RU2549098C2 - Теплоустойчивые пробиотические композиции и содержащие их продукты здорового питания - Google Patents

Теплоустойчивые пробиотические композиции и содержащие их продукты здорового питания Download PDF

Info

Publication number
RU2549098C2
RU2549098C2 RU2012104796/13A RU2012104796A RU2549098C2 RU 2549098 C2 RU2549098 C2 RU 2549098C2 RU 2012104796/13 A RU2012104796/13 A RU 2012104796/13A RU 2012104796 A RU2012104796 A RU 2012104796A RU 2549098 C2 RU2549098 C2 RU 2549098C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
microorganisms
probiotic
coating
layer
cationic
Prior art date
Application number
RU2012104796/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2012104796A (ru
Inventor
Адель ПЕНХАСИ
Йохай ЗОРЕА
Original Assignee
ДеГама Пробиотикс Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42313454&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2549098(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ДеГама Пробиотикс Лтд. filed Critical ДеГама Пробиотикс Лтд.
Publication of RU2012104796A publication Critical patent/RU2012104796A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2549098C2 publication Critical patent/RU2549098C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D8/00—Methods for preparing or baking dough
    • A21D8/02—Methods for preparing dough; Treating dough prior to baking
    • A21D8/04—Methods for preparing dough; Treating dough prior to baking treating dough with microorganisms or enzymes
    • A21D8/045—Methods for preparing dough; Treating dough prior to baking treating dough with microorganisms or enzymes with a leaven or a composition containing acidifying bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
    • A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
    • A21D10/00—Batters, dough or mixtures before baking
    • A21D10/002—Dough mixes; Baking or bread improvers; Premixes
    • A21D10/005—Solid, dry or compact materials; Granules; Powders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
    • A23G1/00—Cocoa; Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/30—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor
    • A23G1/32—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
    • A23G1/42—Cocoa products, e.g. chocolate; Substitutes therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L3/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs
    • A23L3/40—Preservation of foods or foodstuffs, in general, e.g. pasteurising, sterilising, specially adapted for foods or foodstuffs by drying or kilning; Subsequent reconstitution
    • A23L3/44—Freeze-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/30—Dietetic or nutritional methods, e.g. for losing weight
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
    • A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
    • A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
    • A23P10/35—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives with oils, lipids, monoglycerides or diglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K2035/11—Medicinal preparations comprising living procariotic cells
    • A61K2035/115—Probiotics

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)

