TR201816415T4 - Aminopiridiloksipirazol bileşikleri. - Google Patents

Aminopiridiloksipirazol bileşikleri. Download PDF

Info

Publication number
TR201816415T4
TR201816415T4 TR2018/16415T TR201816415T TR201816415T4 TR 201816415 T4 TR201816415 T4 TR 201816415T4 TR 2018/16415 T TR2018/16415 T TR 2018/16415T TR 201816415 T TR201816415 T TR 201816415T TR 201816415 T4 TR201816415 T4 TR 201816415T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
compound
pyridine
cancer
oxy
pyridin
Prior art date
Application number
TR2018/16415T
Other languages
English (en)
Inventor
W Beight Douglas
A Coates David
Joseph Sajan
T Mcmillen William
Parthasarathy Saravanan
Pei Huaxing
Scott Sawyer Jason
D Wolfangel Craig
Zhao Gaiying
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of TR201816415T4 publication Critical patent/TR201816415T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings

Abstract

Bu buluş, büyüme faktörü beta reseptörü 1'in (TGFßR1) dönüştürme aktivitesini inhibe eden yeni aminopiridiloksipirazol bileşiklerine, söz konusu bileşikleri içeren farmasötik bileşimlere, ve kanser, tercihen kolon kanseri, melanom, hepatosellüler karsinom (HCC), renal kanser, gliyoblastom (GBM), pankreatik kanser, miyelodisplastik sendrom (MDS), akciğer kanseri, ve gastrik kanser, ve/veya fibroz, tercihen karaciğer fibrozu ve kronik böbrek hastalığını tedavi etmek için söz konusu bileşiklerin kullanılmasına ilişkindir.

