SK285584B6 - Použitie 11-(4-piperidylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[1,2- b]pyridínovej zlúčeniny ako inhibítora farnezyl-proteíntransferázy na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia - Google Patents

Použitie 11-(4-piperidylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[1,2- b]pyridínovej zlúčeniny ako inhibítora farnezyl-proteíntransferázy na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia Download PDF

Info

Publication number
SK285584B6
SK285584B6 SK898-2000A SK8982000A SK285584B6 SK 285584 B6 SK285584 B6 SK 285584B6 SK 8982000 A SK8982000 A SK 8982000A SK 285584 B6 SK285584 B6 SK 285584B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
cancer
compound
mpk
paclitaxel
proliferative disease
Prior art date
Application number
SK898-2000A
Other languages
English (en)
Other versions
SK8982000A3 (en
Inventor
Walter R. Bishop
Joseph J. Catino
Ronald J. Doll
Ashit Ganguly
Viyyoor Girijavallabhan
Paul Kirschmeier
Ming Liu
Loretta L. Nielsen
David L. Cutler
Original Assignee
Schering Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27385940&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SK285584(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Schering Corporation filed Critical Schering Corporation
Publication of SK8982000A3 publication Critical patent/SK8982000A3/sk
Publication of SK285584B6 publication Critical patent/SK285584B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Opísané je použitie lonafarnibu vzorca (I), ako inhibítora farzenyl-proteíntransferázy, na výrobu liečiva na súčasné alebo postupné použitie s antineoplastickým činidlom, výhodne paklitaxelom, a/alebo s rádioterapiou na liečenie proliferačného ochorenia, ako je rakovina pľúc, rakovina podžalúdkovejžľazy, rakovina hrubého čreva, myeloidná leukémia, melanóm, glióm, tyroidná folikulárna rakovina, karcinóm močového mechúra, myelodysplastický syndróm, rakovina prsníka alebo prostaty.

