SK18412002A3

SK18412002A3 - Použitie substituovaných triazolopyrimidínových derivátov a farmaceutický prostriedok s ich obsahom

Info

Publication number: SK18412002A3
Application number: SK1841-2002A
Authority: SK
Inventors: Mark R. Schmitt; Donald R. Kirsch; Jane E. Harris; Carl F. Beyer; Klaus-Juergen Pees; Paul Carter; Waldemar Pfrengle; Guido Albert
Original assignee: Wyeth
Priority date: 2000-06-30
Filing date: 2001-06-28
Publication date: 2003-06-03
Also published as: PL360027A1; NO20026195L; ZA200300793B; BG107277A; CA2413802A1; CN1592624A; CZ20024150A3; WO2002002563A3; GEP20053688B; AU7306201A; HK1052646A1; IL152869A0; HUP0300798A2; WO2002002563A2; BR0112038A; IN2003KO00001A; NO20026195D0; EA200300091A1; KR20030013475A; AR034553A1

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka použitia substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo inhibiciu rastu rakovinových nádorových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú. Vynález sa ďalej týka použitia substituovaných triazolopyrimidinových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo prevenciu viacnásobnej odolnosti voči liekom (multiple drug resistance, MDR) cicavcov, ktorí takú liečbu alebo prevenciu potrebujú. Podrobnejšie, vynález sa týka použitia substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo inhibiciu rastu nádorových rakovinových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov, interakciou s tubulínom a mikrotubulami a podporou mikrotubulovej polymerizácie.

Doterajší stav techniky

Väčšina v súčasnosti používaných cytostatík inhibuje tvorbu esenciálnych prekurzorov biosyntézy DNA alebo blokuje DNA polymerázy, alebo ruší funkciu templátu DNA, nakoľko DNA bola primárnym cieľom vyvíjaných terapeutických liečiv pre chemoterapiu. Žiaľ, uvedená inhibícia tvorby esenciálnych prekurzorov biosyntézy DNA alebo blokovanie DNA polymeráz, alebo interferencia s funkciou templátu DNA ovplyvňujú aj normálne tkanivá.

Mikrotubuly sú spolu s inými bunkovými štruktúrami potrebné na rast buniek.

Tubulin je biochemický cieľ viacerých protirakovinových liečiv, ktoré zahŕňajú vinea alkaloidy vineristín a vinblastin. Interakcia vineristínu a vinblastínu väzbou k alfa a beta-tubulinovýcm subjednotkám interferuje s rastom a skracovaním mikrotubúl a bráni tvorbe mikrotubúl potrebných pre funkcie buniek. Tieto zlúčeniny sú síce v

-2rakovinovej terapii účinné, majú ale destabilizujúci účinok na mikrotubuly, čo ovplyvňuje tiež proliferáciu normálnych tkanív a vedie k prejavom toxickosti.

Paclitaxel a jeho polosyntetický derivát docetaxel (Taxotere®) tiež interferujú s tvorbou mikrotubúl a stabilizujú mikrotubuly. Paclitaxel (Taxol®) je diterpén izolovaný z kôry západného (pacifického) tisu, Taxus brevifolia, a je predstaviteľom novej skupiny terapeutických látok s taxánovým kruhovým systémom. U ďalších členov skupiny Taxacae, vrátane kanadského tisu (Taxus Canadiensis), nájdeného v Gaspesii, východná Kanada, a tisu Taxus baccata, nájdeného v Európe sa ďalej zistilo, že ich ihličie obsahuje paclitaxel a jeho analógy a preto poskytujú obnoviteľný zdroj paclitaxelu a jeho derivátov. Surový extrakt sa prvý raz skúšal v šesťdesiatych rokoch a jeho aktívny základ sa izoloval v roku 1971; chemickú štruktúru určil (M. C. Wani a ďalší, J. Am. Chem. Soc, 93, 2325 (1971)). Ďalšími skúškami sa ďalej preukázala širokospektrálna účinnosť paclitaxelu na melanómové bunky, leukémiu, rôzne karcinómy, sarkómy a nie-Hodgkinovské lymfómy, ako aj na celý rad tuhých nádorov živočíchov. Paclitaxel a jeho analógy sa vyrábajú čiastkovou syntézou z 10-deacetylbakatínu III, prekurzora získaného z ihličiek a čečiny tisu, alebo celkom synteticky (Holton a ďalší, J. Am. Chem. Soc. 116, 1597 až 1601 (1994) a Nicolaou a ďalší, Náture 367, 630 až 634 (1994)). Ukázalo sa, že paclitaxel má antineoplastický účinok. Neskoršie sa ukázalo, že protinádorový účinok paclitaxelu je dôsledkom podpory mikrotubulovej polymerizácie (Kumar N., J. Biol. Chem. 256, 10435 až 10441 (1981); Rowinsky a ďalší, J. Natl. Cancer Inst. 82, 1247 až 1259 (1990); a Schiff a ďalší, Náture 277. 665 až 667 (1979)). Účinok paclitaxelu na viaceré ľudské nádory sa teraz preukázal aj klinickými skúškami (McGuire a ďalší, Ann. Int. Med., 111, 273 až 279 (1989); Holmes a ďalší, J. Natl. Cancer Inst. 83, 1797 až 1805 (1991); Kohn a ďalší, J. Natl. Cancer Inst. 86, 18 až 24 (1994); a A. Bicker a ďalší, Anti-Cancer Drugs, 4, 141 až 148 (1993)).

Paclitaxel je mikrotubulový blokátor, inhibujúci mitózy interakciou s mikrotubulami. Paclitaxel nechráni zoskupovanie tubulínu, ale skôr urýchľuje polymerizáciu tubulínu a stabilizuje zoskupené mikrotubuly. Paclitaxel účinkuje osobitou cestou, ktorá zahŕňa väzbu k mikrotubulám, čím chráni pred ich depolymerizáciou v podmienkach, v ktorých depolymerizácia zvyčajne nastáva

-3(zriedenie, vápnik, chlad a liečivá rozrušujúce mikrotubuly). Paclitaxel blokuje bunkový cyklus v profáze, čím nastáva akumulácia buniek v G2+M fáze.

Vo farmaceutickom oblasti jestvuje stála potreba cytotoxických látok na použitie v terapii rakoviny. Najmä potreba liečiv, ktoré inhibujú alebo liečivo pôsobia na rast nádorov, ktoré majú účinok podobný ako paclitaxel a interferujú v procese tvorby mikrotubúl. V uvedenom odbore sú potrebné tiež látky, ktoré urýchľujú tubulínovú polymerizáciu a stabilizujú zoskupené mikrotubuly.

Podľa uvedeného bude výhodné, ak sa poskytne spôsob liečby alebo inhibície množenia buniek, neoplastického rastu a rastu malignantných nádorov u cicavcov podávaním zlúčenín, ktoré majú protirakovinový účinok podobný paclitaxelu.

Ďalej bude výhodné, ak sa poskytne spôsob liečby alebo inhibície viacnásobnej liekovej rezistencie (MDR).

Substituované triazolopyrimidínové zlúčeniny podľa tohto vynálezu sú v odbore známe a našli použitie v poľnohospodárstve ako fungicídy. Príprava zlúčenín podľa tohto vynálezu a spôsoby prípravy sa opisujú v nasledujúcich US patentoch: 5 756 509; 5 948 783; 5 981 534; 5 612 345; 5 994 360; 6 020 338; 5 985 883; 5 854 252; 5 808 066; 5 817 663; 5 955 252; 5 965 561; 5 986 135; a 5 750 766.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa pripravia aj spôsobmi, opísanými v nasledujúcich patentových spisoch: WO 98/46 607; WO 98/46 608; WO 99/48 893; WO 99/41 255; EPO 834 513 A2; EPO 782 997 A2; EPO 550 113 B1; FR 2 784 381 A1; EPO 989 130 A1; WO 98/41 496; WO 94/20 501; EPO 945 453 A1; 5 453 A1; EPO 562 615 A1; a EPO 562 615 B1.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je použitie substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo inhibíciu rastu rakovinových nádorových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov.

-4Ďalej vynález poskytuje použitie substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo inhibíciu rastu nádorových rakovinových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú, interakciou s tubulínom a mikrotubulami podporou polymerizácie mikrotubúl.

Po tretie vynález poskytuje použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu lieku na liečenie alebo irihibíciu rastu nádorových rakovinových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov

v ktorom

R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6,10 alebo 14 atómami uhlíka, skupinu -CN, hydroxy, halogén, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, tiofénovú skupinu, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8

-5atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná tricykloalkylová skupina, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, alebo 3- až 6- členný heterocyklický kruh, voliteľne orfo-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R'je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R'je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylová skupina, -S-alkenylová skupina, -SO₂arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO2-cykloalkylová skupina, -SO2-alkylová skupina, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová

- 6 skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka alebo 3- až 6-členný heterocyklický kruh, voliteľne orto-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^aR^b spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou skupinou alebo cykloalkylovou skupinou;

R² je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, hydroxy, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, karbamoyl, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupina karboxy, alkoxykarbonylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, benzyloxy, tienyl, heterocyklyl alebo halogén;

R³ je vodík, halogén, alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, -NR^cR^d, benzyloxy, aralkyloxy, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, aryl, hydroxy, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupina -N₃;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež

- 7 nahradená skupinou -Ο-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH2môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH2- môže byť voliteľne nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', v ktorej R'je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka;

R⁴ je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, halogén, kyano, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, halogén, karbamoyl, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, alebo skupina -CF3;

za predpokladu:

a) keď R¹ je dietylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl, 3,4-dichlórfenyl, 4-chlórfenyl, 3-chlór-4-metoxyfenyl;

b) keď R¹ je dietylamino, R³ je bróm, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl;

c) keď R¹ je izopropylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-benzyloxyfenyl alebo 3,4,5-trimetoxyfenyl;

d) keď R¹ je cyklopentylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 3,4,5trimetoxyfenyl, 2-naftyl alebo 2-stilbén;

e) keď R¹ je 2-aminobicyklo(2.2.1)heptyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 3,4,5- trimetoxyfenyl;

f) keď R¹ je dietylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl;

g) keď R¹ je 1,1,1-trifluóretoxy, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-chlór-6fluórfenyl;

h) keď R¹ je -SO₂-etyl alebo -SO₂-cyklopentyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-chlór-6-fluórfenyl;

i) keď R⁴ je vodík, R² je 2-chlór-6-fluórfenyl, potom R¹ a R³ nie sú 1,2,4-triazol;

j) keď R¹ je cyklohexyl, R⁴ je vodík, R² je 2,4,6-trifluórfenyl a potom R³ nie je -OCH₂O₂C(CH₃)₃;

k) keď R¹ je 2-tienyl, R⁴ je etyl, R³ je vodík a potom R² nie je 2-m-etoxyfenyl, 4metoxyfenyl a 4-trifluórfenyl;

l) keď R² je fenyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R¹ nie je (2E)-7-dimetyl-2,6oktadienyl.

Po štvrté vynález poskytuje použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu lieku na liečenie alebo inhibíciu rastu rakovinových nádorových buniek a ochorení cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú, interakciou s tubulínom a mikrotubulami podporou polymerizácie mikrotubúl

v ktorom

R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až

-912 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupinu -CN, hydroxy, halogén, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, tiofén, voliteľne substituovaný cykloalkenyl s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorom jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -Sarylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, -S-alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupina -NR^aR^b;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná tricykloalkylová skupina, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka s 3 až 8 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, alebo 3- až 6- členný

- 10heterocyklický kruh, voliteľne orto-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylová skupina, -S-alkenylová skupina, -SO₂arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylová skupina, -SO₂-alkylová skupina, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka alebo 3- až 6-členný heterocyklický kruh, voliteľne orto-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^aR^b spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou alebo cykloalkylovou skupinou;

R² je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina arnino, hydroxy, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, karbamoyl, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, karboxylová

-11 skupina, alkoxykarbonylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, benzyloxy, tienyl, heterocyklyl alebo halogén;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10

- 12 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH2- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR’, v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka;

R⁴ je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, halogén, kyano, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, halogén, karbamoyl, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, alebo skupina -CF₃;

za predpokladu:

h) keď R¹ je -S02-etyl alebo -SO₂-cyklopentyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-chlór-6-fluórfenyl;

k) keď R¹ je 2-tienyl, R⁴ je etyl, R³ je vodík a potom R² nie je 2-metoxyfenyl, 4metoxyfenyl a 4-trifluórfenyl;

Po piate tento vynález poskytuje použitie substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo prevenciu viacnásobnej rezistencie voči liečivám (MDR) u cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú. Bližšie, uvedená viacnásobná rezistencia voči liečivám (MDR) je sprostredkovaná p-glykoproteínom alebo MXR.

Po šieste tento vynález poskytuje použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu lieku na liečenie alebo prevenciu viacnásobnej rezistencie voči liečivám (MDR) u cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú

R

(I) v ktorom

R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupinu -CN, hydroxy, halogén, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklylovú skupinu, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R* je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, tiofén, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR', kde R’ je H alebo alkylová

- 14 skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná tricykloalkylová skupina, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, alebo 3- až 6- členný heterocyklický kruh, voliteľne orŕo-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R'je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so

- 156, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylová skupina, -S-alkenylová skupina, -SO₂arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylová skupina, -SO₂-alkylová skupina, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, alebo 3- až 6-členný heterocyklický kruh, voliteľne orto-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^aR^b spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou alebo cykloalkylovou skupinou;

R² je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, hydroxy, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, karbamoyl, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupina karboxy, alkoxykarbonylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, benzyloxy, tienyl, heterocyklyl alebo halogén;

R³ je vodík, halogén, alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, aryloxy, -NR^cR^d, benzyloxy, aralyloxy, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, aryl, hydroxy, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupina -N₃;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná

- 16cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR' kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka;

za predpokladu:

Medzi výhodné skupiny zlúčenín všeobecného vzorca I vrátane ich farmaceutický prípustných solí, užitočné v spôsoboch podľa tohto vynálezu patria zlúčeniny v dole uvedených podskupinách, pričom ostatné premenné všeobecného vzorca I v podskupinách sú určené ako hore:

a) R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne

- 18substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b;

b) R^a a R^b každé nezávisle znamenajú skupinu -C*H(R^e)(R^f), kde R^e a R^f vzájomne nezávisle od seba znamenajú voliteľne halogénsubstituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, pričom C* znamená (R) alebo (S) izomér;

c) R² je voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupina aryloxy, tienyl, benzyloxy, heterocyklyl alebo halogén;

d) R³ je halogén, alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, skupina -NR^cR^d, benzyloxy, aralkyloxy, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina hydroxy, kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupina -N3;

e) R⁴ je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -CF₃.

Medzi ďalšie výhodné skupiny zlúčenín všeobecného vzorca I podľa tohto vynálezu, vrátane ich farmaceutický prípustných solí, užitočné v spôsoboch podľa tohto vynálezu patria zlúčeniny v dole uvedených podskupinách, pričom ostatné premenné vzorca I v podskupinách sú určené ako hore:

a) R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR’, kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SCValkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, kde R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané;

b) R² je voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka alebo heterocyklylová skupina;

c) R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupina -N₃;

d) R⁴ je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -CF₃.

Medzi výhodnejšie skupiny zlúčenín všeobecného vzorca I, vrátane ich farmaceutický prípustných solí, užitočné v spôsoboch podľa tohto vynálezu patria zlúčeniny v dole uvedených podskupinách vrátane ich farmaceutický prípustných solí, pričom ostatné premenné vzorca I v podskupinách sú určené ako hore:

a) R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť nahradená skupinou -O-, -Salebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka,

-20voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -Salkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, -SO₂alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, kde R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané;

b) R² je voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka;

c) R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano, alebo skupina -N3;

d) R⁴ je vodík.

Medzi najvýhodnejšie skupiny zlúčenín všeobecného vzorca I, vrátane ich farmaceutický prípustných solí, užitočné v spôsoboch podľa tohto vynálezu patria zlúčeniny v dole uvedených podskupinách vrátane ich farmaceutický prípustných solí, pričom ostatné premenné vzorca I v podskupinách sú určené ako hore:

a) R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R'je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO2-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, kde R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané; R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina;

R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, alebo -N3;

R⁴ je vodík;

b) R¹ je skupina -NR^aR^b vktorej R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané;

R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina;

R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano alebo -N3;

R⁴ je vodík;

c) R¹ je skupina -NR^aR^b, v ktorej R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané;

R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina;

R³ je halogén, skupina alkoxy, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano alebo -N₃; R⁴ je vodík;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R’ je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka s 3 až 8 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo

-22 alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka;

R^aR^b sú viazané spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný a znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou alebo cykloalkylovou skupinou;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkadiénylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkadiénylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne

-23substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR' kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu aj s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R'je vodík alebo alkylová skupina s 2 až 20 atómami uhlíka;

d) je skupina -NR^aR^b, v ktorej R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané;

R² je vybrané z

och₃

X%^^0CH3

R³ je halogén, skupina alkoxy, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano alebo skupina -N₃;

R⁴je vodík;

e) R¹ je skupina -NR^aR^b, v ktorej R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané, pričom R¹ je vybrané zo skupiny:

-N(C₂H₅)₂

-N

'ίλλλλ

*wxrv>

njxru

η₃ “N^/CFs ^cf₃ ~^N\^XF₃

<vw

XX

F₃u n---í

H

-32R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina;

R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, skupina halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano alebo skupina -N₃;

R⁴ je vodík;

f) R¹ je skupina -NR^aR^b, v ktorej R^aR^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému sú viazané, pričom R¹ je vybrané zo skupiny:

ch₃

ch₂

ci

ch₃

H

,---NH-----(CH₂)₅CH₃

N· H

|/CF₃

Γ^ι

M

R²je voliteľne substituovaná tienylová skupina;

R⁴ je vodík.

