SK278808B6 - Cyklosporíny, ich použitie pri príprave liečiva na - Google Patents
Cyklosporíny, ich použitie pri príprave liečiva na Download PDFInfo
- Publication number
- SK278808B6 SK278808B6 SK3297-91A SK329791A SK278808B6 SK 278808 B6 SK278808 B6 SK 278808B6 SK 329791 A SK329791 A SK 329791A SK 278808 B6 SK278808 B6 SK 278808B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- meleu
- ciclosporin
- hydroxy
- mebmt
- meval
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
- A61K38/13—Cyclosporins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
- C07K7/645—Cyclosporins; Related peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/27—Cyclic peptide or cyclic protein
Description
Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka nových cyklosporínov, ich použitia ako farmaceutických prostriedkov a farmaceutických prostriedkov obsahujúcich tieto cyklosporíny, spôsobu ich prípravy a plesňových kmeňov používaných pri tomto spôsobe.
Doterajší stav techniky
Cyklosporíny zahrnujú triedu štruktúrne rozlíšiteľných cyklických poly-N-metylovaných undekapeptidov, ktoré obvykle vykazujú farmakologickú, najmä imunosupresívnu, protizápalovú a/alebo protiparazitickú účinnosť. Prvý z cyklosporínov, ktorý sa izoloval, je v prírode sa vyskytujúci plesňový metabolit Ciclosporin alebo Cyclosporine, známy tiež ako cyklosporín A a ktorý je komerčne dostupný pod ochrannou známkou SANDIMMUNr alebo SANDIMMUNER. Cyclosporin je cyklosporín vzorca (A), |-MeBmt- Abu-Sar-MeLeu-Val-MeLeu-Ala- (D} Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal1234567 8 9 10 11 kde MeBmt znamená N-metyl-(4R)-4-but-2E-en-l-yl-4-metyl-(L)- treonylový zvyšok vzorca (B),
X
CBS kde -x-y- je -CH=CH- (trans).
Od tých čias, kedy bol objavený pôvodný Ciclosporin, bola izolovaná a identifikovaná celá škála v prírode sa vyskytujúcich cyklosporínov a mnoho ďalších neprírodných cyklosporínov bolo pripravených totálnou syntézou alebo semi-syntetickými spôsobmi alebo aplikáciou modifikovaných techník kultivácie. Trieda cyklosporínov je už teraz rozsiahla a zahrnuje napríklad v prírode sa vyskytujúce cyklosporíny A až Z (viď Traber a kol.; Helv. Chim.Acta, 60, 1247 až 1255 (1977); Traber a kol.; 2, Helv. Chim. Acta, 65, 1655 až 1667 (1982); Kobel a kol., Európ. J. Applied Microbiology and Biotechnology, 14, 273 až 240 (1982); a von Wartburg a kol., Progress in Allergy, 38, 28 až 45, (1986)), ako i rôzne neprírodné deriváty cyklosporínov a umelé alebo syntetické cyklosporíny, vrátane dihydro-cyklosporínov, (kde časť -x-yzvyšku MeBmt (vzorec B) je nasýtená, takže -x-y- = = CH2-CH2-); deriváty cyklosporínov (napríklad kde 3'-O-atóm zvyšku MeBmt je acylovaný alebo kde je zavedený ďalší substituent na α-uhlíkový atóm sarkosylového zvyšku v polohe 3); cyklosporíny, kde MeBmt zvyšok je prítomný v izomérnej forme (napríklad keď konfigurácia v polohách 6' a 7' MeBmt zvyšku je skôr cis než trans); a cyklosporíny, v ktorých sú v špecifických polohách peptidickej sekvencie zabudované rôzne aminokyseliny, napríklad použitím totálnej syntézy pre prípravu cyklosporínov, ktorú vyvinul R.
Wenger - pozri napríklad Traber a kol. 1, Traber a kol. 2 a Kobel a kol., ako je citované; US patenty č. 4 108 985, 4 220 641, 4 288 431, 4 554 351, 4 396 542 a 4 798 823, európske patentové prihlášky č.34 567A, 56 782A, 300 784A, 300 785A a 414 632A, medzinárodná patentová prihláška č. WO 86/02080 a anglické patentové prihlášky č. 2 206 119 a 2 207 678, Wenger 1, Transpl. Proc., 15 Suppl. 1:2230 (1983), Wenger 2, Angew. Chem. Int. Ed. 24, 77, (1985) a Wenger 3, Progress in the Chemistry of Organic Natural Products, 50, 123 (1986).
Trieda cyklosporínov je v súčasnosti skutočne veľmi veľká a zahrnuje napríklad [Thr]2-, [Val]2-, [Nva]2- a [Nva]2- [Nva]5-Ciclosporin (známe tiež ako cyklosporíny C, D, C a M), [3-0-acetyl-MeBmt]’-Ciclosporin (známy tiež ako cyklosporín A acetát), [Dihydro-MeBmt]‘-[Val]2-Ciclosporin (známy tiež ako dihydrocyklosporín D), [(D)Ser]8-Ciclosporin, [Melie] -Ciclosporin, [(D)MeVal]1‘-Ciclosporin (známy tiež ako cyklosporín H), [MeAla]6-Ciclosporin, [(D)Pro]3-Ciclosporin a pod.
V súlade s konvenčnou nomenklatúrou pre cyklosporíny sú tu v opise a v nárokoch zlúčeniny definované vzhľadom na štruktúru Ciclosporinu (t. j. Cyclosporinu A). Najskôr sa označia tie zvyšky v molekule, ktoré sa líšia od zvyškov prítomných v Ciclosporine a potom sa uvedie výraz Ciclosporin, ktorý charakterizuje zostávajúce zvyšky, ktoré sú totožné so zvyškami prítomnými v Ciclosporine. Súčasne sa používa predpona dihydro na označenie cyklosporínov, kde zvyšok MeBmt je hydrogenovaný (dihydro-MeBmt), t. j. kde -x-y- vo vzorci (B) je -CH2CH2-. Tak [Thr]2-Ciclosporin je cyklosporín so sekvenciou znázornenou vo vzorci A, ale ccAbu v polohe 2 je nahradený Thr a [Dihydro-MeBmt]‘-[Val]2-Ciclosporin je cyklosporín so sekvenciou znázornenou vo vzorci (A), ale zvyšok MeBmt v polohe 1 je hydrogenovaný a ccAbu v polohe 2 je nahradený Val.
Ďalej v zvyškoch aminokyselín označených podľa bežnej praxe skratkami, napríklad Ala, MeVal, aAbu atď. sa rozumie, že majú (L)-konfiguráciu, pokiaľ nie je uvedené inak, napríklad ako v prípade (D)Ala. Skratky zvyškov, pred ktorými je použitý výraz Me, ako napríklad MeLeu, znamenajú α-Ν-metylované zvyšky. Jednotlivé zvyšky cyklosporínovej molekuly sú číslované, ako je obvyklé v smere otáčania hodinových ručičiek, pričom sa vychádza od zvyškov MeBmt alebo dihydroMeBmt v polohe 1. V opise a v nárokoch sa používajú rovnaké numerické sekvencie.
Teraz je už preukázané, že Ciclosporin rušivo pôsobí na proces aktivácie T buniek blokovaním iniciácie transkripcie IL-2, i keď presný mechanizmus nie je ešte objasnený. Ukazuje sa, že Ciclosporin tvorí komplex s 17 kD cytosolickým proteínom (cyklofilin), ktorý sa vyskytuje v mnohých typoch buniek a ktorý je identický s peptidyl-prolyl-cis-trans-izomerázou, enzýmom uvoľňovaným pri konformácii proteínu. Až doteraz však nie je jasné, či viazanie na cyklofilin je priamo spojené s imunosupresívnou účinnosťou cyklosporínov alebo či viazaný cyklofilin je sám dostatočným kritériom pre imunosupresívnu účinnosť.
Podstata vynálezu
V súčasnosti sa zistilo, že existujú cyklosporíny, ktoré sú pevne viazane na cyklofilin, ale napriek tomu nepôsobia imunosupresívne. Z toho vyplýva, že viazanie na cyklofllín je nutným, ale nedostatočným kritériom pre imunosupresívnu účinnosť.
Podľa predloženého vynálezu sa získajú cyklosporíny, ktoré sú účinné proti replikácii HIV-1.
Ľudský vírus imunitnej nedostatočnosti (HIV) preferenčne infikuje T-pomocné (T4) lymfocyty, i keď replikuje tiež v rôznych iných typoch buniek, najmä tých, ktoré majú jednobunečný pôvod. Spôsobuje pomaly prebiehajúce ochorenie imunitného systému vyznačené postupnou deštrukciou T4-buniek, nazývané AIDS. Ostatnými imunologickými abnormalitami AIDS sú zvýšenie cytotoxických/supresivnych (T8) lymfocytov, defekt v procese prezentácie/rozoznania antigénu a polyklonálnej aktivácie B- buniek. Mechanizmus deštrukcie T4-buniek nie je ešte stále jasný. Zdá sa, že relatívne málo T4-buniek je infikovaných a tak priamy cytopatogénny účinok spôsobený vírusom nemusí byť iba jediným dôvodom pre vyčerpanie T4-buniek. Existuje hypotéza, že deštrukcia T4-buniek môže byť zosilnená autoimunitným procesom aktivovaným HlV-produkujúcimi bunkami alebo T4-bunkami potiahnutými HlV-proteínom. Táto kontinuálna antigénna stimulácia môže viesť do stavu permanentnej aktivácie T4-buniek, ktoré by zvyšovali HlV-replikácie v týchto bunkách a rozširovali by T-cytotoxické klony. Neinfikované T4-bunky sa môžu stať antigénnymi viazaním exogénneho vírusu gpl20 na CD4 molekuly a stať sa tak cieľom T-cytotoxickej odozvy.
