SK10622002A3

SK10622002A3 - Étery dikarboxylátu vápenatého, metódy ich výroby a ich využitie na liečbu vaskulárnych chorôb a diabetu

Info

Publication number: SK10622002A3
Application number: SK1062-2002A
Authority: SK
Inventors: Howard Yoshihisa Ando; Donald Eugene Butler; Gary Jay Dozeman
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 2000-01-25
Filing date: 2001-01-11
Publication date: 2003-07-01
Also published as: EP1259474B1; JP2003520835A; PE20011064A1; UY26550A1; AP2002002587A0; WO2001055078A1; BG106851A; ATE431326T1; HUP0204422A2; BR0107763A; DK1259474T3; DZ3239A1; NZ519550A; IL150541A0; ZA200205880B; CN1395555A; HN2001000011A; NO20023526L; NO20023526D0; CA2397960C

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny (1:1), solvátov vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny (1:1), metód výroby vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny (1:1) v kryštalickej forme a liečby pomocou týchto látok. Predovšetkým vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny (1:1) a jej solváty uvádzané v predkladanom vynáleze sú vhodné na zníženie plazmových lipidov živočíchov, vrátane Lp(a), triglyceridov, VLDL-cholesterolu a LDL-cholesterolu, a rovnako tak sú vhodné na zvýšenie HDL cholesterolu. Tieto látky sú tiež vhodné na liečbu cukrovky.

Doterajší stav techniky

Vaskulárne choroby akými sú koronárne ochorenia srdca, restenózy a periférne vaskulárné choroby sú častou príčinou smrti a invalidity na celom svete. Ročne zomrie asi 1,5 miliónu ľudí v Spojených štátoch na infarkt myokardu spôsobený srdečným zlyhaním. Aj keď stravovacie návyky a životný štýl môžu urýchliť nástup vaskulárnych chorôb, oveľa významnejším faktorom tohto smrteľného ochorenia sú genetické dispozície vedúce k dyslipidémii. „Dyslipidémia predstavuje abnormálnu hladinu lipoproteínov v krvnej plazme.

S rizikom vaskulárnych chorôb sa spájajú aj niektoré ďalšie rizikové faktory. Medzi ne patrí dyslipidemická vysoká hladina lipoproteínov s nízkou hustotou (LDL) a naopak nízka hladina lipoproteínov s vysokou hustotou (HDL). Pomer HDLcholesterolu k LDL-cholesterolu sa často berie za ukazovateľ rizika vaskulárnych chorôb, pričom žiadúci je vysoký pomer HDL/LDL. Preto sú účelné látky, ktoré zvyšujú tento pomer buď znižovaním LDL alebo zvyšovaním HDL, prípadne obojím.

Štúdie tiež preukázali, že zvýšené hladiny modifikovanej formy LDL označovanej ako lipoproteín (a) ,,Lp(a) sú škodlivé. Zvýšené hladiny Lp(a) súvisia s rozvojom aterosklerózy, cievnych srdečných ochorení, infarktu myokardu, mŕtvice, mozgovej mŕtvice a restenózy, ktoré vyžadujú následnú angioplastiku. V skutočnosti sa ukázalo, že objavené Lp(a) sú výborným predpovedateľom mŕtvice. V súlade s tým vysoké koncentrácie cholesterolu vo forme Lp(a) sú jedným z hlavných ukazovateľov vedúcich k úmrtiu v dôsledku srdečnej choroby. Preto sú užitočné zlúčeniny znižujúce hladinu Lp(a).

US patent č. 5 648 387 opisuje 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovú kyselinu a jej účinky na zníženie koncentrácie Lp(a) v plazme a zvýšenie HDL. Tiež sa opisuje tvorba farmaceutický vhodných solí z karboxylovej kyseliny, napríklad reakciou so zásadou zahŕňajúcou hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydroxid vápenatý, uhličitan sodný, trietylamín, pyridín a amoniak. Vzhľadom na to, že karboxylová kyselina je nie dobre taviteľná a amorfná a jej prípadné soli sú hygroskopické, pri sušení a kryštalizácii velkého množstva takejto hmoty zostáva väčšina nehomogénna. Preto je nutná taká soľ karboxyalkyléteru, ktorá účinne zvyšuje HDL, znižuje plazmový Lp(a), je kryštalická a teda vyrobiteľná na komerčnej báze, a ktorá je prístupná farmaceutickému spracovaniu na liečbu vaskulárnych chorob. Predkladaný vynález opisuje sol', ktorá uspokojí tieto potreby.

Podstata vynálezu >

Zhrnutie

Vynález prináša nové chemické zlúčeniny, ktorými sú étery dykarboxylátu vápenatého. Vynález sa zvlášť zaoberá zlúčeninami, ktoré sú solvátovanými alebo nesolvatovanými formami vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny. Vápenantá sol' podl'a tohto vynálezu je tiež známa ako „CI-1027. Zlúčeniny tohto vynálezu majú vzorec II.

Ca⁺⁺

CH₃ ch₃ z,C—C—(CH₂)₄ O—(CH₂)₄ C—_>xRi0H (ir ⁰ CH₃ ch₃ kde:

Ri je H alebo nižší alkyl, ako metyl, etyl, 1-propyl, 2-propyl a 1-butyl, a x je číslo od 0 do 10. Preferované sú zlúčeniny, kde Ri je H.

Preferovanou zlúčeninou je kryštalická forma 1 CI-1027, kde Rx je H a x zodpovedá obsahu vody asi od 3 do 6 %, ktorej RTG difrakcia je na obrázku 1.

Inou preferovanou zlúčeninou je kryštalická forma 2 CI1027 kde Ri je H a x zodpovedá obsahu vody asi od 3 do 6 %, ktorej RTG difrakcia je na obrázku 15.

Tiež sa preferujú nesolvátované formy soli, to je kde x je 0.

Ďalej sa uvádza metóda sušenia vápenatej soli od organických alkoholov. Spôsob kryštalizácie vápenatej soli je ďalším bodom.

Predkladá sa metóda syntézy vápenatých solí dikarboxylát éteru vzorca II. Metóda zahŕňa pôsobenie éteru dialkánovej kyseliny na oxid vápenatý v organickom alkoholovom rozpúšťadle. Po dobe dostačujúcej na prebehnutie reakcie sa pevný produkt oddelil a sušil za vzniku vápenatej soli dikarboxylatéteru so stechiometrickým pomerom vápnika k dikarboxylatéteru 1:1, ktorý sa solvátoval s alkoholom RiOH. Alkoholový soivát sa odstránil sušením pri zvlhčovaní sušiacej komory vo vákuu. Vápenatá soľ dikarboxylatéteru so stechiometrickým pomerom vápnika k dikarboxylatéteru 1:1 kryštalizuje ako mohohydrát parnou kryštalizáciou, konkrétne zahrievaním v systéme voda/vodná para pri teplote medzi 50 a 150 °C pod tlakom a za stáleho miešania, po ktorom nasleduje vákuové sušenie. Druhá kryštalická forma sa získa zahrievaním prvej formy vo vode počas dlhšej doby alebo tiež reakciou voľnej kyseliny vzorca I priamo s hydroxidom vápenatým a vodou za zvýšenej teploty okolo 80 °C a oddelením pevnej fázy bežnou filtráciou.

I

Zlúčeniny opisované v tomto vynáleze sú využiteľné ako aktívne zložky v kombinácii s farmaceutický vhodnými rozpúšťadlami, nosičmi a masťovými základmi na liečbu vaskulárnych ochorení. Opisuje sa tiež použitie vápenatej soli dikarboxylatéteru, prípadne jej hydrátu alebo solvátu na výrobu kompozitov na liečbu dyslipidémií, kde patria aj vaskulárne choroby. Tiež sa uvádza použitie vápenatej soli dikarboxylatéteru, hydrátu alebo alkoholového solvátu na prípravu kompozitov na liečbu cukrovky.

Podrobný opis vynálezu

Zlúčeniny uvádzané v predkladanom vynáleze sa pripravujú z prekurzoru, éteru dykarboxylovej kyseliny. Syntéza prekurzoru, éteru dykarboxylovej kyseliny sa opisuje v US patente č. 5 64 8 3 87, ktorý sa cituje v odkazoch tohto vynálezu. Prekurzor, éter dikarboxylovej kyseliny má vzorec I:

H<K l”’ ;c-c—(ch₂)₄—o-(ch₂)₄ch₃, ch₃

I /OH

-c-cť

I o ch₃ (I)

Dikyselina vzorca I sa označuje 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina, „72953.

Je tiež známa ako

Vápenaté soli vzorca II, ktorými sa zaoberá predkladaný vynález, sa pripravujú reakciou prekurzorného éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (I) 72953 s vápenatou zlúčeninou, ako je oxid vápenatý alebo hydroxid vápenatý. Preferuje sa oxid vápenatý. Oxid vápenatý môže obsahovať malé percento vody. (do 5 %) . Reakcia najlepšie prebieha v rozpúšťadle, ktoré rozpúšťa éter dialkylkarboxylovej kyseliny (I) a je aspoň minimálne reaktívne vzhľadom k vápenatej báze. Preferuje sa, keď sa báza, akou je napríklad oxid vápenatý, v príslušnom rozpúšťadle tiež čiastočne rozpúšťa. V tomto vynáleze sa alkanoly, konkrétne obsahujúce metylalkohol, etylalkohol, 1používajú ako rozpúšťadlá alkoholy C1-C12, napríklad propylalkohol,

2-propylalkohol, butanoly, pentanoly, cyklopentanoly, hexanoly, cyklohexanoly a iné. Vhodnými rozpúšťadlami sú predovšetkým čisté alkoholy Ci-C₆, pričom najlepšie sú alkoholy Ci-C₄.

Reakcia éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (I) s oxidom vápenatým beží jednoducho pri normálnom alebo zvýšenom tlaku a všeobecne sa preferuje teplota vyššia ako 25°C. Ukázalo sa ale, že je účinné zahriať reakčnú zmes až k azeotropnému bodu rozpúšťadla alebo dokonca vyššie a za zvýšeného tlaku. Rovnomerný priebeh reakcie sa zaistí miešaním reakčnej zmesi. Aby sa zaistila maximálna konverzia éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (I) na vápenatú soľ, mal by sa molárny pomer oxidu vápenatého k éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (I) pohybovať medzi 0,95 a 1,05. Po dobe dostatočnaj na prebehnutie reakcie medzi éterom dialkylkarboxylovej kyseliny (I) a oxidom vápenatým sa objaví pevný produkt. Typická doba potrebná na kompletný priebeh reakcie v refluxnom rozpúšťadle je od 4 do 96 hodín. Zlúčenina pripravená na základe výsledkov predkladaného vynálezu má nasledujúci vzorec:

Ca^TT θ CH₃ ch₃ >-C-(CH₂)₄—O-(CH₂)₄—C-C^ ,xR|OH (Π) ⁰ CH₃ CH₃ kde Ri je H alebo nižší alkyl zahŕňajúci metyl, etyl, 1propyl, 2-propyl, 1-butyl, a x je číslo od 0 asi do 10. Najlepšie je, keď Ri je H (to je hydráty). Bežne sa obsah vody v preferovaných formách soli pohybuje v rozmedzí od 3 do 6 % (to je x = 0,03-0,06) .

