CS251752B2 - Method of simultaneous determination of several or all lactate hydrogenase's isoenzymes - Google Patents
Method of simultaneous determination of several or all lactate hydrogenase's isoenzymes Download PDFInfo
- Publication number
- CS251752B2 CS251752B2 CS756214A CS621475A CS251752B2 CS 251752 B2 CS251752 B2 CS 251752B2 CS 756214 A CS756214 A CS 756214A CS 621475 A CS621475 A CS 621475A CS 251752 B2 CS251752 B2 CS 251752B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- isoenzymes
- reagent
- lactate
- buffer
- tampon
- Prior art date
Links
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 title claims abstract description 17
- 108010020056 Hydrogenase Proteins 0.000 title 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 24
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 22
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 18
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 claims abstract description 17
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 13
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 10
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 5
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 claims description 3
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 2
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 claims 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 claims 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims 1
- 230000009969 flowable effect Effects 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 229960000448 lactic acid Drugs 0.000 claims 1
- QEHKBHWEUPXBCW-UHFFFAOYSA-N nitrogen trichloride Chemical compound ClN(Cl)Cl QEHKBHWEUPXBCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NGSFWBMYFKHRBD-UHFFFAOYSA-N sodium;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound [Na+].CC(O)C(O)=O NGSFWBMYFKHRBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 claims 1
- -1 tritium amine Chemical class 0.000 claims 1
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 abstract description 8
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 abstract description 6
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 abstract description 6
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 abstract description 3
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 2
- 229940101270 nicotinamide adenine dinucleotide (nad) Drugs 0.000 abstract 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- BSABBBMNWQWLLU-UHFFFAOYSA-N lactaldehyde Chemical compound CC(O)C=O BSABBBMNWQWLLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 3
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 3
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N Pyrazine Chemical compound C1=CN=CC=N1 KYQCOXFCLRTKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- 241000234282 Allium Species 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 201000004933 in situ carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 150000004685 tetrahydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000008467 tissue growth Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/805—Test papers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S604/00—Surgery
- Y10S604/904—Tampons
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu současného stanovení několika nebo všech isoenzymů laktátdehydrogenázy přeměnou laktátu a nikltnnamidadennndinukleotidu na pyrohroznan.
Je známo, ·že se laOtát dehydrogenáza (LDH) vyskytuje v pěti isoformách. při stanovení účinnooti jednoHivých isoenzymů se výskotu jí odlišnooti v substrátu i v optimálním pH a tyto zvláštnoosi nebyly až dosud pro jednoolivé isoenzymy zcela známy.
Ppi stanovení všech isoenzymů bylo až dosud nutno tyto isoenzymy rozčdtit elektrolyticky (Die Isoenzyme der LactatHehydrogenase’’, Reihe Biochemie und Klinik S. L. Kowaaewski v G. Thieme Veelag, Stuttgart 1972, str. 29), nebo je nutno uvést do roztoku laktát dehydrogenázy, vázat isoenzymy 2 až 5 a stanovit isoenzym·1, který se vyskytuje nejčassěti a v největším mnnossví. Přehled až dosud užívaných standardních metod je možno na^ít nappíklad v knize Enzymatische Anaayse, sv. I, Verlag · Chemie, Weenheim 1970, str. 557. Podle neeobsytkejší metody se předepisuje pro převádění laktátu na pyrohroznan optimální pH v rozmezí ·
8,3 až 8,9. Z toho je zřejmé, že jde o zássaité nebo téměě nnuutální pH, ppi němž je možno témě? úplně stanovit účinnost ^so^zym^
Lammpecht a další (Ccadilogy 56, 371 až 375 (1971/72) a F^<^tLs<^c^h-^t^e der klantchhea Chemie, Enzyme und H^irm^i^e, Verlag der Wiener iiUίzintchun Akademie 1972, str. 277 až 283) zjisttli, že jednoolivé isoenzymy se mohou změnou pH vzájemně měnit jeden na druhý.
Vynález si klade za úkol ods^ran^t Ooííp ikované postupy, které vzn^ka^í při známých postupech nutnoosí Hěit jednotlivé isoenzymy a současně vdltranat i aepřesnaoti takto prováděného celkového stanovení a tím zaSjsSiě optimální stanovení isoenzymů, zejména itvuazymu 4 a/nebo 5, popřípadě společně s isoenymmem 3. Mimoto si klade vynález za úkol navrhnout směs reakčních činidel a popsat speecelní m^ožaotě. p^r^žiití způsobu podle vynálezu.
