RU2508125C2 - Композиция для лечения рака предстательной железы (рпж) - Google Patents
Композиция для лечения рака предстательной железы (рпж) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2508125C2 RU2508125C2 RU2010118013/10A RU2010118013A RU2508125C2 RU 2508125 C2 RU2508125 C2 RU 2508125C2 RU 2010118013/10 A RU2010118013/10 A RU 2010118013/10A RU 2010118013 A RU2010118013 A RU 2010118013A RU 2508125 C2 RU2508125 C2 RU 2508125C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rna
- prostate
- present
- antigen
- composition
- Prior art date
Links
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 129
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 title abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 188
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims abstract description 300
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 claims abstract description 109
- 102100041003 Glutamate carboxypeptidase 2 Human genes 0.000 claims abstract description 94
- 101000892862 Homo sapiens Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 claims abstract description 90
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 82
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 60
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 37
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 33
- 208000018821 hormone-resistant prostate carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 28
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 102100036735 Prostate stem cell antigen Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 101710120463 Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000007066 Prostate-Specific Antigen Human genes 0.000 claims abstract 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 198
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 198
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 198
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 124
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 98
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 83
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 75
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 73
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 72
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 70
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 69
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 68
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical group NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 55
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 52
- -1 L-ol homers Proteins 0.000 claims description 48
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 46
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 43
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims description 40
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 40
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 35
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine group Chemical group [C@@H]1([C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)N1C=NC=2C(N)=NC=NC12 OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 33
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims description 31
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 claims description 27
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 claims description 24
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 claims description 24
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims description 24
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 claims description 24
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 23
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 20
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 claims description 19
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 claims description 19
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 17
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 15
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 15
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Chemical group 0.000 claims description 13
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 claims description 13
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 13
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 10
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 claims description 10
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 10
- ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N spermidine Chemical compound NCCCCNCCCN ATHGHQPFGPMSJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N spermine Chemical compound NCCCNCCCCNCCCN PFNFFQXMRSDOHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 claims description 8
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 claims description 7
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 claims description 7
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 claims description 6
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 229920000962 poly(amidoamine) Polymers 0.000 claims description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 6
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 5
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims description 5
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Chemical group O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 5
- 229940063673 spermidine Drugs 0.000 claims description 5
- 229940063675 spermine Drugs 0.000 claims description 5
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 claims description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 4
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 101100368144 Mus musculus Synb gene Proteins 0.000 claims description 4
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 claims description 4
- 101710192266 Tegument protein VP22 Proteins 0.000 claims description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 4
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 claims description 4
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 claims description 4
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 3
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 claims description 3
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 claims description 3
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 claims description 3
- 102100021010 Nucleolin Human genes 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108010044762 nucleolin Proteins 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 3
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 claims description 2
- LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[(z)-octadec-9-enoxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)C)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC LDGWQMRUWMSZIU-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims description 2
- WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 2,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC WALUVDCNGPQPOD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- GVDKLYIMIVTKOA-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihexadecoxypropoxymethoxy)ethyl-trimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOCC(COCOCC[N+](C)(C)C)OCCCCCCCCCCCCCCCC GVDKLYIMIVTKOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- JHWGFJBTMHEZME-UHFFFAOYSA-N 4-prop-2-enoyloxybutyl prop-2-enoate Chemical compound C=CC(=O)OCCCCOC(=O)C=C JHWGFJBTMHEZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LQGKDMHENBFVRC-UHFFFAOYSA-N 5-aminopentan-1-ol Chemical compound NCCCCCO LQGKDMHENBFVRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108700031308 Antennapedia Homeodomain Proteins 0.000 claims description 2
- 102100028737 CAP-Gly domain-containing linker protein 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 claims description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 2
- XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N DOSPA trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCNC(=O)C(CCCNCCCN)NCCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XULFJDKZVHTRLG-JDVCJPALSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 2
- 108700006830 Drosophila Antp Proteins 0.000 claims description 2
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 claims description 2
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 claims description 2
- 101000767052 Homo sapiens CAP-Gly domain-containing linker protein 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 2
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 2
- 108010047702 MPG peptide Proteins 0.000 claims description 2
- 244000137850 Marrubium vulgare Species 0.000 claims description 2
- 241000737052 Naso hexacanthus Species 0.000 claims description 2
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 claims description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102100027720 SH2 domain-containing protein 1A Human genes 0.000 claims description 2
- 108010045517 Serum Amyloid P-Component Proteins 0.000 claims description 2
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AZCCDRNDKZSNBW-UHFFFAOYSA-M [2-[bis(2-tetradecanoyloxyethyl)amino]-2-oxoethyl]-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCN(C(=O)C[N+](C)(C)C)CCOC(=O)CCCCCCCCCCCCC AZCCDRNDKZSNBW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N [3-(dimethylamino)-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(CN(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC NYDLOCKCVISJKK-WRBBJXAJSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001576 beta-amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 108010025307 buforin II Proteins 0.000 claims description 2
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 claims description 2
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920001559 poly(2-methyloxazoline)-block-poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000333 poly(propyleneimine) Polymers 0.000 claims description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 claims description 2
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 claims description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 claims description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 claims description 2
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 claims description 2
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 claims description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC KSXTUUUQYQYKCR-LQDDAWAPSA-M 0.000 claims 1
- JKNCOURZONDCGV-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)ethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CN(C)CCOC(=O)C(C)=C JKNCOURZONDCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 claims 1
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 claims 1
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 claims 1
- HIHOWBSBBDRPDW-PTHRTHQKSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] n-[2-(dimethylamino)ethyl]carbamate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(=O)NCCN(C)C)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HIHOWBSBBDRPDW-PTHRTHQKSA-N 0.000 claims 1
- 229920002246 poly[2-(dimethylamino)ethyl methacrylate] polymer Polymers 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 101000628547 Homo sapiens Metalloreductase STEAP1 Proteins 0.000 abstract description 3
- 102100026712 Metalloreductase STEAP1 Human genes 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 144
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 description 103
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 73
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 69
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 68
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 63
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 59
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 50
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 35
- 108700021021 mRNA Vaccine Proteins 0.000 description 32
- 229940126582 mRNA vaccine Drugs 0.000 description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 description 31
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 31
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 31
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 30
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 28
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 24
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 21
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 20
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 20
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 19
- 230000004044 response Effects 0.000 description 19
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 18
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 18
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 16
