RU2647368C2 - Композиция бендамустина и циклополисахарида - Google Patents

Композиция бендамустина и циклополисахарида Download PDF

Info

Publication number
RU2647368C2
RU2647368C2 RU2013107115A RU2013107115A RU2647368C2 RU 2647368 C2 RU2647368 C2 RU 2647368C2 RU 2013107115 A RU2013107115 A RU 2013107115A RU 2013107115 A RU2013107115 A RU 2013107115A RU 2647368 C2 RU2647368 C2 RU 2647368C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
cyclodextrin
bendamustine
cyclopolysaccharide
beta
composition
Prior art date
Application number
RU2013107115A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2013107115A (ru
Inventor
Алахов Валерий
Пиетрзински Грзегорз
Пател Кишоре
Попек Томаз
Original Assignee
Софткемо Фарма Корп.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Софткемо Фарма Корп. filed Critical Софткемо Фарма Корп.
Publication of RU2013107115A publication Critical patent/RU2013107115A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2647368C2 publication Critical patent/RU2647368C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/16—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой композицию для противоопухолевой терапии, включающую бендамустин; первый заряженный циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну заряженную анионную группу, выбранную из сульфата и сульфонила, в частности сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина; и стабилизирующий агент, который представляет собой второй циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну группу, выбранную из амина, гуанидина и четвертичного аммония, в частности гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин. Композиция имеет неожиданно высокую стабильность в условиях реакционно-активной окружающей среды, например в плазме, в сочетании с неожиданно высокой противоопухолевой активностью. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 2 табл., 3 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей бендамустин, первый заряженный циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну заряженную группу; и стабилизирующий агент, который представляет собой второй заряженный циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну заряженную группу с зарядом, противоположным заряду первого заряженного циклополисахарида.
Уровень техники
Бендамустин, 4-[5-[бис(2-хлорэтил)амино]-1-метилбензимидазол-2-ил]бутановая кислота, используется для лечения лейкозов и определенных видов лимфом. Однако указанное соединение имеет ограниченную химическую стабильность в плазме, что требует введения более высоких или повторных доз препарата для достижения лечебного эффекта. Таким образом, существует необходимость создания новых лекарственных форм данного средства, которые будут обладать улучшенной стабильностью.
Осуществлялись попытки улучшить стабильность бендамустина за счет объединения его в комплекс с полимерными материалами. Однако указанный подход позволил достичь лишь ограниченного эффекта. Pencheva и соавт. ("HPLC исследование стабильности бендамустин гидрохлорида, иммобилизованного с полифосфоэфирами"; J. Pharma. Biomed. Anal., 2008), предприняли попытку увеличить стабильность бендамустина путем объединения его в комплекс с полифосфоэфирами. Однако на Рис.2 указанной статьи показано, что даже самый стабильный комплекс распадается на один порядок величины в течение 45 минут при рН 7.
Evjen ("Разработка улучшенных бендамустинсодержащих липосом", Masters Thesis, University of Tromso, 2007) применял двойное асимметричное центрифугирование для включения бендамустина в липосомы. Согласно данным табл.18 (стр.79) указанные композиции обеспечивают только незначительное увеличение стабильности свободного бендамустина (период полураспада 20 минут против периода полураспада 14 минут для свободного бендамустина, растворенного в клеточной культуральной среде).
В заявке на патент США No. 12/711,979 ("Композиции Бенадамустина и Циклополисахарида") описываются определенные композиции бендамустина, включающие: (а) бендамустин, (b) заряженный циклополисахарид и (с) стабилизирующий агент, имеющий заряд, противоположный заряду циклополисахарида. Указанные композиции демонстрируют стабильность в сочетании с высокой противоопухолевой активностью; считается, что указанные преимущества обусловлены формированием структуры, которая защищает бендамустин от воздействия реакционно-активной окружающей среды. Считают, что структура, описанная в заявке на патент США No. 12/711,979, включает образование бочкообразной структуры, при этом молекула бендамустина заключена в углубление молекулы циклополисахарида, и стабилизирующий агент выступает в роли "крышки", изолирующей выступающий участок молекулы. Хотя в указанной заявке описывается множество стабилизирующих агентов, в ней не раскрывается использование заряженных циклополисахаридов в качестве таких стабилизирующих агентов. Учитывая кольцеобразную форму указанных молекул, трудно ожидать, что такие молекулы могут эффективно выполнять функцию "крышки" для "бочки", образуемой первым циклополисахаридом.