Bylo zjištёav, že pokles hodaoty pH pod neiiurální hodaotu při známé přeměně laktátu a aiOvtnaaiidtdeanadiaukluotidu vede k optimálnímu stanovení uvedených isoenzymů, zejména isoenzymů 4 a 5. Proto je velmi důležité, aby bylo stanovení isoenzymů 4 a 5 prováděno pouze v prostředí s kyselým pH. Z toho také vyplývá nutnost, uppaaít celou metodu pro stanovení ltOtáleehydrogenlzy zásadně tak, aby tímto způsobem bylo možno tětaovvt nejen svrchu uvedené isoenzymy 4 a 5, nýbrž i tyto isoenzymy ve vzájemné smiti i ve smiti s ostatními isoenzymy ltktáleehydrogenlzy.
Způsobem podle vynálezu je tedy možno provádět stanovení většího počtu nebo i všech isoenzymů ltOtátUehydrogealzy, a to zejména isoenzymů 4 a 5, popřípadě ve vzájemné smiti nebo ve smisi s ostatními isoenzymy a popřípadě pouze isoenzymů 5 přeměnou laktátu a nikotintmidltleannlkuuaeotidu na pyrohroznan při pH, specifckkém pro pouuítý systém pufru, s výhodou při pcou^í pujfru na podkladě trUthtanoaaiiau a hydroxidu sodného. Pro přeměnu stačí malé irlnOství kappainy.
Předmětem vynálezu je tedy způsob současného stanovení n^J^c^oi^ka nebo všech isoenzymů ltktáldehydrogeaázy, zejména isoenzymů 4 nebo 5 jako takových nebo ve siměi se sebou navzájem nebo s dalšími isoenzymy ltOtáteehydrogunlzt ve vzorku tak, že se vzorek smísí s Ι^ζ^, ai0vtntaiidtduaiadiau01uvtiUei a tutrazvlOovvu sooí, čímž za přítomanosi isoenzymů laktátdehydrogenázy se vytvoří z laktátu a aikvtnnaiilt(leanaauU.keotilu pyrohroznan a vznikne barevná reakce s ěutrtzvlOovvu sooí, p^eemž v případě stanovení in vivo se například reakční složky nanesou na tampon jako na nosič a tampon se zavede do pochvy vyšetřované osoby a v případě stanovení in vitro se například reakční složky smísí s poševní kapalinou osoby, která má být vyšetřena, vyzna^uící se tím, že se stanovení provádí v kapalném prostředí při pH 6 až 6,5, udržovaném pufrem.
Dále bylo stanoveno,
Při pH 6,3 až 6,4 mohou vyskytnout například ve také na pufru.
se že optimum pro společné stanovení většího pobitu isoenzymů závisí jde zejména o společné stanovení isoenzymů 4 a 5, tak jak vaginální kapalině.
to v němž se optimální
PH
S výhodou má mít prostředí, tu výhodu, že je možno udržet se podstatně liší od hodnoty 6 sn^rč^m nahoru nebo doll. .
přeměna provádí velkou pufrovací schopnost. Má pH i při zkoumání tělesných tekutin, jejichž
Stanovení se při te^otě 37 °C. při této teplotě maďí všecky Яoenzymy svou optimální účinnost, takže je m^žno je stanovt s malým stano^ť^r^íí.
Stanovení laktát dehydrogenázy má velkou iůležieste zejména při vyšetřování tělesných tekutin. Tyto isoenzymy jsou u zdravých lidí převážně pevně vázány ve tkáních, avšak v případě, že dojde k abnormálnímu rlstu tkáně nebo u leukemie a podobných onemocnění se tyto isoenzymy nacházel v poměrně vysoké konceenraci v krevním séru i v jiných tělesných tekuutnách. Zejména je možno stanovt, že se vys^ytijí při patologických změnách iittVlníOs pohlavního ústsrojí u žen ve vaginální kapsa^ě.
Způsob podle vynálezu je vhodný pro stanovení uvedených isoenzymž ve všech tělesných tekutinách. Nastavení hodnoty pH ve vzorku závisí na pH vzorku. V každém případě se má stanovení provádět při pH 6,3 až 6,4 s výhodou při hodnotě 6,3. V závislssti na této nutnosti je aapoSřeýí užít pří^ušná reakiní činidla.
pH v rozmezí 8,3 zásadité pH byla
Podle standardně užívané' metody tak jak byla svrchu niSováoa je předepsáno optimální až 8,9. Zpžsob podle vynálezu se provádí při od^nném pH. Podkladem pro skutečnost, že při reakci laktát + NAD+ -L?^ ^^hroznan 2NADH + H+ vzniká proton ve rovnovážný stav doprava, prováděl se postup v alkalickén prostředí.
stechiometrickém poměru k přeměně laktátu. Aby bylo tedy možno posunout
Zpžsobem podle vynálezu se naopak postup provádí tak, že při stanovení v séru nebo plazmě se pH vzorku nastaví pufem s obsahem treeOaonodaniou a hydroxidu sodného na 6,3 až
6,4 a také činidla se naasaví na tuto hodnoou. Stanovení se má provádět tak, že za skoSoostí nemá pH posutit hranice 6,0 až 6,5 a pokud možno má probíhat při hodnotě 6,4. Při pííSonoosti sérunadbuninu se známým zplsobem přidává glutdtOisn.