-37Medzi najvýhodnejšie zlúčeniny všeobecného vzorca I na použitie podľa vynálezu patria ďalej uvedené zlúčeniny alebo ich farmaceutický prípustné soli: 7-(1 -azepanyl)-5-chlór-6-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid í n;

5-chlór-6-(2,6-d ifluórfeny I )-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(1 -piperid i nyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(1 -azepanyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; metyl-[[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl](metyl)aminojacetát;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-(1,1,3,3-tetrametylbutyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

7-(1-azepanyl)-5-chlór-6-(4-metoxyfenyl)[1_I2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-( 1 -azepanyl)-6-(4-brómfenyl)-5-chlór[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-7-( 1 -piperidinyl )-6-[2-(trifluórmetyl)fenyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

6- (4-terc-butylfenyl)-5-chlór-7-(4-metyl-1 -pi perid i nyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a] py rimid ín; 5-chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(3-metyl-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[1, 5-a] pyrimid í n;

6- (4-brómfenyl)-5-chlór-7-(3-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; 5-chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; 5-chlór-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-(2-metyl-1 -pyrolid inyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyri mid í n; 5-chlór-6-(2-chlórfenyl)-7-(2-metyl-1 -pyrolidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7- (1-azepanyl)-5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1_I5-a]pyrimidín; 5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(2-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

6- (4-ŕerc-butylfenyl)-5-chlór-7-(2-metyl-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(2-metyl-1 -piperid inyl )-6-[3-(trif I uórmetyl )feny I] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

dietylester kyseliny 2-[6-(2,6-difluórfenyl)-5-etoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidίη-7-yl]malónovej;

7-(azepanyl)-5-chlór-6-{2-chlór-6-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/\/-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-[(2,2-dichlórcyklopropyl)metyl]-/\/-metyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

-[5-ch lór-6-(2-ch lór-6-fluórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid í n-7-yl]-3-piperid i nol; /V-bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2,5-difluórfenyl)-/V-dodecyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-7-(4-metyl-1 -pi perid inyl )-6-(2,3,6-trifl uórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid in; /V-[5-chlór-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-A/-izopropylamín;

5-chlór-/V-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

/V-alyl-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/\/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín; 5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-A/-cykloheptyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(3,3-dimetyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-N-(3-chlórpropyl)-A/-metyl-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-ajpyrimidín7-amín;

7-(1 -azokanyl)-5-chlór-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyri mid í n;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl )-7-(3,6-dihydro-l (2H)-py rid i n yl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(1 -azokanyl)-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid í n;

5-metoxy-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperid iny I )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]metanol;

-[5-ch lór-6-(2,6-d ifluórfe nyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrim id ín-7-yl]-4-pí peridinol;

5-chlór-7-(4-chlór-1 -piperidinyl )-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid in;

5-chlór-7-(4-tiomorfolinyl )-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)-7-(2,4-dimetyl-1-píperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(4-metyl-1 -piperidinyl )-5-amino-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl )-7-(2,5-dihydro-1 H-pyrol-1 -yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2,5-dimetyl-2,5-dihydro-1 H-pyrol-1 -yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-etyl-1 H-imidazol-1 -y I )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(4-bróm-1 -piperidinyl )-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(2-metylfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

6- (2-brómfenyl)-A/-(sek-butyl)-5-chlór[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-A/-etyl-6-(4-metoxyfenyl)-/V-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(4-chlór-1 -pi pe rid inyl )-6-[2-(trifl uórmetyl )feny I] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[4-(trifluórmetyl)-1-piperidinyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7- (4-bróm-1-piperidinyl )-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(4-bróm-1 -piperidinyl )-5-chlór-6-(2-ch lórfenyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-A/-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-/\/-izopropyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1₎2,4]triazolo[1₎5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-7-(4-tiomorfolinyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(1-azepanyl)-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-ch lór-6-(2-ch lór-6-fl uórfeny I )-7-[2-( 1 -pyrolid inyl)-1 -cyklopentén-1 -yl] [ 1,2,4]triazolo- [1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(4-izopropyl-1 -piperidinyl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid ín;

5-chlór-7-(2,4-dimetyl-1 -piperidinyl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid í n;

5-chlór-7-[etyl(2-metyl-2-propenyl)amino]-6-{4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(1 -azepanyl)-5-chlór-6-{4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid í n;

A/-bicyklo[2.2.1 ]hept-2-yl-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-amín;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)-/V-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlórfenyl)-A/-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórbenzyl)-7-tetrahydro-2-furanyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(alylsulfanyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-A/-etyl-6-mezityl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-A/-etyl-6-(2-metoxyfenyl)-/V-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-hexyl[1,2,4]triazolo[1₁5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

A/-(sek-butyl)-5-chlór-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazo!o[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl]-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-( 1 -azepanyl )-5-ch lór-6-[2,6-d ich lór-4-(trifluórmetyl )fenyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(2,2,2-trifluóretyl)sulfanyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(4,4-dimetyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-A/-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(3,5-difluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(izopropylsulfanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-tetrahydro-2-furanyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

4- [5-chlór-7-(4-metyl-1 -piperid inyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrim id ín-6-yl]an il in;

/V-{4-[5-chlór-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl]fenyl}acetamid;

[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]metylacetát;

5- chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(chlórmetyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; dietyl-2-[6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-yl]malonát;

7-(1-azepanylmetyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

A/-alyl-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-hexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

5-chlór-7-(4-metyl-1 -piperid i nyl )-6-[4-(trifl uórmetoxy)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-ajpyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-(cyklopropylmetyl)-A/-propyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-7-(2-metyl-1 -piperidinyl)-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid í n;

5-chlór-6-{2-chlór-4-nitrofenyl}-7-(4-metyl-1 -piperid í nyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(4-chlór-2,3,5,6-tetrafluórfenyl)-A/-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

4- [5-chlór-2-metyl-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl]-A/,/Vdimetylanilín;

6- (2-chIór-6-fluórfenyl)-5-metyl-7-(4-metyl-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(2-ch lór-6-fl uórfenyl )-7-[2-( 1 -pyrol id i nyl )-1 -cyklohexén-1 -yl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(metoxymetyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-{2-chlór-4-nitrofenyl}-7-[etyl(2-metyl-2-propenyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-bróm-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(izopropylsulfanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/V-cyklopentyl-6-(4-etoxy-2,3,5,6-tetrafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5- chlór-A/-metyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

4- bróm-1 -[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid i η-7-yl] butylacetát;

dietyl-2-alyl-2-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]oxyjmalonát;

6- (2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-etyl-5-metyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

A/-butyl-5-chlór-A/-etyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

6- (2-chlór-6-fluórfenyl)-5-(difluórmetoxy)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5- chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(4-chlórfenyl)sulfanyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(2-metoxyfenyl)sulfanyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-ajpyrimidín-

7- amín;

5-chlór-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2,4,6-tnfiuórfenyl)-A/-( 1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-6-(4-fluórfenyl)-/V-( 1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5,7-bis(4-metyl-1 -piperidinyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-metylfenyl)-/V-(1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5- chlór-6-(2,4,5-trifluórfenyl)-/V-( 1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

6- (2-brómfenyl)-5-chlór-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín-7amín;

5-chlór-/V-izobutyl-/V-(2,2,2-trifluóretyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín;

5-chlór-/V-izobutyl-6-(2-metylfenyl)-/\/-(2_l2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-ajpyrimidín-

7- amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-/\/-(2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)-/V-(2,2₎2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-

7-amín;

5-chlór-/V-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl )-6-(2,4,6-trifluórfeny I )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín-7-amín;

/V-alyl-5-chlór-A/-izobutyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín; 5-chlór-/V-( 1,2-dimetylpropyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-/V-izopropyl-A/-metyl-6-(2A6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-/\/-izopropyl-A/-(2,2,2-trifluóretyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amin;

7-butyl-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-A/-(1 -fenyletyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlórfenyl)-/V-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-/V-etyl-A/-izobutyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-hexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-metylfenyl)-/V,A/-bis(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7amín;

5-chlór-A/-cyklopentyl-A/-metyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

7-butyl-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

-44 5-chlór-/V-(1,2-dimetylpropyl)-A/-metyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-metylpropanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/\/-(1,2-d imetylpropyl )-/V-metyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín;

5-chlór-6-(2-bróm-5-chlórfenyl)-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(3,3,3-trifluórpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; 5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(3-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; [5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-(1 -p-tolyl-etyl)amín;

5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-cyklohexyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(4,4-drfluór-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín;

7-(bicyklo[2.2.1]hept-2-ylamino)-5-chlór-6-{2-fluór-4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-{2-fluór-4-nitrofenyl}-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; 5-(metylsulfanyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

[5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl](2,2,2-trifluór-1-fenyletyl)amín;

5-chlór-/V-[1-(trifluórmetyl)propyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-amín;

5- bróm-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

6- (2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-amín; [5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-(2-metyl-1 -trifluórmetylpropyl)amín;

5-chlór-7-(3-cyklohexén-1-yl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(1 -cyklohexén-1 -yl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

-455-ch lór-/V-[( 1 R)-2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl]-6-(2,4,6-trifluórfeny I )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5- ch ló r-/\/-[( 1 ŕ?)-2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

6- (2,4-difluórfenyl)-5-chlór-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-

7- amín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1 -pi peridinyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-/\/-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-7-cyklohexyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-/V-[(1S)-2,2,2-trifluór-1-metyletyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

7-cyklohexyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-7-(4-fluórcyklohexyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-dichlór-4-fluórfenyl)-7-(3,3,3-trifluórpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

A/-(se/í-butyl)-5-chlór-6-(2,6-dichlór-4-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

4- {5-ch ló r-7-[(2,2,2-trif luór-1 -metyletyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a] py rimid í n-6-yl}-3,6difluórfenol;

5- chlór-7-(3-cyklohexén-1-yl)-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-/V-cyklopentyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(3_I6-dihydro-1(2H)pyridinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(1 -azepanyl)-5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amin;

-465-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-A/-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-fluórcyklohexyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

kyselina 6-(4-{5-chlór-7-[(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl}-3,5-difluórfenoxy)hexánová;

2,6-d ifl u ór-4-[(2-fl uóretoxy)f enyl]-A/-(2,2,2-trif i uór-1 -metyletyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-/V-izopropyl-6-{2-[(trifluórmetyl)sulfanyl]fenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-A/-[4-(trifluórmetyl)fenyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-A/-(4,4,4-trifluór-2-metylbutyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(3-metyl-3-butenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-izobutyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-cyklopentyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-tienyl)-/V-[(1ŕ?)-2,2,2-trifluór-1-metyletyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

4- [5-ch lór-7-(2,2,2-trifluór-1 -metyl-etylamino)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl]-3,5difluór-fenol;

{5-chlór-6-[2,6-difluór-4-(2,2,2-trifluór-etoxy)-fenyl]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7yl}-(2₎2,2-trifluór-1 -metyl-etyl)amín;

5- chlór-6-{2,6-difluór-4-(metoxyfenyl)-/\/-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo- [1,5-a]pyrimidín-7-amín;

(5-chlór-6-{4-[2-(2-etoxyetoxy)-etoxy]-2,6-difluórfenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-yl)-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amín;

(5-chlór-6-{2,6-difluór-4-[2-(2-metoxy-etoxy)etoxy]-fenyl}-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl)-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amín;

5-chlór-6-[2,6-difluór-4-(3-furán-3-ylmetoxy)fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)amín;

-475-chlór-6-(2,5-difluór-4-metoxyŤenyl)-/\/-( 1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

7-cyklohexyl-6-[2,6-difluór-4-(2-metoxyetoxy)fenyl]-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-fluór-4-metoxy-6-chlórfenyl)-A/-(2_l2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-[2,6-difluór-4-(2-fluóretoxy)fenyl]-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

2-[2-(4-{5-chlór-7-[(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6yl}-3,5-difluórfenoxy)etoxy]etanol;

5-chlór-6-(2,3-difluór-4-metoxyfenyl)-/V-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-{4-(2-fluóretoxy)-2,6-difluórfenyl}-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-A/-(4-chlórbenzyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

5-chlór-6-(2-ch lór-6-fluórfeny I )-7-[4-(2-py rid inyl-1 -piperazi nyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-( 1 -etylpentyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amin;

5-ch lór-6-(2-ch lór-6-fluórfenyl )-7-[4-(2-ch lórfenyl)-1 -pi perazinyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[4-(4-metoxyfenyl)-3-metyl-1-piperazinyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/V-cyklopentyl-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín; 5-chlór-7-fenoxy-6-(4-metoxy-fenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-A/-cyklopentyl-6-(4-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5,7-difenoxy-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/V-cyklopentyl-6-(2-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín; 5-chlór-A/,/V-dietyl-6-[4-metoxyfenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-/V,A/-dietyl-6-[2,4-dichlórfenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amin; N-bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-5-chlór-6-(2,4-dichlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín;

-485-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]dec-8-yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-kyano-7-(4-metyl-1 -pi pe rid i nyl )-6-(2-ch lór-5-f I uórfeny I)(1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-(metylsulfanyl)-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-(metylsulfanyl)-7-(4-metyl-1-pipendinyl)-6-(2-chlór-5-(metylsulfanyl)fenyl)[1₎2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid in;

5-chlór-7-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-yl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/V-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-(4-(metylsulfanyl)fenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

2-metyl-6,7-di-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

2-metyl-6-fenyl-7-(4-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín;

2-trifluórmetyl-6-fenyl-7-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5,7-difenoxy-6-(2-metylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-/V-(izopropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pynmidín-7-amín;

5-bróm-6-(4-brómfenyl)-7-dimetylamino[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-bróm-6-(4-trifluórmetylfenyl)-7-dimetylamino[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-7-dimetylamino[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-6-(4-trifluórmetylfenyl)-A/-(etyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

7-(1 -azepanyl)-5-chlór-6-(4-terc-butylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; etyl-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]amino}acetát;

dietyl-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-malonát;

5-chlór-6-(2,5-difluórfenyl)-A/-(3-metyl-2-butenyl)[1,2_l4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amin;

metylester kyseliny [5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7yl]-octovej;

5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl )-7-(2-etyl-1 /-/-imidazol-1 -yl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

5-chlór-/V,/V-dietyl-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

etylester kyseliny [6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-yl]-octovej;

-495-chlór-/V-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl)-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

dimetylester kyseliny 2-[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-yl]malónovej;

dietylester kyseliny 2-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-yl]oxy}-2-izobutylmalónovej;

2-[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid i n-7-yl]-1,3-cyklohexándión;

2-[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]cyklohexanón;

5-chlór-7-(3-nitro-4-metylanilíno)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-cyklohexyl-6-[2,6-difluór-4-(2-metoxyetoxy)fenyl]-5-(2-metoxyetoxy)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(3-brómfenyl)-2-etyl-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(3-brómfenyl)-6-(3-chlórfenyl)-2-etyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

7-(4-brómfenyl)-2-etyl-6-[4-(trifluórmetyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-(3,4,5-trimetoxybenzyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín;

7-(2-benzyl-4,5-dihydro-1 H-’ι mid azol-1 -yl )-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

/V-4-[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl-/V,/V-1-dietyl1,4-pentándiamín;

5-chlór-A/-(3-metyl-2-butenyl)-6-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

5-dimetylamino-6-fenyl-A/-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5- chlór-7-[(2-furylmetyl)sulfanyl]-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin;

6- [1, ľ-bifenyl]-4-yl-5-chlór-A/-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

6-[4-(benzyloxy)fenyl]-5-chlór-/V-izopropyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-A/-[(2,2-dichlórcyklopropyl)metyl]-6-(3,4,5-trimetoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]-pyrimidín-7-amín;

A/-cyklopentyl-6-(2-fluórfenyl)-5-hydrazíno[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5- chlór-/V-etyl-6-(2-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

6- (4-terc-butylfenyl)-5-chlór-/V-izopiOpyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-chlór-6-[2,6-difluór-4-[(3-metyl-2-butenyl)oxy]fenyl]-N-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín;

5-chlór-6-[2,6-difluór-4-(1 -propenyloxy)fenyl]-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)- [1.2.4] triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-ch lór-A/-(3-tricy klo[2.2.1.0^2,6] hept-1 -yl )-6-(2,4,6-trifl uórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín;

5-azido-7-cyklohexyl-6-(2-fluór-6-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín; 5-azid o-6-[2-ch lór-6-f I u órfenyl]-7-(4-metyl-1 -piperid i nyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

2,5-d ich lór-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )-6-[2-ch lór-6-fluórfenyl] [1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín.

Je zrejmé, že v určení zlúčenín všeobecného vzorca I, keď R¹, R², R³, R⁴, R^a, R^b, R^c, R^d alebo R' obsahujú asymetrické uhlíky sú zahrnuté aj všetky možné stereoizoméry a ich zmesi, ktoré sú účinné spôsobom opísaným v ďalšom texte. Podrobnejšie, určenie zahŕňa racemické modifikácie a akékoľvek optické izoméry, izoméry (R) a (S), ktoré sú účinné ďalej opisovaným spôsobom. Optické izoméry možno pripraviť v čistej forme bežnými deliacimi spôsobmi alebo enantiomérne špecifickými syntézami. Je zrejmé, že tento vynález zahŕňa všetky kryštalické formy zlúčenín vzorca I. Farmaceutický prípustné soli zásaditých zlúčenín z tohto vynálezu sú tie soli, ktoré sú odvodené od organických a anorganických kyselín ako sú: kyselina mliečna, kyselina citrónová, kyselina octová, kyselina vínna, kyselina fumárová, kyselina jantárová, kyselina maleínová, kyselina malónová, kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná, kyselina dusičná, kyselina sírová, kyselina metánsulfónová a podobné známe vhodné kyseliny. Keď R¹, R², R³, R⁴, R^a, R^b, R^c, R^d alebo R' obsahuje karboxylovú skupinu, potom soli zlúčenín z tohto vynálezu možno vytvárať aj so zásadami ako sú alkalické kovy (Na, K, Li) alebo kovy alkalických zemín (Ca alebo Mg).

Pokiaľ sa jednotlivo neuvádza inak, hore uvádzané označenia zlúčenín a odkazy na ne majú nasledujúce významy.

Výraz halogénový atóm alebo halogén znamená atóm brómu, jódu, chlóru alebo fluóru a je to najmä atóm brómu, chlóru alebo fluóru.

- 51 Výrazy alkyl, alkenyl, alkinyl, alkadienyl alebo alkylová skupina, alkenylová skupina, alkinylová skupina a alkadienylová skupina sa tu používajú na označenie radikálu alebo skupiny, ktoré majú nerozvetvený alebo rozvetvený reťazec. Také radikály alebo skupiny majú spravidla do 12, najmä do 6 atómov uhlíka. Alkylové skupiny majú vhodne 1 až 6 atómov uhlíka, výhodne od 1 do 3 atómov uhlíka. Výhodnou alkylovou skupinou je etylová skupina alebo ešte výhodnejšie metylová skupina. Alkenylová skupina má vhodne od 2 do 12 atómov uhlíka. Výhodná alkenylová skupina má od 2 do 6 atómov uhlíka. Najvýhodnejšia je alylová skupina alebo ešte výhodnejšie 2-metylalylová skupina. Ktorákoľvek alkylová, alkenylová, alkinylová alebo alkadienylová skupina môže byť voliteľne substituovaná jedným alebo viacerými substituentami, ktoré zahŕňajú napríklad atómy halogénov, skupiny nitro, kyano, tiokyanato, kyanato, hydroxyl, alkyl, halogénalkyl, alkoxy, halogénalkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, formyl, aryl, alkoxykarbonyl, karboxyl, alkanoyl, alkyltio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, karbamoyl, alkylamido, fenyl, fenoxy, benzyl, benzyloxy, heterocyklyl najmä furyl, a cykloalkyl najmä cyklopropyl. Typicky môžu byť prítomné 0 až 3 substituenty.