Таким образом, существует необходимость в поиске новых стабилизирующих агентов, которые могут эффективно функционировать в паре с первым заряженным циклополисахаридом.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение относится к композиции, включающей:
(а) бендамустин; (б) первый заряженный циклополисахарид, включающий, по крайней мере, одну заряженную группу; и (с) стабилизирующий агент, который представляет собой второй циклополисахарид, включающий, по крайней мере, одну заряженную группу, имеющую заряд, противоположный заряду первого заряженного циклополисахарида.
Композиция, в соответствии с настоящим изобретением, обеспечивает неожиданно высокую стабильность бендамустина в условиях реакционно-активной окружающей среды, такой как плазма, в сочетании с неожиданно высокой противоопухолевой активностью. Композиция подходит для инъекционного введения или инфузии пациентам, нуждающимся в лечении бендамустином.
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение относится к композиции, включающей:
(а) бендамустин; (б) первый заряженный циклополисахарид, включающий, по крайней мере, одну заряженную группу; и (с) стабилизирующий агент, который представляет собой второй циклополисахарид, включающий, по крайней мере, одну заряженную группу, имеющую заряд, противоположный заряду первого заряженного циклополисахарида.
Используемый здесь термин "бендамустин" относится к 4-[5-[бис(2-хлорэтил)амино]-1-метилбензимидазол-2-ил]бутановой кислоте, а также ее фармацевтически приемлемым солям, включая бендамустина гидрохлорид. Предпочтительно, соотношение бендамустина и первого заряженного циклополисахарида, по весу, составляет приблизительно от 1:5000 до приблизительно 1:5; более предпочтительно составляет приблизительно от 1:1000 до приблизительно 1:8; еще более предпочтительно составляет приблизительно от 1:500 до приблизительно 1:10, наиболее предпочтительно приблизительно от 1:100 до приблизительно 1:10.
Стабилизирующий агент обычно присутствует в композиции в весовом соотношении с первым циклополисахаридом, составляющим приблизительно от 5:1 до приблизительно 1:1000; предпочтительно от 1:4 до приблизительно 1:100.
Циклополисахариды
К циклополисахаридам, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, относятся циклодекстрины, цикломаннины, циклоалтрины, циклофруктаны и им подобные соединения. В целом, циклополисахариды, включающие от 6 до 8 молекул сахара, являются предпочтительными.
К предпочтительным циклополисахаридам относится циклодекстрин. Циклодекстрин представляет собой циклическую олиго-1-4-альфа-D-глюкопиранозу, состоящую, по крайней мере, из 6 единиц сахара. Наиболее известны циклодекстрины, включающие шесть, семь или восемь единиц сахара. Циклодекстрины, включающие шесть единиц сахара известны как альфа-цикл одекстрины; те, которые содержат семь единиц сахара известны как бета-циклодекстрины, а соединения, включающие восемь единиц сахара, известны как гамма-циклодекстрины. Наиболее предпочтительными являются бета-циклодекстрины.
Циклополисахариды, которые используются в соответствии с настоящим изобретением как в качестве первого циклополисахарида, так и в качестве стабилизирующего агента, представляют собой заряженные циклополисахариды. Термин "заряженные циклополисахариды" относится к циклополисахаридам, в которых одна или более гидроксильных групп замещены заряженной молекулой. Такая молекула сама по себе может представлять собой заряженную группу либо иметь в своем составе органическую молекулу (например, C1-C6 алкил или C1-C6 эфир-алкильную группу), замещенную одной или более заряженной молекулой. В случае если первый заряженный циклополисахарид замещен анионной группой, стабилизирующий агент представляет собой катионный полисахарид. Наоборот, в случае если первый заряженный циклополисахарид замещен катионной группой, стабилизирующий агент представляет собой анионный циклополисахарид.
Также анионный циклополисахарид может включать любую анионную группу или комбинацию указанных групп, предпочтительно, чтобы анионный циклополисахарид включал карбоксильную, сульфонильную или сульфатную группу. К предпочтительным анионным циклополисахаридам относятся сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина, натриевая соль карбоксиметил-бета-циклодекстрина, натриевая соль O-фосфат-бета-циклодекстрина, сукцинил-(2-гидрокси)пропил-бета-циклодекстрин, натриевая соль сульфопропил-бета-циклодекстрина, а также натриевая соль 0-сульфатил-бета-циклодекстрина. Наиболее предпочтительным является сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина.
