RO113716B1 - Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei - Google Patents

Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei Download PDF

Info

Publication number
RO113716B1
RO113716B1 RO96-01180A RO9601180A RO113716B1 RO 113716 B1 RO113716 B1 RO 113716B1 RO 9601180 A RO9601180 A RO 9601180A RO 113716 B1 RO113716 B1 RO 113716B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
egg
sporozoites
merozoites
eimeria
eggs
Prior art date
Application number
RO96-01180A
Other languages
English (en)
Inventor
Nigel A Evans
Craig R Findly
Frederick H Weber
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of RO113716B1 publication Critical patent/RO113716B1/ro

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/002—Protozoa antigens
    • A61K39/012—Coccidia antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/522—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells avirulent or attenuated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Prezenta invenție se referă la o metodă de vaccinare a păsărilor domestice împotriva coccidiozei, prin administrare in ovo de componenți de imunizare din specia Eimeria, ce conțin sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecul lor, în scopul imunizării puilor incubați împotriva coccidiozei.
Coccidioza este o boală enterică a păsărilor domestice provocată de infecția cu paraziți protozoari intracelulari ai genului Eimeria. Coccidioza este boala parazitară cea mai devastatoare, din punct de vedere economic, a păsărilor domestice. Se estimează că medicația anticoccidioză și pierderile datorate de această boală constituie o cheltuială foarte mare pentru industria avicolă.
Sunt cunoscute diferite încercări de vaccinare a păsărilor domestice împotriva acestei boli, prin metode de vaccinare care includ administrarea la păsări a ouăcistelor vii de Eimeria, prin amestecarea acestora cu hrană sau cu apă. Aceaste metode au totuși inconvenientul, și sunt ineficiente, deoarece nu toate păsările primesc doza care se dorește de ouăciste, și multe păsări sunt fie neprotejate, fie primesc o infecție patogenă.
în literatura de specialitate este cunoscut că puii vaccinați in vivo cu virusul herpes al curcanului au dezvoltat imunitate împotriva provocării ulterioare cu virusul bolii lui Marek.
Este cunoscut un procedeu de imunizare a păsărilor, ce constă în administrarea in ovo a unui imunogen nereplicativ. Acest antigen este un antigen de Eimeria prelucrat prin inginerie generică și un extract de ouăciste de Eimeria. Se exclude, în mod expres, stadiul de parazit viu. Această metodă de vaccinare implică administrarea in ovo a sporozoiților sau merozoiților vii de Eimeria, sau un amestec al acestora, în ouă, în cura de dezvoltare a păsărilor domestice. Literatura de specialitate sugerează că o asemenea metodă de vaccinare ar fi insuficientă, in ovo, și că ar trebui aplicată după incubare. S-a arătat că injectarea in ovo a sporozoiților de E.tenella, în ziua a zecea a incubării, nu asigură pro tecție imunologică semnificativă împotriva provocării ulterioare cu ouăciste de E.tenella. De fapt, s-a raportat că puii care nu au primit nici un tratament au avut o rată de supraviețuire mai mare împotriva provocării ulterioare cu ouăciste de E.tenella decât puii care au fost tratați in ovo cu sporozoiți. Din literatura de specialitate se mai cunoaște metoda de inoculare in ovo cu sporociste vii de E.maxima și ouăciste sporulate, dar s-a ajuns la concluzia că această metodă nu a dat nici o dovadă că expunerea in ovo protejează împotriva provocării bolii coccidiozice ulterioare cu ouăciste de E.maxima, la zece zile după incubare. S-a ajuns la concluzia că protecția imunologică semnificativă se asigură dacă inocularea se face imediat după incubare, decât in ovo.
Metoda de vaccinare a păsărilor domestice, în conformitate cu prezenta invenție, constă în aceea că se administrează in ovo prin injectare, în ultimul sfert al perioadei de incubare, o doză de 1D ... 10s de sporozoiți sau merozoiți sau amestecul lor din specia Eimeria. Metoda mai prevede și administrarea in ovo a unui imunostimulator în orice moment al perioadei de incubare. Pasărea domestică este un pui sau un curcan. Sporozoiții sau merozoiții vii sau amestecurile acestora provin din două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintrun grup care cuprinde E.tenella, E.acervulina, E. maxima, E.necatrix, E.praecox și E.brunetti sau dintr-un grup care cuprinde E.meleagimitis, E.adenoeides, E.gallopanovis, E. dispersa, E.meleagridis, E.innocua și E.subrotunda.
Sporozoiții folosiți au fost purificați prin îndepărtarea sporociștilor și oociștilor.
Avantajul invenției este că toate păsările primesc doza dorită de vaccin și nu sunt supuse unei infecții cu patogeni.
Termenul de “pasărefi] domestică (e)” așa cum s-a folosit în prezenta invenție include pui, curcă, rață, păsări de agrement [incluzând, dar fără să se limiteze, la prepeliță, fazani și gâște] și ratite (incluzând, dar fără să limiteze, la
RO 113716 Bl struț).
Termenul “in ovo, așa cum este folosit în cadrul prezentei invenții se referă la administrarea într-un ou de pasăre domestică care conține un embrion viu în curs de dezvoltare.
Termenul “administrat in ovo se referă la administrarea vaccinului descris în prezenta invenție, la un ou de pasăre domestică care conține un embrion viu în curs de dezvoltare, prin orice mijloace de penetrare a cojii oului și introducerea vaccinului. Astfel de mijloace de administrare includ, dar nu se limitează, la injectarea vaccinului.
Termenul “ultimul sfert al incubării “ se referă la sfertul final al incubării unui ou în dezvoltare al unei păsări domestice.