Ľubovoľne sa po reakcii éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (I) s vápenatou soľou reakčná zmes zriedi prídavkom druhého rozpúšťadla. Druhé rozpúšťadlo (tiež sa označuje ako podporné) je predovšetkým dobre miešateľné s reakčným rozpúšťadlom, takže všetka vápenatá soľ rozpustená v reakčnom rozpúšťadle má tendenciu vyzrážať sa z reakčnej zmesi, zatiaľ čo všetka nezreagovaná organická hmota zostáva v roztoku. Ukázalo sa, že ochladením systému pôvodného rozpúšťadla alebo zmesného rozpúšťadla obsahujúceho vápenatú sol éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II) sa ďalej vyvoláva zrážanie.

I

Typ pridávaného rozpúšťadla je čiastočne určovaný typom reakčného rozpúšťadla. Napríklad v prípade alkoholov je typickým podporným (alebo druhým) rozpúšťadlom metyl tercbutyléter. Medzi ďalšie podporné rozpúšťadlá patrí dietyléter, tetrahydrofurán a zmesné alkány C₅-Ci₂. Môže sa ale použiť akékoľvek podporné rozpúšťadlo, v ktorom je vápenatá sol éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II) v podstate nerozpustná a ktoré sa dá za normálnych podmienok jednoducho odstrániť sušením. Po izolácii vápenatej soli CI-1027 napríklad filtráciou alebo odstredením pevného produktu sa sol (II) ľubovoľne premýva čerstvým podporným rozpúšťadlom a znovu sa suší, čím sa odstráni väčšina zostávajúcej vody a rozpúšťadiel. Sušenie sa zjednoduší zahriatím soli (II) na teplotu vyššiu ako laboratórna a nižšiu ako rozkladná teplota soli (II) . Sušenie sa môže uskutočňovať horúcim vzduchom, ohriatým inertným plynom alebo vo vákuu. Uprednostňuje sa ohriatie soli, CI-1027 (II) na teplotu medzi 60 a 100 °C. Produkt sa v podstate vysuší odparením rozpúšťadiel. Lepšie je zahriať sol vo vákuu, čím sa ešte zjednoduší odstránenie prchavých rozpúšťadiel.

Prekvapivo sa ukázalo, že zahrievaním a miešaním amorfnej formy vápenatej soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II) za prítomnosti vody sa nielen odstránia prchavé rozpúšťadlá, ale príslušná sol sa stáva vysoko kryštalickou.

Zvlhčovanie vápenatej soli (II) vo vákuovej miskovej sušičke ďalej zjednodušuje odstránenie všetkých prchavých rozpúšťadiel a vznik kryštalickej formy vápenatej, soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II). Zvlhčenie sa môže uskutočniť pred alebo po úplnom vysušení vápenatej soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II). Preferuje sa, keď sa soľ podrobí zvlhčeniu pred úplným vysušením, aby sa zjednodušilo odstránenie prchavých rozpúšťadiel pod požadovaný limit (to je pod 5 %) a aby sa podporila kryštalizácia.

Takže následné parciálne sušenie soli vo vyhrievanej vákuovej komore s vodou a vodnou parou sa zaraďuje k čiastočnému sušeniu vápenatej soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II). Obidva sušiace procesy sa s výhodou uskutočňujú s miešaním. Po zvlhčení sa znovu aplikuje vákuum, dokiaľ soľ (II) nedosiahne stabilnú hmotnosť. Vápenatá soľ éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II) získaná následným zvlhčením je vysoko kryštalická a má hustotu medzi 0,3 g/ml a 0,52 ,g/l, priemerne teda 0,4 g/ml. Na rozdiel od toho, amorfná forma vápenatej soli CI-1027 (II) má hustotu asi 1,2 g/ml až 0,4 g/ml, priemerne asi 0,3 g/ml.

Predkladaný vynález sa predovšetkým zaoberá dvoma odlišnými polymorfami, konkrétne CI-1027, kryštalickej formy 1 a CI-1027, kryštalickej formy 2. Zahrievaním vodnej suspenzie vápenatej soli kryštalickej formy 1 na asi 60 až 90 °C počas dostatočne dlhú dobu 6 až 48 hodín prechádza kryštalická forma 1 na druhú kryštalickú formu označovanú ako kryštalická forma 2. Keď je treba, kryštalickú formu 2 je možné pripraviť priamo reakciou éteru dikarboxylovej kyseliny (I) s vodným roztokom hydroxidu vápenatého. Tieto formy sú rozlíšiteľné na základe RTG práškovej difrakčnej analýzy, ako ukazujú obrázky 1 a 15.

Kryštalické formy 1 a 2 sú najvhodnejšie, pretože majú poznateľné nižšiu schopnosť, uchovávať elektrostatický náboj ako soli vzorca II vysúšané bez predchádzajúceho zvlhčenia. Lepšie kryštalické vlastnosti vápenatej soli éteru dikarboxylovej kyseliny (formy 1 aj 2) po zvlhčovačom procese a finálnom sušení ukazuje RTG difrakčná analýza. Na obrázkoch sa ukazujú difraktogramy RTG práškovej analýzy solvátovaných solí (II), ktoré znázorňujú tvorbu solvatovanej pevnej fázy z metylalkoholu, etylalkoholu, 1-propylalkoholu, 2propylalkoholu a 1-butanolu. Ďalšia analýza vápenatej soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II) po zvlhčení a vysušení ukazuje na tvorbu soli, ktorá sa viaže s 0,1 až 1 mólom vody

I na 1 mól vápenatej soli éteru dialkylkarboxylovej kyseliny (II), ako ukazujú napríklad obrázky 1 a 15.

Je známe, že jediný kryštál a polymorfné formy zlúčenín sa charakterizujú jednou alebo viacero jednotkami 2Θ na RTG difraktograme. Jedna hodnota 2Θ zodpovedá jednotnej štruktúre, zatiaľ čo obrázky tohto vynálezu zaznamenávajú niekoľkonásobky 2Θ. Takéto jedinečné štruktúrne formy sa tiež určujú pomocou charakteristických rezonančných NMR píkov, napríklad v spektre ¹³C.

Zlúčeniny vzorca II tohto vynálezu sú účinnými farmaceutickými činidlami. Ukázalo sa, že zvyšujú HDL a znižujú triglyceridy, LDL a VLDL (pozri US patent č. 5 783

600). Znižujú tiež Lp(a) (US patent č. 5 750 569) a môžu sa využiť na liečbu cukrovky pri nezávislosti na inzulíne (US patent č. 5 756 544).

CI-1027 sa bežne používa v klinickej praxi na liečbu vaskulárnych chorôb. Kryštalické formy uvádzané v tomto vynáleze sú teda zvlášť dôležité, pretože sa jednoducho komerčne vyrobia a používajú sa ako život zachraňujúce lieky.

Ďalším bodom predkladaného vynálezu je metóda liečby vaskulárnych chorôb a cukrovky zahŕňajúca podávanie zlúčeniny II v účinnom množstve do živočíšneho organizmu. Typická dávka týchto zlúčenín je 50 až 5 000 mg/den, bežne 50 - 2 000 mg/deň. Najčastejšie sa dávkuje 50 - 900 mg/deň. Rovnaké dávkovanie sa používa na liečbu a prevenciu vaskulárnych chorôb aj na špecifické zníženie Lp(a) a zvýšenie HDLcholesterolu, a tiež na liečbu a prevenciu cukrovky. Ďalšou súčasťou predkladaného vynálezu sú farmaceutické látky obsahujúce zlúčeninu vzorca II spoločne s farmaceutický vhodnými masťovými základmi, nosičmi alebo rozpúšťadlami. Látky sa pripravujú na vyhovujúcu orálnu, parenterálnu alebo rektálnu aplikáciu, pričom sa preferuje orálne podávanie. Typické farmaceutické nosiče a masťové základy využiteľné v orálnom uskutočnení zahŕňajú laktózu, sacharózu, škroby, ako je kukuričný a zemiakový škrob, deriváty celulózy, ako metyl a etylcelulózu, želatíny, púder, oleje, ako napríklad rastlinné oleje, sezamový olej, bavlníkový olej a glykoly, ako je polyetylénglykol. Orálne preparáty sú obvykle vo forme tabliet, kapsulí, emulzií, roztokov a podobne. Tiež sa používajú preparáty na riadené dávkovanie využívajúce polymérny matrix alebo ozmotickú pumpu, prípadne niečo podobné. Typické preparáty obsahujú asi 5 až 95 % hmotnostných zlúčeniny vzorca II podávanej v masti alebo nosiči. Pridávajú sa tiež ochuťovacie látky, ako napríklad pomarančové alebo cherry esencie.

Na parenterálnu aplikáciu sa preparáty vytvárajú ľubovoľne s roztokmi, ako je izotonický fyziologický roztok, 5% vodný roztok glukózy a iné vhodné na intramuskulárne a intravenózne podávanie. Preparáty sa tiež môžu pripravovať s voskami a gélmi vo forme čapíkov. Na lokálnu aplikáciu sa môžu pripraviť napríklad maste a kožné náplaste s využitím konvenčných metód.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Ďalšie prednosti predkladaného vynálezu sú názornejšie z podrobnejšieho opisu vynálezu obrázkami. Na obrázkoch výraz v angstrômoch.

,P%’ znamena v spojení s priloženými „d(A) znamená d-rozmer percentuálne zastúpenie jednotlivých píkov vzhľadom na najintenzívnejší pík, ktorý predstavuje 100 %. „Plocha znamená veľkosť plochy pod krivkou piku. „FVHM znamená šírku piku v strede maximálnej výšky piku.

Obr. 1 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy hydrátu vápenatej soli dikarboxylatéteru CI-1027, kryštalickej formy 1.

Obr. IA zhŕňa čí siene údaje pre piky na obr. 1 (každý z obrázkov označený A uvádza číselné hodnoty pre príslušné RTG difraktogramy, takže 2A, 3A, atd'.) .

Obr. 2 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy etylalkoholového solvátu vápenatej soli dikarboxylatéteru CI-1027.

Obr. 3 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy CI-1027, kryštalickej formy 1 (3,25 % vody) po zvlhčení a sušení etylakoholového solvátu vápenatej soli dikarboxylatéteru.

Obr. 4 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy metylalkoholového solvátu CI-1027.

Obr. 5 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy hydrátu CI-1027, kryštalickej formy 1 po zvlhčení a sušení metylakoholového solvátu vápenatej soli dikarboxylatéteru.

Obr. 6 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnéj analýzy 1-propylalkoholového solvátu CI-1027.

Obr. 7 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnéj analýzy CI-1027, kryštalickej formy 1 (3,98 % vody) po zvlhčení a sušení 1-propylalkoholového solvátu.

Obr. 8 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnéj analýzy 1-propylalkoholového solvátu CI-1027.

Obr. 9 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnéj analýzy hydrátu zlúčeniny vzorca II CI-1027, kryštalickej formy 1 po zvlhčení a sušení 2-propylalkoholového solvátu vápenatej soli dikarboxylatéteru.

