Claims (16)
1.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทางปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อปล่อยให้ออกฤทธิ์ต่อสตาร์ชไฮโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ (partial starch) ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูกทำให้ไม่ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ ที่ประกอบรวม ด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่สามารถสร้างเอนไซม์ดังกล่าวในอาหารเพาะเลี้ยงและเก็บเอนไซม์ดังกล่าว จากเซลล์เพาะเลี้ยงที่ได้1. A method for preparing a non-reducing saccharide-containing enzyme with a trehalose terminal unit, composed of trehalose and glucose, that does not require trehalose as a substrate, when allowed to act on reducing partial starch hydrolysates, where the purified enzyme is not inactivated at temperatures ranging from 55°C to 70°C. This method involves culturing microorganisms capable of producing such an enzyme in a culture medium and harvesting the enzyme from the resulting cell cultures.
2. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่จุลชีพดังกล่าวเป็นสมาชิกที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบ ด้วยพวกที่อยู่ในสกุล Sulfolobus และมิวแทนท์ของมัน2. Procedure of Claim 1, whereby the microorganism is a selected member of a group comprising those in the genus Sulfolobus and its mutants.
3. กรรมวิธีสำหรับสร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ซึ่งมีโครงสร้างทรีอาโลสเป็นหน่วย ทางปลาย และประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลสและกลูโคส , ซึ่งประกอบรวมด้วย (a) ให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทางปลาย และประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อปล่อยให้ ออกฤทธฺ์ต่อสตาร์ชไอโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูกทำให้ไม่ ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ. ออกฤทธฺ์ต่อสารละลายที่มีสตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ ชนิดรีดิวซิงเป็นสับสเตรท เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ดังกล่าว และ (b) ทำสารละลายที่ได้ให้บริสุทธิ์เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว3. A procedure for synthesizing a non-reducing saccharide with a trehalose terminal structure and composed of trehalose and glucose units, which includes (a) the activation of an enzyme that synthesizes a non-reducing saccharide with a trehalose terminal structure and composed of trehalose and glucose units without requiring trehalose as a substrate when allowed to act on an incomplete reducing starch hydrolysate, where the purified enzyme is not inactivated at temperatures in the range of 55°C - 70°C, to act on a solution containing an incomplete reducing starch hydrolysate as a substrate to obtain the aforementioned non-reducing saccharide, and (b) the purification of the resulting solution to obtain the aforementioned non-reducing saccharide.
4.กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่สตาร์ชไฮโโรไลเสท ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ดังกล่าวเป็นสตาร์ชไฮโดรเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงหนึ่งตัวหรือมากกว่าที่มีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอร์ไรเซชันอย่างน้อยเป็น 34. The procedure for claim 3, whereby the said incomplete reducing starch hydrolysate is one or more incomplete reducing starch hydrolysates with a glucose polymerization degree of at least 3.
5.กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 โดยสารลละายที่ได้ในขั้นตอน (b) ได้รับการนำไปผ่านลงใน คอลลัมน์โครมาโตกราฟีโดยใช้เรซินแลกแคทไอออนที่่เป็นกรดแรง เพื่อเพิ่มส่วนประกอบของนอน รีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว5. Procedure of Claim 3: The solution obtained in step (b) was passed through a column chromatography using a strong acidic lactation resin to increase the composition of the aforementioned non-reducing saccharide.
6. กรรมวิธีสำหรับเตรียมองค์ประกอบแซคาไรด์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมนอน รีิวซิงแซคาไรด์ตามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 3 และจากนั้นรวมนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ลงใน แซคคาไรด์อื่น ๆ6. Procedure for preparing saccharide compounds by preparing non-reducing saccharides according to the procedure of Patent 3 and then incorporating the non-reducing saccharides into other saccharides.
7. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบ แซคคาไรด์ตามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในอาหาร7. A procedure for preparing food products that includes the preparation of saccharide components according to the procedure of Patent 6 and the incorporation of the saccharide components into food.
8.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเครื่องสำอางที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบแซคคาไรด์ ตาามกรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในพาหะที่ยอมรับได้ทาง เครื่องสำอาง8. A procedure for preparing cosmetics in which the preparation of saccharide components is carried out according to the procedure of Patent 6, and then the saccharide components are incorporated into a cosmeticly acceptable carrier.
9.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมองค์ประกอบแซคคาไรด์ ตามข้อถือสิทธิที่ 6 และจากนั้นรวมองค์ประกอบแซคคาไรด์ลงในพาหะที่ยอมรับได้ทางเภสัชกรรม9. A procedure for preparing a pharmaceutical product incorporating the preparation of the saccharide components as per claim 6, and subsequently incorporating the saccharide components into a pharmaceutically acceptable carrier.
