NO144929B - Fremgangsmaate til felles bestemmelse av isoenzymer av laktatdehydrogenase. - Google Patents
Fremgangsmaate til felles bestemmelse av isoenzymer av laktatdehydrogenase. Download PDFInfo
- Publication number
- NO144929B NO144929B NO753119A NO753119A NO144929B NO 144929 B NO144929 B NO 144929B NO 753119 A NO753119 A NO 753119A NO 753119 A NO753119 A NO 753119A NO 144929 B NO144929 B NO 144929B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- tampon
- ldh
- reagent
- lactate
- isoenzymes
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 title description 22
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 title description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 31
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 claims description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 21
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 15
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims description 15
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims description 13
- RXGJTUSBYWCRBK-UHFFFAOYSA-M 5-methylphenazinium methyl sulfate Chemical compound COS([O-])(=O)=O.C1=CC=C2[N+](C)=C(C=CC=C3)C3=NC2=C1 RXGJTUSBYWCRBK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 12
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 7
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 7
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FSVCQIDHPKZJSO-UHFFFAOYSA-L nitro blue tetrazolium dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 FSVCQIDHPKZJSO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 5
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- MNIQECRMTVGZBM-UHFFFAOYSA-N 3-(1-methylpyrrolidin-2-yl)pyridine;7h-purin-6-amine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1NC=N2.CN1CCCC1C1=CC=CN=C1 MNIQECRMTVGZBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 229960000448 lactic acid Drugs 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 12
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 8
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 4
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010088350 Lactate Dehydrogenase 5 Proteins 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 210000005002 female reproductive tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088351 lactate dehydrogenase 4 Proteins 0.000 description 2
- 230000037447 lactate metabolism Effects 0.000 description 2
- 239000012464 large buffer Substances 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O NAD(+) Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-O 0.000 description 1
- 244000208734 Pisonia aculeata Species 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 210000004392 genitalia Anatomy 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 201000004933 in situ carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 108010087599 lactate dehydrogenase 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010088076 lactate dehydrogenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N nitro blue tetrazolium(2+) Chemical compound COC1=CC(C=2C=C(OC)C(=CC=2)[N+]=2N(N=C(N=2)C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(=CC=2)[N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JPXMTWWFLBLUCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S604/00—Surgery
- Y10S604/904—Tampons
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte til felles bestemmelse av .isoenzymer av laktatdehydrogenase (LDH) ved hjelp av omsetning av laktat og nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD<+>) til pyruvat.
Det er kjent at laktatdehydrogenase, vanligvis kalt LDH, opptrer i fem isoformer. Ved aktivitetsbestemmel-sen av enkelte isoenzymer er forskjellige substrat- og pH-optima viktige trekk, som ennå ikke-var helt kjent for de enkelte isoenzymer.
Til bestemmelse av alle isoenzymer har man hit-
til enten adskilt isoenzymene elektroforetisk (sammenlign f.eks. "Die Isoenzyme der Lactatdehydrogenase", Reihe Bio-chemie und Klinik av S.L. Kowalewski, utgitt i G. Thieme Verlag, Stuttgart, 1972, side 29) eller holdt det samlede
LDH i oppløsning, bundet LDH-2 til -5 og bestemt ved hyppigst forekommende LDH-1. En oversikt over de tidligere standards-arbeidsmetodene befinner seg f.eks. i boken "Enzymatische Analyse", bind I, Verlag Chemie, Weinheim 19 70, side 557. Ifølge denne foreskrives for omsetningen av laktat til
pyruvat et pH-optimum mellom 8,3 og 9,9. Faktisk anvendes ved alle. kjente bestemmelsesmetoder et basisk eller maksi-
malt noe nøytralt pH-område for best mulig å bestemme isoenzymene .
Det er fastslått av Lamprecht et al. (Cardio-
logy 56: 371-375 (1971/1972) og Fortschritte der klinischen Chemie, Enzyme und Hormone, Verlag der Wiener medizinischen Akademie 1972, side 277-283), at enkelte isoenzymer kan gå
over i hverandre ved pH-endring, altså at det finner sted en konformasjonsendring.
Til grunn for oppfinnelsen ligger den oppgave
å unngå de ved den kjente fremgangsmåte opptredende komp-liserte arbeidsganger med skilling og å unngå de alltid opptredende unøyaktigheter i den samlede måling og å sikre en optimal felles bestemmelse av isoenzymene 4 og 5 av LDH.
Videre skal oppfinnelsen tilveiebringe en reagenskombina-
sjon for fremgangsmåten.
