SK175699A3

SK175699A3 - Treatment of insulin resistance with growth hormone secretagogues

Info

Publication number: SK175699A3
Application number: SK1756-99A
Authority: SK
Inventors: Philip Albert Carpino; Charles Kwok-Fung Chiu; Bruce Allen Lefker; Lydia Codetta Pan; Judith Lee Treadway; Michael Paul Zawistoski
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 1997-06-25
Filing date: 1998-06-05
Publication date: 2001-04-09
Also published as: NZ500655A; DZ2539A1; CN1152049C; PA8452601A1; EP1000085B1; IL154111A0; US6630487B2; DE69831745T2; WO1998058949A1; JP2005097261A; CN1530107A; CN1259140A; HN1998000088A; ID24345A; US6448263B1; AP9801267A0; AP1145A; IL156465A0; HRP980361A2; KR20010014224A

Description

Sekretagog rastového hormónu, jeho použitie a farmaceutický prostriedok, ktorý ho obsahuje

Oblasť techniky

Vynález sa týka ošetrovania odolnosti proti inzulínu sekretagogml rastového hormónu.

DoteraJSl stav techniky

Rastový hormón, ktorý je sekretovaný hypofýzou, stimuluje rast vSetkých tkanív v tele, ktoré sú schopné rásť. Okrem toho je známe, že rastový hormón má nasledujúce základné účinky na metabolické procesy v tele:

1. na zvýšenú rýchlosť syntézy proteinov v podstate všetkých buniek v tele,

2. na zníženú rýchlosť využitia glycidov v bunkách tela a

3. na zvýšenú mobilizáciu voľných mastných kyselín a na využitie anlnokyselín pre energiu.

Deficit rastového hormónu spôsobuje rôzne medicínske poruchy. U deti spôsobuje trpasličí vzrast. U dospelých dôsledky získanej deficlence rastového faktoru zahŕňajú hlboké zníženie beztukovej hmoty tela a sprievodný nárast celkového tuku v tele, najmä v oblasti trupu. Znížená hmota kostrového a srdcového svalstva a pevnosti svalstva vedie k výzmnému zníženiu výkonnosti. Znižuje sa tiež hustota kostí. Ukázalo sa, že podávanie exogénneho rastového hormónu obracia mnohé metabolické zmeny. Sprievodnými prednosťami terapie je znižovanie LDL cholesterolu a zlepšenie psychickej pohody.

V prípadoch, keď sú žiadúce zvýšené hladiny rastového hormónu, bol problém všeobecne vyriešený poskytovaním exogénneho rastového hormónu alebo podávaním činidla, ktoré stimuluje produkciu a/alebo uvoľňovanie rastového hormónu. V každom prípade vyžadovala peptidylová povaha zlúčeniny, aby bola po2 dávaná injekčné. Spočiatku bola zdrojom rastového hormónu hypofýza mŕtvol určených k pitve. Výsledkom bol drahý produkt sprevádzaný rizikom, že choroba súvisiaca s hypofýzou, by mohla byt prenesená do príjemca rastového hormónu (napríklad Jacob-Creutzfeldova choroba). V poslednom čase sa stal dostupným rekombinantný rastový hormón, ktorý, i ked už neprináša riziko prenosu chorôb, je stále veľmi drahý produkt, ktorý sa musí podávat injekčné alebo nosovým sprejom.

Väčšina deficitu rastového hormónu je spôsobovaná poruchami jeho uvoľňovania a nie primárnou vadou syntézy rastového hormónu hypofýzou. Preto je alternatívnou stratégiou na normalizovanie hladín séra rastového hormónu stimulácia jeho uvoľňovania z predného laloku hypofýzy. Zvýšenie sekrécie rastového hormónu je možné dosiahnuť stimuláciou alebo inhibíciou rôznych neurotransmiterových systémov v mozgu a v hypotalame. Výsledkom je, že sa sleduje vývoj syntetických činidiel, uvoľňujúcich rastový hormón, na stimuláciu sekrécie rastového hormónu hypofýzou, čo môže mat početné prednosti oproti nákladnej a nepohodlnej terapii náhrady rastového hormónu. Pôsobením po fyziologicky regulačných dráhach by väčšina žiadúcich činidiel stimulovala pulzatívnu sekréciu rastového hormónu a nadmerným úrovniam rastového hormónu, ktoré súviseli s nežiadúcimi vedľajšími účinkami exogénneho podávania rastového hormónu, by sa zabránilo pomocou intaktných negatívnych slučiek spätnej väzby.

K fyziologickým a farmakologickým stimulátorom sekrécie rastového hormónu patrí arginín, L-3,4-dihydroxyfenylalanín (L-DOPA), glukagón, vazopresin a inzulínom vyvolaná hypoglykémia, rovnako ako činnosti ako je spánok a cvičenie nepriamo pôsobia na uvoľňovanie rastového hormónu z hypofýzy, pôsobením určitým spôsobom na hypotalamus snáď buď na zníženie sekrécie somatostatinu alebo na zvýšenie sekrécie známeho sekretagogového uvoľňovacieho faktoru (GHRF) rastového hormónu alebo pôsobením neznámeho endogénneho hormónu, uvolňujúceho rastový hormón alebo všetkých týchto faktorov.

Boli vyvinuté iné zlúčeniny, ktoré stimulujú uvolňovanie endogénneho rastového hormónu, ako analógové peptidylové zlúčeniny súvisiace s GRF alebo peptidy podlá amerického patentového spisu číslo 4 411 890. Tieto peptidy, i keď sú menšie ako rastové hormóny, sú napriek tomu citlivé na rôzne proteázy Podobne ako pri väčšine peptidov, je ich potenciál pre orálnu biologickú dostupnosť nízky. Patentový spis číslo WO 94/13696 opisuje určité spiropiperidíny a homológy, ktoré podporujú uvolňovanie rastového hormónu.

Zlúčeniny podlá patentového spisu číslo WO 94/11012 a WO 94/13696 sa hodia na liečbu osteoporózy v kombinácii s paratyroidným hormónom alebo s bisfosfonátom.

Vynález sa tiež týka spôsobu liečby stavov rezistentných k inzulínu, ako je od inzulínu nezávislá diabetes mellitus (NIDDM) a znížené glykemické ovládanie spojené s obezitou a so starnutím u cicavcov, ktorí to potrebujú, ktorý spočíva v podávaní uvedeným cicavcom účinného množstva zlúčeniny ďalej definovaného všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijatelnej soli.

Vynález je zameraný na použitie sekretagogov najmä peptidov (GHRP) uvolňujúcich rastový hormón alebo nimetika GHRP ďalej definovaného všeobecného vzorca I, na zlepšenie glykemického riadenia. Od činidiel, ktoré zvyšujú hladinu rastového hormónu sa neočakáva tento účinok, pretože sa všeobecne predpokladá, že rastový hormón je v luďoch a zvieratách diabetogénny. Pri akromegalikoch je využitie glukózy a potlačení produkcie hepatickej glukózy oslabené (I. Hansen a kol., Jún.

J. Physiol. 250: E269, 1986). Pri tejto chorobe nadbytku rastového hormónu bolo škodlivé hospodárenie s glukózou a hyperinzulinémia odvrátená chirurgiou hypofýzy alebo chemote4 rapiou, ktorá znížila hladinu rastového hormónu (S.R. Levin a kol., J. Med. 57, str. 526, 1974; C.M. Feek a kol., J. Clin. Endocrinol. 22, str. 532, 1981). krém toho podávanie rastového hormónu starším jedincom vyvolávalo hyperglykémiu, neznášanie glukózy a hyperinzulinémiu (J.F. Aloia a kol. J. Clin. Endocrinol. Metab. 43, str. 992, 1976; Binnerts a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab. 67, str. 1312, 1988; R. Marcus a kol., J. Clin. Endocrinol. Metab. 70, str. 519, 1990). Preto je terapia rastového hormónu kontraindikatívna pre jedincov s diabetes alebo pre jedincov s nebezpečenstvom diabetes.

Obezita je hlavným rizikovým faktorom u diabetikov a velký podiel pacientov NIDDM je tučných. Obidva stavy sa vyznačujú zvýšenou hladinou cirkulujúceho inzulínu a potlačenou hladinou rastového hormónu. Liečenie rastovým hormónom dospelých s nedostatkom rastového hormónu (J.O.L. Jorgensen a kol., Lancet

I, str. 1221, 1989), tučných žien (B. Richelsen a kol., Am. J. Physiol. 266, E211, 1994) a starších mužov (D. Rudman a kol., Horm. Res. 36 (suppl.l), str. 73, 1991) sa prejavilo zvýšením netučného tela, hepatickej a svalovej hmoty pri znižovaní hmoty tuku. Terapia obezity rastovým hormónom sa zdá preto ako atraktívna s výnimkou diabetogénnych účinkov rastového hormónu.

Alternatívou exogénneho podávania rastového hormónu je terapia, ktorá stimuluje endogénnu sekréciu rastového hormónu. Ukázalo sa, že pacienti a starší jedinci s intaktnou hypofýzou a nedostatkom rastového hormónu majú podstatnú hypofýzovú rezervu rastového hormónu, takže znížené hladiny séra rastového hormónu sú spôsobené hyposekréciou.

Hyposekrécia rastového hormónu v niektorých klinických stavoch (obezita, starnutie, potlačenie glukokortikoidu) je pomerne odolná voči stimulácii GHRH (B.J. Gertz a kol., J.

Clin. Endocrinol. Metab. 79, str.745, 1994; E. Arvat a kol.,

J. Clin. Endocrinol. Metab. 79, str. 1440, 1994; M. Maccario a kol., Metabolism 44, str.134, 1995). Na rozdiel od toho po5 dávanie GHRPb alebo kombinované podávanie GHRH a GHRP môže pri týchto pacientoch vyvolať robustnú odozvu rastového hormónu (J.A. Aloi a kol., J. clin. Endocrinol. Metab. 79, str.943, 1994). Štúdie jednotlivých dávok GHRP ukázali chýbajúci akútny účinok na obeh inzulínu alebo na hladinu glukózy. Inzulín a glukóza neboli všeobecne sledované v chronických štúdiách s výnimkou dokladania neexistencie nepriaznivých zmien (T. Jacks a kol., J.Endokrinol. 143, str. 399, 1993).

Až dosial nebolo použitie GHRP alebo mimetik GHRP na zlepšenie glykemickej regulácie špecificky skúmané. Spôsob liečby odolnosti proti inzulínu u cicavcov, spočívajúci v podávaní zlúčenín všeobecného vzorca I, sa vykonáva prednostne pri pacientoch, ktorí majú funkčnú osu hypotalamu a hypofýzy schopnú sekrečnej odozvy rastového hormónu na GHRP a ktorí sú diabetikmi (typu I alebo typu II) alebo sú odolní proti inzulínu alebo ktorí vykazujú zhoršenú znášanlivosť glukózy.

Vynález sa týka tiež spôsobov liečby alebo prevencie kongestívnej srdcovej poruchy, obezity a ochabnutia spojeného so starnutím u cicavcov, ktorí to potrebujú, pričom toto liečenie spočíva v podávaní uvedeným cicavcom súčasne, postupne alebo v akomkolvek poradí alebo ako kombinácie funkčného somatostatinového antagonisty, ako je a-2 adrenergický agonista, napríklad clonidin, xylazin alebo medetomidin a zlúčeniny ďalej opísaného všeobecného vzorca I. Vynález sa týka tiež spôsobu urýchleného zrastania zlomených kostí a hojenia rán, zmierňovania katabolickej proteínovej odozvy po hlavnej operácii a znižovania zoslabnutia a straty proteínov spôsobované chronickými chorobami u cicavcov, ktorí to potrebujú, ktorý spočíva v podávaní uvedeným cicavcom súčasne, postupne alebo v akomkolvek poradí alebo ako kombinácii funkčného somatostatinového antagonisty, ako je a-2 adrenergický agonista, napríklad clonidin, xylazin alebo medetomidin a zlúčeniny ďalej opísaného všeobecného vzorca I. Clonidin je opísaný v americkom patentovom spise číslo 3 202 660, xylazin je opísaný v americkom patentovom spise číslo 3 235 550 a medetomidin je opísaný v americkom patentovom spise číslo 4 544 664. Ukázalo sa, že a-2 adregenické agonisty spôsobujú uvolňovanie endogénneho rastového hormónu u ludí a u králikov (Celia a kol., Life Sciences 34, str. 447 až 454, 1984; J.Hampshire, N. Altszuler, American Journal of Veterinary Research 42:6, str. 1073 až 1076 1981; Valcavi a kol., Clinical Endocrinology 29, str.

309 až 316, 1988; Morrison a kol., American Journal of Veterinary Research 51:1, str.65 až 70, 1990) a spoločné podávanie a-2 adrenergických agonistov s faktorom uvolňujúcim rastový hormón obnovuje sekréciu chybného rastového hormónu u starších psov (Arce a kol., Brain Research 537, str. 359 až 362, 1990; Celia a kol., Neuroendocrinology 57, str. 432 až 438, 1993).

Vynález sa týka tiež ďalej opísaného spôsobu prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca Z v podobe L-vínanu

Vynález sa týka tiež spôsobu prípravy niektorých ďalej uvedených medziproduktov, ktoré sa hodí na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca Z.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, použité pódia vynálezu, a zlúčenina všeobecného vzorca Z sa uvádzajú v súvisiacej autorovej prihláške vynálezu číslo PCT/IB 96/01353 (podanej 4. decembra 1996) ako zlúčeniny pôsobiace ako sekretagogy rastového hormónu a zvyšujúce hladinu endogénneho rastového hormónu

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je sekretagog rastového hormónu všeobecného vzorca I

O X⁴

kde znamená e 0 alebo 1, n a w od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, pričom však n a w nemôžu súčasne znamenať nulu,

Y atóm kyslíka alebo síry,

R¹ atóm vodíka, kyanoskupinu, (CH₂)_qN(X®)C(O)X⁶, -(CH₂)_qN(X^C(O)(CH₂)rA¹,

-(CHáqNCX^SOaíCH^-A’.-CCHj^N^SO^.-ÍCHaJqNíX^CíOJNCX^CHí^-A¹-(CHaJqNÍX’OCíOJNíX⁶)^⁶). -(0^),0(0)^⁵)^⁶). -(CH^qCÍOJNíX^CCHjJrA¹, -(CH2)qC(O)OX⁶, -(CH2)_qC(O)O(CH₂)_rA¹> -(CH₂)qOX⁶, -(CH2)qOC(O)X⁶, -(CH2)q0C(O)(CH₂)_t-A¹. -(CH2)qOC(O)N(X®)(CH2)rA¹, -(CH2)qOC(O)N(X⁶)(X⁵), -(CH2)qC(O)X⁶, -(CH2)qC(O)(CH₂)rA¹, -(ΟΗ^,ΝζΧ^Ο^ΟΧ⁶,

-(CH₂)_qN(X⁶)SO2N(X⁶)(X⁶), -(CH^qSÍOJnX⁶, -(CH2)qS(O)_m(CH₂)_rA¹, -(Ci-C^alkyl. -(CH2)rA¹, -(CH^-CCrC^cyUoalkyl, -(CH2)_q-Y¹-(CrCs)a!ky!, -(CH^q-Ý’-íCH,)^ .'-(CH2)q-Y¹-(CH2)_r(C3-C7)cykloalkyl;

pričom alkylové a cykloalkylové podiely skupiny R¹sú prípadne substituované skupinou alkylovou s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, -CONH₂, -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetrazol-5ylovou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru,

Y¹ znamená atóm kyslíka, skupinu -S(0)_m-, -C(O)NX⁶-, -CH=CH-, —C=C—, -N(X⁶)C(O)-, -C(O)NX⁶-, -C(O)O-, -OC(O)N(X⁶)- alebo -0C(0)-, g 0, 1, 2, 3 alebo 4, t 0, 1, 2 alebo 3, pričom (CH₂)g a (CH₂)_t podiely sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, skupinou -CONH₂, -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetra zol-5-ylovou, jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru a jednou alebo dvoma alkylovými skupinami s 1 až 4 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylcykloalkylovú s 0 až 3 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 3 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkylA¹ s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, alebo skupinu A¹, pričom alkylové a cykloalkylové podiely vo význame symbolu R² sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, skupinou -C(O)OX⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)(X⁶), -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -CtOjA¹, -C(0)(X⁶), trifluórmetylovou, kyanoskupinou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami halogénu,

R³ skupinu A¹, alkylovú s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu alkylA¹ s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele, sku pinu alkylcykloalkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 7 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele, skupinu alkyl-X^-alkyl-A¹ s 1 až 5 atómami uhlíka v prvom alkylovom podiele a s 0 až 5 atómami uhlíka v druhom alkylovom podiele alebo skupinu alkyl-X¹-alkylcykloalkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele a s 3 až 7 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, pričom alkylové podiely v skupinách symbolu R³ sú prípadne substituované skupinou -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jedným, dvoma, tromi, štyrmi alebo piatimi atómami halogénu alebo jednou, dvoma alebo tromi skupinami OX³,

X¹ znamená -0-, -S(O)_m-, -N(X²)C(O)-, -C(O)N(X²), -0C(0)-, -c(o)o-, -cx²=cx²-, -n(x²)c(o)o-, -oc(o)n(x²)alebo -C=CR⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, alebo R⁴spolu s R³ a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú skupinu cykloalkylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, cykloalkenylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, čiastočne alebo úplne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo bicyklický systém tvorený čiastočne alebo úplne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom kondenzovaným na čiastočne nasýtený, úplne nenasýtený alebo úplne nasýtený päťčlenný alebo šesťčlenný kruh, obsahujúci prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

X⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo X⁴ spolu s R⁴ a s atómom dusíka, na ktorý je X⁴viazaný a s atómom uhlíka, na ktorý je R⁴ viazaný, tvoria päťčlenný až sedemčlenný kruh, väzbu alebo skupinu vzorca

(CHáa (CHáb kde znamená a a b od seba nezávisle 0, 1, 2 alebo 3,

X⁵ a X^5a od seba nezávisle skupinu zo súboru zahŕňajúceho atóm vodíka, skupinu trifluórmetylovú, A¹ a pri padne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁵ a X^5a má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, OX², S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX², cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, -N(X²)(X²) a -C(O)N(X²)(X²), alebo atóm uhlíka nesúci skupinu X⁵ a X^5a vytvára jeden alebo dva alkylénové mostíky s atómom dusíka nesúcim skupiny symbolu R⁷ a R⁸, pričom každý alkylénový mostík obsahuje 1 až 5 atómov uhlíka, za podmienky, že v prípade, že jeden alkylénový mostík je tvorený X⁵ alebo X^5a, avšak obidva nemôžu byt na atómu uhlíka a R⁷ alebo R⁸ nie však obidve tieto skupiny sú na atómu dusíka a za ďalšej podmienky, že v prípade existencie dvoch alkylénových mostíkov, nemôžu byt X⁵ a X^5a na atómu uhlíka a R⁷a R nemôžu byt na atómu dusíka, alebo X³ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú čiastočne alebo úplne nasýtený trojčlenný až sedemčlenný kruh alebo čiastočne alebo úplne nasýtený štyr11 členný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú bicyklický systém tvorený čiastočne alebo úplne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden alebo dva heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s úplne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

Z¹ väzbu, atóm kyslíka alebo skupinu N-X² za podmienky, že v prípade, keď a a b znamenajú obidva nulu, potom Z¹ neznamená skupinu N-X² alebo atóm kyslíka,

R⁷ a R⁸ od seba nezávisle atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R a R° má substituent volený od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, -C(O)O-alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až 5 atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri skupiny -0-C(0)alkylové s 1 až 10 atómami uhlíka a 1 až 3 alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka alebo

R⁷ a R⁸ spolu dohromady vytvárajú skupinu -(CH2)r-L-(CH2)r-, kde znamená L skupinu C(X²)(X²), S(O)m alebo N(X²),

A¹ vždy od seba nezávisle skupinu cykloalkenylovú s 5 až atómami uhlíka, fenylovú alebo čiastočne nasýtený, úplne nasýtený alebo úplne nenasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh prípadne s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, a bicyklický systém tvorený čiastočne alebo úplne nasýteným alebo úplne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s úplne nasýteným alebo s úplne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, pričom A¹ je vždy od seba nezávisle prípadne substituovaný na jednom alebo na obidvoch kruhoch v prípade, že A¹ znamená bicyklický systém, s až tromi substituentmi volenými od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho atóm fluóru, chlóru, brómu a jódu, skupinu OCF3, ocf2h, cf3, ch3, och3, -ox⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -c(o)ox⁶, karbonylový kyslík, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, nitroskupinu, kyanoskupinu, skupinu benzylovú, -S(0)malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, lH-tetrazol-5ylovú, fenylovú, fenoxyskupinu, fenylalkyloxyskupinu, skupinu halogénfenylovú, metyléndioxyskupinu, skupinu -N(X⁶)(X⁶), -n(x⁶)c(o)(X⁶), -SO2N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)SO2fenylovú, -N(X⁶)SO2X⁶, -CONX¹³^¹², -SO2NX^1:LX¹², -NX⁶SO2X¹²-NX⁶CONX^1:LX¹², -NX⁶SO2NX¹¹X¹², -NX⁶C(O)X¹², imidazolylovú, tiazolylovú a tetrazolylovú za podmienky, že pokial A¹ je prípadne substituovaný metyléndioxyskupinou, môže byť substituovaný iba raz metyléndioxyskupinou, pričom znamená X¹¹ atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R¹¹ má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu fenylovú, fenoxyskupinu, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 ató13 mami uhlíka v alkoxypodiele, skupinu S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až päť atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri alkanoyloxyskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až tri alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka,

X¹² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylovú, tiazolylovú, imidazolylovú, furylovú alebo tienylovú za podmienky, že v prípade, keď X¹²neznamená atóm vodíka, je skupina X^² prípadne substituovaná jedným až tromi substituentmi od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm chlóru, fluóru, skupinu CH3, OCH3, OCF3 a CF3 alebo

X¹¹ a X¹² spolu dohromady vytvárajú skupinu

-(CHj^-lA-ÍCHj^-, kde znamená L¹ skupinu C(X²)(X²), O, S(0)_m alebo N(X²), r vždy od seba nezávisle 1, 2 alebo 3,

X² od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X² má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jeden až päť atómov halogénu a jednu až tri skupiny OX³,

X³ vždy od seba nezávisle atóm vodíka alebo skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka,

X⁶ od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu halogénalkylovú s 2 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, halogéncykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁶ má jeden alebo dva substituenty volené od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu alkylovú s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovú, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinu karboxylovú, -CONH₂, -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylátalkylesterovú s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele a 1Htetrazol-5-ylovú, alebo v prípade dvoch skupín symbolu X® na jednom atómu a obidva X® znamenajú od seba nezávisle skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, sú prípadne obidve alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka spojené a spolu s atómom, na ktorý sú obidve skupiny X° viazané, vytvárajú štyrčlenný až deväťčlenný kruh obsahujúci prípadne atóm kyslíka, síry alebo skupinu NX⁷,

X⁷ atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou a m vždy od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, za podmienky, že X⁶ a X¹² nemôžu znamenať atóm vodíka, keď sú viazané na C(O) alebo SO2 vo forme skupiny C(O)X⁶, C(O)X¹², so2x⁶ alebo SO₂X¹² a keď R⁶ znamená väzbu, potom L znamená N(X²) a každé r v skupine symbolu (CH₂)_r-L-(CH₂)_r znamená od seba nezávisle 2 alebo 3, alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatených, diastereomérne čistých, enantimérmi obohatených alebo enantio15 mérne čistých izomérov alebo jej farmaceutický prijateľných soli a prodrôg na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.

Vynález sa tiež týka spôsobu ošetrovania inzulínovej rezistencie cicavcov, pričom sa podávajú cicavcom účinné množstvá hore definovanej zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantiomérmi obohatené alebo enantlomérne čisté izoméry alebo farmaceutický prijateľné soli a prodrogy.

Podľa výhodného rozpracovania sa ošetrujú stavy spojené s inzulínovou rezistenciou typu I diabetes, typu II diabetes, hyperglykémia, zhoršená znášanlivosť glukózy alebo proti inzulínu rezistentný syndróm alebo stav.

Podľa iného výhodného rozpracovania sa ošetrujú stavy spojené s Inzulínovou rezistenciou souvislacou s obezitou alebo s vysokým vekom.

S výhodou sa podľa vynálezu používajú zlúčeniny všeobecného vzorca I

kde znamená

R¹ skupinu -CHz-fenyiovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -< CHa)3-fenyiovú,

R¹ skupinu -CHz-fenyiovú. R² skupinu metylovú a R³ skupinu 3-indolyl-CHz-,

R¹ skupinu -CHz-fenyiovú, R² skupinu etylovú a R³ skupinu 3-indolyl-CHa-,

R¹ skupinu -CHz-4-fluórfenylovú, R² skupinu metylovú a R³skupinu 3-indolyl-CHz-,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -CH2-O-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu etylovú a R³ skupinu -CH2-O-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu -CH2CF₃ a R³ skupinu -CH₂-O-CH₂~fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-4-fluórfenylovú, R² skupinu metylovú a R³skupinu -CH2-O-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu terc.-butylovú a R³skupinu -CH2-0-CH₂-fenylovú alebo

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -CH2-O-CH₂-3,4-difluórfenylovú, alebo ich stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantiomérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo ich farmaceutický prijatelné soli a prodrogy.

Podlá iného výhodného rozpracovania spôsobu podlá vynále zu sa používajú zlúčeniny všeobecného vzorca I

kde znamená

R² skupinu metylovú, A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH₂-O-CH₂-fenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-O-CH₂-3-chlórfenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-O-CH₂-4-chlórfenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-2,4-dichlórfenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-3-chlórtiofénovú alebo

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-2,4-difluórfenylovú alebo ich stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantiomérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo ich farmaceutický prijateľné soli a prodrogy.

Podlá ešte dfalšieho výhodného rozpracovania spôsobu pódia vynálezu sú používanými zlúčeninami všeobecného vzorca I alebo ich stereoizomérnymi zmesami, diastereomérmi obohatenými, diastereomérne čistými, enantiomérmi obohatenými alebo enantiomérne čistými izomérmi alebo ich farmaceutický prijateinýrai sólami a prodrogami 3a(R,S),lR diastereomérna zmes, 3a(R),l(R) diastereomér alebo 3a(S),l(R) diastereomér zlúčeniny vybranej zo súboru zahŕňajúceho

2-amino-N- [ 1- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo [ 4,3-c ] pyr idín-5-karbonyl-4-f enylbutyl ]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl )-1-( lH-indol-3-ylmetyl )-2-oxo-ety1]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4,3-c)pyridin-5-yl) -1-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxo-etyl]izobutyramid,

2-amino-N-[2-[3a-(4-fluórbenzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c)pyridin-5-yl )-1-( lH-indol-3-ylmetyl) -2-oxoetyl]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] -izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -l-benzyloxymetyl-2-oxo-etyl ] -izobutyramid,

2-amino-N-[2-(3a-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a-4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl]-l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramid,

2-amino-N-{l-benzyloxymetyl-2-[3a-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-2-oxoetyl}-izobutyramid,

2-amino-N-[2-(3a-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramid a

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo- [ 4,3-c ] pyridin-5-yl) -l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] izobutyr-amid.

Výhodným rozpracovaním predchádzajúceho spôsobu je použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktorou je soľ L-vínnej kyseliny 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7 hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl)-l-(R)benzyloxymetyl-2-oxo etyl]izobutyramidu.

Podľa ešte ďalšieho výhodného rozpracovania spôsobu podľa vynálezu sú používanými zlúčeninami všeobecného vzorca I alebo ich stereoizomérnymi zmesami, diastereomérmi obohatenými, diastereomérne čistými, enantiomérmi obohatenými alebo enantiomérne čistými izomérmi alebo ich farmaceutický prijateľnými soľami a prodrogami 3a(R,S),lR diastereomérna zmes, 3a(R),l(R) enantiomér alebo 3a(S),l(R) enantiomér zlúčeniny vybranej zo súboru zahŕňajúceho

2-amino-N- [ l-benzyloxymetyl-2- (2-metyl-3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl) -2-oxoetyl]-2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1- (3-chlórbenzyloxymetyl) -2-oxo-2- [ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl) -2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] etyl} -2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1- (4-chlórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl )-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] etyl} - 2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1-(2,4-dichlórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] etyl} -2-metylpropionamid,

2-amino-N- {1- (4-chlórtiofen-2-ylmetoxymetyl)-2-oxo-2-[ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl) -2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 3,4-c ] pyr idin-6-yl ] etyl }-2-metylpropión-amid a

2-amino-N- {1- (2,4-dif luórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl )-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] etyl} -2-metylpropiónamid.

Ešte ďalší výhodný spôsob zahŕňa prídavné podávanie cicavcom, ktorí také ošetrenie potrebujú, hormónu uvolňujúceho rastový hormón alebo jeho funkčného analógu, ktoré sa pripravujú známymi spôsobmi, pričom niektoré také spôsoby sú opísané v európskom zverejnenom spise číslo EP 511003.

Vynález sa tiež týka farmaceutických prostriedkov užitočných na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu, ktoré obsahujú farmaceutický prijateľný nosič a účinné množstvo hore definovanej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatených, diastereomérne čistých, enantiomérmi obohatených alebo enantiomérne čistých izomérov alebo ich farmaceutický prijatelnej soli a prodrogy.

Vynález sa tiež týka spôsobov zvyšovania hladiny endogénneho rastového hormónu, pri ktorom sa podávajú ľuďom alebo iným živočíchom, ktorí také ošetrenie potrebujú, účinné množstvá funkčného somastatinového antagonisty a hore definovanej zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérm obohatených, diastereomérne čistých, enantiomérmi obohatených alebo enantiomérne čistých izomérov alebo ich farmaceutický prijateľných solí a prodrôg.

Vynález sa tiež týka spôsobov ošetrovania alebo prevencie kongestívnych srdcových porúch, obezity alebo ochablosti súvisiacej so starnutím, pri ktorom sa podávajú cicavcom, ktorí také ošetrenie potrebujú, funkčné somastatinové antagonisty a hore definované zlúčeniny všeobecného vzorca I, alebo ich stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantiomérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo farmaceutický prijatelné soli a prodrogy. Pri tomto spôsobe je výhodné, aby somastatinovým antagonistom bol a-2 adrenergický agonista. V takom prípade je výhodné, aby bol a-2 adrenergický agonista volený zo súboru zahŕňajúceho clonidin, xylazin a medetomidin. Pri takom spôsobe je výhodné, aby zlúčeninou všeobecného vzorca I bola sol L-vínnej kyseliny 2-aminoN- [ 2- (3a (R) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3c]pyridin-5-yl)-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl] i zobutyramidu

Vynález sa tiež týka farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú farmaceutický prijatelný nosič a účinné množstvo a-2 adrenergického agonisty a účinné množstvo hore definovanej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatených, diastereomérne čistých, enantiomérmi obohatených alebo enantiomérne čistých izomérov alebo ich farmaceutický prijateľných solí a prodrôg.