Abstract

Изобретение относится к продуктам здорового питания. Предложены гранулы пробиотиков, содержащие ядро, включающее пробиотические микроорганизмы и субстрат, в котором абсорбированы указанные микроорганизмы и по меньшей мере три слоя, включающих внутренний масляный слой, покрывающий указанное ядро, и первый внешний слой и второй внешний слой. При этом указанный первый внешний слой представляет собой слой энтеросолюбильного покрытия, содержащий pH-чувствительный полимер, выбранный из группы, включающей альгиновую кислоту, альгинат аммония, альгинат натрия, калия, магния или кальция. Указанный второй внешний слой представляет собой слой внешнего теплостойкого покрытия. Предложены способы изготовления гранул, а также пищевой продукт, содержащий вышеуказанные гранулы. Изобретение позволяет получить пробиотические гранулы, адаптированные выдерживать высокие температуры выпечки при тепловой обработке пищевых продуктов. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 13 пр.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к продуктам здорового питания, в частности к хлебобулочным изделиям, содержащим пробиотики. Предложен способ изготовления продукта, который подвергается тепловой обработке по меньшей мере на одной стадии изготовления, при сохранении живыми достаточного количества пробиотических микроорганизмов.
Предпосылки изобретения
Пробиотики представляют собой живые микробные пищевые добавки, которые благотворно влияют на организм посредством поддержания естественной кишечной флоры, посредством конкуренции с вредными микроорганизмами в желудочно-кишечном тракте, посредством участия в полезных метаболических процессах и посредством усиления резистентности организма-хозяина к токсическим веществам. Ряд организмов используют в пробиотических пищевых продуктах и примером являются микробиологические роды Lactobacillus или Bifidobacterium. Пробиотические организмы должны оставаться живыми в течение срока годности продукта, для того чтобы быть эффективными, и, кроме того, они должны оставаться живыми на всем пути прохождения через желудочно-кишечный тракт в толстую кишку. Пробиотические организмы обычно включают в молочные продукты, такие как йогурты. Существует необходимость во введении полезных микроорганизмов в другие типы пищевых продуктов, например в хлебобулочные изделия. Однако основная проблема при производстве хлебобулочных диетических изделий заключается в температурной обработке, причем температура обычно так высока (превышая 180°С), что продукты почти стерилизуются. В WO 94/00019 описан способ изготовления хлебобулочного изделия, содержащего живые микроорганизмы, включающий охлаждение хлебобулочного изделия и введение в него суспензии живых микроорганизмов. В WO 2009/069122 тех же авторов, которые разработали настоящее изобретение, описан способ изготовления хлебобулочных изделий, включающий инкапсулирование гранул пробиотика, тем самым повышая их стабильность. Задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить способ изготовления приемлемой для питания композиции, содержащей пробиотические микроорганизмы, причем эта композиция является устойчивой к высоким температурам.
Другая задача изобретения заключается в том, чтобы предложить хлебобулочное изделие, содержащее жизнеспособные микроорганизмы в достаточном количестве.
Еще одна задача изобретения заключается в том, чтобы предложить способ изготовления пробиотического хлебобулочного изделия без необходимости введения жизнеспособных микроорганизмов в хлебобулочное изделие после процесса выпечки.
Дополнительная задача изобретения заключается в том, чтобы предложить хлебобулочные изделия, содержащие живые пробиотические микроорганизмы во время всего процесса выпечки.
Еще одна задача изобретения заключается в том, чтобы предложить хлебобулочные изделия, содержащие термостабилизированную пробиотическую композицию.
Также задача изобретения заключается в том, чтобы предложить пробиотические хлебобулочные изделия, обладающие длительным сроком хранения.
Другие задачи и преимущества настоящего изобретения будут очевидны по ходу описания.
Краткое изложение сущности изобретения
Согласно настоящему изобретению предложена гранула пробиотика, содержащая: (1) ядро, содержащее пробиотические микроорганизмы и субстрат, в котором абсорбированы указанные микроорганизмы; (2) внутренний масляный слой, покрывающий указанное ядро; и (3) первый внешний слой и второй внешний слой, которые покрывают указанное ядро и указанный внутренний слой, содержащие по меньшей мере два разных полимера. Указанный субстрат и указанные два разных полимера могут содержать три полисахарида, приемлемых для питания. Указанное ядро может дополнительно содержать один или более чем один вспомогательный агент для указанных микроорганизмов. Предпочтительно агенты способствуют росту указанных микроорганизмов и могут содержать пребиотические вещества, такие как олигосахариды. Указанный внутренний масляный слой может содержать вещество, выбранное из жирных кислот, восков, жиров, масел и липидов. Указанный первый внешний слой обеспечивает стабильность указанных микроорганизмов в условиях верхних отделов желудочно-кишечного тракта, и указанный второй внешний слой увеличивает стабильность указанных микроорганизмов в указанном ядре при повышенной температуре. Указанный субстрат содержит один или более чем один компонент, выбранный из сахаридов и дополнительных агентов. Указанные агенты выбраны из стабилизатора, хелатирующего агента, синергического агента, антиоксиданта и регулятора рН, и указанные сахариды предпочтительно включают пребиотические олигосахариды.
Указанные два внешних слоя в гранулах по изобретению содержат два разных полимера; полимеры могут иметь волокнистую или гелеобразную природу. В одном воплощении по меньшей мере один из внешних слоев содержит волокнистый полисахарид, и по меньшей мере один из внешних слоев содержит гелеобразный полисахарид. Гранула пробиотика согласно изобретению может содержать дополнительные слои, например по меньшей мере один промежуточный слой, расположенный между указанным масляным слоем и указанным вторым внешним слоем. Гранула пробиотика по настоящему изобретению содержит пробиотический микроорганизм, который предпочтительно является бактериальным. Указанный микроорганизм преимущественно включает роды, выбранные из Lactobacillus, Bifidobacterium, Bacillus, Escherichia, Streptococcus, Diacetylactis и Saccharomyces, или их смесь. Микроорганизмы представляют собой в предпочтительном воплощении пробиотические бактерии.
Согласно изобретению предложен способ изготовления гранулы пробиотика, содержащей ядро, содержащее пробиотические микроорганизмы и субстрат, в котором абсорбированы указанные микроорганизмы, окруженное внутренним масляным слоем и двумя внешними полимерными слоями, включающий: (1) смешивание суспензии пробиотических микроорганизмов с субстратом на основе целлюлозы и с вспомогательными агентами для микроорганизмов с получением таким образом смеси для ядра; (2) покрытие частиц указанной смеси для ядра масляным слоем с получением таким образом частиц с масляным покрытием; (3) покрытие указанных частиц с масляным покрытием первым полимерным слоем, который обеспечивает стабильность указанных микроорганизмов в условиях верхних отделов желудочно-кишечного тракта, с получением таким образом частиц, покрытых двумя слоями; и (4) покрытие указанных двухслойных частиц вторым полимерным слоем, который увеличивает стабильность микроорганизмов в указанном ядре в условиях выпечки. Указанные микроорганизмы могут включать один или более чем один микробный штамм, и их смешивают и абсорбируют на микробиологически совместимом полимере, который также приемлем и одобрен для питания, примером которого является полисахарид, такой как вещество на основе целлюлозы. В эту смесь могут быть добавлены вещества, поддерживающие стабильность или рост указанных микроорганизмов. Предпочтительно включают средства поддержки пробиотиков, известные как пребиотики, например мальтодекстрин, трегалоза и так далее. На стадиях нанесения покрытия могут быть использованы методики, известные в данной области техники, включая нанесение покрытия в псевдоожиженном слое, распыление и так далее. При создании покрывающих слоев могут быть использованы растворы или суспензии, а также порошки и так далее. Указанные стадии нанесения покрытия со (2) по (4) приводят к увеличению массы на величину от 10 до 100% относительно массы ядра, например, от 15 до 50%. В предпочтительном воплощении способ производства гранулы пробиотика включает (1) смешивание водной суспензии пробиотических микроорганизмов, содержащих по меньшей мере один род, выбранный из Lactobacillus, Bifidobacterium, Bacillus, Escherichia, Streptococcus, Diacetylactis и Saccharomyces или их смесь, с по меньшей мере одним полисахаридом и по меньшей мере одним олигосахаридом (примером является микрокристаллическая целлюлоза с мальтодекстрином и трегалозой), с получением таким образом смеси для ядра; (2) покрытие частиц указанной смеси для ядра масляным слоем с получением таким образом частиц с масляным покрытием; (3) покрытие указанных частиц с масляным покрытием первым полимерным слоем и вторым полимерным слоем; где указанные два полимерных слоя являются разными и включают по меньшей мере два вещества, выбранные из целлюлозы, модифицированной целлюлозы, полисахарида и/или синтетических полимеров и их смеси.
Важным является то, что изобретение относится к пробиотической композиции, содержащей гранулы, имеющие ядро, содержащее пробиотические микроорганизмы и субстрат, в котором абсорбированы указанные микроорганизмы, окруженное внутренним масляным слоем и двумя внешними полимерными слоями. Пробиотическая композиция по изобретению демонстрирует высокую устойчивость к повышенной температуре. Говоря здесь о высокой устойчивости к повышенной температуре, или говоря о высокой термостабильности, имеют в виду жизнеспособность пробиотических микроорганизмов в гранулах по сравнению со свободными микроорганизмами и, в частности, жизнеспособность пробиотических микроорганизмов в гранулах, добавленных в пищевой продукт, по сравнению со свободными микроорганизмами. В одном аспекте изобретения пробиотические микроорганизмы в ядре трехслойной гранулы выдерживают воздействия на гранулы более высоких температур, чем температура окружающей среды. Термостабильность пробиотической композиции по изобретению достаточно высока, чтобы гарантировать, что часть начальной бактериальной нагрузки, добавленной в пробиотический пищевой продукт по изобретению, остается жизнеспособной даже после всех необходимых стадий производства. Такие стадии могут включать выпечку.
Согласно изобретению предложен продукт здорового питания или пищевая добавка, содержащая пробиотическую композицию, как она описана выше, содержащую стабильные гранулы пробиотика. Указанный продукт может предпочтительно включать хлебобулочное изделие, например мучные кондитерские изделия или хлеб. Указанный продукт может также включать тунец, шоколад, фруктовые соки и молочные продукты.
Согласно изобретению предложен продукт здорового питания, содержащий мучные кондитерские изделия, хлеб, муку, мучные изделия, хлебобулочные изделия, замороженную выпечку, йогурт, молочные продукты, шоколад, нектары, фруктовые соки и тунец. Пищевой продукт согласно изобретению, содержащий гранулы пробиотика, может быть подвергнут воздействию более высокой температуры, чем температура окружающей среды, во время процесса производства.
Вышеуказанные и другие характеристики и преимущества изобретения станут гораздо более очевидными благодаря следующим примерам и на основании прилагаемого графического материала, где:
На чертеже показана схема многослойной капсулы согласно одному из воплощений изобретения для включения в продукты здорового питания; инкапсулирование предназначено для придания пробиотическим микроорганизмам максимальной теплостойкости во время стадии нагревания в процессе производства при получении указанного пищевого продукта, а также высокой биологической эффективности в нижних отделах ЖК-тракта после выхода из желудка в неизменном виде; белое ядро содержит пробиотические микроорганизмы и абсорбирующий субстрат; первый темный слой, прилегающий к ядру, представляет собой масляный слой; светлый слой, прилегающий к масляному слою, представляет собой кислотоустойчивый слой; темный слой, прилегающий к кислотоустойчивому слою, представляет собой возможный промежуточный слой; и внешний светлый слой представляет собой теплостойкий слой.
Подробное описание изобретения
В настоящее время неожиданно обнаружили, что пробиотические микроорганизмы могут быть включены в состав ядер гранул, имеющих по меньшей мере три слоя, таким образом получая пробиотические композиции жизнеспособных пробиотических организмов даже после выпечки, при этом композиции к тому же остаются стабильными при хранении и способными к введению жизнеспособных микроорганизмов в толстую кишку после перорального введения.
Согласно изобретению предложены гранулированные пробиотики для применения в качестве пищевых добавок для здорового питания. В частности, настоящее изобретение относится к способу получения хлебобулочных изделий, таких как пробиотические мучные кондитерские изделия. Суспензию пробиотических микроорганизмов смешивают и гранулируют с подходящим веществом-носителем с образованием частиц, составляющих ядро, на которые будет нанесено покрытие. Пробиотический микроорганизм может быть выбран из Bacillus coagulans GBI-30, 6086; Bacillus subtilis var natt; Bifidobacterium sp LAFTI B94; Bifidobacterium bifidum; Bifidobacterium bifidum rosell-71; Bifidobacterium breve; Bifidobacterium breve Yakult; Bifidobacterium breve Rosell-70; Bifidobacterium infantis; Bifidobacterium infantis 35624; Bifidobacterium lactis; Bifidobacterium longum; Bifidobacterium longum Rosell-175; Bifidobacterium longum BB536; Bifidobacterium animalis; Bifidobacterium animalis subsp.lactis BB-12; Bifidobacterium animalis subsp.lactis HN019; Escherichia coli M-17; Escherichia coli Nissle 1917; Lactobacillus acidophilus; Lactobacillus acidophilus DDS-1; Lactobacillus acidophilus LAFTI® L10; Lactobacillus acidophilus LA-5; Lactobacillus acidophilus NCFM; Lactobacillus casei; Lactobacillus casei LAFTI® L26; Lactobacillus casei CRL431; Lactobacillus casei DN114-001 (Lactobacillus casei lmmunitas(s)/Defensis); Lactobacillus brevis; Lactobacillus bulgaricus; Lactobacillus gasseri; Lactobacillus paracasei; Lactobacillus casei F19; Lactobacillus casei Shirota; Lactobacillus paracasei St11 (или NCC2461); Lactobacillus plantarum; Lactobacillus plantarum 299V; Lactobacillus reuteri ATTC 55730 (Lactobacillus reuteri SD2112); Lactobacillus rhamnosus; Lactobacillus salivarius; Lactobacillus delbrueckii; Lactobacillus fermentum; Lactococcus lactis; Lactococcus lactis L1A; Lactococcus lactis subsp; Lactococcus lactis Rosell-1058; Lactobacillus paracasei St11 (или NCC24610; Lactobacillus johnsonii La1 (соответствует Lactobacillus LC1); Lactobacillus johnsonii La1 (соответствует Lactobacillus LC1, Lactobacillus johnsonii NCC533); Lactobacillus rhamnosus Rosell-11; Lactobacillus acidophilus Rosell-52; Streptococcus thermophilus; Diacetylactis; Lactobacillus rhamnosus ATCC 53013 (открыт Gorbach и Goldin(=LGG)); Lactobacillus rhamnosus LB21; Lactobacillus rhamnosus GR-1 и Lactobacillus reuteri RC-14; Lactobacillus acidophilus NCFM и Bifidobacterium bifidum BB-12; Saccharomyces cerevisiae; Saccharomyces cerevisiae (boulardii) lyo; и их смесей.
Для процесса гранулирования может быть использован подходящий гранулятор или, альтернативно, псевдоожиженный слой. Процесс сушки может включать лиофилизацию. Гранулы пробиотика согласно изобретению могут иметь широкий диапазон размеров. Неограничивающим примером гранулы пробиотика согласно изобретению является по существу сферическая частица, имеющая средний диаметр примерно от 0,1 до примерно 1000 микрон. Не желая ограничиваться какой-либо теорией, полагают, что смешивание пробиотических микроорганизмов с микробиологически приемлемым полимером, таким как производное целлюлозы, в ядре из частиц, подлежащее покрытию тройным слоем микробиологически приемлемых веществ, приводит к повышенной теплостойкости микроорганизма, где повышенная устойчивость может являться следствием как пониженной теплопроводности, так и стабилизации клеток. Обработанные пробиотические микроорганизмы согласно изобретению выдерживают нагрев при выпечке при заранее определенных температуре выпечки и времени выпечки. Полагают, что внутренний масляный слой и первый внешний слой (слой энтеросолюбильного покрытия) дополнительно защищают пробиотические микроорганизмы во время их прохождения через верхние отделы желудочно-кишечного тракта, делая возможным высвобождение пробиотиков либо в тонкой кишке, либо в толстой кишке, либо в обеих. Структура гранулированной пробиотической композиции по изобретению обеспечивает относительно высокую стабильность (жизнеспособность микробных клеток) при хранении перед применением при получении пищевых продуктов, а также внутри пищевых продуктов при их хранении. Кроме того, указанная структура обеспечивает желаемое высвобождение жизнеспособных микроорганизмов в нижних отделах желудочно-кишечного тракта субъекта, принимающего в пищу продукты здорового питания, например хлебобулочное изделие для здорового питания. Кроме того, совокупный положительный эффект может быть дополнительно усилен при включении в пробиотическую композицию также олигосахаридов (называемых пребиотиками), способствующих росту полезного микроорганизма. Возможно, указанный первый внешний слой (слой устойчивого в желудочно-кишечном тракте покрытия, называемый слоем энтеросолюбильного покрытия) может быть отделен от указанного второго внешнего слоя (слоя внешнего теплостойкого покрытия) с помощью промежуточного слоя инертного покрытия для предотвращения любого возможного взаимодействия между ними.
