SA515360035B1 - تركيبات وعمليات اقتران سكر - Google Patents

تركيبات وعمليات اقتران سكر Download PDF

Info

Publication number
SA515360035B1
SA515360035B1 SA515360035A SA515360035A SA515360035B1 SA 515360035 B1 SA515360035 B1 SA 515360035B1 SA 515360035 A SA515360035 A SA 515360035A SA 515360035 A SA515360035 A SA 515360035A SA 515360035 B1 SA515360035 B1 SA 515360035B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
saccharide
polysaccharide
conjugate
carrier protein
kda
Prior art date
Application number
SA515360035A
Other languages
English (en)
Inventor
كريشنا براساد ايه.
جو جيانكس
كيم جين-هوان
يانج يو-يينج
Original Assignee
فايزر انك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by فايزر انك filed Critical فايزر انك
Publication of SA515360035B1 publication Critical patent/SA515360035B1/ar

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/095—Neisseria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/385—Haptens or antigens, bound to carriers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/6415—Toxins or lectins, e.g. clostridial toxins or Pseudomonas exotoxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/305—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F)
    • C07K14/31—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Micrococcaceae (F) from Staphylococcus (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6037—Bacterial toxins, e.g. diphteria toxoid [DT], tetanus toxoid [TT]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/60—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characteristics by the carrier linked to the antigen
    • A61K2039/6031—Proteins
    • A61K2039/6068—Other bacterial proteins, e.g. OMP
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/62—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier
    • A61K2039/627—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the link between antigen and carrier characterised by the linker

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

يوفر الاختراع متقارنات سكر (glycoconjugates) تشمل saccharide مقترن تساهميا مع بروتين مادة حاملة (carrier protein) خلال مُباعد (spacer) (2-((2-oxoethyl)thio)ethyl)carbamate (eTEC)، بتركيبات مولدة للمناعة (immunogenic) تشمل متقارنات السكر (glycoconjugates)، وبطرق لتحضير واستخدام متقارنات السكر والتركيبات المولدة للمناعة (immunogenic).

