RU2630676C2 - Обогащенный рутином экстракт и способ его получения - Google Patents

Обогащенный рутином экстракт и способ его получения Download PDF

Info

Publication number
RU2630676C2
RU2630676C2 RU2015119261A RU2015119261A RU2630676C2 RU 2630676 C2 RU2630676 C2 RU 2630676C2 RU 2015119261 A RU2015119261 A RU 2015119261A RU 2015119261 A RU2015119261 A RU 2015119261A RU 2630676 C2 RU2630676 C2 RU 2630676C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
extract
rutin
acid
water
alcohol
Prior art date
Application number
RU2015119261A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2015119261A (ru
Inventor
Кадзунобу МИНАМИ
Синдзи ТАНИВАКИ
Акико КАЦУМАТА
Original Assignee
ЭйЭлПиЭс ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНД. КО., ЛТД.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ЭйЭлПиЭс ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНД. КО., ЛТД. filed Critical ЭйЭлПиЭс ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНД. КО., ЛТД.
Publication of RU2015119261A publication Critical patent/RU2015119261A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2630676C2 publication Critical patent/RU2630676C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/74—Rubiaceae (Madder family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C07H17/06—Benzopyran radicals
    • C07H17/065—Benzo[b]pyrans
    • C07H17/07—Benzo[b]pyran-4-ones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к способу получения обогащенного рутином экстракта и полученному способом экстракту, который может использоваться в фармацевтической и пищевой промышленности. В предложенном способе обеспечивают рутинсодержащий растительный экстракт в виде неочищенного осадка водных, спиртовых или водно-спиртовых экстрактов Uncaria elliptica; растворяют рутинсодержащий растительный экстракт в метаноле или этаноле с получением раствора неочищенного экстракта рутина, где указанный экстракт содержит 90 - 95 вес.% рутина и 100-300 ч./млн железа; снижают объем раствора неочищенного экстракта рутина с получением концентрата; получают смесь при добавлении к концентрату аскорбиновой или винной кислоты в количестве 1-15 вес.% относительно рутинсодержащего растительного экстракта, метанола или н-бутанола и необязательно воды, где указанный экстракт составляет 8-30% от всей смеси; выдерживают смесь для формирования осадка и отделяют осадок с получением обогащенного рутином экстракта, который содержит менее 20 ч./млн железа. Предложен новый эффективный способ очистки экстракта рутина из Uncaria elliptica и новый экстракт из этого растения. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 4 пр., 7 табл.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
[0001] Настоящее изобретение относится к обогащенному рутином экстракту и способу получения обогащенного рутином экстракта.
Предпосылки создания изобретения
[0002] Рутин представляет собой природный флавоноид, используемый в качестве исходного материала при получении троксерутина, который повышает прочность капилляров и снижает проницаемость стенок венозных кровеносных сосудов. Клинические исследования показали, что лечение пациентов с использованием венорутона, производного рутина, ведет к улучшению состояния в случае пост-травматического синдрома. См. Panminerva Medicine, 53, page 13, 2011. В другом исследовании было показано, что рутин представляет собой один из самых эффективных антитромботических агентов. См. The Journal of Clinical Investigation, 122, No.6, 2012. Рутин, используемых в качестве исходного материла, приобретает все большую значимость.
[0003] Для экстракции и очистки рутина из разных растительных источников, таких как Sophora Japonica (Азия), Fava d’anta (Бразилия) и Uncaria elliptica (Бразилия), обычно используют водные и метанольные растворители. Однако практическое использование таких растительных источников сопряжено с рядом недостатков, свойственных получаемым обогащенным рутином экстрактам, которые включают темно-коричневое окрашивание, а также более высокое содержание железа, чем в случае применения для экстракции рутина других растительных источников. Указанное коричневое окрашивание экстрактов связано с наличие пигментов в данных растениях.
Краткое описание сущности изобретения
[0004] Очень трудно удалить коричневое окрашивание и снизить содержание железа в рамках стандартных способов экстракции и очистки, поскольку железо, по всей видимости, очень прочно связано с пигментами. Предпринимались неоднократные попытки преодолеть эти недостатки. Однако все эти попытки не привели к желаемому снижению уровня железа, включенного в состав пигментов, при сохранении высокого выхода рутина.
[0005] Соответственно, имеется потребность в экономически выгодной процедуре, подходящей для крупномасштабного применения с целью получения обогащенных рутином экстрактов со сниженным содержанием железа и ослабленной пигментацией.
[0006] Настоящее изобретение основано на неожиданном обнаружении того факта, что определенное сочетание спиртов и кислот, используемых при получении обогащенных рутином экстрактов, позволяет снизить в получаемых экстрактах как содержание железа, так и степень пигментации.
