SE448385B - 4"-deoxi-4"-acylamido-derivat av erytromycin-a - Google Patents

Description

10 15 .ll 20 25 30 35 t44s ss5'f 4 Üf ¿ *positiva mikroorganismer; Många av de beskrivna föreningf varna uppvisar också aktivitet gentemot gramnegativa mikro- organismer. Föreningarna enligt förevarande uppfinning har nedan angivna formel, i vilken det vågformiga strecket som förbinder acylaminogruppen vid 4"-kolatomen är allmän för och innefattar båda de.epimera formerna: vari Z ¿är ~ 1 m' - (cnz) m-c (m3) 3; (b) -cr1'(~R5) :I e , K V'.x K Y' , (g) u eller (a) ;e(cn¿)_m-heferceyk1y1; i m är 0 eller 1; H a R5 är väte, klor eller alkoxi med 1-4 kolatomer; XV är väte, klor, brom, fluor, alkyl med 1-4 kolatomer eller aikogi med 1~4 kqlatamer; Y .är X eller trifluormetvl; _heterocyklyl är tienyl, furyl eller tiazolyl eller amonometylderivat av nämnda heterocyklyler.

Föreningarna som faller under ovan angivna allmänna formell inklusive de epimera formerna och de farmaceutiskt godtag- bara salterna därav är effektiva antibakteriella medel geni* 10 -15 20 25 30 35 3 e, 448 sas t'emot grampositiva mikroorganismer, exempelvis Stephylo- coccus aureus och Streptococcns pyogenes, in vitro och många därav är aktiva in vivo vid parenteral och oral ad- ministration, Många av föreningarna (och salter därav) är _oçkså aktiva gentemot vissa gramnegativa mikroorganismer, såsom kocker, exempelvis Pasteurella multocida och Neisseria *sicca.' ,^På grund-av relativt större aktivitet och styrka gynnas de ' föreningar enligt uppfinningen, som är sammanställda i nedan- 'ïstående tabell: (a) - (cH2)¿n-c(cr13)3: M = 0, 1; * s- - i i x (b), cH(R5)-@: _' Y L där R 5 = H, Cl eller OCH3 i Y (6) -(CH2)m-' heterocyklyl; m = 0 Föredraqna föreningar enligt uppfinningen är de bland de i ovanstående tabell sammanställda, i vilka Z är -C(CH3)3, .- dr Y 1 _ i ,CH2-<êÉÉ:' 1-{É::ër, där Y är väte, klor eller fluor; eller 4-metyl-5-tiazolyl.

Speciellt föredragna bland de i ovanstående tabell samman- 'ställda för de, i vilka Z representerar ovannämnda hetero- cyklylgrupp.

Föreningar som faller under den ovan angivna formeln fram- ställes genom att man med lämpligt acyleringsmedel acylerar, v10 15 20, 25 30* 35 1 aminoderivatet i ett gentemot reaktionen inert lösnings- ~44s3sspsiv p4i det motsvarande 4"-aminoderivatet. Acyleringsreaktionen genomföres på det sättet, att man bringar det lämpliga 4¿f_¿e fb dmedel i kontakt med ett reaktivt derivat av det lämpligak acyleringsmedlet. Bland typiska reaktiva derivat av acylef _ l i zringsmedlen kan nämnas syrakloriderna, anhydriderna (enkla eller blandade), syraazid, en aktiv ester eller tioester A med exempelvis N-hydroxiftalimid, N-hydroxisuccinimid, en, c _fenol eller tiofenol, och "kondensationsprodukten" med ett "kondensationsmede1", såsom en karbodiimid, en alkoxiacety- len, N,N'-karbonyldiimidazol, N,N'-karbonylditriazol och fhexahalogencyklotrifosfatriaziner.' . Föredraden acvlerinš enligt förevarande uppfinning innefat- _tar-omsättning-av det lämpliga 45-aminoförsteget för för- eningarna med syrakloriden (eller bromiden) av det lämpliga, acyleringsmedlet i närvaro av en syraacceptor. Lämpliga syra- ,'acceptorer är tertiära,aminer, såsom trialkylaminer med 1-4 kolatomer per alkyl§ruPP, N~metylanilin, pyridin, N-etylpi~l peridin och N-metylmorfolin, När man som lösningsmedel an- vänder ett vattenhaltiqt system, kan man som syraacceptor *använda en oorganisk bas, exempelvis en alkalimetallhydroxid. _Acyleringen kan genomföras i ett vattenhaltigt eller icke' 7 vattenhaltigt lösningsmedelssystem. I vattenhaltiga system 'genomföres reaktionen i allmänhet vid ett pH mellan 6 och ca 9 och vid en temperatur mellan ca 0 och ca 50°C. Den kan också genomföras i instabila emulsioner-av vatten och med _ vatten icke blandhara, organiska lösningsmedel, såsom metyl- isohutylketon och lägre alkylacetat inom ett pH-intervall mellan ca 2 och ca 4. I icke vattenhaltiga system genomföres reaktionen vid en temperatur.mellan cavO och ca 5000 i när- la varo av en i lösningsmedlet löslig syraacceptor, exempelvis en av de ovan uppräknade tertiära aminerna.