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 15
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 15
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 14
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 14
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 13
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 13
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 13
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 12
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 12
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 11
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 11
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 10
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 10
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 10
- 230000009471 action Effects 0.000 description 9
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 9
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 9
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 9
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 9
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 9
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 8
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 8
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 7
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 7
- 230000003319 supportive effect Effects 0.000 description 7
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010062904 Hormone-refractory prostate cancer Diseases 0.000 description 6
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N cytidylyl-(3'->5')-guanosine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O)[C@@H](CO)O1 CTMZLDSMFCVUNX-VMIOUTBZSA-N 0.000 description 6
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 6
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 6
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 6
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000034994 death Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 229930004094 glycosylphosphatidylinositol Natural products 0.000 description 5
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 5
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 5
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 4
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 4
- 101000605534 Homo sapiens Prostate-specific antigen Proteins 0.000 description 4
- 101000592517 Homo sapiens Puromycin-sensitive aminopeptidase Proteins 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 4
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 4
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 4
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 4
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 4
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 3
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 3
- 101710183768 Glutamate carboxypeptidase 2 Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 3
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 3
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 3
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000021839 RNA stabilization Effects 0.000 description 3
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 3
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 3
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 3
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 3
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M dimethyldioctadecylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC REZZEXDLIUJMMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 3
- 208000010658 metastatic prostate carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 3
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 3
- 238000009520 phase I clinical trial Methods 0.000 description 3
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 3
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000002661 proton therapy Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 3
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 3
- FKHUGQZRBPETJR-RXSRXONKSA-N (2r)-2-[[(4r)-4-[[(2s)-2-[[(2r)-2-[(3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxypropanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoyl]amino]-6-(octadecanoylamino)hexanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCC[C@H](C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O FKHUGQZRBPETJR-RXSRXONKSA-N 0.000 description 2
- DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(3s,4s,4ar,6ar,6bs,8r,8ar,12as,14ar,14br)-8a-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(3s,5s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@H]5CC(C)(C)CC[C@@]5([C@@H](C[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H]([C@@H]([C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@](O)(CO)CO3)O)[C@H](O)CO2)O)[C@H](C)O1)O)O)OC(=O)C[C@@H](O)C[C@H](OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O1)O)[C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N 0.000 description 2
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 description 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GFYLSDSUCHVORB-IOSLPCCCSA-N 1-methyladenosine Chemical compound C1=NC=2C(=N)N(C)C=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O GFYLSDSUCHVORB-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 2
- VDCRFBBZFHHYGT-IOSLPCCCSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-7-prop-2-enyl-3h-purine-6,8-dione Chemical compound O=C1N(CC=C)C=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O VDCRFBBZFHHYGT-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 2
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 2
- OIVLITBTBDPEFK-UHFFFAOYSA-N 5,6-dihydrouracil Chemical compound O=C1CCNC(=O)N1 OIVLITBTBDPEFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 2
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 2
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 241000710127 Cricket paralysis virus Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 238000011238 DNA vaccination Methods 0.000 description 2
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 2
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 2
- PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N Glycerol trihexadecanoate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PVNIQBQSYATKKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000711557 Hepacivirus Species 0.000 description 2
- 101000763579 Homo sapiens Toll-like receptor 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000763537 Homo sapiens Toll-like receptor 10 Proteins 0.000 description 2
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000831496 Homo sapiens Toll-like receptor 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000669460 Homo sapiens Toll-like receptor 5 Proteins 0.000 description 2
- 101000669406 Homo sapiens Toll-like receptor 6 Proteins 0.000 description 2
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 2
- 101000800483 Homo sapiens Toll-like receptor 8 Proteins 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 2
- 102000000704 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 2
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 2
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 2
- 101100481579 Mus musculus Tlr11 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100481580 Mus musculus Tlr12 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100031789 Myeloid-derived growth factor Human genes 0.000 description 2
- PIJXCSUPSNFXNE-QRZOAFCBSA-N N-acetyl-4-(N-acetylglucosaminyl)muramoyl-L-alanyl-D-isoglutamine Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]1[C@@H](NC(C)=O)[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PIJXCSUPSNFXNE-QRZOAFCBSA-N 0.000 description 2
- 108010084333 N-palmitoyl-S-(2,3-bis(palmitoyloxy)propyl)cysteinyl-seryl-lysyl-lysyl-lysyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 2
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 2
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 2
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 2
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 2
- 102100027010 Toll-like receptor 1 Human genes 0.000 description 2
- 102100027009 Toll-like receptor 10 Human genes 0.000 description 2
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100024324 Toll-like receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100039357 Toll-like receptor 5 Human genes 0.000 description 2
- 102100039387 Toll-like receptor 6 Human genes 0.000 description 2
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 2
- 102100033110 Toll-like receptor 8 Human genes 0.000 description 2
- 102100034030 Transient receptor potential cation channel subfamily M member 8 Human genes 0.000 description 2
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 2
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 2
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 2
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 2
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 2
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 2
- DBFUQOZREOHGAV-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-bromo-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(N)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 DBFUQOZREOHGAV-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 2
- YIJVOACVHQZMKI-JXOAFFINSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 YIJVOACVHQZMKI-JXOAFFINSA-N 0.000 description 2
- VEWJOCYCKIZKKV-GBNDHIKLSA-N [[(2r,3s,4r,5s)-5-(2,4-dioxo-1h-pyrimidin-5-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O VEWJOCYCKIZKKV-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 235000020964 calcitriol Nutrition 0.000 description 2
- 239000011612 calcitriol Substances 0.000 description 2
- GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N calcitriol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-NKMMMXOESA-N 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 230000005773 cancer-related death Effects 0.000 description 2
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 2
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 2
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 2
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 2
- 229960004275 glycolic acid Drugs 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N imiquimod Chemical compound C1=CC=CC2=C3N(CC(C)C)C=NC3=C(N)N=C21 DOUYETYNHWVLEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 2
- 201000001881 impotence Diseases 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 2
- JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N mifamurtide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OCCNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N 0.000 description 2
- 229960005225 mifamurtide Drugs 0.000 description 2
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 2
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 2
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 108700033545 romurtide Proteins 0.000 description 2
- 229950003733 romurtide Drugs 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 2
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 2
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 2
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 2
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 2
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 2
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 2
- CPCWCRHPTDMVFU-UHFFFAOYSA-N (2-hydroxy-4,5-dioctadecoxypentyl)-dimethylazanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(CC(O)C[NH+](C)C)OCCCCCCCCCCCCCCCCCC CPCWCRHPTDMVFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BIXYYZIIJIXVFW-UUOKFMHZSA-N (2R,3R,4S,5R)-2-(6-amino-2-chloro-9-purinyl)-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O BIXYYZIIJIXVFW-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N (2r,3r)-2,3-bis[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]butane-1,4-diol;(2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.C1=C(O)C(OC)=CC(C[C@@H](CO)[C@H](CO)CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N 0.000 description 1
- JLWUWXCKSOIFPS-KQYNXXCUSA-N (2r,3r,4r,5r)-5-(2,6-diaminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-methoxyoxolan-3-ol Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1 JLWUWXCKSOIFPS-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- ZGYYPTJWJBEXBC-QYYRPYCUSA-N (2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-fluoro-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1F ZGYYPTJWJBEXBC-QYYRPYCUSA-N 0.000 description 1
- IXOXBSCIXZEQEQ-KQYNXXCUSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-(2-amino-6-methoxypurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound C1=NC=2C(OC)=NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O IXOXBSCIXZEQEQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- CQKMBZHLOYVGHW-QYYRPYCUSA-N (2r,3s,4r,5r)-4-amino-5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 CQKMBZHLOYVGHW-QYYRPYCUSA-N 0.000 description 1