Termenul “Eimeria se referă la una sau mai multe specii ale genului Eimeria care infectează păsările domestice. Asemenea specii de Eimeria includ pe cele care sunt găsite în pui, inclusiv E.tenella, E.acervulina, E. maxima, E.necatrix, E.mitis, E.praecox și de asemenea pe cele care sunt găsite în curcani, incluzând E.meleagrimitis, E.adenoides, E.gallopavonis, E. dispersa, E.meleagridis, E.innocua și E.subrotunda și de asemenea specii de Eimeria care infectează alte păsări domestice. Termenul “Eimeria cuprinde de asemenea toate tulpinile speciilor anterioare ale Eimeriei, incluzând, dar fără să se limiteze, la tulpini precoce și tulpini atenuate care includ tulpini care au fost iradiate sau au fost tratate în alt mod, astfel încât ele eșuează în definitivarea dezvoltării. Acest termen mai include, de asemenea, orice tulpină nou descoperită sau alte specii de Eimeria care infectează păsările domestice, precum cele definite mai sus.
Termenii de sporozoiți” și “sporociste”, precum și “ouăciste” și “merozoiți”, se referă la sporozoiți, ouăciste, merozoiți și sporociste vii din specia Eimeria.
Termenul “doze de imunizare eficientă” se referă la un număr de sporozoiți sau merozoiți, sau amestecul lor, care este suficient pentru a asigura pro4 tecție imunologică la păsările incubate, care este mai mare decât imunitatea inerentă a păsărilor care nu au fost imunizate. Așa cum s-a folosit, în cadrul prezentei invenții, termenul de “imunizat” și “vaccinat” sunt sinonime.
în conformitate cu prezenta invenție, o doză preferată care se poate administra cuprinde 10 până la 1Q6 sporozoiți sau merozoiți, sau un amestec al acestora, în care numărul total al numiților sporozoiți și merozoiți este cuprins în domeniul de la 10 până la 106.
□ doză mai preferată cuprinde 103 până la 10B sporozoiți sau merozoiți, sau amestecul lor, în care numărul total al numiților sporozoiți și merozoiți este cuprins în domeniul de la 103 până la 10B.
Altă doză preferată cuprinde 102 până la 105 sporozoiți sau merozoiți, sau un amestec al acestora, în care numărul total al numiților sporozoiți este cuprins în domeniul de la 102 până la 105.
O pasăre domestică preferată pentru vaccinat, în conformitate cu prezenta invenție, este un pui.
O doză preferată de administrat in ovo la ouă de pui, cuprinde sporozoiți sau merozoiți, sau un amestec al acestora din două sau mai multe specii de Eimeria alese dintr-un grup care constă din E.tenella, E.acervulina, E.maxima, E.necatrix, E.mitis, E.praecox și E.brunetti. Doza include de preferință de la 10 până la 106 sporozoiți sau merozoiți sau un amestec al acestora pentru fiecare specie care este cuprinsă în doză.
Altă pasăre domestică preferată pentru a fi vaccinată, în conformitate cu prezenta invenție, este și un curcan.
O doză preferată de administrat in ovo la ouă de curcă cuprinde sporoizi sau merozoiți, sau un amestec al acestora, a două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintr-un grup care constă din E.meleagrimitis, E.adenoides, E.gallopavonis, E.dispersa, E.meleagridis și E.subrotunda. Doza include de preferință de la 10 până la 106 sporozoiți sau merozoiți sau un amestec al acestora pentru fiecare specie care este cuprinsă în
RO 113716 Bl doză.
Alte păsări domestice preferate pentru vaccinare, în conformitate cu metoda din prezenta invenție, sunt păsări de agrement, rațe și ratite. 5
Metoda de tratament în conformitate cu prezenta invenție mai cuprinde, suplimentar, administrarea in ovo și a unui imunostimulator, care poate fi administrat în orice moment din timpul incu- io bării. O metodă preferată de administrare a imunostimulatorului este administrarea simultană in ovo cu doza de sporozoiți sau merozoiți sau amestecul numiților sporozoiți și merozoiți, în ultimul 15 sfert al timpului de incubare. Deci prezenta metodă de vaccinare implică administrarea in ovo, în timpul sfertului final al incubării a sporozoiților sau merozoiților vii din specia Eimeria sau a unui 20 amestec al acestora, în ouă ale păsărilor domestice. în cazul puilor, administrarea in ovo se face de preferință în zilele 15 20 ale incubării, și cel mai preferat, în ziua de 18 a incubării. în cazul curcani- 25 lor, administrarea in ovo se face de preferință în zilele 21-26 ale incubării.
Prezenta metodă de vaccinare se poate realiza folosind orice metodă de administrare in ovo adecvată și cunoscu- 30 tă din literatura de specialitate. De preferință, vaccinul folosit în prezenta metodă se administrează prin intermediul injectării. în conformitate cu o metodă de vaccinare, se realizează un orificiu în coaja 35 oului la capătul mare, folosind un ac de calibru 18, pentru expunerea camerei de aer a oului. Astfel, un ac de calibru 22, atașat la o seringă de mărime corespunzătoare (1... 3 ml), se poate introduce 40 prin orificiu și prin membrana camerei de aer. Un număr corespunzător de sporozoiți sau merozoiți, sau când s-a amestecat un număr corespunzător de sporozoiți sau merozoiți, se suspendă într-un 45 purtător lichid care este adecvat, de exemplu în 10 ... 500 pl de soluție salină tamponată și apoi se injectează în ou. Volumul corespunzător care se administrează este în funcție de mărimea oului 50 care trebuie tratat, de exemplu ouăle de struț fiind capabile să primească un volum mai mare decât ouăle de pui. Locul injectării poate fi în orice regiune a oului sau a embrionului. De preferință, injectarea se face axial, prin centrul capătului mare al oului, în amnios.
Alternativ, pentru aplicarea metodei din prezenta invenție se poate folosi un sistem automat pentru injectat ouă. Aceste sisteme automate sunt descrise în literatura de specialitate.
