SE444683B

SE444683B - Syn-isomerer av 3-substituerade 7-amino-tiazolyl-acetamido-cefalosporansyraforeningar och farmaceutiska kompositioner till anvendning mot gram-positiva och gram-negativa bakterier

Info

Publication number: SE444683B
Application number: SE7811753A
Authority: SE
Inventors: R Heymes; A Lutz
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1977-12-05
Filing date: 1978-11-14
Publication date: 1986-04-28
Also published as: FR2410655A1; CA1315274C; US4260747A; DE2852538C2; JPS5484595A; US4297352A; GB2012761A; IT7852181A0; NL7811823A; FR2410655B1; IT1106427B; GB2012761B; CH638221A5; SE7811753L; DE2852538A1; BE872497A; JPS6360992A

Description

7811753-8 nierad ovan, vari R antingen betecknar en cyklopentylgrupp eller en grupp -CH2-S-Rl, vari Rl betecknar en acetylgruPP, och A be- tecknar en väte~ eller natriumatom. 7-¿'¿"2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_?-amino_7- -3-4"(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer och dess natriumsalt.

De föreningar med formeln I, som nämnts ovan, kan naturligtvis förekomma antingen i ovan nämnda formel I eller i form av före- ningar med formeln Iz ”i s/ NH 0 i __ |\ Iz NH\\\\ 5 N I don 2"" N / R o co 2A Föreningarna enligt uppfinningen kan även framställas genom att en förening med formeln II vari R har ovan angiven betydelse, och Al betecknar en väteatom eller resten av en estergrupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, behandlas med en syra med for- imeln III, syn-isomer in ..,,_ 7811753-8 NHR' \;:r COZH III eller ett funktionellt derivat av denna syra, i vilken formel III R' betecknar en grupp, som lätt kan elimineras med sur hydrolys eller med hydrogenolys, eller betecknar R' en kloracetylgrupp, och R" betecknar en grupp, som lätt kan elimineras med sur hydro- lys eller med hydrogenolys, eller betecknar R" en kloracetylgrupp för framställning av en förening med formeln IV NHR' ß 0 sågen? W NÃOR" O%...___N / COzAl syn-isomer, vilken förening behandlas med ett surt hydrolyserande medel, ett hydrogenolyserande medel, med tiourinämne eller med flera av de ovan nämnda medlen enligt substituenterna R', R" och A1 för framställning av en förening med formeln I, vari A be- tecknar en väteatom, som försaltas, om så önskas, med vanliga metoder för framställning av föreningar med formeln I, vari A be- tecknar en alkalimetall-, jordalkalimetall, magnesiumekvivalent eller en protonerad organisk aminbas.

Bland de grupper, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, och som kan representera R' och R", kan nämnas tert.-pentyloxi-karbonyl-, tert.-butyloxi-karbonylq trityl-, bensyl-, benshydryl-, trikloretyl-, karbobensyloxiq formyl-, trikloretoxikarbonyl- eller 2-tetrahydropvranylqrupperna. Sub- stituenten R" kan även beteckna l-metyl-1-metoxietylqruppen, som voor Qlïåïd-ïïl 7811753-8 är en specifik skyddsgrupp för alkoholer.

Bland rester av estergrupper, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, och som kan representera Al, kan nämnas benshydryl-, tert.-butyl-, bensyl-, parametoxi-bensyl- och trikloretylgrupperna.

Enligt en föredragen utföringsform av förfarandet behandlas före- ningen med formeln II med ett funktionellt derivat av syra med formeln III, såsom anhydriden eller syrakloriden, varvid anhyd- riden kan bildas in situ genom omsättning av isobutyl-klorformiat eller dicyklohexylkarbodiimid med syran. Man kan även använda andra halogenider eller andra anhydrider, som bildas in situ genom omsättning med andra alkyl-klorformiater eller en dialkylkarbo- diimid eller en annan dicykloalkylkarbodiimid. Man kan även an- vända andra syraderivat såsom syraazid, syraamid eller en ester av en aktiv syra, bildad t.ex. med hydroxi-succinimid, paranitro- fenol eller 2,4-dinitrofenol. När omsättningen av föreningen med formeln II utföres med en syrahalogenid med den allmänna formeln III eller med en anhydrid, framställd med ett isobutyl-klorformiat, arbetar man företrädesvis i närvaro av ett basiskt medel.

Såsom basiskt medel kan väljas t.ex. ett alkalimetallkarbonat eller en tertiär organisk bas såsom N-metyl-morfolin, pyridin eller en trialkylamin såsom trietylamin. överföringen av föreningarna med formeln IV till föreningar med formeln I har till syfte att ersätta substituenterna R' och R" med väteatomer och att ersätta substituenten Al, när denna beteck- nar resten av en estergrupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, med en väteatom.

För detta ändamål användes ett eller flera medel för sur hydrolys, när R' och R", som kan vara lika eller olika, var och en beteck- nar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys, och Al betecknar en väteatom eller resten av en estergrupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys. Man använder ett eller flera medel för hydrogenolys, när R' och R", som kan vara lika eller olika, ' var och en betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom hydrogeno- v-h... »_,; 7811753-8 lys, och Al betecknar en väteatom eller resten av en estergrupp, som lätt kan elimineras genom hydrogenolys.

Man använder tiourinämne, när R' och/eller R" betecknar en klor- acetylgrupp. Man använder dessutom en syra och/eller ett medel för hydrogenolys beroende på gruppen Al.

Man använder en syra, ett medel för hydrogenolys och tiourinämne, när R' eller R" betecknar en kloracetylgrupp, och när en av grup- perna R', R" och Al betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys, och de andra betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom hydrogenolys.

Som medel för sur hydrolys, med vilket man eventuellt omsätter föreningarna med formeln IV, kan nämnas myrsyra, trifluorättik- syra eller ättiksyra. Syrorna kan användas vattenfria eller i vattenlösning. Man kan även använda systemet zink-ättiksyra.

Företrädesvis användes ett medel för sur hydrolys såsom vattenfri trifluorättiksyra eller vattenhaltig myrsyra eller vattenhaltig ättiksyra för att eliminera tert.-pentyloxi-karbonyl-, tert.- -pentyloxi-karbonyl-, tert.-butoxi-karbonyl- eller tritylgrupper~ na, som kan representera grupperna R' och R" eller benshydryl-, tert"-butyl- eller parametoxi-bensylgrupperna, som kan representera Al.

Man använder företrädesvis systemet zink-ättiksyra för att elimi- nera trikloretyl-gruppen, som kan representera R', R" och Al.

Man använder företrädesvis ett medel för hydrogenolys såsom väte i närvaro av en katalysator för att eliminera benshydryl- och karbobensyloxigrupperna, som kan representera R' och R" och ben- sylgruppen, som kan representera Al.

Omsättningen av tiourinämne med föreningen med formeln IV, vari R' betecknar en kloracetylgrupp, utföres företrädesvis i neutral eller sur miljö. Denna slags reaktion beskrives av MASAKI (JACS, 90, 4508 (1968)). _ f' =>.--__ f; ff. 'Éﬂf Å l-vfv,¿\ vi”. _.. .1.._.,..-_.. . . 7811753-8 Försaltningen av de föreningar med formeln I, vari substituenten A betecknar en väteatom, kan utföras med de vanliga metoderna.