Vynález sa tiež týka spôsobu ošetrovania odolnosti cicavcov proti inzulínu, pri ktorom sa podávajú cicavcom, ktorí také ošetrenie potrebujú, účinné množstvo peptidu uvolňujúceho rastový hormón alebo peptidového mimetika uvolňujúceho rastový hormón alebo jeho farmaceutický prijatelnej soli.

V nasledujúcich vzorcoch označuje hviezdička vždy stereochemické centrá.

Zlúčenina vzorca k

sa pripravuje niny vzorca g tak, že sa necháva reagovať voľná zásada zlúče-

(g) so zlúčeninou všeobecného vzorca j

kde znamená Prt skupinu chrániacu aminoskupinu, v prítomnosti organickej zásady, peptidového kopulačného činidla a rozpúšťadla inertného k reakčným zložkám pri teplote približne -78 až približne -20C za získania zlúčeniny vzorca k.

Pri tomto spôsobe je výhodné, keď je peptidovým kopulačným činidlom cyklický anhydrid 1-propánfosfónovej kyseliny, zlúčenina vzorca g má R-konfiguráciu, zlúčenina vzorca j má R-konfiguráciu a zlúčenina vzorca k má 3a-(R) ,1-(R)-konfiguráciu.

Zlúčenina vzorca Z v podobe L-vínanu

sa pripravuje tak, že sa necháva reagovať voiná zásada zlúče niny vzorca g

so zlúčeninou všeobecného vzorca j

v prítomnosti organickej zásady, peptidového kopulačného činidla a rozpúšťadla inertného k reakčným zložkám pri teplote približne -78 až -20°C za získania zlúčeniny vzorca k

tjl

O H

N (k)

NH-Prt a odstránenia chrániacej skupiny Prt za získania zlúčeniny vzorca 1

a reakciou zlúčeniny vzorca 1 s L-vínnou kyselinou v alkoholickom rozpúšťadle za získania zlúčeniny vzorca Z.

Pri tomto spôsobe je výhodné, keď je peptidovým kopulač ným činidlom cyklický anhydrid 1-propánfosfónovej kyseliny, zlúčenina vzorca g má R-konfiguráciu, zlúčenina vzorca j má R-konfiguráciu a každá zlúčenina vzorca k, 1 a Z majú 3a(R),1-(R)-konfiguráciu.

Zlúčenina vzorca g v podobe volnej zásady

(g) sa pripravuje tak, že sa necháva reagovať zlúčenina vzorca f v podobe L-vínanu (f) so zásadou v inertnom rozpúšťadle pri teplote približne -50 až -10’C za udržovania chirality benzylovej skupiny za získania zlúčeniny vzorca g.

Zlúčenina vzorca c

sa pripravuje tak, že sa necháva reagovať zlúčenina vzorca b,

kde znamená Prt skupinu chrániacu aminoskupinu, s anorganickou alebo s organickou zásadou a s benzylbromidom v inertnom rozpúšťadle za získania zlúčeniny vzorca c.

Zlúčenina vzorca f v podobe L-vínanu

Me

N—N

(e) s L-vínnou kyselinou v inertnom rozpúšťadle.

Vynález sa tiež týka R,S-enantiomérnej zmesi, R-enantioméru alebo S-enantioméru vzorca kde znamená Prt atóm vodíka alebo skupinu chrániacu aminoskupinu.

Všeobecne sa zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo ich stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantiomérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo ich farmaceutický prijateľné soli a prodrogy, používané podľa vynálezu, ako je hore uvedené, môžu pripravovať známymi spôsobmi pre pracovníkov v odbore.

V hore uvedených vzorcoch majú jednotlivé skupiny nasledujúci význam, pokiaľ to nie je výslovne uvedené inak.

Výrazom alkyl sa vždy rozumie skupina s daným počtom atómov uhlíka s priamym alebo s rozvetveným reťazcom, ktorá má prípadne dvojnú alebo trojnú väzbu. Ako príklady takých alkylových skupín sa uvádzajú skupina metylová, etylová, propylová, izopropylová, butylová, sek.-butylová, terc.-butylová, pentylová, izopentylová, hexylová, izohexylová, alylová, etinylová, propenylová, butadienylová a hexenylová skupina.

Pokiaľ sa alkylová skupina charakterizuje nulovým počtom atómov uhlíka, ide o jednoduchú kovalentnú väzbu.

Výrazom alkoxy sa vždy rozumie skupina s daným počtom atómov uhlíka s priamym alebo s rozvetveným reťazcom, ktorá má prípadne dvojnú alebo trojnú väzbu. Ako príklady takých alkoxyskupín sa uvádzajú metoxyskupina, etoxyskupina, propoxyskupina, izopropoxyskupina, butoxyskupina, izobutoxyskupina, terc.-butoxyskupina, pentoxyskupina, izopentoxyskupina, hexoxyskupina, izohexoxyskupina, alyloxyskupina, 2-propinyloxyskupina, izobutenyloxyskupina a hexenyloxyskupina.

Výrazom halogén alebo halo sa vždy rozumejú atómy halogénu fluór, chlór, bróm a jód.

Výrazom halogénovaný alkyl sa vždy rozumie alkylová skupina hore definovaná, substituovaná jedným alebo niekolkými atómami halogénu.

Výrazom halogénovaný cykloalkyl sa vždy rozumie cykloalkylová skupina, substituovaná jedným alebo niekolkými atómami halogénu.

Výraz aryl zahŕňa skupinu fenylovú, naftylovú a aromatické päťčlenné alebo šesťčlenné kruhy s jedným až štyrmi heteroatómami alebo kondenzované päťčlenné alebo šesťčlenné bicyklické systémy s jedným až štyrmi heteroatómami zo súboru zahŕňajúceho atóm dusíka, síry a kyslíka. Ako príklady takých heterocyklických aromatických skupín sa uvádzajú skupina pyridinová, tiofénová (označovaná tiež ako tienylová), furánová, benzotiofénová, tetrazolová, indolová, N-metylindolová, dihydroindolová, indaolová, N-formylindolová, benzimidazolová, tiazolová, pyrimidínová a tiadiazolová skupina.

Pracovníkom v odbore je zrejmé, že určité kombinácie substituentov obsahujúcich heteroatómy, uvedené pri charakterizácii zlúčenín podlá vynálezu, sú menej stále za fyziologických podmienok (napríklad skupiny s acetalovými alebo s amínovými väzbami). Preto sú také zlúčeniny menej výhodné.

Výrazom prodroga sa vždy rozumejú zlúčeniny, ktoré sú prekurzormi drôg, ktoré po podaní uvoľňujú drogu in vivo niektorými chemickými alebo fyziologickými procesmi (napríklad prodroga upravená na fyziologickú hodnotu pH sa mení na formu žiadúcej drogy). Ako príkladné prodrogy, ktoré po štiepení uvoľňujú zodpovedajúcu νοϊηύ kyselinu a hydrolyzovateľné ester tvoriace zvyšky zlúčenín podľa vynálezu, sa bez zámeru na akékoľvek obmedzenie uvádzajú substituenty karboxylových kyselín (napríklad R¹ znamená skupinu -(CH₂)gC(O)₂X⁶, kde znamená X⁶atóm vodíka alebo R² alebo A¹ obsahuje karboxylovú kyselinu), pričom je voľný atóm vodíka nahradený alkylovou skupinou s 1 až 4 atómami uhlíka a alkanoyloxymetylovou skupinou s 2 až 12 atómami uhlíka v alkanoylovom podiele, l-(alkanoyloxy)etylovou skupinou s 4 až 9 atómami uhlíka v alkanoylovom podiele, 1metyl-l-(alkanoyloxy)etylovou skupinou s 5 až 10 atómami uhlíka, alkoxykarbonyloxymetylovou skupinou s 3 až 6 atómami uhlíka, l-(alkoxykarbonyloxy)etylovou skupinou s 4 až 7 atómami uhlíka, l-metyl-l-(alkoxykarbonyloxy)etylovou skupinou s 5 až 8 atómami uhlíka, N-(alkoxykarbonyl)aminometylovou skupinou s 3 až 9 atómami uhlíka, l-(N-(alkoxykarbonyl)amino)etylovou skupinou s 4 až 10 atómami uhlíka, 3-ftalidylovou, 4-krotonolaktonylovou skupinou, gama-butyrolakton-4-ylovou skupinou, di-N,N-alkylaminoalkylovou skupinou s 1 až 2 atómami uhlíka v prvom alkylovom podiele a s 2 až 3 atómami uhlíka v druhom alkylovom podiele (ako je napríklad skupina β-dimetylaminoetylová), karbamoylalkylovou s 1 až 2 atómami uhlíka v alkylovom podiele, Ν,Ν-dialkylkarbamoylalkylovou s 1 až 2 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele, piperidino-, pyrolidino- alebo morfolinoalkylovou skupinou s 2 až 3 atómami uhlíka v alkylovom podiele.

Iné príkladné prodrogy uvoľňujú alkohol všeobecného vzorca I, pričom je voľný atóm vodíka hydroxylovej skupiny (kedf napríklad R¹ obsahuje hydroxylovú skupinu) nahradený skupinou alkanoyloxymetylovou s 1 až 6 atómami uhlíka v alkanoylovom podiele, alkanoyloxyetylovou s 1 až 6 atómami uhlíka v alkanoylovom po28 diele, l-metyl-l-(alkanoyloxy)etylovou s 1 až 6 atómami uhlíka v alkanoylovom podiele, skupinou alkoxykarbonyloxymetylovou s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, N-alkoxykarbonylaminometylovou s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, sukcinoylovou, alkanoylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, a-aminoalkanoylovou s 1 až 4 atómami uhlíka, arylacetylovou a α-aminoacetylovou alebo α-aminoacyl-a-aminoacylovou, pričom α-aminoacylový podiel je od seba nezávisle odvodený od prírodné sa vyskytujúcich L-aminokyselín obsiahnutých v proteínoch, skupinou P(O)(OH)₂/ -P(0)0-(alkyl)2 s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele alebo glykozylovou skupinou (skupina vzniká oddelením hydroxylovej skupiny z hemiacetalu glycidu).

Prodrogy zlúčenín všeobecného vzorca I, kde je karboxylová skupina nahradená v karboxylovej kyseline vzorca I esterovou skupinou, sa môžu pripravovať reakciou karboxylovej kyseliny s vhodným alkylhalogenidom v prítomnosti zásady, ako je napríklad uhličitan draselný v inertnom rozpúšťadle, ako je napríklad dimetylformamid, pri teplote približne 0 až 100*C počas približne jednej až približne 24 hodín. Alebo sa kyselina môže nechávať reagovať sa vhodným alkoholom ako rozpúšťadlom v prítomnosti katalytického množstva kyseliny, napríklad koncentrovanej kyseliny sírovej, pri teplote približne 20 až približne 120'C, s výhodou pri teplote spätného toku počas približne jednej až približne 24 hodín. Iným spôsobom prípravy je reakcia kyseliny v inertnom rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán, za súčasného odstraňovania vytváranej vody prostriedkami fyzikálnymi (napríklad Dean Starkov odlučovač) alebo chemickými (napríklad molekulárne sitá).

Prodrogy zlúčenín všeobecného vzorca I, kde je alkoholová skupina premenená na éterovú skupinu, sa môžu pripravovať reakciou alkoholu s vhodným alkylbromidom alebo alkyljodidom v prítomnosti zásady, ako je napríklad uhličitan draselný, v inertnom rozpúšťadle, ako je napríklad dimetylformamid, pri teplote približne 0 až 100“C počas približne jednej až pri29 bližne 24 hodín. Alkanoylaminometylétery sa môžu pripraviť reakciou alkoholu s bis-(alkanoylamino)metánom v prítomnosti katalytického množstva kyseliny v inertnom rozpúšťadle, ako je napríklad tetrahydrofurán, spôsobom opísaným v americkom patentovom spise číslo US 4 997984. Alebo sa tieto zlúčeniny môžu pripravovať spôsobmi, ktoré opísali Hoffman a kol. (J. Org. Chem. 59, str. 3530, 1994).

Určité výrazy sa v zlúčeninách podľa vynálezu môžu vyskytovať niekoľkokrát, pričom majú vždy od seba nezávislý hore uvedený význam.

V podlohách uvádzané skratky majú nasledujúci význam:

BOC	terc.-butoxykarbonyl
BOP	benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)- fosfóniumhexafluórfosfát
CBZ	benzyloxykarbonyl
CDI	N,N'-karbonyldiimidazol
CH₂ ^C12	dichlórmetán
chci₃	chloroform
DCC	dicyklohexylkarbodiimid
DMF	dimetylformamid
EDC	1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidhydrochlorid
EtOAc	etylacetát
FMOC	9-fluórenylmetoxykarbony1
h	hodina
Hex	hexán
HOAT	l-hydroxy-7-azabenzotriazol
HOBt	hydroxybenzotriazolhydrát
HPLC	vysokotlaková kvapalinová chromatografia
MHz	megahertz
MS	hmotové spektrum
NMR	nukleárna magnetická rezonancia
PTH	paratyroidní hormón

TFA	trifluóroctová kyselina
THF	tetrahydrof urán
TLC	chromatografia v tenkej vrstve
TRH	tyrotropín uvolňujúci hormón
TROC	2,2,2-trichlóretoyxykarbonyl

Zlúčeniny podlá vynálezu majú všetky aspoň jedno centrum asymetrie, ak označuje hviezdička vo všeobecnom vzorci I. Molekula môže mať prídavné asymetrické centrá v závislosti od povahy rôznych substituentov v molekule. Každé také asymetrické centrum produkuje dva optické izoméry, pričom vynález zahŕňa všetky také optické izoméry, oddelené, čisté, čiastočne vyčistené optické izoméry, racemické zmesi alebo diastereomérne zmesi. V prípade asymetrického centra, označeného hviezdičkou, sa zistilo, že absolútnu stereochémiu aktívnejšieho a teda výhodnejšieho izoméru znázorňuje všeobecný vzorec 1A. Táto výhodná absolútna konfigurácia platí tiež pre všeobecný vzorec I.

O X⁴

Keď znamená R⁴ substituent ako atóm vodíka, zodpovedá priestorová konfigurácia asymetrického centra konfigurácii D-aminokyseliny. Vo väčšine prípadov sa tiež označuje ako R-konfigurácia akokolvek sa mení podlá významu R³ a R⁴, používaných na označenie R- alebo S-stereochémie.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, používané podlá vynálezu, sa izolujú v podobe svojich farmaceutický prijateľných adičných solí s kyselinami, ako sú soli odvodené od anorganických alebo od organických kyselín. Ako príklady takých kyselín sa uvádzajú kyselina chlorovodíková, dusičná, sírová, fosforečná, mravčia, octová, trifluóroctová, propiónová, maleínová, jantárová, D-vínna, L-vínna, malónová a metánsulfónová kyselina. Okrem toho určité zlúčeniny, obsahujúce kyslé funkčné skupiny, napríklad karboxylovú skupinu, sa môžu izolovať v podobe svojich anorganických solí, kde je protiiónom napríklad sodík, draslík, lítium, cézium, horčík, ako tiež katióny organických zásad.

Farmaceutický prijatelné soli sa pripravujú tak, že sa necháva reagovať jeden ekvivalent zlúčeniny všeobecného vzorca I približne s jedným ekvivalentom zodpovedajúcej vhodnej kyseliny podlá typu žiadanej soli. Spracovanie a izolácia výslednej soli sú pracovníkom v odbore dobre známe.

Vynález zahŕňa farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú ako účinnú látku na ošetrovanie odolnosti proti inzulínu účinné množstvo aspoň jednej zlúčeniny všeobecného vzorca I spolu s farmaceutický prijateľným nosičom. Okrem toho zahŕňa vynález farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú ako účinnú látku aspoň jedného a-2 adrenergického agonistu a aspoň jednu zlúčeninu všeobecného vzorca I spolu s farmaceutický prijatelným nosičom. Prípadne môžu farmaceutické prostriedky podlá vynálezu obsahovať ďalej anabolické činidlo okrem aspoň jednej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo inú zlúčeninu, ktorá má odlišnú aktivitu, napríklad umožňujúcu antibiotický rast alebo inú farmaceutický účinnú látku, pričom taká látka podporuje účinnosť alebo obmedzuje na minimum vedlajšie účinky.

Skúška stimulácie uvolňovania GH z hypofýz potkanov

Zlúčeniny, ktoré majú schopnosť stimulovať sekréciu GH z kultivovaných potkaních hypofýzových buniek, sa identifikujú nasledujúcim spôsobom. Test sa používa tiež na porovnávanie štandardov na určenie hladiny dávok. Bunky sa izolujú z hypo32 fýz šesť týždňov starých samcov potkanov Wistar. Po oddelení hlavy sa vyberú celé hypofýzové laloky do sterilného studeného roztoku vyváženého Hankovým činidlom bez vápnika alebo horčíka (HBSS). Tkanivá sa jemne rozmelnia a potom sa podrobia dvom cyklom enzymatickej dispergácie za mechanickej pomoci pri použití 10 U/ml baktériovej proteázy (EC 3.4.24.4, Sigma P-6141, St. Louis, Missouri) v HBSS. Zmes tkaniva a enzýmu sa mieša počas približne 30 minút v odstredivkovej banke pri otáčkach 30/min v prostredí obsahujúcom 5 % oxidu uhličitého pri teplote 37°C a približne po 15 minútach sa ručne trituruje približne 30 minút pri použití 10 ml-pipety. Zmes sa odstrečíuje približne päť minút pri 200 x g. Do supernatantu sa pridá konské sérum (35% konečná koncentrácia) na neutralizáciu nadbytku proteázy. Peleta sa resuspenduje v čerstvej proteáze (10 U/ml), mieša sa ešte približne 30 minút za uvedených podmienok a ručne sa trituruje použitím ihlice 23. Opäť sa pridá konské sérum (35% konečná koncentrácia), bunky z obidvoch dávok spoja, odstrekujú sa (približne 15 minút pri 200 x g), peleta sa resuspenduje v kultivačnom médie (Dulbeco Modified Eagle Médium (D-MEM), doplnenom 4,5 g/1 glukózy, 10 % konského séra, 2,5 % zárodočného hovädzieho séra, 1 % neesenciálnych aminokyslín, 100 U/ml mystatinu a 50 mg/ml gentamycinsulfátu, Gibbco, Grand Island, New York) a spočítajú sa. Bunky sa rozprestrú pri množstve buniek 6,0 až 6,5xl0⁴ na cm² do 48-jamkových doštičiek Costar™ Cambridge Massachusetts) a kultivujú sa 3 až 4 dni v kultivačnom médie.

Tesne pred skúškou sekrécie GH, sa kultivované jamky premyjú dvakrát uvolňovacím médiom, potom sa vyvážia na približne 30 minút v uvolňovacom médie (D-MEM tlmenom 25 mM Hepes, pH

7,4 a obsahujúcom 0,5 % albumínu konského séra pri teplote 37’C). Testované zlúčeniny sa rozpustia v DMSO, potom sa zriedia predhriatym uvoíňovacim médiom. Testy sa vykonávajú vždy štyrikrát. Test sa zaháji pridaním 0,5 ml uvoíňovacieho média (s nosičom alebo s testovanou zlúčeninou) do každej skúšobnej jamky. Inkubácia pri teplote 37“C trvá približne 15 minút a ukončí sa odstránením uvoľňovacieho média, ktoré sa odstreďuje 15 minút pri 2000 x g na vyberanie bunkového materiálu. Koncentrácia potkanieho rastového hormónu v supernatantoch sa stanoví štandardným ďalej opísaným spôsobom rádioimunotestu.

Meranie rastového hormónu potkana

Koncentrácia potkanieho rastového hormónu sa stanoví dvojitým protilátkovým rádioimunotestom pri pomoci referenčnej prípravy potkanieho rastového hormónu (NIDDK-rGH-RP-2) a antiséra potkanieho rastového hormónu vypestovaného v opici (NIDDK anti-rGH-S-5), získaného od Dr. A. Parlowa (Harbor-UCLA, Medical Center, Torrence, CA). Prídavný potkaní rastový hormón (1,5 U/mg, #G2414, Scripps Laboratories, San Diego, CA) sa najóduje na špecifickú aktivitu približne 30 pCi/pg metódou chlóramínu T na použitie ako indikátoru. Imúnne komplexy sa získajú zavedením kozieho antiséra do opice lgG (ICN/Cappel, Aurora, OH) plus polyetylénglykol, molekulová hmotnost 10 000 až 20 000, na konečnú koncentráciu 4,3%; izolácia sa vykoná odstredením. Tento test má pracovný rozsah 0,08 až 2,5 μg potkanieho rastového hormónu na skúmavku nad bazálnu hladinu.

Skúška exogénne stimulovaného uvoľňovania rastového hormónu v potkanovi po intravenóznom podaní testovaných zlúčenín

Samice potkana Sprague-Dawley staré 21 dní (Charles River Laboratory, Wilmington, MA) sa nechajú aklimatizoval: v miestnych podmienkach vivária (24 C, 12 hodín svetlo, 12 hodín tma) počas jedného týždňa pred testovaním zlúčeniny. Všetky potkany majú podľa ľúbosti prístup k vode a ku granulovanému komerčnému krmivu (Agway Country Food, Syracuse NY). Pokusy sa konajú podľa ustanovenia o použití laboratórnych zvierat (NIH Guide for the Čare and Use of Laboratory Animals).

V deň pokusu sa testované zlúčeniny rozpustia v nosiči obsahujúcom 1 % etanolu, 1 mM octovej kyseliny a 0,1 % albumínu hovädzieho séra v soľnom roztoku. Každý test sa uskutočňuje s tromi potkanmi. Potkany sa zvážia a uspia intraperitoneálnou injekciou pentobarbitalu sodného (Nembutol^R, 50 mg/kg telesnej hmotnosti), štrnásť minút pred podaním anestetika sa odoberie vzorka krve napichnutím konca chvostu a vykvapkaním krvi do skúmavky mikroodstredivky (základná vzorka krvi, približne 100 μΐ). 15 minút po podaní anestetika sa podá testovaná zlúčenina intravenóznou injekciou do chvostovej cievy v celkovom objeme injekcie 1 ml/kg telesnej hmotnosti. Ďalšie vzorky krvi sa odoberajú 5, 10 a 15 minút po podaní skúšanej zlúčeniny. Až do prípravy séra odstredením (1430 x g 10 minút pri teplote 10°C) sa vzorky krvi uchovávajú na lade. Sérum sa skladuje pri teplote -80C až do stanovenia rastového hormónu v sére hore opísaným rádioimunotestom.

Vyhodnotenie exogénne stimulovaného uvoľňovania rastového hormónu u psa po orálnom podaní

V čase dávkovania sa testovaná zlúčenina odváži na príslušnú dávku a rozpustí sa vo vode. Dávky sa rozdelia v objeme 0,5 až 3 ml/kg a podávajú sa 2 až 4 psom v každom dávkovacom režime. Odobrané vzorky krvi (5 ml) z krčnej žily priamym napichnutím pred dávkou a 0,17, 0,33, 0,5, 0,75, 1, 2, 4, 6, 8 a 24 hodín po dávke do 5 ml vákuových obalov obsahujúcich lítiumheparín. Pripravená plazma sa až do analýzy uskladní pri teplote -20’C.

Meranie psieho rastového hormónu

Koncentrácia psieho rastového hormónu sa zisťuje štandardným spôsobom rádioimunotestu pomocou psieho rastového hormónu (antigén pre jodáciu a referenčnú preparáciu UAFP-1983B) a antiséra psieho rastového hormónu namnoženého v opici (AFP-21452578) od Dr. A. Parlowa (Harbor-UCLA, Medical Center, Torrence, CA).

Indikátor sa vytvorí chlóramínovou T-jodáciou psieho rastového hormónu na špecifickú aktivitu 20 až 40 μCi/μg. Imunitné komplexy sa získajú vnesením kozieho antiséra do opice lgG (ICN/ Cappel, Aurora, OH) plus polyetylénglykol, molekulová hmotnosť 10 000 až 20 000 na konečnú koncentráciu 4,3%; vyťaženie sa vykoná odstredením. Tento test má pracovný rozsah 0,08 až

2,5 μg psieho rastového hormónu na skúmavku.

Vyhodnotenie psieho rastového hormónu a hladín inzulínu podobného rastového faktoru-1 v psovi po chronickom orálnom podávaní

Psi dostávajú skúšanú zlúčeninu denne počas siedmich alebo 14 dní. Každý deň dávkovania sa testovaná zlúčenina odváži na vhodnú dávku a rozpustí sa vo vode. Dávky v objeme 0,5 až 3 ml/kg sa podávajú 5 psom v každom dávkovacom režime. Vzorky krvi sa odoberajú v deň 0, 3, 7, 10 a 14. Vzorky krvi (5 ml) sa získajú priamym napichnutím krčnej žily pred dávkou a 0,17, 0,33, 0,5, 0,754, 1, 2, 3, 6, 8, 12 a 24 hodín po dávke v deň 0, 7 a 14 do 5 ml vákuových obalov obsahujúcich lítiumheparín. Okrem toho sa odoberie krv pred dávkou a 8 hodín 3. a 10. deň. Pripravená plazma sa až do analýzy uskladní pri teplote -20°C.

Štúdia samíc potkanov

Štúdia vyhodnocuje vplyv chronického ošetrovania s mimetickým GHRP na hmotnosť, telesný stav a koncentráciu nie na lačno glukózy, inzulínu, laktátu a lipidov u samíc potkanov s deficitom estrogénu a s prebytkom estrogénu. Akútne odozvy hladín séra GH na intravenózne podávanie činidla, uvoíňujúceho rastový hormón, sa vyhodnocujú v posledný deň dávkovania. Telesná hmotnosť sa zaznamenáva každý týždeň po celý čas ošetrovania; okrem toho sa vyhodnocuje telesný stav a hladiny glukózy, inzulínu, laktátu, cholesterolu a triglyceridov na konci ošetrovaní.

Panenské potkanie samice Sprague-Dawley sa získajú od Charles River Laboratories (Wilmington, MA) a podrobia sa obojstrannej ovariektómii (Ovx) alebo predstieranému chirurgickému zákroku (Sham) v približnom veku 12 týždňov. Pri klamnej chirurgii boli vaječníky vyberané a vrátené do brušnej dutiny. Po chirurgii boli potkany umiestnené jednotlivo do klietok 20x32x20 cm za štandardných podmienok vivária (približne 24’C, 12 hodín svetlo, 12 hodín tma). Všetky potkany mali volný prístup k vode a k peletizovanému komerčnému krmivu (Agway ProLab 3000, Agway Country Food, Syracuse NY). Pokusy sa konajú pódia ustanovenia o použití laboratórnych zvierat (NIH Guide for the Čare and Use of Laboratory Animals).

Približne 7 mesiacov po chirurgii sa potkany Sham a Ovx zvážia a náhodne rozdelia do skupín. Potkany dostávali denne 1 ml buď nosiča (1% etanol v destilovanej dionizovanej vode), 0,5 mg/kg alebo 5 mg/kg činidla uvolňujúceho rastový hormón počas 90 dní. Počas štúdie sa potkany týždne vážili. 24 hodín pred poslednou orálnou dávkou sa vyhodnocuje akútna odozva rastového hormónu (GH) v sére na skúšané činidlo nasledovne: Potkany sa uspia injekciou pentobarbitalu sodného 50 mg/kg. Uspané potkany sa zvážia a z chvostovej žily sa odoberie základná vzorka krvi (približne 100 μΐ). Skúšané činidlo (činidlo uvolňujúce rastový hormón alebo nosič) sa potom podá intravenózne do chvostovej žily v množstve 1 ml. Približne 10 minút po injekcii sa odoberie z chvostovej žily druhá 100μ1 vzorka krvi. Krv sa nechá zraziť pri teplote približne 4° C a potom sa 10 minút odstreďuje pri 2000 x g. Sérum sa uskladní pri teplote približne -70C. Koncentrácia rastového hormónu v sére sa stanoví pomocou hore opísaného rádioimunotestu. Po tomto postupe sa potom každý uspaný potkan podrobí dvojitej rôntgenovej absorpciometrii celého tela (DEXA, Hologic QDR 1000/W, Waltam MA). Konečné vzorky krvi sa odoberú srdcovou punkciou do heparinizovaných skúmaviek. Plazma sa oddelí odstredením a uskladní sa zmrazená hore opísaným spôsobom.

Inzulín v plazme sa stanoví rádioimunotestom pomocou kitu Binax Corp. (Portland, Maine). Variačný koeficient medzitestov je < 10 %. Triglyceridy, celkový obsah cholesterolu, hladina glukózy a laktátu v plazme sa merí analyzátorom Abbott VP™ a VP Super System¹* Autoanalyser (Abbott Laboratories, Irving, Texas) pomocou systému reakčných činidiel A-Gent™ Triglycerides, Cholesterol and Glucose Test Reagent Systems a pomocou laktátového kitu od firmy Sigma. Aktivita peptidu znižujúceho inzulín, triglyceridy, celkový cholesterol a laktát uvolňujúceho rastový hormón (GHRP) alebo mimetika GHRP, ako je zlúčenina všeobecného vzorca I, sa stanoví štatistickou analýzou (nepárovým t-testom) spolu s kontrolnou skupinou, ošetrenou nosičom.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, použité spôsobom podlá vynálezu, sa môžu podávať orálne, parenterálne (napríklad intramuskulárnou, intraperitoneálnou, intravenóznou alebo subkutánnou injekciou alebo implantátom), nazálne, vaginálne, rektálne sublinguálne alebo topickou cestou podania a môžu sa formulovať s farmaceutický prijatelnými nosičmi na vytvorenie dávkovacej formy pre každú cestu podania.

Pevnými dávkovacími formami na orálne podanie môžu byť kapsuly, tablety, pilulky, prášky a granuly. V takých pevných dávkovacích formách je účinná látka zmiešaná s aspoň jedným farmaceutický prijatelným nosičom ako je sacharóza, laktóza alebo škrob. Také dávkovacie formy môžu obsahovať, ako je bežné, prídavné látky iné ako sú inertné riedidlá, napríklad mazadlá ako je stearát horečnatý. V prípade kapsúl, tabliet alebo piluliek môže dávkovacia forma obsahovať tiež tlmivé činidlá. Tablety a pilulky môžu byt dodatočne opatrené enterickými povlakmi.

Tekuté dávkovacie formy na orálne podanie zahŕňajú farmaceutický prijatelné emulzie, roztoky, suspenzie a sirupy, elixíry obsahujúce inertné riedidlá používané v odbore, ako je napríklad voda. Popri týchto inertných riedidlách môžu prostriedky obsahovať tiež adjuvansy, ako sú namáčadlá, emulgátory a suspenzačné činidlá a sladidlá, činidlá zlepšujúce chuť a parfumy.