10. กรรมวิธีสำหรับเตรียมทรีฮาโลสที่ประกอบรวมด้วย (a) ให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลส เป็นหน่วยทาง ปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลส และกลูโคส โดยไม่ต้องการทรีฮาโลสเป็น ซับสเตรท เมื่อ ปล่อยให้ออกฤทธฺ์ต่อสตาร์ชไอโดรไลเสทที่ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่ซึ่งเอนไซม์ที่บริสุทธิ์นั้น ไม่ถูก ทำให้ไม่ออกฤทธิ์ที่อุณหภูมิในช่วง 55 ํ ซ. -70 ํ ซ. ออกฤทธฺ์ต่อสารละลายที่มีสตาร์ชไฮโดรไลเสท ไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงเป็นสับสเตรท เพื่อให้ได้นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและประกอบด้วยหน่วยทรีฮาโลสและกลูโคสะ (b) ให้กลูโคอะมิเลสหรือ - กลูโคสิเดสออกฤทธิ์ต่อนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่ได้เพื่อให้ได้ เป็นทรีฮาโลส และ (c) เก็บสารละลายที่ได้ที่มีฮาโลสร่วมสตาร์ชไฮโโรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ครบส่วน10. Procedure for the preparation of trehalose consisting of (a) an enzyme that synthesizes a non-reducing saccharide with a trehalose terminal unit structure, consisting of a trehalose and glucose unit, without requiring trehalose as a substrate, when allowed to act on an incomplete reducing starch hydrolysate, where the purified enzyme is not inactivated at temperatures in the range of 55°C - 70°C, to act on a solution containing an incomplete reducing starch hydrolysate as a substrate to obtain a non-reducing saccharide with a trehalose terminal unit structure, consisting of a trehalose and glucose unit; (b) glucoamylase or α-glucosidase to act on the obtained non-reducing saccharide to obtain trehalose; and (c) the resulting solution containing halose along with a complete incomplete reducing starch hydrolysate.
11. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่สตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิงดังกล่าว เป็นสมาชิกที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยสตาร์ชไฮโดรไลเสทไม่สมบูรณ์ชนิดรีดิวซิง ที่มีดีกรีของ กลูโคสพอลิเมอไรเซชันอย่างน้อย 311. Procedure of Claim 10, where the said incomplete reducing starch hydrolysate is a member selected from a group consisting of incomplete reducing starch hydrolysates with a glucose polymerization degree of at least 3.
12. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ทรีฮาโลดังกล่าวเป็นสมาชิก ที่เลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วยผนึกทรีฮาโลชนิดไฮดรัส ผลึกทรีฮาโลสชนิดแอนไฮดรัส และของผสมของมัน12. Procedure of Claim No. 10, where the said trehalose is a member selected from a group comprising ahydrous trehalose crystals, anhydrous trehalose crystals, and mixtures thereof.
13. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่สารละลายที่ได้มีขั้นตอน (c) นั้นได้รับการนำ ไปผ่านลงในคอลัมน์โครมาโตกราฟีโดยใช้เรซินแลกแคทไอออนที่เป็นกรดชนิดแรง เพื่อเพิ่ม ส่วนประกอบของทรีอาโลส13. The procedure of claim 10, whereby the solution obtained in step (c) is passed through a column chromatography using a strong acidic lactation resin to increase the trealose component.
14. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีฮาโลสตาม กรรมวิธีของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีฮาโลสลงในสารอาหาร14. A procedure for preparing food products that includes the preparation of trehalose according to the procedure of Patent 10 and then incorporating the trehalose into the nutrient.
15.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเครื่องสำอางที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีฮาโลสตามกรรมวิธี ของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีฮาโลสลงในพาหะที่ยอมรับได้ทางเครื่องสำอาง15. A procedure for preparing cosmetics in which trehalose is prepared according to the procedure of Patent 10 and then incorporated into a cosmeticly acceptable carrier.
16.กรรมวิธีสำหรับเตรียมเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบรวมด้วยการเตรียมทรีอาโลสตามกรรมวิธี ของข้อถือสิทธิที่ 10 และจากนั้นรวมทรีอาโลสลงในพาหนะที่ยอมรับได้ทางภสัชกรรม16. A procedure for preparing a pharmaceutical product incorporating the preparation of trealose according to the procedure of Patent 10, and then incorporating the trealose into a pharmaceutically acceptable vehicle.