[0007] Соответственно, настоящее изобретение относится к способу получения обогащенного рутином экстракта из растения. Указанный способ включает растворение экстракта из содержащего рутин растения в метаноле или этаноле с получением неочищенного раствора экстракта рутина из растения, где указанный экстракт из содержащего рутин растения содержит от 90 до 95 вес.% рутина и 100-300 ч/млн железа; снижение объема раствора неочищенного экстракта рутина с получением концентрата; получение смеси при добавлении к указанному концентрату кислоты в количестве 1-15 вес.% от растительного экстракта, содержащего рутин, и необязательно С1-С4 спирта, воды или обоих этих компонентов, где указанный содержащий рутин растительный экстракт составляет 8-30% (вес/объем) от всей смеси и кислота выбрана из группы, состоящей из аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, галловой кислоты и яблочной кислоты; выдерживание смеси для формирования осадка; и отделение полученного осадка, что приводит к получению обогащенного рутином экстракта, который содержит менее 20 ч/млн железа.
[0008] Указанный рутинсодержащий экстракт может быть получен в виде неочищенного осадка при проведении экстракции водой, спиртом или водным раствором спирта из таких растений, как Uncaria ellioptica, Sophora Japonica или Fava d’anta.
[0009] В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, указанную кислоту добавляют в количестве 1-10 вес.%, например в количестве 1-5 вес.% или 2-4 вес.%, относительного веса всего рутинсодержащего растительного экстракта. В тех случаях, когда добавляют воду и С1-С4 спирт, соотношение воды и спирта может составлять от 1:1 до 5:1 и составлять, в частности, от 1:1 до 3:1. Вода и С1-С4 спирт могут добавляться по отдельности, одновременно или в виде водного раствора С1-С4 спирта.
[0010] Настоящее изобретение относится, в частности, к обогащенному рутином экстракту из Uncaria ellioptica, где указанный экстракт содержит от 97% до 99% рутина, по данным анализа методом ВЭЖХ, и менее 20 ч/млн железа, и показатель поглощения экстракта при длине волны 550 нм составляет менее 0,2. Указанный экстракт также содержит от 5 вес.% до 10 вес.% воды. Он может быть получен по описанному выше способу.
Подробное описание разных вариантов осуществления настоящего изобретения
[0011] Детали осуществления одного или нескольких вариантов настоящего изобретения приведены ниже, в тексте его подробного описания. Другие особенности, объекты и преимущества настоящего изобретения будут понятны из текста описания и прилагаемой формулы изобретения.
[0012] Ниже описан способ получения обогащенных рутином растительных экстрактов с использованием новых сочетаний кислот и спиртов. Обогащенные рутином экстракты, получаемые согласно данному способу, характеризуются существенно сниженным уровнем как пигментации, так и содержания железа, в сравнении с экстрактами, получаемыми стандартными способами.
[0013] При использовании стандартных способов, известных в данной области в настоящее время, твердый рутинсодержащий экстракт может быть получен из различных растительных источников, например, таких как Sophora Japonica (Азия), Fava d’anta (Бразилия) и Uncaria elliptica (Бразилия). Такого рода способы включают, без ограничения, вымачивание, нагревание, встряхивание, перемешивание или инфузию растительного материала, например стеблей и листьев, в органических растворителях. Используемый растительный материал может быть представлен в виде целого высушенного растения, нарезанного растения или растительного порошка. Указанные растворители включают воду, спирты (например, метанол) или водные растворы спиртов. Полученный после экстракции раствор такого экстракта может быть отделен от твердого вещества путем просеивания, фильтрования, прессования или с помощью других подходящих для этой цели методик. Далее, фильтрат может быть подвергнут концентрированию и охлаждению, с последующим образованием осадка, с получением твердого рутинсодержащего экстракта. Описание различных методов экстракции приведено, например, в патентах Китая 1013579; US2006/0099690; and Dighe at al., International Journal of Pharma and Bio Sciences, 2(1), 750-757 (2011).
[0014] В типичном случае, твердые рутинсодержащие экстракты, изготавливаемые с использованием указанных методов, отличаются высоким содержанием железа, достигающим примерно 100-300 ч/млн, и интенсивной пигментацией, например, желтым или коричневым окрашиванием, в особенности это характерно для экстрактов, получаемых из Uncarnia elliptica. Содержание рутина может достигать 85-90 вес.% от веса таких рутинсодержащих экстрактов.
[0015] Получаемый при этом твердый рутинсодержащий экстракт может быть далее растворен в спиртовом растворителе, предпочтительно в метаноле или этаноле, с получением раствора неочищенного экстракта рутина. Так, например, 0,05–0,13 г твердого экстракта могут быть растворены в 1 мл растворителя. Далее, указанный раствор неочищенного экстракта может быть концентрирован, например, при атмосферном давлении, для уменьшения его объема, например, в 4-10 раз. Окончательный объем раствора неочищенного экстракта может быть заранее определен с учетом желательного объема и содержания смеси, описанной ниже.
[0016] Кислота и необязательно С1-С4 спирт, такой как метанол, этанол, пропанол и н-бутанол, могут добавляться к указанному выше раствору неочищенного экстракта с получением смеси. Вода также может включаться в состав указанной смеси.
[0017] Используемая при этом кислота выбрана из аскорбиновой кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, галловой кислоты и яблочной кислоты. Ее добавляют к раствору неочищенного экстракта рутина в количестве примерно 1-15 вес.%, в частности, на уровне 1-10% или 1-5 вес.% от веса твердого рутинсодержащего экстракта, используемого для получения раствора неочищенного экстракта рутина.