Medzi prostriedkami na parenterálne podanie podlá vynálezu patria sterilné vodné alebo nevodné roztoky, suspenzie alebo emulzie. Príklady nevodných rozpúšťadiel alebo nosičov sú propylénglykol, polyetylénglykol, rastlinné oleje, ako je olivový olej a kukuričný olej, a injektovatelné organické estery ako je etyloleát. Také dávkovacie formy môžu tiež obsahovať adjuvansy ako sú konzervačné, namáčacie, emulgačné a dispergačné činidlá. Môžu byt sterilizované napríklad filtráciou cez filter zachycujúci baktérie, začlenením sterilizačných činidiel do prostriedkov, ožiarením prostriedkov alebo ich ohrevom. Môžu sa tiež vyrábať vo forme sterilných pevných prostriedkov, ktoré sa môžu rozpúšťať v sterilnej vode alebo v dajakom inom sterilnom injektovatelnom médie tesne pred použitím.

Prostriedky na vaginálne alebo rektálne podanie sú zvyčajne čapíky, ktoré môžu obsahovať popri účinnej látke excipienty, ako je kakaové maslo alebo čapíkový vosk.

Prostriedky na nazálne podanie sa tiež pripravujú so štandardnými excipientmi známymi v odbore.

Dávka účinnej látky v prostriedkoch podlá vynálezu sa môže meniť, je nutné, aby množstvo účinnej látky bolo také, aby bola získaná vhodná dávkovacia forma. Volená dávka závisí od požadovaného terapeutického účinku, od cesty podania a od trvania liečby. Všeobecne sa lučfom a iným živočíchom, napríklad cicavcom podávajú denne dávky 0,0001 až 100 mg/kg tele39 snej hmotnosti na dosiahnutie účinného uvoľnenia rastového hormónu.

Výhodná denná dávka u ľudí je 0,01 až 5,0 mg/kg telesnej hmotnosti a môže sa podávať budí v jedinej dávke alebo rozdelene na niekoľko dávok.

U zvierat je vhodná denná dávka 0,01 až 10,0 mg/kg telesnej hmotnosti a môže sa podávať bud v jedinej dávke alebo rozdelene na niekoľko dávok. Na rozdiel od ľudí je u zvierat výhodnejšia denná dávka 0,1 až 5 mg/kg telesnej hmotnosti a môže sa podávať búd v jedinej dávke alebo rozdelene na niekoľko dávok.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, použité spôsobom podľa vynálezu, sa môžu pripravovať sekvenčnou alebo konvergentnou syntetické cestou. Podrobnosti, týkajúce sa prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I sekvenčným spôsobom, sú uvedené v dalšom texte.

Početné chránené deriváty aminokyselín sú obchodne dostupné, kde chrániacimi skupinami Prt, z¹⁰⁰ a z²⁰⁰, sú napríklad BOC, CBZ, skupina benzylová, etoxykarbonylová, CF₃C(O)-, FMOC, TROC, tritylová alebo tozylová. Iné chránené deriváty aminokyselín sa môžu pripravovať spôsobmi opísanými v literatúre. Niektoré 3-oxo-2-karboxylpyrolidíny sú obchodne dostupné a iné, príbuzné pyrolidíny a 4-substituované piperidíny sú známe z literatúry.

Veľa ďalej opísaných schém opisujú zlúčeniny, ktoré obsahujú chrániace skupiny Prt, Z¹⁰⁰ a z²⁰⁰. Benzyloxykarbonylové skupiny sa dajú odstraňovať radom spôsobov vrátane katalytickej hydrogenácie vodíkom v prítomnosti paládia alebo paládiového katalyzátoru v protickom rozpúšťadle ako je metanol. Výhodnými katalyzátormi sú hydroxid paládia na uhlí alebo paládium na uhlí. Je možné použiť tlak vodíka 6,9 až 6900 kPa, výhodnými tlakmi sú 69 až 483 kPa. Alternatívne môže byt benzyloxykarbonylová skupina odstraňovaná transferovou hydrogenáciou.

Chrániacu skupinu BOC je možné odstraňovať silnou kyselinou, napríklad trifluóroctovou kyselinou alebo kyselinou chlorovodíkovou v prítomnosti spoločného rozpúšťadla alebo bez tejto prítomnosti, ako je dichlórmetán, etylacetát, éter alebo metanol, pri teplotách -30 až 70C, s výhodou -5 až približne 35^eC.

Benzylestery amínov je možné odstraňovať radom spôsobov, vrátane katalytickej hydrogenácie vodíkom v prítomnosti paládiového katalyzátoru v protickom rozpúšťadle ako je metanol. Použiť je možné tlak vodíka 6,9 až 6900 kPa, s výhodou 69 až 483 kPa. O pridávaní a odstraňovaní týchto chrániacich skupín sa pojednáva v knihe T. Green: Protective Groups in Organic Synthesis, nakladatelstvo John Wiley & Sons, New York, 1981.

Schéma I

R⁴ X⁴ O R® -Ν-ί-κ5_,Ι__Η

Schéma 1:

Deriváty vzorca 1 s chránenou aminoskupinou sú v mnohých prípadoch obchodne dostupné, pričom chrániacou skupinou Prt je napríklad skupina BOC, FMOC alebo CBZ. Iné aminokyseliny sa môžu pripravovať spôsobmi opísanými v literatúre.

Ako je zrejmé zo schémy 1, kopulujú sa amíny vzorca 2 s kyselinami vzorca 1 s chránenou aminoskupinou, pričom Prt znamená vhodnú chrániacu skupinu, v inertnom rozpúšťadle, ako je dichlórmetán alebo dimetylformamid, s kopulačným činidlom, ako sú EDC alebo DCC, v prítomnosti HOBT alebo HOAT. V prípade, keď je amín v podobe hydrochloridovej soli, je výhodné pridávať do reakčnej zmesi jeden alebo dva ekvivalenty vhodnej zásady, napríklad trietylamínu. Alebo sa kopulácia môže vykonávať s kopulačným činidlom, ako je BOP, v inertnom rozpúšťadle, napríklad v metanole. Taká kopulačná reakcia sa všeobecne uskutočňuje pri teplote približne -30 až približne 80“C, s výhodou pri teplote -10 až približne 25°C. Ďalšie podmienky pre kopuláciu peptidov sú známe z literatúry (Houben-Weyl, zväzok XV, časť II, E. Wunsch, vyd. Geoge Thieme Verlag, Stuttgart, 1974. Oddeľovanie nežiadúcich vedľajších produktov a čistenie medziproduktov sa vykonáva chromatografiou na silikagéli pri použití rýchlej chromatografie (W.C. Still, M. Kahn a A. Mitra, J. Org. Chem. 43, str. 2923, 1978), kryštalizáciou alebo triturovaním.

Premena zlúčeniny vzorca 3 na medziprodukty vzorca 4 sa môže vykonávať odstránením chrániacej skupiny Prt hore opísaným spôsobom. Kopulácia medziproduktu vzorca 4 na aminokyseliny vzorca 5 sa môže vykonávať hore opísaným spôsobom za získania medziproduktu vzorca 6. Odstránením chrániacej skupiny z amínu vzorca 6 sa získa zlúčenina vzorca 7.

Schéma 2

R⁴ X⁴

-N—Prt

COOH

R⁴ X⁴ O

-N—ÍL r⁶_Ň_z*»

COOR

COOH 11

R⁶— n__Z*»

Schéma 2:

Alebo sa zlúčeniny vzorca 7 môžu pripravovať konvergenciou podlá schémy 2. Estery vzorca 8 ako medziprodukty sa môžu pripravovať spracovaním aminokyselín vzorca 1, kde znamená Ptr vhodnú chrániacu skupinu, so zásadou, ako je uhličitan draselný a následne alkylhalogenidom. ako je jódmetán, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je dimetylformamid. Odstránením chrániacej skupiny z amínu sa zlúčenina vzorca 8 mení na zlúčeninu vzorca 9. Vela aminokyselín vzorca 9 sú obchodne dostupné. Medziprodukt vzorca 10 sa pripravuje kopuláciou zlúčeniny vzorca 9 na aminokyselinu vzorca 5. Ester medziproduktu vzorca 10 sa môže meniť na kyselinu vzorca 11 ako medziprodukt početnými známymi spôsobmi, napríklad sa metylestery a etylestery môžu hydroly44 zovať hydroxidom lítnym v protickom rozpúšťadle, ako je vodný metanol alebo vodný tetrahydrofurán pri teplote približne -20 až 120’C, s výhodou približne 0 až 50“C. Okrem toho sa odstraňovanie benzylovej skupiny môže vykonávať početnými redukčnými spôsobmi vrátane hydrogenáciou v prítomnosti platinového alebo paládiového katalyzátoru v protickom rozpúšťadle, ako je metanol. Kyselina vzorca 11 sa potom môže kopulovat na amín vzorca 2 za získania medziproduktu vzorca 6. Transformácia zlúčeniny vzorca 6 na zlúčeninu vzorca 7 sa vykonáva odstránením chrániacej skupiny Z²⁰⁰.

Schéma 3

Schéma 3:

Estery vzorca 6 sa môžu meniť na kyseliny vzorca 13 ako medziprodukt početnými spôsobmi v odbore známymi. Napríklad sa metylestery a etylestery môžu hydrolyzovať hydroxidom lítnym v protickom rozpúšťadle, ako je vodný metanol alebo vodný tetrahydrofurán pri teplote približne -20 až 120’C, s výhodou približne 0 až 50’C. Prídavné sa môže odstraňovať benzylová skupina početnými redukčnými spôsobmi vrátane hydrogenácie v prítomnosti platinového alebo paládiového katalyzátoru v protickom rozpúšťadle, ako je metanol. Kopuláciou kyseliny vzorca 13 na amín vzorca 16 sa získa medziprodukt vzorca 14. Transformácia zlúčeniny vzorca 14 na zlúčeninu vzorca 15 sa vykonáva odstránením chrániacej skupiny Ζ²θ°.

Schéma 4

RR⁴ X⁴I

--N—H

COOH

RR⁴ X⁴ O R®

--Ň—U—R—N—Z²“

COOH

Schéma 4:

Estery vzorca 17 sa môžu pripravovať spracovaním kyseliny vzorca 5 hydroxysukcínimidom v prítomnosti kopulačného činidla, ako je napríklad EDC, v inertnom rozpúšťadle, ako je dichlórmetán, spôsobom objasneným v schéme 4. Spracovaním esteru vzorca 17 aminokyselinou vzorca 1 v rozpúšťadle, ako je dioxán, tetrahydrofurán alebo dimetylformamid, v prítomnosti zásady, ako je diizopropyletylamín, sa získa zlúčenina vzorca 11.

Schéma 5

Schéma 5:

Ako je zrejmé zo schémy 5, alkyláciou difenyloxazinónu vzorca 18 cinamylbromidom v prítomnosti bis(trimetylsilyl)amidu sodného sa získa zlúčenina vzorca 19, ktorá sa mení na žiadanú (D)-2-amino-5-fenylpentánovú kyselinu vzorca 20 odstránením chrániacej skupiny (Prt) a hydrogenáciou v prítomnosti chloridu paladnatého ako katalyzátoru.

Schéma 6:

Spracovaním esteru vzorca 21 zásadou, ako je hydrid sodný, v rozpúšťadle, ako je dimetyiformamid, a následne alkylhalogenidom vzorca 22 sa získa zlúčenina vzorca 23, ako je zrejmé zo schémy 6. Spracovaním zlúčeniny vzorca 23 hydrazínom vzorca

24, ako je hydrazín alebo metylhydrazín, v rozpúšťadle, ako je refluxný etanol, koncentráciou a zahrievaním zvyšku v toluéne na teplotu blízku teplote varu sa získa zlúčenina vzorca

25. Alebo sa zlúčenina vzorca 23 môže spracovávať soľou hydraží nu v prítomnosti octanu sodného za udržovania v etanole na teplote varu za získania zlúčeniny vzorca 25. Odstránením chrániacej skupiny z amínu sa získa zlúčenina vzorca 28. Tioamidy vzorca 26 sa môžu vytvárať spracovaním zlúčeniny vzorca 25 Lawessonovým činidlom varom pod spätným chladičom v toluéne alebo v benzéne. Odstránením chrániacej skupiny sa zlúčenina vzorca 26 mení na zlúčeninu vzorca 27.

Schéma 6:

Schéma 7

Schéma 7:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 21 hydrazínom vzorca 24 v roz púšťadle, ako je refluxný etanol, koncentráciou a zahrievaním zvyšku v toluéne na teplotu blízku teplote varu sa získa zlúčenina vzorca 29. Alebo sa zlúčenina vzorca 21 môže spracovávať solou hydrazínu v prítomnosti octanu sodného v refluxnom etanole za získania zlúčeniny vzorca 29. Amid vzorca 29 sa môže spracovávať zásadou, ako je hydrid sodný, v rozpúšťadle, ako je dimetylformamid, a následne alkylhalogenidom za získania zlúčeniny vzorca 25. Odstránením chrániacej skupiny z amínu sa získa zlúčenina vzorca 28.

Schéma 8

Schéma 8:

Reakciou ketoesteru vzorca 30 s chirálnym amínom, ako je α-metylbenzylamín, s vhodným aldehydom, ako je formaldehyd, alebo reakciou vinylketoesteru vzorca 31 s chirálnym amínom, ako je α-metylbenzylamín, s vhodným aldehydom, ako je formaldehyd, sa získa zlúčenina vzorca 32 podvojnou Mannichovou reakciou. Reakciou zlúčeniny vzorca 32 s hydazínom sa získa chi rálna zlúčenina vzorca 33. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka vodíkom v prítomnosti vhodného katalyzátoru, ako je ládium, sa získa zlúčenina vzorca 34.

Schéma 9

Schéma 9:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 81 redukčným činidlom, ako je bórhydrid sodný, a odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 82. Chránením alkoholu sa získa zlúčenina vzorca 83. Zmydelnením esteru sa získa zlúčenina vzorca

84. Reakciou zlúčeniny vzorca 84 s tionylchloridom a následným spracovaním diazometánom sa získa homologovaná kyselina vzorca

85. Esterifikáciou zlúčeniny vzorca 85 sa získa zlúčenina vzorca 86 a odstránením chrániacej skupiny z kyslíka sa získa zlúčenina vzorca 87. Oxidáciou zlúčeniny vzorca 87 sa získa ketón vzorca 88. Reakciou zlúčeniny vzorca 88 s hydrazínom a následným odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 44.

Schéma 10

Schéma 10:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 35 zásadou, ako je hydrid sodný, v rozpúšťadle, ako je dimetylformamid, a následným spracovaním diétylkarbonátom sa získa etylester zlúčeniny vzorca 36. Odstránením chrániacej skupiny z amínu sa získa zo zlúčeniny vzorca 36 zlúčenina vzorca 37.

Schéma 11

Schéma 11:

Spracovaním esteru malónovej kyseliny vzorca 38 zásadou, ako je hydrid sodný, v rozpúšťadle, ako je dimetylformamid, a následnou hydrogenolýzou benzylovej skupiny vodíkom v prítomnosti katalyzátoru, ako je paládium, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je metanol, sa získa ester vzorca 39. Odstránením chrániacej skupiny z amínu sa získa zlúčenina vzorca 40.

Schéma 12:

Spracovaním ketónu vzorca 41 sekundárnym amínom, ako je piperidín, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je benzén, za odstraňovania vody sa získa enamín 42. Alkyláciou enamínu a-halogénestérom, ako je etylbrómacetát, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je benzén alebo tetrahydrofurán, pri použití vhodnej zásady, ako je LDA alebo NaN(SiMe₃)2 sa získa ketoester vzorca 43. Reakciou s hydrazínom vzorca 24 sa získa zlúčenina vzorca 44. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 45.

Schéma 12

Schéma 13:

Spracovaním ketoesteru vzorca 37 jodóniovou soľou, ako j difenyljodóniumtrifluóracetát, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je terc.-butanol, sa získa ketoester vzorca 46. Reakciou ketoesteru 46 s hydrazínom sa získa zlúčenina vzorca 47. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 48 (ako je podrobne opísané v Synthesis (9), str. 709, 1984).

Schéma 14

Schéma 14:

Spracovaním ketoesteru vzorca 37 olefínom, ako je akrylo nitril, sa získa ketoester vzorca 49. Reakciou ketoesteru 49 s hydrazínom sa získa zlúčenina vzorca 50. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 51.

Schéma 15

zi o

Schéma 15:

Spracovaním ketoesteru vzorca 37 alylbromidom a vhodnou zásadou, ako je hydrid sodný, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je dimetylformamid, sa získa ketoester vzorca 52. Reakciou ketoesteru vzorca 52 s hydrazínom sa získa zlúčenina vzorca 53. Ozonolýzou zlúčeniny vzorca 53 vo vhodnom rozpúšťadle, ako je dichlórmetán, a následným spracovaním redukčným činidlom, ako je dimetylsulfid, sa získa aldehyd vzorca 54. Oxidáciou aldehydu vzorca 54 sa získa karboxylová kyselina vzorca 55. Curtiusovým preskupením zlúčeniny vzorca 55 a následnou hydrolýzou izokyanátu ako medziproduktu sa získa primárny amín vzorca 56. Spracovaním zlúčeniny vzorca 56 izokyanátom alebo karbamátom sa získa močovina vzorca 57. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 58.

Schéma 16

Schéma 16:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 54 primárnym amínom sa získa imín vzorca 59. Redukciou zlúčeniny vzorca 59 sa získa zlúčenina vzorca 60. Spracovaním zlúčeniny vzorca 60 acylačným činidlom sa získa zlúčenina vzorca 61. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 62.

Schéma 17

Schéma 17:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 54 redukčným činidlom, ako je bórhydrid, sa získa zlúčenina vzorca 63. Reakciou zlúčeniny vzorca 63 s acylačným činidlom, ako je izokyanát alebo karbamát, sa získajú zlúčeniny vzorca 64. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 65.

Schéma 18

R² /

Schéma 18:

Spracovaním zlúčeniny vzorca 63 fosfínom, ako je trifenylfosfín, a azozlúčeninou, ako je dietylazodikarboxylát a oxindol, sa získa zlúčenina vzorca 66. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získa zlúčenina vzorca 67.

Schéma 19

Schéma 19:

Spracovaním ketoesteru vzorca 37 chirálnym diolom v prítomnosti kyslého katalyzátoru za odstraňovania vody vo vhodnom rozpúšťadle, ako je benzén, sa získa chirálny ketal vzorca 68. Alkyláciou zlúčeniny vzorca 68 alkylhalogenidom v prítomnosti zásady, ako je LDA, a následnou kyslé katalyzovanou hydrolýzou ketalu sa získajú chirálne ketoestery vzorca 69. Reakciou zlúčeniny vzorca 69 s hydrazínom sa získajú chirálne zlúčeniny vzorca 70. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 71.

Schéma 20

Schéma 20:

Spracovaním ketoesteru vzorca 37 chirálnym esterom amino kyseliny, ako je terc.-butylester valínu, sa získa chirálny enamín vzorca 72. Alkyláciou zlúčeniny vzorca 72 alkylhalogenidom v prítomnosti zásady, ako je LDA a následnou kyslé kata lyzovanou hydrolýzou enamínu sa získajú chirálne ketoestery vzorca 69. Reakciou zlúčeniny vzorca 69 s hydrazínom sa získa jú chirálne zlúčeniny vzorca 70. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 71.

Schéma 21

R² R² / /

Schéma 21:

Odstránením chrániacej skupiny z dusíka zlúčeniny vzorca 25 sa získajú zlúčeniny vzorca 28. Vytvárnením soli zlúčeniny vzorca 28 s chirálnou kyselinou sa získa zmes diastereomérnych solí zlúčeniny vzorca 73. Kryštalizáciou diastereomérnych solí sa získa soľ s kyselinou chirálnej zlúčeniny vzorca 70. Rozkladom soli vzorca 70 zásadou sa uvoľňuje chirálna zlúčenina vzorca 71.

Pd(PPh₃)₄

R²

R

Schéma 2 2:

Alkyláciou zlúčeniny vzorca 25 alylacetátom v prítomnosti vhodného katalyzátoru, ako je paládium-tetrakis(trifenylfosfín) sa získajú zlúčeniny vzorca 74. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú robne opísané v Tetrahedron zlúčeniny vzorca 75 (ako je pod(50), Str. 515, 1994).

Schéma 23:

Spracovaním ketodiesteru vzorca 76 alkylhalogenidom v pri tomnosti zásady, ako je hydrid sodný a následnou kyslé kataly zovanou hydrolýzou a dekarboxyláciou, s následnou esterifikáciou metyljodidom v prítomnosti vhodnej zásady sa získa zlúče nina vzorca 77. Reakciou zlúčeniny vzorca 77 s vhodným aldehy dom, ako je formaldehyd, a s benzylamínom sa získa zlúčenina vzorca 78. Reakciou zlúčeniny vzorca 78 s hydrazínom sa získa jú chirálne zlúčeniny vzorca 79. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 80.

Schéma 24

Schéma 24:

Spracovaním amínu vzorca 23 kyselinou vzorca 11 v inertnom rozpúšťadle, ako je dlchlórmetán alebo dimetylformamid, kopulačným činidlom, ako je EDC alebo DCC, v prítomnosti HOBT sa získajú zlúčeniny vzorca 89. Reakciou zlúčeniny vzorca 89 s hydrazínom sa získajú zlúčeniny vzorca 6. Odstránením chrániacej skupiny z dusíka sa získajú zlúčeniny vzorca 7.

Schéma 25

Schéma 25:

Spracovaním hydroxyacetoacetátesteru vzorca 90 alkylhalogenidom v prítomnosti vhodnej zásady, ako je hydrid sodný, sa získajú zlúčeniny vzorca 91. Reakciou zlúčeniny vzorca 91 s hydrazínom sa získajú zlúčeniny vzorca 92. O-alkyláciou karbonylového kyslíka zlúčenín vzorca 92 sa získajú zlúčeniny vzorca 93, ktoré sa menia na halogenid vzorca 94. Vytlačením halogenidovej skupiny X kyanidovým iónom sa získa nitril vzorca

95. Redukciou zlúčeniny vzorca 95 sa získa primárny amín vzorca

96, ktorý odstránením chrániacej skupiny a cyklizáciou v prítomnosti formaldehydu poskytuje zlúčeniny vzorca 28.

Schéma 26

100

Schéma 26:

Spracovaním β-ketochráneného aminovalerátu vzorca 97 alkyl halogenidom v prítomnosti vhodnej zásady, ako je hydrid sodný, sa získajú zlúčeniny vzorca 98. Reakciou zlúčenín vzorca 98 s hydrazínom sa získajú zlúčeniny vzorca 99. Odstránením chrániacej skupiny zo zlúčeniny vzorca 99 sa získajú primárne amíny vzorca 100. Cyklizáciou zlúčenín vzorca 100 v prítomnosti for maldehydu sa získajú zlúčeniny vzorca 28.

Schéma 27

(CH2)_{w +}N

R³ R<

X. '

Prt

H

23a

R³ F

-W(H2C)

COjMe w(HzC)

23c

R-NHNH-,

R⁴ X⁴

R³·

CO odstránenie n chrániacej skupiny _W(H2C)^{X X}(CH2)„

N—N \

R²

R⁴ X⁴ O R® I

R⁸

I

HOOC—R⁶-N —

R3-P

CO

I wťHzC) (CHá„ n-n ^c ^SR² r6__N_₂200

R⁴ X⁴ O R⁸

R³—j—Ň—Lr⁶-N—H

CO

I odstránenie ehrfaiacej skupiny ^_C)'^N\oHá„

N ^XR²

N-r·' ⁰

Schéma 27:

Spracovaním amínu vzorca 23a kyselinou, ako je kyselina 1, v prítomnosti EDC a HOAT vo vhodnom rozpúšťadle sa získajú ketoestery vzorca 23b. Ketoester vzorca 23b sa môže spracovávať soľou hydrazínu v prítomnosti octanu sodného varom v etanole pod spätným chladičom za získania hydrazínu vzorca 23c. Odstránením chrániacej skupiny za vhodných podmienok sa získajú amíny vzorca 4. Kopuláciou amínu vzorca 4 ako medziproduktu na aminokyseliny vzorca 5 hore opísanou, sa získajú medziprodukty vzorca 6. Odstránením chrániacej skupiny z amínu vzorca 6 sa získajú zlúčeniny vzorca 7.

Schéma 28:

Prt znamená skupinu chrániacu aminoskupinu, pracovníkom v odbore známu. Príkladne, nie však ako akékoľvek obmedzenie, sa ako výhodná skupina Prt uvádza skupina BOC. Okrem toho ako koľvek schéma objasňuje prípravu zlúčeniny vzorca m pri použití určitých izomérov, spadajú do rozsahu vynálezu aj iné izoméry a/alebo izomérne zmesi.

dipeptidové jadro

i.

Stupeň A

Do roztoku etylesterhydrochloridu 4-oxopiperidín-3-karboxlovej kyseliny v inertnom rozpúšťadle, ako je IPE, tetrahydrofurán, dichlórmetán a etylacetát s vodou alebo bez vody ako korozpúšťadla, s výhodou IPE a vody, sa pridá anorganická alebo organická zásada, ako je TEA, DMAP, hydroxid alebo uhličitan, s výhodou TEA a vykoná sa chránenie aminoskupiny s výhodou (Βοο)₂θ· Reakčná zmes sa mieša počas jednej až 24 hodín, s výhodou cez noc, s výhodou v prostredí dusíka. Organická fáza sa oddelí, spracuje sa známym spôsobom a skoncentruje sa, čím sa získa produkt v podobe kryštálov.

Stupeň B

Do roztoku l-terc.-butylester-3-etylesteru 4-oxopiperidín-3-karboxlovej kyseliny v organickom rozpúšťadle, ako je THF, IPE, alkohol, DNF alebo DMSO, s výhodou dimetylformamid, sa pridá anorganická alebo organická zásada, ako TEA, DMAP, hydroxid alebo uhličitan, s výhodou uhličitan lítny a potom benzylbromid. Reakčná zmes sa zahrievaním udržuje na teplote približne 25 až 100’C, s výhodou 60'C a mieša sa počas jednej až 24 hodín, s výhodou 20 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a extrahuje sa organickým rozpúšťadlom, ako je IPE, toluén, THF alebo etylacetát a spracuje sa známym spôsobom za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň C

Do roztoku l-terc.-butylester-3-etylesteru 3-benzyl-4oxopiperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny v organickom rozpúšťadle, ako je alkohol, THF alebo toluén, sa pridá metylhydrazín, následne kyselina, ako je kyselina sírová, chlorovodíková, octová alebo TsOH, s výhodou kyselina octová pri teplote približne 0’C až teplote miestnosti. Reakčná zmes sa zahreje pomaly na teplotu približne 40 až 100’C, s výhodou približne

65°C a mieša sa počas približne troch až desiatich hodín, s výhodou 7,5 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa organická vrstva premyje 10% roztokom hydrogénuhličitanu sodného, spracuje sa známym spôsobom a skoncentruje sa, čím sa získa žiadaná zlúčenina.

Stupeň D

Koncentrovaný roztok zo stupňa C sa mieša s organickým rozpúšťadlom, ako je IPE, ochladí sa na teplotu približne -10 až 10C, s výhodou na teplotu 0^eC, opakovane sa zavádza kyselina, ako je MeSO₃H, TFA alebo HC1, s výhodou plynný chlorovodík a mieša sa pri teplote miestnosti do ukončenia hydrolýzy. Reakčná zmes sa skoncentruje, pridá sa organické rozpúšťadlo, napríklad dichlórmetán, IPE alebo THF, následne sa pridá zásada, ako je hydroxid alebo uhličitan, s výhodou hydroxid amónny. Reakčná zmes sa extrahuje dichlórmetánom, IPE alebo THF a skoncentruje sa za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň E

Do roztoku 3a-benzyl-2-metyl-2,3a,4,5,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-onu v zmesi acetónu a vody (1 až 11 % vody, s výhodou 5 % vody v acetóne) sa pridá L-vínna kyselina. Zmes sa zahreje na teplotu 25 až 60° C, s výhodou na teplotu približne 50°C a mieša sa s výhodou cez noc. Reakčná zmes sa ochladí s výhodou na teplotu približne 10 až 15°C a zrazenina sa odfiltruje, premyje sa studenou zmesou acetónu a vody a vysuší sa za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň 6

2-Aminoizomaslová kyselina, zásada, ako je hydroxid, s výhodou hydroxid sodný, (Boc)₂0 a organické rozpúšťadlo, ako je THF, IPE alebo dioxán, sa navzájom zmiešajú a zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa zriedi orga72 niekým rozpúšťadlom, ako je etylacetát, a hodnota pH sa nastaví na približne 3 až 7 pridaním vodnej kyseliny, napríklad kyseliny chlorovodíkovej. Organická fáza sa oddelí a spracuje sa známym spôsobom za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň H

Do roztoku 2-amino-3-benzyloxypropiónovej kyseliny vo vode a v organickej zásade, s výhodou TEA, sa pridá 2,5-dioxopyrrolidin-l-ylester 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónovej kyseliny v organickom rozpúšťadle, ako je tetrahydrofurán. Reakčná zmes sa mieša s výhodou cez noc s výhodou pri teplote miestnosti, s výhodou v prostredí dusíka. Do reakčnej zmesi sa pridá vodná kyselina, ako je 10% roztok kyseliny citrónovej . Zmes sa mieša počas niekoľkých minút a zriedi sa organickým rozpúšťadlom, ako je etylacetát. Organická fáza sa oddelí od zmesi a spracuje sa známym spôsobom a skoncentruje sa za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň F a I

Do roztoku L-vínanu 3a-(R)-benzyl-2-metyl-2,3a,4,5,6,7hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-onu v organickom rozpúšťadle, ako je etylacetát, sa pridá pri teplote približne -78 až -20’C, s výhodou približne -66'C, zásada, ako je TEA. Reakčná zmes sa mieša počas jednej až 24 hodín, s výhodou počas 1,5 hodiny. Po odstránení vyzrážanej soli sa pridá 3-benzyloxy-2(2-terc. -butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino)propiónová kyselina a zásada, ako je TEA, pri teplote približne -50 až O’C, s výhodou približne -35’C a následne peptidové kopulačné činidlo, s výhodou 50% cyklický anhydrid 1-propánfosfónovej kyseliny (PPAA) v etylacetáte. Zmes sa mieša počas jednej až šiestich hodín, s výhodou približne dve hodiny pri teplote -50 až O’C, s výhodou približne -20 až -27’C, potom sa teplota pomaly zvýši na približne O’C. Reakčná zmes sa vleje do vody a extrahuje sa organickým rozpúšťadlom, ako je IPE, a organic73 ká vrstva sa oddelí a spracuje sa známym spôsobom za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň J

Do roztoku terc.-butylesteru {l-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl 3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl]-l-metyletyl}karbámovej kyseliny v organickom rozpúšťadle, ako je dichlórmetán, sa pridá TFA pri teplote približne -10 až 10’C, s výhodou približne 0 až 5°C, s výhodou pri teplote udržovanej pod približne 5’C. Teplota sa zvýši na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa mieša počas približne jednej až šiestich hodín, s výhodou počas približne troch hodín. Dichlórmetán sa nahradí iným organickým rozpúšťadlom, ako je etylacetát. Hodnota pH zmesi sa nastaví na približne 7 až 9, s výhodou na pH 8, vodnou zásadou, ako je nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného a spracuje sa známym spôsobom za získania žiadanej zlúčeniny.