Ouăcistele se pot prepara prin oricare dintre metodele care sunt cunoscute specialiștilor în domeniu. Conform cu una dintre metodele cunoscute în domeniu, puii broiler comerciali în vârstă de aproximativ două săptămâni se injectează cu specia Eimeria de interes, prin gavaj oral al unei doze corespunzătoare de ouăciste sporulate. De exemplu, o doză uzuală folosită în acest scop pentru E.tenella este 200.000 ouăciste sporulate/pasăre. în continuare, sunt urmate procedurii binecunoscute în domeniu, în ceea ce privește colectarea și purificarea ouăcistelor de la păsările infectate. Pentru majoritatea speciilor Eimeria se colectează materiile fecale de la păsările infectate, la 5 ... 7 zile după infecție, se amestecă și se filtrează pentru îndepărtarea deșeurilor, apoi se centrifughează la o viteză suficientă pentru a se aglomera materiile fecale care rămân. Pentru E.tenella se folosește o procedură similară, cu excepția că miezurile cecale se recoltează la șase zile după infecție. Paietul obținut se resuspendă într-o soluție saturată de clorură de sodiu, în care ouăcistele plutesc și majoritatea deșeurilor contaminate se pot îndepărta prin centrifugare. Suspensia de ouăciste se diluează apoi la concentrație mai mică de sare. Ouăcistele se spală repetat pentru îndepărtarea clorurii de sodiu și se resuspendă în soluție de bicromat de potasiu de concentrație 2,5 % g/v. Suspensia de ouăciste se incubează la temperatura de 29°C cu agitare, de exemplu rotație de 140 rpm, timp de aproape 72 ore, în scopul inducerii sporulării ouăcistelor. Alternativ, ouăcistele se pot trata cu hipoclorit de sodiu șl apoi sporulează.Numărul de ouăciste sporulate /ml
RO 113716 Bl se determină prin numărarea directă, folosind un hemocitometru, după care cultura se depozitează de preferință prin refrigerare, până în momentul utilizării.
Pentru a prepara sporociste, se îndepărtează bicromatul de potasiu din suspensia de ouăciste care a fost descrisă mai sus, prin spălare repetată a ouăcistelor care implică colectarea ouăcistelor prin centrifugare și resuspendarea în apă deionizată sau apă distilată. Când bicromatul de potasiu a fost îndepărtat, care va fi apreciat prin lipsa colorației galben-portocaliu, suspensia de ouăciste se amestecă cu un volum egal de hipoclorit de sodiu (cu rol de albitor) și se incubează la temperatura camerei timp de 15 minute. Hipocloritul de sodiu se îndepărtează apoi prin splări repetate, și ouăcistele se resuspendă în soluție salină fiziologică sau apă deionizată. Ouăcistele pot fi rupte pentru eliberarea sporocistelor, folosind o diversitate de tehnici care sunt cunoscute în domeniul de specialitate. De exemplu, ouăcistele pot fi rupte pentru eliberarea sporocistelor, prin amestecarea ouăcistelor cu bile de sticlă de 1 ... 4 mm diametru și agitare manuală, agitare cu mixer sau un agitator cu incubare sau folosind un omogenizator manual. Ouăcistele intacte și pereții ouăcistelor se pot separa de sporocistele eliberate prin centrifugare diferențială în 50 % Percoll™, sau sucroză 1M, așa cum s-a descris în literatura de specialitate.
Pentru a prepara sporozoiți sau un preparat îmbogățit în sporozoiți, pentru a fi folosit în conformitate cu prezenta invenție, sporozoiți sunt excizați din preparatul de sporociste descris mai sus. într-una din proceduri, sporocistele, preparate cum s-a desris mai sus, se aglomerează prin centrifugare, se resuspendă în tampon de excizare (acid taurodeoxicolic 0,5 % și tripsină 0,25 % în soluție de fosfat salină cu pH 8,0) și se incubează timp de o oră, cu agitare la temperatura de 41 °C. O probă din suspensia care a rezultat se numără, pentru a fi determinat numărul de sporozoiți, după care sporozoiți se spală o dată pentru îndepărtarea tamponului de excizare și se resuspendă în soluție salină tampon de fosfat la o concentrație dorită, pentru a fi apoi injectată in ovo. Acest preparat conține sporozoiți, sporociste și oucăsite și, fără purificare ulterioară, se poate folosi în conformitate cu metoda din prezenta invenție. Sporozoiții purificați îndepărtați de sporociste și ouăciste se pot prepara prin cromatografie de schimb anionic DE-52, așa cum este descris în literatura de specialitate. Doza de sporozoiți care trebuie folosită în conformitate cu metoda din prezenta invenție va depinde de tipul păsării domestice care trebuie vaccinată, precum și de specia de Eimeria care a fost folosită la obținerea de vaccin. în general, doza folosită poate fi cuprinsă în domeniul de la 10 până la 106 sporozoiți/ou. De preferință, doza folosită poate fi în domeniul de la 10 până la 105 sporozoiți/ou, și mai preferat doza este cuprinsă în domeniul de la 102 până la 105 sporozoiți/ou.
Merozoiții se pot prepara prin diverse metode care sunt cunoscute specialiștilor în domeniu. într-una dintre aceste metode, se infectează cu sporozoiți celulele primare renale de pui (PCK), care sunt crescute în culturi ca agregate celulare. Astfel, celulele PCK se incubează la temperatura de 40°C în atmosferă de 3 % bioxid de carbon și pe mediu modificat RK2-DMEM/F12 cu L-glutamină și 15 mM HEPES, suplimentat cu ser fetal bovin, penicilină-streptomicină, 15 mM bicarbonat de sodiu, 10 ng/ml factor de creștere epidermală, 5 pg/ml insulină, 5 pg/ml transferină, 5 ng/ml acid selenios și 0,01 pM hidrocortizon clorhidric, așa cum este descris în literatura de specialitate. Celulele PCK se prepară din rinichi de pui în vârstă de două până la trei săptămâni, prin mărunțirea rinichiului și apoi tratarea acestui țesut, la temperatura de 37°C, cu câteva doze de colageneză 0,2 mg/ml și în soluție salină tamponată de fosfat. Agregatele celulare din supernatant se spală, se resuspendă apoi în mediu RK2 modificat, care conține 5 % ser bovin fetal și se
RO 113716 Bl folosește pentru însămânțarea baloanelor cu culturi de țesut, la o densitate de 1O5 agregate/cma. Celulele PCK se incubează la temperatura de 40°C timp de 18 ore, în atmosferă ce conține 3 % bioxid de carbon și apoi se infectează cu 4 x 1O5 sporozoiți/cm2. Culturile infectate se cultivă apoi pe mediu RK2 modificat, care conține 2 % ser bovin fetal. După o perioadă de incubare de 24 ore se realizează invadarea, iar sporozoiții neinvadați se îndepărtează prin agitarea balonului și îndepărtarea mediului de cultură. Stratul celular se spală o dată cu mediu RK2 modificat, ce conține 2% ser bovin fetal, iar mediul de cultură se elimină din nou. Se adaugă apoi mediul de cultură RK2 proaspăt și culturile se incubează pentru o perioadă de alte 48 până la 54 ore, până când merozoiții se eliberează în mediul de cultură.
