TH28359A

TH28359A - การผลิตและการใช้งานเอนไซม์ปลดปล่อยทรีฮาโลสที่ทน?ความร้อน

Info

Publication number: TH28359A
Application number: TH9501001489A
Authority: TH
Inventors: อิเคกามิ นายชูจิ; ซูกิโมโตะ นายโตชิยูกิ; มิยาเกะ นายโตชิโอะ; คูโบตะ นายมิชิโอะ
Original assignee: คาบูชิกิ ไกชา ฮายาชิบาระ เซยบุตสึ คากากุ เคนคิวโจ
Filing date: 1995-06-22
Publication date: 1998-04-10

Abstract

ได้เปิดเผยถีงเอนไซม์ทนความร้อนที่ปลดปล่อยทรีฮาโลสชนิดใหม่ การเตรียมและ การใช้งานของมัน เอนไซม์นี้ได้มาจากเซลล์เพาะเลี้ยงของจุลชีพอย่างเช่น Sulfolobus acidocaldarius (ATCC 33909 และ ATCC 49426) และ Sulfolobus solfataricus (ATCC 35091 และ ATCC 35092) และสามารถไฮโดรไลซ์พันธะ ระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮา โลสเป็นหน่วยทางปลายและมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซซันเป็น 3 หรือมากกว่าอย่างจำ เพาะ ทรีฮาโลสและองค์ประกอบที่มีมันอยู่นั้นมีประโยชน์เป็นอย่างมากในผลิตภัณฑ์อาหาร เครื่องสำอางค์และเภสัชกรรม

Claims

1. เอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลสที่ทำให้บริสุทธิ์แล้ว ซึ่งจะไฮโดรไรซ์อย่าง เจาะจงที่พันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลส และส่วนไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มี โครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 และซึ่งเอนไซม์สามารถจะออกฤทธิ์ต่อนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่อุณหภูมิสูงกว่า 55 องศา เซลเซียสได้ในขณะที่ยังคงสภาพการทำกิจกรรมไว้ได้

2. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดังกล่าวจะประกอบด้วยกลูโคส ที่เหลือหนึ่งตัวหรือมากกว่า

3. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งจะคงการออกฤทธิ์ของมันไว้ได้ถึงอุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียส เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 60 นาที

4. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งเป็นอนุพันธ์จากจุลชีพ

5. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 4 ซึ่งจุลชีพดังกล่าวคือสมาชิกหนึ่งตัวที่เลือกได้จาก กลุ่มที่ประกอบด้วยพวกที่อยู่ในจีนัส Sulfolobus และสายพันธุ์กลายของมัน

6. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งมีคุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างเจาะจงที่พันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วน ไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมี ระดับของกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 (2) น้ำหนักโมเลกุล 54,000 ถึง 64,000 ดาลตันเมื่อใช้โซเดียมโดเดซิซัลเฟตพอลิ อะคริลาไมด์เจลอีเลคโทรโฟเรซิล (SDS-PAGE) (3) จุดไอโซอีเลคทริค (pl) 5.6 ถึง 6.6 เมื่อใช้ไอโซอีเลคโทรโฟเรซิสโดยใช้แอม โฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม 75 องศาเซลเซียสเมื่อบ่มที่ pH 6.0 เป็นเวลา 30นาที (5) pH ที่เหมาะสม 5.5 ถึง 6.0 เมื่อบ่มที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่อความร้อนคงความเสถียรจนถึงที่อุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียส เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 60 นาที (7) ความเสถียรต่อ pH คงความเสถียรที่ pH ประมาณ 4.0 ถึง 9.5 เมื่อบ่มที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 16 ชั่วโมง

7. กรรมวิธีสำหรับเตรียมเอนไซม์ของข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งประกอบด้วยการเพาะ เลี้ยงจุลชีพสามารถสร้างเอนไซม์ดังกล่าวในอาหารเพาะเลี้ยง และเก็บเอนไซม์ดังกล่าวจากเซลล์ เพาะเลี้ยงที่ได้

8. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 7 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวเป็นสมาชิกหนึ่งตัวที่คัดเลือก จากกลุ่มที่ประกอบด้วยพวกที่อยู่ในจีนัส Sulfolbus และสายพันธุ์กลายของมัน

9. กรรมวิธีสำหรับเตรียมทรีฮาโลสที่ประกอบด้วยขั้นตอนของการปล่อยให้ เอนไซม์ของข้อถือสิทธิ 1 ออกฤทธิ์ต่อสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรี ฮาโลสเป็นหน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3

10. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 9 ที่ซึ่งจะปล่อยให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคา ไรด์ออกฤทธิ์ต่อสารละลายไฮโดรไลเสทบางส่วนของสตาร์ชชนิดรีดิวซิงหนึ่งชนิดหรือมาก กว่าร่วมกันกับเอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1

11. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 9 ที่ซึ่งทรีฮาโลสดังกล่าวคือสมาชิกหนึ่งตัวที่เลือกได้ จากกลุ่มที่ประกอบด้วยผลึกไฮดรัสทริฮาโลส ผลึกแอนไฮดรัสทรีฮาโลส และของผสมของสาร ดังกล่าว

12. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมแซคคาไรด์ที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลสและ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับแซคคาไรด์อื่นอย่างน้อยชนิดหนึ่ง

13. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรด์เซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับวัสดุเป็นอาหาร

14. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมเครื่องสำอางที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับตัวพาที่ยอมรับกันในทางเครื่องสำอาง

15. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมทางเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับตัวพาที่ยอมรับกันในทางเภสัชภัณฑ์