RU98113400A - Улучшенные иммортализованные клеточные линии кожи человека и не содержащая сыворотки среда для их получения - Google Patents

Улучшенные иммортализованные клеточные линии кожи человека и не содержащая сыворотки среда для их получения

Info

Publication number
RU98113400A
RU98113400A RU98113400/13A RU98113400A RU98113400A RU 98113400 A RU98113400 A RU 98113400A RU 98113400/13 A RU98113400/13 A RU 98113400/13A RU 98113400 A RU98113400 A RU 98113400A RU 98113400 A RU98113400 A RU 98113400A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
keratinocytes
medium
melanocytes
immortalized
cell line
Prior art date
Application number
RU98113400/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2215030C2 (ru
Inventor
Баур Маркус
Мас Катрин
Малне Арман
М.А.Пфайфер Андреа
Ренье Марсель
Original Assignee
Сосьете Де Продюи Нестле С.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сосьете Де Продюи Нестле С.А. filed Critical Сосьете Де Продюи Нестле С.А.
Publication of RU98113400A publication Critical patent/RU98113400A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2215030C2 publication Critical patent/RU2215030C2/ru

Links

Claims (30)

1. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов или меланоцитов человека, которая сохраняет способность дифференцировать и экспрессировать протеины и ферменты, которые экспрессируются нормальными дифференцированными кератиноцитами или меланоцитами даже после большого числа пассажей в культуре тканей.
2. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.1, отличающаяся тем, что указанная клеточная линия экспрессирует протеины кератина и другие протеины, которые экспрессируются нормальными дифференцированными кератиноцитами.
3. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.2, отличающаяся тем, что указанные протеины кератина включают кератин К1/10, кератин К14, а указанные другие протеины включают инволюкрин, филаггрин и лорикрин.
4. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.1, отличающаяся тем, что указанная клеточная линия иммортализованных кератиноцитов демонстрирует CYP450 профиль, который идентичен, или практически идентичен, профилю, характерному для нормальных дифференцированных кератиноцитов.
5. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п. 4, отличающаяся тем, что указанная клеточная линия экспрессирует CYP450 1А1, 2С, 2Е1 и 3А5, но не экспрессирует CYP450 1А2, 2А6, 2В6 и 2D6.
6. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов человека по п. 1, отличающаяся тем, что получена в условиях без сыворотки и без использования фидерных клеток.
7. Клеточная линия иммортализованных меланоцитов человека по п. 1, отличающаяся тем, что получена в условиях без сыворотки и без использования фидерных клеток.
8. SV40 Т-антиген иммортализованная клеточная линия кожи человека, выбранная из группы, состоящей из линий кератиноцитов DK2-NR (DSM АСС2238), DK3-NR (DSM АСС2239) и FK2-NR (DSM АСС2240) и линии меланоцитов DM2-NR, (CNCM I-1796).
9. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.1, отличающаяся тем, что экспрессирует мРНК, кодирующую глутатион-S-трансферазы GSTπ, GSTμ и GSTα.
10. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.1, отличающаяся тем, что при культивировании в органотипической культуре образует сильно расслоенный и поляризованный эпителий, содержащий ороговевшие поверхностные слои в отсутствии сыворотки или фидерных клеток.
11. Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов по п.1, отличающаяся тем, что экспрессирует коллагеназу типа 1 и TNFα при обработке сложными эфирами форбола.
12. Способ иммортализации клеток кожи человека для получения иммортализованных кератиноцитов и меланоцитов, отличающийся тем, что включает следующие стадии: (i) получения образца ткани кожи человека; (ii) подготовки указанного образца кожи для культивирования in vitro; (iii) получения кератиноцитов и/или меланоцитов из указанного подготовленного образца кожи и посева указанных кератиноцитов и/или меланоцитов на не содержащую сыворотки среду для выращивания, на культуральные пластины, снабженные покрытием, включающим фибронектин, коллаген типа 1 и BSA, которые облегчают прикрепление клеток и их рост; (iv) замену среды при необходимости для оптимизации конфлюэнтного роста культивируемых клеток при постоянном сохранении покрытия на пластинах с культурами; (v) переноса кератиноцитов или меланоцитов в не содержащую сыворотки селекционную среду на аналогичным образом предварительно покрытые культуральные пластины; (vi) инфицирования кератиноцитов или меланоцитов ретровирусной конструкцией; (vii) переноса полученных иммортализованных кератиноцитов или меланоцитов на не содержащую сыворотки пролиферационную среду, подходящую для пролиферации иммортализованных кератиноцитов или меланоцитов на аналогичным образом предварительно покрытых культуральных пластинах; и (viii) переноса полученных пролиферированных кератиноцитов на не содержащую сыворотки дифференцирующую среду с высоким содержанием кальция на аналогичным образом предварительно покрытые культуральные пластины.