Description

Oblasť techniky
Predkladaný vynález opisuje použitie inhibítora famezyl-proteíntransferázy (FPT) na výrobu liečiva na liečenie pacientov trpiacich proliferačnými ochoreniami, ako je rakovina a nádorové alebo metastázové ochorenia.
Doterajší stav techniky
Onkogény často kódujú proteínové zložky signálnych transdukčných ciest vedúcich k stimulácii bunkového rastu a mitogenézy. Mutácia a/alebo nadmerná expresia niektorých onkogénov je často príčinou bunkovej transformácie a rakovinového ochorenia. Na získanie transformačného potenciálu musí prekurzor ras onkoproteínu podstúpiť famczyláciu cysteínových zvyškov nachádzajúcich sa na karboxylovom konci tetrapeptidu. inhibítory enzýmu katalyzujúceho túto modifikáciu, famezyl-proteíntransferázy, môžu preto mať protinádorové účinky. Mutované, onkogénne formy ras sú často prítomné pri mnohých typoch ľudskej rakoviny, najmä vo viac než 50 % karcinómov hrubého čreva a podžalúdkovej žľazy (Kohl a kol., Science, Vol. 260, 1934 - 1937, (1993)). Pri vzniku nádorov môžu pôsobiť aj iné proteíny než typu ras, ktoré pre biologickú aktivitu takisto vyžadujú famezyláciu.
Medzinárodná patentová prihláška WO92/11034 (uverejnená 9. 7. 1992) opisuje spôsob zvýšenia citlivosti nádoru proti antineoplastickému liečivu ( v prípadoch, keď je nádor proti liečivu rezistentný) súčasným podávaním antineoplastického liečiva a (inter alia) potenciátora všeobecného vzorca:
□k
N X/
N'
I
Y
A, kde prerušovaná čiara predstavuje možnú dvojitú väzbu, X’ je vodík alebo halogén, Y' je vodík, substituovaný karboxylát alebo sulfonyl. Y' je napríklad, medzi iným, COOR', kde R'je C|.6 alkyl alebo substituovaný alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, C7.]2 arylalkyl alebo substituovaný arylalkyl, 2-, 3alebo 4-piperidyl alebo N-substituovaný piperidyl. Y'je ďalej napríklad, medzi iným, SO2R', kde R' je Ci,6 alkyl alebo substituovaný alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, C7.12 arylalkyl alebo substituovaný arylalkyl. Príkladom takýchto potenciátorov sú 1 l-(4-piperídylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[l,2-b]pyridíny, ako je loratadíne. Príkladom antineoplastických liečiv sú vinea alkaloidy, epipodofylotoxíny, antracyklínové antibiotiká, aktínomycín D, plicamycín, puromycín, gramicidín D, taxol, kolchicin, cytochalazín B, emetín, maytanzín, amsacrín. WO92/11034 sa sústreďuje na potenciáciu antineoplastických liečiv mechanizmom inhibície multiplitnej rezistencie proti liečivu.
Vo svetle požiadavky na lepšiu liečbu proliferačných ochorení, najmä rakoviny, sú nové liečebné postupy vítaným prínosom v tejto oblasti techniky. Predkladaný vynález prináša takýto nový liečebný postup.
Podstata vynálezu
Predkladaný vynález sa týka použitia inhibítora farnezyl-proteíntransferázy
(+)-enantiomér na výrobu liečiva na súčasné alebo postupné použitie s antineoplastickým činidlom a/alebo s rádioterapiou na liečenie proliferačného ochorenia.
Proliferačným ochorením sú najmä rôzne typy rakoviny, najmä epiteliálnej rakoviny, napr. rakoviny prostaty, pľúc, prsníkov, rekta, hrubého čreva a podžalúdkovej žľazy. Vo výhodnom uskutočnení sa inhibitor FPT kombinuje s jedným alebo niekoľkými antineoplatickými liečivami, ako je gemcitabín, paclitaxel (Taxoľ*!), 5-fluoruracil (5-FU), cyklofosfamid (Cytoxan*), temozolomid alebo vineristín.
Napríklad vo výhodnom uskutočnení poskytuje predkladaný vynález použitie, v ktorom ochorením je rakovina a ktorý zahŕňa podanie súčasné alebo postupné, účinného množstva inhibítora famezyl-proteíntransferázy (FPT) a gemcitabínu. Vo zvlášť výhodnom vyhotovení je liečený typ rakoviny rakovina podžalúdkovej žľazy.
Podľa iného výhodného vyhotovenia poskytuje predkladaný vynález použitie, v ktorom ochorením je rakovina a ktorý zahŕňa postupné alebo súčasné podanie účinného množstva inhibítora famezyl-proteíntransferázy (FPT) a látky ovplyvňujúcej submikroskopické štruktúry (napr. paclitaxel).
Vo svetle medzinárodnej patentovej prihlášky WO92/11034 predkladaný vynález opisuje súčasné alebo postupné podávanie účinného množstva inhibítora farnezyl-proteíntransferázy (FPT) a antineoplastického liečiva a/alebo rádioterapie na liečenie proliferačného ochorenia, kde FPT inhibítorom je zlúčenina všeobecného vzorca:
kde:
prerušovaná čiara predstavuje možnú dvojitú väzbu;
X' je vodík alebo halogén; a
Y' je vodík, -COOR', kde R’ je C|.12 alkyl alebo substituovaný alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, C7.12 arylalkyl alebo substituovaný arylalkyl, 2-, 3- alebo 4-piperidyl alebo N-substituovaný piperidyl; kde substituenty uvedeného substituovaného C|_i2 alkylu sú volené z amino a substituované amino a substituenty uvedené substituované amino sú volené z C].6 alkylov, substituenty uvedeného substituovaného fenylu a arylu z C7.|2 arylalkylu sú volené z Ci_e alkylov a halogénov a substituenty uvedeného N-substituovaného piperidylu sú Cj.4 alkyl alebo -SO2R', kde R' Cm2 alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, C7.12 arylalkyl alebo substituovaný arylalkyl, kde substituenty uvedeného substituovaného arylu z C7.12 arylalkylu sú volené z C|.6 alkylov a halogénov;
potom antineoplastické liečivo nepatrí do skupiny zahrnujúcej vinea alkaloidy, epipodofylotoxiny, antracyklínové antibiotiká, aktinomycín D, plicamycín, puromycín, gramicidín D, taxol, kolchydín, cytochalazín B, emetín, maytanzin alebo amsacrín.
Predkladaný vynález opisuje použitie inhibítora FPT na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia, najmä rakoviny, kombináciou inhibície FPT (použitím tu opísaných inhibítorov FPT) a postupu terapie rakoviny (chemoterapiou a/alebo rádioterapiou).
Inhibítory FPT sú zlúčeniny, ktoré (i) účinne inhibujú FPT (výhodne nie geranylgeranyl-proteíntransferázu I in vitro)· (ii) blokujú fenotypovú výmenu indukovanou formou transformujúceho H-ras, ktorý je akceptorom famezylu (ale výhodne nie formou transformujúceho H-ras pôsobiaceho ako akceptor geranylu); (iii) blokujú intracelulámu famezyláciu ras a (iv) blokujú abnormálny bunkový rast.
V použití podľa tohto vynálezu sa opisuje postup ovplyvnenia (inhibície) abnormálneho bunkového rastu vrátane transformovaných buniek, u pacienta vyžadujúceho tento typ liečby (napr. cicavca, človeka), súčasným alebo postupným podávaním účinného množstva inhibítora FPT a účinného množstva chemoterapeutika a/alebo rádioterapie. Pod abnormálnym bunkovým rastom sa rozumie bunkový rast, ktorý nepodlieha normálnym regulačným mechanizmom (napr. strata kontaktnej inhibície), ako je abnormálny rast (1) nádorových buniek (nádory) exprimujúcich aktivovaný ras onkogén; (2) rast nádorových buniek, v ktorých bol ras onkogén aktivovaný vplyvom onkogénnej mutácie v inom géne a (3) benígne a malígne bunky iných proliferačných chorôb.
Opísané postupy ovplyvňovania, či inhibície nádorového rastu u pacientov (cicavcov, ľudí), zahrnujú súčasné či postupné podávanie účinného množstva inhibítora FPT a účinného množstva antineoplastického liečiva či rádioterapie. Príkladom nádorov citlivých na tento typ liečby je najmä epiteliálna rakovina, napr. rakovina prostaty, pľúc (napr. pľúcny adenokarcinóm), podžalúdkovej žľazy (napr. pankreatický karcinóm, ako je napr. exokrínny pankreatický karcinóm), prsníkov, hrubého čreva (napr. karcinóm rekta a hrubého čreva, ako je napr. adenokarcinóm a adenóm hrubého čreva), rakovina vaječníkov a karcinóm močového mechúra. Ostatné liečiteľné typy rakoviny zahrnujú melanóm, myeloidnú leukémiu (napr. akútnu myeloidnú leukémiu), sarkómy, tyroidnú folikulámu rakovinu a myelodysplastický syndróm.
Opísané postupy tiež zahrnujú postup ovplyvnenia (inhibície) proliferačného ochorenia, benígneho i maligneho, kde ras proteíny boli chybne aktivované ako následok onkogénnej mutácie iných génov -1, j. gén ras sám osebe nie je mutáciou aktivovaný na onkogénnu formu. Opisuje sa súčasné či postupné podávanie účinného množstva inhibítora FPT a účinného množstva antineoplastického liečiva (a/alebo rádioterapie) pacientovi (cicavcovi, človeku). Príkladom tohto typu ochorenia je napr. benígna proliferačná porucha neurofibromatóza, alebo nádory, kde ras bol aktivovaný následkom mutácie či nadmernej expresie onkogénov tyrozínkinázy napr. (neu, src, abl, lek, lyn, fyn).
Význam použitých termínov: antineoplastické liečivo - chemoterapeutikum účinné proti rakovine, súčasne - (1) súčasne v čase, alebo (2) v rôznom čase v priebehu jedného liečebného programu; a postupne - (1) podanie jednej zo zložiek liečebného postupu ((a) inhibítora FPT alebo (b) antineoplastického liečiva a/alebo rádioterapie) nasledované podaním druhej zložky; po podaní jednej zložky možno okamžite podať druhú, alebo druhá zložka nasleduje po prvej až po účinnom časovom období; účinné časové obdobie je obdobie, potrebné na dosiahnutie maximálneho liečebného účinku z podania prvej zložky.
Chemoterapeutika
Triedy zlúčenín, ktoré sa používajú ako chemoterapeutiká (antineoplastické liečivá) zahrnujú alkylačné činidlá, antimetabolity, prírodné produkty a ich deriváty, hormóny a steroidy (vrátane syntetických analógov) a syntetické látky. Príklady zlúčenín týchto tried sú uvedené ďalej.
Alkylačné činidlá (vrátane dusíkatých horčíc, etylénimínových derivátov, alkylsulfonátov, nitrózomočovín a triazénov): uracilová horčica, chlórmetín, cyklofosfamid (Cytoxan*), ifosfamid, melfalan, chlorambucil, pipobroman, trietylénmelamín, trietyléntiofosforamid, busulfan, carmustin, lomustin, streptozocín, dacarbazín a temozolomid.
Antimetabolity (vrátane antagonistov kyseliny listovej, pyrimidínových a purinových analógov a inhibítorov adenozíndcaminázy): metotrexat, 5-fluorouracil, floxuridín, cytarabín, 6-merkaptopurín, 6-tioguanín, fludarabinfosfát, pentostatín a gemcitabín.
Prírodné produkty a ich deriváty (vrátane vinea alkaloidov, protinádorových antibiotík, enzýmov, lymfokinov a epipodofylotoxínov): vinblastín, vineristín, vindesín, bleomycín, dactinomycín, daunorubicín, doxorubicín, epirubicín, idarubicín, paclitaxel (paclitaxel je komerčne dostupný ako Taxol*· a je podrobnejšie opísaný v časti nazvanej „Látky ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry“), mitramycín, deoxykoformycin, mitomycín-C, L-asparagináza, interferóny (najmä IFN-a), etoposid a teniposid.
Hormóny a steroidy (vrátane syntetických analógov): 17a-etinylestradiol, dietylstilbestrol, testosterón, prednisón, fluoxymesterón, dromostanolónpropionát, testolaktón, megestrolacetát, tamoxifén, metylprednisolón, metyltestosterón, prednisolón, triamcinolon, chlorotrianizén, hydroxyprogesterón, aminoglutetimid, estramustín, medroxyprogesterónacetát, leuprolid, flutamid, toremifén, zoladex.
Syntetické látky (vrátane anorganických komplexov, ako sú platinové koordinačné komplexy): cisplatina, karboplatina, hydroxymočovina, amsacrín, prokarbazín, mitotan, mitoxantrón, levamisol a hexametylmelamín.
Postupy bezpečnej a účinnej administrácie väčšiny týchto chemoterapeutík sú odborníkom v odbore známe. Ich podávanie je tiež opísané v odbornej literatúre. Napríklad administrácii mnohých týchto chemoterapeutík sa venuje „Physicians' Desk Refcrencc“ (PDR), napr. 1996 edition (Medical Economics Company, Montvale, NJ 07645-1742, USA); uvádza sa v prílohe medzi odkazmi.
Látky ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry
Ako bolo uvedené, predkladaný vynález tiež poskytuje postupy liečby poškodených buniek kontaktom s bunkami obsahujúcimi inhibitor FPT a látku ovplyvňujúcu submikroskopické štruktúry (napr. paclitaxel, derivát paclitaxelu alebo zlúčenina paclitaxelu). Látka, ovplyvňujúca submikroskopické štruktúry je zlúčenina, zasahujúca do bunkovej mitózy, t. j. majúca antimitotické účinky, vďaka ovplyvňo3 vaniu tvorby a funkcie submikroskopických štruktúr. Tieto činidlá sú napr. stabilizátory submikroskopických štruktúr alebo činidlá narušujúce ich tvorbu.
Látky ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry vhodné pre predkladaný vynález sú odborníkom v odbore známe a zahrnujú napr. allokolchicín (NSC 757), kolchicínové deriváty (napr. NSC 334110), dolastatín 10 (NSC 376128), maytansín (NSC 153858), rhizoxín (NSC 332598), paclitaxel (Taxol®, NSC 125973), deriváty Taxolu® (napr. deriváty NSC 608832), tiokolchicin (NSC 361792), tritylcysteín (NSC 83265), vinblastínsulfát (NSC 49842), vincristínsulfát (NSC 67574), epothilon A, epothilon a discodermolid (pozri Service, (1996) Science, 274“2009), estramustín, nocodazol, MAP4 a pod.