Также катионный циклополисахарид может включать любую катионную группу или комбинацию указанных групп, предпочтительно, чтобы катионный циклополисахарид включал амино-группу, гуанидиновую группу или четвертичную аммониевую группу. Подходящими амино-циклодекстринами, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, являются амино-альфа-циклодекстрины, амино-бета-циклодекстрины и амино-гамма-циклодекстрины, предпочтительно имеющие уровень замещения приблизительно от 8 до приблизительно 10. Предпочтительными амино-циклодекстринами указанного типа являются гексакис(6-амино-6-деокси)альфа-циклодекстрин, гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин, октакис(6-амино-6-деокси)гамма-циклодекстрин. К другим катионным циклополисахаридам, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, относятся гуанидин-циклодекстрины, предпочтительно имеющие уровень замещения приблизительно от 4 до приблизительно 10, такие как гептакис (6-гуанидин-6-деокси)бета-циклодекстрин; алкиламино-циклодекстрины, предпочтительно имеющие уровень замещения приблизительно от 4 до приблизительно 10, такие как 6-деокси-6-(3-гидрокси)пропиламино бета-циклодекстрин; алкиламмоний-циклодекстрины, предпочтительно имеющие уровень замещения приблизительно от 4 до приблизительно 9, такие как, 2-гидрокси-N,N,N-триметилпропанаммоний-циклодекстрин.
Наиболее предпочтительными катионными полисахаридами являются гептакис(6-амино-6-деокси)альфа-циклодекстрин, гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин, октакис(6-амино-6-деокси)гамма-циклодекстрин; гептакис(6-гуанидино-6-деокси)бета-циклодекстрин.
Согласно одному из вариантов осуществления изобретения первый заряженный циклополисахарид представляет собой сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина, а стабилизирующий агент представляет собой гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин.
Эксципиенты
Композиция, заявленная в соответствии с настоящим изобретением, также может содержать фармацевтически приемлемые эксципиенты, такие как сахара, полиспирты, растворимые полимеры, соли и липиды.
К сахарам и полиспиртам, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, относятся лактоза, сахароза, маннитол и сорбитол. Примерами растворимых полимеров, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, являются полиоксиэтилен, полиоксамеры, поливинилпирролидон и декстран.
К солям, которые подходят для использования в соответствии с настоящим изобретением, являются, без ограничений указанными, хлорид натрия, хлорид магния и хлорид кальция.
К липидам, которые могут использоваться в соответствии с настоящим изобретением, относятся, без ограничений указанными, сложные эфиры жирных кислот, гликолипиды, фосфолипиды.
Приготовление
Композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть приготовлена путем растворения твердого бендамустина в водном растворе первого заряженного циклополисахарида или путем смешивания водного раствора первого заряженного циклополисахарида с водным базовым раствором бендамустина. Полученную смесь перемешивают и, при небхдимости, подвергают воздействию ультразвуковых волн для получения гомогенного и уравновешенного водного раствора. В том случае, когда циклополисахарид представлен циклодекстрином, предпочтительно, чтобы водный раствор циклодекстрина, используемый для приготовления композиции, содержал, по крайней мере, 4% циклодекстрина; более предпочтительно, указанный раствор содержит, по крайней мере, 10% циклодекстрина.
Стабилизирующий агент и эксципиент (если он присутствует), предпочтительно, вводят в композицию путем их добавления к предварительно приготовленному водному гомогенному и уравновешенному раствору бендамустина с первым заряженным циклополисахаридом. Указанные агенты могут добавляться в форме твердых соединений или в форме растворов. Предпочтительно конечную композицию фильтруют перед инъекционным использованием.
Композиция может по желанию быть лиофилизирована для получения твердого материала, подходящего для растворения в инъекционной среде перед введением. Предпочтительно, чтобы композиция, содержащая амины в качестве стабилизирующих агентов, подвергалась лиофилизации перед добавлением указанного стабилизирующего агента, а указанный стабилизирующий агент добавлялся бы в композицию после ее восстановления, непосредственно перед введением пациенту.
Согласно одному варианту осуществления изобретения композицию получают путем смешивания компонентов с последующей инкубацией.
Согласно другому варианту осуществления изобретения композицию получают путем смешивания компонентов с последующей обработкой ультразвуком.
Согласно еще одному варианту осуществления изобретения композицию получают путем смешивания компонентов с последующей инкубацией и лиофилизацией продукта.
Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения композицию получают путем смешивания компонентов с последующей обработкой ультразвуком полученной смеси и лиофилизацией готового продукта.
Композиции в соответствии с настоящим изобретением демонстрируют улучшенную стабильность при попадании в плазму как in vitro, так и in vivo. Следовательно, такие композиции будут иметь период полураспада в плазме, который превышает период полураспада свободного бендамустина; таким образом, период полураспада может быть увеличен, по крайней мере, приблизительно на 10%, по крайней мере, приблизительно на 25%, по крайней мере, приблизительно на 30% или приблизительно на 100% или больше.
Кроме того, композиции в соответствии с настоящим изобретением демонстрируют неожиданно повышенную противоопухолевую активность по сравнению с композициями, содержащими бендамустин и циклополисахарид, а также по сравнению со свободным бендамустином.