- IFVJLCHSLGMHEY-QYYRPYCUSA-N (2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-azido-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1N=[N+]=[N-] IFVJLCHSLGMHEY-QYYRPYCUSA-N 0.000 description 1
- VHUVBWVDIFVVBI-SNYZSRNZSA-N (2s)-3-(4-hydroxyphenyl)-2-(octadecylamino)propanoic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.CCCCCCCCCCCCCCCCCCN[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 VHUVBWVDIFVVBI-SNYZSRNZSA-N 0.000 description 1
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- QGVQZRDQPDLHHV-DPAQBDIFSA-N (3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthrene-3-thiol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](S)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 QGVQZRDQPDLHHV-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N (4R)-4-[[(2S,3R)-2-[acetyl-[(3R,4R,5S,6R)-3-amino-4-[(1R)-1-carboxyethoxy]-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound C(C)(=O)N([C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](CCC(=O)O)C(N)=O)C1[C@H](N)[C@@H](O[C@@H](C(=O)O)C)[C@H](O)[C@H](O1)CO YHQZWWDVLJPRIF-JLHRHDQISA-N 0.000 description 1
- UGXDVELKRYZPDM-XLXQKPBQSA-N (4r)-4-[[(2s,3r)-2-[[(2r)-2-[(2r,3r,4r,5r)-2-acetamido-4,5,6-trihydroxy-1-oxohexan-3-yl]oxypropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O UGXDVELKRYZPDM-XLXQKPBQSA-N 0.000 description 1
- QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-L (5-bromo-4-chloro-1h-indol-3-yl) phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(Cl)=C2C(OP([O-])(=O)[O-])=CNC2=C1 QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVJHHUAWPYXKBD-QLVXXPONSA-N (S,R,R)-alpha-tocopherol Chemical compound [H][C@@](C)(CCCC(C)C)CCC[C@@]([H])(C)CCC[C@@]1(C)CCC2=C(O1)C(C)=C(C)C(O)=C2C GVJHHUAWPYXKBD-QLVXXPONSA-N 0.000 description 1
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 1,25-Dihydroxy-vitamin D3' Natural products C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CC(O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIYWFOZZIZEEKJ-XVFCMESISA-N 1-[(2r,3r,4r,5r)-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound F[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 UIYWFOZZIZEEKJ-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- RKSLVDIXBGWPIS-UAKXSSHOSA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-iodopyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 RKSLVDIXBGWPIS-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- LLIPTMWIZVIUSX-XVFCMESISA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3-amino-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 LLIPTMWIZVIUSX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- MRUKYOQQKHNMFI-XVFCMESISA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3-azido-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidine-2,4-dione Chemical compound [N-]=[N+]=N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MRUKYOQQKHNMFI-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- GBBJCSTXCAQSSJ-JVZYCSMKSA-N 1-[(2r,3s,4r,5r)-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@@H](F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 GBBJCSTXCAQSSJ-JVZYCSMKSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTAIYTHAJQNQDW-KQYNXXCUSA-N 1-methylguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O UTAIYTHAJQNQDW-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- WJNGQIYEQLPJMN-IOSLPCCCSA-N 1-methylinosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O WJNGQIYEQLPJMN-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- CQKMBZHLOYVGHW-UHFFFAOYSA-N 10407-64-4 Natural products NC1C(O)C(CO)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 CQKMBZHLOYVGHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YHRRPHCORALGKQ-FDDDBJFASA-N 2'-O-methyl-5-methyluridine Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 YHRRPHCORALGKQ-FDDDBJFASA-N 0.000 description 1
- HPHXOIULGYVAKW-IOSLPCCCSA-N 2'-O-methylinosine Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 HPHXOIULGYVAKW-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- HPHXOIULGYVAKW-UHFFFAOYSA-N 2'-O-methylinosine Natural products COC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 HPHXOIULGYVAKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROPTVRLUGSPXNH-UHFFFAOYSA-N 2'-amino-2'-deoxy-guanosine Natural products NC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC(N)=NC2=O)=C2N=C1 ROPTVRLUGSPXNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- RSMRWWHFJMENJH-LQDDAWAPSA-M 2,3-bis[[(z)-octadec-9-enoyl]oxy]propyl-trimethylazanium;methyl sulfate Chemical compound COS([O-])(=O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC RSMRWWHFJMENJH-LQDDAWAPSA-M 0.000 description 1
- HLYBTPMYFWWNJN-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4-dioxo-1h-pyrimidin-5-yl)-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1=CNC(=O)NC1=O HLYBTPMYFWWNJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXNTZIJLOZMJTM-UHFFFAOYSA-N 2-(2h-quinolin-1-yl)ethanol Chemical compound C1=CC=C2N(CCO)CC=CC2=C1 RXNTZIJLOZMJTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IQZWKGWOBPJWMX-UHFFFAOYSA-N 2-Methyladenosine Natural products C12=NC(C)=NC(N)=C2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O IQZWKGWOBPJWMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTDJAMXESTUWLO-UUOKFMHZSA-N 2-amino-9-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)-2-oxolanyl]-3H-purine-6-thione Chemical compound C12=NC(N)=NC(S)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OTDJAMXESTUWLO-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- UXUZARPLRQRNNX-DXTOWSMRSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4r,5r)-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1F UXUZARPLRQRNNX-DXTOWSMRSA-N 0.000 description 1
- ROPTVRLUGSPXNH-DXTOWSMRSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4s,5r)-3-amino-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC(N)=NC2=O)=C2N=C1 ROPTVRLUGSPXNH-DXTOWSMRSA-N 0.000 description 1
- PHGQZPFEHQOLJM-DXTOWSMRSA-N 2-amino-9-[(2r,3r,4s,5r)-3-azido-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1N=[N+]=[N-] PHGQZPFEHQOLJM-DXTOWSMRSA-N 0.000 description 1
- IQZWKGWOBPJWMX-IOSLPCCCSA-N 2-methyladenosine Chemical compound C12=NC(C)=NC(N)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O IQZWKGWOBPJWMX-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- VZQXUWKZDSEQRR-SDBHATRESA-N 2-methylthio-N(6)-(Delta(2)-isopentenyl)adenosine Chemical compound C12=NC(SC)=NC(NCC=C(C)C)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O VZQXUWKZDSEQRR-SDBHATRESA-N 0.000 description 1
- RHFUOMFWUGWKKO-XVFCMESISA-N 2-thiocytidine Chemical compound S=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 RHFUOMFWUGWKKO-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HYRQVGHJHUTCJL-UHFFFAOYSA-M 3,3-di(tetradecoxy)propyl-(2-hydroxyethyl)-dimethylazanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCOC(CC[N+](C)(C)CCO)OCCCCCCCCCCCCCC HYRQVGHJHUTCJL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-2-[(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound S1C2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N(CC)C1=NN=C1SC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N1CC ZTOJFFHGPLIVKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KOLPWZCZXAMXKS-UHFFFAOYSA-N 3-methylcytosine Chemical compound CN1C(N)=CC=NC1=O KOLPWZCZXAMXKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 3h-imidazo[4,5-h]quinoline Chemical class C1=CN=C2C(N=CN3)=C3C=CC2=C1 RHKWIGHJGOEUSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLOIGESWDJYCTF-UHFFFAOYSA-N 4-Thiouridine Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=S)C=C1 ZLOIGESWDJYCTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHNIBVWXUOEWTA-UHFFFAOYSA-N 4-[[6-amino-2-(2-methoxyethoxy)-8-oxo-7h-purin-9-yl]methyl]benzaldehyde Chemical compound C12=NC(OCCOC)=NC(N)=C2N=C(O)N1CC1=CC=C(C=O)C=C1 SHNIBVWXUOEWTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJAKJCICANKRFD-UHFFFAOYSA-N 4-acetyl-4-amino-1,3-dihydropyrimidin-2-one Chemical compound CC(=O)C1(N)NC(=O)NC=C1 GJAKJCICANKRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVZFZMCNALTPBY-XVFCMESISA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4r,5r)-3-fluoro-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NVZFZMCNALTPBY-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- FECRKKQKJNKYNF-XVFCMESISA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4s,5r)-3-amino-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 FECRKKQKJNKYNF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- FEOYKPQEERVCAV-XVFCMESISA-N 4-amino-1-[(2r,3r,4s,5r)-3-azido-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrimidin-2-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](N=[N+]=[N-])[C@H](O)[C@@H](CO)O1 FEOYKPQEERVCAV-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- WLZPCFOGJNCCRJ-UHFFFAOYSA-M 4-ethenyl-1-ethylpyridin-1-ium;bromide Chemical compound [Br-].CC[N+]1=CC=C(C=C)C=C1 WLZPCFOGJNCCRJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZLOIGESWDJYCTF-XVFCMESISA-N 4-thiouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=S)C=C1 ZLOIGESWDJYCTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- BQBYBPAPSIWHCE-UHFFFAOYSA-N 5-(dimethylamino)-2-methylpent-2-enoic acid Chemical compound CN(C)CCC=C(C)C(O)=O BQBYBPAPSIWHCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZQDLJNDRVBCST-SHUUEZRQSA-N 5-amino-2-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1,2,4-triazin-3-one Chemical compound O=C1N=C(N)C=NN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 OZQDLJNDRVBCST-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(Cl)=C2C(OP(O)(=O)O)=CNC2=C1 QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLLYLQLDYORLBB-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-n-methylthiophene-2-sulfonamide Chemical compound CNS(=O)(=O)C1=CC=C(Br)S1 JLLYLQLDYORLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- IWFHOSULCAJGRM-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine 5'-triphosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 IWFHOSULCAJGRM-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 5-fluorouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- YIZYCHKPHCPKHZ-PNHWDRBUSA-N 5-methoxycarbonylmethyluridine Chemical compound O=C1NC(=O)C(CC(=O)OC)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YIZYCHKPHCPKHZ-PNHWDRBUSA-N 0.000 description 1
- ZXIATBNUWJBBGT-JXOAFFINSA-N 5-methoxyuridine Chemical compound O=C1NC(=O)C(OC)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZXIATBNUWJBBGT-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- SNNBPMAXGYBMHM-JXOAFFINSA-N 5-methyl-2-thiouridine Chemical compound S=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SNNBPMAXGYBMHM-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1h-pyrimidine-2-thione Chemical compound NC1=CC=NC(S)=N1 DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- QLGGAJVPIQZKIJ-UHFFFAOYSA-N 6-methylquinazolin-4-amine Chemical compound N1=CN=C(N)C2=CC(C)=CC=C21 QLGGAJVPIQZKIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 7-methylguanosine Chemical compound C1=2N=C(N)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OGHAROSJZRTIOK-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 1
- SYPRQIWERSQQNL-KQYNXXCUSA-O 7-methylxanthosine Chemical compound C1=2NC(=O)NC(=O)C=2[N+](C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O SYPRQIWERSQQNL-KQYNXXCUSA-O 0.000 description 1
- OAUKGFJQZRGECT-UUOKFMHZSA-N 8-Azaadenosine Chemical compound N1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OAUKGFJQZRGECT-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- VJUPMOPLUQHMLE-UUOKFMHZSA-N 8-Bromoadenosine Chemical compound BrC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O VJUPMOPLUQHMLE-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- ASUCSHXLTWZYBA-UMMCILCDSA-N 8-Bromoguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=C(Br)N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O ASUCSHXLTWZYBA-UMMCILCDSA-N 0.000 description 1
- HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 8-Oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2NC(=O)N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HCAJQHYUCKICQH-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 9beta-Ribofuranosyl-7-deazaadenin Natural products C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(O)C1O HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 description 1
- 102000009515 Arachidonate 15-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010048907 Arachidonate 15-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102100022146 Arylsulfatase A Human genes 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 102100021663 Baculoviral IAP repeat-containing protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical class OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000031872 Body Remains Diseases 0.000 description 1
