RU98117244A - Модифицированные термостабильные днк-полимеразы для секвенирования - Google Patents

Модифицированные термостабильные днк-полимеразы для секвенирования

Info

Publication number
RU98117244A
RU98117244A RU98117244/13A RU98117244A RU98117244A RU 98117244 A RU98117244 A RU 98117244A RU 98117244/13 A RU98117244/13 A RU 98117244/13A RU 98117244 A RU98117244 A RU 98117244A RU 98117244 A RU98117244 A RU 98117244A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
thermostable dna
dna polymerase
labeled
recombinant thermostable
polymerase
Prior art date
Application number
RU98117244/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2238978C2 (ru
Inventor
Х.Гелфанд Дэвид
Вивьен Кэлмэн Лиза
В.Майерс Томас
Лоуренс Райчерт Фрэд
Лим Сигуа Кристофер
Original Assignee
Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of RU98117244A publication Critical patent/RU98117244A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2238978C2 publication Critical patent/RU2238978C2/ru

Links

Claims (27)

1. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза, отличающаяся тем, что в своей нативной форме полимераза включает аминокислотную последовательность LeuSerXaaXaaLeuXaaXaaProXaaXaaGlu (SEQ ID NO:1), причем "Хаа" в положениях 3, 4, 6, 9 и 10 последовательности обозначают остаток любой аминокислоты, а "Хаа" в положении 7 последовательности обозначает Val или Ile, "Хаа" в положении 4 изменен по сравнению с нативной последовательностью при условии, что "Хаа" в положении 4 не заменен на Glu, и уровень дискриминирующей способности термостабильной ДНК-полимеразы в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, понижен по сравнению с нативной формой полимеразы.
2. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 1, отличающаяся тем, что нуклеотид представляет собой дидезоксинуклеотид и уровень дискриминирующей способности ниже по крайней мере в три раза по сравнению с нативной формой полимеразы.
3. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 2, отличающаяся тем, что ее уровень дискриминирующей способности измеряют, определяя концентрацию дидезоксинуклеотида, меченного флуоресцеиновым красителем, необходимую для 50%-ного ингибирования синтеза ДНК.
4. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 2, отличающаяся тем, что полимеразу получают из термофильных видов, выбранных из группы, включающей Thermosipho africanus, Bacillus caldotenax и Bacillus stearothermophilus.
5. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 2, отличающаяся тем, что полимеразу получают из видов р. Thermus.
6. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 5, отличающаяся тем, что в своей нативной форме полимераза включает аминокислотную последовательность LeuSerXaaXaaLeuXaaIleProTyrGluGlu (SEQ ID NO:2), причем "Хаа" в положении 3 обозначает Gln или Gly, "Хаа" в положении 4 обозначает любую аминокислоту, а "Хаа" в положении 6 обозначает Ser или Ala, "Хаа" в положении 4 изменен по сравнению с нативной последовательностью при условии, что "Хаа" в положении 4 не заменен на Glu, и уровень дискриминирующей способности термостабильной ДНК-полимеразы в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, понижен по сравнению с нативной формой полимеразы.
7. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 6, отличающаяся тем, что в своей нативной форме полимераза включает аминокислотную последовательность LeuSerGlnXaaLeuAlaIleProTyrGluGlu (SEQ ID NO:3), причем "Хаа" в положении 4 обозначает любую аминокислоту, "Хаа" в положении 4 изменен по сравнению с нативной последовательностью при условии, что "Хаа" в положении 4 не заменен на Glu, и уровень дискриминирующей способности термостабильной ДНК-полимеразы в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, понижен по сравнению с нативной формой полимеразы.
8. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 7, отличающаяся тем, что "Хаа" в положении 4 заменен на Lys.
9. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 2, отличающаяся тем, что полимераза получена из видов р. Thermotoga.
10. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза по п. 9, отличающаяся тем, что в своей нативной форме полимераза включает аминокислотную последовательность LeuSerValXaaLeuGlyXaaProValLysGlu (SEQ ID NO:4), причем "Хаа" в положении 4 обозначает любую аминокислоту, предпочтительно Arg, а "Хаа" в положении 7 обозначает Val или Ile, "Хаа" в положении 4 изменен по сравнению с нативной последовательностью при условии, что "Хаа" в положении 4 не заменен на Glu, и уровень дискриминирующей способности термостабильной ДНК-полимеразы в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, понижен по сравнению с нативной формой полимеразы.