Настоящее изобретение далее иллюстрируют представленные ниже примеры, при этом должно быть понятно, что данные примеры включены в настоящее описание только с целью иллюстрации изобретения и никоим образом не ограничивают его сущность. Все проценты, соотношения, а также их части, в описании, примерах и формуле изобретения представлены по весу (массе) и являются приблизительными величинами, если специальным образом не оговаривается иное.
Примеры
Пример 1. Получение композиции бендамустина, содержащей натриевую соль сульфобутилового эфира β-циклодекстрина (SBCED, Sodium Sulfobutyl Ether β-CycloDexgtrin) и гептакис(6-амино-6-деокси)-бета-циклодекстрина гидрохлорид (H6A).
Композиция, включающая 2,5 мг/г бендамустина HCl, 20% SBECD и 1% H6A.
Все процедуры осуществляли при комнатной температуре. 3917 мг воды добавляли к 1000 мг раствора натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина и полученную смесь перемешивали до полного растворения твердого вещества. 12,5 мг бендамустин гидрохлорида и 21 мг маннитола добавляли к раствору и смесь перемешивали в течение 2 часов. К раствору добавляли 50 мг H6A и полученную смесь перемешивали в течение 15 минут. Полученный раствор фильтровали через 0,2 мкм нейлоновый фильтр. Композиция, включающая 2,5 мг/г бендамустина HCl, 20% SBECD и 2% H6A Все процедуры осуществляли при комнатной температуре. 3867 мг воды добавляли к 1000 мг раствора натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина и полученную смесь перемешивали до полного растворения твердого вещества. 12,5 мг бендамустин гидрохлорида и 21 мг маннитола добавляли к раствору и смесь перемешивали в течение 2 часов. К раствору добавляли 100 мг Н6А и полученную смесь перемешивали в течение 15 минут. Полученный раствор фильтровали через 0,2 мкм нейлоновый фильтр. Композиция, включающая 13 мг/г бендамустина HCl, 20% SBECD и 1% H6A
Все процедуры осуществляли при комнатной температуре. 400 мг воды добавляли к 200 мг раствора натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина и полученную смесь перемешивали до полного растворения твердого вещества. 13 мг бендамустин гидрохлорида и 22,1 мг маннитола добавляли к раствору и все перемешивали в течение 2 часов. 10 мг H6A растворяли в 355 мг воды, полученный раствор H6A добавляли к предварительно полученному раствору SBECD, бендамустина и маннитола, конечную смесь перемешивали в течение 15 минут. Полученный раствор фильтровали через 0,2 мкм нейлоновый фильтр.
Пример 2. Фармакокинетика бендамустина при введении крысам в составе композиции, включающей натриевую соль сульфобутилового эфира β-циклодекстрина и гептакис(6-амино-6-деокси-Р-циклодекстрин).
Тестируемые композиции:
Контроль: 2,5 мг/г бендамустин гидрохлорида, 4,25 мг/г маннитола в 0,9% NaCl; доза 10 мг/кг.
Композиция 1: 2,5 мг/г бендамустин гидрохлорида, 20% вес/вес раствора натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина, 1% гептакис(6-амино-6-деокси-β-циклодекстрина), 4,3 мг/г маннитола в воде (получена в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1); доза 10 мг/кг.
Композиция 2: 2,5 мг/г бендамустин гидрохлорида, 20% вес/вес натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина, 2% гептакис(6-амино-6-деокси-β-циклодекстрина), 4,3 мг/г маннитола в воде (получена в соответствии с процедурой, описанной в Примере 1); доза 10 мг/кг.
Композиция А: 5 мг/мл бендамустин гидрохлорида, 20% вес/вес раствора натриевой соли сульфобутилового эфира β-циклодекстрина, 10,2 мг/г маннитола в воде; доза 10 мг/кг.
Животные: Крысы женского пола линии Sprague-Dawley (250-350 г).
Животных содержали по три особи в клетке, оборудованной воздушным фильтром и освещением (цикл день/ночь 12 ч, свет включали в 06:00) в условиях контролируемой температуры 22°C±1°C. Все манипуляции с животными осуществляли под стерильным ламинарным потоком. Животные имели свободный доступ к корму для мышей марки Пурина и воде. Перед введением композиций животных оставляли голодными на протяжении ночи, после чего осуществляли анестезию.
Введение доз и получение образцов:
Композиции бендамустина и контроль вводили животным внутривенно в хвостовую вену. Образцы крови забирали через 5, 15, 30, 45 минут и 1, 1,5, 2, 3 и 4 часа после инъекции. Анестезию осуществляли путем ингаляционного наркоза изофлураном. Образцы крови забирали из яремной вены в гепаринизированные пробирки и полученные образцы держали на льду. Кровь немедленно центрифугировали, а плазму отделяли. Образцы плазмы немедленно экстрагировали.
Экстракция образцов и анализ:
Образцы плазмы объемом 0,100 мл переносили в пластиковые пробирки. Образцы экстрагировали 0,400 мл 100 мМ HCl в ацетонитриле с одновременным интенсивным перемешиванием в течение 30 секунд. Затем образцы центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 минут. Супернатант отделяли. Образцы замораживали на сухом льду и хранили при температуре -80°C до анализа при помощи HPLC. Для HPLC анализа отбирали аликвоты объемом 20 мкл.
Условия осуществления HPLC:
Колонка с обратной фазой C18 50×4,6 мм, Symmetry/Shield 3,5 мкм
Температура колонки: 30°C
Скорость потока: 1,5 мл/мин
Вводимый объем: 20 микролитров
Регистрация флуоресценции при длине волны: возбуждение 237 нм, эмиссия 420 нм