Försaltningen kan t.ex. erhållas genom inverkan av en mineralbas på dessa syror, såsom t.ex. natrium- eller kaliumhydroxid eller natriumbikarbonat eller ett salt av en eventuellt substituerad alifatisk karboxylsyra såsom dietylättiksyra, etylhexansyra eller i synnerhet ättiksyra.

De föredragna salterna av ovan nämnda syror är natriumsalterna.

Försaltningen kan även åstadkommas genom inverkan av en organisk bas såsom trietylamin, dietylamin, trimetylamin, metylamin, propyl- amin, N,N-dimetyletanolamin eller tris(hydroximetyl)-aminometan.

Den kan även erhållas genom inverkan av arginin eller lysin.

För framställningen av salter kan även solvat av de fria syrorna användas såsom utgângsprodukter i stället för de fria syrorna.

Denna försaltning utföres företrädesvis i ett lösningsmedel eller i blandning av lösningsmedel såsom vatten, etyleter, metanol, etanol eller aceton.

Salterna erhålles i amorf form eller kristalliserad form beroende på de använda reaktionsbetingelserna.

De kristalliserade salterna framställes företrädesvis genom att de fria syrorna omsättes med ett av de ovan nämnda alifatiska karboxylsyrasalterna, företrädesvis med natriumacetat.

Vid framställningen av ett natriumsalt utföres omsättningen i ett lämpligt organiskt lösningsmedel såsom t.ex. metanol, vilket lös- ningsmedel kan innehålla små mängder vatten.

Framställningen av föreningar med formeln I, vari R betecknar en cykloalkylgrupp med 3 - 5 kolatomer, kan ske genom att en före- ning med formeln ,'f'i-¿ﬂ 7811753-8 HZN \\ s I :IA F--N o 4% //I R CO2Al 5 vari Rs betecknar en cykloalkylgrupp med 3 - 5 kolatomer och Al betecknar en väteatom eller resten av en estergrupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, med en syra med formeln V NH-R' S \\N ___ ozn V CH N\ 3 \\“o-c-ca I 3 ocH3 syn-isomeren, eller ett funktionellt derivat av denna syra, i vil- ken formel R' betecknar en grupp, som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom hydrogenolys, eller betecknar R' en klor- acetylgrupp, för framställning av en förening med formeln VI NHR' *Ef VI T N // 5 o ,CH3 0 R \\G\ co A ./ cH 2 1 ocH3 3 syn-isomeren, vilken förening, om så erfordras, när Al betecknar en väteatom, försaltas eller behandlas med ett derivat av en ester- grupp, Som lätt kan elimineras genom sur hydrolys eller genom 7811753-8 hydrogenolys, och föreningen med formeln VI eller ett salt därav behandlas antingen med en vattenhaltig mineralsyra för framställ- ning av en förening med formeln VII HR' Å S N O __ N\ kran-:fs \OH /s-N / RS O VII syn-isomeren, vilken förening med formeln VII behandlas med en karboxylsyra, med ett medel för hydrogenolys, med tiourinämne eller med två av dessa medel beroende på grupperna R' och Al för framställning av en förening med formeln I, vari A betecknar en väteatom, eller med ett medel för sur hydrolys, och, om så erford- ras, beroende på värdena för R' och Al, med ett medel för hydroce- nolys, med tiourinämne eller med dessa två medel för framställ- ning av en förening med formel IA, vari A betecknar en väteatom, vilken förening försaltas, om så erfordras, för framställning av *en förening med formeln IA, vari A betecknar en alkalimetall-, jordalkalimetall-, magnesiumekvivalent eller en ekvivalent av en organisk aminbas.

Omsättningen av föreningarna med formeln IIA och V utföres under samma betingelser som omsättningen av föreningarna med formeln II med föreningarna med formeln III.

Den eventuella försaltningen och den eventuella förestringen av föreningarna med formeln VI utföres under vanliga betingelser.

Man kan t.ex. nämna inverkan av diazodifenylmetan.

-Den vattenhaltiga mineralsyra, med vilken man behandlar föreningen med formeln VI för framställning av föreningen med formeln VII är företrädesvis vattenhaltig saltsyra. Man använder t.ex. lN eller 2N saltsyra och utför omsättningen vid rumstemperatur under en 7811755-8 tidsperiod av en halv timme till flera timmar. Därefter justeras pH-värdet till neutral reaktion genom tillsats av en bas såsom natriumvätekarbonat.

När man använder en karboxylsyra för att överföra föreningarna med formeln VII till föreningar med formel I, användes företrädesvis en organisk vattenhaltig syra såsom vattenhaltig myrsyra.

Den syra, som man använder för att direkt överföra föreningarna med formeln VI till föreningar med formeln I, är företrädesvis en vattenhaltig organisk syra, som användes vid en temperatur över rumstemperatur. Man använder företrädesvis vattenhaltig myrsyra vid ca 50°C. Den eventuella försaltningen av de erhållna före- ningarna I utföres under samma betingelser som beskrivits ovan.

Föreningarna med den allmänna formeln I har en mycket bra anti- biotisk aktivitet à ena sidan mot gram-positiva bakterier såsom stafylokocker, streptokocker och i synnerhet mot penicillinresis- tenta stafylokocker samt à andra sidan mot gram-negativa bakterier, och i synnerhet mot koliforma bakterier, Klebsiella, Salmonella och Proteus.

Dessa egenskaper gör nämnda föreningar med formeln I farmaceutiskt godtagbara för användning som läkemedel och i synnerhet som anti- biotika vid behandling av âkommor orsakade av pàverkbara mikro- organismer och i synnerhet av stafylokocker, såsom blodförgiftning på grund av stafylokocker, maligna stafylokockåkommor i ansiktet eller på huden, pyodermier, septiska eller variga sår, brandböl- der, inflammationssvulster, roser, akuta stafylokockåkommor, ur- sprungliga eller efter influensa, bronkopneumonier, lungvarbild- ningar.

Dessa produkter kan även användas såsom läkemedel vid behandling av koli-bakterier och därmed förenade infektioner, vid behandling av infektioner på grund av Proteus, Klebsiella och Salmonella och vid andra àkommor, som orsakas av gram-negativa bakterier.

Bland läkemedlen enligt uppfinningen nämnes i synnerhet farmaceu- tiskt godtagbara produkter med formeln I, vari R antingen beteck- nar en cykloalkylgrupp med 3 - 5 kolatomer eller en grupp -CH2-S-Rl, .._-..,..... .. . ._ m.-. _... -_ . .ii __ . , i ,. ...i , . . V V-_:..._.....__...._..<.___._.__._.___.. ___......_ ......_............ <1 7811753-8 l0 vari Rl angiven betydelse. betecknar en acylgrupp med 2 - 4 kolatomer och A har ovan Bland läkemedlen nämnes speciellt de föreningar med formeln I, vari R antingen betecknar en cyklopentylgrupp eller en grupp -CH2-S-Rl, vari Rl betecknar en acetylgrupp och A betecknar en väteatom eller en natriumekvivalent. 7-¿__'2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxi-imino-acetyl_7-amino_7- -3-(_(acetyltio)-metyl_7cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer och dess natriumsalt.