Príklady týchto látok sú taktiež uvedené v odbornej a patentovej literatúre, pozri napr. Bulinski (1997), J. Celí Sci. 110: 3055 - 3064; Panda (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94: 10560 - 10564; Mulhradt (1997) Cancer Res. 57: 3344 - 3346; Nicolaou (1997) Náture 387: 268 - 272; Velasquez (1997) Mol. Biol. Celí 8: 973 - 985; Panda (1996) J. Biol. Chem. 271: 29807 - 29812.
Zvlášť výhodné látky sú zlúčeniny s podobnými účinkami ako paclitaxel. Ide o paclitaxel, jeho deriváty, látky podobné a analóg paclitaxelu. Paclitaxel a jeho analóg sú komerčne dostupné. Ďalej spôsoby prípravy paclitaxelových derivátov a analógov sú v oblasti techniky známe, pozri napr. U.S. patenty 5 569 729; 5 565 478; 5 530 020;
527 924: 5 508 447; 5 489 589; 5 488 116; 5 484 809;
478 854; 5 478 736; 5 475 120; 5 468 769; 5 461 169;
440 057; 5 422 364; 5 411 984; 5 405 972 a 5 296 506.
Tu uvádzaný termín „paclitaxel“ sa týka liečiva komerčne dostupného pod označením Taxol® (NSC číslo: 125973). Taxol® inhibuje replikáciu eukariotických buniek zvýšením polymerizácie tubulínových skupín na stabilizované submikroskopické zväzky, ktoré nie sú schopné reorganizácie do štruktúr potrebných pre mitózu. Z mnohých dostupných chemoterapeutík si paclitaxel získal pozornosť tým, že bol účinný v klinických testoch proti nádorom vzdorujúcim chemoterapii vrátane nádorov vaječníkov a mliečnej žľazy (Hawkins (1992) Oncology 6: 17 - 23; Horwitz (1992) Trends Pharmacol. Sci. 13: 134 - 146; Rowinsky (1990) J. Natl. Canc. Inst. 82: 1247 - 1259).
Ďalšie látky ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry možno odhadnúť z mnohých takýchto publikovaných testov, ako sú napr. poloautomatizovaný test na stanovenie tubulín-polymerizačnej aktivity analógov paclitaxelu v kombinácii s bunkovým testom, ktorý meria potenciál týchto zlúčenín pri blokovaní mitózy (pozri Lopes (1997) Cancer Chemothcr. Pharmacol 41: 37 - 47).
Všeobecne sa aktivita testovanej zlúčeniny stanoví kontaktom s bunkou, ktorá túto zlúčeninu obsahuje a stanovením, či bol alebo nebol prerušený jej bunkový cyklus, najmä inhibovaním mitózy. Inhibíciu mitózy môže spôsobiť narušenie mitotického aparátu, napr. prerušenie normálnej tvorby vretien. Bunky, pri ktorých bola prerušená mitóza, možno charakterizovať podľa zmenených morfologických znakov (napr. zhustenie submikroskopických štruktúr, zvýšený počet chromozómov atď.).
Vo výhodnom vyhotovení zlúčeniny s možnou tubulín-polymerizačnou aktivitou možno vyhľadávať in vitro. Vo výhodnom vyhotovení sa zlúčeniny testujú z hľadiska inhibície proliferácie a'alebo zmenenej bunkovej morfológie na bunkách WR21 (odvodené z myšacej línie 69-2 wap-ras), najmä sa sleduje zhustenie submikroskopických štruktúr. Vyhľadávanie in vivo pozitívnych zlúčenín možno uskutočňovať na laboratórnych myškách infikovaných nádoro vými bunkami WR21. Podrobné protokoly vypracoval Porter (1995) Lab. Anim. Sci. 45(2): 145-150.
Ďalšie postupy vyhľadávania zlúčenín s požadovanou aktivitou sú odborníkom v odbore dobre známe. Typicky takéto testy zahrnujú testy inhibície zhlukovania a/alebo rozkladania submikroskopických štruktúr. Testy inhibície zhlukovania submikroskopických štruktúr sú opísané, napr. Gaskin a kol. (1974) J. Molec. Biol. 89: 737 - 758. U.S. patent 5 569 720 tiež opisuje testy in vitro i in vivo zlúčenín s paclitaxelovou aktivitou.
Postupy bezpečnej a účinnej administrácie týchto uvedených látok ovplyvňujúcich submikroskopické štruktúry, sú odborníkom v odbore známe. Napríklad administrácii mnohých týchto chemoterapeutík sa venuje „Physicians' Desk Reference“ (PDR), napr. 1996 edition (Medical Economics Company, Montvale, NJ 07645-1742, USA); uvedené v prílohe medzi odkazmi.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Inhibítory FPT, zlúčeniny na obr. 1 až 38, (niekedy označované ako zlúčenina X) sú látky všeobecného vzorca:
(+)-enantiomér
Obr. 1 až 15 ukazujú tri príklady, kde bol pozorovaný jasný synergický efekt. Podobné výsledky boli pozorované na modeloch DLD-1 hrubé črevo, HTB177 pľúca, PA-1 vaječníky, LNCaP prostata, AsPC-1 podžalúdková žľaza a PANC-1 podžalúdková žľaza (údaje nie sú uvedené). Jasný antagonizmus bol pozorovaný na jednej bunkovej línii MDA-MB-231 (obr. 16 až 20). Zmiešané výsledky boli pozorované u MDA-MB-468 (obr. 21 až 35).
Obr. 1 konkrétne ukazuje izobologram pre MiaPaCa2 pankreatické nádorové bunky liečené FPT inhibítorom a paclitaxelom in vitro. Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi y je množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1. Ak leží experimentálna krivka pod priamou diagonálou, ako je tomu v predkladanom príklade, ide o synergickú interakciu. (Pozri napr. O'ConnelI, M.A. a Wolfinger, R.D., J. Computational and Graphical Statistics 6: 224 - 241, 1997 a Berenbaum, M.C., Pharmacol. Rev. 41: 93 - 141, 1989).
Obr. 2 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 1.
Obr. 3 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek), pre bunky MiaPaCa2. Na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 4 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x), pre bunky MiaPaCa2, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 5 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MiaPaCa2, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 6 ukazuje izobologram pre prostatické nádorové bunky DU-145 liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi y je množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1.
Obr. 7 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 6.
Obr. 8 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek), pre bunky DU-145. Na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 9 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x), pre bunky DU-145, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 10 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky DU-145, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 11 ukazuje izobologram pre myšacie nádorové bunky MidT#2-l liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi y je množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1.
Obr. 12 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 11.
Obr. 13 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek) pre bunky MidT#2-l. Na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 14 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x), pre bunky MidT#2-l, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 15 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MidT#2-l, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 16 ukazuje izobologram pre prsnikové nádorové bunky MDA-MB-231 liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi yje množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ'.
Obr. 17 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 16.
Obr. 18 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek) pre bunky MDA-MB231. Na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 19 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x) pre bunky MDA-MB-231, na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 20 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MDA-MB-231, na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 21 ukazuje izobologram pre prsnikové nádorové bunky MDA-MB-468, štúdia#1, liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. (Tu je uvedený príklad E). Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi yje množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1.
Obr. 22 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 21.
Obr. 23 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek) pre bunky MDA-MB-468. Na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 24 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 25 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 26 ukazuje izobologram pre prsnikové nádorové bunky MDA-MB-468, štúdia #2, liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. (Tu uvedený príklad F). Na osi x je množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi y je množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1.
Obr. 27 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 26.
Obr. 28 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek) pre bunky MDA-MB-468. Na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 29 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek vyjadrené v percentách.
Obr. 30 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 31 ukazuje izobologram pre prsnikové nádorové bunky MDA-MB-468, štúdia #3, liečené inhibítorom FPT a paclitaxelom in vitro. (Tu uvedený príklad F). Na osi x jc množstvo paclitaxelu vyjadrené v ng/ml. Na osi yje množstvo zlúčeniny X v pmol.ľ1.
Obr. 32 ukazuje trojrozmerný model proliferácie buniek, z ktorého bol odvodený obr. 31.
Obr. 33 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre interakciu paclitaxelu (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) a zlúčeniny X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1, ako je naznačené vpravo od kriviek) pre bunky MDA-MB-468. Na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 34 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre zlúčeninu X (dávka vyjadrená v pmol.ľ1 na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi y je množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 35 ukazuje krivku odpovede na dávku pred štatistickou analýzou pre paclitaxel (dávka vyjadrená v ng/ml na osi x) pre bunky MDA-MB-468, na osi yje množstvo prežívajúcich buniek v percentách.
Obr. 36 ilustruje graficky údaje z tabuľky 2, ktorá bude uvedená neskôr v tomto opise. Os Y (zvislá os, 0-1500) predstavuje objem nádoru v kubických milimetroch (mm3), 25. deň. Os X (vodorovná os, 1-8) predstavuje podávanú látku. Čísla 1 - 8 predstavujú: 1 je nosič; 2 je inhibítor FPT (zlúčenina X v tabuľke 2); 3 je Cytoxan; 4 je 5-FU; 5 je vineristin; 6 je inhibítor FPT plus Cytoxan; 7 je inhibítor FPT plus 5-FU a 8 je inhibítor FPT plus vineristin. Obr. 36 ukazuje experimenty, kde v deň 0 boli laboratórnym my5 šiam subkutánne implantované bunky HTB177. Inhibítor FPT bol podávaný perorálne v dávke 40 mpk, štyrikrát denne, 1 - 26 dní, čo viedlo k 68 % inhĺbícii rastu nádoru. Chemoterapeutiká boli podávané intraperitoneálne 13. deň. Pri podaní v jednej dávke viedlo cytotoxikum k 9 %, 28 % a 7 % inhĺbícii u Cytoxanu (cyklofosfamid) (200 mpk), 5-fluorouracilu (5-FU) (50 mpk) a vincristínu (1 mpk). Ak bol inhibítor FPT, zlúčenina X (40 mpk), podávaný v kombinácii s cytotoxikami, inhibícia nádorového rastu dosiahla hodnosť 81 %, 80 % a 80 % u kombinácií s Cytoxanom, 5-FU a vincristínom. Tieto výsledky naznačujú zvýšenú účinnosť inhibície nádorového rastu použitím kombinácie inhibítora FPT s cytotoxikom, v porovnaní s použitím samotných látok. Podobné výsledky boli dosiahnuté pri podávaní inhibítora FPT dvakrát denne. Údaje predstavované v stĺpci 6, 7 a 8 na obr. 36 majú hodnotu P<0,05, ak sa porovnajú s liečbou jednou zlúčeninou.
Obr. 37 graficky znázorňuje regresiu nádoru. Os Y (zvislá, 0-200) predstavuje objem nádoru v kubických milimetroch (mm3). Os X (vodorovná os, 1-7) predstavuje podávanú látku. Čísla 1 - 7 predstavujú: 1 je 20 % HPBCD (nosič); 2 je inhibítor FPT, zlúčenina X, pri dávkovaní 2,5 mpk; 3 je inhibítor FPT, zlúčenina X, pri dávkovaní mpk; 4 je inhibítor FPT, zlúčenina X, pri dávkovaní mpk; 5 je inhibítor FPT, zlúčenina X, pri dávkovaní mpk; 6 je inhibítor FPT, zlúčenina X, pri dávkovaní mpk a Cytoxan pri dávkovaní 200 mpk; 7 je Cytoxan pri dávkovaní 200 mpk. Počet dni (0, 7, 14, 21 a 28) je vyjadrený šrafovaním, ako je označené v legende grafu v pravej homej časti na obr. 37. Údaje grafu 37 boli získané vyhodnotením pôsobenia inhibítora FPT na transgénnom myšacom modeli, v ktorom bol exprimovaný aktivovaný H-Ras onkogén z promótora kyslej srvátky (Nilsen a kol. Evaluation of the wap-ras Transgenic Mouse as a Model Systém for Testing Anticancer Drugs, Cancer Research 52, 3733 - 3738, July 1, 1992). Pretože transgén je umiestnený na chromozóme Y, transgénne samce reprodukovane vyvíjali nádory (na prsnej a slinnej žľaze) vo veku 1,5 až 2 mesiace. Terapeutické štúdie, vykonávané na tomto modeli, začínali po vzniku hmatateľných nádorov (stredná veľkosť nádoru pri začatí liečby bola 200 mm3). Myšiam boli podávané štyrikrát denne perorálne dávky 2, 5, 10, 20 alebo 30 mpk testovaného inhibítora FPT počas 4 týždňov. Niektoré myši boli tiež liečené intraperitoneálnou injekciou Cytoxanu (cyklofosfamid) v dávke 200 mpk. Krivky rastu pre rôzne liečené skupiny sú uvedené v grafe 37. V kontrolnej skupine, ktorá dostávala nosič, narástli nádory počas experimentu na objem >1500 mm3. Samotný Cytoxan viedol k takmer úplnému zastaveniu rastu nádoru, nie však k jeho regresii. Inhibítor FPT v dávkach 20 a 30 mpk viedol k významnej regresii nádoru. Inhibítor FPT v dávkach 2,5 a 10 mpk znížil rýchlosť nádorového rastu, ale neviedol k jeho regresii. S prekvapením bolo zistené, že hoci samotný Cytoxan, ani 10 mpk inhibítora FPT k regresii nádoru neviedli, pri kombinácii týchto látok došlo k významnej regresii nádoru. To znamená, že inhibítor FPT v kombinácii so štandardným chemoterapeutikom, ako je Cytoxan, spôsobuje i pri nižšej dávke inhibítora FPT významnú nádorovú reakciu.