Purificarea merozoiților, pentru îndepărtarea resturilor celulelor gazdă, se poate face prin îndepărtarea resturilor celulelor gazdă, se poate face prin diverse metode care sunt cunoscute specialiștilor în domeniu. în conformitate cu una dintre aceste metode, mediul de cultură ce conține merozoiții eliberați se colectează și se centrifughează la turația de 450 x g, timp de 10 minute, pentru concentrația merozoiților. Paietul care conține merozoiții și resturile celulei gazdă se supendăîn 0,1 MNaCI-0,05 M KCI și 20 % albumină serică bovină, și apoi se aplică pe o coloană de schimb ionic (anionic) DE-52 echilibrată în 75 mM Tris- 40 mM NaH2P04-86 mM NaCI-100 mM glucoză la un pH 8,2. în această situație merozoiții curg prin coloană. Merozoiții colectați din coloană se pot testa pentru puritate, prin microscopie electronică, așa cum este descris în literatura de specialitate. în general, doza de merozoiți poate fi folosită în domeniul de la 10 până la 106 merozoiți/ou. De preferință, doza este în domeniul de la 10a până la 105 merozoiți/ou. Când sporozoiții și merozoiții sunt amestecați, în general, doza care cuprinde numărul total de merozoiți și sporozoiți poate fi cuprinsă în domeniul de la 10 până la 105 merozoiți și sporozoiți/ou, și mai preferat doza este cuprinsă în domeniul de la 102 până la 105 merozoiți și sporozoiți/ou.
Sporozoiții sau merozoiții sau amestecul lor se pot injecta in avo în orice mediu care corespunde din punct de vedere fiziologic. De preferință, aceștia sunt suspendați într-o soluție salină echilibrată fiziologic, cum ar fi soluția salină tamponată fosfat. Mediul ales poate include, opțional, unul sau mai mulți agenți de suspendare, cum ar fi, deexemplu, geluri corespunzătoare din punct de vedere fiziologic, hidrosoli, celuloză sau gume polizaharidice.
De preferință, în prezenta metodă de vaccinare, sporozoiții sau merozoiții, sau un amestec al acestora a două sau mai multe specii Eimeria, sunt injectate in ovo în același moment. în conformitate cu prezenta invenție, sporozoiții sau merozoiții sau un amestec al lor de la toate speciile de Eimeria indentificate care infectează o pasăre domestică, cum ar fi puii, se pot injecta in ovo în același moment sau în serii, în doze corespunzătoare pentru a asigura protecția imunologică împotriva tuturor speciilor.
Așa cum s-a amintit mai sus, se pot utiliza, în metoda din prezenta invenție, și imunostimulatori. Imunostimulatorii adecvați includ, dar nu se limitează, citokine, factori de creștere, chemochine, supernatante de la culturi celulare de limfocite, monocite sau celule din organe limfoide, preparate celulare sau extracte celulare (de exemplu, Staphylococcus aureus sau preparate lipopolizaharidice], mitogeni sau adjuvanți, inclusiv medicamente cu greutate moleculară scăzută. Un imunostimulator poate fi administrat in ovo, în orice moment din timpul incubării. De preferință, un imunostimulator se poate adminsitra in ovo în mediul care conține doza de sporozoiți sau merozoiți de Eimeria sau amestecul lor.
Eficacitatea prezentei invenții în vaccinarea împotriva coccidiozei este ilustrată în exemplele de realizare care urmează. Fiecare doză s-a injectat in
RO 113716 Bl ovo, într-o soluție salină acceptabilă din punct de vedere fiziologic, așa cum s-a arătat mai sus. Eficacitatea unui preparat anume s-a determinat prin monitorizarea efectului său asupra ratei incubării și greutatea la incubare a puilor, și după provocarea infecției, producerea de ouăciste, sporul de greutate și patogenitatea (scorul leziunii). Aceste scoruri ale leziunii s-au atribuit conform protocolului care este descris în literatura de specialitate, conform căruia o valoare de zero reprezintă nici o îmbolnăvire, iar o valoare de patru reprezintă maximum de îmbolnăviri.
Se dau în continuare două exemple de realizare a invenției.
Exemplul 1. S-au injectat ouă de pui, în ziua 18 de incubare, cu un prepa rat care conține 1O5 sporoizi de E.tenella/ou. Acest preparat nu a fost purificat pentru îndepărtarea sporocistelor și ouăcistelor. Fiecare doză a conținut de 5 asemenea aproximativ 10 sporociste de E.tenella și aproximativ 1O oucăsite de E.tenella. Drept control, ouăle s-au injectat numai cu soluție salină tamponată de fosfat; Din populația de păsări tratate cu 0 sporozoiți, media ouăcistelor eliminate la zile post incubare ă fost de 1,1 x 106 oucăsite/pasăre. Păsările neimunizate și păsările tratate cu sporozoiți,au fost provocate cu diverse doze de ouăciste sporulate de E.tenella, care au fost administrate prin gavaj oral în zilele 7, 14 sau 21 zile după incubare. Rezultatele obținute sunt date în tabelul 1, care urmează.