Obr. 10 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy 1-butylalkoholového solvátu CI-1027.

Obr. 11 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy hydrátu CI-1027, kryštalickej formy 1 po zvlhčení a sušení 1-butylalkoholového solvátu.

Obr.¹ 12 je trojrozmerný graf porovnávajúci difraktogramy RTG práškovej analýzy kryštalických solvátov - (a) metylalkohol-, (b) etylalkohol-, (c)1-propylalkohol-, (d)

2-propylalkohol- a (e) 1-butylalkoholového solvátu, uvádzaných v predkladanom vynáleze.

Obr. 13 je trojrozmerný graf porovnávajúci difraktogramy RTG práškovej analýzy hydrátov CI-1027, kryštalickej formy 1 odvodených od solvátov (a) - (e) znázornených na obr. 12.

Obr. 14 znázorňuje prekrývanie sa difraktogramov RTG práškovej analýzy organického rozpúšťadla, voľné vápenaté soli 6(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny pripravenej z rôznych alkoholových solvátov.

Obr. 15 je dvojrozmerný difraktogram RTG práškovej difrakčnej analýzy hydrátu CI-1027 (kryštalická forma 2) po zahrievaní hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 1 a vodou, izoláciu a sušenie.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady podrobnejšie demonštrujú prednosti predkladaného vynálezu. Je zrejmé, že uvedené príklady plnia ilustratívnu úlohu a nie sú z hľadiska tohto vynálezu nijako limitujúce. Všetky odkazy na literatúru vrátane patentov sa citujú v predkladanom vynáleze.

PRÍKLAD 1

Príprava hydrátu vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny, kryštalická forma 1

HO,

CH₃ ch₃ ch₃

-(CH₂)₄-o- (CH₂)₄CH:

CaO™

2.MTBE

72953

CH₃

Ca ++ ch₃

--(CH₂)₄—0—(CH₂)₄ ch₃ ch₃

,xH₂0 + h₂o

Návod na poloprevádzkovú prípravu hydrátu CI-1027, kryštalickej formy 1 cez etanolový solvát

Náplň pre 750 1 sklenený destilátor:

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina (72953) - 54,4 kg (179,9 mol);

oxid vápenatý 98% - 10,2 kg (178,2 mol);

etylalkohol, čistý bezvodý - 392 kg (497 1);

Zmes sa mieša a zahrieva k azeotropickému bodu (76-80 °C)a reflux reakčnej zmesi prebieha 96 hodín. Potom sa zmes ochladí na 45 °C. Do reakčnej zmesi sa pridá:

metyl terc-butyléter (MTBE) - 128 kg, 163 1;

Reakčná zmes sa ochladí na 20 - 25 °C a mieša sa približne 1 hodinu. Pevný podiel sa filtruje na centrifúge za vzniku etanolového solvátu CI-1027 (vzorec II, Ri je CH₃CH₂-) . Pevný produkt sa premyje:

MTBE - 307 kg (391 1).

Filtračný koláč produktu sa vyberie z centrifúgy a vlhký produkt (etanolový solvát CI-1027) sa umiestni do 400 1 miskovej sušičky. Sušička sa utesní a spustí sa. vákuový systém. Teplota plášťa sa nastaví na 85 ’C. Po asi 1 hodine sa začne s miešaním pri 85 °C a plnom vákuu, miešanie produktu pri 85 °C a plnom vákuu prebieha 12 až 16 hodín. Teplota plášťa sa potom zvýši na 100 °C a zavrie sa ventil vákua.

Tryskou pre vákuum sa pridá:

Voda, HPCL - 6,4 kg

Voda vo forme pary zvlhčí systém. Uzavrený zvlhčený systém sa mieša 4 hodiny. Znovu sa aplikuje vákuum a produkt sa suší 18 až 24 hodín. Potom sa systém ochladí na 25 °C a vákuum sa odstráni dusíkom. Zo sušičky sa vyberie hydrát CI-1027, kryštalická forma 1 ako biela pevná látka. Suchý produkt sa melie na mlyne Fitzmill s veľkosťou sita IA (Fitzmill Comp., Elmhurst, Illinois). Obvyklý výťažok: 55,2 kg (nutné počítať so 4,04 % vody), 90,9% produkt.

Analytické výsledky:

CigHzaOsCa.HsO IČ (KBr): 1107,3; 1416,2; 1477,9; 1552 cm'¹

Identifikácia (^XH NMR) (CDC1₃) : δ 7,2; 3,4; 1,5; 1,2; Identifikácia (doba zdržania HPLC) vodnej symetrie stĺpec C18;

150 x 4,6 mm: 8,46 minút Obsah zložky (HPLC hm./hm. %) - 99,30 %

Obsah etylalkoholu (hm. % VPC)- 0,06 %

Obsah vody (TGA)- 3,45 %

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)- 12,91 %

Obsah sodíka - 0,08 %

RTG analýza hydrátu CI-1027, kryštalická forma 1 pozri obr. 1 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm 189,6: 186,2 : 71,4 : 43,4 : 30,1:

28,4 : 25,2* : 23,1 znamená rezonanciu jednoznačne zodpovedajúcu kryštalickej forme 1.

Údaje k poloprevádzkovému pokusu

Pri procese dalšieho zvyšovania produktu hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 1 sa objavili problémy pri sušení finálneho produktu. Etanolový solvát vápenatej soli sa tvorí v spätnom toku etylalkoholu, ako sa opisuje vyššie. Odstránenie etylalkoholu z izolovaného produktu hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 1 vo väčšom rozsahu prebieha veľmi obtiažne pri použití typických podmienok pre maximálne vysušenie (100 °C, plné vákuum) a vákuovej miskovej sušičky. Vyskúšali sa rôzne typy sušiček s miešadlom. Aj keď sa malé množstvá vysušili na prípustný obsah etylalkoholu, výsledky sa líšili a aplikované podmienky neviedli na ďalšie zvyšovanie produktu. Príklady sušenia sa uvádzajú v tabulke A. Rôzne podiely (všetky pripravené v podstate podľa vyššie uvedeného opisu) sa označujú ako „CD-číslo. .

Najlepšou metódou tvorby hydrátu je vystaviť solvát CI1027 vlhkosti. Zvýšená vlhkosť veľmi zvýši rýchlosť, odstránenia etylalkoholu a pomôže produkcii hydrátu. Tento postup sa najprv s istým úspechom aplikoval na miskové sušičky. Ďalšie -využitie v miskových sušičkách s miešadlami malo za následok jednoduché odstránenie etylalkoholu v krátkom čase. Tento sušiaci proces so zvlhčením dáva stabilný kryštalický produkt v krátkych časových cykloch, a preto predstavuje možnosť širšieho priemyselného využitia.

Pôvodná sušiaca metóda, bez zvlhčenia dáva amorfný produkt hydrátu CI-1027, ako ukazuje RTG difrakčná analýza (napríklad podiel CD-2969C-3111 v tabuľke A) . Zvlhčovači proces predstavuje sušenie alkoholového solvátu za zvýšenej teploty okolo 50 - 150 °C a pri 80 - 95% relatívnej vlhkosti. Takto získaný etanolový solvát sa sušil vo zvlhčovanej miskovej sušičke s miešadlom za vzniku kryštalického produktu hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 1, ako ukazuje RTG difrakčná analýza. Nasledovne sa zistilo, že kryštalická forma je preukázateľne výhodnejšia ako amorfná. Hydrát CI-1027 kryštalická forma 1 (podiel CD-3103-3243 v tabuľke A) má vyššiu hustotu ako amorfný CI-1027, ako ukazuje tabulka B. Ukázalo sa, že celková hustota amorfnej formy klesá so stúpajúcim množstvom produktu. Kryštalická forma si ale udržuje stabilne vysokú celkovú hustotu, a je tiež viditeľne menej elektrostatická oproti amorfnej forme. Je teda zrejmé, že kryštalická forma lepšie udržuje charakteristické vlastnosti celkového produktu. Ukázalo sa tiež, že rozpustený voľný amorfný produkt CI-1027 sa môže previesť priamo na hydrát CI-1027, kryštalickú formu 1 zvlhčovaním. Obsah rozpúšťadla nie je potrebný na premenu produktu na kryštalickú formu 1.

Súhrnne môžeme povedať, že výhody zvlhčovacieho procesu a výsledného kryštalického produktu sú nasledujúce:

1. Proces zvlhčenia umožňuje účinné sušenie hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 1 v širokom rozsahu. Vzniká homogénny i

v podstate alkoholový rozpustený vol'ný produkt v ovel'a kratšom čase.

2. Výsledný kryštalický alkoholový rozpustený voľný produkt, hydrát CI-1027 kryštalickej formy 1 všeobecne vykazuje vyššiu celkovú hustotu ako amorfný CI-1027. Celková hustota je dostatočne stála pri zvyšovaní produktu, zatiaľ čo celková hustota amorfu so zvyšovaním produktu klesá.

3. Výsledný kryštalický alkoholový voľný produkt, hydrát CI-1027 kryštalickej formy 1 je viditeľne menej elektrostatický ako amorfný produkt. To silne pomáha udrženiu charakteristických vlastností celkového produktu v širokom rozsahu uskutočňovaných operácií a pri následnej konečnej úprave na farmaceutické dávkovanie.

Tabuľka A

Doba sušenia - experimenty/výsledky

Podiel	Metóda sušenia	Obsah
CD-2969C	vák. misk. suš.	48	1.12% EtOH
	@ 72°C	24	1.08% EtOH
	@ 80°C	72	0.92% EtOH; 2.84% H2O
CD-3032	vák. misk. suš.	24	7.0% EtOH
	@ 82°C	24	6.0% EtOH
mletý	— @ 82°C	24	5.5% EtOH
	@ 95^eC	24	4.4% EtOH
	rol 95°C	72	0.9% EtOH; 1.24% H2O
CD-3044	vák. misk. suš. '5' 60^eC	24	5.2% EtOH
	@ 82°C	24	4.1% EtOH
	@101°C	24	4.1% EtOH
začiatok	— @ 102^eC	18	2.0% EtOH
vpúšťania N₂	@101’C	72	0.2% EtOH
	<2>101°C	72	0.1% EtOH; 1.5% H₂O
CD-3055	vák. misk. suš. @ 60°C	24	7.7% EtOH
mletý; presun	— @ 82°C	24	5.5% EtOH
do rotačnej	— /2. 104°C	24	4.7% EtOH
sušičky
	& 105’C	24	3.4% EtOH
	@ 104“C	24	2.9% EtOH
	@101’C	24	2.5% EtOH
	@ 104’C	24	2.0% EtOH
	(Q 101°C	24	2.0% EtOH
odovzdané na misky — (2: 103 “C	24	0.3% EtOH
	(a: 103°C	24	0.1% EtOH; 1.92% H₂O

Tabuľka A (pokračovanie)