Výraz cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkylová skupina alebo cykloalkenylová skupina sa tu používa na označenie cykloalkylových radikálov alebo skupín s 3 až 8 atómami uhlíka, výhodne s 3 až 6 atómami uhlíka; výhodné sú najmä cyklopentyl, cyklohexyl alebo cyklohexenyl, ktoré sú voliteľne substituované jedným alebo viacerými substituentami; uvedené substituenty zahŕňajú napríklad atómy halogénov, skupiny nitro, kyano, tiokyanato, kyanato, hydroxyl, alkyl, halogénalkyl, alkoxy, halogénalkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, formyl, alkoxykarbonyl, karboxyl, alkanoyl, alkyltio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, karbamoyl, alkylamido, fenyl, fenoxy, benzyl, benzyloxy, heterocyklyl najmä furyl, a cykloalkyl najmä cyklopropyl. Typicky môžu byť prítomné 0 až 3 substituenty. Voliteľne môže byť skupina -CH₂cykloalkylového alebo cykloalkenylového radikálu alebo skupiny nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka.

Bicykloalkylová skupina môže obsahovať od 5 do 10 uhlíkových atómov.

Výraz aryl alebo arylová skupina sa tu používa na označenie arylového radikálu alebo skupiny so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, výhodne so 6 až 10

- 52 atómami uhlíka; podrobnejšie, uvedené výrazy sa používajú napríklad na označenie fenylovej alebo naftylovej skupiny, voliteľne substituovaných jedným alebo viacerými, vzájomne nezávisle vybranými substituentami, ktoré zahŕňajú atómy halogénov, skupiny nitro, kyano, alkenyl, tiokyanato, kyanato, hydroxyl, alkyl, halogénalkyl, alkoxy, alkenyloxy, halogénalkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, formyl, alkoxykarbonyl, karboxyl, alkyltio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, karbamoyl, alkylamido, fenyl, fenoxy, benzyl, benzyloxy, heterocyklyl a cykloalkyl. Typicky môže byť prítomých 0 až 5 substituentov.

Výraz aralkyl sa tu používa vo význame aryl-alkylovej skupiny, v ktorej uvedená arylová a alkylová skupina je určená hore. Príklady aralkylových skupín zahŕňajú benzylovú skupinu a fenyletylovú skupinu.

Výraz aralkyloxy sa tu používa na označenie skupiny aryl-alkyl-O-, v ktorej uvedené skupiny aryl a alkyl sú určené hore.

Výraz fenyl alebo fenylová skupina tu znamená šesťčlenný aromatický kruh.

Heterocyklyl alebo heterocyklylové skupiny môžu byť jednokruhové, dvojkruhové systémy alebo kondenzované alebo spiro-viazané, nasýtené alebo nenasýtené systémy, radikály alebo skupiny, ktoré majú 3 až 12 v kruhoch viazaných atómov, výhodne s 5 až 8 atómami v kruhoch, výhodnejšie s 5 alebo 6 atómami v kruhu, vybranými z atómov uhlíka, kyslíka, síry a dusíka; jeden alebo viac uvedených atómov, typicky jeden alebo dva sú kyslík, dusík alebo síra; uvedené heterocyklylové skupiny sú voliteľne substituované jedným alebo viacerými substituentami, ktoré zahŕňajú napríklad atómy halogénov, výhodne fluóru, skupiny nitro, kyano, tiokyanato, kyanato, hydroxyl, alkyl s 1 až 12 atómami uhlíka, výhodne s 1 až 6 atómami uhlíka, halogénalkyl, výhodne halogénalkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxy, alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, výhodne s 1 až 6 atómami uhlíka, halogénalkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, formyl, alkoxykarbonyl, karboxyl, alkanoyl, alkyltio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, karbamoyl, alkylamido, fenyl, fenoxy, benzyl, benzyloxy, heterocyklyl najmä furyl, a cykloalkyl najmä cyklopropyl. Typicky môžu byť prítomné 0 až 3 substituenty. Voliteľne substituované heterocyklylové skupiny zahŕňajú pyrolodinyl, pyrazolidinyl, piperidinyl, piperazinyl alebo morfolín-4yl, pyridinyl ,2,3-dehydropiperid-3-yl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuranyl alebo tetrahydrotienyl, A/-metyl-2,3-dehydropiperid-3-yl, pyrimidinyl, pyrolidinyl, furyl,

-53pyranyl, morfolinyl, tetrahydropyridinyl, tienyl, pyrolidinyl, piperidyl, dihydropiperidyl, dihydropyridinyl, tiazanyl, morfolinyl, tiazinyl, azepanyl, azokanyl a dioxa-aza-spirodecyl.

Keď niektorý z uvedených substituentov je označený ako voliteľne substituovaný, prítomnými substitujúcimi skupinami môže byť voliteľne niektorý alebo viaceré zo skupiny substituentov, ktorá zahŕňa napríklad atómy halogénov, skupiny nitro, kyano, tiokyanato, kyanato, hydroxyl, alkyl, halogénalkyl, alkoxy, halogénalkoxy, amino, alkylamino, dialkylamino, formyl, alkoxykarbonyl, karboxyl, alkanoyl, alkyltio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, karbamoyl, alkylamido, fenyl, fenoxy, benzyl, benzyloxy, heterocyklyl najmä furyl, a cykloalkyl najmä cyklopropyl. Typicky môžu byť prítomné 0 až 3 substituenty. Keď niektorý z uvedených substituentov znamená alebo obsahuje alkylovú substitučnú skupinu, táto môže byť nerozvetvená alebo rozvetvená a môže obsahovať do 12, výhodne do 6 a najmä do 4 atómov uhlíka. Keď niektorý z uvedených substituentov znamená alebo obsahuje arylovú alebo cykloalkylovú skupinu, arylová alebo cykloalkylová skupina môže byť sama substituovaná jedným alebo viacerými atómami halogénov, skupinami nitro, kyano, alkyl, halogénalkyl, alkoxy alebo halogénalkoxy. V prípade cykloalkylových a heterocyklylových skupín voliteľné substituenty zahŕňajú tiež skupiny, ktoré spolu s dvoma súsediacimi uhlíkovými atómami cykloalkylovej alebo heterocyklylovej skupiny vytvárajú nasýtený alebo nenasýtený hydrokarbylový kruh. Inými slovami, nesýtený alebo nenasýtený hydrokarbylový kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s cykloalkylovou alebo heterocyklylovou skupinou.

Voliteľne substituované skupiny môžu byť nesubstituované skupiny, alebo môžu mať jeden až maximálne možný počet substituentov. Typicky sú prítomné 0 až 3 substituenty.

Vynález sa ďalej týka farmaceutického prostriedku, ktorý obsahuje zlúčeninu podľa tohto vynálezu v kombinácii alebo v spojení s farmaceutický prípustným nosičom. Podrobnejšie, vynález sa týka farmaceutického prostriedku, ktorý obsahuje účinné množstvo zlúčeniny podľa tohto vynálezu a farmaceutický prípustný nosič. V tomto opise používaný výraz účinné množstvo zlúčeniny znamená alebo priamo podávanú zlúčeninu, alebo podávanie prekurzorového

-54derivátu, alebo analóga uvedenej zlúčeniny, ktoré vytvoria účinné množstvo uvedenej zlúčeniny priamo v tele.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa pripravia spôsobmi opísanými v patentoch US 5 593 996; 5 756 509; 5 948 783; 5 981 534; 5 612 345; 5 994 360; 6 020 338; 5 985 883; 5 854 252; 5 808 066; 5 817 663; 5 955 252; 5 965 561; 5 986 135 a 5 750 766, ktoré sa tu zahŕňajú týmto odkazom.

Predstavitelia zlúčenín podľa tohto vynálezu sa hodnotili viacerými štandardnými farmakologickými skúšobnými postupmi, ktoré ukázali, že uvedené zlúčeniny z tohto vynálezu majú významný účinok ako promótory mikrotubulovej polymerizácie a sú antineoplastickými látkami. Na základe štandardnými farmakologickými skúšobnými postupmi preukázaného účinku sú preto zlúčeniny podľa tohto vynálezu užitočné ako protirakovinové látky. Týka sa to rakovín, patriacich do skupín zahŕňajúcich rakovinu prsníka, čriev, pľúc, prostaty, melanóm, epidermálnu rakovinu, leukémiu, rakovinu obličky, mechúra, ústnej dutiny, hrtanu, ezofága, žalúdka, vaječníkov, pankreasu, pečene, kože a mozgu. Zlúčeniny podľa tohto vynálezu majú podobný účinok ako paclitaxel. Použité skúšobné postupy a dosiahnuté výsledky sa uvádzajú v ďalšej časti.

Štandardný farmakologický skúšobný postup určenia cytotoxickosti s použitím MTS ako detekčného činidla

Tento štandardný farmakologický skúšobný postup identifikuje príklady typických zástupcov substituovaných triazolopyrimidínových zlúčenín podľa tohto vynálezu, ktoré zahŕňajú zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktoré potláčajú rôzne ľudské línie rakovinových buniek. Táto skúška je založená na konverzii tetrazoliovej soli (MTS) na vo vode rozpustný farebný formazán prostredníctvom živých buniek ale nie mŕtvych buniek; formazán sa určuje spektrofotometricky. Skúšobný postup sa využil na identifikáciu najviac účinných zlúčenín v sériách štruktúrne príbuzných látok, o ktorých bolo známe alebo o ktorých sa usudzovalo, že majú vplyv na mikrotubulový mechanizmus. Najúčinnejšie zlúčeniny sa potom podrobili ďalším skúškam, ktorými sa špecificky analyzovali vplyvy na mikrotubuly.

1. časť - Cytotoxickosť na HeLa bunkách

V prvej cytotoxickej skúške sa skúšal účinok predstavitelov zlúčenín podľa tohto vynálezu (v jednej koncentrácii) na HeLa bunkovú líniu ľudského cervikálneho karcinómu. HeLa bunky (ATCC CCL2.2) sa bežne udržiavali dvojtýždňovou subkultiváciou v čerstvom prostredí. Prostredie bolo RPMI-1640 s L-glutamínom, doplnené s 10 % teplom inaktivovaného fetálneho teľacieho séra, 100 jednotkami na mililiter penicilínu a 100 ng.mľ¹ streptomycínu.

HeLa bunky sa pred vlastnou skúškou získali trypsínizáciou, premyli, počítali a rozdelili do jamiek s plochým dnom 96-jamkových mikrotitračných platní v koncentrácii 1 000 buniek v jamke v 100 μΙ prostredia. Platne sa približne 24 hodín inkubovali pri 37 °C vo vlhkej atmosfére vzduchu s 5 % CO₂.

V deň 2 sa skúšané zlúčeniny zriedili a pridali do jamiek. Zlúčeniny sa rozpustili v dimetylsulfoxide (DMSO) na koncentráciu 10 mg.mľ¹. Tieto roztoky sa zriedili do prostredia, čím sa získali roztoky v koncentrácii 20 μς skúšanej látky v jednom mililitri. 100 μΙ týchto roztokov sa vždy dvojmo pridalo do jamiek obsahujúcich bunky a tak sa dosiahla výsledná koncentrácia skúšaných zlúčenín 10 pg.mľ¹ a konečná koncentrácia DMSO 0,1 %. Na každej platni boli nasledujúce kontrolné pokusy: bunky bez skúšaných zlúčenín (neinhibovaný rast buniek = maximálna MTS odozva = kontrolná odozva); bunky plus 100 nM paclitaxelu (všetky bunky zničené = minimálna MTS odozva); a samotné prostredie bez buniek (kontrola MTS činidla). Platne sa vrátili do inkubátora a 3 dni inkubovali.

Po troch dňoch kultivácie so skúšanými zlúčeninami (5 dní celková inkubácia) sa zmerala absorbancia vo všetkých jamkách platní tak, že sa do každej jamky pipetovacím zariadením pridalo dvadsať μΙ MTS/PMS činidla (Promega CelITiter 96 Aqueous Non-Radiactive Celí Proliferation Assay katalógové číslo G5421; pozri Technical Bull. číslo 169, revidovaný 9/96); platne sa opäť vrátili do 37 °C inkubátora na 2 hodiny pred meraním absorbancie v každej jamke pri 490 nm; použil sa čítač platní zo súpravy ELISA. Hodnoty absorbancií dvojmo vykonávaných pokusov sa spriemerovali a vyjadrili ako percentá zo strednej hodnoty kontrolných jamiek. Percentuálne hodnoty nižšie ako 100 poukazujú na cytotoxický účinok

- 56 skúšaných zlúčenín na použité bunky. Výsledky tejto farmakologickej skúšky sú uvedené v Tab. 1.

Tabuľka 1

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu štandardným postupom MTS farmakologickej skúšky cytotoxickosti voči HeLa bunkám

Pokus číslo	% z kontroly pri 10 μς.ΓηΙ'¹		Pokus číslo	% z kontroly pri 10 μς.ΓηΓ¹		Pokus číslo	% z kontroly pri 10 gg.mľ¹
1	-1,6	54	-0,1	127	-0,9
2	10,4	59	0,9	128	-0,3
4	2,9	60	4,9	130	5,4
5	-0,8	61	-1,2	132	3,4
6	-0,4	62	-0,7	133	10,7
7	0,6	63	10,6	135	-1,1
8	2	64	-2	140	-0,9
9	8,1	65	-0,6	141	10,8
12	0,3	66	-0,7	143	92,8
19	-1,3	70	1,4	144	2,3
24	3,7	72	-1,8	145	16,2
27	2,2	73	15,6	146	16,1
28	3,4	79	7,1	149	7,8
30	-0,4	82	-1,5	150	34
32	20,3	87	-0,2	151	9,6
33	-1,3	99	1,8	157	-2,7
35	17,6	102	1,1	158	-0,4
37	-1,6	103	-0,7	159	-1
38	0,2	105	0	160	1,1
39	10,6	113	-0,3	163	27,2
41	7,1	116	-1,3	167	-2,5
42	-0,1	117	-0,1	168	8,7
43	5,8	121	-0,8	169	23,8
47	0	122	2,1	170	22,6
48	13,9	123	-2,2	172	-0,9
49	12	124	-1,6	173	-0,6

-57Pokračovanie Tabuľky 1

Pokus číslo	% z kontroly pri 10 μρ.πιΓ¹		Pokus číslo	% z kontroly pri 10 pq.mľ¹		Pokus číslo	% z kontroly pri 10 pg.mľ¹
174	0,6		182	-1,7		188	8,8
175	1,9	183	-0,1	189	2,2
176	-0,6	184	1,3	213	10,2
177	8,5	185	1,5	216	5,8
180	-0,3	186	1	217	-0,5
181	-1,5	187	-1,4	225	-1

2. časť - Cytotoxickosť na bunkách COLO 205

V druhom štandardnom postupe farmakologickej skúšky na cytotoxickosť s MTS sa skúšal vplyv predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu (v šiestich koncentráciách) na bunky bunkovej línie COLO 205 ľudského črevného adenokarcinómu s cieľom určiť hodnoty IC50· Bunky COLO 205 (ATCC CCL 222) sa bežne udržiavali v trojtýždňových subkultúrach v čerstvom prostredí. Prostredie bolo RPMI-1640 s L-glutamínom, doplnené s 10 % teplom inaktivovaného fetálneho teľacieho séra, 20 mM HEPES, 100 jednotkami penicilínu v 1 ml a 100 pg.mľ¹streptomycínu.

Pred skúškou sa COLO bunky získali trypsinizáciou, premyli, počítali a rozdelili do jamiek s plochým dnom 96-jamkových mikrotitračných platní v koncentrácii 1 000 buniek v jamke v 100 μΙ prostredia. Naviac sa pripravil jeden riadok jamiek na ďalšej platni (platňa v čase 0). Všetky platne sa 24 hodín inkubovali pri 37 °C vo vlhkej atmosfére vzduchu s 5 % CO₂.

V deň 2 sa skúšané zlúčeniny zriedili a pridali do jamiek. Zlúčeniny sa rozpustili v dimetylsulfoxide (DMSO) na koncentráciu 10 mg.ml'¹. Z každej skúšanej zlúčeniny sa pripravila séria šiestich zriedení v prostredí, vždy trojmo. Najvyššia koncentrácia skúšanej zlúčeniny s bunkami bola 5 pg.mľ¹ a najvyššia koncentrácia DMSO bola 0,05 %. Zlúčeniny sa pridávali do jamiek vždy dvojmo do 100 μΙ objemov. Každá platňa mala tiež nasledujúce kontrolné pokusy: bunky bez skúšaných zlúčenín (neinhibovaný rast buniek = maximálna MTS odozva = kontrolná odozva); bunky plus 100 nM paclitaxelu (všetky bunky zničené = minimálna MTS odozva); a samotné prostredie bez buniek (kontrola MTS činidla). Platne sa vrátili do inkubátora a 3 dni inkubovali.

V čase pridávania zlúčenín do jamiek pokusných platní sa vykonala MTS analýza platne v čase 0. Tak sa získali hodnoty MTS v čase 0, ktoré sú vo vzťahu k počtu živých buniek v jamke v čase pridávania skúšaných zlúčenín. Hodnoty MTS z jamiek experimentálnych platní boli nižšie, alebo vyššie alebo rovnaké ako v čase 0, v závislosti od toho, či skúšaná zlúčenina ničila bunky, neinhibovala bunky alebo bola cytostatická.

Po troch dňoch kultivácie so skúšanými zlúčeninami (5 dní celková inkubácia) sa zmerala absorbancia. Výsledky z každej platne sa počítali samostatne s použitím kontroly z príslušnej platne. Hodnoty absorbancií dvojmo analyzovaných vzoriek sa spriemerovali a podelili priemerom z merania v čase 0. Priemery udávajú maximálny pomerný nárast v MTS sfarbení v dôsledku rastu buniek v posledných troch dňoch kultivácie. Priemer z kontrolných jamiek s paclitaxelom delený hodnotou v čase 0 dáva minimálne sfarbenie pre bunky, ktoré boli celkom zničené. V závislosti od koncentrácie sa pre každú skúšanú zlúčeninu znázornilo graficky šesť hodnôt ; z tejto závislosti sa určila hodnota IC₅o ako koncentrácia pri ktorej sa dosiahne polovičné sfarbenie medzi maximálnou a minimálnou hodnotou z kontrol. Najviac účinné zlúčeniny mali najnižšie hodnoty IC₅₀. Výsledky skúšky pre predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu sa uvádzajú v Tab. 2.

Niektoré zlúčeniny podľa tohto vynálezu boli naviac skúšané dvojmo pri koncentráciách 25 a 50 pg.mľ¹ štandardným skúšobným postupom stanovenia toxickosti s použitím MTS. Výsledky sa vyjadrili ako % z priemernej hodnoty z kontrolných jamiek. Percentá nižšie ako 100 poukazujú na to, že skúšaná zlúčenina má na uvedené bunky cytotoxický účinok. Výsledky tejto skúšky sa uvádzajú tiež v Tab. 2.