Obr. 38 znázorňuje vplyv kombinačnej terapie (na transgénnom modeli wap-ras) použitím zlúčeniny X a paclitaxelu na veľkosť nádoru (stredná veľkosť nádoru vyjadrená v mm3 na osi y) v závislosti od trvania terapie. Krivka označená prázdnymi kosoštvorcami predstavuje samotný paclitaxel (5 mpk), prázdne kolieska označujú samotnú zlúčeninu X (20 mpk), čierne kosoštvorce označujú kombináciu paclitaxelu (5 mpk) a zlúčeniny X (20 mpk) a čierne štvorce označujú samotný nosič bez liečiva.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklady A až G testujú účinok in vitro kombinácie paclitaxelu s nasledujúcimi inhibítormi FPT (označovanými ako „zlúčenina X“ v uvedenej tabuľke):
Ako už bolo spomenuté, obr. 1 až 15 ukazujú tri príklady synergického účinku. Tieto tri príklady sú ďalej diskutované ako: príklady A až C. Podobné výsledky boli pozorované u: DLD-1 hrubé črevo, HTB 177 pľúca, PA-1 vaječník, LNCaP prostata, AsPC-1 podžalúdková žľaza a PANC-1 model podžalúdkovej žľazy (zhrnuté v uvedenej tabuľke; údaje neuvedené). Jasný antagonizmus bol pozorovaný pri jednej bunkovej línii MDA-MB-231 (obr. 16 - 20, príklad D). Zmiešané výsledky boli pozorované pri MDA-MB-468 (obr. 21 - 35, príklady E až G).
Analýza interakcií liečiv medzi zlúčeninou X a paclitaxelom in vitro
Bunková línia Typ nádoru p53 Proteín Ras Mutácia Izobolová analýza
DLD-1 Ľudský kolorektálny Mutant K-ras Synergia (p=0,0592)
NCI-H460 Ľudské pľúca Divoký typ K-ras Svnergia (p=0,0309)
MDA-MB-468 Ľudský prsník Mutant Divoký typ Antagon. (p=0,0001)
MDA-MB-468 Ľudský prsník Mutant Divoký typ Synergia (p=0,0237)
MDA-MB-468 Ľudský prsník Mutant Divoký typ Synergia (p=0,0094)
MDA-MB-468 Ľudský prsník Mutant Mutant Antagon. (p=0,0093)
MidTč. 2-1 Myšacia mliečna žľ. 7 7 Synergia (p=0,011)
PA-1 Ľudský vaječník Divoký typ K-ras Synergia (p=0,0122)
DU-145 Ľudská prostata Mutant Divoký typ Synergia (p=O,O238)
LNCaP Ľudská prostata Divoký typ Divoký typ Synergia (p=0,0021)
AsPC-1 Ľudská podžalúd. žľ. Null K-ras Synergia (p=0,0328)
MiaPaCa2 Ľudská podžalúd. žľ. Mutant K-ras Synergia (p=0,0002)
PANC-1 Ľudská podžalúd. žľ. Mutant K-ras Synergia (p=0,0011)
Pre nasledujúce príklady bola zlúčenina X rozpustená v 100 % DMSO. Konečná koncentrácia DMSO v bunkách bola <0,02 DMSO v bunkovom kultivačnom médiu. V prípade paclitaxelu bol zásobný paclitaxel rozpustený v 100 % etanole. Konečná koncentrácia etanolu bola <0,001 v bunkovom kultivačnom médiu.
Príklad A: Zlúčenina X pôsobí synergicky s paclitaxelom pri inhibicii proliferácie MiaPaCa2 pankreatických nádorových buniek.
Postup: MiaPaCa2 pankreatické nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechané usadiť sa 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu (pozri Mosmann, T. (1983) J. Immunol. Meth., 65: 55 - 63). Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (pozri O'Connell, M.A., Wolfingera, R.D., J. Computational and Graphical Stalistics 6: 224 - 241, 1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok (p=0,0002). Obr. 1 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 2 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 1. Obr. 3, 4 a 5 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou.
Príklad B: Zlúčenina X pôsobí synergicky s paclitaxelom pri inhibicii proliferácie p53raĽt DU-145 prostatických nádorových buniek
Postup: p53mut DU-145 prostatické nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok <p=0,0238). Obr. 6 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 7 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 6. Obr. 8, 9 a 10 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou.
Príklad C: Zlúčenina X pôsobí synergicky s paclitaxelom pri inhibicii proliferácie MidT#2-l nádorových buniek z mliečnej žľazy transgénnych myší
Postup: MidT#2-l myšacie nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., opláchnuté, potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok (p=0,0110). Obr. 11 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 12 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr.
11. Obr. 13, 14 a 15 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou.
Príklad D: Zlúčenina X a paclitaxel majú antagonistický účinok v p53m' MDA-MB-231 prsníkových nádorových bunkách
Postup: p53mut MDA-MB-231 prsníkové nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., opláchnuté, potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú antagonistický účinok (p=0,0093). Obr. 16 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 17 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 16. Obr. 18, 19 a 20 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou.
Príklady E, F a G: Štúdie pôsobenia zlúčeniny X a paclitaxelu v p53mut MDA-MB-468 prsníkových nádorových bunkách
V nasledujúcich 3 príkladoch (E až G) bol študovaný účinok pôsobenia zlúčeniny X a paclitaxelu na p53mut MDA-MB-468 prsníkových nádorových buniek. V dvoch príkladoch (F a G) mali zlúčenina X a paclitaxel synergickú interakciu, v príklade E bol pozorovaný antagonizmus. Bunky v príkladoch F a G mali vyššiu rýchlosť proliferácie než bunky v príklade E, čo mohlo byť ovplyvnené výťažkom, hoci krivky izoboly boli atypické vo všetkých troch štúdiách s p53mut MDA-MB-468 prsníkovými nádorovými bunkami.
Údaje, vychádzajúce z kombinácie konkrétnej peptidomimetickej FTI zlúčeniny a niekoľkých rôznych chemoterapeutík (napr. taxol (paclitaxel), doxorubicín, cisplatina a vinblastin) na bunkové línie prsníkových nádorových buniek MDA-MB-468 a MCF-7 sú prezentované v Moasser, M.M. a kol. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 1369 - 1374, 1998. Výsledky ďalších pokusov kombinácie FTI zlúčeniny s taxolom sú uvedené v Moasserovej publikácii (údaje neuvedené) pre prsníkové nádorové bunkové línie T47D, MDA-MB-231 a MCF-7 a pre prostatické nádorové bunky DU-145. Ďalšie uvedené výsledky (údaje neuvedené) sa týkali pôsobenia fluóruracilu v prsníkových nádorových bunkách.
Príklad E: Zlúčenina X a paclitaxel majú antagonistický účinok v p53mut MDA-MB-231 prsníkových nádorových bunkách (štúdia č. 1)
Postup: p53mul MDA-MB-231 prsníkové nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., opláchnuté, potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú antagonistický účinok (p=0,0001). Obr. 21 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 22 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 21. Obr. 23, 24 a 25 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou.
Príklad F: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok v p53mut MDA-MB-231 prsníkových nádorových bunkách (štúdia č. 2)
Postup: : p53mut MDA-MB-231 prsníkové nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., opláchnuté, potom bola pridaná zlú7 cenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok (p=0,0237). Obr. 26 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 27 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 26. Obr. 28, 29 a 30 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou. Bunky v tejto štúdii mali vyššiu rýchlosť proliferácie než bunky v predchádzajúcej štúdii (príklad E), čo môže byť ovplyvnené výťažkom, hoci krivky izoboly sú v oboch štúdiách atypické.
Príklad G: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok v p53rauI MDA-MB-231 prsníkových nádorových bunkách (štúdia č. 3)
Postup: p53mut MDA-MB-231 prsníkové nádorové bunky boli vložené po alikvotoch do kultivačných jamiek a nechali sa usadiť 3 hodiny. Jamky boli inkubované s paclitaxelom 4 hod., opláchnuté, potom bola pridaná zlúčenina X a inkubácia pokračovala 7 dní. Proliferácia buniek bola kvantifikovaná pomocou MTT Mosmannovho testu. Údaje boli analyzované postupom Thin Plate Spline podľa O'Connella a Wolfingera (1997).
Výsledky: Zlúčenina X a paclitaxel majú synergický účinok (p=0,0094). Obr. 31 ukazuje Izobolovú analýzu na interakciu týchto liečiv, obr. 32 ukazuje trojrozmerný model bunkovej proliferácie, z ktorého bol odvodený obr. 31. Obr. 33, 34 a 35 ukazujú krivku dávkovej odpovede pred štatistickou analýzou. Podobne ako v príklade F, bunky v tejto štúdii mali vyššiu rýchlosť proliferácie než bunky v predchádzajúcej štúdii (príklad E), čo môže byť ovplyvnené výťažkom, hoci krivky izoboly sú vo všetkých týchto štúdiách na p53mut MDA-MB-231 prsníkových nádorových bunkách atypické.
Príklad H: kombinačná terapia in vivo - B I. D.
Účinok in vivo kombinačnej terapie FPT inhibítora (označovaného ako „zlúčenina X“ v uvedených tabuľkách)
s paclitaxelom na HTB 177 xenograftoch (NCI-H460, ľudský pľúcny karcinóm) pri dávkovaní dvakrát denne.
Boli použité athymické nu/nu myšacie samice 5 - 6 týždňov staré. Nultý deň bolo subkutánne naočkované 120 myšiam do boku 3 x 106 buniek HTB 177. Nasleduje prehľad skupín:
Skupina 1 bez liečby 10 myší
Skupina 2 kontrola nosiča p.o. 10 myší
Skupina 3 zlúč. X, 80 mpk,'dávka p.o. 10 myší
Skupina 4 zlúč. X, 20 mpk/dávka p.o. 10 myší
Skupina 5 paclitaxel, 20 mpk/dávka i.p. 10 myší
Skupina 6 paclitaxel, 5 mpk/dávka i.p. 10 myší
Skupina 7 zlúč. X, 80 mpk/dávka
& paclitaxel, 20 mpk/dávka 10 myší
Skupina 8 zlúč. X, 80 mpk/dávka
& paclitaxel, 5 mpk/dávka 10 myší
Skupina 9 zlúč. X, 20 mpk/dávka
& paclitaxel. 20 mpk/dávka 10 myší
Skupina lOzlúč. X, 20 mpk/dávka
& paclitaxel, 5 mpk/dávka 10 myší
Skupina 11 kontrola nosiča 11 p.o. & i.p. 10 myší
Prípravok: Zlúčenina pre skupiny 3, 4, 7, 8, 9 a 10 bola rozpustená v 20 % hydroxypropylbetacyklodextranc (nosič I). Dávkový objem zlúčeniny X bol 0,2 ml roztoku. Paclitaxel bol rozpustený v zriedenom roztoku etanol/cremofor EL (nosič II) a i.p. dávka roztoku paclitaxelu bola 0,1 ml.
Dávkovací roztok 80 mpk zlúčeniny X bol pripravený pridaním 17 ml 20 % HPBCD do 50 ml skúmavky obsahujúcej 136 mg zlúčeniny X na rozpustenie látky. Zmes bola sonikovaná až do úplného rozpustenia.
Dávkovací roztok 20mpk bol pripravený vnesením 2 ml roztoku 80 mpk do 15 ml skúmavky a pridaním 6 ml 20 % HPBCD, zmes bola miešaná na vortexe.
Protokol: Nádorové bunky boli naočkované 120 myšiam nultý deň ráno, myši boli zvážené, randomizované a označené na uškách. Liečba začala v 7:30 4. deň. Zvieratá skupín 21, 3, 4, 7, 8, 9, 10 a 11 boli dávkované p.o., B.I.D. zlúčeninou X alebo roztokom nosiča I (HPBCD) o 7:30 a 19:30 7 dní v týždni. Skupiny 5, 6, 7, 8, 9, 10 a 11 boli dávkované i.p. 4. až 7. deň paclitaxelom alebo roztokom nosiča II. Rast nádoru bol kvantifikovaný po zmeraní objemu nádoru 7. až 14. deň.
Výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 1:
Tabuľka 1
Skupina Dni liečby Stredný objem nádoru Priemerný objem nádoru Štandardná odchýlka Priemerná inhibícia
1. bez liečby 7 14 114,58 632,81 124,36 718,82 37,32 338,44
2. nosič 7 14 130,29 738,8 156,17 760,87 62,78 379,45
3. zlúčenina X 7 32,83 34,84 13,44 95 %
(80 mpk) 14 28,08 34,68 27,95
4. zlúčenina X 7 95,61 90,55 28,56 52%
(20 mpk) 14 357,72 364,59 114,83
5. paclitaxel X 7 37,75 48,52 20,34 88 %
(20 mpk) 14 75,19 91,61 57,08
6. paclitaxel X 7 78,93 91,59 35,14 61 %
(5 mpk) 14 178,73 298,20 280,59
Tabuľka 1 (pokračovanie)
7. zlúčenina X (80 mpk) & paclitaxel (20 mpk) 7 14 23,88 0 23,63 0 6,58 0 100%
8. zlúčenina X (80 mpk) & paclitaxel (5 mpk) 7 14 32,76 23,60 33,19 30,75 27 72,78 95%