Doba sušenia - experimenty/výsledky

Podiel ID	Metóda sušenia	Čas (hod)	Obsah rozpúšťadla
CD-3082	vák. misk. suš. @82°C	24	5.97% EtOH
mletý	-»@98°C	24	0.85% EtOH
pridané 5 1	-»@97 °C	24	0.72% EtOH
vody v miske	@97°C	24	0.41% EtOH
tu	premleté		0.11% EtOH;1.59% H₂O
CD-3089	misk. suš. s mieš.
	@82°C	24	7.1% EtOH
	@98°C	24	5.5% EtOH
	@100°C	24	5.1% EtOH
presun do misk.	-»@100°C	20	1.8% EtOH
suš., pridané 51	@101°C	18	0.22% EtOH
vody	@101°C	24	0.01% EtOH;3.02% H₂O
CD-3102	vák. misk. suš. @84°C	20	6.7% EtOH
	@95°C	24	3.9% EtOH
	@95°C	24	1.77% EtOH
	@95°C	24	0.6% EtOH
	@95°C	72	ND EtOH;2.12% H₂O
CD-3111	vák. misk. suš. @81°C	24	5.4% EtOH
10 misiek bez	@98°C	24	0.07% EtOH
vrchnáčikov,	@97°C	24	0.05% EtOH
umiestnených do	mletý		ND EtOH;1.9% H₂O
vrchnej časti	•
pece

Tabuľka A (pokračovanie)

Doba sušenia - experimenty/výsledky

Podiel ID	Metóda sušenia	Čas (hoď)	Obsah rozpúšťadla
CD-3103*	misk. suš. s mieš.
	@80°C	24	5.4% EtOH
pridaný 1 kg	— ta 80^eC	24	0.07% EtOH
vody	g. 100^eC	24	0.05% EtOH
	mletý		0.06% EtOH: 3.7% H₂O
CD-3130*	misk. suš. s mieš.
	g. 85°C	24	5.9% EtOH
pridané 2 kg	— g 80°C	24	0.04% EtOH
vody	g 100°C	24	0.06% EtOH
	mletý		0.08% EtOH; 4.15% H₂O
ČD-3135*	misk. suš. s mieš.
	g. 80°C	24	5.76% EtOH
pridané 2kg	— 99°C		0.02% EtOH
vody	g 98^eC	5.5	0.02% EtOH
	mletý		ND EtOH: 4.38% H₂O
CD-3172*	misk. suš. s mieš.
	(d- 80°C •w*	20	7.0% EtOH
pridané 2 kg	— ® 100-102°C	19	0.2% EtOH
vody	g100°C	24	0.2% EtOH
CD-3321A*	misk. suš. s mieš.
	g 80-85°C	18	6.27% EtOH
pridané 6,4
	— ta 96-97°C	27	023% EtOH ·
kg vody
	g 97-98’C	19	0.06% EtOH

Tabuľka A (pokračovanie)

Doba sušenia - experimenty/výsledky

Podiel Π)	Metóda sušenia	Čas (hod)	Obsah rozpúšťadla
CD-3243*	misk. suš. s mies. (a· 85-87°C	19	7.22% EtOH
pridané 6,4	98-99^eC	16	0.09% EtOH
kg vody	@ 99°C	18	0.06% EtOH

Produkt je amorfný na RTG, pokiaľ sa označuje *.

Množstvo produktu z CD-3172 bolo 35,1 kg; z CD-3221A bolo 53,9 kg; z CD-3243 bolo 49,3 kg.

* kryštalický produkt podľa RTG analýzy.

Mimoriadna doba sušenia týchto vzoriek je z dôvodu 24 hodinového času pre analýzu etylalkoholu.

Podiel ĽD	strata hustoty (g/ml)	hustota (g/ml)	RTG fáza
CD-2969C CD-3032 CD-3044 CD-3055 CD-3082 CD-3089 CD-3102	0.336 0239 0.249 0.280 0234 0292 0215	0.439 0.306 0279 0.315 0.337 0.337 0270	amorfný amorfný amorfný amorfný amorfný amorfný
CD-3111	0218	0.264	amorfný
CD-3103	0.343	0.484	amorfný
CD-3130	0.311	0.496	kryštalický
CD-3135	0.242	0.379	kryštalický
CD-3172	0.281	0.438	kryštalický
CD-3221A	0.372	0.521	kryštalický
CD-3243	0235	0.300	kryštalický

PRÍKLAD 2

Príprava etylalkoholového solvátu kryštalickej vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny

CH₃ ch₃

--(CH₂)₄—O—(CH₂)₄ ch₃ ch₃

Čao™·

2.MTBE

72953

(CH₂)4-O—(CH₂)₄

Ca ch₃ ch₃ ch₃

C ,xCH₃CH₂OH + h₂o

Štandardná laboratórna metóda

Do 500 ml trojhrdlovej banky s vykurovacím hniezdom, spätným chladičom a horným miešadlom sa vloží:

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina (72953) - 25,0 g (0,08267 mol;

oxid vápenatý 98% - ekvivalentné množstvo 0,08267 mol 4,3 g (korekcia na čistotu) etylalkohol - 187,5 g, 237 ml.

Zmes sa začne pomaly miešať a zahrievať do azeotropného bodu (76 - 80 °C) a reflux zmesi prebieha 4-24 hodín, potom sa ochladí na približne 45 °C.

Do reakčnej zmesi sa pridá:

MTBE - 60,0 g, 79,2 ml.

Reakčná zmes sa ochladí na 20 - 25 °C a mieša sa asi 1 hodinu.

Pevný podiel sa odfiltruje.

Pevný produkt sa premyje MTBE -40,0 g, 50 ml.

Pevný produkt sa suší pri 60 až 100 °C v plnom vákuu do konštantnej hmotnosti, vyberie sa zo sušičky ako biela pevná látka. Obvyklý výťažok je 21 g (20 g sušiny, korekcia na obsah vlhkosti a etylalkoholu), to je 80 % menovanej látky.

Analytické výsledky:

Stanovenie IČ - KBr: 1107,3, 1552 cm'¹

Stanovenie (’Ή NMR) - (CDCl₃) : δ 7,2

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99.738 %

Obsah etylalkoholu (hm. % VPC) - 1,95 %

Obsah vody (titrácia KF1), 73 % (priemer z troch meraní) Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)-10,82 %

RTG analýza kryštalického solvátu pozri obr. 2 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm 189,9: 186,7 : 71,6 : 58,5*:

43,2 : 29,9: 23,5 znamená rezonanciu jednoznačne zodpovedajúcu tejto kryštalickej forme.

PRÍKLAD 3

Príprava hydrátu vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny, kryštalickej formy 1

Štandardná laboratórna metóda (je súhrnom opakujúcich sa reakcií prebiehajúcich rovnakým postupom)

Do opláštenej trojhrdlovej 500 ml banky s guľatým dnom, vrchným miešadlom, čidlom vákua, vstrekovacou tryskou na vodu a vonkajším temperovateľným kúpeľom sa pridá 50 g etylalkoholového solvátu kryštalickej vápenatej soli 6-(5- karboxy- 5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetyl-hexánovej kyseliny pripraveného podľa príkladu 2.

Reaktor sa uzavrie a zmes sa začne miešač (60 - 100 ot/min) .

Zo systému sa celkom vyčerpá vzduch. Teplota plášťa sa nastaví na 60 °C. Produkt sa mieša za plného vákua pri 60 °C počas 18 hodín. Uzavrie sa vákuový ventil a vstrekovacou tryskou sa pridá 20 g vody.

Voda sa vyparí a zvlhčí reakčný systém. Uzavrený zvlhčený systém sa mieša 4 hodiny. Znovu sa otvorí vákuový ventil a produkt sa suší počas 20,5 hodiny. Systém sa ochladí pod 30 °C a vákuum sa vytesní dusíkom. Suchý produkt sa vyberie z reaktora ako kompaktná biela pevná látka. Obvyklý výťažok je 24,89 g uvedeného produktu.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99.725 %

Obsah etylalkoholu (hm. % VPC) - 0,0 %

Obsah vody (titrácia KF) - 3,25 %

RTG analýza kryštalického produktu CI-1027, kryštalická forma 1 pozri obr. 3

PRÍKLAD 4

Príprava kryštalického metylalkoholového solvátu vápenatej soli 6- (5-karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny

HO.

CH₃ ch₃

-(CH₂)₄—O—(CH₂)₄ch₃ ch₃ /°^H% ⁺

CaO

2.MTBE

72953 ‘0

CH₃

Ca

-(CH₂)₄—O—(CH₂)₄0' .xCH₃OH + h₂o ch₃ ch₃ metylalkoholový solvát

Štandardná laboratórna metóda

Do 500 ml trojhrdlovej banky s guľatým dnom s vykurovacím hniezdom, spätným chladičom a horným miešadlom sa vloží:

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina, CI-1027 krok 1 (72953) - 25,0 g (0,08267 mol;

oxid vápenatý 98% - ekvivalentné množstvo 0,08267 mol - 4,3 g (korekcia na čistotu) metylalkohol - 187,5 g, 237 ml.

Zmes sa začne pomaly miešať (50 - 60 ot/min)a zahrievať do' azeotropického bodu (64 - 66 °C) . Azeotropická zmes sa mieša 21 hodín, potom sa ochladí na 45 °C. Do reakčnej zmesi sa pridá:

MTBE - 60,0 g, 79,2 ml.

Reakčná zmes sa ochladí na 20 - 25 °C a mieša sa asi 1 hodinu. Pevný podiel sa odfiltruje.

Pevný produkt sa premyje	MTBE - 40,0 g, 50	ml.
Produktom je biela pevná	látka so šedivými	hrudkami -
50,87 g.			1
Produkt sa suší pri 60	°C v plnom vákuu počas 3	hodín	do
určitej hmotnosti	(21,75 g) , pri 80	°C po 16	hodín	do
hmotnosti 16,34 g,	a ďalej pri 100	°C po 4,5	hodiny	do

hmotnosti 10,97 g. Produkt sa vyberie zo sušičky ako biela kryštalická látka.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99.737 %

Obsah vody (titrácia KF) 3,25 % do 4,94 % (priem, z troch meraní)

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)-11,00 až 11,22 %

RTG analýza metylalkoholového kryštalického solvátu CI-1027 pozri obr. 4 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm: 189,6: 186,2 : 71,4 : 43,2 :

29,6: 23,5

PRÍKLAD 5

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny, kryštalickej formy 1 z metylakoholového solvátu

Štandardná laboratórna metóda

Do opláštenej trojhrdlovej 500 ml banky s guľatým dnom, vrchným miešadlom, čidlom vákua, vstrekovacou tryskou na vodu a vonkajším temperovateľným kúpeľom sa pridá:

metylalkoholový solvát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny pripravený v príklade 4.

Reaktor sa uzavrie a začne sa miešať. (60-100 ot/min) . Celý systém sa úplne vákuuje. Teplota plášťa sa nastaví na 100 °C. Uzavrie sa vákuový ventil a vstrekovacou tryskou sa pridá 10 g vody.