Мобильная фаза:
Буфер А: 5% ацетонитрила, 0,1% TFA
Буфер Б: 90% ацетонитрила, 0,1% TFA
Время пробега: 10 мин
Улучшенные фармакокинетические профили бендамустина в составе тестируемых композиций по сравнению с контролем представлены в Таблице 1 ниже.
Таблица 1.
Концентрация бендамустина в плазме крыс в зависимости от времени после инъекции
Время (часы) Контроль [нг/мл] Композиция 1 [нг/мл] Композиция 2 [нг/мл] Композиция А [нг/мл]
Среднее (SEM) Среднее (SEM) Среднее (SEM) Среднее (SEM)
0,08 6045 (388) 4855 (724) 6104 (432) 5233 (143)
0,25 2428 (250) 2326 (270) 4045 (338) 1702 (217)
0,5 520 (105) 1428 (85) 1964 (344) 307 (73)
0,75 145 (35) 698 (73) 902 (190) 72 (25)
1 48 (11) 346 (22) 625 (231) 36 (17)
1,5 8 (1) 153 (11) 221 (99) 16 (10)
2 2 (1) 29 (4) 94 (42) 5 (4)
3 0 (1) 3 (1) 18 (10) 0 (0)
4 1 (0,4) 3 (2)
SEM - стандартное отклонение от средней величины
Представленные выше данные свидетельствуют о том, что фармакокинетика бендамустина существенно пролонгируется в том случае, если лекарственное средство вводится субъектам в составе композиции в соответствии с настоящим изобретением. Представленные выше данные также свидетельствуют о том, что фармакокинетика бендамустина существенно увеличивается при добавлении в композицию H6A.
Пример 3. Эффект бендамустина в составе композиции, содержащей натриевую сольсульфобутилового эфира β-циклодекстрина и гептакис(6-амино-6-деокси-β-циклодекстрин), на рост подкожных солидных опухолей карциномы молочной железы человека клеточной линии MDA-MB-231 у мышей Balb/c.
Животные:
Мыши Balb/c в возрасте 5-6 недель были получены из лаборатории Charles River Canada Inc. Животных содержали по пять особей в клетке, оборудованной воздушным фильтром и освещением (цикл день/ночь 12 ч, свет включали в 06:00) в условиях контролируемой температуры (22°C±1°C). Все манипуляции с животными осуществляли под стерильным ламинарным потоком. Животные имели свободный доступ к корму для мышей марки Пурина (Pro Lab PMH 4018, Trademark of Agway, Syracuse, New York) и воде. Все исследования на животных осуществляли согласно "Руководству по работе с экспериментальными животными".
Культура опухолевых клеток:
Клетки карциномы молочной железы человека линии MDA-MB 231 выращивали в подходящей культуральной среде. Клетки собирали во время фазы логарифмического роста для получения препарата для опухолевой имплантации. Имплантация опухолевых клеток:
Клетки линии MDA-MB 231 (5,0×105 клеток на одну инъекцию) в культуральной среде с 30% Matrigel подкожно вводили в 2 участка боковой поверхности тела каждого животного. Через девять-десять дней после имплантации, когда размер опухоли достигал от 0,5 до 0,8 см в диаметре, животных случайным образом разделяли на группы, по 5 животных в каждой группе. Препарат вводили посредством внутривенной инъекции на 1, 2, 13 и 14 дни. Контрольная группа получала изотонический раствор. Референс-группа получала 35 мг/кг бендамустина HCl в воде (7 мг/мл). Тестируемая группа получала дозу 60 мг/кг (эквитоксичную дозе, которую получала референс-группа) композиции, в соответствии с настоящим изобретением, включающей 13 мг/г бендамустина HCl, 20% SBECD, 1% H6A и маннитол и полученной согласно методике, описанной выше в Примере 1.
Оценка эффективности:
Измерение подкожной солидной опухоли осуществляли в день первой инъекции и далее с 3-4-дневными интервалами. Два наибольших перпендикулярных диаметра каждой опухоли измеряли при помощи калипера, а размер опухоли рассчитывали при помощи формулы:
TV=L×W/2, где TV - объем опухоли; L - длина, W - ширина.
Также регистрировали вес животных.
Результаты представлены ниже в Таблице 2.
Таблица 2.
Вес солидных опухолей карциномы молочной железы человека у голых мышей, полученных в результате подкожного введения клеток линии MDA-MB 231
Опухоль (дни) Без лечения. Контроль (г) Референс-группа BM BM (35 мг/кг) (г) (60 мг/кг), 20% SBECD 1% H6A (г)
Среднее (SEM) Среднее (SEM) Среднее (SEM)
0 0,108 (0,016) 0,111 (0,013) 0,111 (0,018)
2 0,120 (0,015) 0,123 (0,016) 0,119 (0,019)
5 0,135 (0,015) 0,134 (0,015) 0,117 (0,018)
7 0,161 (0,019) 0,146 (0,017) 0,122 (0,02)
9 0,192 (0,027) 0,156 (0,017) 1,130 (0,023)
12 0,256 (0,039) 0,174 (0,018) 1,140 (0,024)
14 0,318 (0,053) 0,205 (0,021) 0,140 (0,026)
16 0,426 (0,07) 0,228 (0,024) 0,142 (0,026)
19 0,522 (0,086) 0,248 (0,035) 0,138 (0,025)
21 0,653 (0,103) 0,272 (0,042) 0,138 (0,026)
23 0,809 (0,127) 0,296 (0,047) 0,141 (0,028)
SEM - стандартное отклонение от средней величины
Результаты демонстрируют превосходную эффективность композиции, заявленной в соответствии с настоящим изобретением, включающей SBECD и H6A, при сравнении с эквитоксичной дозой бендамустина, применяемого самостоятельно.
Следует отметить, что описанные выше варианты осуществления изобретения иллюстрируют только некоторые из возможных специфических вариантов его воплощения, отражающих реализацию основных принципов изобретения. Многочисленные и разнообразные другие варианты могут быть легко разработаны в соответствии с этими принципами специалистом в данной области в пределах сущности и объема настоящего изобретения.