Description

TARIFNAME AMINOPIRIDILOKSIPIRAZOL BILESIKLERI Bu bulus, büyüme faktörü beta reseptörü 1”in (TGFßRl) dönüstürme aktivitesini inhibe eden yeni aminopiridiloksipirazol bilesiklerine, söz konusu bilesikleri içeren farmasötik bilesimlere, ve kanser, tercihen kolon kanseri, melanom, hepatosellüler karsinom (HCC), renal kanser, gliyoblastom (GBM), pankreatik kanser, miyelodisplastik sendrom (MDS), akciger kanseri, ve gastrik kanser, ve/veya Iibroz, tercihen karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaligini tedavi etmek için söz konusu bilesiklerin kullanilmasina iliskindir.
Dönüstürücü büyüme faktörü beta (TGF-beta veya TGFß), TGF-beta tip I ve tip ll serin/treonin kinaz reseptörlerinin heteromerik komplekslerine baglanan ve TGF-beta reseptör kompleksini aktive eden, SMADZ ve SMAD3”ü fosforlayan ve aktive eden, daha sonra SMAD4 ile iliski kuran ve çekirdege göç eden ve farkli hedef genlerin ekspresyonunu düzenleyen bir çok-fonksiyonlu sitokindir. TGF-beta reseptörü sinyal iletim yolunun anahtar elemanlari arasinda TGFßl, TGFßZ, TGFß3, TGFßRl, TGFßR2, SMADler, SnoN, SARA, SKI, DAB, TRAP, TAKI, SMIF, E2F4, E2F5, RBLl, RBLZ, RBl, TFDPl, TFDP2, SMURFI, SMURFZ, P300, CBP, ve JUN yer alir. SMAD aracili TGF-beta reseptörü yolu, örnegin proliferasyon, farklilasma, büyüme, göç etme, miyelinasyon, hücre döngüsü arresti, apoptoz ve gelistirme gibi çesitli hücresel ve fizyolojik islemleri düzenler.
TGFßRllin küçük moleküllü inhibitörleri, kanser ve/veya fibroz tedavisi için bu sahada iyilestirici tedaviler yoktur. Kanser, tercihen kolon kanser, melanom, hepatosellüler karsinom (HCC), renal kanser, gliyoblastom (GBM), pankreatik kanser, miyelodisplastik sendrom (MDS), akciger kanseri, ve gastrik kanser, ve/veya fibroz, tercihen karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaliginin tedavisi için TGFßR1°in ilave küçük moleküllü inhibitörlerine, özellikle TGFßRl için daha seçici olan bilesiklere sahip olmak arzu edilecektir.
Bu bulus, asagidaki formüle sahip bir bilesigi veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzunu sunmaktadir: 3\N `N R1 hidrojen, izopropil, diflorometil, difloroetil, veya siklopropildir; R2 etil, tert-butil, piridin-2-il, tetrahidropiran-4-i1, tetrahidrofuran-3-il, siklopropil, veya siklobutildir; ve R3 karbamoilfenil, piridin-2-il, (1-hidroksi-1-metiletil)piridinil, l-metil-Z-okso-1H-piridin-4- il, l-metilpirazolil, pirazin-Z-il, 2-met0ksipirimidin-4-il, l-metil-Z-okso-1H-pirimidin-4-il, piridazin-3-il, 6-klor0piridazin-3-il, 6-metilpiridazin-3-il, veya 6-met0ksipiridazin-3-ildir.
Bu bulus ayrica 2-{4-[(4-{[l -siklopropil-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-l H-pirazol-4- il]oksi}piridin-Z-i1)amin0]piridin-2-il}pr0pan-2-ol veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzunu sunmaktadir.
Bu bulus ayrica 2- {4-[(4- {[ l-siklo pro pil-3-(tetrahidr0-2H-piran-4-il)- l H-pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-2-il)amin0]piridin-2-il} propan-Z-01-4-metilbenzensülf0nati sunmaktadir. il]0ksi}piridin-2-il)amin0]piridin-2-il}propan-Z-ol 4-metilbenzensülf0nat1 sunmaktadir. Bu tepe noktasiyla l7.8°,de bir tepe noktasi içeren X-isini toz kirinim paterniyle (Cu radyasyon, il)-1H-piraZOl-4-il]oksi}piridin-2-il)amin0]piridin-2-il}pr0pan-2-ol 4-metilbenzensülfonat1 sunmaktadir.
Bu bulus ayrica bulusun bir bilesigi veya tuzunu, ve bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilen eksipiyan, tasiyici, veya seyreltici içeren farmasötik bir bilesim sunmaktadir.
Bu bulus ayrica terapide kullanim için bu bulusun bir bilesigi veya tuzunu sunmaktadir.
Ilaveten, bu bulus, kanser, tercihen kolon kanseri, melanom, hepatosellüler karsinom (HCC), renal kanser, gliyoblastom (GBM), pankreatik kanser, iniyelodisplastik sendrom (MDS), akciger kanseri, ve gastrik kanser ve/Veya fibroz, tercihen karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaliginin tedavisinde kullanim için bu bulusun bir bilesigi veya tuzunu sunmaktadir.
Bundan baska, bu bulus, kanser, tercihen kolon kanseri, melanom, hepatosellüler karsinom (HCC), renal kanser, gliyoblastom (GBM), pankreatik kanser, miyelodisplastik sendrom (MDS), akciger kanseri, ve gastrik kanser ve/veya Iibroz, tercihen karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaligini tedavi etmeye yönelik bir ilacin imalatinda bu bulusun bir bilesik veya bir tuzunun kullanimini sunmaktadir. Asagidaki paragraflar, bu bulusun tercih edilen siniflarini açiklamaktadir: a) Ri diflorometil, difloroetil, veya siklopropildir; b) R2 piridin-Z-il, tetrahidropiran-4-il, veya siklopropildir; 0) R3 karbamoilfenil veya (l-hidroksi-l-metiletil)piridinildir; d) R1 siklopropildir ve R2 tetrahidropiran-4-ildir; e) R1 siklopropildir ve R2 siklopropildir; I) R1 difloroetildir ve R2 tetrahidropiran-4-ildir; g) R' diflorometildir ve R2 piridin-Z-ildir; h) R] siklopropildir, R2 tetrahidropiran-4-ildir, ve R3 (l-hidroksi-l- metiletil)piridinildir; i) R' siklopropildir, R2 siklopropildir, ve R3 (1-hidroksi-1-metiletil)piridinildir; j) R1 difloroetildir, R2 tetrahidropiran-4-ildir, ve R3 (l-hidroksi-1-metiletil)piridinildir; k) R1 diflorometildir, R2 piridin-Z-ildir, ve R3 karbamoilfenildir.
Bu bulusun bilesiklerinin serbest baz formlarinin, tuzlari olusturabilecegi ve bu tür tuzlarin, bu bulusun parçasi olacak sekilde düsünülecegi uzman okuyucu tarafindan anlasilacaktir. Bu bulusun bilesiklerinin serbest bazi, aminlerdir, ve uygun olarak farmasötik olarak kabul edilebilen asit ilaveli tuzlari olusturmak için çok sayida inorganik ve organik asitlerin herhangi biriyle reaksiyona girer. Bu tür farmasötik olarak kabul edilebilen asit ilaveli tuzlar ve bunlari hazirlamak için yaygin metodoloji bu sahada iyi bilinmektedir. Bakiniz, örnegin, P.
Stahl, ve digerleri, HANDBOOK OF PHARMACEUTICAL SALTS: PROPERTIES, SELECTION AND USE, (VCHA/Wiley-VCH, 2008); S.M. Berge, ve digerleri, Uzman kisi tarafindan, tuz stoikiyometrisinin kolaylikla belirlenebilecegi anlasilmaktadir.
Bakiniz, örnegin, D. Risley, ve digerleri, Simultaneous Deterinination of Positive and Negative Counterions Using a Hidrophilic lnteraction Chromatography Method, LCGC Bu bulusun bilesiklerinin bir kismi, kristalizedir. Herhangi bir belirtilen kristal form için, kirinim tepe noktalarinin bagil yogunluklarinin, kristal morfolojisi ve davranisi gibi faktörlerden kaynaklanan tercih edilen oryantasyona bagli olarak degisebilecegi kristalografi sahasinda iyi bilinmektedir. Tercih edilen oryantasyonun etkileri mevcut oldugunda, tepe noktasi yogunluklari degistirilir, fakat polimorfun karakteristik tepe noktasi pozisyonlari degismez. Bakiniz, örnegin, Amerika Birlesik Devletleri Farmakopesi #23, National form için açisal tepe noktasi pozisyonlarinin hafifçe degisebilecegi kristalografi sahasinda iyi bilinmektedir. Örnegin, tepe noktasi pozisyonlari, bir numunenin analiz edildigindeki sicaklik veya nemlilikteki bir varyasyon, numune yerdegisimi, veya bir iç standardin varligi veya yokluguna bagli olarak kayabilir. Mevcut durumlarda, 20,de ± 0.2,lik bir tepe noktasi pozisyon degiskenligi, belirtilen kristal formun anlasilir tanimini engellemeden bu potansiyel varyasyonlari dikkate alacaktir. Bir kristal formun dogrulanmasi, ayirt edici tepe noktalarinin, tipik olarak daha öne çikan tepe noktalarinin herhangi bir benzersiz kombinasyonunu (° ”lik birimlerde) baz alarak yapilabilir. Ortam sicakligi ve bagil nemlilikte toplanan kristal baz alarak ayarlanir.
Bu bulusun bilesikleri, bu sahada iyi bilinen ve takdir edilen usullerle müteakip sentetik semalara gore hazirlanabilir. Bu semalarin asamalari için uygun reaksiyon kosullari bu sahada iyi bilinmektedir ve çözücülerin ve yardimci reaktif maddelerin uygun sübstitüsyonlari bu sahanin uzmanligi içerisindedir. Benzer sekilde, sentetik ara maddelerin, gerektigi veya arzu edildigi gibi çesitli iyi bilinen tekniklerle izole edilebilecegi ve/veya saflastirilabilecegi, ve siklikla, müteakip sentetik asamalarda, az satlastirmayla veya hiç saflastirma olmadan, çesitli ara maddelerin dogrudan kullanilmasinin mümkün olacagi bu sahada söz konusu uzman kisilerce takdir edilecektir. Bundan baska, uzman kisi, bazi kosullarda, parçalarin katildigi siranin önemli olmadigini takdir edecektir. Bu bulusun bilesiklerini üretmek için gereken asamalarin özel sirasi, belirli bilesik, baslangiç bilesigi, ve sübstitüe edilen parçalarin göreceli yatkinligina baglidir. Tüm sübstitüentler, baska türlüsü belirtilmedikçe, önceden tanimlandigi gibidir ve tüm reaktif maddeler, bu sahada iyi bilinmektedir ve takdir edilmektedir.
Bu bulusun birtakim ara maddeleri veya bilesikleri bir veya daha fazla kira] merkeze sahip olabilir. Bu bulus, tüm bireysel enantiomerleri veya diastereomerleri, ayni zamanda rasematlar dahil olmak üzere söz konusu bilesiklerin enantiomerleri ve diastereomerlerinin karisimlarini kapsamaktadir. En az bir kiral merkez içeren bu bulusun bilesiklerinin, tekli enantiomerler veya diastereomerler olarak mevcut olmasi tercih edilmektedir. Tekli enantioinerler veya diastereoinerler kiral reaktif maddelerle baslanarak veya stereoseçici veya stereospesifik sentetik tekniklerle hazirlanabilir. Alternatif olarak, tekli enantiomerler veya diastereomerler, standart kiral kromatografik veya kristallesme teknikleriyle karisimlardan izole edilebilir. Uzman kisi, bazi kosullarda enantiomerlerin veya diastereomerlerin elüsyon sirasinin farkli kromatografik kolonlara ve mobil fazlara bagli olarak farkli olabilecegini takdir edecektir.
Bir bilesik adinda "izomer 1'”in tanimi, bir çilî enantiomerin bir karisimi, kiral kromatografiyle ayrildiginda, bu bulusun karsilik gelen ara maddesi veya bilesiginin, iki elute edici enantiomerin birincisi oldugunu temsil etmektedir. Bir bilesik adinda "izomer 2'”nin tanimi, bir çift enantiomerin karisimi, kiral kromatografisiyle ayrildiginda, iki elute edici enantioinerin ikincisi olan bu bulusun karsilik gelen ara maddesi veya bilesigini temsil eder.
Bu bulusun bilesikleri, asagidaki Semalarda açiklandigi gibi sentezlenebilir, burada R1, R2, ve R3 önceden tanimlandigi gibidir. 0 H 2 \ 2 2 / / 0- I hidrazin R N 2 R2 4 5 Formül I Sema 1: Formül l'in bilesiklerinin sentezi Sema l formül lje sahip bilesiklerin genel sentezini göstermektedir. Bilesik l, Bilesik 27yi sunmak için oda sicakliginda veya yükseltilmis sicaklikta sezyum karbonat veya potasyum karbonat gibi uygun bir bazla dimetilformamid (DMF) veya aseton gibi uygun bir çözücü içinde 2-klor0piridin-4-olle reaksiyona sokulur. Bilesik 2, Bilesik 3,ü olusturmak için yükseltilmis sicaklikta 1,1-dimetoksi-N,N-dimetil-metanaminle reaksiyona sokulur. Bilesik 3, Bilesik 49ü sunmak amaciyla asetik asit içinde hidrazinle reaksiyona sokmak için saflastirilabilir veya daha fazla sallastirma olmadan kullanilabilir. Bilesik 4, Bilesik 5,i olusturmak için Chan-Lam kenetlenme kosullari altinda potasyum alkiltrifloroborat veya alkiboronik asit gibi uygun bir alkilasyon reaktif maddesiyle reaksiyona sokulabilir. Daha spesifik olarak, önce 1,2-dikloroetan gibi uygun bir çözücü içinde bir 2,2'-bipiridin ve bakir(ll)asetat süspansiyonu yükseltilmis sicakliga isitilir ve azotla temizlenir, ve daha sonra reaksiyon karisimi süzülür ve Süzüntü bir Bilesik 4, uygun bir boronat, örnegin potasyum alkiltrifloroborat veya bir alkilboronik asit, ve 1,2-dikloroetan gibi uygun bir çözücü içinde sodyum karbonat gibi uygun bir baz karisimina ilave edilir. Reaksiyon karisimi, Bilesik 5°i sunmak için bir yükseltilmis sicakliga isitilir. Bilesik 4 ayrica Bilesik 5`i sunmak için DMF veya tetrahidrofuran (THF) gibi uygun bir çözücü içinde sodyum hidrür gibi uygun bir bazla uygun bir alkil halojenür, örnegin alkil iyodür, alkil bromür veya alkil klorürle reaksiyona sokulabilir. Bilesik 5, formül Pe sahip bir bilesik sunmak için uygun bir aminle iyi bilinen Buchwald kenetlenme kosullari altinda reaksiyona sokulur. Daha spesifik olarak, Bilesik 5, formül I”e sahip bir bilesik sunmak için uygun bir aminle yükseltilmis sicaklikta uygun bir bazla, örnegin sezyum karbonat varliginda, uygun bir ligand reaktif maddesiyle, örnegin 4,5- bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksantenle, ve uygun bir katalizörle, örnegin, uygun bir çözücü içinde palladyum(ll)asetatla, örnegin 1,4-di0ksanla reaksiyona sokulur.
R N trietilsilan, trifloroasetik F`,2 L _\ asit LNH 3 | \ \ \ Formüll 6 R1 H'dir.
Sema 2: R1 H oldugunda, Formül I'e sahip bilesiklerin sentezi Sema 2, R1 H oldugunda formül I”e sahip bilesiklerin genel sentezini gösterir. Sema l,de Asama 43te gösterildigi gibi, alkilasyon reaktif maddesi, 2-(trimetilsilil)etoksimetil klorür oldugunda, Bilesik 6, Asama 4iten alkilasyonla elde edilebilir ve Asama 5'ten Buchwald kenetlenme reaksiyonuyla elde edilebilir. Bilesik 6, formül I°e sahip bir bilesik sunmak için trifloroasetik asit içinde trietilsilanla reaksiyona girebilir, burada R1 iadir. Rl H oldugunda, formül I`e sahip bir bilesigin bir çiü tautomer olarak mevcut olabilecegi uzman kisilerce bilinmektedir, burada hidrojen, pirazolil halka üzerinde iki azot arasinda göç edebilir. 7 Formüll R3(karbamoil)fenildir Sema 3: R3 (karbamoil)fenil oldugunda, Formül l'e sahip bilesiklerin sentezi Sema 3, R3 bir (karbamoil)fenil grup oldugunda formül Fe sahip bilesiklerin genel sentezini gösterir. Bilesik 7, R3 uygun olarak benzonitrille sübstitüe edildiginde, Sema 1,de Asama Site gösterilen usulle hazirlanabilir. Bilesik 7, R3 bir (karbamoil)feni1 grup oldugunda, formül Pe sahip bir bilesigi sunmak için hidrojen peroksit ve uygun bir bazla, örnegin potasyum Burada kullanildigi haliyle, asagidaki terimler belirtilen anlamlara sahiptir: "ACN" ile asetonitril atifta bulunulur; "BSA" ile bovin serum albumine atiüa bulunulur; "DCM" ile diklorometana atifta bulunulur; "DMF" N,N-dimetilf0rmamidi temsil eder; "DMSO" ile dimetil sülfokside atifta bulunulur; "DTT" ile ditiyotreitole atifta bulunulur; "EDTA" ile etilenediamintetraasetik aside atifta bulunulur; "EGTA" ile etilen glikol tetraasetik aside atifta bulunulur; ”ELISA" ile enzimle bagli immünosorban analize atifta bulunulur; "EtOAc" ile etil asetata atifta bulunulur; "EtOH" ile etanole atifta bulunulur; "FBS" ile fetal bovin seruma atifta bulunulur; "HEC" ile hidroksietilselüloza atifta bulunulur; "HPLC" ile yüksek performansli sivi kromatografisine atifta bulunulur; "IVTI" ile in vivo hedef inhibisyona atifta bulunulur; "MS" ile kütle spektroskopisine atifta bulunulur; "MeOH" ile metanole atifta bulunulur; "NMR" ile nükleer manyetik rezonansa atifta bulunulur; "THF" ile tetrahidrofurana atifta bulunulur; "TBS" ile tris tamponlu saline atifta bulunulur; "TED" ile esik etkili doza atifta bulunulur; "UVW” ile ultra-viyole dalgaboyuna atifta bulunulur, ve Aksi belirtilmedikçe, burada açiklanan bilesikler, ACDLABS ya da Accelrys Draw 4.1 kullanilarak adlandirilir ve numaralandirilir.