Det ble fastslått at en senkning av pH-verdien under nøytralpunktet ved den i og for seg kjente omsetning av laktat og NAD til pyruvat fører til en optimal felles bestemmelse av isoenzymene 4 og 5 av LDH. Herved er det fremfor alt interessant at bare ved målinger i sur pH bestemmes fullstendig LDH isoenzymene 4 og 5.
Oppfinnelsen vedrører følgelig en fremgangsmåte til felles bestemmelse av 'isoenzymene 4 og 5 av LDH ved omsetning av laktat og nikotinamidadenin-dinukleotid koblet med omsetningen av NADH med fenazinmetosulfat, som er karakterisert ved at omsetningen gjennomføres ved pH 6,0-6,5. For omsetningen er det tilstrekkelig med en liten væskemengde, den gjennomføres imidlertid hensiktsmessig i flytende medium.
"Det ble nemlig videre fastslått at optimum av den felles bestemmelse av flere isoenzymer også er puffer-avhengige. For de fleste puffere ligger dette optimum ved pH 6-6,5. En sur pH-verdi egner seg imidlertid vesentlig bedre til felles bestemmelse av flere isoenzymer. En pH fra 6,3-6,4- egner seg spesielt til felles bestemmelse av LDH 4 og 5, som eksempelvis kan opptre i vaginalvæsken.
Fortrinnsvis stilles det beredt i omsetnings-r mediet en stor pufferkapasitet. Dette har den fordel at også ved undersøkelse av kroppsvæsker med pH-verdier som avviker sterkt fra pH 6 hverken under- eller overskrider den optimale pH ved omsetningen.
Omsetningen foregår på i og for seg kjent
måte ved en temperatur på ca. 37°C. Derved innstilles koenzymmengden således at den var optimalt tilstrekkelig for alle foreliggende isoenzymer, hvilket kan bestemmes under hensyntagen til følgende angivelser med få rutine-forsøk.
Bestemmelsen av LDH er av stor viktighet, spesielt ved undersøkelsen av kroppsvæsker. Mens disse isoenzymer hos friske mennesker overveiende fastholdes i vevene, finner man dem ved anormal vevvekst eller ved leukemi eller andre syk-dommer i merkbar konsentrasjon i serum og andre kroppsvæsker. Spesielt kan man fastslå om LDH ved patologiske endringer i den nedre kvinnelige genitalkanal er inneholdt i vaginalvæsken.
Bestemmelsemetoden ifølge oppfinnelsen er anvend-bar for alle kroppsvæsker. Innstillingen av pH-verdien av prøven som skal undersøkes avhenger av prøvens egen-pH-verdi.
I ethvert tilfelle bør det for selve omsetningen foreligge
en pH fra 6,3-6,4, spesielt ca. 6,3. I overensstemmelse med dette må reagenssammensetning innstilles for gjennomføring av bestemmelsen.
Mens ved standardmetoden (sammenlign Enzymatische Analyse, bind I a.a.O.) er foreskrevet en pH-optimum mellom 8,3 og 8,9, avvikes ifølge oppfinnelsen bevisst fra dette pH-område. Grunnen for fastleggelse av ovennevnte basiske pH-område er å søke deri, at ved reaksjonen
Laktat + NAD+ i£S pyruvat + NADH + H+
oppstår et proton i støkiometrisk forhold til laktatomset-. ningen. For å drive denne likevekt av LDH til høyre arbeider man i alkalisk område.
Ifølge oppfinnelsen derimot, f.eks. ved bestemmelse i serum eller plasma pufres prøven som skal undersøkes med trietanolamin-NaOH til pH 6,3-6,4 og også den til under-søkelse anvendte prøvekombinasjon (prøvereagens) innstilles på denne verdi. Grovt sajt og for overslagsbestemmelser innstilles en pH fra 6,0-6,5 og pufres således at ved selve bestemmelsen foreligger en pH-verdi på 6,3-6,4. Ved serum-albumin tilsettes på i og for seg kjent måte glutation.
Laktatdehydrogenases isoenzymer kan bestemmes optimalt ved pH 6,3-6,4, når det sørges for at reaksjons-likevekten ifølge formel
Laktat + NAD<+> ■ LDH pyruvat + NADH + H+
forskyves mot høyre ved følgereaksjoner. For dette formål tilsettes fenazinmetosulfat, som igjen alltid oksyderer ko-enzymet NADH. Målingen mellom pH 6,0 og 6,5 byr for første gang den mulighet fullstendig å bestemme LDH 5. Dette er fremfor alt interessant fordi nærvær av LDH 5 er et indisium for nærvær av karzinomer og således det eksakte og følsomme middel er et middel til tidlig påvisning av karzinomer.
