SE452885B - 20,21-dinoreburnamenin-derivat, deras framstellning och farmaceutiska kompositioner - Google Patents

Description

05 452 885 I föreningarna med formeln I kan väteatomen i 3-ställning och väteatomen i 16-ställning var och en ha den ena eller den andra av de tvâ orienteringarna K och B vilket avgör förekomsten av cis- och trans-diastereoisomerer.

I produkterna med formeln I, när R betecknar en alkylgrupp, kan denna föreligga i den ena eller den andra av de möjliga orienteringarna runt kolatomen i 14-ställningen, som bestäm- mer förekomsten av tvâ isomerer.

Blandningarna av de olika isomererna med formeln I och i synnerhet blandningarna av epimererna i 14-ställningen av de produkter med formeln I, vari R betecknar en alkylgrupp, faller naturligtvis inom uppfinningens ram.

Uttrycket alkyl innehållande från 1 till 4 kolatomer kan t ex beteckna en metyl-, etyl-, n-propyl-, isopropyl-, n- -butyl-, isobutylgrupp.

Additionssalterna med mineralsyror eller organiska syror av föreningarna med formeln I kan t ex vara de salter, som bildas med salt-, bromväte-, jodväte-, salpeter-, svavel-, fosfor-, propion-, ättik-, myr-, bensoe-, malein-, fumar-, bärnsten-, vin-, citron-, oxal-, glyoxyl-, asparagin-, as- korbin-, alkylmonosulfonsyrorna såsom metansulfonsyra, etansulfonsyra, propansulfonsyra, alkyldisulfonsyrorna så- metandisulfonsyra, G , B-etandisulfonsyra, arylmonosulfon- syror såsom bensensulfonsyra och aryldisulfonsyror.

Föreliggande uppfinning avser i synnerhet: - de produkter, som definieras av formeln I ovan, vari vä- teatomen i 3-ställningen och väteatomen i 16-ställningen föreligger i trans, i alla möjliga isomera former, race- miska eller optiskt aktiva samt additionssalter av för- eningar med formeln I med mineralsyror eller organiska syror; ' . - de produkter, som definieras av formeln I ovan, vari vä- 05 452 885 teatomen i 3-ställningen och väteatomen i 16-ställningen föreligger i trans, och vari ringen E är mättad, och R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp med från 1 till 4 kolatomer i alla de möjliga isomera formerna, racemiska eller optiskt aktiva samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror.

Bland föreningarna enligt uppfinningen nämnes i synnerhet: (36, 161) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinoreburnamenin; (35, 16«) 14,15-dihydro-20,21-dinoreburnamenin; (36, 16=) 14-metyl-20,21-dinoreburnamenin; (38, 16«) 20,21-dinoreburnamenin.

Enligt uppfinningen kan föreningarna såsom de definieras med formeln I enligt ovan i sina racemiska eller optiskt aktiva former samt additionssalter med mineralsyror eller organiska syror av föreningarna med formeln I framställas med ett för- farande, som kännetecknas av att man utsätter en förening med formeln II: II vari R' betecknar en väteatom eller en alkylgrupp med från 1 till 4 kolatomer med ett dehydratiserande medel, erhåller en förening med formeln IA, motsvarande en förening med formeln I, vari ringen E bär en dubbel endo-bindning i 14- -15-ställning, R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp med från 1 till 4 kolatomer eller vari ringen E bär en exo- dubbelbindning i 14-ställning, R betecknar i det senare fallet en grupp = CH2, behandlar, om så önskas, produkten med formeln IA med ett reducerande medel för framställning 05 452 885 av en produkt med formeln IB, motsvarande en förening med _formeln I, vari ringen E inte bär endo- eller exo-dubbel- bindning och R sålunda betecknar en väteatom eller en al- kylgrupp med från 1 till 4 kolatomer och behandlar, om så önskas, den ena eller den andra av de erhållna föreningar- na med formeln I med en mineralsyra eller en organisk syra för att därav bilda saltet.

Den använda produkten med formeln II kan föreligga i race- misk eller optiskt aktiv form.

Produkten eller produkterna med formeln I erhållna utgåen- de ifrån produkten med formeln II föreligger naturligtvis i motsvarande stereokemiska form.

Produkten med formeln II kan användas i form av en av dess additionssalter med mineralsyror eller organiska syror.

