SU663329A3 - Способ определени изоэнзимов лактатдегидрогеназы - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к области медицины и может .быть иснользовано в качестве средства дл  раннего определени  патологических изменений в организме.

Известен способ определени  изоэнзимов лактатдегидрогеназы путем взаимодействи  в буферной среде лактата и никотинамидаденин-нуклеотида до пирувата 1. Однако известный способ не обеспечивает в 1сокой точности определени  изоэнзимов 4. .Целью изобретени   вл етс  повышение точности определени  изоэнзимов 4 и 5.

Эта цель достигаетс  тем, что взаимодействие ведут в буферной среде при значении рН в пределах от 6,0 до 6,5.

Кроме того, в качестве буферной среды примен ют раствор триэтаноламина и NaOH.

Определение лактатдегидрогепазы (ЛДГ) имеет больн.юе значение исследовании жидкостей тела. Если эти энзимы у здоровых людей задерживаютс  главным образом в ткан х то при патологическом росте ткани, при лейкемии и других заболеваний их обнаруживают в большой концентрации в сыворотке или другой жидкости тела (например , влагалиихной).

При исследовании сыворотки или плазмы исследуемую пробу при помощи буферного раствора триэтаноЛамин - NaOH довод т до значени  рН 6,3-6,4. При этих значени х рН изоэнзимы ШДГ 4 и 5 легко определ ютс . Наличие лактатдегидрогеназы 5  вл етс  показанием присутстви  карцином, поэтому точное и чувствительное определение может быть использовано дл  раннего определени х карцином.

При исследовании влагалищной жидкости , значение рН которой paESHO 4, провод т определение при помощи буферного раствора триэтаноламин - NaOH, рН устанавливают в пределах от 6,3 до 6,4.

Влагалишную жидкость исслед юг нри помощи тампонов или ленты, на которые нанос т следуюн 1ий состав, мл:

Триэтаноламин - NaOH-буфер рН7,0

Na-лактат (натриева  соль

D, Z - молочной кислоты) 67,5

Фенозимметосульфат0,1

Claims (2)

1. Н и к от и н а м и да де н и н динуклеотид 1,5 . Нитроголубойхлортетразол 0,5 Ввод т тампон во влагалище, при этом жидкость влагалищавступает в реакцию с изо эндйвдагли- -ЛДГ/ имеющимис  во влагаjiHl4f .npH чении рН 6,0-6,5, предпочтител )ко ..&,.;4. i . ,|ПрЧ У«тсуви /ЛДП feo влагалищной жид .-.кости пйдтвёрждаетс  тем, что спуст  5- 10 мин тампон окращиваетс  в синий цвет. Состав дл  проведени  исследовани  нанос т на носитель, например тампон, любым известным способом, затем высушивают и хран т его в светозащищенном месте до применени . Состав можно наносить также на хлопчатобумажную ленту в форме щнура. Тампоны с составом могут быть применены не только врачом, а кажда  женщина может провести исследование сама. Так окраишвание тампона в синий цвет после 15-ЗО-минутного пребывани  во влагалище , свидетельствует об опасноСтйТ1атОЛйГичёского изменени  и  вл етс  сигналом дл  посещени  врача. Дл  сохранени  тампона до посещени  врача, необходимо его дезинфицировать, это производ т путем погружени  испоттьзованного тампона в 20/о-ныйраствор парамида. Было проведено исследование на 100 здоровых женщинах и больных carinoma colli iteri, carcinoma corparis u carcinoma insiti. Тампон вводили на 1-30 мин. После его извлечени  были обнаружены следующие цветовые изменени : нет окраски - результат отрицательный у здоровых жен1цин; розова  окраска - у здоровых женщин ( в том числе и у беременных до 15 дней); светло-голуба  окраска с фиолетовыми точками - Диагноз «зона перерождени  ;, голуба  или син   окраска - карцин, 4tOсовпадает с результатом патологического исследовани . Определение in vitro, например, сыворотки или плазмы провод т в буферной среде раствора триэтаноламина и NaOH при знач%нии рН в пределах от 6,0 до 6,5. Пример 1. Гигиенические тампоны плотно до 2-х раз обертывают клеющей лентой :U финoй 1. см. Оболочку тампона снимают С противоположной стороны, на которой находитс  выт жна  нитка. С пробирок сби- . ваюг дно, в образовавщуюс  трубку ввод т тампон таким образом, чтобы открытый с одной стороны тампон закрывал конец трубки . Выт жную нитку прикрепл ют с другой стороны.при помощи пластыр  или клейкой ленты. Трубку со сторон сн той оболочки опускают в раствор, тампон впитывает 1,0 мл раствора. Приготовленный таким образом тампон сущат вымораживанием. Высушенные тампоны удал ют из стекл нной трубки и хран т в темноте в светонепроницаемой бумаге или пленке или в цветной бу.маге 6 защищенном от света месте. Пример 2. При помощи щприца ввод т 2,0мл раствора состава дл  проведени  исследований в тампон. Иглу щприца прокалывают через оболочку и, ме/членновпрыскива , провод т иглу в продольном направлении ко второму концу тампона, этим достигаетс  равномерна  пропитка тампона. Затем тампоны сущат и замораживают. Предлагаемый способ обеспечивает возможность быстрого и точного определени  изоэнзимов лактатдегидрогеназы, что позволит быстро вы вить патологические измене- ни  в организме. Формула изобретени  1.Способ определени  изоэнзимов лактатдегидрогеназы путем взаимодействи  в буферной среде лактата и никотинамидадениннуклеотиода до пирувата, и вы влениТО изОЭнзимов по по влению синего окрашивани , отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности определени  изоэнзимов 4 и 5, взаимодействие ведут в буферной среде при значений рН в пределах от 6,0 до 6,5.
2. 2.Способ по п. 1, отличающийс  тем, что в качестве буферной среды примен ют раствор три.этаноламина и ЫаОП. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе I. Biochemica Biophisyca Acta 1968, v 159 h2, pp. 236-244.