-59 Tabuľka 2

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu štandardným farmakologickým postupom skúšky cytotoxickosti voči bunkám COLO 205

Pokus číslo	IC50 (μΜ.ΓηΓ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC50 (μΜ.ΓηΓ¹)	n	% z kontroly pri
25 pg.mľ¹	50 μρ.ηηΓ¹		25 μ9·ΓπΓ¹	50 μΟ-ΠΊΓ¹
1	0,84					23	3,7
2	0,092					24	>5
3	0,82					25	>5a
4	0,082					26	0,33
5	0,057					27	0,033
6	0,16					28	0,08
7	0,12					29	0,29
8	3,3					30	0,31	2
9	0,86					31	2,8
10	0,35					32	>5
11	2,5					33	0,062
12	0,32	2				34	0,44
13	4,3					35	0,026	2
14	0,22					36	0,1
15	1,2					37	>5
16	4,8					38	2,5
17	0,91					39	2,2
18	0,33					40	0,31
19	0,25					41	0,062
20	1					42	0,33
21	2,8					43	0,084
22	4,6					44	0,64

-60Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC50 (pM.mľ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC₅o (μΜ.ΓΤΐΙ'¹)	n	% z kontroly pri
25 μς.ΓηΓ¹	50 μο.ΓηΓ¹		25 ^ig.mľ¹	50 μρ.ιτιΙ’¹
45	4,8					67	0,34
46	0,31					68	1,7	2
47	0,11					69	0,36
48	0,13					70	0,22
49	0,15					71	0,87	2
50	2,1					72	0,22
51	0,86					73	0,13
52	0,7					74	0,31
53	1,3					75	4,3
54	0,094					76	0,37	2
55	0,59					77	0,66	2
56	0,86					78	2,4
57	0,64					79	0,27
58	1					80	2,6	2
59	0,18					81	2,5	2
60	0,19					82	0,038
61	0,095					83	3	2
62	0,13					84	2,8
63	0,16					85	2,8	2
64	0,68	2				86	0,26	2
65	0,18					87	0,24
66	0,11					88	2,8	2

-61 Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC50 (μΜ.ΓΤΐΓ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC₅₀ (μΜ.ΠΊΓ¹)	n	% z kontroly pri
25 pg.mľ¹	50 pg.mľ¹		25 pg.mľ¹	50 pg.mľ¹
89	2,9	2				111	0,39	2
90	1					112	0,34
91	0,39	2				113	0,91
92	1,8					114	3,7
93	2,7	2				115	>5a
94	3,5	2				116	>5
95	3,8					117	0,26
96	0,79	2				118	1,2	2
97	>5a					119	0,75	2
98	2	2				120	1,4	2
99	0,064					121	2,7
100	>5a					122	0,73
101	4,4					123	>5
102	2,3					124	0,12
103	0,27					125	4,7	2
104	0,25	2				126	0,14
105	0,12	2				127	0,056
106	>5a					128	2,6
107	0,11	2				129	0,31	2
108	0,63	2				130	0,91
109	3,5					131	0,1	2
110	0,32	2				132	0,084

-62Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC₅₀ (μΜ,ΓΠΓ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC50 (μΜ,ΓΠΓ¹)	n	% z kontroly pri
25 pg.mľ¹	50 μρ,ΓηΙ'¹		25 pg,mľ¹	50 gg.mľ¹
133	0,092	2				155	1,1
134	0,33	2				156	0,11
135	0,16					157	>5
136	0,55	2				158	0,19
137	1,2					159	0,38
138	0,34	2				160	0,27
139	0,96					161	2,6
140	0,075					162	0,78
141	0,28					163	0,27
142	0,29	2				164	0,17
143	0,097					165	0,96
144	0,084					166	0,32
145	2,5					167	0,1
146	0,099					168	0,11
147	1,2	2				169	0,31	4
148	0,36					170	0,074	11
149	0,056					171	0,29
150	0,26					172	0,3
151	0,099					173	0,3
152	1					174	0,13
153	0,42					175	0,038
154	1,2					176	0,1

-63Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC50 (pM.mľ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC₅₀ (μΜ,ΓηΓ¹)	n	% z kontroly pri
25 pg,mľ¹	50 pg,mľ¹		25 pg.mľ¹	50 pg,mľ¹
177	0,13					199	0,38
178	0,099	3				200	0,27
179	0,35					201	0,39
180	0,81					202	0,25
181	0,043					203	0,17
182	1,3					204	0,12
183	0,078					205	0,036
184	0,25					206	0,12
185	0,04					207	0,035	2
186	0,034					208	0,014
187	0,035					209	0,11
188	0,012	2				210	0,31
189	0,055					211	0,049	3
190	0,33					212	0,88
191	0,032					213	0,47
192	>5a					214	0,79
193	0,95					215	3,5
194	0,58					216	0,63
195	0,1					217	0,2
196	0,15					218	>5a
197	0,3					219	0,89
198	0,091					220	4,9

-64Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC50 (μΜ,ΓΠΓ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC50 (μΜ,ΓΠΓ¹)	n	% z kontroly pri
25 μς,ΠΊΓ¹	50 μς,ΠΊΓ¹		25 μρ,ιτιΓ¹	50 pg,mľ¹
221	2,8					243			12,7	-3,0
222	5	2				244			9,2	21,0
223	2,1					245			100,3	72,5
224	0,3					246			4,0	-4,8
225	0,086					247			63,6	46,4
226	0,095					248			15,5	-3,9
227	4,3					249			47,4	20,3
228	>5a					250			16,4	4,6
229	0,95	2				251			103,9	28,1
230	2,5					252			94,8	69,6
231			44,3	6,6		253			120,0	74,1
232			67,5	15,0		254			39,6	15,6
233			27,3	20,4		255			58,3	86,1
234			5,6	-4,5		256			20,2	14,8
235			80,6	14,7		257			27,3	-3,5
236			28,4	10,9		258			74,6	44,1
237			24,1	-3,5		259			32,6	0,7
238			100,4	41,5		260			87,8	53,5
239			58,8	25,5		261			7,4	-3,9
240			-0,9	-4,0		262			23,7	-5,1
241			2,3	2,4		263			-1.5	2,0
242			13,1	-4,8		264			34,5	-4,2

-65Pokračovanie Tabuľky 2

Pokus číslo	IC50 (μΜ,ΠΊΓ¹)	n	% z kontroly pri		Pokus číslo	IC50 (pM.mr¹)	n	% z kontroly pri
25 pg.mľ¹	50 gg.mľ¹		25 pg.mľ¹	50 pg.mľ
265			8,1	-1,6
266			84,9	72,4
267			17,8	32,1
268			-0,8	4,2
269			3,5	11,9
270	0,095
271	0,32
272	0,91
273	1
274	1,9
275	0,13

Poznámky k Tabuľke 2:

1. n = počet nezávislých analýz (n - 1 pokiaľ nie je uvedené inak);

2. a znamená že pri 5 pg.mľ¹ bola inhibícia medzi 30 a 50 %.

3. časť - Cytotoxickosť na bunky H157, U87MG, PC-3 MM2 a DLD1

Štandardným postupom farmakologickej skúšky na cytotoxickosť s MTS sa skúšal vplyv predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu na štyri ďalšie druhy rakovinových buniek ľudských bunkových línií s cieľom určiť typy nádorov, proti ktorým sú uvedené zlúčeniny účinné. Použité bunkové línie boli H157 ľudské nie malé bunky pľúcneho karcinómu, U87MG ľudského glioblastómu, PC-3 MM2 ľudského karcinómu prostaty a DLD1 ľudského adenokarcinómu hrubého čreva. Postup skúšky a spracovanie výsledkov boli rovnaké ako sa opisuje v časti 2 s bunkami COLO 205. Výsledky sa uvádzajú v Tab.3

-66Tabuľka 3

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu a štandardných cytotoxických látok postupom štandardnej MTS cytotoxickej farmakologickej skúšky s použitím štyroch druhov ľudských rakovinových bunkových línií

Príklad číslo	IC₅₀ (nM)
H157	U87MG	PC-3 MM2	DLD1
35	31	390	220	105
169		>1000	>1000
170	310	200	140	560
175		180	240	215
178		480	550
186	38
187	86
188	16	48	73	48
198		640	580
205	83
208	10	120	140	69
211		370	400
Kamptotecín
Kolchicín	13	6,5	10	25
Doxorubicín	17			170
Mitoxantrón	13
Nocodazol	33	34	43	40
Paclitaxel			0,17	1,4
Vincristín	0,28		0,30	3,0

4. časť - Cytotoxickosť zlúčenín na bunky KB a na liekom rezistentné línie odvodené z línie KB

Na hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu s použitím bunkovej línie KB ľudského epidermálneho karcinómu a z nej odvodených dvoch línii

-67viacnásobne rezistentných bunkových línií sa použil už opísaný štandardný farmakologický postup skúšky na cytotoxickosť s použitím MTS detekcie. Odvodené bunkové línie boli kolchicino-rezistentná KB 8.5 línia, bunky ktorej exprimujú strednú úroveň multiliečivového prenášačového P-glykoproteínu a vinblastíno-rezistentná KB VI línia, bunky ktorej exprimujú vysoké hladiny P-glykoproteínu. Účelom týchto pokusov bolo určiť, či zlúčeniny z tohto vynálezu prekonávajú liečivovú rezistenciu sprostredkovanú P-glykoproteínom. Ak IC₅₀ uvedených zlúčenín sú u všetkých troch línií v podstate rovnaké, potom nie sú uvedené zlúčeniny substrátmi pre P-glykoproteín. Na druhej strane, ak uvedené zlúčeniny majú značne vyššie IC₅₀ v prípadoch KB 8.5 a KB VI v porovnaní s KB (ako je tomu u paclitaxelu, vincristínu a mnohých ďalších štandardných protirakovinových liečiv) potom môžu byť substrátmi pre P-glykoproteín.

Postup skúšky cytotoxickosti a spôsob spracovania výsledkov skúšky bol rovnaký ako sa opisuje hore v 2. časti s bunkami COLO 205. Výsledky sa uvádzajú v Tab. 4. Výsledky poukazujú na to, že zlúčeniny z tohto vynálezu majú v podstate rovnaké hodnoty IC50 pre všetky tri uvedené bunkové línie, čo znamená že nemôžu byť subjektom multiliečivovej rezistencie sprostredkovanej P-glykoproteínom.

Tabuľka 4

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu a štandardných cytotoxických látok štandardným postupom farmakologickej skúšky cytotoxickosti s MTS s použitím ľudských rakovinových bunkových línií, ktoré nadmerne exprimujú P-glykoproteínový transportér

Príklad číslo	IC₅₀ (nM)	Pomerná rezistencia
KB	KB8.5	KB VI	KB	KB8.5	KB VI
35	19	31	16	1	1,6	0,8
186	30	48	33	1	1,6	1,1
187	45	76	56	1	1,7	1,2
188	10	18	11	1	1,8	1,12
Taxol	<0,03	19	3325	1	>630	>111000

Vincristín	<0,06	29	3150	1	>480	>52500
Kolchicín	7,2	51	1330	1	7,1	185
Nocodazol	21	24	33	1	1,1	1,6
Doxorubicín	34	101	4400	1	3,0	130

5. časť - Cytotoxickosť s bunkami S1 a s liečivám rezistentnou líniou odvodenou od S1

Na hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu s použitím bunkovej línie S1 ľudského karcinómu hrubého čreva a z nej odvodenej viacliečivovo rezistentnej línie sa použil už opísaný štandardný farmakologický postup skúšky na cytotoxickosť s použitím MTS detekcie. Odvodená línia bola S1-M1 mitoxantrónorezistentná, ktorá exprimuje viacliečivový transportér MXR. Účelom týchto pokusov bolo určiť, či predstavitelia zlúčenín z tohto vynálezu môžu prekonať liečivovú rezistenciu sprostredkovanú MXR. Ak hodnoty IC₅₀ uvedených zlúčenín sú v podstate rovnaké v obidvoch líniách, potom nie sú uvedené zlúčeniny substrátmi MXR. Na druhej strane, ak uvedené zlúčeniny majú značne vyššie IC50 v prípade S1-M1 v porovnaní s S1 (ako je tomu u mnohých štandardných protirakovinových liečiv) potom môžu byť substrátmi pre MXR.

Postup skúšky cytotoxickosti a spôsob spracovania výsledkov skúšky bol rovnaký ako sa opisuje hore v 2. časti s bunkami COLO 205. Výsledky sa uvádzajú v Tab. 5. Výsledky poukazujú na to, že zlúčeniny z tohto vynálezu majú v podstate rovnaké hodnoty IC₅₀ pre všetky tri uvedené bunkové línie, čo znamená že nemôžu byť subjektom multiliečivovej rezistencie sprostredkovanej MXR.

Tabuľka 5

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu a štandardných cytotoxických látok štandardným postupom farmakologickej skúšky cytotoxickosti s MTS s použitím ľudskej rakovinovej bunkovej línie, ktorá nadmerne exprimuje MXR transportný proteín

Príklad číslo	IC50 (nM)	Pomerná rezistencia
S1	S1-M1	S1	S1-M1
35	73	94	1	1,3
186	99	102	1	1,0
187	99	124	1	1,3
188	33	74	1	2,2
Kolchicín	11	47	1	4,3
Nocodazol	43	146	1	3,4
Doxorubicín	19	10700	1	565
Mitoxatrón	<4	>10000	1	>2500
Camphothecín	6,8	21	1	3,1

Štandardná farmakologická skúška inhibície bunkovej proliferácie s použitím sulforhodamínu B ako detekčným činidlom

Pomocou tohto štandardného farmakologického postupu sa určuje schopnosť hodnotených zlúčenín inhibovať množenie buniek. Na stanovenie celkového bunkového proteínu sa použilo farbenie so sulforhodamínom B v kultúrach po vystavení účinkom hodnotených zlúčenín. Pokles sfarbenia v porovnaní s kontrolnými neexponovanými kultúrami poukazuje na inhibíciu proliferácie buniek.

V týchto pokusoch sa použili dve bunkové línie: línia Reh ľudskej akútnej lymfocytickej leukémie a línia CCRF-CEM ľudskej akútnej lymfoblastovej leukémie, obidve získané z ATCC. Na každej z uvedených dvoch línií sa uskutočnili dva typy pokusov. V prvom type sa bunky kultivovali so zlúčeninou z príkladu 170 pri rôznych koncentráciách zlúčeniny po dobu 24 alebo 72 hodín a potom sa stanovil jej účinok na proliferáciu buniek. V druhom type skúšok sa bunky kultivovali 24 hodín so zlúčeninou z príkladu 170 pri rôznych koncentráciách zlúčeniny, potom sa uvedená zlúčenina odstránila a nahradila čerstvým prostredím; v kultivácii sa pokračovalo ďalších 48 hodín a stanovil sa účinok skúšanej zlúčeniny na proliferáciu buniek. Uvedeným druhým typom pokusov sa určovala schopnosť revitalizácie buniek po poškodení, vyvolanom hodnotenou zlúčeninou v priebehu prvých 24 hodín

-70kultivácie. Po skončení inkubačnej periódy sa bunky fixovali kyselinou trichlóroctovou a farbili sulforhodamínom B pričom sa použila in vitro Toxikologická analytická súprava (Sigma).

Vo všetkých pokusoch sa ako pozitívna kontrola použil aktinomycín D. Viazané farbivo sa stanovovalo spektrofotometricky pri 565 nm s referenčnou vlnovou dĺžkou 690 nm. Kultivácia sa uskutočnila v 96-jamkových platniach, vždy v 5 opakovaných pokusoch s každou koncentráciou. Hodnoty absorbancií paralelných pokusov sa priemerovali a vyjadrili v % z kontrolného pokusu s nosičom. Každé meranie sa raz opakovalo a percentuálny výsledok sa pre danú koncentráciu a každý pokus spriemeroval; výsledky sú uvedené v Tab. 6.

Z výsledkov vyplýva, že zlúčenina z príkladu 170 inhibuje množenie obidvoch bunkových línií; väčší účinok sa pozoroval po 72 hodinách kultivácie, menší pri 24 hodinách. Pokus s revitalizáciou poukázal na to, že ani jedna z použitých bunkových línií sa po 24 hodinách kultivácie s uvedenou cytotoxickou zlúčeninou z príkladu 170 nemohla zotaviť.

Ďalej sa uskutočnil sa pokus s HL-60 bunkami ľudskej promyelocytovej leukémie. Sledovala sa inhibícia proliferácie uvedených buniek viacerými koncentráciami zlúčeniny z príkladu 170, vždy po 24 alebo 72 hodinách kultivácie. Použil sa postup s vyfarbovaním so sulforhodamínom B, opísaný hore. Koncentrácie zlúčeniny z príkladu 170 boli v rozmedzí od 0,005 do 100 pg.mľ¹. Vypočítané hodnoty EC50 boli 2,3 pg.mľ¹ po 24 hodinách a 0,1 pg.mľ¹ po 72 hodinách.

Tabuľka 6

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na dve ľudské bunkové línie leukémie s použitím štandardného farmakologického postupu so sulforhodamínom B

Koncentrácia zlúčeniny v Mg.ml’¹	% vzhľadom na kontrolnú vzorku
bunky Reh	bunky CCRF-CEM
24 hodinová expozícia	72 hodinová expozícia	24 hodín expozícia, 48 hodín zotavenie	24 hodinová expozícia	72 hodinová expozícia	24 hodín expozícia, 48 hodín zotavenie
0,005	120,15	88,57	105,29	104,86	94,88	152,66
0,01	110,83	89,43	103,98	111,05	88,98	143,58
0,05	81,50	71,31	81,23	67,31	19,73	57,05
0,1	68,67	65,87	84,68	65,48	24,04	38,99
0,5	67,70	66,24	74,13	65,72	11,59	50,17
1	83,94	52,91	66,81	51,41	20,74	29,42
5	66,21	41,86	61,34	30,04	22,24	28,90
10	71,46	44,70	34,10	42,05	8,17	18,19
50	55,07	35,40	36,36	47,10	24,84	27,16
100	84,35	51,62	35,76	113,70	54,07	39,47

0,2*	66,99	50,64	39,75	52,44	45,71	20,26

Poznámka: * = Aktinomycin D

Postup štandardnej farmakologickej skúšky na analýzu bunkového cyklu

Tento postup štandardnej farmakologickej skúšky určuje percentá buniek v populácii, ktoré sú v fáze G1, v fáze S a v fáze G2/M bunkového cyklu. Postup využíva farbenie fixovaných buniek proiídiumjodidom a analýzu týchto buniek prietokovou cytometriou. Týmto postupom sa stanovuje tiež apoptóza vyvolaná pôsobením liečiva na základe merania prítomnosti častíc s sub-G1 podielom DNA. Liečivá účinné na mikrotubuly sa vyznačujú tým, že zadržiavajú bunky vo fáze G2/M bunkového cyklu v dôsledku prerušenia funkcie mikrotubúl obsahujúcich mitotické vretienko.

HeLa bunky sa udržiavali v prostredí RPMI-1640 s L-glutamínom, doplnenom s 10 % teplom inaktivovaného fetálneho teľacieho séra, 100 jednotkami na mililiter penicilínu a 100 pg.mľ¹ streptomycínu.