Voda sa vyparí a zvlhčí reakčný systém pri 100 °C. Uzavrený zvlhčený systém sa mieša 60 minút. Znovu sa nastaví vákuum a produkt sa suší počas 2 hodín. Systém sa ochladí na 2 5 °C a vákuum sa vytesní dusíkom. Suchý produkt sa vyberie z reaktora ako biely kryštalický sypký prášok s výťažkom 4,22 g.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99.24 %

Obsah etylalkoholu (hm. % VPC) - 0,0 %

Obsah vody (titrácia KF) - 3,84 %

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)- 11,52 %

RTG analýza kryštalickej formy 1 pozri obr. 5

PRÍKLAD β

Príprava kryštalického 1-propylalkoholového solvátu vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny

HO.

CH₃ ch₃

-(CH₂)₄-o-(CH₂)₄ch.

ch₃

CH₃

Ca ++

CH,

OH + CaO

1. 1-propylalkoho 1

2. MTBE

-(CH₂)₄-o- (ch₂)₄ch₃ ch₃

O' x ch₃ch₂ch₂oh + h₂o

Štandardná laboratórna metóda

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina,

CI-1027 krok 1 (72953) - 25,0 g (0,08267 mol;

oxid vápenatý 98% - ekvivalentné množstvo 0,08267 mol - 4,73 g (korekcia na čistotu)

1-propylalkohol - 187,5 g, 233 ml.

Zmes sa začne pomaly miešať (50 ot/min)a zahrievať do azeotropického bodu (95 - 98 ’C) . Azeotropická zmes sa mieša 12 hodín, potom sa ochladí pod 50 °C. Do reakčnej zmesi sa pridá:

MTBE - 60,0 g, 79,2 ml.

Pevný produkt sa premyje MTBE - 40,0 g, 50 ml.

Produktom je ílovitá biela pevná látka - 69,06 g.

Produkt sa suší pri 60 °C v plnom vákuu počas 16 hodín do

hmotnosti 29,52 g, pri 80	°C počas	3,5 hodiny	do
hmotnosti 23,53 g, a ďalej	pri 100 °C	po 2 hodiny	do
hmotnosti 18,03 g. Produkt	sa vyberie	zo sušičky	ako
biela pevná látka.
Analytické výsledky:
HPLC (percentuálna oblasť CI-1027)	- 99,064 %

Obsah 1-propylalkoholu (TGA)- 5,99 %

Obsah vody (titrácia KF) - 1,72 % (priemer z dvoch meraní) Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)-10,73 %

RTG analýza kryštalického 1-propylalkoholového solvátu CI-1027 pozri obr. 6 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm: 189,9: 186,0 : 71,6 : 43,2 :

29,6: 23,8

PRÍKLAD 7

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny, kryštalickej formy 1 z 1f propylakoholového solvátu

Štandardná laboratórna metóda

1-propylalkoholový solvát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny pripravený v príklade 6.

Reaktor sa uzavrie a začne sa miešať (60-100 ot/min). Celý systém sa úplne vákuuje (optimálne) a teplota plášťa sa nastaví na 100 °C. Uzavrie sa vákuový ventil a vstrekovacou tryskou sa pridá 10 g vody.

Voda sa vyparí a zvlhčí reakčný systém pri 100 °C. Uzavrený zvlhčený systém sa mieša 30 minút. Znovu sa nastaví vákuum a produkt sa suší počas 2 hodín. Systém sa ochladí pod 25 °C a vákuum sa vytesní dusíkom. Produkt sa vyberie z reaktora ako biely prášok s výťažkom 10,33 g.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99,519 %

Obsah 1-propylalkoholu (TGA) - 0,0 %

Obsah vody (titrácia KF)- 3,98 % (priemer z dvoch meraní) Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)- 10,20 %

RTG analýza CI-1027 kryštalickej formy 1 pozri obr. 7

PRÍKLAD 8

Príprava 2-propylalkoholového solvátu vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny

CH₃

-(CH₂)₄—O—(CH₂)₄ch₃ ch₃ ch₃ .OH % ⁺

CaO

1.2-propylalkoho 1 2.MTBE

72953

O' <

Ό.

CH₃

Ca

CH,

-(CH₂)₄-O—(CH₂)₄ch₃ ch₃

CH₃ xCHOH + H₂O ch₃ ’l

Štandardná laboratórna metóda

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina, (72953) - 25,0 g; 0,08267 mol;

2-propylalkohol - 187,5 g, 233 ml.

Zmes sa začne pomaly miešať (50 ot/min)a zahrievať do azeotropického bodu(80 - 83 °C) . Azeotropická zmes sa mieša 24 hodín, potom sa ochladí na 40 °C. Do reakčnej zmesi sa pridá:

MTBE - 60,0 g, 79,2 ml.

Pevný produkt sa premyje MTBE -40,0 g, 50 ml.

Produktom je biela pevná látka - 50,90 g.

Produkt sa suší pri 60 ’C v plnom vákuu počas 3 hodín do hmotnosti 28,59 g, pri 80 ’C počas 16 hodín do hmotnosti 23,27 g, a ďalej pri 100 °C po 4 hodiny do hmotnosti 17,51 g. Produkt sa vyberie zo sušičky ako biela kryštalická pevná látka.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99,315 % Obsah 2-propylalkoholu (TGA) - 6,12 %

Obsah vody (titrácia KF) - 1,96 % (priemer z troch meraní) Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)-10,27 %

RTG analýza kryštalického 2-propylalkoholového solvátu CI-1027 pozri obr. 8 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm: 189,4: 187,7: 70,9: 69,4: 66,5:

63,8*: 43,2 :29,6: 35,0: 30,1: 23,8: 18,7*: 14,3* znamená rezonanciu jednoznačne zodpovedajúcu tejto forme.

PRÍKLAD 9

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny, kryštalickej formy 1 z 2propylakoholového solvátu

Štandardná laboratórna metóda

2-propylalkoholový solvát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny pripravený v príklade 8.

Reaktor sa uzavrie a začne sa miešať (60-100 ot/min). Celý systém sa úplne vákuuje a teplota plášťa sa nastaví na 100 °C. Uzavrie sa vákuový ventil a vstrekovacou tryskou sa pridá 10 g vody.

Voda sa vyparí a zvlhčí reakčný systém. Uzavrený zvlhčený systém sa mieša 60 minút. Znovu sa nastaví vákuum a produkt sa suší počas 12 hodín. Systém sa ochladí pod 30 °C a vákuum sa vytesní dusíkom. Produkt sa vyberie z reaktora ako sypký prášok s výťažkom 9,01 g.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblastí CI-1027) - 99,611 %

Obsah 2-propylalkoholu (TGA)- 0,0 %

Obsah vody (titrácia KF)- 4,04 % (priemer z dvoch meraní) Obsah vápnika (ICP, korekcia¹ na vodu)- 10,93 %

RTG analýza CI-1027 kryštalickej formy 1 pozri obr. 9

PRÍKLAD 10

Príprava 1-butylalkoholového solvátu vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny

CH₃

--(CH₂)₄—O—(CH₂)₄ ch₃ ch₃ ch₃

+

CaO

1. 1-butylalkohol

2. MTBE

72953 '0.

CH-,

Ca ch₃ 'Z

-(CH₂)₄—0—(CH₂)₄0' .xCH₃CH₂CH₂CH₂OH + h₂o ch₃ ch₃

Štandardná laboratórna metóda

1-butylalkohol - 187,5 g, 231,5 ml.

Zmes sa začne pomaly miešať (50 ot/min) a zahrievať do azeotropického bodu (117 - 120 ’C) . Azeotropická zmes sa mieša 12 hodín, potom sa ochladí pod 50 ’C. Do reakčnej zmesi sa pridá:

MTBE - 60,0 g, 79,2 ml.

Pevný produkt sa premyje MTBE - 40,0 g, 50 ml.

Produktom je biela hrubá pevná látka - 44,16 g.

Produkt sa suší pri 60 °C v plnom vákuu počas 16 hodín do hmotnosti 29,04 g, pri 80 °C počas 3,5 hodiny do hmotnosti 23,83 g, a ďalej pri 100 °C po 4 hodiny do hmotnosti 18,43 g. Produkt sa vyberie zo sušičky ako biela kryštalická pevná látka.

Analytické výsledky:

HPLC (percentuálna oblasť CI-1027) - 99,560 %

Obsah 1-butylalkoholu (TGA) - 9,02 %

Obsah vody (titrácia KF)-1,93 % (priemer z dvoch meraní)

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu)- 9,65 %

RTG analýza kryštalického 1-butylalkoholového solvátu CI-1027 pozri obr. 10 ¹³ C NMR (pevná fáza) v ppm: 189,9: 186,0: 71,6: 43,2 : 29,9: 23,8

PRÍKLAD 11

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 1 z 1butylalkoholového solvátu

Štandardná laboratórna metóda

Do opláštenej 500 ml trojhrdlovej nádoby s guľatým dnom, s vrchným miešadlom, meradlom vákua, vstrekovacou tryskou na vodu a vonkajším ohrevom sa dávkuje:

vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny; 1-butylalkoholový solvát pripravený v príklade 10.

Nádoba sa uzavrie a začne sa miešať (60 - 100 otáčok/min) . Systém sa celkom naplní vákuom. Teplota plášťa sa nastaví na 100 ’C. Zdroj vákua sa uzavrie. Cez vstrekovaciu trysku sa pridá 10 g vody.

Voda sa vyparuje a zvlhčuje systém. Uzavrený vlhký systém sa mieša počas 30 minút. Znovu sa pustí vákuum a produkt sa suší 2 hodiny. Systém sa ochladí na 25 ’C. Vákuum sa vytesní dusíkom. Suchý produkt sa vyberie z reaktora ako granule pevnej látky - 10,35 g.

Analytické výsledky:

HPLC (% oblasť CI-1027) - 99,374 %

Obsah 1-butylalkoholu (TGA) - 0,0 %

Obsah vody (KF filtrácia) - 3,96 % (priemer z 3 meraní)

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu) - 10,70 %

RTG analýza CI-1027 kryštalickej formy 1 - pozri obr. 11.

PRÍKLAD 12

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 2 vodným lúhovaním

Štandardná laboratórna metóda Do 200 ml banky sa dávkuje:

vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny CI-1027 kryštalickej formy 1 pripravená poloprevádzkovou metódou v príklade 1-24,4 g;

voda - 100 g

Banka so zmesou sa umiestni na rotačnú odparku začne sa pomaly otáčať (120 ot/min). Teplota zmesi v banke sa na vodnom kúpeli zahreje na 60 °C. Vodná suspenzia sa mieša za atmosférického tlaku 7 dní a potom sa zmes ochladí na 20 - 25 °C. Pevná fáza sa oddelí filtráciou a premyje sa g čerstvej vody.

Pevný produkt sa suší pri 90 °C pod úplným vákuom do konštantnej hmotnosti za vzniku bielej pevnej látky hydrátu CI-1027 kryštalickej formy 2; 21,3 g, 20,6 g bezvodej bázy (korekcia na vodu), 84%.

Analytické výsledky:

HPLC (% oblasť CI-1027) - 100,06 %

Obsah etylalkoholu (hm. % VPC) - 0,04 %

Obsah vody (KF filtrácia) - 3,47 %

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu) - 10,78 %

RTG analýza hydrátu CI-1027 kryštalickej ,formy 2 - pozri obr.

¹ 15.

