SK282004B6 - Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze - Google Patents

Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze Download PDF

Info

Publication number
SK282004B6
SK282004B6 SK728-96A SK72896A SK282004B6 SK 282004 B6 SK282004 B6 SK 282004B6 SK 72896 A SK72896 A SK 72896A SK 282004 B6 SK282004 B6 SK 282004B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
merozoites
sporozoites
eimera
live
genus
Prior art date
Application number
SK728-96A
Other languages
English (en)
Other versions
SK72896A3 (en
Inventor
Nigel A. Evans
Robert Craig Findly
Frederick Henry Weber
Original Assignee
Pfizer Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer Inc. filed Critical Pfizer Inc.
Publication of SK72896A3 publication Critical patent/SK72896A3/sk
Publication of SK282004B6 publication Critical patent/SK282004B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/002—Protozoa antigens
    • A61K39/012—Coccidia antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/522—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimeria alebo ich zmesí na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze, uskutočňované v poslednej štvrtine inkubácie. Ako domestikované vtáky prichádzajú do úvahy najmä kurčatá a morky.ŕ

Description

Vynález sa týka očkovacej látky na očkovanie domestikovaných vtákov, ako sú najmä kurčatá a morky, proti kokcidióze. Vynález sa týka najmä in ovo podávania živých sporozoitov alebo merozoitov Eimera spp. alebo ich zmesí.
Doterajší stav techniky
Kokcidióza je enterická choroba domestikovaných vtákov vyvolaná infekciou intracelulámymi protozoálnymi parazitmi rodu Eimera. Ide o chorobu, ktorej devastujúci účinok je z ekonomického hľadiska najhorší. Odhaduje sa, že lieky proti kokcidióze a straty vyvolané kokcidiózou stoja hydinársky priemysel stovky miliónov dolárov každý rok.
Rôzne pokusy očkovania domestikovaných vtákov proti kokcidióze sú hlásené od včasných 50. rokov dvadsiateho storočia. Súčasné metódy očkovania zahŕňajú podávanie živých oocyst Eimera vtákom spolu s krmivom alebo vodou. Tieto metódy sú však nevhodné a neúčinné, pretože nie všetky vtáky dostanú zamýšľanú dávku oocyst a mnohé z nich sú buď očkovacou látkou nechránené, alebo získajú patogénnu infekciu.
V publikácii J. M. Sharma a B. R. Burmester, Avian Dis. 26: 134 až 149, 1981 citovaní autori oznámili, že u kurčiat vakcinovaných in ovo morčacím herpes vírusom sa vyvinula imunita proti následnému ataku vírusom Markovej choroby.
V európskej patentovej publikácii č. 291 173 je opísaný imunizačný proces, pri ktorom sa nereplikujúci imunogén podáva in ovo. Ako imunogény sa v tomto európskom patente špecificky uvádzajú antigén Eimera zostrojený metódami génového inžinierstva a extrakt z oocyst Eimera. V tomto európskom patente sú špecificky vylúčené živé štádiá tohto parazita, ktoré sa používajú pri spôsobe očkovania podľa tohto vynálezu.
Spôsob očkovania podľa vynálezu zahŕňa in ovo podávanie živých sporozoitov alebo merozoitov Eimera alebo ich zmesi do vyvíjajúcich sa vajec domestikovaných vtákov. Dostupná literatúra uvádza, že taký spôsob očkovania by bol in ovo neúčinný a mal by sa aplikovať až po vyliahnutí. V publikácii T. K. Jeffers a G. E. Wagenbach, J. Parazit 56(4): 656 až 662, 1970 autori uvádzajú, že pri in ovo injekčnom podaní sporozoitov E. tenella 10. deň inkubácie sa nedosiahla žiadna významná imunologická ochrana proti následnému ataku oocystami E. tenella. Autori dokonca oznámili, že neošetrené kurčatá mali vyšší stupeň prežitia proti následnému ataku oocystami E. tenella ako kurčatá, ktoré boli ošetrené in ovo sporozoitmi. V publikácii K. L. Watkins et al., Proc. Vlth Intemational Coccidiosis Conf., Abstract El-2, Ontario, Kanada (1993) opisujú autori in ovo inokuláciu živými sporocystami a sporulovanými oocystami E. maxima, pričom dochádzajú k záveru, že ich štúdia neposkytuje žiadny dôkaz o tom, že by in ovo expozícia chránila proti následnému kokcidióznemu ataku oocystami E. maxima v čase 10 dní po vyliahnutí. Watkins et al. ďalej dochádzajú k záveru, že keď sa očkovanie uskutoční skoro po vyliahnutí, skôr ako in ovo dochádza k významnej imunologickej ochrane. V rozpore s týmito tvrdeniami sa pri spôsobe očkovania in ovo podľa tohto vynálezu dosahuje neočakávateľná imunita, ktorá chráni vyliahnuté vtáky proti následnému ataku kokcidiózy.
Podstata vynálezu
Predmetom vynálezu je použitie živých sporozoitov alebo merozoitov Eimera alebo ich zmesi na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze uskutočňované v poslednej štvrtine inkubácie.
Pod označením „domestikované vtáky“ sa v kontexte tohto vynálezu, ak nie je uvedené inak, rozumejú kurčatá, kačice, morky, lovné vtáky (napríklad prepelice, bažanty a husi), ako aj vtáky patriace do nadradu bežci (napríklad pštros). Na vymenovanie týchto konkrétnych vtákov sa vynález neobmedzuje.
Pod označením „in ovo“ sa, ak nie je uvedené inak, rozumie „do vajec domestikovaných vtákov obsahujúcich živé vyvíjajúce sa embryo“.
Pod označením „podávanie in ovo“ sa tu, ak nie je uvedené inak, rozumie podávanie očkovacej látky podľa vynálezu do vajec domestikovaných vtákov obsahujúcich živé vyvíjajúce sa embryo akýmikoľvek spôsobmi penetrácie škrupinky vajíčka a zavedenia očkovacej látky. Také spôsoby očkovania zahŕňajú injekčné podanie očkovacej látky, pričom však na tento konkrétny spôsob podania nie sú obmedzené.
Pod označením „posledná štvrtina inkubácie“ sa tu rozumie, ak nie je uvedené inak, posledná štvrtina ikubácie vyvíjajúceho sa vajca domestikovaného vtáka.