žádných
6,3 až
Isoenzymy laktáieehydrogčoVay ma^í být stanoveny při optimálním pH 6,3 až 6,4 se dbá toho, aby rovnováha reakce přičemž laktát + NAd+»..Í2S > py^h^nan 2 NADH + H+ byla posunována doprava. K tomuto účelu se přidává fenazinmeehhssUfát, kterým je oxidován koenzym NADH. Měření v rozmezí pH 6,0 až 6,5 poskytuje poprvé moonost úplně stanooit isoenzym 5. To j je ddleěité z eěméén z tooo ddvvodu 5 e pprvv isoenzym 5 mmže býý uukaaaeeem přítomn^o! karcnoomu a proto jeho mňěení a jeho citlivost je spolehlivým prostěedkem pro včasné stanovení tohoto onemoonněí.
U některých tělesných tekutin jsou však pomňry, které se velmi liší od požadovaného pH 6,3 až 6,4. Jde zejména o vaginální kapna^u, jejíž pH je ^ί^ΐζηθ 4. Je tedy nutno vzorek nadSaait na optimální pH, to znamená, že stanovení se provádí při změněném pH vaginální Capadiiy na hodnotu 6 až 6,5.
Je proto nutné upravit směs, sestávájící z iaktátu, nikotinamidadeninnukleotidu (NAD+) a tetrvzolioié soli k zajištění reakce tvl, aby byla pufroiánv nv hodnotu pH 6,3 vž 6,4 a tato pH se udržela i při přidání tělesné tekutiny. Při poožití tušené tkáně nebo přípravku i suchém stavu musí tyto látky mít uvedené pH po rozpuštění. Neeiýhodnnjší pH je tedy 6,0 až 6,5.
♦
Při zvláštním případu, při němž se vyšetřuje vaginální kapalina, která sama o sobě nemá být nastavována pH, které je odlišné od původního je nutno použžt pufr s obsahem trietVnnoVaminu a hydroxidu sodného, přičemž tato směs se nastavuje nv pH 7,0, kdežto jinak se vzorek i směs nastavují nv pH 6,3 vž 6,4.
Vynález tedy zahrnuje i poiuítí způsobu podle vynálezu ve zvláštním případu vyšetřování vaginální kapaViny přímo ve vagíně prostřednictvím maVte^^, který závistí stanovení patologických změn v této části pohlavního ússroóí, přičemž činidlo se v tomto případě nanáší nv vhodný nosii, zejména nv tampon nebo například nv testovací kroužky, které se do oaVteiálu ponooí a pvk zavedou do vagíny, kde se popřípadě příoomné isoenzymy stanoví při pH 6,0 vž 6,5, zejména 6,3 vž 6,4.
Činidlo sestává z roztoku následuuícího složení:
Výhodné mnoožsví
Dolní a horní hranice
| pufr s obsahem Ше^то!- | |||
| voinu-NaOH o pří 7,0 | 5,0 | m^dů | 1,0 vž 150 onolů |
| sodná sůl kyseliny DoL-olédné . | 67,5 | looolů | 20 vž 3 50 rnooiů |
| fčnvziomečhtisjfát (PMS) | 0,1 | modů | 0,01 vž 1,0 looolů |
| nikltίvamidvdčnin- | |||
| dinukleotl-d (NAD+) - | 15 | ornolů . | 0,1 vž 10 moolů |
| derivát nitrooodři a tetrv- | |||
| zoliuochloridu (NBT) | 03 | moolů | 0,01 vž l,5 mmolů |
Toto činidlo se chrání před světlem a zv nepřístupu světla se ovočsč nv nosii, s výhodou tampon a tento nosii se vž do potuítí skladuje zv nepřístupu světla. Přítomnost LDH ve vaginální tekutině se projeví tím, že po 5 až 10 minutách tampon zmodrá. Dojde k oááledující reakcc.
1.
lvktát
LDH + NAD*·· · pyrotroznvn + NADH + H+ 2. NADH + frnazinoečhtisjfát + H+--------}
NAD + redukovaný fčnvzinmečhoiujfát
3. redukovaný frnvzinoerttlsUfát + derivát nilto^m^c^ř^ři a tetrvzoliuochloridu—4formvzvn + fčnvzinmečttisUfát.
Protože při druhé i třetí přeměně lvktátu rovněž dochází k vazbě redukovaného koenzymu, je rovnováha první reakce, to znamená rovnováha vlastní přeměny lvktátu ještě více posunována sm^:rč^m doprava, takže při původním pH 7,0 užitého iinidlv probíhá po zavedeni tamponu vlastní přeměna při pH přiblHně 6 a obvykle 6,3 vž 6,4. Tím dochází k optimálnímu stanovení isočnzymů, zejména isoenzymu 4 a 5, které se při chorobných změnách mohou vyskytovat ve vaginální kvpaVině.