Om så är fallet kan man erhålla föreningen med formeln I i försaltad form eller ej beroende på de valda förfaringsbe- tingelserna.

Genom dehydratisering av en produkt med formeln II, vari R' betecknar en metylgrupp, erhåller man en produkt med for- meln I, vari ringen E bär en dubbel endo-bindning i 14-15- -ställningen och R betecknar en metylgrupp eller samma pro- dukt i en isomer form, vari ringen E inte bär dubbel endo- bindning men bär en grupp CH2 = i 14-ställning eller en blandning av dessa tvâ isomera former.

Vid de föredragna betingelserna för utövning av uppfinning- en utföres det ovan beskrivna förfarandet på följande sätt: a) Dehydratiseringsmedlet är en syra såsom salt-, bromväte-, svavel-, ättik-, paratoluensulfon-, metansulfonsyra eller ett funktionellt syraderivat såsom en syraklorid.

Dehydratiseringen kan utföras i ett lösningsmedel såsom to- luen, xylen, tetrahydrofuran.' 05 452 885.

Dehydratiseringsreaktionen utföres vid en temperatur från rumstemperatur till reaktionsblandningens återloppskokníngs- temperatur.

Genom dehydratisering av en produkt med formeln II, vari R' betecknar en metylgrupp, erhåller man: - när man arbetar i vattenfri miljö och under användning av ett funktionellt syraderivat, en blandning av en produkt med formeln I, vari R betecknar en grupp = CH2, och dess isomer med formeln I vari ringen E bär en dubbel endo- bindning och R betecknar en metylgrupp. De tvâ isomererna kan separeras t ex genom selektiv kristallisation i ett lämpligt lösningsmedel. - när man arbetar i sur vattenmiljö erhåller man till stör- re delen produkter med formeln I, vari ringen E bär en dubbel endo-bindning och R betecknar en metylgrupp.

Man kan utgående från produkter med formeln I, vari R be~ tecknar en grupp = CH2, erhålla isomerer med formeln I, vari ringen E bär en dubbel endo-bindning och R betecknar en me- tylgrupp genom att behandla den första produkten med en sy- ra i vattenmiljö. Syran kan vara saltsyra, svavelsyra, fos- forsyra. b) Reduktionsmedlet med vilket produkten med formeln IA om- sättes, kan vara väte i närvaro av en katalysator såsom platina, palladium.

Reduktionsreaktionen utföres i ett organiskt lösningsmedel eller en blandning av lösningsmedel såsom t ex en alkohol såsom etanol, propanol, metanol, en eter såsom etyleter, tetrahydrofuran eller ett aromatiskt kolväte såsom toluen, bensen, xylen.

Reduktionsreaktionen kan utföras vid en temperatur från -20°C till reaktionsblandningens återloppskokningstempera- tur. 05 452 885 Det är fördelaktigt att genomföra den vid rumstemperatur. c) För saltningsreaktionen utföres på vanligt sätt t ex i ett lösningsmedel eller en blandning av lösningsmedel såsom etanol, tetrahydrofuran, aceton eller etylacetat.

De optiskt aktiva formerna av föreningarna med formeln I, såsom de definieras ovan, kan framställas direkt utgående ifrån motsvarande föreningar med formeln II eller vidare genom spaltning avracemat med de inom tekniken kända meto- derna.

Mängden av föreningarna med formeln I, såsom de definieras ovan, samt deras additionssalter med mineralsyror eller or- ganiska syror har intressanta farmakologiska egenskaper: de är i synnerhet cerebrala syrealstrare och kärlreglerande medel av stort värde. De medför i synnerhet en ökning av det cerebrala flödet på den cerebrala mikrocirkulations- nivån. i Dessa egenskaper gör att de är lämpliga att användas inom terapin och uppfinningen avser även såsom läkemedel före- ningarna såsom de definieras med formeln I ovan, varvid dessa föreningar med formeln I föreligger i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt aktiva samt addi- tionssalter av föreningarna med formeln I med farmaceutiskt godtagbara mineralsyror eller organiska syror.