Pod označením ..Eimera“ sa tu rozumie, ak nie je uvedené inak, jeden alebo viac druhov patriacich do rodu Eimera. ktoré infikujú domestikované vtáky. Také druhy Eimera zahŕňajú druhy vyskytujúce sa u kurčiat, napríklad E. tenella, E. acervulina, E. maxima, E. necatrix, E. mitis, E. praecox a E. brunetti a aj druhy vyskytujúce sa u moriek, napríklad E. meleagrimitis, E. adenoeides, E. gallopavonis, E. dispersa, E. meleagridis, E. innocua a E. subrotunda a ďalej aj druhy, ktoré infikujú iné uvedené domestikované vtáky.
Pod označením ..Eimera“ sa rozumejú aj všetky kmene uvedených druhov Eimera. Ako neobmedzujúce príklady takých kmeňov je možné uviesť prekociálne kmene a atenuované kmene, ktoré zahŕňajú kmene ošetrené ožiarením alebo iným spôsobom, aby neboli schopné úplného vývoja. Označenie „Eimera“ zahŕňa aj akékoľvek novoobjavené kmene alebo druhy Eimera infikujúce definované domestikované vtáky.
Pod označením „sporozoity“, „sporocysty“, „oocysty“ a „nerozoity“ sa rozumejú, ak nie je uvedené inak, sivé sporozoity, sporocysty, oocysty a merozoity Eimera.
Pod označením „účinná imunizačná dávka“ sa tu rozumie, ak nie je uvedené inak, počet sporozoitov alebo meroxoitov alebo ak sa použije ich zmes, počet sporozoitov a merozoitov, dostatočný na imunologickú ochranu vyliahnutých vtákov, ktorá je väčšia ako vlastná imunita neimunizovaných vtákov. Označenia „imunizácia“, „vakcinácie“ a „očkovanie“ sa považujú za synonymné.
Prednostná dávka podávaná pri spôsobe podľa vynálezu obsahuje 10 až 106 sporozoitov alebo merozoitov alebo ich zmes, v ktorej je celkový počet sporozoitov a merozoitov v rozmedzí od 10 do 106.
Obzvlášť výhodná dávka podávaná pri spôsobe podľa vynálezu obsahuje 103 až 106 sporozoitov alebo merozoitov alebo ich zmes, v ktorej je celkový počet sporozoitov a merozoitov v rozmedzí od 103 do 106.
Iná osobitne výhodná dávka podávaná pri spôsobe podľa vynálezu obsahuje 102 až 105 sporozoitov alebo merozoitov alebo ich zmes, v ktorej je celkový počet sporozoitov a merozoitov v rozmedzí od 102 do 10.
SK 282004 Β6
Očkovanie podľa vynálezu sa prednostne uskutočňuje u kurčiat ako domestikovaných vtákov.
Prednostná dávka podávaná in o vo do slepačích vajec zahŕňa sporozoity alebo merozoity alebo ich zmes dvoch alebo viacerých druhov Eimera zvolených zo súboru zahŕňajúceho E. tenella, E. acervulina, E. maxima, E. necatrix, E. mitis, E. praecox a E. brunetti. Táto dávka prednostne obsahuje 10 až 106 sporozoitov alebo merozoitov alebo ich zmesi z každého druhu, ktorý sa v nej nachádza.
Ďalším prednostným domestikovaným vtákom, ktorý sa dá očkovať spôsobom podľa vynálezu, je morka.
Prednostná dávka podávaná in ovo do vajec morky zahŕňa sporozoity alebo merozoity alebo ich zmes dvoch alebo viacerých druhov Eimera zvolených zo súboru zahŕňajúceho E. meleagrlmitis, E. adenoeides, E. gallopavonis, E. dispersa, E. meleagridis, E. innocua a E. subrotunda. Táto dávka prednostne obsahuje 10 až 106 sporozoitov alebo merozoitov alebo ich zmesi z každého druhu, ktoiý sa v nej nachádza.
Inými prednostnými domestikovanými vtákmi, ktoré je možné očkovať spôsobom podľa vynálezu, sú lovné vtáky, kačice a bežci.
Spôsob podľa vynálezu ďalej zahŕňa kombinované ošetrenie, pri ktorom sa spôsob očkovania podľa vynálezu kombinuje s in ovo podaním stimulátora imunity v ľubovoľnom čase v priebehu inkubácie.
Stimulátor imunity sa prednostne podáva súčasne s in ovo podaním dávky sporozoitov alebo merozoitov alebo zmesi sporozoitov a merozoitov počas poslednej štvrtiny inkubácie.
Nasleduje podrobný opis vynálezu.
Ako už bolo uvedené, spôsob očkovania podľa vynálezu zahŕňa in ovo podávanie živých sporozoitov alebo merozoitov Eimera alebo ich zmesi do vajec domestikovaných vtákov v poslednej štvrtine inkubácie. V prípade kurčiat sa in ovo podávanie prednostne uskutočňuje od 15. do 20. dňa inkubácie, najvýhodnejšie 18. deň inkubácie. V prípade moriek sa in ovo podávanie prednostne uskutočňuje od 21. do 26. dňa inkubácie.
Spôsob očkovania podľa vynálezu sa môže uskutočňovať s použitím akéhokoľvek vhodného spôsobu podávania in ovo. Očkovacia látka podľa vynálezu sa prednostne podáva injekčné. Pri jednom spôsobe injekčného podávania sa v škrupinke vajca na širšom konci vajca utvorí pomocou ihly č. 18 otvor exponujúci vzduchovú komoru vajca. Týmto otvorom a membránou vzduchovej komory je možné pretiahnuť injekčnú ihlu č. 22 s dĺžkou 25 až 38 mm pripojenou k injekčnej striekačke s vhodnou veľkosťou (1 až 3 ml). Do vajíčka sa môže vstreknúť vhodný počet sporozoitov alebo merozoitov alebo ak sa používa ich zmes, vhodný počet sporozoitov a merozoitov v podobe suspenzie vo vhodnom kvapalnom nosiči, napríklad 10 až 500 pi fosfátom pufrovaného roztoku chloridu sodného. Vhodný objem bude závisieť od veľkosti ošetrovaného vajca, pretože napríklad pštrosie vajcia budú prirodzene schopné pojať väčší objem ako slepačie vajcia. Miesto injekcie môže ležať v ľubovoľnej oblasti vajca alebo embrya. Prednostne sa injekcia vedie axiálne stredom širšieho konca vajca do amniónu (zárodočnej blany).