Uppfinningen avser farmaceutiska kompositioner, som såsom huvud- beståndsdel innehåller minst ett av ovan definierade läkemedel.

Dessa kompositioner kan administreras oralt, rektalt, parenteralt, intramuskulärt eller lokalt genom topisk administrering på huden och slemhinnorna.

De kan vara fasta eller vätskor och föreligga i farmaceutiska for- mer, som ofta användes inom humanmedicinen såsom t.ex. tabletter, enkla eller överdragna, gelatinkapslar, granulat, suppositorier, injicerbara beredningar, pomador, krämer, geler. De beredes med vanliga metoder. Den aktiva bestàndsdelen eller de aktiva bestånds- delarna kan inkorporeras däri med vanliga utdrivningsmedel, som användes i dessa farmaceutiska kompositioner, såsom talk, gummi arabicum, laktos, stärkelse, magnesiumstearat, kakaosmör, vehik- lar, vattenhaltiga eller ej, vegetabiliska eller animaliska fetter, paraffinderivat, glykoler, olika vät-, disperger- eller emulger- medel, konserveringsmedel.

Den administrerade dosen varierar beroende på den behandlade åkomman, individen, administreringssättet och den använda produk- ten. Den kan t.ex. ligga mellan 0.250 g och 4 g per dag vid oral administrering till människa med den produkt, som beskrives i exempel 3, eller mellan 0,500 g och l g tre gånger per dag vid intramuskulär administrering. lrvid framställningen av föreningarna enligt uppfinningen erhålles nya industriella produkter med den allmänna formeln A 7811755-8 ll NHR' l S//šäk O xa-QXK “rs A NH- N-o\~R6 4?--N /// 0 5 CO2Al syn-isomeren, vari R', R5 och Al har ovan angivna betydelser, och R6 betecknar en l-metyl-1-metoxi-etylgrupp eller en väteatom, i synnerhet de föreningar med den allmänna formeln A ovan, vari R: har ovan angiven betydelse, företrädesvis bland de senare de före- ningar, vari R6 betecknar en väteatom.

Följande exempel beskriver uppfinningen utan att på något sätt begränsa den.

Exem el l 7-/_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl7-amino_7-3- -mety1-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. steg A: tert.-butylester av 7-¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2- -4"(1-metyl-1-metoxi-etoxi)~imino_7-acetamido_7-3-metyl-cef-3-em- -4-karboxylsyra syn-isomer. 2,33 g 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-(1-metyl-l-metoxi-etoxi- ~imino)-ättiksyra syn-isomer satsas i 10 ml metylenklorid. 1,25 g tert.-butylester av 7-amino-desacetoxi-cefalosporansyra tillsättes och 2,5 ml metylenklorid. Lösningen kyles i ett bad av vatten och is och ur en glaskolv med en temperatur av 0 - +5°C satsas under 18 minuter 1,082 g dicyklohexylkarbodiimid i 10 ml metylenklorid.

Dicyklohexylurinämnet kristalliserar ca 10 minuter efter det att tillsatsen börjat. Därefter omröres 3 timmar vid 0 - +5°C. Där- efter får blandningen áterta rumstemperatur under 30 minuter, var- ”Iaqnlßﬁal-rlifï I __-.. _ 7811753-8 12 efter ømröres 1 timme via 20 _ 25°c. via 0 _ +5°c tillsättes 0,93 ml av en lM lösning av dicyklohexylkarbodiimid i metylen- Iklorid- Därefter omröres vid O _ +5°C, det bildade urinämnet centrifugeras och tvättas med metylenklorid. Man erhåller 0,671 g.

Den erhållna lösningen destilleras till torrhet under vakuum, och man erhåller 4,622 q av ett harts, som utgör den önskade råa pro~ dukten.

Produkten renas på silikakolonn med användning av bensen-eter (1-1) såsom elueringsmedel. Man utvinner en homogen fraktion, som tor- kas till konstant vikt av 2,238 g.

Steg B: 7-¿_¿_2-(2-amino-tiasol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7- amino_7-3-metyl-cef-3~em-4-karboxylsyra syn-isomeren. 20 ml trifluorättiksyra placeras under omrörning och vid rumstem- peratur under argongas, och 2 g av den produkt, som erhölls i steg A, tillsättes. Därefter omröres 10 minuter vid rumstemperatur, sedan destilleras under vakuum till en volym av 8 ml. Lösningen kyles i isbad, och långsamt tillsättes 60 ml isopropyleter. Där- efter omröres 10 minuter i rumstemperatur, oentrifugeras och tvät- tas med isopropyleter. Man torkar under vakuum och erhåller l,5 g produktf Denna produkt placeras under argongas och 7,5 ml myrsyra 50-%-ig i vatten tillsättes. Därefter värmes vid 40°C under omrörning 15 minuter. Blandningen centrifugeras och tvättas med 2 x 1 ml 50-%-ig vattenlösning av myrsyra och med 3 x l ml destillerat vatten. 319 mg trifenylkarbinol erhålles. Därefter destilleras till torrhet och etanol tillsättes. Därefter tillsättes 15 ml eter, rives och centrifugeras. Man sköljer med eter, torkar och erhåller 0,973 g av den önskade produkten med ett Rf-värde av 0,3 (aceton med 10 % vatten). 2~(2-tritylamino-tiazol-4-yl) 2-(l-metyl~l-metoxi-etoxi-imino)- -ättiksyran, syn-isomer, använd såsom utgånqssubstans i exempel J framställdes på följande sätt. Under 20 minuter vid rumstempcraw tur omröres l2,9 g 2-¿_(hydroxi)-imino_7-2-(2-tritylamino-tiazol- ~4-yl)-ättiksyra, syn-isomer, i 120 ml metylenklorid och l2 ml 2-metoxi-propen. Därefter koncentreras till torrhet och omröres 7811753-8 13 på nytt 30 minuter i 60 ml metylenklorid och 12 ml metoxi-propen.

Därefter koncentreras till torrhet under sänkt tryck.

Man erhåller den önskade produkten, som användes i det erhållna tillståndet.

Exempel 2 Natriumsaltet av 7-/_¿_2-(2-amino-tiazol~4-yl)~2-hydroxiimino~ -acetyl_7-amino_7-3-metyl-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. 0,927 g av den syra, som erhölls i exempel l, löses i 4,8 ml av en lM lösning av natriumacetat i metanol. Lösningen centrifugeras, varefter tvättas med 2 x 0,6 ml av samma natriumacetatlösning och med 2 x 0,6 ml metanol.

Sakta sättes l2 ml 100-%-ig etanol till filtratet. Natriumsaltet faller ut. Därefter centrifugeras vid rumstemperatur och tvättas med etanol (3 x 2 ml) samt med eter. Därefter torkas under vakuum och man erhåller 517 mg av den önskade produkten.

Moderlutarna spädes med 6 ml etanol, vilket medger ett andra ut- byte om 58 mg av produkten.

NMR-spektrum: (CD3)2SO 1,93 ppm: metyl i 3-ställning 6,61 ppm: proton från tiazol.