- 72 Pred vlastnou skúškou sa HeLa bunky získali trypsinizáciou, premyli, počítali a rozdelili do jamiek 6-jamkových platní v koncentrácii 50 000 buniek v jamke v 3 ml prostredia. Platne sa cez noc inkubovali pri 37 °C vo vlhkej atmosfére vzduchu s 5 % CO₂.

V deň 2 sa skúšané zlúčeniny zriedili a pridali do jamiek v koncových koncentráciách uvádených v tabuľkách. Dvadsať hodín po pridaní zlúčenín sa bunky fixovali studeným 80%-ným etanolom, spracovali s 100 pg.mľ¹ RNAzou a farbili propidiumjodidom; nasledovala prietoková cytometria. Percentá všetkých buniek vo fáze G1, S a G2/M a apoptóznych buniek (sub-G1 populácia) sa určili z fluoroscenčných histogramov a porovnali sa s histogramom pri použití neexponovaných kontrolných buniek v rovnakom pokuse.

Tabuľka 7 obsahuje výsledky predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu, skúšaných pri nízkej koncentrácii a pri päťnásobne vyššej koncentrácii. Tabuľka 8 uvádza výsledky druhého pokusu, v ktorom sa zlúčeniny z tohto vynálezu skúšali na šiestich hodinách koncentrácie. V obidvoch pokusoch uvedené zlúčeniny spôsobili celkom zreteľné zvýšenie percenta buniek v G2/M fáze bunkového cyklu a vyvolali podstatnú apoptózu.

Tabuľka 7

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu analýzou bunkového cyklu HeLa buniek štandardným postupom farmakologickej skúšky

Zlúčenina z príkladu číslo	Koncentrácia v pg.mľ¹	% buniek vo fáze bunkového cyklu
Apoptóza	G1	S	G2/M
žiadna	-	3	64	18	16
	-	2	63	18	17
1	084	8	3	10	79
	4,2	13	7	12	68
5	0,057	44	10	22	25
	0,285	9	1	5	85

7	0,12	8	2	6	84
	0,60	9	3	8	81
9	0,86	10	2	7	81
	4,3	16	28	21	35
12	0,27	46	10	18	26
	1,35	7	1	7	85
27	0,033	28	4	13	55
	0,165	8	1	5	86
35	0,022	28	5	14	54
	0,11	-	-	-	-
39	2,19	26	4	15	55
	10,95	19	17	20	45
41	0,02	9	58	20	13
	0,31	34	18	17	30
42	0,33	47	14	20	19
	1,65	6	1	10	83
47	0,11	8	2	8	83
	0,55	7	1	10	81
59	0,18	43	8	24	26
	0,9	8	2	6	84
61	0,08	7	1	9	83
	0,4	7	2	8	83
105	0,08	12	3	11	74
	0,4	6	2	8	84
127	0,08	8	2	12	79
	0,4	6	3	6	84
151	0,08	15	4	14	67
	0,4	9	6	8	76
186	0,08	7	2	8	82
	0,4	7	2	10	80

187	0,08	6	4	9	81
	0,4	7	2	9	81
188	0,08	9	2	8	81
	0,4	9	2	10	78

Tabuľka 8

Hodnotenie predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu analýzou bunkového cyklu

HeLa buniek štandardným postupom farmakologickej skúšky

Zlúčenina z príkladu číslo	Koncentrácia v pg.mľ¹	% buniek vo fáze bunkového cyklu
Apoptóza	G1	S	G2/M
bez zlúčeniny		4	55	23	18
	-	3	49	25	20
	-	1	56	20	20
35	0,001	1	57	22	20
	0,003	1	58	22	18
	0,01	2	57	20	21
	0,03	29	20	25	25
	0,1	26	9	13	50
	0,3	4	4	3	89
133	0,01	4	54	19	23
	0,03	28	25	21	25
	0,1	34	9	26	29
	0,3	15	5	8	73
	1	3	4	3	90
	3	3	4	3	89
169	0,01	2	51	23	24
	0,03	14	41	21	24

	0,1	33	17	23	25
	0,3	34	8	24	32
	1	3	5	3	88
	3	4	5	2	88
170	0,01	13	42	21	24
	0,03	33	17	20	28
	0,1	27	3	18	50
	0,3	5	5	4	85
	1	3	4	4	88
	3	3	4	4	88
188	0,001	1	55	21	23
	0,003	2	56	18	23
	0,01	18	35	19	27
	0,03	27	7	14	52
	0,1	4	4	3	88
	0,3	3	3	3	90
208	0,001	2	⁵⁹	20	20
	0,003	2	57	20	21
	0,01	14	43	20	23
	0,03	33	8	21	36
	0,1	3	2	3	90
	0,3	3	3	2	91

Postup štandardnej farmakologickej skúšky tubulínovej polymerizácie s použitím vysoko čistého tubulínu

Týmto štandardným postupom farmakologickej skúšky sa určuje účinok predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu na podporu polymerizácie α/β tubulínových heterodimérov. Použitým spôsobom prípravy tubulínu sa dosiahla jeho 99%-ná čistota a preto akýkoľvek vplyv skúšaných zlúčenín na polymerizáciu musí byť dôsledkom priamej väzby skúšanej zlúčeniny na tubulínový proteín. Je dobre

-76známe, že paclitaxel v tejto skúške podporuje polymerizáciu v porovnaní s kontrolnou reakciou bez liečiva a že vincristín a kolchicín inhibujú polymerizáciu. Vysoko čistý tubulín v koncentračnom rozmedzí 1 až 2 mg.ml'¹ v podstate nepodlieha spontánnej polymerizácii. Preto sa do reakčnej zmesi pridáva činidlo ako je glycerol aby sa znížila kritická koncentrácia pre polymerizáciu a dosiahla sa vyššia spontánna kontrolná polymerizácia. V niektorých pokusoch, opísaných ďalej, sa v reakčnej zmesi vynechal alebo glycerol alebo guanozín 5'-trifosfát (zdroj energie pre polymerizáciu) s cieľom bližšie porovnať vplyvy paclitaxelu s vplyvmi predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu.

1. časť - Polymerizácia čisteného tubulínu v prítomnosti guanozín 5'-trifosfátu a glycerolu

Použitý bovinný mozgový tubulín, získaný od spoločnosti Cytoskeleton, Inc., mal podľa polyakrylamidovej gólovej elektroforézy čistotu lepšiu ako 99 %. Proteín sa rozpustil v koncentrácii 1,5 mg.ml'¹ v ľadom chladenom tlmivom roztoku GPEM (80 mM piperazín-A/,A/’-bis[2-etánsulfónová kyselina], pH 6,9, 1 mM etylénglykolbis(p-aminoetyléter)-/V,N,/V,A/^,-tetraoctová kyselina, 1 mM chlorid horečnatý, 1 mM guanozín 5'-trifosfát, GTP), obsahujúcom 10 % hmotnostných glycerolu. Tesne pred použitím sa roztok pri 4 °C odstreďoval 10 minút pri najvyšších otáčkach odstredivky Eppendorf model 5415C. Tubulínový roztok sa pridal do jamiek na polovici 96 jamkovej platne (Costar číslo 3696), kde už boli skúšané zlúčeniny. Každá zlúčenina sa hodnotila pri troch koncentráciách. Konečný objem v jamke bol 110 μΙ. Každá vzorka sa robila dvojmo; kontrolná reakcia, v ktorej sa spracoval iba nosič sa uskutočnila štvormo. Najvyššia koncentrácia DMSO v reakčnej zmesi bola 1 %. Platňa sa vložila do čitača platní SpectraMax od firmy Molecular Devices, termostatovaného na 35 °C a v každej jamke sa každú minútu merala absorbancia pri 340 nm po dobu 60 minút. Absorbancia v čase 0 z každej jamky sa odpočítavala od absorbancií nasledujúcich meraní. Príslušné dvojice výsledkov sa potom priemerovali.

Výsledky tejto štandardnej farmakologickej skúšky s predstaviteľmi zlúčenín z tohto vynálezu a so štandardnými liečivami aktívnymi na mikrotubuly sú uvedené v

Tab. 9 až 14. Zlúčeniny ktoré zvyšujú rýchlosť a/alebo rozsah polymerizácie čistého

- 77 tubulinu v porovnaní s kontrolnou vzorkou (ako je paclitaxel) boli označené ako promótory polymerizácie; zlúčeniny ktoré znižovali rýchlosť alebo rozsah polymerizácie (napríklad vincristín, kolchicín) sa označili ako inhibítory.

Tabuľka 9

Hodnotenie zlúčenín z príkladov 35 a 188 štandardnou farmakologickou skúškou tubulinovej polymerizácie

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 35	Zlúčenina z príkladu 188	Kontrolná vzorka
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0
5	0,0434	0,0003	0,0004	0,0179	-0,0007	-0,0006	-0,0009
10	0,0972	0,0015	0,0010	0,0469	0,0001	-0,0005	-0,0008
15	0,1219	0,0028	0,0012	0,0667	0,0016	-0,0001	0,0001
20	0,1316	0,0058	0,0024	0,0813	0,0040	0,0009	0,0019
25	0,1364	0,0079	0,0041	0,919	0,0063	0,0026	0,0051
30	0,1387	0,0106	0,0061	0,0988	0,0110	0,0052	0,0087
35	0,1397	0,0139	0,0079	0,1032	0,0141	0,0079	0,0132
40	0,1401	0,0177	0,0099	0,1064	0,0179	0,0119	0,0198
45	0,1392	0,0232	0,0133	0,1100	0,0229	0,0142	0,0221
50	0,1396	0,0278	0,0167	0,1149	0,0288	0,0203	0,0245
55	0,1399	0,0311	0,0193	0,1165	0,0337	0,0262	0,0282
60	0,1398	0,0350	0,0224	0,1176	0,0372	0,0304	0,0340

-78Tabuľka 10

Hodnotenie zlúčeniny z príkladu 170 a paclitaxelu štandardnou farmakologickou skúškou tubulínovej polymerizácie

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 170	Paclitaxel	Kontrolná vzorka
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0
5	0,0103	-0,0001	-0,0005	0,0136	0,0044	-0,0012	-0,0009
10	0,0555	0,0008	-0,0010	0,0416	0,0167	-0,0010	-0,0008
15	0,0923	0,0028	-0,0005	0,0704	0,0336	0,0001	0,0001
20	0,1100	0,0056	0,0002	0,0931	0,0500	0,0025	0,0019
25	0,1199	0,0093	0,0018	0,1075	0,0638	0,0060	0,0051
30	0,1257	0,0143	0,0041	0,1162	0,0748	0,0100	0,0087
35	0,1289	0,0198	0,0053	0,1216	0,0835	0,0123	0,0132
40	0,1330	0,0246	0,0088	0,1245	0,0903	0,0168	0,0198
45	0,1353	0,0291	0,0124	0,1269	0,0957	0,0229	0,0221
50	0,1353	0,0338	0,0155	0,1279	0,0997	0,0257	0,0245
55	0,1363	0,0380	0,0192	0,1279	0,1027	0,0293	0,0282
60	0,1364	0,0419	0,0241	0,1282	0,1053	0,0314	0,0340

-79Tabuľka 11

Hodnotenie zlúčenín z príkladov 169 a 175 štandardnou farmakologickou skúškou tubulínovej polymerizácie

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 169	Zlúčenina z príkladu 175	Kontrolná vzorka
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0
5	0,0239	0,0005	-0,0014	0,0073	0,0001	-0,0012	-0,0012
10	0,1172	0,0011	-0,0009	0,0199	0,0014	-0,0005	-0,0011
15	0,1435	0,0024	0,0001	0,0309	0,0037	0,0011	0,0000
20	0,1509	0,0045	0,0020	0,0399	0,0067	0,0025	0,0024
25	0,1532	0,0073	0,0042	0,0488	00,0102	0,0057	0,0051
30	0,1548	0,0106	0,0057	0,0566	0,0160	0,0088	0,0108
35	0,1554	0,0154	0,0105	0,0638	0,0217	0,0116	0,0157
40	0,1555	0,0197	0,0136	0,0704	0,0294	0,0177	0,0203
45	0,1552	0,0246	0,0186	0,0761	0,0349	0,0233	0,0246
50	0,1545	0,0331	0,0234	0,0817	0,0416	0,0261	0,0329
55	0,1561	0,0414	0,0282	0,0872	0,0450	0,0309	0,0369
60	0,1552	0,0456	0,0322	0,0919	0,0485	0,0373	0,0392

-80Tabuľka 12

Hodnotenie zlúčeniny z príkladu 178 a paclitaxelu štandardnou farmakologickou skúškou tubulínovej polymerizácie

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 178	Paclitaxel	Kontrolná vzorka
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0
5	0,0182	-0,0029	-0,0001	0,0200	0,0024	-0,0008	-0,0012
10	0,0304	-0,0021	0,0000	0,0587	0,0144	0,0005	-0,0011
15	0,0448	-0,0007	0,0002	0,0939	0,0315	0,0031	0,0000
20	0,0602	0,0006	0,0009	0,1199	0,0484	0,0070	0,0024
25	0,0770	0,0039	0,0030	0,1369	0,0626	0,0103	0,0051
30	0,0951	0,0064	0,0055	0,1470	0,0746	0,0159	0,0108
35	0,01099	0,0110	0,0080	0,1522	0,0838	0,0197	0,0157
40	0,01250	0,0152	0,0134	0,1557	0,0913	0,0256	0,0203
45	0,01360	0,0202	0,0216	0,1583	0,0969	0,0304	0,0246
50	0,1424	0,0242	0,0218	0,1584	0,1014	0,0336	0,0329
55	0,1488	0,0273	0,0229	0,1588	0,1050	0,0368	0,0369
60	0,1538	0,0316	0,0299	0,1586	0,1076	0,0399	0,0392

-81 Tabuľka 13

Hodnotenie zlúčenín z príkladov 198 a 211 a paclitaxelu štandardnou farmakologickou skúškou tubulínovej polymerizácie

Čas (min)	Δ absorbancií pri 340 nm
Zlúčenina z príkladu 198	Zlúčenina z príkladu 211	Paclitaxel	★★
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
5	0,0011	0,0001	0,0021	-0,0008	-0,0019	-0,0001	0,0145	0,0037	-0,0014	-0,0012
10	0,0025	0,0006	0,0053	-0,0006	-0,0017	0,0014	0,0496	0,0173	0,0032	-0,0014
15	0,057	0,0017	0,0096	0,0009	0,0000	0,0043	0,0857	0,0381	0,0056	-0,0001
20	0,0117	0,0046	0,0143	0,0029	0,0027	0,0080	0,1119	0,0572	0,0098	0,0031
25	0,0206	0,0071	0,0200	0,0055	0,0060	0,0129	0,1280	0,0731	0,0160	0,0077
30	0,0303	0,0106	0,0239	0,0085	0,0107	0,0173	0,1370	0,0860	0,0217	0,0124
35	0,0407	0,0153	0,0292	0,0121	0,0138	0,0228	0,1427	0,0961	0,0289	0,0193
40	0,0489	0,0214	0,0367	0,0165	0,0195	0,0287	0,1462	0,1041	0,0360	0,0223
45	0,0572	0,0258	0,0393	0,0211	0,0251	0,0321	0,1483	0,1102	0,0431	0,0288
50	0,0661	0,0320	0,0495	0,0263	0,0279	0,0397	0,1495	0,1148	0,0488	0,0345
55	0,0729	0,0360	0,0556	0,0320	0,0339	0,0458	0,1505	0,1185	0,0544	0,0389
60	0,0763	0,0413	0,0607	0,0383	0,0393	0,0512	0,1508	0,1211	0,0596	0,0440

Poznámka: ** = kontrolná vzorka

- 82 Tabuľka 14

Hodnotenie vincristínu, kolchicínu a paclitaxelu štandardnou farmakologickou skúškou tubulínovej polymerizácie

Čas (min)	Δ absorbancií pri 340 nm
vincristín	kolchicin	Paclitaxel	**
10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	0,1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
5	-0,0011	-0,0008	0,0016	0,0005	-0,0003	-0,0011	0,0104	0,0023	-0,0008	-0,0016
10	0,0001	-0,0007	0,0012	0,0011	0,0000	-0,0012	0,0372	0,0128	0,0020	-0,0013
15	-0,0001	-0,0007	0,0018	0,0006	0,0002	-0,0008	0,0658	0,0288	0,0084	0,0007
20	-0,0006	-0,0001	0,0031	-0,0001	0,0009	0,0003	0,0885	0,0434	0,0107	0,0027
25	-0,0012	0,0003	0,0044	-0,0003	0,0019	0,0024	0,1040	0,0568	0,0160	0,0054
30	-0,0015	0,0012	0,0074	-0,0008	0,0029	0,0058	0,1149	0,0682	0,0251	0,0103
35	-0,0018	0,0019	0,0119	-0,0008	0,0039	0,0086	0,1218	0,0779	0,0321	0,0181
40	-0,0017	0,0029	0,0154	-0,0012	0,0044	0,0119	0,1261	0,0857	0,0366	0,0232
45	-0,0020	0,0041	0,0189	-0,0016	0,0057	0,0159	0,1299	0,0920	0,0423	0,0272
50	-0,0025	0,0057	0,0253	-0,0020	0,0067	0,0209	0,1313	0,0975	0,0480	0,0300
55	-0,0026	0,0067	0,0298	-0,0020	0,0079	0,0243	0,1325	0,1015	0,0517	0,0362
60	-0,0026	0,0079	0,0322	-0,0021	0,0090	0,0274	0,1335	0,1049	0,0550	0,0399

Poznámka: ** = kontrolná vzorka

2. časť Polymerizácia čistého tubulínu v neprítomnosti guanozín 5-trifosfátu alebo glycerolu

Týmto štandardným farmakologickým skúšobným postupom sa určuje schopnosť predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu vyvolať polymerizáciu čistého tubulínu v neprítomnosti glycerolu alebo v neprítomnosti guanidizín 5'-trifosfátu (GPT). Všetky ostatné podmienky pokusov a spôsobu výpočtu sú rovnaké ako v 1. Časti.

V prvom pokuse polymerizačná reakčná zmes neobsahovala glycerol. Vysoko čistý tubulín v neprítomnosti glycerolu spontánne polymerizuje iba vo veľmi malej miere; paclitaxel je zasa známy tým, že vyvoláva polymerizáciu aj v týchto podmienkach. Údaje uvedené v Tab. 15 poukazujú na to, že zlúčenina z príkladu 170 tiež vyvoláva polymerizáciu v neprítomnosti glycerolu.

-83V druhom pokuse nebol v polymerizačnej reakčnej zmesi prítomný GTP. Normálna polymerizácia tubulínu vyžaduje na tvorbu polymérov energiu uvoľňovanú z hydrolýzy GTP, ale paclitaxel je schopný vyvolať tvorbu polyméru aj v neprítomnosti GTP. Z údajov v Tab. 16 je zrejmé, že zlúčenina z príkladu 170 podobne ako paclitaxel vyvoláva polymerizáciu v neprítomnosti GTP.