Указанный масляный внутренний слой может быть выбран из группы, состоящей из пчелиного воска, карнаубского воска, японского воска, костного воска, парафинового воска, китайского воска, ланолина (шерстяного воска), шеллачного воска, спермацета, мирикового воска, канделильского воска, гидрированного касторового масла, воска эспарто, масла жожоба, воска оурикури, воска рисовых отрубей, соевого воска, церезиновых восков, монтанного воска, озокерита, торфяных восков, микрокристаллического воска, вазелина, полиэтиленовых восков, восков Фишера-Тропша, химически модифицированных восков, замещенных амидных восков, полимеризованных α-олефинов, растительного масла, гидрированного растительного масла, гидрированного касторового масла, жирных кислот, сложных эфиров жирных кислот, жирных спиртов, этерифицированных жирных диолов, гидроксилированных жирных кислот, стеариновой кислоты, стеарата натрия, стеарата кальция, стеарата магния, пальмитата, пальмитолеата, гидроксипальмитата, олеатов длинноцепочечных алифатических спиртов, гидроксилоктакозанилгидроксистеарата, фосфолипидов, лецитина, фосфатидилхолина.
Указанный первый внешний слой может содержать одно или более чем одно рН-чувствительное покрытие, обычно называемое в данной области техники как "энтеросолюбильное покрытие", в соответствии с традиционными методами для замедления высвобождения пробиотических микроорганизмов. Подходящие рН-чувствительные полимеры включают полимеры, которые относительно нерастворимы и непроницаемы при рН среды желудка, но которые более растворимы или расщепляемы или проницаемы при рН среды в тонкой кишке или толстой кишке. Такие рН-чувствительные полимеры включают полиакриламиды, производные фталатов, такие как кислые фталаты углеводов, ацетатфталат амилозы, ацетатфталат целлюлозы (САР), другие фталаты сложных эфиров целлюлозы, фталаты простых эфиров целлюлозы, фталат гидроксипропилцеллюлозы (НРСР), фталат гидроксипропилэтилцеллюлозы (НРЕСР), фталат гидроксипропилметилцеллюлозы (НРМСР), сукцинат ацетата гидроксипропилметилцеллюлозы (HPMCAS), фталат метилцеллюлозы (МСР), фталат поливинилацетата (PVAcP), гидрофталат поливинилацетата, САР натрия, кислый фталат крахмала, ацетаттримеллитат целлюлозы (CAT), сополимер стирола и дибутилфталата малеиновой кислоты, сополимер стирола и поливинилацетатфталата малеиновой кислоты, сополимеры стирола и малеиновой кислоты, производные полиакриловой кислоты, такие как сополимеры акриловой кислоты и сложного эфира акриловой кислоты, полиметакриловая кислота и ее сложные эфиры, сополимеры полиакриловой и метакриловой кислот, шеллак и сополимеры винилацетата и кротоновой кислоты. Предпочтительные рН-чувствительные полимеры включают шеллак, производные фталата, CAT, HPMCAS, производные полиакриловой кислоты, в частности сополимеры, содержащие акриловую кислоту и по меньшей мере один сложный эфир акриловой кислоты, полиметилметакрилат, смешанный с сополимерами акриловой кислоты и сложных эфиров акриловой кислоты, и сополимеры винилацетата и кротоновой кислоты, альгиновую кислоту и альгинаты, такие как альгинат аммония, альгинат натрия, калия, магния или кальция. Особо предпочтительная группа рН-чувствительных полимеров включает CAP, PVAcP, НРМСР, HPMCAS, анионные акриловые сополимеры метакриловой кислоты и метилметакрилата и осмополимеры, содержащие акриловую кислоту и по меньшей мере один сложный эфир акриловой кислоты. Ацетатфталат целлюлозы может быть использован в качестве энтеросолюбильного покрытия для инкапсулированных пробиотических композиций по изобретению, чтобы обеспечить замедленное высвобождение пробиотических микроорганизмов, пока лекарственная форма не выйдет из желудка. Раствор САР для покрытия может также содержать один или более чем один пластификатор, такой как диэтилфталат, полиэтиленгликоль-400, триацетин, триацетинцитрат, пропиленгликоль и другие, известные в данной области техники. Предпочтительными пластификаторами являются диэтилфталат и триацетин. Состав САР для покрытия может также содержать один или более чем один эмульгатор, такой как полисорбат-80.
Анионные акриловые сополимеры метакриловой кислоты и метилметакрилата также являются особенно полезными веществами для энтеросолюбильного покрытия для замедления высвобождения пробиотических микроорганизмов, пока они не займут в ЖК-тракте положение, дистальное по отношению к желудку. Сополимеры этого типа поставляются компанией Rohm America, Inc. под товарными знаками EUDRAGIT-L и EUDRAGIT-S. EUDRAGIT-L и EUDRAGIT-S представляют собой анионные сополимеры метакриловой кислоты и метилметакрилата. Соотношение свободных карбоксильных групп и сложных эфиров составляет приблизительно 1:1 в Eudragit-L и приблизительно 1:2 в Eudragit-S. Также могут быть использованы смеси Eudragit-L и Eudragit-S. Для покрытия эти акриловые покрывающие полимеры могут быть растворены в органическом растворителе или смеси органических растворителей или суспендированы в водных средах. Пригодные для этой цели растворители представляют собой ацетон, изопропиловый спирт и метиленхлорид. Как правило, целесообразно включать 5-20 масс.% пластификатора в составы акриловых сополимеров для покрытия.
Пригодные пластификаторы включают полиэтиленгликоли, пропиленгликоли, диэтилфталат, дибутилфталат, касторовое масло и триацетин. Eudragit-L является предпочтительным, поскольку он относительно быстро растворяется при рН среды кишечника. Кроме рН-чувствительных полимеров, перечисленных выше, покрытия для замедленного высвобождения могут состоять из смеси или сочетания двух или более рН-чувствительных полимеров или могут состоять из смеси одного или более чем одного рН-чувствительного полимера и одного или более чем одного рН-нечувствительного полимера. Добавление рН-нечувствительного полимера к рН-чувствительному полимеру полезно при регулировании длительности задержки или скорости высвобождения пробиотических микроорганизмов из гранулы, сферической частицы или пеллет. Например, задержку можно продлить путем смешивания водонерастворимого полимера с рН-чувствительными полимерами, тогда как задержку можно сократить путем смешивания водорастворимого полимера с рН-чувствительными полимерами. Предпочтительные рН-нечувствительные водонерастворимые полимеры включают сложные эфиры целлюлозы, простые эфиры целлюлозы, полиакрилаты, полиамиды, полиэфиры и виниловые полимеры. Предпочтительные рН-нечувствительные водорастворимые полимеры включают гидроксиалкилзамещенные производные целлюлозы, такие как НРС, НЕС и НРМС, поливинилацетат (PVA), полиэтиленгликоль (PEG), полиэтиленоксид (РЕО), сополимеры полиэтиленгликоля и полипропиленгликоля (PEG/PPG) и водорастворимые полиамиды, полисахариды и полиакрилаты.
В такие покрытия могут быть включены различные вспомогательные вещества, включая эмульгаторы, пластификаторы, поверхностно-активные вещества, наполнители и буферные растворы. Наконец, полимерное покрытие может быть охарактеризовано как "квази-энтеросолюбильное" в том смысле, что оно остается по существу неповрежденным в течение значительного периода времени (например, более одного часа) после того, как лекарственная форма выходит из желудка, становясь после этого достаточно проницаемой для пробиотических микроорганизмов, чтобы обеспечить поэтапное высвобождение пробиотических микроорганизмов посредством диффузии через покрытие.
Возможно, в препарате согласно настоящему изобретению имеется промежуточный слой между энтеросолюбильным слоем и внешним теплостойким слоем. Промежуточный слой покрытия композиции согласно настоящему изобретению по существу полностью покрывает энтеросолюбильное покрытие каждой отдельной единицы. Промежуточный слой предусмотрен для того, чтобы предотвратить непосредственный контакт между энтеросолюбильным слоем и внешним теплостойким слоем, тем самым предотвращая любое взаимодействие между ними. Промежуточный слой покрытия согласно любому из воплощений настоящего изобретения возможно и предпочтительно содержит один из водорастворимых полимеров, который включает поливинилы, такие как повидон (PVP: поливинилпирролидон), поливиниловый спирт, сополимер PVP и поливинилацетата, поперечно-сшитые поливинилы, НРС (гидроксипропилцеллюлозу) (более предпочтительно низкомолекулярную), НРМС (гидроксипропилметилцеллюлозу) (более предпочтительно низкомолекулярную), CMC (карбоксиметилцеллюлозу) (более предпочтительно низкомолекулярную), этилцеллюлозу, МЕС (метилэтилцеллюлозу), СМЕС (карбоксиметилэтилцеллюлозу), НЕС (гидроксиэтилцеллюлозу), НЕМС (гидроксиметилэтилцеллюлозу), полиэтиленоксид, гуммиарабик, декстрин, алюмосиликат магния, крахмал, полиакриловую кислоту, полигидроксиэтилметакрилат (РНЕМА), полиметакрилаты и их сополимеры, камедь, водорастворимую камедь, полисахариды, поперечно-сшитые полисахариды, пептиды или поперечно-сшитые пептиды, белок или поперечно-сшитые белки, желатин или поперечно-сшитый желатин, гидролизованный желатин или поперечно-сшитый гидролизованный желатин, коллаген или поперечно-сшитый коллаген, модифицированную целлюлозу, полиакриловую кислоту или поперечно-сшитую полиакриловую кислоту и/или их смеси, но не ограничен ими.
Указанный второй внешний слой, внешнее теплостойкое покрытие, может содержать линейные, разветвленные или поперечно-сшитые полимеры. Они могут представлять собой гомополимеры, или сополимеры, или привитые сополимеры, или блок-сополимеры, взятые в отдельности или смесь. Хотя они могут являться синтетическими полимерами, предпочтительно такие полимеры могут представлять собой природные полимеры, такие как полисахариды, поперечно-сшитые полисахариды, камеди, модифицированные полисахариды, модифицированный крахмал и модифицированная целлюлоза. Полисахарид может быть выбран из группы, состоящей из хитина, хитозана, декстрана, пуллулана, агаровой камеди, гуммиарабика, камеди карайи, камеди бобов рожкового дерева, трагакантовой камеди, каррагинанов, камеди гхатти, гуаровой камеди, ксантановй камеди и склероглюкана, крахмалов, декстрина и мальтодекстрина, гидрофильных коллоидов, таких как пектин, высший метоксипектин и низший метоксипектин. В композиции могут быть использованы фосфатиды, такие как лецитин. Поперечно-сшитый полисахарид может быть выбран из группы, состоящей из нерастворимых солей металлов или поперечно-сшитых производных альгината, пектина, ксантановой камеди, гуаровой камеди, трагакантовой камеди и камеди бобов рожкового дерева, каррагинана, их солей металлов и их ковалентно сшитых производных. Модифицированная целлюлоза может быть выбрана из группы, состоящей из поперечно-сшитых производных гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, метилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы и солей металлов и карбоксиметилцеллюлозы. Более предпочтительно такие полимеры могут представлять собой катионные полимеры. Примеры катионных полимеров включают катионные полиамины, катионные полиакриламиды, катионные полиэтиленимины, катионный поливиниловый спирт, который представляет собой четвертичную соль метилхлорида и привитого сополимера поли(диметиламиноэтилакрилат)/поливиниловый спирт или четвертичную соль метилсульфата и привитого сополимера поли(диметиламиноэтилакрилат)/поливиниловый спирт, ряд сухих смесей PVA с N-(3-хлор-2-гидроксипропил)-N,N,N-триметиламмонийхлоридом, поставляемых компанией Dow Chemical Company под названием QUAT.RTM.-188, содержащих различные количества воды и NaOH, катионный поливинилпирролидон, желатин, поливинилпирролидон, сополимер поливинилацетата и поливинилпирролидона, сополимер поливинилового спирта и поливинилпирролидона, полиэтиленимин, полиаллиламин и его соли, поливиниламин и его соли, продукт конденсации дициандиамида с полиалкиленполиамином, продукт конденсации полиалкиленполиамина с дициандиамидаммонием, продукт конденсации дициандиамида с формалином, аддитивный полимер эпихлоргидрина-диалкиламина; полимер диаллилдиметиламмонийхлорида ("DADMAC"), сополимер диметиламиноэтилметакрилата и нейтральных метакриловых эфиров, поставляемых компанией Rohm Pharma (Degusa) под названием Eudragit Е, сополимер диаллилдиметиламмонийхлорид-SO2, поливинилимидазол, поливинилпирролидон, сополимер винилимидазола, полиамидин, хитозан, катионизированный крахмал, катионные полисахариды, такие как катионный гуар и катионный гидроксипропилгуар, полимеры винилбензилтриметиламмонийхлорида, (2-метакрилоилоксиэтил)триметил-аммонийхлорид, полимеры диметиламиноэтилметакрилата, поливиниловый спирт с четвертичной аммониевой солью в виде боковой цепи, катионный поливинилформамид, катионный поливинилацетамид, катионный поливинилметилформамид, катионный поливинилметилацетамид, поли(диметиламинопропилметакриламид) (DMAPMAM), поли(диметиламиноэтилакрилат), поли(акрилоилэтилтриметиламмонийхлорид), поли(акриламидопропилтриметиламмонийхлорид) (полиАРТАС), поли(метакриламидопропилтриметиламмонийхлорид) (полиМАРТАС) и его соли, поли(винилпиридин) и его соли, сополимер диметиламина с эпихлоргидрином, сополимер диметиламина с эпихлоргидрином и этилендиамином, поли(амидоамин-эпихлоргидрин), катионный крахмал, сополимеры, которые содержат N-винилформамид, аллиламин, диаллилдиметиламмонийхлорид, N-винилацетамид, N-винилпирролидон, N-метил-М-винилформамид, N-метил-N-винилацетамид, диметиламинопропилметакриламид, диметиламиноэтилакрилат, диэтиламиноэтилакрилат, акрилоилэтилтриметиламмонийхлорид или метакриламидопропилтриметиламмонийхлорид в форме полимеризованных структурных элементов и, в случае необходимости, в расщепленной форме и их соли и их комбинации, но не ограничены ими. Хитозан может иметь степень деацетилирования, изменяющуюся от 80% до более чем 95%. Хитозан может также возможно иметь вязкость, изменяющуюся от 50 мПа·с до 800 мПа·с. Хитозан может возможно представлять собой триметилхитозан или кватернизованный хитозан. Полимер может также возможно представлять собой полиглюкозамин, один из компонентов хитозана. Например, полимер может возможно представлять собой полимер (β-1,4)-D-глюкозамина или полимер (β-1,4)-D-глюкозамина и N-ацетил-D-глюкозамина.
Согласно предпочтительному воплощению изобретения пробиотические микроорганизмы в указанном ядре гранулы смешаны с субстратом. Указанный субстрат может содержать моносахариды, такие как триозы, включая кетотриозу (дигидроксиацетон) и альдотриозу (глицеральдегид), тетрозы, такие как кетотетроза (эритрулоза), альдотетрозы (эритроза, треоза) и кетопентоза (рибулоза, ксилулоза), пентозы, такие как альдопентоза (рибоза, арабиноза, ксилоза, ликсоза), дезоксисахар (дезоксирибоза) и кетогексоза (псикоза, фруктоза, сорбоза, тагатоза), гексозы, такие как альдогексоза (аллоза, альтроза, глюкоза, манноза, гулоза, идоза, галактоза, талоза), дезоксисахар (фукоза, фукулоза, рамноза) и гептоза, такая как (седогептулоза), и октоза и ноноза (нейраминовая кислота). Субстрат может содержать сложные сахариды, такие как (1) дисахариды, такие как сахароза, лактоза, мальтоза, трегалоза, тураноза и целлобиоза, (2) трисахариды, такие как раффиноза, мелезитоза и мальтотриоза, (3) тетрасахариды, такие как акарбоза и стахиоза, (4) другие олигосахариды, такие как фруктоолигосахариды (ФОС), галактоолигосахариды (ГОС) и маннанолигосахариды (МОС), (5) полисахариды, такие как полисахариды на основе глюкозы/глюкан, включая гликоген, крахмал (амилоза, амилопектин), целлюлозу, декстрин, декстран, бета-глюкан (зимозан, лентинан, сизофиран) и мальтодекстрин, полисахариды на основе фруктозы/фруктан, включая инулин, леван бета-2-6, полисахариды на основе маннозы (маннан), полисахариды на основе галактозы (галактан) и полисахариды на основе N-ацетилглюкозамина, включая хитин. Могут быть включены другие полисахариды, включая камеди, такие как гуммиарабик (камедь акации).