' Man föredrar också omsättning av den lämpliga 4"-aminoför- e eningen med syraformen av det lämpliga acyleringsmedlet i närvaro av en karbodiimid. Detta förfarande föredrages ofta '10 15 201 25 30 ...___,.... ..__.._._._.._>. V V. 5 g p 448 ass :pâ grund av att det är bekvämt; att reaktionskomponen- terna är lättillgängliga och på grund av produktutbytet.

När man använder karbodiimid som kondensationsmedel, kan man använda vattenhaltiga eller icke vattenhaltiga lös- __ningsmedelssystem; När ett vattenhaltigt system användes, d*injusteras pH lämpligen mellan ca 5 och ca 8, helst mel- lan ca 6.och ca 7.'Vid.en typisk utföringsform blandas reaktionskomponenterna syra och karbodiimid i ekvimolära proportioner i ett lämpligt lösningsmedel (tetrahydrofuran, 'dioxan), och en lösning av vatten och ett med vatten bland- ","bart¿organiskt lösningsmedel (vatten plus dioxan eller tet- grahydrofuran) innehållande reaktionskomponenten aminomakro- lid tillsättes vid rumstemperaturen. Blandningen omröres i 'flera timmar, till dess att reaktionen är slutförd. Tempe- raturer mellan ca -5 och ca +30°C tillämpas i allmänhet. I *de flesta fall användes kondensationsmedlet i ett överskott upp till ca 10 %. Den acylerade produkten utvinnes på inom här ifrågavarande industriområde känt sätt.

~Syraadditionssalter av föreningarna enligt uppfinningen framställes lätt genom behandling av föreningar med for- meln ovan med minst en ekvimolär mängd av den lämpliga sy? ran i ett gentemot reaktionen inert lösningsmedel. När det föreligger fler än en basisk grupp i en förening möjliggö- res genom tillsats av en tillräcklig mängd syra för neutra- 1 lisation av var och en av de basiska grupperna bildning av polysyraadditionssalter. Syraadditionssalterna utvinnes genom avfiltrering, om de är olösliga i det gentemot reak- tionen inerta lösningsmedlet, genom utfällning åstadkommenš genom tillsats av ett icke lösningsmedel för syraadditions- saltet eller genom indunstning av lösningsmedlet. Represen- _ tativa bland sådana salter är hydroklorid, hydrobromid, fosfat, sulfat;_formiat, acetat, propionat, butyrat, citrat, glykolat, laktat¿ tartrat; malat, maleat, fumarat, glukonat, dstearat, mandelät1.pam0aL,ebnnuoat, suuuinut, laktaL, p«Lu~ luensulfonat och_aspartat, men uppfinningen är icke begränf sad till dessa salter. 10 20».Å 25' 30 35' I 4"fdeoxrfl“faminn-erytromyçin-A.framställes genom oxida- g44ass5 tion av det motsvarande 4"-hvdroxiderivatet med en mol vardera av dimetylsulfoxid_oCh trifluorättiksyraanhydrid i ett gentemot reaktionen inert_lösningsmedel vid en tem- ~ i' peratur mellan ca E30 och ca -65°C, åtföljd av behandling- I *av reaktionsblandningen med ungegär en mol trietylamin.