Ved visse kroppsvæsker er imidlertid ovennevnte forhold annerledes fordi de har en utpreget egen-pH-verdi som avviker fra pH 6,3-6,4. En slik kroppsvæske er spesielt vaginalvæsken, hvis pH ligger ved ca. 4. Her må ved hjelp av anvendte reagens den optimale pH-verdi ved omsetningen innstilles, hvilket betyr at' reagenset har en høyere pH-verdi som deretter ved hjelp av vaginalvæskens pH-verdi forskyves til pH 6-6,5.
En- prøvekombinasjon eller et reagens består
av laktat, nikotinamid-adenin-dinukleotid (NAD<+>) og et tetrazoniumsalt for synliggjøring av den enzymatiske NAD-reaksjon, som pufres til en slik pH-verdi, at ved den egentlige omsetning i væsken som skal undersøkes foreligger en pufferspesifikk pH-verdi fra 6,3-6,4, f.eks. for trietanolamin-NaOH-puffer eller andre surt innstillbare pufre, med unntak av fosfatpuffer. Ved anvendelse av et tørrpreparat må således denne pH foreligge etter oppløsning av dette. En pH på 6,0-6,5 er størrelsesordenmessig egnet.
For spesialtilfellet undersøkelse av en vaginalvæske som selv ikke er forandret i sin opprinnelige pH-verdi, egner det seg spesielt anvendelsen av bestemmelse med trietanolamin-NaOH-puffer, idet reagenset innstilles på pH 7,0, mens ved' til pH 6,3-6,4 innstilte undersøkelses-prøver også reagenset er innstilt til denne verdi.
Oppfinnelsen kan anvendes på spesialtilfellet av undersøkelse av vaginalvæske i vagina ved hjelp av et prøvemateriale til å fastslå en eventuell patologisk endring i den nedre kvinnelige kjønnskanal, idet prøvekombinasjonen respektivt reagenset er påført på egnede bærere, spesielt en
<>>■
tampong, men også f.eks. prøvestrimler og ved inndypning i vagina bevirkes reaksjonen med det i vaginaen tilstedeværende LDH-isoenzym ved pH 6,0-6,5, spesielt 6,3-6,4.
Prøvekombinasjonen eller reagenset består av en oppløsning av følgende sammensetning:
Denne prøvekombinasjon eller reagens blir lett rystet, påført på en egnet bærer, spesielt en tampong, og denne oppbevart lysbeskyttet til den skal anvendes.
Nærvær av LDH i vaginalvæsken påvises ved at etter ca. 5-10 minutter antar tampongen en blå farge. Det finner sted følgende reaksjonsforløp:
1. Laktat + NAD<+> - DH. <*> pyruvat + NADH + H+ ;2. NADH + fenazinmetosulfat + H+ > ;NAD<+> + red. fenazinmetosulfat ;3. red. fenazinmetosulf at + nitro-blå-tetrazoliumklorid—'■—> formazan + fenazinmetosulfat... ;Da den annen og også den tredje til laktatomsetningen koplede reaksjon trekker fra det dannede reduserte koenzym likeledes som første reaksjon, dvs. likevekten av laktatomsetningen forskyves derved ennu sterkere mot høyre, forløper ved avpufring av prøveblandingen til pH 7,0 etter innlegg av tampongen ved den faktiske omsetning ved en pH rundt 6,0, spesielt 6,3-6,4. Derved bestemmes optimalt isoenzymene, LDH-4 og LDH-5, som kan foreligge ved abnormale endringer av vaginalvæsken. ;Ved prøvekombinasjonen eller reagenset som skal anvendes i vagina må det velges en puffer som er stabil og vevsholdbar. Hertil egner det seg spesielt godt trietanolamin-NaOH-puffer. ;Prøvekombinasjonen eller reagenset kan påføres på den anvendte bærer, spesielt en tampong, på en hvilken ;som helst ønskelig måte. Det er kjent at omgangen med slike prøvekombinasjoner eller reagenser må foregå lysbeskyttet og den med prøvekombinasjonen eller reagenset utstyrte bærer oppbevares best mulig under lysutelukkelse til den kommer til anvendelse. To fordelaktige metoder for innføring av prøve-kombinasjonen eller reagenset i en tampong er en injisering av ca. 2 ml av den foretrukne prøvekombinasjonen eller reagens eller impregnering av en tampongende i en lengde på ca. 3/4 cm med likeledes ca. 2 ml prøvekombinasjon eller reagens og den etterfølgende tørkning, spesielt frysetørkning av tampongen. Prøvekombinasjonen eller reagenset kan imidlertid også eksempelvis bare påføres på en tilbaketrekningssnor, som senere ved behov lett er å fjerne fra tampongen. Meget gunstig er også påføringen av prøvekombinasjonen eller reagenset på et bånd- eller kordellformet bomullsprodukt, som