Tabelul 1
Scorul leziunii în ziua a 6-a după provocare Spor de greutate (g), După 6 zile după provocare
Grup1 Doză de provocare (ouăciste sporulate/pasăre] Neimunizate Imunizare in ovo(105 sporozoiți, în ziua 18-a incubării] Neimunizate Imunizare in ovo (105 sporozoiți în ziua 18a incubării)
Provocare □ D 0 188 167
în ziua 7 2,5 χ 103 3,0 0,3- 154 153
post 5 χ 103 3,1 1,2S 153 167
incubare 1 x104 3,7 1,5- 123 165-
Provocare □ □ 0 266 278
în ziua 14 2,5 χ 103 2,4 0,4- 260 269
post 5 x 103 2,8 1, 1g 244 265
incubare 1 χ 104 3,3 1,6- 235 259
Provocare 0 0,1 0 361 357
în ziua 21 2,5 χ 103 2,3 □,7g 375 358
post 5 χ 103 2,1 0,8- 332 344
incubare 1 χ 104 2,8 1.45 337 395-
1_ - fiecare grup a fost supus la o 4 5 provocare unică de ouăciste sporulate în zilele 7, 14 sau 21 postincubare. De exemplu, păsările provocate în ziua 21 postincubare nu au fost provocate în zilele 7 sau 14 postincubare. 50
- diferență semnificativă la păsările neimunizate (p<0,05, ANOVA).
Datele din tabelul 1 de mai sus arată în mod clar că păsările imunizate au fost mai puțin susceptibile la infecție, decât perechile lor incubate neimunizate,
RO 113716 Bl așa cum s-a arătat prin scorurile de leziune reduse și îmbunătățirea sporurilor în greutate la păsările imunizate. Aceste date demonstrează, de asemenea, că metoda de vaccinare în confor- 5 mitate cu prezenta invenție realizează imunitate la pui, la o vârstă relativ timpurie (în 7 zile post incubare). Mai mult decât atât, datele, arată că imunitatea continuă la puii care cresc și se dezvoltă, io Realizarea imunității la pui, la o vârstă timpurie, asigură un avantaj semnificativ în industria de pui broiler, deoarece acești pui ajung de obicei pentru consum pe piață, la vârsta de șase săptămâni.
Exemplul 2. S-au injectat ouăle de pui, în ziua 18 de la incubare, cu soluție salină(control) sau cu preparate ce conțin diferite doze de sporozoiți de E.tenella. în tabelul 2 care urmează se dau rezultatele obținute în urma provocării. Preparatele de sporozoiți, folosite pentru fiecare doză, au conținut 62% sporozoiți, 9% sporociste și 29 % ouăciste. Fiecare doză care conține 105 sporozoiți a inclus un total de 1,6 x 1O5 stadii de parazit (sporozoiți, sporociste și ouăciste).
Tabelul 2
Efectul vaccinării in ovo, asupra ratei incubării și greutății.
Sporozoiți injectați/ou, în ziua 18 a incubării Rata de incubare (%] Greutate la incubare [g]
□ 94 48,9
0 94 48,0
103 100 49,4
104 97 47,0
105 94 49,1
Datele din tabelul 2 arată că puii incubați din ouă injectate cu sporozoiți vii au fost în principal identici perechilor 25 incubate neimunizate în termenii ratei de incubare și greutății la incubare. Apoi, puii au fost provocări în ziua 14 postincubare cu o doză de 1,25 x 10 ouăciste sporulate de E.tenella per pasăre, administrarea făcându-se prin gavaj oral. Rezultatele obținute post provocare, sunt date în tabelul 3, care urmează.
Tabelul 3
Răspuns la infecția provocată a păsărilor neimunizate, față de păsările tratate in ovo cu diferite doze de sporozoiți.
Sporozoiți injectați/ou în ziua 18 a incubării Spor de greutate per pasăre după 6 zile după provocare Scorul leziunii în ziua a 8 după provocare Ouăciste eliminate/pasăre în ziua 8 după provocare
0 978 3,9 19,3
O(control neprovocat] 391 0 0,003*
103 989 9,6* 11,9*
104 991 9,7 19,9
105 304* 1,4* 1,4*
X = diferență semnificativă de grupul neimunizat [a primit soluție salină] care s-a supus la provocare [p< 0,05 ANOVA)
RO 113716 Bl
Datele din tabelul 3 arată că pentru fiecare parametru (spor de greutate, scorul leziunii, eliminarea ouăcistelor), puii incubați din ouă injectate cu diferite doze de preparate de sporozoiți au dove- 5 dit faptul că sunt imunizați. Comparativ cu păsările de control, care s-au tratat numai cu soluție salină și s-au supus la infecția provocată, păsările imunizate in ovo cu preparatul de sporozoiți au pre- io zentat un spor de greutate mai mare și scoruri de leziune reduse. Suplimentar, păsările imunizate in ovo cu preparatul de sporozoiți au fost purtătoare de mai puține ouăciste decât păsările de control 15 după infecția provocată, arătând astfel că infecția a fost mai puțin severă la păsările imunizate.

Claims (8)

1. Metodă de vaccinare a păsărilor domestice împotriva coccidiozei, prin administrare in ovo de componenți de imunizare din specia Eimeria ce conțin 2 sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecul lor, caracterizată prin aceea că , se administrează in ovo ,prin injectare, în ultimul sfert al perioadei de incubare, o doză de 1D ... 106 din respectivii sporo- 3 zoiți sau merozoiți sau amestecul lor.
2. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, mai cu16 prinde în plus administrarea in ovo a unui imunostimulator în orice moment al perioadei de incubare.
3. Metodă, conform revendicării
1, caracterizată prin aceea că, respectiva pasăre domestică este un pui.
4. Metodă, conform revendicării 3, caracterizată prin aceea că, respectivii sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecurile acestora provin din două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintr-un grup care cuprinde E.tenella, E.acervulina, E. maxima, E.necatrix, E. praecox și E. brunetti.
5. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, pasărea domestică este un curcan.
6. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectivi sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecurile acestora provin din două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintr-un grup care cuprinde E.meleagrimitis, E.adenoides, E.gallopanovis, E. dispersa, E. meleagridis, E. innocua și E. subrotunda.
7. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectiva doză cuprinde merozoiți.
8. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectivii sporozoiți au fost purificați prin îndepărtarea sporozoiților și ouăciștilor.