Stupeň K

Do roztoku 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)benzyloxymetyl-2-oxoetyl]-2-metylpropiónamidu zo stupňa I v alkohole, ako je metanol, sa pridá L-(+)-kyselina vínna a reakčná zmes sa mieša cez noc. Získaný roztok sa sfiltruje a skoncentruje sa. Pridá sa organické rozpúšťadlo, ako je IPE alebo etylacetát a azeotropicky sa odstráni zvyšný alkohol. Izolovaná pevná látka sa rozpustí v etylacetáte, roztok sa varí pod spätným chladičom, nechá sa ochladiť na teplotu miestnosti za získania kryštálov žiadaného produktu.

Vynález objasňujú, žiadnym spôsobom však neobmedzujú nasledujúce príklady praktického uskutočnenia.

Na stĺpcovú chromatografiu sa používa Amicon oxid kremičitý 30 μπι s veíkostou pórov 6 nm. Teplota topenia sa stanovuje pri použití aparatúry Buchi 510 a nekoriguje sa. Protónové a uhlíkové spektrá NMR sa zaznamenávajú na jednotke Varian XL-300, Bruker AC-300, Varian Unity 400 alebo Bruker AC-250 pri teplote 25C. Chemické posuny sa vyjadrujú v častiach na milión z trimetylsilánu. Časticový lúč hmotového spektra sa získa na spektrometri Hewlett-Packard 5989A pri použití amoniaku ako zdroja chemickej ionizácie. Na počiatočné rozpustenie vzorky sa používa chloroform alebo metanol. Kvaplinové sekundárne iónové hmotové spektrá (LSIMS) sa získajú na vysoko rozlišovacom spektrometri Kratos Concept-lS pri použití bombardovania céznymi iónmi na vzorke rozpustenej v systéme 1:5 ditioerytritol/ditiotreitol alebo v tioglycerolovej matrici. Na počiatočné rozpúšťanie vzorky sa použije chloroform alebo metanol. Uvádzané hodnoty sú súčty 3 až 20 odpočtov kalibrované proti jodidu céznemu. Chromatografia v tenkej vrstve sa vykonáva pri použití doštičiek oxidu kremičitého E. Merk Silikagél 60 F254 zviditeínených (po eluovaní uvedeným rozpúšťadlom alebo rozpúšťadlami) zafarbením 15% etanolovou fosfomolybdénovou kyselinou a zahriatím na horkej doštičke.

Všeobecný spôsob A (peptidová kopulácia pri použití EDC)

Spracováva sa 0,2 až 0,5M roztok primárneho amínu (1,0 ekvivalentov) v dichlórmetáne (alebo primárneho amínhydrochloridu a 1,0 až 1,3 ekvivalentov trietylamínu) postupne 1,0 až 1,2 ekvivalenty kopulačného partnera karboxylovej kyseliny,

1,5 až 1,8 ekvivalentmi hydroxybenzotriazolhydrátu (HOBT) alebo HOAT a 1,0 až 1,2 ekvivalenty (stechiometrickým ekvivalentom k množstvu karboxylovej kyseliny) l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodimidhydrochloridu (EDC) a zmes sa mieša cez noc na íadovom kúpeli (íadový kúpeí sa nechá ohriať a reakčná zmes sa spravidla necháva na teplote približne 0 až 20°C počas štyroch až šiestich hodín a na teplote 20 až 25C zvyšný čas). Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom alebo iným rozpúšťadlom, ako je uvedené, a zmes sa premyje dvakrát IN roztokom hydroxidu sodného, dvakrát IN kyselinou chlorovodíkovou (pokial produkt nie je zásaditý), raz solankou, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa, čím sa získa surový produkt, ktorý sa čistí, ako je uvedené. Karboxylová kyselina sa môže použiť v podobe dicyklohexylamínovej soli pri kopulácii na primárny amín alebo hydrochlorid primárneho amínu, pričom v takom prípade sa nepoužije trietylamín.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

2-Amino-N-{1(R)-benzyloxymetyl-2-[3a-(R)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetyl}izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N-{1(R)-benzyloxymetyl-2-[3a-(S)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetyl}izobutyramidhydrochlorid

A. 1-terc.-Butylester 3-etylester 4-oxopiperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Zmes 8,00 g (38,5 mmol) etylesterhydrochloridu 4-oxopiperidín-3-karboxylovej kyseliny, 9,23 g (42,4 mmol) di-terc.butylkarbonátu a 3,89 g (38,5 mmol) trietylamínu v 150 ml tetrahydrofuránu sa mieša približne 72 hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a premyje sa trikrát vždy 10% vodnou kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 10,0 g 1A v podobe bielej pevnej látky. MS (Cl,NH₃) 272 (MH⁺).

- 76 B. 1-terc.-Butylester 3-etylester 3-(RS)-(4-fluórbenzyl)-4-oxopiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 2,00 g (7,4 mmol) 1A v 10 ml dimetylformamidu sa pridá 282 mg (7,4 mmol) hydridu sodného (60% disperzia v oleji) a zmes sa mieša približne 15 minút pri teplote miestnosti. Pridá sa roztok 1,39 g (7,4 mmol) 4-fluórbenzylbromidu v 7 ml dimetylformamidu do miešaného roztoku a zmes sa mieša približne 72 hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa raz vodou a štyrikrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 2,8 g 1B. MS (Cl,NH₃)380 (MH⁺).

C. terc.-Butylester 3a-(RS)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 2,54 g (6,7 mmol) 1B a 309 mg (6,7 mmol) metylhydra zínu v 100 ml etanolu sa zahrieva približne 8 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 100 ml toluénu a zahrieva sa počas približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 18:82 etylacetát/hexán) až (objemovo 75:25 etylacetát/hexán), čím sa získa 1,0 g 1C v podobe číreho bezfarbého oleja. MS (C1,NH₃) 362 (MH⁺).

D. Trifluóracetát 3a-(RS)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-2,3a,4,5,-6,7-hexahydropyra zolo[4,3-c]pyridin-3-onu

Do 1,00 g (2,8 mmol) 1C sa pridá 10 ml trifluóroctovej kyseliny pri teplote približne 0’C a zmes sa mieša približne jednu hodinu. Pridá sa etylacetát a zmes sa skoncentruje, čím sa získa 1,0 g 1D. MS (C1,NH₃) 263 (MH⁺).

η

E. (R)-3-Benzyloxy-2-(2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metyl-propionylamino)propiónová kyselina

Do 1,83 g (6,2 mmol) N-terc.-BOC-O-benzyl-D-serínu v 35 ml dimetylformamidu sa pridá 1,02 g (7,4 mmol) uhličitanu draselného, následne 0,92 g (6,5 mmol) jodometánu. Zmes sa mieša cez noc pri teplote približne 24^eC v prostredí dusíka. Reakčná zmes sa zriedi 200 ml vody a extrahuje sa trikrát etylacetátom Spojené organické podiely sa premyjú päťkrát vodou a raz solankou, vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa. Surový metylester (R)-3-benzyloxy-2-terc.-butoxykarbonylaminopropiónovej kyseliny sa rozpustí v 15 ml studenej trifluóroctovej kyseliny pri teplote približne O’C a zmes sa mieša počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa zriedi IN roztokom hydroxidu sodného a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyjú solankou a vysušia sa síranom sodným, čím sa získa 0,84 g (4,02 mmol) výsledného metylesteru (R)-2-amino-3-benzyloxypropiónovej kyseliny, ktorý sa spojí s 0,81 g (4,02 mmol) N-terc.-BOCα-metylalanínu, čím sa získa 1,80 g metylesteru (R)-3-benzyloxy-2-(2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino)propiónovej kyseliny. Surový produkt sa rozpustí v 20 ml systému tetrahydrofuránu:voda 4:1, pridá sa roztok 335 mg (7,98 mmol) lítiumhydroxidhydrátu v 1 ml vody a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje, zvyšok sa zriedi etylacetátom, okyslí sa vodnou kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyjú raz solankou, vysušia sa síranom sodným za získania 1,60 g IE v podobe oleja, ktorý stuhne státím. ¹HNMR (CDC1₃ 300 MHz) δ 7,30 (m,5H), 7,10 (d,lH), 5,07 (bs, 1H), 4,68 (m,lH), 4,53 (q,2H), 4,09 (m,lH), 3,68 (m,lH), 1,31,5 (m,15H).

F. terc.-Butylester (l-{l(R)-benzyloxymetyl-2-[3a-(R,S)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo78

-[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetylkarbamoyl}-1-metyletyl)-karbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa spojí 193 mg (0,51 mmol) 1D a 196 mg (0,51 mmol) a 1E za získania zmesi diastereomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéii pri použití elučného gradientu (objemovo 1:1 etylacetát:hexán) až 100% etylacetát, čím sa získa 60 mg menej polárneho 1F izoméru 1 a 100 mg viac polárneho 1F izoméru 2. MS (C1,NH₃)624 (MH⁺) pre obidva izoméry.

G. Hydrochlorid 2-amino-N-{l(R)-benzyloxymetyl-2-[3a-(R)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetyl}izobutyramidu

Do 60 mg (0,10 mmol) 1F izoméru 1 v 10 ml etanolu sa pridajú 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša približne počas dvoch hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/hexán za získania 50 mg 1G izoméru 1 v podobe bieleho prášku. MS (Cl, NH₃) 524 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,32 (m,5H), 7,12 (m,2H), 6,91 (m,2H), 5,15 (m,lH), 4,54 (s,2H), 3,78 (m,2H), 3,02 (m, 7H), 2,66 (m,2H) 1,57 (s,6H).

H. Hydrochlorid 2-amino-N-{l(R)-benzyloxymetyl-2-[3a-(S)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetyl}izobutyramidu

Do 100 mg (0,16 mmol) 1F izoméru 2 v 10 ml etanolu sa pridajú 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša počas približne dvoch hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/ hexán za získania 60 mg 1H izoméru 2 v podobe bieleho prášku. MS (C1,NH₃) 524 (MH⁺).

¹HNMR (CD-jOD): (parciálny) δ 7,32 (m,5H), 7,08 (m,2H), 6,95 (m,2H), 6,80 (m,2H) 5,30 (m,lH), 4,61 (m,3H), 3,80 (m,2H), 2,58 (m,3H), 1,58 (s,6H).

Príklad 2

Hydrochlorid 2-amino-N-2-[ 3a-(RS)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo14,3-c]pyridin5-yl]-1(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoetyl}izobutyramidu

A. Metylester (R)-2-amino-3-(lH-indol-3-yl)propiónovej kyseliny

Do 4,92 g (16,2 mmol) Ν-α-terc.-BOC-D-tryptofánu v 100 ml dimetylformamidu sa pridá 2,46 g (17,8 mmol) uhličitanu draselného, následne-2,41 g (17,0 mmol) jodometánu a zmes sa mieša cez noc pri teplote 24’C v prostredí dusíka. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyjú päťkrát 500 ml vody a raz solankou, vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa 4,67 g bielej pevnej látky. Do surového metylesteru (R)-2-terc.-butoxykarbonylamino-3-(lH-indol-3-yl)propiónovej kyseliny sa pridá 15 ml studenej trifluóroctovej kyseliny pri teplote približne 0’C a zmes sa mieša počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa zriedi IN roztokom hydroxidu sodného a extrahuje sa trikrát etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyjú solankou a vysušia sa síranom sodným, čím sa získa metylester (R)-2-amino-3-(lH-indol-3-yl)propiónovej kyseliny v podobe oranžového oleja v kvantitatívnom výťažku.

B. Metylester (R)-2-(2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino)-3-(lH-indol-3-ylJpropiónovej kyseliny

Surový produkt 2A 1,55 g (7,1 mmol) sa kopuluje na 1,44 g (7,1 mmol) N-terc.-BOC-a-metylalanín podľa postupu A, čím sa získa olej, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití gradientu 10 %, 20 %, 30 %, 40 % a 50 % etylacetátu v hexáne ako elučného činidla. Získa sa 1,32 g metylesteru (R)-2-(2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino) -3(lH-indol-3-yl)propiónovej kyseliny.

C. (R)-2-(2-terc.-Butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino)-3-(lH-indol-3-yl)propiónová kyselina

Do roztoku 1,03 g (2,64 mmol) 2B v 10 ml tetrahydrofuránu sa pridá 381 mg (9,1 mmol) lítiumhydroxidhydrátu v 2 ml vody a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Prebytok tetrahydrofuránu sa odparí a bázická vodná zmes sa extrahuje trikrát etylacetátom, potom sa okyslí na hodnotu pH 4 zriedenou octovou alebo chlorovodíkovou kyselinou. Produkt sa extrahuje etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyjú solankou, vysušia sa síranom horečnatým a odparia sa, čím sa získa 1,03 g 2C v podobe oranžovej peny. MS (Cl,NH₃) 390 (MH⁺) ¹HNMR (CDC1₃ 300 MHz) δ 7,61 (d,lH), 7,48 (d,lH), 7,27 (t,lH),

7,10 (t,lH), 4,81 (bs, 1H), 3,35 (m,lH), 1,49 (s,6H), 1,32 (s, 9H) .

D. terc.-Butylester {1—[2-[3a-(RS)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-OXO-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1- (R)-(lH-indol-3-metyl)-2-oxo-etylkarbamoyl]-1-metyletyl}-karbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 193 mg (0,51 mmol) 1D a 200 mg (0,51 mmol) 2C a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (obje movo 1:1 etylacetát:hexán) až 100% etylacetát, čím sa získa 230 mg 2D. MS (C1,NH₃) 633 (MH⁺).

E. 2-Amino-N-[2-[3a-(RS)-(4-fluórbenzyl)-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 230 mg (0,36 mmol) 2D v 10 ml etanolu sa pridajú 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a reakčná zmes sa mieša počas dvoch hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/hexán a získa sa 130 mg 2E v podobe bieleho prášku. MS (C1,NH₃) 533 (MH⁺) ¹HNMR (CDC1₃ 300 MHz) (parciálny) δ 7,79 (d,lH), 7,48 (m,lH),

7,33 (m,2H), 7,19-6,77 (m,7H), 6,54, (m,lH), 5,17 (m,lH),

4,02 (m,lH), 3,11-2,68 (m,6H), 2,47 (m,2H), 2,03 (m,2H), 1,59 (m,6H).

Príklad 3

2- Amino-N- [ 2- [ 3a-(RS) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexa-hydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl ]-1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoety1]i zobutyramid

A. 1-terc.-Butylester 3-metylester 4-oxo-piperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Do zmesi 7,00 g (36,2 mmol) metylesteru 4-oxo-piperidín3- karboxylovej kyseliny a 8,82 g (72,3 mmol) 4,4-dimetylaminopyridínu v 200 ml metylénchloridu sa pri teplote približne 0C pridá počas približne 30 minút roztok 7,88 g (36,2 mmol) diterc.-butyldikarbonátu v 150 ml metylénchloridu. Zmes sa ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa počas približne 17 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa zriedi chloroformom a premyje sa trikrát 10% vodnou kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým, skoncentruje sa, čím sa získa 9,18 g číreho žltého oleja.

B. 1-terc.-Butylester 3-metylester 3-(RS)-benzyl-4-oxopiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 5,00 g (19,4 mmol) 3A v 10 ml dimetylformamidu sa pridá 745 mg (7,4 mmol) hydridu sodného (60% disperzia v oleji) a zmes sa mieša počas približne 15 minút pri teplote miestnosti. Kanylou sa do miešaného roztoku pridá roztok 3,32 g (19,4 mmol) benzylbromidu v 15 ml dimetylformamide a zmes sa mieša počas približne 42 hodín pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa raz vodou a štyrikrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým, skoncentruje sa a získa sa 6,0 g 3B v podobe žltého oleja.

MS (C1,NH₃) 348 (MH⁺).

C. terc.-Butylester [3a-(RS)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4-6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 4,00 g (11,5 mmol) 3B a 530 mg (11,5 mmol) metylhydrazínu v 100 ml etanolu sa zahrieva počas približne ôsmich hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 15:85 etylacetát/hexán) až (objemovo 75:25 etylacetát/hexán), čím sa získa 2,6 g 3C v podobe číreho bezfarbého oleja. MS (C1,NH₃) 344 (MH⁺).

D. [3a-(RS)-Benzyl-2-metyl-2,3a,4,5,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-3-on

Do 2,60 g (7,6 mmol) 3C sa pridá 20 ml trifluóroctovej kyseliny pri teplote približne 0’C a zmes sa mieša počas približne 2,5 hodín. Pridá sa etylacetát a roztok sa premyje 6N roztokom hydroxidu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a

I skoncentruje sa, čím sa získa 1,8 g 3D. MS (C1,NH₃) 244 (MH ).

E. terc.-Butylester {l-[2-(3a-(RS)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyra zolo[4,3-c]pyridin-5-y1)-1(R)-(1H-indol-3-ylmetyl)-2-oxo-etylkarbamoyl]-l-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 125 mg 3C a 1,75 g (0,51 mmol) 2C a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 6:4 etylacetát/hexán) až 7 % metanolu v etylacetáte, čím sa získa 150 mg 3E.

F. 2-Amino-N-[2-(3a-(RS)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-l(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 150 mg (0,24 mmol) 3E v 15 ml etanolu sa pridá 5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 3 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému etanol/ hexán, čím sa získa 100 mg 3F. MS (Cl,NH₃) 515 (MH⁺).

^HNMR (CD₃OD) 6 7,20-6,91 (m,9H), 6,56 (m,lH), 5,17 (m,lH), 4,05 (m,lH), 2,96 (s,3H), 2,62 (m,lH), 2,38 (m,lH), 2,06 (m, 2H), 1,61 (m,8H).

Príklad 4

2-Amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)-benzyloxymetyl)-2-oxo -etyl]izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N-[2-(3a-(S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)-benzyloxymetyl)-2-oxo -etyl]izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester (l-[2-(3a-(R,S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)benzyloxymetyl)-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletylkarbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 1,12 g (4,6 mmol) 3C a 1,75 g (0,51 mmol) 1E a získa sa zmes diaste84 reomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 1:1 etylacetát/hexán) až 100% etylacetát, čím sa získa 350 mg menej polárneho 4A izoméru 1 a 250 mg viac polárneho 4A izoméru 2. MS (Cl,NH₃)6O6MH⁺) pre obidva izoméry.

B. 2-Amino-N-12-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolot 4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)-benzyloxymetyl)-2-oxo-etyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 250 mg (0,41 mmol) 4A izoméru 1 v 15 ml etanolu sa pridá 5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 5 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/hexán a vysuší sa vo vákuu, čím sa získa 130 mg 4B izoméru 1.

MS (C1,NH₃) 506 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): δ 7,33 (m,5H), 7,14 (m,5H), 5,22 (m,lH), 4,57 (m,3H), 3,80 (m,2H), 3,14 (m,lH), 3,04 (s,3H), 2,96 (m,2H),

2,61 (m,2H), 1,63 (m,7H).

C. 2-Amino-N-[2-(3a-(S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyr idin-5-yl)-l (R)-benzyloxymetyl)-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 250 mg (0,41 mmol) 4A izoméru 2 v 15 ml etanolu sa pridá 5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 5 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/hexán a vysuší sa vo vákuu, čím sa získa 120 mg 4C izoméru 2.

MS (C1,NH₃) 506 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): δ 7,31 (m,5H), 7,13 (m,5H), 6,78 (m,lH), 5,28 (m,lH), 4,62 (m,3H), 3,81 (m,2H), 3,14 (m,lH), 2,62 (m,3H),

1,58 (m,7H).

D. 2-Amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl)-l(R)-benzyloxymetyl)-2-oxoetyl]izobutyramidmetánsulfonát

Do 3,60 g (6,6 mmol) 4B izoméru 1 sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa vysuší síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa rozpustí v etylacetáte, ochladí sa na teplotu približne 0‘C a pridá sa 0,43 ml (6,6 mmol) metánsulfónovej kyseliny a zmes sa mieša počas približne 0,5 hodiny. Do roztoku sa pridá hexán (200 ml), zmes sa mieša počas jednej hodiny a sfiltruje sa, čím sa získa na 3,40 g bielej pevnej látky. Pevná látka sa nechá prekryštalizovať z 3% vodného etylacetátu a získa sa 2,55 g 4D izoméru 1 v podobe bielej kryštalickej látky. MS(C1,NH₃) 506 (MH⁺).

Príklad 5

2-Amino-N-(1-(3a-(R) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karbonyl)-4-fenyl(R)-butyl]-izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N-[1-(3a-(S) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karbonyl)-4-fenyl(R)-butyl]-izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 2-oxo-5,6-difenyl-3-(3-fenylalyl)morfolín-4-karboxylovej kyseliny

Do roztoku 13,8 g (70,0 mmol) cinnamylbromidu a 4,94 g (14,0 mmol) terc.-butyl-(2S,3R)-(+)-6-oxo-2,3-difenyl-4-morfolínkarboxylátu v 350 ml bezvodého tetrahydrofuránu sa pri teplote približne -78’C pridá 28 ml (28 mmol) IM nátriumbistrimetylsilylamidu v tetrahydrofuráne. Zmes sa mieša pri teplote približne -78’C počas približne 1,5 hodiny a potom sa vleje do 750 ml etylacetátu. Zmes sa premyje dvakrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa žltý olej. Olej sa mieša v 150 ml hexánu cez noc a vyzrážaná pevná látka sa sfiltruje, čím sa získa 3,2 g 5A v podobe bielej pevnej látky.

B. 5(S),6(R)-Difenyl-3(R)-(3-fenylalyl)morfolin-2-on

Pri teplote približne O’C sa do 2,97 g (6,33 mmol) 5A pri dá 20 ml trifluóroctovej kyseliny, zmes sa mieša približne počas dvoch hodín a skoncentruje sa. Zvyšok sa rozpustí vo vode a alkalizuje sa vodným roztokom hydroxidu sodného až do hodnoty pH 10. Zmes sa extrahuje trikrát etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyjú solankou, vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa oranžový olej, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití ako elučného činidla systému objemovo 10:90 etylacetát/hexán, čím sa získa 880 mg 5B v podobe bielej pevnej látky.

C. 2-(R)-Amino-5-fenylpentánová kyselina

Zmes 440 mg (1,19 mmol) 5B a 120 mg chloridu paladnatého v 20 ml etanolu a 10 ml tetrahydrofuránu sa hydrogenuje za tlaku 310,5 kPa počas približne 16 hodín. Zmes sa sfiltruje cez kremelinu a skoncentruje sa; zvyšok sa trituruje s éterom, čím sa získa 240 mg 5C v podobe bielej pevnej látky.

D. 2,5-Dioxo-pyrolidin-l-ylester 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónovej kyseliny

Do suspenzie 5,0 g (24,6 mmol) N-terc.-BOC-a-metylalanínu v 13,5 ml metylénchloridu sa pridá 3,40 g (29,6 mmol) N-hydroxysukcínimidu a 5,65 g (29,6 mmol) EDC. Suspenzia sa mieša pri blížne 17 hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa vždy dvakrát vodou, nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému objemovo 1:1 etylacetát/ hexány, čím sa získa 5,2 g zlúčeniny D v podobe bielej pevnej látky.

E. (R)-2-(2-terc.-Butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino)5-fenylpentánová kyselina

Zmes 203 mg (1,05 mmol) 5D, 378 mg (1,26 mmol) 5C a 434 mg (3,36 mmol) diizipropyletylamínu v 2 ml dimetylformamidu sa mieša cez noc. Zmes sa zriedi etylacetátom a extrahuje sa dvakrát IN kyselinou chlorovodíkovou. Vodná fáza sa extrahuje raz etylacetátom. Spojené organické extrakty sa premyjú trikrát vodou a raz solankou. Zmes sa vysuší síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití 80 % chloroformu v hexáne, potom 100 % chloroformu a následne 10 % metanolu v chloroformu ako elučného činidla, čím sa získa 127 mg 5E.

F. Terc.-butylester {l-[l-[3a-(R,S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c ] pyridín-5-karbonyl ] -4-fenyl- (R)-butylkarbamoyl ]-1-metyletyl}-karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 130 mg (0,53 mmol) 3C a 200 mg (0,53 mmol) 5E za získania zmesi diastereomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 1:1 etylacetát/hexán) až 100% etylacetát, čím sa získa 40 mg menej polárneho 5F izoméru 1 a 40 mg viac polárneho 5F izoméru 2. MS(C1,NH₃) 604 (MH⁺) pre obidva izoméry.

G. 2-Amino-N-[l-[3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridín-5-karbonyl ] -4-f enyl- (R) -butyli zobutyramidhydrochlorid

Do 40 mg (0,07 mmol) 5F izoméru 1 v 10 ml etanolu sa pridajú 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne štyroch hodín Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému metylénchlorid/hexán a vysuší sa vo vákuu, čím sa získa 30 mg 5G izoméru 1. MS(C1,NH₃) 504 (MH⁺) ¹HNMR (CD₃OD): (parciálnyl) δ 7,19 (m,10H), 4,37 (m,lH), 3,02 (m,6H), 2,67 (m,4H), 1,83 (m,4H), 1,62 (s,6H), 1,28 (m,lH).

H. 2-Amino-N-[ 1-[3a-(S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridín-5-karbonyl]-4-fenyl- (R)-butyli zobutyramidhydrochlorid

Do 40 mg (0,07 mmol) 5F izoméru 2 v 10 ml etanolu sa pri dajú 4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne štyroch hodín. Zmes sa skoncentruje, zvyšok sa vyzráža zo systému metylénchlorid/hexán a vysuší sa vo vákuu, čím sa získa 30 mg 5H izoméru 2.

MS(C1,NH₃) 504 (MH⁺) 'HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,25 (m,9H), 6,88 (m,lH), 3,04 (m,3H), 2,71 (m,4H), 2,48 (m,2H), 1,75 (m,4H), 1,62 (m,6H),

I, 28 (m,lH).

Príklad 6

2-Amino-N- [ 2-(3a- (RS) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoety1]i zobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester (l-[2-[3a-(R,S)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ) ]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl]-l-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopulu j e 200 mg (0,82 mmol) 3C a 320 mg (0,82 mmol) 1E za vzniku zmesi diaste reomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 1:1 etylacetát/hexán) až 10 % metanolu v etylacetáte, čím sa získa 170 mg 6A.

B. 2-Amino-N-(2-(3a-(RS)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl) -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 170 mg (0,28 mmol) 6A v 20 ml etanolu sa pridá 5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 2,5 hodiny. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému etanol/hexán, čím sa získa 70 mg 6B. MS(C1,NH₃) 506 (MH⁺) ¹HNMR (CD₃OD): δ 7,32 (m,5H), 7,16 (m,5H), 5,22 (m,lH), 4,67 (m,lH), 4,55 (m,2H), 3,79 (m,2H), 3,12 (m,2H), 3,00 (m,6H), 2,71 (m,3H), 1,56 (m,8H).

Príklad 7

2-Amino-N- [ 2-(3a-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl )-1-( lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 3a-(R,S)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Do 555 mg (1,60 mmol) 3B v 27 ml etanolu sa pridá 240 mg (1,60 mmol) etylhydrazínoxalátu a zmes sa zahrieva pod spätným chladičom približne počas štyroch hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu (objemovo 10:1 hexán/etylacetát) až (objemovo 3:7 hexán/etylacetát), čím sa získa 357 mg 7A.

MS(C1,NH₃) 358 (MH⁺).

B. 3a-(R,S)-Benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-on

Do 350 mg (0,98 mmol) 7A v 3 ml etanolu sa pridá 1,5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje, čím sa získa 257 mg 7B. MS(C1,NH₃) 258 (MH⁺).

C. terc.-Butylester {l-[2-[3a-(R,S)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl) ]-1-(R)- (lH-indol-3-ylmetyl) -2-oxoetylkarbamoyl ] -1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 82 mg (0,28 mmol) 7B a 100 mg (0,26 mmol) 2C a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 100% metylénchlorid až 2 % metanolu v metylénchloride, čím sa získa 110 mg 7C. MS(C1,NH₃) 629 (MH⁺).

D. 2-Amino-N-[2-(3a-(R,S)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c]pyridin-5-yl) -1- (R) - (lH-indol-3-yl-metyl) - 2-oxoetyl ] izobutyramidhydrochlorid

Do 100 mg (0,15 mmol) 7C v 2 ml etanolu sa pridá 1 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje, čím sa získa 72 mg 7D v podobe bezfarbej peny. MS(C1,NH₃) 529 (MH⁺).

Príklad 8

2-Amino-N- [ 2- (3a- (R) -benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexa-hydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl) -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N- [ 2- (3a- (s) -benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexa-hydropyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl) -1-(R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester {l-[2-[3a-(R,S)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2 ,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)]-l-(R)benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl ] -1-metyletyl Jkarbámove j kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 85 mg (0,29 mmol) 7B a 100 mg (0,26 mmol) 1E za získania zmesi diastereomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 100% metylénchlorid až 2 % metanolu v metylénchloride, čím sa získa 6 mg menej polárneho 8A izoméru 1 a 11 mg viac polárneho 8A izoméru 2. MS(C1,NH₃)620 (MH⁺) pre obidva izoméry.

B. 2-Amino-N-[2-[3a-(R)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 5,7 mg (0,009 mmol) 8A izoméru 1 v 1 ml etanolu sa pridá 0,4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša približne počas troch hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a získa sa 4,7 mg 8B izoméru 1.

MS(C1,NH₃) 520 (MH⁺) ^HNMR (CD₃OD): (par-ciálny) δ 7,41-7,05 (m,10H), 5,20 (m,lH),

4,61 (m,lH), 4,52 (s,2H), 3,71 (m,lH), 3,60 (m,lH), 2,61 (m, 3H), 1,39 (m,9H).

C. 2-Amino-N-[2-[3a-(S)-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 10 mg (0,016 mmol) 8A izoméru 2 v 1 ml etanolu sa pridá 0,4 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša približne počas troch hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a získa sa 8 mg 8C izoméru 2.

MS(C1,NH₃) 520 (MH⁺) ¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,43-7,00 (m,10H), 6,81 (m,lH),

5,32 (m,lH), 4,63 (m,2H), 4,53 (m,lH), 3,72 (m,lH), 1,37 (m,9H)

Príklad 9

2-Amino-N-[2-(2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo- [ 4,3-c]pyridin-5-y1)-1-(R)-ben zyloxymety1-2-oxoety1]i zobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 2-benzyl-3-hydroxy-2,4,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 800 mg (3,11 mmol) 3B a 495 mg (3,11 mmol) benzylhydrazíndihydrochloridu a 423 mg (3,11 mmol) trihydrátu octanu sodného v 15 ml etanolu sa zahrieva počas približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 100 ml toluénu a zahrieva sa počas približne 48 hodín pod spätným chladičom. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom, premyje sa solankou vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití 100% etylacetátu, potom systému 5 % metanolu v metylénchloride, čím sa získa 530 mg 9A v podobe svetle hnedej pevné látky. MS(C1,NH₃) 330 (MH⁺).