11. Нуклеотидная последовательность, кодирующая рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10.
12. Вектор, содержащий нуклеотидную последовательность, кодирующую рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10.
13. Клетка-хозяин, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10.
14. Способ получения рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы по любому из пп. 1-10, включающий культивирование клетки-хозяина, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10, в условиях, которые усиливают экспрессию рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы, и выделение рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы из клетки-хозяина или из среды.
15. Рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза, полученная способом по п. 14.
16. Способ секвенирования ДНК, включающий получение рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы по любому из пп. 1-10, получение окрашенного терминатора, меченного отрицательно заряженным флуоресцентным красителем, и проведение реакции секвенирования с окрашенным терминатором.
17. Способ по п. 16, где рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза имеет пониженный уровень дискриминирующей способности в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, и где нуклеотид представляет собой дидезоксинуклеотид и уровень дискриминирующей способности измеряют, определяя соотношение концентрации дидезоксинуклеотида, меченного флуоресцеиновым красителем, необходимой для 50%-ного ингибирования синтеза ДНК, и концентрации немеченого дидезоксинуклеотида, необходимой для 50%-ного ингибирования.
18. Способ по п. 17, где соотношение составляет 4 или менее.
19. Способ получения меченой ДНК, включающий получение рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы по любому из пп. 1-10, получение нуклеотида, меченного красителем из класса флуоресцеина, и проведение реакции синтеза ДНК.
20. Способ получения меченых продуктов удлинения праймера, включающий получение рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы по любому из пп. 1-10, где полимераза включает аминокислотную последовательность LeuSerValXaaLeuGlyXaaProValLysGlu (SEQ ID NO:4), причем "Хаа" в положении 4 может быть любой аминокислотой, кроме Glu, а "Хаа" в положении 7 этой последовательности обозначает Val или Ile, полимераза обладает пониженным уровнем дискриминирующей способности в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, полимераза также включает вторую аминокислотную последовательность SQIXLR(V/I) (SEQ ID NO:18), где "X" обозначает любую аминокислоту, кроме E, и полимераза обладает пониженной дискриминирующей способностью по отношению к включению рибонуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, получение рибонуклеотида, меченного красителем из класса флуоресцеина, и проведение реакции удлинения праймера.
21. Применение рекомбинантной термостабильной ДНК-полимеразы по любому из пп. 1-10 в методах, в которых используется синтез ДНК in vitro, таких, как секвенирование ДНК, синтез меченой ДНК и получение меченых продуктов удлинения праймера.
22. Набор для секвенирования ДНК, включающий рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10 и терминатор, меченный отрицательно заряженным флуоресцентным красителем.
23. Набор по п. 22, где рекомбинантная термостабильная ДНК-полимераза обладает пониженной дискриминирующей способностью в отношении включения нуклеотидов, меченных красителями из класса флуоресцеина, и где пониженный уровень дискриминирующей способности измеряют, определяя соотношение концентрации ддНТФ, меченного красителем из класса флуоресцеина, необходимой для 50%-ного ингибирования синтеза ДНК, и соответствующей концентрации немеченого ддНТФ и где отношение составляет 4 или менее.
24. Набор по п. 23, где уровень дискриминирующей способности ДНК-полимеразы по крайней мере в 5 раз ниже, чем у нативной формы полимеразы.
25. Набор для получения меченой ДНК, включающий рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10 и нуклеотид, меченный отрицательно заряженным флуоресцентным красителем.
26. Набор для получения меченых продуктов удлинения праймера, включающий рекомбинантную термостабильную ДНК-полимеразу по любому из пп. 1-10 и рибонуклеотид, меченный красителем из класса флуоресцеина.
27. Изобретение, как оно представлено в настоящем описании.
RU98117244A 1997-09-11 1998-09-11 Рекомбинантная термостабильная днк-полимераза, способ ее получения и применение RU2238978C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US5852597P 1997-09-11 1997-09-11
US60/058,525 1997-09-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU98117244A true RU98117244A (ru) 2000-08-27
RU2238978C2 RU2238978C2 (ru) 2004-10-27