Preparasyon 1 2-(4-Br0m0-2-piridil)pr0pan-2-ol Bir üç-litrelik, üç-boyunlu yuvarlak tabanli deney sisesi, bir ilave etme hunisi, bir geri akis kondansörü, bir azot girisi, ve bir sicaklik probuyla donatilir. Metilmagnezyum bromür (2- metiltetrahidrofuran içinde 3.2M, ile doldurulur ve bir buz banyosunda sogutulur. Ilave etme hunisine, THF içinde ( bir etil 4-br0m0piridin-2- tutulurken, metilmagnezyum bromür çözeltisine damla damla ilave edilir. Sogutma banyosu çikarilir ve 25°Cide 30 dakika karismaya birakilir. reaksiyon karisimi 5°C,ye sogutulur ve iç sicaklik 30°C3nin altinda tutulurken sulu hidroklorik asit çözeltisinin (IM) damla damla ilavesiyle dikkatli sekilde sönümlenir. Ilave sulu hidroklorik asit çözeltisi (IM) karisim 7 civarinda bir pH,a ulasana kadar eklenir. Sogutma banyosu çikarilir ve etil asetatla (EtOAc; seyreltilir. Organik tabaka izole edilir, susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, bir CELITE® tikacindan süzülür ve EtOAc ile dumlanir. Süzüntü, bir tunincu yag sunmak için konsantre edilir. Basliktaki bilesigi (63.15 g; %840 verim) renksiz bir yag olarak suninak için heksan/EtOAc (3/1) ile elute edilerek bir silika jel tikaci kullanilarak saflastirilir. MS Asagidaki bilesik esas itibariyle Preparasyon 1”in usulüyle hazirlanir.
Prep. No. Kimyasal ad Yapi Fiziksel veriler Preparasyon 3 2-(4-Amino-2-piridil)p ropan-Z-ol Bir karistirma çubuguna sahip bir iki-litrelik Parr reaktörü, bakir (toz ag, 126 g, 198.6 içinde a/a % 28, doldurulur. Reaksiyon karisimi açik havada 30 dakika koyu mavi olana kadar karistirilir. Karistirma çubugu çikarilir, bir mekanik karistirma basi baglanir, sizdirmaz sekilde kapatilir, ve bir karistirici üzerine yerlestirilir. Karisim 100°C°ye isitilir (120°C'de iç, isitma banyosu) ve gece boyunca karistirilir. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutulur ve 2-metiltetrahidrofuran ( ilave edilir. Bir CELITE® tikaçtan süzülür ve 2-metiltetrahidrofuranla durulanir. Organik tabaka izole edilir ve sulu tabaka 2- metiltetrahidrofuranla ( ekstrakte edilir. Organik tabakalar birlestirilir ve susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur. Basliktaki bilesigi (31.3 g; %70.4 verim) sari bir yag olarak sunmak için süzülür, konsantre edilir ve gece boyunca vakum altinda karistirilir. MS Asagidaki bilesik esas itibariyle Preparasyon 3 usulüyle hazirlanir.
Prep. No. Kimyasal ad Yapi Fiziksel veriler 4 2-(5-Amino-Z-piridiDpropan-Z-ol I MS (in/Z): Preparasyon 5 2-Br0m0-1-tetrahidropiran-4-il-etan0n Oksalil klorür ( içinde bir edilir. Karisim oda sicakliginda 2.5 saat azot altinda karistirilir.
DCM içinde ( kalinti indirgenmis basinç altinda konsantre edilir ve çözündürülür.
Elde edilen çözelti (trimetilsilil)diazometana (heksan içinde 2M, - °C9de damla damla ilave edilir ve karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilir. damla damla ilave edilir. Karisim oda sicakliginda iki saat karistirilir. Karisim 0°C'ye sogutulur ve hidrobromik asit (su içinde a/a % 48, 26 mL, 231.36 mmol) damla damla ilave edilir. Karisim oda sicakliginda iki saat karistirilir. su ( ilave edilir ve organik tabaka izole edilir. Sulu tabaka, DCM (2 x ile ekstrakte edilir. Organik tabakalar birlestirilir ve doymus sulu sodyum bikarbonat çözeltisi ve doymus sulu sodyum klorürle yikanir. Susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur ve basliktaki bilesigi (58.2 g; edilir. iH NMR (, 1.78 (m, 4H).
Metanol (MeOH; 50 mL) içinde bir l-tetrahidropiran-4-iletanon (10 g, 78.02 mmol) çözeltisi -10°C,ye sogutulur. Brom ( damla damla ilave edilir. Karisim 0°C°de 45 dakika ve ardindan 10°Clde 45 dakika karistirilir. Sülfiirik asidin bir sulu çözeltisi (l lM, ilave edilir ve elde edilen karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilir. su ilave edilir ve dietil eterle üç kez ekstrakte edilir. Organik tabakalar birlestirilir.
Sodyum bikarbonat ve suyun bir sulu çözeltisiyle yikanir. Basliktaki bilesigi (12 g; %74.28 verim) beyaz bir kati olarak sunmak için susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur ve indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. lH NMR (, Preparasyon 6 2- [(2-Klor0-4-piridil)0ksi] -1 -tetrahîdropiran-4-il-etan0n çözeltisi, DMF içinde ( ve sezyum karbonatin (69.67 g, 213.82 inmol) bir karistirilan karisimina oda sicakliginda damla damla ilave edilir. Elde edilen karisim 90°C”de 2.5 saat karistirilir. Ham karisimi sunmak için oda sicakligina sogutulur. Yukarida belirtildigi gibi baslatilan baska bir 2.85 g (2-kloropiridin-4- ol) ölçeginde reaksiyonun bir hani karisimiyla birlestirilir. Birlesik karisim, su ( ve EtOAc ( ile seyreltilir. Organik tabaka izole edilir ve sulu tabaka, EtOAc (3 x ile yikanir ve sulu sodyum klorürle ( kahverengi bir yag olarak sunmak için susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. MS (m/z): . 72.62 mmol) aseton içinde ( çözeltisine ilave edilir ve elde edilen karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilir. Katiyi gidermek için süzülür ve kati, DCM ile yikanir. Basliktaki bilesigi kantitatif olarak sunmak için süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. MS (ni/z): .
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 6”nin Usul 2”siyle hazirlanir.
Prep. _ Fiziksel veriler MS Kimyasal ad Yapi 2-[(2-Klor0-4-piridil)0ksi]-l-tetrahidroûiran-3-il- of:) etanon Ü 1-[(2-Klor0-4-piridil)0ksi]-3,3-dimetil-butan-2- îîk 2-[(2-Klor0-4-piridil)0ksi]-l-siklobutil-etanon o 11 2-[(2-Klor0-4-piridil)oksi]-l-siklopropil-etanon o Preparasyon 13 2-Klor0-4- [(3 -tetrahidropiran-4-il-1H-pirazol-4-il)0ksi]piridin karistirilir. Kalinti oda sicakligina sogutulur, indirgenmis basinç altinda konsantre edilir ve EtOAc ( ve doymus sulu sodyum klorürle ( yikanir. Bir kahverengi kati sunmak için susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur ve indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Asetik asit ( içinde çözündürülür ve 0°C,ye sogutulur. Hidrazin monohidrat ( ilave edilir ve oda sicakliginda gece boyunca azot altinda karistirilir. Karisim into bir buz/su karisiinina ( ile ekstrakte edilir. Organik tabakalar birlestirilir ve su ( ile yikanir. Kahverengi bir yag sunmak için susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Kahverengi yag, EtOAc ile elute edilerek bir silika jel tikaci kullanilarak saflastirilir. Uygun parçalar birlestirilir ve indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Basliktaki bilesigi (24.43 g; Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 13”ün usulüyle hazirlanir.
Prep. . Fiziksel veriler MS Kimyasal ad Yapi 2-K10ro-4-[(3-tetrahidr0furan-3-il-lH-pirazol-4- J_ _ _ __ _ o `mi il)0ksi]piridin Ö Prep. Fiziksel veriler MS Kimyasal ad Yapi 4-[(3-TeiT-butil-1H-pirazol-4-il)oksi]-2-kloro- ,~. 16 _ _ o \”” piridin i \ 2-K10r0-4-[(3-siklobutil- lH-pirazol-4- -MN H 17 .1) k .] . '(1' E)\ 1 o si piri in \ 2-Kloro-4- 3-siklo ro il-1H- irazol-4- ,N 18 1( p p 1› o \NH 236(M+1) il)oksi]piridin \ 19 H ( p p 0 Im* il]0ksi]piridin Ö Preparasyon 20 2-Klor0-4-(1-siklopropil-3-tetrahidr0piran-4-il-pirazol-4-il)0ksi-piridin 1,2-diklor0etan (asetat sogutulur. 1,2-dikloroetan ( içinde bir 2-kloro-4-[(3-tetrahidropiran-4-il-1H- pirazol-4-il)oksi]piridin (24.43 g, 79.91 mmol) çözeltisi ilave edilir, ardindan ilave edilir. Reaksiyon karisimi 75°C'de iki saat bir oksijen atmosferi altinda isitilir ve oda sicakligina sogutulur. EtOAc ( ile seyreltilir, bir silika jel tikaciyla süzülür ve EtOAc yikanir. Susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir ve kalinti vakum altinda oda sicakliginda gece boyunca kurutulur.
Basliktaki bilesigi (20.75 g; %812 verim) sari bir kati olarak sunmak için DCM içinde %6- 27 EtOAc ile silika jel kolon kromatografisiyle saflastirilir. MS (in/z): . 452 mmol) süspansiyonu 70°C,ye isitilir ve 3 dakika azotla temizlenir. Süzülür ve süzüntü, sodyum karbonat (4.8 g, 45.2 mmol) karisimina ilave edilir. Reaksiyon karisimi 70°C”de dört gün isitilir. Oda sicakligina sogutulur. Süzülür ve DCM ile durulanir. Süzüntü, doymus sulu amonyum klorür çözeltisi ve doymus sulu sodyum bikarbonat çözeltisiyle yikanir. Susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, Süzülür ve süzüntü, indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Bsliktaki bilesigi (6.0 g; %822 verim) sunmak için DCM içinde %1-%10 MeOH ile silika jel kolon kromatografisiyle sailastirilir. MS (m/z): .
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 20,nin Usul 1”iyle hazirlanir. Tetkik prosedüründe degisiklik belirtilmektedir.
Prep. Fiziksel Kimyasal ad Yapi Yorumlar No. MS (m/z): p p 1› ) fî (M+l) 2-Kloro-4-(l ,3- P ppîridin ) iNî (MH) piridil)pirazol-4-il]0ksi-piridin r: (M+l) amonyak hidroksit ait:: kullanilir.
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 20”nin Usul 2”siyle hazirlanir.
Prep. Fiziksel veriler MS Kimyasal ad Yapi 2-Klor0-4- l-siklo ro il-3-etil- irazol-4-il oksi- Si 24 ( p 1? . p ) o xNH piridin \ 2-Kloro-4-( l-siklopropil-3-tetrahidr0furan-3-il- i i i _ _ _ o x“*ü pirazol-4-il)0ksi-piridin 4- 3-Tert-butil-l-siklo ro il- irazol-4-il 0ksi-2- ;Sil kloro-piridin I \ Preparasyon 27 2-Klor0-4-(l-siklopropil-3-tetrahidrofuran-3-il-pirazol-4-il)0ksi-piridin, izomer 1 Basliktaki bilesik olarak birinci elute edici enantiomeri sunmak için 2-klor0-4-(l -siklopropil- 3-tetrahidroûiran-3-il-pirazol-4-il)oksi-piridinin rasemik karisimi (Preparasyon 25), kiral kromatografiyle saflastirilir. MS (ni/z): .
Saflastirma kosullari: CHIRALPAK® IC; Mobil Faz: karbon dioksit içinde %20 etanol Preparasyon 28 2-Klor0-4-(l-siklopropil-3-tetrahidrofuran-3-il-pirazol-4-il)0ksi-piridin, izomer 2 Basliktaki bilesik olarak ikinci elute edici enantiomeri sunmak için 2-klor0-4-(l-siklopropil- 3-tetrahidr0furan-3-il-pirazol-4-il)0ksi-piridinin rasemik karisimi (Preparasyon 25) kiral kromatografiyle saflastirilir. MS (ni/z): .
Saflastirma kosullari: CHIRALPAK® IC; Mobil Faz: karbon dioksit içinde %20 EtOH; Akis hizi: 300 g/dakika; UVW: 240 nm; Tutma süresi: 2.93 dakika.
Preparasyon 29 2-K10r0-4-[1-(ditlorometil)-3-(2-piridil)pirazol-4-il] oksi-piridin DMF içinde (-1H-pirazol-4-il]0ksi]piridin (2.0 g, 7.33 mmol) çözeltisi bir buz banyosu içinde sogutulur ve sodyum hidrür (mineral yag içinde %60, oda sicakligina ilimaya birakilir ve 10 dakika karistirilir. Difloroiyodometan (THF içinde agirlikça %10, ilave edilir ve reaksiyon karisimi 45°C,de gece boyunca karistirilir. Oda sicakligina sogutulur ve EtOAc ile seyreltilir. Önce 5% sulu lityum klorür çözeltisiyle yikanir ve ardindan doymus sulu sodyum klorürle yikanir. Susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur, süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir.
Kalinti, DCM içinde %0-50 EtOAc ile silika jel kolon kromatografisiyle saflastirilir. Uygun parçalar birlestirilir ve indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Basliktaki bilesigi (1.56 g; kromatografisiyle saflastirilir. MS (In/z): .
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 29°un usulüyle hazirlanir. Çözücü, baz, ve/veya reaksiyon sicakligindaki degisiklikler belirtilmektedir.
Kimyasal ad 2-Kloro-4-[3-siklopropil- 1-(diflorometil)pirazol-4- il]oksi-piridin 2-Klor0-4-[1- 31 (diflorometil)-3- tetrahidropiran-4-il- pirazol-4-il]oksi-piridin 2-Kloro-4-[ l - (diflorometil)-3- tetrahidrofuran-3-il- pirazol-4-il]0ksi-piridin 2-Kloro-4-[3-siklo butil- l - 33 (ditlorometil)pirazol-4- il]0kSi-piridin Fiziksel veriler Yorumlar MS (in/z): potasyum tert-butoksit, DMSO-dö) 8 8.42 (8, 111), 8.30 (d, J=5.6 Hz, 1H), 7.71 J=2.4 Hz, 111), 7.04 (dd, J=2.4 Hz, J=5.6 Hz, lH), 1H NMR (399.83 MHz, DMSO-dö) 8 8.46 (s, 1H). 1:2.4 Hz, 1H), 7.05 (dd, 1:2.4 Hz, J=5.6 Hz, 111), 3.89 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 2.12 (m, 1H). 1.99 (m, 1H).
Kimyasal ad 2'Klor0'4'l1-izopropil-3 -(2-piridil)pirazol-4- il]0kSi-piridin 2-Kloro-4-(3-siklopropil- 1-izopropil-p irazo 1-4- il)oksi-piridin 2-Kloro-4-(l -izopropil-3- tetrahidropiran-4-i1- pirazol-4-il)oksi-piridin 2-Kloro-4-(3-siklobutil-1- izo pro pil-pirazo 1-4- i1)oksi-piridin 2-Kloro-4-[ 1 -(2,2- difloroetil)-3-(2- piridil)pirazol-4-il]oksi- 2-Klor0-4-[3-siklopropil- l-(2,2-difloroetil)pirazol- 4-il]oksi-piridin 2-Kloro-4-[ 1 -(2,2- difloroetil)-3 - tetrahidropiran-4-il- pirazol-4-il]oksi-piridin Preparasyon 41 Fiziksel veriler Yorumlar potasyum tert-butoksit , gece boyunca geri akitilir oda sicakligi oda sicakligi oda sicakligi potasyum tert-butoksit, Sezyum karbonat, Sezyum karbonat, Sodyum hidrür (mineral yag içinde %60 süspansiyon, 484 mg, 12.10 mmol), THF içinde çözeltisine O°C”de ilave edilir. 15 dakika 0°Csde karistirilir ve 2-(trimetilsilil)etoksimetil klorür (2.02 g, 12.10 mmol) ilave edilir. Reaksiyon karisimi oda sicakliginda gece boyunca karistirilir. Karisim konsantre edilir. Kalinti, DCM ve su olarak ayrilir. Organik tabaka izole edilir ve sodyum sülfat üzerinde kurutulur. Karisim süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Basliktaki bilesigi (3.64 g; %82.] verim) sunmak için kalinti heksan içinde %0-30 EtOAc ile silika jel kolon kromatografisiyle saflastirilir. MS (m/z): .
Preparasyon 42 mmol) çözeltisi azotla bes dakika temizlenir. Elde edilen karisim, palladyum(ll)asetatla (26.1 mg, 0.12 mmol) muamele edilir ve 5 dakika azotla temizlenir. Flakon kapatilir ve 100°C3de iki saat, ardindan 80°C,de hafta sonu boyunca karistirilir. Oda sicakligina sogutulur, bir CELITE® tikaciyla süzülür ve DCM içinde %5 MeOH ile yikanir. Basliktaki bilesigi (467 mg; %100 verim) sunmak için süzüntü konsantre edilir. MS (m/z): .
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Preparasyon 427nin usulüyle hazirlanir. Katalizör, ve/Veya çözücüdeki degisiklikler belirtilmektedir.