innsettes i tampongen. ;Da det ved anvendelsen på hurtigbestemmelse av en patologisk endring i den nedre kvinnelige' kjønnskanal ved innføring i vagina selvsagt ikke er kjent, hvor meget vaginalvæske som er tilstede og mengden svinger fra tilfellet til tilfellet likeledes som vaginalvæskens mulige pH-verdi, må det foreskrives en stor pufferkapasitet i prøvekombina-sjonen eller reagenset for at det ved den egentlige bestemmelse på reaksjonsstedet overholdes en pH-verdi fra 6-6,5, spesielt 6,3-6,4. Da prøvekapasiteten av den i tilbaketrekk-snoren foreliggende prøvekombinasjon eller reagens herved ;i praksis ofte ikke er tilstrekkelig, er det hensiktsmessig i dette tilfellet å anbringe en større mengde pufferstoff i tampongen, således at det er sikret en tilstrekkelig pufring i ethvert fall ved den til tampongen nærmestliggende del av tilbaketrekningssnoren. ;Slike med prøvekombinasjoner eller reagenser utstyrte bærere kan ikke bare anvendes av legen, men enhver kvinne kan foreta anvendelsen selv. En blåfarvning etter 15-30 minutters opphold av tampongen i vagina viser faren for en patologisk endring og er et varsel om å oppsøke lege. ;Skal imidlertid den benyttede tampong eller tilbaketrekningssnoren eller tilbaketrekningskordellen, f.eks. aktiveres, hvilket spesielt kan være tilfelle ved anvendelse av lege eller når pasienten ønsker å sende tampongen til legen, skal det foregå en etterbehandling av den benyttede tampong, nemlig for å fjerne luktbelastning og desinfisere tampongen og å sikre stabiliseringen av farvningen til oppbevaring over lengere tid. Det ble videre funnet at denne etterbehandling kan foregå ved inndypning av tampongen som er an-vendt til undersøkelsen i en 20%-ig paraloidoppløsning ("Para-loid", oppløst i 20%-ig i toluen). ;Mens de tidligere metoder til LDH-bestemmelser ;er utpregede laboratoriemetoder, som dessuten har de innled-ningsvis omtalte ulemper, består altså her den; mulighet for en hurtig tilstrekkelig kvantitativ bestemmelse for visse anvendelsesformål, eksempelvis for vaginalvæsker, ved den ikke øvede benytter. Dette er spesielt viktig Ved svulstpasienter. Ved et stort antall svulstpasienter ble det ifølge litteraturen til i dag undersøkt 26 enzymer. LDH ;har den høyeste diagnostiske følsomhet, i serum (ikke eks-kreter) finnes en økning mellom 40-90%. Ved påvist tumor har den seriemessige bestemmelse av LDH i serum egnet seg til forløp- og terapikontroll. En LDH-økning er riktignok på ingen måte tumor-spesifikk. Den viser imidlertid alltid en alvorlig sykdom og er i sammenheng med ytterligere trekk egnet til å støtte antagelsesdiagnosen for en tumor. ;Den foreliggende, foretrukne prøvekombinasjon eller reagens, påført på tampong, ble gjennomført ved rekke-undersøkelser på ca. 100 friske kvinner og ved kvinnelige pasienter med Carcinoma colli uteri, Carcinoma corporis og Carcinoma in situ. For beste resultater innlegges tam-pongene i 15-30 minutter. Etter uttak kunne følgende farv-ninger umiddelbart fastslås: ;Opptrer det en blå (++) eller en mørkeblå (+++) farvning, så forelå i alle tilfelle et karzinom, som alltid stemte overens med det patologiske funn. Ved lyseblå farvning kunne det omtrent unntaksløst treffes diagnosen "omvandlings-sone". En rosa farving fant man hittil bare ved sunne kvinner (også hos svangre inntil 15. dag). ;Bestemmelsesfremgangsmåten in vitro, altså f.eks. undersøkelsen av serum eller plasma, gjennomføres på ;i og for seg kjent måte. Den eneste nødvendige modifikasjon er innstilling av en pufferspesifikk pH-verdi på ;6-6,5,' i forhold til den hittil anvendte sterkt basiske pH-verdi, således at her er det ikke nødvendig med noen nærmere beskrivelse.. For absoluttbestemmelser kan det foretas en vurdering av farveomslaget ved hjelp av en standard^LDH-prøve. Vurderingsprøven kan, slik den omtales for konservering av tampongen, farvekonserveres for noen tid. ;De følgende eksempler viser dessuten to mulig-heter til å påføre prøvekombinasjonen eller reagenset på<*>en tampong,
a) Inndypningsmetoden.