B. 2-Benzyl-4,5,6,7-tetrahydro-2H-pyrazolo[4,3-c]pyridin-3-ol

Do 411 mg (1,24 mmol) 3E v 30 ml etanolu sa pridá 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša počas približne 30 minút pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému metanol/ etylacetát, čím sa získa 353 mg 9B. MS(C1,NH₃) 230 (MH⁺).

C. terc.-Butylester {l-[2-(2-benzyl-3-hydroxy-2,4,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podía všeobecného postupu A sa kopuluje 100 mg (0,38 mmol) 9B a 145 mg (0,38 mmol) 1E a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli (objemovo 95:5 metanol/metylénchlorid), čím sa získa 42 mg 9C v podobe bielej pevnej látky.

MS(C1,NH₃) 592 (MH⁺).

D. 2-Amino-N-[2-(2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 42 mg (0,07 mmol) 9D v 20 ml etanolu sa pridá 6 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša počas približne 30 minút pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa zriedi etanolom, skoncentruje sa a zvyšok sa vyzráža zo systému metanol/etylacetát za získania 35 mg 9D v podobe bielej pevnej látky. MS(C1,NH₃) 492 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,41-7,16 (m,10H), 5,19 (m,3H),

4,48 (m,4H), 3,88 (m,lH), 3,74 (m,2H), 2,68 (m,2H), 1,58 (m,6H).

Príklad 10

2-Amino-N-{2-[3a-(R)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluóretyl-2,3-3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyl-oxymetyl-2-oxoetyl}izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N-{2-[3a-(S)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluóretyl-2,3-3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(S)-benzyl-oxymetyl-2-oxoetyl}izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 3a-(RS)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluór-etyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 840 mg (2,42 mmol) 3B a 276 mg (2,42 mmol) 2,2,2-trifluóretylhydrazínu (70% vo vode) v 20 ml etanolu sa zahrieva počas piatich hodín pod spätným chladičom a potom sa skoncentruje. Zvyšok sa rozpustí v 40 ml toluénu a zahrieva sa 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému objemovo 9:1 hexán/etylacetát a získa sa 703 mg 10A v podobe žltého oleja. MS(Cl,NH₃) 412 (MH⁺).

B. 3a-(RS)-Benzyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-on

Do 600 mg (1,46 mmol) 10A sa pri teplote približne 0°C pridajú 3 ml studenej trifiuóroctovej kyseliny a zmes sa mieša počas približne troch hodín až do dosiahnutia teploty miestnosti. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí vo vode a roztok sa alkalizuje na hodnotu pH 11 5N roztokom hydroxidu sodného, potom sa nasýti uhličitanom draselným. Roztok sa extrahuje trikrát etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyjú solankou, vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa 345 mg 10B v podobe nepriehľadného oleja. MS(C1,NH₃) 312 (MH⁺).

C. terc.-Butylester (l-{2-[3a-(R,S)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trif luóretyl )-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl} -1-metyletyl) karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 137 mg (0,44 mmol) 10B a 167 mg (0,44 mmol) 1E, čím sa získa zmes diastereomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 100% metylénchlorid až 5 % metanolu v metylénchloride, čím sa získa 128 mg menej polárneho 10C izoméru 1 a 63 mg viac polárneho 10C izoméru 2.

MS(C1,NH₃)674(MH⁺) pre obidva izoméry.

D. 2-Amino-N-{2-[3a-(R)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl} izobutyramidhydrochlorid

Do 120 mg (0,18 mmol) 10C izoméru 1 v 3,5 ml etanolu sa pridá 1,5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje, čím sa získa 94 mg 10D izoméru 1 v podobe špinavo bieleho prášku. MS(C1,NH₃) 574 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,31(m,5H), 7,18 (m,5H), 5,21 (m, 1H), 4,57 (m,3H), 4,26 (m,lH), 4,08 (m,lH), 3,79 (m,2H), 3,09 (m,4H), 2,65 (m,2H), 1,63 (m,6H).

E. 2-Amino-N-{2-[3a-(S)-benzyl-3-oxo-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl} izobutyramidhydrochlorid

Do 53 mg (0,079 mmol) 10C izoméru 2 v 3,5 ml etanolu sa pridá 1,5 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje, čím sa získa 41 mg 10D izoméru 2 v podobe svetlo žltej pevnej látky. MS(C1,NH₃) 574 (MH⁺).

^lHNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,33 (m,5H), 7,15 (m,4H), 6,81 (m,lH), 5,30 (m,lH) 4,67 (m,4H), 4,15 (m,2H), 3,77 (m,2H),

3,09 (m,3H), 2,64 (m,3H), 1,58 (m,6H).

Príklad 11

2-Amino-N-{2-[3a-(R)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl}izobutyramidmetánsulfonát a

2-amino-N-{2-[3a-(S)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl}izobutyramidmetánsulfonát

A. terc.-Butylester 3A-(R,S)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,-3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Do 2,07 g (5,95 mmol) 14B v 40 ml etanolu sa pridá 0,97 g (7,7 mmol) terc.-butylhydrazínhydrochloridu a 0,63 g (7,7 mmol) octanu sodného a zmes sa udržuje na teplote 70°C počas približne 17 hodín. Zmes sa ochladí a zvyšok sa dekantuje od zrazeniny a skoncentruje sa. Zvyšok sa rozpustí v 80 ml toluénu a varí sa šesť hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli (objemovo 9:1 hexán/etylacetát), čím sa získa 1,7 g 11A.

MS(C1,NH₃) 386 (MH⁺).

B. 3A-(R,S)-Benzyl-2-terc.-butyl-2,3a,4,5,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-on

Do 535 mg (1,39 mmol) 11A v 20 ml metylénchloridu sa pridá 225 μΐ metánsulfónovej kyseliny a zmes sa mieša približne 1,5 hodiny pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa dvakrát IN roztokom hydroxidu sodného a raz solankou, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa, čím sa získa 246 mg 11B. MS(C1,NH₃) 286 (MH⁺).

C. terc.-Butylester {l-[2-(3a-(R,S)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c)pyridin-5-yl]-l-(R) benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl ]-1-metyletyl }karbámove j kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 246 mg (0,86 mmol) 11B a 328 mg 14F, čím vznikne zmes diastereomérov Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli (objemovo 6:4 hexán/etylacetát), čím sa získa 250 mg menej polárneho 11C izoméru 1 a 90 mg viac polárneho 11C izoméru 2.

MS (C1,NH₃) 648 (MH⁺) pre obidva izoméry.

D. 2-Amino-N-{2-[3a-(R)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,-6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl} izobutyramidmetánsulf onát

Do 210 mg (0,32 mmol) 11C izoméru 1 v 15 ml metylénchloridu sa pri teplote približne O’C pridá 28 μΐ (0,44 mmol) me97 tánsulfónovej kyseliny. Ľadový kúpe! sa odstráni a zmes sa mieša počas približne troch hodín, zriedi sa 15 ml dietyléteru a vyzrážaná pevná látka sa od filtruje, čím sa získa 100 mg 11D izoméru 1. MS(Cl,NH₃) 548 (MH⁺).

³ H NMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,33 (m,5H), 7,27-7,07 (m,5H), 5,21 (m,lH) 4,54 (m,3H), 3,86 (m,3H), 3,10(m,4H) 2,61 (s,3H),

1,62 (m,6H), 1,18 (s,9H).

E. 2-Amino-N-{2-[3a-(S)-benzyl-2-terc.-butyl-3-oxo-2,3,3a,4,-6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl}izobutyramidmetánsulfonát

Do 85 mg (0,13 mmol) 11C izoméru 2 v 10 ml metylénchloridu sa pri teplote približne 0'C pridá 21 μΐ (0,32 mmol) metánsulfónovej kyseliny. Ľadový kúpe! sa odstráni a zmes sa mieša počas približne troch hodín, zriedi sa 20 ml dietyléteru a vyzrážaná pevná látka sa sfiltruje, čím sa získa 46 mg 11E izoméru 2. MS(C1,NH₃) 548 (MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 8,28 (br d, 1H), 7,32 (m,5H),

7,18 (m,4H), 6,84 (m, 1H), 5,31 (m,lH) 4,60 (m,3H), 3,70 (m, 3H), 3,18-2,92 (m,3H), 2,68 (s,3H), 1,57 (m,6H), 1,13 (s,9H).

Príklad 12

2-Amino-N-[1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-(2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)-pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetyl]izobutyramiddihydrochlorid

A. 1-terc.-Butylester 3-metylester 4-oxo-3-(R,S)-pyridin-2-yl-metylpiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 2,00 g (7,8 mmol) 3A v 32 ml tetrahydrofuránu sa pridá 468 mg (11,7 mmol) hydridu sodného (60% disperzia v oleji) pri teplote približne 0C a zmes sa mieša počas približne 30 minút. Pridá sa roztok 762 mg (6,0 mmol) 2-pikolylchloridu v 5 ml tetrahydrofuránu počas piatich minút do mieša98 ného roztoku, potom nasleduje prísada 432 mg (2,6 mmol) jodidu draselného. Ľadový kúpeľ sa odstráni a zmes sa zahrieva približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa raz vodou a raz solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systémov (objemovo 6:4 éter/hexán) a následne (objemovo 6:4 etylacetát/hexán), čím sa získa 1,2 g 12A. MS(C1,NH₃) 349 (MH⁺).

B. terc.-Butylester 2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)-pyridin-2-yl-metyl2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 1,20 g (3,45 mmol) 12A a 159 mg (3,45 mmol) metylhydrazínu v 20 ml etanolu sa zahrieva približne 6,5 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 25 ml toluénu a zahrieva sa približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 65:35 etylacetát/hexán), čím sa získa 450 mg 12B. MS(C1,NH₃) 345 (MH⁺).

C. 2-Metyl-3a-(R,S)-pyridin-2-yl-metyl-2,3a,4,5,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-ondihydrochlorid

Zmes 450 mg (1,30 mmol) 12B v 2 ml systému 4M kyselina chlorovodíková/dioxán sa mieša približne 4,5 hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a získa sa 450 mg 12C. MS(C1,NH₃) 245 (MH⁺).

D. terc.-Butylester {l-[l-(l-(R)-H-indol-3-ylmetyl)-2-(2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-2-oxoetylkarbamoyl]-l-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 108 mg (0,31 mmol) 12C a 122 mg (0,31 mmol) 2C a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 95:5 etylacetát/metanol), čím sa získa 118 mg 12D.

MS(C1,NH₃) 616 (MH⁺).

E. 2-Amino-N-[1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-(2-metyl-3-oxo-3a(R,S)-pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c] pyridin-5-yl]-2-oxoetyl]izobutyramiddihydrochlorid

Zmes 110 mg (0,18 mmol) 12D v 1 ml systému 4M kyselina chlorovodíková/dioxán sa mieša počas približne 17 hodín pri teplote miestnosti. Zmes sa skoncentruje a získa sa 51 mg 12E MS(C1,NH₃)516(MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 8,91-8,52 (m,2H), 8,04 (m,2H), 7,76-7,50 (m,3H), 6,82 (m,lH), 4,62 (m,lH), 3,36 (s,3H), 1,63 (s,6H).

Príklad 13

2-Amino-N-[1-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)-pyridin-2-ylmety1-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-5-yl ]-2-oxoetyl] izobutyramiddihydrochlorid

A. terc.-Butylester {1—[l-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-3a- (R, S)-pyridin-2-ylmety 1-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -2-oxoetylkarbamoyl ] -1-metyletyl} -karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 86 mg (0,27 mmol) 12C a 103 mg (0,27 mmol) 1E a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 95:5 etylacetát/hexán), čím sa získa 82 mg 13A.

B. 2-Amino-N- [ 1- (R) -benzyloxymetyl-2- (2-metyl-3-oxo-3a- (R, S) -pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [4,3-c] pyridin-5-yl]-2-oxoetyl]izobutyramiddihydrochlorid

100

Zmes 75 mg (0,12 mmol) 13A v 1 ml systému 4M kyselina chlorovodíková/dioxán sa mieša pri teplote miestnosti pribli žne 17 hodín. Zmes sa skoncentruje, čím sa získa 80 mg 13B.

MS(C1,NH₃)507(MH⁺).

^HNMR (CD₃OD); (parciálny) δ 8,78 (m,lH), 8,46 (m,lH), 8,137,82 (m,2H), 7,32 (m,5H), 4,57 (m,3H), 3,96 (s,lH), 3,82 (m, 2H), 1,63 (m,6H).

Príklad 14

2-Amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-3a-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramid

A. l-terc.-Butylester-3-metylester 4-oxo-piperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Do zmesi 100,0 g (516,4 mmol) metylesteru 4-oxo-piperidín -3-karboxylovej kyseliny a 63 g (516,4 mmol) 4,4-dimetylaminopyridín vil metylénchloridu pri teplote približne 0’C sa pridá roztok 113,0 g (516,4 mmol) di-terc.-butyldikarbonátu v 100 ml metylénchloridu počas približne 90 minút. Zmes sa pomaly zahreje na teplotu miestnosti a mieša sa počas približne 19 hodín. Zmes sa premyje trikrát vždy 10% vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 130,5 g IA v podobe amorfnej pevnej látky.

^HNMR (CD₃OD): δ 4,03 (br,2H), 3,74 (s,3H), 3,56 (t,2H),

2,36 (t,2H), 1,42 (s,9H).

B. l-terc.-Butylester-3-metylester 3-(R)-benzyl-4-oxopiperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Do miešanej suspenzie 11,7 g (293 mmol) hydridu sodného (60% olejovej disperzie premytej dvakrát 100 ml hexánu) v 100

101 ml dimetylformamidu sa pridá počas približne 45 minút pri teplote O'C roztok 65,4 (254 mmol) 14A v 150 ml dimetylformamidu. Ľadový kúpe! sa odstaví a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 45 minút. Zmes sa ochladí na teplotu približne 0^eC a do miešaného roztoku sa prikvapká 35,2 ml (196 mmol) benzylbromidu v 200 ml dimetylformamidu a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 23 hodín. Do roztoku sa pridá opatrne 550 ml vody a zmes sa mieša počas približne 30 minút. Zmes sa extrahuje trikrát etylacetátom a spojené organické extrakty sa premyjú 5x vodou, raz solankou a vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa 98 g žltého oleja. Olej sa nechá vykryštalizovať z hexánu, čím sa získa 71 g 14B v podobe bielej pevnej látky.

MS(C1,NH₃)348(MH⁺).

^HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,32 (m,3H), 7,13 (m,2H), 4,58 (br m,lH), 4,18 (br,lH), 3,63 (s,3H),3,28-2,96 (m,4H), 2,72 (m,lH), 2,43 (m,lH), 1,44 (s,9H).

C. terc.-Butylester 3a-(R)-benzyl-3-oxo-3a-2,3,3a,4,6,7-hexa-hydropyrazolo[4,3-c]-pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 47,0 g (135 mmol) 14B, 38,9 g (270 mmol) metylhydrazínsulfátu a 44,3 g (540 mmol) octanu sodného v 900 ml etanolu sa zahrieva približne 17 hodín pod spätným chladičom v prostredí dusíka. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a premyje sa 3x vodou a raz solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa žltý olej. Olej sa mieša v 750 ml hexánu počas približne troch hodín, čím sa získa biela pevná látka. MS(C1,NH₃)344(MH⁺). ¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,19 (m,3H), 7,05 (m,2H), 4,61 (br m,lH), 4,61 (br n,2H), 3,24 (m,lH), 3,09 (s,3H), 3,01 (m,lH), 2,62 (rn,4H), 1,52 (s,9H).

D. 3a-(R,S)-Benzyl-2-metyl-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-3-on-hydrochlorid

102

Bezvodý chlorovodík sa nechá prebublávať roztokom 24,55 g (71,5 mmol) 14C v 800 ml dietyléteru počas približne 12 minút pri teplote približne 0°C. Zmes sa mieša počas približne troch hodín, pričom sa tvorí biela zrazenina. Zrazenina sa odfiltruje, čím sa získa 19,2 g 14D. MS(C1,NH₃)244(MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,25 (m,3H), 7,05 (m,2H), 3,77 (rn,2H), 3,51 (d,lH), 3,25 (m,lH), 3,17 (m,3H), 3,03 (s,3H)

2,81 (m,lH).

E. 2-Dioxopyrrolidin-l-ylester 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónovej kyseliny

Do miešaného roztoku 100,0 g (492 mmol) Boc-a-metylalanínu a 94,0 g (492 mmol) EDC v 2 1 metylénchloridu sa pri teplote približne O’C pridá po dávkach 56,63 g (492 mmol) Nhydroxysukcínimidu a reakčná zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti. Zmes sa mieša počas približne 24 hodín a premyje sa 2x vždy nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 124,0 g IE v podobe bielej pevnej látky.

¹HNMR (CD₃OD): δ 4,96 (br,lH), 2,82 (s,4H), 1,66 (s,6H),

1,48 (s,9H).

F. 3-(R)-Benzyloxy-2-(2-terc.-butoxykaronylamino-2-metylpropionylamino)propiónová kyselina

Zmes 50,5 g (168 mmol) 14E, 33,5 g (168 mmol) 0-benzylD-serínu a 51,05 g (505 mmol) trietylamínu v 400 ml dioxánu a 100 ml vody sa udržuje na teplote približne 45’C počas približne 16 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a okyslí sa kyselinou octovou na hodnotu pH 2. Vrstvy sa oddelia a organická fáza sa premyje solankou, vysušia sa síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa 650 g 14F v podobe bielej pevnej látky.

103 ^-HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,55 (d,lH), 7,29 (m,5H), 4,52 (m, 1H), 4,48 (s,2H), 3,84 (d z d, 1H), 3,69 (d z d, 1H), 1,42 (s, 6H), 1,38 (s,9H).

G. 3a-(R)-Benzyl-2-metyl-2,3a ,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-3-on L-vínan

Zmes 5,00 g (20,6 mmol) volnej zásady 14D a 3,09 g (20,6 mmol) L-vínnej kyseliny v 80 ml acetónu a 3,2 ml vody sa zahrievaním v prostredí dusíka počas približne 70 hodín udržuje na teplote približne 70“C a v tomto čase sa reakčná zmes zmení na hustú suspenziu a pridá sa 20 ml acetónu. Reakčná zmes sa pomaly ochladí na teplotu miestnosti a sfiltruje sa. Pevná látka sa potom zhromaždí, premyje sa acetónom a vysuší sa vo vákuu, čím sa získa 7,03 g 14G v podobe bielej pevnej látky.

H. 3a-(R)-Benzyl-2-mety 1-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-3-on

Do suspenzie 5,00 g (12,7 mmol) 14G v 80 ml metylénchloridu sa pri teplote 0°C pridá 1,72 ml (25,4 mmol) hydroxidu amónneho a zmes sa mieša približne 15 minút. Studený roztok sa sfiltruje a použije sa bezprostredne v ďalšom stupni.

I. terc.-Butylester {l-[2-(3a-(R)-Benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3-3a ,4,6,7-hexahydropyra zolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl ] -2-oxoetyl-karbamoyl]-1-metyletylJkarbámovej kyseliny

Zmes 4,83 g (12,7 mmol) 14F, roztoku 14H, 2,60 g (19,1 mmol) HOAT a 2,45 g (12,8 mmol) EDC sa mieša počas jednej hodiny pri teplote približne 0’C, ohreje sa na teplotu miestnosti a mieša sa počas približne 16 hodín. Zmes sa sfiltruje a filtrát sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanú sodného a vodou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 7,35 g 141 v podobe bielej pevnej látky.

104

J. 2-Amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-(benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramid

Do 755 mg (1,25 mmol) 141 a 7 ml metylénchloridu sa pri teplote približne 0“C pridá 3,5 ml studenej trifluóroctovej kyseliny a zmes sa mieša pri teplote približne 0’C počas približne jednej hodiny. Zmes sa nechá ohriať na teplotu miestnosti a mieša sa počas približne dvoch hodín. Zmes sa skoncentruje a odparí sa dvakrát s toluénom. Zvyšok sa rozpustí v chloroformu a premyje sa dvakrát nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a raz vždy vodou a solankou. Zmes sa vysuší síranom horečnatým a skoncentruje sa, čím sa získa 594 mg 14J v podobe oleja.

Príklad 15

2-Amino-N-[1-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-2-oxo-etyl]-izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 3,00 g (11,66 mmol) 3A a 537 mg (11,66 mmol) metylhydrazínu v 100 ml etanolu sa zahrieva pod spätným chladičom počas približne 17 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 100 ml toluénu a zahrieva pod spätným chladičom počas približne 17 hodín. Zmes sa zriedi etylacetátom, premyje sa dvakrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradi entú 100% etylacetátu až 5% metanolu v metylénchloride, čím sa získa 2,28 g 15A v podobe bielej pevnej látky.

¹HNMR (CD₃OD): δ 4,20 (s,2H), 3,67 (s,3H), 3,43 (s,3H), 2,58 (t,2H), 1,48 (s,9H).

105

B. 2-Metyl-2,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-3-on-hydrochlorid

Do 510 mg (2,01 mmol) 15A v 30 ml etanolu sa pridá 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 35 minút. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému metanol/ etylacetát, čím sa získa 425 mg 15B v podobe žltej pevnej látky.

^HNMR (CD₃OD): δ 4,27 (S,2H), 3,71 (S,3H), 3,56 (T,2H), 3,05 (T,2H).

C. terc.-Butylester {l-[l-(R)-benzyl-2-(2-metyl-3-oxo2,3,3a-4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 100 mg (0,53 mmol) 15B a 202 mg (0,53 mmol) 1E a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 95:5 metylénchlorid/metanol), čím sa získa 54 mg 15C v podobe bielej pevnej látky. MS(C1,NH₃)516(MH⁺).

D. 2-Amino-N-[1-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-2,3,3a-4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-2-oxoetyl]izobutyramidhydrochlorid

Do 54 mg (0,10 mmol) 15C v 30 ml etanolu sa pridá 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 40 minút. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému metanol/etylacetát, čím sa získa 50 mg 15D. MS(C1,NH₃)416(MH⁺). ¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,28 (m,5H), 5,18 (m,lH), 4,69-4,38 (m,lH),

3,88 (m,lH), 3,73 (m,2H), 3,68 (s,2H), 3,61 (m,lH), 2,67 (m,lH), 1,57 (s,6H).

106

Príklad 16

2-Amino-N-[2-(2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo- [ 4,3-c]pyridin-5-yl)-1(R)-(lH-indol-3-ylmety1)-2-oxoetyl]-izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester 2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 800 g (3,11, mmol) 3A a 495 mg (3,11 mmol) benzylhydrazíndihydrochloridu v 15 ml etanolu sa zahrieva pod spätným chladičom počas približne 17 hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 100 ml toluénu a zahrieva pod spätným chladičom počas približne 48 hodín. Zmes sa zriedi etylacetátom, premyje sa dvakrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 100% etylacetátu až 5% metanolu v metylénchloride, čím sa získa 530 mg 16A v podobe trieslovo zafarbenej pevnej látky.

MS(C1,NH₃)33O(MH⁺).

B. 2-Benzyl-3-oxo-2,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4,3-c]pyridin 3-on hydrochlorid

Do 411 mg (1,24 mmol) 16A v 30 ml etanolu sa pridá 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 30 minút. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému metanol/ etylacetát, čím sa získa 353 mg 16B. MS(Cl,NH₃)230(MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): S 7,26-7,40 (m,5H), 5,22 (S,2H), 4,12 (S,2H), 3,53 (t,2H), 3,00 (t,2H).

C. (R)-2-(2-terc.-Butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino3-(lH-indol-3-yl)-propiónová kyselina

107

Do miešaného roztoku 30,6 g (0,15 mol) D-tryptofánu,

30,6 g (0,30 mol) N-metylmorfolínu v 450 ml systému (4:1) dioxán/voda sa pridá 1E a zmes sa mieša počas približne 72 hodín. Prebytok dioxánu sa odparí a do zmesi sa pridá voda a etylacetát. Hodnota pH roztoku sa upraví koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na 3 a vrstvy sa oddelia. Organická vrstva sa premyje vodou a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému etylacetát/hexány, čím sa získa 37,0 g bielej pevnej látky.

D. terc.-Butylester (1—[2-(2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)

-2-oxoetyl)karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 100 mg (0,38 mmol) 16B a 202 mg (0,53 mmol) 16C a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 95:5 dichlórmetan/metanol), čím sa získa 45 mg 16D v podobe bielej pevnej látky. MS(Cl,NH₃)601(MH⁺).

E. 2-Amino-N-[2-(2-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4 , 3-c ] pyridin-5-yl]-1-(R)-(lH-indol-3-ylmetyl)-2-oxoetyl]-izobutyramidhydrochlorid

Do 45 mg (0,07 mmol) 16D v 60 ml etanolu sa pridá 20 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 35 minút. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa vyzráža zo systému metanol/etylacetát, čím sa získa 30 mg 16E. ¹HNMR (CD₃OD): (parciálny)

S 7,40 (m,4H), 7,25 (m,3H), 7,11 (m,2H), 6,96 (m,2H), 6,81 (m,lH), 5,38-4,93 (m,3H), 4,46 (m,lH), 4,22 (m,lH), 3,06 (m,lH), 3,18 (m,lH), 2,28 (m,lH), 1,57 (m,6H), 1,38 (m,lH).

108

Príklad 17

2-Amino-N- [ l-benzyloxymetyl-2- (2,3a-dimetyl-3-oxo-2,3,3a, 4-6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl )-2-oxoetyl) izobutyramidhydrochlorid

A. terc.-Butylester-3-(R,S)-metylester 3-metyl-4-oxopiperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 2,00 mg (7,77 mmol) 3A v 30 ml dimetylformamidu sa pridá 308 (7,77 mmol) hydridu sodného (60% disperzia) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 35 minút. Do miešaného roztoku sa pridá 0,50 ml (7,77 mmol) metyljodídu a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 17 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa raz vodou a štyrikrát solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 7:3 hexán/etylacetát) za získania 175 g 17A v podobe číreho oleja. MS(C1,NH₃)272(MH⁺).

B. terc.-Butylester 2,3a-(R,S)-dimetyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylovej kyseliny

Zmes 1,62 g (9,50 mmol) 17A a 435 mg (9,50 mmol) metylhydrazínu v 30 ml etanolu sa zahrieva pod spätným chladičom počas približne štyroch hodín. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa rozpustí v 50 ml toluénu a zahrieva pod spätným chladičom počas približne 14 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom, premyje sa dvakrát solankou, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného systému (objemovo 7:3) hexán/etylacetát, čím sa získa 1,00 g 17B v podobe bielej pevnej látky. MS(C1,NH₃)268(MH⁺).

C. 2,3a-(R,S)-Dimetyl-3-oxo-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3c]pyridin-3-on-hydrochlorid

109

Do 1,00 g (3,74 mmol) 17B v 40 ml etanolu sa pridá 8 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 35 minút. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému metanol/ etylacetát, čím sa získa 850 mg 17C v podobe bielej pevnej látky.

MS(C1,NH₃)168(MH⁺).

D. terc.-Butylester (l-[l-(R)-benzyloxymetyl-2-2,3a-(R,S)-di-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo(4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podľa všeobecného postupu A sa kopuluje 150 mg (0,74 mmol) 17C a 514 mg (1,35 mmol) 1E a produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 85:15) hexán/etylacetát, čím sa získa 185 mg 17D v podobe bielej pevnej látky.

E. 2-Amino-N-[l-(R)-benzyloxymetyl-2-(2,3a-dimetyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)-2-oxo-etyl]-izobutyramidhydrochlorid

Do 173 mg (0,33 mmol) 17B v 40 ml etanolu sa pri teplote miestnosti pridá 15 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa zriedi chloroformom a premyje sa dvakrát nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom sodným a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 100% etylacetátu až 10% dietylamínu v etylacetáte. Zvyšok sa rozpustí v etanole a okyslí sa vodnou kyselinou chlorovodíkovou. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa nechá vykryštalizovať zo systému metanol/ etylacetát, čím sa získa 65 mg 17E v podobe bielej pevnej látky.

MS(C1,NH₃)5O2(MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 7,32 (m,5H), 5,14 (m,lH), 4,53 (m,3H), 3,71 (m,3H), 2,97 (m,lH), 2,83 (m,lH), 2,57 (m,lH), 1,98 (m,2H), 1,61 (m,6H), 1,38 (s,3H).

110

Príklad 18

2-Amino-N- [ 2- (3a- (R) -benzyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl) -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] izobutyramidhydrochlorid a

2-amino-N- [ 2- (3a- (S) -benzyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c ]pyridin-5-yl)-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl] izobutyramidhydrochlorid

A. Metylester 3-benzyl-4-oxopiperidín-3-karboxylovej kyseliny

Do 200 mg (0,58 mmol) 3B sa pri teplote približne 0“C pridá studená trifluóroctová kyselina a zmes sa mieša približne jednu hodinu. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa spoločne odparí s etylacetátom a hexánom. Do zvyšku sa pridá na alkalizáciu 2N roztok hydroxidu sodného a zmes sa extrahuje chloroformom. Spojené organické extrakty sa vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú sa, čím sa získa 18A v kvantitatívnom výťažku.

B. Metylester 3-(R,S)-benzyl-l-[3-bezyloxy-2-(R)-(2-terc.-butoxykarbonylamino) -2-metylpropionylamino )propionyl ] -4oxopiperidín-3-karboxylovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 1,77 g (7,16 mmol) 18A a 3,04 g (8,0 mmol) 14F, čím sa získa zmes diastereomérov. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 7:3) hexán/etylacetát, čím sa získa 820 mg menej polárneho 18B izoméru 1 a 1,14 g viac polárneho 18B izoméru 2. MS(C1,NH₃)611(MH⁺) pre obidva izoméry.

C. terc.-Butylester (l-[2-(3a-(R,S)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6-7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl]-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl] -1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Do roztoku 820 mg (1,32 mmol) 18B izoméru 1 v 13 ml etanolu sa pridá 342 mg (2,63 mmol) hydrazínsulfátu a 431 mg

111 (5,26 mmol) octanu sodného a zmes sa zahrieva približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa zriedi etylacetátom a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití elučného gradientu 75% etylacetátu v hexáne 100% etylacetátu, čím sa získa 550 mg 18C izoméru 1.

Do roztoku 1,14 mg (1,86 mmol) 18B izoméru 2 v 20 ml etanolu sa pridá 485 mg (3,73 mmol) hydrazínsulfátu a 613 mg (7,48 mmol) octanu sodného a zmes sa zahrieva približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa zriedi etylacetátom a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a solankou, vysuší sa síranom horečnatým a skoncentruje sa. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 75:25) etylacetát/ hexán, čím sa získa 710 mg 18C izoméru 2.