US patent č. 4 814 323 uvádza, že Ciclosporin vykazuje aktivitu na AIDS a že všeobecne cyklosporiny známe ako imunosupresory môžu byť pri tejto indikácii použiteľné. Nie je však žiadny predpoklad, že by neimunosupresívne cyklosporiny vykazovali tieto vlastnosti.
S prekvapením sa teraz zistilo, že cyklosporiny, ktoré sa viažu na cyklofllín, ale nie sú imunosupresívne, vykazujú inhibičný účinok na HIV-1 replikácie.
Cyklosporin sa považuje za viažuci sa na cyklofllín, ak sa viaže na ľudský rekombinovaný cyklofllín aspoň z jednej pätiny rovnako ako Ciclosporin pri kompetitívnom ELISA teste popísanom v práci Quesniaux, Eur. J. Immunol. 1987, 17, 1359 až 1365. V tomto teste testovaný cyklosporin sa pridá počas inkubácie cyklofilínu s potiahnutým BSA-Ciclosporinom a vypočítava sa koncentrácia potrebná na získanie 50 % inhibície kontrolnej reakcie bez kompetitora (IC50). Výsledky sa vyjadrujú ako väzbový pomer (BR), čo je dekadický logaritmus pomeru IC5o testovanej zlúčeniny a IC50 pri simultánnom teste samotného Ciclosporinu. Tak BR 1,0 indukuje, že testovaná zlúčenina viaže cyklofllín o faktor 10 menej než Ciclosporin a negatívna hodnota ukazuje väzbu silnejšiu než Ciclosporin.
Cyklosporiny aktívne na HIV majú Br nižší než 0,7 (pretože log10 5 = 0,7 približne), výhodne rovnaký alebo nižší než 0.
Cyklosporin sa považuje za neimunosupresívny, ak vykazuje účinok pri zmiešanej lymfocytovej reakcii (MĽR) nie väčší ako 5 %, výhodne nie viac ako 2 % účinku Ciclosporinu. Zmiešaná lymfocytová reakcia je opísaná v práci T. Meo, v Immunological Methods, L. Lefkovits a B. Peris, vyd. Academic Press, N.Y., str. 227 až 239 (1979). Bunky zo sleziny (0,5 x 10b) Balb/c myší (samice, 8 až 10 týždňov) sa 5 dní spolu inkubujú s 0,5 x x 106 bunkami sleziny CBA myší (samice, 8 až 10 týždňov), ktoré boli vopred ožiarené (2000 rad) alebo ošetrené mitomycínom C. Ožiarené alogénne bunky indukujú množenie Balb/c slezinných buniek, ktoré sa môže merať označením prekurzora inkorporovaného do DNA. Pretože stimulačné bunky sú ožiarené (alebo ošetrené mitomycínom C), nereagujú na Balb/c bunky množením, ale zachovávajú si antigénne vlastnosti.
IC50 nájdené pre testovanú zlúčeninu v MLR sa porovnáva s hodnotou nájdenou pre Ciclosporin v paralelnom teste.
Aktivitu cyklosporínov ako inhibítorov HIV-1 replikácie možno preukázať nasledujúcim systémom testov:
1. Inhibícia HIV-1 indukovaného cytopatogénneho efektu v MT4- bunkách.
Použije sa postup opísaný v práci Pauwels a kol., J. Virol. Meth. 20/309 (1988) s malými obmenami. Ako cieľové bunky sa použijú HTLV-I-transformované T4-bunky, MT4, v ktorých bolo vopred preukázané, že sú vysoko permisivné pre HIV-infekcie. Inhibícia HIV-1, kmeňom HTLV-IIIB-indukovaný cytopatogénny účinok sa stanoví meraním životaschopnosti tak HlV-infikovaných, ako aj simulovane infikovaných buniek. Životaschopnosť sa stanoví spektrofotometricky redukciou in situ 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromidu (MTT). Vírusom infikované a neinfikované kultúry bez zlúčeniny sa zahrnujú ako kontroly, rovnako ako neinfikované bunky ošetrené zlúčeninou. Koncentrácia buniek sa vyberá tak, že počet buniek ma ml sa zvýši o faktor 10 počas 4-dennej inkubácie v simulovane infikovanej kultúre. Očko vírusu sa upraví tak, že spôsobí úhyn buniek v 90 % cieľových buniek po 4-dennej inkubácii. Vírus sa adsorbuje na 10-násobne koncentrovanú suspenziu buniek pri teplote 37 °C v priebehu 1 hodiny. Potom sa infikované bunky zriedia 1:10a pridajú sa do mikrotitračných dosiek obsahujúcich testovanú zlúčeninu.
2. Cytotoxicita
Na stanovenie anti-HIV potenciálu v ďalších bunečných líniách a najmä v monocyklickej línii (U937) sa najprv určí bunečná toxicita testovanej zlúčeniny na tieto bunečné línie. Jurkat a U937 bunečné suspenzie sa upravia na 1 x 105 buniek/ /ml a inkubujú sa v prítomnosti rôznych koncentrácií testovanej zlúčeniny. Po 40 hodinách sa množstvo buniek na ml porovnáva zafarbením s MTT. Cytotoxicita v MTT bunkách sa môže merať rovnakým spôsobom.
3. Inhibícia HIV-1 replikácie v Jurkat a U937 bunkách
T4-bunky línie Jurkat a monocytické bunky línie U937 sa infikujú suspendovaním buniek 10-násobnej koncentrácie do roztoku vírusu. Adsorpcia sa uskutočňuje 2 hodiny pri teplote 37 °C. Bunky sa potom vyzrážajú, očko sa odstráni a bunky sa znovu suspendujú na pôvodnú koncentráciu v čerstvom kultivačnom médiu obsahujúcom testovanú zlúčeninu. Substancia sa tak pridáva po adsorpcii. V dňoch 2, 5, 8, 12, 15 a 19 po infekcii sa odoberú alikvoty infikovanej kultúry. Bunky sa vyhodia a supematanty sa zberajú. Koncentrácia vírusového antigénu p24 sa v supematante stanoví použitím komerčného ELISA prostriedku a slúži ako parameter produkcie vírusu. Po každom odobraní alikvot sa spočítajú bunky a upravia sa na 2 x 105 buniek/ml pridaním čerstvého média obsahujúceho testovanú zlúčeninu v príslušnej koncentrácii.
Zo zlúčenín podľa predloženého vynálezu, čiže neimunosupresívnych, cyklofllín viažucich cyklosporínov aktívnych na HIV-1 (aktívne zlúčeniny) sú niektoré no
SK 278808 Β6 vé a ostatné sú známe; ale anti-HIV aktivita známych aktívnych zlúčenín nebola dosiaľ opísaná a v mnohých prípadoch v známych aktívnych zlúčeninách nebol stanovený žiadny farmaceutický účinok.
Zistilo sa, že mnohé aktívne zlúčeniny majú štruktúry odlišné od Ciclosporinov, špeciálne v polohách 4 a/alebo 5.
Jednou skupinou aktívnych zlúčenín sú cyklosporíny, v ktorých skupina MeLeu v polohe 4 je nahradená rôznymi N-metylovanými aminokyselinami, napríklad τ-hydroxy-MeLeu, Melie, MeVal, MeThr alebo MeAla. Ďalej možno použiť okrem Melie a MeThr tiež alo-formy MeaIle a MeaThr. V aloforme má stereochémia v B-polohe opačnú konfiguráciu než prírodná aminokyselina, takže normálna forma a alo-forma tvoria pár diastereoizomérov.
Ďalšou skoupinou aktívnych zlúčenín sú zlúčeniny, v ktorých Val v polohe 5 je nahradený N-alkylovanou, výhodne N- metylovanou aminokyselinou. Výhodnými aminokyselinami sú N-al- kylované Val alebo Leu. Výhodne je vodík v iminoskupine /Val/5 nahradený nerozvetvenou alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, výhodne metylovou, etylovou alebo n-propylovou skupinou, najmä metylovou skupinou. Tieto menované aktívne zlúčeniny sú všetky nové.
Navyše alebo alternatívne sa určité aktívne zlúčeniny môžu líšiť od Ciclosporinu v polohách 1, 2, 3 a/alebo 6. Výhodnú skupinu aktívnych zlúčenín tvoria zlúčeniny všeobecného vzorca (I).
—w—x—R—Y—Z—Q—Ala~(D)Ala—MeLeu—MeLeu—MeVal—
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 (I) kde W je MeBmt, dihydro-MeBmt alebo 8'-hydroxy-MeBmt,
X je aAbu, Val, Thr, Nva alebo O-metyltreonín (MeOThr),
R je Sar alebo (O)-MeAla,
Y je MeLeu, τ-hydroxy-MeLeu, Melie, MeVal, MeThr, MeAla, Mealle alebo MeaThr,
Z je Val, Leu, MeVal alebo MeLeu a
Q je MeLeu, τ-hydroxy-MeLeu alebo MeAla, s podmienkou, že ak Y je MeLeu, potom buď Z je MeVal alebo MeLeu alebo W je 8'-hydroxy-MeBmt.
Skupiny W, X, Y, Z, Q a R môžu mať nezávisle od seba nasledujúce výhodné významy:
Wje výhodne W’, kde W'je MeBmt alebo dihydro-MeBmt,
X je výhodne X', kde X' je aAbu alebo Nva, výhodnejšie X, kde X je aAbu,
R je výhodne R', kde R'je Sar,
Y je výhodne Y', kde Y' je τ-hydroxy-MeLeu, MeVal, MeThr alebo Melie,
Zje výhodne Z', kde Z'je Val alebo MeVal a
Q je výhodne Q', kde Q* 1 je MeLeu.
Mimoriadne výhodnou skupinou aktívnych zlúčenín sú zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde W je W', X je X’, Y je Y', Z je Z', Q je Q1 a R je R'.