Vanlige hygiene-tamponger, f.eks. "o.b." om-vikles tett anliggende med et 1 cm bredt tesabånd i midten gurtelignende en- til to ganger. Tampongens omhylling åpnes på tampongens, motside til der uttrekningstråden befinner seg. Dermed frilegges tampongens sylinderflate.
Av handelsvanlige reagensglass av innhold 18 ml (DIN-format) avsprenges bunnkuppelen. I det således dannede .glassrør innføres tampongen således at den med sin ene side åpnede tampong med sitt plan avslutter flatelikt med rørenden. Uttrekningstråden fastgjøres ved rørets annen ende med heft-plaster, tesabånd eller lignende. Siden av røret med den åpnede tamponghylse dyppes i den under p>unkt 1) nevnte oppløsning. Pr. tampong oppsuges resp. opptrekkes 2,0 ml. Blandingen av oppløsningen og samtlige her omtalte manipulasjoner, .som foregår i forbindelse med prøvekombinasjons^ eller reagensopp-løsninger gjennomføres i mørkekammer ved monokromatisk lys (fotolys i rødt område, "Rotlicht").
Den på denne måte preparerte tampong samt det lille glasstør frysetørkes mørkt (lyofiliseres). Den tørkede tampong fjernes fra røret, f.eks. ved hjelp av uttreknings-tården og oppbevares stadig mørkt resp. i ^mørkekammer ved fotolys pakket og lysbeskyttet med lysugjennomtrengelig papir resp. folie resp. farvet papir,
b) Injeksjonsmetode.
Følgende arbeider gjennomføres i mørkekammer.
Ved hjelp av en 2 ml sprøyte injiseres 2,0 ml av prøvekombi-nasjonen eller reagenset under punkt 1) i tampongen. På tampongens motside, til der hvor uttrekningstråden befinner seg, stikker man injeksjonsnålen gjennom omhyllingen inn i tampongen og fører, mens man langsomt sprøyter nålen gjennom tampongen i lengderetning til den annen ende. Således har man oppnådd at tampongen er jevnt gjennomfuktet. Deretter frysetørkes tampongen og pakkes og oppbevares som under punkt a).
Reagensblandingen kan prisippielt påføres på enhver sugedyktig bærer. For bestemmelse av vaginalvæsken eller i vagina har det vist seg meget hensiktsmessig med transparente folier, f.eks. celluloseacetatfolie, slik den benyttes for elektroforeseformål eller produktet "Parafilm 1 M". På det sted hvor folien kommer i forbindelse med LDH
ved pålegning finner det sted en farvning i retning blått. Slike folier har den fordel at de er mekanisk fastere enn f.eks. filtrerpapir og kan gjøres helt transparent til stabilisering eller arkivering. Derved bibeholdes farve-intensiteten helt uendret.
Som transparenshad for celluloseacetatfolier
kan det anvendes:
a) Metanol:iseddik i forhold 85:15,
b) isobutanol:dioksan i forhold 1:1-3:7,
c) metyletylketon:dioksan i forhold 3:2,
d) eddikester:dioksan i forhold 3:2,
e) metanol:iseddik:glycerol i forhold 87:12:1.
For parafilmfolien egner det seg. kort neddypning
i 7,5%-ig eddiksyreoppløsning.
Det kan også foretas en oljebehandling. Herved egner .det seg "Whitemore-Oil 120" eller "Ondino-Oil 17".
2
Disse folier med en flate på 1,5-2,0 cm kan hensiktsmessig av faglege ved et kolposkopisk inngrep anvendes på en formordet slimhinneforandring i vagina. På det sted hvor det befinner seg celleopphopninger, som er tumorøse, finner det.punktvis sted en farvning analogt tampongens.