Family

ID=22017355

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98117244A RU2238978C2 (ru) 1997-09-11 1998-09-11 Рекомбинантная термостабильная днк-полимераза, способ ее получения и применение

Country Status (18)

Country Link
US (3) US6346379B1 (ru)
EP (1) EP0902035B1 (ru)
JP (1) JP4417452B2 (ru)
KR (1) KR100561122B1 (ru)
CN (1) CN1197962C (ru)
AT (1) ATE530567T1 (ru)
AU (1) AU741366B2 (ru)
BR (1) BR9803419B1 (ru)
CA (1) CA2243985C (ru)
CZ (1) CZ293217B6 (ru)
ES (1) ES2374910T3 (ru)
HK (1) HK1018796A1 (ru)
HU (1) HUP9802024A3 (ru)
IL (1) IL126100A (ru)
NO (1) NO327476B1 (ru)
PL (1) PL328525A1 (ru)
RU (1) RU2238978C2 (ru)
TW (1) TW513439B (ru)

Families Citing this family (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2264045B1 (en) 1996-08-14 2015-10-21 Life Technologies Corporation Stable compositions for nucleic acid amplification and sequencing
US7875440B2 (en) 1998-05-01 2011-01-25 Arizona Board Of Regents Method of determining the nucleotide sequence of oligonucleotides and DNA molecules
US6780591B2 (en) * 1998-05-01 2004-08-24 Arizona Board Of Regents Method of determining the nucleotide sequence of oligonucleotides and DNA molecules
US20030138834A1 (en) * 1998-08-19 2003-07-24 Dawson Elliott P. Method for determining polynucleotide sequence variations
US20040121394A1 (en) * 1998-08-19 2004-06-24 Dawson Elliott P. Method for determining polynucleotide sequence variations
US7501245B2 (en) * 1999-06-28 2009-03-10 Helicos Biosciences Corp. Methods and apparatuses for analyzing polynucleotide sequences
US6818395B1 (en) * 1999-06-28 2004-11-16 California Institute Of Technology Methods and apparatus for analyzing polynucleotide sequences
JP2003507072A (ja) * 1999-08-21 2003-02-25 アマシャム・バイオサイエンス・コーポレイション 耐塩性を改善した、E681にアミノ酸置換を有するTaqDNAポリメラーゼおよびその同族体
US7179590B2 (en) * 2000-04-18 2007-02-20 Roche Molecular Systems, Inc High temperature reverse transcription using mutant DNA polymerases
US6214557B1 (en) * 2000-06-06 2001-04-10 Washington University Cold sensitive mutant DNA polymerases
EP2801624B1 (en) * 2001-03-16 2019-03-06 Singular Bio, Inc Arrays and methods of use
AU2002316586A1 (en) * 2001-07-06 2003-01-21 Amersham Biosciences Corp Novel dna polymerases having amino acid substitutions and homologs thereof
JP2005517413A (ja) * 2002-02-12 2005-06-16 アプレラ コーポレイション ポリメラーゼ組成物
DE10315640A1 (de) * 2003-04-04 2004-10-14 Ignatov, Konstantin Verfahren zur kontrollierten Freisetzung von Komponenten in eine Lösung
WO2004094986A2 (en) * 2003-04-16 2004-11-04 Handylab, Inc. System and method for electrochemical detection of biological compounds
KR100571808B1 (ko) * 2003-04-16 2006-04-17 삼성전자주식회사 다층 박막 구조를 가진 dna 칩
US20050170367A1 (en) * 2003-06-10 2005-08-04 Quake Stephen R. Fluorescently labeled nucleoside triphosphates and analogs thereof for sequencing nucleic acids
US7572581B2 (en) * 2003-06-30 2009-08-11 Roche Molecular Systems, Inc. 2′-terminator nucleotide-related methods and systems
US7169560B2 (en) 2003-11-12 2007-01-30 Helicos Biosciences Corporation Short cycle methods for sequencing polynucleotides
WO2005054441A2 (en) * 2003-12-01 2005-06-16 California Institute Of Technology Device for immobilizing chemical and biomedical species and methods of using same
DE602005020421D1 (de) 2004-02-19 2010-05-20 Helicos Biosciences Corp Verfahren zur analyse von polynukleotidsequenzen
US20060046258A1 (en) * 2004-02-27 2006-03-02 Lapidus Stanley N Applications of single molecule sequencing
US20050239085A1 (en) * 2004-04-23 2005-10-27 Buzby Philip R Methods for nucleic acid sequence determination
ATE507305T1 (de) * 2004-05-25 2011-05-15 Helicos Biosciences Corp Verfahren zur nukleinsäureimmobilisierung
US20070117104A1 (en) * 2005-11-22 2007-05-24 Buzby Philip R Nucleotide analogs
US7476734B2 (en) * 2005-12-06 2009-01-13 Helicos Biosciences Corporation Nucleotide analogs
US20070117103A1 (en) * 2005-11-22 2007-05-24 Buzby Philip R Nucleotide analogs
US20060024678A1 (en) * 2004-07-28 2006-02-02 Helicos Biosciences Corporation Use of single-stranded nucleic acid binding proteins in sequencing
US20060118754A1 (en) * 2004-12-08 2006-06-08 Lapen Daniel C Stabilizing a polyelectrolyte multilayer
US7220549B2 (en) * 2004-12-30 2007-05-22 Helicos Biosciences Corporation Stabilizing a nucleic acid for nucleic acid sequencing
US20060172328A1 (en) * 2005-01-05 2006-08-03 Buzby Philip R Methods and compositions for correcting misincorporation in a nucleic acid synthesis reaction
US7482120B2 (en) * 2005-01-28 2009-01-27 Helicos Biosciences Corporation Methods and compositions for improving fidelity in a nucleic acid synthesis reaction
US7524831B2 (en) * 2005-03-02 2009-04-28 Schering Corporation Treatments for Flaviviridae virus infection
US20060263790A1 (en) * 2005-05-20 2006-11-23 Timothy Harris Methods for improving fidelity in a nucleic acid synthesis reaction
US7666593B2 (en) 2005-08-26 2010-02-23 Helicos Biosciences Corporation Single molecule sequencing of captured nucleic acids