Má-li být činidlo použito pro tento účel, má být stále a nemá poškozovat tkáně. Zvláště vhodná je směs triethanolaminu a hydroxidu sodného.
Činidlo je možno na nosič, zejména na tampon nenést jakýmkoli způsobem. Bylo uvedeno, že je nutno činidlo chránit před světlem a rovněž je nutno chránit i nosič s naneseným činidlem až do použití. Dvěma výhodnými způsoby nanesení činidla na tampon jsou vstřiknutí přibližně 2 ml činidla injekční stříkačkou nebo impregnace konce tamponu v délce 3/4 cm přibližně 2 ml činidla s následným usušením, zejména lyofilizací. Činidlo je však možno nanést také na tkanici, která se později snadno z tamponu odstraní. Výhodné je nanesení činidla na proužek nebo tampon z bavlny, který se pak uloží do vlastního tamponu.
Protože při rychlém stanovení patologických změn v pohlavním ústrojí u žen je známo, že se může měnit jak množství, tak pH vaginální kapaliny, musí mít činidlo vysokou pufrovací schopnost, aby vlastní stanovení probíhalo vždy při pH 6 až 6,5, s výhodou 6,3 až 6,4. Protože v případě použití tkanice by v praxi někdy nebyla pufrovací schopnost dostatečná, je účelné v tomto případě užít většího množství pufru, aby tato schopnost byla vždy na konci této tkanice, který vyčnívá z tamponu dostatečná.
Nosiče s obsahem činidla nemusí být vždy užívány lékařem, protože si je může každá žena snadno zavést. Změna barvy do modra po 15 až 30 minutách po zavedení do vaginy ukazuje na bezpečí chorobné změny a je znamením, že je nutno vyhledat lékaře.
V případě, že má být použitý tampon nebo tkanice uchována delší dobu, což padá v úvahu především při použití lékařem nebo v případě, že nemocná má v úmyslu tampon lékaři poslat, je nutné další zpracování tamponu, aby došlo к jeho desinfekci a ke stabilizaci zabarvení na delší časové období. Bylo zjištěno, že je výhodné provádět toto následné zpracování ponořením použitého tamponu do 20% roztoku paraloidu. (Paraloid firmy Merck, 20% roztok toluolu).
Dosud užívané metody pro stanovení laktátdehydrogenázy byly vysloveně laboratorní a ještě měly řadu nevýhod. Způsob podle vynálezu naopak dovoluje rychlé a dostatečně kvantitativní stanovení к různým účelům, zejména pro stanovení ve vaginální kapalině, přičemž toto stanovení může provádět neodborník. To je důležité zejména u nemocných, kteří trpí nádorovým růstem. Protože u řady těchto nemocných bylo popsáno v literatuře až 26 zkoumaných enzymů, z nichž laktát dehydrogenázy má nejvyšší diagnostickou citlivost, je možno nalézt v krevním séru zvýšení o 40 až 90 %. U zjištěného nádoru má tedy sériové stanovení LDH v séru význam pro kontrolu průběhu a léčby. Na druhé straně zvýšení LDH není specifické pro nádory, je však známkou onemocnění a v souvislosti s dalšími příznaky a zkouškami může potvrdit nebo vyloučit přítomnost nádoru.
Činidlo podle vynálezu, nanesené na tampony, bylo použito pro řadové vyšetření na přibližně 100 zdravých ženách a na ženách, onemocnělých Carcinoma colli uteri, Carcinoma corporis a Carcinoma in šitu. Nejlepší výsledky se dosáhnou při zavedení tamponu na 15 až 30 minut. Okamžitě po vymytí je možno stanovit následující zbarvení:
žádné '.bc-vení růžové zbarvení světle modré do fialova modré tmavě modré negativní ještě negativní + ++ +++
Při modrém (++) nebo tmavě modrém (+++) zbarvení šlo vždy o karcinom, jak bylo možno potvrdit dalšími patologickými nálezy. Při světle modrém zbarvení bylo téměř bez vyjímky možno nalézt přechodnou zónu, v níž docházelo к přeměně buněk. Růžové zbarvení bylo až dosud nalezeno jen u zdravých žen a také u těhotných žen do 15 dne.
Stanovení in vitro, například v séru nebo v plazmě se provádí o sobě známým způsobem. Nutnou změnou je pouze nastavení pH, například 6 až 6,5 na rozdíl od dosud používaného, silně zásaditého pH. Není tedy nutno stanovení podrobněji popisovat. Pro absolutní stanovení je možno provést cejchovací křivku pro změnu barvy podle standardního vzorku LDH. Tato cejchovací křivka může být po určitou dobu podložena uchovaným cejchovacím vzorkem.