Exempel 3 7-/"/"2-(2-amino-tiazol-4-yl)-Zhydroxiimino-acctyl_7-amino_7~3- -/_(1-metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Steg A: 7-/_/_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-4”(l-metyl-l- -yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. -metoxi~etoxi)-imino_7-acetyl_7-amino_7-3-/_(l-metyl-tetrazol-5- Under 20 minuter satsas under omrörninq vid rumsfenmeratur 4,3 g ..- .-.... Mn... _..- _... . . _. . _ _. .......-,u-w-nu-,....._.._... . ..... ._............-.......-..<...~_... .... . .... ~ fﬁ- fﬂfàß *bi kw 31A. w J' *hvnï 'h __ . fn-.- wv-._~.... -.._._._.... , _ 7811753-8 14 2-(2-tritylamino-tiazol-4~yl)-2~hydroxiimino-ättiksyra syn-isomer i 25 ml metylenklorid och 4 ml metoxipropen. Därefter konxuntre- ras till torrhet och återstoden försättes med 25 ml metylenklorid, och l,l g dicyklohexylkarbodiimid tillsättes. Efter omrörning 50 minuter vid rumstemperatur centrifugeras det bildade dicyklo- hexylurinämnet (O:8 q), filtratet kyles till -30°C och en till 3o°c kyld lösning av 1,64 g Lamino-a-(:L-metyi-tetrazol-s-yi-tia- i metyl)-cefalosporansyra i 8 ml metylenklorid och 1,2 ml trietyl- amin tillsättes.

Blandningen får återta rumstemperatur under l l/1 timme, varefter 20 ml etylacetat tillsättes och omröres l0 minuter med 20 ml lN saltsyra. 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiiminc-ättiksyra, syn-isomeren i överskott faller ut. Denna produkt centrifugeras, dekanteras i en kolv, torkas och koncentreras till torrhet. Man erhåller den önskade produkten.

Steg B: dietylaminsaltet av 7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)- -2-4-(1-metyl-1-metoxi-etoxi)-imino_7-acetyl_?-amino_7~3-¿~(1- -metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra, syn~iso- Nerell.

Den produkt, som erhållits i steg A, försättes med 10 ml etylace- tat. 0,25 ml dietylamin tillsättes, varefter utfälles med lOO ml eter. Man centrifugerar 2,748 g av det önskade saltet, Steg C: 7-4 [_2-(2-tritylamino-tiazol-4~yl)-2-hydroxiimino-ace- tyl_7-amino_7-3-1'(l-metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4- -karboxylsyra, syn-isomeren.

Den förening, som erhölls i steg B, omröres 40 minuter med 10 ml aceton och 3,5 ml lN saltsyra. Acetonen drives av, varefter extraheras med etylacetat, torkas, koncentreras till liten volym och utfälles genom tillsats av 50 ml eter. Man erhåller 1,83 g av den önskade produkten.

Steg D: 7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7- -amino¿7-354?(1-metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karb= oxylsyra, syn-isomer. '>'*'- va. -n- ~<.._~.«_._..._-.-.~_ _-,.-...._-..,.... ._ , ...___-_ - -_ _. ..-.-.. 7811755-8 l5 Den förening, som erhölls i steg C, omröres 30 minuter med 4 ml vattenhaltig myrsyra (2 volymer syra per l volym vatten)- Där- efter koncentreras till torrhet, rives i 10 ml vatten, centrifuge- ras, tvättas med vatten och utröres till en deg med eter för av- lägsnande av trifenylkarbinolen. Den råa produkten löses i 15 ml aceton innehållande 20 % vatten, varefter olösligt material cent- rifugeras, varefter rives i 10 ml etanol. Man erhåller 1 g oren produkt, som blandas till en deg med 5 ml av en blandning av mety- lenklorid och etanol (1-l) och man erhåller 0,6 g av den önskade produkten.

Analys: Cl5Hl5O5N9S3 l EtOH = 543.63 Beräknat: N % 23,1 S % 17,7 Funnet: 22,2 17,7 NMR: (C193) zso 6,65 ppm: proton i tiazol 7,25 ppm: fri amin IR-spektrum Nujol Absorption vid 1770 cm_l kännetecknande för B-laktam.

Exemgel 4 7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydrcxiimino-acetyl_7-amino_7-3- -[_(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Steg A: dietylaminsalt av 7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2- -[_(l-metyl-1-metoxi-etoxi)-imino_7-acetyl_7-amino_7-3-4-(acetyl- tio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn~isomer.

Under 20 minuter omröres vid rumstemperatur 4,3 g 2-(2-trityl- amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-ättiksyra syn-isomer i 25 ml metylenklorid och 4 ml metoxipropen.

Därefter förfar man som i steg A i exempel 3 under tillsats av 1,2 g 3~acetyltiometyl-7-amino-cefalosporansyra.

Utan att isolera den motsvarande fria syran fortsättes såsom i ,___...._..____..._... __ ...__._..__. __. 7811753-8 16 steg B i exempel 3, och man isolerar 2,64 g av det önskade saltet.

Steg B: 7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-ace- tyl_7-amino_7~3-Ä-(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra, syn-isomer.

Den förening, som erhölls i steg A, satsas i 10 ml aceton och 3,5 ml 2N saltsyra. Acetonen drives av och därefter extraheras med etylacetat och rives i eter. Man centrifugerar kondensatet och erhåller den önskade produkten.

Steg C: 7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7- -amino_7-3-Ä-(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-iso- 111611' .

Den förening, som erhölls i steg B, omröres 10 minuter med 4 ml vattenhaltig myrsyra (2 ml syra per 1 volym vatten) vid 45oC.

Därefter koncentreras till torrhet under vakuum, rives med 5 ml vatten, centrifugeras och torkas under vakuum. Man erhåller l g oren produkt,som löses i 20 ml metanol. Därefter centrifugeras olösligt material bort, övervätskan koncentreras till halva voly- men, 20 ml etanol tillsättes, varefter koncentreras på nytt till halva volymen, centrifugeras, tvättas med etanol och med eter.

Man erhåller 0,5 g renad produkt.

Analys: Cl5Hl5O6N5S3 0,5 EtOE = 480,5 Beräknat: N % 14,57 S % 20,00 Funnet: 14,3 20,1 NMR; (C93) zso 6,66 ppm: proton i tiazolcykeln TIR-spektrum Nujol _ _ Absorption vid 1776 cm_l kännetecknande för B-laktam _Exemgel 5 3-acetoximety1-7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-ace" tyl}7amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. 7811753-8 17 Steg A: dietylaminsalt av 3-acetoximetyl~7-¿"¿_2-(2-tritylamino- -tiäzol-4-yl)-2~¿_(l-metyl-l-metoxi-etoxi)-imino_7-acetvl_7- amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-(l-metyl-l-metoxi-etoxi-imino)- -ättiksyran, syn-isomer, erhållen med det förfarande, som beskrives i exempel l, utgående frán 47,25 g 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)- -2-hydroxiimino-ättiksyra i 230 ml metylenklorid. 12,5 g dicyklo- hexylkarbodiimid tillsättes och omröres 1 timme vid rumstemperatur.