[0018] Рассматриваемая смесь должна содержать по меньшей мере один С1-С4 спирт. Например, как было описано выше, может использоваться метанол или этанол (т.е. С1-С4 спирт) для получения раствора неочищенного экстракта рутина из твердого рутинсодержащего экстракта. При этом может возникнуть необходимость внести дополнительное количество С1-С4 спирта к указанному раствору неочищенного экстракта рутина. В некоторых случаях, для получения смеси, содержащей 8-30% (вес/объем) твердого рутинсодержащего экстракта, могут быть добавлены С1-С4 спирт, водный раствор С1-С4 спирта или С1-С4 спирт и вода, например, в 2-12-кратном количестве (вес/объем) относительного твердого рутинсодержащего экстракта. Вносимый дополнительно С1-С4 спирт может быть тем же самым, что и спирт, использованный для получения раствора неочищенного экстракта рутина, но может и отличаться от него.
[0019] Рутин существует в виде различных гидратов, таких как моногидрат, дигидраты и тригидрат. В этой связи, предпочтительно изготавливать относительно стабильные формы дигидрата и тригидрата путем добавления воды в процессе очистки. Соответственно, вода может быть добавлена к раствору неочищенного экстракта рутина. Она может быть добавлена отдельно от других процессов. Вода может быть добавлена в виде водного раствора спирта. Отношение содержания воды к С1-С4 спирту может составлять от 1:1 до 5:1, например от 1:1 до 3:1. Как отмечалось выше, готовая смесь содержит от 8% до 30% (вес/объем) твердого рутинсодержащего экстракта.
[0020] Смесь, содержащая раствор неочищенного экстракта рутина, С1-С4 спирт, кислоту и необязательно воду, может быть оставлена для формирования осадка, например, в виде кристаллов. Далее, указанная смесь может быть подвергнута концентрированию с последующим перемешиванием и снова оставлена для формирования осадка. Полученный таким образом осадок может быть отделен с помощью любой подходящей для этой цели методики, такой как фильтрование, затем промыт спиртом и/или водой и высушен.
[0021] Осадок, т.е. рутинсодержащий экстракт, может содержать 97%-99% рутина, согласно данным анализа по методу ВЭЖХ, и менее 20 ч/млн железа, т.е. менее 10 ч/млн. Он также характеризуется слабой пигментацией, например, показатель абсорбции экстракта при длине волны 550 нм составляет менее 0,2. Он также может включать 5-10 вес.% воды. Указанный обогащенный рутином экстракт может включать частицы любого размера, такие как, например, 5 мкм (микрометров) или менее. Например, он может включать частицы наноразмера.
[0022] Обогащенный рутином экстракт, полученный по описанному выше способу, используется в различных вариантах применения. Он может быть изготовлен в виде фармацевтической композиции, например, в виде лекарственного средства. Он может также использоваться в виде питательного компонента или в виде пищевой добавки.
ПРИМЕРЫ
[0023] Приведенные ниже примеры следует рассматривать только как поясняющие, иллюстративные, но никоим образом не ограничивающие настоящее изобретение. При этом любой специалист в данной области на основании приведенного здесь описания может без дополнительных сложных экспериментов использовать настоящее изобретение во всей его полноте. Все процитированные здесь публикации включены в настоящее описание полностью, в качестве ссылок.
[0024] Все данные по содержанию железа, чистоте и поглощению, приведенные в показанных ниже примерах 1-4, были получены с использование следующих процедур.
[0025] (1) Содержание железа
Аккуратно отбирают 1 мл образца и обрабатывают серной кислотой. К остатку добавляют 2 мл хлористоводородной кислоты. Затем образец сушат и нагревают в кипящей воде, после добавления 10 мл воды с одной каплей хлористоводородной кислоты. После охлаждения, объем аккуратно доводят до 10,0 мл и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 микрон. Концентрацию железа в растворе образца определяют по методу индуктивно-связанной плазмы (ICP).
[0026] (2) Абсорбция в видимой части спектра
1,0 г образца растворяют в 15 мл диметилформамида (ДМФ). После корректировки объема до 20,0 мл с использованием ДМФ раствор фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 микрон. Поглощение профильтрованного образца определяют при длине волны 550 нм и с длиной оптического пути 1 см.
[0027] (3) ВЭЖХ
ВЭЖХ анализ проводят по методике ЕР, с использованием тригидрата рутинозида, родственного соединения, по процедуре жидкостной хроматографии. Ниже приведено краткое описание реактивов и условий, используемых в данном методе:
[0028] [Препарат 1]
Исследуемый раствор: растворяют 0,10 г исследуемого вещества в 20 мл метанола и разбавляют до 100,0 мл мобильной фазой В.
Стандартный раствор (а): растворяют 10,0 мг тригидрата рутозида CRS в 10,0 мл метанола.
Стандартный раствор (b): разбавляют 1,0 мл стандартного раствора (а) до 50,0 мл мобильной фазой В.
Колонка (LiCrospher 100 RP-8, C8, 4,0Ч250 мм, Agilent)
- размер: длина 0,25 м, внутренний диаметр 4,0 мм;
- стационарная фаза: октилсилилсиликагель для хроматографии (5 мкм);
- температура: 30°С.
Мобильная фаза:
- мобильная фаза А: смешивают 5 объемов тетрагидрофурана с 95 объемами раствора дигидрогенфосфата натрия (15,6 г/л), откорректированного до рН 3,0 фосфорной кислотой;
- мобильная фаза В: смешивают 40 объемов тетрагидрофурана с 60 объемами раствора дигидрогенфосфата натрия (15,6 г/л), откорректированного до рН 3,0 фосфорной кислотой.
[0029] [Препарат 2]
Условия и характеристики градиентной элюции:
Время (мин) Мобильная фаза А (%) Мобильная фаза В (%)
0-10 50-0 50-100
10-20 0 100
20-21 0-50 100-50
21-35 50 50