9. zlúčenina X (20 mpk) & paclitaxel (20 mpk) 7 14 30,03 48,32 32,49 65,18 11 36,18 91 %
10. zlúčenina X (20 mpk) & paclitaxel (5 mpk) 7 14 38,49 97,65 40,37 103,25 9,66 46,19 86%
11. etanol/ cremafor 7 14 194,77 1147,61 190,48 1080,01 61,81 632,87
Z tabuľky 1 jasne vyplýva, že kým samotná zlúčenina X pri dávke 20 mpk vykazovala len 52 % priemernú inhibíciu (pokus 4) a samotný paclitaxel pri dávke 5 mpk vykazoval len 61 % priemernú inhibíciu (pokus 6), kombinácia zlúčeniny X pri 20 mpk plus paclitaxelu 5 mpk viedla k 86 % priemernej inhibícii (viď pokus 10).
Príklad J: kombinačná terapia in vivo - Q. I. D.
Účinok in vivo kombinačnej terapie FPT inhibítora (označovaného ako „zlúčenina X“ v tabuľke 2)
(+)-enantiomér s chemotcrapeutikami na HTB 177 xenograftoch (NCI-H460, ľudský pľúcny karcinóm) pri dávkovaní štyrikrát denne.
Boli použité athymické nu/nu myšacie samice 5-6 týždňové. Nultý deň bolo subkutánne naočkované 170 myšiam do boku 3 x 106 buniek HTB 177. Myši boli zvážené, náhodne rozdelené do 17 skupín po desiatich. Liečba začala o 6:00 L deň. Zvieratá skupín 2, 3, 4, 5, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 a 17 boli dávkované p.o,, q.i.d. o 6, 12, 18 a 24 hodine, 7 dní v týždni počas 4 týždňov. Myšiam v skupinách 6 a 17 bolo raz podané i.p. indikované cytotoxikum (pozri tabuľka 1), 13. deň. Primáme nádory boli merané dvakrát týždenne. Výsledky sú uvedené v tabuľke 2.
Tabuľka 2
Skupina Liečba Priemerná inhibícia (%)
1 Kontrola bez liečby
2 Nosič, 20 % HPBCD, QID, 1 .-26. deň, p.o.
3 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 -26. deň, p.o. 68
4 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 -12. deň, p.o. Nosič, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 64
5 Nosič, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 25
6 Cytoxan, 200 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 9
7 5-FU, 50 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 28
8 Vincristin, 1 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 7
9 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 .-26. deň, p.o. Cytoxan, 200 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 81
10 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 .-26. deň, p.o. 5-FU, 50 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 80
11 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 .-26. deň, p.o. Vincristin, 1 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. 80
12 Nosič, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. Cytoxan, 200 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 36
13 Nosič, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. 5-FU, 50 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 25
14 Nosič, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. Vincristin, 1 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 12
15 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 .-12. deň, p.o. Cytoxan, 200 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Nosič, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 83
16 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1 .-12. deň, p.o. 5-FU, 50 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Nosič, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 68
17 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. Vincristin, 1 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Nosič, 40 mpk, QID, 13.-26.deň, p.o. 85
Zlúčenina X (FPT inhibítor) pre skupiny 3, 4, 5, 9 ,10, 11, 12, 13,14, 15, 16 a 17 bola rozpustená v 20 % hydroxypropylbetacyklodextrane (HPBCD). Cytoxan, 5-FU a vineristin boli rozpustené v sterilnej vode.
Dávkovací roztok 40 mpk zlúčeniny X bol pripravený pridaním 39,6 ml 20 % HPBCD do 50 ml skúmavky obsahujúcej 320 mg zlúčeniny X na rozpustenie zlúčeniny. Zmes bola sonikovaná až do úplného rozpustenia. Alikvotné roztoky boli pripravené skôr pre požadovaný počet dávok na 24 hodín. Alikvoty 20 % HPBCD boli pripravené pre požadovaný počet dávok spolu s dávkami pre kontroly s nosičom v ten deň, keď mali byť podané.
Dávkovací roztok 20 mpk bol pripravený vnesením 2 ml roztoku 80 mpk do 15 ml skúmavky, pridaním 6 ml 40 % HPBCD a miešaním roztoku na vortexe.
Príklad K: kombinačná terapia in vivo - B. I. D.
Účinok in vivo kombinačnej terapie FPT inhibítora (označovaného ako „zlúčeninaX“ v tabuľke 3)
(+)-enantiomér s chemoterapeutikom Cytoxan na HTB 177 xenograftoch (NCI-H460, ľudský pľúcny karcinóm) pri dávkovaní dvakrát denne.
Boli použité athymické nu/nu myšacie samice 5 - 6 týždňové. Nultý deň bolo subkutánne naočkovaných 100 myšiam do boku, 3 x 106 buniek HTB 177. Myši boli zvážené, náhodne rozdelené do 10 skupín po desiatich. Liečba začala o 8:00 1. deň. Zvieratá skupín 2, 5, 6, 7, 8, 9 a 10 boli dávkované p.o., b.i.d. o 8 a 20 hod., 7 dni v týždni počas 4 týždňov. Myši v skupinách 3, 4, 6, 7, 9 a 10 boli dávkované i.p. naznačenou dávkou Cytoxanu (pozri tabuľka 2) 5.,
12. a 19. deň. Primáme nádory boli merané jedenkrát týždenne. Výsledky sú uvedené v tabuľke 3.
Tabuľka 3
Skupina Liečba Priemerná inhibícia (%)
1 Kontrola bez liečby
2 Nosič, 40 % HPBCD, BID, p.o.
3 Cytoxan, 200 mpk, BID, 5., 12. a 19. deň, i.p. 75,38
4 Cytoxan, 100 mpk, BID, 5., 12. a 19. deň, i.p. 61,87
5 Zlúčenina X, 80 mpk, BID, p.o. 74,77
6 Zlúčenina X, 80 mpk, BID, p.o. Cytoxan, 200 mpk, BID, i.p. 89,29
7 Zlúčenina X, 80 mpk, BID, p.o. Cytoxan, 100 mpk, BID, i.p. 89,32
8 Zlúčenina X, 20 mpk, BID, p.o. 49,47
9 Zlúčenina X, 20 mpk, BID, p.o. Cytoxan, 200 mpk, BID, i.p. 90,29
10 Zlúčenina X, 20 mpk, BID, p.o. Cytoxan, 100 mpk, BID, i.p. 68,71
17 Zlúčenina X, 40 mpk, QID, 1.-12. deň, p.o. Vincristín, 1 mpk, jedenkrát, 13. deň, i.p. Nosič, 40 mpk, QID, 13.-26. deň, p.o. 85
Zlúčenina X (FPT inhibítor) pre skupiny 5, 6, 7, 8, 9 a 10 bola rozpustená v 40 % hydroxypropylbetacyklodextrane (HPBCD). Cytoxan bol rozpustený v sterilnej vode.
Dávkovací roztok 80 mpk zlúčeniny X bol pripravený pridaním 10,8 ml 40 % HPBCD do 50 ml skúmavky obsahujúcej 176 mg zlúčeniny X, aby sa zlúčenina rozpustila. Zmes bola sonikovaná až do úplného rozpustenia.
Dávkovací roztok 20 mpk bol pripravený vnesením 2 ml roztoku 80 mpk do 15 ml skúmavky, pridaním 6 ml 40 % HPBCD a miešaním roztoku na vortexe.
Príklad L: kombinačná terapia in vivo - B. I. D.
Účinok in vivo kombinačnej terapie FPT inhibítora (označovaného ako „zlúčenina X“ v uvedených tabuľkách)
(+)-enantiomér (zlúčenina X) s Gemzarom® (gemcitabín HCI) na MIA PaCa xenograftoch (NCI-H460, ľudský pankreatický karcinóm). Boli použité athymické nu/nu myšacie 7 týždňové samice. Nultý deň bolo subkutánne naočkovaných 50 myšiam do boku 6 x 106 rakovinových buniek MIA PaCa. Nasleduje prehľad skupín:
Skupina 1 Kontrola nosiča I 10 myši
Skupina 2 Kontrola nosiča II 10 myší
Skupina 3 Zlúč. X, 80 mpk/dávka 10 myši
Skupina 4 Zlúč. X, 80 mpk/dávka &
Gemzar® (120 mpk qid x 3) 10 myši
Skupina 5 Gemzar® (120 mpk qid x 3) 10 myši
Prípravok: Gemzar® bol rozpustený vo fyziologickom roztoku (Nosič I). Zlúčenina X bola rozpustená v 20 % hydroxypropylbetacyklodextrane (Nosič II). Dávkový objem zlúčeniny X bol 0,2 ml roztoku. Dávka (i.p.) roztoku Gemzaru® bola 0,1 ml.
Dávkovací roztok 80 mpk zlúčeniny X bol pripravený pridaním 15 ml 20 % HPBCD do 50 ml skúmavky obsahujúcej 120 mg zlúčeniny X, aby sa látka rozpustila. Zmes bola sonikovaná až do úplného rozpustenia.
Dávkovací roztok Gemzaru® bol pripravený pridaním 16,6 ml fyziologického roztoku do ampuly s Gemzarom® na injekcie (200 mg gemcitabinu HCI) a miešaním roztoku na vortexe do rozpustenia. Gemzar® je komerčne dostupná forma gemcitabinu (2',2'-difluórdeoxycytidín, dFdC, Gemzar®), čo je pyrimidínový analóg deoxycytidínu, ktorého cukomá časť obsahuje v polohe 2' dva atómy fluóru. (Pozri Heinemann a kol. Cancer Res. 1988, 48: 4024). Ako je poznamenané v DeVita a kol. (Eds.) Cancer: Principles and Practice of Oncology (Lippencott-Raven, Phila., Pa., 5th Ed. 1997), gemcitabín má široké spektrum protinádorovej aktivity proti leukémiám a pevným nádorom, (ref: Hertel a kol., Evaluation of thc antitumor activity of gcmcitabine, (2',2'-difluordeoxycytidin) Cancer Res. 1990, 50: 4417). Podľa deVita a kol., je „najobvyklejšie terapeutické použitie 30 minútová IV infúzia počas 3 týždňov, po ktorej nasleduje 1 týždňová prestávka a odporučená dávka je 1000 mg/m2 Vo fáze II pokusov sledujúcich tento liečebný plán (800 až 1250 dFdC mg/m“ za týždeň) boli zistené rýchlosti odpovede v rozsahu 16 až 24 % u pacientov trpiacich pľúcnou rakovinou s nemalými bunkami (skôr neliečených), pacientov s pľúcnou rakovinou s malými bunkami alebo rakovinou prsníkov, ktorí prekonali nie viac než jeden liečebný režim metastázujúceho ochorenia a u pacientov s úpornou rakovinou vaječníkov, hormonálne úpornou rakovinou prostaty, rakovinou hlavy a krku. DeVita a kol.
(Eds.) Cancer: Principles and Practice of Oncology (Lippencott-Raven, Phila., Pa., 5th. Ed. 1997).
Protokol: Nádorové bunky boli naočkované 50 myšiam nultý deň ráno, myši bolo zvážené, randomizované a označené na uškách. Liečba zlúčeninou X alebo nosičom II bola začala 1. deň a pokračovala dvakrát denne, o 7. a 19. hodi ne do 32. dňa. Liečba Gemzarom® a nosičom I začala 7. deň a pokračovala každý tretí deň (deň 10. a deň 13.). Rast nádoru bol stanovený meraním objemu v troch rozmeroch 10., 15., 21., 26. a 32. deň.
Výsledky sú uvedené v tabuľke 4:
Tabuľka 4
Skupina Dni liečby Stredný objem nádoru Priemerný objem nádoru Štandardná odchýlka Priemerná inhibícia
1. Nosič I 10 6,12 13,15 17,94
15 33,3 47,41 39,47
21 63,9 74,32 34,38
26 90,33 83,88 30,16
32 166,9 154,17 70,5
2. Nosič II 10 2,46 7,51 10,0
15 63,1 63,86 21,85
21 84,81 83,25 34,4
26 90,9 92,61 44,43
32 139,76 125,76 48,07
3. Zlúčenina X 10 4,96 8,87 10,7
(80 mpk) 15 12,84 16,91 8,78
21 13,0 14,63 25,03
26 41,21 34,53 20,07
32 43,3 54,2 44,61 57%
4. Zlúčenina X 10 4,12 5,57 6,28
(80 mpk) a 15 6,66 12,21 14,06
Gemzar® 21 0,40 0,67 0,68
(120 mpk) 26 0,53 0,76 0,48
32 0,34 15,03 23,67 88%
5. Gemzar® 10 12,29 13,26 11,56
(120 mpk) 15 31,82 34,91 22,67
21 0,84 5,95 14,56
26 20,06 20,03 17,18
32 49,3 49,25 50,29 60%
Z tabuľky 4 jasne vyplýva, že kým samotná zlúčenina X pri dávke 80 mpk vykazovala len 57 % priemernú inhibíciu a samotný Gemzar® pri dávke 120 mpk vykazoval len 60 % priemernú inhibíciu, kombinácia zlúčeniny X pri 80 mpk plus Gemzar® pri 120 mpk viedla k 88 % inhibícii. Percentuálny výsledok inhibície pozorovanej pri kombinácii zlúčeniny X s Gemzarom® je štatisticky významný pri porovnaní s výsledkami pôsobenia samotných liečiv (px0,05).
Príklad M: terapia in vivo wap-ras transgénneho modelu
Účinnosť kombinácie zlúčeniny X a paclitaxelu bola tiež hodnotená na wap-ras transgénnom modeli. Tento model bol použitý pri terapeutickom režime, keď terapia začala až po vzniku dobre vyvinutých nádorov u myší. Nasleduje prehľad skupín:
Skupiny
Skupina 1 Bez liečby 10 myší
Skupina 2 Kontrola Nosič I 10 myší
Skupina 3 Zlúčenina X, 20 mpk/dávkovanie p.o. 10 myší
Skupina 4 Paclitaxel, 5 mpk/dávkovanie i.p. 10 myší
Skupina 5 Zlúčenina X, 20 mpk a Paclitaxel, mpk 10 myší
Skupina 6 Kontrola Nosič I a Nosič II p.o. a i.p. 10 myší
Prípravok: Zlúčenina X bola rozpustená v 20 % hydroxypropylbetacyklodextrane (nosič I). Objem zlúčeniny X pre p.o. dávkovanie bol 0,2 ml roztoku. Paclitaxel bol roz pustený v zriedenom roztoku etanol/cremofor EL (nosič II) a i.p. dávka roztoku paclitaxelu bola 0,1 ml.
Protokol: Nultý deň boli myši zvážené, randomizované a označené na uškách. Liečba zlúčeninou X a nosičom I začala 1. deň a pokračovala po dvanástich hodinách do 21. dňa. Liečba paclitaxelom a nosičom II bola začala 4. deň a pokračovala denne 5., 6. a 7. deň.
Výsledok: Výsledky sú znázornené na obr. 38. Wap-ras nádory neodpovedali na liečbu samotným paclitaxelom. Reagovali (89 % inhibícia rastu) na liečbu samotnou zlúčeninou X pri 20 mpk. Pri kombinácii zlúčeniny X (20 mpk) a paclitaxelu (5 mpk) došlo k zvýšeniu účinnosti (nádor sa zmenšil, ekvivalentne 180 % inhibícii) pri porovnaní s účinkom samotného liečiva. Okrem zvýšenej účinnosti kombinácie zlúčeniny X a paclitaxelu došlo vplyvom zlúčeniny X taktiež ku zvýšeniu citlivosti paclitaxel-rezístentných nádorov.
Farmaceutické prípravky