V následujících příkladech jsou popsány ještě dvě možnosti, jak nanést činidlo na tampon.
a) Ponoření
Běžné hygienické tampony, například o. b. firmy Dr. Carl Hahn se jednou až dvakrát silně ovinou uprostřed proužkem o tloušťce 1 cm. Obal tamponu se otevře na opačné straně tamponu než na straně, na které z tamponu vyčnívá vytahovací vlákno. Válcová plocha tamponu je tedy volná. Z vhodných reakčních nádobek o obsahu 18 ml (DIN-formát firmy Schott, Mainz) se odstraní dno. Do takto vzniklé skleněné trubice se tampon zavede tím způsobem, že z trubice vyčnívá. Vytahovací vlákno se na druhém konci upevní náplastí nebo jiným způsobem. Trubice se druhým koncem ponoří do roztoku, uvedeného 1). Užijí se 2,0 ml roztoku na tampon. Tvorba roztoku a další postup se provádí v temné komoře při monochromatickém světle, zejména při červeném světle.
Takto připravené tampony včetně skleněných trubic se ve tmě lyofilizují. Usušené tampony se odstraní z trubice, například pomocí vytahovacího vlákna, a balí se ve tmě nebo v temné komoře papírem, popřípadě fólií, popřípadě barevným papírem, nepropustným pro světlo a skladují se ve tmě.'
b) Vstřikování
Tento způsob se provádí v temné komoře. Pomocí injekční stříkačky o obsahu 2 ml se do tamponu nanesou dva ml činidla 1). Na opačné straně tamponu, než kde se nachází vytahovací vlákno se zabodne injekční jehla obalem tamponu do tamponu a v průběhu vstřikování se jehla pohybuje podélně směrem к opačnému konci tamponu. Tak je možno zajistit rovnoměrné zvlhčení tamponu, který se pak lyofilizuje a balí a skladuje stejně jako v případě a).
Činidlo je možno nanést zásadně na jakýkoli roztok ze savého materiálu. Ke stanovení ve vaginální kapalině nebo ve vagině jsou výhodné průhledné fólie, například z acetátu celulózy, tak jak se užívají pro elektroforetické účely nebo materiál parafilm M firmy Američan Chemcompany. V místě, kde se dostávají fólie do styku s LDH, dochází ke zbarvení do modra. Tyto fólie mají tu výhodu, že mají větší mechanickou pevnost než například filtrační papír a lépe se stabilizují a uchovávají pro svou průhlednost. Intenzita zbarvení se přitom nemění.
К uchování průhlednosti u fólií z acetátu celulózy je možno užít následující směsi:
a) methanol a ledová kyselina octová v poměru 85:15,
b) isobutanol a dioxan v poměru 1:1 až 3:7,
c) methylethylketon a dioxan v poměru 3:2
d) ledová kyselina octová a dioxan v poměru 3:2
e) methanol, ledová kyselina octová a glycerin v poměru 87:12:1.
Folie z parafilmu se na krátkodobu máčí do 7,5% roztoku kyseliny octové.
Je možno zpracování provést také olejem, jako. Whitemore-120 nebo Ondino-17 (Shell).
_ _ o
Tyto folie s plochou 1,5 až 2,0 cm“ lze s výhodou užít při kolposkopickém vyšetření a uložit přímo na změněnou sliznici v pochvě. Na místě, kde se nacl-iháce í shluky nádorovýchbuněk, dojde k bodové změně barvy obdobně jako na tamponech. ‘
PŘEDMĚT VYNÁLEZU
Claims (9)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZU1. Způsob současného stanovení někooika nebo všech isoenzymů lak.tátdehydrogenázy, zejména isoenzymů 4 nebo 5 jako takových nebo ve směěi se sebou navzájem nebo s dalšími isoenzymy lαktátdehyduogeaázy ve vzorku tak, že se vzorek smísí s laktátem, dikotdnamitadeeindinukleotďdem a tetrazoloovou sooí, čímž za příoomnoosi isoenzymů lčktáddehydrogeaázy se vytvoří z laktátu a nikutánαaitαtenándiaukleotitu pyrohroznan a vznikne barevná reakce s tetrazoliovou solí, přieemi v případě stanoveni in vivo se například reakčni složky nanesou na tampon jako na nosič a tampon se zavede do pochvy vyšetřované osoby a v případě stanovení in vitro se například reakcní složky smísí s poševní ko^^^l^inou osoby, která má být vyšetřena, vyznnčijící se tím, že se stanovení provádí v kapalném prostředí při pH 6 až 6,5, udržovaném pufeem.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznnčijící se tím, že se stanoveni provádí při pouužtí pufru s obsahem tritečnnočaminu a hydroxidu sodného při pH 6 až 6,5, s výhodou 6,3 až 6,4.