Najmä výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sú:
a) [dihydro-MeBmt]'-[ T-hydroxy-MeLeu]4 5-Ciclosporin
b) [MeVal]4-Ciclosporin
c) [Melle]4-Ciclosporin
d) [MeThr]4-Ciclosporin
e) [T-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin
f) [Nva]2 [T-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin
g) [r-hydroxy-MeLeu]4-[T-hydroxy-MeLeu]6-Ciclosporin
h) [MeVal]5-Ciclosporin
i) [MeOThr]2-[(D)MeAla]3-[MeVal]5-Ciclosporin
j) [8'-hydroxy-MeBmt] '-Ciclosporin
Ďalej sú aktívnymi zlúčeninami určité zlúčeniny, ktoré nepatria do rozsahu všeobecného vzorca (I), napríklad
k) [MeAla]6-Ciclosporin a
l) [r-hydroxy-MeLeu]9-Ciclosporin.
Podstatou vynálezu sú tiež nové aktívne zlúčeniny všeobecného vzorca (II),
-W’—X—R—Y—Z—MeLeu—Ala—(U) Ala—MeLeu—MeLeu—MaVal123456 7 8 9 10 11 (II!
kde W', X, R, Y a Z majú uvedený význam s podmienkou, že
1. keď Y je MeLeu alebo MeAla, potom Z je MeVal alebo MeLeu a
2. keď W' je MeBmt, R je Sar a Y je τ-hydroxy-MeLeu, potom Z je iné než Val.
Výhodnú skupinu nových aktívnych zlúčenín tvoria zlúčeniny všeobecného vzorca (II), kde X je X, Y je Y' a Z je Z', s podmienkou, že ak W' je MeBmt, potom Y' je iné než τ-hydroxy-MeLeu.
Najmä výhodné nové aktívne zlúčeniny sú zlúčeniny a), b), d), ť) a h), už uvedené. Niektoré z týchto zlúčenín, napríklad zlúčeniny b) a c), blokujú imunosupresívne pôsobenie Ciclosporinu blokovaním jeho viazania na cyklofilín atak pôsobia ako antagonisty Ciclosporinu.
Aktívne zlúčeniny možno pripraviť mnohými rôznymi spôsobmi, ktoré možno roztriediť nasledovne:
1. Fermentácia
2. Biotransťormácia
3. Derivatizácia
4. Čiastočná syntéza
5. Celková syntéza
1. Určité aktívne zlúčeniny sa pripravia ako spoluprodukty pri fermentácii pôvodných alebo modifikovaných kmeňov organizmov produkujúcich Ciclosporin, ako je Tolypociadium inflatum Gams, ako je doložené pri príprave zlúčeniny c) v príklade 1.
2. Ostatné aktívne zlúčeniny, vrátane známych zlúčenín j) a 1), sú metabolity Ciclosporinu a možno ich izolovať chromatografickými metódami z moču ľudí a zvierat, ktorí obdržali Ciclosporin. Ďalej možno pri týchto a ostatných transformáciách použiť mikroorganizmy, napríklad pri príprave zlúčenín e) a g) biotransformáciou cyklosporínu A, ako je opísané v príkladoch 2 a 3 alebo pri príprave zlúčeniny f) biotransformáciou cyklosporínu C, ako je opísané v príklade 4. Tieto príklady dokladujú nový spôsob prípravy cyklosporínov s jedným alebo viacerými zvyškami τ-hydroxy-MeLeu zvyškov, ktorý sa vyznačuje tým, že sa kultivuje nový modifikovaný kmeň Sebekia benihana, pridá sa cyklosporín, ktorý má jeden alebo viac MeLeu zvyškov a izoluje sa produkt z fermentačného média.
3. Derivatizáciou sa rozumie to, že prírodné alebo syntetické cyklosporíny možno previesť na aktívne zlúčeniny jednou alebo viacerými chemickými reakciami, pri ktorých sa jedna alebo viac aminokyselín modifikuje bez toho, aby došlo k otvoreniu peptidických väzieb a premenia sa. Napríklad triedu aktívnych zlúčenín, kde Val v polohe 5 je N-alkylovaný, možno pripraviť reakciou zodpovedajúceho cyklosporínu obsahujúceho Val v polohe 5 s butyllítiom a potom reakciou s alkylačným činidlom, ako je doložené pre zlúčeninu h) v príklade 5 a pre zlúčeninu i) v príklade 6.
Ďalej možno zlúčeninu a) pripraviť hydrogenáciou zlúčeniny c) (príklad 7) a zlúčeninu j), ktorá je tiež hlavným metabolitom Ciclosporinu, možno pripraviť zo známej zlúčeniny, Ciclosporin-acetátu, ako je opísané v príklade 8.
4. Výrazom čiastočná syntéza sa rozumie séria chemických reakcií, pri ktorých sa kruh prírodného cyklosporínu otvorí, odstráni sa jedna alebo viac aminokyselín, pridajú sa iné aminokyseliny a kruh sa opäť uzavrie.
5. Celkovú syntézu cyklosporínov možno uskutočniť vytvorením lineárneho undekapeptidu a cyklizáciou, ako opísal Wenger (pozri vyššie) a pozri tiež US patenty č. 4 396 542 a 4 789 823. V zásade možno akýkoľvek cyklosporín pripraviť celkovou syntézou, ak je však dostupná jedna z ostatných uvedených metód, je to pre celkovú syntézu omnoho výhodnejšie. Celkovú syntézu možno použiť pre prípravu zlúčeniny d) (príklad 9) a pre známy metabolit zlúčeninu 1.
Zlúčenina k) je známa látka, ktorej vlastnosti boli popísané v práci Quesniaux a kol. (Mol. Immunol. 24, 1159, 1987) a ktorú možno tiež pripraviť celkovou syntézou. Napríklad celková syntéza tejto zlúčeniny je opísaná v US patente č. 4 914 188.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 [Melle]4-Ciclosporin (zlúčenina c)
Produkčný kmeň
Zlúčenina c) sa pripraví fermentáciou plesne kmeňa Tolypocladium inflatum Cy E 4556, uloženého v Deutsche Sammlung fur Mikroorganismen za podmienok Budapeštianskej dohody 24. júna 1991 pod číslom DSM 6627. Tento kmeň je mutantom kmeňa NRRL 8044 druhu Tolypocladium inflatum Cams a je taxonomicky identický s východiskovým kmeňom, ktorý je dôsledne opísaný napríklad v anglickom patente 1 491 509. Kultúra 1. Východisková kultúra na agare
Šikmé agarové kultúry kmeňa DSM 6627 sa nechajú rásť 14 dní pri teplote 27 °C na živnom médiu nasledujúceho zloženia:
extrakt z kvasníc (Cistex)4 g sladový extrakt (Wander)20 g agar20 g demineralizovaná voda do 1000 ml
Toto médium má pH 5,4 až 5,6 a sterilizuje sa 20 minút pri teplote 120 °C.
2. Prekultúra
Spóry mycélia 4 východiskových kultúr sa suspendujú v 40 ml 0,9 % roztoku soli. Vždy 20 ml tejto suspenzie sa inokuluje rad 500 ml Erlenmcyerových baniek vždy s obsahom 100 ml média pre prekultúru. Zloženie média pre prekultúru je nasledujúce:
kazeín (Amber EHC) 25g maltóza 75g
KH2PO4 1g
KC12,5 g demineralizovaná voda do 1000 ml
Toto médium sa upraví na pH 5,2 až 5,5 pomocou HC1 a potom sa 20 minút sterilizuje pri teplote 120 °C. Prekultúry sa fermentujú 24 hodín pri teplote 27 °C na rotačnej trepačke pri 200 otáčkach za minútu s excentri citou 50 mm.
3. Medzikultúra
25-litorvý oceľový fermentor s 20 litrami média pre prekultúru sa inokuluje 200 ml prekultúry. Medzikultúra sa fermentuje 5 dní pri teplote 27 °C pri miešaní 150 otáčok za minútu a prevzdušňovaní prietokom vzduchu 0,5 1/min. na liter a pri tlaku 0,05 MPa.
4. Hlavná kultúra
100 litrov média pre prekultúru sa inokuluje 10 litrami medzikultúry a fermentuje sa v 120-litrovom oceľovom fermentore. K tomuto médiu sa pridá 4 g/1 O-Treonínu, sterilizovaného filtráciou. Fermentácia sa uskutočňuje 14 dní pri teplote 27 °C pri miešaní rýchlosťou 70 otáčok za minútu a prevzdušňovaní prietokom vzduchu 0,4 1/min. na liter média a pri tlaku 0,05 MPa prvých 5 dní, a počas zvyšného času fermentácie sa rýchlosť miešania zvýši na 100 otáčok za minútu a prevzdušňuje sa prietokom 0,5 1/min.
Izolácia
Mycélium sa oddelí od média kultÚTy a extrahuje sa rozmelnením a miešaním trikrát 10 litrami zmesi metanolu a vody (9:1 objemovo). Rozmelnené mycélium sa oddelí od rozpúšťadla vákuovou filtráciou a spojené filtráty sa zahustia odparením pri zníženom tlaku a teplote 40 °C, kým pary nepozostávajú prevažne zo samotnej vody. Získaná zmes sa extrahuje štyrikrát pri použití vždy 2 litrov 1,2-dichlóretánu a spojené 1,2-dichlóretánové roztoky sa zahustia odparením pri zníženom tlaku a teplote 40 “C.