GB0518867D0 (en) * 2005-09-15 2005-10-26 Secretary Trade Ind Brit Microscopy tip
US20070117102A1 (en) * 2005-11-22 2007-05-24 Buzby Philip R Nucleotide analogs
US20070128610A1 (en) * 2005-12-02 2007-06-07 Buzby Philip R Sample preparation method and apparatus for nucleic acid sequencing
CA2633476C (en) * 2005-12-22 2015-04-21 Pacific Biosciences Of California, Inc. Active surface coupled polymerases
CN101365807A (zh) 2005-12-22 2009-02-11 加利福尼亚太平洋生物科学股份有限公司 用于掺入核苷酸类似物的聚合酶
EP1963501A4 (en) * 2005-12-22 2009-04-22 Pacific Biosciences California PROTEIN ENGINEERING STRATEGIES FOR OPTIMIZING THE ACTIVITY OF PROTEINS FIXED TO SURFACES
US8962293B2 (en) 2006-10-18 2015-02-24 Roche Molecular Systems, Inc. DNA polymerases and related methods
EP2089517A4 (en) * 2006-10-23 2010-10-20 Pacific Biosciences California POLYMERASEENZYME AND REAGENTS FOR ADVANCED NUCKIC ACID SEQUENCING
US20100081927A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Histological facilitation systems and methods
US20100081916A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware. Histological facilitation systems and methods
US20100081928A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Histological Facilitation systems and methods
US20100081915A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, Alimited Liability Corporation Of The State Of Delaware Histological facilitation systems and methods
US20100081924A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Histological facilitation systems and methods
US20100081926A1 (en) * 2008-09-29 2010-04-01 Searete Llc, A Limited Liability Corporation Of The State Of Delaware Histological facilitation systems and methods
FR2940291B1 (fr) 2008-12-23 2012-12-21 Isp Investments Inc Peptide derive d'hmg-coa reductase et composition cosmetique ou pharmaceutique le contenant
FR2940125B1 (fr) 2008-12-23 2013-03-22 Isp Investments Inc Composition cosmetique ou pharmaceutique apaisante comprenant un peptide activateur de la hmg-coa reductase
US8933036B2 (en) 2009-04-15 2015-01-13 Isp Investments Inc. Cosmetic and/or pharmaceutical composition comprising a yeast peptide hydrolysate and use of the yeast peptide hydrolysate as an active agent for strengthening hair
FR2944526B1 (fr) 2009-04-15 2013-05-10 Isp Investments Inc Composition cosmetique et/ou pharmaceutique comprenant un hydrolysat peptidique capable de renforcer la fonction barriere
FR2944445B1 (fr) 2009-04-15 2013-08-16 Isp Investments Inc Composition cosmetique et/ou pharmaceutique comprenant un hydrolysat peptidique apaisant
EP2582801B1 (en) 2010-06-18 2015-04-22 Roche Diagnostics GmbH Dna polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
WO2011157435A1 (en) 2010-06-18 2011-12-22 Roche Diagnostics Gmbh Dna polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
CA2802302C (en) 2010-06-18 2016-04-26 F. Hoffman-La Roche Ag Dna polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
CN103025869B (zh) 2010-06-18 2015-07-01 霍夫曼-拉罗奇有限公司 具有增强的3’-错配辨别力的dna聚合酶
WO2011157438A1 (en) 2010-06-18 2011-12-22 Roche Diagnostics Gmbh Dna polymerases with increasesed 3'-mismatch discrimination
WO2011157436A1 (en) 2010-06-18 2011-12-22 Roche Diagnostics Gmbh Dna polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
CN103025870B (zh) 2010-06-18 2015-07-01 霍夫曼-拉罗奇有限公司 具有增强的3’-错配辨别力的dna聚合酶
AU2011267421B2 (en) 2010-06-18 2014-04-24 F. Hoffmann-La Roche Ag DNA polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
EP2675897B1 (en) 2011-02-15 2016-05-11 Roche Diagnostics GmbH Dna polymerases with increased 3'-mismatch discrimination
JP6023173B2 (ja) 2011-04-11 2016-11-09 エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft 改良された活性を有するdnaポリメラーゼ
ES2553400T3 (es) 2011-07-28 2015-12-09 F. Hoffmann-La Roche Ag ADN polimerasas con actividad mejorada
ES2668448T3 (es) 2011-12-08 2018-05-18 F. Hoffmann-La Roche Ag ADN polimerasas con actividad mejorada
JP6140182B2 (ja) 2011-12-08 2017-05-31 エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft 改善された活性を有するdnaポリメラーゼ
EP2788480B1 (en) 2011-12-08 2019-01-16 Roche Diagnostics GmbH Dna polymerases with improved activity
WO2015026873A1 (en) 2013-08-19 2015-02-26 Singular Bio, Inc. Assays for single molecule detection and use thereof
US10329545B2 (en) 2014-11-14 2019-06-25 Illumina, Inc. Polymerases
EP3712261A1 (en) 2015-02-02 2020-09-23 F. Hoffmann-La Roche AG Polymerase variants and uses thereof
CN113528623A (zh) 2015-02-18 2021-10-22 卓异生物公司 用于单分子检测的测定及其应用
US10526588B2 (en) 2015-05-14 2020-01-07 Roche Sequencing Solutions, Inc. Polymerase variants and uses thereof
JP6963238B2 (ja) 2015-11-27 2021-11-05 国立大学法人九州大学 Dnaポリメラーゼ変異体
WO2020053327A1 (en) 2018-09-13 2020-03-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Mutant dna polymerase(s) with improved strand displacement ability
CN117083392A (zh) * 2021-03-19 2023-11-17 深圳华大智造科技股份有限公司 用于有效掺入核苷酸与3’-磷酸酯和其他3’-终止子的聚合酶