Președintele comisiei de examinare: chim. Hăulică Mariela Examinator: farm. Pentelescu Elena
Edil
Editare și tehnoredactare computerizată - OSIM
Tipărit la: Oficiul de Stat pentru Invenții și Mărci
RO 113716 Bl
VERSIUNE CORECTATA - CORRECTED VERSION Semnalat în: / Reffered to in: BOPÎ 7/1999
Datele din tabelul 3 arată că pentru fiecare parametru (spor de greutate, scorul leziunii, eliminarea ouăcistelor), puii incubați din ouă injectate cu diferite doze de preparate de sporozoiți au dove- 5 dit faptul că sunt imunizați. Comparativ cu păsările de control, care s-au tratat numai cu soluție salină și s-au supus la infecția provocată, păsările imunizate in ovo cu preparatul de sporozoiți au pre- io zentat un spor de greutate mai mare și scoruri de leziune reduse. Suplimentar, păsările imunizate in ovo cu preparatul de sporozoiți au fost purtătoare de mai puține ouăciste decât păsările de control 15 după infecția provocată, arătând astfel că infecția a fost mai puțin severă la păsările imunizate.
Revendicări 20
1. Metodă de vaccinare a păsărilor domestice împotriva coccidiozei, prin administrare in ovo de componenți de imunizare din specia Eimeria ce conțin 25 sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecul lor, caracterizată prin aceea că , se administrează in ovo ,prin injectare, în ultimul sfert al perioadei de incubare, o doză de 10 ... 1D6 din respectivii sporo- 30 zoiți sau merozoiți sau amestecul lor.
2. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, mai cu16 prinde în plus administrarea in ovo a unui imunostimulator în orice moment al perioadei de incubare.
3. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectiva pasăre domestică este un pui.
4. Metodă, conform revendicării 3, caracterizată prin aceea că, respectivii sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecurile acestora provin din două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintr-un grup care cuprinde E.tenella, E.acervulina, E. maxima, E.necatrix, E. mutis, E. praecox și E. brunetti.
5. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, pasărea domestică este un curcan.
6. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectivi sporozoiți sau merozoiți vii sau amestecurile acestora provin din două sau mai multe specii de Eimeria, alese dintr-un grup care cuprinde E.meleagrimitis, E.adenoides, E.gallopavonis, E. dispersa, E. meleagrîdis, E. innocua și E. subrotunda.
7. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectiva doză cuprinde merozoiți.
8. Metodă, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, respectivii sporozoiți au fost purificați prin îndepărtarea sporozoiților și ouăciștilor.
RO96-01180A 1995-06-07 1996-06-07 Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei RO113716B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB1995/000446 WO1996040234A1 (en) 1995-06-07 1995-06-07 In ovo vaccination against coccidiosis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO113716B1 true RO113716B1 (ro) 1998-10-30

Family

ID=40909824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO96-01180A RO113716B1 (ro) 1995-06-07 1996-06-07 Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei

Country Status (37)

Country Link
US (2) US6500438B2 (ro)
EP (1) EP0831897B1 (ro)
JP (1) JP3120860B2 (ro)
KR (1) KR0167417B1 (ro)
CN (1) CN1153510C (ro)
AR (3) AR002157A1 (ro)
AT (1) ATE200029T1 (ro)
AU (1) AU694872B2 (ro)
BG (1) BG63035B1 (ro)
BR (1) BR9602667A (ro)
CA (1) CA2223700C (ro)
CO (1) CO4440630A1 (ro)
CZ (1) CZ290810B6 (ro)
DE (1) DE69520509T2 (ro)
DK (1) DK0831897T3 (ro)
DZ (1) DZ2048A1 (ro)
ES (1) ES2155129T3 (ro)
FI (1) FI974439A7 (ro)
GR (1) GR3035938T3 (ro)
HU (1) HU223707B1 (ro)
IL (1) IL118490A (ro)
MA (1) MA23890A1 (ro)
MX (1) MX9709868A (ro)
MY (1) MY121973A (ro)
NZ (1) NZ286754A (ro)
PE (1) PE2998A1 (ro)
PL (1) PL184002B1 (ro)
PT (1) PT831897E (ro)
RO (1) RO113716B1 (ro)
RU (1) RU2125890C1 (ro)
SI (1) SI9600181A (ro)
SK (1) SK282004B6 (ro)
TR (1) TR199600471A2 (ro)
TW (1) TW430558B (ro)
UA (1) UA41381C2 (ro)
WO (1) WO1996040234A1 (ro)
ZA (1) ZA964726B (ro)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SK282004B6 (sk) * 1995-06-07 2001-10-08 Pfizer Inc. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze
US6627205B2 (en) * 1997-12-01 2003-09-30 Pfizer Incorporated Ovo vaccination against coccidiosis
DE19828322A1 (de) * 1998-06-25 1999-12-30 Hoechst Roussel Vet Gmbh Coccidienvakzine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US6984378B1 (en) * 1999-02-26 2006-01-10 Pfizer, Inc. Method for the purification, recovery, and sporulation of cysts and oocysts
WO2001034187A2 (en) * 1999-11-08 2001-05-17 Novus International, Inc. Preparation and method for prevention of coccidiosis
US20070077256A1 (en) 1999-11-19 2007-04-05 Los Angeles Biomedical Research Institute Pharmaceutical compositions and methods to vaccinate against disseminated candidiasis and other infectious agents
US6682754B2 (en) * 1999-11-24 2004-01-27 Willmar Poultry Company, Inc. Ovo delivery of an immunogen containing implant
US20020160022A1 (en) 2000-11-08 2002-10-31 Schasteen Charles S. Methods and compositions for the control of coccidiosis
CN101381681B (zh) 2001-08-30 2013-08-07 恩布里克斯公司 制备卵囊的改进方法
CN100528225C (zh) * 2002-05-21 2009-08-19 先灵-普劳有限公司 孢子纲物种体外培养的方法及其用途
PT2004220E (pt) * 2006-03-30 2015-09-24 Zoetis Services Llc Métodos e composições para vacinação de aves de capoeira
US20080194006A1 (en) * 2007-02-08 2008-08-14 Embrex, Inc. Methods of releasing sporocysts from oocysts using controlled shear forces
TW201010717A (en) 2008-05-29 2010-03-16 Intervet Int Bv Coccidiosis vaccines
EP2355844A2 (en) 2008-11-13 2011-08-17 Intervet International BV Eimeria vaccine for turkeys
US8858959B2 (en) 2011-07-15 2014-10-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Gel vaccine delivery system for treating poultry
JP2014521605A (ja) 2011-07-22 2014-08-28 ノバダイム セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓに対してワクチン接種するための方法および組成物
EP2968497B1 (en) 2013-03-15 2020-08-12 Los Angeles Biomedical Research Institute at Harbor-UCLA Medical Center Compositions and methods for treating fungal and bacterial pathogens
EP3426287A4 (en) 2016-03-09 2020-03-11 Los Angeles Biomedical Research Institute at Harbor-UCLA Medical Center Methods and kits for use in preventing and treating vulvovaginal candidiasis
US20180208885A1 (en) 2017-01-24 2018-07-26 Mary Ann Pfannenstiel Antibiotic-free compositions for the prevention or control of coccidiosis
MX2021000344A (es) * 2018-07-10 2021-03-25 Applied Lifesciences And Systems Llc Metodo para preparar y suministrar soluciones de ovoquistes.