Zvyšok sa chromatografuje na kolóne silikagélu (10 kg silikagélu, veľkosť granulátu 0,02 až 0,045 mm, Crace) s použitím zmesi etylacetátu a vody ako elučného činidla (frakcia 2,5 1). Frakcie 20 až 23, obsahujúca [Melle]4-Ciclosporin, sa spoja a potom sa ďalej chromatograficky rozdelia použitím kolóny silikagélu (600 g silikagélu, veľkosť granulátu 0,04 až 0,63 mm, Merck) a použitím zmesi chloroformu a metanolu (98 : 2 objemovo) ako elučného činidla (frakcia 300 ml). Ďalšie čistenie sa uskutočňuje chromatograficky na kolóne silikagélu (400 g silikagélu, veľkosť granulátu 0,04 až 0,063 mm, Merck) pri použití zmesi metylénchloridu a metanolu (90 : 2 objemovo) ako elučného činidla (frakcia 200 ml) a získa sa čistý [Melle]4-Ciclosporin vo forme bieleho amorfného prášku, teplota topenia 155 -150 °C, [a]D20 = - 235° c = 0,68 v CHC13) a - 193° (c = 0,74vCH3OH).
IC spektrum v CH2C12 je znázornené na obr. 1, kde T znamená % transmisie a A znamená % absorpcie a protónové NMR spektrum v COC13 je znázornené na obr. 2.
Príklad 2 [i-Hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin (zlúčenina e)
Zlúčenina e) sa získa biotransformáciou Ciclosporinu pomocou mikroorganizmov Sebekia benihana. Originálny kmeň je označený ako NRLL 11111 a patrí k druhu Sebekia benihana (Dietz a kol.: Sebekia, nový rod čeľade Actinoplanaceae. Abstrakta 82. Ann. Meet. Amer. Soc. Microbiol., 163, Atlanta 1982). Tento kmeň je schopný hydroxylovať novobiocín. Subkultúmy kmeň, ktorý sa používa na prípravu zlúčeniny e) a príbuzných zlúčenín, je uložený Germán Colection of Microorganisms (D-3300 Braunschweig) pod číslom DSM 6182.
SK 278808 Β6
1. Východisková kultúra na agare
Šikmé agarové kultúry kmeňa DSM 6182 sa nechajú 10 dní rásť pri teplote 27 °C na agarovom živnom médiu nasledujúceho zloženia:
glukóza 10g škrob (rozpustný) 20g extrakt z kvasníc (Cistex) 5g pepton (N-Z-Amine typ A, Sheffield) 5g
CaCO3 1g agar (Bacto) 10g demineralizovaná voda do1 1 pH: neutralizácia na pH 7 pomocou NaOI 1/112SO4 sterilizácia: 20 minút pri teplote 120 °C
2. Prekultúra
Spóry a mycélium jednej východiskovej kultúry sa suspendujú v 10 ml 0,9 % roztoku soli. Vždy 5 ml tejto suspenzie sa inokuluje rad 200 ml Erlenmeyerových baniek vždy s 50 ml média pre prekultúru. Zloženie média pre prekultúru je nasledujúce: glukóza 7g škrob (rozpustný)10 g extrakt z kvasníc (Cistex)4,5 g sladový extrakt (kvapalný, Wander)10 g pepton (N-Z-Amine typ A, Sheffield2,5 g
CaCO3 1g roztok stopových prvkov č. 235 1ml demineralizovaná voda do 1 litra pH: neutralizácia na pH 7 pomocou NaOH/H2SO4 sterilizácia: 20 minút pri teplote 120 °C
Roztok stopových prvkov č. 235:
H3BO30,1 g
FeSO4.7H2O5 g
KI 0,05 g
CoC12.6H2O2 g
CuSO4.5H2O0,2 g
MnCl2.4H2O2 g
ZnSO4.7H2O4 g demineralizovaná voda do 999 ml
H2SO4 (97 %) 1ml
Prekultúry sa fermentujú 4 dni pri teplote 27 °C na rotačnej trepačke pri 200 otáčkach za minútu s excentricitou 50 mm.
3. Medzikultúra
Rad 200 ml Erlenmeyerových baniek každá s 50 ml média pre prekultúru sa inokuluje vždy 5 ml prekultúry. Medzikultúra sa fermentuje 3 dni pri teplote 27 °C na rotačnej trepačke pri 200 otáčkach za minútu s excentricitou 50 mm.
4. Hlavná kultúra
Rad 500 ml Erlenmeyerových baniek vždy s 50 ml hlavného média (celkove 12 litrov) sa inokuluje vždy 5 ml medzikultúry. Tieto kultúry sa fermentujú 3 dni pri teplote 27 °C na rotačnej trepačke pri 200 otáčkach za minútu s excentricitou 50 mm. Po 24 hodinách sa pridá ku každej hlavnej kultúre (=150 mg/1) cyklosporín A (7,5 mg) solubilozovaný v metanole.
Zloženie média hlavnej kultúry je nasledujúce:
cerelóza 10g dextrín 10g škrob (rozpustný) 10g extrakt z kvasníc (Cistex)2,5 g sójová múka (Nurupan, Edelsója) 12,5 g K2HPO4 0,25g
KH2PO4 0,12g
MgŠO4.7H2O 0,10g
CaCl2.6H2O 0,05 g roztok stopových prvkov AC-11 ml demineralizovaná voda do 1 litra pH: upravené na 7,2 až 7,5 (KOH/H2SO4) 10 sterilizácia: 20 minút pri teplote 120 °C
Roztok stopových prvkov AC-1:
Tento roztok má rovnaké zloženie ako roztok č. 235, ibaže sa do neho pridá 0,2 g (NH4)6Mo7024·
5. Izolácia
Mycélium sa oddelí od média kultúry a vzniknutý filtrát kultúry (13 1) sa extrahuje trikrát 1,2-dichlóretánom s použitím 1,5 I pre každú extrakciu. Spojené 20 1,2-dichlóretánové roztoky sa odparia pri zníženom tlaku pri teplote 40 °C. Surový zvyšok sa podrobí gélovej filtrácii na Sephadexe LH-20 s použitím metanolu ako elučného činidla. Tie frakcie, ktoré obsahujú cyklosporínové zlúčeniny (525 mg), sa spoja a chromatografujú 25 sa na silikagéle (50 g, veľkosť granulátu 0,04 až 0,063 mm, Merck) s použitím zmesi chloroformu a metanolu ako elučného činidla. Opakovanou chromatografiou s použitím rovnakého systému sa získa čistý [τ-hydroxyMeLeu]4 *-Ciclosporin vo forme bieleho amorfného práš30 ku s teplotou topenia 150 až 153 °C, [a]D20 = - 225° (c = = 0,53 v CHCI3), - 171° (c = 0,44 v CH3OH).
Príklad 3 [x-hydroxy-MeLeu]4-[T-hydroxy-MeLeu]6-Ciclosporin (zlúčenina g)
Viac poláme vedľajšie frakcie vznikajúce pri čistení [-r-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporinu sa ďalej oddelia opakovanou chromatografiou na kolóne silikagélu (veľkosť granulátu 0,04 až 0,063 mm) s použitím zmesi octanu a hexánu 2 : 1 ako elučného činidla a ďalšou chromatografiou na silikagéle s použitím zmesi metylterc.butyléteru, metanolu a vody 90 : 9 : 1 ako elučného činidla. Prvá frakcia obsahuje [x-hydroxy-Leu]4-Ciclosporin, ktorý sa ďalej čistí odfarbením aktívnym uhlím, čím sa získa čistá zlúčenina vo forme bieleho amorfného prášku, s teplotou topenia 162 až 164 °C, [a]D20 = -211° (c = 0,50 v CHClj), - 157° (c = 0,52 v CH3OH).
Neskoršie frakcie z chromatografie na kolóne silika_θ gélu obsahujú [x-hydroxy-MeLeu]4-[T-hydroxy-MeLeu]6-Ciclosporin a ten sa ďalej čistí odfarbením aktívnym uhlím, pričom sa získa čistá zlúčenina uvedená v názve vo forme bieleho amorfného prášku s teplotou topenia 157 až 160 °C, [a]D20 = -217° (c = 0,54 v CHC13), 55 -176° (c = 0,42 v CHjOH).
Príklad 4 [Nva]2-[T-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin (zlúčenina f)
Zlúčenina uvedená v názve sa pripraví analogicky 6q ako pri príprave zlúčeniny c) ('[T-h_vdroxy-MeLeu]4-Ciclosporin), ale s použitím cyklosporínu C ([Nva]2-Ciclosporin) ako východiskovej zlúčeniny. Po čistení opakovanou chromatografiou na kolóne silikagélu s použitím etylacetátu nasýteného vodou a zmesou acetónu a hexánu 2 : 1 ako elučných činidiel sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bieleho amorfného prášku s teplotou topenia 138 až 141 °C [a]D 2t> = -213° (c = 0,69 v CHClj), -168° (c = 0,70 v CH3OH).
Príklad 5 [MeVal]s-Ciclosporin (zlúčenina h)
Cyklosporín A (0,60 g, 0,5 mmol) sa rozpustí v tetrahydrofuráne (20 ml) a inkubuje sa s 0,63 ml 1,6 M roztoku butyllítia (1,0 mmol) v hexáne. Vzniknutý roztok sa nechá reagovať s dimetylsulfátom (0,1 ml, 1,5 mmol) pri teplote -78 °C. Reakčná zmes sa nechá pomaly zohriať na izbovú teplotu a mieša sa cez noc.
Izoláciou rýchlou chromatografiou (SiO2, 5 % zmes metanolu a éteru) a potom vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou (reverzná fáza) sa získa produkt uvedený v názve. Zlúčenina je charakterizovaná ’H NMR (300 MHz, CDC13) spektrom, ktoré je znázornené na obr. 3.
Príklad 6 [MeThr]2-[(D)MeAla]3-[MeVal]5-Ciclosporin (zlúčenina i)
Zmes 480 ml tetrahydrofuránu (absolútneho) a 6,96 g (49,2 mmol) diizopropylamínu sa ochladí na -80 °C a pomaly sa nálevkou pridáva 33,5 ml 1,33 M roztoku butyllítia v hexáne (44,5 mmol). Zmes sa mieša 30 minút pri teplote -80 °C a potom sa počas 2 až 3 minút pridá nálevkou roztok 8 g (6,6 mmol) cyklosporínu C ([Thr]2-Ciclosporin) v 120 ml absolútneho tetrahydrofuránu. Číry roztok sa mieša ďalšiu hodinu pri teplote -80 °C a potom sa pomaly pridá 2,06 ml metyljodidu.