Föreliggande uppfinning avser i synnerhet: - ett läkemedel, såsom det definieras ovan, kännetecknat av att i formeln I föreligger väteatomen i 3-ställningen och väteatomen i 16~ställningen i trans; - ett läkemedel, såsom det definieras ovan, kännetecknat av att i formeln I föreligger väteatomen i 3-ställningen och väteatomen i 16~stäl1ningen i trans, - ringen E är mättad och R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp med från 1 till 4 kolatomer. 05 452 885 Uppfinningen avser i synnerhet såsom läkemedel: (38, 16“) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinoreburnamenin; (3B, 16=) 14,15-dihydro-20,21-dinoreburnamenin; (36, 16=) 14-metyl-20,21-dinoreburnamenin; (36, 16«) 20,21-dinoreburnamenin samt additionssalter därav med farmaceutiskt godtagbara mi- neralsyror eller organiska syror.

Mängden av föreningar såsom de definieras ovan utgör mycket användbara läkemedel inom humanterapin, i synnerhet vid be- handling av cerebrala vaskulopatier och av alla de syndrom, som orsakas av en förändring av hjärncirkulationen. De till- lâter förhindring av eller minskning av cerebrala arterio- sklerösa effekter, cerebrala cirkulationsrubbningar, hjärn- hinnehemorragier eller cerebrala hemorragier. De kan använ- das i synnerhet vid behandling av cerebrala insufficienser, cerebrovaskulära olyckor och traumatiska tillstånd i krani- et.

Den dagliga dosen varierar beroende på den använda produk- ten, den behandlade individen och âkomman i fråga och kan t ex vara mellan 10 mg och 200 mg per dag hos den vuxne vid oral administrering.

Föreliggande uppfinning avser även farmaceutiska komposi- tioner innehållande såsom aktiv huvudbeståndsdel minst ett av de nämnda läkemedlen.

Dessa kompositioner framställes så att de kan administreras via matsmältningskanalen eller parenteralt. De kan vara fas- ta eller vätskor och föreligga i de farmaceutiska former, som ofta användes inom humanmedicinen, såsom t ex enklare överdragna tabletter, gelatinkapslar, granulat, supposito- rier, injicerbara beredningar. De framställes med de vanli- ga metoderna.

Den aktiva beståndsdelen eller de aktiva beståndsdelarna kan inkorporeras däri med utdrygningsmedel, som vanligen använ- 452 885 des i dessa farmaceutiska kompositioner, som talk, gummi arabicum, laktos, stärkelse, magnesiumstearat, kakaosmör, vehiklar, vattenhaltig eller ej, fetter av animaliskt el- ler vegetabiliskt ursprung, paraffinderivst, glykoler, olika vät-, disperger- eller emulgermedel, konserverings- medel.

De föreningar med formeln II, vari R' betecknar en väte- atom i deras racemiska och optiskt aktiva former, beskrives i det franska patentet nr. 2 381 048.

De föreningar med formeln II, vari R' betecknar en alkyl- grupp med från 1 till 4 kolatomer, kan framställas genom alkylering i 14-ställning av en motsvarande förening in- nehållande en oxo-grupp i 14-ställning.

Sådana 14-oxo-föreningar är kända och kan framställas t.ex. såsom anges i det franska patentet nr. 2 190 113 och i det belgiska patentet nr. 764 166.

Alkyleringen av dessa produkter kan utföras genom inverkan_ av en alkyl-magnesiumhalogenid i ett organiskt lösningsme- del.

Ett sådant framställningsexempel återges nedan i den experi- mentella delen. 05 -35 452 885 Följande exempel beskriver uppfinningen utan att begränsa den på något sätt.