Fiziksel Prep. 4 veriler Kimyasal ad Yapi Yommlar 2-[5-[[4-[3-(2-Piridi1)-1- (2- / N 43 trimetilsililetoksimetil)p \ i J'.N`/o`/` 519 Tris(dibenzilidenaseton)dipallad irazo 1-4-i1]0ksi-2- N` Ö (M+l) yum(0), toluen piridil]amin0]-2- @Ü N piridil]pr0pan-2-01 siklo ro il-l-izo ro il- N 44 _p I: 4 '1 kp' zp o :-N_< 394 Tris(dibenzilidenaseton)dipallad irazo- -1 O 81- - p ) NI \ fî (M+1) yum(0), toluen karboksilat 4-[[4-[1-Izopr0pil-3-(2- 45 piridil)pirazol-4-il]0ksi- GL” N& 397 2- N Ö (MH) piridil]amin0]benzonitril 5 Ç 3-[[4-(1-Sik10pr0pil-3 - o 46 tetrahidropiran-4- il- Oi; ”“ pirazol- -4- i-l)0ksi-2- N//ûH' Ö (M+l) piridil]amin0]benzonitri1 "r 4-[[4-(1-Sik10pr0pi1-3- /Iî 47 etil-pirazol-4-il)0ksi-2- N\\ Ebî (M 1) piridil]amin0]benzonitril @N 48 3-tetrahidropiran-4-il- c `NK (M 1) pirazol-4-il]0ksi-2- Kimyasal ad piridil]amin0]benzonitril N-[4-[l-(Diflor0metil)- 3-tetrahidr0furan-3 -il- pirazoI-4-il]0ksi-2- 'NCN i \ piridil]piridazin-3-amin / u N” 2-[4-[[4-(1-Sik10propil- 3-tetrahidr0furan-3-il- 0* 50 piIazol-4-il)0ksi-2- 0 "M piridil]amin0]-2- HO N' / E lu' piridil]pr0pan-2-ol 4-[[4-[3-Sik10buti1-1- 51 (diflorometil)pirazol-4- o :N`N_ 11]0ksi-2- n û piridil]amin0]benzonitril ü " 3-[[4-[l-(Diflor0metil)- I `N 3-(2-piridil)pirazol-4- N / /N-Nj 52 ii o \ F i1]0ksi-2- (EL , i piridil]amin0]benzonitril ,u `N 4-[[4-(1,3- 53 Disikloivropilpuazol-4- N` &Ný 11)0ksi-2- \©\ (5 piridil]amin0]benzonitril E N Fiziksel Yorumlar Tris(dibenzilidenaseton)dipallad 1,4-dioksan ( içinde bir 2-kloro-4-(1-siklopropi1-3-tetrahidropiran-4-il-pirazol-4- ve sodyum fenat (26.5 g, 228.2 mmol) çözeltisiyle azotla 20 dakika temizlenir. Elde edilen bis(dibenzilidenaseton)palladyumla (4.10 g, 7.13 mmol) muamele edilir. 21 saat geri akitilir.
Reaksiyon oda sicakligina sogutulur ve gece boyunca karistirilir. Bir CELITE® tikacindan süzülür ve DCM ( ile yikanir. Süzüntü, silika jel üzerinde konsantre edilir. EtOAc içinde %0-10 MeOH ile silika jel kolon kromatografisiyle saIlastirilir. Basliktaki bilesigi (58.7 g; %91.7 verim) sunmak için uygun parçalar konsantre edilir ve gece boyunca vakum altinda karistirilir. MS (m/Z): . Ürünün birkaç partisi, yukaridaki usul kullanilarak üretilir. EtOH (1 L) içinde basliktaki bilesiklerin (92.4 g) birlesik partileri çözündürülür. Çözelti, QUADRASIL® MP (100 g, 1.0-l.5 mmol/g) ile muamele edilir ve 60°C,de bir saat çalkalanir. Oda sicakligina sogutulur ve katilari gidermek için süzülür. Çözücüyü gidermek için konsantre edilir. Kalinti, 100°C,de isitilirken EtOH ( içinde çözündürülür. Daha sonra karisim yavas yavas oda sicakligina sogutulur ve su ( yavas yavas ilave edilir.
Karisim karistirilirken 5°C”ye sogutulur. Basliktaki bilesigi (81.8 g) sunmak için kati süzülerek toplanir ve 45 °C°de gece boyunca vakum altinda kurutulur. MS (in/z): . dimetilksanten (134.6 mg, 0.23 mmol) ilave edilir ve 5 dakika azotla temizlenir. palladyum(II)asetat (26.1 mg, 0.12 mmol) ilave edilir ve 5 dakika azotla temizlenir. Flakon sizdirmaz sekilde kapatilir ve 100°C,de gece boyunca karistirilir. Reaksiyon oda sicakligina sogutulur, bir CELITE® tikaciyla süzülür ve DCM içinde %5 MeOH ile yikanir. Konsantre edilir ve ters faz kromatografisiyle (Redisep Rf Gold High Performance CIS Ters Faz Kolonu, formik asit/su içinde % satlastirilir. Basliktaki bilesigi (341 mg; %673› verim) sunmak için uygun parçalar konsantre edilir ve vakum altinda kurutulur. MS (m/z): .
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Örnek 1”in Usul 2lsiyle hazirlanir. Baz, katalizör, ligand, ve/Veya çözücüde degisiklikler belirtilmektedir.
Kimyasal ad (Diflorometil) -3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]oksilpiridin-2- metoksipiridazin- 3-amin (Diflorometil)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi } piridin-2- metoksipirimidin- 4-amin 4-{[1- (Diflorometil)-3- (piridin-2-i1)- 1 H- Fiziksel Yapi Yorumlar o ` F bis(dibenzilidenaseton)palladyum Kimyasal ad pirazol-4- il)piridin-2-amin 6-Kloro-N-(4- {[1-siklopropil-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)piridazin-3- Siklopropil-B- (tetrahidro-ZH- piran-4-i1)- 1 H- pirazol-4- i1]0ksi} piridin-2- metoksipiridazin- 3-amin Siklopropil-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-i1)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-Z- Fiziksel Yorumlar Kimyasal ad metilpiridazin-S- SiklopropiI-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-Z- il)pirazin-2-amin 2- {2-[<4-{[1- Siklopropil-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-2- i1)amin0]piridin- 4-il}pr0pan-2-ol 4-{[1_(2,2- Difloroetil)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- metil- l H-pirazol- 3-il)piridin-2- Fiziksel Yorumlar sodyum fenat, bis(dibenzilidenaseton)palladyum Kimyasal ad 4- {[ l-(2,2- Difloroetil)-3- (piridin-Z-il)-l H- pirazol-4- metil- 1 H-pirazo l- 4-il)piridin-2- 2-{5-[(4-{[1-(2,2- Difloroetil)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 4-{[1- (Diflorometil)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]oksi}›-N-(1 - metil- 1 H-pirazo 1- -il)piridin-2- 4-{[1- (Diflorometil)-3- (p iridin-Z-il)- 1 H- pirazo 1-4- Fiziksel Yorumlar sodyum fenat, bis(dibenzilidenaseton)palladyum sodyum fenat, bis(dibenzilidenaseton)palladyum bis(dibenzilidenaseton)palladyum bis(dibenzilidenaseton)palladyum Kimyasal ad metil- lH-pirazol- 4-il)piridin-2- (Diflorometil)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-Z- il)piridazin-3- 2-{6-[(4-{[1- S iklopropil-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazo 1-4- il]0ksi} piridin-2- i1)amin0]piridin- 3-il}pr0pan-2-01 2-{5-[(4-{[1- Siklopropil-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-i1}pr0pan-2-01 2- {4-[(4-{[1- Siklopropil-3- (piridin-Z-il)- 1 H- Fiziksel Yorumlar bis dibenzilidenaseton allad um Kimyasal ad pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-iI}pr0pan-2-ol 2-{6-[(4-{[1- (Propan-2-il)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 3-il}pr0pan-2-ol 1-Metil-4- [(4- {[ 1 -(pr0pan-2-il)- 3-(piridin-2-il)- lH-pirazol-4- il]0ksi} piridin-Z- il)amin0]piridin- 2(1H)-on (Propan-2-il)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)piridazin-3- Fiziksel o @39% Yorumlar sodyum fenat, bis(dibenzilidenaseton)palladyum Kimyasal ad siklopropil-l H- 22 pirazol-4- il)oksi]piridin-2- il}piridazin-3- 2-[5-({4-[(3-Tert- siklopropil-l H- 23 pirazol-4- OH N il)0ksi]piridin-2- 1' 15 il}amin0)piridin- 2-il]pr0pan-2-ol 2-[4-({4-[(3-Tert- siklopropil-IH- N 24 pirazol-4- O il)0ksi]piridin-2- i/ i, il}amino)piridin- 2-il]propan-2-ol 2-[4-({4-[(1- Siklopropil-3- etil-1H-pirazol-4- il)oksi]piridin-2- HO NI` INS il}amino)piridin- 2-il]propan-2-ol Fiziksel Yorumlar Kimyasal ad 4-{[3- Siklopropil- 1 - (diflorometil)- 1 H-pirazoI-4- metil- 1 H-pirazo l- 4-il)piridin-2- 2- {4-[(4- {[3- Siklopropil- l - (2,2-dif10roetil)- 27 1 H-p irazo 1-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 Siklopropil- 1 - (diflorometil)- 28 1H-pirazol-4- il]0ksi } piridin-2- il)piridazin-3- 4-( {4-[( 1 ,3- Disiklopropil- 1 H- irazol-4- il)oksi]piridin-Z- il} amino)-1- metilpirimidin- Fiziksel Yorumlar bis(dibenziliden easeton)palladyum easeton)palladyum bis(dibenziliden easeton)palladyum Kimyasal ad 2(lH)-0n 4-[(1,3- Disiklopropil-l H- pirazol-4-il)0ksi]- N-( 1 -metil- 1 H- pirazol-3- il)piridin-2-amin 2-[6-({4-[(1,3- Disiklopropil-l H- pirazol-4- i1)oksi]piridin-2- i1} amin0)piridin- 3-il]propan-2-ol 4-[(1,3- Disiklopropil-IH- pirazol-4-i1)0ksi]- N-(l-metil- 1 H- pirazol-4- il)piridin-2-amin 4-( {4-[(l,3- Disiklopropil-IH- pirazol-4- il)oksi]piridin-2- il}amino)-1- metilpiridin- 2( 1 H)-on Fiziksel Yorumlar easeton) palladyum easeton)palladyum bis(dibenzilidenaseton)palladyum, toluen/N-metilpirrolidone Kimyasal ad Disiklopropil-IH- pirazol-4- il)0ksi]piridin-2- il}piridazin-3- 2-{4-[(4-{[i-(2,2- Difloroetil)-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazol-4- i1]0ksi} piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 (Diflorometil)-3- (tetrahidro-ZH- 36 piran-4-il)- il]0ksi}piridin-2- il)piridazin-3- 4-{[1- Siklopropil-3- (tetrahidro-ZH- 37 piran-4-i1)- 1 H- pirazol-4- il]oksi}-N-(1- metil- lH-pirazo l- Fiziksel Yorumlar easeton)palladyum bis(dibenziliden easeton)palladyum bis(dibenzi1iden easeton)palladyum Kimyasal ad -il)piridin-2- 4-{[i- SiklopropiI-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazo 1-4- metil- l H-pirazol- 4-il)piridin-2- 4-[(4- {[ 1 - Siklopropil-3- (tetrahidr0-2H- piran-4-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi} piridin-2- il) amino]- l - metilpiridin- 2( 1 H)-0n Siklopropil-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi} piridin-Z- il)piridazin-3- Fiziksel Yorumlar bis(dibenziliden easeton)palladyum Kimyasal ad 4-[(4-{[i- Siklopropil-3- (tetrahidro furan- 3-il)- l H-pirazol- 4-il]0ksi}piridin- 2-il)amin0]-1- metilpiridin- 2( 1 H)-0n Siklopropil-3- (tetrahidro furan- pirazo 1-4- il} 0ksi)p iridin-Z- il]piridazin-3- amin, izomer 2 Siklopropil-3- (tetrahidro furan- pirazol-4- il } 0ksi)p iridin-2- il]piridazin-3- amin, izomer l 2-{5-[(4-{[1- Siklopropil-3- (tetrahidrofuran - 3-il)- lH-pirazol- 4-il]0ksi}piridin- Fiziksel Yorumlar easeton)palladyum Kimyasal ad i1)amin0] piridin- 2-il} propan-Z-ol 2- {5-[(4- {[3- Siklobutil- 1- (diüorometil)- 1H-pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 2-[5-( {4-[(3- Siklobutil- 1- Siklopropil-IH- pirazol-4- il)0ksi]piridin-2- i1}amin0)piridin- 2-i1]pr0pan-2-ol 2-{5-[(4-{[1- (Diflorometil)-3- (p iridin-Z-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- i1)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-ol 2- {4-[(4-{[1- (Difîorometil)-3- (p iridin-Z-il)- 1 H- pirazo 1-4- Yorumlar Fiziksel Örn veriler Kimyasal ad Yapi Yorumlar i1]0ksi}-piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 2-{5-[(4-{[1- (Propan-2-il)-3- iridin-Z-il -lH- / `N 49 pirazol-4- o \ il]0ksi}piridin-2- l/ N lN, il)amin0]piridin- H 2-il}pr0pan-2-ol 2-{4-[(4-{[1- (Propan-2-il)-3- (piridin-Z-il)- 1 H- /SN 50 pirazol-4- o \ il]0ksi}pir1d1n-2- '/ N li( il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 2-{5-[(4-{[3- S iklopropil- 1 - (diflorometil)- 51 1H-pirazol-4- 0 H 0 F i1]0ksi}pirid1n-2- '/ N 'N/ il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 2- 4- 4- 3- 52 Siklo ro il-l- F (diflorometil)- â»ÇLN ' Fiziksel Örn veriler No Kimyasal ad Yapi MS Yorumlar lH-pirazol-4- i1]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2- il propan- 2-- 01 2-[5-({4-[(1›3- Disiklopropil- lH- 53 pirazol-4- &N N` il)0ksi]piridin-2- % il}amin0)piridin- 2-il]pr0pan-2-01 2-[4-({4-[(1,3- Disiklopropil- 1 H- 54 pirazol-4- ÜîN-q 392 sodyum fenat, bis(dibenziliden il)0ksi]piridin-2- YONINÜ (M+l) easeton)palladyum il} amino)piridin- HO H 2-il]pr0pan-2-ol 2-{5-[(4-{[3- S iklopropil- l - 55 @miz-13:& HO En( 394 sodyum fenat, bis(dibenziliden il]0ksi}piridin-2- @MENÜ (M+1) easeton)palladyum il)amin0]piridin- 2-il}pr0pan-2-ol 2-{5-[(4-{[1- o (Diflorometil) -3- OEM( 446 (tetrahidro-ZH- &NIL Ö (M+ 1) piran-4-il)- 1 H- Kimyasal ad pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin - 2- il propan- -2- 01 2- {4-[(4-{[1- (Diflorometil)-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-il)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- i1)amino]piridin- 2-il}pr0pan-2-01 2-{5-[(4-{[1- Siklopropil-B- (tetrahidro-ZH- piran-4-i1)- 1 H- pirazol-4- i1]0ksi} piridin-Z- il)amin0]piridin- 2-il} propan-2-ol 2- {4-[(4-{[1- (Propan-Z-il)-3- (tetrahidro-ZH- piran-4-i1)- 1 H- pirazol-4- il]0ksi}piridin-2- il)amin0]piridin- 2-il} propan-2-01 Fiziksel Yapi Yorumlar Fiziksel Örn veriler Kimyasal ad Yapi Yorumlar 2-[4-({4-[(3- Siklobutil- 1- siklopropil-lH- N . . 60 pirazol-4- 0 (M 1) ) 1] (1 N \ \ + easeton a a m il)oksi]piridin-2- Ho i/ JÖ p yu il}amino)piridin- 2-i1]propan-2-01 2-{4-[(4-{[3- Siklobutil- 1- ( ro an-Z-il -lH- N 61 pirazol-4- 0 il]oksi}piridin-2- HO '/ N u' il)amino]piridin- 2-il}propan-2-01 amino] benza mid Potasyum karbonat ( içinde bir 4-[[4-(1-siklopr0pil-3- çözeltisine ilave edilir. %30 hidrojen peroksit ( ilave edilir ve reaksiyon karisimi ortam sicakliginda gece boyunca karistirilir. Suyla seyreltilir ve DCM ile dört kez ekstrakte edilir. Organik tabakalar birlestirilir ve doymus sulu sodyum klorürle yikanir. Susuz sodyum sülfat üzerinde kurutulur. Karisim süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. Basliktaki bilesigi (220 mg; %459 verim) sunmak için kalinti ters faz kromatografisiyle (Redisep Rf Gold High Performance Cl8 Ters Faz Kolon, formik asit/su içinde %.
Asagidaki bilesikler esas itibariyle Örnek 62°nin usulüyle hazirlanir.
.. Fiziksel N Kimyasal ad Yapi veriler MS 3- [(4- {[ l-Siklopropil-3-(tetrahidro-2H-piran- 0 N 63 4-il)-1H-pirazol-4-il]oksi}›piridin-2- o `MG il)amin0]benzamid Wû 'N' pirazol-4-1l]oksi}p1nd1n-2-il)amin0]benzamid H Nü Ö 2 N lN/ 4-( 4-[(l-Siklo ro il-3-etil-1H- irazol-4- :`N 65 { p p p mu 0 `Q il)oksi]piridin-2-il}amino)benzamid oÄû l \ 4-[(4- {[l-(Diilorometil)-3 -(tetrahidro-2H- 0 N 66 piran-4-il)-lH-pirazol-4-i1]0ksi}piridin-2- o 0 :R: il)amin0]benzamid HzNÄûN lNî 4_ 4_ 3-S`1klobutil-1-diflorometil)-1H- :5/5 F 67 H H ( o o `HF pirazol-4-il]0ksi}piridin-2-il)amino]benzamid HZNJkû 'x 3- 4- l- Diflorometil)-3- iridin-2-il-1H- / IN' F pirazol-4-il]okSi}piridin-2-il)amino]benzamid é , .. Fiziksel N Kimyasal ad Yapi veriler MS 4- 4- 1,3-Disiklo ro il-lH- irazol-4- &2 il)0ksi]pir1din-2-il}amin0)benzamid HJNJKû Ü 2-il}pr0pan-2-01 Bir sizdirmaz sekilde kapatilmis flakon içinde THF içinde (6 mL) bir metil 4-[[4-(3- mmol) çözeltisi azotla temizlenir. Metilmagnezyum bromür (dietil eter içinde 3M, 1.01 mL, 3.03 mmol) damla damla ilave edilir ve karisim oda sicakliginda iki saat karistirilir. Karisim indirgenmis basinç altinda konsantre edilir ve kalinti, DCM ve doymus sulu sodyum bikarbonatla seyreltilir. Organik tabaka izole edilir ve sulu tabaka, DCM ile ekstrakte edilir.
Organik tabakalar birlestirilir ve doymus sulu sodyum klorürle yikanir. Sodyum sülfat üzerinde kurutulur, süzülür ve konsantre edilir süzüntü. Basliktaki bilesigi (160 mg; %53.69 verim) sunmak için DCM içinde %5-10 MeOH ile silika jel kolon kromatografisiyle saflastirilir. MS (in/z): . Örnek 71 Trifloroasetik asit (3 mL) içinde bir 2- [5-[[4-[3-(2-Piridil)- 1 -(2- mmol) çözeltisi 0°C”ye bir buz banyosu içinde sogutulur. Trietilsilan (l mL, 6.24 mmol) ilave edilir. Reaksiyon karisimi oda sicakliginda gece boyunca karistirilir. Kalinti konsantre edilir ve ters faz kromatografisiyle (Redisep Rf Gold High Performance C18 Ters Faz Kolon, ACN içinde %0- saflastirilir. ACN'yi gidermek için uygun parçalar konsantre edilir. Geri kalan sulu karisim, DCM ile ekstrakte edilir, organik tabaka izole edilir, ve sodyum sülfat üzerinde kurutulur. Basliktaki bilesigi (168 mg; %449 verim) sunmak için süzülür ve süzüntü indirgenmis basinç altinda konsantre edilir. MS (m/z): 389 N-[4-({l-(Dif10r0metil)-3-(tetrahidrofuran-3-il)- l H-pirazol-4-il} 0ksi)piridin-2- il]piridazin-3-amin, izomer 1 Basliktaki bilesik olarak birinci elute edici enantiomeri sunmak için N-[4-[1-(diflorometil)-3- tetrahidrofuran-3-il-p irazol-4-il]oksi-2-piridil]piridazin-3-aminin rasemik karisimi (Preparasyon 49) kiral kromatografiyle saflastirilir. MS (m/z): .
Saflastirma kosullari: CHIRALPAK® IC; Mobil Faz: karbon dioksit içinde %02 izopropil Asagidaki bilesik esas itibariyle Örnek 72”nin usulüyle hazirlanir. Alternaif saflastirma kosullari belirtilmektedir.