Claims (6)
1. Fremgangsmåte til felles bestemmelse av isoenzymene 4 og 5 av LDH ved omsetning av laktat og nikotinamidadenin-dinukleotid koblet med omsetningen av NADH med fenazinmetosulfat, karakterisert ved at omsetningene gjennomføres ved pH 6,0-6,5.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at omsetningene gjennomføres ved pH 6,3-6,4.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at det som puffersystem anvendes trietanolamin/NaOH.
4. Fremgangsmåte ifølge et av de foregående krav, karakterisert ved at såvel kroppsvæsken som skal undersøkes som også det til undersøkelsen anvendte prøvereagens innstilles på en pH-verdi fra 6,3-6,4.
5. Reagens eventuelt påført en bærer til felles bestemmelse av isoenzymene 4 og 5 av LDH med et innhold av puffer, laktat, nikotinamidadenin-dinukleotid, fenazinmetosulfat og nitroblåtetrazoliumklorid for gjennomføring av fremgangsmåten ifølge kravene 1-4, karakterisert ved at det inneholder 1,0-150 mM trietanolaminpuffer, pH 7,0, 20-350 mM Na-laktat (natriumsalt av DL-melkesyren), 0,01-1,0 mM fenazinmetosulfat (PMS), 0,1-10 mM nikotinamid—adenin-dinukleotid (NAD<+>) og 0,01-1,5 mM nitroblåtetrazoliumklorid (NBT).
6. Reagens ifølge krav 5, karakterisert ved at det inneholder 5,0 mM trietanolaminpuffer, pH 7,0, 67,5 mM Na-laktat, 0,1 mM fenazinmetosulfat (PMS), 1,5 mM nikotin-adenin-dinukleotid (NAD ) og 0,3 mM nitroblåtetrazoliumklorid (NBT).
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19742443741 DE2443741C3 (de) | 1974-09-12 | Verfahren zur gemeinsamen Bestimmung der Isoenzyme 4 und 5 der LDH |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO753119L NO753119L (no) | 1976-03-15 |
| NO144929B true NO144929B (no) | 1981-08-31 |
| NO144929C NO144929C (no) | 1981-12-09 |
Family
ID=5925603
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO753119A NO144929C (no) | 1974-09-12 | 1975-09-12 | Fremgangsmaate til felles bestemmelse av isoenzymer av laktatdehydrogenase. |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4003795A (no) |
| JP (2) | JPS5512239B2 (no) |
| AR (1) | AR211523A1 (no) |
| AT (1) | AT351173B (no) |
| AU (1) | AU503460B2 (no) |
| BE (1) | BE833348A (no) |
| BR (1) | BR7505850A (no) |
| CA (1) | CA1076010A (no) |
| CH (1) | CH631209A5 (no) |
| CS (1) | CS251752B2 (no) |
| DD (1) | DD120296A1 (no) |
| DK (1) | DK144659C (no) |
| ES (1) | ES440870A1 (no) |
| FI (1) | FI58943C (no) |
| FR (1) | FR2284882A1 (no) |
| GB (1) | GB1527243A (no) |
| HK (1) | HK79879A (no) |
| HU (1) | HU171962B (no) |
| IE (1) | IE41901B1 (no) |
| IL (1) | IL48071A (no) |
| IN (1) | IN142896B (no) |
| IT (1) | IT1155451B (no) |
| NL (1) | NL178086C (no) |
| NO (1) | NO144929C (no) |
| PL (1) | PL98619B1 (no) |
| RO (1) | RO68447A (no) |
| SE (1) | SE417109B (no) |
| SU (2) | SU663329A3 (no) |
| TR (1) | TR19139A (no) |
| YU (1) | YU218175A (no) |
| ZA (1) | ZA755704B (no) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4311791A (en) * | 1978-06-05 | 1982-01-19 | Bernstein Larry H | Automated kinetic determination of lactate dehydrogenase isoenzymes in serum |
| US4309184A (en) * | 1980-05-08 | 1982-01-05 | Majid Ali | Method of determining food or chemical allergy and intolerance |
| US4543327A (en) * | 1980-06-10 | 1985-09-24 | Bernstein Larry H | Malate dehydrogenase method |
| DE3231287C2 (de) * | 1982-08-23 | 1984-09-06 | MEDI-PHARMA Vertriebsgesellschaft mbH, 5000 Köln | Verfahren zum Herstellen einer diagnostischen Vorrichtung |
| DE3231288C2 (de) * | 1982-08-23 | 1984-06-28 | MEDI-PHARMA Vertriebsgesellschaft mbH, 5000 Köln | Diagnostische Vorrichtung und ihre Verwendung |
| GB2147415B (en) * | 1983-08-05 | 1987-02-11 | Powell & Scholefield Limited | Device and method for antibiotic sensitivity testing |
| DK427784A (da) * | 1984-09-06 | 1986-03-07 | Forenede Bryggerier As | Fremgangsmaade og apparat til bestemmelse af vitalitet i froe |