Det bildade dicyklohexylurinämnet centrifugeras och tvättas med något metylenklorid (man erhåller 9,82 g). Till filtratet sättes lösningen av 13,6 g 7-amino-cefalosporansyra i 70 ml metylenklorid och l4 ml trietylamin. Därefter omröres 2 timmar vid rumstempera- tur. Därefter tvättas i en kolv med 350 ml lN saltsyra, dekante- ras, tvättas med vatten, torkas och koncentreras till torrhet. Återstoden löses i 100 ml etylacetat, och kristallisationen sättes igång. Blandningen får kristallisera 30 minuter, varefter centri- fugeras och 5,5 g av utgàngsprodukten utvinnes. Filtratet koncent- reras till torrhet, och återstoden omröres 30 minuter med 200 ml isopropyleter. Efter centrifugering och torkning erhålles 37,35 g rått kondensat. För att rena detta förfar man på följande sätt.

Produkten löses i 148 ml etylacetat. 5,5 ml dietylamin tillsättes och utfälles under kraftig omrörning med 650 ml eter. Därefter centrifugeras, tvättas med eter, torkas och man erhåller 26,35 g av den önskade produkten. Därefter koncentreras filtratet till torrhet, försättes med 50 ml eter och man erhåller ett andra utbyte av 2,8 g, identiskt med det första utbytet enligt tunnskiktskroma- tografi. Dietylaminsaltet användes således för avslutning av syn- tesen.

NMR CDCl3 50 MHz \\\ CH3(a) (a) = 1,54 ppm 0 CH3(a) (b) = 3,27 ppm ocn3 (b) proton i tiazolcykeln: 6,73 ppm Steg B: 3-acetoximetyl-1{'¿_2~(2-tritylamino-tiazol~4-yl)-2- /_(1_metyl-1-metoxi-etoxi)-imino_7-acetyl_7-amino_7-cef-3~em-4-di- -»_ rrﬁzztt-ﬂ* f'*r""' “" n ,QQAL1¶Y 7811753-8 18 fenyl-metyl-karboxylat syn-isomer. 4,15 g av dietylaminsaltet, framställt enligt steg A, satsas i 40 ml metylenklorid och 55 ml 0,1 N saltsyra.

Därefter omröres 10 minuter vid rumstemperatur, dekanteras och den organiska fasen tvättas med 2 x 25 ml vatten. Denna fas torkas därefter, centrifugeras och tvättas med metylenklorid.

Under 10 minuter satsas under omrörning 15 ml diazodifenyl-metan 8 % i bensen. Därefter omröres 15 minuter vid rumstemperatur, var~ efter lösningsmedlen indunstas under sänkt tryck vid 30°C. Iso- propyleter tillsättes, varefter sönderdelas och lösningsmedlet av- drives under sänkt tryck. Efter ytterligare en tillsats av isopro- pyleter centrifugeras och tvättas. Efter torkning erhålles 4,41 g av den önskade produkten.

NVR CDCI3 (e) 1530 - NH (a) NHd\___f S \ O of N\/ H2occx-13 (b) cH3 (a) ö X cozcs j? (i) cH3 (a) (e) cH (c) 3 Il 1,53 ppm - 2,01 ppm il 3,26 ppm m 0 w m H I 6,78 ppm (e)= 7,33 ppm 7811755-8 19 Steg C: 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazo1-4-yl)-2- -hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylat-difenylmetyl syn-isomer. 2,775 g av den produkt, som erhölls i steg B ovan, löses i 14 ml aceton och 4,5 ml IN saltsyra. Därefter omröres 2 timmar vid rums- temperatur och acetonen avdrives under sänkt tryck. 20 ml etylacetat tillsättes, omröres och därefter dekanteras. Den organiska fasen tvättas med 4 x 10 ml vatten, innehållande något salt. Tvättvattnen extraheras med 5 ml etylacetat. De organiska fraktionerna förenas och torkas. Man centrifugerar, tvättar med etylacetat och indunstar lösningsmedlet under sänkt tryck. Åter- stoden upptages i eter och kristalliseras. Därefter sönderdelas, centrifugeras och tvättas med eter. Efter torkning erhålles 1,88 g av den önskade produkten.

NMR CDCl3 60 MHZ 6,88 ppm: proton i diazolcykeln 7,33 ppm: proton i fenylkärnorna Rf = 0,5 (elueringsmedel = eter med 20 % aceton) Steg D: 3-acetoximety1-7-/*/_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxi- imino-acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. 1,88 g av den produkt, som erhölls i steg C, satsas i 15 ml ren trifluorättiksyra. Blandningen får vila 15 minuter efter upplös- ningen, varefter spädes under omrörning med 100 ml isopropyleter.

Därefter omröres 5 minuter, centrifugeras och tvättas med isopro- pyleter.

Efter torkning löses det erhållna trifluoracetatet i 2 ml etanol innehållande 0,2 ml pyridin.

Därefter centrifugeras, tvättas två gånger med etanol och man er- håller den önskade produkten.

NMR (C03) Zso _, ___..- .......@, P9Û3IQUALITY_ 7811753-8 20 (c) t OK H NH\ .S (b) N \ F-L / oH O/ ( (ä) g cH2-o-c-c1a3 a) cozzi o (a): singlett vid 2,01 ppm (b): singlett vid 6,67 ppm (c): singlett vid 7,08 ppm (d): singlett vid ll,3 ppm Exempel 6 3~acetoximetyl-7-¿_¿-2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-ace- tyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Steg A: 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2- 4-(l-metyl-l-metoxi-etoxi)-imino_7-acetyl_7-amino_7-cef~3-em-4- -tert.-butylkarboxylat syn-isomer.

I 120 ml metylenklorid löses 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-(l- -metyl-l-metoxi-etoxiimino)-ättiksyran syn-isomer, erhållen i exem- pel l. 9,84 g av tert.-butylestern av 7-amino-cefalosporansyra tillsättes. Därefter kyles till +lO°C och 6,6 g dicyklohexyl- karbodiimid tillsättes. Man tar bort kylbadet och låter blandning~ en stå 3 timmar under omrörning vid rumstemperatur. Det erhållna dicyklohexylurinämnet (4 g) centrifugeras, koncentreras till torr- het och återstoden upplöses i 25 ml etylacetat. Man tillsätter 100 ml eter och tvättar med 100 ml 0,2 N saltsyra och 100 ml vatten och 20 ml av en 1N lösning av natriumvätekarbonat. Därefter ut- fälles natriumsaltet av utgångsprodukten, som centrifugeras och torkas, varvid 3,9 g utvinnes.

Därefter tvättas med vatten, torkas, centrifugeras och koncentreras 7811753-8 21 till torrhet. Återstoden försättes med 50 ml eter, varefter man ympar och full- ständigar kristallisationen genom tillsats av 50 ml isopropyleter.

Därefter centrifugeras, tvättas och torkas. Man erhåller 10,8 g av den önskade produkten med en smältpunkt av l60°C.

NMR cncl N CH (a) 3 \O I 3 (a) 1,53 ppm \C CH (b) 3,26 ppm tiazolproton: 6,76 ppm 3 (a) o-cH3 (b) Steg B: 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-tritylamino-tiazol-4~yl)-2- -hydroximino-acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-tert.-butylkarboxylat syn-isomer.

Under 3 timmar omröres vid rumstemperatur en lösning bestående av 0,812 g av den produkt, som erhölls i steg A, i 4 ml aceton och l ml lN saltsyra. 1 ml lN vattenlösning av natriumvätekarbonat tillsättes samt 10 ml vatten och 5 ml etylacetat. Man erhåller 0,551 g av den önskade produkten med en smältpunkt av ZOOOC.