Zmes sa nechá zohriať na izbovú teplotu počas 2 hodín, potom sa pridá 40 ml vody a rozpúšťadla, odparia sa na rotačnom odparováku pri teplote 30 °C a pri tlaku 2,0 kPa. Zvyšok sa rozdelí medzi vodu a éter a éterová vrstva sa premyje štyrikrát polonasýteným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a odparí. Získa sa zvyšok s hmotnosťou 8,1 g.
Tento zvyšok sa chromatografuje na 1200 g silikagélu a eluuje sa vodou nasýteným etylacetátom, pričom sa získa surový produkt, ktorý sa čistí ďalšou chromatografiou na 200 g silikagélu a eluuje sa 5 % MeOH/CH2Cl2, pričom sa získa čistá zlúčenina uvedená v názve, [a]D 20 = = -195° (c=1,0vCHC1)3.
Príklad 7 [Dihydro-MeBmt]1-[x-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin (zlúčenina e)
K suspenzii 200 mg vopred hydrogenovaného 10 % paládia na uhlí v 4 ml etanolu sa pridá 1,2 g [τ-hydroxy-MeLeuJ4-Ciclosporinu (zlúčenina e) v 10 ml etanolu a hydrogenácia sa uskutočňuje pri izbovej teplote tak dlho, kým sa nespotrebúva žiadny vodík. Po odstránení katalyzátora filtráciou sa roztok odparí, pričom sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bieleho amorfného prášku s teplotou topenia 154 až 156 °C, [a]D20 = -225° (c = = 0,87 v CHC13), -169° (c = 0,70 v CH3OH).
Príklad 8 [8'-Hydroxy-MeBmt]1 -Ciclosporin (zlúčenina j)
1. [O-acetyΙ-ω-bróm-Bmt]1 -C iclosporin:
Zmes 25,0 g (20 mmol) [O-acetyl-MeBmťj'-Ciclosporinu (Trabor a kol. Helv. Chim. Acta, 1982, 65 1653), 4,4 g (25 mmol) N-brómsukcínimidu a 400 mg azobisizobutyronitrilu v 250 ml chloridu uhličitého sa zohrieva do varu 2,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odparí a nahradí sa éterom, pevné podiely sa odfiltrujú sa premyjú vodou, vysušia síranom horečnatým a odparia sa do sucha. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéle za elúcie zmesi etyléteru a etylacetátu (4 : 1) a získa sa 10,7 g (40 %) amorfného produktu, ktorý sa prekryštalizuje zo zmesi éteru a hexánu a získa sa 8,4 g čistej látky s teplotou topenia 207 až 209 °C. Neskoršie frakcie chromatogramu obsahujú ďalších 11,2 g produktu o niečo menšej kvality.
2. [O-acetyΙ-ω-acetoxy-MeBmt]1 -Ciclosporin:
Zmes 4,31 g (3,3 mmol) produktu zo stupňa 1 (znečisteného podľa výpočtu 15 až 20 % východiskovou látkou) a 2,1 g (8 mmol) tetraetylamóniumacetátutetrahydrátu v 30 ml metyletylketónu obsahujúceho katalytické množstvo jodidu sodného, sa zohrieva 3 hodiny na olejovom kúpeli na teplotu 105 °C a potom sa udržuje pri izbovej teplote cez víkend. Zmes sa zriedi metylterc.butyléterom a premyje sa vodou a roztokom chloridu sodného. Organická vrstva sa vysuší síranom horečnatým a odparením sa získa 4,0 g surového produktu, ktorý sa čisti na kolóne s reverznou fázou RP-18 (240 g) a získa sa 3,07 g zlúčeniny uvedenej v názve s teplotou topenia 191 až 192 °C.
3. [ω-hydroxy-MeBmt] ’-Ciclosporin:
Roztok 1,72 g (1,3 mmol) produktu zo stupňa 2 v 75 ml metanolu a roztok 1,2 g sodíka v 50 ml metanolu sa spolu zmieša a zmes sa udržuje 2,5 hodiny pri izbovej teplote. Potom sa roztok okyslí kyselinou octovou. Rozpúšťadlo sa odparí pri zníženom tlaku a zvyšok sa rozpustí v metylterc.butylétere, premyje sa postupne vodou, roztokom chloridu sodného a roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a odparí. Surový produkt (1,6 g) sa eluuje z kolóny RP-18 (240 g) zmesou metanolu a vody (75 : 15) a získa sa 1,5 g čistého produktu. Vzorka sa prekryštalizuje zo zmesi éteru a hexánu a získa sa kryštalický produkt s teplotou topenia 181 až 183 °C.
Príklad 9 [MeThr]4-Ciclosporin (zlúčenina d)
Celková syntéza Ciclosporinu, ako je opísaná v US patentoch č. 4 396 542 a 4 7698 823, sa uskutočňuje s použitím zlúčeniny obsahujúcej v polohe 4 MeThr namiesto McLeu. Produkt má [a]D 20 = -249,6° (c = 1,0 v CHCI,).
Príklad 10 [MeVal]4-Ciclosporin (zlúčenina b)
Celková syntéza Ciclosporinu, ako je opísaná v US patentoch č. 4 396 542 a 4 798 823, sa uskutočňuje s použitím zlúčeniny obsahujúcej v polohe 4 MeVal namiesto MeLeu. Produkt má [a]D 20 = -226° (c = 0,350 v CHC13).
Príklad 11
Imunosupresívna účinnosť viazania aktívnych zlúčenín na cyklofilín, vztiahnuté na Ciclosporin
Tabuľka I uvádza v stĺpci (1) príklady väzbových pomerov (BR) aktívnych zlúčenín na cyklofilín, vztiahnuté na Cicloporin, ako bolo merané ELISA testom, a v stĺpci (2) imunosupresívna účinnosť aktívnych zlúčenín, vztiahnuté na Ciclosporin, ako bolo merané MLR testom a ako jc vyjadrené ako percento účinnosti, vztiahnuté na
Ciclosporin, (imunosupresívny pomer označený ako IR). Ďalšie vysvetlenie týchto významov a metodiky uskutočnenia týchto testov bolo už vysvetlené.
Tabuľka I
Zlúčenina | BR(logio) | IR (%) |
a) [dihydro-HeBint.] ’-(r-hydroxy- | ||
MeLeu]*-ciclcsporir. | 0,1 | <1 |
b) [MeValp-Cicloaporin | 0,1 | <1 |
c) [Melie]‘-Ciclosporin | -0,2 | <1 |
e) (r-hydroxy-MeLeuV-Ciclospcrin | -0,3 | <1 |
f) (Nva)3-[r-hydroxy-MeLeu]*- | ||
Ciclosporin | 0,4 | <1 |
h) [MeVal]e-clclosporin | 0,4 | 5,3 |
j] (a'-hydroxy-MeBnt]1- | ||
Ciclosporin | 0,35 | 1,8 |
k) [MeAlaľ-ciclosporin | -Q,4 | 3*2 |
D [τ-hydroxy-MeLeu]- Ciclosporin | 0,15 | 2,9 |
Príklad 12
Anti-HIV účinnosť a cytotoxicita aktívnych zlúčenín
Príklady účinnosti aktívnych zlúčenín a Ciclosporinu ako inhibítora HIV-1 replikácie v MT4-bunkách a cytotoxicita aktívnych zlúčenín a Ciclosporinu v MT4-bunkách sú zhrnuté v nasledujúcej tabuľke 1. Významy týchto hodnôt a príslušné metodiky boli už diskutované.
TabuDca II
Zlúčenina Cytotoxicita antl-Hív (jig/ni} (ic ao)
a) [dihydro-MeBBt^-ír-bydroxy-
MeĹeu ] ‘‘-Cici osporin | 16,3 | 0,32 |
b) (MeValp-Cidosporin | 5,4 | 0,064 |
c) [Melie]‘-Ciclosporin | 4,5 | 0,056 |
e) [T-hydroxy-MeLeu]*-cLcloeporin | 15,5 | 0,34 |
f) [Hva]a-[r-hydroxy-MeLeul*- | ||
Ciciesporin | 14,1 | 0,95 |
h) [MeVal]“-Ciclosporin | 4,4 | 0,45 |
i) [MeThr]’-{ (DJMeAlap-CMeVal]*- | ||
Ciclosporin | >10 | 0,45 |
j] (a'-hydroxy-MeBnt]x- | ||
Ciclcsporln | 10,6 | 0,56 |
k) [MeAla]“~Clclosporin | 5,2 | 1,34 |
1) [r-hydroxy-MeLeuľ- Ciclosporin | >10 | 0,31 |
Ciclosporin | 8,45 | 0,53 |
Aktívne zlúčeniny sú indikované tak pre prevenciu AIDS u asymptomatických HlV-pozitívnych pacientov, ako aj ošetrovaní pacientov podozrelých z AIDS. U pacientov, u ktorých sa prejavilo AIDS, by malo podávanie aktívnej zlúčeniny zvrátiť úbytok T4-buniek spojený s AIDS, vyvolať pokles ťažkostí súvisiacich s AIDS, ako je Kaposiho sarkóm, a znížiť pravdepodobnosť možnosti nových infekcií.
Predložený vynález sa tiež týka spôsobu ošetrovania a prevencie syndrómu získanej imunitnej nedostatočnosti a ostatných ťažkostí vyvolaných vírusom HIV-1 u pacientov infikovaných týmto vírusom, pričom tento spôsob spočíva v podávaní účinného množstva aktívnej zlúčeniny týmto pacientom.