Description

— \ — تركيبات وعمليات اقتران سكر ‎Glycoconjugation processes and compositions‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بصفة ‎Ale‏ بمتقارنات سكر ‎Jedi (glycoconjugates)‏ ‎(jd saccharide‏ تشساهميا_ مع بروتين ‎sale‏ حاملة ‎MA (carrier protein)‏ مُباعد ‎(spacer)‏ ‎((eTEC) (2-((2-oxoethyl)thio)ethyl)carbamate ©‏ بتركيبات مولدة للمناعة ‎Jods (immunogenic)‏ متقارنات السكر؛ وبطرق لتحضير واستخدام متقارنات السكر والتركيبات المولدة للمناعة. تم بنجاح لعقود استخدام طريقة لزيادة استمناع ‎(Immunogenicity)‏ جزيئات ‎alge‏ للمناعة بدرجة ضعيفة عن طريق اقتران هذه الجزيئات مع جزيئات "المادة الحاملة ‎(carrier)‏ (انظرء على ‎Vo‏ سبيل المثال» 53 :69 ‎(Goebel et al. (1939) J.
Exp.
Med.‏ على سبيل المثال؛ تم وصف تركيبات مولدة للمناعة عديدة التي اقترنت فيها البوليمرات الكبسولية ‎(capsular‏ ‎sll polymers)‏ مع بروتينات المادة الحاملة لتخليق الكثير من التركيبات المؤثرة المولدة للمناعة باستغلال "تأثير المادة الحاملة ‎et al. (1984) ."(carrier effect)‏ 5000661500 ‎Infect.
Immun. 45: 582-591)‏ تبيّن أيضا أن الاقتران يجتاز استجابة الجسم المضاد ‎١‏ الضعيفة الملاحظة عادة في ‎afl‏ عند اكتساب مناعة مع ‎polysaccharide‏ حر: ‎(Anderson etal. (1985) J.
Pediatr. 107: 346; Insel et al. (1986) J.
Exp.‏ ‎Med. 158: 294).‏ تم بنجاح توليد متقارنات باستخدام عوامل كاشفة متنوعة للاتصال بصورة متقاطعة أو للاقتران؛ مثل وصلات متقاطعة ‎(crosslinkers)‏ لها وظيفية مزدوجة متجانسة؛ لها وظيفية مزدوجة مختلفة ‎٠‏ أو صفرية الطول. يكون العديد من الطرق متاحة حاليا من أجل اقتران الجزيئات المولدة للمناعة؛
ا مثل ‎saccharides‏ البروتينات؛ والببتيدات؛ مع المواد الحاملة للببتيد أو البروتين. تخلق ‎plaza‏ ‏الطرق روابط ‎dsothiourea urethane amide amine‏ أو ‎disulfide‏ أو في بعض الحالات 110615635. إن العيب المتعلق باستخدام عوامل كاشفة للاتصال بصورة متقاطعة أو للاقتران التي تدخل مواقع تفاعلية في السلاسل الجانبية لجزيئات الحمض الأميني المتفاعلة على المادة الحاملة و/أو الجزيئات المولدة للمناعة هو أن المواقع المتفاعلة؛ إذا لم ‎(Jala‏ تكون حرة للتفاعل مع أي جزيء غير مرغوب فيه سواء في المعمل (بالتالي تؤثر سلبا بصورة محتملة على وظيفية أو ثبات الاقترانات) أو في الجسم الحي (بالتالي تُظهر خطورة محتملة للحالات السلبية في الأشخاص أو الحيوانات المكتسبين مناعة مع المستحضرات). يمكن تفاعل أو 'تغطية ‎(capped)‏ ‏المواقع المفرطة التفاعلية؛ لإخماد هذه المواقع؛ باستخدام تفاعلات كيميائية معروفة متنوعة؛ لكن قد ‎Ye‏ تكون هذه التفاعلات بخلاف ذلك مدمرة لوظيفية المتقارنات. قد يسبب هذا مشكلة على ‎day‏ ‏الخصوص عند محاولة خلق متقارن عن طريق إدخال المواقع المتفاعلة في جزيء المادة الحاملة؛ حيث أن مقاسه الكبير وبناءه الأكثر تعقيدا (بالنسبة إلى الجزيء المولد للمناعة) قد يجعله أكثر ‎dae‏ للتأثيرات ‎sped)‏ للمعالجة الكيميائية. بالتالي؛ تبقى هناك ‎dala‏ لطرق جديدة لتحضير متقارنات بروتين ‎Sale‏ حاملة مُغطى بصورة مناسبة؛ بحيث أنه يتم الحفاظ على وظيفية المادة ‎١‏ الحاملة ويحتفظ المتقارن بالقدرة على إظهار الاستجابة المناعية المطلوبة. الوصف العام للاختراع يتعلق الاختراع الحالي بطرق لتصنيع متقارنات ‎Su‏ تشمل ‎saccharide‏ مقترن تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال وصلة ثنائية ‎HIS‏ لها وظيفية مزدوجة مختلفة يشار إليها هنا على أنها مُباعد ‎(TEC) (2—((2-oxoethyl)thiojethyl)carbamate‏ يتضمن المُباعد ‎€TEC‏ سبع ‎Ye‏ ذرات خطية (أي؛ ‎(-C(O)NH(CH2)2SCH2C(O)-‏ ويوفر روابط ‎thioether‏ و ‎amide‏ ‏ثابتة بين ‎S@CCharide‏ وبروتين المادة الحاملة. يوفر الاختراع إضافيا متقارنات سكر متصلة مع ©610؛ تركيبات مولدة للمناعة تشتمل عليهاء وطرق لاستخدام متقارنات السكر والتركيبات المولد للمناعة. في جانب واحد؛ يوفر الاختراع متقارن سكر ‎Jody‏ 5800081106 مقترن مع بروتين ‎sale‏ ‎Yo‏ حاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ حيث يتصل ‎saccharide‏ تساهميا مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال
— ¢ — توصيلة ‎carbamate‏ وحيث يتصل بروتين المادة الحاملة تساهميا مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال توصيلة ‎.amide‏ ‏في بعض التجسيدات؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎Ji «polysaccharide‏ ‎polysaccharide‏ كبسولي مشتق من بكتيرياء تحديدا من بكتيريا مسببة للمرض. في تجسيدات ‎saccharide «sal ©‏ هر ‎.monosaccharide J oligosaccharide‏ قد تتمثل متقارنات السكر المتصلة مع ‎€TEC‏ من الاختراع بالصيغة العامة )11 اس ‎EDF‏ ‎SN N‏ ووب ‎i H H‏ حيث توجد الذرات المشتملة على المُباعد ‎eTEC‏ في الصندوق المركزي. تنتقى بروتينات المادة الحاملة المندمجة في متقارنات السكر من الاختراع من مجموعة ‎٠‏ - بروتينات المادة الحاملة المناسبة عموما لهذه ‎(nhl)‏ كما هو موصوف إضافيا هنا أو معروف لهؤلاء المهرة في الفن. في تجسيدات خاصة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو ‎CRMI197‏ ‏في جانب ‎AT‏ يوفر الاختراع طريقة لتصنيع متقارن سكر يشمل ‎saccharide‏ مقترن مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد 16 6؛ ‎Joli‏ الخطوات: 0 تفاعل 580008106 مع مشتق ‎carbonic acid‏ في ‎cul‏ عضوي لإنتاج ‎saccharide‏ مُنشط؛ (ب) تفاعل ‎saccharide‏ ‎Vo‏ المُنشط مع ‎cystamine‏ أو ‎cysteamine‏ أو ملح منه؛ لإنتاج ‎sthiolated saccharide‏ )=( تفاعل ‎thiolated saccharide‏ مع عامل اختزال لإنتاج ‎thiolated saccharide‏ مُنشط يشمل مادة متخلفة ‎sulfhydryl‏ ‏واحدة أو أكثر؛ (د) تفاعل ‎saccharide‏ المُنشط مع بروتين مادة ‎Alda‏ مُنشط ‎Jody‏ مجموعة ‎sal; o-haloacetamide‏ أو أكثرء لإنتاج ‎le‏ بروتين ‎thiolated Alla sale‏ ‎s¢saccharide | ٠‏ )2( تفاعل متقارن بروتين مادة حاملة ‎thiolated saccharide‏ مع ‎(V)‏ عامل كاشف للتغطية أول قادر على تغطية مجموعات ‎g—haloacetamide‏ غير مقترنة من بروتين
‎sald)‏ الحاملة المُنشطة؛ و/أو ‎(Y)‏ عامل كاشف للتغطية ثان قادر على تغطية مواد متخلفة ‎sulfhydryl‏ حرة غير مقترنة من ‎thiolated saccharide‏ المُنشط؛ حيث ينتج متقارن سكر
‏متصل مع ‎TEC‏ ‏في تجسيدات متعددة؛ يكون المشتق ‎carbonic acid‏ هو -أ8- الا68+500-:1,1 ‎(CDT) (1,2,4-triazole) ©‏ أو ‎(CDI) 1,1°—carbonyldiimidazole‏ على نحو أفضل؛ يكون المشتق ‎carbonic acid‏ هو ‎CDT‏ ويكون المذيب العضوي هو مذيب قطبي لا بروتوني؛ مثل ‎.dimethylsulfoxide (DMSO)‏ في تجسيدات مفضلة؛ ينتج ‎thiolated saccharide‏ عن طريق تفاعل ‎saccharide‏ المُنشط مع عامل كاشف ‎thioalkylamine‏ متماثل مزدوج ‎cystamine (ia‏ أو ملح منه. بطريقة بديلة؛ قد يتشكل ‎saccharide‏ 101018160 عن طريق ‎٠‏ تفاعل ‎saccharide‏ المُنشط مع ‎cysteamine‏ أو ملح منه. قد تتمثل متقارنات سكر متصلة مع
‎(1) ‏ناتجة بطرق الاختراع بالصيغة العامة‎ e TEC
‏في تجسيدات متعددة؛ يكون العامل الكاشف للتغطية الأول هو ‎N-acetyl-L-‏ ‏6 الذي يتفاعل مع مجموعات 081080861800106-.0 غير مقترنة على مواد متخلفة 686 من بروتين المادة الحاملة لتشكيل ‎sale‏ متخلفة ‎(CMC) S-carboxymethylcysteine‏ ‎١‏ متصلة تساهميا مع ‎sald)‏ المتخلفة ‎lysine‏ المُنشطة خلال توصيلة ‎thioether‏ في تجسيدات أخرى؛ يكون العامل الكاشف للتغطية الثاني هو ‎(IAA) iodoacetamide‏ الذي يتفاعل مع مجموعات ‎sulfhydryl‏ حرة غير مقترنة من ‎thiolated saccharide‏ المُنشط لتوفير ‎١006‏ مُغطى. بصورة متكررة؛ تشمل الخطوة (ه) تغطية مع كل من عامل كاشف للتغطية أول وعامل كاشف للتغطية ثان. في تجسيدات خاصة؛ تشمل الخطوة (ه) تغطية مع ‎N=‏ ‎acetyl-L—cysteine ٠‏ كالعامل الكاشف للتغطية الأول 4 ‎TAA‏ كالعامل الكاشف للتغطية الثاني. في بعض التجسيدات؛ تشمل إضافيا خطوة التغطية (ه) تفاعل مع عامل اختزال» على سبيل المثال» ‎«TCEP (DTT‏ أو ‎mercaptoethanol‏ بعد التفاعل مع العامل الكاشف للتغطية
‏الأول و/أو الثاني.
-- في بعض التجسيدات؛ تشمل الخطوة (د) إضافيا توفير بروتين مادة حاملة مُنشط يشمل مجموعة ‎a—haloacetamide‏ واحدة أو أكثر قبل تفاعل ‎thiolated saccharide‏ المُنشط مع بروتين ‎salad)‏ الحاملة المُنشط. في تجسيدات متعددة؛ يشمل بروتين المادة الحاملة المُنشط ‎do gene‏ ©0-5+001080©18000 واحدة أو أكثر. ° في جانب آخرء يوفر الاختراع متقارن ‎Su‏ متصل مع 6120 يشمل ‎saccharide‏ ‏مقترن مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ @ ناتج طبقا لأي من الطرق المعلن عنها هنا. بالنسبة لكل جانب من ‎ep RY)‏ في تجسيدات خاصة للطرق والتركيبات الموصوفة هناء يشتمل متقارن السكر المتصل مع ‎TEC‏ على ‎saccharide‏ وهو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ تحديدا ‎polysaccharide‏ كبسولي مشتق من بكتيريا مسببة للمرض. ‎IK‏ في بعض من هذه التجسيدات؛ يشتمل متقارن السكر المتصل مع ‎eTEC‏ على ‎JsS polysaccharide‏ متعلق بالمكورات الرئوية ‎(Pn) (pneumococcal)‏ مشتق من ‎Streptococcus pneumonia‏ في تجسيدات خاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Pn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبوليق لء 3 ك 5 ‎(TF 6B 6A‏ 8« ‎(10A OV‏ ملل 12 4ل 58ل قل م19 197 ‎33F 5 23F (22F‏ لها النمط ‎١٠‏ المصلي ‎.(Pn-serotype) Pn‏ في التجسيدات الأخرى؛ يشتمل متقارن السكر المتصل ‎eTEC re‏ على 6606 كبسولي مسبب لالتهاب السحايا ‎(Mn) (meningococcal)‏ مشتق من ‎Neisseria meningitides‏ في تجسيدات خاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Mn‏ ‏من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية ‎(A‏ © 135//ا و7 من النمط المصلي ‎Mn ٠‏ في تجسيدات مفضلة تحديداء؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ ‎polysaccharide Sie‏ كبسولي 00 ‎(Mn‏ مقترن تساهميا مع 081/197 خلال مُباعد ‎TEC‏
تكون التركيبات والطرق الموصوفة هنا مفيدة في تشكيلة واسعة من التطبيقات. على سبيل ‎(JE‏ يمكن استخدام متقارنات سكر من الاختراع في إنتاج تركيبات مولدة للمناعة تشمل متقارن ‎Su‏ متصل مع ‎(Say TEC‏ استخدام متقارنات السكر المولدة للمناعة لحماية متلقينها من ‎abla)‏ بعدوى بكتيرية؛ على ‎JE due‏ بواسطة. ‎LES‏ مسببة للمرض مثلا ‎meningitides J 5. pneumonia ©‏ .لا. هكذاء في جانب ‎AT‏ يوفر الاختراع تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين ‎Wile‏ حيث يشمل متقارن السكر ‎(ie saccharide‏ تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ حسب الوصف هنا. في تجسيدات متعددة؛ ‎Jodi‏ التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‎Sole ؛ةغوسم Bales ٠‏ حاملة أو مادة مخففة مقبولين ‎dua (Wile‏ يشمل متقارن السكر ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري. في بعض التجسيدات؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‏الذي ‎polysaccharide Jody‏ كبسولي ‎Pn‏ مشتق من ‎pneumonia‏ .5. في بعض التجسيدات الخاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ ‎leas ١٠‏ 1ء 3 ك 5 ‎OV 8 (TF 6B 6A‏ ممل ملك 12 14« ‎«18C ¢15B‏ ‎33F 5 23F 22F (19F (19A‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ ‏في تجسيدات أخرء تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ الذي يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Mn‏ مشتق من ‎meningitides‏ .اا. في بعض التجسيدات الخاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Mn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ ‎٠‏ كبسولية ‎«CA‏ 7/135 و7 من النمط المصلي ‎Mn‏ ‏في تجسيدات مفضلة؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‏الذي يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ مثل ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أى ‎«Mn‏ ‏مقترن تساهميا مع ‎CRM197‏ خلال مُباعد ‎TEC‏
—A—
في بعض التجسيدات؛ تشمل التركيبة ‎Sal gall‏ للمناعة ‎Sale‏ مساعدة. في بعض التجسيدات؛ تكون المادة المساعدة هي مادة مساعدة معتمدة على الألومنيوم منتقاة من المجموعة المتكونة من فوسفات الألومنيوم؛ سلفات الألومنيوم وهيدروكسيد الألومنيوم. في تجسيد ‎coals‏ تشمل التركيبات المولدة للمناعة الموصوفة هنا المادة المساعدة فوسفات الألومنيوم.
° في جانب ‎«AT‏ يوفر الاختراع طريقة منع؛ معالجة أو تحسين إصابة بعدوى بكتيرية؛ مرض أو حالة في كائن؛ تشمل إعطاء الكائن كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة من الاختراع»؛ حيث تشمل التركيبة المولدة للمناعة المذكورة متقارن ‎Su‏ متصل مع ‎eTEC‏ الذي يشمل مولد مضاد بكتيري؛ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري.
في تجسيد ‎aly‏ تكون ‎BLY)‏ بالعدوى» المرض أو الحالة مصاحبين ‎LASS‏
‎٠‏ 0081000018 .5 ويشمل متقارن السكر ‎-Pn Jswspolysaccharide‏ في تجسيد آخرء؛ تكون الإصابة بالعدوى؛ المرض أو الحالة مصاحبين لبكتيريا ‎meningitides‏ .اا ويشمل متقارن السكر ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Mn‏ ‏في جوانب أخرى» يوفر الاختراع طريقة لحث استجابة مناعية ضد بكتيريا مسببة للمرض؛ طريقة لمنع؛ معالجة أو تحسين مرض أو حالة تسببها بكتيريا مسببة للمرض؛ وطريقة لتقليل شدة ‎V0‏ عرض إصابة بعدوى؛ مرض أو ‎Ala‏ واحدة على الأقل تسببها بكتيريا مسببة للمرض؛ في كل ‎la‏ ‏عن طريق إعطاء كائن كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع 16 ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين ‎(Wile‏ حيث يشمل متقارن السكر مولد مضاد ‎«yi‏ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري مشتق من البكتيريا المسببة للمرض. في جانب آخرء يوفر الاختراع طريقة لحث استجابة مناعية في كائن؛ تشمل إعطاء الكائن ‎٠‏ كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة ‎Jodi‏ متقارن سكر متصل مع 616 ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو ‎sale‏ مخففة مقبولين ‎cll‏ حيث يشمل متقارن السكر مولد مضاد بكتيري؛ مثلا 06 كبسولي بكتيري. في تجسيدات مفضلة؛ تتضمن الطريقة حدوث استجابة مناعية وقائية في الكائن؛ كما هو موصوف إضافيا هنا.
في جانب آخرء يوفر الاختراع طريقة؛ إعطاء كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ©6150 إلى كائن لتوليد استجابة مناعية وقائية في الكائن؛ كما هو موصوف إضافيا هنا. في جاذب إضافي؛ يوفر الاختراع جسم مضاد متولد استجابة لمتقارن سكر متصل مع ‎€TEC ©‏ من الاختراع الحالي؛ أو تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن السكر. يمكن استخدام هذه الأجسام المضادة في البحث والاختبارات المعملية الإكلينيكية؛ مثلا الكشف عن بكتيريا والتنميط المصلي ‎(serotyping)‏ أو قد تستخدم للبحث عن المناعة السلبية للكائن. في جانب ‎clad AT‏ يوفر الاختراع تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع 6 من الاختراع الحالي؛ من أجل الاستخدام في منع؛ معالجة أو تحسين الإصابة بالعدوى ‎٠‏ البكتيرية؛ على سبيل ‎Jud‏ الإصابة بعدرى ‎.N. meningitides J 5. pneumonia‏ في جانب آخرء يوفر الاختراع استخدام تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ‎TEC‏ € من الاختراع ‎geo Jad)‏ أجل تحضير دواء لمنع؛ معالجة أو تحسين الإصابة بالعدوى البكتيرية» على سبيل ‎Jud‏ الإصابة بعدروى ‎.N. meningitides J 5. pneumonia‏ في تجسيدات مفضلة خاصة للطرق والاستخدامات العلاجية و/أو الوقائية الموصوفة ‎١‏ أعلاه؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل ‏ مع ‎eTEC‏ مشتمل على ‎JS polysaccharide‏ بكتيري متصل تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏في تجسيدات متعددة للطرق والاستخدامات الموصوفة هناء؛ يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي البكتيري هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎.Mn‏ في بعض التجسيدات؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Pn‏ من المجموعة ‎ASW‏ من ‎polysaccharides ٠‏ كبمولية 1« 3 ك 5 ‎OV 8 (TF 6B 6A‏ طول ملل 127 ‎33F 5 23F (22F (19F (19A ¢18C «15B 14‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ في تجسيدات أخرى؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Mn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ ‏كبسولية ‎W135 CA‏ و7 من النمط المصلي ‎Mn‏ ‏في تجسيدات مفضلة خاصة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو 0140/1197. في تجسيدات
=« \ _ مفضلة تحديداء تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ الذي يشتمل على 0/0006 كبسولي بكتيري؛ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أو ‎«Mn‏ مقترن تساهميا مع 041/197 خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏© شرح مختصر للرسومات. شكل ‎:١‏ يوضح مخطط عام من أجل تحضير متقارنات سكر متصلة مع ‎€TEC‏ من الاختراع؛ من أجل متقارن سكر يشمل ‎polysaccharide‏ مقترن تساهميا مع ‎.CRM197‏ ‏شكل 7: يوضح بناء ‎polysaccharide‏ متكرر من ‎33F JsuSpolysaccharide‏ له نمط مصلي ‎pneumonia‏ .5 (00-331). ‎٠٠‏ شكل ‎iV‏ يوضح بناء 007/58001135106 متكرر من ‎22F JswSpolysaccharide‏ له نمط مصلي ‎.(Pn-22F) 5. pneumonia‏ شكل ‎if‏ يوضح بناء ‎polysaccharide‏ متكرر من 001/58060181106 كبسولي 10/8 له نمط مصلي ‎pneumonia‏ .5 (/00-10). شكل 0 يوضح بناء ‎polysaccharide‏ متكرر من 001/58060181106 كبسولي 11/8 ‎Yo‏ له نمط مصلي ‎pneumonia‏ .5 (/00-11). شكل 0 يوضح بناء تمثيلي لمتقارن ‎Su‏ 00-331 يدمج الوصلة ‎eTEC‏ 0 ومواقع ‎sulfhydryl‏ الحرة المغطاة وغير المغطاة المحتملة (ب). شكل ‎:١7‏ يوضح مخطط متتابع لعملية تمثيلية من أجل عمليات التنشيط 0 والاقتران (ب) المستخدمة في تحضير متقارن سكر ‎Pn—-33F‏ مع ‎.CRM197‏ ‎٠١‏ شكل ‎tA‏ يوضح مستوى ‎thiolation‏ من ‎polysaccharide‏ كبسولي 00-331 كدالة على المكافئات الجزيئية من ‎CDT‏ المستخدم في خطوة التنشيط. ااي
-١١- ‏لتفصيلي:‎ ١ ‏الوصف‎ ‏قد يفهم الاختراع الحالي بسهولة أكثر بالإشارة إلى الوصف التفصيلي التالي للتجسيدات‎ ‏المفضلة من الاختراع والأمثلة المتضمنة فيه. ما لم يحدد خلاف ذلك؛ يكون لكل المصطلحات‎ ‏التقنية والعلمية المستخدمة هنا نفس المعنى المفهوم بصورة شائعة عن طرق أحد المهرة في الفن‎ ‏الذي يتعلق به الاختراع. على الرغم من استخدام أي طرق ومواد مماثلة أو مكافئة لتلك الموصوفة‎ ‏توصف هنا طرق ومواد مفضلة خاصة. في وصف‎ (Jad) ‏هنا في ممارسة أو اختبار الاختراع‎ ‏تستخدم تقنية محددة طبقا للتعريفات المذكورة أدناه.‎ op FAY) ‏التجسيدات وتحديد‎ ‏حسب الاستخدام هناء تتضمن صيغ المفرد "8'؛ 80" و"© الإشارات إلى الجمع ما لم‎ (the method) ‏سبيل المثال؛ تتضمن الإشارات إلى "الطريقة‎ Joo Jal ‏يحدد خلاف ذلك.‎ eTEC sel’ ‏طريقة و/أو؛ خطوة واحدة أو أكثر من النوع الموصوف هناء وتشير الإشارات إلى‎ ٠ ‏المهرة في الفن عند‎ mY ‏واحد أو أكثرء كما هو موضح‎ €TEC ‏إلى مُباعد‎ "(TEC spacer) ‏قراءة الكشف.‎ ‏في النطاق التعبيري إحصائيا‎ "(@about) ‏حسب الاستخدام هناء يعني المصطلح "حوالي‎ ‏درجة حرارة أو أس‎ da ‏نطاق زمني؛ وزن جزيئي‎ me ‏نطاق تركيزي‎ She ced ‏هيدروجيني. يمكن أن يكون هذا النطاق في ترتيب نسبي؛ نموذجيا بنسبة 778 نموذجيا أكثر‎ ١ ‏يمكن أن‎ clad ‏ونموذجيا أكثر أيضا بنسبة 75 من القيمة أو النطاق المحددين.‎ 7٠0 ‏بنسبة‎ ‏التجريبي النموذجي للطرق القياسية المستخدمة من أجل قياس و/أو‎ Ladd) ‏يكون هذا النطاق ضمن‎ ‏تحديد قيمة أو نطاق محدد. يعتمد الاختلاف المسموح به الذي يشمله المصطلح "حوالي” على‎ ‏النظام الخاص تحت الدراسة؛ ويمكن تقديره عن طريق أحد المهرة في الفن. كلما ذكر نطاق في‎ ‏هذا الطلب؛ يعرف أيضا كل عدد صحيح داخل النطاق بأنه تجسيد للاختراع.‎ YS (comprises) Jad’ Jie ‏يفهم أنه في هذا الكشف؛ يمكن أن يكون للمصطلحات‎ ‏'محتوية‎ J(contains) ‏'يحتوي‎ (comprising) ‏"اشتمال‎ (comprised) ‏'مشتملة‎ ‏إلخ؛ المعنى الخاص بها في نظام براءات الاختراع الأمريكي؛ مثلا يمكن أن‎ (containing) ‏إلخ. تشير هذه‎ (including) ‏"تضمين‎ (included) ‏'متضمنة‎ (includes) ‏تعني 'يتضمن‎
-١١7-
المصطلحات إلى تضمين مقومات محددة أو مجموعة من المقومات بدون استثناء أي من المقومات الأخرى. يكون للمصطلحات مثلا "'متكون أساسيا ‎"(consisting essentially of)‏ و"'يتكون أساسيا من ‎"(consists essentially of)‏ المعنى الخاص بها في نظام براءات الاختراع الأمريكي؛ مثلا تسمح بتضمين مقومات إضافية أو خطوات تقلل من قيمة الخواص الجديدة أو الأساسية للاختراع؛ أي تستثني المقومات الإضافية غير المذكورة أو الخطوات التي تقلل من قيمة الخواص الجديدة أو الأساسية للاختراع. يكون للمصطلحات 'يتكون من ‎"(consists of)‏ و أمتكون من ‎"(consisting of)‏ المعنى الخاص بها في نظام براءات الاختراع الأمريكي؛ تحديداء تكون هذه المصطلحات متعادلة في النهاية. طبقا لذلك؛ تشير هذه المصطلحات إلى تضمين مقوم خاص
أو مجموعة من المقومات واستثناء كل المقومات الأخرى.
«polysaccharide ‏الاستخدام هنا إلى‎ wus “saccharide” ‏قد يشير المصطلح‎ ٠٠ saccharide ‏بصورة متعددة» فإن الإشارات إلى‎ .monosaccharide ‏أو‎ (oligosaccharide ‏كبسولية مشتقة من‎ polysaccharides ‏كبسولي بكتيري؛ تحديدا‎ polysaccharide ‏تشير إلى‎ ‏.لا.‎ meningitis J 5. pneumonia ‏بكتيريا مسببة للمرض مثل‎
تستخدم المصطلحات 'متقارن ‎"(conjugate)‏ أو 'متقارن سكر ‎"(glycoconjugate)‏
‎VO‏ بصورة ‎Allie‏ هنا لتشير إلى ‎saccharide‏ مقترن تساهميا مع بروتين ‎sale‏ حاملة. أحيانا
‏يشار هنا إلى متقارنات السكر من الاختراع الحالي على أنها متقارنات سكر 'متصلة مع ‎eTEC‏
‎(eTEC linked)‏ التي تشمل ‎saccharide‏ متقترن تساهميا مع بروتين ‎sabe‏ حاملة خلال
‏مُباعد 6156 واحد على الأقل. قد تحتوي متقارنات السكر المتصلة مع ‎€TEC‏ من الاختراع والتركيبات المولدة للمناعة المشتملة عليها على بعض من كمية ‎saccharide‏ الحر.
‎Ye‏ يعني المصطلح ‎saccharide’‏ حر ‎"(free saccharide)‏ حسب الاستخدام هنا 6 لا يقترن تساهميا مع بروتين المادة الحاملة أو 06 ملحق تساهميا مع بروتينات مادة حاملة قليلة جدا ملحقة بنسبة عالية ‎[saccharide‏ بروتين (> 10 ١)؛‏ ولكن رغم ذلك يوجد في تركيبة متقارن السكر. قد لا يتحد تساهميا (أي لا يرتبط تساهميا؛ يمتزء أو يحتجز) 6 الحر مع متقارن سكر بروتين المادة الحاملة ‎saccharide‏ المقترن. قد تستخدم هنا
‎polysaccharide’ ; "(free polysaccharide) ‏حر‎ polysaccharide’ ‏المصطلحات‎ Yo
‎Eye
‎Ad —‏ \ — كبسولي حر ‎"(free capsular polysaccharide)‏ لنقل نفس المعنى بالنسبة إلى متقارنات السكر حيث يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ أو 06 ا كبسولي»؛ على التوالي. حسب الاستخدام ‎cla‏ يشير "ليقترن ‎conjugate)‏ 16)"؛ 'مقترن (601[198180)" و "اقتران © (600[0981090)" إلى عملية عن طريقها يتحد تساهميا ‎saccharide‏ على سبيل المثال ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري مع جزيء مادة ‎Alea‏ أو بروتين ‎sale‏ حاملة. في طرق الاختراع الحالي؛ يقترن ‎saccharide‏ تساهميا مع بروتين المادة الحاملة خلال مُباعد ‎eTEC‏ ‏واحد على الأقل. يمكن إجراء الاقتران طبقا للطرق الموصوفة أدناه أو عن طريق عمليات أخرى معروفة في الفن. الاقتران مع بروتين ‎sald)‏ الحاملة يعزز استمناع ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎A‏ بكتيري. متقارنات السكر يتعلق الاختراع الحالي بمتقارنات سكر تشمل ‎saccharide‏ مقترن تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد 8156 واحد أو أكثر؛ حيث يقترن تساهميا ‎saccharide‏ مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال توصيلة ‎«carbamate‏ وحيث يقترن تساهميا بروتين المادة الحاملة مع المُباعد ‎elTEC Yo‏ خلال توصيلة ‎.amide‏ ‏بالإضافة إلى وجود مُباعد ‎€TEC‏ واحد أو أكثرء تتضمن السمات الجديدة لمتقارنات السكر من الاختراع الحالي أنماط الوزن الجزيئي الجرامي لأجل ‎saccharides‏ ومتقارنات السكر المتصلة مع ‎eTEC‏ الناتجة؛ نسبة ‎lysines‏ المقترنة لكل بروتين ‎sale‏ حاملة وعدد ‎lysines‏ ‏المتصلة تساهميا مع ‎polysaccharide‏ مُباعد (مُباعدات) ‎TEC‏ عدد التوصيلات التساهمية ‎٠‏ بين بروتين المادة الحاملة و ‎saccharide‏ كدالة على وحدات متكررة من ‎saccharide‏ والكمية النسبية لأجل ‎saccharide‏ الحر مقارنة مع كمية ‎4K) saccharide‏ قد تتمثل متقارنات السكر المتصلة مع ‎€TEC‏ من الاختراع بالصيغة العامة ‎:)١(‏
-؟١-‏ ‎saccharide EE rT‏ ‎SF PN‏ ‎hss‏ )1( يتضمن المُباعد ‎TEC‏ سبع ذرات خطية (أي؛ ‎(—C(O)NH(CH2)2SCH2C(0)~‏ ‏ويوفر روابط ‎amide sthioether‏ ثابتة بين ‎saccharide‏ وبروتين المادة الحاملة. يشمل تخليق متقارن السكر المتصل مع 810 تفاعل مجموعة ‎hydroxyl‏ مُنشطة من ‎saccharide‏ مع © المجموعة 800100 من عامل كاشف ‎cysteinamine cystamine i thioalkylamine‏ أو ملح منه؛ بتشكيل توصيلة 68158177818 مع 580601181106 لتوفير ‎.thiolated saccharide‏ يتحقق ‎alg‏ مجموعة ‎sulfhydryl‏ حرة واحدة أو أكثر عن طريق التفاعل مع عامل كاشف للاختزال لتوفير ‎thiolated saccharide‏ مُنشط. إن تفاعل مجموعات ‎sulfhydryl‏ الحرة من ‎saccharide‏ 0181680 _المُنشط مع بروتين مادة حاملة مُنشط له مجموعة ‎a=‏ ‎haloacetamide ٠‏ واحدة أو أكثر على متخلفات محتوية على ‎amine‏ يولد رابطة ‎thioether‏ ‏لتشكيل متقارن؛ حيث يلتحق بروتين المادة الحاملة مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال رابطة ‎amide‏ ‏في متقارنات السكر من الاختراع؛ قد يكون ‎saccharide‏ هر ‎«polysaccharide‏ ‎(oligosaccharide‏ أو ‎cmonosaccharide‏ وقد ينتقى بروتين المادة الحاملة من ‎ale‏ حاملة مناسبة حسب الوصف ‎Lila)‏ هنا أو كما هو معروف لهللاء المهرة في الفن. في تجسيدات ‎Vo‏ متعددة؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري. في ‎pam‏ من هذه التجسيدات»؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو ‎.CRM197‏ ‏في بعض من هذه التجسيدات؛ فإن متقارن السكر المتصل مع ‎eTEC‏ يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ مشتق من ‎pneumonia‏ .5. في تجسيدات خاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي 00 من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية 1؛ ‎٠‏ 0 3ك ‎(TF 6B 6A S‏ ف ‎OV‏ ملل مطلتل 02ل 158ل قل ‎(19A‏ 9ل ‎33F 5 23F (22F‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ في تجسيدات ‎(sal‏ ينتقى ‎polysaccharide‏ ‏الكبسولي من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية ل 3 4 5 ‎«6B 6A‏ ‎(TF‏ فق لاق ‎10A‏ طلل 12 4ل 158ل 186 ‎33F 5 237 227 19 (19A‏ لها
-م١-‏ النمط المصلي ‎.Pn‏ في هذا التجسيد؛ يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي ‎-Pn=33F‏ في تجسيد آخرء يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي ‎-Pn=22F‏ في تجسيد آخرء يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي 00-10/8. 4 تجسيد آخر أيضاء يكون 7/580008006ا00_الكبسولي هو ‎polysaccharide ©‏ كبسولي ‎.Pn-11A‏ ‏في تجسيدات ‎af‏ « يشتمل متقارن سكر المتصل مع ‎eTEC‏ على ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي ‎Mn‏ مشتق من 1016010910065 ‎.N.‏ في تجسيدات خاصة؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ ‏الكبسولي 1/1 من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية ‎«CA‏ 135//ا و من النمط ‎Mn Ladi‏ .في هذا التجسيدء؛ يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide | ٠‏ كبسولي ‎-Mn—-A‏ في تجسيد آخرء يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎-Mn—C‏ في تجسيد آخرء يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎-Mn-W135‏ في تجسيد ‎AT‏ أيضاء يكون ‎polysaccharide‏ ‏الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Mn-Y‏ ‏في تجسيدات مفضلة على ‎aay‏ التحديدات؛ فإن متقارن السكر المتصل مع ‎€TEC‏ يشمل ‎polysaccharide Vo‏ كبسولي بكتيري ‎Pn‏ أو ‎Mn‏ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي 1« 3 4؛ ‎OV 8 (TF 6B 6A 5‏ طول ‎<11A‏ +12 كل 1538 0ق ‎22F 019 (19A‏ ‎33F 5 23F‏ له النمط المصلي ‎(Pn‏ أو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎W135 (C (A‏ و من النمط المصلي ‎(Mn‏ الذي يقترن تساهميا مع ‎CRM197‏ خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏في بعض التجسيدات؛ تشتمل متقارنات السكر المتصلة مع ‎€TEC‏ من الاختراع الحالي ‎٠‏ على ‎saccharide‏ مقترن تساهميا مع بروتين المادة الحاملة خلال المُباعد ‎TEC‏ حيث يكون 6 له وزن جزيئي جرامي بين ‎٠١‏ كيلودالتون ‎Yew yg‏ كيلودالتون. في تجسيدات أخرى» يكون ‎saccharide‏ له وزن ‎Juss‏ جرامي بين ‎٠٠‏ كيلودالتون و00٠٠‏ كيلودالتون. في تجسيدات إضافية؛ يكون ‎saccharide‏ له وزن جزيئي جرامي بين ‎on‏ كيلودالتون ‎Yous‏ ‏كيلودالتون؛ بين ‎٠ ٠‏ كيلودالتون و١٠5١‏ كيلودالتون؛ بين ‎on‏ كيلودالتون و١5١١‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠. Yo‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠‏ 5 كيلودالتون و 75 كيلودالتون؛ بين ‎ov‏ كيلودالتون
-؟١-‏ و66 كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون ‎You vg‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و ‎١756‏ ‏كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و٠٠5١‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و ‎Yo‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و١‏ 5 كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ ‏كيلودالتون و ‎ove‏ كيلودالتون؛ بين ‎You‏ كيلودالتون و٠00٠‏ كيلودالتون؛ ‎7٠090‏ كيلودالتون © و ‎١75.‏ كيلودالتون؛ ‎٠٠١‏ كيلودالتون و١٠5١‏ كيلودالتون؛ ‎You‏ كيلودالتون و ‎١*5»‏ كيلودالتون؛ ‎٠‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ ‎Yaw‏ كيلودالتون و٠‏ 75 كيلودالتون؛ أو ‎٠٠0٠8‏ كيلودالتون و6٠٠5‏ كيلودالتون. في بعض من هذه التجسيدات»؛ يكون ‎saccharide‏ هر ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي بكتيري؛ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي 1 3 4 5 ‎6B 6A‏ ا 8 ‎OV‏ ‎33F 5 23F (22F (19F 198 ¢18C (15B 14 «12F ¢11A <10A‏ له النمط المصلي ‎Pn).‏ أو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎(A‏ ©؛ ‎W135‏ و من النمط المصلي ‎(Mn‏ حيث يكون 00/866056 الكبسولي له وزن جزيئي يقع في أي من نطاقات الوزن الجزيئي الجرامي حسب الوصف. في بعض التجسيدات؛ يكون متقارن السكر المتصل مع ‎TEC‏ من الاختراع له وزن جزيئي جرامي بين ‎٠٠‏ كيلودالتون ‎Yong‏ كيلودالتون. في تجسيدات أخرى؛ يكون متقارن السكر ‎١‏ المتصل مع 8160 له وزن جزيئي جرامي بين ‎5٠0٠0‏ كيلودالتون و١٠٠٠٠‏ كيلودالتون. في تجسيدات أخرى؛ يكون متقارن السكر المتصل مع 126 له وزن جزيئي جرامي بين ‎٠٠١‏ ‏كيلودالتون و١٠٠٠٠‏ كيلودالتون. في تجسيدات أخر أيضاء يكون متقارن السكر المتصل مع 610 له وزن جزيئي جرامي بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و٠00٠"‏ كيلودالتون. في تجسيدات إضافية؛ يكون متقارن السكر المتصل مع ‎TEC‏ من الاختراع له وزن ‎Yo‏ جزيئي جرامي بين ‎You‏ كيلودالتون ‎Yoong‏ كيلودالتون؛ بين ‎You‏ كيلودالتون ‎Youu ey‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ كيلودالتون و١٠١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ ؟ كيلودالتون و ‎٠ ٠‏ 75 كيلودالتون؛ بين ‎Yoo‏ كيلودالتون و١0٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎You‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كبلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ ‏كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ © كيلودالتون ‎Yes‏ كيلودالتون؛ بين ‎Ove‏ كيلودالتون و ‎١55666‏ كيلودالتون؛ بين ‎5٠٠0‏ كيلودالتون و556١‏ كيلودالتون؛ بين ‎©٠٠90‏ كيلودالتون ‎YO‏ و١١٠٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎ove‏ كيلودالتون و٠٠‏ 75 كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ كيلودالتون و٠100‏ لاد yy ‏كيلودالتون و٠١٠٠ © كيلودالتون؛‎ © ٠٠ ‏كيلودالتون و١٠٠٠ كيلودالتون؛ بين‎ ٠٠٠ ‏كيلودالتون؛ بين‎ 06 ‏كيلودالتون و١0٠٠ كيلودالتون؛ بين‎ ٠٠ ‏كيلودالتون؛ بين‎ Tee ‏كيلودالتون‎ ٠٠٠ ‏بين‎ ‏كيلودالتون‎ 75 ٠ ‏كيلودالتون و١٠٠٠ كيلودالتون؛ بين‎ 5٠٠ ‏كيلودالتون و٠٠5١ كيلودالتون؛ بين‎ ‏كيلودالتون‎ Yoo ‏كيلودالتون؛ بين‎ ١5٠٠0١0 ‏كيلودالتون و‎ Vou ‏كيلودالتون؛ بين‎ ٠006556و‎ 7556١ ‏كيلودالتون و‎ Vou ‏كيلودالتون و١٠١٠٠٠ كيلودالتون؛ بين‎ 75 ٠ ‏كبلودالتون؛ بين‎ Your gy © ‏كيلودالتون و٠0٠٠ 5 كيلودالتون؛‎ 5 ٠ ‏كيلودالتون و١٠٠٠ كيلودالتون؛ بين‎ You ‏كيلودالتون؛ بين‎