Скорость течения: 1 мл/мин;
Обнаружение: спектрофотометрия при длине волны 280 нм;
Инъекция: 20 мкл.
[0030] Кислоты и спирты, используемые в описанных ниже примерах 1-4, были получены от компании Wako Pure Chemical Industries, Ltd (Осака): аскорбиновая кислота (минимальное содержание 99,5% реактива высокой чистоты, ЧДА); лимонная кислота (минимальное содержание 98,0% реактива особого класса чистоты, ХЧ), яблочная кислота (минимальное содержание 99,0% реактива особого класса чистоты, ХЧ), галловая кислота (содержание 98,0-103,0% реактива высокой чистоты, ЧДА); винная кислота (минимальное содержание 99,0% реактива высокой чистоты, ЧДА); метанол (минимальное содержание 99,5% реактива высокой чистоты, ЧДА); этанол (минимальное содержание 99,5% реактива особого класса чистоты, ХЧ); н-пропанол (минимальное содержание 99,7% реактива особого класса чистоты, ХЧ); н-бутанол (минимальное содержание 99,0% реактива особого класса чистоты, ХЧ).
[0031] ПРИМЕР 1: Получение раствора неочищенного экстракта рутина
Проводят экстракцию водой и/или спиртом из стеблей и листьев Uncaria elliptica с использованием стандартных процедур получения твердых рутинсодержащих экстрактов. Три набора твердых рутинсодержащих экстрактов (каждый по 50 г) растворяли в 600 мл метанола и перемешивали в течение двух часов при температуре 30-35 градусов С (Цельсия). Каждый раствор фильтровали и концентрировали при атмосферном давлении с получением 300 мл раствора неочищенного экстракта рутина.
[0032] Полученные таким образом рутинсодержащие экстракты содержали 85-90 вес.% рутина и 100-200 ч/млн железа. При их растворении в органических растворителях развивалось коричневое окрашивание, и среднее значение поглощения в ДМФ при длине волны 550 нм составляло 0,8–1,3. Полученные данные суммированы в приведенной ниже таблице 1.
[0033]
Таблица 1
Лот № Железо (ч/млн) Поглощение при 550 нм Содержание рутина (вес.%) Содержание воды, %
А 167 1,173 88,0 9,6
В 174 1,149 89,2 9,2
С 160 1,048 88,6 8,9
[0034] ПРИМЕР 2: Влияние аскорбиновой кислоты в сочетании с разными растворителями
(1) Метанол
Три набора растворов неочищенного экстракта рутина, каждый из которых был получен при растворении 50 г твердого рутинсодержащего экстракта в 600 мл метанола, концентрировали при атмосферном давлении до объема 300 мл. В указанные концентраты не вносили или вносили 1,0 или 5,0 г аскорбиновой кислоты, и далее их концентрировали до объема 150 мл. После кристаллизации, вызванной охлаждением, очищенные кристаллы рутина собирали фильтрованием и промывали метанолом. Очищенный рутин сушили при температуре 60 градусов С (Цельсия) в течение 5 часов и затем анализировали по описанной выше методике. Полученные результаты суммированы в приведенной ниже таблице 2. Добавление аскорбиновой кислоты в процессе кристаллизации привело к снижению содержания остаточного железа, а также к уменьшению показателя поглощения при длине волны 550 нм в зависимом от дозы.
[0035]
Таблица 2
№ Экстрак-ция Кристаллизация Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
(550 нм)		 Рутин ВЭЖХ площ.
(%)		 Выход
(%)		 Вода
(%)
1 МеОН МеОН Нет - 22,4 0,235 99,0 70,2 4,9
2 МеОН МеОН Аскорбиновая кислота 2 13,7 0,146 98,9 69,9 4,7
3 МеОН МеОН Аскорбиновая кислота 10 10,2 0,114 98,4 70,5 5,5
*Количество внесенной добавки относительно веса твердого рутинсодержащего экстракта
[0036] (2) Этанол
Два набора растворов неочищенного экстракта рутина по 500 мл, каждый из которых был получен при растворении 25 г твердого рутинсодержащего экстракта в этаноле (EtOH), концентрировали при атмосферном давлении до объема 100 мл. В указанные концентраты вносили по 25 мл воды, которая либо не содержала, либо содержала 0,5 г аскорбиновой кислоты. После кристаллизации, вызванной охлаждением, очищенные кристаллы рутина собирали фильтрованием и промывали 15 мл 95% этанола. Очищенный рутин сушили при температуре 60 градусов С (Цельсия) в течение 5 часов и затем анализировали по описанной выше методике. Полученные результаты суммированы в приведенной ниже таблице 3. Как видно из приведенных данных, эффект добавления этанола был не настолько выражен, как это наблюдалось при добавлении метанола в процессе кристаллизации.
[0037]
Таблица 3
№ Экстракция Кристаллизация Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
(550 нм)		 Рутин ВЭЖХ площ.
(%)		 Выход
(%)		 Вода
(%)
4 EtOH Вода/ EtOH Нет - 10,7 0,280 97,1 84,0 9,2
5 EtOH Вода/ EtOH Аскорбиновая кислота 2 9,59 0,260 97,0 83,5 8,7
*Количество внесенной добавки относительно веса твердого рутинсодержащего экстракта
[0038] (3) Пропанол
Два набора растворов неочищенного экстракта рутина получали при растворении 25 г твердого рутинсодержащего экстракта в 300 мл MeOH. Каждый из этих растворов концентрировали при атмосферном давлении до объема 43 мл. В указанные концентраты вносили водный раствор пропанола (н-пропанол: вода=1:1, всего 200 мл), который либо не содержал, либо содержал 0,5 г аскорбиновой кислоты. После кристаллизации при перемешивании и охлаждении очищенные кристаллы рутина собирали фильтрованием. Далее, кристаллы рутина промывали 25 мл н-пропанола и затем водой. Очищенный рутин сушили при температуре 80 градусов С (Цельсия) в течение 6 часов и затем анализировали. Полученные результаты суммированы в приведенной ниже таблице 4. Аскорбиновая кислота снижала остаточное содержание железа и уменьшала поглощение указанного очищенного рутина при длине волны 550 нм.
[0039]
Таблица 4
№ Экстракция Кристаллизация Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