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что ретровирусной конструкцией является SV40 конструкция pLXSHD+SV40( 328) или HPV16 конструкция pLXSHD+E6/E7.
14. Способ по п.12, отличающийся тем, что не содержащей сыворотки средой на стадии (iii) является NR-3 среда.
15. Способ по п.12, отличающийся тем, что средой на стадии (v) является NR-3 среда или NR-4 среда.
16. Способ по п. 12, отличающийся тем, что пролиферационной средой на стадии (vii) является NR-2 среда или NR-3 среда и М2 среда для меланоцитов.
17. Способ по п. 12, отличающийся тем, что дифференцирующей средой на стадии (viii) является NR-2 среда или модифицированная MCDB 153 среда, которая содержит кальций в количестве, по крайней мере, 1,5 мМ.
18. Новая, не содержащая сыворотки, среда, пригодная для выделения и продуцирования кератиноцитов и меланоцитов человека, которые сохраняют способность дифференцировать и экспрессировать протеины и ферменты дифференцированных кератиноцитов и меланоцитов человека даже после большого числа пассажей, которая включает: аминокислоты или соли аминокислот; неорганические соли; витамины; аденин, этаноламин, глюкозу, HEPES, фенол красный, путресцин 2НС1, тиоктовую кислоту, тиамин НСl, тимидин, эпидермальный фактор роста; инсулин; гидрокортизон; трансферрин; фосфоэтаноламин; и экстракт бычьего гипофиза.
19. Среда по п.18, отличающаяся тем, что содержит эпинефрин.
20. Среда по п.19, отличающаяся тем, что концентрация эпинефрина достаточна для усиления роста кератиноцитов.
21. Среда по п.18, отличающаяся тем, что аминокислоты, содержащиеся в среде, выбирают из группы, состоящей из L-аланина, L-аргинина-НСl, аспарагина-Н2О, L-аспарагиновой кислоты, L-цистеин-НСl-Н2O, L-глутаминовой кислоты, глутамина, глицина, L-гистидин-НСl-Н2O, L-изолейцина, L-лейцина, L-лизин-HCl, L-метионина, L-фенилаланина, L-пролина, L-серина, L-треонина, L-триптофана, L-тирозина, L-валина и их солей.
22. Среда по п.18, отличающаяся тем, что неорганические соли выбирают из группы, состоящей из метаванадата аммония, молибдата аммония, хлорида кальция, сульфата меди(2), сульфата железа (3), хлорида магния, хлорида марганца, сульфата никеля, хлорида калия, ацетата натрия, бикарбоната натрия, хлорида натрия, двухосновного фосфата натрия, пирувата натрия, селенита натрия, силиката натрия, хлорида олова и сульфата цинка.
23. Способ по п.18, отличающийся тем, что витамины выбирают из группы, состоящей из d-биотина, d-кальцийпантотената, холинхлорида, цианокобаламина, фолиевой кислоты, i-инозитола, никотинамида, пиридоксина и рибофлавина.
24. Новая, не содержащая сыворотки среда, отличающаяся тем, что предназначена для выделения, продуцирования и/или поддержания иммортализованных кератиноцитов и/или меланоцитов, которую выбирают из группы, состоящей из NR-2 среды, NR-3 среды и NR-4 среды.
25. Анализ, который использует дифференцированные кератиноциты и/или меланоциты, в котором усовершенствование включает использование иммортализованных кератиноцитов и/или меланоцитов по п.1.
26. Анализ по п.25, отличающийся тем, что клетки выбирают из группы, состоящей из DK2-NR (DSM АСС2238), DK3-NR (DSM АСС2239), DM2-NR (CNCM 1-1796) и FK2-NR (DSM АСС 2240).
27. Способ по п.24, отличающийся тем, что указанный анализ представляет анализ воспалений.
28. Анализ, в котором используют первичные меланоциты или кератиноциты, отличающийся тем, что усовершенствование включает использование первичных меланоцитов или кератиноцитов, полученных по п.12 (iii).
29. Анализ по п.28, отличающийся тем, что указанный анализ является анализом воспалений.
30. Способ трансплантации кожи, отличающийся тем, что усовершенствование включает использование в качестве трансплантируемой кожной ткани первичных кератиноцитов или меланоцитов, полученных по п.12 (iii).
RU98113400/13A 1995-12-21 1996-12-19 Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов и меланоцитов (варианты), способ иммортализации клеток кожи человека для получения иммортализованных кератиноцитов, способ иммортализации клеток кожи человека для получения иммортализованных меланоцитов, бессывороточная среда (варианты), анализ кожных реакций RU2215030C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US57648395A 1995-12-21 1995-12-21
US08/576,483 1995-12-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU98113400A true RU98113400A (ru) 2000-10-20
RU2215030C2 RU2215030C2 (ru) 2003-10-27