Согласно предпочтительному воплощению изобретения пробиотические микроорганизмы в указанном внутреннем ядре смешаны с субстратом, который может дополнительно содержать дополнительные компоненты. Эти компоненты могут быть выбраны из хелатирующих агентов. Предпочтительно хелатирующий агент выбран из группы, состоящей из антиоксидантов, эдетата дикалия, эдетата динатрия, эдетата кальция-динатрия, эдетовой кислоты, фумаровой кислоты, яблочной кислоты, мальтола, эдетата натрия, эдетата тринатрия.
Согласно некоторым воплощениям настоящего изобретения ядро дополнительно содержит как хелатор, так и синергический агент (секвестрант). Не желая ограничиваться какой-либо одной гипотезой или теорией, хелатирующие агенты и секвестранты могут быть возможно дифференцированы, как указано ниже. Хелатирующий агент, такой как лимонная кислота, предназначен для содействия в хелатировании следовых количеств металлов, тем самым способствуя предотвращению потери активного ингредиента(ов), такого как симвастатин, вследствие окисления. Секвестрант, такой как аскорбиновая кислота, возможно и предпочтительно имеет несколько гидроксильных и/или карбоксильных групп, которые могут обеспечить запас атомов водорода для регенерации свободного радикала инактивированного антиоксиданта. Поэтому секвестрант предпочтительно действует как поставщик атомов водорода для восстановления первичного антиоксиданта. Согласно предпочтительным воплощениям настоящего изобретения ядро дополнительно содержит антиоксидант. Предпочтительно антиоксидант выбран из группы, состоящей из гидрохлорида цистеина, 4,4-(2,3-диметилтетраметилен-дипирокатехола), богатого токоферолом экстракта (природный витамин Е), α-токоферола (синтетический витамин Е), β-токоферола, γ-токоферола, δ-токоферола, бутилгидрохинона, бутилгидроксианизола (ВНА), бутилгидрокситолуола (ВНТ), пропилгаллата, октилгаллата, додецилгаллата, третичного бутилгидрохинона (TBHQ), фумаровой кислоты, яблочной кислоты, аскорбиновой кислоты (витамин С), аскорбата натрия, аскорбата кальция, аскорбата калия, аскорбилпальмитата и аскорбилстеарата. В состав ядра могут быть включены лимонная кислота, лактат натрия, лактат калия, лактат кальция, лактат магния, аноксомер, эриторбовая кислота, эриторбат натрия, эриторбиновая кислота эриторбин натрия, этоксихин, глицин, гваяковая камедь, цитраты натрия (цитрат натрия однозамещенный, цитрат натрия двузамещенный, цитрат натрия трехзамещенный), цитраты калия (цитрат калия однозамещенный, цитрат калия трехзамещенный), лецитин, полифосфат, винная кислота, тартраты натрия (тартрат натрия однозамещенный, тартрат натрия двузамещенный), тартраты калия (тартрат калия однозамещенный, тартрат калия двузамещенный), тартрат натрия-калия, фосфорная кислота, фосфаты натрия (фосфат натрия однозамещенный, фосфат натрия двузамещенный, фосфат натрия трехзамещенный), фосфаты калия (фосфат калия однозамещенный, фосфат калия двузамещенный, фосфат калия трехзамещенный), этилендиаминтетраацетат кальция-натрия (ЭДТА кальция-натрия), молочная кислота, тригидроксибутирофенон и тиодипропионовая кислота. Согласно одному предпочтительному воплощению антиоксидант представляет собой ВНА.
Согласно предпочтительным воплощениям настоящего изобретения ядро дополнительно содержит стабилизатор. Предпочтительно стабилизатор может представлять собой основное вещество, которое может повышать значение рН водного раствора или дисперсии препарата до по меньшей мере примерно 6,8. Примеры таких основных веществ включают антациды, такие как алюмометасиликат магния, алюмосиликат магния, алюминат магния, безводный гидроксид алюминия, синтетический гидротальцит, синтетический силикат алюминия, карбонат магния, осажденный карбонат кальция, оксид магния, гидроксид алюминия и гидрокарбонат натрия и их смеси; и регуляторы рН, такие как L-аргинин, фосфат натрия, гидрофосфат динатрия, дигидрофосфат натрия, фосфат калия, гидрофосфат дикалия, дигидрофосфат калия, цитрат динатрия, сукцинат натрия, хлорид аммония и бензоат натрия и их смеси, но не ограничены ими. Основное вещество может быть выбрано из группы, состоящей из неорганического водорастворимого или неорганического водонерастворимого соединения. Примеры неорганического водорастворимого основного вещества включают карбонаты, такие как карбонат натрия или калия, бикарбонат натрия, гидрокарбонат калия, фосфаты, выбранные, например, из безводного двухосновного фосфата натрия, калия или кальция, тринатрийфосфата, гидроксиды щелочных металлов, выбранные из гидроксида натрия, калия или лития, и их смеси, но не ограничены ими. Бикарбонат натрия преимущественно служит для нейтрализации кислотных групп в композиции в присутствии влаги, которая может абсорбироваться на частицах композиции во время хранения. Карбонат кальция оказывает буферное действие в хранящейся композиции без видимого воздействия на высвобождение вещества при приеме внутрь. Дополнительно установлено, что карбонаты значительно стабилизируют композицию. Примеры неорганического водонерастворимого основного вещества включают подходящие щелочные соединения, способные придавать необходимую основность, включают некоторые фармацевтически приемлемые неорганические соединения, обычно используемые в антацидных композициях, например оксид магния, гидроксид магния или карбонат магния, гидрокарбонат магния, гидроксид или карбонат алюминия или кальция, комбинированные алюминиево-магниевые соединения, такие как гидроксид магния и алюминия, силикатное соединение, такое как алюмосиликат магния (Veegum F), алюмометасиликат магния (Nesulin FH2), алюмосиликат магния (Nisulin А); а также фармацевтически приемлемые соли фосфорной кислоты, такие как трикальцийфосфат; и их смеси, но не ограничены ими.
Изобретение дает возможность производить различные пищевые продукты для здорового питания, не разделяя стадии смешивания и нагревания. Имеется возможность, например, приготовления хлебного теста, содержащего гранулы пробиотика, избегая любых трудновыполнимых стадий введения по способам предшествующего уровня техники. Массовое соотношение между пробиотической композицией и остальной частью теста может составлять, например, 1:100.
Инкапсулированные пробиотические микроорганизмы согласно настоящему изобретению могут быть введены в муку, мучные изделия, хлебобулочные изделия, йогурт, тунец, замороженную выпечку, шоколад, горячие напитки, нектары и фруктовые соки и другие продукты, которые во время обработки и/или процесса производства могут подвергаться воздействию более высокой температуры, чем температура окружающей среды (комнатная).
Изобретение далее будет дополнительно описано и проиллюстрировано в следующих примерах.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Материалы
Материалы: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Гидрированное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Этилцеллюлоза Е100 Полимер второго слоя покрытия
Альгинат натрия Полимер второго слоя покрытия и теплостойкий полимер
Хлорид кальция Теплостойкий компонент (отвердитель)
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С.
2. Первый слой покрытия с использованием гидрированного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели гидрированное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными бактериями при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Нанесение покрытия проводили с использованием раствора этилцеллюлозы Е100 и альгината натрия в соотношении 85:15 соответственно, в этаноле с общей концентрацией твердых частиц 6% (масс./масс.). Конечная цель процесса нанесения покрытия состояла в получении 20%-ного прироста массы за счет покрытия. Процесс нанесения покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое при 40°С.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Альгинат кальция использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала раздельно готовили водные растворы альгината натрия (3% масс./масс.) и хлорида кальция (5% масс./масс.). Затем оба раствора альгината натрия и хлорида кальция попеременно распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 20% (масс./масс.).
Пример 2
Материалы
Ингредиенты: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Гидрированное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Альгинат натрия высокой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на микроорганизмы высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием гидрированного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели гидрированное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 15%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 20% (масс./масс.).
Пример 3
Материалы
Ингредиенты: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Гидрированное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Альгинат натрия низкой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию бактерий и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация бактерий в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на бактерии высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием гидрированного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели гидрированное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на бактерии с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 15%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 20% (масс./масс.).
Пример 4
Материалы
Ингредиенты: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Насыщенное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Альгинат натрия высокой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Диоксид кремния Скользящий агент
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на микроорганизмы высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием насыщенного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели насыщенное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 15%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Затем после полного растворения хитозана добавляли диоксид кремния (1% масс./масс.). Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 25% (масс./масс.).
Пример 5
Материалы
Ингредиенты: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Гидрированное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Альгинат натрия высокой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на микроорганизмы высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием гидрированного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели гидрированное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 15%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 30% (масс./масс.).
Пример 6
Материалы
Ингредиенты: Функция:
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Гидрированное растительное масло Агент первого слоя покрытия
Альгинат натрия высокой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на микроорганизмы высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием гидрированного растительного масла
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели гидрированное растительное масло распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 25%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 20% (масс./масс.).
Пример 7
Инкапсулированные гранулы с пробиотическими микроорганизмами проверяли на теплостойкость. Соответственно, полученные инкапсулированные гранулы с микроорганизмами из Примера 6 выдерживали при 85°С в течение 45 минут. Затем определяли количество колониеобразующих единиц в г (КОЕ/г), используя описанный ниже метод подсчета.
Метод подсчета Lactobacillus acidophilus и Lactobacillus bifidus: 10 г образца суспендировали в 90 мл фосфатного буфера и помещали в гомогенизатор Stomacher на 10 минут. Затем полученную суспензию перемешивали в течение 90 минут. Смесь затем серийно (десятикратно) разводили и наконец вливали в соответствующие среды для культивирования на чашках Петри. Для ацидофильных лактобактерий и бифидобактерий использовали питательные среды МРС (Мозера-Рогоза-Шарпа), содержащие либо цистеин, либо мальтозу соответственно. Полученные чашки затем инкубировали в течение 3 суток в анаэробных условиях. В конце подсчитывали микроорганизмы и соответственно рассчитывали значение КОЕ/г.
Результаты:
  Lactobacillus acidophilus Bifidobacterium bifidum
Без покрытия - перед процессом нанесения покрытия* (исходное КОЕ/г) 3,6×1010 7,2×109
После нанесения покрытия** (КОЕ/г) 1,6×107 1,2×107
После нагревания*** (КОЕ/г) 1,4×107 5,4×106
*Массовое соотношение между двумя типами микроорганизмов в конечном продукте составляет 1:1.
**Смесь микроорганизмов составляет 10% (масс./масс.) от конечного продукта.
***Процесс нагревания проводили при 80°С в течение 45 минут.
Пример 8
Пробиотическое печенье
Это пробиотическое печенье состоит из 0,3 г наполнителя и 30 г печенья. Наполнитель: следующие ингредиенты смешивают при комнатной температуре (проценты являются массовыми процентами, исходя из общей массы наполнителя): рецепт печенья: 1 часть сахара, 2 части маргарина, 3 части муки, смешанных с 1 процентом пробиотического порошка.
Жизнеспособность микроорганизмов
Максимальная температура составляла примерно 200°С, применяемая в течение вплоть до 4,5 минут, что соответствует большинству процессов промышленного изготовления печенья. Примерно 50% живых микроорганизмов сохранялось после выпечки.
Пример 9
Пробиотический хлеб
Этот пробиотический хлеб состоит из 0,3 г наполнителя и 30 г хлеба. Жизнеспособность микроорганизмов
Уровень жизнеспособности микроорганизмов, полученный при моделировании процесса, составлял от 50% до 80%. Было получено до 83% живых организмов через 10 минут выпечки при 200°С при исходном количестве 109 микроорганизмов на грамм.
Пример 10
Оценка теплостойкости инкапсулированных пробиотических микроорганизмов по настоящему изобретению в сухом состоянии
Цель
Оценка теплостойкости и жизнеспособности инкапсулированных пробиотических микроорганизмов в сравнении с пробиотическими микроорганизмами без покрытия при использовании методики на основе настоящего изобретения в сухом состоянии.
Итог
Как инкапсулированные, так и неинкапсулированные пробиотические микроорганизмы (L. Acidophillus и Bifidobacteria) помещали в печь, которую предварительно нагревали до 80°С, либо в течение 30 минут, либо в течение 45 минут. Затем пробиотики вынимали и проводили анализ числа КОЕ для определения жизнеспособности микроинкапсулированных микроорганизмов в сравнении с неинкапсулированными. Результаты показывают, что воздействие на неинкапсулированные пробиотики таких температурных режимов может быть катастрофическим, когда не может быть подсчитано число КОЕ/г, что указывает на то, что произошло полное разрушение неинкапсулированных микроорганизмов. В противоположность этому, инкапсулированные пробиотики, полученные согласно процессу микроинкапсулирования по настоящему изобретению, не демонстрировали значительного уменьшения жизнеспособности при анализе в условиях такой тепловой обработки. На основании этих результатов можно сделать вывод, что процесс микроинкапсулирования с использованием многослойного покрытия согласно настоящему изобретению обеспечивает теплостойкость пробиотиков в условиях, описанных выше.
Материалы
2 грамма смеси пробиотических микроорганизмов с нанесенным покрытием (L. Acidophillus и Bifidobacteria) согласно настоящему изобретению. Состав слоев покрытия представлен в таблице 1.
2 грамма смеси бактерий без покрытия (L. Acidophillus и Bifidobacteria).
Метод
Процесс микроинкапсулирования проводили согласно основному протоколу процесса производства с номерами партий RDEN 904051 и RDEN 904051.
Таблица 1
Компоненты на разных стадиях процесса микроинкапсулирования
Ингредиенты Стадия
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Гранулированное внутреннее ядро
Дегидрат трегалозы Гранулированное внутреннее ядро
Мальтодекстрин DE15 Гранулированное внутреннее ядро
Lactobacillus acidophilus Гранулированное внутреннее ядро
Bifidobacterium Гранулированное внутреннее ядро
Гидрированное растительное масло (HVO) Первый слой покрытия
Альгинат натрия высокой плотности Второй слой покрытия
Хитозан Третий слой покрытия
Испытание нагреванием
Как микроинкапсулированные, так и неинкапсулированные (контроль) пробиотики помещали в печь, которую предварительно нагревали до 80°С, в течение либо 30 минут, либо 45 минут.
Анализ числа КОЕ
Анализы числа КОЕ проводили для бактерий до и после процесса нагревания с использованием метода, описанного ниже:
1) 10 г образца с 90 мл фосфатного буфера;
2) гомогенизатор Stomacher в течение 10 минут;
3) перемешивание образцов в течение 90 минут;
4) десятикратные разведения;
5) глубинный посев;
6) для ацидофильных лактобактерий использование среды МРС с цистеином;