Exempel 1: (36, 161) 20,21-dinoreburnamenin Man blandar 2 g (36, 16«) 14-15-dihydro-20,21-dinoreburna- menin-14-ol (isomer vars kemiska förskjutning av vätet i 145-ställning är 6,26 ppm) 25 cm3 toluen, tillsätter 0,002 g paratoluensulfonsyra, âterloppskokar under 3 timmar och 30 minuter och destillerar till torrhet under sänkt tryck. Man âterupptar återstoden i 50 cm3 kokande etylacetat, filtre- rar lösningen och sköljer med 3 X 5 cm3 etylacetat. Man koncentrerar den erhållna lösningen vid normalt tryck till en volym av ca 15 cm3, kyler till 18 - 20°C under 1 timme, centrifugerar, tvättar med etylacetat vid 20°C, torkar vid 60°C och erhåller 1,4 g av den önskade produkten. Smp = 154°c. ꧧly§= Beräknat: C% Funnet : §ëB:§E§EEEEE toppar vid toppar vid toppar vid toppar vid 81,5 H% 7,24 N% 11,19 81,2 7,4 11 (deuteriepyridin) (ppm) till 5,1 väte i 15-ställning 6,9 till 7,1 väte i 14-Ställning 7 till 7,6 aromater :1 ä 3,3 andra protoner Exempel 2: (36, 16=) 14,15-dihydro-20,21-dinoreburnamenin Man hydrerar 10 g av den produkt, som erhölls i Exempel 1, 150 cma metylenklorid i närvaro av 1 g aktivt kol innehål- lande 10% palladium. Efter 3 timmar och 30 minuter centri- fugerar man det aktiva palladiumkolet och tvättar med mety- lenklorid. Den erhållna lösningen filtreras igenom alumini- umaxia och aestiiieras till torrnet under sänkt tryck. man erhåller 10,1 g av den önskade produkten, som man renar ge- 05 452 885 nom utröring till en deg under omrörning 30 minuter vid - 25°C i 50 cm3 aceton. Man centrifugerar, sköljer med aceton och erhåller 7,6 g renad produkt. Smp = 132°C. êëëlyšï Beräknat: C% 80,90 H% 7,99 N% 11,10 Funnet : 81,0 8,2 10,9 ygg:§p§k§rgm (deuteriepyridin) (ppm) - ingen absorption i de våglängder, som kan avslöja närva- ron av etylenprotoner i 14-15-ställning. - toppar 23.42 till 4,4; tva vateatomer 1 14-ställning - toppar 17 till 7,7: aromater - toppar ï1,08 till 2,08: andra protoner Exempel 3: (36, 16=) (2) 14,15-dihydro-14-metylen-20,21- dinoreburnamenin Man blandar under 2 timmar 550 cm3 metylmàgnesiumbromid i lösning 0,8 M i tetrahydrofuran, som man kyler vid OOC i2°C och 30 g (38, 16=) (i) 20,21-dinoreburnamenin-14 (15H)-one i lösning i 400 cm3 tetrahydrofuran, rör under 5 timmar och låter temperaturen återgå till 19°C, håller sedan under 15 timmar under omrörning. Man âterloppskokar under 2 timmar och 30 minuter, bringar temperaturen till 10°C, tillsätter sakta under 1 timme och 40 cm3 acetylklorid under det att temperaturen får anta 25°C. Man rör om ytterligare under 1 timme och 30 minuter och häller sedan i 1 liter vatten- - lösning mättad med ammoniumklorid innehållande 100 cm3 kon- centrerad ammoniak (pH >10), separerar genom dekantering vattenfasen, som man extraherar med etylacetat, tvättar med hjälp av en vattenlösning innehållande hälften natrium- hydroxid, torkar, bringar till torrhet och erhåller 44 g produkt, som man rör ut till en deg i 100 cm3 aceton under âterlopp under 1 timme. Man kyler till 20oC, centrifugerar och erhåller 9 g önskad rå produkt (Smp = 146°C), som man renar genom kristallisation i etanol. Man erhåller 7,14 g (33, 16I) ii) 14,15-dihydro-14-metylen-20,21-dinoreburna- menin, renad; Émp = 148°C. 0 05 452 885 11 gnglyg: (C18H20N2) Beräknat: C% 81,78 H% 7,62 N% 10,59 Funnet : 81,9 7,7 10,6 ë§B:§Bs맧sr (CDCl3> (PPm> - 4,5 och 5,2 : CH2 = - från 7,1 till 7,9 : aromater - från 1 till 3,21 : andra protoner I exemplet ovan erhålles (3B,16“) 14,15-dihydro-14-metyl- -20,21-dinoreburnamenin~14-ol intermediärt utan att iso- leras.

Nedan återges ett exempel på framställning och isolering av (38, 16«) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinoreburname- nin-14-ol och dess klorhydrat.