(550нм)		 Рутин ВЭЖХ площ.
(%)		 Выход
(%)		 Вода
(%)
6 МеОН Вода/ пропанол Нет - 26,7 0,296 98,2 76,4 8,1
7 МеОН Вода/ пропанол Аскорбиновая кислота 2 12,8 0,148 98,2 74,8 8,1
*Количество внесенной добавки относительно веса твердого рутинсодержащего экстракта
[0040] (4) Бутанол
Два набора растворов неочищенного экстракта рутина получали при растворении 25 г твердого рутинсодержащего экстракта в 300 мл MeOH. Каждый из этих растворов экстракта концентрировали при атмосферном давлении до объема 43 мл. В указанные концентраты вносили водный раствор н-бутанола (вода: н-бутанол =133: 67 мл), который либо не содержал, либо содержал 0,25, 0,5 или 2,5 г аскорбиновой кислоты. После кристаллизации при перемешивании и охлаждении очищенные кристаллы рутина собирали фильтрованием. Далее, кристаллы рутина промывали 25 мл н-бутанола и затем 100 мл воды. Очищенный рутин сушили при температуре 80 градусов С (Цельсия) в течение 6 часов и затем анализировали по описанной выше методике. Полученные результаты суммированы в приведенной ниже таблице 5. Аскорбиновая кислота снижала остаточное содержание железа и уменьшала поглощение указанного очищенного рутина при длине волны 550 нм.
[0041]
Таблица 5
№ Экстрак-ция Кристаллизация Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
(550нм)		 Рутин ВЭЖХ площ.
(%)		 Выход
(%)		 Вода
(%)
15 МеОН Вода/ BuOH Нет - 60,3 0,701 97,6 83,6 8,4
16 МеОН Вода/ BuOH Аскорбиновая кислота 1 15,5 0,245 98,2 83,5 8,0
17 МеОН Вода/ BuOH Аскорбиновая кислота 2 1,86 0,097 98,2 82,4 7,9
18 МеОН Вода/ BuOH Аскорбиновая кислота 10 1,36 0,074 98,1 82,9 8,0
*Количество внесенной добавки относительно веса твердого рутинсодержащего экстракта
[0042] ПРИМЕР 3: Влияние разных кислот, вносимых в сочетании с водным раствором бутанола
Семь растворов неочищенного экстракта рутина получали при растворении 25 г твердого рутинсодержащего экстракта, полученного по процедуре примера 1, в 300 мл МеОН. Указанные экстракты концентрировали при атмосферном давлении до объема 43 мл. В указанные концентраты вносили водный раствор бутанола (вода: н-бутанол =133: 67 мл), который содержал винную кислоту, лимонную кислоту, яблочную кислоту или галловую кислоту, в количестве, показанном в приведенной ниже таблице 6.
[0043] После кристаллизации концентратов при перемешивании и охлаждении очищенные кристаллы рутина собирали фильтрованием. Очищенный рутин промывали 25 мл н-бутанола и затем 100 мл воды. Далее, очищенный рутин сушили при температуре 80 градусов С (Цельсия) в течение 6 часов и затем анализировали по описанной выше методике. Полученные результаты суммированы в приведенной ниже таблице 6. За исключением галловой кислоты, все остальные кислоты снижали содержание остаточного железа и уменьшали поглощение очищенного рутина при длине волны 550 нм.
[0044] Результаты, описанные в примерах 2 и 3, показывают, что сочетание бутанола и аскорбиновой кислоты наиболее эффективно для снижения содержания железа и ослабления желтого окрашивания, оцениваемого по величине поглощения при длине волны 550 нм.
[0045]
Таблица 6
№ Экстракция Кристалл Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
(550нм)		 Рутин ВЭЖХ площ.
(%)		 Выход
(%)		 Вода
(%)
8 МеОН Вода/BuOH Нет - 60,3 0,701 97,6 83,4 8,4
9 МеОН Вода/BuOH Винная
кислота		 2 15,2 0,224 98,0 83,5 8,3
10 МеОН Вода/BuOH Лимонная
кислота		 2 27,6 0,313 98,1 80,8 8,0
11 МеОН Вода/BuOH Яблочная
кислота		 2 27,9 0,353 98,2 82,8 8,0
12 МеОН Вода/BuOH Галловая
кислота		 2 60,6 0,809 98,0 82,9 8,0
13 МеОН Вода/BuOH Винная
кислота		 10 10,8 0,101 97,4 81,2 7,2
14 МеОН Вода/BuOH Винная,
Лимонная,
Галловая
кислоты		 По 3% каждой кислоты 18,6 0,146 97,3 81,0 7,3
*Количество внесенной добавки относительно веса твердого рутинсодержащего экстракта
[0046] ПРИМЕР 4: Влияние растворителей
Очищенный рутин получали с использование различных растворителей, без добавления кислоты. Было показано, что водный раствор бутанола и водный раствор этанола дают более высокий выход рутина, в сравнении с другими растворителями. См. приведенную ниже таблицу 7.
[0047]
Таблица 7
№ Экстракция Кристалл Кислота Количество
(%)*		 Железо
(ч/млн)		 Поглощение,
550 нм		 Рутин ВЭЖХ площ. Выход Вода
(%)
1 МеОН МеОН Нет - 22,4 0,235 99,0 70,2 4,9
4 EtOH Вода/EtOH Нет - 10,7 0,280 97,1 84,0 9,2
6 МеОН Вода/про-панол Нет - 26,7 0,296 98,2 76,4 8,1
15 МеОН Вода/BuOH Нет - 60,3 0,701 97,6 83,6 8,4
[0048] ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Все особенности и характеристики, приведенные в настоящем описании, могут быть объединены с получением любого сочетания. Каждая такая особенность/характеристика, указанная в настоящем описании, может быть заменена альтернативным вариантом, выполняющим ту же, эквивалентную или аналогичную, функцию для достижения желательной цели. Соответственно, если особо не указано иное, каждая раскрытая здесь особенность/характеристика дана лишь для примера, с тем чтобы показать целую серию эквивалентных или родственных особенностей/характеристик.
[0049] На основе приведенного здесь описания любой специалист со средним уровнем знаний в данной области может понять сущность настоящего изобретения и, не выходя за рамки принципов и области настоящего изобретения, может внести различные изменения и модификации в настоящее изобретение, с тем чтобы адаптировать его к различным вариантам применения и условиям. Таким образом, другие варианты осуществления настоящего изобретения также охватываются областью настоящего изобретения, которая определяется прилагаемой ниже формулой изобретения.

