加入冰，將反應混合物倒在 飽和氯化銨水溶液中且用乙酸乙酯萃取。將合倂有機相用 食鹽水萃洗，以硫酸鈉脫水，且減壓濃縮而得（7 α ) - 3 -甲 氧基-7-甲基_16，17_亞甲基-17-[(三甲基矽烷基）氧基]雌_ 1，3，5(]0)-三烯（35.5克）。產物不再純化即用於下面步 驟中。 (iii)-將前一步驟中所得產物（3 5.5克）在無水二甲基甲醯胺 U 6 9毫升）中的溶液加到冰冷過的氯化鐵（1 ϊ I)(非常無水者 -14- 200521134 (11) ，40 ·8克）在相同溶劑（169毫升）中的溶液內。移開冰浴且 在室溫下攪拌反應混合物1 . 5小時。於冷卻之下，用鹽酸 水溶液（2Μ)逐滴驟止混合物。將混合物倒在水中且用乙酸 乙酯萃取；將合倂有機相用水和食鹽水萃洗，以硫酸鈉脫 水且減壓濃縮。管柱層析術得到（7 α )_3-甲氧基-7-甲基-D-同 D 環雌-1，3，5(10)-四-17a-酮（10.0克）。 (iv)-將鈀/活性碳（Pd/C)(10% ; 5克）在水（50毫升）中的懸浮 液加到前一步驟所得產物（67克）在乙醇（ 1 25 0毫升）和 THF(25 0毫升）的混合物中之溶液內且於氫氣（5巴（bar)下於 室溫中攪拌混合物整夜。將一份反應混合物樣品濾過矽藻 土且將濾液減壓濃縮。1H-NMR指出有70%轉化率。加入 另一份Pd/C(10%，2.5克）且在氫氣（5巴）下繼續攪拌整夜 。按上述進行收拾處理得到（7 a )-3 -甲氧基-7-甲基-D-同 D環雌-1，3，5(10)-三烯-17a·酮（61克）。產物不再純化即 用於下面步驟中。 v)-將甲基鋰（1 · 4 Μ乙醚中的溶液，4 7 5毫升）與無水 THF(5000毫升）的混合物冷卻到-40°C。加入上一步驟所得 產物（54克）在無水THF(l〇〇〇毫升）中的溶液且在室溫下攪 拌反應混合物整夜。將混合物倒在飽和氯化銨水溶液 (7 5 00毫升）中且用乙酸乙酯萃取。將合倂有機相以食鹽水 萃洗，用硫酸鈉脫水及減壓濃縮。管柱層析術得到（7 α， 17ayS)-3 -甲氧基-7，17a -二甲基.ο·同 D 環雌-1，3，5(10) -三烯-17a-醇（19.9克）。 (v i )·將上一步驟所得產物（1 · 〇克）在無水四氫呋喃（2 5毫升） -15- 200521134 (12) 中的溶液加到液態氨（1⑽毫升）內，冷卻到-4 5 °c。加入鋰 (0.65克）且在-45°C攪拌反應混合物2小時。滴加2-丙醇（10 毫升）和無水THF(10毫升）的混合物且在使氨蒸發之下攪 拌混合物整夜。加入飽和氯化銨水溶液（1 0 0毫升）接著加 入乙酸乙酯（25 0毫升）。用乙酸乙酯萃取混合物。將合倂 有機相用食鹽水萃洗，以硫酸鈉脫水且減壓濃縮而得（7 α ，：l7a/3)-3-甲氧基-7，17a-二甲基-D-同 D 環雌-2，5(10)-三烯-17a-醇（1.02克）。產物不再純化即用於下面步驟中。 (vii)-將上一步驟中所得產物（1.02克）在丙酮（50毫升）中的 溶液用鹽酸（6 Μ，5毫升）處理。在室溫攪拌2小時之後，用 飽和碳酸氫鈉水溶液中和反應混合物且將產物萃取到乙酸 乙酯中。合倂有機相以食鹽水萃洗，用硫酸鈉脫水且減壓 濃縮。結晶得到（7 a ，17a )-17a-羥基-7，17a-二甲基- D-同D環雌-4-烯-3-酮（熔點152°C)。 實施例2 (7a ，17a/3)-17a -乙基-17a -羥基-7-甲基-D-同 D 環雌- 4-烯-3-酮之製備 (7a ，17a/5)-17a-乙基-17a-羥基-7-甲基-D-同 D 環雌-4- 儲-3 -酮 i)_將氯化鈽（ΙΠ)( 1.8克）在無水四氫呋喃（40毫升）中的懸浮 液攪拌整夜後冷卻到-7 8 °C。加入氯化乙基鎂/四氫呋喃 (2 5 %，3 · 3毫升）且繼續攪拌一小時。加入固體（7 α ) - 3 -甲 氧基-7 -甲基-D-同D環雌-1，3，5(]0)-三j：希17a -酮[實施 -16- 200521134 (13) 例1，步驟iv ; 0.50克]且於1.5小時內使反應混合物達到 室溫。將混合物倒在飽和氯化銨水溶液中且將產物萃取到 乙酸乙酯內。將合倂有機相用食鹽水萃洗，以硫酸鈉脫水 且減壓濃縮。管柱層析術得到（7 a ，17a々）-17 a-乙基- 3-甲氧基·7 -甲基-D-同 D環雌-1，3，5(10)-三烯-17a-醇 (〇·ΐ1克）。 ii) -將上一步驟所得產物（0.1 1克）/無水四氫呋喃（10毫升） 加到回流中的液氨（50毫升）中。加入鋰（〇·65克）且將反應 混合物攪拌1 〇分鐘。加入第三丁醇/四氫呋喃溶液且繼續 攪拌另一 1 · 5小時。於冷卻到-7 8 °C之後，用乙醇驟止混合 物且蒸發掉氨。加入水並將產物萃取到乙酸乙酯內。將合 倂有機相用食鹽水萃取，以硫酸鈉脫水且減壓濃縮而得（7 α ，乙基-3-甲氧基-7-甲基-D-同D環雌·2， 5(10)-二烯-17a-醇。產物不再純化即用於下面步驟中。 iii) -採用類似於實施例1步驟vii中所述程序，將上一步驟 所得產物轉化爲（7a ，17a々）-17a-乙基-17a-羥基-7-甲基-D-同 D 環雌-4-嫌-3-酮（0.071克）。h-NMR^CDClOS.SS^bs ，1 Η)，2.48-0.94(m)，0.90(t，3H，J = 7.8Hz)，0.72(d， 3 H，J = 7 · 4) 〇 實施例3 本發明化合物的雄激素性和孕激素激動活性 對本發明化合物檢驗雄激素活性和孕激素活性。 