NMR ¹³C (v pevnom stave) v ppm: 190,9,-189,6; 186,2;120,4;

72,7*; 44,7*; 44,2; 43,0; 42,3; 39,3; 37,9; 31,8; 30,9;

29,6; 27,7; 26,2*; 25,3; 24,0; 22,9; 21,5 a 20,2.

* označuje predpokladanú špecifickú rezonanciu pre túto formu

PRÍKLAD 13

Príprava vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 2 reakciou s hydroxidom vápenatým vo vode

HO ch₃ ch₃ (CH₂)₄—O—(CH₂)₄

ch₃

H₂O

72953 + Ca(OH)₂hydroxid vápenatý M = 74.10

,xH₂O + 2 H₂O

Štandardná laboratórna metóda

6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánová kyselina (72953) -25,0 g, 0,08267 mol;

práškový hydroxid vápenatý - ekvivalentné množ. 0,08267 mol 6,13 g (bez korekcie na čistotu,·) voda - 175 g, 175 ml.

Zmes sa začne miešať a zahrieva sa na 80 °C, miešanie zmesi pri 80 °C prebieha 12 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na 0-5 °C, pridá sa 40 ml vody na zachovanie miešateľnosti zmesi. Pevný produkt sa odfiltruje ako biela pevná látka - 49,34 g, suší sa pri 95 °C a plnom vákuu po 24 hodín. Produkt sa vyberie zo sušiarni ako kompaktná biela pevná látka, ktorá sa pred uskladnením rozotrie- 14,62 g.

Analytické výsledky:

HPLC (% oblasť CI-1027) - 99,60 %

Obsah vody (titrácia KF) - 4,93 % (priemer z 2 meraní)

Obsah vápnika (ICP, korekcia na vodu) - 10,52 %

RTG analýza CI-1027, kryštalickej formy 2 - pozri obr. 15.

Ako sa ukazúje v predchádzajúcich príkladoch, vápenatá soľ vzorca II v rôznych solvátových formách je pevná látka, často vysoko kryštalická, takže je zvlášť vhodná na komerčnú prípravu a výrobu. Jednoznačný charakter pevnej látky a kryštalinita vápenatých solí sú prekvapivé, pretože iné bežné soli majú niektoré nežiadúce fyzikálne vlastnosti, napríklad sú hygroskopické alebo amorfné, prípadne oboje. Tieto formy solí (hygroskopické a amorfné) sú na širšie komerčné využitie nepoužitel'né. Nasledujúci príklad ukazuje výhody uvádzaných vápenatých solí oproti iným formám solí.

PRÍKLAD 14

Porovnanie solí alkalických zemín s inými soľami

Podl'a všeobecného postupu uvedeného v príklade 1, 72 953 reagovala s hydroxidom sodným, hydroxidom draselným a acetylcholínom v stechiometrických pomeroch 1:1 a 2:1 pre molekulu dialkánovej kyseliny. Vlastnosti takto pripravenej a celkom vysušenej pevnej látky sa porovnali s vlastnosťami vápenatej soli (CI-1027) z príkladu 1. Výsledky uvádza tabulka 1.

TABUĽKA 1

Forma solí a hygroskopické vlastnosti pripravená soľ forma fyzikál. vlastn. pevnej látky disodná didraselná monocholínová dicholínová pevná 1. pevná 1. olejovitá 1. olej ovitá 1.

silne hygroskopická silne hygroskopická sodná draselná vápenatá pevná 1. pevná 1. pevná 1. a (alebo) kryštalická hygroskopická silne hygroskopická nehygroskopická alebo slabo hygroskopická

PRÍKLAD 15

Účinky CI-1027 vzorca II, kryštalickej formy 1 na Lp(a) a iné parametre lipoproteínu stanovené in vivo na dvoch modeloch zvýšeného Lp(a)

Opiciam Cynomolgus macaque a Lp(a) transgenetickým myšiam sa podávala orálne so stravou CI-1027 v dávkach 3, 10, 30, 100 alebo 300 mg/kg. Podľa toho sa znižovalo dávkovanie Lp(a) (-9, -23, -64, -68 a -87 % pre dávky 3, 10, 30, 100 a 300 mg/kg). V takomto množstve sa znižovala celková plazma a HDL cholesterol. Samičky transgenetických myší sa rozdelili do piatich skupín podľa hladiny Lp(a) a dávkovala sa im samotná strava alebo strava s CI-1207 (3, 10, 30 a 100 mg/kg/deň). Každý týždeň sa odoberali vzorky krvi, 2 týždne pred liečbou, 2 týždne počas liečby. Na začiatku experimentu bola bežná hodnota Lp(a) v plazme 40 mg (1 dl) vo všetkých skupinách. Po 1 týždni ovplyvnilo dávkovanie CI-1027 zníženie hladiny plazmatickej Lp(a) (-15, -41, -54 a -61 % pôvodnej hladiny pre 3, 10, 30 a 100 mg CI-1027/kg/deň) v porovnaní s myšami, ktorým bola podávaná samotná strava. V závislosti na dávkovaní CI-1027 sa tiež prejavilo celkové zníženie plazmy a cholesterolu s maximálnym úbytkom 32 % pri dávke 100 mg/kg/deň. Lipoproteínový profil stanovený HPLC ukázal, že pokles cholesterolu je daný predovšetkým viditeľným znížením

LDL cholesterolu. HDL cholesterol sa nemení. Pomer HDL cholesterolu a VLDL + LDL cholesterolu sa liečbou zlepšil z hodnoty 0,39 na 0,65. Hodnota plazmatického apoB sa tiež znížila až o 30 %. V druhom týždni liečby boli zmeny podobné.

PRÍKLAD 16

Účinky CI-1027, kryštalickej formy 1 na citlivosť inzulínu

CI-1027 sa určuje štandardným postupom pomocou 3T3-L1 adipocytov, ktoré sú predovšetkým citlivé na inzulín, to je spracovanie cukru sa náhle aktivuje inzulínom 15 - 20krát.

Úplnú metodiku používanú pre túto skúšku opisuje Frost et al: 1985, J. Biol. Chem. 260, 2646-2652. 3T3-L1 fibroblastické bunky sa špeciálne získali z amerických kultúr American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD). Bunky sa vypestovali do zhluku a rozdelili sa do adipocytov. V deň 0 sa bunkový

I zhluk upravil 167 nm inzulínu, 0,25 μΜ dexametasónu a 0,5 mM metyl-izobutylmetylxantínu v 10% plodovom hovädzom sére (FBS) obsahujúcom Dulbeccovo modifikované orlie médium (DMEM). Po dvoch dňoch sa médiá premenili na DMEM obsahujúce 167 nm inzulínu a 10% FBS. Médiá sa potom zmenili na 10% DMEM a menili sa každý ďalší deň až do odberu. CI-1027 rozpustená v dimetylsulfoxide sa pridala do médií v deň 0 a doplňovala sa s každou zmenou médií. Rozdielnosť sa hodnotila vizualizáciou i

nazhromaždených tukových kvapôčok v bunkách. Transport glukózy sa meral kvantitatívnym vyhodnotením pridanej deoxyglukózy ¹⁴C v rozdielnych bunkách v 9. dni metódou opísanou Sandoukom et al. : 1993, Endokrinology 133, 352-359.

PRÍKLAD 17

Farmakokinetika a metabolizmus [¹⁴C] CI-1027

CI-1027 sa klinicky skúša na liečbu dislipidémií a ateroskleróz zvyšovaním lipoproteínového cholesterolu vysokej hustoty (HDL-C) a znižovaním aterogénneho lipoproteínu Lp(a). CI-1027 sa rýchlo vstrebáva v krysom, psom a opičom organizme. Orálna bioaktivita sa zdá byt vysoká, aj keď farmakokinetika CI-1027 je nelineárna a látka pravdepodobne podlieha enterohepatickej recirkulácii. Predpokladané intravenózne (IV) a orálne (PO) eliminačné polčasy sú kratšie pre krysu (5 až 7 hodín) ako pre psa (17 až 31 hodina) alebo pre opicu (9 až 15 hodín). Proteíny viazané k plazme in vitro sú závislé na použitej látke a koncentrácii. Albumín sa javí ako primárne viazaný proteín. Štúdie in vitro hepatocytov krysy, psa a opice s využitím radioindikátorov ukázali dva hlavné piky ¹⁴C zodpovedajúce intaktnej látke a glukuronidovému konjugátu. Regenerácia (v percentách dávkovaného ¹⁴C) intaktných krýs a opíc a krýs a opíc s kanylou v žlčovodoch na 10 mg/kg [¹⁴C] ukazuje tabuľka 2.

TABUĽKA 2

Priemerná obnova v % z lOmg/kg a dávke ¹⁴ C

• ' vvmešok	intaktná krysa	lranvl lrrvsa	opica	kanvl. opice ¹
žlč		87.5		42.0
moč	37.0	10.5	78.1	62.2
stolica	56.9	0.72	17.3	3.82
celkom	93.9	98.7	95.4	108

Metabolická analýza sa uskutočňuje HPLC s rádiometrickou detekciou a metabolity sa stanovujú LC/RAM/MS/MS. V podstate 100 % rádioaktívnej látky v plazme sa nezmenilo. Pretože v žlči a moči sa vyskytuje acyl-glukoronid, uskutočňuje sa LC/NMR analýza na zistenie prípadnej migrácie acyl-produktov.

PRÍKLAD 18

Zloženie kapsulí

zložka	množstvo
hydrát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5 -metyl-hexyloxy)2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 1	1 000 g
laktóza	9Ó0g
stearát horečnatý	40 g

Zložky sa miešajú do homogénneho zloženia zmesi a plnia sa do tvrdých želatínových kapsulí (#4). Každá kapsula sa plní 200 mg homogénnej zmesi a obsahuje 100 mg aktívneho monokalcium dikarboxylát éteru. Kapsule sa podávajú dospelým v dávke 1 až 3 denne na zníženie plazmatickej Lp(a),

PRÍKLAD 19

Zloženie tabliet

zložka	množstvo
hydrát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)- 2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 2	3 000 g

laktóza 750 g kukuričný škrob 300 g želatína 120 g voda 1 000 cm³ stearát horečnatý 20 g

Dialkyléterová soľ, laktóza a 150 g kukuričného škrobu sa zmieša s roztokom želatíny vo vode. Vlhký granulát sa sieťuje, suší a opäť sieťuje. Suché granule sa zmiešajú so stearátom horečnatým a zvyškom škrobu a zmes sa lisuje do 698 mg tabliet s využitím štandardných konkávnych lisov 15/32 palcov. Každá tableta obsahuje 500 mg dialkyléterovej soli.