I 280 cm3 av en metylmagnesiumbromidlösning 0,96 N i tet- Iahydrofuran satsar man under 1 timme vid +5°C i2°C, 18 g (ss, 1s«) rzo,21-ainoreburnamenin-14 (1sH)-one 1 zoo cm3 tetrahydrofuran, man låter återgå till rumstemperatur och rör under 93 timmar. Sedan häller man i 1,5 liter vatten- lösning mättad med ammoniumklorid, centrifugerar fâllning- en, tvättar med vatten, torkar under sänkt tryck vid 60°C och erhåller 16,9 g av den önskade råa produkten.

Man renar genom att lösa upp 14,5 g av den råa produkten 1 100 cm3 varm almerylformamia ïI1oo°c), filtrerar, tvät- tar med 10 cm3 varmt lösningsmedel, låter sedan kristalli- sera 3 timmar vid rumstemperatur, centrifugerar, tvättar, torkar under sänkt tryck vid 60°C och erhåller 11,1 g av den renade önskade produkten i ickeförsaltad form. Smp ='226o°c.

Genom HPLC-kromatografi av denna produkt noterar man när- varon av tvâ epimerer i 14~ställning i förhållandet 79%- 21%. 05 452 885 12 lérl§:ê¿äyëz9:15:as§y;:29r21:§ia9:§ëus§§m§§¿æ:l2:9;= Man löser 6 g av den produkt, som erhölls ovan i 500 cma dioxan vid 60°C, bringar lösningen till 20°C, tillsätter 2 cm3 koncentrerad saltsyra, rör om under 5 timmar vid rumstemperatur, filtrerar, rör ut till en deg i dioxan sedan i eter, torkar under sänkt tryck vid 60°C och er- håller 6 g av den önskade produkten i form av klorhydrat, som man renar genom behandling med 1 N natriumhydroxid, upplösning av den erhållna produkten i dioxan och utfäll- ning med hjälp av en etanolisk saltsyralösning. Man er- håller 4 g av den önskade produkten renad i form av klor- hydrat av (38, 16fl) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinore- burnamenin-14-ol. Smp = 250°C.

Iíëlëârëêlfššëfll (DMSO) (ppm) - 1,65 : CH3 axiell - 6,3 : OH ekvatoriell - 6,8 ä 7,8 : aromatiska ênalysz (C H ClN 0) 18 23 2 Beräknat: C% 67,81 H% 7,27 Cl% 11,12 N% 8,78 Funnet = 67,8 7,3 10,9 8,5 Exempel 4: (38, 16=) (1) 14-metyl-20,21-dinoreburnamenin Man indunstar moderlutarna från de 9 g produkt, som iso- Vlerades i Exempel 3, återupptar med etyleter, filtrerar, bringar till torrhet och erhåller 30 g önskad produkt i form av olja, som man löser upp i 100 cm3 etylacetat, tillsätter vid rumstemperatur under omrörning 33 cm3 av en etanolisk 1,8 N saltsyralösning. Man håller under om- rörning 17 timmar vid rumstemperatur (pH-värdet är 5 - 6).

Man centrifugerar, tvättar med etylacetat, torkar under sänkt tryck vid 60°C och erhåller 13,7 g klorhydrat av den önskade råa produkten (Smp = 240 - 260°C) av vilken man renar ett prov om 5,4 g på följande sätt: 05 452 885. 13 Man behandlar med koncentrerad ammoniak, extraherar med eter, torkar, bringar till torrhet, erhåller 4 g rå pro- dukt, som man återupptar med isopropyleter, filtrerar, bringar till torrhet, âterupptar i petroleumeter och lå- ter kristallisera.

Man erhåller 2 g av den önskade rena produkten. Smp = =1oo°c. ê§É;Y§= (c13H20N2) Beräknat: C% 81,78 H% 7,62 N Funnet : 81,7 7,6 N ll ,59 ,5 ggßjspçktrgm (deuteriekloroform) (ppm) - 2,47 ' : CH 3 - 4,75 : H etyleniskt - 7 ä 7,7 : aromatiska - 1 ä 3,3 : andra protoner Exempel 5: (38, 16“) (t) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-di- noreburnamenin och dess klorhydrat Man blandar 8,3 g produkt, erhâllen i Exempel 3, 600 cm3 metanol och 1 g platinaoxid och rör om under väteatmosfär ' under 6 timmar vid rumstemperatur (man noterar att 889 cm3 väte absorberas). Man filtrerar katalysatorn, tvättar med e metanol, bringar till torrhet under sänkt tryck och erhål- ler 8,5 g (38, 16“) (i) 14, 15-dihydro-14-metyl-20,21-di- noreburnamenin i rå form.