本發明化合物的轉活化雄激素激動活性係在中國田鼠 -17- 200521134 (14) 卵巢細胞（CH Ο)中測量，該細胞經用人類雄激素受體 (hAR) ’組合著小鼠乳房腫瘤病毒（MMTV)，與蟲螢光素酉每 基因轉染過（溫浸時間1 6小時，溫度3 7 °C )並與5 α -二氫睾 酮的活性比 _父[根據 S chο ο n er，W . G · E . J . e t a 1 ·，A na 1 y t， Biochem.261，222-224(1998)所述程序]。 本發明化合物的轉活化孕激素激動活性係在中國田鼠 卵巢細胞（CHO)中測量，該細胞經用人類孕酮受體 B(hPRB)，組合著小鼠乳房腫瘤病毒（MMTV)，與蟲螢光 素酶基因轉染過（溫浸時間1 6小時，溫度3 7 °C )且與（1 6 α )-16-乙基-2 1-羥基-19-去甲孕-4-烯-3，2 0_二酮的活性相比 較[根據 Schoonen，W.G.J.et al.，Analyt，Biochem.261， 222-2 24 ( 1 99 8)中所述程序]。結果都羅列在表1之中。 LH壓制檢定 本發明化合物的活體內效力係在成雄性閹過的大鼠楔 型內測定。 於此模型中，有高血淸LH含量（比完整大鼠較高約 2 〇x倍，係因設有睾九睪酮的負回饋所致）。用一所給本 發明化合物在花生油或花生油加5或1 0 °/❶乙醇中的懸浮液 ，於4天中每天經口（ρ·〇·)處理此等大鼠。於投藥之前與最 後口服劑後3小時，透過尾靜脈採集血液且測定血淸LH。 本發明化合物（最低活性劑量，MAD)的效力（口服）係表爲 可壓制血淸LH達65%(95%信任區間）的本發明化合物用量 (毫克/仟克）。 -18- 200521134 (15) 本發明也發展出大鼠LH時間解析免疫螢光測量檢定 法（TR-IFMA)，其中係使用自製的藥劑，一種爲針對人類 絨毛膜促性腺激素（hCG，可與大鼠/3 -次單元交叉反應）的 β -次單元之單株抗體捕捉抗體與一種生物素標記偵檢抗 體（針對重組大鼠LH的α -次單元之兔子多株抗體）。重組 大鼠 LH係根據已知方法製備的，例如 Hakola et a 1 ·，Μ ο 1 e c u 1 a r & Cellular Endocrinology ( 1 997)，128，47-56。所述方法。於此種兩部位-IFMA中，只有完整大鼠 LH係經由最後與鏈黴抗生物素蛋白·銪溫浸而測定。 IFMA中的偵檢係以在相當長的激發期中鑭系元素，銪的 螢光爲基礎。大鼠LH標準品的濃度範圍爲0.001-10毫微 克/毫升，爲了血淸LH的最優準確度測量，乃將血淸樣品 用檢定緩衝液稀釋 8 倍（J.I.van Casteren et al.，Biol. Reprod .(2000)，62，8 8 6- 8 94)。結果經羅列於表1中之中 -19- 200521134 (16) 表1本發明化合物（實施例1和2)與先前技藝化合物（A_c) 的雄激素性與孕激素激動活性/LH壓制數據。 化合物 雄激素性活性 (%) 孕激素活性 (%) ---------------- LH-壓制 MAD(口服） (毫克/仟克） 實施例1 化合物 42.9 53.3 8.5 實施例2 化合物 9.9 29.7 10 參比化合物A 71.6 98.0 >30 參比化合物B 25.3 10.6 >30 參比化合物C 220 45 1 .0 參比化合物Α: (17α0)-17Η -羥基-17a -甲基-D -同D環雌- 4-烯-3·酮 參比化合物B: (7a，17a/3)-17a-羥基-7-甲基-D-同D環 雌-4-烯-3-酮 參比化合物C: (7a，17a/3)-17-羥基-7，17-二甲基雌-4- 嫌-3-酮（Mibolerone)。 成雄閹大鼠中的抗-骨質疏鬆試驗（6週處理期） 於此試驗中，評估本發明化合物對於預估雄大鼠中閹 割-誘發小粱骨礦物質密度（BMD)減損之口服效力。 使用成雄Wistar大鼠（3 5 0-400克）°睾九切除（orx)或 僞手術係在異氟烷麻醉下實施。於麻醉恢復後’在24小時 200521134 (17) 內，於6週中的每一天用不同劑量的本發明化合物或只含 媒劑者（無效對照劑，完整大鼠，無效對照劑〇rx)以1毫升 /仟克（n = 5)之體積處理大鼠一次。於最後一次投藥後的該 曰，實施屍體剖檢且切出右股骨。用PQCT(周圍定量電腦 局部 X 射線檢定儀；XCT960A，Stratec，Birkenfeld , Germ any)測量股骨的幹骺端部份之小梁骨礦物質密度。結 果經羅列於表2之中。 表2骨質疏鬆檢定之結果 化合物 劑量 BMD 骨密度平 (克平均値±sem) 均比例差 無效對照完整體 〇毫升/仟克 2 1 7±27 1 0 0 % 無效對照orx 〇毫升/仟克 1 00±1 7 0% 實施例1化合物 8毫升/仟克 255±22 1 3 3 % 參比化合物A 16毫升/仟克 1 33±20 2 8% 肝安全性之測定：BSP滯留檢定 本試驗的基本目標爲肝功能評估，係在雄閹兔經口處 理7天後（每天一次）測量單一靜脈內（i.v.)注射劑量的溴磺 酸基酞（BSP)的廓淸率。 槪述之，此檢驗是在成雄閹NZW兔體內實施的。在 閹割後至少兩週，使用呈片劑或在花生油+5%乙醇媒劑內 的本發明化合物處理七天（每天一次），其劑量爲1 〇毫克/仟 克。最後一次給藥的2 4小時後，用0.1 5毫升肌肉內注射 -21 - 200521134 (18)