D. 2-Amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c] pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]-izobutyramidhydrochlorid

Do 200 mg (0,34 mmol) 18B izoméru 1 v 12 ml etanolu sa pridá 6 ml kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti približne počas 2,5 hodiny. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa spoločne odparí trikrát s etanolom, čím sa získa 20 mg 18D izoméru 1. MS(C1,NH₃)492(MH⁺).

¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) δ 8,42 (br d,lH), 7,35 (m,5H), 7,18 (m,5H), 5,23 (m,2H), 4,91 (m,lH), 4,54 (m,4H), 3,80 (m,2H),

3,63 (m,lH), 3,12 (m,lH), 3,07 (m,3H), 2,61 (m,3H), 1,62 (m, 6H), 1,39 (m,lH).

E. 2-Amino-N-[2-(3a-(S)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl)-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl ]-izobutyramidhydrochlorid

112

Do 200 mg (0,34 mmol) 18C izoméru 2 v 20 ml etanolu sa pridá 10 ml koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne 2,5 hodiny. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa spoločne odparí trikrát s etanolom, čím sa získa 30 mg 18E izoméru 2. MS(C1,NH₃)492(MH⁺). ¹HNMR (CD₃OD): (parciálny) £ 8,29 (br d,lH), 7,30 (m,5H),

7,11 (m,4H), 5,29 (m,lH), 4,92 (m,lH), 4,62 (m,3H), 3,913,70 (m,3H), 3,22-2,95 (m,3H), 2,66 (m,3H), 1,57 (m,6H), 1,30 (m,lH), 0,89 (m,lH).

Príklad 19

2-Amino-N- [ 1-(R)-benzyloxymetyl-2- (2-metyl-3-oxo-3a- (R, S) -tiazol-4-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-5-yl)-2-oxo-etyl]izobutyramidhydrochlorid

A. l-terc.-Butylester-3-etylester 4-oxo-3-(R,S)-tiazol-4-yl-metylpiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 300 mg (1,10 mmol) IA v 5 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote približne 0’C pridá 67 mg (1,66 mmol) nátriumhydridu (60% disperzia) a zmes sa mieša počas približne 30 minút. Do studenej suspenzie sa pridá roztok 204 mg (1,21 mmol) 4-chlórmetyltiazolu a následne 87 mg (0,53 mmol) jodidu draselného a zmes sa zahrieva počas približne 17 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Spojené organické extrakty sa vysušia síranom sodným a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 7:3) hexán/etylacetát, čím sa získa 90 mg uvedenej zlúčeniny MS(C1,NH₃)648(MH⁺).

B. terc.-Butylester 2-metyl-3-oxo-3a-(R,s)-tiazol-4-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridín-5-karboxylove j kyseliny

113

Do 90 mg (0,24 mmol) 19A v 2 ml etanolu sa pridá 11,2 mg (0,24 mmol) metylhydrazínu a zmes sa zahrieva počas približne 17 hodín pod spätným chladičom. Pridá sa ďalších 33,6 mg (0,72 mmol) metylhydrazínu a zmes sa zahrieva počas približne 7 hodín pod spätným chladičom. Zmes sa skoncentruje a zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli pri použití sys tému (objemovo 6:4) hexán/etylacetát, čím sa získa 44 mg 19B. MS(C1,NH₃)648 (MH⁺).

C. 2-Metyl-3a-(R,S)-tiazol-4-yl-metyl 2,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4,3-c]pyridin-3-onhydrochlorid

Zmes 44 mg (0,10 mmol) 19B v 1 ml systému 4M kyselina chlorovodíková/dioxán sa mieša pri teplote miestnosti počas približne štyroch hodín. Zmes sa skoncentruje a spoločne odparí s metylénchloridom, čím sa získa 40 mg 19C.

MS(C1,NH₃)251(MH⁺).

D. terc.-Butylester (1-[1-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)tiazol-4-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Spôsobom podlá všeobecného postupu A sa kopuluje 40 mg (0,12 mmol 19C a 39 mg (0,12 mmol) 14F a zvyšok sa čistí chro matografiou na silikagéli pri použití systému (objemovo 9:1) etylacetát/hexán, čím sa získa 40 mg 19D. MS(C1,NH₃)613(MH⁺).

E. 2-Amino-[1-(R)-benzyloxymetyl-2-(2-metyl-3-oxo-3a-(R,S)tiazol-4-ylmetyl-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-2-oxo-etyl]izobutyramidhydrochlorid

Zmes 40 mg (0,06 mmol) 19D v 1 ml systému 4M kyselina chlorovodíková/dioxán sa mieša pri teplote miestnosti počas

114 približne piatich hodín. Zmes sa skoncentruje a spoločne sa odparí s metylénchloridom, čím sa získa 40 mg 19E.

MS(C1,NH₃)513(MH⁺).

Príklad 20

Soí L-vínnej kyseliny 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidu

Do 4,6 g zlúčeniny pódia príkladu 14 v 20 ml etanolu sa pridá pri teplote približne 0‘C roztok 1,36 g kyseliny L-vínnej v 20 ml metanolu. Zmes sa zahreje na teplotu miestnosti, mieša sa približne počas 40 minút a skoncentruje sa vo vákuu. Zvyšok sa zriedi 220 ml etylacetátu, zahrieva sa pod spätným chladičom počas približne 1,5 hodiny a potom sa mieša približne počas 18 hodín pri teplote približne 72’C. Zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a filtráciou sa získa 5,78 g žiadanej soli zlúčeniny v podobe bezfarbej kryštalickej pevnej látky.

Príklad 21 terc.-Butylester 3-benzyl-3-metoxykarbonylmetyl-4-oxopiperidín-l-karboxylovej kyseliny

A. terc.-Butylester 3-benzyl-4-oxopiperidín-l-karboxylovej kyseliny

Zmes β-ketoesteru (4480 mg, 12,9 mmol) a chloridu lítneho (1100 mg, 25,8 mmol) sa zahreje v dimetylformamide (2,0 ml) na teplotu približne 120’C a udržuje sa na teplote približne 17 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a extrahuje sa etylacetátom (3x100 ml). Spojené extrakty sa vysušia a skoncentrujú sa vo vákuu. Surový produkt sa podrobí chromatografii na oxide kremičitom pri použití systému 20 % etylacetátu/hexány, čím sa získa 1320 mg žiadaného produktu

115 v podobe žltého oleja. MS(APC1):19O (M+1-B0C).

¹HNMR (250 MHz CDCl-j): d 7,4 (m,5H), 4,2 (m,lH), 3,4 (m,lH),

3.3 (dd,lH), 3,05 (dd,lH), 2,7 (m,lH), 2,55 (m,4H), 1,5 (s,9H)

B. terc.-Butylester 3-benzyl-3-metoxykarbonylmetyl-4-oxopiperidín-l-karboxylovej kyseliny

Roztok produktu zo stupňa A príkladu 21 (1320 mg, 4,56 mmol), pyrolidín (972 mg, 13 mmol) a p-toluénsulfonová kyselina (33 mg) v benzéne (30 ml) sa refluxuje molekulárnymi sitami 0,3 nm počas približne 17 hodín. Zvyšok sa rozpustí v ben zéne (10 ml) a ochladí sa na teplotu približne O’C. Prikvapká sa metylbrómacetát (1530 mg, 10 mmol). Reakčná zmes sa nechá pomaly ohriať na teplotu miestnosti a potom sa zahrieva počas približne 17 hodín pod spätným chladičom, potom sa pridá voda (5 ml). Po zahrievaní počas približne ďalších dvoch hodín sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a extrahuje sa etyl acetátom (3x100 ml). Spojené organické extrakty sa vysušia a skoncentrujú sa vo vákuu. Surový produkt sa podrobí chromátografii na silikagéli pri použití systému 15 % etylacetátu/hexány, čím sa získa 280 mg žiadaného produktu.

MS(APC1):362 (M+1).

¹HNMR (250 MHZ CDC1₃): d 7,35 (m,5H), 4,5 (m,lH), 3,8 (s,3H),

3.4 (dd,lH), 3,1 (m,lH), 2,85 (m,4H), 2,6 (m,lH), 2,4 (m,lH),

1.5 (s,9H)

Príklad 22

3-terc.-Butylester-1-metylester 6-oxo-l-fenylcyklohexán-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Roztok difenylortuti (890 mg, 2,5 mmol) v trichlórmetáne (4 ml) sa zahreje v prostredí dusíka na teplotu 40’C. Pridá sa po malých dávkach tetraacetát olova (1110 mg, 2,5 mmol) a zelenožltý roztok je mieša počas 0,5 hodiny pri teplote približne 40’C. Pridá sa β-ketoester (520 mg, 2,0 mmol) a násled ne pyridín (0,2 ml, 2,5 mmol). Po približne piatich hodinách

116 na teplote 40“C sa reakčná zmes skoncentruje vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v étere (100 ml) a sfiltruje sa. Filtrát sa premyje 3N kyselinou sírovou (3x), vysuší sa a skoncentruje, čím sa získa 616 mg žltej pevnej látky. Rýchlou chromatografiou na silikagéli pri použití systému 25 % etylacetátu/hexány sa získa 368 mg žiadaného produktu.

¹HNMR (400 MHZ CDCl-j): d 7,15 (m,5H), 4,4 (s,2H), 3,7 (s,5H),

2,6 (s,2H), 1,5 (s,9H); MS(APC1):334 (M+1).

Príklad 23

Hydrochlorid (D)-2-amino-3-(2,4-dichlórbenzyloxy)propiónovej kyseliny

A. D-2-terc.-Butoxykarbonylamino-3-(2,4-dichlórbenzyloxy)propiónová kyselina

Do miešaného roztoku Boc-D-serínu (8,2 g, 40 mmol) v dimetylformamide (75 ml) sa pri teplote približne 0^eC pridá počas 10 minút hydrid sodný (60% disperzia, 3,2 g, 80 mmol). Reakčná zmes sa mieša počas približne 1,75 hodiny pri teplote približne 0“C a potom 0,25 hodiny pri teplote miestnosti. Po ochladení na približne 0’C sa prikvapká roztok 2,4-dichlórtoluénu (5,56 rol, 40 mmol) v dimetylformamide (5 ml). Reakčná zmes sa nechá ohriať na teplotu približne 23’C a mieša sa počas približne 17 hodín, potom sa rozdelí medzi diizopropyléter a 10% kyselinu chlorovodíkovú. Vodný roztok sa extrahuje diizopropyléterom (2x). Spojené extrakty sa premyjú nasýtenou vodnou solankou, vysušia sa a skoncentrujú, čím sa získa 14,75 g surového produktu, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia.

MS(APC1):264,266 (M+1).

¹HNMR (400 MHZ CDCl₃) : ď 7,6-7,2 (m,3H), 5,4 (d,lH), 4,6 (s, 2H), 4,0 (d,lH), 3,8 (dd,2H), 1,1 (s,9H);

117

B. Hydrochlorid (D)-2-amino-3-(2,4-dichlórbenzyloxy)propiónovej kyseliny

Produkt zo stupňa A príkladu 23 (14,7 g, 40 mmol) sa mieša v systému 4M kyselina chlorovodíková HCl/dioxán (100 ml) približne 17 hodín. Reakčná zmes sa skoncentruje vo vákuu, čím sa získa 12 g svetle žltej pevnej látky (100% výťažok).

MS (APC1):265 (M+1).

Príklad 24

Zlúčenina všeobecného vzorca

kde R¹ znamená -CH₂-fenylovú a R² metylovú skupinu, sa pripraví obdobným spôsobom ako podľa príkladu 3C až 3F, pričom sa vychádza z titulnej zlúčeniny príkladu 21. Izolujú sa obidva diastereoméry R,R a R,S (* znamená iný stereoizomérový stred na C3 uhlíku uvedenej štruktúry). Hmotové spektrum (M+l)= 520; MS metóda = bombardovanie časticami.

Príklady 25 a 26

Zlúčeniny všeobecného vzorca

118 kde pre obidva príklady R¹ znamená fenylovú a R² metylovú skupinu a v príklade 25 ide o R,R izomér a v príklade 26 o S,R izomér. Zlúčeniny podlá príkladu 25 a 26 sa pripravia obdobným spôsobom ako podlá príkladu 3C až 3F, pričom sa vychádza zo zlúčeniny podlá príkladu 22 a nasleduje chromatografická separácia jednotlivých izomérov. Hmotové spektrum v obidvoch prípadoch je (M+l)= 4930; MS metóda = bombardovanie časticami.

Príklady 27 až 159

Zlúčeniny podlá príkladov 27 až 159, ktorých zoznam je v nasledujúcej tabulke, sa pripravia podlá nasledujúcej schémy spojovaním príslušne substituovaného pyrazolónpiperidínu všeobecného vzorca I (v uvedenej schéme) s (D)-OBnSer derivátom II (podlá uvedenej schémy) obdobným spôsobom ako podlá príkladu 3E a 3F.

Pyrazolónpiperidíny všeobecného vzorca I sa pripravia obdobne ako podlá príkladu 3B a 3C, pričom sa vychádza z príslušného alkylačného činidla a alkylhydrazínu; (D)-OBnSer derivát II sa pripraví v troch stupňoch obdobne ako podlá príkladu 23A, 23B a 5F. v prvom stĺpci tabulky je uvedené číslo príkladu. Výrazom phenyl podobne ako Ph sa vždy rozumie fenyl, výrazom thiazolyl sa rozumie tiazolyl.

119

	Izomér	R²	R¹— -CHrA¹ A¹	Ar	MS	MS spôsob
27	d1	H	2-pyridyl	phenyl	493	PB
28	d1	H	4-thiazolyl	phenyl	499	PB
29	d2	H	4-thiazolyl	phenyl	499	PB
30	d1	H	5-thiazolyl	phenyl	499	APCI
31	d1	Me	phenyl	2,4-di-CI-Ph	574,5	APCI
32	d1	Me	phenyl	2,4-di-F-Ph	542	PB
33	d1	Me	phenyl	[2,3-O-CH_rO]Phenyl	550,2	PB
34	d1	Me	phenyl	2-CFrPh	575	PB
35	d1	Me	phenyl	2-Me-Ph	520	PB
36	d1	Me	phenyl	2-pyridyl	507	PB
37	d1	Me	phenyl	3,4-di-F-Ph	542	PB
38	d1,2	Me	phenyl	3,5-di-CF3-Ph	642	PB
39	d1	Me	phenyl	3,5-di-CI-Ph	576	APCI
40	d2	Me	phenyl	3-CFrPh	575	APCI
41	d1	Me	phenyl	3-CI-Ph	540	APCI
42	d1	Me	phenyl	3-Cl-tiofén	546, 548	APCI
43	d1	Me	phenyl	3-F-4-CI-Ph	560	APCI
44	d1	Me	phenyl	3-Me-Ph	520	PB
45	d1	Me	phenyl	4-CI-Ph	540	PB
46	d1	Me	phenyl	4-pyridyl	507	PB
47	d1	Me	phenyl	4-thiazofyl	513	PB
48	d1	Me	phenyl	5-thiazolyl	513	APCI
49	d1,2	Me	phenyl	benzizoxazolyl	547	PB
50	d1	Me	phenyl	4-pyrimidinyl	508	PB
51	d1,2	Me	4-Ph-Ph	4-thiazolyl	589	APCI
52	d1,2	Me	4-Ph-Ph	2-pyridyl	583	APCI
53	d1	Me	4-F-Ph	phenyl	524	PB
54	d2	Me	4-F-Ph	phenyl	524	PB
55	d1	Me	4-F-Ph	3-CI-Ph	558	PB
56	d2	Me	4-F-Ph	3-CI-Ph	558	PB
57	d1	Me	4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	560	APCI
58	d2	Me	4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	560	APCI
59	d1,2	Me	4-F-Ph	2-pyridyl	525	APCI

120

—	Iramér	R^z	R¹= -CHrA¹ A¹	Ar	MS	MS spôsob
60	d1,2	Me	4-F-Ph	2-CFs-Ph	592	APCI
61	d1	Me	4-CF-rPh	4-CI-Ph	609	APCI
62	d1,2	Me	4-CFrPh	4-CI-Ph	609	APCI
63	d1,2	Me	3-pyridyl	phenyl	508	PB
64	d1	Me	phenyl	3-pyridyl	508	PB
65	d1	Me	2-cAinolinyl	phenyl	594	PB
66	d2	Me	2- čhinolinyl	phenyl	594	PB
67	d1	Me	2-pyridyl	phenyl	506	PB
68	d2	Me	2-pyridyl	phenyl	506	PB
69	d1,2	Me	2-pyridyl	3-F-4-CI-Ph	559, 561	APCI
70	d1	Me	2-pyridyl	3-CI- tiofén	547, 549	APCI
71	d1	Me	2-pyridyl	3-CFrPh	575	PB
72	d1,2	Me	2,4-di-F-Ph	3,4-di-F-Ph	579	APCI
73	d1,2	Me	2,4-di-F-Ph	2-pyridyl	544	PB
74	d1	Me	4-thiazolyl	phenyl	513	APCI
75	d2	Me	4-thiazolyl	phenyl	513	PB
76	d1	Me	5-thiazolyl	phenyl	513	PB
77	d1	Et	2-pyridyl	phenyl	521	PB
78	d1,2	Et	phenyl	4-thiazolyl	541	APCI
79	d1	Et	phenyl	3.5-di-CFs-Ph	656	PB
80	d1,2	Et	phenyl	3,4-di-F-Ph	556	PB
81	d1	Et	2,4-di-F-Ph	2,4-di-F-Ph	593	APCI
82	d2	Et	2,4-di-F-Ph	2,4-di-F-Ph	593	APCI
83	d1	Et	2,4-di-F-Ph	2-CFrPh	625	APCI
84	d2	Et	2,4-di-F-Ph	2-CFrPh	625	APCI
85	d1	Et	2,4-di-F-Ph	3,4-di-F-Ph	593	APCI
86	d2	Et	2,4-di-F-Ph	3,4-di-F-Ph	593	APCI
87	d1	Et	2-pyridyl	3,4-di-F-Ph	607	PB
88	d2	Et	2-pyridyl	3,4-di-F-Ph	607	PB
89	d1	Et	4-CF-rPh	2,4-di-F-Ph	625	APCI
90	d2	Et	4-CFrPh	2,4-di-F-Ph	625	APCI
91	d1	Et	4-CF_rPh	3-CFPh	623	APCI
92	d1	Et	4-CFrPh	4-CI-Ph	623	APCI
93	d2	Et	4-CFrPh	4-CkPh	623	APCI
94	d1	Et	4-CHs-Ph	3-CkPh	568	APCI
95	d2	Et	4-CHj-Ph	3-CI-Ph	568	APCI
96	d1	Et	4-CFPh	3,4-di-F-Ph	590	PB
97	d2	Et	4-CI-Ph	3,4-di-F-Ph	590	PB
98	d1	Et	4-CkPh	3-5-di-CkPh	622	PB
99	d2	Et	4-CI-Ph	3-5-di-CI-Ph	622	PB
100	d1	Et	4-CI-Ph	3-CkPh	589	PB
101	d2	Et	4-CkPh	3-CI-Ph	589	PB
102	d1	Et	4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	574	PB
103	d2	Et	4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	574	PB
104	d1	Et	4-F-Ph	3-CkPh	\| 572	APCI

121

ι—r	Izomér	R²	R’=-CHrA¹ A¹	Ar	MS	MS spôsob
105	d2	Et	4-F-Ph	3-CI-Ph	572	APCI
106	d1,2	Et	4-Me-Ph	2-CFa-Ph	602	APCI
107	d1,2	Et	4-Me-Ph	. 3,4-di-F-Ph	570	APCI
108	d1,2	CF₃CH₂	phenyl	4-thiazolyl	595	APCI
109	d1	cf₃ch₂	phenyl	3-CFrPh	642,3	APCI
110	d1	cf₃ch₂	phenyl	3,5-di-CI-Ph	643	APCI
111	d2	cf₃ch₂	phenyl	3,5-di-CI-Ph	644	APCI
112	d1	cf₃ch₂	phenyl	3,4-di-F-Ph	610,2	APCI
113	d2	cf₃ch₂	phenyl	3,4-di-F-Ph	610,2	APCI
114	d1	cf₃ch₂	phenyl	3,5-di-CI-Ph	643	APCI
115	d2	cf₃ch₂	phenyl	3,5-di-CI-Ph	644	APCI
116	d1	cf₃ch₂	phenyl	3-CFa-Ph	642,3	APCI
117	d1	cf₃ch₂	phenyl	3,4-di-F-Ph	610,2	APCI
118	d2	cf₃ch₂	phenyl	3,4-di-F-Ph	610,2	APCI
119	d1,2	cf₃ch₂	phenyl	4-thiazolyl	595	APCI
120	d1.2	cf₃ch₂	2,4-di-Cl-Ph	2-pyridyl	643	APCI
121	d1,2	cf₃ch₂	2,4-di-Cl-Ph	4-thiazolyl	649	APCI
122	d1	cf₃ch₂	2,4-F-Ph	2-CFj-Ph	679	APCI
123	d2	cf₃ch₂	2.4-F-Ph	2-CFs-Ph	679	APCI
124	d1	cf₃ch₂	2,4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	647	APCI
125	d2	cf₃ch₂	2.4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	647	APCI
126	d1,2	cf₃ch₂	2,4-F-Ph	4-thiazolyl	617	PB
127	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	2,4-di-Cl-Ph	643	APCI
128	d2	cf₃ch₂	2-pyridyl	2,4-di-Cl-Ph	643	APCI
129	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	2,4-di-F-Ph	611	PB
130	d2	cf₃ch₂	2-:pyridyl	2,4-di-F-Ph	611	PB
131	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	2-CF₃-4-F-Ph	661	APCI
132	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	2-CFa-Ph	643	PB
133	d2	cf₃ch₂	2-pyridyl	2-CF-rPh	643	PB
134	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	3,4-di-F-Ph	611	PB
135	d2	cf₃ch₂	2-pyridyl	3,4-di-F-Ph	611	PB
136	d1	CFaCHj	2-pyridyl	3,5-di-CI-Ph	643	APCI
137	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	3-CI-Ph	609	PB
138	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	3-Ck tiofén	615, 617	APCI
139	d1,2	cf₃ch₂	2-pyridyl	3-F-4-CI-Ph	627, 629	APCI
140	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	3-OCF_rPh	659	APCI
141	d1	cf₃ch₂	2-pyridyl	4-CI-Ph	609	PB
142	d2	cf₃ch₂	2-pyridyl	4-CFPh	609	PB
143	d1,2	cf₃ch₂	3-pyridyl	2,4-di-F-Ph	612	APCI
144	d1,2	cf₃ch₂	3-pyridyl	2-CFrPh	644	APCI
145	d1,2	cf₃ch₂	3-pyridyl	4-CI-Ph	610	APCI
146	d1	cf₃ch₂	4-CHrPh	3-CkPh	622	APCI
147	d2	cf₃ch₂	4-CHrPh	3-CI-Ph	622	APCI
148	d1	cf₃ch₂	4-CI-Ph	3,4-di-F-Ph	644	PB
149	d2	cf₃ch₂	4-CI-Ph	3.4-di-F-Ph	644	PB

122

	Izomér	R²	R’= -CHrA¹ A¹	Ar	MS	MS spôsob..
150	d1	CF₃CH₂	4-CI-Ph	3.5-di-CI-Ph	675	PB
151	d2	cf₃ch₂	4-CI-Ph	3,5-di-CI-Ph	675	PB
152	d2	cf₃ch₂	4-CI-Ph	3-CI-Ph	642	PB
153	d1	cf₃ch₂	4-CI-Ph	3-CI-Ph	642	PB
154	d1	cf₃ch₂	4-F-Ph	3,4-di-F-Ph	628	PB
155	d2	cf₃ch₂	4-F-Ph	3.4-di-F-Ph	628	PB ·
156	d1	cf₃ch₂	4-F-Ph	3-CI-Ph	626	PB
157	d2	cf₃ch₂	4-F-Ph	3-CI-Ph	626	PB
158	d1,2	cf₃ch₂	4-Me-Ph	2-CFs-Ph	656	APCI
159	d1.2	cf₃ch₂	4-Me-Ph	3.4-di-F-Ph	624	APCI

Poznámka: V uvedenej tabuľke sa označenie izomérov týka stereo chémie v polohe C3 (v štruktúre označené **) pyrazolónpiperidínové skupiny; dl a d2 sa týkajú izomérov, ktoré boli chromatograficky oddelené; dl,2 sa týka zmesi izomérov. V tabuľke sú použité tieto skratky: Ph=fenyl, PB=bombardovanie časticami, APC1= chemická ionizácia pri tlaku okolia. Nasledujú údaje NMR zlúčenín z uvedenej tabuľky:

Príklad 37:Ή NMR (400 MHz, d4-MeOH): d 7,2 (m, 5H), 5,2 (t, 1H), 4,6 (m, 3H),

3,8 (d, 2H). 3,1 (d, 1H), 3,0 (s, 3H), 2,6 (dd, 2H). 1,6 (s, 6H).

Pri k 1 ad⁵ 67 & 68: ’H NMR (300 MHz, d4-MeOH): d 8_Z85 (s, 1H), 8_Z6 (t, 1H), 8,1 (d, 1H), 8,0 (t, 1H), 7,35 (s, 5H), 5,15 (s, 1H), 4,6 (bs, 3H). 3,85 (m,2H), 3,65 (m,2H), 3,2 (s, 3H), 2,75 (m, 2H), 1,65 (s, 6H).

P r í kl ad 128:’H NMR (400 MHz, d4-MeOH):d 8,.8 (s, 1H), 8,6 (s, 1H), 8,5 (t, 1H), 7,96 (t, 1H), 7,9 (d, 1 H). 7,45 (d, 1H), 7,33 (d, 1H), 5,2 (s, 1H), 4,6 (s, 3H), 4,4 (m, 1H), 4,2 (m, 2H), 3,9 (m, 4H), 3,5 (m), 3,2 (m, 2H), 2,8 (dd. 2H), 1,6 (s, 6H). Príklad 129 & 130:’H NMR (400 MHz, d4-MeOH): d 8,76 (s, 1H), 8,50 (t, 1H), 7,92 (dt,2H), 7,43 (q, 1H), 6,90 (t, 1H), 5,20 (m, 1H), 4,90 (m), 4,30 (m, 1H), 4,20 (m, 1 H). 3,7 - 3,4 (m), 3,30 (s, 2H), 3,20 (m, 1H), 2,80 (dd, 2H), 1,60 (s, 6H). Príklad 137:’H NMR (300 MHz, d4-MeOH): d 8,7 (1,1H), 8,45 (t, 1 H), 7,9 (t, 2 H), 7,25 (m, 4 H), 5,2 (m, 1 H), 4,95 (d, 1 H), 4,6 (s, 2H), 4,3 (m. 1 H), 3,8 (t, 2H), 3,5 (dd, 2 H), 2,8 (m, 1H), 2,8 (dd, 2 H), 1,6 (s, 6 H).

Príklad 138: ’H NMR (400 MHz, d4-MeOH): d 8,8 (dd, 1H), 8,6 (s, 1H), 8,5 (t, 1H), 7,95 (t, 1Η), 7,9 (s, 1H), 7,3 (s, 1H), 7,0 (s, 1H), 5,2 (s, 1H), 4,85 (s, 3H), 4,4 (m, 1 H), 4,18 (m, 1H), 3,8 (m, 2H), 3,5 (dd, 2H), 3,2 (d, 2H), ^.8 (dd, 2H), 1,6 (s, 6H).

123

Pri kí ad 141 & 142:¹H NMR (300 MHz, d4-MeOH): d 8,75 (m, 1 H), 8,5 (m, 1 H),

7,9 (m, 2 H), 7,3 (s, 2 H), 5,2 (m, 1 H), 4,65 (m, 1 H), 4,55 (s, 2 H), 4,35 (m, 1 H),

4,20 (m, 1 H), 3,8 (t, 1 H), 3,5 (dd, 2 H), 3,15 (d, 1 H), 2,8 (dd, 2 H), 1,6 (s, 2 H).

Príklady 160 až 179

Zlúčeniny podľa príkladov 160 až 179, uvedené v nasledujúcej tabuľke, sa pripravia podľa uvedenej schémy spojovaním príslušne substituovaného pyrazolónpiperidínu všeobecného vzorca I (v uvedenej schéme) s (D)-OBnSer derivátom III (v uvedenej schéme) obdobným spôsobom ako podľa príkladu 3E a 3F.

	Izomér	R²	R¹=-CH_rA¹ A¹	MS	MS.' spôsob
160	d1	Me	4-CFrPh	584	APCI
161	d1,2	Me	4-CFrPh	584	APCI
162	d1	Me	4-F-Ph	533	PB
163	d2	Me	4-F-Ph	533	PB
164	d1	Me	4-Ph-Ph	591	APCI
165	d1,2	Et	2,4-di-CFPh	597	APCI

124

166	d1,2	Et	2,4-F-Ph	566	APCI
167	d1	Et	4-CFrPh	598	APCI
168	d1,2	Et	4-CFrPh	598	APCI
169	d1	Et	4-CI-Ph	563	PB
170	d2	Et	4-CI-Ph	563	PB
171	d1,2	Et	4-F-Ph	547	APCI
172	d1,2	Et	4-Me-Ph	543	APCI
173	d1,2	CF₃CH₂	2,4-di-CI-Ph	651.5	APCI
174	d1,2	cf₃ch₂	2,4-di-F-Ph	620	APCI
175	d1	cf₃ch₂	4-CI-Ph	617	PB
176	d2	cf₃ch₂	4-CI-Ph	617	PB
177	d1	cf₃ch₂	4-F-Ph	601	APCI
178	d2	cf₃ch₂	4-F-Ph	601	APCI
179	d1,2	cf₃ch₂	4-Me-Ph	597	APCI

Poznámka: V uvedenej tabulke sa označenie izomérov týka stereochémie v polohe C3 (v štruktúre označené ***) pyrazolónpiperidínovej skupiny; dl a d2 sa týkajú izomérov, ktoré boli chromatograficky oddelené; dl,2 sa týka zmesi izomérov. V prvom stĺpci tabulky je uvedené číslo príkladu. Výrazom Ph sa vždy rozumie fenyl.

Príklady 180 až 183

Zlúčeniny podlá príkladov 180 až 183, uvedené v nasledujúcej tabulke, sa pripravia podlá uvedenej schémy spojovaním príslušne substituovaného pyrazolónpiperidínu všeobecného vzorca I s kyselinou všeobecného vzorca IV ako medziproduktom obdobným spôsobom ako podlá príkladu 3E a 3F.

(D (IV) o

H

125

Kyselina všeobecného vzorca IV ako medziprodukt sa pripraví spracovaním aminokyseliny produktom podľa príkladu 5D zavedeným spôsobom podľa príkladu

5F.