PRÍKLAD 20

Zloženie roztoku na orálnu aplikáciu zložka množstvo hydrát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)- 4,0 g

2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 1 sorbitový polyoxyetylén monostearát 0,1 cm³ karboxymetyl celulózy-sodná soľ 0,3 g komplex kremičitanu horečnato-hlinitého 0,5 g cukor* 10 g glycerín 2 cm³ benzoát sodný 0,5 g citrát sodný 0,2 g overené červené farbivo 1 mg cherry esencia 0,02 cm³ destilovaná voda 100 cm³

Sorbitový monostearát polyoxyetylénu je produktom typu polysorbátu 60 alebo Tween 60. Komplexný kremičitan horečnatohlinitý je gélotvorné činidlo, ako napríklad Vcegum H.V. Táto látka sa hydrátuje cez noc 10 cm³ destilovanej vody. Zmes pripravená zo sorbitového stearátu polyoxyetylénu, imitácie esencie cherry, 30 cm³ destilovanej vody a dikarboxylát éteru kovu alkalických zemín sa vedie do homogenizátora. Za intenzívneho miešania sa pridá cukor, glycerín, citrát sodný, benzoát sodný a sodná soľ karboxymetyl celulózy, nasledovne potom hydratovaný komplex kremičitanu horečnato-hlinitého a roztok červeného farbiva v 2 cm³ vody. Výsledná suspenzia sa homogenizuje, upraví na pH = 5,0 kyselinou citrónovou a nariedi sa na výsledný objem 100 cm³ destilovanou vodou. Orálna dávka 55 cm³ tejto suspenzie obsahuje 100 mg éterovej soli dialkyl kyseliny. Podľa požiadavky sa môže červené farbivo a príchuť cherry vynechať alebo zameniť za iné zafarbujúce a dochuťujúce činidlá.

PRÍKLAD 21

Zloženie poťahovaných tabliet zložka množstvo pre 1 000 tabliet plášť tablety vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)- 168,92

2,2-dimetylhexánovej kyseliny (CI-1027) hydrát laktózy NF hydroxypropyl celulózy kroskarmelozan sodný

36,00

18,80

9,40

235,00 g stearát horečnatý (nie hovädzí) prečistená voda, USP

1,88 podľa potr.

Plášť tabliet sa pripravuje vo fluidnom vsádzkovom granulátore. Vodný roztok (spojivo) hydroxypropyl celulózy sa prevedie do nizkootáčkového mixéru. CI-1027 a hydrát laktózy sa zmieša vo fluidnom vsádzkovom granulátore. Spájajúci roztok sa rozprašuje z hrdla mixéru do zmesi v granulátore za vzniku granulí. Granule sa zhlukujú a vedú sa cez Comil. Preosiate granule sa zmiešajú so sodnou soľou kroskarmelózy a miešajú sa do homogénnej zmesi. Potom sa pridá stearát horečnatý a opäť sa zmes mieša do homogenity. Zmes sa potom lisuje do 1 000 tabliet za použitia štandardného tabletovacieho lisu. Tablety sa potom miešajú v poťahovacej nádobe s roztokom 7,00 g Opandry White YS-1-7040 (Colorcon, a.s., West Point, Pensylvánia) a 0,05 g simetikónovej emulzie USP (30% vodný roztok). Tablety sa potiahnu filmom, ktorý pomáha uskladneniu a aplikácii lieku. Každá tableta obsahuje 168,92 mg CI-1027, čo je ekvivalentné ku 150 mg 72953 (voľná kyselina).

Predkladaný vynález, spôsob a priebeh jeho realizácie a využitia sa opisujú tak úplne, jednoducho a jasne presnými výrazmi, aby ho každá osoba pohybujúca sa v odbore mohla uskutočniť a aplikovať. Tým sa rozumie, že opísané najdôležitejšie časti tohto vynálezu a ich modifikácie sa môžu realizovať bez odchýlenia sa od myšlienky a rámca tohto vynálezu, tak ako sa uvádzajú v patentových nárokoch. Nasledujúce patentové nároky špecifikujú a zretelne vymedzujú predmety vynálezu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina vápenatá soľ 6- (5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny vzorca II:

Ca⁺⁺

Ό V**^{3 CH3} 0' ^C—C—(CH₂)₄—O—(CH₂)₄—C—Cť .xR,0H (II) n^z I 10 ^υ ch₃ ch₃ vyznačujúca sa tým, že R_x je H alebo nižší alkyl a x je číslo od O do 10.
2. Zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je vápenatá sol 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny.
3. Zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je hydrát vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny.

4 . Zlúčenina vápenatá sol 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny, kryštalická forma 1 vyznačujúca sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 2Θ d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.760 13.0648 5106 100.0 1497 100.0 0.234 T 8.183 10.7953 1743 34.1 435 29.1 0.200 J 8.560 10.3207 1866 36.5 543 36.3 0.233 4 9.239 9.5638 234 4.6 29 1.9 0.096 5 9.760 9.0546 972 19.0 220 14.7 0.181 6 10.569 8.3634 156 3.1 12 0.8 0.061 7 11.141 7.9353 178 3.5 29 1.9 0.130 8 13.760 6.4304 266 5.2 46 3.1 0.138 9 15.599 5.6761 338 6.6 63 42 0.148 10 16.740 5.2917 433 8.5 64 4.3 0.118 11 17.420 5.0866 1890 37.0 689 46.0 0291 12 20.639 4.3000 523 10.2 128 8.5 0.196 13 21.391 4.1505 188 3.7 20 1.3 0.085 14 22.139 4.0119 445 8.7 74 4.9 0.132 15 31.559 2.8326 270 5.3 24 1.6 0.070

5. Zlúčenina vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny vyznačujúca aa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189,6; 186,2; 71,4; 43,4; 30,1;

28,4; 25,2; 23,1.
6. Zlúčenina vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny vyznačujúca sa tým, že pík ¹³C NMR je 25,2 ppm.

Ί. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 1 vyznačujúca aa tým, že obsahuje etanolový solvát 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy) 2,2-dimetylhexánove j kyseliny, kde Rj. je etyl.

8. Kryštalická zlúčenina etanolový solvát 6-(5-karboxy-5metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny vyznačujúca

sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje: # 2Θ d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.899 12.8028 13186 100.0 3025 100.0 0.184 2 8.261 10.6945 5221 39.6 931 30.8 , 0.143 J 8.838 9.9969 2057 15.6 482 15.9 0.187 4 11.061 7.9927 785 6.0 160 5.3 0.163 5 12.100 7.3086 1355 10.3 150 4.9 0.088 6 13.619 6.4964 450 3.4 89 2.9 0.157 7 17.677 5.0132 753 5.7 126 4.2 0.134 8 18.180 4.8755 2011 15.3 588 19.4 0.234 9 20.840 4.2588 439 n J. J 40 1.3 0.072 10 21.334 4.1615 427 3.2 67 2.2 0.125 Kryštalická zlúčenina podľa nároku 8 vyznačujúca sa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189,9; 186,7; 71,6;

58,5; 43,2; 29,

9; 23,5.
10. Zlúčenina etylalkoholový solvát vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny vyznačujúca sa tým, že pík ¹³C NMR je 58,5 ppm.
11. Kryštalická zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je metanolovy solvát 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2dimetylhexánovej kyseliny.

12. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 11 vyznačujúca sa' tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 20 d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.896 12.8072 11991 100.0 2593 100.0 0.173 2 8.339 10.5940 2046 17.1 334 12.9 0.131 J 9.219 95853 1438 12.0 281 10.8 0.156 4 10.280 8.5979 632 5.3 180 6.9 0.227 5 11.320 7.8105 1079 9.0 322 12.4 0.238 6 15.800 5.6044 463 3.9 59 2.3 0.102 7 16.741 5.2913 432 3.6 38 1.4 0.069 8 18.160 4.8809 1260 10.5 599 23.1 0.380 9 18.702 4.7408 700 5.8 184 7.1 0.210 10 19.816 4.4766 589 4.9 94 3.6 0.127 11 21.724 4.0876 510 4.3 96 3.7 0.150

13. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 12 vyznačujúca sa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189,6; 186,2; 71,4;

43,2; 29,6; 23,5.
14. Zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je 1-propylalkoholový solvát 6-(5-karboxy-5-metyl- hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny.

15. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 14 vyznačujúca sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

tt 2Θ d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.899 12.8025 12371 100.0 3495 100.0 0.226 -> 7.843 11.2637 4815 38.9 1119 32.0 0.186 J 8.661 10.2009 1709 13.8 357 10.2 0.167 4 11.359 7.7833 771 6.2 141 4.0 0.146 5 12.300 7.1900 752 6.1 127 3.6 0.135 6 13.100 6.7528 517 4.2 37 1.0 0.057 7 18.262 4.8540 1945 15.7 596 17.1 0.245 8 20.721 4.2832 828 6.7 279 8.0 0.269 9 21.740 4.0847 573 4.6 146 4.2 0.203

16. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 15 vyznačujúca sa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189,6; 186,2; 71,4;

43,2; 29,6; 23,5.
17. Zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je 2-propylalkoholový solvát 6-(5-karboxy- 5-metyl -hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny.

18. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 17 vyznačujúca sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 20 d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.918 12.7674 10028 100.0 2562 100.0 0.204 n 8.000 11.0427 3984 39.7 800 31.2 0.161 J 8.619 10.2506 1619 16.1 346 13.5 0.171 4 11.338 7.7981 658 6.6 68 2.6 0.082 5 11.718 7.5459 236 ' 2.4 28 1.1 0.093 6 12.241 7.2243 761 7.6 131 5.1 0.138 7 15.382 5.7557 610 6.1 107 4.2 0.140 8 18.162 4.8803 1937 19.3 441 172 0.182 9 20.779 4.2713 853 8.5 222 8.6 0.208 Kryštalická zlúčenina podľa nároku 14 vyznačujúca sa tým že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189, 4; 187,7 70, 9; 69,4; 66,5; 63,8; 43,2; 35,0; 30,1; 23,8; 18,7

14,3.

20. Zlúčenina 2-propylalkoholový solvát vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny vyznačujúca sa tým, že pík ¹³C NMR je 63,8, 18,7 alebo

14,3 ppm.
21. Zlúčenina vyznačujúca sa tým, že je 1-butylalkoholový solvát 6-(5-karboxy -5- metyl -hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny.

22. Kryštalická zlúčenina podľa nároku 21 vyznačujúca sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 2Θ d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 7.060 12.5101 19609 100.0 4796 100.0 Ó. 196 2 9.078 9.7332 3027 15.4 567 11.8 0.150 J 11.100 7.9644 924 4.7 164 3.4 0.142 4 16.361 5.4135 554 2.8 76 1.6 0.109 5 18.040 4.9133 2276 11.6 456 9.5 0.160 6 18.820 4.7112 1303 6.6 385 8.0 0236 7 19.922 4.4532 1886 9.6 457 9.5 0.193 8 21.560 4.1183 853 4.4 205 4.3 0.191 9 22.281 3.9867 343 1.7 37 0.8 0.086 10 23.521 3.7793 450 2.3 107 2.2 0.189

23. Zlúčenina podľa nároku 21 vyznačujúca sa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 189,9; 186,0; 71,6; 43,2;

29,9; 23,8.