Family

ID=24304605

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU98113400/13A RU2215030C2 (ru) 1995-12-21 1996-12-19 Клеточная линия иммортализованных кератиноцитов и меланоцитов (варианты), способ иммортализации клеток кожи человека для получения иммортализованных кератиноцитов, способ иммортализации клеток кожи человека для получения иммортализованных меланоцитов, бессывороточная среда (варианты), анализ кожных реакций

Country Status (23)

Country Link
US (2) US6423540B2 (ru)
EP (2) EP0780469B1 (ru)
JP (1) JP4404965B2 (ru)
KR (1) KR100455006B1 (ru)
CN (1) CN1154717C (ru)
AT (1) ATE199390T1 (ru)
AU (1) AU730222B2 (ru)
BR (1) BR9612256B1 (ru)
CA (1) CA2234118C (ru)
CZ (1) CZ297289B6 (ru)
DE (1) DE69611894T2 (ru)
DK (1) DK0780469T3 (ru)
ES (1) ES2155166T3 (ru)
GR (1) GR3035719T3 (ru)
HU (1) HU226195B1 (ru)
IL (1) IL124191A (ru)
NO (1) NO326190B1 (ru)
NZ (1) NZ325814A (ru)
PL (1) PL195108B1 (ru)
PT (1) PT780469E (ru)
RU (1) RU2215030C2 (ru)
SK (1) SK283314B6 (ru)
WO (1) WO1997023602A1 (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4404965B2 (ja) * 1995-12-21 2010-01-27 ソシエテ デ プロデユイ ネツスル ソシエテ アノニム 改良した、不死化したヒト皮膚細胞系およびその生産に有用な新規無血清培地
CA2324479C (en) * 1998-04-17 2007-12-04 Societe Des Produits Nestle S.A. Immortalised cell line derived from normal human skin tissues
US6964869B2 (en) 1998-07-13 2005-11-15 Wisconsin Alumni Research Foundation Method and composition for skin grafts
CN1087778C (zh) * 1999-03-02 2002-07-17 华东理工大学 杂交瘤细胞无血清培养基
DE19912798C1 (de) * 1999-03-10 2000-02-17 Andreas Jordan Verfahren zur Kultivierung von Krebszellen aus Humangewebe und Vorrichtung zur Aufbereitung von Gewebeproben
AUPR298901A0 (en) 2001-02-07 2001-03-08 McComb Foundation, Inc., The Cell suspension preparation technique and device
NZ529035A (en) * 2001-04-24 2007-01-26 Wisconsin Alumni Res Found Chimeric skin comprised of human immortalised keratinocyte cells and human donor cells for use in skin grafting and plastic surgery methods
WO2002091999A2 (en) 2001-05-09 2002-11-21 Geron Corporation Treatment for wounds
US20030022369A1 (en) * 2001-05-18 2003-01-30 Helen Fillmore Differentiation of specialized dermal and epidermal cells into neuronal cells
EP1417629B1 (en) * 2001-07-06 2008-02-20 Lipomics Technologies, Inc. Generating, viewing, interpreting, and utilizing a quantitative database of metabolites
GB0208041D0 (en) 2002-04-08 2002-05-22 Lonza Biologics Plc Method of culturing animal cells
US20050025737A1 (en) * 2003-07-30 2005-02-03 Sebagh Jean Louis Compositions containing melon extracts
WO2005028626A2 (en) * 2003-09-18 2005-03-31 Raven Biotechnologies, Inc. Cell culture media
WO2005071065A1 (en) * 2004-01-26 2005-08-04 Cognis France S.A.S Method for studying functional interactions between sensory neurons and keratinocytes or melanocytes
CA2601595C (en) 2005-03-17 2015-02-24 Stratatech Corporation Skin substitutes with improved purity
DE602007008627D1 (de) * 2006-02-14 2010-10-07 Genetix Ltd Zellkulturmedium
US8637310B2 (en) 2008-12-05 2014-01-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Use of a rock inhibitor to sustain primary human keratinocytes in a proliferative state
US20120142103A1 (en) * 2009-05-18 2012-06-07 Kohji Nishida Method for inducing differentiation into epithelial progenitor cell/stem cell population and corneal epithelial cell population from induced pluripotent stem cells
KR101768632B1 (ko) * 2011-05-18 2017-08-17 (주)아모레퍼시픽 칼슘 펄스를 통한 배양상피세포층의 분리방법
DK2732027T3 (en) * 2011-07-12 2017-05-22 Foodchek Systems Inc CULTIVATION MEDIUM, METHOD OF CULTIVATING SALMONELLA AND E. COLI AND METHOD OF DETERMINING SALMONELLA AND E. COLI
WO2013129885A1 (ko) * 2012-02-28 2013-09-06 건국대학교 산학협력단 세포 배양액
JP6414945B2 (ja) 2013-03-11 2018-10-31 Jcrファーマ株式会社 ヒト角膜上皮シートの製造法
AU2013205148B2 (en) 2013-03-14 2014-10-30 AVITA Medical Americas, LLC Systems and methods for tissue processing and preparation of cell suspension therefrom
WO2016085304A1 (ko) * 2014-11-28 2016-06-02 (주)아모레퍼시픽 멜라닌 세포주 계대배양계 및 이를 이용한 노화 수준 판단, 미용 정보 제공, 또는 스크리닝 방법
GB2547605A (en) * 2015-01-26 2017-08-23 Halliburton Energy Services Inc Rotating superhard cutting element
CN105238739A (zh) * 2015-11-11 2016-01-13 朱宁文 临床治疗级细胞治疗用黑色素细胞(melanocytes)规模化制备人类细胞外基质筛选培养方法
CN106520674A (zh) * 2016-12-24 2017-03-22 严志海 一种用于表皮黑素细胞体外培养的无血清培养基
CN107115219A (zh) * 2017-05-12 2017-09-01 青岛赛欧凯普图乐生物医药有限公司 一种纤维芽母细胞活化液面膜配方
CN114058565A (zh) * 2020-07-31 2022-02-18 上海尚瑞生物医药科技有限公司 一种无血清的黑素母细胞培养液及其培养方法
KR102583179B1 (ko) * 2020-11-27 2023-09-26 (주)엑셀세라퓨틱스 칼슘, 상피세포성장인자 및 알부민을 포함하는 각질형성세포 수립 또는 배양용 배지 조성물