Inertné, farmaceutický prijateľné nosiče používané na prípravu farmaceutických prípravkov obsahujúcich FPT inhibítory a uvedené chemoterapeutiká sú pevné alebo kvapalné látky. Medzi pevné preparáty patria prášky, tablety, dispergované granuly, kapsuly, tobolky a čapíky. Prášky a tablety obsahujú 5 až 70 % hmotn. účinnej zložky. Vhodné pevné nosiče sú v oblasti techniky známe, napr. magnézium karbonát, magnézium stearát, talok, cukor a/alebo laktóza. Tablety, prášky, tobolky a kapsuly možno použiť ako pevné dávkové formy vhodné na perorálne podávanie.
Pri príprave čapíkov sa nízkotaviaci vosk, napr. zmes glyceridov mastných kyselín alebo kakaové maslo najprv roztavia a účinná zložka sa miešaním homogénne disperguje. Roztavená homogénna zmes sa potom naleje do foriem bežnej veľkosti, nechá ochladiť a stuhnúť.
Kvapalné prípravky zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie. Príkladom sú roztoky na parenterálne injekcie vo vode či v zmesi voda-propvlénglykol. Kvapalné prípravky tiež zahrnujú roztoky na intranazálne podávanie.
Aerosólové prípravky vhodné na inhalovanie zahrnujú roztoky a pevné látky v práškovej forme, ktoré bývajú kombinované s farmaceutický prijateľnými nosičmi, ako sú inertné komprimované plyny.
Vhodné sú tiež pevné formy prípravkov, ktoré sa tesne pred použitím prevedú na kvapalnú formu na perorálne alebo parenterálne podávanie. Kvapalné formy zahrnujú roztoky, suspenzie a emulzie.
FPT inhibítory a uvedené chemoterapeutiká možno tiež podávať transdermálne. Transdermálne prípravky bývajú vo forme krémov, roztokov na potieranie, aerosólov a/alebo emulzií a možno ich použiť v transdermálnych matriciach alebo rezervoároch, ako je bežné na transdermálnu aplikáciu.
Výhodne sú zlúčeniny podávané perorálne.
Farmaceutický prípravok výhodne obsahuje dávkovú jednotku. Takto je prípravok rozdelený do dávkových jednotiek obsahujúcich príslušné množstvá účinnej látky, napr. účinné množstvo na dosiahnutie žiaduceho efektu.
Množstvo účinnej zložky v dávkovej jednotke sa pohybuje v rozmedzí 0,1 až 1000 mg, výhodne 1 až 300 mg, výhodnejšie 10 až 200 mg, podľa požiadaviek aplikácie.
Aktuálna použitá dávka sa riadi požiadavkami terapie pacienta, vážnosťou jeho ochorenia. Určenie vhodnej dávky pre daný stav je v odbore techniky známy. Obvykle sa liečba začína malými dávkami, o niečo nižšími, než je dávka optimálna. Potom sa po malých množstvách dávky zvyšujú, až sa dosiahne optimálny efekt v daných podmienkach. Celkovú dennú dávku možno rozdeliť a podávať po častiach počas dňa, pokiaľ je zo žiaduce.
Množstvo a frekvencia podávaní FPT a chemoterapeutika a/alcbo radiačnej terapie sa riadi rozhodnutím ošetrujúceho lekára, ktorý berie do úvahy také údaje, ako je vek pacienta, jeho stav a telesná hmotnosť, vážnosť liečeného ochorenia. Dávkový režim inhibítorov FPT spočíva v perorálnej administrácii 10 až 2000 mg/deň, výhodne 10 až 1000 mg/deň, výhodnejšie 50 až 600 mg/deň, v dennej dávke rozdelené na 1 až 4 časti, výhodne 2 časti tak, aby došlo k zablokovaniu rastu nádoru. Vo výhodnom vyhotovení, v prípadoch, kde ako FPT inhibítor slúži kondenzovaný tricyklický benzocykloheptapyridín, je výhodná dávka na perorálnu administráciu 50 až 600 mg/deň, výhodnejšie 50 až 400 mg/deň v dennej dávke rozdelenej na dve časti. Vhodná je i prerušovaná terapia (napr. jeden vynechaný týždeň z troch týždňov, alebo tri vynechané zo štyroch).
Chemoterapeutikum a/alebo radiačná terapia sa riadia typom liečeného ochorenia a známymi účinkami daného chemoterapeutiká a/alebo rádioterapie. Liečebný postup sa tiež riadi znalosťami ošetrujúceho lekára, terapeutickým plánom (dávkové množstvá a počet dávok), možno ho meniť podľa pozorovaných účinkov zvolenej terapie (t. j. antineoplastika alebo rádioterapia) na pacienta, podľa pozorovanej pacientovej reakcie na podávané terapeutiká.
Výhodným príkladom kombinačnej terapie pri liečbe rakoviny podžalúdkovej žľazy bol inhibítor FPT (zlúčenina X) podávaný perorálne v množstve 50 až 400 mg/deň, v dávke rozdelenej na 2 časti, v kontinuálnom liečebnom režime; antineoplastikom bol gemcitabín podávaný v dávke
750 až 1350 mg/'m2 týždenne v režime tri vynechané týždne zo štyroch.
Výhodným príkladom kombinačnej terapie pri liečbe rakoviny pľúc bol inhibítor FPT (zlúčenina X) podávaný perorálne v množstve 50 až 400 mg/deň, v dávke rozdelenej na 2 časti, v kontinuálnom liečebnom režime; antineoplastikom bol paclitaxel podávaný v dávke 65 až 175 mg/m2 v režime jedenkrát za tri týždne.
Výhodným príkladom kombinačnej terapie pri liečbe gliómov bol inhibítor FPT (zlúčenina X) podávaný perorálne v množstve 50 až 400 mg/deň, v dávke rozdelenej na 2 časti, antineoplastikom bol temozolomid podávaný v dávke 100 až 250 mg/m2.
Iným príkladom kombinačnej terapie pri liečbe gliómov bol inhibítor FPT (zlúčenina X) podávaný perorálne v množstve 50 až 400 mg/deň, v dávke rozdelenej na 2 časti, v kontinuálnom liečebnom režime; antineoplastikom bol 5-flurouraeil (5-FU) podávaný v dávke 500 mg/m2 jedenkrát týždenne, alebo v dávke 200 až 300 mg/m2 denne, v prípade kontinuálnej infúzie 5-FU. V prípade jednorazovej týždňovej administrácie 5-FU možno 5-FU podávať v kombinácii s folátovým agonistom (napr. Leucovoran v dávke 20 mg/m2/týždeň).
V postupoch predkladaného vynálezu sa FPT inhibítor podáva súčasne s podaním alebo postupne po podaní chemoterapeutika a/alebo rádioterapie, nie je preto nevyhnutné, aby chemoterapeutikum a FPT inhibítor boli podávané súčasne, alebo temer súčasne. Výhodnosť súčasného podávania alebo takmer súčasného podávania závisí od rozhodnutia ošetrujúceho lekára.
Rovnako nie je nutné, aby chemoterapeutikum a FPT inhibítor boli podávané v jednom farmaceutickom prípravku, vďaka rôznym fyzikálnym a chemickým vlastnostiam možno ich dokonca podávať rôznymi cestami. Napríklad inhibítor FPT možno podávať perorálne a udržovať v krvi vhodné hladiny, chemoterapeutikum možno podávať intravenózne. Určenie spôsobu podávania a účelnosť podávania, kde je to možné, spoločného farmaceutického prípravku, je celkom v rukách ošetrujúceho lekára. Počiatočné podávanie sa obyčajne riadi zavedenými postupmi známymi v oblasti techniky a ďalší režim ošetrujúci lekár upravuje podľa pozorovaných účinkov liečby, t. j. dávkovanie, spôsoby administrácie a počty dávok.
Konkrétna voľba FPT inhibítora a chemoterapeutiká a/alebo rádioterapie závisí od diagnózy lekárskeho tímu, rozhodnutia o stave pacienta a príslušného liečebného protokolu.
Inhibítor FPT a chemoterapeutikum možno podávať súčasne (t. j. zároveň, takmer zároveň alebo v rámci jedného liečebného protokolu) alebo postupne, podľa typu liečeného proltferačného ochorenia, stavu pacienta a aktuálneho výberu chemoterapeutík a/alebo rádioterapie, ktoré možno podávať spolu s inhibítorom FPT.
Pokiaľ sa inhibítor FPT a chemoterapeutikum a/alebo rádioterapia nepodávajú súčasne alebo takmer súčasne, potom poradie podávaných liečiv nie je podstatné. Inhibítor FPT tak môže byť podávaný ako prvý a podávané chemoterapeutiká a/alebo rádioterapia môže nasledovať; alebo chemoterapeutikum a/alebo rádioterapia sa podávajú ako prvé a nasleduje podanie inhibítora FPT. Takéto striedavé podávanie možno opakovať v rámci jedného liečebného protokolu. Stanovenie poradia podávaní, počtu opakovaní a podávaní každého jednotlivého liečiva počas liečebného protokoluje celkom v rukách ošetrujúceho lekára, ktorý sa riadi vážnosťou liečeného ochorenia a celkovým stavom pacienta. Napríklad sa najskôr podáva chemoterapeutikum a/alebo rádioterapia, najmä ak ide o cytotoxikum, a potom liečba pokračuje podávaním FPT inhibítora a ak je to výhodné, nasleduje opäť chemoterapeutikum a/alebo rádioterapia, a tak ďalej, až do splnenia liečebného protokolu.
Ošetrujúci lekár teda v rámci svojich skúseností a znalostí môže liečebný protokol modifikovať z hľadiska podávania terapeutických zložiek (t. j. FPT inhibítor, chemoterapeutikum a/alebo rádioterapia) podľa individuálnych požiadaviek pacienta a postupujúcej liečby.
Ošetrujúci lekár pri hodnotení pokračujúcej liečby vychádza z takých znakov, ako je celkový subjektívny stav pacienta i konkrétnejšie znaky, ako je úľava od symptómov ochorenia, inhibícia rastu nádoru, aktuálne zmenšenie nádoru alebo inhibícia metastáz. Veľkosť nádoru možno merať štandardnými postupmi, ako sú rádiologické štúdie, napr. CAT alebo MRI skenovanie a za sebou idúce merania napomáhajú rozhodnúť, či sa rast nádoru zastavil, alebo či sa dokonca nádor začal zmenšovať. Úľava od symptómov ochorenia, ako je napr. úľava od bolesti a celkové zlepšenie stavu tiež pomáha vyhodnotiť efektivitu liečby.
Nasledujú príklady (príklady 1 až 4) tvorby prípravkov vo forme kapsúl pre inhibítor FPT:
Príklady 1 a 2
Príprava a zloženie kapsuly
Zloženie Príklad 1 mg/kapsula Príklad 2 mg/kapsula % hmotn. v prípravku
Pevný roztok 100 400,0 84,2
Oxid kremičitý NF(I) 0,625 2,5 0,5
Magnézium stearát NF<21 0,125 0,5 0,1
Kroskarmelóza sodná NF 11,000 44,0 9,3
Pluronic F68 NF 6,250 25,0 5,3
Oxid kremičitý NF<3) 0,625 2,5 0,5
Magnézium stearát NF*41 0,125 0,5 0,1
Spolu 118,750 475,00
Veľkosť kapsuly č. 4 č. 0
Postup (Príklady 1 a 2)
Príprava pevného roztoku
Zloženie g/náplň % hmotn. v prípravku
FPT inhibítor 80 33,3
Povidon NF K29/32 160 66,6
Dichlórmetán 5000 ml odparí sa
jemné častice. Prášok bol preosiaty sitom 30 mesh. Rôntgenovou analýzou bola potvrdená amorfnosť prášku.
Pevný roztok, oxid kremičitý*1’ a magnézium stearát*21 boli miešané vo vhodnom mixéri 10 min. Zmes bola komprimovaná vo vhodnom valcovom kompaktore a mletá na veľkosť častíc 30 mesh. Do mletej zmesi boli pridané kroskarmelóza sodná, Pluronic F68 a oxid kremičitý*3’ a zmes bola miešaná ďalších 10 min. Vopred bola pripravená zmes magnézium stearátu*4’ a rovnakého množstva zmesi. Táto zmes bola pridaná do zvyšku zmesi a všetko sa miešalo 5 min. Zmes bola rozdelená do želatínových kapsúl s tvrdým obalom.
Príklady 3 a 4
Príprava a zloženie kapsuly
Zloženie Príklad 3 mg/kapsula Príklad 4 mg/kapsula % hmotn. v prípravku
Pevný roztok 400 200,0 80,0
Oxid kremičitý NF1” 3,75 1,875 0,75
Magnézium stearát NF^ 0,125 0,625 0,25
Kroskarmelóza sodná NF 40,00 20,00 8,0
Pluronic F68 NF 50,00 25,00 10
Oxid kremičitý NF® 3,75 1,875 0,75
Magnézium stearát nf(4) 1,25 0,625 0,25
Spolu 500,00 250,00
Veľkosť kapsuly č.O č. 2
Postup (Príklady 3 a 4)
Príprava pevného roztoku
Zloženie g/náplň % hmotn. v prípravku
FPT inhibítor 15 50
Povidon NF K29/32 15 50
Dichlórmetán 140 ml odparí sa
Metanol 60 ml odparí sa
Informáciu o príprave prípravkov možno nájsť v U.S. patentovej prihláške č. 08/997168 a 60/068387 (podaná 22. 12. 1997), uvedené v odkazoch.
Kryštalický FPT inhibítor a povidon boli rozpustené v dichlórmetáne. Roztok bol sušený na vhodnej sprejovej sušičke rozpúšťadiel. Pevný zvyšok bol potom rozomletý na jemné častice. Prášok bol preosiaty sitom 30 mesh. Rôntgenovou analýzou bola potvrdená amorfnosť prášku.
Pevný roztok, oxid kremičitý*1’ a magnézium stearát*2’ boli miešané vo vhodnom mixéri 10 min. Zmes bola komprimovaná vo vhodnom valcovom kompaktore a mletá na veľkosť častíc 30 mesh. Do mletej zmesi boli pridané kroskarmelóza sodná, Pluronic F68 a oxid kremičitý*3’ a zmes bola miešaná ďalších 10 min. Vopred bola pripravená zmes magnézium stearátu*4’ a rovnakého množstva zmesi. Táto zmes bola pridaná do zbytku zmesi a všetko sa miešalo 5 min. Zmes bola rozdelená do želatínových kapsúl s tvrdým obalom.
Rozsah vynálezu z farmaceutického hľadiska nie je obmedzený na uvedené príklady.
Všetky dokumenty (publikácie a patentové prihlášky) sú zahrnuté v odkazoch v rozsahu týkajúcom sa predkladaného vynálezu.
Hoci bol predkladaný vynález opísaný pomocou špecifických vyhotovení, zahrnuje i rad alternatív, modifikácií a
Kryštalický FPT inhibítor a povidon boli rozpustené v dichlórmetáne. Roztok bol sušený na vhodnej sprejovej sušičke rozpúšťadiel. Pevný zvyšok bol potom rozomletý na variácií, ako je odborníkovi v odbore zrejmé. Všetky prípadné alternatívy, modifikácie a variácie patria do rámca predkladaného vynálezu.
Priemyselná využiteľnosť
Predkladaný vynález prináša nový postup liečby proliferačných ochorení spočívajúci v inhibícii proliferácie buniek, najmä rakovinových. Postup pozostávajúci z kombinovaného použitia (1) inhibítora famezyl proteíntransferázy („FPT“) a (2) antineoplastického liečiva a/alebo rádioterapie. Vynález prináša i postupy príprav farmaceutických prípravkov obsahujúcich tieto liečivá.