Metylenklorid.är ett lämpligt, gentemot reaktionen inert _ lösningsmedel för denna oxidation. Representativa förfa¥ randen för framställning av de nödvändiga utgângsmateria- len angives här nedan.

Stereokemin hos utgångsmaterialen, som leder till de anti- 'bakteriella medlen enligt förevarande uppfinning överens- stämmer med det natürliga materialets. Genom oxidationenh av 4"-hydroxigruppen i erytromycin-A till en keton och efterföljande omvandling av nämnda keton till 4"-aminerna ' __ föreligger möjlighet till ändring ev M-eubetifuentene stereokemi från den naturliga produktens. Följaktligen är det möjligt, att vid omvandling av 4“-oxoreaktionskompo- nenterna till aminer erhålla epimera aminer. I praktiken observeras; att båda de epimera aminerna föreligger i slntprodukten i varierande mängdförhållanden beroende pä _val av syntesmetod. Om den isolerade produkten till över- »vägande del består av en av epimererna, kan nämnda epimer - renas genom sådana metoder som upprepar kristallisation i ett lämpligt lösningsmedel till konstant smältpunkt. Den andra epimeren, dvs. som föreligger i mindre mängd i det ursprungligen isolerade materialet, utgör den övervägande produkten.i moderluten. Den kan utvinnas ur denna pâ för fackmannen känt sätt, exempelvis genom att moderluten in- V14' dunstas och återstoden underkastas npprepad omkristalli~' sation till en produkt med konstant smältpunkt eller genom _ \A}| kromatografering.;Eburu blandningen av epimera aminer kan _separeras på sätt som är_välkända för fackmannen, kan det_ *av praktiska skäl ofta vara fördelaktigt att använda bland- 'ningen sådan den isoleras ur reaktionen. Om man använder epimera blandningar av 4V-aminoreaktionskomponenterna er- t, 10 15 20' 25 '_30 35 448 385 hâlles givetvis en epimer blandning av de acylerade pro- dukterna. Den så bildade epimera blandningen kan separe- ras på för fackmannen känt sätt. Båda epimererna av en given förening uppvisar emellertid samma typ av aktivitet soch ehuru separationen är önskvärd, är den icke alltid nvöaviänaig. ' i WFöreningarna enligt uppfinnimmflluppvisar in vitro aktivi- *tet gentemot ett flertal grampositiva mikroorganismer och * gentemot vissa gramnegativa mikroorganismer, såsom de med' sfärisk eller ellipsoid form (kocker). Deras aktivitet e gentemot olika mikroorganismer påvisas lätt vid prov in vitro med användning av hjärna-hjärta-infusionsmedium I medelst den vanliga 2-faldiga-spädningstekniken. Deras 'aktivitet in vitro gör dem användbara för topisk applika- ~ tion i form av salvor, krämer och liknande, för sterilise- tionsändamål, exempelvis av sjukrumsutensilier; och som industriella _antimikrobmedel, exempelvis för vattenbehand- ling, slembekämpning och konservering av målningsfärg och ïträ, För användning in vitro, exempelvis för topisk applikation,, är det ofta bekvämt att bereda den valda produkten med en farmaceutiskt godtagbar bärare, exempelvis en vegetabilisk olja, en mineralolja eller en uppmjukande kräm. De kan li- kaledes lösas eller dispergeras i vätskeformiga bärare eller lösningsmedel, exempelvis vatten, alkohol, glyceroler eller blandningar därav eller andra farmaceutiskt godtagbara, inerta medier, dvs. medier som icke har någon ogynnsam 'effekt på den aktiva beståndsdelen. För sådana ändamål är det i allmänhet acceptabelt att den aktiva beståndsdelens koncentration ligger mellan ca 0,01 och upp till ca 10 vikt- procent räknat på den totala blandningen.

