ได้เปิดเผยถีงเอนไซม์ทนความร้อนที่ปลดปล่อยทรีฮาโลสชนิดใหม่ การเตรียมและ การใช้งานของมัน เอนไซม์นี้ได้มาจากเซลล์เพาะเลี้ยงของจุลชีพอย่างเช่น Sulfolobus acidocaldarius (ATCC 33909 และ ATCC 49426) และ Sulfolobus solfataricus (ATCC 35091 และ ATCC 35092) และสามารถไฮโดรไลซ์พันธะ ระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮา โลสเป็นหน่วยทางปลายและมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซซันเป็น 3 หรือมากกว่าอย่างจำ เพาะ ทรีฮาโลสและองค์ประกอบที่มีมันอยู่นั้นมีประโยชน์เป็นอย่างมากในผลิตภัณฑ์อาหาร เครื่องสำอางค์และเภสัชกรรมA novel heat-resistant enzyme releasing trehalose has been discovered, along with its preparation and applications. This enzyme was derived from cell cultures of microorganisms such as Sulfolobus acidocaldarius (ATCC 33909 and ATCC 49426) and Sulfolobus solfataricus (ATCC 35091 and ATCC 35092). It can hydrolyze the bond between the trehalose portion and the remaining glycosyl portion in non-reducing saccharides with trehalose as the terminal unit and a specific degree of glucose polymerization of 3 or more. Trehalose and its associated components are of great interest in food, cosmetic, and pharmaceutical products.
Claims (15)
1. เอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลสที่ทำให้บริสุทธิ์แล้ว ซึ่งจะไฮโดรไรซ์อย่าง เจาะจงที่พันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลส และส่วนไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มี โครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 และซึ่งเอนไซม์สามารถจะออกฤทธิ์ต่อนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่อุณหภูมิสูงกว่า 55 องศา เซลเซียสได้ในขณะที่ยังคงสภาพการทำกิจกรรมไว้ได้1. An enzyme that releases purified trehalose, specifically hydrolyzing the bond between the trehalose and glycosyl regions in non-reducing saccharides with trehalose as the terminal unit and at least three glucose polymerization levels, and which can act on non-reducing saccharides at temperatures above 55°C while maintaining its activity.2. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดังกล่าวจะประกอบด้วยกลูโคส ที่เหลือหนึ่งตัวหรือมากกว่า2. An enzyme according to claim 1 in which the glycosyl portion contains one or more remaining glucose molecules.3. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งจะคงการออกฤทธิ์ของมันไว้ได้ถึงอุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียส เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 60 นาที3. The enzyme under claim 1, which retains its activity up to 85°C when incubated at pH 7.0 for 60 minutes.4. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งเป็นอนุพันธ์จากจุลชีพ4. The enzyme under claim 1, which is a microbial derivative.5. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 4 ซึ่งจุลชีพดังกล่าวคือสมาชิกหนึ่งตัวที่เลือกได้จาก กลุ่มที่ประกอบด้วยพวกที่อยู่ในจีนัส Sulfolobus และสายพันธุ์กลายของมัน5. An enzyme according to claim 4, in which the microorganism is a selectable member from a group comprising those in the genus Sulfolobus and its mutant strains.6. เอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งมีคุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างเจาะจงที่พันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วน ไกลโคซิลที่เหลือในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมี ระดับของกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 (2) น้ำหนักโมเลกุล 54,000 ถึง 64,000 ดาลตันเมื่อใช้โซเดียมโดเดซิซัลเฟตพอลิ อะคริลาไมด์เจลอีเลคโทรโฟเรซิล (SDS-PAGE) (3) จุดไอโซอีเลคทริค (pl) 5.6 ถึง 6.6 เมื่อใช้ไอโซอีเลคโทรโฟเรซิสโดยใช้แอม โฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม 75 องศาเซลเซียสเมื่อบ่มที่ pH 6.0 เป็นเวลา 30นาที (5) pH ที่เหมาะสม 5.5 ถึง 6.0 เมื่อบ่มที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่อความร้อนคงความเสถียรจนถึงที่อุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียส เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 60 นาที (7) ความเสถียรต่อ pH คงความเสถียรที่ pH ประมาณ 4.0 ถึง 9.5 เมื่อบ่มที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 16 ชั่วโมง6. An enzyme according to claim 1 which has the following physicochemical properties: (1) activity: specifically hydrolyzes the bond between the trehalose portion and the remaining glycosyl portion in non-reducing saccharides with trehalose as the terminal unit structure and has a degree of glucose polymerization of at least 3; (2) molecular weight: 54,000 to 64,000 daltons when using sodium dodecisulfate polyhydride. (3) Isoelectric point (pl) 5.6 to 6.6 when using isoelectrophoresis with ampholite. (4) Optimal temperature 75 °C when incubated at pH 6.0 for 30 min. (5) Optimal pH 5.5 to 6.0 when incubated at 60 °C for 30 min. (6) Heat stability remains stable up to 85 °C when incubated at pH 7.0 for 60 min. (7) pH stability remains stable at pH approximately 4.0 to 9.5 when incubated at 25 °C for 16 hours.7. กรรมวิธีสำหรับเตรียมเอนไซม์ของข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งประกอบด้วยการเพาะ เลี้ยงจุลชีพสามารถสร้างเอนไซม์ดังกล่าวในอาหารเพาะเลี้ยง และเก็บเอนไซม์ดังกล่าวจากเซลล์ เพาะเลี้ยงที่ได้7. The procedure for preparing the enzyme of claim 1 consists of culturing microorganisms capable of producing the enzyme in a culture medium and harvesting the enzyme from the resulting cell cultures.8. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 7 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวเป็นสมาชิกหนึ่งตัวที่คัดเลือก จากกลุ่มที่ประกอบด้วยพวกที่อยู่ในจีนัส Sulfolbus และสายพันธุ์กลายของมัน8. Procedure of claim 7 in which such microorganism is a single selected member from a group consisting of those in the genus Sulfolbus and its mutant strains.9. กรรมวิธีสำหรับเตรียมทรีฮาโลสที่ประกอบด้วยขั้นตอนของการปล่อยให้ เอนไซม์ของข้อถือสิทธิ 1 ออกฤทธิ์ต่อสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรี ฮาโลสเป็นหน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 39. A procedure for preparing trehalose consisting of a step of allowing the enzyme of claim 1 to act on a solution containing a non-reducing saccharide with a trehalose structure as the terminal unit and with at least 3 glucose polymerization steps.10. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 9 ที่ซึ่งจะปล่อยให้เอนไซม์ที่สร้างนอนรีดิวซิงแซคคา ไรด์ออกฤทธิ์ต่อสารละลายไฮโดรไลเสทบางส่วนของสตาร์ชชนิดรีดิวซิงหนึ่งชนิดหรือมาก กว่าร่วมกันกับเอนไซม์ตามข้อถือสิทธิ 110. A procedure under claim 9 which allows the enzyme that produces non-reducing saccharides to act on a partial hydrolysate solution of one or more reducing starches in combination with the enzyme under claim 1.11. กรรมวิธีของข้อถือสิทธิ 9 ที่ซึ่งทรีฮาโลสดังกล่าวคือสมาชิกหนึ่งตัวที่เลือกได้ จากกลุ่มที่ประกอบด้วยผลึกไฮดรัสทริฮาโลส ผลึกแอนไฮดรัสทรีฮาโลส และของผสมของสาร ดังกล่าว11. The procedure of claim 9 where such trehalose is a single, selectable member from a group consisting of crystalline hydrous trehalose, crystalline anhydrous trehalose, and mixtures thereof.12. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมแซคคาไรด์ที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลสและ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับแซคคาไรด์อื่นอย่างน้อยชนิดหนึ่ง12. A procedure for preparing a saccharide mixture consisting of a) exposure of a solution containing a non-reducing saccharide with a trehalose-as-a-terminal structure and at least 3 glucose polymerization degrees to the enzyme according to claim 1 to produce trehalose, and b) incorporation of the trehalose obtained in step (a) with at least one other saccharide.13. กรรมวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์อาหารประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรด์เซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับวัสดุเป็นอาหาร13. The process for preparing the food product consists of a) contact of a solution containing a non-reducing saccharide with a trehalose-as-a-terminal structure and at least a 3-level glucose polymerization stage with the enzyme according to Patent 1 to produce trehalose, and b) incorporation of the trehalose obtained in step (a) into the food material.14. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมเครื่องสำอางที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับตัวพาที่ยอมรับกันในทางเครื่องสำอาง14. A procedure for preparing a cosmetic mixture consisting of a) contact of a solution containing a non-reducing saccharide with a trehalose-as-a-unit structure and at least 3 glucose polymerization levels with an enzyme according to Patent 1 to produce trehalose, and b) incorporation of the trehalose obtained in step (a) into a cosmeticly accepted carrier.15. กรรมวิธีสำหรับเตรียมสารผสมทางเภสัชภัณฑ์ที่ประกอบด้วย a) การสัมผัสสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ซึ่งมีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีระดับขั้นกลูโคสพอลิเมอไรเซซันอย่างน้อยเป็น 3 กับเอนไซม์ตามข้อถือ สิทธิ 1 เพื่อสร้างทรีฮาโลส และ b) การรวมทรีฮาโลสที่ได้ในขั้นตอน (a) เข้ากับตัวพาที่ยอมรับกันในทางเภสัชภัณฑ์15. A procedure for the preparation of a pharmaceutical mixture consisting of a) the exposure of a solution containing a non-reducing saccharide with a trehalose terminal unit and at least a 3-level glucose polymerization to the enzyme according to Patent 1 to produce trehalose, and b) the incorporation of the trehalose obtained in step (a) into a pharmaceutically accepted carrier.
TH9501001489A1995-06-22
Production and applications of heat-resistant trehalose-releasing enzymes?
TH9112B
(en)
THERMOSTABLE PULLULANASE AND PROCEDURES FOR PREPARING THEREOF AND USING THEREOF IN A PROCEDURE FOR SUPPLYING STARCH OR IN A PROCESS FOR PREPARING MALTOSE WITH HIGH PURITY