7) для бифидобактерий использование среды МРС с мальтозой вместо лактозы;
8) инкубирование в течение 3 суток в анаэробных условиях;
9) подсчет бактерий и расчет числа КОЕ/г. Метод подробно описан в других источниках (K.G. de С.Lima et al./LWT - Food Science and Technology 42 (2009), 491-494).
У инкапсулированных пробиотических бактерий сначала разрушали многослойную оболочку, окружающую микроорганизмы, с использованием ступки и пестика, а затем применяли вышеуказанный способ подсчета КОЕ.
Результаты
Таблица 2
Влияние процесса инкапсулирования на число КОЕ
  Lactobacillus Bifidobacterium
acidophilus (КОЕ/г) bifidum (КОЕ/г)
Неинкапсулированные микроорганизмы*
(исходные чистые микроорганизмы)		 3,6×1010 7,2×109
После нанесения покрытия    
(микроинкапсулированные 1,6×107 1,2×107
микроорганизмы)**    
*массовое соотношение между двумя типами микроорганизмов в конечном продукте составляет 1:1.
** Смесь микроорганизмов составляет 10% (масс./масс.) от конечного продукта.
Таблица 3
Влияние тепловой обработки на жизнеспособность пробиотических микроорганизмов в сухом состоянии
  Lactobacillus acidophilus (КОЕ/г) Bifidobacterium bifidum (КОЕ/г)
Инкапсулированные микроорганизмы после тепловой обработки, сухое состояние (80°С, 30 минут) 1,0×107 8,6×106
Инкапсулированные микроорганизмы после тепловой обработки, сухое состояние (80°С, 45 минут) 1,4×107 5,4×106
Немикроинкапсулированные микроорганизмы (80°С, 30 минут) 0 0
Вывод
На основании результатов Таблицы 3 можно сделать вывод, что процесс микроинкапсулирования с использованием процесса нанесения многослойного покрытия согласно настоящему изобретению обеспечивает теплостойкость пробиотиков в сухом состоянии.
Пример 11
Оценка теплостойкости инкапсулированных пробиотических микроорганизмов по настоящему изобретению в условиях полувыпечки
Цель
Оценка теплостойкости и жизнеспособности инкапсулированных пробиотических микроорганизмов при использовании методики согласно настоящему изобретению в сравнении с пробиотическими микроорганизмами без покрытия в условиях полувыпечки.
Итог
Как инкапсулированные, так и неинкапсулированные пробиотические микроорганизмы (L. Acidophillus и Bifidobacteria) смешивали с ингредиентами белого хлеба и подвергали выпечке при 180°С, 70%-ной влажности в течение 40 минут. Чтобы облегчить извлечение микроорганизмов из запеченного теста, и инкапсулированные, и неинкапсулированные микроорганизмы вводили в тесто при использовании двух различных методов, называемых "серпянка" и "равиоли". Соответственно, микроорганизмы добавляли в тесто либо опосредованно при использовании серпянки для изолирования микроорганизмов от теста (эксперимент I по методу серпянки), либо непосредственно путем создания отдельного кармана (эксперимент II по методу равиоли), сделанного из того же теста, уже содержащего микроорганизмы. Согласно методу серпянки микроорганизмы либо предварительно заключали в серпянку, которую затем вводили в тесто перед процессом выпечки (эксперимент Ia), либо микроорганизмы помещали на тонкий кусок серпянки, который предварительно вводили в тесто посредством образования небольшого углубления в центре порции теста и заполнения его тонким куском серпянки (эксперимент Ib). Согласно методу "равиоли" сначала формировали из теста небольшой карман наподобие равиоли, в который помещали 2 грамма смеси микроорганизмов с нанесенным покрытием, и закрывали. Карман затем помещали в центр порции теста. С помощью этих способов можно также предотвратить прилипание теста к микроорганизмам после процесса выпечки. Важно предотвратить прилипание теста к микроорганизмам, поскольку в таком эксперименте тесто может создавать механическое препятствие для дробящего усилия во время процесса дробления, действуя как "амортизатор". Таким образом можно гарантировать, что покрытие полностью разрушено во время процесса дробления перед анализом числа КОЕ. После выпечки микроорганизмы извлекали и определяли число КОЕ/г для каждого штамма микроорганизмов как инкапсулированных, так и неинкапсулированных микроорганизмов.
Результаты анализа КОЕ ясно показывают, что микроорганизмы без покрытия не смогли выжить в условиях выпечки, тогда как инкапсулированные микроорганизмы демонстрировали теплостойкость во время процесса выпечки и высокое значение жизнеспособности после процесса выпечки.
Материалы
3 чашки муки
10 грамм дрожжей
2 столовые ложки оливкового масла
1/8 чайной ложки соли
вода
2 грамма смеси пробиотических микроорганизмов с нанесенным покрытием (L. Acidophillus и Bifidobacteria)
2 грамма смеси бактерий без покрытия (L. Acidophillus и Bifidobacteria)
Методы
Процесс выпечки
Смешивали все ингредиенты для выпечки хлеба, и через несколько минут замешивания тесто оставляли подниматься. Тесто затем делили на отдельные порции. Микроорганизмы вводили в порции теста с использованием двух различных методов, "серпянка" и "равиоли", которые описаны ниже (прокомментированные в эксперименте I и эксперименте II соответственно).
Эксперимент I - метод "серпянки"
Эксперимент Ia - Как инкапсулированные, так и неинкапсулированные микроорганизмы вводили в тесто, когда они были предварительно заключены в "серпянку". 2 г либо инкапсулированных, либо неинкапсулированных микроорганизмов помещали в середину каждой порции теста.
Эксперимент Ib - 2 г инкапсулированных микроорганизмов помещали на поверхность тонкого куска серпянки, который предварительно вводили в середину порции теста посредством образования углубления и заполнения его тонким куском серпянки. Углубление затем закрывали оставшимся тестом.
Эксперимент II - метод "равиоли"
Сначала формировали из теста небольшой карман наподобие равиоли, в который помещали 2 г смеси инкапсулированных микроорганизмов, и закрывали. Карман затем помещали в центр порции теста.
Тесто оставляли подниматься в течение дальнейших 15 минут.
Процесс выпечки проводили при 180°С в течение 40 минут.
На нижнюю полку печи помещали металлический лоток с 1/2 литра воды для создания внутри печи влажности перед помещением буханок хлеба в печь. Созданную внутри печи влажность измеряли перед помещением буханок хлеба в печь. Для достижения оптимального уровня влажности при выпечке буханки хлеба ставили в печь, когда влажность достигала значений от 60 до 70%. Как только порции теста были выпечены, микроорганизмы легко извлекали и передавали на анализ числа КОЕ.
Анализ числа КОЕ
Анализы числа КОЕ проводили для микроорганизмов до и после процесса выпечки с использованием метода, описанного ниже:
1) 10 г образца с 90 мл фосфатного буфера;
2) гомогенизатор Stomacher в течение 10 минут;
3) перемешивание образцов в течение 90 минут;
4) десятикратные разведения;
5) глубинный посев;
6) для ацидофильных лактобактерий использование среды МРС с цистеином;
7) для бифидобактерий использование среды МРС с мальтозой вместо лактозы;
8) инкубирование в течение 3 суток в анаэробных условиях;
9) подсчет микроорганизмов и расчет числа КОЕ/г.
Метод подробно описан в других источниках (К.G. de С.Lima et al./LWT - Food Science and Technology 42 (2009), 491-494).
У инкапсулированных пробиотических микроорганизмов сначала разрушали многослойную оболочку, окружающую микроорганизмы, используя ступку и пестик, а затем применяли вышеуказанный способ подсчета КОЕ.
Результаты
Таблица 4
Число КОЕ/г инкапсулированных и неинкапсулированных микроорганизмов до и после состояния выпекания
  L. acidophilus Bifidobacteria
Инкапсулированные пробиотические бактерии до выпечки 5×105 5×105
Неинкапсулированные пробиотические бактерии до выпечки 5×105 5×105
Инкапсулированные пробиотические бактерии после выпечки - эксперимент Iа 5×105 3,1×105
Неинкапсулированные пробиотические бактерии после выпечки - эксперимент Iа 0 0
Инкапсулированные пробиотические бактерии после выпечки - эксперимент Ib 1×105 1×105
Инкапсулированные пробиотические бактерии после выпечки - эксперимент II 1×105 1×105
Вывод
Результаты, полученные выше, показывают, что инкапсулированные пробиотические микроорганизмы при использовании методики согласно настоящему изобретению являются устойчивыми к нагреванию при выпечке под воздействием влажности, присутствующей в тесте во время процесса выпечки.
Пример 12
Оценка теплостойкости инкапсулированных пробиотических микроорганизмов по настоящему изобретению в условиях полной выпечки
Цель
Оценка теплостойкости и жизнеспособности инкапсулированных пробиотических микроорганизмов при использовании методики согласно настоящему изобретению в условиях полной выпечки с использованием промышленного метода. Это исследование предназначено для того, чтобы продемонстрировать пригодность концепции инкапсулированных пробиотиков согласно настоящему изобретению, устойчивых к процессу выпечки, при котором они подвергаются напряжениям сдвига, влажности и нагреванию.
Краткий обзор
Цель этого исследования состояла в том, чтобы оценить устойчивость инкапсулированных пробиотиков согласно настоящему изобретению в процессе выпечки, используемом в промышленности. В соответствии с этим инкапсулированные пробиотики непосредственно добавляли в тесто, подвергаемое сначала напряжениям сдвига при замешивании и затем нагреванию и влажности в процессе выпечки. Этот процесс разработан так, чтобы имитировать процесс выпечки, который осуществляют в промышленном методе. Для этой цели инкапсулированные пробиотики согласно настоящему изобретению добавляли непосредственно в муку и другие ингредиенты, в которые затем добавляли воду (метод прямого добавления), и затем замешивали и выпекали. Соответственно, инкапсулированные пробиотики добавляли непосредственно в ингредиенты для приготовления теста и затем гомогенно распределяли в тесте посредством замешивания, при этом на них воздействовала влажная среда во время приготовления теста с последующим воздействием нагревания в процессе выпечки. После процесса выпечки проводили анализ числа КОЕ для определения жизнеспособности инкапсулированных микроорганизмов. Результаты анализа КОЕ ясно показали, что инкапсулированные микроорганизмы демонстрируют высокое значение жизнеспособности после процесса выпечки. Поэтому можно сделать вывод, что инкапсулированные пробиотики согласно настоящему изобретению определенно устойчивы к влажной среде в условиях сильного сдвига, существующих во время замешивания теста, а также к нагреванию в процессе выпечки.
Материалы
Ингредиенты для выпечки хлеба:
белая мука: 231 грамм;
оливковое масло: 18,7 грамм;
соль: 2 грамма;
дрожжи: 5 грамм;
инкапсулированные пробиотики: 2 грамма;
тесто перед выпечкой: 398,7 грамм;
хлеб после выпечки: 364,5 грамма.
Общая методика процесса выпечки
Инкапсулированные пробиотические микроорганизмы L. Addophillus и Bifidobacteria гомогенно смешивали со всеми остальными ингредиентами для выпечки хлеба (белый хлеб). Добавляли воду и затем замешивали тесто. Полученное тесто затем выпекали при 180°С, 70%-ной влажности в течение 40 минут. Этот процесс был следующим:
Оборудование
Миксер Kenwood: чан на 5 литров.
Приготовление теста
Поместить муку, дрожжи и инкапсулированные микроорганизмы в чан для смешивания.
Смешать вместе все ингредиенты.
Добавить масло и соль.
Постепенно добавлять воду до тех пор, пока мучная смесь не образует плотное тесто.
Оставить миксер включенным для замешивания теста в течение 10 минут.
Выключить миксер и оставить тесто выстаиваться в накрытом чане и подниматься в течение 30 минут.
Включить миксер на несколько секунд, чтобы "опустить" тесто.
Процедура выпечки
Сначала печь предварительно нагревали до 180°С, затем помещали в нее тесто. Выпечку проводили при 180°С в течение 40 минут. Металлический лоток, содержащий 1/2 литра воды, помещали на нижнюю полку печи для создания соответствующей влажности (относительная влажность примерно 70%) внутри печи перед помещением теста. Созданную внутри печи влажность измеряли перед выпечкой. Тесто помещали в форму для выпечки и выпекали в течение 40 минут (180°С и относительная влажность 70%). В конце выпечки снова проверяли влажность.
Условия выпечки
Влажность перед выпечкой: 70% (относительная влажность). Влажность после выпечки: 70% (относительная влажность).
Длительность выпечки: 40 минут.
После выпечки образец выпеченного хлеба передавали на определение числа КОЕ/г инкапсулированных микроорганизмов.
Анализ числа КОЕ
Анализы числа КОЕ проводили для инкапсулированных пробиотиков после процесса выпечки с использованием метода определения КОЕ, описанного ниже:
1) брали 20 г образца (выпеченный хлеб), к которому добавляли 90 мл стерильного фосфатного буфера;
2) эту смесь затем разрушали, используя ступку и пестик в течение нескольких минут;
3) добавляли дополнительные 160 мл стерильного фосфатного буфера в одноразовый стерильный пакет гомогенизатора Stomacher.
Эту смесь затем гомогенизировали в течение 2 минут с использованием гомогенизатора Stomacher.
Анализ числа КОЕ/г проводили с использованием следующей стандартной процедуры:
1) десятикратные разведения;
2) глубинный посев;
3) для ацидофильных лактобактерий использование среды МРС с цистеином;
4) для бифидобактерий использование среды МРС с мальтозой вместо лактозы;
5) инкубирование в течение 3 суток в анаэробных условиях;
6) подсчет микроорганизмов и расчет числа КОЕ/г.
Метод подробно описан в других источниках (К.G. de С.Lima et al./LWT - Food Science and Technology 42 (2009), 491-494).
Результаты
Результаты анализа КОЕ до и после выпечки суммированы в Таблице 5. Результаты анализа КОЕ ясно показывают, что инкапсулированные микроорганизмы демонстрировали теплостойкость в процессе полной выпечки и высокое значение жизнеспособности после процесса выпечки.
Таблица 5
Число КОЕ/г инкапсулированных пробиотиков в условиях полной выпечки
  L. acidophilus Bifidobacteria
Инкапсулированные пробиотические бактерии до выпечки 5×105 5×105
Инкапсулированные пробиотические бактерии после выпечки 1,4×105 1,3×105
Вывод
Инкапсулированные пробиотики согласно настоящему изобретению устойчивы к нагреванию при выпечке во время промышленного изготовления, когда инкапсулированные пробиотики непосредственно добавляют ко всем ингредиентам и затем подвергают процессу замешивания при влажности, присутствующей в тесте, и затем нагреванию в процессе выпечки. Эти обнаружения ясно показывают, что препараты со слоями покрытия по изобретению обеспечивают пробиотики необходимой защитой, чтобы выдержать все стадии изготовления хлебобулочного изделия, включая напряжения сдвига при замешивании, относительно высокую влажность и нагревание при выпечке.
Пример 13
Материалы:
Ингредиенты Функция
Lactobacillus acidophilus Пробиотические микроорганизмы
Bifidobacterium Пробиотические микроорганизмы
Микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) Субстрат ядра
Мальтодекстрин Вспомогательный агент для микроорганизмов
Трегалоза Вспомогательный агент для микроорганизмов
Стеариновая кислота Агент первого масляного слоя покрытия
Альгинат натрия высокой вязкости Полимер второго слоя покрытия
Хитозан Теплостойкий полимер
Соляная кислота (HCl) Агент для регулирования уровня рН
Способ
1. Абсорбция микроорганизмов на микрокристаллическом субстрате ядра
Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium абсорбировали на МКЦ-субстрате исходя из соотношения 38:62 соответственно. Для этой цели готовили 30%-ную суспензию микроорганизмов и мальтодекстрина и трегалозы на водной основе. Концентрация микроорганизмов в этой суспензии составляла примерно 15% (масс./масс.). Абсорбцию проводили при конечной температуре менее 35°С, чтобы избежать воздействия на микроорганизмы высоких температур и, таким образом, высокотемпературного повреждения.
2. Первый слой покрытия с использованием стеариновой кислоты
Нанесение покрытия проводили с использованием устройства для нанесения покрытия в псевдоожиженном слое на основе метода горячего плавления. Для этой цели стеариновую кислоту распыляли на МКЦ-субстрат с абсорбированными микроорганизмами при 40°С с получением 40%-ного прироста массы. Поток входящего воздуха регулировали так, чтобы он был низким.
3. Второй слой покрытия - энтеросолюбильное покрытие
Альгинат натрия использовали в качестве энтеросолюбильного полимера. Готовили водный раствор альгината натрия (2% масс./масс.). Раствор альгината натрия распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 15%.
4. Третий слой покрытия - теплостойкое покрытие
Хитозан использовали в качестве теплостойкого полимера для третьего слоя покрытия. Сначала готовили водный раствор хитозана (4% масс./масс.) с рН 5 при использовании HCl. Полученный раствор распыляли на микроорганизмы с нанесенным покрытием до получения прироста массы на 30% (масс./масс.).
Хотя это изобретение описано в аспекте некоторых конкретных примеров, возможны многие модификации и изменения. Поэтому понятно, что в объеме прилагаемой формулы изобретения изобретение может быть реализовано иным способом, чем конкретно описанный.