Vou ‏كيلودالتون و٠٠٠؟ كيلودالتون؛ بين‎ Vou ‏كيلودالتون و١500 كيلودالتون؛ بين‎ You ‏بين‎ ‏كيلودالتون‎ ٠٠٠١ ‏كيلودالتون و٠٠5١ كيلودالتون؛ بين‎ Vou ‏كيلودالتون و٠٠0٠ كيلودالتون؛ بين‎ ‏كيلودالتون‎ ٠٠٠١ ‏كيلودالتون؛ بين‎ ١5٠5٠0 ‏كيلودالتون و‎ ٠٠٠١ ‏كيلودالتون؛ بين‎ You ‎٠‏ 0 و١١١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و١750‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و٠٠٠9‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و ‎Even‏ ‏كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون ‎Your go‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠0٠‏ كيلودالتون ‎Your yg‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠090٠‏ كيلودالتون و ‎١75.٠0‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠50٠‏ كيلودالتون و١٠١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠090٠‏ كيلودالتون و7566 كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠‏ كيلودالتون ‎Tovey‏ ‎١‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠050٠0‏ كيلودالتون و060٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠50٠‏ كيلودالتون و0060 كيلودالتون؛ أو بين ‎7٠٠١‏ كيلودالتون و١٠0٠‏ كيلودالتون. ‏إن طريقة أخرى لتمييز متقارنات السكر المتصلة مع ‎TEC‏ من الاختراع تكون عن طريق عدد من متخلفات ‎lysine‏ في بروتين المادة الحاملة الذي يصبح مقترن مع ‎saccharide‏ ‏خلال المُباعد ‎@TEC‏ الذي يمكن أن يتميز بنطاق من ‎lysines‏ المقترنة. ‎7٠‏ في تجسيدات متعددة؛ يقترن تساهميا بروتين المادة الحاملة مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال ‎dua‏ 807106 مع مجموعة ‎e-amino‏ واحدة أو أكثر من متخلفات ‎lysine‏ على بروتين ‎sald)‏ ‏الحاملة. في بعض التجسيدات؛ يشمل بروتين المادة الحاملة ‎Yoo NY‏ متخلف ‎lysine‏ مقترن تساهميا مع ‎saccharide‏ في تجسيدات ‎«gal‏ يشمل بروتين ‎sald)‏ الحاملة ؛ إلى ‎١١‏ متخلف ‎ii lysine‏ تساهميا مع ‎.saccharide‏ ‏لاد
م١-‏ في تجسيد مفضل؛ يشمل بروتين المادة الحاملة ‎(CRM197‏ الذي يحتوي على ‎Ye‏ ‏متخلف ©510اا. في بعض التجسيدات؛ قد يشمل 041/197 من 4 إلى ‎١١‏ متخلف ‎lysine‏ من 4 متخلف متصل تساهميا مع 5800081106. إن طريقة أخرى لتوضيح هذا المعيار أن حوالي ‎٠‏ إلى حوالي ‎74١‏ من ‎CRM197 lysines‏ يتصل تساهميا مع 5800081106. في تجسيد © آخرء؛ قد يشمل 040/197 من ؟ إلى ‎٠١‏ متخلف 57106لاا من 9 متخلف متصل تساهميا مع 06 . إن طريقة أخرى لتوضيح هذا المعيار أن حوالي 75 إلى حوالي 756 من ‎CRM197 lysines‏ يتصل تساهميا مع ‎.saccharide‏ ‏قد تتميز أيضا متقارنات السكر المتصلة مع ‎TEC‏ من الاختراع بنسبة (وزن/ وزن) ‎J) saccharide‏ مادة حاملة. في بعض التجسيدات؛ تكون نسبة 5800081108: بروتين المادة ‎٠‏ الحاملة (وزن/ وزن) بين 7“ و©. في تجسيدات أخرى؛ تكون نسبة ©88001880: بروتين المادة الحاملة (وزن/ وزن) بين ‎١‏ و©*.7. في تجسيدات إضافية؛ تكون نسبة ‎saccharide‏ بروتين المادة الحاملة (وزن/ وزن) بين ‎VV cof‏ في بعض التجسيدات؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ و/أو يكون بروتين ‎sald)‏ الحاملة هو ‎.CRM197‏ ‏قد تتميز متقارنات السكر بعدد من التوصيلات التساهمية بين بروتين المادة الحاملة ‎saccharide; Vo‏ كدالة على وحدات متكررة من 5800081106. في تجسيد ‎coals‏ يشمل متقارن السكر ‎ge‏ الاختراع توصيلة تساهمية واحدة على ‎JY‏ بين بروتين ‎sold)‏ الحاملة و ‎polysaccharide‏ من أجل كل ؛ وحدات متكررة ‎saccharide‏ من ‎polysaccharide‏ في تجسيد ‎AT‏ ¢ تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين المادة الحاملة و ‎polysaccharide‏ 35 واحدة على الأقل في كل ‎٠١‏ وحدات متكررة 580008106 من ‎polysaccharide‏ في تجسيد آخرء ‎٠‏ تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين ‎sald)‏ الحاملة و ‎polysaccharide‏ مرة واحدة على الأقل في كل ‎Yo‏ وحدة متكررة ‎saccharide‏ من ‎polysaccharide‏ في تجسيد ‎Ala)‏ تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين المادة الحاملة و ‎polysaccharide‏ مرة واحدة على الأقل في كل ‎YO‏ وحدة متكررة ‎saccharide‏ من ‎.polysaccharide‏
-١- ‏في تجسيدات متعددة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو 040/197 وتظهر التوصيلة‎ ‏مرة واحدة على الأقل كل‎ polysaccharide ‏و‎ CRM197 ‏التساهمية خلال مُباعد 1176© بين‎ .polysaccharide ‏وحدة تكرار 58600806 من‎ Yo ‏أو‎ V0 ٠١ »4 ‏إن التقدير الهام أثناء الاقتران هو تطوير شروط تسمح باستبقاء المجموعات الوظيفية لبديل‎ 0- ‏حساس بصورة محتملة من المكونات الفردية؛ مثلا سلاسل جانبية‎ saccharide ‏بخلاف‎ © .saccharide epitope ‏التي قد تشكل جزء من‎ glycerol phosphate ‏فوسفات أو‎ (Acyl ‏بين‎ O-acetylation ‏له درجة‎ saccharide ‏متقارن السكر‎ Jody coals ‏في تجسيد‎ -59 ٠ ‏بين‎ O-acetylation ‏له درجة‎ saccharide ‏في بعض التجسيدات؛ يكون‎ .27100<-٠ 7٠٠١-0 ‏بين‎ O-acetylation is ‏له‎ saccharide ‏في تجسيدات أخري؛ يكون‎ .٠ 7916 ‏أكبر من أو تساوي‎ O-acetylation ‏له درجة‎ saccharide ‏في تجسيدات إضافية؛ يكون‎ (ZY +S) ‏والتركيبات المولدة للمناعة من الاختراع‎ €TEC ‏قد تحتوي متقارنات السكر المتصلة مع‎ ‏حر الذي لا يقترن تساهميا مع بروتين المادة الحاملة؛ لكنه بخلاف ذلك يوجد‎ saccharide ‏على‎ ‏في تركيبة متقارن السكر. قد لا يتحد تساهميا (أي لا يرتبط تساهمياء يمتزء أو يحتجز)‎ ‏الحر مع متقارن السكر.‎ saccharide Vo ‏في بعض التجسيدات؛ قد يشتمل متقارن السكر المتصل مع 8156 على أقل من حوالي‎ 775 ‏من حوالي‎ Ji ‏حرء‎ saccharide 7460 ‏حرء أو أقل من حوالي‎ saccharide 0 saccharide 7728 ‏حرء أقل من حوالي‎ 580008006 77٠ ‏من حوالي‎ Ji » ‏حر‎ saccharide ‏حرء أقل من‎ saccharide 719 ‏حرء أقل من حوالي‎ saccharide 77٠8 ‏حرء أقل من حوالي‎ ‏حر بالنسبة إلى إجمالي كمية‎ saccharide 75 ‏حر » أقل من حوالي‎ saccharide ٠ ‏حوالي‎ ٠ saccharide 71١ ‏على نحو أفضل؛ يشتمل متقارن السكر على أقل من حوالي‎ .sacCcharide ‏ويفضل أكثر حتى الآن أقل من حوالي‎ «ja saccharide 7٠١ ‏حرء يفضل أكثر أقل من حوالي‎ . ‏حر‎ saccharide 5
١. ‏في تجسيدات خاصة مفضلة؛ يوفر الاختراع متقارن سكر متصل مع 6120© يشمل‎ ‏مقترن تساهميا مع‎ (Mn ‏أو‎ Pn ‏كبسولي» يفضل 00175800081106 كبسولي‎ polysaccharide ‏له واحدة أو أكثر من السمات التالية بمفردها أو في‎ (TEC ‏بروتين المادة الحاملة خلال مُباعد‎ ‏كيلودالتون و009٠ كيلودالتون؛‎ 5 ٠ ‏له وزن جزيئي جرامي بين‎ polysaccharide ‏اتحاد. يكون‎ ‏كيلودالتون و١٠٠٠٠ كيلودالتون؛ يشمل بروتين‎ 5٠١ ‏يكون لمتقارن السكر وزن جزيئي جرامي بين‎ 5 ‏متصل تساهميا مع 5800081106؛ تكون نسبة‎ lysine ‏متخلف‎ Yoo ‏المادة الحاملة من ؟ إلى‎ ‏و؛؛ يشمل متقارن السكر توصيلة تساهمية واحدة‎ ٠.7 ‏بروتين المادة الحاملة بين‎ saccharide ‏وحدة‎ Yo ‏أو‎ ١5 ٠١ ot ‏لأجل كل‎ polysaccharide ‏الحاملة و‎ sald) ‏على الأقل بين بروتين‎
O-acetylation ‏له درجة‎ saccharide ‏يكون‎ ¢polysaccharide ‏تكرار 580031706 من‎ ‏حر بالنسبة إلى‎ polysaccharide 715 ‏بين 00-75٠27؛ يشمل المتقارن أقل من حوالي‎ ٠ ‏يكون بروتين المادة الحاملة هو 0840/0197؛ ._ ينتقى‎ ¢polysaccharide ‏إجمالي‎ ‎TF «6B 6A 5 4 3 ‏كبمولية ل‎ polysaccharides ‏الكبسولي من‎ polysaccharide ‏لها النمط‎ 33F 5 23+ 22+ (19F 19/8 186 158 14 12 (11A <10A ‏لاق‎ 8 «C (A ‏كبسولية‎ polysaccharides ‏الكبسولي من‎ polysaccharide ‏أو ينتقى‎ «Pn ‏المصلي‎ ‎Mn ‏و7 لها النمط المصلي‎ 0/135 | ١ (Kd) ‏بتوزريع مقاسها الجزيئي‎ TEC ‏قد تتميز أيضا متقارنات السكر المتصلة مع‎ ‏يتحدد المقاس الجزيئي للمتقارنات بواسطة أوساط تحليل كروماتوجرافي مستثنى المقاس‎ ‏باستخدام‎ Sepharose CL-4B «uti ‏طور‎ (SEC) (size exclusion chromatography) (high pressure liquid chromatography) ‏الضغط‎ Je ‏نظام تحليل كروما توجرافي سائل‎ ‏الذي يمتل‎ VO ‏يعاير أولا عمود التحليل الكروماتوجرافي لتحديد‎ (Kd ‏بالنسبة لتحديد‎ .)101©( ٠ ‏الحجم الذي تصفى عنده أصغر الجزيئات في العينة؛‎ Vig ee WEY) ‏حجم‎ lea) ‏حجم الفراغ أو‎ ‏تتحدد القيمة‎ Vip VO ‏بين‎ SEC ‏المعروف أيضا بأنه الحجم بين الجسيمات. يجرى فصل كل‎ ‏من أجل كل كسر متجمع بالصيغة التالية‎ Kd
Kd = (Ve-Vi)/(Vi-V0)
Eye yy ‏القيمة‎ ٠.7 < ‏حيث 6/ يمثل حجم استبقاء المركب. يحدد الكسر# (الذروة الرئيسية) التي تصفي‎ ‏لمتقارن (توزيع مقاس جزيئي). في بعض التجسيدات؛ يوفر الاختراع متقارنات سكر متصلة‎ Kd ‏تجسيدات أخرى؛ يوفر الاختراع متقارنات‎ 3.770 > (Kd) ‏لها توزيع مقاس جزيئي‎ €TEC ‏مع‎ ‎> ل٠١‎ > ‏قال‎ > ٠١ > ١١ <(Kd) ‏لها توزيع مقاس جزيئي‎ TEC ‏سكر متصلة مع‎
JA > ‏.اال > نمال أو‎ Sd > ‏م فال > قال > فغال > قال‎ ‏قد تحتوي متقارنات السكر المتصلة مع 8156 والتركيبات المولدة للمناعة من الاختراع‎ ‏المُنشطة‎ thiolated saccharides ‏حرة. في بعض الحالات؛ تحتوي‎ sulfhydryl ‏على متخلفات‎ ‏الحرة؛ بعض منها لا يخفضع‎ sulfhydryl ‏المتشكلة بالطرق المتوفرة هنا على العديد من متخلفات‎ sulfhydryl ‏الحاملة أثناء خطوة الاقتران. تغطى متخلفات‎ sald) ‏للاقتران التساهمي مع بروتين‎ ‏على سبيل المثال‎ thiol ‏الحرة المتخلفة بالتفاعل مع عامل كاشف للتغطية متفاعل مع‎ ٠ ‏لتغطية الوظيفية المتفاعلة بصورة ممكنة. تؤخذ في الاعتبار أيضا‎ (IAA) iodoacetamide ‏كاشفة؛‎ Je ‏محتوي على‎ maleimide ‏مثلا‎ «gyal thiol ‏مع‎ Ale lite ‏عوامل كاشفة للتغطية‎ ‏إلخ.‎ ‏إضافة لذلك؛ قد تحتوي متقارنات السكر المتصلة مع 616 والتركيبات المولدة للمناعة‎ ‏حاملة‎ Bale ‏.من الاختراع على بروتين مادة حاملة غير مقترن متخلف؛ الذي قد يتضمن بروتين‎ ‏مُنشط خضع إلى التعديل أثناء خطوات عملية التغطية.‎ ‏يمكن استخدام متقارنات السكر من الاختراع في إنتاج تركيبات مولدة للمناعة لحماية‎ ‏متلقينها من الإصابات بعدوى بكتيرية؛ على سبيل المثال بواسطة بكتيريا مسببة للمرض مثلا‎ ‏أو 5 .ل8. بالتالي؛ في جانب آخرء يوفر الاختراع تركيبة مولدة‎ 5. pneumonia ‏ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين‎ €TEC ‏متقارن سكر متصل مع‎ Jodi ‏اللمناعة‎ 7٠ ‏مقترن تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال‎ saccharide ‏يشمل متقارن السكر‎ dua (Wiig ‏حسب الوصف هنا.‎ TEC ‏مُباعد‎
— \ \ — في تجسيدات متعددة؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‎Sole ؛ةغوسم Sales‏ حاملة أو مادة مخففة مقبولين ‎Wile‏ حيث يشمل متقارن السكر ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري. في بعض التجسيدات؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‏© الذي ‎polysaccharide Jody‏ كبسولي ‎Pn‏ مشتق من ‎pneumonia‏ .5. في بعض التجسيدات ‎dala)‏ ينتقى ‎Pn sll polysaccharide‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبمولية 1( 3 ك 5 ‎6B 6A‏ ات 8 ‎OV‏ حطمال ‎¢11A‏ 12 ‎33F 5 23F 22F (19F (19A «18C (15B (14‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ ‏في تجسيدات ‎gyal‏ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ الذي
‎٠‏ يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Mn‏ مشتق من ‎meningitides‏ .اا. في بعض التجسيدات ‎dala)‏ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Mn‏ من المجموعة المتكونة من 605 كبسولية ‎(A‏ ؛ ‎W135‏ و7 من النمط المصلي ‎Mn‏
‏في تجسيدات مفضلة؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ ‏الذي يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ مثل ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أى ‎«Mn‏ ‎Vo‏ مقترن تساهميا مع 040/1197 خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏في بعض التجسيدات » تشمل التركيبة المولدة للمناعة مادة مسا ‎Je‏ في بعض التجسيدات؛ تكون المادة المساعدة هي مادة مساعدة معتمدة على الألومنيوم منتقاة من المجموعة المتكونة من فوسفات الألومنيوم؛ سلفات الألومنيوم وهيدروكسيد الألومنيوم. في تجسيد ‎coals‏ تشمل التركيبة المولدة للمناعة المادة المساعدة فوسفات الألومنيوم.
‎٠‏ قد تحتوي متقارنات السكر المتصلة مع ‎TEC‏ والتركيبات المولد للمناعة المشتملة عليها من الاختراع على كمية من ‎saccharide‏ الحر. في بعض التجسيدات؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة أقل من حوالي ‎Jd (to‏ من حوالي ‎٠‏ )؛ أقل من حوالي أقل من حوالي ‎AY‏ ‏أقل من حوالي ‎JYo‏ أقل من حوالي ‎TAR‏ أقل من حوالي ‎VAL‏ أقل من حوالي ‎YAR‏ أو أقل من حوالي ‎Jo‏ 6 ام حر مقارنة مع إجمالي كمية ‎polysaccharide‏ على نحو
دس أفضل؛ تشتمل التركيبة المولدة للمناعة على أقل من حوالي ‎saccharide ٠‏ حرء يفضل أكثر أقل من حوالي 790 ‎saccharide‏ حرء ويفضل أكثر حتى الآن أقل من حوالي 75 ‎saccharide‏ حر . في جانب ‎al‏ قد تستخدم متقارنات السكر أو التركيبات المولدة للمناعة من الاختراع © لتوليد أجسام مضادة وظيفية عند القياس عن طريق قتل البكتيريا في نموذج فعالية حيوان أو خلال اختبار قتل مُبلعم الطاهية ‎.(Opsonophagocytic)‏ يمكن استخدام متقارنات السكر من الاختراع المشتملة على ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري ‏ في إنتاج أجسام مضادة ضد 6006 كبسولي بكتيري. بالتالي يمكن استخدام هذه الأجسام المضادة في البحث والاختبارات المعملية؛ مثلا الكشف والتنميط المصلي. قد تستخدم أيضا هذه الأجسام المضادة ‎٠‏ ا للبحث عن المناعة السلبية للكائن. في بعض التجسيدات؛ تكون الأجسام المضادة الوظيفية الناتجة ضد ‎polysaccharides‏ بكتيرية وظيفية سواء في نموذج فعالية حيوان أو في اختبار قتل مُبلعم الطاهية. قد تستخدم أيضا متقارنات السكر المتصلة مع ‎TEC‏ والتركيبات المولدة للمناعة الموصوفة هنا في طرق علاجية أو وقائية متنوعة من أجل منع؛ علاج أو تحسين إصابة بعدوى ‎dag Vo‏ مرض أو حالة في كائن. تحديداء قد تستخدم متقارنات السكر المتصلة مع ‎eTEC‏ ‏المشتملة على مولد مضاد بكتيري؛ ‎polysaccharide De‏ كبسولي بكتيري من بكتيريا مسببة للمرض؛ لمنع؛ علاج أو تحسين إصابة بعدوى بكتيرية؛ مرض أو ‎Alls‏ في كائن تسببه بكتيريا مسببة للمرض. بالتالي في جانب ‎candy‏ يوفر الاختراع طريقة لمنع؛ علاج أو تحسين إصابة بعدوى ‎٠‏ بكتيرية؛ مرض أو حالة في كائن؛ تشمل إعطاء الكائن كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة من ‎op VARY)‏ حيث تشمل التركيبة المولدة للمناعة المذكورة متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ الذي يشمل مولد مضاد بكتيري؛ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري. في تجسيد واحدء تكون ‎LLY)‏ بالعدوى؛ المرض أو الحالة مصاحبين_ لبكتيريا 28 .5 ويشمل متقارن السكر 0017580008108 كبسولي 7. في بعض التجسيدات؛
"١ ‏تنتقى الإصابة بالعدوى؛ المرض أو الحالة من المجموعة المتكونة من التهاب رئوي؛ التهاب‎ ‏الجيوب الأنفية؛ التهاب الأذن الوسطىء التهاب السحاياء تجرثم الدم؛ تعفن الدم؛ تجمع صديد داخل‎ ‏التجويف البلوري؛ التهاب الملتحمة؛ التهاب النخاع العظمي؛ التهاب المفاصل التعفني؛ التهاب‎ ‏الشغاف؛ التهاب الصفاقء التهاب التأمور؛ التهاب الخُشاء؛ التهاب النسيج الخلوي؛ إصابة النسيج‎ ‏الرخو بالعدوى وخراج بالمخ.‎ ‏المرض أو الحالة مصاحبين لبكتيريا‎ gall ‏تكون الإصابة‎ OAT ‏في تجسيد‎ ‏في بعض‎ Mn ‏كبسولي‎ polysaccharide Sul ‏ويشمل متقارن‎ S. pneumonia ‏التجسيدات؛ تنتقى الإصابة بالعدوى؛ المرض أو الحالة من المجموعة المتكونة من التهاب السحاياء‎ ‏تعفن الدم بالمكورات السحائية؛ تجرثم الدم وتعفن الدم.‎ ‏في جانب آخرء يوفر الاختراع طريقة لحث استجابة مناعية في كائن؛ تشمل إعطاء الكائن‎ Vo ‏كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع 616 ومادة مسوغة؛‎ ‏كبسولي‎ polysaccharide ‏حيث يشمل متقارن السكر‎ Lila ‏مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين‎ ‏بكتيري.‎ ‎Us ‏طريقة لمنع؛ معالجة أو تحسين مرض أو‎ UY) ‏أيضاء يوفر‎ AT ‏في جانب‎ ‏تسببها بكتيريا مسببة للمرض في كائن؛ تشمل إعطاء الكائن كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة‎ ٠5 ‏ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين‎ €TEC ‏للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع‎ ‏كبسولي بكتيري.‎ polysaccharide ‏دوائيا؛ حيث يشمل متقارن السكر‎ ‏واحدة على الأقل‎ Alla ‏في جانب آخرء يوفر الاختراع طريقة لتقليل شدة عرض مرض أو‎ ‏من تركيبة مولدة للمناعة‎ Lelie ‏تسببها بكتيريا مسببة للمرض؛ تشمل إعطاء كائن كمية مؤثرةٍ‎ ‏حاملة أو مادة مخففة مقبولين دوائيا؛‎ Sale ‏ومادة مسوغة؛‎ €TEC ‏متصل مع‎ Su ‏تشمل متقارن‎ Yo ‏كبسولي‎ polysaccharide Mis ‏حيث يشمل متقارن السكر 00175800081106 كبسولي بكتيري»‎ .Mn ‏أى‎ Pn
Eye
اج \ — في جانب آخرء يوفر الاختراع طريقة إعطاء كمية مؤثرة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة ‎Jo‏ متقارن سكر متصل مع )61 من الاختراع إلى كائن لتوليد استجابة مناعية وقائية في الكائن؛ كما هو موصوف إضافيا هنا. في جانب آخر أيضاء يوفر الاختراع تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع © 8156 من الاختراع ‎(Jali‏ حسب الوصف هناء من أجل الاستخدام في منع؛ معالجة أو تحسين الإصابة بالعدوى البكتيرية»» على سبيل المثال الإصابة ‎S. pneumonia (gx‏ أى ‎.N. meningitides‏ في جاذب ‎AT‏ « يوفر الاختراع استخدام تركيبة ‎alge‏ للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ من الاختراع الحالي؛ حسب الوصف ‎lia‏ من أجل تحضير دواء لمنع؛ معالجة أو ‎Yo‏ تحسين الإصابة بالعدوى البكتيرية؛» على سبيل المثال الإصابة ‎pneumonia (gsm‏ .5 أى ‎.N. meningitides‏ في الطرق والاستخدامات العلاجية و/أو الوقائية الموصوفة أعلاه؛ تشمل التركيبة المولدة للمناعة بصورة متعددة متقارن سكر متصل مع ‎TEC‏ مشتمل على ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري متصل تساهميا مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد 16 6. في تجسيدات متعددة للطرق ‎١‏ والاستخدامات الموصوفة ‎la‏ يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي البكتيري هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎.Mn‏ في بعض التجسيدات؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Pn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية ‎<10A OV 8 (TF «6B 6A 5 «4 1‏ ملك 12ل ‎¢15B‏ قل طقل ‎«19F‏ ‎33F 5 23F (22F‏ لها النمط ‎Lad‏ 00. في تجسيدات ‎(sal‏ ينتقى ‎polysaccharide‏ ‎٠‏ الكبسولي ‎Mn‏ من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبسولية ‎W135 CA‏ و١‏ من النمط المصلي ‎Mn‏ ‏في تجسيدات مفضلة خاصة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو 0140/1197. في تجسيدات مفضلة تحديداء تشمل التركيبة المولدة للمناعة متقارن سكر متصل مع ‎TEC‏ الذي يشتمل على
— أ \ — ‎Jus polysaccharide‏ بكتيري؛ مثلا ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أو ‎«Mn‏ مقترن تساهميا مع ‎CRM197‏ خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏إضافة لذلك؛ يوفر الاختراع طرق لحث استجابة مناعية ضد بكتيريا ‎pneumonia‏ .5 أو ‎meningitides‏ .لا في كائن؛ طرق لمنع؛ علاج أو تحسين إصابة بعدوى» مرض أو ‎Ala‏ تسببها © بكتيريا ‎pneumonia‏ .5 أو ‎N. meningitides‏ في كائن؛ وطرق لتقليل شدة عرض إصابة بعدوى» مرض أو ‎Ala‏ واحدة على الأقل تسببها بكتيريا ‎J 5. pneumonia‏ .لا 0245 في كائن؛ في كل حالة عن طريق إعطاء كائن كمية مؤثرة ‎belie‏ من تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين دوائيا؛ حيث يشمل متقارن السكر ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري مشتق من .5 ‎pneumonia.‏ أو ‎meningitides‏ .لا على التوالي. ‎Saccharides‏ ‏إن ‎Saccharides‏ 3 تتضمن ‎oligosaccharides «(polysaccharides‏ ‎.monosaccharides‏ في تجسيدات متعددة؛ يكون ‎«polysaccharide s saccharide‏ تحديدا ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري. تحضر ‎polysaccharides‏ الكبسولية عن طريق ‎Vo‏ تقنيات قياسية معروفة لهؤلاء المهرة في الفن. في الاختراع الحالي؛ قد تحضر ‎polysaccharides‏ الكبسولية؛ ‎She‏ من 1؛ 3 4؛ 5؛ ‎OV 8 (TF 6B 6A‏ مول ملك ا2لغكل 1538 18 19ل ا19 227 ‎23F‏ ‎33F‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ من ‎pneumonia‏ .5. في تجسيد واحد؛ قد ينمو النمط المصلي 6 ام المتعلق بالمكورات الرثوية في وسط أساسه فول الصوياء تتقى ‎polysaccharides | ٠‏ ,430 خلال الطرد المركزي؛ الترسيب؛ الترشيح الفائق؛ و/أو تحليل كروماتوجرافي عمود. قد ‎polysaccharides his‏ المنقاة لجعلها قادرة على التفاعل مع المُباعد ‎TEC‏ وبعدئذ تندمج في متقارنات السكر من الاختراع»؛ حسب الوصف إضافيا هنا. يؤخذ في الاعتبار الوزن الجزيئي الجرامي لأجل ‎polysaccharide‏ الكبسولي من أجل الاستخدام في التركيبات المولدة للمناعة. تكون ‎polysaccharides‏ الكبسولية عالية الوزن
ل الجزيئي الجرامي قادرة على حث استجابات مناعية لجسم مضاد خاصة نظرا لتكافؤ الإبيتوبات الأعلى الموجودة على السطح المستضد. يؤخذ في الاعتبار ‎Jie‏ وتنقية ‎polysaccharides‏ ‏الكبسولية عالية الوزن الجزيئي الجرامي من أجل الاستخدام في المتقارنات المناعية؛ التركيبات والطرق من الاختراع الحالي.
‎o‏ في بعض التجسيدات؛ يكون ‎saccharide‏ له وزن جزيئي جرامي بين ‎٠١‏ كيلودالتون ‎You‏ كيلودالتون. في تجسيدات أخرى؛ يكون ‎saccharide‏ له وزن جزيئي جرامي بين ‎ov‏ ‏كيلودالتون و٠٠٠٠‏ كيلودالتون. في تجسيدات إضافية؛ يكون 880011811086 له وزن جزيئي جرامي بين ‎on‏ كيلودالتون و١ ‎١75‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ كيلودالتون و١٠٠١‏ كيلودالتون؛ بين ‎ou‏ ‏كيلودالتون و6٠5١‏ كيلودالتون؛ بين ‎5٠‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠‏ 5 كيلودالتون
‎٠٠٠١و ‏كيلودالتون‎ ٠٠١ ‏كيلودالتون و00 كيلودالتون؛ بين‎ 5٠0 ‏كيلودالتون؛ بين‎ Vou oo ٠
‏كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و ‎١75٠6‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و٠٠ ‎١5‏ كيلودالتون؛
‏بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و756١‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏
‏كيلودالتون و ‎You‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠١‏ كيلودالتون و٠٠‏ 5 كيلودالتون؛ بين ‎You‏ كيلودالتون
‎١5٠١و ‏كيلودالتون‎ ٠٠٠9 ‏كيلودالتون؛ بين‎ ١75. ‏كيلودالتون و‎ 5٠9 ‏كيلودالتون؛ بين‎ Young
‎١‏ كيلودالتون؛ بين ‎You‏ كيلودالتون و ‎١7*5٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠٠9‏ كيلودالتون و١٠٠٠‏ كيلودالتون؛
‏بين ‎You‏ كيلودالتون و١‏ 75 كيلودالتون؛ أو بين ‎٠٠0٠9‏ كيلودالتون و٠0٠5‏ كيلودالتون. في بعض
‏من هذه التجسيدات؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ ‎Mie‏
‎«14 12 ‏ات 8 لاق طفمل ملل‎ 6B 6A 5 «4 3 ‏كبمولي ل‎ polysaccharide
‎polysaccharide ‏أى‎ Pn ‏له النمط المصلي‎ 33F 5 23F 22F (19F <19A (18C ¢15B
‎٠‏ كبسولي ‎W135 (CA‏ و7 من النمط المصلي ‎(Mn‏ حيث يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي له وزن جزيئي يقع في أي واحد من نطاقات الوزن الجزيئي الجرامي حسب الوصف.
‏في بعض التجسيدات؛ تكون ‎saccharides‏ من الاختراع ‎.O-acetylated‏ في بعض
‏التجسيدات»؛ يشمل متقارن السكر ‎alsaccharide‏ درجة 0-30617/131007 بين ‎7٠٠١-٠١‏ بين
‎-١7١0 ‏بين‎ 1٠-٠٠١ ‏بين ٠؛؟-١٠٠1؛ بين ١*-١٠٠1؛ بين‎ 1٠٠١-١ ‏بين‎ 1١-٠
‎790-55 ‏بين‎ 970-80٠ ‏بين‎ 71٠-98 ‏بين‎ 1٠٠١-8٠ ‏بين 750١-١١٠٠0؛ بين‎ ٠٠١ 7٠
م \ — بين لاح 4 أو بين 71 في تجسيدات أخري؛ تكون درجة ‎٠١ > O-acetylation‏ > ١ل‏ > .كال ك قال > قال > نبال > يلال > ‎JA‏ أو > .5 أو حوالي < يد ‎J ١‏ في بعض التجسيدات؛ تستخدم ‎polysaccharides‏ الكبسولية؛ المتقارنات المناعية أو 0 التركيبات المولدة للمناعة من الاختراع لتوليد أجسام مضادة التي تكون وظيفية عند القياس عن طريق قتل البكتيريا في نموذج فعالية حيوان أو خلال اختبار قتل مُبلعم الطاهية الذي يوضح أن الأجسام المضادة تقتل البكتيريا. يمكن الحصول مباشرة على ‎polysaccharides‏ كبسولية من بكتيريا باستخدام إجراءات العزل المعروفة لأحد المهرة العاديين في الفن. انظرء على سبيل المثال؛ ‎Fournier etal. (1984), supra; Fournier etal. (1987) Ann.
Inst. 1.‏ ‎Pasteur/Microbiol. 138:561-567;‏ منشور طلب براءة الاختراع الأمريكي رقم: 79 ‎eV V/V EV‏ ومنشور طلب براءة الاختراع الدولي رقم: 0/57751©؛ يندمج كل منهم هنا كمرجع كما هو مذكور بأكمله. إضافة لذلك؛ يمكن إنتاجها باستخدام البروتوكولات التخليقية. علاوة على ذلك؛ يمكن إنتاج ‎polysaccharide‏ ‎٠‏ كبسولي بصورة تخليقية باستخدام إجراءات الهندسة الوراثية المعروفة أيضا لأحد المهرة العاديين في الفن. (انظر؛ على سبيل المثال» 143:2395-2405 ‎«Sau et al. (1997) Microbiology‏ وبراءة الاختراع الأمريكية رقم: ‎YYA0Y‏ £10 يندمج كل منهم كمرجع كما هو مذكور بأكمله). يمكن الحصول على السلالات البكتيرية ‎N. meningitides J 5. pneumonia‏ المستخدمة لتصنيع ‎polysaccharides‏ الخاصة المستخدمة في متقارنات السكر من الاختراع ‎Yo‏ من مجموعات أدبية ‎YEW‏ أو نماذ ‎z‏ إكلينيكية . بروتينات المادة الحاملة يكون المكون الآخر لمتقارن السكر من الاختراع هو بروتين مادة حاملة الذي يقترن معه 06 . يمكن استخدام المصطلحات 'مادة حاملة للبروتين ‎"(protein carrier)‏ أو
—vq- ‏بصورة متبادلة هنا. يفضل‎ "(carrier) ‏أو 'مادة حاملة‎ "(carrier protein) ‏"بروتين المادة الحاملة‎ ‏أن تكون بروتينات المادة الحاملة هي بروتينات غير سامة وغير مسببة للتفاعل ويمكن الحصول‎ ‏عليها بكمية كافية ونقاء كاف. يجب أن تكون بروتينات المادة الحاملة قابلة للتعديل طبقا لإجراءات‎ ‏الاقتران القياسية. في متقارنات السكر الجديدة من الاختراع؛ يقترن تساهميا بروتين المادة الحاملة‎
TEC ‏خلال الممُباعد‎ saccharide ‏مع‎ © إن الاقتران مع مادة حاملة يمكنه أن يُحسن استمناع المولد المضاد؛ على سبيل المثال المولد المضاد البكتيري ‎polysaccharide Sie‏ كبسولي بكتيري. تكون المواد الحاملة للبروتين المفضلة من أجل المولدات المضادة هي ‎toxoids toxins‏ أو أي مادة متفاعلة تقاطعيا ‎(CRM) (cross-reactive material)‏ طفرية من 10*10 من التتانوس»؛ الديفترياء؛ السعال ‎٠‏ الديكيء ‎Staphylococcus (E. coli (Pseudomonas‏ و5116010000005. في تجسيد واحدء تكون المادة الحاملة المفضلة تحديدا هي 40/1197 ‎toxoid‏ ديفتيري؛ مشتق من ‎CT‏ ‏سلالة ‎¢(B197) C. diphtheria‏ التي تنتج بروتين ‎.CRM197‏ يكون لهذه ‎AD‏ رقم وصول ‎.OTYAY :ATCC‏ يتم وصف طريقة إنتاج ‎CRMIOT‏ في براءة الاختراع الأمريكية رقم: 217 التي تندمج هنا كمرجع كما هو مذكور بأكمله. ‎Yo‏ بطريقة ‎ily‏ يمكن استخدام كسر أو إبيتوب من المادة الحاملة للبروتين أو بروتين مولد للمناعة آخر. على سبيل المثال؛ يمكن اقتران مولد مضاد كبدي مع إبيتوب الخلية ‎T‏ من ‎CRM toxoid «toxin‏ بكتيري. انظرء ‎calla‏ براءة الاختراع الأمريكية رقم: 1555848 المسجل في ‎١‏ فبراير» ‎»٠988‏ بعنوان 'ببتيدات تخليقية ‎Ji‏ إبيتوب خلية 1 على أنه جزيء ‎sale‏ ‎dla‏ من أجل اقتران اللقاحات"؛ المندمج هنا كمرجع كما هو مذكور بأكمله. تتضمن ‎Ye‏ بروتينات المادة الحاملة الأخرى المناسبة ‎toxins‏ بكتيرية خاملة ‎cholera toxoid i.‏ (مثلا؛ حسب الوصف في طلب براءة الاختراع الدولي رقم: ‎E. coli LT, E. coli «(Yr &/eATYON‏ ‎exotoxin A, (ST‏ من ‎.Pseudomonas aeruginosa‏ يمكن أيضا استخدام بروتينات خارجية بكتيرية مثلا معقد غشاء خارجي © ‎«(OMPC) (outer membrane complex c)‏ ‎porins | 5‏ بروتينات ارتباط ‎«transferrin‏ 510/اا00611070؛ بروتين سطح متعلق بالمكورات الرثوية
ل ‎(pneumococcal surface protein A) A‏ (/59)؛ بروتين التصاق متعلق بالمكورات الرثوية ‎(PsaA) (pneumococcal adhesion protein)‏ أو بروتين إنفلونزا المستدمية ‎D‏ ‎(Haemophilus influenzae protein D)‏ يمكن أيضا استخدام بروتينات أخرى, ‎Mie‏ ‏ألبومين البيض ‎(ovalbumin)‏ هيموسيانين اللزيق ‎(keyhole limpet hemocyanin)‏ ‎JY) «(KLH) ©‏ مصل بقري ‎(BSA) (bovine serum albumin)‏ أو مشتق بروتين منقى ‎(PPD) (purified protein derivative)‏ من ‎tuberculin‏ كبروتينات مواد حاملة. طبقا لذلك؛ في تجسيدات ‎amie‏ تشتمل متقارنات السكر المتصلة مع ‎eTEC‏ على 7 كبروتين المادة الحاملة؛ حيث يتصل تساهميا ‎polysaccharide‏ الكبسولي مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال توصيلة ‎carbamate‏ وحيث يتصل تساهميا 041/197 مع المُباعد ‎٠‏ 156 خلال توصيلة ‎amide‏ المتشكلة عن طريق متخلف حمض أميني مُنشط من البروتين» نموذجيا خلال المجموعة ‎e—amine‏ من متخلف ‎lysine‏ واحد أو أكثر. يمكن أن يتميز عدد متخلفات ‎lysine‏ في بروتين المادة الحاملة الذي يصبح مقترن مع ‎saccharide‏ بأنه نطاق ‎lysines‏ المقترنة. على سبيل ‎JB‏ في بعض التجسيدات للتركيبات المولدة للمناعة؛ قد يشتمل ‎CRM197‏ على ؛ إلى ‎١١‏ متخلف ‎lysine‏ من ‎YA‏ متخلف متصلين ‎Vo‏ تساهميا مع 58008106. إن طريقة أخرى لتوضيح هذا المعيار هي أن حوالي ‎79٠١‏ إلى حوالي ‎75١‏ من ‎lysines‏ 0540/4197 يتصل تساهميا مع ©580011800. في تجسيدات ‎(gal‏ قد يشمل 7 من ؟ إلى ‎Yo‏ متخلف ‎(lysine‏ 4 متخلف متصل تساهميا مع ‎.saccharide‏ ‏إن طريقة ‎gal‏ لتوضيح هذا المعيار هي أن حوالي 75 إلى حوالي ‎75٠0‏ من 081/197 ‎Jay lysines‏ تساهميا مع ‎.saccharide‏ ‎٠‏ إن تكرار التحاق السلسلة ‎saccharide‏ مع ‎lysine‏ على بروتين ‎sald)‏ الحاملة هو معيار ‎AT‏ من أجل تمييز متقارنات السكر من الاختراع. على سبيل ‎JB)‏ في بعض التجسيدات؛ توصيلة تساهمية واحدة على الأقل بين بروتين المادة الحاملة و 7/58003108ا00 من أجل كل ¢ وحدات تكرار 582608106 من 5860118:106/ا00. في تجسيد آخرء تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين المادة الحاملة و ‎polysaccharide‏ )3 واحدة على الأقل في كل ‎٠١‏ وحدات تكرار ‎Yo‏ 58608106 من ‎polysaccharide‏ في تجسيد آخرء تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين
“yy saccharide ‏وحدة تكرار‎ Vo ‏واحدة على الأقل في كل‎ 3 polysaccharide ‏المادة الحاملة و‎ ‏من 106+:7580008ا00. في تجسيد إضافي؛ تظهر التوصيلة التساهمية بين بروتين المادة الحاملة‎ ‏من‎ saccharide ‏وحدة تكرار‎ Yo ‏مرة واحدة على الأقل في كل‎ polysaccharide ‏و‎ ‎.polysaccharide ‏في تجسيدات متعددة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو 040/197 وتظهر التوصيلة‎ o ‏واحدة على الأقل كل‎ 3 polysaccharide ‏و‎ CRM197 ‏بين‎ e TEC ‏التساهمية خلال مُباعد‎ ‏في بعض هذه‎ .polysaccharide ‏من‎ saccharide ‏وحدة تكرار‎ Yo ‏أو‎ ٠ ء٠١‎ 4 5. ‏كبسولي بكتيري مشتق من‎ polysaccharide ‏هو‎ polysaccharide ‏التجسيدات؛ يكون‎ pneumonia .N. meningitides J ٠ sald) ‏في تجسيدات أخرى؛ يشمل المتقارن توصيلة تساهمية واحدة على الأقل بين بروتين‎ ‏وحدات‎ ١ ‏كل ؟ إلى‎ saccharide ‏وحدات تكرار‎ ٠١ ‏لأجل كل © إلى‎ saccharide ‏الحاملة و‎ ‏وحدات تكرار 580008+106؛ كل ؛ إلى 5 وحدات تكرار‎ A ‏كل ؟ إلى‎ ¢saccharide ‏تكرار‎ ‏وحدة تكرار‎ VY ‏إلى‎ ١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ١١ ‏إلى‎ ١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ٠١4 ‏كل 94 إلى‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ١١ ‏إلى‎ A ‏كل‎ saccharide Vo ‏وحدات تكرار‎ ١ ‏كل ؟ إلى‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ Yo ‏إلى‎ ٠١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدات تكرار‎ A ‏كل ؛ إلى‎ tsaccharide ‏وحدات تكرار‎ ١ ‏كل ؟ إلى‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ١١ ‏إلى‎ ١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدات تكرار‎ ٠١ ‏إلى‎ ١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ١١ ‏كل 4 إلى‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ١١ ‏كل + إلى‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ Yoo ‏إلى‎ ٠١ ‏كل‎ ¢saccharide ‏وحدة تكرار‎ ٠١4 ‏إلى‎ ٠١ ‏كل‎ ¢saccharide | ٠٠ .saccharide ‏أو كل ؛ إلى © وحدة تكرار‎ ¢saccharide ‏الحاملة‎ sold) ‏بين بروتين‎ JAY ‏تظهر توصيلة واحدة على‎ AT aan ‏في‎ ‏مالف كل‎ VE AT AY ‏لأجل كل كت ىت كفك صخل كنل لكت‎ saccharide ‏من‎ saccharide ‏وحدة تكرار‎ YO ‏أو‎ YE (YY 77 (YY oY. ‏كل‎ OVA AY .polysaccharide Yo
Eye
دج طرق تصنيع متقارنات ‎Su‏ متصلة مع ‎eTEC‏ ‏يوفر الاختراع الحالي طرق لتصنيع متقارنات ‎Su‏ متصلة مع ‎Jeli eTEC‏ 6 -مقترن ‎ae bald‏ بروتين ‎sald‏ الحاملة خلال مُباعد -2))-2) ‎TEC) oxoethyljthio)ethyl)carbamate‏ ©). يحتوي المُباعد ‎eTEC‏ على سبع ذرات خطية ‎o‏ (أي؛ ‎«(—C(O)NH(CH2)2SCH2C(O)-‏ تشمل ‎thioether Luly)‏ و207106 ثابتة؛ وتعمل على توصيل ‎saccharide‏ وبروتين المادة الحاملة تساهميا. يرتبط أحد أطراف المُباعد ‎eTEC‏ ‏تساهميا مع مجموعة ‎saccharide hydroxyl‏ خلال توصيلة ‎carbamate‏ يرتبط الطرف الآخر من المُباعد ‎€TEC‏ تساهميا مع متخلف محتوي على ‎@MINO‏ من بروتين المادة الحاملة؛ نموذجيا متخلف ‎ce-lysine‏ خلال توصيلة ‎amide‏ ‎IK‏ يوضح ‎١ KE‏ طريقة تمثيلية لتحضير متقارنات سكر من الاختراع الحالي؛ تشمل ‎polysaccharide‏ مقترن مع بروتين المادة الحاملة المُنشط 081/197. توضح الأشكال 7 ؛ ؛ ‎oy‏ على التوالي_البناء الكيميائي لأجل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري تمثيلي؛ ‎22F 5 11A <10A (33F polysaccharides‏ لها الأنماط المصلية المتعلقة بالمكورات ‎Lgl‏ ‏المشتقة من ‎pneumoniae‏ .5؛ لها المواقع المحتملة للتعديل باستخدام عملية المُباعد ‎TEC‏ ‎Vo‏ يوضح الشكل ١ل)‏ بناء متقارن ‎Su‏ متصل مع 6156 تمثيلي من الاختراع؛ يشمل ‎33F polysaccharide‏ له النمط المصلي المتعلق بالمكورات الرثوية مقترن تساهميا مع 7 باستخدام كيمياء الوصلة ‎TEC‏ يوضح الشكل ١(ب)‏ مواقع ‎sulfhydryl‏ حرة مغطاة وغير مغطاة محتملة من أجل عمليات توضيحية. تحتوي ‎Polysaccharides‏ نموذجيا على العديد من مجموعات ‎hydroxyl‏ وبالتالي قد يختلف موقع التحاق المُباعد ‎€TEC‏ مع ‎hydroxyl ٠‏ خاص داخل وحدات التكرار ‎polysaccharide‏ خلال التوصيلة ‎.carbamate‏ ‏في جانب ‎candy‏ تشمل الطريقة الخطوات: 0 تفاعل 53800118106 مع مشتق ‎carbonic‏ ‎(CDT) 1,I’~carbonyl-di~(1,2,4-triazole) >i. acid‏ أو ‎1,I'-‏ ‎(CDI) carbonyldiimidazole‏ في مذيب عضوي لإنتاج ‎saccharide‏ مُنشط؛ (ب) تفاعل 806 المُنشط مع ‎cystamine‏ أو ‎cysteamine‏ أو ملح ‎«ais‏ لإنتاج ‎thiolated‏ py thiolated ‏مع عامل اختزال لإنتاج‎ thiolated saccharide ‏تفاعل‎ (=) ¢saccharide
Ia sulfhydryl ‏مُنشط يشمل مادة متخلفة‎ saccharide ‏مجموعة‎ Jody ‏المُنشط مع بروتين مادة حاملة مُنشط‎ saccharide ‏واحدة أو أكثر؛ )3( تفاعل‎ thiolated Ala sale ‏بروتين‎ lie zy ‏أو أكثرء‎ sal; o-haloacetamide )١( ‏مع‎ thiolated saccharide ‏تفاعل متقارن بروتين المادة الحاملة‎ (2) 5 ¢saccharide © ‏عامل كاشف للتغطية أول قادر على تغطية مجموعات 0-08103806180106 غير مقترنة من‎ ‏عامل كاشف للتغطية ثان قادر على تغطية مواد متخلفة‎ (Y) ‏بروتين المادة الحاملة المُنشطة؛ و/أو‎ ‏المُنشط؛ حيث ينتج متقارن سكر‎ thiolated saccharide ‏حرة غير مقترنة من‎ sulfhydryl
TEC ‏متصل مع‎ polysaccharide ‏تشمل الطريقة الخطوات: (أ) تفاعل‎ dyad ‏في تجسيد مفضل‎ Ya
Pn-33F polysaccharide ‏في مذيب عضوي لإنتاج‎ CDI ‏أو‎ CDT ‏كبسولي 00-331 مع‎ cysteamine ‏أر‎ cystamine ‏المُنشط مع‎ 00-331 polysaccharide Jel ‏مُنشط؛ (ب)‎ thiolated Pn— ‏(ج) تفاعل‎ ¢thiolated 00-331 polysaccharide ‏أو ملح منه؛ لإنتاج‎ thiolated 00-331 polysaccharide ‏مع عامل اختزال لإنتاج‎ 33F polysaccharide thiolated 00-3317 ‏حرة واحدة أو أكثر؛ (د) تفاعل‎ sulfhydryl ‏متخلفة‎ sale Jody ‏مُنشط‎ ٠ a= ‏مجموعة‎ Jody ‏المُنشط مع بروتين مادة حاملة 040/197 مُنشط‎ 06 thiolated 00-331 polysaccharide— ‏واحدة أو أكثر» لإنتاج متقارن‎ 0100108018006 ‏مع‎ 11018160 00-331 polysaccharide-CRM197 ‏؛ و(ه) تفاعل المتقارن‎ 7 0.- ‏كعامل كاشف للتغطية أول قادر على تغطية مجموعات‎ N-acetyl-L-cysteine )١( iodoacetamide )١(و ‏غير مقترنة من بروتين المادة الحاملة المُنشطة؛‎ 500108081800106 | ٠ ‏حرة غير مقترنة من‎ sulfhydryl ‏كعامل كاشف للتغطية ثان قادر على تغطية مواد متخلفة‎
Pn-33F ‏المُنشط؛ حيث ينتج متقارن سكر‎ 1018180 Pn-33F polysaccharide . 1) ‏متصل مع‎ polysaccharide-CRM197 ‏على نحو‎ .CDI ‏أو‎ CDT ‏هو‎ carbonic acid ‏في تجسيدات متعددة؛ يكون المشتق‎ ‏ويكون المذيب العضوي هو مذيب قطبي لا‎ «CDT ‏هو‎ carbonic acid ‏أفضل؛ يكون المشتق‎ Yo
ديو" بروتوني؛ مثل ‎.dimethylsulfoxide (DMSO)‏ لا يتطلب ‎saccharide sas‏ المُنشط قبل خطوات ‎thiolation‏ و/أو الاقتران. في تجسيد مفضل؛ ينتج ‎saccharide‏ 111018160 عن طريق تفاعل ‎saccharide‏ ‏المُنشط مع ‎cystamine‏ العامل الكاشف ‎thioalkylamine‏ المتماثئل ذو الوظيفية المزدوجة؛ أو © ملح منه. إن ‎sad)‏ المحتملة لهذا العامل الكاشف هي أن وصلة ‎cystamine‏ المتماثلة يمكن أن تتفاعل مع جزيئين من ‎saccharide‏ المُنشط؛ بالتالي يتشكل جزيثين من ‎thiolated‏ ‏06 لكل جزيء ‎cystamine‏ عند اختزال الرابطة ‎(disulfide‏ بطريقة بديلة؛ قد يتشكل ‎thiolated saccharide‏ عن طريق تفاعل ‎saccharide‏ المُنشط مع ‎«cysteamine‏ أو ملح منه. قد تتمثل متقارنات السكر المتصلة مع ‎eTEC‏ الناتجة بطرق الاختراع عن طريق الصيغة ‎٠‏ العامة (ا). يفهم هؤلاء المهرة العاديين في الفن أن الخطوة ‎(a)‏ اختيارية ‎Lexie‏ يتفاعل ‎saccharide‏ ‏المُنشط مع ‎cysteamine‏ أو ملح منه؛ الذي يحتوي على متخلفات ‎sulfhydryl‏ الحرة. ‎ble‏ ‏تتفاعل روتينيا ‎thiolated saccharides‏ المشتملة على ‎cysteamine‏ مع عامل اختزال في الخطوة (ج) لتقليل أي منتجات ثانوية ‎disulfide‏ متأكسدة التي يمكن أن تتشكل أثناء التفاعل. في بعض تجسيدات لهذا الجانبء تشمل إضافيا الخطوة (د) إضافيا توفير بروتين مادة حاملة مُنشطة تشمل مجموعة ‎a—haloacetamide‏ واحدة أو أكثرء قبل تفاعل ‎thiolated‏ ‏6 المُنشط مع بروتين المادة الحاملة المُنشطة؛ لإنتاج متقارن بروتين المادة الحاملة ‎.thiolated saccharide‏ في تجسيدات متعددة؛ يشمل بروتين المادة الحاملة المُنشط مجموعة ©000080©180010+-0 واحدة أو أكثر. ‎Ye‏ قد يعالج متقارن بروتين المادة الحاملة ‎thiolated saccharide‏ مع عامل كاشف للتغطية واحد أو أكثر قادر على التفاعل مع مجموعات وظيفية مُنشطة متخلفة موجودة في خليط التفاعل. قد توجد الجموعات المتفاعلة المتخلفة على ‎saccharide‏ غير متفاعل أو مكونات بروتين المادة الحاملة؛ نظرا لعدم اكتمال الاقتران أو من وجود فائض واحد من المكونات في خليط
—yvo- ‏التفاعل. في هذه الحالة؛ قد تساعد التغطية على تنقية أو عزل متقارن السكر. في بعض الحالات؛‎ ‏قد توجد المجموعات الوظيفية المُنشطة المتخلفة في متقارن السكر.‎ على سبيل ‎(JUD‏ قد تغطى المجموعات ‎a—haloacetamide‏ الفائضة على بروتين المادة الحاملة المُنشطة عن طريق التفاعل مع ‎thiol‏ منخفض الوزن الجزيثي الجرامي؛ على سبيل © المثال ‎(N-acetyl-L-cysteine‏ الذي قد يستخدم بصورة فائضة لضمان اكتمال التغطية. تسمح أيضا التغطية مع ‎ashy N-acetyl-L-cysteine‏ فعالية ‎(LEY‏ عن طريق الكشف عن ‎(CMC) S-carboxymethylcysteine‏ للحمض الأميني الفريد من متخلفات ‎cysteine‏ عند المواقع المغطاة؛ التي يمكن تحديدها عن طريق التحلل المائي الحمضي وتحلل الحمض الأميني لمنتجات الاقتران. يؤكد الكشف عن الحمض الأميني على التغطية الناجحة لمجموعات ‎٠‏ 500010808180106 المتفاعلة؛ بالتالي تجعلها غير متاحة لأي من التفاعلات الكيميائية غير المرغوبة. تتراوح مستويات التساهمية المقبولة والتغطية بين حوالي ‎١9-١‏ من أجل ‎CMCA/Lys‏ ‏وحوالي صفر-ه من أجل ‎.CMC/Lys‏ بصورة ‎(lilac‏ يمكن تغطية متخلفات ‎sulfhydryl‏ الحرة الفائضة عن طريق التفاعل مع عامل كاشف محب للإلكترون منخفض الوزن الجزيئي الجرامي؛ ‎.iodacetamide >is‏ قد يشتق قسم من ‎CMCA‏ من ‎polysaccharide thiols‏ المغطاة ‎VO‏ مباشرة عن طريق ‎iodoacetamide‏ الذي لا يتضمن مع مجموعات ‎haloacyl‏ من بروتين المادة ‎LaLa)‏ بالتالي؛ نحتاج لفحصض عينات التفاعل بعد الاقتران (قبل التغطية بواسطة ‎oe (iodoacetamide‏ طريق تحلل الحمض الأميني ‎(CMCA)‏ لتحديد المستويات الدقيقة لأجل 05 الموجودة مباشرة في الاقتران. بالنسبة إلى ‎saccharide‏ 111018160 محتوي على ‎-٠١‏ ‎cthiols VY‏ يتحدد نموذجيا 1-0 ‎thiols‏ لتتضمن مباشرة في الاقتران بين ‎polysaccharide‏ .lodoacetamide ‏بواسطة‎ thiols o—¢ ‏ويغطى‎ bromoacetylated ‏والبروتين‎ thiol ٠
N-acetyl-L- ‏في تجسيدات مفضلة؛ يكون العامل الكاشف للتغطية الأول هو‎ ‏الذي يتفاعل مع مجموعات 08108061870106-.0 غير مقترنة على بروتين المادة‎ 686 iodoacetamide ‏يكون العامل الكاشف للتغطية الثاني هو‎ (al ‏الحاملة. في تجسيدات‎ thiolated saccharide ‏حرة غير مقترنة من‎ sulfhydryl ‏الذي يتفاعل مع مجموعات‎ (IAA) ‏كالعامل‎ N-acetyl-L-cysteine ‏الخطوة (ه) تغطية مع‎ Jodi ‏المُنشط. بصورة متكررة؛‎ Yo
#١
Jedi ‏الكاشف للتغطية الأول وهلا كالعامل الكاشف للتغطية الثاني. في بعض التجسيدات؛‎ ‏أو‎ 1650 DTT Jud ‏على سبيل‎ Jia) ‏إضافيا الخطوة (ه) تفاعل مع عامل‎ ‏بعد التفاعل مع العامل الكاشف للتغطية الأول و/أو الثاني.‎ 01608010611800١ ‏في بعض التجسيدات؛ تشمل الطريقة إضافيا خطوة تنقية متقارن السكر المتصل مع‎ ‏عن طريق الترشيح الفائق/ الترشيح الثنائي.‎ JB ‏610؛ على سبيل‎ © ‏المتماثل مزدوج الوظيفة هو‎ thioalkylamine ‏في تجسيد مفضل؛ يكون العامل الكاشف‎ ‏أو‎ thiolated saccharide ‏المُنشط لتوفير‎ saccharide ‏أو ملح منه يتفاعل مع‎ cystamine disulfide ‏ملح منه يحتوي على جزء‎ thiolated ‏مع عامل اختزال ينتج‎ thiolated saccharide ‏إن تفاعل مشتقات‎ ‏وتنقية‎ Jie ofa ‏حر واحد أو أكثر.‎ sulfhydryl ‏مُنشط يشمل متخلف‎ polysaccharide ٠ ‏التتقية‎ [ell ‏عن طريق الترشيح‎ (JB ‏المُنشطة؛ على سبيل‎ thiolated saccharides ‏المُنشطة؛ على سبيل المثال؛‎ thiolated saccharides ‏وتنقية‎ Jie ‏يمكن‎ Alia ‏الثنائية. بطريقة‎ ‏عياري أو طرق كروماتوجرافية تبادل‎ (SEC) ‏بواسطة طرق تحليل كروماتوجرافي مستثنى المقاس‎ ‏المعروف في الفن.‎ DEAE ‏أيون مثلا‎ ‏فإن التفاعل مع عامل اختزال‎ cthiolated saccharides ‏مشتق»‎ cystamine ‏في حالة‎ Vo ‏مُنشط مشتمل على متخلف‎ activated thiolated saccharide ‏لتوفير‎ disulfide ‏يشق الرابطة‎ ‏يكون‎ cthiolated saccharides «sii cystamine ‏حر واحد أو أكثر. في حالة‎ sulfhydryl ‏المتشكلة عن طريق‎ disulfide ‏التفاعل مع عامل اختزال اختياري ويمكن استخدامه لاختزال روابط‎ ‏أكسدة العامل الكاشف أو المنتج.‎
JE ‏تتضمن عوامل الاختزال المستخدمة في طرق ا لاختراع؛ على سبيل‎ Yo ‏أو‎ (DTT) dithiothreitol ~~ ((TCEP) tris(2-carboxyethyl)phosphine ‏مناسب.‎ disulfide ‏مع ذلك؛ يمكن استخدام أي عامل اختزال‎ .mercaptoethanol
الا في بعض التجسيدات؛ تشمل الطرق إضافيا توفير بروتين مادة حاملة مُنشط يشمل مجموعة 0-11810306180106 واحدة أو أكثر. يفضل مجموعة ©010001080618110-.0 واحدة أو أكثر. إن تفاعل ‎thiolated saccharide‏ المُنشط مع بروتين المادة الحاملة المشتمل على جزء © 810808200106-»0 واحد أو أكثر يؤدي إلى إزاحة محبة للإلكترون لمجموعة 0-810 بروتين ‎sald)‏ الحاملة المُنشط عن طريق مجموعة ‎sulfhydryl‏ حرة واحدة أو أكثر من ‎thiolated‏ ‎saccharide‏ المُنشط؛ بتشكيل رابطة ‎thioether‏ من المُباعد ‎TEC‏ ‏تلتحق نموذجيا متخلفات الحمض الأميني ‎a—haloacetylated‏ من بروتين المادة الحاملة مع مجموعات 0-80100_ من متخلف واحد أو أكثر لبروتين المادة الحاملة. في ‎٠‏ تجسيدات متعددة؛ يحتوي بروتين المادة الحاملة على متخلف حمض أميني -0 ‎bromoacetylated‏ واحد أو أكثر. في تجسيد واحد؛ يُنشط بروتين المادة الحاملة مع عامل كاشف ‎N-hydroxysuccinimide ester >i. bromoacetic acid‏ من ‎bromoacetic‏ ‎.(BAANS) acid‏ في تجسيد واحد؛ تتضمن الطريقة خطوة توفير بروتين مادة حاملة مُنشط يشمل مجموعة ‎٠‏ 812010 0-2108 واحدة أو أكثر وتفاعل ‎thiolated polysaccharide‏ المُنشط مع بروتين المادة الحاملة لإتناج متقارن بروتين ‎sale‏ حاملة ‎cthiolated polysaccharide‏ بالتالي ينتج متقارن سكر ‎polysaccharide Jody‏ مقترن مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ ‏في بعض التجسيدات المفضلة للطريقة المذكورة هنا؛ يكون ‎polysaccharide‏ الكبسولي البكتيري هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ مشتق من ‎pneumonia‏ .5. في بعض ‎٠‏ التجسيدات؛ ينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Pn‏ من المجموعة المتكونة من ‎Polysaccharides‏ كمولية ل 3 ك 5 ‎6B 6A‏ ات 8 ‎OV‏ طول ‎¢11A‏ 12 ‎«15B .4‏ 180؛ ‎33F 5 23F (22F (19F (19A‏ له ‎ball‏ المصلي ‎Pn‏ في تجسيدات مفضلة خاصة؛ يكون بروتين المادة الحاملة هو 040/1197 وينتقى ‎polysaccharide‏ الكبسولي ‎Pn‏ من المجموعة المتكونة من 007/58000350865 كبليق لء 3 ك 5 ‎(TF 6B 6A‏ 8«
م ‎(10A OV‏ 1ل 12 14« 158 18 19ء 197 ‎33F 5 23F (22F‏ له النمط
Pn Lad ‏الكبسولي‎ polysaccharide ‏في تجسيدات مفضلة أخرى للطريقة المتوافرة هناء يكون‎ ‏بعض‎ AN. 1016010910065 ‏مشتق من‎ Mn ‏كبسولي‎ polysaccharide ‏البكتيري هو‎ ‏من المجموعة المتكونة من‎ Mn ‏الكبسولي‎ polysaccharide ‏التجسيدات؛ ينتقى‎ oo ‏1/ا. في تجسيدات مفضلة‎ Lad) ‏135//ا و7 من النمط‎ <C (Adu polysaccharides ‏الكبسولي من‎ polysaccharide ‏وينتقى‎ CRM197 ‏الحاملة هو‎ sald) ‏خاصة؛ يكون بروتين‎ ‏و7 من النمط المصلي‎ W135 CA ‏كبسولية‎ Polysaccharides ‏المجموعة المتكونة من‎
Mn ‏أو‎ imidazole ‏مع‎ saccharide ‏في بعض التجسيدات من الطرق المتوفرة هناء يُركب‎ Va ‏عضوي (مثلا؛‎ cule ‏في‎ «CDT ‏مثلا‎ ccarbonic acid ‏وبعدئذ يتفاعل مع مشتق‎ 6 ‏لإنتاج 58000811065 مُنشطة. إن استخدام‎ el ‏وزن/ حجم‎ 70١7 ‏يحتوي على حوالي‎ (DMSO ‏في المذيب العضوي.‎ saccharide ‏المركب في خطوة التنشيط يزيد قابلية ذوبان‎ 6 da ‏لكل‎ 1,2,4- triazole ‏جرام من مادة مسوغة‎ ٠١ ‏مع‎ saccharide ‏يركب‎ chads ‏مُركب.‎ saccharide ‏يليه الخلط عند درجة حرارة المحيط لتوفير‎ polysaccharide | ١٠ ‏مع‎ saccharide ‏خطوة تركيب‎ Lila) ‏بالتالي؛ في تجسيدات خاصة تشمل الطريقة‎ ‏مُركب قبل خطوة التنشيط (أ). في بعض‎ saccharide ‏لإعطاء‎ imidazole ‏أو‎ triazole ‏المُركب متجمد القشرة؛ مجفد ومعاد تركيبه في مذيب عضوي‎ saccharide ‏التجسيدات؛ يكون‎ «carbonic acid ‏ويضاف حوالي 7007 وزن/ حجم قبل التنشيط مع المشتق‎ (DMSO ‏(مثلا‎ .CDT ‏مثلاء‎ ٠ ‏مع -لا‎ thiolated saccharide ‏في تجسيد واحد؛ يعالج اختياريا خليط التفاعل‎ ‏لتغطية أي 06 مُنشط غير متفاعل. في بعض‎ acetyl-lysine methyl ester ‏المغطى بواسطة الترشيح الفائق/ الترشيح‎ thiolated saccharide ‏التجسيدات؛ ينقى خليط‎ الثنائي.
‎q —‏ اذ في تجسيدات متعددة» يتفاعل ‎thiolated saccharide‏ مع عامل اختزال لإنتاج ‎thiolated saccharide‏ مُنشط. .في بعض التجسيدات؛ يكون عامل الاختزال هو 06م( ال2-08+000/61-)15 . ‎(DTT) dithiothreitol ~~ ((TCEP)‏ أو ‎mercaptoethanol‏ في بعض التجسيدات؛ ينقى ‎thiolated saccharide‏ المُنشط بواسطة ‎o‏ الترشيح الفاثق/ الترشيح الثنائي. في تجسيد واحد؛ تشمل طريقة إنتاج متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ خطوة ضبط والحفاظ على الأس الهيدروجيني لخليط التفاعل من ‎thiolated saccharide‏ المُنشط وبروتين المادة الحاملة إلى أس هيدروجيني من حوالي ‎A‏ إلى حوالي 4 لمدة حوالي ‎Yo‏ ساعة عند حوالي © "مئوية. " في تجسيد ‎candy‏ تشمل طريقة إنتاج متقارن السكر من الاختراع خطوة ‎Jie‏ متقارن بروتين ‎sald)‏ الحاملة ‎thiolated saccharide‏ بعد إنتاجه. في تجسيدات متعددة؛ يُعزل متقارن السكر بواسطة الترشيح الفائق/ الترشيح الثنائي. في تجسيد ‎AT‏ ¢ تشمل طريقة إنتاج متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ خطوة عزل متقارن بروتين المادة الحاملة ‎saccharide‏ المعزول بعد إنتاجه. في تجسيدات متعددة؛ يُعزل متقارن ‎Vo‏ السكر بواسطة الترشيح الفائق/ الترشيح الثنائي. في تجسيد آخر أيضاء تشمل طريقة إنتاج ‎saccharide‏ المُنشط خطوة ضبط تركيز ‎sll‏ ‏من خليط التفاعل المشتمل على ‎CDT ysaccharide‏ في مذيب عضوي إلى ما بين حوالي ‎٠.١‏ ‏و70.4. في تجسيد ‎candy‏ يضبط تركيز الماء من خليط التفاعل المشتمل على ‎saccharide‏ ‎CDT‏ في مذيب عضوي إلى حوالي ‎Joy‏ ‎٠‏ في تجسيد ‎Jodi coals‏ خطوة تنشيط ‎saccharide‏ تفاعل ‎polysaccharide‏ مع كمية من ‎CDT‏ التي تكون بفائض حوالي © جزيء جرامي عن كمية ‎polysaccharide‏ الموجودة في خليط التفاعل المشتمل على ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎CDT‏ في مذيب عضوي. في تجسيد آخر؛ تشمل طريقة إنتاج متقارن السكر من الاختراع خطوة تحديد تركيز ‎sll‏ ‏من خليط التفاعل المشتمل على 580008010©6. في تجسيد ‎candy‏ تتوافر كمية ‎CDT‏ المضافة إلى
مو خليط التفاعل لتتنشيط ‎saccharide‏ بحوالي كمية ‎CDT‏ التي تكون متساوية الجزيئي الجرامي مع كمية الماء الموجود في خليط التفاعل المشتمل على ‎CDT ysaccharide‏ في مذيب عضوي. في تجسيد آخرء تتوافر كمية ‎CDT‏ المضافة إلى خليط التفاعل لتنشيط ‎saccharide‏ ‏بحوالي كمية ‎CDT‏ التي تكون عند نسبة جزيئية جرامية من حوالي ‎١ :٠.5‏ مقارنة مع كمية الماء © الموجود في خليط التفاعل المشتمل على ‎CDT saccharide‏ في مذيب عضوي. في تجسيد واحد؛ تتوافر كمية ‎CDT‏ المضافة إلى خليط التفاعل لتنشيط ‎saccharide‏ بحوالي كمية ‎CDT‏ ‏التي تكون عند نسبة جزيئية جرامية من حوالي 0-75: ‎١‏ مقارنة مع كمية الماء الموجود في خليط التفاعل المشتمل على ‎CDT saccharide‏ في مذيب عضوي. في تجسيد واحدء تشمل الطريقة خطوة ‎thiolated polysaccharide Jie‏ بالترشيح ‎Ys‏ الثنائي. في تجسيد آخرء تشمل الطريقة خطوة عزل ‎thiolated polysaccharide‏ المُنشط بالترشيح الثنائي. في تجسيد واحد؛ء فإن بروتين المادة الحاملة المستخدم في طريقة إنتاج متقارن بروتين المادة الحاملة ‎polysaccharide‏ الكبسولي 00 المعزول يشمل ‎.CRM197‏ في تجسيد آخرء فإن بروتين المادة الحاملة المستخدم في طريقة إنتاج متقارن بروتين المادة الحاملة ‎polysaccharide | ١‏ الكبسولي ‎Mn‏ المعزول يشمل ‎.CRM197‏ ‏في بعض التجسيدات؛ تتراوح نسبة 5800081106: بروتين المادة الحاملة المُنشط (وزن/ وزن) بين ‎١7‏ و؛. في تجسيدات ‎(Al‏ تتراوح نسبة ‎:saccharide‏ بروتين المادة الحاملة المُنشط (وزن/ وزن) بين ‎١‏ و*.7. في تجسيدات إضافية؛ تتراوح نسبة ‎saccharide‏ بروتين ‎sald)‏ الحاملة المُنشط (وزن/ وزن) ‎YS Gu‏ في تجسيدات ‎Al‏ تكون نسبة ‎saccharide | ٠‏ بروتين المادة الحاملة المُنشط (وزن/ وزن) حوالي ‎.١ :١‏ في بعض التجسيدات؛ يكون ‎saccharide‏ هو ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري ويتولد بروتين المادة الحاملة المُنشط عن طريق تنشيط ‎.CRM197 (bromoacetylation)‏ في تجسيد آخرء تشمل طريقة إنتاج ‎saccharide‏ المُنشط استخدام مذيب عضوي. في تجسيدات متعددة؛ يكون المذيب العضوي هو مذيب قطبي لابروتوني. في بعض التجسيدات؛ ينتقى
— \ ¢ — المذيب القطبي اللابروتوني من المجموعة المتكونة من ‎«dimethyl sulfoxide (DMSO)‏ ‎N-methyl-2- «dimethylacetamide (DMA) .dimethylformamide (DMF)‏ ‎1,3-Dimethyl-3,4,5,6~tetrahydro-2(1H)- «acetonitrile «pyrrolidone (NMP)‏ ‎chexamethylphosphoramide (HMPA) pyrimidinone (DMPU)‏ أو خليط من ذلك. 2 في تجسيد مفضل ؛» يكون المذيب العضوي هو ‎.DMSO‏ ‏في تجسيدات متعددة؛ ‎Jie Jody‏ متقارن السكر المتصل مع ‎TEC‏ خطوة ترشيح فاثق/ ترشيح ثنائي. في تجسيد ‎coals‏ يكون ‎saccharide‏ المستخدم في طريقة إنتاج متقارن السكر من الاختراع له وزن جزيئي جرامي بين حوالي ‎٠١‏ كيلودالتون وحوالي ‎٠٠0٠0١0‏ كيلودالتون. في تجسيد ‎٠‏ آخرء؛ يكون ‎saccharide‏ المستخدم في طريقة إنتاج متقارن السكر من الاختراع له وزن جزيئي جرامي بين حوالي ‎٠‏ 5 كيلودالتون وحوالي ‎٠00١0‏ كيلودالتون. في تجسيد ‎candy‏ يكون متقارن السكر الناتج في طريقة إنتاج متقارن سكر لبروتين المادة الحاملة ‎polysaccharide‏ الكبسولي له مقاس بين حوالي ‎٠‏ © كيلودالتون وحوالي ‎٠٠٠٠١‏ ‏كيلودالتون. في تجسيد ‎AT‏ يكون متقارن السكر الناتج في طريقة إنتاج متقارن سكر لبروتين ‎Vo‏ المادة الحاملة ‎polysaccharide‏ الكبسولي له مقاس بين حوالي ‎ove‏ كيلودالتون وحوالي ‎١١١٠‏ كيلودالتون . في تجسيد واحد 3 يكون مثقارن السكر الناتج في طريقة إنتاج مثقارن سكر لبروتين المادة الحاملة ‎polysaccharide‏ الكبسولي له مقاس بين حوالي ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون وحوالي ‎7٠0١‏ كيلودالتون. في جانب واحد؛ ‎jig‏ الاختراع متقارن سكر متصل مع ‎eTEC‏ يشمل ‎saccharide‏ ‎Yo‏ مقترن مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎@TEC‏ ناتج عن طريق أي من الطرق المعلن عنها هنا . في جانب واحدء يوفر الاختراع تركيبة مولدة للمناعة تشمل متقارن سكر متصل مع ‎TEC‏ ناتج عن طريق أي من الطرق المعلن عنها هنا.
وه يمكن تحديد درجة ‎O-acetylation‏ من أجل ‎saccharide‏ بأي طريقة معروفة في ‎(Cll‏ ‏مثلا بواسطة رنين مغناطيسي نووي ‎NMR (Nuclear Magnetic Resonance)‏ بروتون: ‎Lemercinier and Jones (1996) Carbohydrate Research 296; 83-96, Jones‏ ‎and Lemercinier (2002) J.
Pharmaceutical and Biomedical Analysis 30;‏ © ,1233-1247 الطلب الدولي رقم: ‎١5/077147‏ أو الطلب الدولي رقم: 0/5172 ‎.٠‏ يتم وصف طريقة أخرى شائعة عن طريق 249-261 ;180 ‎J.
Biol.
Chem.‏ )1949( 168010. تعتمد طريقة أخرى ‎Lal‏ على تحليل كروماتوجرافي مستثنى الأيون ‎HPLC‏ تتحدد درجة ‎O-acetylation‏ عن طريق تقييم كمية ‎acetate‏ الحر الموجود في عينة ومقارنة القيمة مع كمية ‎acetate‏ المنطلق بعد ‎٠‏ تحلل مائي لقاعدة معتدل. ينحل ‎acetate‏ من المكونات الأخرى للعينة وتتحدد كميته مع كشف الأشعة فوق البنفسجية ‎(UV) (Ultra-Violet)‏ عند ‎7٠١‏ نانومتر. تعتمد طريقة أخرى على تحليل كروماتوجرافي مستثنى الأيون ‎HPLC‏ يتحدد ‎O-acetyl‏ عن طريق تقييم كمية ‎acetate‏ ‏الحر الموجود في عينة ومقارنة القيمة مع كمية ‎acetate‏ المنطلق بعد تحلل ‎Sle‏ لقاعدة معتدل. ينحل ‎acetate‏ من المكونات الأخرى للعينة وتتحدد كميته مع كشف الأشعة فوق البنفسجية ‎(UV) ١٠‏ عند ‎7٠١‏ نانومتر. تتحدد درجة الاقتران بواسطة التحلل ‎Ald)‏ للحمض الأميني يؤدي التحلل ‎Ald‏ لحمض عينات الاقتران "المغطاة قبل ‎"TAA‏ المتولدة باستخدام كيميا ء ‎bromoacetyl Lis‏ إلى تشكيل ‎«ut (CMCA) S-carboxymethylcysteamine‏ الحمض من ‎cystamine‏ عند المواقع المقترنة و ‎(CMC) S-carboxymethylcysteine‏ ثابت ‎٠‏ الحمض من ‎cysteines‏ عند المواقع المغطاة. يؤدي التحلل المائي لحمض المتقارنات "المغطاة بعد ‎salgdl TAA‏ (نهائيا) باستخدام كيمياء تنشيط ‎bromoacetyl‏ إلى تشكيل -5 ‎cul (CMCA) carboxymethylcysteamine‏ الحمض من ‎cystamine‏ عند المواقع المقترنة والمواقع المغطاة مع ‎(CMC) S-carboxymethylcysteine‏ ثابت الحمض من ‎cysteines‏ عند المواقع المغطاة.
— ¢ — تتحول مر أخرى كل ‎lysines‏ غير المقترنة وغير المغطاة إلى ‎lysine‏ ويتم الكشف عليها كما هي. تتحلل ‎Whe‏ كل الأحماض الأمينية الأخرى عائدة إلى الأحماض الأمينية الحرة باستثناء ‎ccysteine 5 tryptophan‏ التالفين عن طريق شروط التحلل المائي. يتحول ‎Asparagine‏ ‏و ‎glutamine‏ إلى ‎aspartic acid‏ و ‎«glutamic acid‏ على التوالي. ‎o‏ إن الأحماض ‎Amd‏ لكل من المقارن والعينة المحللة ‎Wile‏ تفصل باستخدام تحليل كروماتوجرافي تبادل أيون يليه التفاعل مع محلول ‎Beckman Ninhydrin NinRX‏ عند ‎Bay WAIT‏ يتم ‎aid)‏ عن الأحماض الأمينية المشتقة في النطاق المرئي عند 070 نانومتر £845 نانومتر (انظر جدول ‎.)١‏ تجرى مجموعة قياسية من الأحماض الأمينية ‎[Pierce Amino Acid Standard ١[‏ المحتوية على ‎5٠٠‏ بيكوجزيء جرامي لكل حمض ‎ad ٠‏ مع _العينات والمقارنات لأجل ‏ كل مجموعة_ من التحلل ‎LAW‏ يضاف -5 ‎[Sigma-Aldrich] carboxymethylcysteine‏ إلى المعيار. جدول ‎١‏ ‏أزمنة استبقاء الأحماض الأمينية استخدام برنامج مستوى متدرج ‎١‏ على جهاز تحليل حمض أميني 6300 ‎Beckman‏ ‎shal‏ الموجي زمن الاستبقاء ٍ ٍ الحمض الأمينى المستخدم من أجل (الدقيقة) ‎i‏ ‏الك 0 ‎ov.
CMC Carboxymethylcysteine AY‏ ‎ov.
Asx Aspartic Acid & Asparagine 4.1‏ ‎ov.
Thr Threonine YY‏ ‎Eye‏
_ _
te. & ov, Glx Glutamic Acid & Glutamine Yo.
A ov.
Gly Glycine YY.A ov.
Ala Alanine ‏اف‎ ‎ov.
Val Valine 4 ov.
Met Methionine YY.A ov. lle Isoleucine vo.o ov.
Tyr Tyrosine £4.0 ov.
Phe Phenylalanine ‏ال‎ ‎ov.
CMCA Carboxymethylcysteamine |. ov.
His Histidine EAA ov.
Lys Lysine 1 ov.
Arg Arginine Yoel A
ينتقى ‎oe Lysine‏ أجل التقييم المعتمد على التحاقه التساهمي مع ‎Cysteine‏ ‎Cysteamine‏ والتحليل المائي المماثل المتوقع. بعدئذ تقارن الأعداد الناتجة لجزيئات الأحماض الأمينية مع تركيبة الحمض الأميني للبروتين وتعلن مع القيم من أجل ‎.CMCA 5 CMC‏ تستخدم مباشرة القيمة ‎CMCA‏ من أجل تقييم درجة الاقتران وتستخدم مباشرة القيمة ‎CMC‏ من أجل تقييم
© درجة التغطية. ااي
اج ¢ — في تجسيد ‎easly‏ يتميز متقارن السكر بتوزيع مقاسه الجزيئي الجرامي ‎(Kd)‏ يتحدد المقاس الجزيئي الجرامي للمتقارنات عن طريق وسط تحليل كروماتوجرافي مستثنى المقاس ‎jh (SEC)‏ ثابت 01-48 ‎Sepharose‏ _باستخدام نظام تحليل كروماتوجرافي سائل ‎Se‏ ‏الضغط ‎(HPLC)‏ من أجل تحديد ‎(Kd‏ يعاير أولا عمود التحليل الكروماتوجرافي لتحديد ‎V0‏ ‏5 التي ‎Jia‏ حجم ‎EDA‏ أو إجمالي حجم الاستثناء ‎Vig‏ الحجم الذي تصفى عنده أصغر الجزيئات في العينة؛ المعروف أيضا بأنه الحجم بين الجسيمات. يجرى فصل كل ‎SEC‏ بين ‎VO‏ وألا. تتحدد القيمة ‎Kd‏ من أجل كل كسر متجمع بالصيغة التالية: ‎Kd = (Ve-Vi)/(Vi-V0)‏ ‎Ve Cua‏ يمثل حجم استبقا ‎s‏ المركب ‎٠.‏ يحدد الكسر ‎A‏ (الذروة الرئيسية) التي تصفي << ‎LY‏ القيمة ‎Kd Ye‏ للمتقارن (توزيع مقاس جزيئي). تركيبات مولدة للمناعة إن المصطلح 'تركيبة مولدة للمناعة ‎Sli "(immunogenic composition)‏ بأي تركيبة دوائية تحتوي على مولد مضاد ‎DE)‏ كائن متعضي مجهري أو مكون من ذلك) التي يمكن استخدامها لإثارة الاستجابة المناعية في ‎CAE‏ ‎Yo‏ كما هو مستخدم ‎cla‏ فإن ‎aad‏ للمناعة (©101010009©01)”؛ يعني قدرة مولد المضاد (أو إبيتوب من مولد المضاد)؛ ‎polysaccharide Jie‏ كبسولي بكتيري؛ أو متقارن سكر أو تركيبة مولدة للمناعة تشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري؛ لإثارة استجابة مناعية في كائن عاثل؛ مثلا كائن ثديي؛ يتسبب فيها بصورة غير مباشرة سواء خلطيا أو خلويا؛ أو كلاهما. قد يعمل متقارن السكر على جعل العائل حساس بتقديم مولد المضاد في اتحاد مع جزيئات ‎MHC ٠‏ عند سطح خلية. بالإضافة لذلك؛ يمكن أن تتولد خلايا ‎١‏ تخص مولد المضاد أو أجسام مضادة لإتاحة الحماية المستقبلية ‎Bilal!‏ المحصن. إن متقارنات السكر هكذا يمكنها حماية العائل من واحد أو أكثر من الأعراض المصاحبة للعدوى ‎ES ae‏ أو ‎Bll Gla‏ من ‎Cdl‏ نتيجة للعدوى مع ‎LS‏ يصاحبها
‎h —_‏ _ ‎polysaccharide‏ الكبسولي. قد تستخدم أيضا متقارنات السكر لتوليد أجسام مضادة عديدة النسخ أو أحادية النسخ؛ التي قد تستخدم لمنح مناعة سلبية للكائن. قد تستخدم متقارنات السكر أيضا لتوليد أجسام مضادة تكون وظيفية حسب القياس بواسطة قتل البكتيريا في أي من نموذج فعالية حيوان أو من خلال اختبار قتل مبلعم الطاهية (جسيم مضاد يتحد مع الميكروب فيجعله قابلا _للالتهام).
‏إن "جسم مضاد ‎"(antibody)‏ هو جزيء جلوبيولين مناعي قادر على الارتباط بصفة خاصة مع هدف؛ مثل كربوهيدرات؛ عديد نيكلوتيد؛ ‎cand‏ عديد ببتيد؛ إلخ» من خلال موقع إدراك مولد مضاد واحد على الأقل؛ يقع في المنطقة المتغيرة من جزيء الجلوبيولين المناعي. كما هو مستخدم هناء مالم يشار إلى خلاف ذلك في السياق؛ فإن المصطلح يعتبر شاملا ليس فقط ‎٠‏ ا للأجسام المضادة عديدة النسخ أو أحادية النسخ السليمة؛ لكنه يشتمل أيضا على أجسام مضادة ‎dalle‏ هندسيا ‎Ol)‏ خميرية؛ مكتسبة للسمة الآدمية و/أو مشتقة لتبديل وظائف المستجيب؛ الثبات ونشاطات بيولوجية أخرى) وكسور من ذلك (مثلا ‎(Fv (F(ab’)2 Fab’ (Fab‏ أجسام مضادة لسلسلة فردية ‎(SCFV)‏ وأجسام مضادة لمجال ‎Glad)‏ متضمنة أجسام مضادة لسمك القرش أو للجمال)؛ وبروتينات التحام تشمل جزء جسم مضاد؛ أجسام مضادة عديدة التكافؤء أجسام ‎Vo‏ مضادة عديدة الخصوصية ‎Ole)‏ أجسام مضادة ثنائية الخصوصية طالما أنها تظهر النشاط البيولوجي المرغوب) وكسور جسم مضاد كما هو موصوف هناء وأي هيئة معدلة ‎Al‏ لجزيء الجلوبيولين المناعي الذي يشمل موقع إدراك مولد مضاد. إن الجسم المضاد يتضمن جسم مضاد من أي فئة؛ مثلا ‎IgG‏ هواء أو ‎IgM‏ (أو فئة فرعية من ذلك)؛ والجسم المضاد لا يحتاج أن يكون من أي فئة محددة. اعتماد على ترتيب الحمض الأميني للجسم المضاد من مجال السيطرة ‎٠‏ الثابت لسلاسله ‎GALEN‏ يمكن تعيين الجلوبيولينات المناعية لفئات مختلفة. هناك 0 فئات رئيسية للجلوبيولينات المناعية: ‎(IgM 5 (IgG (IGE ¢IgD (IgA‏ والعديد منها قد يقسم إضافيا فئات فرحية (أنواع متماتلة)؛ ‎(IgGl ie‏ 62واء ‎(IgG3‏ 64©وا ‎1gAL‏ و082ا في آدميين. إن مجالات السيطرة الثابتة للسلسلة الثقيلة التي تقابل الفئات المختلفة من الجلوبيولينات المناعية تسمى؛ ‎cepsilon «delta «alpha‏ 0800008؛ 5 ‎«mu‏ على التوالي. تعرف جيدا بناءات الوحدة الفرعية
‏5 والهيئات ثلاثية الأبعاد لفئات مختلفة من الجلوبيولينات المناعية.
— 7 ¢ — إن 'كسور جسم مضاد ‎"(Antibody fragments)‏ تشمل فقط جزء من جسم مضاد سليم حيث يحتفظ الجزء بصورة مفضلة بواحدة على الأقل يفضل معظم أو كلء؛ الوظائف المصاحبة طبيعيا لهذا الجزء عند وجوده في جسم مضاد سليم . إن المصطلح ‎Al ga‏ مضاد ‎"(antigen)‏ يشير عامة إلى جزيء بيولوجي؛ عادة بروثين» © ببتيد؛ ‎polysaccharide‏ أو متقارن في تركيبة مولدة للمناعة؛ أو مادة مولدة للمناعة يمكنها حث إنتاج أجسام مضادة أو استجابات خلية 7 أو كلاهماء في كائن؛ تتضمن تركيبات تحقن أو تمتص في الكائن. قد تتولد الاستجابات المناعية للجزيء ‎call‏ أو لأجزاء متنوعة من الجزيء (مثلاء إبيتوب أو 080180). قد يستخدم المصطلح للإشارة إلى جزيء فردي أو مجموعات متجانسة أو متغايرة من جزيئات مولدة للمضاد. يتم إدراك مولد مضاد بواسطة أجسام مضادة؛ ‎٠‏ مستقبلات خلية 1 أو عناصر أخرى لاستمناع خلطي و/أو خلوي خاص. إن "مولد المضاد" يتضمن أيضا كل الإبيتوبات المولدة للمضاد ذات الصلة. يمكن تحديد إبيتوبات لمولد مضاد محدد باستخدام أي عدد من تقنيات تخطيط إبيتوب؛ معروفة جيدا في الفن. انظرء على سبيل المثال؛ ‎Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66‏ ‎(Glenn E.
Morris, Ed., 1996) Humana Press, Totowa, N.J.‏ ‎Yo‏ على ‎JE Js‏ قد تعرف إبيتوبات خطية بواسطة؛ على سبيل ‎JE‏ تصنيع تزامني لعدد كبير من الببتيدات على دعامات صلبة؛ الببتيدات المقابلة لأجزاء من جزيء البروتين؛ وتفاعل الببتيدات مع أجسام مضادة بينما لا تزال الببتيدات مرتبطة مع الدعامات. تعرف تلك التقنيات في الفن وتوصف في؛ على سبيل المثال براءة الاختراع الأمريكية رقم 4970811 ؛ ‎Geysen et al. (1984) Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 81:3998-4002; Geysen‏ ‎et al. (1986) Molec.
Immunol. 23:709-715; ٠٠‏ يندمج كل منهم هنا كمرجع بالكامل. بصورة مشابهة؛ قد تعرف الإبيتوبات التهايؤية بتحديد الهيئة المكانية للأحماض الأمينية مثلا بواسطة؛ التخطيط البلوري بأشعة ‎X‏ والرنين المغناطيسي النووي ثنائي الأبعاد . انظر على سبيل ‎CYS gig ¢ JE‏ تخطيط الإبيتوب » ‎el‏ علاوة على هذاء لأغراض الاختراع الحالي؛ يمكن أيضا استخدام 'مولد مضاد" للإشارة إلى بروتين يتضمن gh
تعديلات؛ مثلا؛ حذوفات؛ إضافات واستبدالات (تحفظية بصفة عامة بالطبيعة؛ لكنها قد تكون غير تحفظية)؛ للترتيب الأصلي؛ طالما أن البروتين يحتفظ بالقدرة على إحداث استجابة مناعية. قد تكون هذه التعديلات متعمدة؛ مثلا خلال تبديل موجه لموقع؛ أو من خلال إجراءات تخليقية محددة؛ أو من خلال أسلوب معالجة هندسية جينية؛ أو قد يكون عرضي؛ مثلا من خلال طفرات 0 للعوائل؛ التي ‎pan‏ مولدات المضاد. علاوة على هذاء قد أن يشتق؛ ينتج؛ أو يعزل مولد المضاد من ميكروب؛ ‎ES Ole‏ أو يمكن أن يكون كائن متعضي. بصورة مشابهة؛ ‎Of‏ ‎oligonucleotide‏ أو عديد نيكلوتيد؛ الذي يظهر مولد مضاد؛ كما في تطبيقات تحصين حمض نووي؛ يدخل أيضا في التعريف. تدخل ‎load‏ مولدات المضاد التخليقية؛ ‎Sle‏ عديد إبيتوبات؛
إبيتوبات جانبية؛ ومولدات مضاد أخرى مشتقة تخليقيا أو اصطناعيا ‎(Bergmann et al. (1993) Eur.
J.
Immunol. 23:2777 2781; Bergmann ٠‏ ‎etal. (1996) J.
Immunol. 157:3242-3249; Suhrbier (1997) Immunol.
Cell‏ ‎Biol. 75:402 408; Gardner et al. (1998) 12th World AIDS Conference,‏
‎Geneva, Switzerland, Jun. 28 to Jul. 3, 1998).‏ إن استجابة مناعية 'وقائية ‎"(protective)‏ تشير إلى قدرة التركيبة المولدة للمناعة على ‎Vo‏ إحداث استجابة مناعية؛ يتسبب فيها بصورة غير مباشرة سواء خلطيا أو خلوياء أو كلاهماء التي تعمل على حماية كائن من عدوى. إن الحماية المتوافرة لا تحتاج أن تكون مطلقة؛ أي؛ لا تحتاج العدوى إلى المنع أو الاستئصال ‎LS‏ إذا كان هناك تحسن كبير إحصائيا مقارنة مع مجموعة مقارنة من الكائنات؛ ‎Ole‏ حيوانات مصابة لم يتم إعطائها لقاح أو تركيبة مولدة للمناعة. قد تقتصر الحماية على تخفيف حدة أو سرعة بداية أعراض العدوى. بصفة عامة؛ فإن "الاستجابة ‎٠‏ المناعية الوقائية ‎(protective immune response)‏ سوف تتضمن حث الزيادة في مستويات جسم مضاد يخص مولد مضاد محدد في على الأقل من الكائنات؛ متضمنة بعض مستويات استجابات جسم مضاد وظيفية قابلة للقياس لكل مولد مضاد. في حالات محددة؛ فإن :استجابة مناعية ‎AE,‏ قد تتضمن حث زيادة بمقدار ضعفين في مستويات جسم مضاد أو زيادة بمقدار أربعة أضعاف في مستويات جسم مضاد يخص مولد مضاد محدد في 756 على الأقل من ‎Yo‏ الكائنات؛ متضمنة بعض مستويات استجابات جسم مضاد وظيفية ‎ALE‏ للقياس. في تجسيدات لاد
PP
‏معينة؛ ترتبط الأجسام المضادة الطاهية مع استجابة مناعية وقائية. هكذاء قد تقيم الاستجابة‎ ‏المناعية الوقائية بقياس الزيادة النسبية في العد البكتيري في اختبار بلعمة الطاهية؛ على سبيل‎ 77٠١ ‏المثال تلك الموصفين أدناه. بصورة مفضلة؛ هناك زيادة في العد البكتيري بمقدار على الأقل‎ ‏أو أكثر.‎ Tae ‏.حال‎ Ae ‏نمال‎ Ye ‏قال فخال‎ Ye ‎o‏ إن المصطلحان "الكمية ‎sa gall‏ للمناعة ‎"(immunogenic amount)‏ و"الكمية الفعالة لتوليد المناعة ‎(immunologically effective amount)‏ المستخدمين بالتبادل ‎ba‏ يشيران إلى كمية مولد المضاد أو التركيبة المولدة للمناعة الكافية لإحداث استجابة مناعية؛ التي قد تكون استجابة خلوية (خلية ‎f(T‏ خلطية (خلية 8 أو جسم مضاد)؛ أو كلاهماء حيث قد تقاس الاستجابة المناعية هذه باختبارات قياسية معروفة للماهر في الفن. ‎badges‏ فإن الكمية الفعالة ‎٠‏ لتوليد المناعة سوف تحدث استجابة مناعية وقائية في كائن. يمكن استخدام التركيبات المولدة للمناعة من الاختراع الحالي ‎WE,‏ أو علاجياء لحماية أو علاج كائن عرضة للعدوى البكتيرية؛ ‎Sle‏ بواسطة بكتيريا ‎pneumonia‏ .5 أو ‎meningitidis‏ .لا بواسطة إعطاء تركيبات مولدة للمناعة بواسطة طريقة جهازية؛ أو عن طريق ‎aad)‏ أو عن طريق الغشاء المخاطي؛ أو يمكن استخدامها لتوليا مستحضر جسم مضاد عديد ‎Vo‏ النسخ أو أحادي النسخ يمكن استخدامه لمنح استمناع سلبي لكائن آخر. إن تلك الإعطاءات يمكن أن تتضمن الحقن طرق الإعطاء في العضل؛ في الغشاء البريتوني؛ داخل الأدمة أو تحت الجلد؛ أو من خلال الإعطاء في الغشاء المخاطي فمويا/ عن طريق القناة الهضمية؛ الجهاز التنفسي أو التناسلي البولي. قد تستخدم التركيبات المولدة للمناعة أيضا لتوليد أجسام مضادة تكون وظيفية حسب القياس بواسطة قتل البكتيريا في أي من نموذج فعالية حيوان أو من خلال اختبار قتل مبلعم ‎٠‏ طاهية. إن الكميات ‎BA‏ لمكونات تركيبة مولدة للمناعة محددة يمكن التحقق منها بواسطة دراسات قياسية تتضمن ملاحظة الاستجابات المناعية الملائمة في الكائنات. بعد التطعيم الأولي؛ يمكن للكائنات استقبال تحصين معزز واحد أو تحصينات معززة متعددة متباعدة على نحو كاف.
ير - في تجسيدات معينة؛ سوف تشتمل التركيبة المولدة للمناعة على واحدة أو أكثر من المواد
المساعدة. كما هو معرف هناء فإن ‎sald‏ مساعدة ‎"(@djuvant)‏ هو مادة تعمل على تعزيز التولد
المناعي لتركيبة مولدة للمناعة من هذا الاختراع. ‎Xa‏ غالبا ما تعطى المواد المساعدة لتعزيز
الاستجابة المناعية وتعرف جيدا للفني الماهر. إن المواد المساعدة المناسبة لتعزيز فعاليات التركيبة
تتضمن؛ لكن بدون تحديد:
أملاح ألومنيوم ‎(alu m)‏ 3 مثل هيدروكسيد ألومنيوم 3 فوسفات ألومنيوم؛ سلفات ألومنيوم 3 إلخ؛
مستحضرات مستحلب زيت في ماء (مع أو بدون عوامل مثيرة للمناعة خاصة أخرى ‎Jie‏ ببتيدات
‎muramyl‏ (معرفة أدناه) أو مكونات جدار خلية بكتيرية)؛ على سبيل المثال؛
‏9 (منشور ‎PCT‏ الدولي رقم 0/144877)؛ المحتوي على 75 ‎(Squalene‏ 70.0 ‎Span 85 7.١.5 5 Tween 80 ٠‏ (يحتوى اختياريا كميات متنوعة من ‎MTP-PE‏ (انذ
‏و يحتوي اختياري يات متنوعة من
‎coli‏ برغم عدم الحاجة) مصاغ في جسيمات ميكرونية ثانوية باستخدام مميع ميكروني ‎Jie‏ مميع
‎«(Microfluidics, Newton, Mass.) Model 1107 ‏ميكروني‎
‎pluronic ‏بوليمر معاق‎ Zo Tween 80 70.4 Squalene 7٠١ ‏يحتوي على‎ SAF
‎thr-MDP 5 (LI21‏ (انظر أدناه) سواء متميع ميكرونيا في مستحلب ميكروني ثانوي أو مدوم ‎Vo‏ لتوليد مستحلب بمقاس جسيم أكبر؛ و
‏)2( نظام مساعد ‎(Ribi™ adjuvant system) Ribi™‏ ركم )؛
‎(Corixa, Hamilton, Mont.)‏ يحتوي على 77 50081606» 70.7 80 ‎«Tween‏ وواحد أو
‎3-O-deacylated ‏من مكونات جدار خلية بكتيرية من المجموعة المتكونة من‎ SS)
‎(MPLTM) monophosphorylipid A‏ الموصوف في براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎¢4YY.4¢ Y.‏ (قاوم) ‎trehalose dimycolate‏ (/101)؛ وهيكل جدار خلية ‎(cell wall‏
‎¢(Detox™) MPL+CWS ‏يفضل‎ (CWS) skeleton)
‎(Antigenics, STIMULONTM QS-21 ‏أو‎ Quil A ‏مثل‎ csaponin ‏قد تستخدم مساعدات‎
‎Framingham.
Mass.)‏ (براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎5754٠‏ ) أو جسيمات متولدة منها
‏مثل 1500/1/5 (معقدات حث مناعي)؛
-١ه-‏ ‎Lipopolysaccharides‏ بكتيرية؛. مماثلات ‎and‏ م/م تخليقية ‎Je‏ مركبات ‎(AGP) aminoalkyl glucosamine phosphate‏ أو مشتقات أو مماثلاث لذلك؛ التي تكون متاحة من ‎ (Corixa‏ والموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم منكجححنت؛ إن أحد ‎AGP‏ هذه هو ‎2-[(R)-3-‏ ‎Tetradecanoyloxytetradecanoylamino] ethyl 2-Deoxy—-4-O-phosphono-3- ٠‏ ‎[(R)-3-tetradecanoyloxytetradecanoyl] -2-])(-3-‏ ‎ctetradecanoyloxytetradecanoylamino ]-b—D-glucopyranoside‏ المعروف أيضا بأنه 529 (معروف سابقا ‎((RC529 ash‏ الذي يصاغ كشكل ‎Sle‏ أو كمستحلب ثابت؛ عديد نيكلوتيدات تخليقية مثل ‎oligonucleotides‏ تحتوي على حافز (حافزات) ‎CpG‏ (براءة الاختراع ‎٠‏ الأمريكية رقم ‎(IY YTET‏ ‎«Cytokines‏ مثل ‎interleukins‏ مثاد ‎(IL-2 (IL-1‏ 4حال دحال 6حجالء ‎dL=T‏ ‏2-ا؛ 15حااء 18حااء ‎(gamma interferon (ik) interferons (zl)‏ عامل حث مستعمرة بلعم محبب ‎(GM- (granulocyte macrophage colony stimulating factor)‏ ‎«CSF)‏ عامل حث مستعمرة بلعم ‎(M- (macrophage colony stimulating factor)‏ ‎(CSF) Vo‏ عامل تنكرز ورم ‎(TNF) (tumor necrosis factor)‏ جزيئات مثيرة بشكل مشترك 87-1 و87-2 . إلخ؛ طافرات مزيلة للسمية من توكسين ‎ADP-ribosylating‏ بكتيري مثل توكسين الكوليرا ‎(cholera‏ ‎(CT) toxin)‏ سواء في نوع بري أو شكل طفري؛ على سبيل ‎(JB‏ حيث يستبدل ‎glutamic‏ ‏0 عند موقع الحمض الأميني 74 بواسطة حمض أميني آخرء يفضل ‎histidine‏ طبقا لطلب ‎٠‏ براءة الاختراع الدولي رقم ‎٠0/184574‏ (انظر أيضا الطلب الدولي رقم 487778 7/0 والطلب الدولي رقم ‎٠7/097775‏ )؛ توكسين السعال الديكي ‎٠ (PT) (pertussis toxin)‏ أو توكسين قابل للتغير ‎(LT) (labile toxin)‏ بالحرارة ‎<E. coli‏ تحديدا 63ا-آاء ‎(LT-R72‏ 01-5109؛ ‎PT-K9/G129‏ (انظرء على سبيل المثال؛ الطلب الدولي رقم 67 977/977 والطلب الدولي رقم 17/5 و ‎YO‏ مواد أخرى تعمل كعوامل مثيرة للمناعة لحث فعاليات التركيبة. ااي
اج إن ببتيدات ‎Muramyl‏ تتضمنء لكن بدون تحديدء ‎N-acetylmuramyl-L—‏ ‎N-acetylnormuramyl-L-alanine-2- «(thr—-MDP) threonyl-D-isoglutamine‏ ‎dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyphosphoryloxy)-ethylamine‏ 1-2( ‎«(MTP-PE)‏ إلخ. ‎o‏ في تجسيدات معينة؛ تكون المادة المساعدة هي مادة مساعدة تعتمد على الألومنيوم؛ مثلا ملح ألومنيوم. في تجسيدات ‎(ald‏ تنتقى المادة المساعدة المعتمدة على الألومنيوم من المجموعة المتكونة من فوسفات ألومنيوم؛ سلفات ألومنيوم وهيدروكسيد ألومنيوم. في تجسيد خاص؛ تكون المادة المساعدة هي فوسفات ألومنيوم. يمكن أن تشتمل التركيبة المولدة للمناعة على مادة ‎Alda‏ مقبولة دوائيا. إن المواد ‎٠‏ الحاملة المقبولة دوائيا تتضمن مواد ‎Alda‏ مصدق عليها من قبل الوكالة التنظيمية الفيدرالية؛ الحكومة ‎del)‏ أو وكالة تنظيمية ‎al‏ أو مقيدة في الأقرباذين الأمريكي أو أي أقراباذين آخر معتمد بصفة ‎dele‏ للاستخدام في ‎(WIEN‏ تتضمن الآدميين بالإضافة إلى الثدييات غير الآدمية. إن مصطلح المادة الحاملة قد يستخدم للإشارة إلى مادة مخففة؛ مادة مسوغة؛ أو ناقل الذي معه تعطى التركيبة الدوائية. ‎(Say‏ استعمال ماء؛ محاليل ملحية 5 ‎dextrose‏ مائي ‎١‏ ومحاليل جليسرول كمواد حاملة ‎Alle‏ تحديدا لمحاليل ‎ALE‏ للحقن. توصف الأمثلة على المواد الحاملة الدوائية المناسبة في ‎"Remington's Pharmaceutical Sciences”‏ بواسطة ‎E.
W.‏ ‎Martin‏ إن الصياغة يجب أن تتناسب مع أسلوب الإعطاء. قد تشتمل التركيبات المولدة ‎deli]‏ من الاختراع ‎lila)‏ على واحدة أو أكثر من المواد الحافظة بالإضافة إلى مجموعة من متقارنات بروتين ‎polysaccharide‏ كبسولي. إن ‎FDA ٠‏ (منظمة الأغذية والأدوية ‎(Food and Drug Administration)‏ تتطلب أن تكون المنتجات البيولوجية في قوارير متعددة الجرعة تحتوي على مادة حافظة؛ مع استثناءات قليلة فقط. إن منتجات اللقاح المحتوية على مواد حافظة تتضمن لقاحات تحتوي على ‎«Lyme «HepA DTaP) 2-phenoxyethanol (anthrax) benzethonium chloride‏ ‎Polio‏ (عن غير الطريق المعوي))؛ ‎Typhoid «(Pneumo) phenol‏ (عن غير الطريق ‎Yo‏ المعوي)؛ ‎(DTaP, DT, Td, HepB, Hib, Influenza, JE, thimerosal (Vaccinia‏ ‎Eye‏
الج ‎.Mening, Pneumo, Rabies)‏ إن المواد الحافظة المصدق عليها للاستخدام في عقاقير قابلة للحقن ‎(acai‏ على سبيل المثالء (800آنا09:ماتا ‎«methylparaben (m-cresol‏ ‎«propylparaben‏ ‎«benzalkonium chloride <benzethonium chloride (2-phenoxyethanol‏ ‎thimerosal phenol (benzyl alcohol <benzoicacid ©‏ و ‎.phenylmercuric nitrate‏ في تجسيدات معينة؛ فإن صياغة من الاختراع التي تكون متوافقة مع الإعطاء عن غير الطريق المعوي تتضمن واحد أو أكثر من منشطات السطح غير الأيونية؛ متضمنة لكن بدون تحديد ‎esters‏ حمض د هني ‎(Tween Polysorbate-80 «polyoxyethylene sorbitan‏ ‎(Tween 40) Polysorbate-40 «(Tween 60) Polysorbate-60 80)‏ ‎Polysorbate-20, ٠‏ ‎(polyoxyethylene alkyl ethers (Tween 20)‏ تتضمن لكن بدون تحديد 58 ‎Brij «Brij‏ 35 بالإضافة إلى المواد الأخرى مثل ‎«Triton X-100‏ 114 كر ‎Span «(NP4Q (Triton‏ وسلاسل ‎Pluronic‏ لمنشطات سطح غير أيونية ‎o(Pluronic 121 Se)‏ مع مكونات مفضلة ‎Polysorbate-80‏ عند تركيز من حوالي ‎70.00٠‏ إلى حوالي ‎ZY‏ (مع تفضيل ما ‎Vo‏ يصل إلى حوالي 0.75 7) أو ‎Polysorbate-40‏ عند تركيز من حوالي 720.009 إلى ‎7١‏ (مع تفضيل ما يصل إلى حوالي 0.5 7). التعبئة وأشكال التجريع قد يتم التوصيل المباشر للتركيبات المولدة للمناعة من الاختراع الحالي إلى ‎A‏ بواسطة الإعطاء عن غير الطريق المعوي (في العضل؛ في الغشاء البريتوني؛ في الأدمة؛ تحت الجلد؛ في ‎٠١‏ الوريدء أو إلى منطقة ‎ADA‏ من النسيج)؛ أو من خلال الإعطاء في الغشاء المخاطي إلى الفم/ القناة الهضمية؛ الجهاز التنفسي أو البولي التناسلي؛ أو بواسطة الإعطاء الموضعي؛ عبر الأدمة؛ في الأنف؛ في العين؛ في الأذن؛ رئويا أو غشاء مخاطي آخر. في أحد التجسيدات؛ يكون الإعطاء عن غير الطريق المعوي بواسطة الحقن في العضل؛ ‎Ole‏ إلى فخذ أو عضد الكائن. قد يكون الحقن من خلال )5 (مثلا إبرة تحت الجلد)؛ لكن قد ااي
_ جم يستخدم حقن بدون إبرة بطريقة بديلة. إن الجرعة المعطاة في العضل النموذجية تكون ‎٠.5‏ ‏ملليلتر. في تجسيد ‎AT‏ يستخدم الإعطاء الأنفي لمعالجة التهاب رئوي أو التهاب الأذن الوسطى (كحمل بلعومي أنفي لمكورات رثوية يمكن منعها بصورة أكثر فعالية؛ بالتالي تضعف العدوى عند مرحلتها المبكرة).
0 قد تحضر تركيبات من الاختراع في أشكال متنوعة؛ على سبيل المثال؛ للحقن سواء كمحاليل سائلة أو معلقات. في تجسيدات ‎(Aza‏ قد تحضر التركيبة كمسحوق أو رش للإعطا ءِِ الرثوي؛ ‎De‏ في جهاز استنشاق. في تجسيدات ‎(pal‏ قد تحضر التركيبة كتحميلة أو تحميلة ‎(Aen‏ أو للإعطا ءِِ في الأنفء في الأذن أو في العين » مثلاء كرش ؛+ ‎alas‏ هلام أو مسحوق.
تنتقى كمية متقارن السكر في كل جرعة تركيبة مولدة للمناعة ككمية تحث استجابة مناعية ‎٠‏ وقائية بدون تأثيرات ضارة كبيرة. يمكن أن تختلف هذه الكمية اعتمادا على نوع المصل البكتيري الموجود في متقارن السكر . ‎Adin,‏ عامة ¢ سوف تشمل كل ‎٠.١ ie‏ إلى ‎Yeo‏ ميكروجرام من ‎(polysaccharide‏ تحديدا ‎١١٠‏ إلى ‎٠١‏ ميكروجرام؛ وبتحديد أكثر ‎١‏ إلى © ميكروجرام. في تجسيد ‎dame‏ من الاختراع ‎(J‏ تكون التركيبة المولدة للمناعة عبارة عن مستحضر سائل معقم من ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎Pn‏ أو ‎Mn‏ مقترن فرديا مع 197 ‎CRM‏ ‏5 .من خلال وصلة 6156؛ حيث تصاغ كل جرعة بمقدار ‎vio‏ ملليلتر لتحتوي على ‎5-١‏ ‏ميكروجرام من ‎(polysaccharide‏ الذي قد يحتوي ‎Lilia)‏ على ‎١.٠796‏ مجم من المادة المساعدة الألومنيوم الأولي )20+ مجم فوسفات ألومنيوم)؛ وكلوريد صوديوم ومثبت أس هيدروجين 5001017 ‎SUCCINate‏ كمواد مسوغة. يمكن التحقق من الكميات المُثلى لمكونات تركيبة مولدة للمناعة محددة بواسطة دراسات ‎Yo‏ قياسية تتضمن ملاحظة الاستجابات المناعية الملائمة في الكائنات. بعد التطعيم الأولي» يمكن للكائنات استقبال تحصين معزز واحد أو تحصينات معززة متعددة متباعدة على نحو كاف. قد تعبا التركيبات المولدة للمناعة من الاختراع في شكل جرعة وحدة أو شكل متعدد الجرعات ‎Dl)‏ جرعتين؛ ؛ جرعات؛ أو أكثر). للأشكال متعددة الجرعات؛ تكون القوارير نموذجية لكن ليس بالضروري أن تكون مفضلة عن المحاقن المعبأة مسبقا. إن أشكال متعددة الجرعات
هه المناسبة تتضمن لكن بدون تحديد: ؟ إلى ‎٠١‏ جرعات لكل حاوية عند ‎١0٠‏ إلى ؟ ملليلتر لكل جرعة. في تجسيدات معينة؛ تكون الجرعة بمقدار ‎vio‏ ملليلتر. انظرء على سبيل ‎(JE‏ طلب براءة الاختراع الدولي رقم ‎٠٠١97/17973154‏ المندمج هنا كمرجع. قد تقدم التركيبات في قوارير أو حاويات تخزين أخرى مناسبة؛ أو قد تقدم في أدوات © توصيل معبأة ‎line‏ مثلاء محاقن فردية أو متعددة المكون؛ التي قد تورد مع أو بدون إبر. يحتوي الحاقن نموذجيا ‎OS‏ ليس من الضروري على جرعة فردية من التركيبة المولدة للمناعة المحتوية على ‎sale‏ حافظة من الاختراع» على الرغم أيضا من تصور محاقن معبأة مسبقا متعددة الجرعة. أيضاء فإن القارورة قد تتضمن جرعة فردية لكنها قد تتضمن بصورة بديلة جرعات متعددة. يمكن ترسيخ أحجام تجريع فعالة روتينياء لكن الجرعة النموذجية من تركيبة للحقن لها حجم ‎٠‏ - بمقدار 5.؛ ملليلتر. في تجسيدات معينة؛ تصاغ الجرعة للإعطاء إلى كائن أدمي. في تجسيدات معينة؛ تصاغ الجرعة للإعطاء إلى شخص آدمي بالغ؛ مراهق؛ يافع؛ طفل أو رضيع (أي؛ لم يبلغ من العمر أكثر من عام واحد) وقد تعطى في تجسيدات مفضلة بالحقن. إن التركيبات المولدة للمناعة السائلة من الاختراع تكون مناسبة أيضا لإعادة تشكيل تركيبات مولدة للمناعة أخرى التي توجد في شكل مجفد. حيث قد تستخدم تركيبة مولدة للمناعة ‎١‏ الإعادة تشكيل مرتجل؛ يوفر الاختراع مجموعة مع قارورتين أو أكثر؛ محقنين معبأين جاهزين أو أكثرء أو واحد أو أكثر من كل منهماء مع استخدام محتويات الحاقن لإعادة تشكيل محتويات القارورة قبل الحقن؛ أو العكس بالعكس. في تجسيد ‎AT‏ أيضاء تنتقى حاوية لشكل متعدد الجرعة من واحد أو أكثر من المجموعة المتكونة من؛ لكن بدون تحديد؛ آنية زجاجية معملية عامة؛ دوارق؛ أكواب صيدلية؛ أسطوانات ‎٠٠‏ مدرجة؛ مخمرات؛ مفاعلات حيوية؛ شبكة أنابيب؛ أنبوبات؛ ‎owls)‏ مرطبانات؛ قوارير؛ غالقات للقارورة ‎Sa)‏ سدادة مطاطية؛ فتاحة على الغطاء)؛ أمبولات؛ محاقن؛ محاقن مزدوجة أو متعددة الحجرة» سدادات ‎(AU‏ مكابس للحاقن؛ غالقات مطاطية؛ غالقات من البلاستيك» غالقات زجاجية؛ خراطيش وأقلام للاستعمال ‎$e‏ واحدة؛ إلخ. لا تتقيد الحاوية من الاختراع الحالي بمادة تصنيع؛ | ‎ds emily‏ مثل ‎lal‏ المعادن | ‎AYE OEY‏ فلاذ
-1ه- لا يصداًء ألومنيوم؛ إلخ) وبوليمرات (مثلا؛ مواد لدنة حرارياء مواد المطاط الصناعية؛ مواد المطاط الصناعية اللدنة ‎(Whe‏ في تجسيد ‎me‏ تكون حاوية الشكل هي قارورة زجاجية 1 ‎Schott Type‏ بمقياس © ملليلتر مع مدادة الإآانا5. سوف يدرك الماهر في الفن أن الهيئة المذكورة ‎led‏ ليست قائمة حصرية على ‎(PUY‏ لكنها تعمل كدليل للفني فيما ‎oo‏ يتعلق بتشكيلة الهيئات المتاحة للاختراع الحالي. ‏ قد توجد الهيئات الإضافية المتوقعة للاستخدام في الاختراع الحالي في كتالوجات منشورة من بائعي ومصنعي المعدات المعملية ‎Jie‏ ‎(Lima, OH) United States Plastic Corp.‏ ا/الالا. طرق حث استجابة مناعية وحماية ضد العدوى يتضمن الاختراع الحالي أيضا طرق لاستخدام متقارنات ‎Su‏ متصلة مع ‎eTEC‏ ‎٠‏ وتركيبات مولدة للمناعة تشملهم؛ سواء وقائيا أو علاجيا. على سبيل ‎(JB‏ يوفر أحد جوانب الاختراع طريقة لحث استجابة مناعية ضد ‎LAS‏ مسببة ‎compel‏ على سبيل المثال بكتيريا المكورات الرئوية أو البكتيريا المسببة للالتهاب السحائي؛ ‎Jai‏ إعطاء كائن كمية مؤثرةٍ مناعيا من أي من التركيبات المولدة للمناعة الموصوفة هنا المشتملة على مولد مضاد بكتيري؛ مثلا ‎Jw polysaccharide‏ بكتيري مشتق من بكتيريا مسببة للمرض. يوفر أحد تجسيدات ‎١‏ الاختراع طريقة لحماية كائن ضد العدوى ببكتيريا مسببة للمرض؛ أو طريقة لمنع؛ معالجة أو تخفيف مرض أو حالة عدوى تصاحبها بكتيريا مسببة للمرض؛ أو طريقة لخفض حدة أو تأخير بداية عرض واحد على الأقل مصاحب بعدوى تسببها بكتيريا مسببة للمرض؛ في كل ‎Ala‏ تشتمل الطرق على إعطاء كائن كمية فعالة مناعيا من أي من التركيبات المولدة للمناعة الموصوفة هنا المشتملة على مولد مضاد بكتيري؛ مثل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري مشتق من البكتيريا ‎٠٠‏ المسببة للمرض. يوفر أحد تجسيدات الاختراع طريقة لمنع؛ معالجة أو تخفيف عدوى ‎AS‏ مرض أو حالة في كائن؛ ‎Jodi‏ إعطاء ‎(AN‏ كمية فعالة مناعيا من تركيبة مولدة للمناعة من الاختراع؛ حيث تشتمل التركيبة المولدة للمناعة المذكورة على متقارن سكر متصل مع ‎€TEC‏ يشمل مولد مضاد بكتيري؛ مثل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري.
له في بعض التجسيدات؛ تكون الطريقة لمنع؛ معالجة أو تخفيف عدوى بكتيرية؛ مرض أو حالة تشمل معالجة آدمي؛ طبيب بيطري؛ حيوان؛ أو معالجة زراعية. يوفر تجسيد آخر طريقة لمنع؛ معالجة أو تخفيف عدوى بكتيرية؛ مرض أو حالة تصاحبها بكتيريا مسببة للمرض في كائن؛ تشمل الطريقة توليد مستحضر جسم مضاد عديد النسخ أو أحادي النسخ من التركيبة المولدة ا للمناعة الموصوفة هنا؛ واستخدام مستحضر الجسم المضاد المذكور لمنح استمناع سلبي للكائن. يوفر أحد تجسيدات الاختراع طريقة لمنع عدوى بكتيرية في كائن يخضع لإجراء جراحي؛ تشمل الطريقة خطوة إعطاء كمية مؤثرة وقائيا من تركيبة مولدة للمناعة موصوفة هنا إلى الكائن قبل الإجراء الجراحي.
في تجسيدات مفضلة لكل من الطرق السابقة؛ تكون البكتيريا المسببة للمرض هي بكتيريا ‎٠‏ المكورات الرئوية أو البكتيريا المسببة للالتهاب السحائي؛ ‎Jie‏ بكتيريا ‎pneumoniae‏ .5 أو بكتيريا ‎WN. meningitis‏ في بعض من تلك التجسيدات؛ يكون مولد المضاد البكتيري هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ينتقى من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ الكبسولية 1؛ ‎(TF 6B 6A 5 4 3‏ ف ‎<10A OV‏ ملل 02ل 158ل قل ‎I9F (19A‏ ‎33F 5 23F (22F‏ لها النمط المصلي ‎.Pn‏ في تجسيدات ‎(eal‏ يكون مولد المضاد البكتيري هو ‎polysaccharide Yo‏ كبسولي ينتقى من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ الكبسولية من
النمط المصلي ‎Mn‏ متل ‎CA‏ 0/135 و 7. إن الاستجابة المناعية لمولد مضاد أو تركيبة مولدة للمناعة تتميز بتطور استجابة مناعية تتسبب فيها بصورة غير مباشرة سائل و/أو خلية في كائن للجزيئات الموجودة في مولد المضاد أو التركيبة المولدة للمناعة محل الدراسة. لأغراض الاختراع الحالي فإن "الاستجابة المناعية الخلطية ‎"(humoral immune response) | ٠‏ هي استجابة مناعية يتسبب فيها بصورة غير مباشرة جسم مضاد وتتضمن حث وتوليد أجسام مضادة تدرك وترتبط مع بعض الإنجذابية إلى مولد المضاد في التركيبة المولدة للمناعة من الاختراع؛ بينما "الاستجابة المناعية التي تتسبب فيها بصورة غير مباشرة خلية ‎(cell-mediated immune response)‏ هي واحدة تتسبب ‎led‏ بصورة غير مباشرة خلايا 7 و/أو ‎WA‏ دم بيضاء أخرى. تحدث "استجابة مناعية تتسبب فيها بصورة غير ‎YO‏ مباشرة خلية' بتقديم إبيتوبات مولدة للمضاد في اتحاد مع جزيئات من الفئة ‎١‏ أو ‎VAN‏ من معقد
—oA- ‏أو‎ CDI «(MHC) (major histocompatibility complex) ‏التوافق النسيجي الرئيسي‎
Ase ‏التي تخص‎ 0104+ ١1 ‏المساعدة‎ WAN ‏غير تقليدية. إن هذا ينشط‎ MHC ‏جزيئات تشبه‎ (cytotoxic ١ lymphocyte cells) CD8+ ‏سامة خلويا‎ T ‏المضاد أو خلايا ليمفاوية‎ ‏لها خصوصية لمولدات مضاد الببتيد المقدمة في اتحاد مع البروتينات‎ CTLs ‏إن‎ .)"1157 ‏تساعد‎ CTLs ‏المشفرةٍ بواسطة 1/1405 تقليدية أو غير تقليدية والظاهرة على أسطح الخلايا. إن‎ © ‏أو تحلل الخلايا المصابة بتلك‎ Nal ‏حث وتعزيز الهلاك داخل الخلايا للميكروبات داخل‎ ‏الميكروبات. إن جانب آخر للاستمناع الخلوي يتضمن استجابة تخص مولد مضاد بواسطة خلايا‎ ‏مستجيب‎ WIA ‏مساعدة. تعمل خلايا 1 المساعدة على مساعدة إثارة الوظيفة؛ وتمركز نشاط‎ T ‏تقليدية‎ MHC ‏غير خاصة ضد خلايا تظهر ببتيد أو مولدات مضاد أخرى في اتحاد مع جزيئات‎ ‎٠‏ أو غير تقليدية على أسطحها. إن "استجابة مناعية تتسبب فيها بصورة غير مباشرة ‎IR‏ تشير أيضا إلى إنتاج ‎chemokines (cytokines‏ والجزيئات الأخرى أيضا المنتجة بواسطة ‎T WA‏ و/أو خلايا دم بيضاء أخرى منشطة؛ تتضمن تلك المشتقة من خلايا 7 +604 و+008. قد تتحدد قدرة ‎alse‏ مضاد محدد أو تركيبة على إثارة استجابة مناعية تتسبب فيها بصورة غير مباشرة خلية بعدد من الاختبارات؛ مثلا بواسطة اختبارات الانقسام الليمفاوي (تنشيط ليمفاوي)؛ اختبارات ‎Ye‏ خلية سامة ‎CTL Les‏ باختبار ‎WA‏ ليمفاوية ‎T‏ تخص مولد المضاد في ‎HE‏ مصاب بالحساسية؛ أو بواسطة قياس إنتاج ‎cytokine‏ بواسطة ‎T WA‏ استجابة إلى إعادة الإثارة مع مولد مضاد. تعرف تلك الاختبارات جيدا في الفن. انظر؛ على سبيل المثال؛ ‎Erickson et al. (1993) J. Immunol. 151:4189-4199; and Doe et al.‏ ‎Eur. J. Immunol. 24:2369-2376.‏ )1994( ‎)١( ‏قد تكون التركيبات المولدة للمناعة والطرق من الاختراع نافعة لواحد أو أكثر مما يلي:‎ Y. ‏منع عدوى أو تكرار عدوى؛ كما في لقاح تقليدي؛ (7) خفض حدة؛ أو؛ التخلص من الأعراض؛‎ ‏و/أو )7( التخلص الجوهري أو الكامل من مسبب المرض أو الاضطراب محل الدراسة. لهذاء قد‎ ‏تتم المعالجة وقائيا (قبل العدوى) أو علاجيا (بعد العدوى). في الاختراع الحالي؛ تكون المعالجة‎ ‏الوقائية أسلوب مفضل. طبقا لتجسيد محدد من الاختراع الحالي؛ تتوافر تركيبات وطرق تعالج؛‎ ‎5. ‏بواسطة‎ Sle ‏متضمنة التحصين الوقائي و/أو العلاجي؛ كائن عائل ضد العدوى البكتيرية؛‎ YO
-4ه- ‎pneumoniae‏ أو ‎NL meningitides‏ تكون الطرق من الاختراع الحالي نافعة لبحث ‎Lain)‏ ع وقائي و/أو علاجي لكائن. يمكن ممارسة الطرق من الاختراع الحالي أيضا على كائنات لتطبيقات بحث طبية بيولوجية. كما هو مستخدم ‎cla‏ فإن المصطلح ‎(subject) I‏ يعني آدمي أو حيوان غير آدمي. بتحديد أكثر فإن كائن يشير إلى أي حيوان مصنف ‎HIS‏ ثديي؛ متضمنا الآدميين» الحيوانات الأليفة وحيوانات المزرعة؛ وحيوانات ‎(Canal)‏ حيوانات حديقة الحيوان» حيوانات الألعاب الرياضية والحيوانات الرفيقة المدللة مثل الحيوانات المدللة المنزلية وحيوانات أليفة أخرى تتضمن؛ لكن بدون تحديد؛ الماشية؛ الغنم؛ حيوانات ابن مقرض؛ خنزير؛ خيل؛ أرانب؛ ‎ele‏ كلاب؛ قطط» إلخ. إن الحيوانات الرفيقة المفضلة هي الكلاب والقطط. بصورة مفضلة؛ يكون الكائن آدميا. ‎IK‏ تحسب بصفة عامة كمية المتقارن المحدد في تركيبة اعتمادا على الكمية الكلية من ‎JS polysaccharide‏ من المتقارن وغير المتقارن لهذا المتقارن. على سبيل المثال» فإن المتقارن مع 7780 من ‎polysaccharide‏ حر سوف يكون له حوالي ‎Av‏ ميكروجرام من ‎Ell polysaccharide‏ وحوالي ‎٠١‏ ميكروجرام من ‎polysaccharide‏ غير المتقارن في ‎٠‏ ميكروجرام من جرعة ‎sale polysaccharide‏ لا يؤخذ في الاعتبار البروتين المشارك في ‎Vo‏ التقارن عند ‎lua‏ جرعة المتقارن. قد تتنوع الكمية المولدة للمناعة للمتقارن أو التركيبة المولدة للمناعة اعتمادا على ‎ball‏ المصلي البكتيري. عامة؛ سوف تشتمل تلك الجرعة على ‎٠٠١‏ إلى ‎٠‏ ميكروجرام من ‎polysaccharide‏ تحديدا ‎١٠‏ إلى ‎٠١‏ ميكروجرام؛ وبتحديد أكثر ‎١‏ إلى ‎٠‏ ميكروجرام. قد تنحرف الكمية المولدة للمناعة من مكونات ‎polysaccharide‏ المختلفة في تركيبة مولدة للمناعة وقد يشتمل كل منها على ‎١‏ ميكروجرام» ؟ ميكروجرام» ؟ ميكروجرام؛ ؛ ‎bag fae ٠‏ © ميكروجرام» ‎١‏ ميكروجرام» ‎١‏ ميكروجرام» ‎A‏ ميكروجرام» 4 ميكروجرام»؛ ‎٠١‏ ‏ميكروجرام» ‎١١‏ ميكروجرام» ‎Yo‏ ميكروجرام» ‎Vo‏ ميكروجرام» 560 ميكروجرام؛ ‎On‏ ميكروجرام؛ ‎٠١‏ ‏ميكروجرام» ‎Ve‏ ميكروجرام» ‎Av‏ ميكروجرام» 90 ميكروجرام» أو حوالي ‎٠٠١‏ ميكروجرام من أي من مولد مضاد ‎polysaccharide‏ محدد. إن المصطلح 'مرض عدواني ‎"(invasive disease)‏ يشير إلى عزل بكتيريا من موقع ‎YO‏ معقم طبيعياء حيث توجد علامات/ أعراض إكلينيكية مصاحبة للمرض. إن مواقع البدن المعقمة qa ‏المائع الجنبي؛ المائع التاموريء المائع البريتوني؛ مائع المفصل/‎ (CSF ‏طبيعيا تتضمن الدم؛‎ ‏المائع الزليلي؛ العظم» موقع داخل البدن (العقد الليمفاوية؛ المخ؛ القلب؛ الكبدء الطحال؛ مائع‎ ‏الجسم الزجاجي؛ الكلى؛ البنكرياس؛ المبيض) أو مواقع معقمة طبيعيا أخرى. إن الحالات‎ ‏التهاب النسيج الخلوي؛‎ (gs) ‏الإكلينيكية المميزة للأمراض العدوانية تتضمن تجرثم الدم؛ التهاب‎ ‏التهاب العظم والنخاع؛ التهاب الشغاف؛ صدمة متعفنة والمزيد. يمكن قياس فعاليات مولد مضاد‎ © ‏اختبارات إطلاق‎ Jie ‏كمستمنع سواء باختبارات الانقسام؛ بواسطة الاختبارات المحللة للخلية؛‎ ‏لقياس قدرة خلية 1 على تحليل خلية هدف تخصهاء أو بقياس مستويات نشاط خلية‎ chromium ‏المضاد في المصل. يمكن‎ alse ‏بقياس مستويات الأجسام المضادة بالدورة الدموية التي تخص‎ 8 ‏أيضا الكشف عن استجابة مناعية بقياس مستويات المصل من جسم مضاد يخص مولد مضاد‎
‎٠‏ محثة بعد إعطاء مولد ‎load)‏ بصفة خاصة أكثر؛ بقياس قدرة الأجسام المضادة المحثة على تعزيز القدرة على بلعمة الطاهية لخلايا دم بيضاء محددة؛ كما هو موصوف هنا. قد يتم قياس مستوى حماية الاستجابة المناعية بواسطة تحدي العائل المحصن مع مولد المضاد المعطى. على سبيل المثال؛ إذا كان مولد المضاد المطلوب استجابة مناعية له هو بكتيريا؛ يقاس مستوى الحماية المحثة بالكمية المولدة للمناعة من ‎alse‏ المضاد باكتشاف النسبة المئوية للبقاء على ‎ad‏ الحياة أو
‎Vo‏ النسبة المئوية للوفيات بعد تحدي الحيوانات مع الخلايا البكتيرية. في أحد التجسيدات؛ قد يقاس مقدار الحماية بقياس عرض واحد على الأقل تصاحبه عدوى بكتيرية؛ مثلا حمى تصاحبها عدوى. سوف تتنوع كمية كل مولد مضاد في لقاح متعدد المكونات أو متعدد مولد المضاد أو التركيبات المولدة للمناعة بالنسبة لكل مكون من المكونات الأخرى ويمكن تحديدها بطرق معروفة للفني الماهر. تلك الطرق سوف تتضمن إجراءات لقياس الاستمناع و/أو الفعالية داخل الجسم.
‎Y.‏ في جانب ‎gy AT‏ الاختراع أجسام مضادة وتركيبات جسم مضاد التي ترتبط بصفة خاصة ‎polysaccharides ae Lilly‏ الكبسولية أو متقارنات السكر من الاختراع الحالي. في بعض من تلك التجسيدات؛ يوفر الاختراع أجسام مضادة وتركيبات جسم مضاد ترتبط بصفة خاصة وانتقائيا مع ‎polysaccharides‏ الكبسولية 1 3 4 5 ‎OA‏ ‎<10A OV (8 (TF 6B‏ ملل ‎«12F‏ 14« 158 عق8ل طقل 197 227 237 5 ‎33F‏
‎Yo‏ لها ‎lad) hall‏ 00 أو متقارنات السكر التي تشملهم. في تجسيدات أخرى؛ يوفر الاختراع yy polysaccharides ‏أجسام مضادة أو تركيبات جسم مضاد ترتبط بصفة خاصة وانتقائيا مع‎ ‏و7 أو متقارنات سكر تشملهم. في بعض‎ 10/135 (CA Jie Mn ‏الكبسولية من النمط المصلي‎ ‏الكبسولية أو متقارنات‎ polysaccharides ‏التجسيدات؛ تتولد الأجسام المضادة عند إعطاء كائن‎ ‏السكر من الاختراع الحالي. في بعض التجسيدات؛ يوفر الاختراع أجسام مضادة منقاة أو معزولة‎ ‏الكبسولية أو متقارنات السكر من الاختراع‎ polysaccharides ‏موجهة ضد واحد أو أكثر من‎ © ‏الحالي. في بعض التجسيدات؛ تكون الأجسام المضادة من الاختراع الحالي وظيفية حسب القياس‎ ‏بواسطة قتل البكتيريا في كل من نموذج فعالية حيوان أو من خلال اختبار قتل مبلعم الطاهية. قد‎ ‏تستخدم الأجسام المضادة أو تركيبات الجسم المضاد من الاختراع في طريقة لمعالجة أو منع‎ ‏مسببة للمرض في كائن؛ على سبيل المثال؛‎ WES ‏تصاحبها‎ Alla ‏عدوى بكتيرية؛» مرض أو‎ ‏أو 5 .لا تشمل الطريقة توليد مستحضر جسم مضاد‎ 5. pneumoniae ‏بكتيريا‎ ٠ ‏عديد النسخ أو أحادي النسخ؛ واستخدام الجسم المضاد أو تركيبة الجسم المضاد المذكورة لمنع‎ ‏استمناع سلبي للكائن. أيضا قد تكون الأجسام المضادة من الاختراع نافعة للطرق التشخيصية؛‎ ‏الكبسولي أو متقارن سكر‎ polysaccharide ‏الكشف عن وجود أو تحديد مقدار مستويات‎ Oli ‏أيضا قد تكون الأجسام المضادة من الاختراع نافعة للكشف عن وجود‎ (JE ‏من ذلك. على سبيل‎ ‏أو متقارن سكر من ذلك؛‎ Mnf 00 ‏الكبسولي‎ polysaccharide ‏أو تحديد مقدار مستويات‎ Vo ‏كبسولي بكتيري متقارن مع بروتين حامل من‎ polysaccharide ‏حيث يشتمل متقارن السكر على‎
TEC ‏خلال مباعد‎ ‏قد تستخدم اختبارات متنوعة ونماذج حيوان معروفة في الفن _لتقييم فعالية أي‎ ‏يصف‎ JE ‏من التركيبات المولدة للمناعة الموصوفة هنا. على سبيل‎ ‏نماذج حيوان‎ Chiavolini et al. Clin. Microbiol. Rev. (2008), 21)4(:666-685 ٠٠ ‏يصف‎ .S. pneumoniae ‏مصابة بأمراض‎
Gorringe et al. Methods in Molecular Medicine, vol. 66 (2001), Chapter 17, Pollard and Maiden eds. (Humana Press Inc.) ‏نماذج حيوان مصابة بأمراض مسببة للالتهاب السحائي.‎
‎h \ —_‏ _ اختبار نشاط مبلعم الطاهية ‎(OPA) (Opsonophagocytic activity)‏ تعتمد إجراءات اختبار ‎OPA‏ على الطرق الموصوفة مسبقا بواسطة ‎Hu, et al. (Clin.
Diagn.
Lab.
Immunol. 2005; 12)2(:287-95(‏ مع التعديلات التالية. تخفف بصورة تسلسلية أمصال غير منشطة بالحرارة بمقدار ضعفين ونصف في مثبت أس © هيدروجيني. تضاف البكتيريا المستهدفة إلى أطباق الاختبار وتحضن لمدة 70 دقيقة عند #5مثوية على رجاج. بعدئذ خلايا أرنب رضيع متممة (تبلغ أعمارها ؟ إلى ؛ ‎Pel- auld‏ ‎7١١7.0 (Freez‏ تركيز ‎HL-60 WIA (Sl‏ متمايزة إلى كل عين عند نسبة مستجيب إلى هدف تقريبية بمقدار ‎.٠:7٠١‏ تحضن أطباق الاختبار لمدة £0 دقيقة عند 7١7"مئوية‏ على رجاج. لإنهاء ‎Je lal)‏ يضاف ‎Ae‏ ميكرولتر من ‎NaCl 7..a‏ إلى العيون» يتم الخلطء ‎Yo Jaw‏ ‎Ve‏ ميكرولتر من القواسم التامة إلى عيون أطباق مرح ‎Millipore, MultiScreenHTS HV‏ تحتوي على ‎Yeo‏ ميكرولتر ماء. يرشح السائل من خلال أطباق تحت شفط ويضاف ‎You‏ ‏ميكرولتر من وسط ‎HySoy‏ إلى كل عين ويرشح خلالها. تحضن أطباق المرشح بعدئذ عند ١7"مئوية؛‏ 75 602 طوال الليل ثم تثبت مع ‎xis. (Bio-Rad) 0651810 Solution‏ الأطباق فيما بعد مع ‎Coomassie Blue‏ ويزال التبقع مرة واحدة. يتم تصوير المستعمرات ويتم عدها على ‎andy (Cellular Technology Limited (CTL) ImmunoSpot Analyzer® Yo‏ عيار الجسم المضاد ‎OPA‏ من متبادل اثنين من تخفيفات المصل المشتملة على نقطة خفض ‎٠‏ 75 في عدد المستعمرات البكتيرية عند المقارنة مع العيون المقارنة التي لا تحتوي على مصل مناعي. إن الكشف أعلاه يصف عامة الاختراع الحالي. يمكن الحصول على فهم مكتمل أكثر بالرجوع إلى الأمثلة الخاصة التالية. توصف تلك الأمثلة فقط بغرض التوضيح ولا تعتبر محددة ‎Y ٠‏ لنطاق الاختراع. الأمثلة مثال ‎.١‏ عملية عامة لتحضير متقارنات ‎Su‏ متصلة مع ‎eTEC‏ ‏تنشيط ‎Saccharide‏ و ‎Thiolation‏ مع ‎Cystamine dihydrochloride‏ ‎Eve Y‏
اس يعاد تشكيل 58060118106 في ‎(DMSO) dimethylsulfoxide‏ لامائي. يتحدد محتوى رطوبة المحلول بواسطة تحليل ‎(KF) Karl Fischer‏ ويضبط ليصل إلى محتوى رطوبة بمقدار ‎١‏ و20.45 نموذجيا ‎JY‏ ‎gal‏ التنشيط» يحضر طازجا محلول من 6ا1-1,2,4-11820- الإ1,17-68+500 ‎(CDT) ©‏ أو ‎(CDI) 1,17-carbonyldiimidazole‏ بتركيز ‎٠٠١‏ مجم/ ملليلتر في ‎DMSO‏ ينشط 6 مع كميات متنوعة من ‎٠١-١( CDT/CDI‏ مكافئ جزيئي جرامي) ويترك التفاعل ليتقدم لمدة ساعة واحدة عند ‎VY‏ +1 7١"مثوية.‏ قد يتحدد مستوى التنشيط بواسطة ‎HPLC‏ يحضر ‎Cystamine dihydrochloride‏ طازجا في ‎DMSO‏ لامائي عند تركيز بمقدار ‎٠‏ 5 مجم/ ‎cystamine ‏مكافئ جزيء من‎ ١ xe ‏المنشط‎ saccharide ‏مليلتر. يتفاعل‎ ٠ ‏جزيء مكافئ من‎ ١ ‏المنشط مع‎ saccharide ‏_بطريقة بديلة؛ يتفاعل‎ dihydrochloride
YY ‏ساعة عند‎ ١ + ١١ ‏ليتقدم لمدة‎ thiolation ‏يترك تفاعل‎ .cysteamine hydrochloride
CDT/CDI ‏يتحدد مستوى 1110181100 بكمية‎ .thiolated saccharide zy ‏ساعة؛‎ ¥ + ‏المضافة.‎ ‎Vo‏ يخمد ‎CDT/CDI‏ المتخلف في محلول تفاعل التنشيط بإضافة ‎٠٠١‏ مللي جزيئي جرامي من محلول ‎Wl sodium tetraborate‏ هيدروجيني 4. تجرى الحسابات لتحديد الكمية المضافة من ‎tetraborate‏ ولضبط محتوى الرطوبة النهائي ليصل إلى ‎77-١‏ من المحتوى المائي الإجمالي. اختزال وتنقية ‎Thiolated Saccharide‏ المنشط ‎o ‏أضعاف بالإضافة إلى‎ ٠١ ‏بمقدار‎ thiolated saccharide ‏يخفف خليط التفاعل‎ Y. ‏المبرد مسبقا في 70.9 محلول ملحي؛ بأس‎ sodium succinate ‏مللي جزيئي جرامي من‎ 16018460 ‏هيدروجيني 1 ويرشح خلال مرشح © ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لأجل‎ saccharide ‏إلى ما تبقى يضاف محلول من‎ WRL ‏مقابل حجم مزدوج بمقدار 6؛ ضعف من‎
— أ — ‎tris(2-carboxyethyl)phosphine (TCEP)‏ )0 مكافئ جزيء؛ بعد التخفيف بواسطة ‎٠‏ حجم من مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات صوديوم ‎0٠‏ جزيئي جرامي؛ بأس هيدروجيني ‎WT‏ يترك تفاعل الاختزال هذا ليتقدم ‎Ye sad‏ + 7 ساعة عند 5 + ؟”مثوية. تجرى تنقية ‎thiolated saccharide‏ المنشط بصورة مفضلة بواسطة الترشيح الفاثق/ الترشيح المزدوج لفوسفات صوديوم بمقدار ‎Yo‏ مللي جزيثي جرامي مبرد مسبقًا أحادي القاعدة؛ بأس هيدروجيني ".. بطريقة ‎dla‏ ينقى ‎thiolated saccharide‏ بواسطة إجراءات كروماتوجرافية باستثناء المقاس ‎(SEC)‏ قياسية أو طرق كروماتوجرافية بتبادل الأيون . يتم سحب قاسم تام من ‎thiolated‏ ‏06 المنشط المتبقي لتحديد تركيز ‎saccharide‏ واختبارات محتوى ‎.(Ellman) thiol‏ اختزال وتنقية بديلة لأجل ‎Laid) Thiolated Saccharide‏ ‎Ya‏ كبديل لإجراء التنقية الموصوف أعلاه؛ ينقى أيضا ‎thiolated saccharide‏ المنشط كما هو أدناه. إلى خليط التفاعل ‎saccharide‏ 110181680 يضاف محلول من ‎٠١-٠ (TCEP) tris(2—carboxyethyl)phosphine‏ جزيء مكافئ؛ ويترك ليتقدم ‎sad‏ ؟ + ‎١‏ ساعة عند ‎YY‏ + 7"مثوية. يخفف خليط التفاعل بمقدار © أضعاف بالإضافة إلى © مللي ‎٠‏ جزيثي ‎sha‏ من ‎sodium succinate‏ المبرد مسبقا في 70.9 محلول ‎ale‏ بأس هيدروجيني 1 ويرشح خلال مرشح © ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لأجل ‎thiolated saccharide‏ باستخد ام حجم مزدوج بمقدار ‎٠‏ ضعف من ‎٠١‏ مللي جزيني جرامي فوسفات صوديوم مبرد مسبقا أحادي القاعدة؛ بأس هيدروجيني 4.7 . يتم سحب قاسم تام من ‎thiolated saccharide‏ المنشط المتبقي لتحديد تركيز ‎saccharide‏ واختبارات محتوى ‎.(Ellman) thiol‏ ‎Yo‏ تنشيط وتنقية بروتين حامل ‎Bromoacetylated‏ ‏يجرى ‎bromoacteylation‏ لمجموعات أمينية حرة من البروتين الحامل بالتفاعل مع عامل ‎bromoacetic acid N-hydroxysuccinimide ester i. (<bromoacetylating‏ ‎<bromoacetylbromide «(BAANS)‏ أو عامل كاشف ‎AT‏ مناسب. ‎Eye‏
هم يحفظ أولا البروتين الحامل (في ‎00٠‏ جزيئي جرامي من فوسفات الصوديوم؛ بأس هيدروجيني / + ‎)٠<”7‏ عند 8 + ‎de®‏ عند حوالي أس هيدروجيني 7 قبل التنشيط. إلى محلول البروتين» يضاف ‎ester‏ 01070/5661711106/-ل من ‎bromoacetic acid‏ ‎(BAANS)‏ على أنه محلول ‎(DMSO) dimethylsulfoxide‏ مخزون ‎Yo)‏ مجم/ ملليلتر) بنسبة ‎:BAANS vo —v Yo 0‏ بروتين (وزن/ وزن)ز يخلط التفاعل برفق عند © + ‎ACY‏ لمدة ‎٠8‏ ؟7- ‎٠‏ دقيقة. ينقى البروتين (المنشط) ‎Se mill bromoacetylated‏ بواسطة الترشيح ‎[SE‏ ‏الترشيح المزدوج باستخدام غشاء ‎٠١ MWCO‏ كيلودالتون باستخدام ‎٠١‏ مللي جزيئي جرامي من مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات (بأس هيدروجيني 7). بعد التنقية؛ يتم تقييم تركيز البروتين من البروتين الحامل ‎bromoacetylated‏ بواسطة اختبار بروتين ‎Lowry‏ ‎AD‏ يتحدد مدى التنشيط بواسطة اختبار ‎bromide‏ إجمالي بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل لتبادل الأيون مقترن مع الكشف عن الموصلية المكبوحة (تحليل كروماتوجرافي أيون). ينشق 6 المرتبط على بروتين ‎bromoacetylated‏ المنشط من البروتين في تحضير عينة الاختبار وتتحدد كميته مع أي من ‎all bromide‏ الذي قد يتواجد. يتم إطلاق ‎bromine‏ المرتبط تساهميا المتبقي على البروتين بواسطة التحول إلى ‎bromide‏ أيوني بتسخين العينة في -2 ‎mercaptoethanol ١٠‏ قلوي. تنشيط وتنقية ‎Bromoacetylated CRM197‏ يخفف 080/197 إلى © مجم/ ملليلتر مع 70.9 ‎NaCl‏ مثبت الأس الهيدروجيني بفوسفات ‎٠١‏ مللي جزيئي جرامي بأس هيدروجيني ‎(PBS)‏ ثم يصنع ‎0.١‏ جزيئي جرامي من ‎NaHCO3‏ بأس هيدروجيني 7 باستخدام محلول مخزون ‎١‏ جزيئي جرامي. يضاف ‎BAANS‏ ‎Yo‏ بنسبة ‎BAANS :CRM197‏ بنسبة ‎.725:١‏ (وزن: وزن) باستخدام محلول مخزون ‎BAANS‏ ‏من ‎٠١‏ مجم/ ملليلتر ‎DMSO‏ يحضن خليط التفاعل عند بين ‎aT‏ و١١”مثوية‏ لمدة ‎٠١‏ ‏دقيقة- ساعة واحدة ثم ينقى بالترشيح الفائق/ الترشيح المزدوج باستخدام غشاء ‎10K MWCO‏ و١٠‏ مللي جزيئي جرامي من فوسفات صوديوم/ 70.9 ‎NaCl‏ بأس هيدروجين 7. يختبر 7 المنشط المنقى بواسطة اختبار ‎Lowry‏ لتحديد تركيز البروتين ثم يخفف مع ‎PBS‏
-١1- ‏ويجمد‎ cryoprotectant ‏إلى © مجم/ ملليلتر. يضاف سكروز إلى 75 وزن/ حجم على أنه‎ ‏البروتين المنشط ويخزن عند —0 50 لحين الحاجة للتقارن.‎
Jaa ‏متوافقة‎ CRM197 ‏من‎ lysine ‏لمتخلفات‎ Bromoacetylation ‏تكون عملية‎ ‏متاحة. ينتج التفاعل إنتاجيات عالية‎ lysines ‏من 4؟‎ lysines Yo ‏إلى‎ Yo ‏متسببة في تتشيط‎ ‏من البروتين المنشط.‎ 0
Bromoacetylated ‏تقارن 5800081108 151018160 المنشط مع بروتين حامل‎ ‏قبل بدء تفاعل التقارن؛ تبرد قوارير التفاعل مسبقا إلى ©*مثوية. يضاف على التوالي‎ ‏المنشط ويتم الخلط عند سرعة‎ thiolated saccharide ;Bromoacetylated ‏البروتين الحامل‎ co) + ٠.9 ‏البروتين‎ [saccharide ‏دورة في الدقيقة. تكون نسبة إدخال‎ 5٠00-١59١ ‏رج بمقدار‎ ‏جزيئي جرامي من محلول‎ ١ ‏مع‎ va) + A ‏يضبط الأس الهيدروجيني الخاص بالتفاعل إلى‎ ٠ ‏ساعة.‎ ١ + ٠١ ‏يترك تفاعل التقارن ليتقدم عند *"مثوية لمدة‎ NaOH ‏تغطية المجموعات الوظيفية المتفاعلة المتخلفة‎ ١ ‏غير المتفاعلة على البروتين الحامل بالتفاعل مع‎ bromoacetylated ‏تخمد متخلفات‎ ‏كعامل كاشف للتغطية لمدة ؟ ساعات عند‎ N-acetyl-L-cysteine ‏جزيء جرامي مكافئ من‎ ‏الحرة المتخلفة مع ؛ جزيء جرامي مكافئ من‎ sulfhydryl ‏#مئوية. تغطى مجموعات‎ ١ ‏ساعة عند **مثوية.‎ ٠١ sad (IAA) iodoacetamide eTEC ‏متصل مع‎ Su ‏تنقية متقارن‎ ‏ميكرومتر. يجرى‎ ١.459 ‏خلال مرشح‎ (IAA ‏يرشح خليط تفاعل التقارن (بعد التغطية مع‎ 70.05 —succinate ‏من‎ da ‏ترشيح فائق/ ترشيح مزدوج لمتقارن السكر ضد © مللي جزيئي‎ ٠.7 ‏بعدئذ يرشح متقارن السكر المتبقي خلال مرشح‎ LT ‏أس هيدروجيني‎ ale ‏محلول‎ Yo ‏عند‎ Addl ‏ميكرومتر. يسحب قاسم تام من متقارن السكر للاختبارات. يخزن متقارن السكر‎
PEPIN
Pn-33F eTEC ‏تحضير متقارنات‎ VJs ‏ارق‎
عملية التنشيط تنشيط ‎Pn33F Polysaccharide‏ يركب ‎polysaccharide‏ 00-335 مع 500 مللي جزيئي جرامي من =1,2,4 ‎triazole‏ ‏© (في ‎(WF‏ للحصول على ‎٠١‏ جرامات من ‎triazole‏ لكل جرام من ‎.polysaccharide‏ ‎Bom‏ يجمد الخليط في حمام ثلج- ‎ethanol‏ جاف ثم يجفد حتى الجفاف. يعاد تشكيل ‎33F polysaccharide‏ المجفد في ‎(DMSO) dimethylsulfoxide‏ لامائي. يتحدد محتوى الرطوبة لمحلول ‎33F/DMSO‏ المجفد بواسطة تحليل ‎(KF) Karl Fischer‏ يضبط محتوى الرطوبة بإضافة ‎J) WEI‏ محلول ‎33F/DMSO‏ ليصل إلى محتوى رطوبة بمقدار 0.7 7. ‎I‏ لبدء التنشيط» ‎(CDT) 1,1°-carbonyl-di-1,2,4-triazole jas;‏ طازجا عند ‎٠‏ مجم/ ملليلتر في محلول ‎.DMSO‏ ينشط ‎PN33F polysaccharide‏ مع كميات مختلفة من ‎CDT‏ قبل خطوة 1110181100. يجرى تنشيط ‎CDT‏ عند ‎ACY + YY‏ لمدة ساعة واحدة. يتحدد مستوى التنشيط بواسطة تحليل ‎((A220/A205) HPLC‏ يضاف محلول ‎Sodium‏ ‎٠٠١ 8601656‏ مللي جزيئي جرامي؛ أس هيدروجيني + لإخماد أي ‎CDT‏ متخلف في ‎Yo‏ محلول تفاعل التنشيط. تجرى الحسابات لتحديد الكمية المضافة من ‎tetraborate‏ ويترك محتوى الرطوبة النهائي ليصبح 77.7 من المحتوى المائي الإجمالي. يترك التفاعل ليتقدم ‎sad‏ ساعة واحدة عند ‎YY‏ + 7"مثئوية. ‎Thiolation‏ لأجل ‎Polysaccharide‏ ]00-33 المنشط يحضر طازجا ‎Cystamine—dihydrochloride‏ في ‎DMSO‏ لامائي ويضاف ‎١‏ ‎٠‏ جزيء جرامي مكافئ من ‎cystamine dihydrochloride‏ إلى محلول تفاعل ‎polysaccharide‏ المنشط. يترك التفاعل ليتقدم ‎7١ sad‏ + 7 ساعة عند ‎Aga + 7١‏ يخفف محلول ‎٠١ thiolated saccharide‏ أضعاف بإضافة © مللي جزيئي جرامي من ‎sodium‏ ‏636 مجمد مسبقا في 70.9 محلول ملحي؛ بأس هيدروجيني 21 يرشح التفاعل المخفف
م أ — خلال مرشح © ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لأجل ‎thiolated 00-331 polysaccharide‏ مع كاسيتات غشاء مرشح فائق ‎MWCO‏ 6ا100؛ باستخدام ماء للحقن ‎(Water for Injection)‏ ‎(WF)‏ ‏يوضح في شكل ‎A‏ مستوى ‎thiolation‏ لأجل ‎polysaccharides‏ ]00-33 المنشطة 0 كدالة على المكافئات الجزيئية الجرامية من ‎CDT‏ ‏اختزال وتنقية ‎Thiolated 00-331 Polysaccharide‏ المنشط إلى المادة المتبقية يضاف محلول من ‎«(TCEP) tris(2-carboxyethyl)phosphine‏ جزيء جرامي مكافئ + بعد التخفيف بنسبة طم من الحجم ‎٠.1‏ جزيثي جرامي من مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات صوديوم؛ بأس هيدروجيني 7. يترك تفاعل الاختزال ‎٠‏ هذا _ليتقدم ‎١ + 7 sad‏ ساعة عند 77 + ؟تمئوية. يجرى ترشيح مزدوج لأجل ‎33F polysaccharide‏ 111018180 مع كاسيتات غشاء مرشح 3( ‎MWCO‏ 6ا100. يجرى الترشيح المزدوج ضد فوسفات صوديوم ‎٠١‏ مللي جزيئي جرامي مجمد مسبقا؛ بأس هيدروجيني 7. يسحب ‎33F polysaccharide‏ 111018180 المتبقي لكل من تركيز ‎saccharide‏ ‏واختبارات ‎-(Ellman) thiol‏ ‎Ve‏ اختزال وتنقية بديلين لأأجل ‎Thiolated 00-331 Polysaccharide‏ المنشط كبديل لإجراء التنقية الموصوف ‎«del‏ ينقى أيضا ‎33F thiolated saccharide‏ المنشط كما يلي. إلى خليط تفاعل ‎thiolated saccharide‏ يضاف محلول ‎tris(2-‏ ‎(TCEP) carboxyethyl)phosphine‏ © جزيء جرامي مكافئ ويترك ليتقدم لمدة ؟ + ‎١‏ ‎٠‏ ماعة عند ‎vy‏ + 7"مئوية. بعدئذ يخفف خليط التفاعل بمقدار 5 أضعاف بالإضافة إلى ‎oo‏ مللي جزيئي جرامي ‎sodium succinate‏ مجمد مسبقا في 70.9 محلول ملحي؛ بأس هيدروجيني ‎7١‏ ويرشح خلال مرشح © ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لأجل ‎thiolated saccharide‏ باستخدام ‎aaa‏ مزدوج £4 ضعف من ‎Al ٠١‏ جزيئي ‎ha‏ فوسفات صوديوم أحادي القاعدة؛
بأس ‎age‏ £7 مع كاسيتات غشاء مرشح فائق ‎Cay 100K MWCO‏ ‎thiolated 33F polysaccharide‏ المتبقي لكل من تركيز ‎saccharide‏ واختبارات ‎thiol‏ ‎(Ellman)‏ يتوافر مخطط متتابع لعملية التنشيط في شكل ‎(hv‏ . عملية التقارن © تقارن ‎Thiolated Pn33F Polysaccharide‏ إلى ‎Bromoacetylated CRM197‏ ينشط البروتين الحامل ‎CRM197‏ بصورة منفصلة بواسطة ‎<bromoacetylation‏ كما
هو موصوف في مثال ١؛‏ ثم يتفاعل مع ‎polysaccharide‏ 00-331 المنشط لتفاعل التقارن. قبل بدء تفاعل ‎opal‏ تبرد قارورة التفاعل ‎We‏ إلى ‎Lal‏ يخلط ‎Bromoacetylated CRM197‏ و ‎33F polysaccharide‏ 111018180 معا في قارورة تفاعل
‎٠‏ عند سرعة رج بمقدار ‎٠00-١5١0‏ دورة في الدقيقة. تكون نسبة إدخال ‎[saccharide‏ البروتين ‎Lvl) + 4‏ يضبط الأس الهيدروجيني الخاص بالتفاعل إلى ‎A‏ -4. يترك تفاعل التقارن ليتقدم عند 0 ‎iy‏ لمدة ‎٠١‏ + ؟ ساعة. تغطية المجموعات المتفاعلة على ‎Bromoacetylated CRM197‏ و ‎Thiolated Pn33F‏ ‎Polysaccharide‏
‎lass Yo‏ متخلفات ‎bromoacetylated‏ غير المتفاعلة على بروتينات ‎CRM197‏ بالتفاعل مع ¥ جزيء جرامي مكافئ من ‎N-acetyl-L-cysteine‏ لمدة ‎١‏ ساعات عند **مثوية؛ ثم تغطى أي مجموعات ‎sulfhydryl‏ حرة متخلفة من ‎thiolated 33F-polysaccharide‏ مع ¢ جزيء جرامي مكافئ من ‎(IAA) iodoacetamide‏ لمدة ‎٠١‏ ساعة عند *"مثوية. تنقية متقارن سكر 00-331 متصل مع ‎eTEC‏
‎AR‏ يرشح محلول التقارن خلال مرشح ‎v.80‏ ميكرومتر أو © ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لمتقارن السكر ‎33F‏ مع كاسيتات غشاء مرشح فائق ‎300K MWCO‏ يجرى ترشيح مزدوج ضد © مللي جزيئي جرامي من ‎—succinate‏ 70.9 محلول ‎(ale‏ أس هيدروجيني ‎.١‏ بعدئذ يرشح
‎١ «=‏ 06 متقارن السكر ‎Pn-33F‏ المتبقي خلال مرشح 6077 ميكرومتر ويخزن عند **مئوية. يوضح في شكل ‎١‏ (ب) مخطط متتابع لعملية التقارن. النتائج توضح في جدول ¥ معايير التفاعل وبيانات التمييز للدفعات المتنوعة من متقارنات السكر ه ‎.Pn-33F eTEC‏ إن تنشيط- ‎thiolation‏ لأجل ‎CDT‏ مع ‎cystamine dihydrochloride‏ يولدان متقارنات سكر لها من 7+ إلى 79550 من إنتاجيات ‎saccharide‏ و<١7‏ إلى ‎Ny‏ ‎saccharides‏ حرة. جدول 7. المعايير التجريبية وبيانات التمييز لأجل متقارنات ‎Pn33F eTEC‏ ‎33-١ 33-١ 33F-| 33F| 33F-‏ | 33 دفعة المتقارن 33-6 ‎SE 4D 3C| -2B 1A‏ -6- مستوى - تنشيط (جزيء جرامي من ‎[thiol‏ جزىء ‎OAV eV NTE YY LY) )‏ لكو ‎Na‏ ‏جرامي من ‎polysaccharide‏ ‏( ‏مستوى . التنشيط ‎AR YAY ٠. ١.6 VY AR‏ 8 ‎(%Thiol)‏ ‏نسبة (إدخال) ‎[Saccharide‏ دلا.. ‎١ ١ Yo ١١‏ مد ‎A]‏ ‏بروتين ‏ااي
١ \ — نسبة ‎[Saccharide‏ .أ ‎A AI‏ 4 ا ‎١. ١٠١١‏ بروتين ١١.
Le>| ‏ا«<ء/‎ ANY IVY Ltt | ‏حر وا‎ Saccharide
A
‏بواسطة‎ MW ١7١ oovy YYYY Yam ‏لم‎ | YoY | ١ SEC-MALLS q ‏(كيلودالتون)‎ ‎١.6 ‎AY 0.4 Y.v T.A "١.‏ م ‎CMCA/CMC‏ / / / / / / / ‎GU ‏صفر‎ vl vl A ‏صفر‎ ‏صفر ‎A ١ LAA iyo LAN] ‏دم‎ (+.v 2) ZKd ‏محدد ‏مستوى ‎Acetylation‏ ‏(جزيء جرامي من ‎[acetate‏ جزيء ‎AQ‏ نما لنككى ‎AN LAO‏ عم ‎٠.١‏ ‏جرامي من ‎polysaccharide‏ ‏( ‏عيارات ‎OPA‏ لمتقارنات السكر ‎Pn-33F eTEC‏ مع ‎CRM197‏ ‎Eve
١ \ —
تتحدد عيارات ‎Pn-33F OPA‏ في فثران تحت شروط قياسية. توضح في جدول ؟ عيارات ‎GMT) OPA‏ مع 795 ‎(Cl‏ عند ؛ إلى ‎١7‏ أسابيع» موضحة أن النمط المصلي لمتقارن سكر ‎33F Pn‏ يظهر عيارات ‎OPA‏ في نموذج استمناع فأري.
© جدول ؟. عيارات ‎GMT) Pn-33F OPA‏ مع ‎(Cl Zao‏ ثقارن ‎vee) 33F‏ ‎vo)‏ ميكروجرام .+ ميكروجرام ‎Pn‏ ميك روجرام ‎Jb‏ ؟. تحضير متقارنات ‎Pn-22F eTEC‏ ية | الا ‎ra‏ ‏تنشيط ‎Pn-22F Polysaccharide‏ يركب ‎polysaccharide‏ 00-335 مع 500 مللي جزيئي جرامي من =1,2,4 ‎triazole ٠‏ (في ‎(WF‏ للحصول على ‎٠١‏ جرامات من ‎triazole‏ لكل جرام من ‎.polysaccharide‏ ‎Bom‏ يجمد الخليط في حمام ثلج- ‎ethanol‏ جاف ثم يجفد حتى الجفاف. يعاد تشكيل ‎22F polysaccharide‏ المجفد في ‎(DMSO) dimethylsulfoxide‏ لامائي. يتحدد محتوى الرطوبة لمحلول 227/1001/50 المجفد بواسطة تحليل ‎(KF) Karl Fischer‏ يضبط محتوى ‎١‏ الرطوبة بإضافة ‎WEI‏ إلى محلول 001/5©0/ا00-22 ليصل إلى محتوى رطوبة بمقدار 0.7 7. لبدء التنشيط» يحضر ‎(CDT) 1,1°-carbonyl—di-1,2,4-triazole‏ طازجا بمقدار ‎٠‏ مجم/ ملليلتر في محلول ‎.DMSO‏ ينشط ‎polysaccharide‏ 70-221 مع كميات مختلفة من ‎CDT‏ قبل خطوة ‎thiolation‏ مع ‎١‏ جزيء ‎da‏ مكافئ من 075180106
-Vy- ‏لمدة ساعة واحدة. يتحدد مستوى‎ 45°F + YY ‏عند‎ CDT ‏يجرى تنشيط‎ dihydrochloride «Sodium tetraborate ‏يضاف محلول‎ ((A220/A205) HPLC ‏التنشيط بواسطة تحليل‎ ‏متخلف في محلول تفاعل‎ CDT ‏أس هيدروجيني + لإخماد أي‎ (da ‏مللي جزيئي‎ ٠ ‏ويترك محتوى الرطوبة‎ tetraborate ‏التنشيط. تجرى الحسابات لتحديد الكمية المضافة من‎ ‏ساعة واحدة عند‎ ad ‏الإجمالي. يترك التفاعل ليتقدم‎ AW) ‏من المحتوى‎ 77٠.7 ‏النهائي ليصبح‎ 0 ‏لمثوية.‎ 7 + YY ‏المنشط‎ 00-221 Polysaccharide ‏لأجل‎ Thiolation ‏لامائي ويضاف إلى‎ DMSO ‏في‎ Cystamine—dihydrochloride aja ‏يحضر‎ ‏يخفف‎ LACT YY ‏ساعة عند‎ ١ + 7١ ‏محلول التفاعل. يترك التفاعل ليتقدم لمدة‎ ‏جرامي من‎ Gn ‏أضعاف بالإضافة إلى © مللي‎ ٠١ 101018160 saccharide ‏محلول‎ Vo ‏يرشح‎ ١7 ‏مجمد مسبقا في 70.9 محلول ملحي؛ بأس هيدروجيني‎ sodium succinate ‏خلال مرشح 5# ميكرومتر. يجرى ترشيح مزدوج لأجل‎ Ed ‏محلول التفاعل‎ «100K MWCO ‏مع كاسيتات غشاء مرشح فائق‎ thiolated 00-227 polysaccharide (WF) ‏باستخدام ماء للحقن‎ ‏المنشط‎ Thiolated 00-221 Polysaccharide ‏اختزال وتنقية‎ Yo «(TCEP) tris(2-carboxyethyl)phosphine ‏إلى المادة المتبقية يضاف محلول من‎ ‏جزيئي جرامي‎ 0.١ ‏من الحجم‎ 79٠0 ‏جزيء جرامي مكافئ؛ بعد التخفيف بنسبة‎ ٠١-٠ ‏من مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات صوديوم؛ بأس هيدروجيني 6. يترك تفاعل الاختزال هذا‎ ‏عند 79 + ؟تمثوية. يجرى ترشيح مزدوج لأجل‎ dele ١ + ١ sad ‏ليتقدم‎ ‏يجرى‎ 100K MWCO ‏مع كاسيتات غشاء مرشح فائق‎ thiolated 22F polysaccharide | ٠ ‏مللي جزيئي جرامي مجمد مسبقا؛ بأس هيدروجيني‎ ٠١ ‏الترشيح المزدوج ضد فوسفات صوديوم‎ saccharide ‏المتبقي لكل من تركيز‎ 111018180 22F polysaccharide ‏يسحب‎ .7 -(Ellman) thiol ‏واختبارات‎ ‎Pn-22F eTEC ‏ال تغطية وتنقية متقارنات سكر‎ (CE
Eye
يجرى تقارن ‎thiolated 00221 polysaccharide‏ المنشط إلى ‎CRM197‏ المنشطء تغطية؛ وتنقية متقارنات السكر ‎eTEC‏ 00-22 طبقا للعمليات الموصوفة في مثال ‎CY‏ ‏النتائج ‏تتوافر في جدول ؛ معايير وبيانات العملية لمتقارنات السكر ‎eTEC‏ 00-227 تمثيلية ‎o‏ إلى ‎.CRM197‏ ‏جدول ‎o£‏ المعايير التجريبية وبيانات التمييز لأجل متقارنات ‎Pn22F eTEC‏ ‎Pn-22F-1D| Pn-22F-1C| Pn-22F-1B| Pn-22F-1A‏ ‎Polysaccharide‏ ‏178.5 كيلودالتون | 1778.5 كيلودالتون | 1778.5 كيلودالتون | 1778.5 كيلودالتون ‎MW‏ (كيلودالتون) ‎i | ’ 0‏ ا جزيء جرامي مكافئ ‎J‏ جزيء جرامي 4« جزيء جرامي ‎VY‏ جزيء جرامي ‎١٠.2‏ جزيء جرامي من ‎CDT‏ مكافئ مكافئ مكافئ مكافئ ‎١١‏ جزيء جرامي ‎١١|‏ جزيء جرامي ‎١١‏ جزيء جرامي ‎١|‏ جزيء جرامي جزيء جرامي مكافئ | : : : : مكافئ من | مكافئ من | مكافئ من | مكافئ من من ‎Thiol‏ ‎cystamine 2HCI | cystamine 2HCI | cystamine 2101 cystamine -2HCI‏ جزيء جرامي من | ‎٠١‏ جزيء جرامي | ‎٠١‏ جزيء جرامي | ‎٠١‏ جزيء جرامي | ‎٠١‏ جزيء جرامي المادة المختزلة مكافئ من ‎TCEP‏ امكافئ من ‎TCEP‏ امكافئ من ‎TCEP‏ امكافئ من ‎TCEP‏ ‏مستوى | (تنشيط) ‎thiol‏ (جزيء ‎«VY ord‏ 1 جرامي من ‎fthilo‏ ‎EYE‏
_ 7 ‏اج‎ ‏جزيء جرامي من‎ (polysaccharide ‏مستوى التنشيط‎ 1 ١١ q ( /thiol )
CRM197 ‏إنتاجية‎ ‎1 ‏اام‎ VERN Joo ( YA ) saccharide ‏نسبة‎ ‎٠١.١ ٠١.١ ‏.أ‎ V.¢ [saccharide ‏البروتين‎ ‏كيلودالتون‎ 77 48 | la ١877 | نوتلادوليك‎ ١7/897 | ‏كيلودالتون‎ ٠8
SEC-MALLS
CRM197 ‏متقارن مع‎ 00-10/ eTEC ‏مثال ؛. تحضير‎
Pn-10A eTEC ‏تحضير متقارنات السكر‎
AA
‎١ h —_‏ تحضر طبقا للعمليات الموصوفة في مثال ؟ متقارنات سكر تشمل ‎polysaccharide‏ ‏كبسولي للمكورات الرثوية من النمط المصلي ‎PN=10A‏ متقارن مع 040/197 من خلال مباعد ‎.eTEC‏ ‏تمييز متقارنات السكر ‎Pn-10A eTEC‏ ‎o‏ تتوافر في جدول © بيانات التمييز والعملية لمتقارنات سكر ‎eTEC‏ 00-108 تمثيلية إلى ‎.CRM197‏ ‏جدول ©. معايير تجريبية وبيانات تمييز لمتقارنات السكر ‎Pn—10A‏ ‏دفعة التقارن 00-10 ‎0-١ Pn—-10A-| Pn-10A- Pn—|‏ 0-1 1 10-2 3 4 5 ‎YYA YYA YYA YYA oYA | Saccharide MW‏ (كيلودالتون) مستوى (تنشيط) ‎«.\Y | thiol‏ ل اكد ‎AN Ye‏ ‎sg)‏ جرامي من ‎[thilo‏ جزيء جرامي من ‎(polysaccharide‏ ‏مستوى التنشيط | ‎tv ve 4 YA VY‏ ‎(“thiol)‏ ‏ثقارن ‎٠١ 949 Ave 0. Yoy. | MW‏ (كيلودالتون) إنتاجية ‎on Loo Loy Ley aN‏ ‎(saccharide)‏ 1 ااي
— 7 7 — 1 ْ ] -
Pn-10A OPA ‏عيارات‎ تتحدد عيارات ‎OPA‏ ضد تقارن ‎eTEC‏ 00-108 إلى 040/0197 في فثران تحت شروط قياسية. توضح في جدول + عيارات ‎OPA‏ كدالة على الجرعة. تكون مستويات ‎OPA‏ ‏أعلى بدرجة كبيرة للتقارن فيما يتعلق مع ‎polysaccharide‏ من ‎hall‏ المصلي 10/8 غير © المتقارن. جدول 6. عيارات ‎GMT) Pn—-10A OPA‏ مع ‎(Cl Zao‏ الشكل المتباين ‎coe)‏ ميكروجرام ‎von)‏ ميكروجرام ‎٠.١‏ ميكروجرام ‎10A Pn‏ ‎Yeot YY A 14١ Pn-10A Ha‏ ‎eTEC‏ ‎AY) (YYY ٠ lov) (0 YYV FAQ)‏ / )£9( غير المتقارن 07 لكك ‎(VAAY‏ ‏مثال *©. تحضير ‎eTEC‏ 00-1178 متقارن مع ‎CRM197‏ ‏تحضير متقارنات السكر ‎Pn-11A eTEC‏ تحضر طبقا للعمليات الموصوفة في مثال ؟ متقارنات ‎Su‏ تشمل ‎polysaccharide‏ ‎٠‏ كبسولي للمكورات الرثوية من النمط المصلي 00-117 متقارن مع 040/197 من خلال مباعد ‎.eTEC‏ ‏تمييز متقارنات السكر ‎Pn-11A eTEC‏ ارق
‎A —_‏ 7 _ تتوافر في جدول ‎V‏ بيانات التمييز والعملية لمتقارنات سكر ‎Pn—11AeTEC‏ تمثيلية إلى ‎.CRM197‏ ‏جدول 7. معايير تجريبية وبيانات تمييز لمتقارنات السكر ‎Pn—-11A‏ ‎Pn-11A-2B| Pn-11A-2A| Pn-11A-1B| Pn-11A-1A‏ ‎Polysaccharide‏ ‎٠١‏ كيلودالتون | ‎١١‏ كيلودالتون | ‎YY‏ كيلودالتون ‎١‏ 730 كيلودالتون ‎MW‏ ‏جزيء جرامي مكافئ . . من ‎CDT‏ ‏جزيء جرامي مكافئ ‎١ ١ NY ٠ Y o‏ من ‎Thiol‏ ‏جزيء جرامي من ‎١ ١١ Ve‏ أ ‎TCEP‏ ‏مستوى (تنشيط) ‎thiol‏ (جزي ءِ جرامي من ‎VY VE .. 1 [thilo‏ جزيء جرامي من ‎(polysaccharide‏ ‏مستوى | التنشيط ‎١٠٠١ VY ١ £1‏ ‎/thiol )‏ ( ‎grey‏
_ 7 q —_ ‏نسبة إدخال‎
Yo Vo Yo Vo [Saccharide ‏البروتين‎ ‏إنتاجية‎ ‏اذه‎ 1 ATR: ERR saccharide ‏نسبة‎ ‎١ ‏لا‎ "3 a1 [saccharide ‏البروتين‎ ‎6 ١٠١6 ٠١ ١١١ SEC-MALLS ‏(كيلودالتون)‎ ‎Pn-11A OPA ‏عيارات‎ ‏في فئران تحت‎ CRM197 ‏إلى‎ 00-108 eTEC ‏ضد تقارن‎ OPA ‏تتحدد عيارات‎ ‏على الجرعة.‎ AIX OPA ‏عيارات‎ A ‏شروط قياسية. توضح في جدول‎ (Cl Jao ‏مع‎ GMT) Pn—-11A OPA ‏عيارات‎ A ‏جدول‎ ‏ميكروجرام‎ ٠.١ ‏ميكروجرام‎ von) ‏ميكروجرام‎ coe) ‏الشكل المتباين‎ 11A Pn 4 9.1 ٠. Pn-11A ‏ثقارن‎ ‎AA
“Am (14 ot FEA) (١ IVE) (Yor 3 1) eTEC
CRM197 ‏إلى‎ Ak ‏طور‎ [Pn=33F RAC ‏مثال 1 تحضير متقارنات‎ ‏طور مائي‎ [Pn=33F RAC ‏تحضير متقارنات سكر‎ (Reductive Amination) ‏تحضر متقارنات السكر ]00-33 باستخدام أمينية اختزالية‎ ‏التي تطبق بنجاح لإنتاج لقاح متقارن للمكورات الرثوية‎ ((RAC/Aqueous) ‏في طور مائي‎ ‏إن هذا الأسلوب يتضمن‎ (YAN YAY ‏الطلب الدولي رقم‎ JB ‏(انظر على سبيل‎ 0 diols ‏وظيفيا من‎ aldehyde ‏لإنتاج‎ polysaccharide ‏خطوتين. الخطوة الأولى هي أكسدة‎ ‏من‎ (Lys) lysine ‏المنشط إلى متخلفات‎ polysaccharide ‏مجاورة. الخطوة الثانية هي تقارن‎ .CRM197 ‏المجمد وتجرى الأكسدة في مثبت اس هيدروجيني‎ polysaccharide ‏باختصارء يذوب‎ sodium periodate ‏بإضافة كمية مختلفة من‎ ١ ‏فوسفات صوديوم عند أس هيدروجيني‎ ٠ ‏المنشط ويخزن‎ polysaccharide Jal ‏يجرى تركيز وترشيح مزدوج‎ -(NalO4) ‏المنشط مع بروتين‎ polysaccharide ‏المنشط المنقى عند “مثوية. يركب‎ 0/806 ‏و1197//ل04 المخلوطين تماما قبل وضع الزجاجة‎ polysaccharide ‏يتم توصيل‎ . 7 ‏/7580008:108ا00. يعاد تشكيل‎ CRM197 ‏ثم يتم تجفيد خليط‎ cethanol ‏في حمام ثلج جاف/‎ ‏جزيئي جرامي من مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات صوديوم. يبدأ تفاعل‎ 00٠ ‏الخليط المجفد في‎ Yo ‏وتتم الحضانة‎ sodium cyanoborohydride ‏من مكافئات جزيئية من‎ ٠.* ‏التقارن بإضافة‎
XV ‏ساعة عند أ7”مثوية و؛؛ ساعة إضافية عند ١؟“مثوية. تخفف التفاعلات مع‎ ٠١ ‏لمدة‎ ‎sodium ‏جزيئي جرامي مكافئ من‎ ١ ‏من 70.9 من محلول ملحي وتغطى باستخدام‎ aaa 70809 ‏حجم من‎ XY ‏لمدة ؟ ساعات عند 77"مثوية. يخفف خليط التفاعل مع‎ borohydride ‏محلول ملحي ثم يرشح خلال مرشح 0.45 ميكرومتر قبل التنقية. يجرى تركيز وترشيح مزدوج‎ . ٠١ 100K MWCO UF ‏للمتقارن باستخدام كاسيتات غشاء‎ ‏نحصل على متقارنات متعددة باستخدام العملية الموصوفة أعلاه بتنويع المعايير المختلفة‎ .(polysaccharide ‏(مثلا الأس الهيدروجيني» درجة حرارة التفاعلات وتركيز‎
تكون إنتاجية ‎polysaccharide‏ النموذجية حوالي ‎٠‏ 75 لهذه المتقارنات و7159 من 6 الحر مع المتقارن ‎MW‏ في حدود ‎Yo 0-7٠٠١‏ كيلودالتون. مع هذاء يحمل ‎polysaccharide‏ من النمط المصلي ‎33F‏ الأصلي مجموعة -0 ‎Acetyl‏ على ‎C2‏ الخاص به من متخلف ‎5-galactofuranosyl‏ ووجد أنه تمت إزالة حوالي 0 280 من المجموعة الوظيفية ‎acetyl‏ طوال عملية التقارن باستخدام أمينية اختزالية في طور مائي. ‎Lady‏ أن مجموعة ‎O-Acetyl‏ على بناء حلقة من © أعضاء ‎(5-galactofuranoside)‏ ‏يمكنها الهجرة ويمكن إزالتها بسهولة باستخدام كيمياء أمينية اختزالية في عملية طور مائي. تقييم ثبات متقارن السكر ‎[Pn-33F RAC‏ طور ‎le‏ ‏توزع القواسم ‎dail‏ من متقارن ‎[RAC‏ الطور المائي التمثيلي المحضرة بواسطة العملية ‎٠‏ أعلاه في أنابيب ‎polypropylene‏ تخزن تلك الأنابيب سواء عند © 7*مئوية أو عند ‎LACTY‏ ‏ويراقب الثبات حتى ‎Veo‏ شهر. عند كل ‎dads‏ ثبات زمنية؛ تقيم مستويات ‎saccharide‏ الحر 7. تلخص في جدول 9 بيانات الثبات لدرجتي الحرارة. كما هو موضح في جدول 3 تزداد مستويات ‎saccharide‏ الحر” بدرجة كبيرة عند © 7“مثوية و١"”مثوية.‏ إن زيادة مستويات ‎saccharide‏ ‏الحر# أثناء التخزين هي مؤشر محتمل لانحلال ‎polysaccharide‏ في المتقارن. ‎VO‏ جدول 4: بيانات الثبات للمتقارن ‎[RAC‏ الطور المائي عند ©7"مئوية و7١7”مثوية‏ 06 الحر )1( عند * 7"مئوية 06 الحر )1( عند ١"”مئوية‏ كاد
‎A \ —‏ — على الرغم من ‎dda‏ ينشط ‎polysaccharide‏ من النمط المصلي ‎33F‏ بنجاح بالتفاعل مع ‎sodium periodate‏ والتقارن على التوالي مع 080/197 باستخدام كيمياء أمينية اختزالية مائية؛ فإن نتائج ثبات ‎all saccharide‏ 7 تحت شروط متسارعة متحدة مع عدم القدرة على الحفاظ على وظيفية ‎acetyl‏ (إبيتوب ‎polysaccharide‏ رئيسي للاستمناع) أثناء التقارن تشير © إلى أن عملية ‎[RAC‏ الطور ‎Sl‏ لا تكون عملية مُثلى لمتقارن النمط المصلي ‎33F‏ ‏مثال ‎.١‏ تحضير متقارنات ‎RAC/DMSO‏ 00-33 إلى ‎CRM197‏ ‏تحضير متقارنات ‎Pn-33F RAC/DMSO Su‏ مقارنة مع عملية ‎[RAC‏ الطور المائي؛ يتم التقارن من خلال أمينية اختزالية في ‎DMSO‏ ‎(RAC/DMSO)‏ له فرصة منخفضة بدرجة كبيرة لإزالة 0-80617/181007. من ناحية التحديات ‎٠‏ المصاحبة لحفظ وظيفية ‎O-acetyl‏ باستخدام عملية ‎[RAC‏ طور مائي الموصوفة في ‎UJ‏ ‏يقيم أسلوب بديل باستخدام ‎[RAC‏ مذيب ‎(DMSO‏ الذي يطبق بنجاح لإنتاج لقاح متقارن المكورات الرثوية (انظر على سبيل المثال الطلب الدولي رقم ‎AY TV YAY‏ يركب ‎polysaccharide‏ المنشط مع سكروز (0 75 وزن/ حجم في ‎(WF‏ باستخدام نسبة من ‎YO‏ جرام من السكروز لكل ‎aha‏ من ‎polysaccharide‏ المنشط. تخلط المكونات ‎lus‏ ‎١‏ قبل التجميد في حمام ثلج جاف/ ‎ethanol‏ بعدئذ تجفد زجاجة الخليط المركب المجمدة حتى الجفاف. يعاد تشكيل ‎polysaccharide‏ المنشط المجفد في ‎.(DMSO) dimethyl sulfoxide‏ يضاف ‎DMSO‏ إلى ‎CRM197‏ المجفد لإعادة التشكيل. يتحد ‎polysaccharide‏ المنشط معاد التشكيل مع ‎CRM197‏ معاد التشكيل في قارورة التفاعل. يبدأ التقارن بإضافة ‎NaCNBH3‏ إلى ‎Yo‏ خليط التفاعل. يحضن التفاعل عند ‎HASTY‏ لمدة ‎٠١‏ ساعة. ينتهي تقارن تفاعل (التغطية) بإضافة ‎NaBH4‏ ويستمر التفاعل لمدة ؟ ساعات أخرى. يخفف خليط التفاعل إلى ؛ أضعاف الحجم من © مللي جزيئي جرامي من ©500017181- 9 7 محلول ‎(ale‏ بمثبت أس هيدروجيني بأس هيدروجيني + ثم يرشح خلال مرشح * ميكرومتر قبل التنقية. يجرى تركيز وترشيح مزدوج
للمتقارن باستخدام أغشية ‎MWCO‏ ا100. يجرى ترشيح مزدوج ضد أحجام مزدوجة ‎٠‏ ؛ ضعف من © مللي جزيئي جرامي من ‎—succinate‏ 70.5 محلول ‎(ale‏ بمثبت أس هيدروجيني بأس هيدروجيني ‎A‏ ترشح المادة المتبقية خلال مرشحات 50080 ‎YY‏ .+ ميكرومتر وتحلل . نحصل على متقارنات متعددة باستخدام العملية الموصوفة أعلاه بتنويع المعايير المختلفة © (مثلا نسبة إدخال ‎—saccharide‏ البروتين» تركيز التفاعل» عدد الجزيئات المتكافئة من ‎«sodium cyanoborohydride‏ ومحتوى الماء). توضح البيانات الإجمالية الناتجة من المتقارنات المحضرة بواسطة عملية 880/01/50 أنها تكون فائقة مقارنة مع عملية ‎[RAC‏ ‏الطور المائي وتتاح لتحضير متقارنات مع إنتاجية تقارن جيدة؛ ‎saccharide‏ حر منخفضة (<75) ودرجة ‎Jef‏ من التقارن ‎lysines)‏ المتقارنة). بصورة إضافية؛ يكون من الممكن ‎Lin‏ ‎٠‏ أكثر من 780 من وظيفية ‎acetyl‏ طوال عملية تقارن ‎RAC/DMSO‏ ‏تقييم ثبات متقارنات السكر ‎Pn—-33F RAC/DMSO‏ توزع القواسم التامة من متقارن ‎DMSO [RAC‏ التمثيلي المحضرة بواسطة العملية أعلاه في أنابيب ‎(polypropylene‏ التي تخزن سواء عند ؛؟*مئوية أو عند © 7*مئوية ويراقب الثبات ‎sad‏ شهور لأجل 580008106 الحر. كما هو موضح في جدول ١٠؛‏ توضح العينات المخزنة ‎١‏ عند ؛*مثوية زيادة ‎saccharide‏ الحر بنسبة 74.8 في ؟ شهور. مع هذا فإن العينات المخزنة عند 5 7*مئوية توضح زيادة بنسبة 7715.4 في ‎all saccharide‏ 37 ثلاثة أشهر. تنسب زيادة ‎all saccharide‏ 7 في متقارنات ‎RAC‏ إلى انحلال المتقارن؛ تحديدا عند © "*مئوية. جدول ‎:٠١‏ نتائج الثبات للمتقارن ‎DMSO [RAC‏ عند ؛ "مئوية 5 7"مئوية ' أسابيع 06 الحر (7) عند ‎Lt‏
06 الحر )1( عند * 7"مئوية تتم دراسة ثبات تشغيلة أخرى من متقارن 880/01/50 عند ؛"مئوية؛ ‎MACYS‏ ‏و/77*مثوية. توزع القواسم التامة في أنابيب ‎polypropylene‏ وتراقب لتحديد النزعة المحتملة في ‎LT all saccharide‏ كما هو موضح في الجدول ‎١١‏ توضح العينات المخزنة عند ‎Let‏ ‏زيادة بنسبة 74.97 في ‎all saccharide‏ 7 في شهرين. تكون زيادة ‎saccharide‏ الحر أعلى © بكثير عند 5 7"مئوية 5 ‎AOTY‏ 4( مشيرة إلى انحلال محتمل للمتقارن. جدول ‎:١١‏ نتائج ثبات المتقارن ‎RAC/DMSO‏ عند ؛ "مئوية؛ ٠7"مئوية‏ 5 ‎BOTY‏ ‏06 الحر (7) عند ‎Lt‏ ‏06 الحر )1( عند * 7"مئوية 06 الحر )1( عند ١"”مئوية‏ على الرغم من أن المتقارنات المتولدة بواسطة عملية 080/01/50 تحفظ مجموعة -0 ‎(Acetyl‏ تلاحظ زيادة في ‎saccharide‏ الحر#؛ تحديدا عند 4500 وأعلى عدم الاستقرار المحتمل المشار إليه باستخدام هذه الطريقة. من ناحية هذه الملاحظة المتعلقة بعد الثبات المحتمل ‎٠‏ المتقارنات ‎(RAC/DMSO‏ لا يعتبر ‎RAC/DMSO‏ أمثل لتقارن النمط المصلي ‎33F‏ وتتطور طريقة كيميائية بديلة لتوليد متقارنات أكثر ثباتا (متقارنات 6156). اد
- ‏اج‎ ‏إضافية‎ 00-331 eTEC ‏تحضير متقارنات‎ JA Jb
YJ ‏تتولد متقارنات 6186© 00-337 إضافية باستخدام العملية الموصوفة في‎ ‏معايير التفاعل وبيانات التمييز للدفعات الإضافية هذه من متقارنات السكر‎ VY ‏توضح في جدول‎ .Pn-33F eTEC ‏إضافية‎ 00331 eTEC ‏المعايير التجريبية وبيانات التمييز لمتقارنات‎ . ١١“ ‏جدول‎ © 33 33+ 33F| 33| 33F | 33F| 33F 33F | 33F - - - - - - - ‏دفعة المتقارن‎ -Ol | -8H 16P| 150 | 14N| 13M | 12L | 11K| 10J ‏مستوى التنشيط‎ ‏(جزيء جرامي من‎ ou) ou) r,t ou) ou) ٠.١ ou) oY +) ‏جزيء جرامي‎ [thilo ١ Y 1 Y ¢ Y ١ Y ‏من‎ ‎(polysaccharide ‏نسبة (إدخال)‎ ‏لأ‎ ‏أ أ أ أ أ أ أ أ‎ [Saccharide lo} ‏البروتين‎ ‏إنتاجية‎ ‏ا‎ TAN TAN | ‏عه لعن‎ ZY | ‏فم لني عن‎ /.Saccharide [Saccharide ‏نسبة‎ ‎Y.q4 Yq] ١ V.¢ V.¢ ٠. | 7١١ ١ ١ ‏البروتين‎ ‎TU YAY ‏اذ اا‎ Y.¥| e.4 T.A
Zy>| all Saccharide
A A A Q A A A A
Eve Y
— أ ‎A‏ — ‎dads MW‏ ا ‎YY | YYa[‏ 4 45+ مه | ‎Tee [| YeV‏ لغلا ‎SEC-MALLS‏ ‎vl oa‏ 0 الم 9 : 9 9 (كيلودالتون) غير ‎Yoo Yeo [1a‏ محدد ‎[YY [EN] ١٠١١ [et] [e.0‏ ‎Ik: /Y| LO CMC /CMCA‏ / ‎٠.١ | ١.١ | ٠١ ٠١١ ١‏ ‎LO YAY 7.١١ Q‏ ‎Q‏ ‎TAS | LAY | TAY | TAA as (+.v 2) ZKd‏ محدد محدد محدد ‎REE WY‏ مستوى ‎Acetylation‏ ‎en)‏ جرامي ‎vA‏ 4« ل .أ 4« الأ و ل ‎[acetate‏ جزيء ‎CoA‏ ‏1 1 لا ‎Y A ١ 3 ١‏ جرامي ‎(polysaccharide‏ ‎=LOQ‏ حد تحديد الكمية كما هو موضح ‎De‏ وفي جدول يكت نحصل على متقارنات ‎Pn 33 F‏ متعددة باستخدام ‎eTEC i‏ أعلاه. إن كيمياء 61856 ‎xm‏ تحضير_المتقارنات مع إنتاجية عالية؛ ‎a saccharide‏ 7 منخفض ودرجة عالية من التقارن ‎lysines)‏ المتقارنة). بصورة إضافية؛ © يكون من الممكن حفظ أكثر من ‎ZA‏ من وظيفية ‎acetyl‏ باستخدام عملية تقارن ‎TEC‏ ‏مثال 9. تقييم ثبات متقارنات السكر ‎eTEC‏ ]00-33: نزعات ‎Saccharide‏ الحر 7 توزع القواسم التامة من دفعة المتقارن 337-28 (انظر ‎(Y dea‏ في أنابيب ‎polypropylene‏ وتخزن عند ‎(dy iE‏ © 7”مثوية؛ و١‏ 7”مثوية على التوالي وتراقب النزعات في
‎all saccharide‏ 7 توضح البيانات ‎all saccharide)‏ 7( في جدول ‎.١١‏ كما هو موضح في هذا الجدول؛ لا توجد تغيرات كبيرة في ‎saccharide‏ الحر 7. جدول ‎Saccharide «ld AY‏ الحر# لمتقارن السكر ‎eTEC‏ ]00-33 عند ‎®t‏ ‏450 و 7١7”منوية‏ رقم ‎Saccharide‏ الحر 7 التشغيلة ‎33F-‏ اصفر أأسبوع | أسابيع اشهر شهرين | أشهر ‎١|‏ أشهر ‎2B‏ واحد واحد ل غير ‎ALY‏ غير ‎٠9| 7 9.Y‏ محدد محدد للا غير ‎١٠١‏ غير .لا غير غير محدد محدد محدد محدد للا ‎ARI‏ غير ‎+١9.‏ غير غير غير محدد محدد محدد محدد هه نصل إلى الثبات المتسارع لتشغيلة متقارن أخرى (دفعة ‎(33F-3C‏ عند 7١7"مئوية‏ لمدة تصل إلى شهر واحد. كما هو موضح في جدول 4٠؛‏ لا يوجد تغير كبير بالنسبة إلى ‎[all saccharide‏ عند ١؟"مثوية؛‏ لمدة تصل إلى شهر واحد.
جدول ؟١.‏ ثبات ‎Saccharide‏ الحر# لمتقارن السكر ‎eTEC‏ 00-331 عند 7١؟"مثوية‏ رقم ‎Saccharide‏ الحر 7 التشغيلة
للتأكد إضافيا من ثبات متقارنات 6156؛ تراقب دفعات متقارنة إضافية ‎33F-3C)‏ ‎Jk) 33F-5E,‏ جدول ؟ وجدول ‎(VF‏ مخزنة عند ‎Bet‏ لمدة تصل إلى حوالي سنة واحدة؛ لتحديد النزعات المحتملة في ‎saccharide‏ الحرة. كما هو موضح في جدول ‎Vo‏ لا © توجد تغيرات كبيرة في مستويات ‎all saccharide‏ 7 للمتقارنات المخزنة عند ؟ “مئوية لمدة تصل إلى حوالي سنة. جدول ‎.١5‏ نتائج ثبات ‎saccharide‏ الحر# لمتقارنات السكر ‎eTEC‏ 00-331 عند ‎Lt‏ ‏6 الحر (7) ‎(vey‏
— A q —
على العكس من متقارنات ‎[RAC‏ الطور المائي ‎(RAC/DMSO;‏ اتضح أن متقارنات النمط
‎Lad)‏ ]33 المتولدة بواسطة كيمياء ‎eTEC‏ 337 أكثر استقرارا بدون انحلال ملحوظ كما هو
‏مراقب بواسطة نزعات ‎saccharide‏ الحر عن درجات حرارة متنوعة (بالزمن الفعلي وبالتسارع).
‏إن كل المنشورات وطلبات براءة الاختراع المذكورة في المواصفة تشير إلى مستوى هؤلاء المهرة في © الفن الموجه إليهم هذا الاختراع. تندمج كل المنشورات وطلبات براءة الاختراع هنا كمرجع إلى نفس
‏النطاق كما لو تمت الإشارة بصفة خاصة وبصورة فردية إلى كل منشور أو طلب براءة اختراع
‏فردي ليندمج هنا كمرجع.
‏على الرغم من وصف الاختراع السابق ببعض من التفصيل على سبيل التوضيح والتمثيل بغرض
‎Yo ‎Eve

Claims (1)

  1. عناصر الحماية ‎-١‏ طريقة لتصنيع متقارن سكر ‎(glycoconjugate)‏ يشمل ‎saccharide‏ مقترن مع بروتين مادة حاملة خلال مُباعد ‎«(e TEC) (2—((2—oxoethyl)thio)ethyl)carbamate (spacer)‏ تشمل الخطوات: 0 تفاعل 58001181106 مع ‎(CDT) 1,1’-carbonyl-di—(1,2,4-triazole)‏ أو ‎(CDI) 1,1°-carbonyldiimidazole ©‏ في ‎cule‏ عضوي لإنتاج 58001181106 مُنشط؛ (ب) ‎saccharide Je li‏ المُنشط مع ‎cystamine‏ أو ‎cysteamine‏ أو ملح منه؛ لإنتاج ‎saccharide‏ 111018160؛ )=( تفاعل ‎thiolated saccharide‏ مع عامل اختزال لإنتاج ‎thiolated saccharide‏ مُنشط يشمل ‎sale‏ متخلفة ‎sulfhydryl‏ حرة واحدة أو أكثر؛ ‎AD‏ (د) تفاعل ‎saccharide‏ المُنشط مع بروتين مادة حاملة مُنشط يشمل مجموعة ‎—haloacetamide‏ 0 واحدة أو أكثرء لإنتاج متقارن بروتين ‎sale‏ حاملة ‎thiolated‏ ‎s¢saccharide‏ ‏)2( تفاعل متقارن بروتين المادة الحاملة ‎saccharide‏ 11018160 مع ‎(V)‏ عامل كاشف للتغطية أول ‎(first capping reagent)‏ قادر على تغطية مجموعات ‎a—haloacetamide‏ ‎VO‏ غير مقترنة من بروتين المادة الحاملة المُنشطة؛ و/أو ‎(Y)‏ عامل كاشف للتغطية ثان ‎(second‏ ‎capping reagent)‏ قادر على تغطية مواد متخلفة ‎sulfhydryl‏ حرة غير مقترنة؛ بذلك ينتج متقارن ‎(glycoconjugate) Su‏ متصل مع ‎TEC‏ ‏"- الطريقة من عنصر الحماية )¢ حيث تشمل خطوة التغطية (ه) تفاعل متقارن بروتين المادة الحاملة ‎saccharide‏ 11018160 مع ‎N—acetyl-L—cysteine )١(‏ كعامل كاشف للتغطية أول ‎«(first 800109 689800 ٠‏ و/أو (7) ‎iodoacetamide‏ عامل كاشف للتغطية ‎(second (i‏
    ‎.capping reagent)‏ *- الطريقة من عنصر الحماية ‎١‏ أو 7 تشمل إضافيا تركيب 5800085106 مع 1132016 أو 110108206 لتوفير 58001781106 ‎(Se‏ حيث يكون ‎saccharide‏ المُركب متجمد القشرة؛ مجفد ومعاد تركيبه في مذيب عضوي قبل الخطوة (أ).
    gy thiolated polysaccharide ‏تشمل إضافيا تنقية‎ oF ‏الطريقة من عنصر الحماية ) ¥ أو‎ —¢ ‏الناتج في الخطوة (ج)؛ حيث تشمل خطوة التنقية ترشيح ثنائي.‎ ‏حيث يكون عامل الاختزال في الخطوة‎ of ‏إلى‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ —0 ‏أو‎ (DTT) dithiothreitol ((TCEP) tris(-2~carboxyethyl)phosphine ‏(ج) هر‎ .mercaptoethanol © ‏إلى ©؛ حيث ينشط بروتين المادة الحاملة مع‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ -7 ‏مُنشط.‎ bromoacetic acid ‏مشتق‎ ‏هو‎ bromoaceticacid ‏الطريقة من عنصر الحماية 1 حيث يكون المشتق‎ -١ -(BAANS) bromoacetic acid ‏من‎ N-hydroxysuccinimide ester ‏إلى 7 حيث تشمل الطريقة إضافيا تنقية متقارن‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ AY ‏السكر المتصل مع 6126 عن طريق ترشيح ثنائي.‎ ‏حيث يكون المذيب العضوي في الخطوة‎ cA ‏إلى‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ -4 dimethyl sulfoxide ‏قطبي لابروتوني منتقى من المجموعة المتكونة من‎ cule ‏هو‎ 0 N- «dimethylacetamide (DMA) «dimethylformamide (DMF) (DMSO) 1,3-Dimethyl-3,4,5,6- «acetonitrile (methyl-2-pyrrolidone (NMP) ح٠‎ hexamethylphosphoramide tetrahydro—2(1H)~-pyrimidinone (DMPU) ‏رطان أو خليط من ذلك.‎ :saccharide ‏إلى 9؛ حيث تكون نسبة‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ =) NY 0.4 ‏و؟ أو بين‎ ١١7 ‏بروتين المادة الحاملة (وزن/ وزن) بين‎ ‏هو‎ saccharide ‏حيث يكون‎ Vo ‏إلى‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ -١١ ٠ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من‎ 5. pneumonia ‏ا كبسولي مشتق من‎ 6 12+ 11 ¢10A ‏لاق‎ 8 (TF 6B 6A 5 ‏كبملية لء 3( ك‎ polysaccharides (Pn=Pn ‏المصلي‎ ball ‏لها‎ 33F 5 23F 22F (19F «19A 180 (15B (14 .serotype) Eve Y
    —qy— ‏الكبسولي هو‎ polysaccharide ‏حيث يكون‎ VY ‏الطريقة من عنصر الحماية‎ — VY )60- Pn ‏أو 335 له النمط المصلي‎ 227 (10A (11A ‏كبسولي‎ polysaccharide .serotype) ‏هو‎ saccharide ‏حيث يكون‎ Vv ‏إلى‎ ١ ‏الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية‎ =F
    NN. meningitides ‏كبسولي مشتق من‎ polysaccharide © ‎-٠6‏ الطريقة من أي واحد من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎OF‏ حيث يكون بروتين المادة الحاملة هو
    ‎.CRM197‏ ‏- متقارن سكر ‎(glycoconjugate)‏ ناتج بالطريقة من أي واحد من عناصر الحماية ‎.١ 4-١‏ - تركيبة مولدة للمناعة ‎Jodi (immunogenic)‏ متقارن سكر ‎(glycoconjugate)‏ من ‎٠‏ عنصر الحماية ‎VO‏ ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين دوائيا. ‎-١١‏ متقارن سكر ‎(glycoconjugate)‏ يشمل ‎polysaccharide‏ كبسولي بكتيري مقترن مع بروتين المادة الحاملة خلال مُباعد ‎TEC‏ 6؛ حيث يتصل تساهميا ‎polysaccharide‏ مع المُباعد ‎e TEC‏ خلال توصيلة ‎ccarbamate‏ وحيث يتصل بروتين المادة الحاملة تساهميا مع المُباعد ‎eTEC‏ خلال توصيلة ‎amide‏ ‎-١8# Yo‏ متقارن سكر (917/000010[09818) من عنصر الحماية ‎OY‏ حيث يشتق ‎polysaccharide‏ الكبسولي من ‎pneumonia‏ .5 منتقى من المجموعة المتكونة من ‎polysaccharides‏ كبليةق 1( 3 ك 5 ‎OV 8 (TF 6B 6A‏ مطل م11 12 ‎33F 5 23F 22F (19F «19A ¢18C ¢15B (14‏ لها النمط المصلي ‎Pn‏ ‏4- متقارن سكر ‎(glycoconjugate)‏ من عنصر الحماية ‎٠8‏ حيث يكون ‎polysaccharide | ٠‏ الكبسولي هو ‎polysaccharide‏ كبسولي ‎(10A (11A‏ 227 أو 337 له النمط المصلي ‎.(Pn-serotype) Pn‏ ‎-٠‏ متقارن السكر (91700000[00981©6) من عنصر الحماية ‎NY‏ حيث يشتق ‎polysaccharide‏ الكبسولي من ‎meningitides‏ .لا. ‎-”١‏ متقارن السكر ‎(glycoconjugate)‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ‎Yo‏ حيث ‎Ov ‏كيلودالتون؛ بين‎ ٠٠٠09 ‏كيلودالتون و‎ ٠١ ‏يكون 0017586008006 له وزن جزيئي جرامي بين‎ Yo
    سمو كيلودالتون و0٠0٠‏ كيلودالتون؛ بين ‎٠٠‏ كيلودالتون و000٠‏ كيلودالتون أو بين ‎٠٠٠١‏ كيلودالتون و١١٠٠٠٠‏ كيلودالتون. ‎YY‏ = متقارن ‎(glycoconjugate) Sud‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ١7؛‏ حيث يكون ‎polysaccharide‏ له درجة ‎O-acetylation‏ بين لاح ‎7٠١‏ ‏0 ؟7- متقارن السكر ‎(glycoconjugate)‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ‎YY‏ حيث يكون بروتين المادة الحاملة هو ‎.CRM197‏ ‏؛*- متقارن السكر ‎(glycoconjugate)‏ من عنصر الحماية ‎«YY‏ حيث يشتمل 041/197 على ؟ إلى ‎٠١‏ أو ¢ إلى ‎١١‏ متخلف 5176لا متصل تساهميا مع ‎polysaccharide‏ خلال المُباعد ‎TEC‏ ‎٠‏ #؟- متقارن ‎(glycoconjugate) Sul‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ‎(YE‏ حيث تكون نسبة 880011806: بروتين المادة الحاملة (وزن/ وزن) بين 07 و؟ أو بين ‎NV ٠.4‏ 7- متقارن السكر ‎(glycoconjugate)‏ من عنصر الحماية ‎Cus (YY‏ تظهر توصيلة واحدة على الأقل بين ‎CRM197‏ و ‎٠١ (Vo (Yo JSsaccharide‏ أو 4 وحدات تكرار ‎saccharide‏ ‏من ‎.saccharide‏ ‎Vo‏ 77- متقارن السكر ‎(glycoconjugate)‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ‎YT‏ له توزيع مقاس جزيئي جرامي ‎(Kd)‏ 775 عند < 3... ‎YA‏ = تركيبة مولدة للمناعة ‎(immunogenic)‏ تشمل متقارن ‎(glycoconjugate) Su‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎١١7‏ إلى ‎YY‏ ومادة مسوغة؛ مادة حاملة أو مادة مخففة مقبولين دوائيا. 4؟- تركيبة مولدة للمناعة ‎(immunogenic)‏ من عنصر الحماية ‎«YA‏ تشمل إضافيا مولد مضاد ‎Ye‏ إضافي. = تركيبة مولدة للمناعة ‎(immunogenic)‏ من عنصر الحماية 719 حيث يشمل المولد المضاد الإضافي متقارن ‎(glycoconjugate) Su‏ من ‎polysaccharide‏ كبسولي منتقى من المجموعة المتكونة من 5800031065/راوم كبولية لء 3 ك 5( ‎OV (8 (TF 6B 6A‏ ‎¢18C ¢15B 14 «12F <11A 10A‏ 198 ا19؛ ‎33F 5 23F 22F‏ لها النمط المصلي
    ‎.(Pn-serotype) Pn Yo ‎Eye
    ‎-١‏ التركيبة ‎sa gall‏ للمناعة ‎(immunogenic)‏ من أي واحد من عناصر الحماية ‎٠0 YA‏ ؛ يشمل إضافيا مادة مساعدة. ‎YY‏ = التركيبة ‎sa gall‏ للمناعة ‎(immunogenic)‏ من عنصر الحماية ١؛‏ حيث تكون المادة المساعدة هي مادة مساعدة معتمدة على الألومنيوم منتقاة من المجموعة المتكونة من فوسفات الألومنيوم؛ سلفات الألومنيوم وهيدروكسيد الألومنيوم.
    _ q ‏اج‎ ‎\ ‏ا‎ | 3 ES (CDT) ‏تنشيط‎ LS Saccharide Ar ( ‏منشسط يت‎ 530018110 3 a h 3] N HA 5 Pats ‏ل‎ NTN yg Bp nN - ll ed OT Ny Ny 2 vd . ny Polysacchande ‏اا | امس الا اص الوا (مركب)‎ 5 ِ: ‏الحاق مباعد | وا‎ Cystamine irinzole ‏مركب مع‎ -١ ‏متمائل مزدوج الوظيفة)‎ thivatky lamin ‏للجفيد‎ WY 0 DMSO ‏إعادة تشكيل في‎ ly ‏ل‎ ‏الح 3 سر‎ IN Ne 1 A 5 ‏رايخ‎
    ‎“ . LE : (TCEP) disulfide ‏انشتاق‎ ‎4 ads Thiolated Bars ٠ ‏ام‎ ‏تنقية ا ا ا ا‎ HS ‏(ترشيح فائق/ ترشيح‎ Polysaccharide 0 Sage WE ‏مح‎ nn TS LEN 2 NH ay ‏الا‎ : x aH EN 0 ks SYR Tidolated Saccharide EWE WE - we ¥ ‏م‎ 8 8 i ‏ثرا‎ 4 Fidget oS Pod TT SARI ‏ادح م مم سن اننا‎ CER aN 00 BN . : ‏جا‎ ‎RA N-Ac-Cysteing ‏تخطية‎ 1 31 Li ‏بوبالالت‎ Todoncetamide ‏كت غطاء‎ ‏بروثين مادة حاملة‎ | 385.7 oO HAE ‏(ترشيح فاتق/ ترشيح‎ 0 CRM ‏ارس ا 0-7 ا‎ NS 3 Sar” Teg” 1 = Saccharide (TEC) ‏أ متقارن‎
    شكل ؟ ‎te 8‏ ‎oH oH OH‏ 1 ‎eR ee‏ _ ب ‎Gon UI,‏ الس = > ب ‎RE 2 4‏ ل 4 : 0
    JE Sea a Nw H i k LT x ‏و2‎ © LA, 1 3 N
    ا ‎oH‏ | الا اسان 3 ادي ‎HERA‏ بيبا ا أأساا اا ‎SN :‏ ‎OH “ok NLL‏ ‎RN ; 8‏ ‎BER +‏ لسر الم تر ‎tee‏ وروا لاير3 ع ‎Berd fof‏ 33 ا ل بجيام .سلا رصن اير 4 ‎efi‏ لس = ‎Avg‏ ماين
    _ q 7 _ VES J 1 HOE PE RA Ue HEF ge oo AP ‏ل‎ ‏كو‎ 5 $ Jt i Nem ; ‏أ 7ن : با‎ iL HO ve a RY I PRS \ X { \ » J "| ‏ا لطا‎ ‏شيا ال | بين‎ ‏ري‎ 9 . 8 HOw 2 Ki [IEC HE I or ‏ب‎ ‏ا اب‎ wy EN i ‏و‎ 3 : %, 0 3 HO, aj J Ne ‏نم ب‎ H i on hl : ‏بيخ‎ ‏م0‎ ‎2 ‎+ ‏اناا لد اال‎ i te ‏الما اناه سراح ايام الصوانات لناء و السعاءا المي عاد‎ ٍ 3 8 REE ene
    : ‏شكل‎ ‎Won ‎- ‏ا‎ - 1 a Ae] Le 0 ‏وا‎ A B x ae ie . hp i oe.
    Nn \ hed ‏يم‎ ‎| J { REN, k k ‏تت ب‎ | oH < X X : 4 ‏ا‎ i “oe Ne AULT wd N Xue ’ KR 3 ‏تت‎ i ge 8 ered ‏اليس‎ 7 edb i Swen 0 a hh % ١ 3 0 hat gp i CN ‏بيخ اله يها‎ 1 > ‏كينا‎ 2+ > & N ; Bi i ! er Ov ‏سأ‎ 8 ‏“ترا‎ ‎fi 2 ‘ ~ 3 > 4 ‏ند 3 2 ند‎ 2 1 3 3 ‏ادا لصحت دان مت‎ ete ‏الل صصح نات‎ = DRO] Cre Boe ‏إن‎ 1 0 Gale
    ‏شكل‎ ‎OH ‎HO 7 Q OH oo HG B (Ae) (A HOH QE=p—Or aaron OH H EI SOL JU SJ ‏مع‎ 0" 0 Ho OAC OH OH OM - ١“ ‏ابيط عم‎ 0 ‏مسد‎ i 0A OH 0 5 Pra Pod ep Ora Pod poral] ‏حا‎ ‎4 0 Om POg—1-Dlyearn] IANA
    سا ال شكل +() ‎A‏ ا متشا ‎Np oy‏ ب و الع ‎FIF-CRM 0 0d‏ من ‎RE FUE ON wn © xf‏ متقارن .335-6834 من نوع مصلي ‎Belo‏ بالمكورات الرنرية )#308 ‎(TEC‏ ‏بوبشاكاتث جا > ‎RW: 2‏ ( الأ ‎os‏ مر اجرج ا ‎Ng mH =n‏ كا ‎Fa ee pS‏ : ا موا ‎Spots‏ ال ب كا ‎Woon PH Aw La‏ ‎a HERA‏ ذا ‎Xo . EN Tomderdd ١ N o Be EL Wt RR‏ ا ‎Ans‏ ارارق مص حي المج الي ع 0 ‎pa,‏ 3< ا ‎wel oo +o hema‏ انها ‎Rae HY yd Ri‏ ا 4 ‎RY i ON A‏ ٍ الس ‎I SSVI ASI,‏ ‎CN sel BI wi 1 0‏ انارت بس لتسخصيم | ‎JOOS SO‏ : سحا ير © ‎eT a a I he DAY wy + Fy‏ ‎A Ney dw tu‏ بي 4 ‎pa WY gd‏ م : م ال زلا 0 = ‎WRG wed‏ بين ‎HRT‏ ل ‎HER wed EE‏
    ‎٠ \ —‏ \ _ ‎Ek‏ ت(ب) ‎a 4‏ ‎)١‏ متقارن يعرف ساعد ‎RC‏ هه ل ال ‎i‏ ‏(1) مثقارن يعرف بمياعد ‎TR Hos TEE‏ الي ‎TTT‏ ال زيم 2 8 8 0 { متقازن ‎hic‏ مغط : .ال اا (؟) ‎thin) Wa‏ مغطى مع ‎a a ENTS a Rag, TAA‏ ‎oo oF #3 ;‏
    1 .7 مر (؟) تبقى وامزب المحتملة غير مغطأة ب 0 9 = ا 0 مع فضا ‎٠‏ ااال ‎ST‏ ل ري > با ‎Nd uw 8‏ 3 ‎A,‏ ‎HE G‏ م 8 ‎i” . : 2‏ 8 2 )1( مجموعات ‎Brive‏ في متقارنات مغطاة ‎EY Pe‏ ا . . حو 0 7 5 ‎Sop. J N‏ مع ‎oH \ N-Ao-Cysiging‏ ليد 3 ‎La‏ ‎[Rete ny‏ ‎NAL‏ ‎IANA‏
    ‎٠ \ —_‏ \ _ شكل ‎٠‏ ‏0 ‏النمط ‎Polysaceharide (dead!‏ لدتو - مركب مع ‎4-triazole‏ 1,2 - تلجفيد ‎2033٠ Polysaccharide |‏ مجند - إعادة تشكيل في 03450 لاماني ‎Joli «‏ مع ‎1.1-carbonyldi-1.2,4-triazole (CDT)‏ ‎o‏ تحضين لمدة ساعة واحدة؛ ‎dust’ + YY‏ ‎Aad} -‏ تمع ‎Yee‏ مللي جز يني جز أمي ‎sodium tetraborate‏ أشن هيدر وجيني 3 - تحضين لمدة ساعة ‎YT Saad‏ + 7“منوية - إضافة مل تين لطعوجل رتل ‎cvstamine‏ - تحضين لمدة ‎٠‏ + ساعتينء ‎YY‏ + #منوية - اختزال مع ‎TCEP‏ ‏- تحضين لمدة ؟ ساعاتء ‎Rg a + YT‏ ترشيح ثناني ‎٠٠١‏ كيلو ‎MWCO‏ مقابل ‎٠١‏ مللي جز يني جر أمي فوسفات الصوديوغ ~ أن إْ هيدرو جيني ‎Thiclated Po33F Polysaccharide LY‏ )=( ‎Thiolated Pu33F Polysacchari del‏ - إضافة يي ‎bromoacetylated CRM,‏ - تحضين لمدة 0 + ساعتين:؛ 8 + ‎iY‏ أل هيدر وجيني ‎TA‏ ‏- تغطية مع ‎N-acetyl-1-cysteine‏ ‎Ciena 3 ~‏ لمدة ؟ ساعات: 8 + ‎Ay 4a‏ . تغطية مع ‎lodoacsiamide‏ ‏تحضين لمدة ‎Ye‏ + ساعتين؛ * + ‎LY‏ ‏ترشيح 46 أو ‎Soy Aged‏ ترشيح ثناني ‎٠٠‏ ؟ كيلو ‎MWCO‏ مقابل © مللي جزيني جرامي ‎Succinate‏ - #3 محلول ملهي؛ أس هيدر وجيني 3 ‎Co LP ow‏ ب حي اد ابأ اير لاض ترشيح 7 ميكرومتر مثفارن 203317 (كتلة نهانية) شار
    _ \ ٠ Ad —_ A ‏شكل‎ ‎: AAA ‏ا ا ل‎ A AL AEA AREA AREA AR : "© 3 H 3 H 3 H 3 H : 1 3 ‏ااا ا ...ارا ا اا ااا ااا ااه ما ااا ااا الات تنا اانا تنا ااا لاا تالالا ل وه‎ : 8 : H : : ‏وب‎ ‎: H ra : H 3 H : 0 H ed : ‏ااا ات الا ا ااا راو‎ : LA : : ‏با‎ ‎: H 3 8 i ea : ‏ع‎ ‏ا‎ H td 00: 0 : ‏دي لا لي ل للق للق لتق للق للف للف لي ا‎ EA VARA AAA AAA AAA ALL AARA AAA AARA AAA VARMA ARAN 3 : ‏واه‎ x + a Te 8 H ea oR: H a Ng “a = 1 ‏ب‎ w= 0.1038 03 8 i & oR i \ ‏ل و لا ا ا‎ R fad H Pa : H : H ea : x : H a 3 H : : RY rd : EE ‏ال ا‎ 3 ‏ل"‎ pus 3 H 3 H 3 H 3 H v : * H : ‏صقل‎ a A EE I rE SE ER : ‏شر‎ 0 ¥ ¥ : & 1 5 ‏الا أ‎ Eg sent msg ‏جز‎ CDT
    مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏
SA515360035A 2012-08-16 2015-02-15 تركيبات وعمليات اقتران سكر SA515360035B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261684043P 2012-08-16 2012-08-16
PCT/IB2013/056597 WO2014027302A1 (en) 2012-08-16 2013-08-12 Glycoconjugation processes and compositions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA515360035B1 true SA515360035B1 (ar) 2015-09-15

Family

ID=49385307

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA515360035A SA515360035B1 (ar) 2012-08-16 2015-02-15 تركيبات وعمليات اقتران سكر

Country Status (30)

Country Link
US (6) US9517274B2 (ar)
EP (2) EP3421051B1 (ar)
JP (1) JP6291495B2 (ar)
KR (1) KR101742406B1 (ar)
CN (1) CN104661684B (ar)
AR (1) AR092368A1 (ar)
AU (1) AU2013303826B2 (ar)
BR (1) BR112015003227B1 (ar)
CA (1) CA2881420C (ar)
DK (2) DK3421051T3 (ar)
ES (2) ES2800479T3 (ar)
FR (1) FR22C1037I2 (ar)
HK (1) HK1210021A1 (ar)
HU (3) HUE049531T2 (ar)
IL (1) IL237066B (ar)
IN (1) IN2015DN00694A (ar)
MX (1) MX363511B (ar)
MY (1) MY167579A (ar)
NL (1) NL301188I2 (ar)
NZ (1) NZ704490A (ar)
PE (1) PE20150464A1 (ar)
PH (1) PH12015500243A1 (ar)
PL (2) PL2885007T3 (ar)
PT (2) PT3421051T (ar)
RU (2) RU2724840C2 (ar)
SA (1) SA515360035B1 (ar)
SG (1) SG11201500566XA (ar)
SI (2) SI3421051T1 (ar)
TW (1) TWI480049B (ar)
WO (1) WO2014027302A1 (ar)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN2015DN00694A (ar) 2012-08-16 2015-06-26 Pfizer
PT3096786T (pt) * 2014-01-21 2021-08-24 Pfizer Polissacáridos capsulares de streptococcus pneumoniae e conjugados dos mesmos
WO2015110941A2 (en) * 2014-01-21 2015-07-30 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
CN105934251A (zh) * 2014-01-21 2016-09-07 辉瑞大药厂 肺炎链球菌荚膜多糖及其缀合物
US11160855B2 (en) * 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
JP2017505792A (ja) 2014-02-14 2017-02-23 ファイザー・インク 免疫原性糖タンパク質コンジュゲート
PT3116887T (pt) 2014-03-13 2021-04-30 Univ Basel Ligantes de hidratos de carbono que se ligam a anticorpos igm contra a glicoproteína associada à mielina
PT3244917T (pt) 2015-01-15 2023-05-31 Pfizer Composições imunogénicas para utilização em vacinas pneumocócicas
EP3292146A1 (en) * 2015-05-04 2018-03-14 Pfizer Inc Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof
US10729780B2 (en) * 2015-06-08 2020-08-04 Serum Institute Of India Private Ltd. Methods for improving the adsorption of polysaccharide-protein conjugates and multivalent vaccine formulation obtained thereof
SG10202005253TA (en) * 2015-07-21 2020-07-29 Pfizer Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
US11091591B2 (en) 2015-09-16 2021-08-17 Universität Basel Carbohydrate ligands that bind to antibodies against glycoepitopes of glycosphingolipids
EP3377098A1 (en) 2015-11-20 2018-09-26 Pfizer Inc Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
CN109862908B (zh) 2016-08-05 2023-05-02 圣诺菲·帕斯图尔公司 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物
CN109890415B (zh) 2016-08-05 2023-04-04 圣诺菲·帕斯图尔公司 多价肺炎球菌多糖-蛋白质缀合物组合物
MX2019002489A (es) 2016-09-02 2019-10-21 Sanofi Pasteur Inc Vacuna contra neisseria meningitidis.
US11951165B2 (en) 2016-12-30 2024-04-09 Vaxcyte, Inc. Conjugated vaccine carrier proteins
KR102459629B1 (ko) 2017-01-20 2022-10-28 화이자 인코포레이티드 폐렴구균 백신에 사용하기 위한 면역원성 조성물
KR102634811B1 (ko) * 2017-06-10 2024-02-06 인벤트프라이즈 인크. 면역원성과 항원항체 결합성이 개선된 2가 또는 다가 접합체 다당류를 가진 다가 접합체 백신
US10729763B2 (en) 2017-06-10 2020-08-04 Inventprise, Llc Mixtures of polysaccharide-protein pegylated compounds
AU2018328036B2 (en) 2017-09-07 2024-03-07 Merck Sharp & Dohme Llc Pneumococcal polysaccharides and their use in immunogenic polysaccharide-carrier protein conjugates
JP6950099B2 (ja) 2018-02-05 2021-10-13 サノフィ パスツール インコーポレイティッド 多価肺炎球菌多糖体−タンパク質複合体組成物
SG11202006387QA (en) 2018-02-05 2020-07-29 Sanofi Pasteur Inc Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition
KR20200141053A (ko) * 2018-03-23 2020-12-17 코라넥스 캐피탈 치료 도구로서의 정밀 당 접합체
EP3782642A4 (en) 2018-04-18 2022-04-13 SK Bioscience Co., Ltd. CAPSULE POLYSACCHARIDES FROM STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE AND CONJUGATES THEREOF
US11260119B2 (en) * 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
CA3136278A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
CN111024832B (zh) * 2019-10-29 2022-05-03 北京成大天和生物科技有限公司 多糖结合疫苗中残余NaCNBH3的离子色谱检测方法
IL292494A (en) 2019-11-01 2022-06-01 Pfizer Preparations of Escherichia coli and their methods
CN115362177A (zh) 2020-02-21 2022-11-18 辉瑞公司 糖类的纯化
JP2023514697A (ja) 2020-02-23 2023-04-07 ファイザー・インク 大腸菌組成物およびその方法
KR20230043157A (ko) 2020-09-17 2023-03-30 얀센 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 다가 백신 조성물 및 이의 용도
CA3199094A1 (en) 2020-10-22 2022-04-28 Pfizer Inc. Methods for purifying bacterial polysaccharides
AU2021368151A1 (en) 2020-10-27 2023-06-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
US20240000912A1 (en) 2020-11-04 2024-01-04 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
WO2022234416A1 (en) 2021-05-03 2022-11-10 Pfizer Inc. Vaccination against pneumoccocal and covid-19 infections
CA3218544A1 (en) 2021-05-03 2022-11-10 Pfizer Inc. Vaccination against bacterial and betacoronavirus infections
US20220387613A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
EP4346893A2 (en) 2021-05-28 2024-04-10 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024084397A1 (en) 2022-10-19 2024-04-25 Pfizer Inc. Vaccination against pneumoccocal and covid-19 infections

Family Cites Families (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US578573A (en) 1897-03-09 Brake-actuating mechanism
US4708871A (en) 1983-03-08 1987-11-24 Commonwealth Serum Laboratories Commission Antigenically active amino acid sequences
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
JPH0832638B2 (ja) 1989-05-25 1996-03-29 カイロン コーポレイション サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤
IL101715A (en) 1991-05-02 2005-06-19 Amgen Inc Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs
JPH07507854A (ja) 1991-12-23 1995-08-31 ツォッヒェ，ミヒャエル 油除去装置を備えたエンジン
DE69434079T2 (de) 1993-03-05 2005-02-24 Wyeth Holdings Corp. Plasmid zur Herstellung von CRM-Protein und Diphtherie-Toxin
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
US6113918A (en) 1997-05-08 2000-09-05 Ribi Immunochem Research, Inc. Aminoalkyl glucosamine phosphate compounds and their use as adjuvants and immunoeffectors
US6027925A (en) 1997-06-12 2000-02-22 Shin-Etsu Bio, Inc. Production of non-native bacterial exopolysaccharide in a recombinant bacterial host
DE69937571T2 (de) 1998-09-30 2008-09-04 The Government Of The United States Of America As Represented By The Uniformed Services University Of The Health Sciences Mutiertes cholera holotoxin als hilfsmittel
US6936258B1 (en) 1999-03-19 2005-08-30 Nabi Biopharmaceuticals Staphylococcus antigen and vaccine
DE19926475A1 (de) * 1999-06-10 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Träger-Pharmaka-Konjugate
JP2005504718A (ja) * 2001-01-23 2005-02-17 アヴェンティス パストゥール 多価髄膜炎菌多糖−タンパク質複合ワクチン
DE60234695D1 (de) 2001-06-07 2010-01-21 Univ Colorado Mutantenformen von cholera holotoxin als adjuvans
CA2449670A1 (en) 2001-06-07 2002-12-12 Wyeth Holdings Corporation Mutant forms of cholera holotoxin as an adjuvant
CN1394867A (zh) * 2001-07-06 2003-02-05 中国科学院生态环境研究中心 可作药物的寡糖和其制备方法及含该寡糖的药物组合物
US6995001B2 (en) * 2002-10-03 2006-02-07 Wyeth Holdings Corporation Processing for preparing monoprotected diols from symmetric diols
NZ561879A (en) * 2003-03-07 2009-05-31 Wyeth Corp Polysaccharide - staphylococcal surface adhesin carrier protein conjugates for immunization against nosocomial infections
WO2004083251A2 (en) 2003-03-17 2004-09-30 Wyeth Holdings Corporation Mutant cholera holotoxin as an adjuvant and an antigen carrier protein
GB0323103D0 (en) 2003-10-02 2003-11-05 Chiron Srl De-acetylated saccharides
US7445916B2 (en) * 2004-04-14 2008-11-04 Wyeth Process for preparing rapamycin 42-esters and FK-506 32-esters with dicarboxylic acid, precursors for rapamycin conjugates and antibodies
US7910753B2 (en) * 2004-09-10 2011-03-22 Anaspec Incorporated Cyanine dyes and their applications as luminescence quenching compounds
IL308456A (en) 2005-04-08 2024-01-01 Wyeth Llc A multivalent pneumomuroral protein-polysaccharide conjugate preparation
GB0513069D0 (en) * 2005-06-27 2005-08-03 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
TWI457133B (zh) * 2005-12-13 2014-10-21 Glaxosmithkline Biolog Sa 新穎組合物
PT1962899E (pt) * 2005-12-22 2011-10-19 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacina conjugada polissacarídica pneumocócica
TW200806685A (en) * 2006-02-21 2008-02-01 Wyeth Corp Processes for the convergent synthesis of calicheamicin derivatives
AU2007223963A1 (en) * 2006-03-07 2007-09-13 Wyeth Process for preparing water-soluble polyethylene glycol conjugates of macrolide immunosuppressants
US20070253985A1 (en) 2006-04-26 2007-11-01 Wyeth Novel processes for coating container means which inhibit precipitation of polysaccharide-protein conjugate formulations
DE102006026436A1 (de) * 2006-06-07 2007-12-13 Continental Aktiengesellschaft Verfahren und Messfahrzeug zur Ermittlung objektiver Reifeneigenschaften auf einer Fahrbahnoberfläche
US20100189740A1 (en) * 2007-06-20 2010-07-29 Francis Michon Modified polysaccharides for conjugate vaccines
RU2378015C2 (ru) * 2008-04-02 2010-01-10 Равшан Иноятович Атауллаханов Конъюгат для иммунизации и вакцинации и способ повышения иммуногенности
SG10201406432RA (en) * 2009-06-22 2014-11-27 Wyeth Llc Compositions and methods for preparing staphylococcus aureus serotype 5 and 8 capsular polysaccharide conjugate immunogenic compositions
WO2011000958A1 (en) * 2009-07-03 2011-01-06 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Compounds targeting the cation-independent mannose 6-phosphate receptor
WO2011066291A2 (en) * 2009-11-24 2011-06-03 Talecris Biotherapeutics, Inc. Lyophilization methods, compositions, and kits
BR112013012626A2 (pt) * 2010-12-10 2016-07-19 Merck Sharp & Dohme formulação, composição imunogênica, e, seringa pré-carregada
CA2848142C (en) * 2011-09-07 2021-05-18 Prolynx Llc Hydrogels with biodegradable crosslinking
IN2015DN00694A (ar) 2012-08-16 2015-06-26 Pfizer
WO2015110941A2 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
JP2017505792A (ja) 2014-02-14 2017-02-23 ファイザー・インク 免疫原性糖タンパク質コンジュゲート

Also Published As

Publication number Publication date
AU2013303826B2 (en) 2017-06-29
PE20150464A1 (es) 2015-04-25
BR112015003227A2 (pt) 2017-07-04
DK3421051T3 (da) 2020-06-22
RU2015103017A (ru) 2016-10-10
US11110160B2 (en) 2021-09-07
RU2016136630A3 (ar) 2019-12-30
US10583187B2 (en) 2020-03-10
FR22C1037I2 (fr) 2023-05-26
US20230355735A1 (en) 2023-11-09
BR112015003227B1 (pt) 2020-10-27
NL301188I2 (nl) 2024-05-15
AU2013303826A1 (en) 2015-02-12
JP2015524839A (ja) 2015-08-27
HUS2200034I1 (hu) 2022-08-28
US20150216996A1 (en) 2015-08-06
SI3421051T1 (sl) 2020-08-31
MX2015001992A (es) 2015-10-05
NZ704490A (en) 2017-07-28
DK2885007T3 (en) 2018-12-03
PH12015500243B1 (en) 2015-03-30
US11723965B2 (en) 2023-08-15
US20180221467A1 (en) 2018-08-09
KR101742406B1 (ko) 2017-05-31
HUE049531T2 (hu) 2020-10-28
TW201420115A (zh) 2014-06-01
ES2700824T3 (es) 2019-02-19
RU2724840C2 (ru) 2020-06-25
PT3421051T (pt) 2020-06-26
RU2016136630A (ru) 2018-12-11
US20170224804A1 (en) 2017-08-10
IN2015DN00694A (ar) 2015-06-26
EP2885007A1 (en) 2015-06-24
PT2885007T (pt) 2018-12-10
EP3421051B1 (en) 2020-05-13
HUE041381T2 (hu) 2019-05-28
IL237066B (en) 2019-03-31
EP2885007B1 (en) 2018-10-10
CN104661684A (zh) 2015-05-27
SI2885007T1 (sl) 2018-12-31
AR092368A1 (es) 2015-04-15
FR22C1037I1 (fr) 2022-09-09
MX363511B (es) 2019-03-26
WO2014027302A1 (en) 2014-02-20
US9517274B2 (en) 2016-12-13
SG11201500566XA (en) 2015-04-29
CA2881420C (en) 2016-11-15
RU2645071C2 (ru) 2018-02-15
ES2800479T3 (es) 2020-12-30
CA2881420A1 (en) 2014-02-20
HK1210021A1 (en) 2016-04-15
CN104661684B (zh) 2018-03-20
PL2885007T3 (pl) 2019-02-28
TWI480049B (zh) 2015-04-11
JP6291495B2 (ja) 2018-03-14
PL3421051T3 (pl) 2020-10-05
US20220096619A1 (en) 2022-03-31
PH12015500243A1 (en) 2015-03-30
US20200246448A1 (en) 2020-08-06
MY167579A (en) 2018-09-20
EP3421051A1 (en) 2019-01-02
KR20150041139A (ko) 2015-04-15
US9950054B2 (en) 2018-04-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA515360035B1 (ar) تركيبات وعمليات اقتران سكر
US11707529B2 (en) Immunogenic glycoprotein conjugates
JP6393804B2 (ja) 組成物および黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）血清型５および８莢膜多糖コンジュゲート免疫原性組成物を調製するための方法