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 102100038518 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108090000932 Calcitonin Gene-Related Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102100021868 Calnexin Human genes 0.000 description 1
- 108010056891 Calnexin Proteins 0.000 description 1
- 102100029968 Calreticulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L Carbenoxolone sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C([O-])=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC(=O)CCC([O-])=O)C1(C)C BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 241000710777 Classical swine fever virus Species 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 241000724252 Cucumber mosaic virus Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- PCDQPRRSZKQHHS-UHFFFAOYSA-N Cytidine 5'-triphosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 PCDQPRRSZKQHHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- IELOKBJPULMYRW-NJQVLOCASA-N D-alpha-Tocopheryl Acid Succinate Chemical compound OC(=O)CCC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C IELOKBJPULMYRW-NJQVLOCASA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 241000710188 Encephalomyocarditis virus Species 0.000 description 1
- 102100039328 Endoplasmin Human genes 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010066687 Epithelial Cell Adhesion Molecule Proteins 0.000 description 1
- 102100031940 Epithelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 description 1
- 208000010228 Erectile Dysfunction Diseases 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 208000006168 Ewing Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010048963 Glutamate carboxypeptidase Proteins 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000288105 Grus Species 0.000 description 1
- 108010088729 HLA-A*02:01 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010013476 HLA-A24 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102100027685 Hemoglobin subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108091005902 Hemoglobin subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000812663 Homo sapiens Endoplasmin Proteins 0.000 description 1
- 101000853002 Homo sapiens Interleukin-25 Proteins 0.000 description 1
- 101000853000 Homo sapiens Interleukin-26 Proteins 0.000 description 1
- 101000998139 Homo sapiens Interleukin-32 Proteins 0.000 description 1
- 101000957351 Homo sapiens Myc-associated zinc finger protein Proteins 0.000 description 1
- 101001128431 Homo sapiens Myeloid-derived growth factor Proteins 0.000 description 1
- 101001136592 Homo sapiens Prostate stem cell antigen Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 101000668058 Infectious salmon anemia virus (isolate Atlantic salmon/Norway/810/9/99) RNA-directed RNA polymerase catalytic subunit Proteins 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 102000049772 Interleukin-16 Human genes 0.000 description 1
- 101800003050 Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 description 1
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 102100039879 Interleukin-19 Human genes 0.000 description 1
- 108050009288 Interleukin-19 Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013264 Interleukin-23 Human genes 0.000 description 1
- 108010065637 Interleukin-23 Proteins 0.000 description 1
- 102100036679 Interleukin-26 Human genes 0.000 description 1
- 108010066979 Interleukin-27 Proteins 0.000 description 1
- 101710181613 Interleukin-31 Proteins 0.000 description 1
- 108010067003 Interleukin-33 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- UBORTCNDUKBEOP-UHFFFAOYSA-N L-xanthosine Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 UBORTCNDUKBEOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 1
- 101150048357 Lamp1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000270322 Lepidosauria Species 0.000 description 1
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 102100032131 Lymphocyte antigen 6E Human genes 0.000 description 1
- 102100026894 Lymphotoxin-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000362 Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 1
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- HACHPVCYFLSKSB-UMJDSZQGSA-N ManNAz-DBCO-Pam3CSK4 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(N[C@H](CSCC(COC(CCCCCCCCCCCCCCC)=O)OC(CCCCCCCCCCCCCCC)=O)C(N[C@H](CO)C(N[C@H](CCCCN)C(N[C@H](CCCCN)C(N[C@H](CCCCN)C(N[C@H](CCCCN)C(NCCC(N(C1)C2=CC=CC=C2C2N(C(N[C@H]([C@H](C3)O)[C@H]([C@@H]([C@@H](CO)O)O)O[C@@]3(C(O)=O)O)=O)N=NC2C2=C1C=CC=C2)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O HACHPVCYFLSKSB-UMJDSZQGSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010027452 Metastases to bone Diseases 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 241000714177 Murine leukemia virus Species 0.000 description 1
- 101100481581 Mus musculus Tlr13 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100038750 Myc-associated zinc finger protein Human genes 0.000 description 1
- RSPURTUNRHNVGF-IOSLPCCCSA-N N(2),N(2)-dimethylguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N(C)C)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O RSPURTUNRHNVGF-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- SLEHROROQDYRAW-KQYNXXCUSA-N N(2)-methylguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(NC)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O SLEHROROQDYRAW-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- GUVMFDICMFQHSZ-UHFFFAOYSA-N N-(1-aminoethenyl)-1-[4-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[hydroxy-[[3-[hydroxy-[[3-hydroxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy]phosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy]phosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-[[[2-[[[2-[[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-2-[[[5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-[[hydroxy-[2-(hydroxymethyl)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxyphosphinothioyl]oxymethyl]oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]oxolan-2-yl]-5-methylimidazole-4-carboxamide Chemical group CC1=C(C(=O)NC(N)=C)N=CN1C1OC(COP(O)(=S)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)OC2C(OC(C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)OC2C(OC(C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)OC2C(OC(C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)OC2C(OC(C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)CO)C(OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)OP(O)(=S)OCC2C(CC(O2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)O)C1 GUVMFDICMFQHSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700024476 N-acetylmuramyl-alanylglutamine methyl ester Proteins 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- OXZZMWVZYFVMKG-UHFFFAOYSA-N N-diazo-[hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl]oxyphosphonamidic acid Chemical compound [N-]=[N+]=NP(=O)(O)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O OXZZMWVZYFVMKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002274 Nalgene Polymers 0.000 description 1
- 206010029096 Neoplasm prostate Diseases 0.000 description 1
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZQXUWKZDSEQRR-UHFFFAOYSA-N Nucleosid Natural products C12=NC(SC)=NC(NCC=C(C)C)=C2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O VZQXUWKZDSEQRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N Octadecylamine Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCN REYJJPSVUYRZGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical group OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000254064 Photinus pyralis Species 0.000 description 1
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 description 1
- 229920001106 Pleuran Polymers 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 230000026279 RNA modification Effects 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010061934 Salivary gland cancer Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 206010054184 Small intestine carcinoma Diseases 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical class [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010002687 Survivin Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- RZCIEJXAILMSQK-JXOAFFINSA-N TTP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 RZCIEJXAILMSQK-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000006474 Theobroma bicolor Species 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QMGSCYSTMWRURP-UHFFFAOYSA-N Tomatine Natural products CC1CCC2(NC1)OC3CC4C5CCC6CC(CCC6(C)C5CCC4(C)C3C2C)OC7OC(CO)C(OC8OC(CO)C(O)C(OC9OCC(O)C(O)C9OC%10OC(CO)C(O)C(O)C%10O)C8O)C(O)C7O QMGSCYSTMWRURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 108091000117 Tyrosine 3-Monooxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102000048218 Tyrosine 3-monooxygenases Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- CAEFEWVYEZABLA-UUOKFMHZSA-N XTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 CAEFEWVYEZABLA-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- UBORTCNDUKBEOP-HAVMAKPUSA-N Xanthosine Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 UBORTCNDUKBEOP-HAVMAKPUSA-N 0.000 description 1
- 241000269368 Xenopus laevis Species 0.000 description 1
- DNUXJWBKTMJNEP-JVSLBXKQSA-N [(2R)-3-[(2S)-2-[[(4R)-4-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[(2R,3R,4R,5R)-2-acetamido-4-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-5,6-dihydroxy-1-oxohexan-3-yl]oxypropanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoyl]amino]propanoyl]oxy-2-hexadecanoyloxypropyl] hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]([C@@H](NC(C)=O)C=O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O)[C@H](O)CO)C(N)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC DNUXJWBKTMJNEP-JVSLBXKQSA-N 0.000 description 1
- RLXCFCYWFYXTON-JTTSDREOSA-N [(3S,8S,9S,10R,13S,14S,17R)-3-hydroxy-10,13-dimethyl-17-[(2R)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-16-yl] N-hexylcarbamate Chemical group C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC(OC(=O)NCCCCCC)[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 RLXCFCYWFYXTON-JTTSDREOSA-N 0.000 description 1
- ISXSJGHXHUZXNF-LXZPIJOJSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] n-[2-(dimethylamino)ethyl]carbamate;hydrochloride Chemical compound Cl.C1C=C2C[C@@H](OC(=O)NCCN(C)C)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 ISXSJGHXHUZXNF-LXZPIJOJSA-N 0.000 description 1
- MULRMTLVICSWMO-JCKUYFFHSA-N [(z)-octadec-9-enyl] (2s)-2-acetamido-5-amino-5-oxopentanoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCC(N)=O MULRMTLVICSWMO-JCKUYFFHSA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- LTOCXIVQWDANEX-UXCYUTBZSA-M [Br-].CCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCC.CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C Chemical compound [Br-].CCCC\C=C/CCCCCCCCOCC(C[N+](C)(C)CCCN)OCCCCCCCC\C=C/CCCC.CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)CC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C LTOCXIVQWDANEX-UXCYUTBZSA-M 0.000 description 1
- JPNBLHSBLCCTEO-VPCXQMTMSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C[C@@]1(O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 JPNBLHSBLCCTEO-VPCXQMTMSA-N 0.000 description 1