- 3. Způsob podle bodu 1 a 2, vyznaa^íc^ se tím, že se jak zkoumaný vzorek, tak činidlo nastaví na pH 6,3 až 6,4.
- 4. Reakccní činidlo k provádění způsobu podle bodu 1 až 3, sessáávaící z laktátu, nikotinčmitčdeeindlnukleotitu, tet^i^azolo^v^é sooi pro ozřejmění enzymaaické redukce nikotinamidtčtenndtnukkeotitu a dalších složek, přičemž při poujití reakčního činidla pro stanovení in vivo se nanášej tyto složky například na tampon jako nosič nebo při stanove^l-in vitro jsou k disp^s^i^f^i jako vodný roztok, vyznaa^í^ se tím, že jako tаčeí složku obsahuje rufr, například trieeannočааin a hydroxid sodný, který udržuje pH během stanoveni na hodnotě6 až 6,5, s výhodou 6,3 až 6,4.
- 5. Reakčni činidlo podle bodu 4, vyznačijící se tím, že při vyšetřování vzorku, jehož pH je v oblaasi 6 až 6,5 udrží pH na hodnotě 6,3 až 6,4.
- 6. Reakčnř činidlo podle bodu 5, vyznnčijjcí se tím, že je pufrováno na pH 7,0.
- 7. Reakonř činidlo podle bodu 5 nebo 6, vyznačijící se tím, že jako pufr obsahuje směs triteαanočaaiau a hydroxidu sodného.
- 8. Revení činidlo podle bodu 4, vyznaa^í^ se tím, že obsahuje 1,0 až 150 mM trieteaaoαamioo·. ého pvfru o pH 7,0, 20 až 350 mM sodné sooi kyseliny DL-mléčné, 0,01 až1,0 mM fllrcιz-.a.1'trϊuj')|Jτááu, 0,1 až 10 mM aikutnnamitαtenaaukleotitu a 0,01 až 1,5 mM derivátu nitoomoddi a t.ltrčzuljuachluritu.
- 9. Rcukční činidlo podle bodu 8, vyznačijj’.cí se tím, že obsahuje 5,0 mM trleehčnulaminu jako pufru o pH 7,0, 67,5 mM sodné sooi kyseliny mléčné, 0,1 mM feaaziaaeethoujfátu,1,5 mM aikutaαaaitčtenaadiaukl·eotitu a 0,3 mM derivátu nitoomodři a tetčazuljuaceluridu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19742443741 DE2443741C3 (de) | 1974-09-12 | Verfahren zur gemeinsamen Bestimmung der Isoenzyme 4 und 5 der LDH |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS621475A2 CS621475A2 (en) | 1986-12-18 |
| CS251752B2 true CS251752B2 (en) | 1987-08-13 |
Family
ID=5925603
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS756214A CS251752B2 (en) | 1974-09-12 | 1975-09-12 | Method of simultaneous determination of several or all lactate hydrogenase's isoenzymes |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4003795A (cs) |
| JP (2) | JPS5512239B2 (cs) |
| AR (1) | AR211523A1 (cs) |
| AT (1) | AT351173B (cs) |
| AU (1) | AU503460B2 (cs) |
| BE (1) | BE833348A (cs) |
| BR (1) | BR7505850A (cs) |
| CA (1) | CA1076010A (cs) |
| CH (1) | CH631209A5 (cs) |
| CS (1) | CS251752B2 (cs) |
| DD (1) | DD120296A1 (cs) |
| DK (1) | DK144659C (cs) |
| ES (1) | ES440870A1 (cs) |
| FI (1) | FI58943C (cs) |
| FR (1) | FR2284882A1 (cs) |
| GB (1) | GB1527243A (cs) |
| HK (1) | HK79879A (cs) |
| HU (1) | HU171962B (cs) |
| IE (1) | IE41901B1 (cs) |
| IL (1) | IL48071A (cs) |
| IN (1) | IN142896B (cs) |
| IT (1) | IT1155451B (cs) |
| NL (1) | NL178086C (cs) |
| NO (1) | NO144929C (cs) |
| PL (1) | PL98619B1 (cs) |
| RO (1) | RO68447A (cs) |
| SE (1) | SE417109B (cs) |
| SU (2) | SU663329A3 (cs) |
| TR (1) | TR19139A (cs) |
| YU (1) | YU218175A (cs) |
| ZA (1) | ZA755704B (cs) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4311791A (en) * | 1978-06-05 | 1982-01-19 | Bernstein Larry H | Automated kinetic determination of lactate dehydrogenase isoenzymes in serum |
| US4309184A (en) * | 1980-05-08 | 1982-01-05 | Majid Ali | Method of determining food or chemical allergy and intolerance |
| US4543327A (en) * | 1980-06-10 | 1985-09-24 | Bernstein Larry H | Malate dehydrogenase method |
| DE3231287C2 (de) * | 1982-08-23 | 1984-09-06 | MEDI-PHARMA Vertriebsgesellschaft mbH, 5000 Köln | Verfahren zum Herstellen einer diagnostischen Vorrichtung |
| DE3231288C2 (de) * | 1982-08-23 | 1984-06-28 | MEDI-PHARMA Vertriebsgesellschaft mbH, 5000 Köln | Diagnostische Vorrichtung und ihre Verwendung |
| GB2147415B (en) * | 1983-08-05 | 1987-02-11 | Powell & Scholefield Limited | Device and method for antibiotic sensitivity testing |