Aktívne zlúčeniny možno podávať obvyklými spôsobmi, najmä enterálne, napríklad orálne, napríklad vo forme roztoku na pitie, tabliet alebo kapslí, alebo parenterálne, napríklad vo forme injikovateľných roztokov alebo suspenzií. Pri intravenóznom podávaní sa určená denná dávka môže pohybovať od 1 do 20 mg/kg, výhodne od 3 do 10 mg/kg, a pri orálnom podávaní od 1 do 50 mg/kg, výhodne od 7 do 20 mg/kg.
Predpokladá sa, že toxicita aktívnych zlúčenín je podobná ako toxicita Ciclosporinu. Pretože aktívne zlúčeniny nie sú imunosupresívne, nevyvolávajú určité 5 vedľajšie účinky, ktoré spôsobí Ciclosporin vzhľadom na imunosupresivitu. Aktívne zlúčeniny však môžu spôsobiť ostatné vedľajšie účinky ako Ciclosporin, najmä neurotoxicitu pri dlhodobom používaní.
Výhodné liečivé prípravky s aktívnymi zlúčeninami 10 sú mikroemulzie, ako sú opísané v anglickej patentovej prihláške 2 222 770A, ktoré zahrnujú tak topické, ako i orálne formy a ďalej orálne a injikovateľné formy získané z tuhých roztokov obsahujúcich monoester mastnej kyseliny so sacharidom, napríklad monolaurát sacharó15 zy, ako je opísané v anglickej patentovej prihláške 2 209 671 A. Vhodná jednotková dávka pre orálne aplikácie je napríklad od 25 do 200 mg aktívnej zlúčeniny na dávku.
Príklad prípravku A:
produkt podľa príkladu 1 50,0 mg
Glycofurol 75 180,0mg
Miglyol812 90,0 mg
CremophorRII40 180,0mg a-tokoferol 0,5 mg
Príklad prípravku B:
produkt podľa príkladu 1 100,0mg tetraglykol 20,0mg
Captex 800 20,0mg
Nikkol HCO-40 860,0 mg butylhydroxytoluén (BHT) 1,0 mg
Príklad prípravku C:
produkt podľa príkladu 1 25,0 mg
Glycofurol 75 100,0mg
Miglyol812 35,0mg
Cremophor RH 40 90,0mg butylhydroxyanizol (BHA) 0,2 mg
Príklad prípravku D:
produkt podľa príkladu 1 10,0mg tetraglykol 10,0mg myritol 5,0 mg
Cremophor RH 40 75,0mg a-tokoferol 0,1 mg
Jednotlivé zložky týchto prípravkov, ako i spôsoby ich prípravy sú opísané v anglickej patentovej prihláške č. 2 222 770, ktorá je tu uvedená ako odkaz.
Priemyselná využiteľnosť
Zlúčeniny opísané v predloženom vynáleze možno použiť na liečenie a prevenciu syndrómu získanej imunitnej nedostatočnosti a ostatných ťažkostí vyvolaných vírusom HIV-1 u pacientov infikovaných týmto vírusom.
Claims (6)
1 2 3 4 5 G 7 6 9 10 11 I <11 !
SK 278808 Β6 kde W je MeBmt, dihydro-MeBmt alebo 8'-hydroxy-MeBmt,
X je aAbu, Val, Thr, Nva alebo MeOThr,
R je Sar alebo (D)-MeAla,
Y je MeLeu, τ-hydroxy-MeLeu, Melie, MeVal, MeThr, MeAla, Mealle alebo MeaThr,
Zje Val, Leu, MeVal alebo MeLeu, a
Q je MeLeu, τ-hydroxy-MeLeu alebo MeAla, s podmienkou, že ak Y je MeLeu, potom buď Z je MeVal alebo MeLeu alebo W je 8'-hydroxy-MeBmt, na použitie ako liečivo.
1. Cyklosporín všeobecného vzorca (I), :W—X—R—Y—Z—Q—Ala-(D) Ala—MeLeu—MeLeu—MeVal—i
2. Cyklosporín podľa nároku 1 všeobecného vzorca (D’,
CW i —χ'—Sar—Y ‘ —21 —MeLeu—kla— (D) Ala-MeLeu-MeLeu-KeVal.—.
12345 6 7 S 9 10 11 [1'1 kde W'je MeBmt alebo dihydro-MeBmt,
X1 je aAbu alebo Nva,
Y'je τ-hydroxy-MeLeu, MeVal, MeThr alebo Melie, Z'je Val alebo MeVal, na použitie ako liečivo.
3 výkresy kde W'je MeBmt alebo dihydro-MeBmt,
X je aAbu, Val, Thr, Nva alebo MeOThr,
R je Sar alebo (D)-MeAla,
Y je MeLeu, τ-hydroxy-MeLeu, Melie, MeVal, MeThr, MeAla, Mealle alebo MeaThr a
Zje Val, Leu, MeVal alebo MeLeu, s podmienkou, že 1) ak Y je MeLeu alebo MeAla, potom Z je MeVal alebo MeLeu, a 2) keď W' je MeBmt, R je Sar a Y je τ-hydroxy-MeLeu, potom Z je iné ako Val.
3. Cyklosporín podľa nároku 1, vybraný zo skupiny zahrnujúcej:
[dihydro-MeBmt]'-[ T-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin [MeVal]4-Ciclosporin [Mclle]4-Ciclosporin [MeThr]4-Ciclosporin [v-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin [Nva]2-[T-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin [T-hydroxy-MeLeu]4-[r-hydroxy-MeLeu]6-Ciclosporin [MeValf-Ciclosporin [MeOThr] 2-[(D)MeAla]3- [MeVal] 5-Ciclosporin [8'-hydroxy-MeBmt] '-Ciclosporin a [T-hydroxy-MeLeuf-Ciclosporin.
na použitie ako liečivo.
4. Použitie cyklosporinu podľa nárokov 1, 2 alebo 3 pri príprave liečiva na liečenie a prevenciu AIDS a ťažkostí spojených s AIDS.
5. Cyklosporín všeobecného vzorca (II) podľa nároku 1,
H*_X_R—V—z—KalAU—Kla—(t»Ala—MeLau—HeLeu—MeVal1 J 3 Λ 5 β 7 a 9 io 11 dD
7. Cyklosporín podľa nároku 6 vybraný zo skupiny zahrnujúcej: [dihydro-MeBmt]'-[T-hydroxy-MeLeu]4-CicIosporin [MeVal]4-Ciclosporin [Melle]4-Ciclosporin [MeThr]4-Ciclosporin [Nva]2-[r-hydroxy-MeLeu]4-Ciclosporin [T-hydroxy-MeLeu]4-[T-hydroxy-MeLeu]6-Ciclosporin [McValj’-Ciclosporin a [MeOThr]2-[(D)MeAla]3-[MeVal]5-Ciclosporin.
8. Cyklosporín podľa nároku 7, ktorým je [Melle]4-Ciclosporin.
9. Spôsob prípravy [Melle]4-Ciclosporinu podľa nárokov 1, 2, 3 a 5 až 8, vyznačujúci sa t ý m , že sa kultivuje plesňový kmeň DSM 6627 v živnom médiu a produkt sa izoluje z fermentačnej živnej pôdy.
10. Čistá kultúra plesňového kmeňa DSM 6627.
11. Spôsob prípravy cyklosporínov obsahujúcich jeden alebo viac τ-hydroxy-MeLeu zvyškov podľa nárokov 1,2, 3a5až 8, vyznačujúci sa tým, že sa kultivuje plesňový kmeň DSM 6182 v živnom médiu, pridá sa cyklosporín obsahujúci jeden alebo viac MeLeu zvyškov a z fermentačnej živnej pôdy sa izoluje produkt.
12. Čistá kultúra plesňového kmeňa DSM 6182.