Claims (9)

1. Композиция для противоопухолевой терапии, включающая бендамустин; первый заряженный циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну заряженную анионную группу, выбранную из сульфата и сульфонила; и стабилизирующий агент, который представляет собой второй циклополисахарид, имеющий, по крайней мере, одну группу, выбранную из амина, гуанидина и четвертичного аммония.
2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что первый заряженный циклополисахарид представляет собой циклодекстрин.
3. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что первый заряженный циклополисахарид выбирают из группы, включающей сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина, натриевую соль сульфопропил-бета-циклодекстрина и натриевую соль О-сульфатил-бета-циклодекстрина.
4. Композиция по п. 3, отличающаяся тем, что первый заряженный циклополисахарид представляет собой сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина.
5. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что второй циклополисахарид выбирают из группы, включающей гексакис(6-амино-6-деокси)альфа-циклодекстрин, гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин, окстакис(6-амино-6-деокси)гамма-циклодекстрин, гептакис(6-гуанидино-6-декокси)бета-циклодекстрин, октакис(6-гуанидино-6-деокси)-гамма-циклодекстрин, 2-гидрокси-N,N,N-триметилпропанаммоний-циклодекстрин и 6-деокси-6-(3-гидрокси)пропиламино бета-циклодекстрин.
6. Композиция по п. 5, отличающаяся тем, что второй циклополисахарид представляет собой гептакис (6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин.
7. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что бендамустин находится в форме бендамустин гидрохлорида.
8. Композиция для противоопухолевой терапии, включающая бендамустин; первый заряженный циклополисахарид, причем первый заряженный циклополисахарид представляет собой сульфобутиловый эфир бета-циклодекстрина; и стабилизирующий агент, который представляет собой второй циклополисахарид, и второй циклополисахарид представляет собой гептакис(6-амино-6-деокси)бета-циклодекстрин.
9. Композиция по п. 8, отличающаяся тем, что бендамустин находится в форме бендамустин гидрохлорида.
RU2013107115A 2010-07-19 2011-02-23 Композиция бендамустина и циклополисахарида RU2647368C2 (ru)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US39985510P 2010-07-19 2010-07-19
US61/399,855 2010-07-19
US13/032,168 2011-02-22
US13/032,168 US8383663B2 (en) 2010-07-19 2011-02-22 Bendamustine anionic-catioinic cyclopolysaccharide compositions
PCT/IB2011/003367 WO2012127277A2 (en) 2010-07-19 2011-02-23 Bendamustine anionic-catioinic cyclopolysaccharide compositions