US20250161424A1 (en) 2022-03-08 2025-05-22 Hipra Scientific, S.L.U. In ovo vaccine compositions against coccidiosis

Family Cites Families (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5345595B2 (ro) 1972-07-27 1978-12-07
US4040388A (en) 1976-02-27 1977-08-09 Agrimatic Corporation Method and apparatus for automatic egg injection
DE2849226A1 (de) 1977-11-14 1979-05-17 Unilever Nv Verfahren zur wachstumsfoerderung von gefluegel, mittel zu seiner durchfuehrung und deren herstellung
JPS5649323A (en) 1979-09-29 1981-05-02 Nisshin Flour Milling Co Ltd Coccidiostat
US4357320A (en) 1980-11-24 1982-11-02 Gist-Brocades N. V. Infectious bronchitis vaccine for poultry
US4500638A (en) 1979-11-30 1985-02-19 Gist-Brocades N.V. Infectious bronchitis virus strain
PT72077B (en) 1979-11-30 1981-09-29 Gist Brocades Nv Infectious bronchitis vaccines for poultry and process forthe preparation of such vaccines
US4735801A (en) 1982-09-07 1988-04-05 Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University Novel non-reverting salmonella live vaccines
JPS5780325A (en) 1980-09-05 1982-05-19 Nat Res Dev Coccidial disease vaccine
GB2114438A (en) 1982-02-05 1983-08-24 Akzo Nv Infectious bronchitis vaccines
US4593646A (en) 1982-06-01 1986-06-10 Agrimatic Corporation Egg injection method and apparatus
US4458630A (en) 1982-06-22 1984-07-10 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Disease control in avian species by embryonal vaccination
SE8205892D0 (sv) 1982-10-18 1982-10-18 Bror Morein Immunogent membranproteinkomplex, sett for framstellning och anvendning derav som immunstimulerande medel och sasom vaccin
US4650676A (en) 1983-08-19 1987-03-17 American Cyanamid Company Antigens and monoclonal antibodies reactive against merozoites of Eimeria spp.
US4469047A (en) 1983-10-25 1984-09-04 Miller Gary E Apparatus and method for injecting eggs
US4639372A (en) * 1984-06-29 1987-01-27 Merck & Co., Inc. Coccidiosis vaccine
US5279960A (en) 1984-07-05 1994-01-18 Enzon Corp. 25 KD coccidial antigen of eimeria tenella
US4681063A (en) 1986-07-02 1987-07-21 Embrex Inc. High speed automated injection system for avian embryos
JP2573189B2 (ja) 1986-08-08 1997-01-22 新技術事業団 カリクレインの検出方法
US5496550A (en) * 1986-08-14 1996-03-05 Chilwalner Method of reducing the output of Eimeria oocysts from a newborn chick
CA1300013C (en) 1986-08-18 1992-05-05 Martin William Shirley Attenuated anticoccidial vaccine
US4935007A (en) 1986-08-28 1990-06-19 Eli Lilly And Company Anticoccidial method
ZA876321B (en) 1986-08-28 1989-04-26 Lilly Co Eli Anticoccidial method
IL85980A (en) * 1987-04-16 1992-03-29 Embrex Inc Disease control in avian species by embryonal vaccination with a nonreplicating immunogen
GB8711256D0 (en) 1987-05-13 1987-06-17 Unilever Plc Protection
US5004607A (en) 1987-08-25 1991-04-02 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Method of immunizing poultry
US4808404A (en) 1988-01-11 1989-02-28 A. H. Robins Company, Inc. Live vaccine for coccidiosis utilizing coccidial sporozoites
ZA893740B (en) 1988-06-03 1990-02-28 Hoffmann La Roche Recombinant coccidiosis vaccines
JPH01313437A (ja) 1988-06-14 1989-12-18 Nippon Seibutsu Kagaku Kenkyusho 飼料内投与用の粒子状生ワクチン及びその製法並びに鶏コクシジウム症生ワクチン
US5068104A (en) 1988-08-01 1991-11-26 A. H. Robins Company Incorporated Live vaccine for coccidiosis utilizing coccidial sporozoites
NL8802399A (nl) 1988-09-29 1990-04-17 Marcus Theodorus Martinus Pete Preparaat, geschikt voor gebruik inzake de preventie van de bij coccidiosis optredende schade bij pluimvee, voedsel resp. drinkwater, dat een dergelijk type preparaat bevat, werkwijze voor het voorkomen van de bij coccidiosis optredende schade bij pluimv
US5028421A (en) 1989-05-25 1991-07-02 Embrex, Inc. Method of treating birds
US5106617A (en) 1989-06-27 1992-04-21 Embrex, Inc. Method of treating immature birds with IL-2
ZA9010461B (en) 1990-01-26 1991-10-30 Hoffmann La Roche Recombinant coccidiosis vaccines-5-7 eimeria surface antigen
US5288845A (en) 1991-05-29 1994-02-22 Merck And Co., Inc. Eimeria necatrix 16s rDNA probes
US5359050A (en) 1991-05-29 1994-10-25 Merck And Co., Inc. Eimeria mitis 16S or DNA probes
US5403581A (en) 1991-07-12 1995-04-04 Hoffmann-La Roche Inc. Coccidiosis vaccines
