TH30801B - การผลิตและการใช้งานเอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวชิงแซคคาไรด์ที่เสถียรต่อความร้อน - Google Patents

Abstract

ได้เปิดเผยถึงเอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่เสถียรต่อความร้อนได้ชนิดใหม่ การ เตรียมและการใช้งานของมัน เอนไซม์นี้ได้มาจากเซลล์เพาะเลี้ยงของจุลซีพอย่างเช่น Sulfolobus acidocaldarius (ATCC 33909 และ ATCC 49426) และ Sulfolobus solfataricus (ATCC 35091 และ ATCC 35092)และสามารถสร้างนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหมู่ทางปลายเมื่อปล่อยให้ออกฤทธิ์ต่อสตาร์ซไฮโดร ไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงที่อุณหภูมิที่สูงกว่า 55 ํ ซ. กลูโคอะมิเลส และ 4-กลูโคสิ เดสจะให้ทรีฮาโลสได้โดยง่ายเมื่อปล่อยให้ออกฤทธิ์ต่อนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ พวกนอนรี ดิวซิงแซคคาไรด์และทรีฮาโลสนั้นมีประโยชน์เป็นอย่างมากในผลิตภัณฑ์อาหาร เครื่องสำ อาง และเภสัชภัณฑ์ สิทธิบัตรยา

Claims (6)

1.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทางปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อปล่อยให้ออกฤทธิ์ต่อสตาร์ชไฮโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ (partial starch) ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูกทำให้ไม่ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ ที่ประกอบรวม ด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่สามารถสร้างเอนไซม์ดังกล่าวในอาหารเพาะเลี้ยงและเก็บเอนไซม์ดังกล่าว จากเซลล์เพาะเลี้ยงที่ได้ 2. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่จุลชีพดังกล่าวเป็นสมาชิกที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบ ด้วยพวกที่อยู่ในสกุล Sulfolobus และมิวแทนท์ของมัน 3. กรรมวิธีสำหรับสร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ซึ่งมีโครงสร้างทรีอาโลสเป็นหน่วย ทางปลาย และประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลสและกลูโคส , ซึ่งประกอบรวมด้วย (a) ให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทางปลาย และประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อปล่อยให้ ออกฤทธฺ์ต่อสตาร์ชไอโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูกทำให้ไม่ ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ. ออกฤทธฺ์ต่อสารละลายที่มีสตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ ชนิดรีดิวซิงเป็นสับสเตรท เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ดังกล่าว และ (b) ทำสารละลายที่ได้ให้บริสุทธิ์เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว 4.กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่สตาร์ชไฮโโรไลเสท ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ดังกล่าวเป็นสตาร์ชไฮโดรเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงหนึ่งตัวหรือมากกว่าที่มีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอร์ไรเซชันอย่างน้อยเป็น 3 5.กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 โดยสารลละายที่ได้ในขั้นตอน (b) ได้รับการนำไปผ่านลงใน คอลลัมน์โครมาโตกราฟีโดยใช้เรซินแลกแคทไอออนที่่เป็นกรดแรง เพื่อเพิ่มส่วนประกอบของนอน รีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว 6. กรรมวิธีสำหรับเตรียมองค์ประกอบแซคาไรด์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมนอน รีิวซิงแซคาไรด์ตามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 และจากนั้นรวมนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ลงใน แซคคาไรด์อื่น ๆ 7. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบ แซคคาไรด์ตามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในอาหาร 8.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเครื่องสำอางที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบแซคคาไรด์ ตาามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในพาหะที่ยอมรับได้ทาง เครื่องสำอาง 9.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบแซคคาไรด์ ตามข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในพาหะที่ยอมรับได้ทางเภสัชกรรม 1 0. กรรมวิธีสำหรับเตรียมทรีฮาโลสที่ประกอบรวมด้วย (a) ให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทาง ปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อ ปล่อยให้ออกฤทธฺ์ต่อสตาร์ชไอโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูก ทำให้ไม่ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ. ออกฤทธฺ์ต่อสารละลายที่มีสตาร์ชไฮโดรไลเสท ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงเป็นสับสเตรท เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลสและกลูโคสะ (b) ให้กลูโคอะมิเลสหรือ - กลูโคสิเดสออกฤทธิ์ต่อนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่ได้เพื่อให้ได้ เป็นทรีฮาโลส และ (c) เก็บสารละลายที่ได้ที่มีฮาโลสร่วมสตาร์ชไฮโโรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ครบส่วน 1

1. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่สตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงดังกล่าว เป็นสมาชิกที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยสตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่มีดีกรีของ กลูโคสพอลิเมอไรเซชันอย่างน้อย 3 1

2. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ทรีฮาโลดังกล่าวเป็นสมาชิก ที่เลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วยผนึกทรีฮาโลชนิดไฮดรัส ผลึกทรีฮาโลสชนิดแอนไฮดรัส และของผสมของมัน 1

3. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่สารละลายที่ได้มีขั้นตอน (c) นั้นได้รับการนำ ไปผ่านลงในคอลัมน์โครมาโตกราฟีโดยใช้เรซินแลกแคทไอออนที่เป็นกรดชนิดแรง เพื่อเพิ่ม ส่วนประกอบของทรีอาโลส 1

4. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีฮาโลสตาม กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีฮาโลสลงในสารอาหาร 1

5.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเครื่องสำอางที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีฮาโลสตามกรรมวิธี ของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีฮาโลสลงในพาหะที่ยอมรับได้ทางเครื่องสำอาง 1

6.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีอาโลสตามกรรมวิธี ของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีอาโลสลงในพาหนะที่ยอมรับได้ทางภสัชกรรม