Alternatívne sa pri spôsobe podľa vynálezu môže použiť automatizovaný systém na podávanie injekcii do vajec. Také systémy sú opísané v US patentoch č. 4 681 063, 4 040 388, 4 469 047 a 4 593 646. Hore a ďalej uvedené citácie sú tu uvedené ako náhrada za prenesenie ich celého obsahu do opisu tohto vynálezu. Odborníkom v tomto odbore sú zrejmé i iné vhodné spôsoby injekčného podávania.
Oocysty je možné získať ľubovoľným z niekoľkých známych spôsobov. Tieto spôsoby zahŕňajú napríklad spôsoby opísané v J. F. Ryley et al., Parasitology 73: 311 až 326 (1976) a P. L. Long et al., Fólia Veterinaria Latina VI č. 3, 201 až 217 (1976). Pri jednom spôsobe sa brojlery chované priemyselným spôsobom s vekom približne 2 týždne infikujú druhom Eimera orálnou sondou s použitím vhodnej dávky sporulovaných oocyst. Zvyčajná dávka používaná v prípade druhu E. tenella je napríklad 200 000 sporulovaných oocyst na vtáka. Potom sa zhromaždia a purifikujú oocysty infikovaných vtákov spôsobmi, ktoré sú v tomto odbore dobre známe. Vo väčšine druhov Eimera sa
5. až 7. deň po infekcii zhromažďuje vtáči trus, premieša sa a filtráciou sa zbaví zvyškov a potom sa centrifúguje pri rýchlosti dostatočnej na vytvorenie pelety so zvyšujúceho fekálneho materiálu. U E. tenella sa používa podobný postup, len s tým rozdielom, že sa cekálne jadrá odoberajú 6 dní po infekcii. Peleta sa resuspenduje v nasýtenom roztoku soli, v ktorom oocysty plávajú, a tak sa dá väčšina znečisťujúcich zvyškov odstrániť centriftigáciou. Suspenzia oocyst sa potom zriedi na nižšiu koncentráciu soli. Oocysty sa opakovane premyjú, aby sa odstránila soľ, a resuspendujú v roztoku dichrómanu draselného a koncentráciou 25 g/liter. Suscpnzia oocyst sa inkubuje pri 29 °C, pričom sa pretrepáva (pri frekvencii otáčania napríklad 140 min.1) počas asi 72 hodín, aby sa indukovala sporulácia oocyst. Alternatívne sa oocysty môžu ošetriť chlómanom sodným a potom sporulovať. Počet sporulovaných oocyst v 1 ml sa môže stanoviť priamym spočítaním s použitím hemocytometra a získaná kultúra sa skladuje, prednostne v chladničke až dovtedy, kým nie je potrebná.
Pri príprave sporocyst sa zo suspenzie oocyst opísanej odstráni dichróman draselný opakovaným premývaním, ktoré sa uskutočňuje tak, že sa oocysty oddelia centrifugáciou a resuspendujú v deionizovanej alebo destilovanej vode. Keď je dichróman odstránený, čo sa zistí na základe vymiznutia žltooranžovélno sfarbenia, zmieša sa suspenzia oocyst s rovnakým objemom chlómanu sodného (bielidla) a inkubuje 15 minút pri teplote miestnosti. Chlóman sodný sa potom odstráni opakovaným premývaním a oocysty sa resuspendujú vo fyziologickom roztoku chloridu sodného alebo deionizovanej vode. Oocysty je možné rozbiť, aby uvoľnili sporocysty, s použitím rôznych známych spôsobov. Tak napríklad sa môžu sporocysty z oocyst uvoľniť rozbitím oocyst, ktoré sa uskutoční zmiešaním so sklenými perlami s priemerom 1 až 4 mm a pretrepaním vzniknutej zmesi v ruke, miešači, v ktorom sa vytvára vír, alebo pretrepávanom inkubátore. Môže sa použiť aj ručný homogenizátor. Nerozbité oocysty a steny oocyst je možné oddeliť od uvoľnených sporocyst diferenciálnou centrifugáciou v 50 % Percoll(R> (výrobok predávaný firmou Pharmacia Biotech) alebo IM roztoku sacharózy spôsobom opísaným v Dulski et al., Avian Diseases, 32:235 až 239,1988.
Pri výrobe sporozoitov alebo prípravku bohatého na sporozoity na použitie pri spôsobe podľa vynálezu sa sporozoity excystujú zo sporocystového prípravku opísaného. Pri jednom postupe sa sporocysty pripravené uvedeným spôsobom peletizujú centrifugáciou, peleta sa resuspenduje v excystačnom tlmivom roztoku (0,5 % kyselina taurodeoxycholová a 0,25 % trypsín vo fosfátom pufrovanom roztoku chloridu sodného, pH 8,0) a za pretrepávania inkubuje 1 hodinu pri 41 °C. Vo vzorke výslednej suspenzie sa spočítaním stanoví počet sporozoitov a sporozoity sa raz premyjú kvôli odstráneniu excystačného tlmivého roztoku, potom sa resuspendujú vo fosfátom pufrovanom roztoku chloridu sodného s požadovanou koncentráciou na injekcie in ovo. Tento prípravok obsahuje sporozoity, sporocysty a oocysty a bez ďalšej purifikácie sa dá použiť pri spôsobe očkovania podľa vynálezu. Purifíkované sporozoity oddelené od sporocyst a oocyst je možné získať chromatografiou na anexe DE-52 spôsobom opísaným v D. M. Schmatz et al., J. Protozool. 31: 181 až 183 (1984). Dávka sporozoitov vhodná na použitie pri spôsobe očkovania podľa vynálezu sa bude meniť v závislosti od typu domestikovaného vtáka, ktorý má byť očkovaný a od druhov Eimera použitých v očkovacej látke. Zvyčajne bude táto dávka v rozmedzí od 10 do 106 sporozoitov vzhľadom na jedno vajce. Prednostne bude táto dávka v rozmedzí od 10 do 105, najmä od 102 do 105 sporozoitov/vajce.