| DK427784A (da) * | 1984-09-06 | 1986-03-07 | Forenede Bryggerier As | Fremgangsmaade og apparat til bestemmelse af vitalitet i froe |
| US4849347A (en) * | 1984-11-29 | 1989-07-18 | Hoffmann-La Roche Inc. | Colorimetric biological assay |
| US5141853A (en) * | 1988-07-22 | 1992-08-25 | Abbott Laboratories | Determination of ammonia levels in a sample |
| EP0401641B1 (en) * | 1989-06-09 | 1995-01-25 | Abbott Laboratories | Method for assaying isoenzymes |
| US5468236A (en) * | 1993-06-09 | 1995-11-21 | Kimberly-Clark Corporation | Disposable absorbent product incorporating chemically reactive substance |
| US20070134740A1 (en) * | 2005-12-12 | 2007-06-14 | David Brusilovsky | Compositions and articles for detection of analytes exceeding a pre-set threshold |
| US7947467B2 (en) * | 2001-07-19 | 2011-05-24 | Common Sense Ltd. | Methods for monitoring pathological conditions in a female subject |
| US7083569B2 (en) * | 2001-08-03 | 2006-08-01 | Zassi Medical Evolutions, Inc. | Ostomy cartridge |
| EP1506406B1 (en) * | 2002-05-23 | 2009-03-11 | Sunnybrook and Women's College Health Sciences Centre | Diagnosis of hepatocellular carcinoma |
| US20070031914A1 (en) * | 2005-08-05 | 2007-02-08 | Wei Zhu | Devices for analyte assays and methods of use |
| US8053625B2 (en) * | 2006-12-14 | 2011-11-08 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Absorbent articles including a body fluid signaling device |
| CN105277656B (zh) | 2014-07-01 | 2018-12-25 | 科蒙森斯公司 | 用于鉴定羊水的诊断组合物 |
| WO2020152679A1 (en) | 2019-01-23 | 2020-07-30 | Gina-Life Diagnostics Ltd. | Cancer diagnosis and monitoring apparatus, systems and methods thereof |
| CN113453884A (zh) | 2019-02-19 | 2021-09-28 | 日东电工株式会社 | 二维材料层叠体的制造方法及层叠体 |
| US20230054322A1 (en) * | 2021-08-23 | 2023-02-23 | Leslie P. Taylor | Urine indication pad with inbuilt diagnostics for training and indication of potential disease |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2905169A (en) * | 1955-03-10 | 1959-09-22 | Herbert E Nieburgs | Device for cancer detection |
| US2999052A (en) | 1959-03-16 | 1961-09-05 | Miles Lab | Composition for colorimetric test for serum enzymes |
| US3326777A (en) * | 1964-12-10 | 1967-06-20 | Warner Lambert Pharmaceutical | Process for differentiating the isoenzymes of lactic dehydrogenase |
| US3388044A (en) * | 1965-12-07 | 1968-06-11 | Warner Lambert Pharmaceutical | Process for differentiating the isoenzymes of lactic dehydrogenase |
| DE1959410C3 (de) * | 1969-11-26 | 1974-02-28 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Indikator zur Bestimmung der reduzierten Pyridincöenzyme |
| US3663374A (en) * | 1970-08-14 | 1972-05-16 | Geomet | Method and apparatus for quantitating enzyme activity |
| DE2061984C3 (de) | 1970-12-16 | 1974-04-11 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Reagens zur Bestimmung der Lactat-Dehydrogenase im Farbtest |
| US3862010A (en) * | 1972-06-09 | 1975-01-21 | Technicon Instr | Method of heat fractionating ldh into isoenzyme components |
| US3867258A (en) * | 1973-11-08 | 1975-02-18 | American Cyanamid Co | Lactate dehydrogenase test material |
| US4046634A (en) * | 1974-05-28 | 1977-09-06 | Mercer Donald W | Assay of isoenzymes by ion exchange chromatography |
| US4080263A (en) * | 1976-08-11 | 1978-03-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for the rapid quantitative determination of lactate or alanine |
-
1975
- 1975-08-27 YU YU02181/75A patent/YU218175A/xx unknown
- 1975-08-29 AT AT667075A patent/AT351173B/de not_active IP Right Cessation
- 1975-09-01 NL NLAANVRAGE7510277,A patent/NL178086C/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-03 GB GB36351/75A patent/GB1527243A/en not_active Expired
- 1975-09-05 ZA ZA00755704A patent/ZA755704B/xx unknown
- 1975-09-09 IT IT69244/75A patent/IT1155451B/it active
- 1975-09-10 RO RO7583353A patent/RO68447A/ro unknown
- 1975-09-10 IL IL48071A patent/IL48071A/xx unknown