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2013107115A RU2013107115A (ru) 2014-08-27
RU2647368C2 true RU2647368C2 (ru) 2018-03-15

Family

ID=45467434

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013107115A RU2647368C2 (ru) 2010-07-19 2011-02-23 Композиция бендамустина и циклополисахарида

Country Status (11)

Country Link
US (1) US8383663B2 (ru)
EP (1) EP2595660B1 (ru)
JP (1) JP5788982B2 (ru)
KR (2) KR101874764B1 (ru)
CN (1) CN103228296B (ru)
AU (3) AU2011363446B2 (ru)
BR (1) BR112013001462B8 (ru)
CA (1) CA2805805C (ru)
MX (1) MX341356B (ru)
RU (1) RU2647368C2 (ru)
WO (1) WO2012127277A2 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108997514B (zh) * 2017-06-06 2021-06-08 首都医科大学 单-6-(苯达莫司汀酰胺基)-6-脱氧-β-环糊精的制备和应用
MX2020003511A (es) 2017-10-05 2020-07-22 Tube Pharmaceuticals Gmbh Formulaciones orales de bendamustina.
CN111557904A (zh) * 2020-04-09 2020-08-21 比卡生物科技（广州）有限公司 苯达莫司汀组合物及其用途
WO2021203377A1 (zh) * 2020-04-09 2021-10-14 比卡生物科技（广州）有限公司 苯达莫司汀组合物及其用途
US11970977B2 (en) 2022-08-26 2024-04-30 Hamilton Sundstrand Corporation Variable restriction of a secondary circuit of a fuel injector
US20240148696A1 (en) 2022-10-25 2024-05-09 Softkemo Pharma Inc. Lyophilized bendamustine-cyclodextrin composition

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080119431A1 (en) * 2004-09-10 2008-05-22 Mavridis Irene M Per-6-Guanidino-, Alkylamino-Cyclodextrins, Methods Of Their Synthesis And Their Use For The Compaction Of Dna And Interacellular Delivery
RU2342931C2 (ru) * 2002-08-20 2009-01-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Состав на основе комплекса арипипразола
WO2010036702A1 (en) * 2008-09-25 2010-04-01 Cephalon, Inc. Liquid formulations of bendamustine

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6407079B1 (en) 1985-07-03 2002-06-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Pharmaceutical compositions containing drugs which are instable or sparingly soluble in water and methods for their preparation
US5068226A (en) 1987-12-07 1991-11-26 Cyclex, Inc. Pharmaceutical preparations containing cyclodextrins and their use in iontophoretic therapies
JPH04500229A (ja) * 1988-08-31 1992-01-16 オーストレイリアン・コマーシヤル・リサーチ・アンド・デイベロツプメント・リミテツド 薬剤分配用及びクロマトグラフィー用の組成物及び方法
MY106598A (en) 1988-08-31 1995-06-30 Australian Commercial Res & Development Ltd Compositions and methods for drug delivery and chromatography.
US5602112A (en) 1992-06-19 1997-02-11 Supergen, Inc. Pharmaceutical formulation
KR100563764B1 (ko) 1997-03-13 2006-03-24 헥살 아게 아미노산과 시클로덱스트린과의 병용에 의한 산(酸) 민감성 벤즈이미다졸류의 안정화 방법
US6624141B1 (en) 1999-03-17 2003-09-23 The Regents Of The University Of Michigan Protamine fragment compositions and methods of use
DK1165119T3 (da) 1999-04-08 2003-12-15 Genentech Inc Sammensætning baseret på modsat ladede polypeptider
GB9921958D0 (en) 1999-09-16 1999-11-17 Pharmacia & Upjohn Spa Formulations for parenteral use of estramustine phosphate and sulfoalkylether-cyclodextrins
US20030044356A1 (en) 2001-04-20 2003-03-06 Jin Auh Composition for nasal solution sprays having effective component of 1,2,3,9-tetrahydro-9-methyl-3-[(2-methyl-1H-imidazol-1-yl)methyl]-4H-carbazol-4-one)
AR038576A1 (es) 2002-02-22 2005-01-19 Pharmacia Corp Formulaciones de drogas antibioticas oftalmicas que contienen un compuesto de ciclodextrina y cloruro de cetil piridinio
CN1646171B (zh) 2002-04-19 2010-05-26 诺瓦提斯公司 新型生物材料、其制备和用途
CA2585659A1 (en) * 2004-11-05 2006-06-22 Cephalon, Inc. Cancer treatments
CN101052396A (zh) * 2004-11-05 2007-10-10 赛福伦公司 癌症治疗
US20060128653A1 (en) * 2004-12-10 2006-06-15 Chunlin Tang Pharmaceutical formulation of decitabine
US8436190B2 (en) 2005-01-14 2013-05-07 Cephalon, Inc. Bendamustine pharmaceutical compositions
WO2006083671A2 (en) 2005-01-28 2006-08-10 Brigham Young University Bacterial glycolipid activation of cd1d-restricted nkt cells
EP1760467A1 (en) 2005-09-02 2007-03-07 Schering AG Optically fluorescent nanoparticles
CN1846685A (zh) 2006-01-25 2006-10-18 济南帅华医药科技有限公司 含苯达莫司汀和其增效剂的缓释注射剂
US8372834B2 (en) 2007-03-02 2013-02-12 University Of Wollongong Compositions and methods for delivery of anti-cancer agents
CN101219113A (zh) 2008-01-28 2008-07-16 济南帅华医药科技有限公司 含苯达莫司汀的复方抗癌缓释注射剂
RU2734236C2 (ru) 2009-02-25 2020-10-13 Софткемо Фарма Корп. Композиции бендамустина и циклополисахарида
CN101606934B (zh) 2009-07-27 2011-09-28 江苏奥赛康药业有限公司 盐酸苯达莫司汀组合物
WO2011103150A2 (en) 2010-02-18 2011-08-25 Cephalon, Inc. Lyophilized preparations of bendamustine
CN101897977A (zh) 2010-07-29 2010-12-01 浙江大学 离子型环糊精衍生物在制备用于离子导入透皮给药的药物制剂中的应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2342931C2 (ru) * 2002-08-20 2009-01-10 Бристол-Маерс Сквибб Компани Состав на основе комплекса арипипразола
US20080119431A1 (en) * 2004-09-10 2008-05-22 Mavridis Irene M Per-6-Guanidino-, Alkylamino-Cyclodextrins, Methods Of Their Synthesis And Their Use For The Compaction Of Dna And Interacellular Delivery
WO2010036702A1 (en) * 2008-09-25 2010-04-01 Cephalon, Inc. Liquid formulations of bendamustine