Dessutom är många föreningar enligt förevarande uppfinning aktiva in vivo gentemot grampositiva och vissa gramnegativa mikroorganismerpvid oral och/eller parenteral administration 10 V 157 zorj 25 30 35i fi _ ¿stälIa beredningar lämpliga för improviserad tillredning på människor och djur. Deras aktivitet in vivo är mera [begränsad vad beträffar känsliga organismer och bestämmesj på det vanliga sättet, som innefattar infektering med test-, organismen av möss med väsentligen likformig vikt och efter-I _ât skeende behandling av försöksdjuren oralt eller subkutant med testföreningen. I praktiken ympas möss, exempelvis 10 t stycken)-intraperitonealt med lämpligt utspädda kulturer _ innehållande ungefär 1-10 gånger_LD100 (den lägsta koncent- iration av organismen, som erfordras för att alla försöks- djuren dör). Kontrollprov genomföras samtidigt, vid vilkas i möss ympas med lägre utspädningar som kontroll med avseenden “på möjliga variationer beträffande testföreningens virulens.

Testföreníngen administreras 0,5 timmar efter ympningen och upprepas 4, 24 och 48 timmar senare. överlevande möss hålles 4 dagar efter den sista behandlingen och antalet överlevande antecknas. K K _Vid användning in vivo kan dessa nya föreningar administreras _oralt eller parenteralt, exempelvis genom subkutan eller int- ramuskulär injicering i doser mellan ca'1 och ca 200 mg/kg kroppsvikt och dag. Ett gynnsamt doseringsintervall ligger mellan caI5 och ca 100 mg/kg och det föredragna intervallet ligger mellan ca 5 och ca 50 mg/kg kroppsvikt och dag. För iparenteral injicering lämpliga vehikler är antingen vatten- ,haltiga (vatten}fisotonisk koksaltlösning, isotonisk dextros- 1 lösning, Ringer's lösning) eller icke-vattenhaltiga såsom feta oljor av vegetabiliskt ursprung (bomullsfröolja, jord- hnötsolja,'majsolja, sesamoljai, dimetylsulfoxid och andra icke-vattenhaltigaavehikler, som icke stör preparatets te- _rapeutiska effektivitet Och som icke är giftiga i de voly- 'mer eller proportioner; varmed de användes-(glycerol, pro- pylenglykol,Vsorbitol). Dessutom kan man med fördel fram- Ev av lösningar före administrationen. Sådana beredningar kan _ innehålla vätskeformiga utspädningsmedel, exempelvis pro- - 7 1 ä pylenglykol, dietylkarbonat¿ glycerol, sorbitol etc; buf- fertsuhstanser,ghvaluronidas, lokalanestetika och oorganiska TO 15 20 25 30 35 7En lösning av 4"-deoxi-4“-amino-erytromycin-A i tetrahydro- ' furan.(6O ml) och vatten (30 ml), som injusterats på pH 8,0 448 sssl gsalter~för erhållande av önskvärda farmakologiska egen- -skaper. Dessa föreningar kan också kombineras med olika =farmaceutiskt godtagbara, inerta bärare, bl.a. fasta ut- spädningsmedelÅ'vattenhaltiga vehikler, ogiftiga organiska lösningsmedel_i form av kapslar, tabletter, sugtabletter, karameller, torra blandningar, suspensioner, lösningar, V a elixirer, parenterala lösningar eller suspensioner. I all- I mänhet användes föreningarna i olika doseringsformer vid *koncentrationer mellan ca 0,5 och ca 90 viktprocent räknat tpå-den.totala'blandningen.v ~ I följande exempel har man icke bemödat sig om att utvinna maximal mängd bildad produkt eller optimera utbytet av en given produkt. Exemplen är endast illustrativa för förfa- randet och för de genom detta framställbara produkterna.

I exemplen 1-17 användes som reaktionskomponent den enkla epimerprodukten som_erhålles enligt exempel D. Enär 4"- I-aminogruppens konfiguration icke med säkerhet är känd, an- vändes i ovanstående formel det vågformiga strecket.