Merozoity je možné pripraviť rôznymi spôsobmi, ktoré sú odborníkom v tomto odbore známe. Podľa jednej metódy sa sporozoity infikujú do primárnych kuracích obličkových buniek (PCK), ktoré sa pestujú v kultúre ako bunkové agregáty, s použitím modifikácie spôsobu opísaného v D. J. Doran, J. Parasit 57: 891 až 900 (1971). Bunky PCK sa nechajú rásť pri 40 °C v atmosfére obsahujúcej 3 % oxidu uhličitého na modifikovanom médiu RK2-DMEM/F12 s L-glutamínom a 15mM HEPES, doplnenom fetálnym teľacím sérom, penicilín-streptomycínom, hydrogenuhličitanom sodným (15mM), epidermálnym rastovým faktorom (10 ng/ml), inzulínom (5 μ/ml), transferínom (5 pg/ml), kyselinou seleničitou (5 ng/ml) a hydrochloridom hydrokortizónu (0,01 μΜ), ako je to opísané v S. D. Chung et al., J. Celí. Biol 95: 118 až 126 (1982). Bunky PCK sa získajú z obličiek dvoj- až trojtýždňových kurčiat tak, že sa obličky rozomelú a na tkanivo sa pôsobí pri 37 “C niekoľkými dávkami (0,2 mg/ml) kolagenázy (výrobok firmy Worthington Biochemical Corp., Freehold, NJ, USA) vo fosfátom pufrovanom roztoku chloridu sodného. Bunkové agregáty v supematante sa premyjú, resuspendujú v modifikovanom médiu RK2 s obsahom 5 % fetálneho teľacieho séra a použijú sa na zaočkovanie nádob na pestovanie tkanivových kultúr pri hustote 105 agregátov/cm2. Bunky PCK sa inkubujú 18 hodín pri 40 °C v atmosfére s obsahom 3 % oxidu uhličitého a potom infikujú 4 x 105 sporozoitov/cm2. Infikované kultúry sa nechajú rásť v modifikovanom médiu RK2 s obsahom 2 % fetálneho hovädzieho séra. Po 24 hodinách inkubácie, počas ktorých sa umožní invázia, sa neinvadované sporozoity odstránia tak, že sa z nádoby za miešania odstráni kultivačné médium. Vrstva buniek sa raz premyje modifikovaným médiom RK2 s obsahom 2 % fetálneho teľacieho séra a kultivačné médium sa znova zlikviduje. Pridá sa čerstvé médium RK2 a kultúry sa inkubujú ďalších 48 až 54 hodín, t. j. tak dlho, kým sa do kultivačného média neuvoľnia merozoity.
Purifikácia merozoitov kvôli odstráneniu zvyškov hostiteľských buniek sa môže uskutočniť rôznymi metódami, ktoré sú odborníkom v tomto odbore známe. Pri jednej z týchto metód, ktorá je opísaná v J. A. Olson, Antimicrob. Agents Chemother. 34: 1435 až 1439 (1990) sa kultivačné médium, obsahujúce uvoľnené merozoity, zhromaždí a odstreďuje 10 minút pri 450 x g, aby sa merozoity skoncentrovali. Peleta obsahujúca merozoity a zvyšky hostiteľských buniek sa suspenduje v 0,1 M roztoku chloridu sodného - 0,05M roztoku chloridu draselného - 20 % roztoku hovädzieho sérového albumínu a vzniknutá suspenzia sa nanesie na stĺpec anexu DE-52, ktorý bol ekvilibrovaný v 79mM Tris - 40mM dihydrogenfosforačnane sodnom - 86 mM chloride sodnom - lOOmM glukóze pri pH 8,2. Merozoity pretečú stĺpcom. Merozoity zhromaždené zo stĺpca je možné skúšať na čistotu elektrónovou mikroskopiou, ako je opísané v A. Kileian, J. Biol. Chem. 249: 4650 až 4655 (1974). Dávka merozoitov môže byť zvyčajne v rozmedzí od 10 do 106 merozoitov/vajce. Prednostne je táto dávka v rozmedzí od 10 do 105 merozoitov/vajce, najmä v rozmedzí od 102 do 105 merozoitov/vajce. Ak sa používa zmes sporozoitov a merozoitov, zahŕňa dávka celkový počet merozoitov a sporozoitov v rozmedzí od 10 do 106/vajce, prednostne od 10 do 105 merozoitov a sporozoitov/vajce a najvýhodnejšie v rozmedzí od 102 do 105 merozoitov a sporozoitov/vajce.
Sporozoity alebo merozoity alebo ich zmes sa môžu injekčné podávať in ovo v akomkoľvek fyziologicky vhodnom médiu. Prednostne sa suspendujú vo fyziologickom roztoku chloridu sodného, ako je napríklad fosfátom puftovaný fyziologický roztok chloridu sodného. Zvolené médium môže prípadne obsahovať jedno alebo viac suspenzných činidiel, ako sú napríklad fyziologicky vhodné gély, želatíny, hydrosóly, celulóza alebo polysacharidové živice.
Pri spôsobe očkovania podľa vynálezu sa in ovo injekčné podávajú prednostne súčasne sporozoity alebo merozoity, alebo ich zmes pochádzajúca z dvoch alebo viacerých druhov Eimera. Pri spôsobe očkovania podľa vynálezu sa môžu sporozoity alebo merozoity alebo ich zmes pochádzajúca zo všetkých identifikovaných druhov Eimera. ktoré môžu infikovať konkrétneho domestikovaného vtáka, ako je kurča, injekčné podávať in ovo súčasne alebo za sebou vo vhodných dávkach zaisťujúcich imunologickú ochranu proti všetkým druhom.
V kombinácii so spôsobom očkovania podľa vynálezu sa môžu podávať aj stimulátory imunity. Vhodné stimulátory imunity (na vymenovanie týchto sa vynález neobmedzuje) zahŕňajú cytokíny, rastové faktory, chemokíny, supematanty bunkových kultúr lymfocytov, monocytov alebo buniek lymfoidných orgánov, bunkové prípravky alebo bunkové extrakty (napríklad Staphylococcus aureus alebo lipopolysacharidové prípravky), mitogény alebo adjuvanty vrátane nízkomolekulových farmaceutických činidiel. Stimulátor imunity sa môže podávať in ovo kedykoľvek v priebehu inkubácie. Prednostne sa stimulátor imunity podáva in ovo v médiu obsahujúcom dávku sporozoitov alebo merozoitov Eimera alebo ich zmesi.