| US4849347A (en) * | 1984-11-29 | 1989-07-18 | Hoffmann-La Roche Inc. | Colorimetric biological assay |
| US5141853A (en) * | 1988-07-22 | 1992-08-25 | Abbott Laboratories | Determination of ammonia levels in a sample |
| DE69016265T2 (de) * | 1989-06-09 | 1995-09-28 | Abbott Lab | Verfahren zur Bestimmung von Isoenzymen. |
| US5468236A (en) * | 1993-06-09 | 1995-11-21 | Kimberly-Clark Corporation | Disposable absorbent product incorporating chemically reactive substance |
| US7947467B2 (en) * | 2001-07-19 | 2011-05-24 | Common Sense Ltd. | Methods for monitoring pathological conditions in a female subject |
| US20070134740A1 (en) * | 2005-12-12 | 2007-06-14 | David Brusilovsky | Compositions and articles for detection of analytes exceeding a pre-set threshold |
| US7083569B2 (en) * | 2001-08-03 | 2006-08-01 | Zassi Medical Evolutions, Inc. | Ostomy cartridge |
| US20070031914A1 (en) * | 2005-08-05 | 2007-02-08 | Wei Zhu | Devices for analyte assays and methods of use |
| US8053625B2 (en) * | 2006-12-14 | 2011-11-08 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Absorbent articles including a body fluid signaling device |
| CN109613177B (zh) | 2014-07-01 | 2021-08-20 | 科蒙森斯公司 | 用于鉴定羊水的诊断组合物 |
| EP3914163A4 (en) * | 2019-01-23 | 2022-04-13 | Gina-Life Diagnostics Ltd. | CANCER DIAGNOSTIC AND MONITORING APPARATUS, SYSTEMS AND METHODS |
| US20220169002A1 (en) | 2019-02-19 | 2022-06-02 | Nitto Denko Corporation | Method for producing laminate of two-dimensional material and laminate |
| US20230054322A1 (en) * | 2021-08-23 | 2023-02-23 | Leslie P. Taylor | Urine indication pad with inbuilt diagnostics for training and indication of potential disease |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2905169A (en) * | 1955-03-10 | 1959-09-22 | Herbert E Nieburgs | Device for cancer detection |
| US2999052A (en) | 1959-03-16 | 1961-09-05 | Miles Lab | Composition for colorimetric test for serum enzymes |
| US3326777A (en) * | 1964-12-10 | 1967-06-20 | Warner Lambert Pharmaceutical | Process for differentiating the isoenzymes of lactic dehydrogenase |
| US3388044A (en) * | 1965-12-07 | 1968-06-11 | Warner Lambert Pharmaceutical | Process for differentiating the isoenzymes of lactic dehydrogenase |
| DE1959410C3 (de) * | 1969-11-26 | 1974-02-28 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Indikator zur Bestimmung der reduzierten Pyridincöenzyme |
| US3663374A (en) * | 1970-08-14 | 1972-05-16 | Geomet | Method and apparatus for quantitating enzyme activity |
| DE2061984C3 (de) | 1970-12-16 | 1974-04-11 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Reagens zur Bestimmung der Lactat-Dehydrogenase im Farbtest |
| US3862010A (en) * | 1972-06-09 | 1975-01-21 | Technicon Instr | Method of heat fractionating ldh into isoenzyme components |
| US3867258A (en) * | 1973-11-08 | 1975-02-18 | American Cyanamid Co | Lactate dehydrogenase test material |
| US4046634A (en) * | 1974-05-28 | 1977-09-06 | Mercer Donald W | Assay of isoenzymes by ion exchange chromatography |
| US4080263A (en) * | 1976-08-11 | 1978-03-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for the rapid quantitative determination of lactate or alanine |
-
1975
- 1975-08-27 YU YU02181/75A patent/YU218175A/xx unknown
- 1975-08-29 AT AT667075A patent/AT351173B/de not_active IP Right Cessation
- 1975-09-01 NL NLAANVRAGE7510277,A patent/NL178086C/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-03 GB GB36351/75A patent/GB1527243A/en not_active Expired
- 1975-09-05 ZA ZA00755704A patent/ZA755704B/xx unknown
- 1975-09-09 IT IT69244/75A patent/IT1155451B/it active
- 1975-09-10 DD DD188274A patent/DD120296A1/xx unknown
- 1975-09-10 IL IL48071A patent/IL48071A/xx unknown
- 1975-09-10 RO RO7583353A patent/RO68447A/ro unknown