•	Izomér	R*	R^-CHrA¹ A¹	Ar	MS	spôsob
180	d1,2	Me	Phenyl	(CH₂)₂Ph	504	PB
181	d1,2	Me	Phenyl	SCHtPh	559	PB
182	d1	Me	Phenyl	2-Naftalenyl	527	APCI
183	d1,2	Me	Phenyl	CH₂O-(4-F-Ph)	524	PB

Poznámka: V uvedenej tabuľke sa označenie izomérov týka stereo chémie v polohe C3 (v štruktúre označené ***) pyrazolónpiperidínovej skupiny; dl a d2 sa týkajú izomérov, ktoré boli chromatograficky oddelené; dl,2 sa týka zmesi izomérov. V prvom stĺpci tabuľky je uvedené číslo príkladu. Výrazom phenyl sa vždy rozumie fenyl.

Príklad 184

L-vínan 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 46,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-1-(R)-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]-2-metylpropiónamidu

A. l-terc.-Butylester-3-etylester 4-oxo-piperidín-l,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku etylesterhydrochloridu 4-oxopiperidín-3-karboxylovej kyseliny (100 g, 0,482 mol) v zmesi IPE (724 ml) a vody (360 ml) sa pomaly pridá TEA (63,5 g, 0,627 mol) a následne (Boc)₂0 (115,7 g, 0,53 mol). Reakčná zmes sa mieša cez

126 noc v prostredí dusíka. Organická fáza sa oddelí a premyje sa vodou, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa žiadaný produkt vo forme kryštálov (142,0 mg, výťažok 109%), s malým podielom IPE).

B. 1-terc.-Butylester-3-etylester 3-benzyl-4-oxopiperidín1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku 1-terc.-butylester-3-etylesteru 4-oxopiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny (73,36 g, 0,27 mol) v dimetylformamide (734 ml) sa pridá lítiumkarbonát (50 g, 0,676 mol) a následne benzylbromid (55,34 g, 0,324 mol). Zmes sa zahreje na teplotu približne 60C a mieša sa počas približne 20 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti, extrahuje sa IPE, premyje sa vodou a vysuší sa síranom horečnatým. Po filtrácii a koncentrácii vo vákuu sa získa pevná látka. Prekryštalizovaním surového produktu z hexánu sa získa biela pevná látka (33,6 g, výťažok 38,,2 %).

C. 3a-Benzyl-2-metyl-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyrid in-3-on

Do roztoku 1-terc.-butylester-3-etylesteru 3-benzyl-4oxopiperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny (1935,97 g, 5,36 mol) v toluéne (9700 ml) sa pridá metylhydrazín (199,2 ml, 5,63 mol), nasledovaný pomaly octovou kyselinou (325 ml, 5,68 mol) pri teplote približne 8“C. Reakčná zmes sa ohreje pomaly na teplotu približne 65°C a mieša sa približne 7,5 hodiny. Po vychladnutí na teplotu miestnosti sa organická vrstva premyje 10% roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa vo vákuu na malý objem. Reakcia sa opakuje dvakrát v rovnakom meradle. Koncentrované roztoky produktu z troch reakcií sa spoja a zmiešajú sa s IPE (50 1) a ochladia sa na teplotu približne 0‘C. Opakovane sa zavedie plynný chlorovodík a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti až do úplného odstránenia chrániacej skúpi127 ny. Zmes sa skoncentruje vo vákuu na približne polovinu pôvodného objemu, pridá sa dichlórmetán (24 1), následne hydroxid amónny (22 1). Zmes sa extrahuje dichlórmetánom a skoncentruje sa na malý objem (6 až 7 1). Pridá sa hexán (20 1) a zmes sa ochladí na teplotu 15 až 20C. Voľný zásaditý produkt sa zhromaždí v podobe kryštálov a vysuší sa vo vákuu (celkom 1985 g, výťažok 84,8%).

D. L-Vínan 2a-(R)-benzyl-2-metyl-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-pyridin-3-onu

Do roztoku 3a-benzyl-2-metyl-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo-[4,3-c]-pyridin-3-onu (100 g, 0,41 mol) v zmesi acetónu a vody (970 ml/120 ml) sa pridá L-vínna kyselina (67,55 g, 0,45 mol). Zmes sa zahreje na teplotu približne 50’C a mieša sa cez noc. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu približne 10 až 15’C a zrazenina sa odfiltruje, premyje sa studenou zmesou acetónu a vody a vysuší sa vo vákuu. Získa sa produkt v podobe bielej pevnej látky (157,8 g, výťažok 97,83 %, 99 % ee).

E. 2-terc.-Butoxykarbonylamino-2-metylpropiónová kyselina

Zmieša sa 2-aminoizomaslová kyselina (140 g, 1,36 mol), IN roztok hydroxidu sodného (1620 ml, 1,63 mol), (Boc)₂0 (375 ml,

1,63 mol) a tetrahydrofurán (420 ml) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (700 ml) a 6N kyselinou chlorovodíkovou sa nastaví na hodnotu pH 3,0. Organická fáza sa oddelí, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa na približne štvrtinu pôvodného objemu. Po spracovaní hexánom sa izoluje a zhromaždí produkt v podobe bielej pevnej látky (125,8 g, výťažok 45,44%). Z matečného lúhu sa dodatočne získa dfalších 7,8 g produktu.

F. 2,5—Dioxopyrolidin—1—ylester 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónovej kyseliny

128

Do roztoku 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónove j kyseliny (100 g, 0,492) a anhydridu jantárovej kyseliny (60,02 g 0,522 mol) v metylénchloride (1000 ml) sa pridá EDC (100,09 g, 0,522 mol) za miešania v prostredí dusíka. Zmes sa mieša cez noc v prostredí dusíka. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (1 1), premyje sa nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a vodou a skoncentruje sa vo vákuu na malý objem. Z roztoku sa vyzrážajú biele kryštály, odfiltrujú sa a vysušia sa vo vákuu, čím sa získa (104,9 g + 27,3 g, výťažok 89,5%).

G. 3-(R)-Benzyloxy-2-( 2-terc. -butoxykarbonylamino-2-metyl-propionylamino)propiónová kyselina

Do roztoku 2-amino-3-benzyloxypropiónovej kyseliny (26,2 g, 0,113 mol) vo vode (101,8 ml) a TEA (28,53 g, 0,282 mol) sa pridá 2-terc.-butoxykarbonylamino-2-metylpropiónová kyselina a 2,5-dioxopyrolidin-l-yl-ester (33,94 g, 0,113 mol) v tetrahydrofuráne (407 ml). Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti v prostredí dusíka. Do zmesi sa pridá 10% roztok kyseliny citrónovej (500 ml). Zmes sa mieša počas ďalších 10 minút a zriedi sa etylacetátom (500 ml). Organická fáza sa oddelí, premyje sa vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa vo vákuu za získania hustého oleja. Surový olej sa spracuje systémom IPE/hexán (50/50) a ochladí sa na teplotu približne 10’C, čím sa získa biely pevný produkt (42,3, výťažok 98,4%).

H. terc.-Butylester {l-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl ] -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetylkarbamoyl]-1-metyletyl}karbámovej kyseliny

Do roztoku 3a-(R)-benzyl-2-metyl-2,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [4,3-c ]pyridin-3-onu, L-vínanu (10,81 g, 0,0275 mol) v etylacetáte (216,2 ml) sa pri teplote približne -66’C pridá TEA (8,43 ml, 0,0605 mol). Zmes sa mieša počas približne 1,5 hodiny. Po odfiltrovaní vyzrážanej soli sa pridá 3-benzyloxy129

-2-( 2-terc. -butoxykarbonylamino- 2-metylpropionylamino) propiónová kyselina (8,7 g, 0,229 mol) a TEA (19,15 ml, 0,1374 ml) pri teplote približne -35^eC, prikvapká sa 50% PPAA v etylacetáte (27,5 ml, 0,0458 mol). Zmes sa mieša počas približne dvoch hodín pri teplote približne -20’C až približne -27’C, potom

1,5 hodinu, pričom sa teplota pomaly zvýši na približne O’C. Reakčná zmes sa vleje do vody a extrahuje sa IPE, premyje sa 7% roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa vo vákuu. Takto získaný surový olej sa spracuje systémom IPE/hexán (50/50) na umožnenie kryštalizácie. Získa sa produkt v podobe bielej pevnej látky (10,3 g, výťažok 74,3%).

I. 2-Amino-N-[ 2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl]-l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxo-etyl-2-metylpropiónamid

Do roztoku terc.-butylesteru {l-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ]pyridin-5-yl ] -l-(R)-benzyloxymetyl-2-oxo-etylkarbamoyl]-1-metyletyl Jkarbámovej kyseliny (10,3 g, 0,017 mol) v metylénchloride (68,6 ml) sa pri teplote približne 0 až 5’C pridá TFA (35 ml) za udržania teploty pod približne 5’C. Teplota sa potom zvýši na teplotu miestnosti. Zmes sa mieša počas približne troch hodín. Metylénchlorid ako rozpúšťadlo sa nahradí etylacetátom. Nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného sa hodnota pH nastaví na 8, zmes sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa vo vákuu na malý objem. Po spracovaní zmesi IPA a následne hexánom sa získa produkt v podobe bielej pevnej látky (7,4 g, výťažok 86,1%). Chromatografiou HPLC sa získa produkt obsahujúci 0,2% diasteroméru.

J. L-vínan 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -1- (R) -benzyloxymetyl-2-oxoetyl-2-metylpropiónamidu

130

Do roztoku 2-amino-N-[2-(3a-(R)-benzyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridin-5-yl ] -l- (R) -benzyloxymetyl-2oxoetyl-2-metylpropiónamidu zo stupňa I (385 g, 0,761 mol) v metanole (4000 ml) sa pridá L-(+)-vínna kyselina (114,5 g, 0,761 mol) a zmes sa mieša cez noc. Výsledný kalný roztok sa sfiltruje na získanie číreho roztoku, ktorý sa skoncentruje na odstránenie väčšiny rozpúšťadla. Pridá sa celkom 12 1 etylacetátu a zvyšný metanol sa odstráni azeotropicky pri teplote približne 63^eC až 72^eC. Pevná látka sa izoluje a rozpustí sa v etylacetáte a roztok sa zahrieva počas približne 16 hodín pod spätným chladičom a nechá sa cez noc vychladnúť na teplotu miestnosti. Získa sa produkt v podobe bielej pevnej látky (482,3 g, výťažok 96,8%). Teplota topenia je 174 až 176°C.

Príklad 185

L- (+) -vínan 2-amino-N- {1- (2,4-difluórbenzyloxymetyl) -2-oxo-2- [ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl )-2,3,-3a ,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl]etyl-2-metylpropiónamidu

A. l-terc.-Butylester-3-etylester 4-oxo-3-pyridin-2-ylmetyl-piperidín-1,3-dikarboxylovej kyseliny

Do roztoku l-terc.-butylester-3-etylesteru 4-oxo-piperidín 1,3-dikarboxylovej kyseliny (10,34 g, 38,2 mmol) v dimetylformamide (40 ml) sa pri teplote približne 0’C pridá pikolylchloridhydrochlorid (5,7 g, 34,7 mmol), uhličitan draselný (14,4 g, 104,1 mmol) a jodid draselný (5,76 g, 34,7 mmol). Po dvojhodinovom miešaní pri teplote približne 0°C sa ľadový kúpeľ odstaví a pridá sa DABCO (973 mg, 8,68 mmol). Reakčná zmes sa mieša počas približne 30 minút a vleje sa do zmesi vody a IPE. Organická vrstva sa oddelí a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa vo vákuu. Surový zvyšok sa nechá vykryštalizovať z hexánov za získania bielej pevnej látky (8,19 g, výťažok 65%).

131 l-HNMR (CDC1₃): δ 1,17 (z,3H), 1,48 (s,9H), 1,55 (s,2H), 2,61 m,lH), 2,71 m,1H), 3,31-3,50 (m,3H), 4,11 (d,2H), 4,49 (d,lH), 7,06 (br S,1H), 7,17 (d,lH), 7,54 (m,lH), 8,40 (s,lH).

B. terc.-Butylester 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2)-tri-fluóretyl)-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-karboxylovej kyseliny

70% vodný roztok CF₃CH₂NHNH2 (325 ml, 1,986 mol) (produkt spoločnosti Aldrich) sa extrahuje toluénom (3x120 ml). Do roztoku produktu zo stupňa A (600 g, 1,655 mol) v toluéne (900 ml) sa napred pridajú spojené toluénové extrakty obsahujúce 2,2,2trifluóretylhydrazín a potom kyselina octová (121,4 g, 1,986 mol). Reakčná zmes sa udržuje na teplote 70^eC počas približne dvoch hodín, pridá sa ďalší toluénový extrakt 70% vodného 2,2,2 trifluórhydrazínu (50 g). Reakčná zmes sa udržuje na teplote približne 80’C počas približne 3,5 hodiny, ochladí sa na teplotu miestnosti a zriedi sa nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2 1). Toluénová vrstva sa oddelí a premyje sa nasýteným vodným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa olej (754,8 g). Kryštalizáciou zo systému metanol/voda sa získa žiadaný produkt v podobe bielej pevnej látky (609,5 g).

¹HNMR (CDC1₃): δ 1,50 (s,9H), 2,53 (d,lH), 2,70 br S,2H), 2,88 (br s,lH), 3,31 (m,2H), 3,97 (m,lH), 4,19 (m,lH), 4,46 (br s, 1H), 4,63 (br S,1H), 7,06 (m,2H), 7,51 (m,lH), 8,34 (m,lH).

C. 3a-Pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2)-trifluóretyl)-2,3a,4,-5,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-on

Do roztoku produktu zo stupňa B (10 g, 24,2 mmol) v dichlórmetáne (100 ml) sa prikvapká metánsulfónová kyselina (11,6 g, 121 mmol) počas 30 minút. Reakčná zmes sa mieša približne jednu hodiny, ochladí sa na teplotu približne 0C, lievikom sa pridá trietylamín (18,6 ml, 133,1 mmol). Zmes sa nechá ohriať na teplotu miestnosti počas približne jednej hodiny,

132 zriedi sa ďalším dichlórmetánom, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa síranom sodným, skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa produkt vo forme bielej pevnej látky (7,2 g).

^HNMR (CDC1₃): δ 2,51-2,72 (m,,4H), 3,35 (m,2H), 3,49 (m,2H), 4,03 (m,lH), 4,25 (m,lH), 7,08 (d,2H), 7,51 (t,lH), 8,37 (d,lH)

D. (D)-vínan 3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2)-trifluóretyl)2,3a,4,5,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-3-on

V suchej banke s gulatým dnom s obsahom 5 litrov, vypláchnutej dusíkom a opatrenej mechanickým miešadlom sa do produktu zo stupňa C (243 g, 0,78 mol) v zmesi acetónu a vody (9:1, 2430) pridá pri teplote približne 17‘C D-(-) vínna kyselina (129 g, 0,86 mol). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc, pevná látka sa zhromaždí a premyje sa studeným acetónom a vysuší sa vo vákuu. Získa sa produkt v podobe žltej pevnej látky (284 g, výťažok 78,8%).

E. 2-terc. -Butoxykarbonylamino-3- (2,4-difluórbenzyloxy)propiónová kyselina

Do roztoku N-Boc-(D)serínu (452 g, 2,2026 mol) v zmesi tetrahydrofuránu (7 1) a dimetylformamidu (3 1) sa pri teplote približne 0’C pridá roztok terc.-butoxidu draselného (515,8 g, 4,5963 mol). Reakčná zmes sa mieša pri teplote približne 0'C počas približne 30 minút, pridá sa 2,4-difluórbenzylbromid (456,5 g, 2,2051 mol). Po ohrevu na teplotu miestnosti sa reakčná zmes skoncentruje vo vákuu na odstránenie tetrahydrofuránu. Reakčná zmes sa rozdelí medzi 4,5 1 vody a 4,5 1 IPE. Vodná vrstva sa extrahuje dvakrát vždy 4 1 IPE. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa žltá voskovitá hmota (518,0 g, výťažok 70,9%). ¹HNMR (CDC1₃): δ 1,44 (s,9H), 3,73 (m,lH), 4,44 (br S,1H), 4,54 (s,2H), 5,34 (m,lH), 6,78 (m,lH), 6,84 (m,lH), 7,30 (m,lH).

133

F. Soľ metánsulfónovej kyseliny 2-amino-3-(2,4-benzyloxy)propiónovej kyseliny

Do roztoku produktu zo stupňa E (1,19 g, 3,59 mmol) v systému dichlórmetán/IPE (1:1, 12 ml) sa počas 10 minút pridá injekčnou striekačkou metánsulfónová kyselina (1,72 g, 17,95 mmol). Z roztoku sa okamžite vyzráža pevná látka. Po približne jednej hodine sa pevná látka odfiltruje a premyje sa zmesou dichlórmetán/IPE (1:1), čím sa získa 939 mg produktu (výťažok 80%).

G. 2- (2-terc. -Butoxykarbonylamino-2-metylpropionylamino-3-(2,4-difluórbenzyloxy)propiónová kyselina

Do roztoku produktu zo stupňa F (520 mg, 1,46 mmol) v systému tetrahydrofurán/voda (4:1, 10 ml) sa pridá 2,5-dioxopyrolidin-l-yl-ester 2-terc. -butoxykarbonylamino-2-metylpropiónovej kyseliny (438 mg, 1,46 mmol) a trietylamín (369 mg, 3,65 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas približne jednej hodinu a zriedi sa 10% vodným roztokom kyseliny citrónovej (10 ml). Po približne 15 minútach sa pridá etylacetát (50 ml), organická vrstva sa oddelí, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa produkt vo forme peny (534,1 mg, výťažok 88%).

¹HNMR (CDC1₃):5 1,38 (br s,15H), 3,77 (d,lH), 4,52 (m,3H),

4,54 (s,2H), 6,92 (m,lH), 7,41 (m,lH), 7,58 (d,lH).

H. terc.-Butylester (1-(1-(2,4-difluórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3-3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c ] pyridín-5-y 1 ] etyl) karbámove j kyseliny

a) Produkt zo stupňa D (5,17 g, 1,12 mol) sa pridá pri teplote približne -6C do etylacetátu (5170 ml) v suché 12-litrovej banke s guľatým dnom vypláchnutej dusíkom, opatrenej

134 mechanickým miešadlom. Roztok sa ochladí na teplotu približne -40’C, počas 45 minút sa pridá trietylamín (398 ml, 2,86 mol). Reakčná zmes sa mieša približne 90 minút pri teplote približne -50^eC až -40^eC, sfiltruje sa do 22-litrovej banky s guľatým dnom, vypláchnutej dusíkom a premyje sa etylacetátom (2068 ml, predbežne ochladeným na teplotu -50’C), čím sa získa voľná báza v podobe bielej pevnej látky.

b) Pri teplote približne -30’C sa produkt zo stupňa G (425 g 1,02 mol) pridá do etylacetátového roztoku obsahujúceho produkt zo stupňa H(a), trietylamín (654 ml, 4,69 mol) a PPAA (50% v etylacetáte, 916 ml, 1,53 mol). Reakčná zmes sa mieša počas približne jednej hodiny, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa síranom sodným, skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa produkt vo forme oleja (636 g, výťažok 87,8%).

I. 2-Amino-N-{1-(2,4-difluórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a, 4,6,7hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]etyl-2-metylpropiónamid

Počas približne 55 minút sa pri teplote približne 15’C prikvapká metánsulfónová kyselina (258,3 ml, 3,98 mol) do produktu zo stupňa H (566 g, 0,796 mol) v dichlórmetáne (11,320 ml) v suchej 22-litrovej banke s guľatým dnom vypláchnutej dusíkom, opatrenej mechanickým miešadlom. Zmes sa mieša počas približne 40 minút pri teplote približne 20’C, pridá sa nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného (8,490 ml) na úpravu hodnoty pH na 7,8. Organická vrstva sa oddelí, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a vysuší sa síranom sodným, skoncentruje sa vo vákuu, čím sa získa produkt vo forme oleja (388,8 g, výťažok 80%).

J. L-vínan 2-amino-N-{l-(2,4-difluórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2- [ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a135

-4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl ]etyl-2-metylpropiónamidu

Do roztoku produktu zo stupňa I (370 g, 0,6 mol) v metanole (4,070 ml) v 12-litrovej banke s gulatým dnom vypláchnutej dusíkom, opatrenej mechanickým miešadlom sa pridá L-(+)-vínna kyselina (90 g, 0,6 mol). Surový zvyšok sa zriedi etylacetátom (4,560 ml), zahreje sa na teplotu približne 70’C, potom sa nechá pomaly vychladnúť počas 17 hodín na teplotu miestnosti. Pevná látka sa odfiltruje a vysuší, čím sa získajú biele kryštály s teplotou topenia 188 až 189“C (348,46 g, výťažok 76%). MS:MH+ 611. [a]⁵⁸⁹+22,03(c=ll,9, MeOH).

¹HNMR (MeOH,4d): δ 8,28 (d,lH), 7,59 (t,lH), 7,41-7,39 (m,lH), 7,18-7,13 (m,lH), 6,92 (t,lH), 5,2 (t,lH), 4,56 (bs,3H),

4,36 (s,2H), 4,31-4,25) (m,lH), 4,13-4,06 (m,lH), 3,78 (d,2H), 3,21 (t,lH), 3,18-2,96 (m,2H), 2,65-2,55 (m,2H), 1,57 (d,6H)

Príklad A

Nasledujú výsledky štúdie so samicami potkanov, ktorým sa podávala GH sekretagogová L-vínna sol zlúčeniny 2-amino-N[ 2- (3a- (R) -benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3 -c ] pyridin-5-yl]-1-(R)-(benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramidu

Tabulka I

Stredné hladiny inzulínu a metabolitu v plazme po dennom dávkovaní mimetika GHRP počas troch mesiacov

Pri usmrtení potkanov sa zhromaždili vzorky krvi na lačno. Hviezdičkou (*) sú označené hodnoty významne sa líšiace od skupiny ošetrenej nosičom (p < 0,05).

136

	Dávka	Inzulín	Glukóza	Laktát	Cholesterol	Triglycerid
Chirurgia (mg/kg) (uU/ml	(mg/d)	(mg/d)	(mg/d)	(mg/d)
Fikcia	nosič	118,8	181,7	4,6	97,9	254,8
Fikcia	0,5	94,9	*142,7	3,7	95,4	219,6
Fikcia	5,0	95,7	*139,9	*3,2	*80,6	227,2
Ovx	nosič	112,8	194,0	3,9	106,8	182,7
Ovx	0,5	* 78,7	179,7	3,6	92,5	181,9
Ovx	5,0	* 84,1	177,2	3,1	102,2	158,4

Údaje v tabulke I ukazujú, že toto ošetrenie je spojené so znížením hladiny glukózy a/alebo inzulínu v plazme závislom od dávky, čo je konzistentné so zlepšením glykemického riadenia a inzulínovej citlivosti týmto ošetrením. Ošetrenie je tiež spojené s klesajúcim trendom laktátu, cholesterolu a triglyceridu v plazme, čo je rovnako konzistentné so zlepšením lipidového profilu a metabolického riadenia ako dôsledkom zlepšenej inzulínovej citlivosti liečenej týmto ošetrením.

Priemyselná využiteínosť

Peptid alebo peptidové mimetikum uvoíňujúce rastový hormón alebo jeho farmaceutický prijatelná sol na výrobu farmaceutického prostriedku osobitne na ošetrovanie stavov spojených s inzulínovou rezistenciou typu I diabetes, typu II diabetes, hyperglykémie, zhoršenej znášanlivosti glukózy alebo proti inzulínu rezistentnému syndrómu alebo stavu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sekretagog rastového hormónu všeobecného vzorca I kde znamená e o alebo 1, n a w od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, pričom však n a w nemôžu súčasne znamenat nulu,

Y atóm kyslíka alebo síry,

R¹ atóm vodíka, -CN. -(CH2)qN(X⁶)C(O)(CH2)rA¹,

-(CH₂)_qN(X⁶)SO2(CH2)rA\-(CH2)qN(X⁵)S02X⁶, -(CH^NíX^CÍOJNíX^CHárA¹. -(CH^NQ^CÍOJNÍX⁶)^⁶). -(CH^CtOJNÍX⁶)^⁶), -(0^),0(0)^(0¾)^¹. -(CH2)qC(O)OX^e, -(CH2)_qC(O)O(CH₂)_rA¹, -(CH^OX⁶, -(CH2)qOC(O)X^s, -(CH2)_qOC(O)(CH₂)_rA¹. -(CHáqOCÍOJNpOíCHzX-A¹. -(CH^OCíONQ^íX⁶), -(CHáqCÍOJX⁶. -(CH₂)_qC(O)(CH₂),-A¹. -(CH^NtX'jCtOJOX⁶,

-(CH^NíX'jSOzNQ^íX⁵). -(ΟΗ2),8(Ο)„Χ⁶. -(CH2)_qS(O)_m(CH₂)_rA¹, -(C,-C,0)alkyl. -(CH2)rA¹. -(CH2)_q-(C₃-C₇)cykloaIkyl, -(CH₂)_q-Y¹-(CrC6)alkyl. -(CH2)q-Y¹-(CH2)rA¹ , -(CH2)q-Y¹-(CH2)_t-(C3-C₇)cyMoalkyl;

138 pričom alkylové a cykloalkylové podiely skupiny R¹sú prípadne substituované skupinou alkylovou s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, -CONH₂, -StOjj alkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetrazol-5-ylovou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru,

Y¹ znamená atóm kyslíka, skupinu -S(0)_m-, -C(O)NX⁶-, -CH=CH-, -C=C-, -N(X⁶)C(0)-, -C(O)NX⁶-, -C(0)0-,

-OC(O)N(X⁶)- alebo -0C(0)-, q 0, 1, 2, 3 alebo 4, t 0, 1, 2 alebo 3, pričom (CH₂)g a (CH₂)_t podiely sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, skupinou -CONH₂-S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -CO₂alkyleste rovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, 1Htetrazol-5-ylovou, jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru a jednou alebo dvoma alkylovými skupinami s 1 až 4 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylcykloalkylovú s 0 až 3 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 3 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkylA¹ s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, alebo skupinu A¹, pričom alkylové a cykloalkylové podiely vo význame symbolu R² sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, skupinou -C(O)OX⁶-C(O)N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)(X⁶), -s(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)A¹, -C(O)(X⁶), trifluórmetylovou,

139 kyanoskupinou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami halogénu,

R³ skupinu A¹, alkylovú s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu alkylA¹ s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele, skupinu alkylcykloalkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 7 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkyl-X-^-alkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkyl-A¹ s 1 až 5 atómami uhlíka v prvom alkyI lovom podiele a s 0 až 5 atómami uhlíka v druhom alkylovom podiele alebo skupinu alkyl-X¹-alkylcykloalkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele a s 3 až 7 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, pričom alkylové podiely v skupinách symbolu R³ sú prípadne substituované skupinou -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jedným, dvoma, tromi, štyrmi alebo piatimi atómami halogénu alebo jednou, dvoma alebo tromi skupinami 0X ,

X¹ znamená -0-, -S(O)_m-, -N(X²)C(O)-, -C(O)N(X²), -0C(0)-, -C(0)0-, -CX²=CX²-, -N(X²)C(O)O-, -oc(o)n(x²)alebo -C=CR⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, alebo R⁴spolu s R³ a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú skupinu cykloalkylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, cykloalkenylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom kondenzovaným na čiastočne nasýtený, plne nenasýtený alebo plne nasýtený päťčlenný alebo šesťčlenný kruh,

140 obsahujúci prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

X⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo X⁴ spolu s R⁴ a s atómom dusíka, na ktorý je X⁴ viazaný a s atómom uhlíka, na ktorý je R⁴ viazaný, tvoria päťčlenný až sedemčlenný kruh, >6 väzbu alebo skupinu vzorca \/^x(CHáa (CHáb kde znamená a a b od seba nezávisle 0, 1, 2 alebo 3,

Χ^ a X^5a od seba nezávisle skupinu zo súboru zahŕňajúceho atóm vodíka, skupinu trifluórmetylovú, A¹ a prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁵ a X^5a má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, OX², S(O)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX², cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, -N(X²)(X²) a -C(O)N(X²)(X²), alebo atóm uhlíka nesúci skupinu X⁵ a X^5a vytvára jeden alebo dva alkylénové mostíky s atómom dusíka nesúcim skupiny symbolu R⁷ a R⁸, pričom každý alkylénový mostík obsahuje 1 až 5 atómov uhlíka, za podmienky, že v prípade, že jeden alkylénový mostík je tvorený X⁵ alebo X^5a, avšak obidva nemôžu byt na atómu uhlíka a R⁷ alebo R⁸ nie však obidve tieto skupiny sú na atómu dusíka a za ďalšej podmienky, že v prípade existencie dvoch alkylénových

141 mostíkov, nemôžu byt X⁵ a X^5a na atómu uhlíka a R⁷ a R⁸ nemôžu byt na atómu dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú čiastočne alebo plne nasýtený trojčlenný až sedemčlenný kruh alebo čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden alebo dva heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

Z¹ väzbu, atóm kyslíka alebo skupinu N-X² za podmienky, že v prípade, keď a a b znamenajú obidva nulu, potom Z¹ neznamená skupinu N-X² alebo atóm kyslíka,

R⁷ a R⁸ od seba nezávisle atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s l až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R⁷ a R⁸ má substituent volený od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, -C(0)0-alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -S(O)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až 5 atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri skupiny -0-C(0)alkylové s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až 3 alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka alebo

142

R⁷ a R⁸ spolu dohromady vytvárajú skupinu -(CH2)r-L-(CH2)r-, kde znamená L skupinu C(X²)(X²), S(0)m alebo N(X²),

A¹ vždy od seba nezávisle skupinu cykloalkenylovú s 5 až

7 atómami uhlíka, fenylovú alebo čiastočne nasýtený, plne nasýtený alebo plne nenasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh prípadne s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, a bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným alebo plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným alebo s plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, pričom A¹ je vždy od seba nezávisle prípadne substituovaný na jednom alebo na obidvoch kruhoch v prípade, že A¹ znamená bicyklický systém, s až tromi substituentmi volenými od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho atóm fluóru, chlóru, brómu a jódu, skupinu ocf3, ocf2h, cf3, ch3, och3, -0X⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -C(O)OX⁶, karbonylový kyslík, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, nitroskupinu, kyanoskupinu, skupinu benzylovú, -S(0)malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, lH-tetrazol-5-ylovú, fenylovú, fenoxyskupinu, fenylalkyloxyskupinu, skupinu halogénfenylovú, irietyléndioxyskupinu, skupinu -N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)C(0)(X⁶), -SO2N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)S02-fenylovÚ, -N(X⁶)SO2X⁶, -conx^i:lx¹², -so2nx^i:lx¹², -nx⁶so2x¹², -nx⁶conx¹¹x¹², -NX⁶so2NX^i:lX¹², -NX⁶C(O)X¹², imidazolylovú, tiazolylovú a tetrazolylovú za podmienky, že pokial A¹ je prípadne substituovaný metyléndioxyskupinou, môže byt