Účinnosť tohto vynálezu pri očkovaní proti kokcidióze je ilustrovaná v nasledujúcich príkladoch. Tieto príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohľade neobmedzujú.
Každá dávka sa podáva injekčné in ovo vo fyziologickom vhodnom roztoku chloridu sodného, ako je opísané. Účinnosť konkrétneho prípravku sa stanoví monitorovaním jeho účinku na úspešnosť liahnutia (%), hmotnosť vyliahnutých kurčiat a - po ataku infekcie- na produkciu oocyst, hmotnostný prírastok a patogenicitu (skóre lézií). Skóre lézií sa pridelí na základe protokolu opísaného v J. K. Johnson a V. M. Reid, Exp, Parasitol 28: 30 až 36, 1970, pričom skóre 0 znamená, že nie je prítomná žiadna choroba a skóre 4 znamená maximálnu patológiu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Do slepačích vajec sa 18. deň inkubácie injekčné podá prípravok obsahujúci 105 sporozoitov E. tenella/vajce. Použitý prípravok nie je purifikovaný kvôli odstráneniu sporocyst a oocyst. Každá dávka obsahuje aj približne 104 sporocyst E. tenella a približne 104 oocyst E. tenella. Ako kontrolné vajcia slúžia vajcia, do ktorých sa injekčné podá len fosfátom pufŕovaný roztok chloridu sodného. V populácii vtákov ošetrených sporozoitmi je stredný počet vylúčených oocyst 7 dní po vyliahnutí 1,1 x 106 oocyst/vták. Neinunizované vtáky a vtáky ošetrené sporozoitmi sa vy4
SK 282004 Β6 stavia ataku rôznymi dávkami sporulovaných oocyst E. tenella podaných orálnou sondou 7., 14. alebo 21. deň po vyliahnutí. Zistené údaje sú uvedené v tabuľke 1.
Tabuľka 1
Odpoveď na rôzne provokačné dávky v rôznom čase po vyliahnutí očkované/neočkované vtáky
Skóre lézií g. deň po provokácii
Skupine* 1 2 Provokačná dávka /eporulované oocyaty/vták/ bez očkovanie Po očkovaní in ovo /10^ eporožaitov 1S. deň inkuoácie/
Provokácia 0 O 0
7« deň po 2,5 x 1O3 3.0 0.3“
vyliahnutí 5 x 1O3 3.1 1,2*
1 x 1O4 3,7 1.·“
Provokácia O 0 0
14> deň po 2,5 x 1O3 2.4 0,4*
vyliahnutí 5 x 1O3 2,β 1,1*
1 x 1O4 3.3 1,6
Provokácie 0 0,1 O
21. deň po 2,5 x 1O3 2,3 0,7“
vyliahnutí 5 x lo3 2,1 0,8*
1 x 104 2,3 1.4*
Haotnostny prírastok (g)/vták za 6 dní po provokácii
Skupina1 provokačná dávka /eporulované oocysty/vták/ Bez očkovania Po očkovaní in ovo /10^ sporozoitov 10. deň inkubácie/
Provokácie 0 188 167
7· deň po 2,5 « lo3 154 153
vyliahnutí 5 x lo3 153 167
1 x 1O4 123 165*
Provokácia 0 265 276
14. deň po 2,5 x 103 260 269
vyliahnutí 5 x 1O3 244 265
1 x 1O4 235 259*
Provokácia Ú 361 357
21. deň po 2,5 x 1O3 375 35Θ
vyliahnutí 5 x 103 332 344
1 x 1Q4 337 395*
1 Každá skupina sa podrobí jednej provokácii sporulovanými oocystami 7., 14. alebo 21. deň po vyliahnutí. Tak napríklad vtáky provokované 21. deň po vyliahnutí sa neprovokujú 7. ani 14. deň po vyliahnutí.
* Významná odchýlka od hodnoty zistenej u neočkovaných vtákov (p < 0,05, ANOVA).
Údaje uvedené v tabuľke 1 jasno ukazujú, že očkované vtáky sú menej suspceptibilné proti infekcii ako ich neočkovaní druhovia z liahne, ako ukazujú znížené hodnoty skóre léziíí a zlepšené hmotnostné prírastky očkovaných vtákov. Tieto údaje ukazujú aj to, že spôsobom podľa vynálezu je možné dodať kurčatám imunitu v pomerne ranom veku (do 7 dní po vyliahnutí). Tieto údaje ukazujú ďalej i to, že imunita pokračuje v priebehu ďalšieho rastu a vývoja kurčiat. Dodaním imunity kurčatám v ranom veku sa dosahujú podstatné výhody u brojlerov, pretože brojlery spravidla dosahujú tržnú hodnotu v 6 týždňoch veku.
Príklad 2
Do slepačích vajec sa 18. deň inkubácie injekčné podá roztok chloridu sodného (kontrolný pokus) alebo prípravok obsahujúci rôznu dávku sporozoitov E. tenella, ako je uvedené v tabuľke 2 (tieto skupiny poskytujú predprovokačné výsledky). Sporozoitový prípravok použitý v každej dávke obsahuje 62 % sporozoitov, 9 % sporocyst a 29 % oocyst.
Každá dávka obsahujúca 105 sporozoitov zahŕňa celkom 1,6 x 103 štádií parazita (sporozoitov, sporocyst a oocyst).
Tabuľka 2
Účinok in ovo očkovania na úspešnosť liahnutia a hmotnosť
Počet injekčné podá- Úspešnosí liahnutia Hootnoaí po vy
ných eporozoilov/vajce / % / liahnutí / g /
18. deň inkubácie
0 94 43,2
0 94 48,0
1O3 100 49,4
104 97 47.0
1O5 94 49,1
Údaje uvedené v tabuľke 2 ukazujú, že kurčatá vyliahnuté z vajec, do ktorých boli podané živé sporozoity, sú v podstate totožné so svojimi neočkovanými druhmi z liahne, pokiaľ sa týka úspešnosti liahnutia a hmotnosti po vyliahnutí. Potom sa kurčatá 14 dni po vyliahnutí atakujú 1,25 x x 104 sporulovaných oocyst E. tenellah/tík. Oocysty sa podávajú orálnou sondou. Výsledky zistené po tejto provokácii sú uvedené v tabuľke 3.