24. Zlúčenina vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)2,2-dimetylhexánovej kyseliny, kryštalická forma 2 vyznačujúca sa tým, že vzorka RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 20 d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 7.259 12.1686 9283 100.0 2482 100.0 0.214 2 8.739 10.1100 4191 45.1 603 24.3 0.115 Ή J 9.386 8.9628 967 10.4 161 6.5 0.133 4 11.659 7.5838 430 4.6 49 1.9 0.089 5 13.955 6.3408 305 «R J. J 58 2.3 0.151 6 14.220 6.2233 326 3.5 73 2.9 0.178 7 15.387 5.7537 278 3.0 19 0.7 0.053 8 16.461 5.3806 986 10.6 187 7.5 0.152 9 17.361 5.1039 1490 16.1 348 14.0 0.187 10 18.063 4.9069 1284 13.8 323 13.0 0201 11 19.302 4.5947 871 9.4 166 6.7 0.152 12 19.862 4.4664 686 7.4 142 5.7 0.166 13 20.200 4.3923 457 4.9 103 4.1 0.179 14 21.178 4.1918 656 7.1 97 3.9 0.117 15 21.641 4.1031 167 1.8 6 0.2 0.029 16 22.300 3.9833 794 8.6 192 7.7 0.193 17 23.218 3.8278 247 2.7 23 0.9 0.071 18 24.100 3.6897 183 2.0 34 1.3 0.145 19 25.481 3.4928 487 5.2 141 5.7 0231 20 28.800 3.0974 134 1.4 14 0.6 0.083 21 29.297 3.0459 ²⁵⁹ 2.8 28 1.1 0.084 30.700 2.9099 287 3.1 20 0.8 0.055

25. Kryštalická zlúčenina podl'a nároku 24 vyznačujúca sa tým, že ¹³C NMR (v pevnom stave) v ppm je: 190,9;189,6; 186,2; 120,4; 72,7; 44,7; 44,2; 43,0; 42,3; 39,3; 3 7,9;

31,8; 30,9; 29,6; 27,7; 26,2; 25,3; 24,0; 22,9; 21,5 a

20,2.
26. Zlúčenina vápenatá soľ 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalická forma 2 vyznačujúca sa tým, že pík ¹³C NMR je 72,7, 44,7 alebo

26,2 ppm.
27. Zlúčenina podľa nároku 1 vyznačujúca sa tým, že kryštalická štruktúra obsahuje od približne 0,1 do približne 1 molekuly vody na ión soli.
28.Spôsob prípravy stabilnej kryštalickej zlúčeniny vzorca II:

Ca**

CH₃ ch₃ )_ZC-C—(CH₂)4—O-(CH₂)₄— C-CC_o .xR,OH (II) ° CH, CH, kde Ri je nižší alkyl a x je číslo od .0 do 10, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakciu zlúčeniny vzorca I

HO.

ch₃ ch₃

I I ΌΗ

C—C—(CH₂)₄—O—(CH₂)₄—C—

I I ^XO ch₃ ch₃ (I) s oxidom vápenatým v alkanolovom organickom rozpúšťadle vzorca RjOH za vzniku pevného produktu: a sušenie pevného produktu na získanie vápenatej soli dikarboxylát éteru zlúčeniny vzorca II majúcej stechiometrický pomer vápnika k dikarboxylátu približne 1:1.
29. Spôsob podl'a nároku 28 vyznačujúci sa tým, že organické rozpúšťadlo je alkohol C1-C12.

30. Spôsob podl'a nároku 2 8 vyznačujúci sa tým, že alkohol Cj.- C12 je v podstate bezvodý. 31. Spôsob alkanol podl'a nároku 2 8 vyznačujúci sa tým, že C_x-C₄. alkohol je 32 . Spôsob podľa nároku 2 8 vyznačujúci sa tým, že zahŕňa

ďalej krok vrazenia pomocného rozpúšťadla do organického alkoholového rozpúšťadla a ďalej sa vyznačujúci tým, že pomocné rozpúšťadlo prevedie aspoň časť vápenatej soli dikarboxylát éteru na zrazeninu z organického alkoholového rozpúšťadla.
33. Spôsob podľa nároku 32 vyznačujúci sa tým, že pomocné rozpúšťadlo je metyl terc-butyléter.
34. Spôsob podľa nároku 32 vyznačujúci sa tým, že ďalej zahŕňa krok filtrácie pevného produktu z organického rozpúšťadla pred sušením.
35. Spôsob podľa nároku 32 vyznačujúci sa tým, že ďalej zahŕňa krok vymývania pevného produktu pomocným organickým rozpúšťadlom nasledovne po filtrácii.
36. Spôsob prípravy kryštalického hydrátu vzorca II

Ca⁺⁺

-₀ ch₃ ch₃ .

3,^C~C—(CH₂)4—o—(CH₂)₄—C—Cť .xRjOH (II) o ι i o ^u ch₃ ch₃ vyznačujúci aa tým, že Rj je H a x je číslo od 0 do 10 a ďalej sa vyznačujúci tým, že zahŕňa reakciu alkoholového solvátu vzorca II, kde Ri je nižší alkyl s vodou.
37. Spôsob podľa nároku 36 vyznačujúci aa tým, že pevný produkt obsahuje medzi približne 0,1 a 1,0 ekvivalent vody na ekvivalent vápenatej soli dikarboxylát éteru nasledovne po zmienenej filtrácii a zmienenom sušení.
38. Spôsob podľa nároku 28 vyznačujúci sa tým, že zmienený reakčný krok prebieha pri teplote medzi asi 15 °C a refluxným bodom alkanolového organického rozpúšťadla pri štandardnom tlaku.
39. Spôsob podľa nároku 28 vyznačujúci aa tým, že zmienený reakčný krok prebieha pri teplote medzi refluxným bodom alkanolového organického rozpúšťadla a asi 150 °C pri tlaku vyššom ako je štandardný.
40. Spôsob premeny zlúčeniny hydrát vápenatej soli 6-(5karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalická forma 1 na zlúčeninu hydrát vápenatej soli

6- (5-karboxy-5-metyl-hexyloxy) -2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalická forma 2 vyznačujúci aa tým, že uvedený spôsob zahŕňa kroky: rozklad kryštalickej formy 1 vo vode; miešanie kryštalickej formy 1 a vody; zahrievanie kryštalickej formy 1 a vody počas dobu potrebnú na premenu, až sa objavia kryštáliky formy 2; sušenie pevného produktu na získanie hydrátu vápenatej soli 6-(5-karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalická forma 2, kde kryštalická forma 2 má stechiometrický pomer vápnika k dikarboxylátu v zlúčenine 1:1.
41. Spôsob podľa nároku 40 vyznačujúci sa tým, že ďalej zahŕňa krok filtrácie kryštalickej formy 2 z vody pred zmieneným sušením.
42. Farmaceutické zloženie vyznačujúce sa tým, že obsahuje zlúčeninu vápenatú soľ 6-(5- karboxy-5-metyl-hexyloxy)2,2-dimetylhexánovej kyseliny dohromady s jedným alebo viacerými farmaceutický vhodnými rozpúšťadlami, nosičmi alebo masťami.
43. Farmaceutické zloženie vyznačujúce sa tým, že obsahuje kryštalickú formu vápenatej soli 6- (5- karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny dohromady s jedným alebo viacerými farmaceutický vhodnými rozpúšťadlami, nosičmi alebo masťami.
44. Farmaceutické zloženie vyznačujúce sa tým, že obsahuje hydrát formu vápenatej soli 6-(5- karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 1 dohromady s jedným alebo viacerými farmaceutický vhodnými rozpúšťadlami, nosičmi alebo masťami.
45. Farmaceutické zloženie vyznačujúce sa tým, že obsahuje hydrát formu vápenatej soli 6-(5- karboxy-5-metylhexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny kryštalickej formy 2 dohromady s jedným alebo viacerými farmaceutický vhodnými rozpúšťadlami, nosičmi alebo masťami.
46. Spôsob využitia zlúčeniny podľa nároku 1 vyznačujúci sa tým, že sa používa na liečbu vaskulárnych chorôb.
47. Spôsob využitia zlúčeniny podľa nároku 1 vyznačujúci sa tým, že sa používa na liečbu cukrovky.
48. Zlúčenina podľa nároku 1 v podstate ako sa tu opisuje vyznačujúca sa tým, že sa používa v ktoromkoľvek z príkladov.
49. Spôsob liečby vaskulárnych chorôb pacienta, ktorý to potrebuje, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podávanie terapeuticky účinného množstva vápenatej soli 6 - (5karboxy-5-metyl-hexyloxy)-2,2-dimetylhexánovej kyseliny pacientovi.

50. Spôsob podľa nároku 49 vyznačujúci sa tým, že zlúčenina má kryštalickú formu 1, ktorej difraktogram RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 20 d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 6.760 13.0648 5106 100.0 1497 100.0 0.234 2 8.183 10.7953 1743 34.1 435 29.1 0.200 J 8.560 10.3207 1866 36.5 543 36.3 0233 4 9.239 9.5638 234 4.6 29 1.9 0.096 5 9.760 9.0546 972 19.0 220 14.7 0.181 6 10.569 8.3634 156 3.1 12 0.8 0.061 7 11.141 7.9353 178 3.5 29 1.9 0.130 8 13.760 6.4304 266 5.2 46 3.1 0.138 9 15.599 5.6761 338 6.6 63 4.2 0.148 10 16.740 5.2917 433 8.5 64 4.3 0.118 n 17.420 5.0866 1890 37.0 689 46.0 0291 12 20.639 4.3000 523 102 128 8.5 0.196 13 21.391 4.1505 188 3.7 20 1.3 0.085 14 22.139 4.0119 445 8.7 74 4.9 0.132 15 31.559 2.8326 270 5.3 24 1.6 0.070

51. Spôsob podľa nároku 49 vyznačujúci sa tým, že zlúčenina má kryštalickú formu 2, ktorej difraktogram RTG práškovej difrakcie v podstate obsahuje:

# 2Θ d(A) pík P% oblasť oblasť % FWHM 1 7.259 12.1686 9283 100.0 2482 . 100.0 0.214 2 8.739 10.1100 4191 45.1 603 24.3 0.115 3 93860 8.9628 967 10.4 161 6.5 0.133 4 11.659 7.5838 430 4.6 49 1.9 0.089 5 13.955 6.3408 305 3.3 58 2.3 0.151 6 14.220 6.2233 326 3.5 73 2.9 0.178 7 15.387 5.7537 278 3.0 19 0.7 0.053 8 16.461 5.3806 986 10.6 187 7.5 0.152 9 17.361 5.1039 1490 16.1 348 14.0 0.187 10 18.063 4.9069 1284 13.8 323 13.0 0201 11 19.302 4.5947 871 9.4 166 6.7 0.152 12 19.862 4.4664 686 7.4 142 5.7 0.166 13 20200 4.3923 457 4.9 103 4.1 0.179 14 21.178 4.1918 656 7.1 97 3.9 0.117 15 21.641 4.1031 167 1.8 6 0.2 0.029 16 22.300 3.9833 794 8.6 • Λ⁹² 7.7 0.193 17 23.218 3.8278 247 2.7 23 0.9 0.071 18 24.100 3.6897 183 . 2.0 34 1.3 0.145 19 25.481 3.4928 487 5.2 141 5.7 0.231 20 28.800 3.0974 134 1.4 14 0.6 0.083 21 29.297 3.0459 259 2.8 28 1.1 0.084 -n 30.700 2.9099 287 3.1 20 0.8 0.055