Claims (11)

1. Гранула пробиотиков, содержащая:
1) ядро, содержащее пробиотические микроорганизмы и субстрат, в котором абсорбированы указанные микроорганизмы; и
по меньшей мере три слоя, включающих
2) внутренний масляный слой, покрывающий указанное ядро; и
3) первый внешний слой и второй внешний слой, которые покрывают указанное ядро и указанный внутренний слой, где указанный первый внешний слой представляет собой слой энтеросолюбильного покрытия, содержащий pH-чувствительный полимер, выбранный из группы, включающей альгиновую кислоту, альгинат аммония, альгинат натрия, калия, магния или кальция; и указанный второй внешний слой представляет собой слой внешнего теплостойкого покрытия, содержащий по меньшей мере один полимер, выбранный из группы, включающей полисахариды, поперечно-сшитые полисахариды, камеди, модифицированные полисахариды, модифицированный крахмал, модифицированную целлюлозу, хитин, хитозан, декстран, пуллулан, агаровую камедь, гуммиарабик, камедь карайи, камедь бобов рожкового дерева, трагакантовую камедь, каррагинаны, камедь гхатти, гуаровую камедь, ксантановую камедь, склероглюкан, крахмалы, декстрин, мальтодекстрин, пектин, высший метоксипектин, низший метоксипектин, лецитин, нерастворимые соли металлов, поперечно-сшитые производные альгината, пектина, ксантановой камеди, гуаровой камеди, трагакантовой камеди, камеди бобов рожкового дерева, каррагинана, их солей металлов и их ковалентно поперечно-сшитых производных, поперечно-сшитые производные гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, метилцеллюлозы, карбоксиметилцеллюлозы, солей металлов и карбоксиметилцеллюлозы, катионные полимеры, катионные полиамины, катионный полиакриламид, катионный полиэтиленимин, катионный поливиниловый спирт, четвертичную соль метилхлорида и привитого сополимера поли(диметиламиноэтилакрилат)/поливиниловый спирт или четвертичную соль метилсульфата и привитого сополимера поли(диметиламиноэтилакрилат)/поливиниловый спирт, ряд сухих смесей PVA (поливинилацетат) с N-(3-хлор-2-гидроксипрол)-N,N,N-триметиламмонийхлоридом, катионный поливинилпирролидон, желатин, поливинилпирролидон, сополимер поливинилацетата и поливинилпирролидона, сополимер поливинилового спирта и поливинилпирролидона, полиэтиленимин, полиаллиламин и его соли, поливиниламин и его соли, продукт конденсации дициандиамида с полиалкиленполиамином, продукт конденсации полиалкиленполиамина с дициандиамидаммонием, продукт конденсации дициандиамида с формалином, аддитивный полимер эпихлоргидрина-диалкиламина, полимер диаллилдиметиламмонийхлорида («DADMAC»), сополимер диметиламиноэтилметакрилата и нейтральных метакриловых эфиров, сополимер диаллилдиметиламмонийхлорид-SO2, поливинилимидазол, поливинилпирролидон, сополимер винилимидазола, полиамидин, хитозан, катионизированный крахмал, катионные полисахариды, катионный гуар и катионный гидроксипропилгуар, полимеры винилбензилтриметиламмонийхлорида, (2-метакрилоилоксиэтил)триметил-аммонийхлорид, полимеры диметиламиноэтилметакрилата, поливиниловый спирт с четвертичной аммониевой солью в виде боковой цепи, катионный поливинилформамид, катионный поливинилацетамид, катионный поливинилметилформамид, катионный поливинилметилацетамид, поли(диметиламинопропилметакриламид) (DMAPMAM), поли(диметиламиноэтилакрилат), поли(акрилоилэтилтриметиламмонийхлорид), поли(акриламидопропилтриметиламмонийхлорид) (полиАРТАС), поли(метакриламидопропилтриметиламмонийхлорид) (полиМАРТАС) и его соли, поли(винилпиридин) и его соли, сополимер диметиламина с эпихлоргидрином, сополимер диметиламина с эпихлоргидрином и этилендиамином, поли(амидоамин-эпихлоргидрин), катионный крахмал, сополимеры, которые содержат N-винилформамид, аллиламин, диаллилдиметиламмонийхлорид, N-винилацетамид, N-винилпирролидон, N-метил-N-винилформамид, N-метил-N-винилацетамид, диметиламинопропилметакриламид, диметиламиноэтилакрилат, диэтиламиноэтилакрилат, акрилоилэтилтриметиламмонийхлорид или метакриламидопропилтриметиламмонийхлорид в форме полимеризованных структурных элементов и в расщепленной форме, и их соли и их комбинации, полиглюкозамин, полимер (β-1,4)-D-глюкозамина или полимер (β-1,4)-D-глюкозамина и N-ацетил-D-глюкозамина.
2. Гранула пробиотиков по п. 1, где указанные пробиотические организмы в ядре трехслойной гранулы выдерживают воздействия на гранулы более высоких температур, чем температура окружающей среды.
3. Гранула пробиотиков по п. 1, где указанные пробиотические организмы абсорбированы в субстрате, содержащем один или более чем один компонент, выбранный из сахаридов и дополнительных агентов.
4. Гранула пробиотиков по п. 3, где указанные агенты выбраны из стабилизатора, хелатирующего агента, синергического агента, антиоксиданта и регулятора pH и где указанные сахариды включают пребиотические олигосахариды.
5. Гранула пробиотиков по п. 1, дополнительно содержащая по меньшей мере один промежуточный слой, расположенный между указанным масляным слоем и указанным вторым внешним слоем.
6. Гранула пробиотиков по любому из пп. 1-5, где указанные микроорганизмы включают род, выбранный из Lactobacillus, Bifidobacterium, Bacillus, Escherichia, Streptococcus, Diacetylactis и Saccharomyces или их смеси.
7. Способ изготовления гранулы по п. 1, включающий смешивание суспензии пробиотических микроорганизмов с субстратом на основе целлюлозы и с вспомогательными агентами для микроорганизмов с получением таким образом смеси для ядра; покрытие частиц указанной смеси для ядра масляным слоем с получением таким образом частиц с масляным покрытием; покрытие указанных частиц с масляным покрытием первым полимерным слоем, который обеспечивает стабильность указанных микроорганизмов в условиях верхних отделов желудочно-кишечного тракта, с получением таким образом частиц, покрытых двумя слоями; и покрытие указанных двухслойных частиц вторым полимерным слоем, который увеличивает стабильность микроорганизмов в указанном ядре в условиях выпечки.
8. Способ по п. 7, где каждая из указанных стадий нанесения покрытия приводит к увеличению массы на величину от 10 до 100% относительно массы указанного ядра.
9. Способ изготовления гранулы по п. 1, включающий:
1) смешивание водной суспензии пробиотических микроорганизмов, включающих по меньшей мере один род, выбранный из Lactobacillus, Bifidobacterium, Bacillus, Escherichia, Streptococcus, Diacetylactis и Saccharomyces или их смеси, с по меньшей мере одним полисахаридом и по меньшей мере одним олигосахаридом с получением таким образом смеси для ядра;
2) покрытие частиц указанной смеси для ядра масляным слоем с получением таким образом частиц с масляным покрытием;
3) покрытие указанных частиц с масляным покрытием первым полисахаридным слоем и вторым полисахаридным слоем;
где указанные два полисахаридных слоя являются разными и содержат по меньшей мере два компонента из целлюлозы, альгината, хитозана или их смеси.
10. Пищевой продукт или пищевая добавка, содержащие гранулу пробиотиков по любому из пп. 1-6.
11. Пищевой продукт по п. 10, выбранный из группы, состоящей из мучных кондитерских изделий, хлеба, муки, мучных изделий, хлебобулочных изделий, замороженной выпечки, йогурта, молочных продуктов, шоколада, нектаров, фруктовых соков и тунца.
RU2012104796/13A 2009-07-09 2010-07-08 Теплоустойчивые пробиотические композиции и содержащие их продукты здорового питания RU2549098C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IL199781 2009-07-09
IL199781A IL199781A0 (en) 2009-07-09 2009-07-09 Heat resistant probiotic compositions and healthy food comprising them
PCT/IL2010/000550 WO2011004375A1 (en) 2009-07-09 2010-07-08 Heat resistant probiotic compositions and healthy food comprising them