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
F. HIRAYAMA, Cyclodextrin-based controlled drug release system, Advanced Drug Delivery Reviews 36 (1999) 125-141;. *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2805805C (en) 2018-10-23
CN103228296B (zh) 2015-04-08
AU2019219792A1 (en) 2019-09-12
WO2012127277A3 (en) 2013-03-14
AU2019219792B2 (en) 2023-03-02
US8383663B2 (en) 2013-02-26
KR101807903B1 (ko) 2017-12-12
CN103228296A (zh) 2013-07-31
BR112013001462B8 (pt) 2022-08-02
BR112013001462B1 (pt) 2022-04-19
KR20170102061A (ko) 2017-09-06
RU2013107115A (ru) 2014-08-27
KR20130113428A (ko) 2013-10-15
US20120015995A1 (en) 2012-01-19
CA2805805A1 (en) 2012-09-27
EP2595660A2 (en) 2013-05-29
AU2017216568A1 (en) 2017-09-14
MX2013000729A (es) 2013-07-17
AU2011363446A1 (en) 2013-02-21
AU2011363446B2 (en) 2017-05-18
JP5788982B2 (ja) 2015-10-07
BR112013001462A2 (pt) 2016-05-31
KR101874764B1 (ko) 2018-07-04
MX341356B (es) 2016-07-07
WO2012127277A2 (en) 2012-09-27
JP2013531060A (ja) 2013-08-01
EP2595660B1 (en) 2015-07-22
EP2595660A4 (en) 2014-01-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2734236C2 (ru) Композиции бендамустина и циклополисахарида
AU2019219792B2 (en) Bendamustine anionic-cationic cyclopolysaccharide compositions
CN103705942B (zh) 抗微生物组合物
JP2022130630A (ja) ベンダムスチンの製剤
WO2007095850A1 (fr) Composition pharmaceutique de docétaxel, préparation et utilisation
EA022890B1 (ru) Инъецируемые композиции мелфалана, содержащие производное циклодекстрина, и способы их применения
AU2002327307B2 (en) Clathrates of butylphtualide with cyclodextrin or its derivatives, a process for their preparations and the use there of
JP6498610B2 (ja) カバジタキセル組成物
CN111465389B (zh) 多西他赛共缀物的药物组合物及制备方法
CN112451475B (zh) 一种用于治疗空洞型肺结核的长效缓释凝胶
CN104771371B (zh) 4-(3,5-二甲氧苯基)-5-(3-羟基-4-甲氧基苯基)咪唑制剂
BR102017020068A2 (pt) Micelas poliméricas carregadas do fármaco miltefosina e produto para o tratamento do cancer e doenças infecciosas

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20151029

FZ9A Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal)

Effective date: 20160212

FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20160719

HE9A Changing address for correspondence with an applicant