Analys: C H O N S 38 37 7 5 2 Beräknat: C % 61,69 H % 5,04 N % 9,47 S % 8,66 Funnet: 61,5 5,0 9,1 8,4 NMR: CDCI3 60 MHz 1,55 ppm: tert.-butyl 6,88 ppm: proton i tiazol.

Steg C: 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxi- imino-acetyl_Zamino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Man förfar på samma sätt som i steg D i exempel 5 utgående från 0,551 g av den produkt, som erhölls i föregående steg B och 5 ml trifluorättiksyra. Man erhåller en produkt identisk med den, som erhölls i exempel 5. 7811753-8 22 Exempel 7 3-acetoximetyl-7-/_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiímino-acetyl7- -anino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn~isomer.

Steg A: dietylaminsalt av 3-acetoxi-metyl-7-¿_¿_2-(2-tritylamino- -tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxyl- syra syn-isomer. 7,6 g av dietylaminsaltet av 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-trity1amino- -tiazol-4-yl)-2-(1-metyl-l-metoxi-etoxiimino_7-acetyl_7-amino-cef- -3-em-4-karboxylsyra syn-isomeren,framställd i steg A i exempel 5 löses i 30 ml aceton och 10 ml 2N saltsyra. Därefter omröres 40 minuter vid rumstemperatur och 20 ml vatten tillsättes, varefter acetonen avdrives vid 30°C under sänkt tryck. Därefter tillsättes 25 ml etylacetat, dekanteras, äterextraheras, tvättas med vatten, torkas och centrifugeras. Till filtratet sättes l ml dietylamin, varefter finfördelas, kyles och det bildade dietylaminsaltet cent- rifugeras, tvättas med eter och man erhåller 6 g av ren produkt.

Analys: C H O N S 38 40 7 6 2 Beräknat: C % 60,30 H % 5,33 N % ll,l0 S % 8,47 Funnet: 60,5 5,7 10,9 8,2 NMR (C193) zso 6,63 ppm: proton i tiazol 7,33 ppm: proton i trityl Steg B: 3-acetoximetyl-7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxi- imino-acetyl 7-amino 7-cef-3-em-4-karboxy]syra syn-isomer.

De 6 g av dietylaminsaltet, som erhölls i steg A, värmes vid 45°C under 15 minuter i 18 ml 50-%~ig vattenlösning av myrsyra.

Trifenylkarbinolen centrifugeras, filtratet koncentreras till torr- "het under sänkt tryck och återstoden försättes flera gånger med absolut etanol. Man erhåller den önskade produkten, som är identisk med den produkt, som erhölls i exemplen 5 och 6. 7811753-8 23 Exempel 8 3-acetoximetyl-7-/_/"2-(2-amino~tiazol-4-yl)-2~hydroxiimino-ace~ tyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer. 8,29 q av det dietylaminsalt, som erhölls i steg A i exempel 5, värmes vid 45oC under 15 minuter i 24 ml 50-%-ig vattenlösning av myrsyra.

Trifenylkarbinolen centrifugeras, filtratet koncentreras till torr- het under sänkt tryck och återstoden försättes flera gånger med absolut etanol. Man isolerar 3,5 g av den önskade produkten.

Produkten är identisk med den produkt, som erhölls i exemplen 5, 6 och 7.

Exemgel 9 3-[_(5-metyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiomety1_7-7-¿_¿_2-(2-amino~tia- zol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Steg A: dietylaminsalt av 3-¿'(5-metyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tio- metyl~7-7-¿'¿"2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-4*(l-metyl-l-metoxi- -etoxi)-imino_7~acetyl_7-amino_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Vid 2000 satsas 1,002 g 2-(2-tritylamino-tiazol-4-yl)-2-¿'(l-metyl- -1-metoxi-etoxi)-imino_7-ättiksyra, syn~isomer i 3 ml metylenklorid.

Därefter satsas vid 20°C under kvävgas 0,23 g dicyklohexylkarbo- diimid. Därefter omröres vid 20 - 25°C under l timme, och man er» håller en suspension av dicyklohexylurinämne.

För övrigt blandas 0,344 g 7-amino-3-¿_(5-metyl-l,3,4~tiadiazol-2- -yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra och 2 ml nitrometan. Till den erhållna lösningen sätten via 20 _ 25°c 0,28 nl trietylamin.

Man erhåller en brun lösning, till vilken man under omrörning vid 20 - 25oC under 5 minuter sätter den förut erhållna vattenfria sus- pensionen av urinämnet. Därefter tvättas med metylenklorid och omröres 2 timmar. Dicyklohexylurinämnet centrifugeras och tvättas med metylenklorid. Man utvinner 0,2 g dicyklohexylurinämne. _. ....._. -__ ...,>.-..._,......_.....-.___._...._.___..._-- z »f =~'ïí;'1'.'.ï I *íﬁn-.n--v--ﬂ- 7811753-8 24 Den erhållna lösningen omröres med 8 ml lN vattenlösning av salt- syra. En brun fällning centrifugeras och tvättas med vatten och metylenklorid. Man erhåller 0,4 g av en produkt, som huvudsakligen består av 7-amino-3-¿_(5-metyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl_7- -cci-3-om-4-karboxyisyra, utgångssunstansvn.

Den organiska fasen tvättas med destillerat vatten till neutrali- tet. Därefter torkas och destilleras under sänkt tryck. Återstoden försättes med 5 ml etylacetat. Därefter centrifugeras vid rums- temperatur olösligt material, som tvättas med etylacetat.

Detta olösliga material utgöres av 0,32 g 2-(2-tritylamino-tiazo1- -4-yl)-2-hydroxiimino-ättiksyra syn-isomer.

Man koncentrerar den erhållna lösningen till ca 4 ml. 0,1 ml di- etylamin tillsättes och spädes vid 20°C med 9 ml isopropyleter.

Därefter omröres l timme vid 20 - 25°C, varefter centrifugeras och saltet tvättas med etylacetat och isopropyleter.

Därefter torkas och destilleras under sänkt tryck och man erhåller 0,72 g av den önskade produkten.

NMR (CDCI3 60 MHZ) 6,76 ppm (proton i 5-ställning i tiazol) 7,28 ppm (protoner i tritylgruppen).

Steg B: 3-4-(5-metyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl_7-7-¿_¿_2-(2- -tritylamino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-cef-3- -em-4-karboxylsyra syn-isomer. 6,93 g av den produkt, som erhölls i steg A, satsas vid 28 ml ace- ton. Vid 20 - 25°C tillsättes till den erhållna lösningen 8,6 ml av en 2N vattenhaltig saltsyralösning. Därefter omröres 2,5 timme vid zo _ 23%. 4,3 m1 zu vattenhaltig saltsyra tillsättes och där- efter 28 ml destillerat vatten. Acetonen destilleras under vakuum utan att man överskrider 35°C.

Därefter centrifugeras vid rumstemperatur, tvättas till neutral reak- 7811753-8 25 tion samt torkas under sänkt tryck.

Man erhåller 5,79 g av den önskade produkten i ren form.

Denna produkt renas på följande sätt. 2,79 g av ovanstående produkt löses i 8,4 ml metylenklorid. Vid 20 - 25°C tillsättes under 5 minuter 28 ml etylacetat.