Tabuľka 3
Odpoveď na provokačnú injekciu u neočkovaných vtákov a vtákov očkovaných in ovo rôznymi dávkami sporozoitov
Počet injektova- Haotnostný pri- Skóre lézií Vylúčené
nych sporozoitov/ rastok na vtáka 6. deň po oocyaty/
vajce 18. deň za 6 dní po pro- provokácií vták(xlo^)
inkubácie vokácii č. ceň pc
provokácii
0 278 3.2 12,3
0 321 0 0,003*
/bez provokácie,
kontrolná/
103 289 2,6* 11,2
104 291 2,7 12.2
10’ 304* 1,4* 1.4*
♦ Významná odchýlka od hodnoty zistenej u neočkovanej skupiny vtákov (ktorá dostala len roztok chloridu sodného) vystavenej provokačnému ataku (p< 0,05, ANOVA).
Údaje uvedené v tabuľke 3 ukazujú, že kurčatá vyliahnuté z vajec, do ktorých boli injektované rôzne dávky sporozoitového prípravku, majú znaky imunity podľa všetkých uvažovaných parametrov (hmotnostný prírastok, skóre lézií, vylučovanie oocyst). V porovnaní s kontrolnými vtákmi, ktorých vajcia boli ošetrené len roztokom chloridu sodného a potom vystavené provokačnému ataku infekcie, majú vtáky očkované in ovo sporozoitovým prípravkom vyššie hmotnostné prírastky a znížené hodnoty skóre lézii. Vtáky očkované in ovo sporozoitovým prípravkom okrem toho po provokačnom ataku infekcie vylučujú menej oocyst ako kontrolné vtáky, čo ukazuje, že u očkovaných vtákov je infekcia menej závažná.

Claims (16)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesi na výrobu očkovacej látky na in Ονο očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze v poslednej štvrtine inkubácie.
  2. 2. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesi podľa nároku 1 v počte 10 až 10č sporozoitov e/alebo merozoitov na účinnú imunizačnú dávku.
  3. 3. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu
    Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 1 v počte 103 až 106 sporozoitov a/alebo merozoitov na účinnú imunizačnú dávku.
  4. 4. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesi podľa nároku 1 v počte 102 až 105 sporozoitov a/alebo merozoitov na účinnú imunizačnú dávku.
  5. 5. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 2 na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie kurčiat ako domestikovaných vtákov.
  6. 6. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 5, odvodených od dvoch alebo viacerých druhov Eimera zvolených zo súboru zahŕňajúceho E. tenella, E. acervulina, E. maxima, E. necatrix, E. mitis, E. praecox a E. brunetti.
  7. 7. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 6 na výrobu očkovacej látky vo forme in ovo injekcii.
  8. 8. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 2 na výrobu očkovacej látky na podávanie v kombinácii so stimulátorom imunity.
  9. 9. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 8 na výrobu očkovacej látky na súčasné podávanie v kombinácii so stimulátorom imunity.
  10. 10. Použitie živých merozoitov rodu Eimera podľa nároku 1 v množstve 10 až 106 na účinnú imunizačnú dávku.
  11. 11. Použitie živých sporozoitov rodu Eimera podľa nároku 1 v počte 14 až 106 na účinná imunizačnú dávku.
  12. 12. Použitie živých sporozoitov rodu Eimera podľa nároku 11 purifikovaných kvôli odstráneniu sporocýst a oocyst.
  13. 13. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 2 na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie moriek ako domestikovaných vtákov.
  14. 14. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo zmesí podľa nároku 13, odvodených od dvoch alebo viacerých druhov Eimera zvolených zo súboru zahŕňajúceho E. meleagrimitis, E. adenoeides, E. gallopavonis, E. dispersa, E. meleagridis, E. innocua a E. subrotunda.
  15. 15. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 14 na výrobu očkovacej látky vo forme in ovo injekcií.
  16. 16. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu Eimera alebo ich zmesí podľa nároku 2 na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie lovných vtákov, kačíc alebo bežcov ako domestikovaných vtákov.
SK728-96A 1995-06-07 1995-06-07 Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze SK282004B6 (sk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB1995/000446 WO1996040234A1 (en) 1995-06-07 1995-06-07 In ovo vaccination against coccidiosis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK72896A3 SK72896A3 (en) 1997-11-05
SK282004B6 true SK282004B6 (sk) 2001-10-08

Family

ID=40909824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK728-96A SK282004B6 (sk) 1995-06-07 1995-06-07 Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze

Country Status (37)

Country Link
US (2) US6500438B2 (sk)
EP (1) EP0831897B1 (sk)
JP (1) JP3120860B2 (sk)
KR (1) KR0167417B1 (sk)
CN (1) CN1153510C (sk)
AR (3) AR002157A1 (sk)
AT (1) ATE200029T1 (sk)
AU (1) AU694872B2 (sk)
BG (1) BG63035B1 (sk)
BR (1) BR9602667A (sk)
CA (1) CA2223700C (sk)
CO (1) CO4440630A1 (sk)
CZ (1) CZ290810B6 (sk)
DE (1) DE69520509T2 (sk)
DK (1) DK0831897T3 (sk)
DZ (1) DZ2048A1 (sk)
ES (1) ES2155129T3 (sk)
FI (1) FI974439A (sk)
GR (1) GR3035938T3 (sk)
HU (1) HU223707B1 (sk)
IL (1) IL118490A (sk)
MA (1) MA23890A1 (sk)
MX (1) MX9709868A (sk)
MY (1) MY121973A (sk)
NZ (1) NZ286754A (sk)
PE (1) PE2998A1 (sk)
PL (1) PL184002B1 (sk)
PT (1) PT831897E (sk)
RO (1) RO113716B1 (sk)
RU (1) RU2125890C1 (sk)
SI (1) SI9600181A (sk)
SK (1) SK282004B6 (sk)
TR (1) TR199600471A2 (sk)
TW (1) TW430558B (sk)
UA (1) UA41381C2 (sk)
WO (1) WO1996040234A1 (sk)
ZA (1) ZA964726B (sk)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69520509T2 (de) * 1995-06-07 2001-07-12 Pfizer In ovo impfung gegen coccidiose
US6627205B2 (en) * 1997-12-01 2003-09-30 Pfizer Incorporated Ovo vaccination against coccidiosis
DE19828322A1 (de) * 1998-06-25 1999-12-30 Hoechst Roussel Vet Gmbh Coccidienvakzine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US6984378B1 (en) 1999-02-26 2006-01-10 Pfizer, Inc. Method for the purification, recovery, and sporulation of cysts and oocysts
WO2001034187A2 (en) * 1999-11-08 2001-05-17 Novus International, Inc. Preparation and method for prevention of coccidiosis
US20070077256A1 (en) 1999-11-19 2007-04-05 Los Angeles Biomedical Research Institute Pharmaceutical compositions and methods to vaccinate against disseminated candidiasis and other infectious agents
US6682754B2 (en) * 1999-11-24 2004-01-27 Willmar Poultry Company, Inc. Ovo delivery of an immunogen containing implant
US20020160022A1 (en) 2000-11-08 2002-10-31 Schasteen Charles S. Methods and compositions for the control of coccidiosis
BRPI0211870B1 (pt) 2001-08-30 2016-01-12 Embrex Inc método para esporulação de oocistos viáveis de eimeria
MXPA04011514A (es) * 2002-05-21 2005-08-15 Pathogenes Inc Metodos para el cultivo in vitro de sporozoea sp. y usos del mismo.