§MB:§9ek:r2m (DMSO) (ppm) Den analyserade produkten utgör tvâ isomerer - väte i 14-ställning vid 4,25 ppm: isomer med väte i 14- -axiell (1/4 av den analyserade råa produkten) - väte i 14-ställning vid 4,75 ppm: isomer med väte i 14- -ekvatoriell (3/4 av den analyserade råa produkten) Eremëëëll§in9_§Y_kl9rhy§re:= Man löser den råa produkten , erhållen ovan, i 50 cm3 eta- 05 452 885 14 nol, och tillsätter under omrörning 12 cm3 av en 1,8 M etanolisk saltsyralösning. Man erhåller kristaller, som man centrífugerar och rör ut till en deg med etanol. Man torkar under sänkt tryck vid 60°C och erhåller 4,1 g av den önskade produkten. Smp >260°C. ênalys: (C18H23N2Cl) Beräknat: C% 71,39 H% 7,65 Cl 11,71 N = 9,25 Funnet : 71,1 7,8 11,7 N = 8,9 §ëB:§Peë252m - inga absorptionsband motsvarande etylenprotoner - 1,18 - 1,28: CH3-CH- - 4,25 : väte i 3-ställning - 4,75 ' : väte i 14-ställning ekvatoriellt - 7 - 7,6 : aromatiska Exemgel 6: Farmaceutiska former a) Eahlgttggz man har framställt tabletter med följande formel: - (38, 16“) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21~dinore- burnamenin ....Ä . . . . .... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 30 mg - utdrygningsmedel q s för en tablett upp till ... 150 mg _ Exempel på utdrygningsmedel: (laktos, sädstärkelse, behandlat stärkelse, risstärkelse, magnesiumstearat, talk). b) gelatinkagglar: man har framställt gelatinkapslar med följande sammansättning: _ (38, 16«) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinore~ burnamenin ....................... . . . . . . . . . . .... 30 mg - utdrygningsmedel q s för en gelatinkapsel upp till . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 150 mg Exempel på utdrygningsmedel: (talk, magnesiumstearat, aerosil). 05 452 885 FARMAKOLOGISK UNDERSÖKNING 1) Dnêeëëökning a!_§sn akuëfl t°ëisi§eës§ Man har utvärderat de dödliga doserna DL för de olika un- 0 dersökta föreningarna efter oral administrering till råtta.

DL0 benämnes den maximala dos, som inte orsakar någon död- lighet under 8 dagar.

De erhållna resultaten är följande: Produkt enligt exempel DL0 i mg/kg 2 200 3 600 4 200 100 2) Es§§_sy_ëz29ëer_ëa9§i Man använder hanråttor med en vikt av 20-22 g, fastande sedan fem timmar, fördelade i grupper om 10 djur.

Man administrerar den produkt, som skall undersökas, till djuren oralt i suspension i en lösning innehållande 0,5% metylcellulosa. Femton minuter efter administrering av produkten placerar man djuren i en 2 liters exikator vari man snabbt bringar trycket till 90 mm Hg med en pump och noterar överlevnadstiden uttryckt i sekunder.

Man noterar ökningen av överlevnadstiden, uttryckt i pro- cent, för de behandlade djuren i förhållande till kontroll- djuren, utsatta för samma betingelser.

Man har erhållit följande resultat: Produkt enligt exempel Doser mg/kg ökning av över- per os levnadstiden 2 50 106% 2 10 20% 4 50 32% 59% 452 885 16 Farmakologiska jämförande försök Jämfiüande försök har utfihis mellan fönafinoarna enlnyzex. 2 och 5 i fö- religgande ansökan een föreningen enligt exempel 2 i een franska patent- skriften 2 381 048 och en förening enligt den tyska utlägg- ningsskriften 2 330 990.

I. Anoxi erhallen genom avbrytning av konstgjord andning på rätta.

Metod: Rattar av nankön (cnanes luven en) med en vin av zso-soo g har använts, sövda med etyleter och trakeotomiserade, immobi- liserade med klorhydrat och d-tubokurarin 0.5 mg/kg i.v. och utsatta för konstgjord andning med en blandning av 70% kväve- monoxid och 30% syre.