- 1975-09-10 DD DD188274A patent/DD120296A1/xx unknown
- 1975-09-11 SE SE7510130A patent/SE417109B/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 BR BR7505850*A patent/BR7505850A/pt unknown
- 1975-09-11 DK DK406475A patent/DK144659C/da not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 ES ES440870A patent/ES440870A1/es not_active Expired
- 1975-09-11 FI FI752550A patent/FI58943C/fi not_active IP Right Cessation
- 1975-09-11 AU AU84720/75A patent/AU503460B2/en not_active Expired
- 1975-09-11 CA CA235,284A patent/CA1076010A/en not_active Expired
- 1975-09-11 CH CH1178775A patent/CH631209A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-09-12 BE BE159982A patent/BE833348A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-09-12 HU HU75SCHA170A patent/HU171962B/hu unknown
- 1975-09-12 PL PL1975183289A patent/PL98619B1/pl unknown
- 1975-09-12 CS CS756214A patent/CS251752B2/cs unknown
- 1975-09-12 JP JP11079975A patent/JPS5512239B2/ja not_active Expired
- 1975-09-12 FR FR7528099A patent/FR2284882A1/fr active Granted
- 1975-09-12 NO NO753119A patent/NO144929C/no unknown
- 1975-09-12 TR TR19139A patent/TR19139A/xx unknown
- 1975-09-12 IE IE2000/75A patent/IE41901B1/en unknown
- 1975-09-12 SU SU752171403A patent/SU663329A3/ru active
- 1975-09-12 US US05/612,633 patent/US4003795A/en not_active Expired - Lifetime
- 1975-09-12 AR AR260373A patent/AR211523A1/es active
- 1975-10-09 IN IN1960/CAL/1975A patent/IN142896B/en unknown
-
1976
- 1976-09-09 SU SU762405873A patent/SU657732A3/ru active
-
1978
- 1978-07-10 US US05/923,641 patent/US4266022A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-11-15 HK HK798/79A patent/HK79879A/xx unknown
- 1979-11-22 JP JP54150822A patent/JPS5850720B2/ja not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS251752B2 (en) | Method of simultaneous determination of several or all lactate hydrogenase's isoenzymes | |
| US3092465A (en) | Diagnostic test device for blood sugar | |
| Kerpel-Fronius et al. | The use of ferricyanide for the light and electron microscopic demonstration of succinic dehydrogenase activity | |
| KR101821002B1 (ko) | 양호한 건강의 바이오마커를 검출하기 위한 질 표시기 | |
| US4898813A (en) | Catalytic test composition intended to produce a range of colors | |
| US4673654A (en) | Composition for determining peroxidase-like activity of hemoglobin | |
| GB1065526A (en) | Diagnostic compositions and test indicators | |
| US3654180A (en) | Indicator for detecting hydrogen peroxide and peroxidative compounds containing alpha naphthoflavone | |
| NO156506B (no) | Reagens for bestemmelse av et redusert pyridin-nukleotid | |
| Diniz et al. | Release of an acetylcholine-like substance from guinea pig ileum by scorpion venom | |
| Szasz et al. | Creatine kinase in serum: 5. Effect of thiols on isoenzyme activity during storage at various temperatures. | |
| CA2065401C (en) | Very rapid detection of fungal infections | |
| US3042496A (en) | Diagnostic composition | |
| IE61442B1 (en) | Test composition device and method for the visual determination of hydrogen peroxide | |
| EP0028644A1 (en) | Impending ovulation test | |
| EP0030560A1 (en) | Specific impending ovulation indicator | |
| CS274496B2 (en) | Method of affinitive-enzymatic compounds preparation for cholesterol's visul indication | |
| JP4013108B2 (ja) | リパーゼの安定化方法 | |
| GB1560077A (en) | Test composition for the detection or peroxidatively active substances | |
| US4157279A (en) | Process for the determination of at least one of the isoenzymes of lactatedehydrogenase | |
| DK159173B (da) | Fremgangsmaade til paavisning af bloedningsblod i mavesaft og proevesaet og fremkalderoploesning til anvendelse ved fremgangsmaaden | |
| JPS59159798A (ja) | 生体体液成分の測定法 | |
| Buffa et al. | Influence of blood sugar level on the glycolytic activity of human red cells | |
| DE2443741C3 (de) | Verfahren zur gemeinsamen Bestimmung der Isoenzyme 4 und 5 der LDH |