6. Cyklosporín podľa nároku 5 všeobecného vzorca (Π)', rN‘ —aADu—Sar—Y ’-Z'-MeLeu-Ala-(D) Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-i x 2 3 4 5 6 7 6 9 10 11 (Iľ) kde W1 je MeBmt alebo dihydro-MeBmt,
Y'je τ-hydroxy-MeLeu, MeVal, MeThr alebo Melie, a
Z’je Val alebo MeVal, s podmienkou, že ak W’ je MeBmt, Y' je iné ako τhydroxy-MeLeu.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB909023859A GB9023859D0 (en) | 1990-11-02 | 1990-11-02 | Chemical products |
GB909023972A GB9023972D0 (en) | 1990-11-05 | 1990-11-05 | New use of a cyclosporin derivative |
GB909023970A GB9023970D0 (en) | 1990-11-05 | 1990-11-05 | New use of a cyclosporin derivative |
GB909023971A GB9023971D0 (en) | 1990-11-05 | 1990-11-05 | New use of a cyclosporin derivative |
GB919116836A GB9116836D0 (en) | 1991-08-05 | 1991-08-05 | Organic compounds |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SK278808B6 true SK278808B6 (sk) | 1998-03-04 |
Family
ID=27517009
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK3297-91A SK278808B6 (sk) | 1990-11-02 | 1991-10-30 | Cyklosporíny, ich použitie pri príprave liečiva na |
Country Status (25)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US5767069A (sk) |
EP (1) | EP0484281B2 (sk) |
JP (1) | JP2740775B2 (sk) |
KR (1) | KR100203556B1 (sk) |
AT (1) | ATE148469T1 (sk) |
AU (1) | AU649277B2 (sk) |
CA (1) | CA2054590C (sk) |
CY (1) | CY2159B1 (sk) |
CZ (1) | CZ280909B6 (sk) |
DE (1) | DE69124459T3 (sk) |
DK (1) | DK0484281T4 (sk) |
ES (1) | ES2095926T5 (sk) |
FI (1) | FI111730B (sk) |
GR (2) | GR3022592T3 (sk) |
HK (1) | HK1005741A1 (sk) |
HU (1) | HU212674B (sk) |
IE (1) | IE913824A1 (sk) |
IL (1) | IL99912A (sk) |
MX (1) | MX9101869A (sk) |
MY (1) | MY134806A (sk) |
NZ (1) | NZ240421A (sk) |
PL (1) | PL168609B1 (sk) |
PT (1) | PT99410B (sk) |
SA (1) | SA92120344B1 (sk) |
SK (1) | SK278808B6 (sk) |
Families Citing this family (81)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0624093A1 (en) * | 1992-01-28 | 1994-11-17 | KARPAS, Abraham | The use of a compound for the manufacture of a medicament for the treatment of hiv infection |
GB9204466D0 (en) * | 1992-03-02 | 1992-04-15 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
ES2065273B1 (es) * | 1993-05-25 | 1995-09-16 | Biogal Gyogyszergyar | Procedimiento para la purificacion de ciclosporina a. |
US5948693A (en) * | 1994-09-01 | 1999-09-07 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Solid phase synthesis of immunosuppressive agents |
US5639852A (en) * | 1994-09-01 | 1997-06-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Immunostimulatory agents |
US6696413B2 (en) | 1995-06-16 | 2004-02-24 | Hexal Ag | Pharmaceutical preparation with cyclosporin A |
ATE209216T1 (de) * | 1995-07-17 | 2001-12-15 | Chem Ag C | Cyclosporin-derivate mit anti-hiv-wirkung |
JP3089350B2 (ja) * | 1995-11-20 | 2000-09-18 | ギルフォード ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | シクロフィリンロタマーゼ活性の阻害剤 |
EP0944394A4 (en) * | 1996-03-12 | 2003-05-14 | Picower Inst Med Res | TREATING HIV INFECTION BY INFLUENCING CYCLOPHILIN RECEPTOR ACTIVITY IN THE HOST CELL |
CN1130373C (zh) * | 1996-09-13 | 2003-12-10 | 诺瓦蒂斯有限公司 | [3'-脱氧-3'-氧代-MeBmt]'环孢菌素制备方法 |
FR2757522B1 (fr) * | 1996-12-24 | 1999-01-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Derives de cyclosporine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
FR2757521B1 (fr) * | 1996-12-24 | 1999-01-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux derives de cyclosporine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
FR2757520B1 (fr) * | 1996-12-24 | 1999-01-29 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Derive de cyclosporine, sa preparation et les compositions pharmaceutiques qui le contiennent |
FR2762843B1 (fr) * | 1997-04-30 | 1999-12-10 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux derives de cyclosporine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent |
ATE423130T1 (de) | 1997-10-08 | 2009-03-15 | Isotechnika Inc | Deuterierte cyclosporin-analoga und ihre verwendung als immunmodulierende agenzien |
US20030220234A1 (en) * | 1998-11-02 | 2003-11-27 | Selvaraj Naicker | Deuterated cyclosporine analogs and their use as immunodulating agents |
ZA99981B (en) * | 1998-02-17 | 2000-08-08 | Du Pont Pharm Co | Oral liquid formulations of benzoxazinones HIV reverse transcriptase inhibitors. |
GB9811854D0 (en) * | 1998-06-02 | 1998-07-29 | Ciba Geigy Ag | Organic compounds |
FR2780061B1 (fr) | 1998-06-22 | 2001-09-07 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveau procede de preparation de derives de cyclosporine |
PT1091975E (pt) | 1998-07-01 | 2006-05-31 | Debiopharm Sa | Nova ciclosporina com um perfil de actividade melhorado |
JP2002534370A (ja) | 1998-12-30 | 2002-10-15 | デクセル リミテッド | サイクロスポリンを送達するための分散可能な濃縮物 |
US6521595B1 (en) * | 1999-11-19 | 2003-02-18 | Lg Chemical, Ltd. | Nonimmunosuppressive [γ-hydroxy-methylleucine4] cyclosporin A, hair growth stimulator and external composition for skin using the same |
US7732404B2 (en) | 1999-12-30 | 2010-06-08 | Dexcel Ltd | Pro-nanodispersion for the delivery of cyclosporin |
AU2002245996B8 (en) * | 2001-04-20 | 2005-07-14 | Ophthalmopharma Ag | Modified cyclosporine which can be used as a pro-drug and use thereof |
KR100695611B1 (ko) * | 2001-05-17 | 2007-03-14 | 주식회사 엘지생활건강 | [감마 히드록시 엔-메틸 엘-루신4] 사이클로스포린유도체를 유효성분으로 하는 모발 성장 촉진제 |
ES2326040T3 (es) | 2001-10-19 | 2009-09-29 | Isotechnika Inc. | Sintesis de analogos de ciclosporina. |
AR036852A1 (es) * | 2001-10-19 | 2004-10-06 | Isotechnika Inc | Preconcentrado de una microemulsion de analogos de ciclosporina, su metodo de preparacion y metodos para producir inmunosupresion |
DE20220744U1 (de) * | 2001-10-25 | 2004-05-13 | Viromics Gmbh | Mittel zur Hemmung von Lentiviren |
US7108988B2 (en) * | 2001-11-02 | 2006-09-19 | The J. David Gladstone Institutes | Methods of identifying agents for inhibiting lentivirus replication |
WO2004082629A2 (en) * | 2003-03-17 | 2004-09-30 | Albany Molecular Research, Inc. | Novel cyclosporins |
GB0320638D0 (en) * | 2003-09-03 | 2003-10-01 | Novartis Ag | Organic compounds |
US20050059583A1 (en) | 2003-09-15 | 2005-03-17 | Allergan, Inc. | Methods of providing therapeutic effects using cyclosporin components |
CN1964735A (zh) * | 2004-04-08 | 2007-05-16 | 诺瓦提斯公司 | 环孢菌素用于治疗脑局部缺血以及脑和脊髓损伤的用途 |
KR20070036127A (ko) * | 2004-07-13 | 2007-04-02 | 노파르티스 아게 | 알츠하이머병을 치료하기 위한 사이클로스포린 |
DE602005026294D1 (de) | 2004-07-14 | 2011-03-24 | Novartis Ag | Verwendung einer kombination von cyclosporin und pegylierten interferonen zur behandlung von hepatitis c (hcv) |
KR100597309B1 (ko) | 2004-09-17 | 2006-07-05 | 주식회사 핸슨바이오텍 | 세베키아 베니하나를 이용한 [감마 히드록실메틸루신4] 사이클로스포린 a의 제조방법 |
US7511013B2 (en) * | 2004-09-29 | 2009-03-31 | Amr Technology, Inc. | Cyclosporin analogues and their pharmaceutical uses |
EP1809656A4 (en) * | 2004-09-29 | 2009-03-25 | Amr Technology Inc | CYCLOSPORINAL KINANALOGA AND ITS PHARMACEUTICAL APPLICATIONS |
KR101309409B1 (ko) * | 2004-10-01 | 2013-09-23 | 싸이넥시스, 인크. | C형 간염 바이러스 감염의 치료 및 예방을 위한 3-에테르및 3-티오에테르 치환된 시클로스포린 유도체 |
US7196161B2 (en) * | 2004-10-01 | 2007-03-27 | Scynexis Inc. | 3-ether and 3-thioether substituted cyclosporin derivatives for the treatment and prevention of hepatitis C infection |
WO2006041631A2 (en) * | 2004-10-06 | 2006-04-20 | Amr Technology, Inc. | Novel cyclosporin alkynes and their utility as pharmaceutical agents |
US7151085B2 (en) * | 2004-11-15 | 2006-12-19 | Allergan, Inc. | Therapeutic methods using cyclosporine components |
US7135455B2 (en) * | 2004-11-15 | 2006-11-14 | Allergan, Inc | Methods for the therapeutic use of cyclosporine components |
KR100777488B1 (ko) | 2004-12-15 | 2007-11-28 | 주식회사 핸슨바이오텍 | 세베키아 베니하나 (Sebekia benihana)배양물로부터 감마-히드록실메틸루신4 사이클로스포린 A를 효과적이고 선택적으로 회수하는 방법 |
NZ555142A (en) * | 2004-12-23 | 2010-03-26 | Novartis Ag | Compounds for flaviviridae treatment |
US7897565B2 (en) * | 2004-12-23 | 2011-03-01 | Novartis Ag | Compositions for HCV treatment |
CA2623864C (en) * | 2005-09-30 | 2014-12-16 | Scynexis, Inc. | Arylalkyl and heteroarylalkyl derivatives of cyclosporine a for the treatment and prevention of viral infection |
US7696165B2 (en) | 2006-03-28 | 2010-04-13 | Albany Molecular Research, Inc. | Use of cyclosporin alkyne analogues for preventing or treating viral-induced disorders |
US7696166B2 (en) | 2006-03-28 | 2010-04-13 | Albany Molecular Research, Inc. | Use of cyclosporin alkyne/alkene analogues for preventing or treating viral-induced disorders |
CN101466727B (zh) | 2006-04-11 | 2012-10-17 | 诺瓦提斯公司 | Hcv/hiv抑制剂及其用途 |
WO2007136759A2 (en) | 2006-05-19 | 2007-11-29 | Scynexis, Inc. | Method for the treatment and prevention of ocular disorders |
EP2027761A1 (fr) * | 2006-06-02 | 2009-02-25 | Claude Annie Perrichon | Gestion des electrons actifs |
WO2008069917A2 (en) * | 2006-11-20 | 2008-06-12 | Scynexis, Inc. | Novel cyclic peptides |