Därefter omröres 30 minuter, centrifugeras, tvättas med etylacetat, torkas under sänkt tryck och man erhåller 2,22 g produkt.

De organiska vätskorna koncentreras under vakuum till ca 5 ml och efter centrifuqering erhålles ett andra utbyte på 0,27 g.

NMR (cncl 60 MHz) 3! 7,0l ppm (proton i 5-ställning i tiazol) 7,31 ppm (protoner i tritylgruppen). steg c= 3-¿" (s-metyl-l, s, ßz-tiaaiazol-z-yl)_t10mefy1_7_7-[¿"2- (z- -amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-cef~3-em-4- -karboxylsyra syn-isomer. 2,48 g av den produkt, som erhölls i steg B, satsas i 7,5 ml myr- syra innehållande 33 % vatten. Därefter omröres vid 45 - 50oC under l5 minuter och under kvävgas. Vid 45 - 5000 tillsättes 2,5 ml destillerat vatten. Därefter centrifugeras omedelbart vid SOOC den utfällda trifenylkarbinolen och tvättas med 3 x 2,5 ml vatten- lösning av 50-%-ig myrsyra. Därefter torkas under sänkt tryck och man erhåller 0,77 g trifenylkarbinol. Filtratet destilleras under sänkt tryck och återstoden försättes med 5 ml destillerat vatten.

Därefter rives, centrifugeras vid 20°C och tvättas med destillerat vatten och därefter med eter.

Därefter indunstas under vakuum och man erhåller l,l5 g av den önskade produkten. Under 30 minuter utröres denna till en deg i 11,5 ml etanol. Därefter centrifugeras och tvättas med etanol och därefter med eter. Man torkar under vakuum och erhåller 1,06 g av den önskade produkten. 7811753-8 26 NMR (DMso. 60 MHz) 6,7 ppm (proton i 5-ställning i tiazol) 2,68 ppm (metyl i tiadiazolgruppen).

Exempel 10 Natriumsalt av 3-4-(5-metyl-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiometyl_7-7- -¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimono-acetyl_7-amino_7-cef- -3-em-4-karboxylsyra syn-isomer.

Vid rumstemperatur försättes 1 g av den syra, som erhölls i exempel 9 med 15 ml metanol och 2,2 ml metanollösning innehållande IM trietyl- amin under 5 minuter och omrörning. Olösligt material centrifuge- ras (vikt 0,066 g). Detta tvättas med metanol. Till filtratet sättes 3 ml av en metanollösning av natriumacetat. Natriumsaltet utfaller omedelbart, och det spädes med 50 ml etanol. Därefter om- röres 15 minuter vid rumstemperatur, centrifugeras och tvättas med 3 x 2 ml etanol och 3 x 5 ml eter. Därefter torkas under sänkt tryck, och man erhåller 0,511 g av den önskade produkten. De orga- niska vätskorna koncentreras under sänkt tryck till 15 ml, varefter "centrifugeras och tvättas med 3 x 0,5 ml etanol och 3 x 5 ml eter.

Därefter torkas under vakuum och man erhåller 0,200 g produkt.

De två utbytena av produkten röres till en deg i 7 ml etanol under 30 minuter vid rumstemperatur. Därefter centrifugeras och tvättas med etanol och eter. Därefter torkas under vakuum och man erhåller 0,679 g av den önskade produkten.

NMR DMSO, 60 MHZ 2,66 ppm (metyl i tiadiazolgruppen) 6,65 ppm (proton i 5-ställning i tiazol).

Exempel ll En beredning för injektion har framställts med följande sammansätt- ning: » natriumsalt av 7-/_/;2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-ace- tyl_7-amino_7-3-metyl-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer....500 mg utdryqninqsmedel sterilt vatfcn upp fill - - - - - - - - - - - - - - - - - -- 5 ml 7811753~8 27 Exempel 12 En beredning för injektion har framställts med följande sammansätt- ning: 7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-3- -[_(1-metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer .... . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . _ . . . , _, 500 mg utdrygningsmedel sterilt vatten upp till ... . . . . . . . . . . . . . . .. 5 ml.

Exempel 13 En beredning för injekiionhar framställts med följande sammansätt- ning: 7-¿_¿_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino_7-3- [_(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer ... 500 mg utdrygningsmedel sterilt vatten upp till ......_ . . . . ........ 5 ml.

Exempel 14 Gelékapslar med följande sammansättning har framställts: 7-¿'¿"2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl_7-amino7-3- -[_(1-metyl-tetrazol-5-yl)-tiometyl_?-cef-3-em-4-karboxylsyra syn-isomer . . . . . . . . . . . . . . . . . . _... . . . . . . . ............. . . . . . . _. 250 mg utdrygningsmedel för en gelatinkapsel upp till . . . . . . . . . . . . _. 400 mg Farmakologisk studie av föreningarna enligt uppfinningen.

A) Aktivitet in vitro.

Metod med utspädningar i vätskemedium.

En serie rör beredas, i vilka man placerat samma mängd sterilt näringsmedium. I varje rör fördelas ökande mängder av den före- ning, som skall studeras, och därefter ympas varje rör med en bak- teriestam.

Efter inkubation 24 timmar eller 48 timmar i värmeskåp vid 37°C uppskattas inhiberingen genom de ökade mängderna medelst genom- lysning, vilket gör att man kan bestämma de minsta inhiberade kon- centrationerna (M.I.K.) uttryckta i /ug/ml.

Följande resultat har erhållits. 7811753-8 28 Förening enligt exempel 2 M.I.K. i ,ug/ml Stammar 2ü tim. 48 tim.

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 Pen- känslig 5 5 Staphylococcus aureus UC l 128 Pen- resistent 5 5 Staphylococcus aureus exp. nr 5Ä lü6 5 5 Streptococcus pyogënes A 561 0,1 0,2 Streptococcus faecalis 5 H32 H0 H0 Streptococcus faecalis 99 F 74 >4O >40 5 20 Bacillus subtilis ATCC 6 633 Escherichia Coli Sensible tetracyklín- känslig ATCC 9 657 Escherichia Colí tetracyklin-resistent ATCC ll 303 7811753-8 29 ;scnerichía Coli Lxp. T026n¿ 2 2 Lschericnia Coli resistent mot Gentamicin, ïobramycine n 55 123 D 2 2 nlebsiella pneumoniae Exp. 52 105 1 1 hlebsiella pneumoniae 2 536 Genta- mycin-resistent 5 5 Proteus mirabilis (indol-) A 235 1 2 salmonella typhímurium N20 1 2 Lnterooacter cloacae 681 10 20 Frovidencia Lu 08 10 40 Serratia resistent mot Gentamicin 2 532 >H0 >00 Förening enligt exempel 3 stammar M.I.K. i /ug/ml 20 tim. M8 tim.

Staphylocøccus aureus ATCC 6 538 Pen- Känslig 0,2 0,2 ütaphylococcus aureus UC l l2S Pen- resistent 0,5 0,5 Staphylococcus aureus exp. nr 50 106 ,2 0,5 Streptococcus pyogënes A 561 <0,02 40,02 Streptococcus faecalis 5 H52 2 3 Streptococcus faecalis 99 F 74 5 20 bacillus subtilís ATCC 6 633 0,5 l Escherichia Coli Sensible tetracyklin- känslig ATcc 9 657 0,1 0,1 Escherichia Coli resístent tetracyklin- ATcc 11 305 40,02 40,02 uscherichia Coli Lxp. TO26B6 0,1 0,1 mscherichia Coli resistent mot Genta- micin, Tobramycine R 55 125 D 0,1 0,1 hlebsiella pneumoniae Exp. 52 145 60,02 é0,05, 1f-ﬂí>:;,,z< ,u gl F; \ AM ﬂILG _ -..www- 7811753-8 50 ¿le6sielle pneumoniae 2 556 Genta- mycln reslstent 0,5 0,5 Eroteus mirabilís (indol-) A 235 0,05 0,1 dalmonella typhimurium Ä20 0,1 0,1 nnterobacter cloacae 681 3 5 Providencia Du H8 1 2 Serratia resistent møt Gentamicin 2 532 l 2 Förening enligt exempel U M.I.K. i /ug/ml Stam” 24 tim. us tim.

Staphylococcus aureus ATCC 6 558 Pen- känslig 0,5 0,5 Staphylococcus aureus UC l 128 Pen- resistent 0,5 l Staphylococcus aureus exp. nr. 5H 146 0,5 1 Streptococcus pyogënes A 561 50,02 0,05 Streptococcus faecalis 5 H32 5 >ü0 Streptococcus faecalis 99 F 70 10 H0 Bacillus subtilis ATCC 6 633 0,5 l Escherichia Coli känslig för tetra- Cyklin ATCC 9 637 0,5 0,5 nscherichia Coli resistent mot tetra- Cyklin ATCC ll 303 0,2 0,2 Escherichía Coli Exp. TO26B6' 0,5 0,5 ßscherichia Coli resistent mot Genta- mycine, Tobramycíne R 55 123 D 0,5 0,5 ﬂlebsiella pneumoniae Exp. 52 145 0,2 0,5 Klebsiella pneumoniae 2 556 Genta- mycin-resistent 2 3 Proteus mírabilis (indol-) A 235 0,2 0,2 Salmonella typhimurium 420 0,5 0,5" 7811753-8 51 Proviuencía Lu nu 10 ng Uerrabia dentamycin-resístent 2 532 20 00 Pörening enligt exempel 10 M.I.K. /ug/ml stammar 18 tim. 214 tim.

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 Pen- känslig 0,5 0,5 dtaphylococcus aureus UC 1 128 Pen- resistent 0,5 0,5 ätaphylococcus aureus exp. nr 50 106 0,5 0,5 ¿tapnylococcus aureus CO 15 resistent mot Cêphalexine 2 5 Jtreptococuuu pyogênes A 561 0,1 0,1 ¿treptococcus faecalis 5 H32 1 2 Streptococcus faecalis 99 F 70 2 2 uacillus subtilis ATCC 6 633 0,5 0,5 Lscherichia Coli känslig mot tetracyklin Afrcc 9 637 0,2 0,2 Escherichia Coli resistent mot tetracyk- lin ATCC ll 303 50,02 50,02 bscherichía Coli Exp. TO26B6 0,2 0,2 Escherichia Coli resistent mot Gentamycin Tobramycin R 55 125 D 0,5 0,5 Klebsíella pneumoníae Exp. 52 145 0,05 0,1 Klebsíella pneumoniae 2 556 Gentamycín-resistent l 2 Proteus mírabílís (indol-) A 235 0,1 0,1 Salmonella typhimuríum H20 0,2 0,2 bnterobacter cloacae 681 2 2 Providencía Du H8 3 5 ïßerratia resistent mot Gentamycine 2 532 3 H .ïï99§-QUÅﬁïïï_ 7811753-8 32 B) Aktivitet in vivo.

Experimentell infektion med Proteus Morqanii A 256.

Inverkan av föreningen enligt exempel 3 på en experimentell infek- tion av Proteus Morganii på mus har studerats.

Grupper om 10 möss av hankön med en medelvikt av 20 g infekterades med intraperitoneal injektion om 0.5 ml av en 22 timmars odling i ett medium med pH-värdet 7 av stammen Proteus Mirabilis A 356 späda 1/lo. l timme, 5 timmar och 24 timmar efter injektionen administrerades en bestämd mängd av föreningen med subkutan injektion.

Följande resultat erhölls: Dödlíghet efter överlevande möss L: :im '5 :m5 tim 22 zu zu sim På ö* dagen Ü0 ' 'n É0ﬁr1t' tim 30 min kontroll 9 l O/10 Produkt enl. exempel 3 Láßsﬂlëšâxßa. __2_______ __; ______________________ “QLLQ ________ __ Produkt enl. exempel 3 5 1 0,05 mg 5 l l l H/10 Produkt enl. exempel 5 3 x O,]_ mg 10/10 ...,...__........._.__._ _..

Claims

7811753-8 Patentkrav

l. Syn-isomererna av 3-substituerade 7-amino-tiazo1yl-acetyl- amino-cefalosporansyraföreningar med formeln I i vilken formel R betecknar en cykloalkylgrupp med 3 - 5 kol- atomer eller en grupp -CH2-S-Rl, vari Rl betecknar en acylgrupp av en organisk karboxylsyra med 2 - 4 kolatomer, och A väljs från den grupp, som består av väte eller en alkalimetall, jord- alkalimetall, magnesium eller en protonerad organisk amin.
2. Föreningar enligt krav l, k ä n n e t e c k n a d e av att R betecknar en cyklopentylgrupp eller en grupp -CH2-S-Rl, vari R betecknar en acetylgrupp och A betecknar en väte- eller l natriumatom.
3. Förening med formeln I enligt krav 1, k ä n n e t e c k - n a d av 7-/_/_2-(2-amino-tiazol-4-yl)-2-hydroxiimino-acetyl7- -amino_7-3-Ä*(acetyltio)-metyl_7-cef-3-em-4-karboxylsyra syn- -isomer och dess natriumsalt.
4. Farmaceutiska kompositioner till användning mot gram-posi- tiva och gram-negativa bakterier, k ä n n e t e c k n a d e av att de såsom aktiv huvudbestândsdel innehåller en av de farmaceutiskt godtagbara föreningarna med formeln I enligt krav l 'ePÛOtRoQUÄLÉïïM _ ...__-.__._.-.--w-_._._..._-~ 7811755-8 NH ÄN S QWÄkNH-~fS N\\\\OH 6á____N // CO2A i vilken formel R betecknar en cykloalkylgrupp med 3 - 5 kol- atomer eller en grupp -CH2-S-Rl,vari Rl betecknar en acylgrupp av en organisk karboxylsyra med 2 - 4 kolatomer, och A väljs från den grupp, som består av väte eller en alkalimetall, jord- alkalimetall, magnesium eller en protonerad organisk amin. Farmaceutiska kompositioner enligt krav 4, k ä n n e - av att de såsom aktiv huvudbeståndsdel inne-
5. t e c k n a d e håller en av de farmaceutiskt godtagbara föreningarna med formeln I enligt krav 1. Farmaceutiska kompositioner enligt krav 4, k ä n n e av att de såsom aktiv huvudbeståndsdel inne-
6. t e c k n a d e håller en förening enligt krav 3.