- HCXHLIFQJYSIBK-XVFCMESISA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound F[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 HCXHLIFQJYSIBK-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- YCZSHICNESTART-ZOQUXTDFSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-hydroxy-4-methoxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound CO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 YCZSHICNESTART-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- YKEIUAOIVAXJRI-XVFCMESISA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](F)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 YKEIUAOIVAXJRI-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- GKVHYBAWZAYQDO-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(2-oxo-4-sulfanylidenepyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=S)C=C1 GKVHYBAWZAYQDO-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- KHYOUGAATNYCAZ-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(4-oxo-2-sulfanylidenepyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=S)NC(=O)C=C1 KHYOUGAATNYCAZ-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- ABOQIBZHFFLOGM-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(5-iodo-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 ABOQIBZHFFLOGM-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- QTWNSBVFPSAMPO-IOSLPCCCSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-(6-imino-1-methylpurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(=N)N(C)C=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O QTWNSBVFPSAMPO-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- LCQWKKZWHQFOAH-IOSLPCCCSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-3,4-dihydroxy-5-[6-(methylamino)purin-9-yl]oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(NC)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O LCQWKKZWHQFOAH-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- RJZLOYMABJJGTA-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-4-amino-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 RJZLOYMABJJGTA-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- WNVZQYHBHSLUHJ-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-4-amino-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)N=C(N)C=C1 WNVZQYHBHSLUHJ-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- JKLOYZCVXRYXFE-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-4-azido-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound [N-]=[N+]=N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 JKLOYZCVXRYXFE-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- CABDYDUZLRXGTB-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2,6-diaminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C12=NC(N)=NC(N)=C2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O CABDYDUZLRXGTB-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- YWHNPOKVSACYOQ-KQYNXXCUSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(2-amino-1-methyl-6-oxopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O YWHNPOKVSACYOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- NCKFQXVRKKNRBB-SHUUEZRQSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 NCKFQXVRKKNRBB-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- WJUFDWJKJXOYSB-XVFCMESISA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-2-sulfanylidenepyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound S=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 WJUFDWJKJXOYSB-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- ZPZGYYNOHSQDQC-UAKXSSHOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-amino-5-iodo-2-oxopyrimidin-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=C(I)C(N)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 ZPZGYYNOHSQDQC-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- GVVRDIINMFAFEO-KCGFPETGSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O GVVRDIINMFAFEO-KCGFPETGSA-N 0.000 description 1
- PQISXOFEOCLOCT-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-amino-8-azidopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound [N-]=[N+]=NC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O PQISXOFEOCLOCT-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- WDPOFPOWJQWIPX-UUOKFMHZSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(7-aminotriazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound N1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O WDPOFPOWJQWIPX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011126 aluminium potassium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N avridine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CCCN(CCO)CCO)CCCCCCCCCCCCCCCCCC WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010555 avridine Drugs 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 210000000270 basal cell Anatomy 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 150000001649 bromium compounds Chemical class 0.000 description 1
- PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N c-di-GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@@H](O)[C@H](N4C5=C(C(NC(N)=N5)=O)N=C4)O[C@@H]3COP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 PKFDLKSEZWEFGL-MHARETSRSA-N 0.000 description 1
- 210000004900 c-terminal fragment Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229960005084 calcitriol Drugs 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- HFNQLYDPNAZRCH-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O.OC(O)=O HFNQLYDPNAZRCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 238000002659 cell therapy Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 1
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- PCDQPRRSZKQHHS-ZAKLUEHWSA-N cytidine-5'-triphosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[P@](O)(=O)O[P@@](O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 PCDQPRRSZKQHHS-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 229940099418 d- alpha-tocopherol succinate Drugs 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 108700042119 disaccharide tripeptide Proteins 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000004426 flaxseed Nutrition 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N hexaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCOCCO IIRDTKBZINWQAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000819 hypertonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000000815 hypotonic solution Substances 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 229960002751 imiquimod Drugs 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 102000004114 interleukin 20 Human genes 0.000 description 1
- 108090000681 interleukin 20 Proteins 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 108010074109 interleukin-22 Proteins 0.000 description 1
- 102000003898 interleukin-24 Human genes 0.000 description 1
- 108090000237 interleukin-24 Proteins 0.000 description 1
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 150000004694 iodide salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000001689 kallikreinlike Effects 0.000 description 1
- BWHLPLXXIDYSNW-UHFFFAOYSA-N ketorolac tromethamine Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)C1CCN2C1=CC=C2C(=O)C1=CC=CC=C1 BWHLPLXXIDYSNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229950005634 loxoribine Drugs 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004995 male reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000003446 memory effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- OXSVRXKURHXDIV-OTVXWGLQSA-N methyl (2r)-2-[[(2s)-2-[2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxypropanoylamino]propanoyl]amino]-5-amino-5-oxopentanoate Chemical compound NC(=O)CC[C@H](C(=O)OC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C(C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]1NC(C)=O OXSVRXKURHXDIV-OTVXWGLQSA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 230000002297 mitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 235000021281 monounsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940035036 multi-peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000000853 optical rotatory dispersion Methods 0.000 description 1
- 150000002891 organic anions Chemical class 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- ONTNXMBMXUNDBF-UHFFFAOYSA-N pentatriacontane-17,18,19-triol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCC ONTNXMBMXUNDBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- 238000000053 physical method Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- BOTWFXYSPFMFNR-PYDDKJGSSA-N phytol Chemical class CC(C)CCC[C@@H](C)CCC[C@@H](C)CCC\C(C)=C\CO BOTWFXYSPFMFNR-PYDDKJGSSA-N 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920000083 poly(allylamine) Polymers 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 229920002851 polycationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 108040000983 polyphosphate:AMP phosphotransferase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940050271 potassium alum Drugs 0.000 description 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- GGHDAUPFEBTORZ-UHFFFAOYSA-N propane-1,1-diamine Chemical compound CCC(N)N GGHDAUPFEBTORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005825 prostate adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000064 prostate epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000026455 prostate symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000011471 prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 1
- 108010030416 proteoliposomes Proteins 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000011472 radical prostatectomy Methods 0.000 description 1
- 238000002601 radiography Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000021014 regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000014493 regulation of gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011607 retinol Substances 0.000 description 1
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 description 1
- 150000003290 ribose derivatives Chemical group 0.000 description 1
- RHFUOMFWUGWKKO-UHFFFAOYSA-N s2C Natural products S=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 RHFUOMFWUGWKKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 1
- 201000003804 salivary gland carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000009528 severe injury Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000012868 site-directed mutagenesis technique Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 229960005314 suramin Drugs 0.000 description 1
- FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-H suramin(6-) Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S([O-])(=O)=O)=C2C(NC(=O)C3=CC=C(C(=C3)NC(=O)C=3C=C(NC(=O)NC=4C=C(C=CC=4)C(=O)NC=4C(=CC=C(C=4)C(=O)NC=4C5=C(C=C(C=C5C(=CC=4)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)C=CC=3)C)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 FIAFUQMPZJWCLV-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 108010037277 thymic shared antigen-1 Proteins 0.000 description 1
- REJLGAUYTKNVJM-SGXCCWNXSA-N tomatine Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@@H]1C[C@@H]2CC[C@H]3[C@@H]4C[C@H]5[C@@H]([C@]4(CC[C@@H]3[C@@]2(C)CC1)C)[C@@H]([C@@]1(NC[C@@H](C)CC1)O5)C)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O REJLGAUYTKNVJM-SGXCCWNXSA-N 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-KCGFPETGSA-N tubercidin Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O HDZZVAMISRMYHH-KCGFPETGSA-N 0.000 description 1
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002948 undecyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YIZYCHKPHCPKHZ-UHFFFAOYSA-N uridine-5-acetic acid methyl ester Natural products COC(=O)Cc1cn(C2OC(CO)C(O)C2O)c(=O)[nH]c1=O YIZYCHKPHCPKHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- UBORTCNDUKBEOP-UUOKFMHZSA-N xanthosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC(=O)NC2=O)=C2N=C1 UBORTCNDUKBEOP-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- JOUZZYMOTNQWPM-SCGRZTRASA-L zinc;(2s)-pyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound [Zn+2].[O-]C(=O)[C@@H]1CCCN1.[O-]C(=O)[C@@H]1CCCN1 JOUZZYMOTNQWPM-SCGRZTRASA-L 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001193—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; PAP or PSGR
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001193—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; PAP or PSGR
- A61K39/001194—Prostate specific antigen [PSA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001193—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; PAP or PSGR
- A61K39/001195—Prostate specific membrane antigen [PSMA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/575—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 humoral response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Раскрыта вакцина, включающая четыре РНК, кодирующих простат-специфический антиген (ПСА), простат-специфический мембранный антиген (ПСМА), антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП) и шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП). Вакцина предназначена для лечения рака предстательной железы, предпочтительно неоадъювантно - и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. Раскрыто также применение вакцины и набор. Изобретение может быть использовано в медицине. 4 н. и 12 з.п. ф-лы, 23 ил., 8 пр.
Description
Изобретение относится к активной (иммуностимулирующей) композиции, включающей по крайней мере одну РНК, предпочтительно мРНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, способных индуцировать (приобретенный) иммунный ответ у млекопитающего, причем антигены выбирают из группы, включающей простат-специфический антиген (ПСА), простат-специфический мембранный антиген (ПСМА), антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП) и шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП). Настоящее изобретение, кроме того, относится к вакцине, включающей указанную активную (иммуностимулирующую) композицию, а также к применению указанной активной (иммуностимулирующей) композиции (для получения вакцины) и/или вакцины для индуцирования (приобретенного) иммунного ответа для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. Наконец, настоящее изобретение относится к наборам, прежде всего, к наборам компонентов, включающим активную (иммуностимулирующую) композицию и/или вакцину.