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012104796A RU2012104796A (ru) 2013-08-20
RU2549098C2 true RU2549098C2 (ru) 2015-04-20

Family

ID=42313454

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012104796/13A RU2549098C2 (ru) 2009-07-09 2010-07-08 Теплоустойчивые пробиотические композиции и содержащие их продукты здорового питания

Country Status (10)

Country Link
US (3) US20110008493A1 (ru)
EP (1) EP2451300B2 (ru)
CN (2) CN105105104A (ru)
AU (2) AU2010202518B2 (ru)
CA (1) CA2767602C (ru)
ES (1) ES2700879T3 (ru)
IL (2) IL199781A0 (ru)
NZ (1) NZ597992A (ru)
RU (1) RU2549098C2 (ru)
WO (1) WO2011004375A1 (ru)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL199781A0 (en) 2009-07-09 2010-05-17 Yohai Zorea Heat resistant probiotic compositions and healthy food comprising them
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
EP2421544B1 (en) * 2009-04-22 2015-06-03 Ofir Menashe Microorganism comprising particles and uses of same
DK2464721T3 (en) * 2009-08-14 2016-01-25 Dupont Nutrition Biosci Aps Surface dehydrated microorganisms with increased stability and viability
EP2603240B1 (en) * 2010-08-09 2019-11-20 Degama Smart Ltd. Probiotic liquid food products
CN103180432B (zh) * 2010-08-26 2016-03-16 梅西大学 制备耐贮存益生菌食品的方法
EP2648528B1 (en) 2010-12-06 2016-07-20 Degama Berrier Ltd. Composition and method for improving stability and extending shelf life of probiotic bacteria and food products thereof
JP2014506923A (ja) * 2011-03-01 2014-03-20 クオラム イノベーションズ リミテッド ライアビリティ カンパニー 病原性バイオフィルムと関連した状態を治療するための物質および方法
CN102178238B (zh) * 2011-03-02 2012-10-10 润盈生物工程（上海）有限公司 一种耐热型微胶囊益生菌及其制备方法和用途
US9788563B2 (en) * 2011-04-15 2017-10-17 Pepsico, Inc. Encapsulation system for protection of probiotics during processing
AR087159A1 (es) 2011-06-20 2014-02-26 Gen Biscuit Galletita para desayuno con glucosa de lenta disponibilidad
RU2606757C2 (ru) * 2011-11-11 2017-01-10 Кипкул Лтд. Наслаивание и микроинкапсулирование термочувствительного биологически активного материала с использованием слоев теплопоглощающего материала с возрастающими точками плавления
FR2984352B1 (fr) * 2011-12-16 2018-02-16 Lesaffre Et Compagnie Composition comprenant une biomasse microbienne active
WO2013093912A1 (en) * 2011-12-19 2013-06-27 SPAI Group Ltd. Compositions and methods for improving stability and extending shelf life of flavoring agents
KR101381794B1 (ko) * 2012-04-10 2014-04-07 씨제이제일제당 (주) 타가토스 및 프로바이오틱 유산균을 함유하는 신바이오틱 식품 조성물
US20130295227A1 (en) * 2012-05-01 2013-11-07 Robbert H. ter Haar Composition Comprising a Sensitive Ingredient
US9017666B2 (en) * 2012-06-05 2015-04-28 Jarrow Formulas, Inc. Broccoli based nutritional supplements
CN104470371A (zh) * 2012-07-18 2015-03-25 丹尼斯科美国公司 熔化延迟的颗粒
US20140112985A1 (en) * 2012-10-22 2014-04-24 Polonez Therapeutics Llc Method of prevention and treatment of clostridium difficile infection
WO2014067976A1 (en) * 2012-10-30 2014-05-08 Nestec S.A. Compositions comprising microparticles and probiotics to deliver a synergistic immune effect
WO2014170904A1 (en) 2013-04-19 2014-10-23 Degama Smart Ltd. Liquid food product comprisiing granules with heat and humidity resisting probiotic bacteria
US10543175B1 (en) 2013-05-17 2020-01-28 Degama Berrier Ltd. Film composition and methods for producing the same
WO2015017625A1 (en) * 2013-07-31 2015-02-05 Wikifoods, Inc. Encapsulated functional food compositions
CN104642539B (zh) * 2013-11-25 2018-02-09 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 一种益生菌颗粒，其制备方法，含有其的长保质期发酵乳及制备方法
CN103652891B (zh) * 2013-11-28 2015-04-08 浙江省农业科学院 一种包埋干酪乳杆菌的微胶囊及其制备方法
US9622506B2 (en) 2014-02-19 2017-04-18 Incredible Foods, Inc. Encapsulated soft food compositions and methods of making
US10624934B2 (en) 2014-03-06 2020-04-21 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Prebiotic formulations
JP6754694B2 (ja) * 2014-03-06 2020-09-16 リサーチ インスティチュート アット ネイションワイド チルドレンズ ホスピタル プロバイオティクス製剤および使用のための方法
SG11201610390QA (en) 2014-06-25 2017-01-27 Goodman Fielder New Zealand Ltd Probiotic fortified food products and methods of manufacture
US10137164B2 (en) 2015-01-02 2018-11-27 Melaleuca, Inc. Dietary supplement compositions
TWI788111B (zh) 2015-01-02 2022-12-21 美商梅拉洛伊卡公司 多元補充品組成物
TWI829098B (zh) * 2015-01-02 2024-01-11 美商梅拉洛伊卡公司 細菌組成物
TWI553536B (zh) * 2015-03-13 2016-10-11 中強光電股份有限公司 觸控式投影幕及觸控式投影系統
WO2016161506A1 (en) 2015-04-07 2016-10-13 Her Majesty The Queen In Right Of Canada, As Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Method for preparing microencapsulated heat-sensitive bioactive material
CN104957254B (zh) * 2015-06-08 2018-10-16 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 益生菌凝胶颗粒、其制备方法和含有其的乳制品
WO2017011588A1 (en) 2015-07-14 2017-01-19 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Novel formulation for the elimination of cariogenic and opportunistic pathogens within the oral cavity
CN106822007B (zh) * 2015-09-11 2021-12-31 西姆莱斯股份公司 口服制剂
JP7017849B2 (ja) * 2015-09-11 2022-02-09 シムライズ アーゲー 経口投与剤形
EP3365027B1 (en) 2015-10-14 2022-03-30 Research Institute at Nationwide Children's Hospital Hu specific antibodies and their use in inhibiting biofilm
FR3042387B1 (fr) * 2015-10-20 2019-05-24 Ynsect Preservation de vitamines hydrosolubles
US9999640B2 (en) 2016-02-02 2018-06-19 University Of Dammam Microencapsulated probiotic bacteria
ES2698384T3 (es) * 2016-02-10 2019-02-04 Fundacion Tecnalia Res & Innovation Microcápsulas probióticas multicapa
WO2018179001A1 (en) * 2017-03-27 2018-10-04 Praj Industries Limited Process for the preparation of powdered probiotic formulations for monograstic animals.
SG11201913653RA (en) * 2017-07-31 2020-01-30 Mitsubishi Corporation Life Sciences Ltd Thickening composition for dysphagia patients
WO2019144979A1 (es) * 2018-01-25 2019-08-01 Vallecilla B Y Vallecilla M Y Cia Sca Carval De Colombia Procedimiento de granulación y recubrimiento de probioticos y núcleo granulado obtenido mediante el mismo
EP3524051A1 (en) * 2018-02-12 2019-08-14 DuPont Nutrition Biosciences ApS Matricial microencapsulation compositions
CN110432495A (zh) * 2018-05-03 2019-11-12 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 一种耐酸耐胆汁盐的益生菌制剂及其制备方法
CN111134330A (zh) * 2018-11-06 2020-05-12 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 一种挤压造粒法制备益生菌微胶囊的方法及其产品
CN111134333A (zh) * 2018-11-06 2020-05-12 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 含益生菌微胶囊的食品或保健品及其制备方法
CN111134331A (zh) * 2018-11-06 2020-05-12 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 一种益生菌微胶囊及其制备方法
CN111134332A (zh) * 2018-11-06 2020-05-12 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 一种通过流化床喷雾造粒法制备益生菌微胶囊的方法及其产品
CN111150068A (zh) * 2018-11-06 2020-05-15 内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司 一种以复合材料为壁材的益生菌微胶囊及其制备方法
TWI740073B (zh) * 2018-11-16 2021-09-21 大漢酵素生物科技股份有限公司 具有促進腸幹細胞增生、抗病毒、抗發炎和抗過敏功效的乳酸菌晶體組合物及其製備方法
US20220106238A1 (en) * 2018-12-07 2022-04-07 Pivot Bio, Inc. Polymer compositions with improved stability for nitrogen fixing microbial products
CN109480038B (zh) * 2018-12-21 2024-10-11 杭州远大生物制药有限公司 一种耐温益生菌巧克力制品及其制备方法
WO2020179435A1 (ja) * 2019-03-06 2020-09-10 大司 風見 希釈用菌体分散液及びその製造方法
EP3735840A1 (en) 2019-05-07 2020-11-11 DNA Catcher, S.L. Process for preparing high density, thermostable polysaccharide beads as food additives
CN111035013A (zh) * 2019-11-30 2020-04-21 江苏艾兰得营养品有限公司 一种益生菌微胶囊及其制备方法
CN111378642A (zh) * 2020-03-26 2020-07-07 微来世界生物科技(苏州)有限公司 一种微生物疏水包埋物、包埋用溶液及微生物疏水包埋制备方法
CN111748477B (zh) * 2020-07-28 2022-03-18 北部湾大学 一种提高益生菌耐受环丙沙星的方法
CN113455549B (zh) * 2021-06-29 2022-09-13 黑龙江飞鹤乳业有限公司 一种奶酪产品及其制备方法和应用
CN114209063A (zh) * 2021-12-20 2022-03-22 广西大学 一种佛手多糖包埋副干酪乳杆菌微胶囊的制备方法
ES2952438A1 (es) * 2022-03-23 2023-10-31 Igen Biolab Group Ag Aditivo alimenticio postbiotico de productos obtenidos a base de harina de cereal, composicion alimenticia a base de harina de cereal para preparar productos de panaderia y bolleria que comprende el aditivo, y producto a base de harina de cereal de panaderia, bolleria y reposteria que comprende la composicion alimenticia
CN116508942B (zh) * 2023-04-25 2024-09-20 四川省成都市饮食公司赖汤圆食品厂 一种熊猫汤圆及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2308942C1 (ru) * 2006-07-03 2007-10-27 Александра Вадимовна Мелихова Энтеросолюбильная оболочка и способ покрытия такой оболочкой твердой фармацевтической композиции
RU2323586C2 (ru) * 2002-03-12 2008-05-10 Сосьете Де Продюи Нестле С.А. Способ получения пищевого продукта (варианты)
WO2009069122A1 (en) * 2007-11-26 2009-06-04 Zimand, Henri Process for preparing bakeable probiotic food