WO2007126816A2 (en) * 2006-03-30 2007-11-08 Embrex, Inc. Methods and compositions for vaccination of poultry
US20080194006A1 (en) * 2007-02-08 2008-08-14 Embrex, Inc. Methods of releasing sporocysts from oocysts using controlled shear forces
US9050281B2 (en) 2008-05-29 2015-06-09 Intervet Inc. Coccidiosis vaccines
US8252292B2 (en) * 2008-11-13 2012-08-28 Intervet International B.V. Eimeria vaccine for turkeys
US8858959B2 (en) 2011-07-15 2014-10-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Gel vaccine delivery system for treating poultry
UA114286C2 (uk) 2011-07-22 2017-05-25 Общєство С Огранічєнной Отвєтствєнностью "Новамєдіка" Спосіб лікування staphylococcus aureus
WO2014144211A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center Compositions and methods for treating fungal and bacterial pathogens
WO2017155949A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Los Angeles Biomedical Research Institute At Harbor-Ucla Medical Center Methods and kits for use in preventing and treating vulvovaginal candidiasis
US20180208885A1 (en) 2017-01-24 2018-07-26 Mary Ann Pfannenstiel Antibiotic-free compositions for the prevention or control of coccidiosis
WO2020018325A1 (en) * 2018-07-10 2020-01-23 Applied Lifesciences And Systems Poultry, Inc. Method of preparing and delivering oocyst solutions
WO2023170057A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Hipra Scientific, S.L.U. In ovo vaccine compositions against coccidiosis

Family Cites Families (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5345595B2 (sk) 1972-07-27 1978-12-07
US4040388A (en) 1976-02-27 1977-08-09 Agrimatic Corporation Method and apparatus for automatic egg injection
FR2408351A1 (fr) 1977-11-14 1979-06-08 Unilever Nv Procede et composition destines a la lutte contre la coccidiose chez la volaille
JPS5649323A (en) 1979-09-29 1981-05-02 Nisshin Flour Milling Co Ltd Coccidiostat
US4357320A (en) 1980-11-24 1982-11-02 Gist-Brocades N. V. Infectious bronchitis vaccine for poultry
US4500638A (en) 1979-11-30 1985-02-19 Gist-Brocades N.V. Infectious bronchitis virus strain
PT72077B (en) 1979-11-30 1981-09-29 Gist Brocades Nv Infectious bronchitis vaccines for poultry and process forthe preparation of such vaccines
US4735801A (en) 1982-09-07 1988-04-05 Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University Novel non-reverting salmonella live vaccines
JPS5780325A (en) 1980-09-05 1982-05-19 Nat Res Dev Coccidial disease vaccine
GB2114438A (en) 1982-02-05 1983-08-24 Akzo Nv Infectious bronchitis vaccines
US4593646A (en) 1982-06-01 1986-06-10 Agrimatic Corporation Egg injection method and apparatus
US4458630A (en) 1982-06-22 1984-07-10 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Disease control in avian species by embryonal vaccination
SE8205892D0 (sv) 1982-10-18 1982-10-18 Bror Morein Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin
US4650676A (en) 1983-08-19 1987-03-17 American Cyanamid Company Antigens and monoclonal antibodies reactive against merozoites of Eimeria spp.
US4469047A (en) 1983-10-25 1984-09-04 Miller Gary E Apparatus and method for injecting eggs
US5279960A (en) 1984-07-05 1994-01-18 Enzon Corp. 25 KD coccidial antigen of eimeria tenella
US4681063A (en) 1986-07-02 1987-07-21 Embrex Inc. High speed automated injection system for avian embryos
JP2573189B2 (ja) 1986-08-08 1997-01-22 新技術事業団 カリクレインの検出方法
US5496550A (en) 1986-08-14 1996-03-05 Chilwalner Method of reducing the output of Eimeria oocysts from a newborn chick
ES2129423T3 (es) 1986-08-18 1999-06-16 Btg Int Ltd Vacunas.