В настоящее время рак предстательной железы является вторым из наиболее часто диагностированных типов рака и четвертой из наиболее распространенных причин связанного с раком летального исхода у мужчин в развитых странах всего мира. Способы терапевтического лечения недостаточно эффективны, и в настоящее время лечению поддается только локализованное заболевание. Установлено, что при гормонорезистентном раке предстательной железы существующие агенты продлевают жизнь на период не более приблизительно 1 год (см., например, Pavlenko M., Roos А.K. и др., «A phase I trial of DNA vaccination with a plasmid expressing prostate-specific antigen in patients with hormone-refractory prostate cancer», Br. J. Cancer, 91 (4), cc.688-694 (2004)). В некоторых высоко развитых западных странах, таких как Соединенные Штаты Америки, в настоящее время рак предстательной железы является даже наиболее часто диагностированной злокачественной опухолью и третьей из самых распространенных причин связанного с раком летального исхода среди мужчин в Соединенных Штатах (см., например, Jemal A., Siegel R. и др., «Cancer statistics, 2006», СА Cancer J. Clin., 56 (2), cc.106-130 (2006)) и в Европе, соответственно (см., например, Thomas-Kaskel А.K., Waller С.F. и др., «Immunotherapy with dendritic cells for prostate cancer». Int. J. Cancer, 121 (3), cc.467-473 (2007)). Большинство диагностированных опухолей представляют собой аденокарциномы, которые сначала пролиферируют гормонозависимым способом.
Рак предстательной железы развивается в предстательной железе, железе мужской репродуктивной системы. Он развивается, когда клетки предстательной железы подвергаются мутациям и начинают бесконтрольно размножаться. Было установлено, что типичные антигены, сверхэкспрессируемые клетками рака предстательной железы по сравнению с нормальными аналогами, представляют собой, в том числе антигены, такие как ПСА, ПСМА, РАР, АСКП, HER-2 и Ер-САМ. Указанные клетки рака предстательной железы распространяются (метастазируют) из предстательной железы в другие отделы организма, прежде всего, в костную ткань и лимфатические узлы. Рак предстательной железы вызывает боль, затруднение при мочеиспускании, эректильную дисфункцию и другие симптомы. Обычно рак предстательной железы развивается в большинстве случаев у мужчин старше пятидесяти лет, которые представляют собой наиболее распространенную группу пациентов. Однако наиболее часто рак предстательной железы не диагностируется, даже если его выявление возможно. Диагностику рака предстательной железы обычно проводят при физическом осмотре или по результатам анализов крови, таких как анализ на простат-специфический антиген (ПСА). При подозрении на рак предстательной железы диагноз рака обычно подтверждают при удалении кусочка предстательной железы (биопсии) и проведении его анализа под микроскопом. Для определения распространения рака предстательной железы можно проводить другие исследования, такие как рентгенография и остеосцинтиграфия.
Лечение рака предстательной железы все еще остается нерешенной проблемой. Для лечения рака предстательной железы можно использовать стандартные методы лечения, такие как хирургия, лучевая терапия, гормональная терапия, периодически проводимая химиотерапия, протонная терапия или некоторые комбинации указанных способов лечения. Однако при определении исхода заболевания важную роль играют возраст и общее состояние здоровья мужчины, а также степень распространения, внешние признаки, наблюдаемые под микроскопом, а также ответная реакция рака на начальное лечение. В связи с тем, что рак предстательной железы является заболеванием, которое обычно диагностируют у мужчин пожилого возраста, многие умирают вследствие других причин до распространения медленно прогрессирующего рака предстательной железы или проявления симптомов, что приводит к трудностям при выборе лечения. Решение о лечении локализованного рака предстательной железы (опухоли, которая присутствует в предстательной железе) с направленным на излечение вмешательством или об отказе от него принимают пациенты, выбирая между ожидаемыми пользой и отрицательными действиями, которые могут снизить продолжительность жизни и качество жизни.
Однако все указанные выше способы лечения, такие как хирургия, лучевая терапия, гормональная терапия и химиотерапия и т.п., характеризуются серьезными ограничениями. Например, хирургическое удаление предстательной железы, или простатэктомия, является распространенным способом лечения первичного рака предстательной железы, а также рака, который не поддается лечению лучевой терапией. Хирургическое удаление может вызвать повреждение нерва, что значительно ухудшает качество жизни. Наиболее распространенными серьезными осложнениями являются потеря контроля над мочеиспусканием и импотенция. Однако, даже при удачном удалении опухоли предстательной железы, распространение рака предстательной железы в организме остается нерешенной проблемой.
При лечении рака предстательной железы обычно применяют лучевую терапию. Ее можно использовать вместо хирургии на ранних стадиях рака, а также на более поздних стадиях прогрессирования рака предстательной железы для лечения метастазирования, вызывающего боль в костной ткани. Лучевое лечение можно также комбинировать с гормональной терапией при заболевании средней степени тяжести, когда при применении лучевой терапии в отдельности существует меньшая вероятность излечения рака. Однако лучевая терапия также характеризуется высоким риском и в большинстве случаев приводит к полной потере иммунной защиты вследствие разрушения иммунной системы пациента. Кроме того, лучевую терапию обычно применяют локально на участке роста опухоли и, таким образом, нельзя исключить вероятность распространения рака предстательной железы в организме. При систематическом применении лучевая терапия может привести к тяжелым повреждениям клеток и иммунной системы.
Химиотерапию в течение длительного времени рассматривали в качестве менее эффективного способа лечения рака предстательной железы, так как только малая часть пациентов чувствительна к такому способу лечения. Однако на некоторых пациентов (с ответной реакцией) с диагнозом метастазирующей карциномы предстательной железы химиотерапия оказывает благоприятное действие. Доля пациентов, чувствительных к такому лечению, составляет приблизительно 20%, и, в связи с этим, химиотерапия целесообразна при лечении рецидива опухоли, а также в случае неудачного применения гормональной терапии. Однако химиотерапия обычно только временно ослабляет заболевание и не приводит к полному устранению рака предстательной железы у пациента. Типичные химиотерапевтические агенты включают циклофосфамид, доксорубицин, 5-фторурацил, адриамицин, сурамин и другие агенты, однако ни один из указанных агентов не обеспечивает значительного продления жизни пациентов. Недавно в 2004 г. были опубликованы данные в New England Journal of Medicine, и было установлено, что продолжительность жизни пациентов, принимающих дозы доцетаксела каждые три недели, увеличивается в среднем на 2,5 месяца.
При гормональной терапии обычно используют лекарственные средства или комбинацию гормональной терапии и хирургии для блокирования доступа дигидротестостерона (ДГТ) в опухолевые клетки предстательной железы, гормона, продуцируемого в предстательной железе, который требуется для роста и распространения большинства опухолевых клеток предстательной железы. Блокирование ДГТ в большинстве случаев вызывает остановку роста опухоли предстательной железы, и даже уменьшение размера опухоли. Однако гормональная терапия в редких случаях излечивает рак предстательной железы, так как рак, который сначала чувствителен к действию гормональных лекарственных средств, обычно через один-два года становится резистентным. Например, паллиативное антиандрогенное лечение может вызвать ремиссию у 80% пациентов, но через 15-20 месяцев клетки опухоли становятся гормон-нечувствительными, и развивается андроген-независимый рак предстательной железы. В этом случае существует слишком мало способов лечения, например, эффективность химиотерапии ограничена (см. выше). В связи с этим, гормональную терапию обычно применяют, если рак распространяется за пределы предстательной железы. Ее также назначают некоторым мужчинам, прошедшим курс лучевой терапии или после хирургического вмешательства с целью исключить рецидив рака.
В связи с этим существует острая необходимость в альтернативных способах лечения пациентов с обычным, а также рецидивирующим раком предстательной железы или прогрессирующим раком предстательной железы. В качестве одного подхода описанные выше стандартные способы лечения рака предстательной железы, локализованного в одном органе, включая радикальную простатэктомию или лучевую терапию, такую как внешнее излучение и близкофокусная лучевая терапия, в некоторых случаях включают также неоадъювантно- или адъювантно-гормональную терапию (см., например, Totterman Т.Н., Loskog А. и др., «The immunotherapy of prostate and bladder cancer», BJU Int., 96 (5), cc.728-735 (2005)). Хотя указанные способы лечения являются относительно эффективными в течение короткого периода времени, у значительной части пациентов (30-40%) с исходно локализованным заболеванием в итоге наблюдается рецидив. В случае метастазирующего рака предстательной железы основным лечением является подавление андрогенов. Хотя указанное лечение обычно обеспечивает клеточную редукцию и временное ослабление заболевания, прогрессирование гормонорезистентного заболевания обычно происходит в течение 14-20 месяцев. В данной области химиотерапии проведено множество клинических испытаний лечения прогрессирующего андроген-независимого рака предстательной железы. Только недавно в ходе двух испытаний было установлено, что химиотерапия в минимальной степени продлевает жизнь пациентов с гормонорезистентным заболеванием.