DK0594743T3 (da) 1991-07-12 1999-12-20 Pfizer Kontinuert cellelinje og vaccine mod aviær coccidia
US5311841A (en) 1992-07-10 1994-05-17 Thaxton J Paul Administration of medicaments of poultry
AU5989894A (en) * 1993-01-19 1994-08-15 Merck & Co., Inc. Live coccidiosis vaccine
CA2098773C (en) 1993-06-18 1999-09-21 Eng-Hong Lee Recombinant coccidia and its use in a vaccine
JPH07206705A (ja) * 1993-11-03 1995-08-08 American Cyanamid Co 生インオボ（ｉｎ ｏｖｏ）ワクチン
US5339766A (en) 1993-11-03 1994-08-23 Embrex, Inc. Method of introducing material into eggs during early embryonic development
ATE232903T1 (de) * 1993-11-12 2003-03-15 Akzo Nobel Nv Impfstoff gegen geflügelkokzidose
SK282004B6 (sk) 1995-06-07 2001-10-08 Pfizer Inc. Použitie živých sporozoitov alebo merozoitov rodu eimeria na výrobu očkovacej látky na in ovo očkovanie domestikovaných vtákov proti kokcidióze
FI974438A7 (fi) * 1995-06-07 1998-01-14 Pfizer In ovo-rokotus kokkidioosista vastaan
US5888518A (en) 1995-10-06 1999-03-30 Beretich, Sr.; Guy R. Method for preventing and treating coccidiosis
US5807551A (en) 1996-04-01 1998-09-15 Iowa State University Research Foundation, Inc. Method to provide artificial passive immunity in birds
WO1998008699A1 (fr) 1996-08-29 1998-03-05 Kabushiki Kaisha Toyoda Jidoshokki Seisakusho Dispositif de chauffage visqueux
ID21338A (id) 1996-09-30 1999-05-27 Embrex Inc Metoda untuk menghasilkan kekebalan aktif dengan vaksin gabungan
US6048535A (en) * 1997-06-12 2000-04-11 Regents Of The University Of Minnesota Multivalent in ovo avian vaccine
US6627205B2 (en) * 1997-12-01 2003-09-30 Pfizer Incorporated Ovo vaccination against coccidiosis
US6019985A (en) 1998-02-27 2000-02-01 Munova Corporation Immunostimulation methods for providing disease protection in poultry
US6608033B1 (en) * 1999-08-27 2003-08-19 Pfizer Inc. Treatment or prevention of coccidiosis
CA2508757C (en) * 2002-12-09 2011-02-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Coccidial vaccine and methods of making and using same

Also Published As

Publication number Publication date
CA2223700A1 (en) 1996-12-19
AR044236A2 (es) 2005-09-07
RU2125890C1 (ru) 1999-02-10
TW430558B (en) 2001-04-21
DZ2048A1 (fr) 2002-07-21
AU694872B2 (en) 1998-07-30
WO1996040234A1 (en) 1996-12-19
JPH10506920A (ja) 1998-07-07
IL118490A0 (en) 1996-09-12
US7018640B2 (en) 2006-03-28
HUP9601554A2 (en) 1997-03-28
SK72896A3 (en) 1997-11-05
MX9709868A (es) 1998-03-31
BG63035B1 (bg) 2001-02-28
PE2998A1 (es) 1998-03-02
DK0831897T3 (da) 2001-04-30
KR0167417B1 (ko) 1999-01-15
US6500438B2 (en) 2002-12-31
PL184002B1 (pl) 2002-08-30
TR199600471A2 (tr) 1996-12-21
MY121973A (en) 2006-03-31
JP3120860B2 (ja) 2000-12-25
CO4440630A1 (es) 1997-05-07
CZ164396A3 (en) 1997-03-12
NZ286754A (en) 1998-06-26
PT831897E (pt) 2001-07-31
US20020031530A1 (en) 2002-03-14
FI974439A0 (fi) 1997-12-05
BR9602667A (pt) 1998-04-22
CZ290810B6 (cs) 2002-10-16
GR3035938T3 (en) 2001-08-31
FI974439L (fi) 1998-01-27
KR970000245A (ko) 1997-01-21
EP0831897A1 (en) 1998-04-01
HU223707B1 (hu) 2004-12-28
IL118490A (en) 2000-07-26
MA23890A1 (fr) 1996-12-31
BG100642A (bg) 1997-07-31
DE69520509T2 (de) 2001-07-12
DE69520509D1 (de) 2001-05-03
US20020146435A1 (en) 2002-10-10
PL314639A1 (en) 1996-12-09
ATE200029T1 (de) 2001-04-15
AR044235A2 (es) 2005-09-07
SI9600181A (en) 1997-04-30
CN1153510C (zh) 2004-06-16
AU5478296A (en) 1996-12-19
FI974439A7 (fi) 1998-01-27
ES2155129T3 (es) 2001-05-01
HUP9601554A3 (en) 2003-08-28
UA41381C2 (uk) 2001-09-17
SK282004B6 (sk) 2001-10-08
EP0831897B1 (en) 2001-03-28
CA2223700C (en) 2002-05-07
AR002157A1 (es) 1998-01-07
CN1145168A (zh) 1997-03-19
ZA964726B (en) 1997-12-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO113716B1 (ro) Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei
JP3020226B2 (ja) ワクチン
RO113715B1 (ro) Metoda de vaccinare a pasarilor domestice impotriva coccidiozei
US7816118B2 (en) Methods for the in vitro culture of Sporozoea sp. and uses thereof
US20020090378A1 (en) In ovo vaccination against coccidiosis
AU2007203386A1 (en) Methods for the in vitro culture of sporozoea SP. and user thereof
HK1070820B (en) Methods for the in vitro culture of sporozoea sp. and use thereof