Kimyasal ad 2-(5- { [4-( { l-Siklopropil- 3-(tetrahidrofuran-3-il)- lH- irazol-4-il 73 i . p i }i 0ksi)piridin-2-il]amin0} piridin-2-il)propan-2-ol, 2-(5-{[4-({1-Si'klopr0pil- 3-(tetrahidroûiran-3-il)- 1 H-pirazo l-4- il}0ksi)piridin-2- il]amin0} piridin-2- il)pr0pan-2-ol, izomer 2 2-(4-{[4-({1-Sik10pr0pil- 3 -(tetrahidroiuran-3-il)- l H-pirazo l-4- il}0ksi)p iridin-2- il] amino}piridin-2- il)pr0pan-2-ol, izomer 1 2-(4- {[4-( { 1 -Siklopropil- 3-(tetrahidrofuran-3-il)- lH-pirazol-4- il}oksi)piridin-2- il] amino } piridin-2- il)pr0pan-2-ol, izomer 2 Fiziksel kosullar CHIRALCEL® OJ-H; Mobil F az: heptan içinde mL/dakika; UVW: 280 nm; Tutma süresi: 17.39 dakika CHIRALCEL® OJ-H; Mobil Faz: heptan içinde mL/dakika; UVW: 280 nm; Tutma süresi: 21.55 dakika CHIRALCEL® OJ-H; Mobil Faz: karbon dioksit 1 in e . izo to 1 amin 1 eren izo ro ano; Akis hizi: 70 g/dakika; UVW: 225 nm; Tutma süresi: 2.67 dakika CHIRALCEL® OJ-H; Mobil Faz: karbon dioksit MS içinde %02 izopropil amin (in/z): içeren %20 izopropanol; 422 Akis hizi: 70 g/dakika; (M+l) UVW: 225 nm; Tutma Örn. Fiziksel Kimyasal ad Yapi kosullar _ No. veriler süresi: 3.59 dakika Örnek 77-79 için X-isini Toz Kirinimi Toplama Prosedürü Kristalize katilarin XRD paternleri, 35 kV ve 50 mAida çalisan, bir CuKa kaynagi (7» = 1.54060 Ä) ve bir Vantec detektörüyle donatilmis bir Biuker D4 Endeavor X-isini toz asama boyutuyla ve 0.5 saniye/asamalik bir tarama hiziyla, ve 0.6 mm sapmayla, 5.28 sabit saçilma önleyiciyle, ve 9.5 mm detektör yariklariyla taranir. Kuru toz, bir kuartz numune tutucu üzerinde ambalajlanir ve bir lam kullanilarak bir pürüzsüz yüzey elde edilir. Kristal form kirinim paternleri ortam sicakliginda ve bagil nemlilikte toplanir. il)amin0] piridin-Z-il}propan-Z-ol, (2Z)-but-2-enedi0at (1 :1) ACN (2 mL) içinde 2-{4-[(4-{[l-siklopropil-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-lH-pirazol-4- rpmade karistirilirken tamamen çözündürülür. Maleik asit (48 mg, 1.20 esdegerleri, 80°Cide 1 mL ACN içinde) elde edilen çözeltiye ilave edilir. Karisim baslangiçta bulaniktir, fakat çabuk berrak bir çözelti haline gelir. Isitma ve karistirma durdurulur. Çözelti oda sicakligina sogutulur. Katiyi süspansiyon halinde tutmak için baska bir 2 mL ACN ilave edilir. Beyaz kati vakumla süzülerek izole edilir ve kati 15 dakika bir hava akimi altinda filtre üzerinde yerinde kurutulur. Basliktaki bilesigi (132 mg, %73.4 verim) sunmak için elde edilen kati, bir 65°C vakumlu firinda gece boyunca kurutulur. Bir mono tuz için olusturulan tuzda maleik asit iyonun teoretik yüzdesi %21.0”dir. Olusturulan tuzda maleik asit iyonun gerçek yüzdesini belirleyen HPLC ile karsit iyon analizi %17.2,dir. Karsit iyon analizi, bir mono tuzu belirtir. Örnek 775nin X-isini toz kirinimi Örnek 77”nin hazirlanan bir numunesi, asagida Tablo 137te açiklandigi gibi, kiriniin tepe noktalarina (2-teta degeri) sahip, ve özellikle 0.2 derecelik kirinim açilari için bir toleransla, kombinasyon halinde 9.6°,da tepe noktalarina sahip CuKa radyasyonu kullanilarak bir XRD Tablo 12: Örnek 77lnin X-isini toz kirinimi tepe noktalari Tepe noktasi Açi (°2-Teta) +/- 0.2° Bagil yogunluk (en yogun tepe noktasi %,si) 1 9.6 1000 2 12.5 88.2 3 17.5 74.4 4 16.9 55.8 12.9 54.0 6 20.1 45.9 7 21.5 44.1 8 19.2 36.4 9 20.9 35.5 23.5 32.0 Örnek 78 il)amin0]piridin-Z-il}propan-Z-ol, metansülfonat (1 : 1) rpm7de karistirilirken tamamen çözündürülür. Metansülfonik asit (21 uL, 1.24 esdegerleri) elde edilen çözeltiye ilave edilir. Isitma ve karistirma durdurulur. Çözelti oda sicakligina sogutulur. Katiyi süspansiyon halinde tutmak için baska bir 3 mL aseton ilave edilir. Beyaz kati vakumla süzülerek izole edilir ve kati, hava akimi altinda 15 dakika filtre üzerinde yerinde kurutulur. Basliktaki bilesigi (87 mg, %63.08 verim) sunmak için elde edilen kati bir 65°C vakumlu firinda gece boyunca kurutulur. Bir mono tuz için olusturulan tuzda metansülfonik asit iyonun teoretik yüzdesi %18.1,dir. Olusturulan tuzda metansülfonik asit iyonunun gerçek yüzdesini belirleyen HPLC ile karsit iyon analizi %16.2”dir. Karsit iyon analizi, bir mono tuzu belirtir. Örnek 789in X-ismi toz kirinimi Örnek 781in hazirlanan bir numunesi, asagida Tablo l4°te açiklandigi gibi kirinim tepe noktalarina (2-teta degeri) sahip, ve özellikle 0.2 derecelik kiriniin açilari için bir toleransla, 14.1°, 10.8°, ve 18.6°°den olusan gruptan seçilen bir veya daha fazla tepe noktasiyla kombinasyon halinde 7.0°°de tepe noktalarina sahip CuKa radyasyonu kullanilarak bir XRD Tablo 13: Örnek 78”in X-isini toz kirinimi tepe noktalari Tepe noktasi Açi (°2-Teta) +/- 0.2° Bagi] yogunluk (en yogun tepe noktasi %,si) 1 7.0 1000 2 14.1 93.2 3 10.8 73.6 4 18.6 66.1 15.9 61.4 Tepe noktasi Açi (OZ-Teta) +/- 0.2° Bagil yogunluk (en yogun tepe noktasi %“si) 6 19.7 60.7 7 5.4 49.2 8 7.9 49.1 9 4.5 48.1 17.8 47.6 il)amin0]piridin-2-il}propan-Z-ol 4-metilbenzensülf0nat (1:1) EtOAc (2 mL) içinde 2-{4-[(4-{[l-siklopropil-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-lH-pirazol-4- rpmSde karistirilirken tamamen çözündürülür. p-toluensülfonik asit monohidrat (1.23 esdegerleri, 80°C”de 1 mL EtOAc içinde) elde edilen çözeltiye ilave edilir. Karisim 80°C/ 1000 rpm”de 30 dakika bulamaç haline getirilir. Isi kesilir ve karisim, oda sicakligina sogurken 1000 rpm°de karistirmaya devam edilir. Elde edilen beyaz kati vakumla süzülerek izole edilir ve kati, hava akimi altinda filtre üzerinde yerinde 15 dakika kurutulur. Basliktaki bilesigi (159 mg, %93.40 verim) sunmak için elde edilen kati bir 65°C vakumlu firinda gece boyunca kurutulur. Bir mono tuz için olusturulan tuzda p-toluensülfonik asit iyonun teoretik yüzde %29.3”tür. Olusturulan tuzda p-toluensülfonik asit iyonun gerçek yüzdesini belirleyen HPLC ile karsit iyon analizi %28.3'tür. Karsit iyon analizi, bir mono tuzu belirtir. Örnek 793un X-isini toz kirinimi Örnek 79”un hazirlanan bir numunesi, asagida Tablo 15”te açiklandigi gibi kirinim tepe noktalarina (2-teta degeri) sahip, ve özellikle 02 derecelik kirinim açilari için bir toleransla, 19.7°, 18.4°, ve 22.0°,den olusan gruptan seçilen bir veya daha fazla tepe noktasiyla koinbinasyon halinde 17.8°”de tepe noktalarina sahip CuKa radyasyonu kullanilarak bir XRD Tablo 14: Örnek 79°un X-isini toz kirinimi tepe noktalari Tepe noktasi Açi (°2-Teta) +/- 0.2° Bagil yogunluk (en yogun tepe noktasi %”si) 1 17.8 100.0 2 19.7 78.0 3 18.4 65.8 4 22.0 53.0 20.3 50.5 6 10.1 48.0 7 16.4 46.5 8 11.5 24.6 9 7.4 14.2 7.8 13.1 TGFß yoluyla sinyal, çesitli endikasyonlarda kanser ve tümör ilerlemesiyle iliskilendirilmistir Growth Factor Rev 17:41-58). Tümörle veya tümör mikro-ortaminda stromayla üretilen TGFß ligandlarin, tümör ilerlemesine katkida bulanabildigi çesitli tipte kanser söz konusudur.
MATLylu siçan prostat kanser hücreleri (Steiner ve Barrack (1992) Mol. Endocrinol 6: 15-25) ve MCP-7 insan meme kanseri hücreleri (Arteaga, ve digerleri (1993) Cell Growth and Differ. 4:193-201), fare TGFßPi eksprese eden bir vektörle transfeksiyonda sonra daha tümörijenik ve metastatik hale gelir. TGF-ßl, insan prostat ve ileri derecede gastrik kanserde anjiyogenez, metastaz ve yetersiz prognozla iliskilendirilmistir (Wikstrom, P., ve digerleri kanserinde, yetersiz prognoz, yükseltilmis TGF-ß ile iliskilendirilmistir (Dickson, ve digerleri ( Cancer Res. tamoksifen tedavisinin basarisizligiyla iliskilendirilmistir (Thompson, ve digerleri (1991) Br. kanseri hücrelerinin büyümesini inhibe etmektedir (Arteaga, ve digerleri (1993) J. Clin. tedavidir. Latent TGFßl ile transfekte edilmis CHO hücreleri ayrica çiplak farelerde azalinis NK aktivitesi ve artmis tümör büyümesi gösterdi (Wallick, ve digerleri (1990) J. Exp. Med. baskilamaya neden olabilir. TGFß1”in yüksek plazma konsantrasyonlarinin, ileri derecede meme kanseri hastalari için yetersiz prognozu belirttigi gösterilmistir (Anscher, ve digerleri transplantasyondan önce yüksek dolasimda TGFß”si olan hastalar, hepatik veno-oklusif hastalik (%50,ye kadar bir mortalite oraniyla tüm hastalarin %15-%50°si) ve idiyopatik interstisyal pnömonit (tüin hastalarin %40-%60,i) için yüksek risktedir. Bu tespitlerin belirtisi l) TGFß,nin yükseltilmis plazma seviyelerinin, riskli hastalari tanimlamak için kullanilabilecegi ve 2) TGFß sinyalinin azaltilmasinin, meme kanseri hastalari için bu yaygin tedavilerin morbidite ve mortalitesini azaltabilecegidir.
Son zamandaki yayinlar ayrica TGFß sinyalinin, tümörlerin, kemoterapiler ve reseptör tirozin önemli olabilecegini ileri sürmüstür. Spesifik olarak, kolon kanserinde, bir spesifik gen ekspresyon imzasinin, yaygin baslangiç tedavilerine dirençli olan bir grup hastaya izole edildigi gösterilinistir. Bu tümör hücreleri, TGFß yolu, bir TGFBRI spesifik küçük molekül inhibitörüyle bloke edildiginde terapiye yeniden duyarlik kazanir (Huang, ve digerleri, (2012) Miyleodisplastik sendromlar (MDS), miyeloid bölümünde, hematopoietik sistem rahatsizliklaridir ve miyeloid hücrelerin etkisiz üretimiyle karakterize edilir. MDS, azalmis SMAD7 seviyeleriyle teinsil edilen TGFB yolunun degisikliklerine baglidir. SMAD7, TGFB aracili SMAD sinyalini inhibe etmek için fonksiyon gösteren bir inhibitör SMAD°dir ve TGFßRI ve TGFßRII ile, ligandla aktive olan sinyalin asagi akimidir. SMAD7'nin asiri ekspresyonunun, bu nedenle, MDS”de TGFß sinyalinin asiri-aktivasyonuna yol açtigi düsünülmektedir, ve bu fenotip, bir TGFßRl küçük molekül inhibitörüyle tedavi edilerek gliyoblastomda (GBM), TGFß ligand seviyeleri yükseltilir ve hastaligin ilerlemesiyle ilgilidir. bir antisens oligonükleotid terapötigi, AP1002, GBM hastalarin bir alt-kümesinde potansiyel olarak aktif oldugu gösterilmistir (Bogdahn ve digerleri, (2011). Curr Pharm Biotechnol). Melanomda, TGFß yol sinyali aktivasyonu ayrica BRAF ve MEK Birçok habis hücre, dönüstürücü büyüme faktörü-ß (TGF-ß), bir kuvvetli immünosüpresan salgilar, bu, TGFß üretiminin, konakçi immün takipten bir anlamli tümör kaçis mekanizmasini temsil edebilecegi ileri sürülmektedir (Flavell ve digerleri, (2010) Nat Rev konakçida bozulmus TGFß sinyaliyle bir lökosit alt-popülasyonunun yerlesmesi, tek basina veya bir veya daha fazla baska immünoterapiyle kombinasyon halinde, örnegin bir veya daha fazla PD-l inhibitör, örnegin nivolumab, pembrolizumab, PD-Ll inhbitörleri, kanser asilari, ve IMCgplOO gibi bi-spesifik immün baglantili moleküllerle kombinasyon halinde kanser immünoterapisi için bir potansiyel yol sunar. Lenfositlerle üretilen TGFß ligandi, tümör immün takibi antagonize etmek için klinik öncesinde gösterilmistir (Donkor ve digerleri, linmunity 35:123-134); bu eksenin klinik öncesinde bozulmasi, murin modellerde ve in vitro anti-tümör yarari sunmak için gösterilmistir (Zhong ve digerleri, (2010) Cancer Res 16:] 191- hayvan modeli, normalde ölümcül TGFB°yi asiri eksprese edici bir lenfoma tümörü, EL43ü hücrelerinde TGFß salgilamasinm asagi düzenlemesi, konakçida immünojenisitenin iyilestirilmesiyle sonuçlanir, diger yandan TGFß”ye T-hücresi duyarsizligi, hizlandirilmis farklilasma ve otoimmüniteyle sonuçlanir, bunlarin elementleri, bir tolerize edilmis konakçida kendi kendine-antijen-eksprese edici tümörlerle savasmak amaciyla gerekebilir.
TGFß'nin immünosüpresif etkileri ayrica bunlarin CD4/CD8 T hücre sayimlarini baz alan tahmin edilen immün yanittan daha düsük sekilde HIV hastalarinin bir alt-popülasyonunda edici antikor, kültürdeki etkiyi tersine çevirebilmekteydi, bu, TGFß sinyali inhibitörlerinin, HIV hastalarinin bu alt-kümesinde mevcut immün baskilamayi tersine çevirmede yarara sahip olabilecegini belirtmektedir.
Karsinojenezin en erken evreleri boyunca, TGFßl, bir kuvvetli tümör baskilayici olarak hareket edebilir ve bazi kemo-önleyici maddelerin etkilerine araci olabilir. Ancak, habis neoplazmalarin gelisimi ve ilerlemesi sirasinda belli bir noktada, tümör hücrelerinin, mikro- ortamda biyo-aktif TGFßinin görünümüyle parallel sekilde TGFß”ye bagli büyüme inhibisyonundan kaçtigi görülmektedir. TGFß”nin çift tümör baskilama/tümör promosyonu roller, keratinositlerde TGFß3yi asiri eksprese eden bir transjenik sistemde en açik sekilde aydinlatilmistir. Transjenikler, selim cilt lezyonlarinin olusumuna daha dirençliyken, transjeniklerde metastatik dönüsümünün hizi çarpici sekilde artmistir (Cui, ve digerleri ilerlemesinin, ilerleyen evreyle arttigi görülmektedir. Ana epitelyal kanserlerin birçogunda çalismalar, insan kanserleriyle TGFß”nin artmis üretiminin, tümör ilerlemesi sirasinda nispeten geç bir durum olarak meydana geldigini ileri sürmektedir. Ayrica, bu tümörle iliskili TGFß, seçici avantajla tümör hücreleri sunmaktadir ve tümör ilerlemesin, tesvik etmektedir.
Hücre/hücre ve hücre/stroma etkilesimleri üzerinde TGFß'nin etkileri, istila ve metastaz için daha büyük bir egilimle sonuçlanir. Tümörle iliskili TGFß, aktive edilmis lenfositlerin klonal yayilmasinin kuvvetli bir inhibitörü oldugundan, tümör hücrelerinin, immün takipten kaçmasina izin verebilir. TGFß”nin ayrica anjiostatin üretimini inhibe ettigi gösterilmistir.
Radyasyon terapisi ve kemoterapi gibi kanser terapötik yöntemleri, tümörde, aktive edilmis TGFß,nin üretimini baslatir, böylelikle TGFß büyüme inhibitörü etkilerine dirençli olan habis hücrelerin fazla büyümesi seçilir. Dolayisiyla, bu antikanser tedavileri, riski arttirir ve arttirilmis büyüme ve yayilabilirlikle tümörlerin gelisimini acele ettirir. Bu durumda, TGFß- aracili sinyal transdüksiyonu hedef alan maddeler, çok etkili bir terapötik strateji olabilir.
Tümör hücrelerinin TGFß'ye direncinin, radyasyon terapisi ve kemoterapinin sitotoksik etkilerinin çogunu etkisiz hale getirdigi ve stromada TGFITnin tedaviye bagli aktivasyonunun, mikro-ortami, tüinör ilerlemesine daha yardimci hale getirebildiginden ve fibroza yol açan doku hasarma katkida bulundugundan hatta zarar verici olabildigi gösterilmistir. TGFß sinyal transdüksiyon inhibitörlerinin gelisimi, tek basina ve baska terapilerle kombinasyon halinde ilerlemis kanser tedavisinden muhtemelen yararlaninaktadir.
Ilaveten, TGFß sinyalinin, karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaligi gibi fibrotik kosullarla ilgili oldugu bu sahada bilinmektedir. Bakiniz, örnegin, Ueha S, ve digerleri, 2012.
Front lmmunol. 3:71. Cellular and molecular mechanisms of chronic inflammation- A phase 1, single-dose study of &esolimumah an anti-TGF-ß antibody, in treatment-resistant primary focal segmental glomerulosclerosis; and Rosenbloom J, ve digerleri, 2010. Narrative review: fibrotic diseases: cellular and molecular mechanisms and novel therapies. Ann Intern Asagidaki analizler, örneklendirilmis bilesiklerin, hücresel seviyede bir biokimyasal analizde, ve bir hayvan modelinde TGFßR1”i inhibe ettigi gösterilmistir.
TGFßRl Aktivitesi icin Bivokimvasal Analiz Bunun amaci in vitro analizde, TGFßR1”I inhibe eden bilesikleri tanimlamaktir.