В основном, описанные выше стандартные методы лечения, такие как упомянутая выше хирургия, лучевая терапия, гормональная терапия, периодически проводимая химиотерапия, протонная терапия и т.п., при использовании в отдельности, по-видимому, не пригодны для эффективного лечения рака предстательной железы (РПЖ). В связи с этим усовершенствованный способ лечения может включать указанные способы лечения или другие способы лечения, которые могут повысить эффективность указанных стандартных методик. Таким образом, в данном контексте предполагается использовать приобретенный иммунитет в ходе основного лечения или поддерживающего лечения рака предстательной железы (РПЖ).
Как известно в данной области, иммунная система играет важную роль в лечении и профилактике многочисленных заболеваний. В настоящем уровне техники известны различные механизмы защиты организма млекопитающих за счет идентификации и уничтожения, например, опухолевых клеток. Согласно настоящему изобретению указанные опухолевые клетки необходимо детектировать и отличать от нормальных (здоровых) клеток и тканей организма.
Иммунная система позвоночных, таких как человек, включает множество типов белков, клеток, органов и тканей, которые взаимодействуют в чрезвычайно сложной динамической системе. В качестве части указанного комплексного иммунного ответа система позвоночных со временем приспосабливается более эффективно распознавать конкретные патогены или опухолевые клетки. В процессе адаптации формируется иммунологическая память и обеспечивается даже более эффективная защита в ходе следующих столкновений. Указанный адаптационный или приобретенный иммунитет создает основу для разработки стратегии вакцинации.
Приобретенный иммунитет является антиген-специфическим, т.е. специфически распознает «собственные» или «чужие» антигены в ходе процесса, называемого презентацией антигена. Антигенная специфичность обеспечивает выработку ответных реакций, которые предназначены для идентификации специфических патогенов или инфицированных патогенами клеток, или опухолевых клеток. Способность усиливать указанные специфические ответные реакции поддерживается в организме так называемыми «клетками памяти». При повторном инфицировании организма патогеном указанные специфические клетки памяти используются для быстрого уничтожения патогена. В связи с этим, приобретенный иммунитет обеспечивает более сильный иммунный ответ, а также иммунологическую память, в которой каждый патоген или опухолевая клетка «запоминается» по одному или более характерных антигенов.
Главные компоненты приобретенного иммунитета у позвоночных предпочтительно включают на клеточном уровне лимфоциты, а на молекулярном уровне - антитела. Лимфоциты в качестве клеточных компонентов приобретенного иммунитета включают В-клетки и Т-клетки, которые образуются из кроветворных стволовых клеток костного мозга. В-клетки принимают участие в гуморальном ответе, в то время как Т-клетки вовлечены в опосредованный клетками иммунный ответ. В-клетки и Т-клетки включают рецепторные молекулы, которые распознают специфические мишени. Т-клетки распознают «чужую» мишень, такую как патогенная структура-мишень, только после процессинга и презентации антигенов (например, небольших фрагментов патогена) в комбинации с «собственным» рецептором, называемым молекулой главного комплекса гистосовместимости (ГКГ). И наоборот, антиген-специфический рецептор В-клеток представляет собой молекулу антитела на поверхности В-клеток и распознает патогены как таковые, когда антитела на поверхности В-клеток связываются со специфическим чужеродным антигеном. Указанный комплекс антиген/антитело поглощается В-клеткой и подвергается протеолизу (процессингу), при этом образуются пептиды. Затем В-клетка презентирует указанные антигенные пептиды на поверхности молекулы ГКГ класса II. Указанная комбинация ГКГ и антигена притягивает соответствующую Т-клетку-хелпер, которая высвобождает лимфокины и активирует В-клетку. Затем активированная В-клетка начинает делиться, ее потомок секретирует миллионы копий антитела, которое распознает указанный антиген. Указанные антитела циркулируют в плазме крови и лимфе, связываются с патогенами или опухолевыми клетками, экспрессирующими антиген, и маркируют их для деструкции при активации комплемента или для поглощения и деструкции фагоцитами. Цитотоксические Т-клетки (CD8+) в качестве клеточного компонента приобретенного иммунитета также индуцируют ответ цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ). Цитотоксические Т-клетки (CD8+) распознают пептиды из эндогенных патогенов и собственные антигены, связанные с молекулами ГКГ типа I. CD8+ Т-клетки выполняют киллерную функцию за счет высвобождения цитотоксических белков в клетку.
Таким образом, механизмы иммунной системы могут формировать мишени для эффективного лечения различных заболеваний. Соответствующие способы обычно основаны на введении адъювантов для индуцирования врожденного иммунитета или на введении антигенов или иммуногенов для индуцирования приобретенного иммунного ответа. Поскольку антигенами обычно являются специфические компоненты патогенов (например, поверхностные белки) или их фрагменты, можно также вводить пациенту нуклеиновые кислоты с последующей экспрессией требуемых полипептидов, белков или антигенов.
Например, результаты клинических испытаний вакцинации, основанной на известных антигенах, связанных с предстательной железой, проведенных группой Noguchi и др. в 2003 г. и 2004 г. (см., например, статьи Noguchi M., Itoh K. и др., «Phase I trial of patient-oriented vaccination in HLA-A2-positive patients with metastatic hormone-refractory prostate cancer», Cancer Sci., 95 (1), cc.77-84 (2004) и Noguchi M., Kobayashi K. и др., «Induction of cellular and humoral immune responses to tumor cells and peptides in HLA-A24 positive hormone-refractory prostate cancer patients by peptide vaccination», Prostate, 57 (1), cc.80-92 (2003)), которые проводили в две фазы I с использованием мультипептидной вакцины с участием пациентов с метастазирующим гормонорезистентным раком предстательной железы, показали, что в ходе лечения наблюдается как повышенный клеточный, так и гуморальный иммунный ответ на выбранные мишени. Вакцинация безопасна, характеризуется достаточно высокой переносимостью и отсутствием значительного токсического действия. Однако при этом наблюдается также стабилизация или снижение концентраций простат-специфического антигена (ПСА) и только у одного пациента наблюдалось исчезновение метастаз в костной ткани. Главное ограничение указанного подхода, которое вызывает проблемы при его применении в клинике, заключается в необходимости получения предварительной информации о гаплотипе антиген-лейкоцитов человека (АЛЧ), а также об экспрессии пептидов опухолевыми клетками предстательной железы.
В некоторых других недавно разработанных подходах используют вакцинацию на основе клеток, например, для вакцинации используют различные антигены или используют дендритные клетки, нагруженные различными антигенами или их фрагментами. Например, описаны клинические испытания вакцинации пациентов с диагнозом рака предстательной железы аутологическими дендритными клетками, нагруженными импульсным рекомбинантным ПСА человека (см., например, Barrou В., Benoit G. и др., «Vaccination of prostatectomized prostate cancer patients in biochemical relapse, with autologous dendritic cells pulsed with recombinant human PSA», Cancer Immunol. Immunother., 53 (5), cc.453-460 (2004)). При вакцинации пациентов с диагнозом прогрессирующего рака предстательной железы дендритными клетками, нагруженными пептидами АСКП и ПСА, у 5-10 пациентов вырабатывается иммунный ответ по крайней мере на один антиген (см., например, Thomas-Kaskel А.K., Zeiser R. и др., «Vaccination of advanced prostate cancer patients with PSCA and PSA peptide-loaded dendritic cells induces DTH responses that correlate with superior overall survival». Int. J. Cancer, 119(10), cc.2428-2434 (2006)).
Другим примером является вакцинация пациентов с диагнозом рака предстательной железы, проведенная группой Murphy и др. (1996), в соответствующей клинической фазе I с использованием двух эпитопов ПСМА HLA-A*0201S по сравнению с вакцинацией пептидом в отдельности или с использованием импульсных ДК. Результаты свидетельствуют о том, что в случае вакцинации импульсными ДК ответ наблюдается у большинства пациентов. В результате указанных испытаний было установлено, что вакцинация ДК, нагруженными пептидами или белками, вызывает по крайней мере частично, детектируемый иммунный ответ, а также временное снижение или стабилизацию АСКП (см., например, Murphy G., Tjoa В. и др., «Phase I clinical trial: T-cell therapy for prostate cancer using autologous dendritic cells pulsed with HLA-A0201-specific peptides from prostate-specific membrane antigen», Prostate, 29 (6), cc.371-380 (1996)).
Вакцинацию пациентов с диагнозом рака предстательной железы можно также проводить с использованием комбинаций пептидов, которыми нагружают дендритные клетки, например, с использованием дендритных клеток, нагруженных смесью пептидов (см., например, Fuessel S., Меуе А. и др., «Vaccination of hormone-refractory prostate cancer patients with peptide cocktail-loaded dendritic cells: results of a phase I clinical trial», Prostate, 66 (8), cc.811-821 (2006)). Смесь включает пептиды ПСА, ПСМА, сурвивина, простеина и Trp-р8 (транзиторный рецепторный потенциал р8). Клинические испытания проводили также с использованием основанной на дендритных клетках мультиэпитопной иммунотерапии гормонорезистентной карциномы предстательной железы (см., например, Waeckerle-Men Y., Uetz-von Allmen E. и др., «Dendritic cell-based multi-epitope immunotherapy of hormone-refractory prostate carcinoma», Cancer Immunol. Immunother., 55 (12), cc.1524-1533 (2006)), а также проводили испытания вакцинации против гормонорезистентной карциномы предстательной железы пептидами АСКП, простатической кислой фосфатазой (ПКФ), ПСМА и ПСА.