Den rektala temperaturen hölls vid ca 37°C. Efter det att huvudskâlen tagits bort implanterades och fixerades två silverkloridelektroder med tandcement i regionen för 'visuella cortex' (Al. 12/3) och lilla hjärnan för att registrera EEG.

En arteria carotis communís kateteriserades för kontinuerlig registrering av det arteriella trycket (P.A.) och en svansven för administreringen av produkterna.

Anoxin orsakades genom stopp av andningspumpen. Den använda tekniken liknar den, som beskrives av Rosner et al (Arch.

Int. Pharmacodyn. 194. 375 (1971).

Produkterna, lösta i fysiologiskt serum i form av klorhydrat injicerades 3 minuter före avstängningen av pumpen. Den cerebrala resistansen. tiden i sekunder som förlöper mellan avstängningen av den konstgjorda andningen och utplaningen av EEG-kurvan. 452 885 17 I början kontrollerades syretrycket, koldioxidtrycket. pH och om så erfordrades reglerades andningsfrekvensen för att er- hålla normala värden.

En annan kontroll utfördes 90 sekunder efter anoxins början.

A andra sidan inregistrerades följande hemodynamiska para- metrar: medelvärdet för det arteriella trycket och hjärtfrek- vensen.

Resultat Dos mg/kg Effekt på resistans- intravenös tiderna i EEG administrering Produkt enligt exempel 4 10 - 15% BF 22381041 Produkt enligt exempel 2 10 + 14% enligt uppfinningen Produkt enligt exempel 5 10 + 6% enligt uppfinningen De två produkterna enligt föreliggande uppfinning ökar resistanstiderna för EEG i motsats till produkten enligt tidigare teknik.

II. Bestämning av enolas på mus Han använde den teknik som beskrivits av Steinberg R. et al Neuron - Specific enolase in cerebrofluid : a possible indicator of neuronal damage in kainic acid lesions - Neutroscience Letters. 1984. gå. 147-150.

Den neurotoxiska förening som använts är kainsyra, som ges subkutant i en mängd om 35 mg/kg.

Den produkt, som skall undersökas. injiceras intraperitonealt 1 timme före kainsyran. Han ger den specifika enolasneuron- dosen eller y-7 24 timmar efteråt i serum. 452 885 18 Resultatet är uttryckt i den procentuella minskningen av enolaset 1 serum 1 förhållande till en kontrollgrupp.

Dos mg/kg 2 minskning desetylepieburnamonin 10 - 24% produkt enligt exempel l 10 - 39% 1 föreliggande p.ans.

Man observerar en minskning av enolaset i serumet, vilken minskning är avsevärt större med produkten enligt föreliggan- de uppfinning än med produkten enligt tidigare teknik.

Claims (12)

05 10 15 20 25 30 35 Fä 452 885 Patentkrav

1. Föreningar, k ä n n e t e c k n a d e a v att de har formeln I: (I) vari R betecknar en väteatom, en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer eller en grupp = CH2, varvid den vâgiga linjen, som förenar gruppen R med ringen E beteck- nar en enkel bindning, när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, eller en dubbelbindning, när R betecknar en grupp = CH2, och den streckade linjen i ringen E anger att ringen kan bära en dubbel endo-bindning i 14-15-ställning när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, vilka föreningar med formeln I föreligger i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt ak- tiva, samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror.

2. Föreningar med formeln I enligt krav 1, k ä n n e - t e c k n a d e a v att väteatomen i 3-ställningen och väteatomen i 16-ställningen föreligger i trans, i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt aktiva samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror.

3. Föreningar med formeln I enligt krav 1, k ä n n e - t e c k n a d e a v att väteatomen i 3-ställningen och OS 10 15 20 25 30 35 452 885 lào väteatomen i 16-ställningen föreligger i trans, och vari ringen E är mättad och R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt aktiva samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror.

4. Förening med formeln I enligt krav 1, k ä n n e - t e c k n a d a v att den utgöres av (38, 16=) 14,15-di- hydro-14-metyl-20,21-dinoreburnamenin samt additionssalter därav med mineralsyror eller organiska syror.