Claims (18)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie inhibítora famezyl-proteíntransferázy (+)-enantiomér na výrobu liečiva na súčasné alebo postupné použitie s antineoplastickým činidlom a/alebo s rádioterapiou na liečenie proliferačného ochorenia.
  2. 2. Použitie podľa nároku 1, v ktorom je antineoplastické činidlo vybrané z: uracilovej horčice, chlórmetínu, cyklofosfamidu, ifosfamidu, melfalanu, chlorambucilu, pipobrómanu, trietylénmelaminu, trietyléntiofosforamidu, busulfanu, karmustínu, lomustínu, streptozocínu, dakarbazínu, temozolomidu, metotrexatu, 5-fluorouracilu, floxuridinu, cytarabínu, 6-merkaptopurínu, 6-tioguanínu, fludarabínfosfátu, pentostatinu, gemcitabínu, vinblastínu, vincristínu, vindezínu, bleomycínu, dactinomycínu, daunorubicínu, doxorubicínu, epirubicínu, idarubicínu, paclitaxelu, mitramycínu, deoxykoformycínu, mitomycínu-C, L-asparaginázy, interferónov, etopozidov, tenipozidu, 17u-etinylestradiolu, dietylstilbestrolu, testosterónu, prednizónu, fluoxymesterónu, dromostanolónpropionátu, testolaktónu, megestrolacetátu, tamoxifénu, metylprednizolónu, metyltestosterónu, prednizolónu, triamcinolónu, chlorotrianizénu, hydroxyprogestcrónu, aminoglutetimidu, estramustínu, medroxyprogesterónacetátu, leuprolidu, flutamidu, toremifénu, goserelínu, cisplatiny, karboplatiny, hydroxymočoviny, amsacrinu, prokarbazínu, mitotanu, mitoxantrónu, levamizolu, navelbénu, irinotekan hydrochloridu, anastrazolu, letrazolu, capecitabínu, reloxafínu, droloxafínu alebo hexametylmelamínu.
  3. 3. Použitie podľa nároku 1, v ktorom antineoplastické činidlo je vybrané z: cyklofosfamidu, 5-fluorouracilu alebo vincristínu.
  4. 4. Použitie podľa nároku 1, v ktorom antineoplastické činidlo je cyklofosfamid.
  5. 5. Použitie podľa nároku 1, v ktorom antineoplastické činidlo je 5-fluorouracil.
  6. 6. Použitie podľa nároku 1, v ktorom antineoplastické činidlo je temozolomid.
  7. 7. Použitie podľa nároku 1, v ktorom proliferačným ochorením je: rakovina pľúc, rakovina podžalúdkovej žľazy, rakovina hrubého čreva, myeloidná leukémia, melanóm, glióm, tyroidná folikuláma rakovina, karcinóm močového mechúra, myelodysplastický syndróm, rakovina prsníka alebo prostaty.
  8. 8. Použitie podľa nároku 7, v ktorom proliferačné ochorenie je epiteliálna rakovina.
  9. 9. Použitie podľa nároku 1 inhibítora famezylproteintransferázy (+)-enantiomér na výrobu liečiva na súčasné alebo postupné použitie s gemcitabínom na liečenie proliferačného ochorenia.
  10. 10. Použitie podľa nároku 9, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina prostaty, rakovina pľúc alebo rakovina podžalúdkovej žľazy.
  11. 11. Použitie podľa nároku 9, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina podžalúdkovej žľazy.
  12. 12. Použitie podľa nároku 1, v ktorom antineoplastické činidlo je liečivo ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry.
  13. 13. Použitie podľa nároku 12, v ktorom liečivo ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry je paclitaxel alebo derivát paclitaxelu.
  14. 14. Použitie podľa nároku 12, v ktorom liečivo ovplyvňujúce submikroskopické štruktúry je docetaxel.
  15. 15. Použitie podľa nároku 12, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina prostaty, rakovina pľúc alebo rakovina podžalúdkovej žľazy, rakovina hrubého čreva alebo rakovina močového mechúra.
  16. 16. Použitie podľa nároku 12, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina prostaty.
  17. 17. Použitie podľa nároku 12, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina pľúc.
  18. 18. Použitie podľa nároku 12, v ktorom proliferačné ochorenie je rakovina podžalúdkovej žľazy.
SK898-2000A 1997-12-22 1998-12-21 Použitie 11-(4-piperidylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[1,2- b]pyridínovej zlúčeniny ako inhibítora farnezyl-proteíntransferázy na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia SK285584B6 (sk)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US99602797A 1997-12-22 1997-12-22
US14352998A 1998-08-28 1998-08-28
US18196998A 1998-10-29 1998-10-29
PCT/US1998/026224 WO1999032114A1 (en) 1997-12-22 1998-12-21 Combination of benzocycloheptapyridine compounds and antineoplastic drugs for treating proliferative diseases