I exemplet 18 användes som reaktionskomponent epimerbland- ningen av 4"-deoxi-4"-amino-erytromycin-A framställd på sätt som angives i exempel C; 4"-deoxi-4"-(2-fenylacetamido)-erytromycin-A -genom tillsats av-utspädd saltsyra, försattes vid rumstem- peraturen, droppvis och under omrörning inom loppet av 3 , minuter med en lösning av fenylacetylklorid (0,549 ml) i tetranydrofuran (4 ml). Reaktionsblandningens pH hölls vid 7,9-8,1 genom samtidig tillsats av en utspädd vattenlösning I av natriumhydroxid (1-normal). Reaktionsblandningen omrördes i 5 minuter vid rumstemperaturen och hälldes därefter under .omrörning i en blandning av vatten-etylacetat (1:1), och pH . . _.._ A._..__-._....... 443 335ad* _ injusterades nå 9,0; den Qrganiska fasen avskildeš, tvät- l fades ned vatten Qch därefter ned en saltlösning, varpå dnettaz löstes iïeen het lösning av 30 mlzvattlen øch 45 m1 fi, den torkades överfNa2SO4._Genom indunstnlng av lösnings- medlen erhölls en pfodukt i form av ett vitt skum (3,2 g). daCetön'oCh den så erhållna lösningen koncentrerades genom_, - kokning till en undefårlig volym-av 60 ml, där produkten började utkfistalliseral Blandningen kyldes, den fasta e enbstansen"avfiltrerades och tófkadeš i vakuum.

.ExemÉeI 2-19 _" *nu "Det i ekempel 1 beskrivna förfarandet upprepades med den ândringen,jatt man=anyände lämpliga syraklorider för er- hållande av följande föreningárš' d Hag: _ šrccrxm _ wfl _ 448 sas 11 .mmm .mv .mmm .mv mmflm Hmmm ”mv mmflm m m _ m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm m. mmm ev mm m mmm»mmm _ m um-mv1 mm mm . .mmm .mv mm.m _ .mmm .mv mm.m .mmm ”mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv.mm.m .mmm. ev mm.m .mmm .ev mm.m msmm mmmmmmmm mm=mm-m m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mmfm . ._ .mmm .mv mm.m »mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m mamm mmmmmmmm mm=mm-m w .mmm ”mv mmnm Hmmm ”mv mmflm Hmmm Umv_mmHm . m.m _ m mmm mv mm.m mmm mm mm.m mmm av mm m msmmmmmm m m mm-mv- mm m .mmm .mv om.m »mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.mmmmmm mmm>v mama .m m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m -mmmmm m.m mmm _ m ummmmvmu m m .m _. m m _ m. m vww J __ ._ .mmm mv mm m mmm mv mm m mmm mv mm m esmm mmm> -_m.muvm. m _ _ . .mmm .mv mm.m .mmm.Umv mmnm Mmmm ”mv mmmm Hmmm Hmv mm.m _ _.m.m m. m _ m. _ .mmm mv mm m mmm mv mm m _mmm. mv mm.m emmm mmm> m m om mm-mv- mm m Mmmm ”mv mmflm ”mmm ”mv mmmm Hmmm Mmv.mmfim. .. m__ -_m m_. ._m. _ _ mmm mv mm m mmm mv.mm m mmm .ev mm m smmm mmm> m m mmmlmv- mm m .mmm .mv mm.m .mmm .mv mm.m .mmm .mv m~.m mm .mm .mmm wmmmmmv. mmm .mv mmwm .mmm .mv mmmm .mmm .mv mmmm mømm mmmm mm.mmm m v _ . m m. . _ m m . . . . _ . _ ».mmm ~m~ mm.m .mmm Hmv.mm.~ .mmm_.mv mmflm _ 1mmmeMmm . m m fm _ m _mmm mv mm m mmm. mv mm m mmm .mv mm m mmmmmv mmm mmm . m.m mm ._ m . u .Ümcsmmmmmmmm . _ N Hummmmmvmmn. mmmu m . . . mmmun mmm . 12 m448 385% .mmw .hmm .hmm .flmw .hmm .fimv .mmm .mv @m.v .mv mmm. .ñmm .mv .mv mm.m .ñ=~ .mv .mv mm.. .mmm .mv .mv =m.m .nzv .mv .mv mm.. .~mm.Hmv .vv Pm.m .ñmv av .nmm .mv om.~ ._m.N mmmß om.N, Qm.m mm.~.