Claims (24)

1. Способ получения обогащенного рутином экстракта, включающий:
обеспечение рутинсодержащим растительным экстрактом, полученным в виде неочищенного осадка на основе экстрактов из Uncaria elliptica водой, спиртом или водным раствором спирта;
растворение рутинсодержащего растительного экстракта в метаноле или этаноле с получением раствора неочищенного экстракта рутина, где указанный рутинсодержащий растительный экстракт содержит 90-95 вес. % рутина и 100-300 ч./млн железа;
снижение объема раствора неочищенного экстракта рутина с получением концентрата;
получение смеси при добавлении к концентрату кислоты в количестве 1-15 вес.% относительно рутинсодержащего растительного экстракта, С1-С4 спирта и необязательно воды, где указанный рутинсодержащий растительный экстракт составляет 8-30% (вес/объем) от всей смеси, С1-С4 спирт представляет собой метанол или н-бутанол и где указанная кислота представляет собой аскорбиновую кислоту или винную кислоту;
выдерживание смеси для формирования осадка и
отделение осадка с получением при этом обогащенного рутином экстракта, который содержит менее 20 ч./млн железа.
2. Способ по п. 1, где добавляют и С1-С4 спирт, и воду.
3. Способ по п. 1, где кислоту добавляют в количестве 1-10 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
4. Способ по п. 3, где кислоту добавляют в количестве 1-5 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
5. Способ по п. 4, где кислоту добавляют в количестве 2-4 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
6. Способ по п. 2, где С1-С4 спирт и воду добавляют в виде водного раствора С1-С4 спирта, который содержит 5-80 об.% воды.
7. Способ по п. 2, где соотношение объемов воды и указанного С1-С4 спирта составляет от 1:1 до 5:1.
8. Способ по п. 7, где соотношение объемов воды и указанного С1-С4 спирта составляет от 1:1 до 3:1.
9. Способ по п. 1, где С1-С4 спирт представляет собой метанол и указанная кислота представляет собой аскорбиновую кислоту.
10. Способ по п. 1, где С1-С4 спирт представляет собой н-бутанол и указанная кислота представляет собой аскорбиновую кислоту.
11. Способ по п. 10, где кислоту добавляют в количестве 1-10 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
12. Способ по п. 11, где кислоту добавляют в количестве 1-5 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
13. Способ по п. 12, где кислоту добавляют в количестве 2-4 вес.% относительно всего рутинсодержащего растительного экстракта.
14. Способ по п. 10, где соотношение объемов воды и указанного С1-С4 спирта составляет от 1:1 до 5:1.
15. Способ по п. 10, где соотношение объемов воды и указанного С1-С4 спирта составляет от 1:1 до 3:1.
16. Обогащенный рутином экстракт, полученный способом по п. 1, в качестве фармацевтической композиции, питательного компонента или пищевой добавки, содержащий менее 20 ч./млн железа, и величина поглощения указанного экстракта при длине волны 550 нм составляет менее чем 0,2 и % площадь рутина в экстракте, измеренная методом ВЭЖХ, составляет 97-99%.
17. Обогащенный рутином экстракт по п. 16, где экстракт содержит менее 10 ч./млн железа, и величина поглощения при длине волны 550 нм составляет менее чем 0,1, и % площадь рутина в экстракте, измеренная методом ВЭЖХ, составляет по меньшей мере 98%.
18. Обогащенный рутином экстракт по п. 16, где экстракт содержит 5-10 вес.% воды.
RU2015119261A 2012-10-22 2012-10-22 Обогащенный рутином экстракт и способ его получения RU2630676C2 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/JP2012/006758 WO2014064731A1 (en) 2012-10-22 2012-10-22 Rutin-rich extract and method of making same