Protein Ekspresvonu ve Sailastirilmasi Asp7ye degistirilen pozisyon amino asitler 200-503'ü kodlayan nükleotid dizisi, N-terminal HIS tag ile PFASTBACTMl (lnvitrogen, Kat# 10360-014) vektörüne yerlestirilir. Bakulovirüs, BAC-TO-BAC® Bakulovirüs Ekspresyon Sistemi protokolüne göre olusturulur (lnvitrogen, Kat# 10359-016). 1.5 x 106 hücre/mLide Sf9 hücreleri, beher litre kültür için 15 mL Pl virüs kullanilarak enfekte edilir ve 28°C3de 48 saat inkübe edilir. Hücreler toplanir ve müteakip protein sailastirmasi için -80°C`de muhafaza edilir. Protein sailastirmasi 4°C”de yürütülür. 2L kültürden pelletler, %02 Triton X-100 ve Roche tam EDTA-içermeyen proteaz inhibitörü 5mM imidazol, %10 gliserol) süspansiyon halinde tutulur ve homojenlestirilir. Hücre lizatlari, 16,500 rpm`de 45 dakika bir Bechman JA-18 rotöründe santrifügasyonla berraklastirilir. Üst faz, 5 mL Ni-NTA metal afinite reçinesiyle (Qiagen) üç saat inkübe edilir.
Bir kolon üzerinde ambalajlanir ve tampon A ile yikanir. HIS-TGFßRl(200-503)(T204D) protein, tampon Aida 0-400 mM imidazol gradyaniyla elute edilir. Fraksiyonlar içeren HIS- kolonu (GE Healthcare Bioscience) üzerine yüklenir. Kolon, depolama tamponuyla (50 mM Tris-HCl, pH elute edilir. Fraksiyonlar içeren HIS- belirlenir. Protein bölüntülere ayrilir ve -80 °Cide inuhafaza edilir.
TR-F RET Analiz Kosullari Bilesikler, rekombinant His-TGFßRl(200-503)(T204D), ve Eu-anti-HIS saptama antikorlariyla (InVitrogen, Kat# PV5597) yari alan siyah plakalarda önceden-inkübe edilir.
Bilesik seri seyreltmeleri, DMSO içinde lmM stok test bilesiklerinden hazirlanir. 2 uM ila 0.1 nM arasinda degisen nihai bilesik konsantrasyonlariyla bir on noktali seyreltme egrisi elde etmek için stok çözeltisi DMSO Içinde 3-kat seri sekilde seyreltilir. Analizde nihai DMSO konsantrasyonu %4,tür. Reaksiyon, kinaz izleyici ilavesiyle baslatilir (Kinase Tracer üzerinde floresan okunur.
Bilesikle muamele edilen gruplarin yüzde inhibisyonu, asgari inhibisyon grubuna göre (tek basina DMSO, muamele edilmemis) hesaplanir. Mutlak IC50, bir 4-parametreli dogrusal olmayan lojistik denklem kullanilarak hesaplanir, burada mutlak IC50 = konsantrasyon, ActivityBase veri analizi yazilimi kullanilarak %50 inhibisyona neden olur. Bu analizlerin sonuçlari, örneklendirilen bilesiklerin, TGFßR1”in etkili inhibitörler oldugunu gösterir. Örnegin, örneklendirilen bilesiklerin hepsi, 1 uM7den az IC50 degerleri gösterir. Spesifik olarak, Örnek 1 için IC50, 0.027 uM”dir.
TGFßRl Aktivitesi için Hücre bazli Lusiferaz Raportör Analizi Bu analizin amaci, hücre bazli analizlerde SMAD 2,3-bagimli gen ekspresyonuyla seçici olarak etkilesiine giren bilesikleri tanimlamaktir, bu, bunlarin hücresel seviyede TGFBRISI inhibe ettigini gösterir.
Atesböcegi lusiferazi, TGFß stimülasyonuna cevaben bir SMAD 2,3”e yanit veren promotörden eksprese etmek için HEK düzenlenir. Bu tür bir hücre hatti, lentiviral parçaciklarla enfeksiyonla (SA Biosciences) ve selection puromisin direnci için seçimle olusturulabilir. HEK293_SMAD 2/3 hücreleri, %10 fetal bovin serum içeren OPTl-MEM® ortaininda 96 kuyucuklu plakalarda beher kuyucuk için15,000 hücrede analize hazir dondurulmus stoklardan plakalanir. After 72 saat sonra, ortam, %01 bovin serum albuinin içeren OPTI-MEM®”ye degistirilir. DMSO içinde test bilesikleri, 10 mM stok çözeltiler hazirlamak için hazirlanir. 20 uM ila 1 nM arasinda degisen nihai bilesik konsantrasyonlariyla bir on noktali seyreltme egrisini elde etmek için stok çözeltiler DMSO içinde 3-kat seri sekilde seyreltilir, analizde nihai DMSO konsantrasyonu %0.5°tir. Test bilesikleri ilave edilir ve bir saatlik bir dengelemeden sonra, TGFß ilave edilr (nihai konsantrasyon = 2 nM, R&D Systems). 24 saat sonra, liziz tamponu [Glo Liziz Tamponu (Kat #E266l)] ve lusiferaz reaktif maddesi çikarmak için her bir kuyucuga ilave edilir. Bir plaka okuyucu üzerinde luminesani okumak için sivi bölüntüler (80 uL) beyaz kati tabanli plakalara aktarilir (Emisyon filtresi: Luminesan 700, 1 saniye okuma). Bilesikle muamele edilen gruplarin yüzde inhibisyonu, asgari inhibisyon grubuna göre (tek basina DMSO, muamele edilmemis) hesaplanir. Her bir bilesik için nispi lCso, bir doz yanit çalismasindan hesaplanir ve %50 inhibisyonu elde etmek için gereken konsantrasyondur. Doz-yanit çalismalarindan olusturulan veriler, ActivityBase veri analizi yaziliini kullanilarak bir dört-parametreli lojistik denkleme uydurulur. Bu analizlerin sonuçlari, örneklendirilen bilesiklerin, TGFß ile uyarilmis HEK293_SMAD2/3 hücrelerinden lusiferaz raportör aktivitesinin etkili inhibitörleri oldugunu gösterir. Örnegin, örneklendirilen bilesiklerin hepsi, 1 uMaden az IC50 degerlerini gösterir. Spesifik olarak, Örnek 1 için IC50 Bu analizin amaci, bir test bilesiginin, bir EMT6-LM2 genetik olarak es hayvan modelinde tümörlerde pSMAD2 ekspresyonunu inhibe edebilme özelligini ölçmektir, diger bir deyisle, analiz, bir test bilesiginin, bir kati tümör hayvan modelinde TGFßRI sinyalini inhibe edebilme özelligini ölçer.
EMT6-LM2 Hücre Oligiimu EMT-6 hücreleri (ATCC, CRL-2755), immün kompetan BALB/cAnNHsd farelerin yanina (Harlan Laboritories) subkütanöz olarak (5 x 105/hayvan) implante edilir. Tümörler yaklasik olarak 3000 mm3 `e ulastiginda, hayvanlar, COZ asfiksazyonuyla öldürülür. Tümör tasiyan hayvanlardan akcigerler izole edilir ve yerlestirilir. Akeigerler, bir tekli hücre süspansiyonu olusturmak için yavas yavas homojenlestirilir. Hücreler, kültür ortaminda (IMDM, %10 PES) büyütülür ve EMT6-LM1 hücrelerini suninak için tümör hücreleri izole edilir. EMT-LM2 hücrelerini olusturmak için yukaridaki islem, implantasyon için EMT6-LM1 hücrelerinin kullanilmasiyla tekrarlanir.
Sailastirilmis fosfo HlS-SMAD2 gpSMADZI Tam uzunlukta insan SMAD2”yi kodlayan nükleotid dizisi (NM_005901.5) into PFASTBACHTATM (Invitrogen, Kat # 10584-027) vektörüne yerlestirilir, bu, HIS-SMAD2 proteinini eksprese etmek için bakulovirüs yapisiyla sonuçlanir. Asp”ye degistirilen pozisyon amino asitleri 148-503”ü kodlayan nükleotid dizi, PFASTBACHTATM (Invitrogen, Kat # 10584-027) vektörüne yerlestirilir, bu, HIS-TGFßRl(l48-503)(T204D) proteinini eksprese etmek için bakulovirüs yapisiyla sonuçlanir. Bakulovirüs, BAC-TO-BAC® Bakulovirüs Ekspresyon Sistemi (lnvitrogen) protokolüne gore olusturulur. Sf9 hücreleri, beher litre kültür için HIS- uMslik bir nihai konsantrasyona ilave edilir. Bir ilave üç saatlik inkübasyondan sonra, hücreler toplanir ve müteakip protein saflastirmasi için -80°C”de muhafaza edilir. Protein saflastirmasi 4°C3de, %0.l TRITON® X-lOO ve Roche tam EDTA-içermeyen proteaz NaCl, 2mM B-merkaptoetanol, 5 mM imidazol, %10 gliserol, içinde karistirilarak inkübasyonla ve homojenizasyonla 6 L kültürden liz ile dondurulmus hücre pelletleriyle yürütülür. Hücre lizatlari santrifügasyonla bir Bechman JA-18 rotoründe 45 dakika 16,500 rpmide berraklastirilir. Üst faz, 10 mL TALON metal afinite reçinesiyle tampon A ile yikanir. Reçine, bir kolon üzerinde ambalajlanir ve tampon A ile yikanir. HIS- SMAD2 proteini, tampon Alda bir 0-100 mM imidazol gradyaniyla elute edilir. Fosfo HIS- SMAD2 içeren fraksiyonlar toplanir ve 0.1 uM okadiak asit ve 5 mM EDTA ile takviye edilir. Protein konsantrasyonu, standart olarak BSA kullanilarak BioRad protein analiziyle belirlenir (BioRad DC Protein Analiz kiti #500-01 16). Protein bölüntülere ayrilir ve -80°C”de muhafaza edilir.
Canli Faz EMT6-LM2 hücreleri, %10 PES, 2 mM Glutamax ve 0.1 mM esansiyel olmayan amino asitlerle takviye edilen lscoves Modifiye Dulbecco Ortaminda (MDM) kültürlenir ve %5 C0; içinde 37°C3de inkübe edilir. Tripsinize edilir ve hücreler, kültürden izole edilir. Hücreler, Hank dengeli tuz çözeltisinde (HBSS) yeniden süspansiyon halinde tutulur, ardindan MATRIGEL® (lzl) ile karistirilir. Hücreler (5 x 105 /hayvan) farelerin arka yanlara (female BALB/c fareler, Harlan) subkütanöz olarak implante edilir. Bir kaliperle tümör hacmi ve vücut agirligi haftada iki kez ölçülür. Tümör hacmi, yaklasik olarak 200-250 mm3°ye ulastiktan sonra, hayvanlar randomize edilir ve vehikül kontrolü ve bilesikle tedavi gruplarina ayrilir. Bilesik (%1 hidroksietilselüloz (HEC) ve %025 TWEEN® 80 ve %005 Köpük önleyici içinde formüle edilir) ve vehikül kontrolü (%1 HEC ve %025 TWEEN® 80 ve 150 mg/kg°lik bir tekli dozun ardindan bir tekli zaman noktasinda (2 saat) test edilerek olusturulur. Bir süreç, fareler, bir tekli dozun ardindan 1 saat ve 16 saat arasinda çoklu zaman noktalarinda öldürülerek bir doz yanit çalismasindan hesaplanmis (usul asagida detaylandirilir) TED50 veya TEDgO dozda gerçeklestirilir.
Doku Islemi Tümör dokulari toplanir ve asagida açiklandigi gibi homojenlestirilir. Tümör dokulari (her biri ~100 mg), sivi azot içinde dondurulur ve bir havanla pulverize edilir. Pulverize edilmis doku, bir tüpe (Lysing Matrix A tüpü, MPBio # 6910-100) kuru buz üzerinde yerlestirilir ve bir liziz tamponunda (her biri (150 mM NaCl; 20 HM Tris, pH 7.5; 1 mM etilendiamintetraasetik asit (EDTA); 1 mM etilen glikol tetraasetik asit (EGTA); %1 TRITON® X-100; Proteaz lnhibitör kokteyli (Sigma P8340); Fosfataz Inhibitör Kokteyli ll (Sigma P bir Bi0101 FASTPREP® FP120 homojenlestirici (ayar 4.5) kullanilarak 25 saniye homojenlestirilir. Hücresel yiginti ve taneler santriiîigasyonla 14,000 x g”da 10 dakika 4°C7de pelletlenir. Lizat, yeni bir mikrofüj tüpüne aktarilir ve 14,000 x gide 10 dakika 4°Clde tekrar santriiüjlenir. Santrilüjlenmis lizat, bir dein kuyucuklu 96 kuyucuklu plakaya aktarilir ve buz üzerinde tutulur. Protein konsantrasyonu, asagidaki gibi bir BioRad protein analizi (BioRad DC Protein Analiz kit Sinin (20 uL), analiz için gereken her bir lmL kit reaktif maddesi A,ya ilave edilmesiyle hazirlanir. Bir protein standardinin 0.2 mg/mL ila 1.5 mg/mL proteininden 3-5 seyreltme hazirlanir ve bir standart egri olusturulur. 5 uL standartlar ve numuneler, bir temiz, kuru mikrotitre plakasina pipetlenir. 25 uL isleyen reaktif madde her bir kuyucuga ilave edilir. 200 uL reaktif madde B her bir kuyucuga ilave edilir ve 5 saniye çalkalanir. 15 dakika sonra, 750 nMade her bir kuyucugun absorbansi okunur. Her bir kuyucuk için protein seviyeleri, nuinune kuyucuklarinin absorbansinin, standart kuyucuklardan elde edilen standart egriyle kiyaslanmasiyla belirlenir. Tümör lizatlar, asagida açiklanan usul gibi ELISA ile pSMAD2 ve toplam SMAD2/3°ün analizi için preparasyonda liziz tamponuyla, 10 mg/mljye norinalize SMAD ELISA Tümör lizatlar, bagimsiz ELISA plakalari kullanilarak analiz edilir, burada bir plaka, toplam SMAD 2/3 seviyelerini belirlemek için kullanilir ve diger plaka, fosfo SMAD 2 seviyelerini belirlemek için kullanilir. Kaplama antikoru, her iki plaka için ayniyken, sekonder antikor, toplam SMAD 2/3 veya fosfo SMAD 2 için spesifiktir. Bu plakalara, topluca "ELISA plakalari" olarak ve ayri sekilde sirasiyla "Toplam ELISA plaka" veya "fosfo ELISA plaka" olarak atitta bulunulur. Kaplama antikoru 2.5 pg/mL7de BupH Karbonat-Bikarbonat BupH Karbonat-Bikarbonat) hazirlanir ve beher kuyucuk için 100 uL7de 96 kuyucuklu immünoplakalara (Thermo Scientific #439454) ilave edilir ve ELISA plakalari olusturmak için 4°C,de bir platform çalkalayici üzerinde gece boyunca inkübe edilir. Ardindan, ELISA plakalari yikama tamponuyla (tris tamponlu salin (TBS) içinde %05 TWEEN® 20, Sigma tamponla (1x TBS içinde %1 bovin serum albumin (BSA)) bir platform çalkalayici üzerinde iki saat oda sicakliginda bloke edilir. Yikama tamponuyla dört kez yikanir. Fosfo SMAD ELISA plakasina, beher kuyucuk için 100 uL tümör lizati veya vehikül lizati 10 mg/mlide uygun kuyucuklara ilave edilir. Toplam ELISA plakasina, beher kuyucuk için 98 uL liziz tamponu ve beher kuyucuk için 2 ul, 10 mg/ml tümör lizati veya vehikül lizati, uygun kuyucuklara (002 mg protein lizat nihai) ilave edilir. Bir standart egri ayrica saflastirilmis pSMAD2 kullanilarak her bir ELISA plakaya (fosfo ve her ikisinin toplami) ilave edilir. Gece boyunca inkübe edilir. ELISA plakalari, yikama tamponuyla dört kez tekrar yikanir. sekonder antikorlar (Millipore anti-fosfo SMAD2 tavsan monoklonal antikor #04-953; Millipore anti- SMAD2/3 tavsan poliklonal antikor #07-408) %1 BSA ile takviye edilmis liziz tamponunda 11500 seyreltmede hazirlanir ve beher kuyucuk için 100 pL uygun plakaya ilave edilir.
Plakalar oda sicakliginda iki ila üç saat inkübe edilir. yikama tamponuyla dört kez yikanir ve beher kuyucuk için 100 uL raportör antikor (anti-tavsan HRP, GE Healthcare #NAV934V, bloke edici tamponda l:l0,000 seyreltilir) plakalara ilave edilir. Bir saat oda sicakliginda inkübe edilir ve plakalar yikama tamponuyla bir nihai dört kez yikanir ve beher kuyucuk için 100 uL oda sicakliginda 3, 3', 5, 5'-tetrametilbenzidin (TMB; Surmodics/BioFX #TMBW- Durdurma çözeltisi (IN HZSO4) ilavesiyle durdurulur. Absorbans (0D) bir plaka okuyucu üzerinde 450 nmide okunur.
Vehikül grup için toplam SMAD (tSMAD) - fosfo SMAD (pSMAD) orani, pSMAD sinyalinin asgari inhibisyonunu (%0) belirlemek için kullanilir. Yüzde inhibisyonu, vehikül grubun asgari pSMAD inhibisyonuna göre bilesikle muamele edilen gruplar için hesaplanir.
TED50 ve TEDgo, SAS'ta (Versiyon 9.3, Cary, NC) NLIN prosedürü kullanilarak bir doz yanit çalismasindan (bu zaman noktasinda sirasiyla %50 ve %80 inhibisyonu elde etmek için gereken doz) hesaplanir. Bu analiz, Örnek llin, 1 dozdan 2 saat sonra 10.8 mg/kg°lik bir TED50 ve 24.1 ing/kgilik bir TEDgo degerine sahip oldugunu gösterir. TED50 dozunda süreç çalismasinda (ll pmk), Örnek 1, dozlamadan sonra bir saatte %48 inhibisyonu ve iki saatte saatte %71 inhibisyonu ve iki saatte %70 inhibisyonu gösterir.
Bu bulusun bilesikleri genellikle genis bir dozaj araliginda etkilidir. Örnegin, beher gün için dozajlar normalde yaklasik [-2000 mg,lik günlük aralik içerisinde yer alir. Tercihen bu tür dozlar, 10-1000 mgilik günlük aralik içerisinde yer alir. Daha tercih edilen haliyle, bu tür dozlar, 10-100 mg,lik günlük aralik içerisinde yer alir. Hatta daha tercih edilen haliyle bu tür dozlar, 10-80 mg”lik günlük aralik içerisinde yer alir. En tercih edilen haliyle bu tür dozlar, -50 mgllik günlük aralik içerisinde yer alir. Bazi örneklerde, yukarida belirtilen araliklarin alt sinirinin altinda dozaj seviyeleri fazlasiyla yeterli olabilir, diger yandan baska durumlarda, yine daha büyük dozlar kullanilabilir, ve dolayisiyla yukaridaki dozaj araliklarinin, bulusun kapsamini herhangi bir sekilde sinirlamasi amaçlanmamaktadir. Gerçekte uygulanan bilesik miktarinin, tedavi edilecek durum, seçilen uygulama yolu, uygulanan gerçek bilesik veya bilesikler, tek tek hasta yasi, agirligi ve yaniti, ve hastanin semptomlarinin ciddiyeti dahil olmak üzere, ilgili kosullar isiginda bir doktor tarafindan belirlenecegi anlasilacaktir.