Hypnorm將兔子輕微鎭靜，並注射Bsp(15毫克/仟克靜脈 內，溶在5 % (w / v)甘露醇/ Η 2 〇中）。於5，1 〇，1 5和2 0分鐘 收集血液，且用光譜光度計測定血漿中的B S Ρ含量。從 所得數據計算針對BSP的Τ1/2(參看表3)。

表3本發明化合勺B S Ρ數據 化合物 媒劑 T1/2BSP(分） 實施例1化合物 片劑 6.3 睾酮 片劑 5.2 參比化合物c 片劑 13.6 實施例1化合物 花生油+5%乙醇 4.6 _酮 花生油+5%乙醇 4.2 •—. ___ — ......— - 參比化合物C 花生油+5%乙醇 7.1

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Claims (1)

1. 200521134 (1) 十、申請專利範圍 1. 一種式I化合物， OR3

   其中 R1爲0，或NOR，其中R爲氫，（Cn)烷基或（Cl.6)醯基 R2爲甲基或乙基，且 R3爲氫或（C! _M)醯基。 2·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中Ri爲〇。 3·根據申請專利範圍第1或2項之化合物，其中Ri爲〇 且R3爲氫。

   4·一種化合物（7a ，17ayS)-17a -羥基-7，17a -二甲基-D -问 D 環雌-4-稀-3-嗣（7a ，17ayS )-17a-hydroxy-7，Ua-dimethyl-D-homoestr-len-S-one 〇 5.根據申請專利範圍第1或4項之化合物，其係用於治 療0 6 . —種藥學組成物，其包括根據申請專利範圍第1 - 4 項中任一項之化合物與藥學上可接受之賦形劑。 7 · —種根據申請專利範圍第1或4項之化合物應用於製 造具有避孕活性的藥劑之用途。 8 . —種雄性避孕用套組，其包括供投予孕激素用之工 -23- 200521134 (2) 具和供投予雄激素用之工具，其特徵在於該等工具之一者 爲根.據申請專利範圍第6項之藥學組成物。 9.一種根據申請專利範圍第1或4項之化合物應用於製 造供治療雄激素缺乏用之藥劑或供睪酮替代用之藥劑之用 途。

   -24- 200521134 無 明 說 單 旺U • •號 為符 圖件 表元 代之 定圖 指表 ••案代 圖本本 表' ， 代 定一二 指CC 七 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式： ORd

   式I -4-