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015119261A RU2015119261A (ru) 2016-12-10
RU2630676C2 true RU2630676C2 (ru) 2017-09-12

Family

ID=50544137

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015119261A RU2630676C2 (ru) 2012-10-22 2012-10-22 Обогащенный рутином экстракт и способ его получения

Country Status (11)

Country Link
US (2) US9308216B2 (ru)
EP (1) EP2828276B1 (ru)
JP (1) JP6114308B2 (ru)
CN (1) CN104334569B (ru)
BR (1) BR112014029436A2 (ru)
ES (1) ES2693704T3 (ru)
IN (1) IN2014MN02144A (ru)
PL (1) PL2828276T3 (ru)
RU (1) RU2630676C2 (ru)
TR (1) TR201815897T4 (ru)
WO (1) WO2014064731A1 (ru)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103923139B (zh) * 2014-05-08 2016-04-27 罗俊 一种从槐米中提取芦丁的方法
CN106053707A (zh) * 2016-06-24 2016-10-26 广西灵峰药业有限公司 一种药制龟苓膏的生产质量控制方法
KR101859688B1 (ko) * 2016-06-28 2018-05-25 대한민국 루틴 성분을 다량 함유한 기능성 분말의 제조방법
KR101834745B1 (ko) * 2016-10-25 2018-03-08 대한민국 루틴 성분을 다량 함유한 기능성 분말의 제조방법
JP6469629B2 (ja) * 2016-11-25 2019-02-13 株式会社三旺コーポレーション 水素を吸蔵させたシリカを有効成分とするアレルギー疾患の予防・改善用組成物
CN111579701A (zh) * 2020-05-19 2020-08-25 河南科高中标检测技术有限公司 一种亚麻荠种子标准指纹图谱建立方法以及检测芦丁含量的方法
CN114891847B (zh) * 2022-06-02 2023-12-26 杭州配方师科技有限公司 一种羟基肉桂酸芸香苷酯及其制备方法和应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003092410A1 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 Aipop Co., Ltd. Method of extracting rutin from buck wheat growed by hydroponics
WO2004027074A2 (en) * 2002-09-23 2004-04-01 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of Agriculture Extraction, purification and conversion of flavonoids from plant biomass
WO2006070883A1 (ja) * 2004-12-28 2006-07-06 Suntory Limited クエルセチン配糖体組成物およびその調製方法
WO2007109802A2 (en) * 2006-03-23 2007-09-27 Herbalscience Singapore Pte. Ltd. Extracts and methods comprising green tea species
RU2394597C2 (ru) * 2005-11-24 2010-07-20 Вифор (Интернациональ) Аг Препарат, содержащий комплексные соединения железа (iii) и активное окислительно-восстановительное вещество