- 1975-09-11 FI FI752550A patent/FI58943C/fi not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 CH CH1178775A patent/CH631209A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 SE SE7510130A patent/SE417109B/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 ES ES440870A patent/ES440870A1/es not_active Expired
- 1975-09-11 AU AU84720/75A patent/AU503460B2/en not_active Expired
- 1975-09-11 DK DK406475A patent/DK144659C/da not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 BR BR7505850*A patent/BR7505850A/pt unknown
- 1975-09-11 CA CA235,284A patent/CA1076010A/en not_active Expired
- 1975-09-12 CS CS756214A patent/CS251752B2/cs unknown
- 1975-09-12 PL PL1975183289A patent/PL98619B1/pl unknown
- 1975-09-12 TR TR19139A patent/TR19139A/xx unknown
- 1975-09-12 FR FR7528099A patent/FR2284882A1/fr active Granted
- 1975-09-12 HU HU75SCHA170A patent/HU171962B/hu unknown
- 1975-09-12 BE BE159982A patent/BE833348A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-12 US US05/612,633 patent/US4003795A/en not_active Expired - Lifetime
- 1975-09-12 AR AR260373A patent/AR211523A1/es active
- 1975-09-12 IE IE2000/75A patent/IE41901B1/en unknown
- 1975-09-12 JP JP11079975A patent/JPS5512239B2/ja not_active Expired
- 1975-09-12 SU SU752171403A patent/SU663329A3/ru active
- 1975-09-12 NO NO753119A patent/NO144929C/no unknown
- 1975-10-09 IN IN1960/CAL/1975A patent/IN142896B/en unknown
-
1976
- 1976-09-09 SU SU762405873A patent/SU657732A3/ru active
-
1978
- 1978-07-10 US US05/923,641 patent/US4266022A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-11-15 HK HK798/79A patent/HK79879A/xx unknown
- 1979-11-22 JP JP54150822A patent/JPS5850720B2/ja not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO144929B (no) | Fremgangsmaate til felles bestemmelse av isoenzymer av laktatdehydrogenase. | |
| Savage | Preparation and properties of highly purified diaphorase | |
| Schultz et al. | The chemistry of experimental chloroma: I. Porphyrins and peroxidases | |
| KR20140029362A (ko) | 양호한 건강의 바이오마커를 검출하기 위한 질 표시기 | |
| CN101025415A (zh) | 一种检测尿液中尿酸含量范围的试纸 | |
| US3699005A (en) | Method and article for detecting the fertile period | |
| JPS5955199A (ja) | 診断具 | |
| Knox et al. | Bacterial tetrathionase: adaptation without demonstrable cell growth: A report to the medical research council | |
| Racker | Histidine detection and estimation in urine | |
| MacCARDLE et al. | XCIII. SPECTROGRAPHIC ANALYSIS OF NEURODERMATITIC LESIONS: A HUMAN MAGNESIUM DEFICIENCY | |
| US4157279A (en) | Process for the determination of at least one of the isoenzymes of lactatedehydrogenase | |
| EP0028644A1 (en) | Impending ovulation test | |
| DE2443741C3 (de) | Verfahren zur gemeinsamen Bestimmung der Isoenzyme 4 und 5 der LDH | |
| Stombaugh Jr et al. | Factors affecting the use of lactate dehydrogenase as a means of bloodstain differentiation | |
| CA1252703A (en) | Diagnostic saliva test for detecting periodontal disease | |
| Ewing | Clinical pathology of the blood: a treatise on the general principles and special applications of hematology | |
| Sen et al. | DNA content of oral and oropharyngeal carcinoma | |
| Marx | The influence of normal and cancer blood on tyrosinase activity in vitro | |
| SU1714506A1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики острого вирусного гепатита и механической желтухи | |
| Moore et al. | A Clinical Method of Haemalkalimetry, with application to determination of the reactivity of the inorganic salts of the serum in Malignant Disease and other conditions | |
| Hailes et al. | Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase Deficiency Screening in Madeira | |
| Fuller | The nature of the bactericidal substance in the urine of patients receiving a ketogenic diet | |
| RU1807393C (ru) | Способ отсроченного определени гликемии | |
| Schwartz et al. | Sperm motility—a simple method for analysis | |
| Reynolds et al. | Measurement of portal venous pressure by hepatic vein catheterization |