US20080255038A1 (en) * | 2007-04-11 | 2008-10-16 | Samuel Earl Hopkins | Pharmaceutical compositions |
AU2008304313B2 (en) * | 2007-09-26 | 2013-01-10 | Oregon Health & Science University | Cyclic undecapeptides and derivatives as multiple sclerosis therapies |
WO2010002428A2 (en) * | 2008-06-06 | 2010-01-07 | Scynexis, Inc. | Novel macrocyclic peptides |
WO2009148615A1 (en) * | 2008-06-06 | 2009-12-10 | Scynexis, Inc. | Cyclosporin analogs and their use in the treatment of hcv infections |
BRPI0911709A2 (pt) * | 2008-07-30 | 2017-06-20 | Isotechnika Labs Inc | composto, processo para a produção de um composto, composição farmacêutica e método de tratar uma doença mediada a ciclofilina em um mamífero |
US8536114B2 (en) | 2008-12-31 | 2013-09-17 | Scynexis, Inc. | Macrocycles |
US11304960B2 (en) | 2009-01-08 | 2022-04-19 | Chandrashekar Giliyar | Steroidal compositions |
US8481483B2 (en) * | 2009-02-19 | 2013-07-09 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Cyclosporin analogues |
US8512690B2 (en) | 2009-04-10 | 2013-08-20 | Novartis Ag | Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors |
US20110182850A1 (en) | 2009-04-10 | 2011-07-28 | Trixi Brandl | Organic compounds and their uses |
GB0909754D0 (en) * | 2009-06-05 | 2009-07-22 | Magnani Mauro | Drug delivery systems |
US8802666B2 (en) * | 2009-12-21 | 2014-08-12 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Inhibitors of cyclophilins and uses thereof |
US20120010131A1 (en) | 2009-12-30 | 2012-01-12 | Scynexis, Inc. | Novel cyclosporin analogues |
CN103153329A (zh) | 2010-07-16 | 2013-06-12 | 美国科技环球有限公司 | 新颖的环孢霉素a衍生物在病毒感染的治疗和预防中的应用 |
US9573978B2 (en) | 2010-08-12 | 2017-02-21 | S&T Global, Inc. | Cyclosporin derivatives for the treatment and prevention of a viral infection |
AU2011311880B2 (en) | 2010-10-08 | 2014-07-24 | Novartis Ag | Vitamin E formulations of sulfamide NS3 inhibitors |
US20180153904A1 (en) | 2010-11-30 | 2018-06-07 | Lipocine Inc. | High-strength testosterone undecanoate compositions |
US9034858B2 (en) | 2010-11-30 | 2015-05-19 | Lipocine Inc. | High-strength testosterone undecanoate compositions |
US9358241B2 (en) | 2010-11-30 | 2016-06-07 | Lipocine Inc. | High-strength testosterone undecanoate compositions |
US9890198B2 (en) | 2010-12-03 | 2018-02-13 | S&T Global Inc. | Cyclosporin derivatives and uses thereof |
US20120148675A1 (en) | 2010-12-10 | 2012-06-14 | Basawaraj Chickmath | Testosterone undecanoate compositions |
MY165152A (en) | 2010-12-15 | 2018-02-28 | Contravir Pharmaceuticals Inc | Cyclosporine analogue molecules modified at amino acid 1 and 3 |
US20120253007A1 (en) * | 2011-03-28 | 2012-10-04 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Synthesis of Cyclosporin H |
US20140205566A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-07-24 | Novartis Ag | Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof |
WO2016033549A2 (en) | 2014-08-28 | 2016-03-03 | Lipocine Inc. | (17-ß)-3-OXOANDROST-4-EN-17-YL TRIDECANOATE COMPOSITIONS AND METHODS OF THEIR PREPARATION AND USE |
US9498485B2 (en) | 2014-08-28 | 2016-11-22 | Lipocine Inc. | Bioavailable solid state (17-β)-hydroxy-4-androsten-3-one esters |
JP2020503269A (ja) | 2016-11-28 | 2020-01-30 | リポカイン インコーポレーテッド | 経口ウンデカン酸テストステロン療法 |
CN111449050A (zh) | 2019-01-20 | 2020-07-28 | 睿诺医疗科技(上海)有限公司 | 环孢菌素类似物及其用途 |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2455859C2 (de) | 1973-12-06 | 1983-12-15 | Sandoz-Patent-GmbH, 7850 Lörrach | Das Antibiotikum Cyclosporin A (S 7481/F-1), seine Herstellung und Verwendung |
US4304855A (en) * | 1977-05-05 | 1981-12-08 | The Upjohn Company | Allylic methyl-hydroxylated novobiocins |
CH667274A5 (de) * | 1984-03-23 | 1988-09-30 | Sandoz Ag | Cyclosporine, ihre herstellung und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen. |
EP0194972B1 (en) * | 1985-03-11 | 1992-07-29 | Sandoz Ag | Novel cyclosporins |
US4814323A (en) * | 1986-03-25 | 1989-03-21 | Andrieu J M | Process for the treatment and the prevention of AIDS and other disorders induced by the LAV/HTLV III virus |
EP0283801A3 (en) * | 1987-03-27 | 1990-05-30 | Abbott Laboratories | Fluorescence polarization assay for cyclosporin a and metabolites and related immunogens and antibodies |
US4798823A (en) * | 1987-06-03 | 1989-01-17 | Merck & Co., Inc. | New cyclosporin analogs with modified "C-9 amino acids" |
EP0373260B1 (en) * | 1987-06-22 | 1994-03-09 | Merck & Co. Inc. | Cyclosporin derivatives with modified "8-amino acid" |
GB8717300D0 (en) * | 1987-07-22 | 1987-08-26 | Nat Res Dev | Cyclosporins |
US4981799A (en) * | 1987-08-21 | 1991-01-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Acylamino acid racemase, production and use thereof |
US4914188A (en) † | 1987-11-16 | 1990-04-03 | Merck & Co., Inc. | Novel 6-position cyclosporin analogs as non-immunosuppressive antagonists of cyclosporin binding to cyclophilin |
US5081024A (en) * | 1988-09-05 | 1992-01-14 | Nissan Chemical Industries, Ltd. | Process for producing optically active amino acids |
GB2227244A (en) * | 1989-01-19 | 1990-07-25 | Merck & Co Inc | Immunosuppressive fluorinated cyclosporin analogs |
US5122511A (en) * | 1990-02-27 | 1992-06-16 | Merck & Co., Inc. | Immunosuppressive cyclosporin analogs with modified amino acids at position-8 |
-
1991
- 1991-10-30 SK SK3297-91A patent/SK278808B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-10-30 DE DE69124459T patent/DE69124459T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-10-30 ES ES91810841T patent/ES2095926T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-10-30 FI FI915135A patent/FI111730B/fi not_active IP Right Cessation
- 1991-10-30 DK DK91810841T patent/DK0484281T4/da active
- 1991-10-30 AT AT91810841T patent/ATE148469T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-10-30 CZ CS913297A patent/CZ280909B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1991-10-30 EP EP91810841A patent/EP0484281B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-10-31 PL PL91292248A patent/PL168609B1/pl unknown
- 1991-10-31 IL IL9991291A patent/IL99912A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-10-31 AU AU86923/91A patent/AU649277B2/en not_active Expired
- 1991-10-31 PT PT99410A patent/PT99410B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-10-31 MX MX9101869A patent/MX9101869A/es unknown
- 1991-10-31 NZ NZ240421A patent/NZ240421A/en not_active IP Right Cessation
- 1991-10-31 CA CA002054590A patent/CA2054590C/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-01 HU HU913446A patent/HU212674B/hu unknown
- 1991-11-01 KR KR1019910019402A patent/KR100203556B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1991-11-01 IE IE382491A patent/IE913824A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-11-01 JP JP3287501A patent/JP2740775B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1991-11-01 MY MYPI91002021A patent/MY134806A/en unknown
-
1992
- 1992-01-19 SA SA92120344A patent/SA92120344B1/ar unknown
-
1995
- 1995-04-24 US US08/427,312 patent/US5767069A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-02-19 GR GR970400277T patent/GR3022592T3/el unknown
-
1998
- 1998-05-26 US US09/084,709 patent/US5981479A/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-03 HK HK98104804A patent/HK1005741A1/xx not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-09-09 US US09/392,282 patent/US6255100B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-01-13 CY CY0000002A patent/CY2159B1/xx unknown
-
2001
- 2001-01-31 GR GR20010400150T patent/GR3035323T3/el not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SK278808B6 (sk) | Cyklosporíny, ich použitie pri príprave liečiva na | |
EP0056782B1 (en) | Novel cyclosporins | |
US4914188A (en) | Novel 6-position cyclosporin analogs as non-immunosuppressive antagonists of cyclosporin binding to cyclophilin | |
DE69928938T2 (de) | Neues cyclosporin mit verbesserter wirkung | |
CA1247546A (en) | Cyclosporins | |
US4764503A (en) | Novel cyclosporins | |
Sakamoto et al. | FR901459, A NOVEL IMMUNOSUPPRESSANT ISOLATED FROM Stachybotrys chartarum No. 19392 TAXONOMY OF THE PRODUCING ORGANISM, FERMENTATION, ISOLATION, PHYSICO-CHEMICAL PROPERTIES AND BIOLOGICAL ACTIVITIES | |
RU2112807C1 (ru) | Способ получения иммунодепрессанта циклоспорина а и штамм tolypocladium species свs630.92, продуцирующий циклоспорин а | |
GB2207678A (en) | Novel immunosuppressive fluorinated cyclosporin analogs | |
US20040235716A1 (en) | Novel cyclosporins | |
AU702332B2 (en) | Organic compounds | |
RU2085589C1 (ru) | Циклоспорины | |
NO310028B1 (no) | Cyklosporiner, deres anvendelse og fremstilling samt en biologisk ren kilde | |
RO110144B1 (ro) | Noi ciclosporine, procedeu de sinteză a acestora și metodă de tratament și prevenire a SIDA | |
RU2272643C2 (ru) | Высокоактивный кристаллический препарат циклоспорина а и способ его получения | |
JPH0338280B2 (sk) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MK4A | Patent expired |
Expiry date: 20111030 |