Claims (4)

  1. ISTEMLER 1. Asagidaki formüle sahip bir bilesik veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzu Rl hidrojen, izopropil, dillorometil, difloroetil, veya siklopropildir; R2 etil, tert-butil, piridin-Z-il, tetrahidropiran-4-il, tetrahidrofuran-S-il, siklopropil, veya siklobutildir; ve R3 karbamoilfenil, piridin-2-il, (1 -hidroksi- 1 -metiletil)piridinil, l-metil-2-0kso-1H-piridin-4- il, l-metilpirazolil, pirazin-2-il, 2-met0ksipirimidin-4-il, l-metil-Z-okso-1H-pirimidin-4-il, piridazin-3-il, 6-klor0piridazin-3-il, 6-metilpiridazin-3-il, veya 6-metoksipiridazin-3-ildir.
  2. 2. Istem 1 ,e göre bilesik veya bunun farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzu olup, 2- {4- il)a1nin0]piridin-2-il} propan-Z-oldür.
  3. 3. Istem 1 veya 2°ye göre bilesik veya tuz olup, 2- {4-[(4- {[l-siklopropil-3-(tetrahidr0-2H- metilbenzensülfonattir.
  4. 4. Istem l-3°ün herhangi birine göre bilesik veya tuz olup, kristalize 2-{4-[(4-{['l-sik10pr0pil- 4-meti1benzensülfonattir. (26±0.2°) olusan gruptan seçilen bir veya daha fazla tepe noktasiyla 17 .8°,de bir tepe noktasi içeren X-isini toz kirinim paterni (Cu radyasyon, ?v1.54060 Â) ile karakterize edilen, kristalize 2- {4-[(4- {[l-siklopropil-3-(tetrahidr0-2H-piran-4-il)- lH-pirazol-4-il]0ksi} piridin- 2-il)amino]piridin-2-il}propan-Z-ol 4-metilbenzensülfonattir. 6. Istem 1-5”in herhangi birine göre bir bilesik veya tuz ve bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilen eksipiyan, tasiyici, veya seyreltici içeren farmasötik bir bilesim. 7. Istem l-5”in herhangi birine göre bir bilesik veya tuz olup, terapide kullanim içindir. 8. Istem l-5”in herhangi birine göre bir bilesik veya tuz olup, kanser tedavisinde kullanim 9. Istem 8'e göre kullanim için bir bilesik veya tuz olup, burada kanser, kolon kanseri, melanom, hepatosellüler karsinom, renal kanser, gliyoblastom, pankreatik kanser, miyelodisplastik sendrom, akciger kanseri, ve gastrik kanserden olusan gruptan seçilir. 10. Istem l-5iin herhangi birine göre bir bilesik veya tuz olup, fibroz tedavisinde kullanim 11. Istem lO,a göre kullanim için bir bilesik veya tuz olup, burada fibroz, karaciger fibrozu ve kronik böbrek hastaligindan olusan gruptan seçilir.
TR2018/16415T 2014-10-07 2015-09-30 Aminopiridiloksipirazol bileşikleri. TR201816415T4 (tr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462060724P 2014-10-07 2014-10-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201816415T4 true TR201816415T4 (tr) 2018-11-21