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5466591A (en) 1986-08-22 1995-11-14 Hoffmann-La Roche Inc. 5' to 3' exonuclease mutations of thermostable DNA polymerases
US4889818A (en) 1986-08-22 1989-12-26 Cetus Corporation Purified thermostable enzyme
CA2018273C (en) * 1989-06-09 1999-04-06 Peter D. Senter Thermally stable cytosine deaminase
US5338678A (en) * 1989-06-09 1994-08-16 Oncogen, A Limited Partnership Expression of DNA sequences encoding a thermally stable cytosine deaminase from saccharomyces
US5292658A (en) * 1989-12-29 1994-03-08 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Boyd Graduate Studies Research Center Cloning and expressions of Renilla luciferase
US6083686A (en) * 1990-10-26 2000-07-04 Johnson & Johnson Clinical Diagnostic Systems, Inc. Increased production of Thermus aquaticus DNA polymerase in E. coli
US5446591A (en) * 1993-02-08 1995-08-29 Lockheed Missiles & Space Co., Inc. Lens mounting for use with liquid lens elements
US5571706A (en) * 1994-06-17 1996-11-05 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Plant virus resistance gene and methods
US6015668A (en) * 1994-09-30 2000-01-18 Life Technologies, Inc. Cloned DNA polymerases from thermotoga and mutants thereof
US5614365A (en) 1994-10-17 1997-03-25 President & Fellow Of Harvard College DNA polymerase having modified nucleotide binding site for DNA sequencing
DE655506T1 (de) * 1994-10-17 1995-09-28 President And Fellows Of Harvard College, Cambridge, Mass. DNS Polymerase mit Veränderten Nukleotiden Bindungstelle.
US5852191A (en) * 1995-06-07 1998-12-22 Carnegie Mellon University Rigidized monomethine cyanines
US6107029A (en) * 1996-07-31 2000-08-22 Message Pharmaceticals, Inc. Universal method for detecting interactions between RNA molecules and RNA binding proteins
CZ293215B6 (cs) * 1996-08-06 2004-03-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Rekombinantní tepelně stálá DNA polymeráza, způsob její přípravy a prostředek, který ji obsahuje
US5723298A (en) * 1996-09-16 1998-03-03 Li-Cor, Inc. Cycle labeling and sequencing with thermostable polymerases
EP0983364B1 (en) 1997-03-12 2002-06-12 PE Corporation (NY) Dna polymerases having improved labeled nucleotide incorporation properties