143 substituovaný iba jednou metyléndioxyskupinou, pričom znamená X¹¹ atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R¹¹ má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu fenylovú, fenoxyskupinu, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, skupinu S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až päť atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri alkanoyloxyskupiny

I s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až tri alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka,

X¹² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylovú, tiazolylovú, imidazolylovú, furylovú alebo tienylovú za podmienky, že v prípade, keď X¹² neznamená atóm vodíka, je skupina X¹² prípadne substituovaná jedným až tromi substituentmi od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm chlóru, fluóru, skupinu CH₃, OCH₃, OCF₃ a CF₃ alebo

X¹¹ a X¹² spolu dohromady vytvárajú skupinu

-(CH^-lA-ÍCH^-, kde znamená L¹ skupinu C(X²)(X²), O, S(O)_m alebo N(X²), r vždy od seba nezávisle 1, 2 alebo 3,

X² od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X² má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu -S(0)_malkylovú s 1 až 6

144 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jeden až päť atómov halogénu a jednu až tri skupiny OX³,

X³ vždy od seba nezávisle atóm vodíka alebo skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka,

X⁶ od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu halogénalkylovú s 2 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, halogéncykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, f

pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s l až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁶ má jeden alebo dva substituenty volené od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu alkylovú s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovú, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinu karboxylovú, -CONH₂, -S(O)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylátalkylesterovú s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele a lH-tetrazol-5-ylovú, alebo v prípade dvoch skupín symbolu X⁶ na jednom atómu a obidva X⁶ znamenajú od seba nezávisle skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, sú prípadne obidve alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka spojené a spolu s atómom, na ktorý sú obidve skupiny X⁶ viazané, vytvárajú štyrčlenný až deväťčlenný kruh obsahujúci prípadne atóm kyslíka, síry alebo skupinu NX⁷,

X⁷ atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovú skupinu a m vždy od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, za podmienky, že X⁶ a X¹² nemôžu znamenať atóm vodíka, kedf sú viazané na C(O) alebo SO2 vo forme skupiny C(O)X⁶, C(O)X¹², so2X⁶ alebo SO2X¹² a keď R⁶ znamená väzbu, potom L znamená N(X²) a každé r v skupine symbolu (CH2)_r-L-(CH₂)_rznamená od seba nezávisle 2 alebo 3,

145 alebo jeho stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantlmérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo jeho farmaceutický prijateľné soli a prodrogy há výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
2. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I kde znamená

R¹ skupinu -CH2~fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -(CH2)₃-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu 3-indolyl-CH2-,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu etylovú a R³ skupinu 3-indolyl-CH2-,

R¹ skupinu -CH2-4-fluórfenylovú, R² skupinu metylovú a R³skupinu 3-indolyl-CH2-,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -CH2-O-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2~fenylovú, R² skupinu etylovú a R³ skupinu -CH2-o-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu -CH2CF₃ a R³ skupinu -CH₂-O-CH₂-fenylovú,

R¹ skupinu -CH2~4-f luórf enylovú, R² skupinu metylovú a R³skupinu -CH2-O-CH₂-fenylovú,

146 R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu terc.-butylovú a R³skupinu -CH2-0-CH₂-fenylovú alebo

R¹ skupinu -CH2-fenylovú, R² skupinu metylovú a R³ skupinu -CH2-O-CH₂-3,4-dif luórfenylovú, alebo jeho stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantimérmi obohatené alebo enantlomérne čisté izoméry alebo jeho farmaceutický prijateľné soli a prodrogy na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
3. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I kde znamená

R skupinu metylovú, A skupinu 2-pyridylovú a R^J skupinu CH₂-0-CH₂-fenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-O-CH₂-3-chlórfenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-4-chlórfenylovú,

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-2,4-dichlórfenylovú,

R² skupinu ch2cf3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-0-CH₂-3-chlórtiofénovú alebo

R² skupinu CH2CF3 A¹ skupinu 2-pyridylovú a R³ skupinu CH2-O-CH₂-2,4-difluórfenylovú

147 alebo jeho stereoizomérne zmesi, diastereomérml obohatené, diastereomérne čisté, enantimérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo jeho farmaceutický prijateľné soli a prodrogy na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
4. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I alebo jeho stereoizomérne zmesi, diastereomérml obohatené, diastereomérne čisté, enantimérmi obohatené alebo enantiomérne čisté Izoméry alebo ich farmaceutický prijateľné soli a prodrogy, ktorými sú 3a(R,S),ÍR diastereomérne zmes, 3a(R),l(R) diastereomér alebo 3a(S),l(R) diatereomér zlúčeniny vybranej zo súboru zahŕňajúceho

2-amirio-N- [ 1- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-karbonyl-4-f enylbutyl ]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo[ 4,3-c ]pyridin-5-yl) -1- (lH-indol-3-ylmetyl) -2-oxo-etyl]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolof 4,3-c]pyridin-5-yl) -1- (lH-indol-3-ylmetyl) -2-oxo-etyl]izobutyramid,

2-amiňo-N- [ 2- [ 3a- (4-f luórbenzyl-2-metyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]-l-(lH-indol-3-yl-metyl)-2-oxoetyl]izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-metyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydro-pyrazolo[4, 3-c]pyridin-5-yl]-l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]-izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-etyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydro-pyrazolo [ 4,3-c ]pyridin-5-yl ] -l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] -izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-3-oxo-2- (2,2,2-trif luóretyl)-2,3,3a-4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4,3-c]pyridin-5-yl ] -1-benzyloxy-metyl-2-oxoetyl] izobutyramid,

148

2-amino-N- {l-benzyloxymetyl-2- [ 3a- (4-f luórbenzyl) -2-metyl—3-0X0-2,3,3a,4,6, 7-hexahydropyrazolo[4,3-c]-2-oxoetyl}-izobutyramid,

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-2-terc. -butyl-3-oxo-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c)pyridin-5-yl )-l-benzyloxymetyl-2-oxoetyl]i zobutyramid a

2-amino-N- [ 2- (3a-benzyl-3-oxo-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo- [ 4,3-c ] pyridin-5-yl) -1-benzyloxymetyl-2-oxoetyl ] izobutyr-amid.

na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
5. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I, ktorým je soľ L-vinnej kyseliny 2-amino-N-[2(3a-(R)-benzyl-2-metyl-3-oxo-2, 3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-clpyridln-5-yl)-1-(R)benzyloxymetyl-2-oxoetyl]izobutyramid na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
6. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I jeho stereoizomérne zmesi, diastereomérmi obohatené, diastereomérne čisté, enantimérmi obohatené alebo enantiomérne čisté izoméry alebo ich farmaceutický prijateľné soli a prodrogy, ktorými sú 3a(R,S),ÍR diastereomérna zmes, 3a(R),l(R) enantiomér alebo 3a(S),l(R) enantiomér zlúčeniny vybranej zo súboru zahŕňajúceho

2-amino-N- [ l-benzyloxymetyl-2- (2-metyl-3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2,3,3a, 4,6,7-hexahydropyrazolo[ 4,3-c]pyridin-5-yl)-2-oxoetyl]-2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1- (3-chlórbenzyloxymetyl) -2-oxo-2-[ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl )-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]etyl}-2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1- (4-chlórbenzyloxymetyl) -2-oxo-2- [ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl )-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo [ 4 , 3-c]pyridin-5-yl]etyl}-2-metylpropiónamid,

2-amino-N- {1- (2,4-dichlórbenzyloxymetyl) -2-oxo-2- [ 3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2- (2,2,2-trif luóretyl) -2,3,3a, 4,6,7149

-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]etyl}-2-metylpropiónamid,

2-amino-N-{1-(4-chlórtiofen-2-ylmetoxymetyl)-2-oxo-2-[3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[3,4-c]pyridin-6-yl]etyl}-2-metylpropión-amid a

2-amino-N-{1-(2,4-difluórbenzyloxymetyl)-2-oxo-2-[3-oxo-3a-pyridin-2-ylmetyl-2-(2,2,2-trifluóretyl)-2,3,3a,4,6,7-hexahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl]etyl}-2-metylpropiónamid.

na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
7. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I spolu s rastovým hormónom uvoľňujúcim hormón alebo s jeho funkčným analógom na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu.
8. Farmaceutický prostriedok na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický prijatelný nosič a účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I

O x⁴ kde znamená e 0 alebo 1, n a w od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, pričom však n a w nemôžu súčasne znamenať nulu,

Y atóm kyslíka alebo síry,

150

R¹ atóm vodíka, -CN, -(CH₂)_qN(X⁶)C(O)X⁶, -(CH^NíX^CíOKCH^rA¹,

-(CH₂)_qN(X^s)SO2(CH2)t-A¹l -(CH^qNíX^SOzX⁶, -(CH2)qN(X⁶)C(O)N(X^(CH2)_rA¹, -(CHáqNp^CÍOJNÍX⁶)^⁶), -(CH^qC^NÍX⁶)^⁶), -(CHáqCíOJNíX^CCHárA¹, -(CH2)qC(O)OX⁶, -(CH2)_qC(O)O(CH₂)rA¹, -(CH2)qOX⁶, -(CH2)_qOC(O)X⁶, -(CH2)qOC(O)(CH2)rA¹, -(CH^qOCíOJNCX^CCH^rA¹, -(CH^qOCíOJNíX⁶)^⁶), -(CH2)_qC(O)X⁶, -(CH₂)_qC(O)(CH₂)rA¹, -(CHáqN^CCOJOX⁶,

-(CH^qNCX^SOzNQOCX⁶), -(CH^qSCOJnX⁶, -(CH2)qS(O)m(CH2)rA¹, -(Ci-Cio)alkyl. -(CHjOtA¹, -(CH2)_q-(C3-C7)cykloalkyl, -(CH^q-Y’-CCrCeJalkyl, -(CH₂)_q-Y¹-(CH2)rA¹. -(CH2)_q-Y¹-(CH₂)_r(CrC₇)cykloalkyl;

pričom alkylové a cykloalkylové podiely skupiny R¹sú prípadne substituované skupinou alkylovou s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, -C0NH₂, -S(O)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetrazol-5-ylovou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru,

Y¹ znamená atóm kyslíka, skupinu -S(O)_m~, -C(O)NX⁶-, -CH=CH-, -C=C-, -N(X⁶)C(O)-, -C(O)NX⁶-, -C(0)0-, -OC(O)N(X⁶)- alebo -OC(O)-, g 0, 1, 2, 3 alebo 4, t 0, 1, 2 alebo 3, pričom (CH₂)g a (CH₂)^. podiely sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, skupinou -CONH₂, -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -CO₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, 1H151 tetrazol-5-ylovou, jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru a jednou alebo dvoma alkylovými skupinami s 1 až 4 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylcykloalkylovú s O až 3 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 3 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkylA¹ s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, alebo skupinu A¹, pričom alkylové a cykloalkylové podiely vo význame symbolu R² sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, skupinou -C(O)OX⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)(X⁶), -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)A¹, -C(O)(X⁶), trifluórmetylovou, kyanoskupinou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami halogénu,

R³ skupinu A¹, alkylovú s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu alkylA¹ s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele, skupinu alkylcykloalkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele a so 7 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkyl-A¹ s 1 až 5 atómami uhlíka v prvom alkylovom podiele a s O až 5 atómami uhlíka v druhom alkylovom podiele alebo skupinu alkyl-X¹alkylcykloalkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele a s 3 až 7 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, pričom alkylové podiely v skupinách symbolu R³ sú prípadne substituované skupinou -S(O)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jedným, dvoma, tromi, štyrmi alebo piatimi atómami halogénu alebo jednou, dvoma alebo tromi skupinami OX³,

X¹ znamená -0-, -S(0)_m-, -N(X²)C(O)-, -C(O)N(X²), -oc(o)-, -c(o)o-, -cx²=cx²-, -N(X²)C(O)O-, -OC(O)N(X²)alebo -C=C152

R⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, alebo R⁴spolu s R³ a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú skupinu cykloalkylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, cykloalkenylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom kondenzovaným na čiastočne nasýtený, plne nenasýtený alebo plne nasýtený päťčlenný alebo šesťčlenný kruh, obsahujúci prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

X⁴

R⁶ atóm vodíka, skupinu alkylovú s l až 6 atómami uhlíka alebo X⁴ spolu s R⁴ a s atómom dusíka, na ktorý je X⁴viazaný a s atómom uhlíka, na ktorý je R⁴ viazaný, tvoria päťčlenný až sedemčlenný kruh, väzbu alebo skupinu vzorca (CHáa (CHz)b kde znamená a a b od seba nezávisle 0, 1, 2 alebo 3,

X⁵ a X^5a od seba nezávisle skupinu zo súboru zahŕňajúceho atóm vodíka, skupinu trifluórmetylovú, A¹ a prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu

153

X⁵ a X^5a má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, OX?, S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX², cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, -N(X²)(X²) a -C(O)N(X²)(X²), alebo atóm uhlíka nesúci skupinu X⁵ a X^5a vytvára jeden alebo dva alkylénové mostíky s atómom dusíka nesúcom skupiny symbolu R⁷a R⁸, pričom každý alkylénový mostík obsahuje 1 až 5 atómov uhlíka, za podmienky, že v prípade, že jeden alkylénový mostík je tvorený X⁵ alebo X^5a, avšak obidva nemôžu byt na atómu uhlíka a R⁷ alebo R⁸ nie však f

obidve tieto skupiny sú na atómu dusíka a za ďalšej podmienky, že v prípade existencie dvoch alkylénových mostíkov, nemôžu byt X⁵ a X^5a na atómu uhlíka a R⁷a R⁸ nemôžu byt na atómu dusíka, alebo X$ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú čiastočne alebo plne nasýtený trojčlenný až sedemčlenný kruh alebo čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden alebo dva heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

Z¹ väzbu, atóm kyslíka alebo skupinu N-X² za podmienky, že v prípade, keď a a b znamenajú obidva nulu, potom Z¹neznamená skupinu N-X² alebo atóm kyslíka,

154

R⁷ a R⁸ od seba nezávisle atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R⁷ a R⁸ má substituent volený od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, -C(0)0-alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -S(O)_malky lovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až 5 atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri skupiny -0-C(O)alkylové s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až 3 alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka alebo

R⁷ a R⁸ spolu dohromady vytvárajú skupinu -(CH2)r-L-(CH2)r-, kde znamená L skupinu C(X²)(X²), S(O)m alebo N(X²),

A¹ vždy od seba nezávisle skupinu cykloalkenylovú s 5 až

7 atómami uhlíka, fenylovú alebo čiastočne nasýtený, plne nasýtený alebo plne nenasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh prípadne s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, a bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným alebo plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným alebo s plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, pričom A¹ je vždy od seba nezávisle prípadne substituovaný na jednom alebo na obidvoch kruhoch v prípade, že A¹ znamená bicyklický systém, s až tromi substituentmi volenými od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho atóm fluóru, chlóru, brómu a jódu, skupinu OCF₃,

155 ocf₂h, cf₃, ch₃, och₃, -OX⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -C(O)OX⁶, karbonylový kyslík, skupinu aikylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, nitroskupinu, kyanoskupinu, skupinu benzylovú, -S(0)malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, lH-tetrazol-5ylovú, fenylovú, fenoxyskupinu, fenylalkyloxyskupinu, skupinu halogénfenylovú, metyléndioxyskupinu, skupinu -N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)C(O)(X⁶), -so2n(x⁶)(x⁶), -n(x⁶)so2fenylovú, -N(X⁶)SO2X⁶, -CONX^i;lX¹², -SO2NX^1:lX¹², -nx⁶so2x¹², -nx⁶conx¹¹x¹², -nx⁶so2nx¹¹x¹², -nx⁶c(o)x¹², imidazolylovú, tiazolylovú a tetrazolylovú za podmienky., že pokial A¹ je prípadne substituovaný metyléndioxyskupinou, môže byt substituovaný iba jednou metyléndioxyskupinou, pričom znamená X¹¹ atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu aikylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R¹¹ má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu fenylovú, fenoxyskupinu, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, skupinu S(0)malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až pät atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri alkanoyloxyskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až tri alkoxyskupiny s l až 6 atómami uhlíka,

X¹² atóm vodíka, skupinu aikylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylovú, tiazolylovú, imidazolylovú, furylovú alebo tienylovú za podmienky, že v prípade, keď X¹² neznamená atóm vodíka, je skupina X¹² prípadne substituovaná jedným až tromi substituentmi od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm chlóru, fluóru, skupinu CH₃, OCH₃, OCF₃ a CF₃ alebo

X¹¹ a X¹² spolu dohromady vytvárajú skupinu

-(αΗ₂)_Γ-ΐΑ-(0Η₂)_Γ-, kde znamená L¹ skupinu C(X²)(X²), O, SCo)^ alebo N(X²),

156 r vždy od seba nezávisle 1, 2 alebo 3,

X² od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami o

uhlíka vo význame symbolu X má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jeden až päť atómov halogénu a jednu až tri skupiny OX³,

X³ vždy od seba nezávisle atóm vodíka alebo skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka,

X⁶ od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu halogénalkylovú s 2 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, halogéncykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁶ má jeden alebo dva substituenty volené od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu alkylovú s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovú, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinu karboxylovú, -CONH₂, -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylátalkylesterovú s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele a 1Htetrazol-5-ylovú, alebo v prípade dvoch skupín symbolu X⁶ na jednom atómu a obidva X⁶ znamenajú od seba nezávisle skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, sú prípadne obidve alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka spojené a spolu s atómom, na ktorý sú obidve skupiny X⁶ viazané, vytvárajú štyrčlenný až deväť157 členný kruh obsahujúci prípadne atóm kyslíka, síry alebo skupinu NX⁷,

X⁷ atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou a m vždy od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, za podmienky, že X⁶ a X^{9 * * 12} nemôžu znamenať atóm vodíka, keď sú viazané na C(0) alebo SO2 vo forme skupiny C(O)X⁶, C(O)X¹², SO2X⁶ alebo SO₂X¹² a keď R⁶ znamená väzbu, potom L znamená N (X²) a každé r v skupine symbolu (CH₂)_r-L-(CH₂)_r znamená od seba nezávisle 2 alebo 3, alebo .jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatených, diastereomérne čistých, enantiomérmi obohatených alebo enantiomerne čistých izomérov alebo ich farmaceutický prijateľnej soli a prodrogy.
9. Farmaceutický prostriedok na ošetrovanie odolnosti cicavcov proti inzulínu, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a účinné množstvo ot-2 adrenergického agonistu a účinné množstvo sekretagogu rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I (I) kde znamená

0 alebo 1 od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, pričom však n a w nemôžu súčasne znamenať nulu,

158

Y atóm kyslíka alebo síry,

R¹ atóm vodíka, -CN, -(CH2)qN(X^E)C(O)X⁶, -(C H 2)_q N (X⁵) C (0)(0^),^¹.

-(CH₂)_qN(X⁵)SO2(CH2),-A¹, -(CH2)qNp<⁶)SO2X⁶, -(ΟΗ^ΝίΧ^Ο^ΧθχϋΗ^-Α¹, (CH2)_qN(X⁶)C(O)N(X⁶)(X⁶), -(CHáqCCOJNCX^íX⁶), -(CH2),C(O)N(X^(CH2)rA¹, ’ -(CH2)_qC(O)OX⁶, -(CH2)qC(O)O(CH2)rA¹, -(CH2)qOX⁶, -(CH2)qOC(O)X⁶, -(CH2)qOC(O)(CH₂)_t-A¹, -(0^),00(0)^(0¾)^¹. -(0^),00(0)^⁵)^⁶). -(CH2)qC(O)X⁶, -(CH2)qC(O)(CH₂),-A¹. -(CH^qNCX^CíOJOX⁶.

•(CH₂),N(X⁶)SO2N(X⁶)(X⁵)I -(CHáqSíOjX -(0^),8(0)40¾)^¹. (CrC10)alkyl, -(CH2),-A¹. -(CH2),-(C3-C₇)cykloalkyl, -(CH^-Y’-ÍCrC^alkyl, -(CH₂)q-Y¹-(CH2)rA¹ , -(CH2)q-Y¹-(CH₂)r(C3-C₇)cyk:loaIkyl;

pričom alkylové a cykloalkylové podiely skupiny R¹sú prípadne substituované skupinou alkylovou s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, -CONH₂, -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetrazol-5-ylovou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru,

Y¹ znamená atóm kyslíka, skupinu -S(0)_m-, -C(O)NX⁶-, —CH=CH-, -CsC-, -N(X⁶)C(0)-, -C(O)NX⁶-, -C(0)0-, -OC(O)N(X⁶)- alebo -0C(0)-, q 0, 1, 2, 3 alebo 4, t 0, 1, 2 alebo 3, pričom (CH₂)_q a (CH₂)_t podiely sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinou karboxylovou, skupinou -CONH₂,

159

-S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C0₂alkylesterovou s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele, lH-tetra zol-5-ylovou, jedným, dvoma alebo tromi atómami fluóru a jednou alebo dvoma alkylovými skupinami s 1 až 4 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 8 atómami uhlíka, alkylcykloalkylovú s O až 3 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 3 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkylA¹ s 1 až 4 atómami uhlíka v alky- > lovom podiele, alebo skupinu A¹, pričom alkylové a cykloalkylové podiely vo význame symbolu R² sú prípadne substituované skupinou hydroxylovou, skupinou -C(O)OX⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)(X⁶), -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -CfOjA¹, -C(0)(X⁶), trifluórmetylovou, kyanoskupinou alebo jedným, dvoma alebo tromi atómami halogénu,

R³ skupinu A¹, alkylovú s 1 až 10 atómami uhlíka, skupinu alkylA¹ s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele, skupinu alkylcykloalkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovom podiele a s 7 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele, skupinu alkyl-X¹-alkyl-A¹ s 1 až 5 atómami uhlíka v prvom alkylovom podiele a s O až 5 atómami uhlíka v druhom alkylovom podiele alebo skupinu alkyl-X¹-alkylcykloalkylovú s 1 až 5 atómami uhlíka v každom alkylovom podiele a s 3 až 7 atómami uhlíka v cykloalkylovom podiele, pričom alkylové podiely v skupinách symbolu R³ sú prípadne substituované skupinou -S(0)_malkylovou s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jedným, dvoma, tromi, štyrmi alebo piatimi atómami halogénu alebo jednou, dvoma alebo tromi skupinami OX³,

160

X¹ znamená -Ο-, -S(O)_m-, -N(X²)C(O)-, -C(O)N(X²), -oc(o)-, -c(o)o-, -cx²=cx²-, -N(X²)C(O)O-, -OC(O)N(X²) alebo -C=CR⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, alebo R⁴spolu s R³ a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú skupinu cykloalkylovú s 5 až 7 atómami uhlíku, cykloalkenylovú s 5 až 7 atómami uhlíka, čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom kondenzovaným na čiastočne nasýtený, plne nenasýtený alebo plne nasýtený päťčlenný alebo šesťčlenný kruh, obsahujúci prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

X⁴ atóm vodíka, skupinu alkylovú s l až 6 atómami uhlíka alebo X⁴ spolu s R⁴ a s atómom dusíka, na ktorý je X⁴viazaný a s atómom uhlíka, na ktorý je R⁴ viazaný, tvoria päťčlenný až sedemčlenný kruh,

R⁶ väzbu alebo skupinu vzorca (CHáa (CH^b kde znamená a a b od seba nezávisle 0, 1, 2 alebo 3,

X⁵ a X^5a od seba nezávisle skupinu zo súboru zahŕňajúceho atóm vodíka, skupinu trifluórmetylovú, A¹ a

161 prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu a X^5a má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, OX², S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, —C(O)OX², cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka -N(X²)(X²) a -C(O)N(X²)(X²), alebo atóm uhlíka nesúci skupinu X⁵ a X^5a vytvára jeden alebo dva alkylénové mostíky s atómom dusíka nesúcim skupiny symbolu R⁷a R⁸, pričom každý alkylénový mostík obsahuje 1 až 5 atómov uhlíka, za podmienky, že v prípade, že jeden alkylénový mostík je tvorený X⁵ alebo X^5a, avšak obidva nemôžu byt na atómu uhlíka a R⁷ alebo R⁸ nie však obidve tieto skupiny sú na atómu dusíka a za ďalšej podmienky, že v prípade existencie dvoch alkylénových mostíkov, nemôžu byt X⁵ a X^5a na atómu uhlíka a R⁷a R⁸ nemôžu byt na atómu dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú čiastočne alebo plne nasýtený trojčlenný až sedemčlenný kruh alebo čiastočne alebo plne nasýtený štyrčlenný až osemčlenný kruh s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, alebo X⁵ dohromady s X^5a a s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, vytvárajú bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden alebo dva heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

162

Z¹ väzbu, atóm kyslíka alebo skupinu N-X² za podmienky, že v prípade, ked a a b znamenajú obidva nulu, potom z¹ neznamená skupinu N-X² alebo atóm kyslíka,

R⁷ a R⁸ od seba nezávisle atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R⁷ a R⁸ má substituent volený od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu A¹, -C(0)0-alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -S(O)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až 5 atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri skupiny -0-C(0)alkylové s l až 10 atómami uhlíka a jednu až 3 alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka alebo

R⁷ a R⁸ spolu dohromady vytvárajú skupinu -(CH2)r-L-(CH2)r-, kde znamená L skupinu C(X²)(X²), S(O)m alebo N(X²),

A¹ vždy od seba nezávisle skupinu cykloalkenylovú s 5 až

7 atómami uhlíka, fenylovú alebo čiastočne nasýtený, plne nasýtený alebo plne nenasýtený štyrčlenný až osem členný kruh prípadne s jedným až štyrmi heteroatómami od seba nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, a bicyklický systém tvorený čiastočne alebo plne nasýteným alebo plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka, kondenzovaný s čiastočne alebo s plne nasýteným alebo s plne nenasýteným päťčlenným alebo šesťčlenným kruhom obsahujúcim prípadne jeden až štyri heteroatómy od seba nezávisle volené zo súboru zahŕňajúceho atóm kyslíka, síry a dusíka,

163 pričom A¹ je vždy od seba nezávisle prípadne substituovaný na jednom alebo na obidvoch kruhoch v prípade, že A¹ znamená bicyklický systém, s až tromi substituentmi volenými od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho atóm fluóru, chlóru, brómu a jódu, skupinu ocf3, ocf2h, cf3, ch3, och3, -OX⁶, -C(O)N(X⁶)(X⁶), -C(O)OX⁶, karbonylový kyslík, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, nitroskupinu, kyanoskupinu, skupinu benzylovú, -S(0)malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, lH-tetrazol-5-ylovou, fenylovú, fenoxyskupinu, fenylalkyloxyskupinu, skupinu halogénfenylovú, metyléndioxyskupinu, skupinu -N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)C(O)(X⁶), -SO2N(X⁶)(X⁶), -N(X⁶)S02-fenylovú, -N(X⁶)SO2X⁶, -conx^i:lx¹², -so2nx^i:lx¹², -nx⁶so2x¹², -nx⁶conx^1:1-x¹², -NX⁶SO2NX^1:lX¹², -NX⁶C(O)X¹², imidazolylovú, tiazolylovú a tetrazolylovú za podmienky, že pokial A¹ je prípadne substituovaný metyléndioxyskupinou, môže byt substituovaný iba jednou metyléndioxyskupinou, pričom znamená X¹¹ atóm vodíka alebo prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka vo význame symbolu R¹¹ má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu fenylovú, fenoxyskupinu, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxypodiele, skupinu S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, jeden až pät atómov halogénu, jednu až tri hydroxylové skupiny, jednu až tri alkanoyloxyskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka a jednu až tri alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka,

X¹² atóm vodíka, skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylovú, tiazolylovú, imidazolylovú, furylovú alebo tienylovú za podmienky, že v prípade, ked X¹² neznamená atóm vodíka, je skupina X¹² prípadne substituovaná jedným až tromi substituentmi od seba

164 nezávisle volenými zo súboru zahŕňajúceho atóm chlóru, fluóru, skupinu CH₃, OCH₃, OCF₃ a CF₃ alebo

X¹¹ a X¹² spolu dohromady vytvárajú skupinu

-(CH₂)_r-lA-(CH₂)_r-, kde znamená L¹ skupinu C(X²)(X²), O, S(O)_m alebo N(X²), r vždy od seba nezávisle 1, 2 alebo 3,

X² od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X² má substituent volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, -C(O)OX³, jeden až pat atómov halogénu *> *1 „ a jednu az tri skupiny OX , X vždy od seba nezávisle atóm vodíka alebo skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka,

X® od seba nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovanú skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinu halogénalkylovú s 2 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinu cykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, halogéncykloalkylovú s 3 až 7 atómami uhlíka, pričom prípadne substituovaná skupina alkylová s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadne substituovaná skupina cykloalkylová s 3 až 7 atómami uhlíka vo význame symbolu X⁶ má jeden alebo dva substituenty volené od seba nezávisle zo súboru zahŕňajúceho skupinu alkylovú s 1 až 4 atómami uhlíka, hydroxylovú, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, skupinu karboxylovú, -CONH₂, -S(0)_malkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, karboxylátal165 kylesterovú s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovom podiele a lH-tetrazol-5-ylovú, alebo v prípade dvoch skupín symbolu X⁶ na jednom atómu a obidva X⁶ znamenajú od seba nezávisle skupinu alkylovú s 1 až 6 atómami uhlíka, sú prípadne obidve alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka spojené a spolu s atómom, na ktorý sú obidve skupiny X⁶ viazané, vytvárajú štyrčlenný až deväťčlenný kruh obsahujúci prípadne atóm kyslíka, síry alebo skupinu NX',

X⁷ atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou a m vždy od seba nezávisle 0, 1 alebo 2, za podmienky, že X⁶ a X^{11 12} nemôžu znamenať atóm vodíka, keď sú viazané na C(0) alebo S02 vo forme skupiny C(O)X⁶, C(O)X¹², so2x⁶ alebo SO₂X¹² a keď R⁶ znamená väzbu, potom L znamená N(X²) a každé r v skupine symbolu (CH₂)_r-L-(CH₂)_r znamená od seba nezávisle 2 alebo 3, alebo jej stereoizomérnej zmesi, diastereomérmi obohatených, diastereomérne čistých, enantiomérmi obohatených alebo enantiomérne.čistých izomérov alebo jej farmaceutický prijateľnej soli a prodrogy.
10. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie stavov spojených s odolnosťou proti inzulínu, ako je typ I dlabetes, typ II diabetes, hyperglykémia, zhoršená znášanlivosť glukózy alebo syndróm alebo stav inzulínovej rezistencie.
11. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I na výrobu farmaceutického prostriedku na ošetrovanie stavov spojených s odolnosťou proti inzulínu, ako je obezita a staroba.

166
12. Sekretagog rastového hormónu podľa nároku 1 všeobecného vzorca I spolu s peptidom uvoľňujúcim rastový hormón alebo mimetiky peptidu uvoľňujúceho rastový hormón na výrobu farmaceutického prostriedku na oSetrovanle inzulínovej rezistencie cicavcov.