Family

ID=54266692

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/16415T TR201816415T4 (tr) 2014-10-07 2015-09-30 Aminopiridiloksipirazol bileşikleri.

Country Status (42)

Country Link
US (1) US9617243B2 (tr)
EP (1) EP3204377B1 (tr)
JP (1) JP6043894B2 (tr)
KR (1) KR101921847B1 (tr)
CN (1) CN106795139B (tr)
AP (1) AP2017009836A0 (tr)
AR (1) AR102003A1 (tr)
AU (1) AU2015328553C1 (tr)
BR (1) BR112017005453B1 (tr)
CA (1) CA2961262C (tr)
CL (1) CL2017000765A1 (tr)
CO (1) CO2017002233A2 (tr)
CR (1) CR20170072A (tr)
CY (1) CY1120903T1 (tr)
DK (1) DK3204377T3 (tr)
DO (1) DOP2017000090A (tr)
EA (1) EA031830B1 (tr)
EC (1) ECSP17021097A (tr)
ES (1) ES2700376T3 (tr)
GT (1) GT201700067A (tr)
HR (1) HRP20181797T1 (tr)
IL (1) IL250543B (tr)
JO (1) JO3336B1 (tr)
LT (1) LT3204377T (tr)
MA (1) MA41038B1 (tr)
MX (1) MX367360B (tr)
MY (1) MY190541A (tr)
NZ (1) NZ729800A (tr)
PE (1) PE20170662A1 (tr)
PH (1) PH12017500635A1 (tr)
PL (1) PL3204377T3 (tr)
PT (1) PT3204377T (tr)
RS (1) RS58094B1 (tr)
SG (1) SG11201702481UA (tr)
SI (1) SI3204377T1 (tr)
SV (1) SV2017005411A (tr)
TN (1) TN2017000046A1 (tr)
TR (1) TR201816415T4 (tr)
TW (1) TWI582083B (tr)
UA (1) UA118807C2 (tr)
WO (1) WO2016057278A1 (tr)
ZA (1) ZA201701175B (tr)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015089800A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Eli Lilly And Company Fluorophenyl pyrazol compounds
ES2813875T3 (es) 2014-01-01 2021-03-25 Medivation Tech Llc Compuestos y procedimientos de uso
JP6626885B2 (ja) * 2014-10-31 2019-12-25 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 新しいピリジニルオキシ及びフェニルオキシピラゾリル化合物
CA3038749A1 (en) 2016-09-30 2018-04-05 Eli Lilly And Company Use of 2-{4-[(4-{[1-cyclopropyl-3-tetrahydro-2h-pyran-4-yl)-1h-pyrazol-4-yl]oxy}pyridine-2-yl)amino]pyridin-2-yl}propan-2-ol in the treatment of cancer
JOP20190080A1 (ar) * 2016-10-14 2019-04-11 Bayer Pharma AG مركبات مشتقة من 6-(1h-بيرازول-1-يل) بيريميدين-4- أمين مستبدل واستخداماتها
JP2020512400A (ja) * 2017-03-23 2020-04-23 クラヴィウス ファーマシューティカルズ，エルエルシー ＴＧＦβの阻害のための三置換イミダゾールおよび治療方法
WO2019013790A1 (en) * 2017-07-12 2019-01-17 Curza Global, Llc ANTIMICROBIAL COMPOUNDS AND USES THEREOF
CN107540672A (zh) * 2017-10-10 2018-01-05 牡丹江医学院 一种治疗肝硬化的药物及其合成方法
CN107892687B (zh) * 2018-01-21 2018-08-24 广东莱恩医药研究院有限公司 一种2-乙酸酯咪唑类化合物及其在防治骨质疏松药物中的应用
CA3103771A1 (en) * 2018-06-18 2019-12-26 Janssen Pharmaceutica Nv 6-aminopyridin-3-yl pyrazoles as modulators of roryt
US20210309679A1 (en) 2018-07-23 2021-10-07 Guangzhou Othrotx Co., Ltd. Bisphosphonate drug conjugates
CA3103995A1 (en) 2018-07-26 2020-01-30 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Methods for treating diseases associated with abnormal acvr1 expression and acvr1 inhibitors for use in the same
EP3840748A4 (en) * 2018-08-22 2022-06-29 Clavius Pharmaceuticals, LLC Substituted imidazoles for the inhibition of tgf-beta and methods of treatment
JP2022504982A (ja) * 2018-10-18 2022-01-13 南京聖和薬業股▲ふん▼有限公司 ＴＧＦ－βＲ１阻害剤としての化合物及びその応用
WO2020088526A1 (zh) * 2018-10-31 2020-05-07 南京明德新药研发有限公司 作为TGF-βR1激酶抑制剂的双环吡唑类化合物
WO2020103817A1 (zh) * 2018-11-20 2020-05-28 南京圣和药业股份有限公司 TGF-βR1抑制剂及其应用
US20220054465A1 (en) * 2018-12-27 2022-02-24 Nexys Therapeutics, Inc. (pyridin-2-yl)amine derivatives as tgf-beta r1 (alk5) inhibitors for the treatment of cancer
CN113272281A (zh) * 2019-01-10 2021-08-17 大日本住友制药肿瘤公司 用于治疗骨髓增生异常综合征的alk5抑制剂
KR20210118891A (ko) 2019-01-24 2021-10-01 지앙수 아오사이캉 파마수티칼 씨오., 엘티디. TGF-β R1 키나아제 억제제로서의 5-(4-피리딜옥시)피라졸 화합물
CN113993859A (zh) 2019-06-25 2022-01-28 益方生物科技(上海)股份有限公司 杂环化合物、其制备方法及其使用方法
CN112694477B (zh) * 2019-10-22 2024-02-06 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 吡唑并环类化合物，包含其的药物组合物，其制备方法及其用途
WO2021129621A1 (zh) * 2019-12-23 2021-07-01 江苏先声药业有限公司 吡唑类化合物
CN111116565B (zh) * 2020-04-01 2020-07-14 中科利健制药(广州)有限公司 2-芳基-4-（4-吡唑氧基）吡啶类化合物、其制备方法、药物组合物与应用
CN111303135A (zh) * 2020-04-01 2020-06-19 中科利健制药(广州)有限公司 4-（4-吡唑氧基）喹啉类化合物、其制备方法、药物组合物与应用
WO2021204626A1 (en) 2020-04-06 2021-10-14 Almirall, S.A. Aryl and heteroaryl-carboxamide substituted heteroaryl compounds as tyk2 inhibitors
CN113698395B (zh) * 2020-05-22 2023-12-08 赛诺哈勃药业（成都）有限公司 转化生长因子受体拮抗剂、其制备方法和应用
WO2022017208A1 (zh) * 2020-07-23 2022-01-27 江苏奥赛康药业有限公司 作为TGF-βR1抑制剂的吡啶氧基连吡唑类化合物的盐型、晶型以及其药物组合物
WO2023182780A1 (ko) * 2022-03-22 2023-09-28 오토텔릭바이오 주식회사 티아졸 유도체 화합물 및 이의 용도

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1951939A (zh) 2001-05-24 2007-04-25 伊莱利利公司 作为药物的新的吡唑衍生物
UA80571C2 (en) 2002-11-22 2007-10-10 Lilly Co Eli Quinolinyl-pyrrolopyrazoles
GB0313915D0 (en) * 2003-06-16 2003-07-23 Smithkline Beecham Corp Compounds
WO2009022171A1 (en) 2007-08-13 2009-02-19 Astrazeneca Ab Pyridinyiioxy pyridines as alk5 inhibitors
US8080568B1 (en) 2010-06-29 2011-12-20 Ewha University - Industry Collaboration Foundation 2-pyridyl substituted imidazoles as therapeutic ALK5 and/or ALK4 inhibitors
AU2012240240A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
WO2013086397A1 (en) * 2011-12-08 2013-06-13 Array Biopharma Inc. Urea compounds as gka activators
WO2015089800A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Eli Lilly And Company Fluorophenyl pyrazol compounds

Also Published As

Publication number Publication date
ES2700376T3 (es) 2019-02-15
DOP2017000090A (es) 2017-04-30
WO2016057278A1 (en) 2016-04-14
ECSP17021097A (es) 2018-02-28
SI3204377T1 (sl) 2018-11-30
EA031830B1 (ru) 2019-02-28
TWI582083B (zh) 2017-05-11
KR101921847B1 (ko) 2018-11-23
EA201790476A1 (ru) 2017-08-31
SV2017005411A (es) 2017-04-21
IL250543B (en) 2020-06-30
CY1120903T1 (el) 2020-05-29
ZA201701175B (en) 2019-01-30
DK3204377T3 (en) 2018-11-26
BR112017005453B1 (pt) 2022-12-06
MX367360B (es) 2019-08-16
MA41038B1 (fr) 2018-10-31
KR20170045348A (ko) 2017-04-26
SG11201702481UA (en) 2017-04-27
EP3204377A1 (en) 2017-08-16
BR112017005453A8 (pt) 2018-04-24
AP2017009836A0 (en) 2017-03-31
CA2961262C (en) 2019-10-22
PL3204377T3 (pl) 2019-02-28
PH12017500635B1 (en) 2017-09-25
JO3336B1 (ar) 2019-03-13
RS58094B1 (sr) 2019-02-28
UA118807C2 (uk) 2019-03-11
US9617243B2 (en) 2017-04-11
AU2015328553B2 (en) 2018-04-12
CO2017002233A2 (es) 2017-05-31
AU2015328553C1 (en) 2018-11-15
MA41038A (fr) 2017-08-16
IL250543A0 (en) 2017-03-30
LT3204377T (lt) 2018-12-27
CN106795139B (zh) 2019-08-09
PH12017500635A1 (en) 2017-09-25
GT201700067A (es) 2019-10-10
TN2017000046A1 (en) 2018-07-04
CR20170072A (es) 2017-05-12
AU2015328553A1 (en) 2017-03-09
BR112017005453A2 (pt) 2017-12-12
HRP20181797T1 (hr) 2018-12-28
EP3204377B1 (en) 2018-09-26
US20160096823A1 (en) 2016-04-07
CA2961262A1 (en) 2016-04-14
JP2016535745A (ja) 2016-11-17
MY190541A (en) 2022-04-27
CL2017000765A1 (es) 2017-12-15
AR102003A1 (es) 2017-01-25
PT3204377T (pt) 2018-12-19
NZ729800A (en) 2018-07-27
JP6043894B2 (ja) 2016-12-14
TW201623282A (zh) 2016-07-01
PE20170662A1 (es) 2017-05-26
CN106795139A (zh) 2017-05-31
MX2017004457A (es) 2017-06-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201816415T4 (tr) Aminopiridiloksipirazol bileşikleri.
DK2970191T3 (en) PYRIDINE DERIVATIVES RIGHT (REARRANGED DURING TRANSFECTION) -KINASE INHIBITORS
AU2011251321B2 (en) Nitrogen-containing heterocyclic compound having kynurenine production inhibitory activity
KR102379517B1 (ko) 세린/트레오닌 키나아제 억제제
KR102007056B1 (ko) 과증식성 질환 치료시 Bub1 키나제 저해제로 사용하기 위한 치환된 벤질인다졸
RU2707953C2 (ru) Производное пиридона, имеющее тетрагидропиранилметильную группу
TW201900632A (zh) N-(氮雜芳基)環內醯胺-1-甲醯胺衍生物及其製備方法和應用
TW200904813A (en) Compounds
JP2015524448A (ja) アルキニルへテロ芳香環化合物及びその応用
CN112739690A (zh) 用作smarca2拮抗剂的吡啶-2-酮化合物
JP2013503194A (ja) Ｒａｆキナーゼを阻害するための１Ｈ−ピラゾロ［３，４−Ｂ］ピリジン化合物
WO2018214866A9 (zh) 一种氮杂芳基衍生物、其制备方法和在药学上的应用
TW202028195A (zh) 作為TGF-βR1抑制劑的化合物及其應用
CN112939966B (zh) 嘧啶衍生物、其制备及应用
CN116635390A (zh) 作为血清素1b受体调节剂的强效和选择性化合物
CN113164481A (zh) 环烷-1,3-二胺衍生物
CN115141202A (zh) 嘧啶并吡嗪酮化合物及其用途
TW201305153A (zh) 三唑並吡啶和三唑並吡嗪化合物及其組合物和應用