P_.ß .ñmm .av mm.m .ñmv .mmv oN.ß_. »hmm .nm~ .ñ:m ..~m~ ..fi=m, .mv mm.. .ñ=m .mv .mv vmwm .ñmv .mv .mv w<.~ .mmø .mv ..mv mß.m .fimv_mmv .mv mm._ .mmm »mv mm.~ mm.m mm.~_ ow.m mm.m. .hmm .mv .hav .mv .hmm .mv .ñmm .av .^:m_.mv .nm~ .ev .mv om.m ^:v..m@v .^:m_.mv .ñ:m..Ev .fl=m..mv 12-37 m :Ö .~m~..mv .fimv .mv.m@.m »hmm .mv.Q«.ß_.mmm .mmv .fimm..mv wm.~_.~:m.f .mv _m.m .^um.v .mv mm.m..ñmm._ .mv.mm.m..^mm._ .mv v_~ñm~_ ämm. ;.ñmf .mv.om.m .ñxv .mv »mmm .^m~ .wvv@m.m .mv mm.m .hmm .av .mv.m«.v .mmm .mv. .mv mm.m .hmm .mv .ñmm .Ey @m.m,.ñ:+ .Ev ,>.N va.. mm.m~ mm.ß mm.fi omm. .^:~ mm.ß ~m.m mm.> mN.m om.ß ~m.m mm.ß m<.w mm.. @m.~ mm.m mm.m mmumu mzß .D mzz .G9 5 . H>Ho~m«u|v|H>umE|~ mf .mm«-m.mmf _flm=mu~mU-«.mv-~wU m.

H>:mvm-~ vw. vm_-ßmv_ fiwwummw mv n«wmUmmu»~v-NmUv mv ^mmmufu«~»+~mu. mfiv Ammmummummvfmmu m. angm mmm> vívmmmuflmmuovmumqmnm vmvf ävzm v _ ._ : v mmmmmwmcmmqmwflm. .fimmmUQmmummv-~:u _.

,Uo.m»:m@»Hmem N . Hmmemxm _.. . 10 _15 20 25' 30i _- mycinfA. 135 448 sas 13 Exemgèl .A 2*-acetyl-Ä"-deoxi¥4"-oxo-erytromycin~A 7 Till en blandning av 3 ml metylenklorid och 0,328 ml di~_ metylsulfoxid, vilken blandning kylts till ca -65oC och, fsom hölls under kvåveatmosfär sattes 0,652 ml trifluor- -ättiksyraanhydridl Efter ungefär en minut bildades en vit up§slamning, som visade närvaron av trifluorättiksyraan- ,hydrid-dimetylsulfoxidkomplex. Till den erhållna uppslam- ningen sattes dropnvis en lösning av 1,0 g 2'-acetyleryt- fomycinfA~etvlacetat, erhållet genom omkristallisation av 2f*acetylerytromyçin-A i etylacetat, i 7 ml metylenklorid, varvid temperaturen hölls vid ungefär -65°C. Den så erhåll- _ .na blandningen omrördes i 15 minuter vid ungefär -60°C och kylaes aärefteà: till -7o°c. Trietylamin (1,61 m1) sattes snabbt till reaktionsblandningen och kylbadet avlägsnadesi .Efter omrörning i T5 minuter sattes lösningen till 10 ml vatten och den vattenhaltiga fasens pH injusterades på 10.

Den organiska fasen avskildes, tvättades först med vatten ,(3 x 10 ml) och därefter med saltlösning (1 x 10 ml) och torkades_över natriumsulfat. Genom att avlägsna lösnings- :medlet under reducerat tryck erhölls 929 mg av råproduktenr _ Genom omkristallisation i metylenklorid-hexan erhölls 320 mg av den renade produkten med en smältpunkt av 105~108oC.

NMR (J, cDc13)= 31,28 ws, sn), 2,21 (s, an), och 2,03 (s, an). a i ^ " På analogt sätt framställdes med användning av 2'-propionyl- «erytromycin¥A-etylacetat 2'-propionyl-4"-deoxi-4"-oxo-erytro- Exemgel B i 4"-deoxi-4“-oxo-erytromycin-A;1 -En lösning av 4,0 g 2'-acetyl-4"-deoxi-4“-oxo-erytromycin-A .i 75 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen i 20 timmar.

Lösningsmedlet avlägsnades i vakuum och det som indunstnings* ;g44s4zs5§oi 10 15 20 025 030 35 '14 'återstod'erhållna vita skummet omkristalliserades i metylen- kloridrhexan} varigenom man erhöll 3,44 g, med en smältpnnkt 0 av 170,5 - 172;s°c; 'NMR ( 6] cncl )= 3,36 (s. 3H) och 2;33 (s, 6H). _ _ ,.3 »_ _ . , g g ExemEel'Ce' ,4"sdeoxi-4"-aminoferytromycin-A ,Metod (a):§ 'Till en under omrörning hållen lösning av 3,0 g 4"-deoxi-4?-oxo-erytromycin-A i 30 ml.metanol under kväve- 'atmosfär.sattes 3¿16 g torrt ammoniumacetat. Efter 5 minuter 5 spelades 188:mg natriumcyanoborhydrid in i reaktionsbland- ningen med 5 ml metanol och reaktionsblandningen omrördes vid rumstemperaturen hela natten. Den ljusgula lösningen Khälldes i 300 ml vatten och ÉH injusterades på 6,0. Den * vattenhaltiga fasen extraherades vid pH 6; 7; 7,5; 8; 9 ioch 10, varvid man för varje extraktion använde 125 ml di- * etyleter. Extrakten som erhölls vid pH 8;f9 och 10 kombine- rades ooh tvättades med 125 ml nytt vatten. Den avskilda, vattennaltiga fasen extraherades med eter (1 x 100 ml) vid: pH 7, med etylacetat (1~x 100 ml) vid pH 74 med eter (1 x 100 ml) via pm 7,5, med etylacefiar (1 X 100 ml) vid pn 7,5 och med etylacetat (l_x 100 ml) vid pH 8; 9 och 10. Etyl- acetatextrakten som erhölls genom extraktion vid pH 9 och i10 kombineradesf'tvättades med en mättad saltlösning och I torkades över natriumsnlfat..Genom att avlägsna lösnings- medlet i vakuum erhölls 30 mg av en epimerblandning av den_ önskade produkten i form av ett elfenbensfärgat skum. _Metodi(b):g 720 g 4"fdeoxi-4”-oko-erytromycin-A, 31,6 g ' ammoniumacetat och 10 g 10f%»palladium-pâ~träkol i 200 ml .metanol skakades vid rumstemperaturen i väteatmosfär vid ett begynnelsetryok av 345 kPa¿ Skakningen fortsattes hela natten. Den förbrukade katalysatorn avfiltrerades och filt- ratet'indunstades till torrhet i vakuum. Återstoden förde- I lades mellan vatten och kloroform vid ett pH av 5,5. Vatten-I '49- g) --.,,... \ ..~....,.._. _ .W-ye-.f ._.; '10 15 201 25 30 25 448 385 >1ss fasen aVskildes,.pH injusterades på 9,6 och kloroform till- Ksattes. Den organiska fasen avskildes, torkades över natrium- sulfat och indunstades under reducerat tryck till torrhet.

~Indunstningsåterstoden, nämligen ett vitt skum (19 g), tri- tuerades med 150 ml dietyleter vid rumstemperaturen i 30 kminuter. Den så erhållna substansen avfiltrerades och tor- . kades och man erhöll 9,45 g av en enda epimer, som icke,1 kunde skiljas från den i exempel D erhållna.

Dietyleterfiltratet indunstades till torrhet och man erhöll '6,89 g produkt bestående av den andra epimeren jämte några föroreningar; Metod (c); 2 g 4"fdeoxi-4"-oxo-erytromycin-A, 3,1 g ammo; niumacetat och 2,0 g Raney-nickel i 50 ml metanol skakades vid rumstemperaturen i väteatmosfär med ett begynnelsetryck -av-345 kPa. Skakningen fortsattes hela natten. Ytterligare 3,16 g ammoniumacetat och 2,0 g Raney-nickel tillsattes och hydreringen fortsattes i.ytterligare 5 timmar. De fasta beståndsdelarna avfiltrerades och filtratet indunstades till ,torrhet_i'vakuum. Indunstningsåterstoden sattes under omrör- ning till en blandning av vatten och kloroform och pH injus- terades från 6,4 till 5,5. Den vattenhaltiga fasen avskildes, pH_injustérades på 9,6 och ny kloroform tillsattes. Kloro- I formextraktet avskildes} torkades över natriumsulfat och indunstades under reducerat tryck, varigenom man erhöll 1,02 g-av produkten i form av ett gult skum. Den övervägande isomeren hade motsatt konfiguration i ställningen 4" i jäm- förelse med den i exempel D erhållna föreningen. Å Egemgel D J fl_ 4"-deoxi-4"-amino-erytromycin-A (enkel epimer) _,_En lösning av 10,0 g av epimerblandningen av 2'-acetyl-4"- deoxi-4"faminoerytromycin-A i 150 ml metanol omrördes vid rumstemperaturen under kväve i 72 timmar. Lösningsmedlet avlägsnades i vakuum och återstoden löstes i en under om- .yrörning hållen blandning av 150 ml vatten och 200 ml kloro~ a f 448. 385 formÅ Ûattenfasen'pàsserades och 150 ml nytt vatten till- sattes. Den vattenhaltiga>fasens pH injusterades på 5 och *dklorofornfasen avskildes.

Den vattenhaltica fiasens pH injusterades därefter på 5,5; 6; 7; 8 och 9 och extraherades efter varje injustering med 100 nl ny kloroforn; Kloroformextrakten erhållna genom ,?_extraktion vid pH 6;l7 och 8 kombinerades, tvättades suc- cessivt med vatten och torkades över natrinmsulfat. Lös- ningsmedlet ašlägsnades under reducerat tryck och man er- ehöllj2,9 gjav en epimerblandning av 4“-deoxi-4"-amino-eryt- 7romycin~A. Ett prov:om 1,9 g av blandningen triturerades ' med dietyleter, varigenom-en liten del av det olösta skum-l 'met krištalliserade. De fasta beståndsdelarna avfiltrerades och torkadee och man erhöll 67 mg av en enda epimer av 4"- 'deoxi-4"-amino-erytromycin-A, smältpünkt 140~147°C. ,-. .~,.._....,11 44sÉ3s5 17 IN viTRo DATA (MIK pg/mlj Proåiiki: Staph, _ ïâtaph. _Strep.» Pasturella Neisseria enligt aureus 'aureus pyogenes multocida- sicca exempel 'o1A005 01A400R- 020203 59A001 660000 1 S 0,10 0,20 .< 0,10 0,78 0,20 2 0,78, 0,78 5 0,10 12,5 - 3_9 0,20 5 0,10 5 0,10 0,39 0,20 ' I _ 1 :1 4 0,20 0,39 0,025 0,39 3,12 R,s4flena- 5 ' 0,39 1,56 S 0,10 0,78 0,39¶ 6 0,39 S 0,10 5 0,10 0,39 5 0,10 7- 5 0,10 S 0,10 5 0,10 1,56 - 8 5 0,10 0,20 5 0,10 5 0,10 0,78 9 _ 0,20 0,39 0,025 0,78 - 10 0,20 '5¶0,101 S 0,10 0,39 - 11 0,10 0,05 í 0,012 ¶ 0,10 - 12. 0,20 0,39 ,0,02 0,39 0,73 13 0,05 0,05 0,05 0,2 0,2 214 0,1 0,05¶ 0,02 0,2 0,02 15 0,1 0,05 0,02 0,39 0,1 16 0,39' 1,56 0,33 3,1 ¶12,5 17 0,39 1,56 0,39_ 3,1 6,25 1s¶ 0,1 0,203 0,006 0,02 0,02 19 ' 0,39 21,56 - 1,56 - °le?nd°' 10,39 - 0,2 50 25 - myc ln

Claims (1)

1. e1o~ 15 20 25 44s?5as *7*Patentkrav Förèningar med formeln ._15 vari (a) - (cllzïm-c 3; ' (pl -CHQgr fiï “ .P l ' l(c) -<fišš§::X; ¶ eller _ Y. a r _(d)Ü -(CHålm~hereröcyklyl; Z är, m ärío eller 1; Rs X är väte, klor; brom; fluor, alkyl med 1-4 kolatomer är-väte, klo; eller alkexi med 1-4 kelatemer; eller alkoxi méå 1f4 kolatomer; ~ K',§ år X eller Érifluormetyl; V heflerçcyklyl är tiènyl, furyl eller-tiaàolyl eller mono- métylderivat av ñämnda~heterocykly1er§ och farmacèutiskr godtagbara syraadditionssalter därav.