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4515769A (en) 1981-12-01 1985-05-07 Borden, Inc. Encapsulated flavorant material, method for its preparation, and food and other compositions incorporating same
US4661359A (en) 1985-06-03 1987-04-28 General Mills, Inc. Compositions and methods for preparing an edible film of lower water vapor permeability
JP2643222B2 (ja) * 1988-02-03 1997-08-20 エーザイ株式会社 多重層顆粒
KR940004883B1 (ko) 1990-07-02 1994-06-04 선일포도당 주식회사 분말 유산균 제조를 위한 안정제와 그를 이용한 안정화 방법
DK83292D0 (da) 1992-06-24 1992-06-24 Faellesforeningen For Danmarks Broedprodukt
AUPM823094A0 (en) 1994-09-16 1994-10-13 Goodman Fielder Limited Probiotic compositions
NL1007696C1 (nl) 1997-05-01 1998-11-03 Inst Voor Agrotech Onderzoek Omhulde stof met gecontroleerde afgifte.
US6251430B1 (en) * 1998-02-04 2001-06-26 Guohua Zhang Water insoluble polymer based sustained release formulation
DE19830375A1 (de) * 1998-07-08 2000-01-13 K D Pharma Bexbach Gmbh Mikroverkapselte ungesättigte Fettsäure oder Fettsäureverbindung oder Mischung aus Fettsäuren und/oder Fettsäureverbindungen
IT1304170B1 (it) 1998-12-15 2001-03-08 Novartis Nutrition Ag Composti organici
AU2922499A (en) 1998-12-17 2000-07-03 Elnaggar, Khaled Separator for vacuum cleaner
WO2002076237A2 (en) 2001-03-23 2002-10-03 Societe Des Produits Nestle S.A. Stabilized aroma-providing components and foodstuffs containing same
US20060034937A1 (en) 1999-11-23 2006-02-16 Mahesh Patel Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
DE19962427A1 (de) 1999-12-22 2001-07-12 Nutrinova Gmbh Verkapselte multifunktionelle, biologisch aktive Nahrungsmittelkomponente, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung
DE10012199A1 (de) 2000-03-13 2001-09-20 Haarmann & Reimer Gmbh Eingekapselte Substanzen mit kontrollierter Freisetzung
AUPR272901A0 (en) 2001-01-25 2001-02-22 Gainful Plan Limited Method of preparing biological materials and preparations produced using same
US7972818B2 (en) * 2001-02-14 2011-07-05 Lawrence Livermore National Security, Llc Flow cytometric detection method for DNA samples
US20050266069A1 (en) 2002-09-06 2005-12-01 Simmons Donald L Stable probiotic microsphere compositions and their methods of preparation
US8168170B2 (en) * 2002-10-03 2012-05-01 The Procter And Gamble Company Compositions having an inner core and at least three surrounding layers
US6835397B2 (en) 2002-12-23 2004-12-28 Balchem Corporation Controlled release encapsulated bioactive substances
MXPA05010002A (es) 2003-03-24 2006-03-10 Biosphere Medical Inc Embolizacion temporal utilizando polimeros termosensibles inversos.
US8871266B2 (en) * 2003-10-01 2014-10-28 Commonwealth Scientific & Industrial Research Organisation Probiotic storage and delivery
CN1613455A (zh) 2003-11-04 2005-05-11 北京东方百信生物技术有限公司 靶向益生菌微胶囊及其制备方法
FR2863828B1 (fr) * 2003-12-23 2007-02-02 Gervais Danone Sa Produit alimentaire liquide comprenant des granules de bacteries lactiques
US20060029645A1 (en) * 2004-08-04 2006-02-09 Nutritech Solutions Ltd. Acid-containing feed supplements for ruminants and methods of manufacturing same
JP4777365B2 (ja) 2005-02-15 2011-09-21 シャーウッド エル． ゴルバック プロバイオティクスおよび単離されたβ−グルカンを含有する食物ならびにその使用方法
US7988958B2 (en) 2005-04-05 2011-08-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Enterococcus and Streptococcus strains and bacteriocins
US7803413B2 (en) 2005-10-31 2010-09-28 General Mills Ip Holdings Ii, Llc. Encapsulation of readily oxidizable components
WO2007058614A1 (en) 2005-11-17 2007-05-24 Celac Sweden Ab Probiotic bread and method of its production
US20070154498A1 (en) 2005-12-09 2007-07-05 Bortz Jonathan D Intravenous essential fatty acid emulsion
WO2007081981A2 (en) 2006-01-11 2007-07-19 Attune Foods Probiotic food, process for its preparation and dietary regimen
KR100747754B1 (ko) 2006-02-28 2007-08-08 정명희 함유산균빵의 제조에 유용한 락토바실러스 플란타룸 ｓｅ１
KR100745515B1 (ko) * 2006-04-10 2007-08-02 주식회사 대웅제약 염산 탐술로신 함유 서방성 펠렛 및 그의 제조방법
WO2008035332A1 (en) 2006-09-19 2008-03-27 Technion Research And Development Foundation Ltd. Probiotic compositions and methods of making same
WO2008037578A1 (en) 2006-09-29 2008-04-03 Unilever Plc Compounds, which are starch containing particles coated, embedded or encapsulated by at least one biopolymer in a multilayer arrangement
US20100055083A1 (en) * 2006-10-18 2010-03-04 Ray Edward Kowalski Encapsulation of heat and moisture sensitive substances
EP2117354B1 (en) 2006-12-18 2018-08-08 Advanced BioNutrition Corp. A dry food product containing live probiotic
AU2008206668A1 (en) 2007-01-19 2008-07-24 The Iams Company Composition and method of stabilized sensitive ingredient
CA2674422A1 (en) * 2007-01-19 2008-07-24 The Iams Company Composition and method of stabilized sensitive ingredient
US20090092704A1 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 H.J. Baker & Bro., Inc. Granular feed supplement
NZ555022A (en) 2007-11-07 2010-09-30 Encoate Holdings Ltd Stabilisation of dried biological material with oil and biopolymer
AU2008323624B2 (en) 2007-11-14 2014-01-30 The University Of Queensland Device and method for preparing microparticles
IL199781A0 (en) 2009-07-09 2010-05-17 Yohai Zorea Heat resistant probiotic compositions and healthy food comprising them
WO2009089115A1 (en) 2008-01-04 2009-07-16 Hormel Foods Corporation Encapsulation of oxidatively unstable compounds
CA2729015A1 (en) 2008-06-26 2009-12-30 Mcneil-Ppc, Inc. Coated particles containing pharmaceutically active agents
CN101323850B (zh) 2008-07-28 2011-05-04 天津科技大学 瑞士乳杆菌微胶囊及其制备与应用
US8945643B2 (en) 2008-08-21 2015-02-03 The Hillshire Brands, Company System and method for forming a multi-layer extruded food product
CN101416681B (zh) 2008-11-25 2011-09-07 丁岚峰 富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊及其制备方法和应用
US8663671B2 (en) 2009-11-05 2014-03-04 Philip Morris Usa Inc. Methods and compositions for producing hydrogel capsules coated for low permeability and physical integrity
EP2603240B1 (en) 2010-08-09 2019-11-20 Degama Smart Ltd. Probiotic liquid food products
EP2648528B1 (en) 2010-12-06 2016-07-20 Degama Berrier Ltd. Composition and method for improving stability and extending shelf life of probiotic bacteria and food products thereof
RU2013156437A (ru) 2011-06-07 2015-07-20 СПАЙ Груп Лтд. Композиция и способы улучшения стабильности и продления срока хранения чувствительных пищевых добавок и пищевых продуктов из них

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2323586C2 (ru) * 2002-03-12 2008-05-10 Сосьете Де Продюи Нестле С.А. Способ получения пищевого продукта (варианты)
RU2308942C1 (ru) * 2006-07-03 2007-10-27 Александра Вадимовна Мелихова Энтеросолюбильная оболочка и способ покрытия такой оболочкой твердой фармацевтической композиции
WO2009069122A1 (en) * 2007-11-26 2009-06-04 Zimand, Henri Process for preparing bakeable probiotic food

Also Published As

Publication number Publication date
RU2012104796A (ru) 2013-08-20
AU2010269814A1 (en) 2012-03-01
US20130115334A1 (en) 2013-05-09
EP2451300B1 (en) 2018-09-05
US20100303962A1 (en) 2010-12-02
EP2451300A4 (en) 2013-07-31
AU2010269814B8 (en) 2014-03-06
WO2011004375A1 (en) 2011-01-13
CN102595938A (zh) 2012-07-18
CA2767602A1 (en) 2011-01-13
AU2010202518B2 (en) 2014-10-23
NZ597992A (en) 2013-11-29
US20110008493A1 (en) 2011-01-13
AU2010269814B2 (en) 2014-02-06
AU2010269814A8 (en) 2014-03-06
CN105105104A (zh) 2015-12-02
AU2010202518A1 (en) 2010-07-08
EP2451300A1 (en) 2012-05-16
ES2700879T3 (es) 2019-02-19
CA2767602C (en) 2019-04-02
US9961910B2 (en) 2018-05-08
AU2010202518A8 (en) 2010-07-22
IL199781A0 (en) 2010-05-17
IL217449A0 (en) 2012-02-29
EP2451300B2 (en) 2023-07-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2549098C2 (ru) Теплоустойчивые пробиотические композиции и содержащие их продукты здорового питания
Nunes et al. Inulin, hi-maize, and trehalose as thermal protectants for increasing viability of Lactobacillus acidophilus encapsulated by spray drying
Zanjani et al. Microencapsulation of Lactobacillus casei with calcium alginate-resistant starch and evaluation of survival and sensory properties in cream-filled cake
Khan et al. Development of extrusion-based legume protein isolate–alginate capsules for the protection and delivery of the acid sensitive probiotic, Bifidobacterium adolescentis
EP2603240B1 (en) Probiotic liquid food products
US11123384B2 (en) Microencapsulated probiotic bacteria
JP6669646B2 (ja) 耐熱及び耐湿性プロバイオティクス細菌を含む顆粒を含む流動食
JP2021521249A (ja) 耐湿性プロバイオティック顆粒およびその製造方法
US20240115509A1 (en) A probiotic granule having a unified stabilizing coating and a method for the production thereof
US20240023568A1 (en) Fat encapsulated microbial cultures
US20210401760A1 (en) Composite Coating for an Active Agent
Çabuk Development of whey protein-pullulan microcapsules for the encapsulation of Lactobacillus acidophilus NRRL-B 4495 as a functional food ingredient
Almutairi Development of a new milk drink containing dates-immobilized probiotic bacteria