Výsledky z uvedených dvoch pokusov sú konzistentné v závere, že na tubulínovú polymerizáciu vplýva zlúčenina z príkladu 170 podobným mechanizmom ako paclitaxel.

Tabuľka 15

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 a paclitaxelu v neprítomnosti glycerolu v podmienkach štandardného postupu farmakologickej skúšky polymerizácie tubulínu

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 170	Paclitaxel	Kontrolná vzorka
10 μΜ	1 μΜ	10 μΜ	1 μΜ	-
0	0	0	0	0	0
5	0,0019	0,0005	0,0056	0,0014	0,0002
10	0,0049	0,0014	0,0279	0,0091	0,0007
15	0,0095	0,0024	0,0546	0,0198	0,0011
20	0,0153	0,0039	0,0801	0,0310	0,0018
25	0,0215	0,0054	0,1016	0,0412	0,0024
30	0,0280	0,0074	0,1188	0,0500	0,0033
35	0,0347	0,0097	0,1070	0,0576	0,0043
40	0,0422	0,0121	0,1142	0,0638	0,0048
45	0,0504	0,0149	0,1192	0,0691	0,0058
50	0,0595	0,0188	0,1238	0,0737	0,0069
55	0,0595	0,0188	0,1238	0,0737	0,0077
60	0,0687	0,0222	0,1262	0,0773	0,0094

-84Tabuľka 16

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 a paclitaxelu v neprítomnosti GTP v podmienkach štandardného postupu farmakologickej skúšky polymerizácie tubulínu

Δ absorbancií pri 340 nm
Čas (minúty)	Zlúčenina z príkladu 170	Paclitaxel	Kontrolná vzorka
20 μΜ	5 μΜ	20 μΜ	5 μΜ	-
0	0	0	0	0	0
5	0,0364	0,0000	0,0204	0,0032	-0,0010
10	0,0582	0,0009	0,0592	0,0160	-0,0004
15	0,0735	0,0028	0,0933	0,0305	0,0019
20	0,0830	0,0046	0,1159	0,0445	0,0035
25	0,0921	0,0078	0,1288	0,0570	0,0078
30	0,1022	0,0107	0,1365	0,0674	0,0121
35	0,1086	0,0142	0,1409	0,0764	0,0167
40	0,1125	0,0180	0,1435	0,0843	0,0198
45	0,1192	0,0220	0,1449	0,0908	0,0241
50	0,1225	0,0265	0,1457	0,0962	0,0276
55	0,1264	0,0310	0,1456	0,1008	0,0333
60	0,1277	0,0357	0,1455	0,1046	0,0387

Imunofluorescenčný štandardný postup na analýzu vplyvov skúšaných zlúčenín na morfológiu mitotických vretenovitých mikrotubúl v bunkách

Zlúčeniny, ktoré sa viažu k tubulínu alebo k mikrotubulám typicky majú veľký a charakteristický vplyv na štruktúru mikrotubúl, vrátane mitotického vretena deliacich sa buniek. Zlúčeniny ako je vincristín a kolchicín, ktoré inhibujú normálnu tubulínovú polymerizáciu spôsobujú ťažké rozvrátenie až vymiznutie vretenových mikrotubúl. Na druhej strane zlúčeniny ako je paclitaxel, ktorý podporuje polymerizáciu tubulínu a stabilizuje mikrotubuly, spôsobuje vznik hutných

-85tubulínových zväzkov alebo agregátov. Tieto vplyvy, spôsobované zlúčeninami možno zviditeľniť imunofluorescenčným farbením fixovaných buniek.

Uskutočnili sa pokusy, v ktorých sa ľudské bunky PC-3 MM2 karcinómu prostaty naniesli na platne (5.10⁴ buniek na komôrku v 8 komôrkovom mikroskopickom sklíčku, ktoré bolo ošetrené poly-D-lyzínom (Biocoat 8-well CultureSlide, Becton Dickinson). Pred pridaním skúšaných zlúčenín sa bunky nechali naviazať a rásť 24 hodín. Zlúčeniny sa pridali v ďalej uvedených koncentráciách. Po ďalších 18 až 20 hodinách kultivácie so zlúčeninami sa bunky fixovali metanolom pri -20 °C priamo na sklíčkach, rehydratovali v fosforečnanom tlmenom roztoku soli a spracovali s myšacou monoklonovou protilátkou k α-tubulínu (kloň DM 1A, Sigma) a následne s F(ab')2 fragmentárni kozieho proti-myšacieho IgG FITC konjugátu (Jackson Immunoresearch). Bunky sa farbili s Hoechst 33258 na zviditeľnenie DNA. Bunky sa pozorovali Zeissovým fluorescenčným mikroskopom s epiilumináciou a digitálne sa zobrazili s použitím videokamery MTI Model DC330 a programového vybavenia Optimas V. Obrazy sa analyzovali pomocou programu Corel PhotoPaint.

Ako je zrejmé z Tab. 17, predstavitelia zlúčenín z tohto vynálezu spôsobujú významné zhlukovanie alebo agregáciu vretenových mikrotubúl v deliacich sa bunkách. Vzhľad mikrotubulových zhlukov bol podobný zhlukom, produkovaným paclitaxelom. Pri skúšaní zlúčenín v ekvi-potentných koncentráciách (to znamená v koncentrácii každej zlúčeniny rovnej osemnásobku jej IC50 hodnoty, zistenej trojdňovou skúškou cytotoxickosti), paclitaxel produkoval prednostne bipolárne štruktúry, v ktorých sa mikrotubuly zdali byť skrátené a zhutnené. Zlúčeniny z tohto vynálezu typicky produkovali dva, tri alebo štyri hutné kruhové zväzky s intenzívnou fluorescenciou. Vincristín a kolchicín, ktoré ničia mikrotubuly, produkovali celkom odlišné útvary od hore uvedených. Tieto výsledky sú konzistentné so záverom, že zlúčeniny z tohto vynálezu podporujú polymerizáciu tubulínu ako paclitaxel.

Tabuľka 17

Hodnotenie vplyvu predstaviteľov zlúčenín podľa vynálezu na morfológiu mitotických vretenovitých mikrotubúl v bunkách PC-3 MM2, sledovaných imunofluorescenčným štandardným farmakologickým skúšobným postupom

Zlúčenina z pokusu číslo	Koncentrácia (μΜ)	Vzhľad mitotických vretenovitých mikrotubúl
35	0,54	menej tesne kondenzované, väčšia rozmanitosť abnormálnych štruktúr vrátane zamotaných špagiet
169	6,41	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
170	1,74	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
175	0,74	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
178	1,91	rigídne tŕne vychádzajúce z centrálneho jadra: vzhľad morského ježa
188	0,24	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
198	2,10	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
208	0,26	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, až do 8 v bunke
211	0,89	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, zhruba kruhových tvarov, 2 až 4 v bunke
Paclitaxel	0,016	hutné, kompaktné, silne fluorescenčné zväzky, typicky bipolárne
Vincristín	0,008	rôzne abnormálne štruktúry, mnohé pripomínajúce čiastočne poškodené vretená
Kolchicín	0,064	takmer celkom depolymerizované mikrotubuly, niekedy s viacerými malými škvrnami so svetlejšou fluorescenciou

Štandardný farmakologický skúšobný postup stanovenia protinádorového účinku u atymickej myši s ľudským nádorovým xenoštepom.

V pokuse sa použili nádory H157 ľudský pľúcny karcinóm, U87MG ľudský glioblastóm, LOX ľudský melanóm a DLD1 ľudský adenokarcinóm hrubého čreva. Bunky sa kultivovali v prostredí RPMI-1640 s L-glutamínom, doplnenom s 10% teplom inaktivovaného fetálneho teľacieho séra, 100 jednotkami penicilínu na 1 ml a 100 pg.mľ¹ streptomycínu. Bunky sa subskutánne injektovali do slabín krížených nu/nu myší. Asi po piatich dňoch sa nádory hodnotili a tie ktoré malí okolo 100 mg

-87sa vybrali na ďalšie použitie. Hmotnosti nádorov sa počítali z meraní dĺžok v dvoch smeroch.

Zlúčeniny sa na pokusy pripravili v kluceli a podávali sa myšiam intraperitoneálnou injekciou (objem 0,5 ml) alebo perorálne s krmivom (objem 0,2 ml). Zlúčeniny z tohto vynálezu sa typicky podávali 14 dní dva razy za deň v dávkach, uvedených v nasledujúcich tabuľkách. Každá pokusná skupina pozostávala z 10 zvierat pokiaľ sa jednotlivo neuvádza inak. Kontrolná skupina (tiež 10 zvierat) dostala iba klucel. Hmotnosti nádorov sa vo väčšine pokusov určovali každých 3 až 5 dní (v jednom pokuse každý 7. deň).

Jednotlivé výsledky sú v Tab. 18 až 28.

Tabuľka 18

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši: porovnanie intraperitoneálneho a perorálneho dávkovania

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 7	Deň 10	Deň 14	Deň 16	Deň 18	Deň 21
Klucel	MTW	121	509	756	1298	1583	1752	2879


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, ip	MTW	128	221	287	567	755	1163	2467
T/C	1,05	0,43	0,38	0,44	0,48	0,66	0,86
P		0,001	0,001	0,001	0,009	0,062	0,282
Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	MTW	125	191	235	489	591	816	1835
T/C	1,03	0,37	0,31	0,38	0,37	0,47	0,64
P		0,0005	0,0003	0,0003	0,0025	0,0065	0,052

Poznámky k Tab. 18:

1. MTW = stredná hmotnosť nádoru = priemerná hmotnosť nádorov u všetkých zvierat v skupine. Každá skupina mala 10 zvierat.

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

3. T/C = MTW ošetrených zvierat v deň n, delené MTW kontrolných zvierat v deň n.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách neuhynulo žiadne zviera.

Tabuľka 19

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši: porovnanie troch hladín perorálneho dávkovania

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 4	Deň 8	Deň 12	Deň 14	Deň 17
Klucel	MTW	117	270	549	1066	1632	2314


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	MTW	127	142	194	428	602	839
T/C	1,08	0,53	0,35	0,40	0,37	0,36
P		0,002	0,001	0,003	0,001	0,001
Zlúčenina 170 12,5 mg/kg bid, po	MTW	126	188	275	464	748	965
T/C	1,08	0,70	0,50	0,44	0,46	0,42
P		0,018	0,005	0,004	0,004	0,002
Zlúčenina 170 6,3 mg/kg bid, po	MTW	121	221	377	643	1030	1147
T/C	1,03	0,82	0,69	0,60	0,63	0,50
P		0,130	0,044	0,023	0,024	0,003

Poznámky k Tab. 19:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách 25 mg a 12,5 mg uhynulo po jednom zvieraťu.

Tabuľka 20

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši: porovnanie perorálneho dávkovania podávaného raz a dva razy za deň

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 4	Deň 9	Deň 12	Deň 14	Deň 18
Klucel	MTW	111	334	577	1037	2237	3782


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, ip	MTW	126	219	287	431	766	1550
T/C	1,14	0,65	0,50	0,42	0,34	0,41
P		0,03	0,01	0,0006	0,0006	0,005
Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	MTW	115	123	158	176	413	817
T/C	1,04	0,37	0,27	0,17	0,18	0,22
P		4E-05	5E-05	2E-06	9E-06	2,5E-05

Poznámky k Tab. 20:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách neuhynulo žiadne zviera.

-90 Tabuľka 21

Hodnotenie vplyvu zlúčenín z príkladov 170, 169 a 133 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 5	Deň 7	Deň 10	Deň 14	Deň 17
Klucel	MTW	119	300	425	638	1385	1940


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, ip	MTW	136	215	253	345	540	1203
T/C	1,14	0,72	0,60	0,54	0,39	0,62
P		0,07	0,05	0,07	0,03	0,10
Zlúčenina 169 25 mg/kg bid, ip	MTW	136	277	425	716	1641	1869
T/C	1,14	0,92	1,00	1,12	1,18	0,96

Zlúčenina 133 25 mg/kg bid, ip	MTW	139	262	367	558	1103	1888
T/C	1,17	0,87	0,86	0,87	0,80	0,97

Poznámky k Tab. 21:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V skupine so zlúčeninou 170 uhynulo 1 zviera.

- 91 Tabuľka 22

Hodnotenie vplyvu zlúčenín z príkladov 170 a 208 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 3	Deň 7	Deň 10	Deň 14	Deň 17	Deň 21
Klucel	MTW	138	213	580	1028	1948	3041	3453


Zlúčenina 170 50 mg/kg bid, potom qd, 'P	MTW	159	123	162	236	391	562	1335
T/C	1,15	0,58	0,28	0,23	0,20	0,18	0,39
P		0,002	0,0005	0,001	0,001	0,0005	0,006
Zlúčenina 208, 50 mg/kg bid, potom qd, 'P	MTW	158	187	287	367	pozri poznámku 5
T/C	1,14	0,92	1,00	1,12	1,18	0,96

Poznámky k Tab. 22:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14; dávky sa podívali dva razy za deň v dňoch 1 až 6 a štyri razy za deň v dňoch 7 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. Dávkovanie zlúčeniny z príkladu 208 sa zastavilo po 10 dňoch pre toxickosť.

6. jedno uhynutie v skupine so zlúčeninou 170.

-92 Tabuľka 23

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 35 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 6	Deň 10	Deň 14	Deň 18	Deň 21	deň 25
Klucel	MTW	87	255	334	721	1212	1148	2076


Zlúčenina 35 50 mg/kg bid, ip	MTW	91	305	514	1372	2192	2296	2154
T/C	1,05	1,20	1,54	1,90	1,81	2,00	1,04
P
^Doznámky k'	ľab. 23:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách neuhynulo žiadne zviera.

Tabuľka 24

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 188 na rast ľudského H 157 pľúcneho karcinómu u atymickej myši

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 4	Deň 7	Deň 10
Klucel	MTW	139	325	516	942


Zlúčenina 188 50 mg/kg bid, ip	MTW	154	385	560	1037
T/C	1,11	1,18	1,08	1,10
P		0,15	0,33	0,31

-93Poznámky k Tab. 24:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 10.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. Dávkovanie zlúčeniny z príkladu 188 sa po 10 dňoch zastavilo pre toxickosť.

Tabuľka 25

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského U87MG glioblastómu u atymickej myši: porovnanie troch hladín intraperitoneálneho dávkovania

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 4	Deň 7	Deň 10	Deň 14	Deň 17	Deň 19
Klucel	MTW	160	258	406	504	1025	1656	2257


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	MTW	156	134	145	111	144	200	296
T/C	0,98	0,52	0,36	0,22	0,14	0,12	0,13
P		2E-07	8.6E-07	1.5E-08	6.9E-09	3.3E-09	2.8E-06
Zlúčenina 170 10 mg/kg bid, Ip	MTW	156	190	232	314	664	1155	1896
T/C	0,98	0,74	0,57	0,62	0,65	0,70	0,84
P		0,0010	0,0001	0,0005	0,0027	0,0084	0,174
Zlúčenina 170 5 mg/kg bid, ip	MTW	161	213	320	414	849	1631	2567
T/C	1,01	0,83	0,79	0,82	0,83	0,99	1,14
P		0,028	0,052	0,100	0,157	0,462	0,259

Poznámky k Tab. 25:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = p hodnota Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách nenastalo uhynutie zvieraťa.

Tabuľka 26

Hodnotenie vplyvu predstaviteľov zlúčenín z tohto vynálezu na rast ľudského

U87MG glioblastómu u atymickej myši

Ošetrenie	Ukazovateľ	Deň 0	Deň 3	Deň 7	Deň 9
Klucel	MTW	128	213	363	537


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	MTW	128	138	120	112
T/C	1,00	0,65	0,33	0,21

Zlúčenina 211 25 mg/kg bid, Ip	MTW	130	171	266	374
T/C	1,02	0,80	0,73	0,70

Zlúčenina 198 25 mg/kg bid, ip	MTW	127	198	305	559
T/C	0,99	0,93	0,84	1,04

Zlúčenina 178 25 mg/kg bid, ip	MTW	124	112	pozri poznámku 4
T/C	0,97	0,53
Zlúčenina 175 25 mg/kg bid, po	MTW	138	176	239	433
T/C	1,08	0,83	0,66	0,81

Zlúčenina 35 25 mg/kg bid, Ip	MTW	135	180	226	427
T/C	1,05	0,85	0,62	0,80
Zlúčenina 169 25 mg/kg bid, ip	MTW	136	187	254	464
T/C	1,06	0,88	0,70	0,86

Poznámky k Tab. 26:

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 9.

4. Pre toxickosť sa zlúčenina z príkladu 178 prestala po 4 dňoch podávať.

5. V pokusných skupinách nenastalo uhynutie zvieraťa.

Tabuľka 27

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského LOX melanómu u atymickej myši; porovnanie intraperitoneálneho a perorálneho podávania

Ošetrenie	ukazovateľ	Deň 0	Deň 7	Deň 14
Klucel	RTG	1	11,51	40,53


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, ip	RTG	1	4,91	14,77
T/C	1	0,43	0,36
P		0,05	0,08
Zlúčenina 170 10 mg/kg bid, Ip	RTG	1	8,06	35,55
T/C		0,70	0,88
P		0,38	0,53

Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	RTG	1	10,17	40,49
T/C		0,88	1,00
P		0,61	0,53

Poznámky k Tab. 27:

1. RTG (relative tumor growth) = pomerný rast nádoru = stredná hmotnosť nádoru v deň n delená strednou hmotnosťou nádorov rovnakej skupiny v deň 0. Kontrolná skupina mala 10 zvierat, v ostatných skupinách po 5 zvieratách.

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

3. T/C = RTG ošetrených zvierat v deň n, delené RTG kontrolných zvierat v deň n.

4. p = hodnota p zo Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách sa nezaznamenalo uhynutie zvieraťa.

Tabuľka 28

Hodnotenie vplyvu zlúčeniny z príkladu 170 na rast ľudského DLD1 karcinómu hrubého čreva u atymickej myši; porovnanie intraperitoneálneho a perorálneho podávania

Ošetrenie	ukazovateľ	Deň 0	Deň 7	Deň 14	Deň 21
Klucel	RTG	1	3,17	9,62	18,11


Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, ip	RTG	1	3,60	8,08	14,58
T/C		1,14	0,84	0,81
P		0,87	0,20	0,31
Zlúčenina 170 25 mg/kg bid, po	RTG	1	3,95	9,64	17,32
T/C		1,25	1,00	0,96
P		0,96	0,56	0,48

-97 Poznámky k Tab. 28

1. RTG (relative tumor growth) = pomerný rast nádoru - stredná hmotnosť nádoru v deň n delená strednou hmotnosťou nádorov rovnakej skupiny v deň 0. Každá skupina pozostávala z 10 zvierat.

2. Zvieratá boli ustájené v deň 0 a dávky dostávali v dňoch 1 až 14.

4. p = hodnota p zo Študentovho testu.