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2534275A (en) * 1947-07-18 1950-12-19 Charles F Krewson Method of refining rutin
CN1013579B (zh) 1987-05-25 1991-08-21 北京工业大学 芦丁生产方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003092410A1 (en) * 2002-04-30 2003-11-13 Aipop Co., Ltd. Method of extracting rutin from buck wheat growed by hydroponics
WO2004027074A2 (en) * 2002-09-23 2004-04-01 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of Agriculture Extraction, purification and conversion of flavonoids from plant biomass
WO2006070883A1 (ja) * 2004-12-28 2006-07-06 Suntory Limited クエルセチン配糖体組成物およびその調製方法
RU2394597C2 (ru) * 2005-11-24 2010-07-20 Вифор (Интернациональ) Аг Препарат, содержащий комплексные соединения железа (iii) и активное окислительно-восстановительное вещество
WO2007109802A2 (en) * 2006-03-23 2007-09-27 Herbalscience Singapore Pte. Ltd. Extracts and methods comprising green tea species

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Gulpinar A.R. et al, 2012, vol. 46, N2б 536-543. *
Jose Galberto Martins da Costa et al, Molecules, 2012, 17, 934-950. J.P. Balz et al, Planta Medica, 1979, vol. 36, 174-177. *
Legnerova Z. et al, Analytica Chimica Acta, 2003, vol. 497, N1-2, 165-174. *
WU T. et al, 2007, vol. 100, N4, 1573-1579. *

Also Published As

Publication number Publication date
IN2014MN02144A (ru) 2015-08-21
US9308216B2 (en) 2016-04-12
EP2828276A1 (en) 2015-01-28
PL2828276T3 (pl) 2019-02-28
ES2693704T3 (es) 2018-12-13
JP2015536299A (ja) 2015-12-21
RU2015119261A (ru) 2016-12-10
US20150157654A1 (en) 2015-06-11
JP6114308B2 (ja) 2017-04-12
EP2828276A4 (en) 2015-08-26
CN104334569B (zh) 2017-06-13
TR201815897T4 (tr) 2018-11-21
CN104334569A (zh) 2015-02-04
EP2828276B1 (en) 2018-08-22
BR112014029436A2 (pt) 2021-07-06
US9827262B2 (en) 2017-11-28
US20160213699A1 (en) 2016-07-28
WO2014064731A1 (en) 2014-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2630676C2 (ru) Обогащенный рутином экстракт и способ его получения
CN106810904B (zh) 一种花青素类成分的提取方法
CN110101728B (zh) 基于胶束介质处理的马齿苋多糖及总黄酮联合提取方法
CN101612243A (zh) 一种天然植物花椒提取物的应用方法
CN105267275B (zh) 一种菊花中黄酮的提取方法
CN102816066A (zh) 一种从金银花叶中提取绿原酸和金丝桃苷的方法
CN108558837B (zh) 黄烷醇生物碱及其制备方法和应用
CN107496490B (zh) 一种淫羊藿红景天制剂及其制备方法
CN102362876A (zh) 一种水杉皮提取物及其制备方法和用途
CN101823964A (zh) 鸡树条荚蒾叶中绿原酸的制备工艺
CN110386861A (zh) 从工业大麻里提取大麻二酚的新型工艺方法
CN106939031B (zh) 一种螺旋甾碱烷型糖苷生物碱及其制备方法与用途
CN101612292A (zh) 一种天然植物土茯苓提取物的应用方法
CN109620860B (zh) 一种用于提取香椿多酚的溶剂及其应用
CN109096076B (zh) 一种查尔酮类化合物及其制备方法
CN106905391B (zh) 一种蓝莓花色苷提取、分离纯化方法
TWI533875B (zh) 富芸香素之萃取物及其製備方法
CN101590110A (zh) 桑葚中生物类总黄酮的提取方法
CN103479702A (zh) 一种红花黄色素的提取方法及应用
CN108210554A (zh) 一种从甘草中分离纯化醇溶性总黄酮的方法
CN108997293A (zh) 一种槲皮素新晶体及其制备方法
CN112094828B (zh) 一种从山茶花中提取sod超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法
CN106138294B (zh) 一种翻白草总黄酮的制备方法
CN107308270A (zh) 一种抗癌药物组合物
CN108530505A (zh) 一种黄酮苷类化合物及其制备方法和应用