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4940666A (en) * 1983-07-15 1990-07-10 University Patents, Inc. Process and defined medium for growth of human epidermal keratinocyte cells
US4885238A (en) 1987-10-30 1989-12-05 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Immortalized human bronchial epitherial mesothelial cell lines
US5292655A (en) * 1990-01-29 1994-03-08 Wille Jr John J Method for the formation of a histologically-complete skin substitute
US5376542A (en) 1992-04-27 1994-12-27 Georgetown University Method for producing immortalized cell lines using human papilluma virus genes
EP0757558A4 (en) * 1994-04-12 1999-06-16 Alza Corp METHOD FOR DETECTING AGENTS THAT MODULATE AN INFLAMMATORY SKIN REACTION
DE19617261A1 (de) * 1995-04-21 1996-11-28 Naeher Helmut Dr Med Priv Doz Hautverträglichkeitstest
JP4404965B2 (ja) * 1995-12-21 2010-01-27 ソシエテ デ プロデユイ ネツスル ソシエテ アノニム 改良した、不死化したヒト皮膚細胞系およびその生産に有用な新規無血清培地

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU98113400A (ru) Улучшенные иммортализованные клеточные линии кожи человека и не содержащая сыворотки среда для их получения
AU730222B2 (en) Improved immortalized human skin cell lines and novel serum-free medium useful for the production thereof
Reid et al. Culturing hepatocytes and other differentiated cells
CA2807418C (en) Simplified basic media for human pluripotent cell culture
US5143842A (en) Media for normal human muscle satellite cells
US5342777A (en) Cell culture medium for human liver epithelial cell line
US7462487B2 (en) Cell culture media
US11485955B2 (en) Formula of serum-free medium for human pluripotent stem cells
JP2000506374A5 (ru)
US9644186B2 (en) Simplified basic media for human pluripotent cell culture
Ham Dermal fibroblasts
AU756151B2 (en) Immortalised cell lines derived from normal human skin tissues
Taylor et al. Modulation of epithelial cell proliferation in culture by dissolved oxygen
Utesch et al. Dependency of the in vitro stabilization of differentiated functions in liver parenchymal cells on the type of cell line used for co-culture
IL292933A (en) Serum-free human pluripotent stem cell culture medium
Agy et al. Protein-free medium for C-1300 mouse neuroblastoma cells
US5916809A (en) Medium for culturing normal human epidermal melanocytes
JP2024009995A (ja) ペプチド、細胞増殖促進剤、タンパク質産生促進剤、培地、該ペプチドを用いた細胞増殖方法、及び、該ペプチドを用いたタンパク質産生方法
Groopman et al. A NON-TUMORIGENIC HUMAN LIVER EPITHELIAL CELL CULTURE MODEL FOR CHEMICAL AND BIOLOGICAL CARCINOGENESIS INVESTIGATIONS