5. V pokusných skupinách sa nezaznamenalo uhynutie zvieraťa.

Na základe uvedených výsledkov štandardných farmakologických skúšobných postupov sú zlúčeniny podľa tohto vynálezu užitočné ako látky na liečbu, inhibíciu alebo ovládanie rastu rakovinových nádorových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov, ktorí takú liečbu alebo inhibíciu potrebujú, interakciou s tubulínom a mikrotubulami podporou polymerizácie mikrotubúl. Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sú tiež užitočné na liečbu alebo prevenciu viacnásobnej liekovej rezistencie (MDR). Účinná dávka účinnej zložky bude rôzna v závislosti od jednotlivej použitej zlúčeniny, spôsobu podávania a úpornosti liečeného stavu. Vo všeobecnosti sa ale budú dosahovať uspokojivé výsledky vtedy, ak sa zlúčeniny podľa tohto vynálezu podávajú v množstvách od približne 0,10 do približne 100 mg.kg’¹ telesnej hmotnosti na deň. Výhodné režimy pre optimálne výsledky môžu byť 1 mg.kg'¹ do 20 mg.kg’¹ telesnej hmotnosti na deň a také dávkové jednotky predstavujú použitie od približne 70 mg do približne 1400 mg účinnej zlúčeniny u subjektu s telesnou hmotnosťou približne 70 kg v priebehu 24 hodín.

Dávkový režim liečby cicavcov možno upravovať tak, aby sa dosiahla optimálna terapeutická odozva. Napríklad, denne možno podávať niekoľko čiastkových dávok, alebo dávku možno úmerne znižovať podľa požiadaviek terapeutickej situácie. Praktickou výhodou je určite skutočnosť, že uvedené účinné zlúčeniny možno podávať ktorýmkoľvek bežným spôsobom ako je napríklad perorálne podávanie, intravenózne podávanie, intramuskulárne podávanie alebo subkutánne spôsoby podávania. Účinné zlúčeniny možno perorálne podávať napríklad s inertným riedidlom alebo s asimilovateľným jedlým nosičom, alebo uvedenú zlúčeniny možno uzatvoriť do tvrdých alebo mäkkých želatínových kapsúl,

-98alebo ich možno lisovať do tabliet, alebo ich možno priamo zabudovať do stravy. Na perorálne terapeutické podávanie možno tieto zlúčeniny zahrnúť spolu s pomocnými látkami a použiť vo forme tabliet na prehltnutie, bukálnych tabliet, pastiliek, kapsúl, elixírov, suspenzií, sirupov, oblátok a podobne. Také farmaceutické prostriedky a prípravky by mali obsahovať najmenej 0,1 % účinnej látky. Percentuálny podiel účinnej látky v farmaceutických prostriedkoch alebo v prípravkoch možno samozrejme meniť a bežne môže byť medzi približne 2 % do 60 % hmotnosti prostriedku alebo prípravku. Množstvo účinnej látky v uvedených farmaceutický užitočných prostriedkoch je také, aby sa dosiahlo vhodné dávkovanie podávaného liečiva. Výhodné prostriedky alebo prípravky podľa tohto vynálezu sa pripravia tak, aby sa dosiahla perorálna jednotková dávková forma medzi 10 a 1 000 mg účinnej zlúčeniny.

Tablety, pastilky, kapsuly a podobné liekové formy môžu obsahovať tiež nasledujúce látky: spojivo ako je tragant, akácia, kukuričný škrob alebo želatína; pomocné látky ako je fosforečnan divápenatý; látku podporujúcu rozpad ako je kukuričný škrob, zemiakových škrob, kyselina algínová a podobné; mastivo ako je stearan horečnatý; sladidlo ako je sacharóza, laktóza alebo sacharín; alebo chuťové prísady ako je mäta, ligurček, alebo višňová príchuť. Ak jednotková dávková forma je kapsula, potom môže obsahovať popri hore uvedených materiáloch aj tekutý nosič. Farmaceutické prostriedky alebo prípravky môžu ďalej obsahovať rôzne iné materiály ako sú povlaky alebo iné látky upravujúce fyzikálnu formu dávkovej jednotky. Napríklad tablety, pastilky alebo kapsuly môžu byť natierané šelakom, cukrom alebo ich kombináciou. Sirup alebo elixír môže obsahovať účinnú látku, sacharózu ako sladidlo, metyl a propylparabény ako konzervačné látky, farbivo a príchuť ako je višňová alebo pomarančová príchuť. Každý materiál použitý na prípravu jednotkovej dávky musí byť samozrejme farmaceutický čistý a tiež v podstate netoxický v takých množstvách, ktoré sa používajú. Uvedené účinné zlúčeniny možno naviac zabudovať aj do prípravkov a formulácií s riadeným uvoľňovaním liečiva.

Uvedené účinné zlúčeniny možno podávať tiež parenterálne alebo intraperitoneálne. Účinné zlúčeniny vo forme voľných zásad alebo ich farmaceutický prípustných solí možno pripraviť ako roztoky alebo suspenzie vo vode, vhodne

-99zmiešané s tenzidom ako je hydroxypropylcelulóza. Disperzie možno pripraviť tiež v glycerole, tekutých polyetylénglykoloch a v ich zmesiach s olejmi. Aby sa zabránilo rastu mikroorganizmov v bežných podmienkach skladovania a použitia obsahujú tieto formulácie konzervačnú látku.

Uvedené liekové formy vhodné na injekčné použitie zahŕňajú sterilné vodné roztoky alebo disperzie a sterilné prášky na nepredvídanú rýchlu prípravu sterilných injekčných roztokov alebo disperzií. Uvedené liekové formy musia byť vo všetkých prípadoch sterilné a musia byť tekuté v takom rozsahu, aby sa dali ľahko podávať injekčnou striekačkou. V podmienkach prípravy a skladovania musia byť stále a musia byť upravené proti kontaminácii účinkom mikroorganizmov ako sú baktérie a plesne. Nosič môže byť rozpúšťadlo alebo dispergačné prostredie obsahujúce, napríklad, vodu, etanol, polyól (napríklad glycerol, propylénglykol a tekutý polyetylénglykol), ich vhodné zmesi a rastlinné oleje.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce Príklady 1 až 275 uvádzajú predstaviteľov zlúčenín podľa tohto vynálezu, ktoré sú užitočné ako promótory polymerizácie mikrotubúl a ako protirakovinové látky.

Príklad 1

7-(1-Azepanyl)-5-chlór-6-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 2

5-Chlór-6-(2,6-difluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príkald 3

5-Chlór-6-(4-metoxyfenyl )-7-(1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 4

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

- 100 -

Príklad 5

7-(1-Azepanyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 6

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-metyl-1 -pi perid i nyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín

Príklad 7

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimidín

Príklad 8

Metyl-[[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl](metyl)amino]acetát

Príklad 9

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-A/-( 1,1,3,3-tetrametylbutyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín

Príklad 10

7-(1-Azepanyl)-5-chlór-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 11

7-(1 -Azepanyl)-6-(4-brómfenyl)-5-chlór[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 12

5- Chlór-7-( 1 -piperid inyl )-6-[2-(trifluórmetyl)fenyl][1,2,4] triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 13

6- (4-terc-Butylfenyl)-5-chlór-7-(4-metyl-1 -piperid i nyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 14

5-Chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 101 -

Príklad 15

5- Chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(3-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 16

6- (4-Brómfenyl)-5-chlór-7-(3-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín

Príklad 17

5-Chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 18

5-Chlór-6-(2,6-dichlórfenyl)-7-(2-metyl-1-pyrolidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 19

5-Chlór-6-(2-chlórfenyl)-7-(2-metyl-1 -pyrol id inyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 20

7- (1 -Azepanyl)-5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 21

5-Chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 22

5- Chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(2-metyl-1 -pi perid i nyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín

Príklad 23

6- (4-ŕerc-Butylfenyl)-5-chlór-7-(2-metyl-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 24

5-Chlór-7-(2-metyl-1 -pi perid inyl )-6-[3-(trifl uórmetyl )fenyl][ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 102 -

Príklad 25

Dietylester kyseliny 2-[6-(2,6-difluórfenyl)-5-etoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]malónovej

Príklad 26

7-(Azepanyl)-5-chlór-6-{2-chlór-6-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 27

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/\/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 28

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amin

Príklad 29

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-[(2_l2-dich!órcyklopropyl)metyl]-/V-metyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 30

1-[5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-3-piperidinol

Príklad 31

A/-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-5-chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 32

5-Chlór-6-(2,5-difluórfenyl)-/V-dodecyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 33

5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

-103 Príklad 34

A/-[5-Chlór-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-A/-izopropylamín

Príklad 35

5-Chlór-A/-etyl-/V-(2-metyl-2-propenyl )-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 36

A/-Alyl-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/\/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 37

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 38

5-Chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-/\/-cykloheptyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 39

5-Chlór-6-(3-chlór-4-metoxyfenyl)-7-(3,3-dimetyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 40

5-Chlór-A/-(3-chlórpropyl)-/V-metyl-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín

Príklad 41

7-(1-Azokanyl)-5-chlór-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 42

5-Chlór-6-(2,6-difl uórfenyl)-7-(3,6-d i hyd ro-1 (2H )-pyrid i nyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 104 -

Príklad 43

7-(1-Azokanyl)-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 44

5-Metoxy-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín

Príklad 45 [5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]metanol

Príklad 46

1-[5-Chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-4-piperidinol

Príklad 47

5-Chlór-7-(4-chlór-1 -piperid inyl)-6-(2,6-difl uórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 48

5-Chlór-7-(4-tiomorfolinyl)-6-(2,3,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

Príklad 49

5-C hlór-6-(2,6-d ifluórfenyl )-7-(2,4-d i metyl-1 -piperid i nyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín

Príklad 50

7-(4-Metyl-1 -piperidinyl)-5-amino-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 51

5-Chlór-6-(2,6-difluórfenyl )-7-(2,5-dihydro-1 M-pyrol-1-yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 52

- 105 5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2,5-dimetyl-2,5-d ihydro-1 /-/-pyrol-1 -yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 53

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-etyl-1 H-ϊ m id azol-1 -y I )[1,2,4] triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 54

7-(4-Bróm-1 -pi perid i ny I )-5-chlór-6-(2-chl ór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 55

5- Chlór-6-(2-metylfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 56

6- (2-Brómfenyl)-A/-(sek-butyl)-5-chlór[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 57

5-chlór-/V-etyl-6-(4-metoxyfenyl)-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 58

5-Chlór-6-(4-metoxyfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin

Príklad 59

5-Chlór-7-(4-chlór-1 -pi periel i nyl )-6-[2-(trifl uórmetyl )feny I] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 60

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[4-(trifluórmetyl)-1 -piperid inyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin

- 106 Príklad 61

7-(4-B ró m-1 -pi pe rid i nyl )-5-ch lór-6-(2,6-d ifluó rfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 62

7-(4-Bróm-1 -piperidinyl)-5-chlór-6-(2-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 63

5-Chlór-/V-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJ- pyrimidín-7-amín

Príklad 64

5-Chlór-A/-izopropyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 65

5-Chlór-7-(4-tiomorfolinyl)-6-(2,4,6-tnfluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 66

7-(1 -Azepanyl)-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrim id ín

Príklad 67

5-Chlór-6-(2-cľilór-6-fluórfenyl)-7-[2-(1-pyrolidinyl)-1-cyklopentén-1-yl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin

Príklad 68

5-Chlór-7-(4-izopropyl-1 -piperidinyl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 69

5-Chlór-7-(2,4-dimetyl-1 -piperidinyl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

Príklad 70

5-Chlór-7-[etyl(2-metyl-2-propenyl)amino]-6-{4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

- 107 Príklad 71

7-(1 -Azepanyl)-5-chlór-6-{4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 72 /V-Bicyklo[2.2.1]hept-2-yl-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-amín

Príklad 73

5-Chlór-6-(2,6-difluórfenyl )-A/-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 74

5-Chlór-6-(2-chlórfenyl)-A/-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 75

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórbenzyl)-7-tetrahydro-2-furanyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 76

7-(Alylsulfanyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 77

5-Chlór-/\/-etyl-6-mezityl-/\/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 78

5-Chlór-/V-etyl-6-(2-metoxyfenyl)-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 79

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-hexyl[1,2_l4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 80

5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperid i nyl )-6-[4-(metylsulfanyl )feny l][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 108Príklad 81

5-Chlór-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 82

A/-(se/<-Butyl)-5-chlór-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 83

5-Chlór-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl]-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 84

5-Chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 85

7-(1 -Azepanyl)-5-chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 86

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(2,2,2-trifluóretyl)sulfanyl][1,2,4]tríazolo[1,5-aJpyrimidín

Príklad 87

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4,4-dimetyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 88

5-Chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 89

- 109 -

5-Chlór-6-[2,6-dichlór-4-(trifluórmetyl)fenyl]-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 90

5-Chlór-6-(3,5-difluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrimid ín

Príklad 91

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(izopropylsulfanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 92

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-tetrahydro-2-furanyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 93

4- [5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperid inyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl]anilín

Príklad 94

A/-{4-[5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a] py rim id í η-6-y Ijfenyl}acetamid

Príklad 95 [5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]metylacetát

Príklad 96

5- Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(chlórmetyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 97

Dietyl-2-[6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-yl]malonát

Príklad 98

7-(1 -Azepanylmetyl)-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

-110 Príklad 99

W-Alyl-5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-hexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 100

5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperid i nyl )-6-[4-(trifl uórmetoxy )fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 101

5-Chlór-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a] pyrimid í n

Príklad 102

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-/V-(cyklopropylmetyl)-/V-propyl[1₎2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 103

5-Chlór-7-(2-metyl-1 -piperid inyl )-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]tríazolo[1,5-a]pyrimid ín

Príklad 104

5-Chlór-6-{2-chlór-4-nitrofenyl}-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 105

5- Chlór-6-(4-chlór-2,3,5,6-tetrafluórfenyl)-A/-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 106

4-[5-Chlór-2-metyl-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl]-A/,A/dimetylanilín

Príklad 107

6- (2-Chlór-6-fluórfenyl)-5-metyl-7-(4-metyl-1 -piperid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 111 -

Príklad 108

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(2-(1-pyrolidinyl )-1-cyklohexén-1-yl][1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

Príklad 109

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(metoxymetyl)(1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 110

5-Chlór-6-{2-chlór-4-nitrofenyl}-7-[etyl(2-metyl-2-propenyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 111

5-Bróm-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(izopropylsulfanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 112

5-Chlór-/V-cyklopentyl-6-(4-etoxy-2,3,5,6-tetrafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 113

5- Chlór-/V-rnetyl-/V-(2-rnetyl-2-propenyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 114

4-Bróm-1 -[5-chlór-6-(2-chlór-6-f luórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-yl]butylacetát

Príklad 115

Dietyl-2-alyl-2-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]oxyjmalonát

Príklad 116

6- (2-Chlór-6-fluórfenyl)-/\/-etyl-5-metyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

-112-

Príklad 117

A/-butyl-5-chlór-A/-etyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad118

6- (2-Chlór-6-fluórfenyl)-5-(difluórmetoxy)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 119

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(4-chlórfenyl)sulfanyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 120

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[(2-metoxyfenyl)sulfanyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 121

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-A/-( 1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín-

7- amín

Príklad 122

5-Chlór-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 123

5-Chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 124

5-Chlór-6-(4-fluórfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín

Príklad 125

-113 5,7-Bis(4-metyl-1 -piperidinyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a] pyrim id í n

Príklad 126

5-Chlór-6-(2-metylfenyl)-A/-(1,2,2-trimetyl propyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]py ri mid í n-7amín

Príklad 127

5- Chlór-6-(2,4,5-trifluórfenyl)-/V-( 1,2,2-trimetylpropyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 128

6- (2-Brómfenyl)-5-chlór-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 129

5-Chlór-/V-izobutyl-A/-(2,2,2-trifluóretyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín

Príklad 130

5-Chlór-A/-izobutyl-6-(2-metylfenyl)-A/-(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 131

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 132

5-Chlór-6-(2,6-d ifl u órfenyl )-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 133

5-Ch lór-A/-(2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

-114 Príklad 134

A/-Alyl-5-chlór-A/-izobutyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 135

5-Chlór-A/-(1,2-dimetylpropyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 136

5-Chlór-A/-izopropyl-A/-metyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 137

5-Chlór-A/-izopropyl-/V-(2,2,2-trifluóretyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 138

7-Butyl-5-chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 139

5-Chlór-/V-(1 -fenyletyl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 140

5-Chlór-6-(2-chlórfenyl)-/V-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 141

5-Chlór-/V-etyl-A/-izobutyl-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 142

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-hexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

-115Príklad 143

5-Chlór-6-(2-metylfenyl)-A/,/V-bis(2,2,2-trifluóretyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 144

5-Chlór-/V-cyklopentyl-A/-metyl-6-(2,3A5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 145

7-Butyl-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 146

5-Chlór-A/-( 1,2-dimetylpropyl)-/\/-metyl-6-(2,3,4,5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 147

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 148

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(2-metylpropanyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 149

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-ajpyrimidín

Príklad 150

5-Chlór-A/-( 1,2-dirnetylpropyl)-/V-metyl-6-(2_l4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín

Príklad 151

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín

- 116 Príklad 152

5-Chlór-6-(2-bróm-5-chlórfenyl)-/V-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 153

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(3,3,3-trifluórpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 154

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(3-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 155 [5-Chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-(1 -p-tolyl-etyl)amín

Príklad 156

5-Chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín;

Príklad 157

5-Chlór-7-cyklohexyl-6-(2,3,4_I5,6-pentafluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 158

5-C h lór-6-(2-chlór-6-fl uó rfenyl )-7-(4,4-d ifl uór-1 -pi perid inyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 159

7-(Bicyklo[2.2.1]hept-2-ylamino)-5-chlór-6-{2-fluór-4-nitrofenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 160

5-Chlór-6-{2-fluór-4-nitrofenyl}-7-(4-metyl-1 -piperidinyl )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín

Príklad 161

- 117 -

5-(Metylsulfanyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 162 [5-Ch ló r-6-(2,4,6-trifl uórfenyl)[ 1,2,4]triazolo[ 1,5-a] pyri m id í η-7-yl] (2,2,2-trifluór-1 fenyletyl)amín

Príklad 163

5-Chlór-A/-[1 -(trifluórmetyl)propyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín7-amín

Príklad 164

5- Bróm-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2₎4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 165

6- (2-Chlór-6-fluórfenyl)-7-cyklohexyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-amín

Príklad 166 [5-Chlór-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]-(2-metyl-1 -trifluórmetylpropyl)amín

Príklad 167

5-Chlór-7-(3-cyklohexén-1-yl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 168

5-Chlór-7-(1-cyklohexén-1-yl)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 169

5-Ch lór-/V-[( 1 R)-2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[ 1,2,4]triazolo [1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 170