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU98117244A (ru) Модифицированные термостабильные днк-полимеразы для секвенирования
RU2238978C2 (ru) Рекомбинантная термостабильная днк-полимераза, способ ее получения и применение
CA2222744C (en) Thermostable dna polymerases
KR100510619B1 (ko) 변형된 열안정성 디엔에이 폴리머라아제
Holland et al. The primary structure of a glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene from Saccharomyces cerevisiae.
US5614365A (en) DNA polymerase having modified nucleotide binding site for DNA sequencing
EP0655506B1 (en) DNA polymerases having modified nucleotide binding site for DNA sequencing
Devine et al. Differential expression of the members of the discoidin I multigene family during growth and development of Dictyostelium discoideum
WO1996012042A9 (en) Dna polymerases having modified nucleotide binding site for dna sequencing
RU97113529A (ru) Модифицированная термостабильная днк-полимераза
Catalano et al. Interaction of Escherichia coli DNA polymerase I with azidoDNA and fluorescent DNA probes: identification of protein-DNA contacts
MXPA97005961A (en) Thermostable dna polymerase, modification
Reichmann et al. RNA polymerase activity and poly (A) synthesizing activity in defective T particles of vesicular stomatitis virus
Burke et al. Restriction fragment primed ΦX174 single-stranded DNA as template for DNA polymerases α and β. Detection and partial purification of a polymerase α stimulating factor
Wu et al. Lactose operator–repressor interaction
Hübscher et al. Paradoxes of in Situ Polyacrylamide Gel Assays for DNA Polymerase Priming
Burger et al. Glucose Dehydrogenase as Detector Protein of Recombinant Fusion-Proteins Directly in SDS Gels