US4935007A (en) 1986-08-28 1990-06-19 Eli Lilly And Company Anticoccidial method
CA1298555C (en) 1986-08-28 1992-04-07 Kenneth William Bafundo Anticoccidial method
IL85980A (en) * 1987-04-16 1992-03-29 Embrex Inc Disease control in avian species by embryonal vaccination with a nonreplicating immunogen
GB8711256D0 (en) 1987-05-13 1987-06-17 Unilever Plc Protection
US5004607A (en) 1987-08-25 1991-04-02 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Method of immunizing poultry
US4808404A (en) 1988-01-11 1989-02-28 A. H. Robins Company, Inc. Live vaccine for coccidiosis utilizing coccidial sporozoites
ZA893740B (en) 1988-06-03 1990-02-28 Hoffmann La Roche Recombinant coccidiosis vaccines
JPH01313437A (ja) 1988-06-14 1989-12-18 Nippon Seibutsu Kagaku Kenkyusho 飼料内投与用の粒子状生ワクチン及びその製法並びに鶏コクシジウム症生ワクチン
US5068104A (en) 1988-08-01 1991-11-26 A. H. Robins Company Incorporated Live vaccine for coccidiosis utilizing coccidial sporozoites
NL8802399A (nl) 1988-09-29 1990-04-17 Marcus Theodorus Martinus Pete Preparaat, geschikt voor gebruik inzake de preventie van de bij coccidiosis optredende schade bij pluimvee, voedsel resp. drinkwater, dat een dergelijk type preparaat bevat, werkwijze voor het voorkomen van de bij coccidiosis optredende schade bij pluimv
US5028421A (en) 1989-05-25 1991-07-02 Embrex, Inc. Method of treating birds
US5106617A (en) 1989-06-27 1992-04-21 Embrex, Inc. Method of treating immature birds with IL-2
ZA9010461B (en) 1990-01-26 1991-10-30 Hoffmann La Roche Recombinant coccidiosis vaccines-5-7 eimeria surface antigen
US5288845A (en) 1991-05-29 1994-02-22 Merck And Co., Inc. Eimeria necatrix 16s rDNA probes
US5359050A (en) 1991-05-29 1994-10-25 Merck And Co., Inc. Eimeria mitis 16S or DNA probes
US5403581A (en) 1991-07-12 1995-04-04 Hoffmann-La Roche Inc. Coccidiosis vaccines
DK0594743T3 (da) 1991-07-12 1999-12-20 Pfizer Kontinuert cellelinje og vaccine mod aviær coccidia
US5311841A (en) 1992-07-10 1994-05-17 Thaxton J Paul Administration of medicaments of poultry
AU5989894A (en) * 1993-01-19 1994-08-15 Merck & Co., Inc. Live coccidiosis vaccine
CA2098773C (en) 1993-06-18 1999-09-21 Eng-Hong Lee Recombinant coccidia and its use in a vaccine
US5339766A (en) 1993-11-03 1994-08-23 Embrex, Inc. Method of introducing material into eggs during early embryonic development
JPH07206705A (ja) * 1993-11-03 1995-08-08 American Cyanamid Co 生インオボ（ｉｎ ｏｖｏ）ワクチン
DK0653489T3 (da) 1993-11-12 2003-06-10 Akzo Nobel Nv Coccidiosisvaccine til fjerkræ
DE69520509T2 (de) * 1995-06-07 2001-07-12 Pfizer In ovo impfung gegen coccidiose
US6495146B1 (en) * 1995-06-07 2002-12-17 Pfizer Incorporated In ovo vaccination against coccidiosis
US5888518A (en) 1995-10-06 1999-03-30 Beretich, Sr.; Guy R. Method for preventing and treating coccidiosis
US5807551A (en) 1996-04-01 1998-09-15 Iowa State University Research Foundation, Inc. Method to provide artificial passive immunity in birds
WO1998008699A1 (fr) 1996-08-29 1998-03-05 Kabushiki Kaisha Toyoda Jidoshokki Seisakusho Dispositif de chauffage visqueux
ES2224273T3 (es) 1996-09-30 2005-03-01 University Of Arkansas Metodo para producir inmunidad activa por medio de un conjugado de vacuna.
US6048535A (en) * 1997-06-12 2000-04-11 Regents Of The University Of Minnesota Multivalent in ovo avian vaccine
US6627205B2 (en) * 1997-12-01 2003-09-30 Pfizer Incorporated Ovo vaccination against coccidiosis
US6019985A (en) 1998-02-27 2000-02-01 Munova Corporation Immunostimulation methods for providing disease protection in poultry
US6608033B1 (en) * 1999-08-27 2003-08-19 Pfizer Inc. Treatment or prevention of coccidiosis
EP1569687B1 (en) * 2002-12-09 2010-10-06 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Coccidial vaccine and methods of making and using same

Also Published As

Publication number Publication date
MA23890A1 (fr) 1996-12-31
BG63035B1 (bg) 2001-02-28
MY121973A (en) 2006-03-31
IL118490A (en) 2000-07-26
RO113716B1 (ro) 1998-10-30
GR3035938T3 (en) 2001-08-31
US20020031530A1 (en) 2002-03-14
BG100642A (en) 1997-07-31
CZ290810B6 (cs) 2002-10-16
HUP9601554A2 (en) 1997-03-28
AR044236A2 (es) 2005-09-07
AR002157A1 (es) 1998-01-07
DZ2048A1 (fr) 2002-07-21
HUP9601554A3 (en) 2003-08-28
DE69520509T2 (de) 2001-07-12
ZA964726B (en) 1997-12-08
TR199600471A2 (tr) 1996-12-21
UA41381C2 (uk) 2001-09-17
EP0831897A1 (en) 1998-04-01
TW430558B (en) 2001-04-21
FI974439A0 (fi) 1997-12-05
DK0831897T3 (da) 2001-04-30
KR970000245A (ko) 1997-01-21
PL184002B1 (pl) 2002-08-30
DE69520509D1 (de) 2001-05-03
PL314639A1 (en) 1996-12-09
BR9602667A (pt) 1998-04-22
NZ286754A (en) 1998-06-26
WO1996040234A1 (en) 1996-12-19
CN1153510C (zh) 2004-06-16
CA2223700C (en) 2002-05-07
HU223707B1 (hu) 2004-12-28
MX9709868A (es) 1998-03-31
FI974439A (fi) 1998-01-27
PE2998A1 (es) 1998-03-02
US6500438B2 (en) 2002-12-31
US7018640B2 (en) 2006-03-28
ES2155129T3 (es) 2001-05-01
CN1145168A (zh) 1997-03-19
SK72896A3 (en) 1997-11-05
ATE200029T1 (de) 2001-04-15
CO4440630A1 (es) 1997-05-07
KR0167417B1 (ko) 1999-01-15
CA2223700A1 (en) 1996-12-19
AU694872B2 (en) 1998-07-30
IL118490A0 (en) 1996-09-12
CZ164396A3 (en) 1997-03-12
AR044235A2 (es) 2005-09-07
JPH10506920A (ja) 1998-07-07
PT831897E (pt) 2001-07-31
JP3120860B2 (ja) 2000-12-25
US20020146435A1 (en) 2002-10-10
SI9600181A (en) 1997-04-30
EP0831897B1 (en) 2001-03-28
AU5478296A (en) 1996-12-19
RU2125890C1 (ru) 1999-02-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2126267C1 (ru) Способ вакцинации домашней птицы против кокцидиоза
SK282004B6 (sk) Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze
US7816118B2 (en) Methods for the in vitro culture of Sporozoea sp. and uses thereof
US6627205B2 (en) Ovo vaccination against coccidiosis
US7211265B2 (en) Vaccination modalities