-118 -

5- Chlór-A/-[( 1 R)-2,2,2-trif I uór-1 -metyletyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 171

6- (2,4-Difl uórfenyl )-5-chlór-/V-(2,2,2-trifl uór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 172

5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 173

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-/V-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 174

5-Chlór-7-cyklohexyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2_I4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 175

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-/V-[(1S)-2,2,2-trifluór-1-metyletyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 176

7- Cyklohexyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 177

5-Chlór-7-(4-fluórcyklohexyl )-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 178

5-Chlór-6-(2,6-dichlór-4-fluórfenyl )-7-(3,3,3-trifluórpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín

- 119 Príklad 179 /V-(sek-Butyl)-5-chlór-6-(2,6-dichlór-4-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrirnidín-7amín

Príklad 180

4- {5-Chlór-7-[(2,2₎2-trifluór-1-metyletyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl}-

3,6-difluórfenol

Príklad 181

5- Chlór-7-(3-cyklohexén-1 -yl)-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin

Príklad 182

5-Chlór-6-(2,6-difliiór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 183

5-Chlór-A/-cyklopentyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 184

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl )-7-(3,6-dihydro-l (2H)pyridinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 185

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-tiomorfolinyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 186

7-(1 -Azepanyl)-5-chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 187

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-/V-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

- 120 -

Príklad 188

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 189

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(4-fluórcyklohexyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 190

Kyselina 6-(4-{5-chlór-7-[(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)amino][ 1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6-yl}-3,5-difluórfenoxy)hexánová

Príklad 191

2,6-Difluór-4-[(2-fluóretoxy)fenyl]-/V-(2,2_l2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]- pyrimidín-7-amín

Príklad 192

5-Chlór-/V-izopropyl-6-{2-[(trifluórmetyl)sulfanyl]fenyl}[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-amin

Príklad 193

5-Chlór-A/-[4-(trifluórmetyl)fenyl]-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-amin

Príklad 194

5-Chlór-A/-(4,4_I4-trifluór-2-metylbutyl)-6-(2,4_l6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-aJpyrimidín-7-amín

Príklad 195

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-(3-metyl-3-butenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 121 Príklad 196

5-Chlór-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-7-izobutyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 197

7-Cyklopentyl-6-(2,6-difluór-4-metoxyfenyl)-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 198

5-C hlór-6-(2-tienyl )-Λ/-[( 1 F?)-2,2,2-trifluór-1 -metyletyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 199

4- [5-C h lór-7-(2,2,2-trifluór-1 -metyl-etylamino)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a] pyrim id í n-6-yl]-3,5difluór-fenol

Príklad 200 {5-Chlór-6-[2,6-difluór-4-(2,2,2-trifluór-etoxy)-fenyl]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7yl}-(2,2,2-trifluór-1-metyl-etyl)amín

Príklad 201

5- Chlór-6-{2,6-difluór-4-(metoxyfenyl)-/V-(2,2₎2-trifluór-1-metyletyl)[1₎2,4]triazolo- [1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 202 (5-Chlór-6-{4-[2-(2-etoxyetoxy)-etoxy]-2,6-difluórfenyl}[1 ^^Jtriazolofl.S-alpyrimidín7-yl)-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amín

Príklad 203 (5-Chlór-6-{2_l6-difluór-4-[2-(2-metoxy-etoxy)etoxy]-fenyl}-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl)-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amín

Príklad 204

- 122 5-Chlór-6-[2,6-difluór-4-(3-furán-3-ylmetoxy)fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]A/-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amín

Príklad 205

5-Chlór-6-(2,5-difluór-4-metoxyfenyl)-A/-(1,2,2-trimetylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 206

7-Cyklohexyl-6-[2,6-difluór-4-(2-metoxyetoxy)fenyl]-5-metoxy[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 207

5-Chlór-6-(2-fluór-4-metoxy-6-chlórfenyl)-A/-(2_l2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 208

5-Chlór-6-[2,6-difluór-4-(2-fluóretoxy)fenyl]-/\/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 209

2-[2-(4-{5-Chlór-7-[(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)amino][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-6yl}-3,5-difluórfenoxy)etoxy]etanol

Príklad 210

5-Chlór-6-(2,3-difluór-4-metoxyfenyl)-A/-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 211

5-Chlór-6-{4-(2-fluóretoxy)-2,6-difluórfenyl}-A/-(2,2,2-trifluór-1 -metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 212

- 123 5-Chlór-A/-(4-chlórbenzyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 213

5-Ch lór-6-(2-ch lór-6-fl uórfenyl )-7-[4-(2-py rid inyl-1 -piperazinyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 214

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-N-(1-etylpentyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 215

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[4-(2-chlórfenyl)-1 -piperazinyl] [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 216

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-[4-(4-metoxyfenyl)-3-metyl-1-piperazinyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 217

5-Chlór-/V-cyklopentyl-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1_l2₎4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 218

5-Chlór-7-fenoxy-6-(4-metoxy-fenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 219

5-Chlór-/V-cyklopentyl-6-(4-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 220

5,7-Difenoxy-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 221

5-Chlór-A/-cyklopentyl-6-(2-chlórfenyl)[1,2_l4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

- 124Príklad 222

5-Chlór-A/,A/-dietyl-6-[4-metoxyfenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 223

5-Chlór-/V, /V-dietyl-6-[2,4-dichlórfenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-am ín

Príklad 224

A/-Bicyklo[2.2.1 ]hept-2-yl-5-chlór-6-(2,4-dichlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 225

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl )-7-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]dec-8-yl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 226

5-Kyano-7-(4-metyl-1-piperidinyl)-6-(2-chlór-5-fluórfenyl)(1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 227

5-(Metylsulfanyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 228

5-(Metylsulfanyl)-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-(2-chlór-5-(metylsulfanyl)fenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 229

5-Chlór-7-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-yl)-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 230

- 125 5-Chlór-N-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-(4-(metylsulfanyl)fenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 231

2-Metyl-6,7-di-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid in

Príklad 232

2-Metyl-6-fenyl-7-(4-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 233

2-Trifluórmetyl-6-fenyl-7-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 234

5,7-Difenoxy-6-(2-metylpropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 235

5-Chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-A/-(izopropyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 236

5-Bróm-6-(4-brómfenyl)-7-dimetylamino[1,2_>4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 237

5-Bróm-6-(4-trifluórmetylfenyl)-7-dimetylamino[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 238

5-Chlór-6-(3,4-difluórfenyl)-7-dimetylamino[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 239

5-Chlór-6-(4-trifluórmetylfenyl)-/\/-(etyl)[1,2_l4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 240

7-(1 -Azepanyl)-5-chlór-6-(4-terc-butylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

- 126 Príklad 241

Etyl-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]arnino}acetát

Príklad 242

Dietyl-5-chlór-6-(2,6-difluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-malonát

Príklad 243

5-Chlór-6-(2,5-difluórfenyl)-/V-(3-metyl-2-butenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7amín

Príklad 244

Príklad 245

5-Ch lór-6-(2,6-difl uórfenyl )-7-(2-etyl-1 H-imidazol-1 -yl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid in

Príklad 246

5-Chlór-A/,A/-dietyl-6-[4-(metylsulfanyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 247

Etylester kyseliny [6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-7-(4-metyl-1-piperidinyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-5-yl]-octovej

Príklad 248

5-Chlór-A/-etyl-A/-(2-metyl-2-propenyl)-6-(4-fenoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 249

Dimetylester kyseliny 2-[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]-pyrimidín-7-yl]malónovej

- 127 Príklad 250

Dietylester kyseliny 2-{[5-chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín7-yl]oxy}-2-izobutylmalónovej

Príklad 251

2-[5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ίη-7-yl]-1,3-cyklohexándión

Príklad 252

2-[5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-yl]cyklohexanón

Príklad 253

5-Chlór-7-(3-nitro-4-metylanilíno)-6-(2,4,6-trifluórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 254

7-Cyklohexyl-6-[2,6-difluór-4-(2-metoxyetoxy)fenyl]-5-(2-metoxyetoxy)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 255

7-(3-Brómfenyl)-2-etyl-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 256

7-(3-Brómfenyl)-6-(3-chlórfenyl)-2-etyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 257

7-(4-Brómfenyl)-2-etyl-6-[4-(trifluórmetyl)fenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 258

5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)-A/-(3,4,5-trimetoxybenzyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 259

- 128 7-(2-Benzyl-4,5-d ihyd ro-1 H-imidazol-1 -yl)-5-chlór-6-(2-ch lór-6-fl uórfenyl )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimid ín

Príklad 260 /V-4-[5-Chlór-6-(2-chlór-6-fluórfenyl)[1,2,4]triazolo[ 1,5-a] pyrim id í n-7-yl-A/, Λ/-1 -dietyl1,4-pentándiamín

Príklad 261

5-Chlór-/V-(3-metyl-2-butenyl)-6-fenyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 262

5-Dimetylamino-6-fenyl-/V-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin-7-amín

Príklad 263

5- Chlór-7-[(2-furylmetyl)sulfanyl]-6-(4-metoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 264

6- [1 ,ľ-Bifenyl]-4-yl-5-chlór-A/-cyklopentyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 265

6-[4-(Benzyloxy)fenyl]-5-chlór-A/-izopropyl[1,2,4] triazol o[ 1,5-a]pyrimid ín-7-amín

Príklad 266

5-Chlór-/V-[(2,2-dichlórcyklopropyl)metyl]-6-(3,4,5-trimetoxyfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]-pyrimidín-7-amín

Príklad 267

A/-Cyklopentyl-6-(2-fluórfenyl)-5-hydrazíno[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 268

5-Chlór-/V-etyl-6-(2-metylfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

- 129 Príklad 269

6-(4-terc-Butylfenyl)-5-chlór-A/-izopropyl[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amin

Príklad 270

5-Chlór-6-[2,6-difluór-4-[(3-metyl-2-butenyl)oxy]fenyl]-/V-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 271

5-Chlór-6-[2,6-difluór-4-(1-propenyloxy)fenyl]-A/-(2,2,2-trifluór-1-metyletyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 272

5-Chlór-/V-(3-tricyklo[2.2.1.0^2,6]hept-1 -yl )-6-(2,4,6-trifl uórfeny I )[1,2,4]triazolo[ 1,5-a]pyrimidín-7-amín

Príklad 273

5-Azido-7-cyklohexyl-6-(2-fluór-6-chlórfenyl)[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Príklad 274

5-Azido-6-[2-chlór-6-fluórfenyl]-7-(4-metyl-1 -pi perid i ny I )[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidin

Príklad 275

2,5-Dichlór-7-(4-metyl-1 -piperidinyl)-6-[2-chlór-6-fluórfenyl][1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidín

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie substituovaných triazolopyrimidínových derivátov alebo ich farmaceutický prípustných solí na výrobu lieku na liečenie alebo irihibíciu rastu rakovinových nádorových buniek a s tým spojených ochorení cicavcov, ktorí takú liečbu potrebujú.
2. Použitie podľa nároku 1, kde substituovaným triazolopyrimidínovým derivátom je zlúčenina vybraná zo zlúčenín všeobecného vzorca I v ktorom

R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa halogén, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupinu -CN, hydroxy, halogén, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R'je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, tiofénovú skupinu, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú

- 131 skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO2-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO2-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná tricykloalkylová skupina, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, alebo 3- až 6- členný heterocyklický kruh, voliteľne o/Ťo-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R'je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylová skupina, -S-alkenylová skupina, -SO2arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylová skupina, -SO₂-alkylová skupina, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka,

- 132heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina, cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka alebo 3- až 6-členný heterocyklický kruh, voliteľne orto-kondenzovaný s voliteľne substituovaným fenylovým kruhom;

R^aR^b spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R'je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou skupinou alebo cykloalkylovou skupinou;

R² je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, hydroxy, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, karbamoyl, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupina karboxy, alkoxykarbonylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, benzyloxy, tienyl, heterocyklyl alebo halogén;

R³ je vodík, halogén, alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina aryloxy, -NR^cR^d, benzyloxy, aralkyloxy, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, aryl, hydroxy, karbamoyl, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupina -N₃;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina

- 133 s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkinylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR' kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', v ktorej R'je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka;

R⁴ je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, halogén, kyano, karboxy, alkoxykarbonyl s 2 až 12 atómami uhlíka, heterocyklyl, halogén, karbamoyl, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, alebo skupina -CF₃;

za predpokladu:

a) keď R¹ je dietylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl,
3,4-dichlórfenyl, 4-chlórfenyl, 3-chlór-4-metoxyfenyl;

- 134 -

b) keď R¹ je dietylamino, R³ je bróm, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl;

c) keď R¹ je izopropylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-benzyloxyfenyl alebo 3,4,5-trimetoxyfenyl;

d) keď R¹ je cyklopentylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 3,4,5trimetoxyfenyl, 2-naftyl alebo 2-stilbén;

e) keď R¹ je 2-aminobicyklo(2.2.1)heptyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 3,4,5- trimetoxyfenyl;

f) keď R¹ je dietylamino, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 4-trifluórmetylfenyl;

g) keď R¹ je 1,1,1-trifluóretoxy, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-chlór-6fluórfenyl;

h) keď R¹ je -SO₂-etyl alebo -SO₂-cyklopentyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R² nie je 2-chlór-6-fluórfenyl;

i) keď R⁴ je vodík, R² je 2-chlór-6-fluórfenyl, potom R¹ a R³ nie sú 1,2,4-triazol;

j) keď R¹ je cyklohexyl, R⁴ je vodík, R² je 2,4,6-trifluórfenyl a potom R³ nie je -OCH₂O₂C(CH₃)₃;

k) keď R¹ je 2-tienyl, R⁴ je etyl, R³ je vodík a potom R² nie je 2-metoxyfenyl, 4metoxyfenyl a 4-trifluórfenyl;

l) keď R² je fenyl, R³ je chlór, R⁴ je vodík, potom R¹ nie je (2E)-7-dimetyl-2,6-oktadienyl, alebo jej farmaceutický prípustná soľ.

3. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -Salebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne

-135substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR’, kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂-cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b.
4. Použitie podľa nároku 2, kde R^a a R^b každé nezávisle znamenajú skupinu -C*H(R^e)(R^f), kde R^e a R^f vzájomne nezávisle od seba znamenajú voliteľne halogénom substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, pričom C* znamená (R) alebo (S) izomér.
5. Použitie podľa nároku 2, kde R² znamená voliteľne substituovanú arylovú skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, skupinu aryloxy, tienyl, benzyloxy, heterocyklyl alebo halogén.
6. Použitie podľa nároku 2, kde R³ znamená halogén, alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu aryloxy, skupinu -NR^cR^d, benzyloxy, aralkyloxy, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu hydroxy, kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupinu -N₃.
7. Použitie podľa nároku 2, kde R⁴ znamená vodík, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu -CF₃.
8. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú

- 136 - alkinylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú alkadienylovú skupinu so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú bicykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -Salebo -NR’, kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SCVcykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, pričom R^aa R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný.
9. Použitie podľa nároku 2, kde R² znamená voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka alebo heterocyklyl.
10. Použitie podľa nároku 2, kde R³ znamená halogén, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu -NR^cR^d, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu kyano, amino, alkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, alebo skupinu -N₃.
11. Použitie podľa nároku 2, kde R⁴ znamená vodík, voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu dialkylamino s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu -CF₃.
12. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R’ je H alebo

- 137 - alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, pričom R^a a R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný.
13. Použitie podľa nároku 2, kde R² znamená voliteľne substituovanú arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka.
14. Použitie podľa nároku 2, kde R³ znamená halogén, skupinu alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu -NR^cR^d, skupinu halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupinu kyano, alebo skupinu -N₃.
15. Použitie podľa nároku 2, kde R⁴ znamená vodík.
16. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa voliteľne substituovanú cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovanú cykloalkenylovú skupinu s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -O-, -S- alebo NR', kde R’ je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -S-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylovú skupinu s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylovú skupinu so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylovú skupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylovú skupinu s 1 až 12 atómami uhlíka a skupinu -NR^aR^b, pričom R^a a R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný; R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina; R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d,

- 138 - halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, kyano, alebo skupina -N₃; R⁴ je vodík.
17. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ znamená skupinu -NR^aR^b, v ktorej R^a a R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný; R²je voliteľne substituovaná fenylová skupina; R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano, alebo skupina -N₃; R⁴ je vodík.
18. Použitie podľa nároku 2, kde

R¹ znamená skupinu -NR^aR^b, v ktorej R^a a R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný;

R² je voliteľne substituovaná fenylová skupina; R³ je halogén, skupina alkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina -NR^cR^d, halogénalkoxy s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina alkyltio s 1 až 12 atómami uhlíka, skupina kyano, alebo skupina -N₃; R⁴ je vodík;

R^a je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadiénylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenyková skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, heterocyklylová skupina, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina;

R^b je vodík, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkadiénylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, voliteľne

- 139 substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je H alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -Salkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -S-alkenylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka, -SO₂-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, -SO₂cykloalkylová skupina s 3 až 8 atómami uhlíka, -SO₂-alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, -O-arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka;

R^aR^b spolu s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh s 3 až 12 v kruhu viazanými atómami, v ktorom najmenej jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 2 až 12 atómami uhlíka; uvedený nasýtený alebo nenasýtený heterocyklický kruh môže byť voliteľne kondenzovaný s arylovou skupinou alebo cykloalkylovou skupinou;

R^c je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 8 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH₂- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^d je vodík, skupina amino, voliteľne substituovaná alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, halogénalkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, voliteľne

- 140 substituovaná alkenylová skupina s 2 až 12 uhlíkovými atómami, voliteľne substituovaná alkadienylová skupina so 4 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkylová skupina s 3 až 10 uhlíkovými atómami, v ktorej jedna skupina -CH2- môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR', kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná cykloalkenylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, v ktorej jedna skupina -CH₂môže byť tiež nahradená skupinou -0-, -S- alebo -NR' kde R' je vodík alebo alkylová skupina s 1 až 12 atómami uhlíka, voliteľne substituovaná bicykloalkylová skupina s 5 až 10 atómami uhlíka, arylová skupina so 6, 10 alebo 14 atómami uhlíka, benzylová skupina, voliteľne substituovaná benzylová skupina alebo heterocyklylová skupina;

R^cR^d spolu a s dusíkovým atómom, na ktorý je každý z nich viazaný znamenajú voliteľne substituovaný heterocyklický kruh s 3 až 8 v kruhu viazanými atómami, v ktorom jedna skupina -CH₂- môže byť voliteľne nahradená skupinou -O-, -S- alebo -NR', v ktorej R' je vodík alebo alkylová skupina s 2 až 20 atómami uhlíka.
19. Použitie podľa nároku 2, kde R¹ znamená skupinu -NR^aR^b, v ktorej R^a a R^b sú voliteľne spojené spolu aj s dusíkom, ku ktorému je každý z nich viazaný; R² je vybrané zo skupiny, ktorá zahŕňa: