SE434268B - Sett att framstella nya oximderivat av 3-tiadiazolyl-tiometyl-7-aminotiazolyl-acetamidocefalosporansyra - Google Patents

Description

7800790-3 2 litium-, kalcium- och magnesiumekvivalent, och bland de organiska 1 baserna, som kan representeras genom A, kan man nämna trimetylamin, I trietylamin, metylamin, propylamin, N,N-dimetyletanolamin och tris(hydroximetyl)aminometan. É Bland värdena för R3 kan man nämna metyl, etyl, propyl, isopropyl butyl, sek-butyl, tert-butyl, metoxi, etoxi, propyloxi, isopropyloxi, butyloxi, sek-butyloxi och tert-butyloxi.

Uppfinningen hänför sig särskilt till ett sätt att framställa föreningar med formeln I, vari A betecknar en väteatom eller en alkaliê metall-, jordalkalimetall- eller magnesiumekvivalent eller en ekviva- É lent av en organisk aminbas. ' Uppfinningen hänför sig speciellt till ett sätt att framställa föreningar med formeln I, vari R2 betecknar en metylgrupp, R3 betecknar en metyl- eller metoxigrupp och A betecknar en väteatom eller en V natriumatom.

Bland föreningarna med den allmänna formeln I kan man särskilt nämna de här nedan i exemplen beskrivna föreningarna och isynnerhet: syn-isomer av 7-[?{2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamidd]-3-[(3- -metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometylí-cef-3-em-4-karbonsyra och dess salter med alkalimetaller, jordalkalimetaller och med magnesium eller med organiska aminbaser, och syn-isomer av 7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)~ -2-metoxiiminoacetamido]-3-[(3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyi]~ -cef-3-em-4-karbonsyra och dess salter med alkalimetaller, jordalkali-ä metaller och med magnesium och med organiska aminbaser.

Det är underförstått, att föreningarna med den tidigare formeln I kan föreligga antingen i denna angivna formel I eller i form av Ä föreningar med formeln Iz 7 f I i i s NH ff _ /C\H få “\ S R3 N , I -m QR 4' //I H --S -\\ /N 2 o 2 s ' l co-A Z L i vilken R1, R2, R3 och A betecknar detsamma som ovan.

Sättet för framställning av föreningarna med formeln I, sådana 7800790-3 som definierats här ovan, kännetecknas av att man omsätter en förening med formeln II Hag: KR, f, /N II i vilken R3 betecknar detsamma som ovan och A' betecknar en väteatom eller en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, med en syra med formeln III NH R'1 Q III OR syn-isomer, eller med ett funktionellt derivat av denna syra, varvid i formeln III R'1 betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, eller en kloracetylgrupp och R2 betecknar detsamma som ovan, för att framställa en förening med formeln IV NHR ' r, * S o \=g(»\m1 IV N _ f S __(33 cozA' _ syn-isomer, vilken förening med formeln IV man behandlar med ett surt O OR2 hydrolyseringsmedel, med ett hydrogenolysmedel eller med tiokarbamid eller med två av de nämnda medlen, allt efter betydelsen av R'1 och A', för att framställa en förening med formeln I' 7800790-3 4 S o \::Z\“/JL* R3 I' . ~- NH\ ,s g 0112 04 / H2 _S “S/N co H 2 motsvarande en förening med formeln I, vari A betecknar en väteatom och R2 och R3 betecknar detsamma som ovan, vilken förening med formelnš I' man eventuellt försaltar på i och för sig känt sätt för att fram- ställa en förening med formeln I, vari A betecknar en alkalimetall-, jordalkalimetall- eller magnesiumekvivalent eller en ekvivalent av en organisk aminbasi' I ett föredraget utföringssätt omsätter man föreningen med for- meln II med ett funktionellt derivat av syran med formeln III, exempel; vis anhydriden eller syrakloriden, varvid anhydriden kan bildas in i situ genom inverkan av isobutylklorformiat eller dicyklohexylkarbodi- 1 imid på syran. Man kan även använda andra halogenider eller även andraï anhydrider, som bildats in situ genom inverkan av andra alkylklor- 3 formiat, av en dialkylkarbodiimid eller av en annan dicykloalkylkarbo-3 diimid. Man kan likaledes använda andra syraderivat, exempelvis syra- V aziden, den aktiverade syraamiden eller en aktiverad syraester bildad exempelvis med hydroxisuccinimid, paranitrofenol eller 2,4-dinitrofenol I det fall då reaktionen utföres med en förening med formeln II och en syrahalogenid med den allmänna formeln III eller med en anhydrid bildad med ett isobutylklorformiat, så utför man reaktionen företrädes- vis i närvaro av ett basiskt agens.

Såsom basiskt agens kan man exempelvis nämna ett alkalimetall- karbonat eller en tertiär organisk bas, t.ex. N-metylmorfolin, pyridin, eller en trialkylamin, t.ex. trietylamin.

Reaktionen utföres i ett lösningsmedel eller i en blandning av lösningsmedel, av vilka man kan nämna metylenklorid, kloroform, tetra- hydrofuran, aceton och dioxan.

Omvandlingen av föreningarna med formeln IV till föreningar med formeln I' avser att ersätta substituenten R'1 med en väteatom och, då A' betecknar något annat än en väteatom, att ersätta A' med en väteatom. 7800790-3, Man omsätter härvid föreningen med formeln IV med ett surt hydrolyseringsmedel, då.R'1 betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys, och A' betecknar en väteatom eller en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys.

Man omsätter föreningen med formeln IV med ett hydrogenolysmedel, då R'1 betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom hydrogenolys och A' betecknar en väteatom eller en grupp som lätt kan elimineras genom hydrogenolys.

Man omsätter föreningen med formeln IV, med ett surt hydrolyse- ringsmedel och med ett hydrogenolysmedel, då den ena av substituen- terna R'1 och A' betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys, och den andra substituenten betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom hydrogenolys.

Man omsätter föreningen med formeln IV med tiokarbamid, då R'1 betecknar en kloracetylgrupp och A' betecknar en väteatom, och då R'1 betecknar en kloracetylgrupp och A' betecknar en grupp som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller hydrogenolys. Man behandlar föreningarna med formeln I med tiokarbamid och med ett surt hydroly- seringsmedel eller hydrogenolysmedel allt efter betydelsen av A'.

Den reaktionstyp, varvid man använder tiokarbamid, beskrives av Masaki /JAcs, g, 4508/(1968) .

Såsom surt hydrolyseringsmedel, varmed man eventuellt omsätter föreningarna med formeln IV, kan man nämna myrsyra, trifluorättiksyra och ättiksyra. Dessa syror kan användas i vattenfritt tillstånd eller i vattenlösning. Man kan även använda systemet zink-ättiksyra.

Man använder företrädesvis ett surt hydrolyseringsmedel, t.ex. vattenfri trifluorättiksyra eller vattenhaltig myrsyra eller vatten- haltig ättiksyra, för att eliminera tert-butoxikarbonyl- eller trityl- gruppen, som kan representera gruppen R'1, eller grupperna benshydryl, tert-butyl eller parametoxibensyl, som kan representera A'.

Man använder företrädesvis systemet zink-ättiksyra för att eliminera trikloretylgruppen, som kan representera R'1 och A'.

Man använder företrädesvis ett hydrogenolysmedel, t.ex. väte i närvaro av en katalysator, för att eliminera dibensyl- karbobensyloxi- gruppen, som kan representera R'1, och bensylgruppen, som kan represen- tera R'1 och A'.

Föreningarna med formeln IV eller I' kan saltbildas medelst brukliga förfaringssätt. Saltbildningen kan exempelvis åstadkommas genom inverkan av en oorganisk bas, exempelvis natrium- eller kalium- 7800790-3 hydroxid, natriumvätekarbonat eller natriumacetat, eller en organisk bas, t.ex. trietylamin, på syrorna.

Denna saltbildning åstadkommes företrädesvis i ett lösningsmedel eller i en blandning av lösningsmedel, t.ex. vatten, etyleter, metanol, etanol eller aceton. Salterna kan framställas i amorf eller kristalli- serad form. I I Ä Föreningarna med den allmänna formeln I har en mycket god anti- biotisk verkan, å ena sidan på grampositiva bakterier, t.ex. stafylo- kocker, streptokocker och isynnerhet på penicillin-resistenta stafylo- kocker, och å andra sidan på gramnegativa bakterier, isynnerhet på koliforma-, klebsiella-, salmonella- och proteusbakterier.

Dessa egenskaper gör att föreningarna är farmaceutiskt godtag- bara till att användas såsom läkemedel för behandling av sjukdomar med känsliga bakterier och isynnerhet för sjukdomar med stafylokocker, såsom septikemier med stafylokocker, elakartade stafylokockinfektioner å i ansiktet eller kutant, pyodermiter, septiska eller variga sår, antrax: flegmoner, ros, ursprungliga akuta eller efterföljande katarrer med stafylokocker, bronkopneumonier, pulmonära varbildningar. 5 Föreningarna kan likaledes användas såsom läkemedel för behand- i ling av infektioner med kolibaciller och besläktade infektioner, för behandling av infektioner med Proteus, Klebsiella och med Salmonella och av andra sjukdomar som framkallas av gramnegativa bakterier. i Såsom läkemedel och isynnerhet såsom antibiotiska läkemedel före-; drager man föreningar med formeln I, vari A betecknar en väteatom, en alkalimetall-, jordalkalimetall- eller magnesiumekvivalent eller en ekvivalent av en organisk aminbas.

Bland dessa läkemedel skall man särskilt nämna föreningar med formeln I, vari R2 betecknar en metylgrupp, R3 betecknar en metyl- eller metoxigrupp och A betecknar en väteatom, och deras farmaceutiskt godtagbara salter, och alldeles särskilt föreningar med formeln I, variš R2 betecknar en metylgrupp, R3 betecknar en metyl- eller metoxigrupp, ~A betecknar en väteatom och gruppen OR2 står i synfiställning, och deras farmaceutiskt godtagbara salter.

Bland dessa senare_föreningar skall man alldeles särskilt nämna de föreningar, som beskrivas i exemplen och isynnerhet syn-isomeri av 7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiimino-acetamido]-3-[(3-metyl- -1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbonsyra och dess farma- ceutiskt godtagbara salter med alkalimetaller, jordalkalimetaller, V magnesium eller med organiska aminbaser, och syn-isomer av 7-[2-(2-anno; 7800790-3 7 -4-tiazolyl)-2-metoxiimino-acetamido]-3-[(3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5- -yl)ticmetyl]-cef-3-em-4-karbonsyra och dess farmaceutiskt godtagbara salter med alkalimetaller, jordalkalimetaller, magnesium eller med organiska aminbaser.

De nya oximerna med formel I kan således användas för framställ- ning av farmaceutiska kompositioner, vilka som verksam substans inne- håller minst en av dessa oximer.

Kompositionerna kan administreras buckalt, rektalt, parenteralt, intramuskulärt eller lokalt med topisk applicering på huden och på slemhinnorna.

Kompositionerna kan vara fasta eller flytande och föreligga i farmaceutiska former som konventionellt användes inom humanmedicinen, exempelvis enkla eller dragerade tabletter, överdragna piller, granuler, suppositorier, injicerbara preparat, salvor, krämer och geler. De kan framställas medelst vanliga förfaranden. Den verksamma substansen eller de verksamma substanserna kan införas tillsammans med excipienter, som vanligtvis användes i farmaceutiska kompositioner, t.ex. talk, gummi arabicum, laktos, stärkelse, magnesiumstearat, kakaosmör, vatten- haltiga ellericke vattenhaltiga vehiklar, animala eller vegetabiliska fetter, paraffinderivat, glykoler, olika vät-, disperger-, emulger- eller konserveringsmedel.

Den administrerade doseringen kan varieras med avseende på den behandlade sjukdomen, ifrågavarande individ, administreringssätt och ifrågavarande förening. Doseringen kan exempelvis ligga mellan 0,250 och 4 g per dag, oralt till människa för den i exempel 2 eller 4 beskrivna föreningen, eller kan även ligga mellan 0,500 och 1 g, tre gånger per dag intramuskulärt.

Föreningarna med formeln II kan framställas medelst en utbytes- reaktion genom att man på i och för sig känt sätt bringar 7-aminoce- falosporansyra att reagera med en förening med formeln V Uppfinningen möjliggör likaledes framställning av nya industri- produkter med den allmänna formeln V 7800790-3 ß! V i vilken R3 betecknar en alkylgrupp med 2-4 kolatomer eller en alkoxi- HS grupp med 1-4 kolatomer.

Föreningarna med formeln V kan framställas genom att man bringar¿ natriumvätesulfid eller tiokarbamid att i närvaro av kaliumhydroxid reagera med en förening med formeln -N-WRB i ÅS» a @ Cl Exempel på framställning av föreningar med formlerna V och II angives längre fram i den experimentella delen.

Föreningarna med formeln III kan framställas medelst det _ f förfarande som beskrives i den belgiska patentskriften 850 662, vilket_ sätt består av att man bringar tiokarbamid att reagera med en förening! med formeln B: É clcfiz - c - c -co alk ' å n u 2 O NnnrOR2 B i vilken R2 betecknar detsamma som ovan och alk betecknar an alkylgrupn med 1-4 kolatomer, för att efter behandling med en bas framställa en förening med formeln: som man omsätter med ett funktionellt derivat av en grupp, som lätt kan» elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, för att framställa en förening med formeln 7800790-3 H-1v1 C/§02alk N OR i vilken R'1, R2 och alk betecknar detsamma som ovan, och behandlar föreningen med en bas, därefter med en syra, för att framställa de sökta föreningarna med formel III. Ett exempel på ett sådant framställnings- förfarande angives senare i den experimentella delen.

Föreningarna med formeln B framställes genom inverkan av diazo- metan eller motsvarande alkylhalogenider eller alkylsulfat på etyl-Y- -klor-a-oxiiminoacetylacetat, såsom beskrives i J. of Medicinal Chemistry, l§ (9), 978 (1973).

Man framställer föreningarna med formel III med syn-konfiguration genom att utföra reaktionen mellan tiokarbamiden och föreningen med formeln B antingen i ett vattenhaltigt lösningsmedel eller genom att arbeta vid rumstemperatur i närvaro av en ungefär stökiometrisk mängd tiokarbamid och genom att utföra reaktionen under en tidsperiod begrän- sad till nâgra timmar, eller genom att förena samtliga de här ovan angivna förhållandena. _ Föreningarna med Formeln IV framställes genom att man bringar en syra med formeln i vilken R'1 och R2 betecknar detsamma som ovan att reagera med 7-amino- cefalosporansyra, eventuellt följt av en sur hydrolys eller en hydro- genolys. Ett exempel på ett sådant framställningsförfarande angives senare i den experimentella delen. 7800790-5 1 Följande exempel belyser uppfinningen utan att likväl begränsa densamma.

Exempel 1 _ Syn-isomer av 7-[2-(Zwtritylamino-4-tiazolyl)-2-metoxiimino-acetamido]f -3-[13-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbonsyra_ I Till 3,36 g natriumsalt av syn-isomer av 2-(2-trity1amino-4- -tiazolyl)-2-metoxiiminoättiksyra sätter man 60 cm3 metylenklorid och 10 cm3 2-normal klorvätesyra. Man dekanterar, tvättar med vatten, torkar och indunstar till torrhet, varvid man erhåller den fria syran.š Man löser den erhållna återstoden i 30 cm3 metylenklorid och 1 tillsätter 950 mg dicyklohexylkarbodiimid. Man rör om blandningen 1 E timme, varefter man suger av den bildade fällningen (750 mg dicyklo- hexylkarbamid). Man kyler filtratet till É10°C och tillsätter på en gång en lösning av 1,3 g 7-amino-3- H3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)- tiometyl]-cef-3-emf4-karbonsyra i 13 cm3 kloroform och 1,3 cm3 tri- etylamin. Man låter blandningens temperatur återgå till rumstemperatur¿ tvättar med 2-normal klorvätesyra och därefter med vatten, torkar, j filtrerar och indunstar till torrhet, varvid man erhåller 4,8 g rå- 1 produkt. Denna produkt renas genom kromatografering på 500 g kiseldioxf och eluering med en blandning av aceton och vatten (90:10) . Man ' isolerar 1,6 g renad förening. Rf=0,45. Man renar föreningen genom en andra kromatografering på 160 g kiseldioxid, varefter man slutligen 4 erhåller 1,1 g ren förening.

Natriumsaltet av syn-isomer av 2-(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2- 1 -metoxiiminoättiksyra som användes som utgångsförening i exempel 1 beskrives i den belgiska patentskriften 850 662. Föreningen har framställts på följande sätt.

Z Steg A: etyl-Y-klor-u-metoxi-iminoacetylacetat.

Man blandar 22,5 g etyl¥Y-klor-a-oximino-acetylacetat i 100 cm3 metylenklorid. Man kyler blandningen i isbad och tillsätter långsamt med omrörning en nyframställd lösning av diazometan med en koncentra- tion av 21,6 g/liter, dvs. 275 cm3. Man låter blandningen stå 5 minuter varefter man förstör överskottet av diazometan medelst en ringa mängd aluminiumoxid. Man indunstar lösningen och renar återstoden genom kromatografering på kiseldioxid och eluering med metylenklorid, varvid man erhåller 11,93 g önskad förening.

Steg B: etyl-2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetat.

Man blandar 1 g etyl-Y-klor-a-metoxi-iminoacetylacetat, 3 cm3 abs. etanol och 0,42 g sönderkrossad tiokarbamid. Man rör om bland- 7800790-5 11 ningen vid rumstemperatur ca 2 timmar. Man späder den med 60 cm3 eter, varvid den bildade hydrokloriden kristalliSerar-Man rör om, suger av, tvättar med eter och torkar, varvid man erhåller 685 mg hydroklorid.

Man löser denna i 4 cm3 vatten vid 50°C och tillsätter natriumacetat till ett pH-värde av 6, varvid den frigjorda aminen utkristalliserar.

Man kyler av blandningen, suger av kristallerna, tvättar med vatten och torkar, varvid man erhåller 270 mg önskad förening Smp.: 16100.

Föreningen har syn-konfiguration. RMN (CDC13, 60 MHz) ppm: 4 (NOCH3), 6,7 (proton i tiazolringen).

Steg C: syn-isomer av etyl-2-(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-metoxi- iminoacetat. ' 4,6 g av den i föregående steg framställda föreningen löses vid °C i 92 cm3 metylenklorid. Man kyler lösningentill -10°C, tillsätter 2,9 cm3 trietylamin, kyler blandningen till -35°C och tillsätter under minuter 6,1 g tritylklorid. Man låter blandningens temperatur stiga till rumstemperatur inom 2 å timme. Man tvättar med vatten och där- efter med 0,5-normal klorvätesyra och med en lösning av natriumacetat i vatten. Man torkar blandningen, indunstar den och tager upp återstoden i eter, indunstar på nytt, löser återstoden i metanol, tillsätter vat- ten ocheier och låter blandningen kristallisera, suger av kristallerna och tvättar dem med eter, varvid man erhåller 6,15 g önskad förening. snp. 12o°c.

Steg D: syn-isomer av natriumsalt av 2-(2-tritylamino-4-tiazo- lyl)-2~metoxi-iminoättiksyra. 3 dioxan. 7,01 g av den i steg C framställda estern löses i 35 cm Man upphettar lösningen till 110°C på oljebad och tillsätter under 5 minuter 9 cm3 2-normal natriumhydroxidlösning och upphettar bland- ningen med omrörning 30 minuter med âterflöde. Natriumsaltet kristalli- serar ut. Man kyler av blandningen, suger av kristallerna, tvättar med dioxan och därefter med eter, varvid man erhåller en första sats av ,767 g salt. Man koncentrerar moderluten, varvid man erhåller en andra sats av 1,017 g, dvs. totalt 6,784 g natriumsalt.

Föreningen 7-nnine-3-[(3-netexi-1,2,4-tiediazei-5-y1)tienetyij- -cef-3-em-4-karbonsyra framställdes på följande sätt.

Steg A: 3-metoxi-5-merkapto-1,2,4-tiadiazol.

Man kyler en,suspension av 6,16 g söndermalen natriumvätesulfid i 300 en3 etenei tiil o°c een tillsätter areppvis 1s g 3-netexi-5-k10r- -1,2,4-tiadiezol. men rör om blandningen 3 timmer via o°c een låter den därefter stå över natten i kylskåp. Man filtrerar och tvättar med 7000790-3 2 1 § 12 metylenklorid, varvid man erhåller 13,6 g av en kristalliserad bland-Å ning. Man kromatograferar denna på kiseldioxid och eluerar med en I blandning ävkloroform och metanol (95:5), varvid man erhåller 3 g É önskad förening. Rf=0,35. Man löser dessa 3 g i 150 cm3 metylenkloridš i värme. Man filtrerar och indunstar till dess en kristallisering börjar. Man låter därefter blandningen stå över natten i kylskåp, A varefter man suger av kristallerna, tvättar dem med metylenklorid ochš torkar dem, varvid man erhåller totalt 2,6 g önskad förening. * Smp.: 146°C. - Steg B: 7-amino-3- Ü3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cefâ -3-em-4-karbonsyra. å Man blandar under kvävgas 2,72 g 7-amino-cefalosporansyra, 27 cm3 dest. vatten, 840 mg natriumvätekarbonat och 1,48 g 3-metoxi~5- -merkapto-1,2,4-tiadiazol. Man rör om blandningen 5 timmar vid 60°C, tillsätter 0,74 g 3-metoxi-5-merkapto-1,2,4-tiadiazol och rör om blandningen 2 timmar vid 60°C. Därefter surgör man dem till ett pH- värde av 4 medelst ättiksyra suger av den utskilda produkten, tvättar; med vatten och därefter med aceton och torkar, varvid man erhåller i 2,2 g råprodukt. Man renar produkten genom att lösa den i en natrium-- vätekarbonatlösning och behandla. lösningen med aktivt kol och filtrer Man surgör filtratet med ättiksyra, suger av den utskilda produkten, tvättar den med vatten och aceton och torkar, varvid man erhåller 1,3: önskad förening. É Exemgel 2 Z Syn-isomer av 7-'É-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-[(3- -metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbonsyra.

Man upphetter 5,5 cm3 av en 50 %-ig myrsyravattenlösning till 55°C. Till denna sätter man 1,1 g av den i exempel 1 framställda före-å ningen och upphettar blandningen 25 minuter vid 55-60°C. Man suger av É den bildade fällningen av trifenylkarbinol (390 mg). Man indunstar filtratet till torrhet, rör ut det till en gröt med etanol, suger av, tvättar med etanol och torkar, varvid man erhåller 470 mg. Denna produkt röres på nytt ut med vatten, varefter man suger av och torkar _ produkten. Man erhåller 330 mg önskad förening.

Mikroanalys: C17H17N7O6S4 ' Beräknat: C % 37,56 H % 3,15 Funnet: 37,4 3,2 UV-spektrum (i etanol-1/10-normal klorvätesyra) 1= 310; =110o0 inflexion = 240 nm E1 7800790-3 13 max: 270 nm El 423 8 = 23000 E inflexion 280 nm 1 403 Exempel 3 2 Syn-isomer av 7-[2-(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacet- amido]-3-[]3-metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbon- syra.

Till 2,7 g natriumsalt av syn-isomer av 2-(2-tritylamino-4-tiazo- 3 3 lyl)-2-metoxiiminoättiksyra sätter man 60 cm metylenklorid och 6 cm 2~normal klorvätesyra. Man dekanterar, tvättar med vatten, torkar och indunstar till torrhet. Man löser den oljeartade återstoden i 30 cm3 metylenklorid och tillsätter 690 mg dicyklohexylkarbodiimid. Man rör om blandningen 1 timme vid rumstemperatur och suger därefter av den bildade fällningen av 570 mg dicyklohexylkarbamid. Man kyler filtratet till -10°C och tillsätter på en gång 1 g 7-amino-3-[(3-metyl-1,2,4- 3 metylenklorid -tiadiazol-5-yl)tiometylï-cef-3-em-4-karbonsyra i 10 om och 1 cm3 trietylamin. Man låter blandningens temperatur återgå till rumstemperatur under 1% timme. Man tvättar med normal klorvätesyra och därefter med vatten, torkar, filtrerar och indunstar till torrhet.

Man tager upp återstoden i 10 cm3 dioxan och 1 cm3 vatten och sätter 3 mättad natriumvätekarbonatlösning. därefter till denna lösning 3 cm Man rör om blandningen 30 minuter, varvid en del av utgângsföreningen, dvs. natriumsaltet av syran, faller ut. Man suger av och torkar, varvid man erhåller 580 mg. Man indunstar filtratet till torrhet, tager upp återstoden i 20 cm3 metylenklorid, tvättar med vatten och med normal klorvätesyra, torkar, filtrerar och indunstar till torrhet, varvid man erhåller 1,95 g önskad förening. Man rör ut denna förening till en gröt i eter, suger av och torkar, varvid man erhåller 1,7 g renad produkt. Man kromatograferar denna på 450 g kiseldioxid och eluerar med aceton innehållande 10 % vatten. Man erhåller 1,2 g önskad förening, som man löser i 4 cm3 etylacetat. Man fäller ut föreningen genom att tillsätta nâgra cm3 eter, varvid man slutligen erhåller 940 mg ren förening.

Den som utgångsförening i exempel 3 använda 7-amino-3-I]3-metyl- -1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbonsyran framställdes på följande sätt.

Man blandar under kvävgas 2,72 g 7-aminocefalosporansyra, 27 cm3 dest. vatten och 0,84 g natriumvätekarbonat. Man erhåller partiell upplösning till vilken man sätter 1,45 g 3-metyl-5-merkapto-1,2,4- -tiadiazol. Man rör om blandningen 4å timme vid en temperatur av 7800790-3 14 60-70°C. Man surgör blandningen med ättiksyra till ett pH-värde av 4. Man suger av den utskilda produkten, tvättar den med vatten och med aceton och därefter med eter. Man torkar den därpå, varvid man er- u håller 2,4 g önskad förening.

Exempel 4 I Syn-isomer av 7-I?-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-[(3-É -metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyll-cef-3-em-4-karbonsyra.

Man upphettar 4 cm3 50 %-ig myrsyravattenlösning till 5500. Tillš denna lösning sätter man 940 mg av den i exempel 3 framställda före- i ningen. Man rör om blandningen 20 minuter vid 55°C, suger av bildad I trifenylkarbinol och tvättar med vatten, varvid man erhåller 340 mg. smp.= 158°c.

Man indunstar filtratet till torrhet och löser återstoden i 3 cm3 etanol. Man sugar av, tvättar med etanol_och därefter med eter och torkar, varvid man erhåller 415 mg önskad förening.

UV-spektrum i etanol-1/10-normal klorvätesyra Infiexion = 234 nm 1:1 = 325; = 17000 ' 1 Maximum = 269-270 nm E1 = 5258 = 27500 1 _ Inflexion = 280 nm E: = 488 Exempel 5 r Natriumsalt av 7-[Z-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacet- f amido]-3-[(3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)-tiometyl]-cef-3-em-4-karboxyl syra, syn-isomer. * Till 300 mg av den produkt, som erhölls i Exempel 2, sättes I 3,7 ml 0,1N natriumhydroxid, och den resulterande lösningen hålles vid rumstemperatur under ca 10 minuter, indunstas under vakuum vid * en temperatur, som ej överstiger 30°C, och det önskade natriumsaltet isoleras. Den sönderfaller mellan 250 och 260°C.

Analys: % Na funnet: 4 % Na teoretiskt: 4,07 Exempel 6 Natriumsalt av 7-[Z-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacet- amido]-3-[3-metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)-tiometyl]-cef-3-em-4-karboxyl- syra, syn-isomer.

Till 50 mg av den produkt, som erhölls i exempel 4, sätter man 0,9 ml O,1N natriumhydroxid, håller den erhållna lösningen vid rums- temperatur under ca 10 minuter, indunstar under vakuum vid en temperatur, som ej överskrider 30°C, och isolerar det önskade natrium- saltet. Det sönderfaller vid ca 250°C.

Analys: % Na funnet: 4,17 % Na teoretiskt: 4,18 7800790-3 FšâLIPE-Ll Man framställer ett preparat för injektion med formuleringen: Syn-isomer av 7-í2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3- - H3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em-4-karbonsyra 500 mg -H3 Steril vattenhaltig excipient ad 5 ~~ Exempel 8 Man framställer ett preparat för injektion med formuleringen: Syn-isomer av 7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-[(3- -metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl]-cef-3-em~4-karbonsyra 500 mg Steril vattenhaltig excipient ad 5 cm3 Exempel 9 ' Man framställer överdragna piller med formuleringen: Syn-isomer av 7-[}-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamidol-3-[(3- -metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyll-cef-3-em-4-karbonsyra 250 mg Excipient ad ett piller med slutvikt av 400 mg Farmakologisk undersökning av föreningarna enligt uppfinningen.

Verkan in vitro: Metodik med utspädningar i flytande medium: Man framställer en serie provrör, i vilka man inför samma mängd sterilt näringsmedium. Man fördelar därefter i varje rör växande mängder av den förening som skall studeras, och därpå inokuleras varje rör med en bakteriestam.

Inhiberingen av tillväxten bestämmes, efter inkubering under 24: eller 48 timmar i ugn vid 37OC medelst genomlysning, vilket gör det möjligt att bestämma de minimala inhiberingskoncentrationerna (C.M.I.) uttryckta i ng/cm3.

Följande resultat har erhållits. 7800790-3 16 Förening enligt Exempel 2 C.M.I. i ug/ml Stammar 24 t 48 t Staphylococcus aureus ATCC 5638, pen-känslig 1 1 Staphylococcus aureus UC 1128, pen-resistent 1 2 Staphylococcus aureus Exp. nr 54146 - 1 1 Streptococcus pyogenes A 561 50,02 {0,02 Streptococcus faecalis 5432- 2 _ 5 Streptococcus faecalis 99F74 3 10 Bacillus subtilis ATCC 6633 0,4 1 Escherichia coli, känslig för tetracyclin 5 5 ATCC 9637 Escherichia coli, resistent mot tetracyclin ATCC 11303 0,2 0,2 Escherichia coli Exp. TO26 B6 0,4 0,4 Escherichia coli, resistent mot gentamicin Tobramycine R 55 123 D 5 0,6 0,6 Klebsiella pneumoniae Exp. 52145 0,2 0,2 Klebsiella pneumoniae 2536, resistent mot gentamicin 5 5 Proteus mirabilis (xndoiÄ) A 235 0,2 0,2 Salmonella typhimurium 420 51 1 Providencia Du 48 5 _5 Serratia, resistent mot gentamicin 2532 5 5 7800790-3 17 Förening enligt Exempel 4 C.M.I. i ug/ml 24 t 48 t Staphylococcus aureus ATCC 5638, pen-känslig 1 1 Staphylococcus aureus UCm1128,pen-resistent 1 2 Staphylococcus aureus Exp. nr 54146 1 1 Streptococcus pyogenes A 561 50,02 50,02 Streptococcus faecalis 5432 1 5 Streptococcus faecalis 99 F 74 3 10 Bacillus subtilis ATCC 6633 0,2 . 1 Escherichia coli, känslig för tetracyclin ATCC 9637 5 5 Escherichia coli, resistent mot tetracyclin ATCC 11303 0,1 0,1 Escherichia coli Exp. TO26 B6 0,2 0,2 Escherichia coli, resistent mot gentamicin Tobramycin R 55 123 D 0,4 0,4 Klebsiella pneumoniae Exp 52145 0,1 0,1 Klebsiella pneumoniae 2536, resistent mot gentamycin 2 2 Proteus mirabilis (Indol-) A 235 0,1 0,1 Salmonella typhimurium 420 0,6 0,6 Providencia Du 48 5 5 Serratia, resistent mot gentamicin 2532 2 5 7800790-3 18 Jämförande farmakologiska försök har utförts mellan föreningarna enligt Exempel 2 och 4 i föreliggande patentansökan och en förening enligt den svenska patentansökningen 7206296-1.

Jämförande'farmakologiska försök har utförts mellan: Produkt A, Exempel 2 i föreliggande patentansökan, syn-isomer av 7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-|]3-metoxi- -1,2,4-tiadiazol-5-ylïtiometyil-cef-3-em-4-karbonsyra och produkt B, Exempel 4 i föreliggande patentansökan, syn-isomer av 7~[2-(2~amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamidol-3-K(3-metyl- -1,2,4-tiadiazol-5-yl)-tiometyll-cef-3-em-4-karbonsyra och förening X enligt den svenska patentansökningen 7206296~1, 3-karbamoyloximetyl-7-[(2)2-fur-2-yl)-metoxiiminoacetamidoí-cef-3- -em-4-karboxylsyra. _ Föreningarnas aktivitet in vitro mot olika bakteriestammar har undersökts med utspädningsmetoden i vätskemedium.

Man bereder en serie rör i vilka man fördelar samma mängd av sterilt näringsmedium. I varje rör satsar man ökande mängder av den förening, som skall undersökas, varefter varje rör ympas med en bakteriestam.

Efter inkubering 24 eller_48 timmar i ugn vid 37°C uppskattas inhiberingen på grund av den ökande dosen genom genomlysning, vilket medger bestämning av de minsta inhiberande koncentrationerna, , uttryckta i mikrogram/cm3. Resultaten framgår av de bifogade tabel- lerna 1 och 2. Den minsta inhiberande koncentrationen för föreningar-I na A och B enligt föreliggande uppfinning är för de undersökta gram- positiva stammarna lika stor eller mindre, i vissa fall avsevärt mindi än den minsta inhiberande koncentrationen för produkt X enligt Glaxos, svenska patentansökan 7206296-1.

Det framgår sålunda att de undersökta föreningarna enligt före- liggande uppfinning har en bättre inhiberande effekt på gram-positiva stammar. Liknande resultat erhålles enligt tabell 2 för gram-negativa_ stammar. 7800790-3 o«^ o«^ V m N m m Nmmm cfiufiemßcmm __ MCE uCwUwfimNH NHHMHHÜW OQA o«^ M m m m m wq :Q mflu=w@fl>oHm .ON 0, W w_o w_o F ¶ P Qmq a:fiH:efi;m>» mHHw=oeH~w_ ~_o m.Q w f_o f_o ~.o ~_O mmm m ^|Ho@=H. wfififlnmufle wswuoum ON Q. M N N m m =fluflsm@=w@ »ce ß UCÜHWfiOH wMmN ONJMEOEÜNEQ MHHNflwQÜHM ~_0 ~.O M f_o ,_o -o ~_0 mvrwm .mxm mmfisoaøwcm mflflwfimnwflx OP of _ q_@ «.o w_O @~o mmm? mmm =flo>ewHno~cflufismß:wm __ QOE Mfiwflwflmünfi .wHOO MHSOAHMSUWW m m w N.o ~_O f «_o «_o f wmwmoa .mxm flflou mflsufluwzuwm _ f f _ TG få _ m5 Nä nä: uuÉ cflvšomnuw» í UOE Nflmflmfimwhfl .wHOO .NflQOHHQEOmW _ Of of m m _ m m 44 ßmøm uuaæ cflflxwumupwpu f Hmm mmflflmflmx fifloo mfl:0fluwßumm_ z mv m «~ m mv z WN m m mv = qw _ x »våøoä m »všøoå < »åëoä ëmáemuw., disk H VG: f _ _ umëåmßm m>«ummmc1EmuO N Hfiwßmß 78ÛÛ790-5 19 3 _ f Nå _ vä 33 mona mflflnøm wzflflumm EX EX 3 m 3 _ m .Kräm mïmowmu wzuuouopmwuum SX m m P m N Nüå wflmuwmu møuoouopmwuum 2.9/ 2.3/ 2.3/ Noáw Noáv, Noáv/ Em 4 mwcwmošw wnuoououmwuum f P P P P F wwwvm .oz .mxm wswnsm møouoooflæsmmuw N f N F N _ »nwfifimwucfiflflfluflcwm wmww UD WDÜHDN wDUO0UOH%flßmßm mmmm 0094 møwusm wsooouofiæzmmum mfiamcmxcfiflafloflcwm m mv E wm E mv m ww m mv m QN x MMDGOHQ m MMSUOHQ _ 4 uxflO0H% flE\aK Q XHZ HMEEMHW umåëmuw m>flufim0m|EmHw P afiwßmß 7800790-3 21 Jämförande farmakologiska försök har utförts mellan föreningarna enligt Exempel 2 och 4 enligt föreliggande uppfinning och en före- ning enligt Exemplen 62 och 63 i den svenska patentansökningen 7514286-9.

Jämförande farmakologiska försök har utförts mellan följande föreningar: Produkt A, Exempel 2 enligt föreliggande patentansökan, syn-isomer,av 7-E2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamido]-3- -[13-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)-tiometyl]-cef-3-em-4-karboxylsyra. produkt B, Exempel 4 i föreliggande patentansökan, syn-isomer av 7-[X2-(2-aminof4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacetamidol-3-I]3-metyl- -1,2,4-tiadiazol-5-yl)~tiometyÄ]-cef-3-em-4-karboxylsyra och förening X, Exempel 62 och 63 i den svenska patentansökningen 7514286-9, natriumsaltet av 78-[h-metoxiimino-u-(2-aminotiazol-4- -yl)-acetamido]-3-(1-metyl-1H~tetrazol-5-yl-tiometylïcef-3-em-4- -karboxylsyra.

Den antibakteriella aktiviteten mättes in vitro med utspädnings- metoden i vätskemedium, och de erhållna värdena framgår av följande tabeller, där de uttryckes i minsta inhiberande koncentration i mikrogram per cm3 efter 24 och 48 timmar. Resultaten framgår av bifogade tabell 1 och 2. Föreningarna A och B enligt föreliggande uppfinning har en lägre minsta inhiberande koncentration än föreningen X enligt Takedas svenska patentansökan 7514286-9 för samtliga de undersökta gram-positiva och gram-negativa stammarna. 7800790-3 22 3 3 r NS P ïo 23 uuÉ ïfinšøm wfifiumfl ov^ ov^ or m ofi m vßmmm mflflmuwmm msuuououmwuum ow^ ow^ m F m m Nmwm mflflmuwmw wsouoooumwuum m5 m5 N93/ .Sáv/ Såw 210V, Sw 4 mwnwmoäw mnuuouovmwnvw cv om P ~ _ F m«Fvm .oz .mxm mswusm msooouoflænmmum ow av N f N P ucwuwflwwucflflflfloflcmm www? UD mamman msuoouoflxcmmum E. om f P P f wïmcmxcflflflfluflqwm æmwm 0064 msmusm wflououofiænmmum m wv m vw m mv m vw m mv E vw x uxfløoum m uxdwoum 4 uxflfloum umñëmuw f Heëwä fl ä: umsëmuw m>fluHmom|Emuw P flawnmß 7800790-3 23 o«^ cv, m N m m Nmmw c«uHem»:wm MOE ucwumflwwu mfiumunwm o«^ Q«_ m m w m m mv :Q mflu:w@fl>oH@ ON ON w_o w.o F f owq s:HHøsfl;m>» mflfiwcoafimm m m ~_O f_o ~.o ~.°” mmm a Affiowcfi. wflflflnmufia wswpoum ow^ cv _ N N m m cfloflšmucwm woß ”_ ßflmüwflwh wmmN ONflCOEDQCQ MHHUHWQMHX m N «_O r.o ~_o ~_0 g m«f~m .mxw wmfinoeswcm mHHwfiwnwflm _ _ ON UN «_O «.@ w_Q w.O a nmmf mmm cfluæamunopcfiuflempcwm í QOE flfimßwfiwwh HAOO mflSUfiHwSUmH of O? ß ~_o ~_O «_Q «_o W wmwwoa .mxm flflou mflnufiuwnuwm m N J _.o f.o ~_Q ~_o _ momff uusm :flflx>omu»w» . _ MCE Ufiwuwflwmh HHOO mflflüflhwflüwfl m _ of of % m m m m Q ßmwm uuaa =HHx>umu»w» __ .HEM MmvflHwCWM .fiHOU mflSUfiHwCUmN _ m wv m vw _ m mv = «~ _ m mv : vw x ßxøwoum H m pxsvoum < uxsøoum »meemßwm He\w&.fl xwz umEEmum m>flummmc|EmuU N afiwßmß

Claims (4)

7300190-5

1. Sätt att framställa IH Patentkrav 3 nya oximer med den allmänna formeln 1 1:32 s/än o I \_._._ r-N I / I J ',¿Ä«HQ-SI'J> I 022 2A i vilken R2 1-4 kolatomer, R3 betecknar en alkylgrupp med 1-4 kolatomer eller en alkoxigrupp med 1-4 kolatomer, A betecknar en väte- atom eller en alkalimetall-, jordalkalimetall- eller magne- siumekvivalent eller en ekvivalent av en organisk aminbas och våglinjen angiver att gruppen 0Rí kan föreligga i syn- ställningen, k ä n n e förening med formeln II W Ra __¿f"í' “\CH2S S»Åï S “ärr Oør N~ïâV betecknar en mättad eller omättad alkylgrupp med t e c k n a t av att man omsätter en II Gogh' _ i vilken R betecknar detsamma som ovan och A' betecknar en 3 väteatom eller en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, med en syra med formeln III III syn-isomer, eller med ett funktionellt derivat av denna syra, varvid i formeln III R' 1 betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolysj eller en kloracetylgrupp och R2 betecknar detsamma som ovan, för att framställa en förening med formeln IV 7800790-3 ~ f NHR 1 \* o s l-Lgï/k m R Iv ' \ B n-í 5 N N / N š ,- / 0112 - S 5/ on 0 2 r I _ COZÅ syn-isomer, vilken förening med formeln Iv man behandlar med ett surt hydrolyseringsmedel, med ett hydrogenolysmedel eller med tiokarbamid eller med tvâ av de nämnda medlen, allt efter betydelsen av R'1 och Af, för att framställa en förening med formeln I' NH2 Av eçkw 2 OR2 S E_- /Rš ,l 1/ “N w C32 - S -'\s/ cozzi _ I motsvarande en förening med formeln I, vari A betecknar en väteatom och R2 och R3 betecknar detsamma som ovan, vilken förening med formeln I' man eventuellt försaltar på i och för sig känt sätt för att framställa en förening med formeln I, vari A betecknar en alkalimetall-, jordalkalimetall- eller magnesiumekvivalent eller en ekvivalent av en organisk amin- bas.

2. Sätt enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att man omsätter en förening med formeln II, vari R3 betecknar en metyl- eller en metoxigrupp och A' har den i krav 1 angivna betydelsen med en syra, med formeln III eller ett funktionellt derivat därav, vari R2 betecknar en metylgrupp och R1 har den i krav 1 angivna betydelsen, för framställning av föreningar med formeln I, vari R2 betecknar en metylgrupp, R3 betecknar en metyl- eller metoxigrupp och A betecknar en väteatom eller en natriumatom.

3. Sätt enligt något eller några av kraven 1 eller 2, k ä n- n e t e c k n a t av att man omsätter en förening med _780Û79Û-3 . 16 formeln II, vari R3 betecknar en metylgrupp och A' har den i krav 1 angivna betydelsen, med en syra med formeln III eller ett funktionellt derivat därav, vari R2 betecknar en metylgrupp, och R'1 har den i krav 1 angivna betydelsen för framställning av syn-isomer av 7-1fÉ-(2-amino-4-tiazolyl)-2- -metoxiiminoacetamido_7¥3-[_(3-metyl-1,2,4-tiadiazol-5-yl)- tiometyl_7~cef-3-em-4-karbonsyra och dess salter med alkali- metaller, jordalkalimetaller, magnesium eller organiska aminbaser.

4. Sätt enligt något eller några av kraven 1 eller 2, k ä n- n e t e c k n a t av att man omsätter en förening med formeln II, vari R3 betecknar en metoxigrupp och A' har den i krav 1 angivna betydelsen med en syra med formeln III eller ett funktionellt derivat därav, vari R2 betecknar en metylgrupp och R'1 har den i krav 1 angivna betydelsen för framställning av syn-isomer av 7-li2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-metoxiiminoacet- amido_7¥3-Å_(3-metoxi-1,2,4-tiadiazol-5-yl)tiometyl_7-cef-3- -em-4-karbonsyra och dess salter med alkalimetaller, jord- alkalimetaller, magnesium eller organiska aminbaser.