5. Förening med formeln I enligt krav 1, k ä n n e - t e c k n a d a v att den utgöres av vilken som helst av föreningarna med följande namn: - (3B, 16«) 14,1S-dihydro-20,21-dinoreburnamenin, - (36, 16«) 14-metyl-20,21-dinoreburnamenin, - (36, 16«) 20,21-dinoreburnamenin samt additionssalter därav med mineralsyror eller organiska syror.

6. Sätt att framställa föreningar med formeln I (I) vari R betecknar en väteatom, en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer eller en grupp = CH2, varvid den vâgiga linjen, som förenar gruppen R med ringen E beteck- nar en enkel bindning, när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, eller en dubbelbindning, när R betecknar en grupp = CH2, och 05 10 15 20 25 30 ä* 452 ses den streckade linjen i ringen E anger att ringen kan bära en dubbel endo-bindning i 14-15-ställning när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, vilka föreningar med formeln I föreligger i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt ak- tiva, samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror, k ä n n e t e c k - n a t a v att man omsätter en förening med formeln II: II vari R' betecknar en väteatom eller en alkylgrupp inne- hållande från 1 till 4 kolatomer med ett dehydratiserings- medel, erhåller en förening med formeln IA, motsvarande en förening med formeln I, vari ringen E bär en dubbel endo-bindning i 14-15-ställning, R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer eller vari ringen E bär en dubbel exo-bindning i 14-ställ- ning, vanfid_Ri det senare fallet betecknar en grupp = CH2, behandlar, om så önskas, produkten med formeln IA med ett Kreducerande medel för framställning av en förening med formeln IB, motsvarande en förening med formeln I, vari ringen E inte bär dubbel endo- eller exo-bindning, och R sålunda betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehål- lande från 1 till 4 kolatomer, behandlar, om så önskas, den ena eller den andra av de erhållna föreningarna med formeln I med en mineralsyra eller en organisk syra för att därav bilda saltet. 05 10 15 20 25 30 35 452 885 'âà

7. Föreningar med formeln I (I) vari R betecknar en väteatom, en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer eller en grupp = CH2, varvid den vågiga linjen, som förenar gruppen R med ringen E beteck- nar en enkel bindning, när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, eller en dubbelbindning, när R betecknar en grupp = CH2, och den streckade linjen i ringen E anger att ringen kan bära en dubbel endo-bindning i 14-15-ställning när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, vilka föreningar med formeln I föreligger i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt ak- tiva, samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror, för användning som terapeutikum.

8. Föreningar enligt krav 7, k ä n n e t e c k n a d e av att i formeln I föreligger väteatomen i 3-ställning och väteatomen i 16-ställning i trans.

9. Föreningar enligt krav 7, k ä n n e t e c k n a d e av att i formeln I föreligger väteatomen i 3-ställning och väteatomen i 16-ställning i trans, ringen E är mättad och R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer. 05 10 15 20 25 30 35 452 885 'QS

10, (36, 16a) 14,15-dihydro-14-metyl-20,21-dinoreburnamenin samt additionssalter därav med farmaceutiskt godtagbara mineralsyror eller organiska syror för användning som terapeutikum.

11. (38, 16a) 14,15-dihydro-20,21-dinoreburnamenin, (36, 16u) 14-metyl-20,21-dinoreburnamenin, (38, 16u) 20,21- -dinoreburnamenin samt farmaceutiskt godtagbara additions- salter därav med mineralsyror eller organiska syror för an- vändning som terapeutikum.

12. Farmaceutiska kompositioner, k ä n n e t e c k n a d e av att de såsom aktiv nuvudbestândsdel innehåller minst en förening med formeln I (I) vari R betecknar en väteatom, en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer eller en grupp = CH2, varvid den vågiga linjen, som förenar gruppen R med ringen E beteck- nar en enkel bindning, när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, eller en dubbelbindning, när R betecknar en grupp = CH2, och den streckade linjen i ringen E anger att ringen kan bära en dubbel endo-bindning i 14-15~ställning när R betecknar en väteatom eller en alkylgrupp innehållande från 1 till 4 kolatomer, vilka föreningar med formeln I föreligger i alla möjliga isomera former, racemiska eller optiskt ak- tiva, samt additionssalter av föreningarna med formeln I med mineralsyror eller organiska syror enligt vilket som helst av kraven 7-11. V