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK8982000A3 SK8982000A3 (en) 2001-04-09
SK285584B6 true SK285584B6 (sk) 2007-04-05

Family

ID=27385940

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK898-2000A SK285584B6 (sk) 1997-12-22 1998-12-21 Použitie 11-(4-piperidylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[1,2- b]pyridínovej zlúčeniny ako inhibítora farnezyl-proteíntransferázy na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia

Country Status (25)

Country Link
EP (1) EP1041985B1 (sk)
JP (1) JP4502503B2 (sk)
KR (1) KR100700907B1 (sk)
CN (1) CN1129431C (sk)
AR (1) AR017440A1 (sk)
AT (1) ATE317697T1 (sk)
AU (1) AU756762B2 (sk)
BR (1) BR9814419A (sk)
CA (1) CA2315693C (sk)
CL (1) CL2007001889A1 (sk)
CO (1) CO5080764A1 (sk)
CZ (1) CZ298511B6 (sk)
DE (1) DE69833509T2 (sk)
DK (1) DK1041985T3 (sk)
ES (1) ES2255196T3 (sk)
HU (1) HUP0102473A3 (sk)
IL (1) IL136462A0 (sk)
MY (1) MY137303A (sk)
NO (1) NO326832B1 (sk)
NZ (1) NZ504928A (sk)
PE (1) PE20000042A1 (sk)
PT (1) PT1041985E (sk)
SK (1) SK285584B6 (sk)
TW (1) TW581763B (sk)
WO (1) WO1999032114A1 (sk)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2787327B1 (fr) * 1998-12-21 2003-01-17 Aventis Pharma Sa Compositions contenant des inhibiteurs de farnesyle transferase
EP1233787B8 (fr) * 1999-11-09 2005-05-18 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S.C.R.A.S.) Produit comprenant un inhibiteur de la transduction des signaux des proteines g heterotrimeriques en association avec un autre agent anti-cancereux pour une utilisation therapeutique dans le traitement du cancer
WO2001045740A2 (en) * 1999-12-22 2001-06-28 The Government Of The United States, Department Of Health And Human Services Compositions and methods for treatment of breast cancer
EP1267872A2 (en) * 2000-02-29 2003-01-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with anti-tumor anthracycline derivatives
EP1261356A2 (en) * 2000-02-29 2002-12-04 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with platinum compounds
AU2001235496A1 (en) * 2000-02-29 2001-09-12 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with anti-tumor alkylating agents
CA2397690A1 (en) * 2000-02-29 2001-09-07 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with anti-tumor nucleoside derivatives
EP1267871A2 (en) * 2000-02-29 2003-01-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Farnesyl protein transferase inhibitor combinations with anti-tumor podophyllotoxin derivatives
JP2003525236A (ja) * 2000-02-29 2003-08-26 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ ビンカアルカロイドとのファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤の組み合わせ剤
TWI310684B (en) 2000-03-27 2009-06-11 Bristol Myers Squibb Co Synergistic pharmaceutical kits for treating cancer
AU2002236813A1 (en) * 2001-01-22 2002-07-30 Schering Corporation Treatment of malaria with farnesyl protein transferase inhibitors
ATE415161T1 (de) * 2001-02-15 2008-12-15 Janssen Pharmaceutica Nv Farnesyl-protein-transferase hemmer in kombination mit antiöstrogenen
NZ532562A (en) * 2001-11-30 2007-02-23 Schering Corp Use of an FPT inhibitor in combination with other antineoplastic agents for the manufacture of a medicament to be used in the treatment of cancer
EP1453513A1 (en) * 2001-12-03 2004-09-08 Schering Corporation Use of fpt inhibitors and at least two antineoplastic agents in the treatment of cancer
WO2008022535A1 (fr) * 2006-08-09 2008-02-28 Tian Jin Tasly Group Co., Ltd. Composition pharmaceutique pour traiter le gliome du cerveau, son procédé et sa préparation pharmaceutique
CN105198758A (zh) * 2015-09-22 2015-12-30 湖南大学 一种高纯度(z)-他莫昔酚的制备方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5047246A (en) * 1988-09-09 1991-09-10 Bristol-Myers Company Direct compression cyclophosphamide tablet
JPH06504772A (ja) * 1990-12-18 1994-06-02 ザ　ウエルカム　ファウンデーション　リミテッド 抗癌剤の薬効を増強し抗多剤耐性を有する薬剤
JP2767176B2 (ja) * 1992-12-15 1998-06-18 大塚製薬株式会社 抗癌剤
US5637688A (en) * 1994-12-13 1997-06-10 Eli Lilly And Company Process for preparing 1-(2'-deoxy-2'-difluoro-d-ribofuranosyl)-4-aminopyrimidin-2-one hydrochloride
ATE302613T1 (de) * 1995-08-09 2005-09-15 Banyu Pharma Co Ltd Proteinfarnesyltransferase-inhibitoren in kombination mit hmgcoa-reduktase-inhibitoren zur behandlung von aids
ATE309238T1 (de) * 1995-12-22 2005-11-15 Schering Corp Zur hemming der g-protein-funktion und zur behandlung proliferativer krankheiten geeignete tricyclische amide
ATE314843T1 (de) * 1996-03-12 2006-02-15 Pg Txl Co Lp Wasserlösliche paclitaxel-prodrogen
WO1997036583A1 (en) * 1996-04-03 1997-10-09 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
CA2251716A1 (en) * 1996-04-15 1997-10-23 W. Gillies Mckenna Sensitization of cells to radiation and chemotherapy
WO1997038664A2 (en) * 1996-04-18 1997-10-23 Merck & Co., Inc. A method of treating cancer
AU3215197A (en) * 1996-05-30 1998-01-05 Merck & Co., Inc. A method of treating cancer
WO1998032376A1 (en) * 1997-01-29 1998-07-30 Picker Medical Systems, Ltd. Predictive bolus tracking
BR9807418A (pt) * 1997-02-18 2002-01-22 Canji Inc Terapia de gene supressor de tumor combinado e quimioterapia no tratamento de neoplasmas

Also Published As

Publication number Publication date
KR100700907B1 (ko) 2007-03-29
CL2007001889A1 (es) 2008-01-11
NO20003229L (no) 2000-08-22
HUP0102473A2 (hu) 2002-01-28
MY137303A (en) 2009-01-30
SK8982000A3 (en) 2001-04-09
KR20010033452A (ko) 2001-04-25
HUP0102473A3 (en) 2003-07-28
EP1041985A1 (en) 2000-10-11
DE69833509T2 (de) 2006-10-26
NO20003229D0 (no) 2000-06-21
DE69833509D1 (de) 2006-04-20
TW581763B (en) 2004-04-01
EP1041985B1 (en) 2006-02-15
BR9814419A (pt) 2000-10-10
CA2315693A1 (en) 1999-07-01
ES2255196T3 (es) 2006-06-16
CN1284875A (zh) 2001-02-21
WO1999032114A1 (en) 1999-07-01
DK1041985T3 (da) 2006-06-19
ATE317697T1 (de) 2006-03-15
PE20000042A1 (es) 2000-02-17
AU1907299A (en) 1999-07-12
NO326832B1 (no) 2009-02-23
CZ298511B6 (cs) 2007-10-24
CZ20002236A3 (cs) 2001-04-11
IL136462A0 (en) 2001-06-14
JP2001526224A (ja) 2001-12-18
CA2315693C (en) 2010-11-30
PT1041985E (pt) 2006-07-31
NZ504928A (en) 2004-12-24
CO5080764A1 (es) 2001-09-25
AU756762B2 (en) 2003-01-23
JP4502503B2 (ja) 2010-07-14
CN1129431C (zh) 2003-12-03
AR017440A1 (es) 2001-09-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6333333B1 (en) Methods for treating proliferative diseases
AU783177B2 (en) Methods of inducing cancer cell death and tumor regression
SK285584B6 (sk) Použitie 11-(4-piperidylidén)-5H-benzo[5,6]-cyklohepta[1,2- b]pyridínovej zlúčeniny ako inhibítora farnezyl-proteíntransferázy na výrobu liečiva na liečenie proliferačného ochorenia
RU2264217C2 (ru) Синергические способы и композиции для лечения рака
RU2587013C2 (ru) Комбинированная химиотерапия
HU230273B1 (hu) Egy epotilon analóg és kemoterápiás szerek kombinációja proliferatív betegségek kezelésére
JP2013503171A (ja) がんの処置および予防におけるメトホルミンの使用
US20070117784A1 (en) Treatment of hyperproliferative diseases with anthraquinones
US6777415B2 (en) Methods of inducing cancer cell death and tumor regression
BR112021007283A2 (pt) método de tratamento de um câncer ou câncer refratário
AU2002211862A1 (en) Methods of inducing cancer cell death and tumor regression
BG108605A (bg) Използване на състави при лечението на рак
AU2007334381A1 (en) Compositions and methods for the treatment of cancer
US20160368980A1 (en) Inhibition of granulocyte colony stimulating factor in the treatment of cancer
EP3976039A1 (en) Bisaminoquinolines and bisaminoacridines compounds and methods of their use
CN107404876B (zh) 抗癌治疗剂
RU2284818C2 (ru) Комбинированная химиотерапия
WO2023107894A1 (en) Combination therapy comprising a pkc inhibitor and a c-met inhibitor
TWI528960B (zh) 用於治療增生性疾病的醫藥組合物
MXPA00006257A (en) Combination of benzocycloheptapyridine compounds and antineoplastic drugs for treating proliferative diseases

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20101221