Хотя вакцинация антигенными белками или пептидами, например, которыми нагружены дендритные клетки, является стандартным способом индуцирования иммунного ответа, для включения требуемой генетической информации в клетку в основе иммунизации или вакцинация можно также использовать нуклеиновые кислоты. В основном, для введения нуклеиновых кислот разработаны различные способы, такие как кальций-фосфатная трансфекция, полипреновая трансфекция, слияние протопластов, электропорация, микроинъекция и липофекция, причем было установлено, что пригодным способом, прежде всего, является липофекция.
В качестве одного примера можно привести способ лечения рака предстательной железы при вакцинации, основанной на трансфекции дендритных клеток общей РНК, полученной из аутологической опухоли (см., например, Heiser A., Coleman D. и др., «Autologous dendritic cells transfected with prostate-specific antigen RNA stimulate CTL responses against metastatic prostate tumors», J. Clin. Invest., 109 (3), cc.409-417 (2002)). Преимущество указанной стратегии заключается в использовании в качестве мишени многочисленных специфических опухоль-ассоциированных антигенов (ОАА) АЛЧ класса I и класса II у пациентов без проведения предварительного типирования АЛЧ. Кроме того, в качестве мишеней в данной стратегии можно использовать даже стромальные антигены, так как мРНК получают из хирургических образцов, а не из опухолевых клеточных линий. Например, группой Heiser и др. разработана методика иммунотерапии на основе ДК, которые трансфектируют мРНК, кодирующей ПСА. Вакцинация характеризуется достаточно высокой переносимостью и индуцирует повышенный Т-клеточный ответ на ПСА. Однако указанные вакцины на основе ДК против рака предстательной железы, по-видимому, генерируют значительный Т-клеточный ответ, который может сопровождаться клинической ответной реакцией, хотя частота регистрации таких симптомов все еще остается неудовлетворительной.
В стратегии вакцинации для включения требуемой генетической информации в клетку в качестве нуклеиновой кислоты можно также использовать ДНК. В конкретном примере в качестве носителя ДНК используют вирусную ДНК. Благодаря своим инфекционным свойствам указанные вирусы характеризуются чрезвычайно высокой скоростью трансфекции. Используемые вирусы обычно генетически модифицируют таким образом, чтобы в трансфектированной клетке не образовались функциональные инфекционные частицы. Например, клинические испытания в фазе I проводили с использованием рекомбинантного вируса коровьей оспы, экспрессирующего ПСА. Авторами было установлено, что наблюдается Т-клеточный иммунный ответ на ПСА, а также стабилизация сывороточного ПСА у выбранных пациентов (см., например, Eder J.P., Kantoff P.W. и др., «A phase I trial of a recombinant vaccinia virus expressing prostate-specific antigen in advanced prostate cancer», Clin. Cancer Res., 6 (5), cc.1632-1638 (2000)). Воспалительная ответная реакция, индуцируемая высоко иммуногенными пептидами рекомбинантного вируса, может усиливать иммуногенность чужеродного белка, но было установлено, что иммунная система снижает репликацию рекомбинантного вируса и таким образом ограничивает эффективность применения в клинике. Хотя в ходе нескольких испытаний установлена иммуногенность рекомбинантных вакцин и доказана ответная реакция опухоли, указанные результаты тем не менее нуждаются в подтверждении.
Согласно другому подходу вакцинацию пациентов с диагнозом гормонорезистентного рака предстательной железы проводят плазмидными ДНК, экспрессирующими ПСА (см., например, статью Pavlenko M., Roos А.K. и др., «A phase I trial of DNA vaccination with a plasmid expressing prostate-specific antigen in patients with hormone-refractory prostate cancer», Br. J. Cancer, 91 (4), cc.688-694 (2004)). Было также установлено, что терапевтическая и профилактическая вакцинация плазмидой или вирусоподобным репликоном, кодирующим шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП), увеличивает продолжительность жизни мышей с привитыми опухолями (см., например, Garcia-Hernandez Mde L., Gray А. и др., «In vivo effects of vaccination with six-transmembrane epithelial antigen of the prostate: a candidate antigen for treating prostate cancer», Cancer Res., 67 (3), cc.1344-1351 (2007)). Недавно было установлено, что ШТЭАП является белком-индикатором прогрессирующего рака предстательной железы человека и характеризуется значительной сверхэкспрессией при раке предстательной железы человека. Его функция в настоящее время еще не определена.
Хотя ДНК используют в качестве носителя генетической информации, тем не менее нельзя исключить риск неконтролируемой репродукции введенного гена или вирусных генов, например, за счет возможной рекомбинации. В связи с этим, существует также риск, связанный с включением ДНК в интактный ген генома клетки-хозяина, например, рекомбинацией, при этом возможна мутация указанного гена, который в связи с этим полностью или частично инактивируется или содержит искаженную информацию. Другими словами, синтез генного продукта, который жизненно необходим клетке, полностью подавляется, или, в другом варианте, экспрессируется модифицированный генный продукт или генный продукт с неправильной информацией. Особый риск возникает, если ДНК внедряют в ген, который принимает участие в регуляции роста клеток. В этом случае клетка-хозяин дегенерирует, что приводит к развитию рака или образованию опухоли. Кроме того, если ДНК вводят в клетку с целью ее экспрессии, необходимо, чтобы соответствующий носитель ДНК содержал сильный промотер, такой как вирусный промотер ЦМВ. Интеграция указанных промотеров в геном обрабатываемой клетки приводит к нежелательным изменениям регуляции генной экспрессии в клетке. Другой риск использования ДНК в качестве агента для индуцирования иммунного ответа (например, в качестве вакцины) заключается в индуцировании патогенных антител против ДНК у пациента, которому введена чужеродная ДНК, что может вызвать иммунный ответ (возможно летальный).
Подводя итог, результаты описанных выше подходов, несомненно, свидетельствуют о достижении определенного прогресса в лечении рака предстательной железы (РПЖ), тем не менее, при данном высоком уровне смертности, существует острая необходимость в других, альтернативных или усовершенствованных способах лечения.
В связи с этим в настоящее время существует возможность и необходимость создания эффективной системы, которую можно использовать, чтобы обеспечить эффективную стимуляцию иммунной системы для лечения рака предстательной железы (РПЖ) и при этом исключить проблемы неконтролируемой репродукции введенного гена, вызванной ДНК в составе композиций.
В связи с этим в объекте настоящего изобретения предлагается композиция, которая а) обеспечивает лечение РПЖ за счет стимуляции иммунной системы, в то время как б) исключаются упомянутые выше недостатки.
Объектом настоящего изобретения является прежде всего активная (иммуностимулирующая) композиция, включающая по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два, три или даже четыре (предпочтительно различных) антигена, выбранных из группы, включающей следующие антигены:
- простат-специфический антиген ((ПСА), калликреин-3 (КЛК3)),
- простат-специфический мембранный антиген (ПСМА),
- антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
- шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП).
Неожиданно было установлено, что специфическая комбинация по крайней мере двух антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов из упомянутой выше группы, предпочтительно двух, трех или четырех указанных антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, эффективно стимулирует (приобретенный) иммунитет, что позволяет лечить РПЖ, предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентный рак предстательной железы, а также родственные заболевания или нарушения. В данном контексте термины антигены, антигенные белки или антигенные пептиды являются синонимами. В контексте настоящего изобретения активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению, кроме того, включает композицию, которая индуцирует иммунный ответ, предпочтительно приобретенный иммунный ответ, как определено выше, за счет действия одного компонента (ов), который содержится в активной (иммуностимулирующей) композиции или кодируется компонентами активной (иммуностимулирующей) композиции, предпочтительно по крайней мере одной РНК, предпочтительно мРНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена.
Было установлено, что антигены, такие как ПСА, ПСМА и АСКП, сверхэкспрессируются опухолевыми клетками предстательной железы по сравнению с нормальными аналогами. В связи с этим, указанные антигены представляют собой возможные мишени для иммунотерапии (см., например, статью Marrari A., Iero M. и др., «Vaccination therapy in prostate cancer», Cancer Immunol. Immunother., 56 (4), cc.429-445 (2007)).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции кодирует ПСА. В контексте настоящего изобретения термин «ПСА» обозначает «простат-специфический антиген», известный в литературе также как калликреин-3 (КЛКЗ). ПСА является белком с молекулярной массой 33 кДа и представляет собой калликреин-подобную регулируемую андрогенами сериновую протеазу, которая продуцируется исключительно эпителиальными клетками ткани предстательной железы всех типов, доброкачественными и злокачественными. Прежде всего, ПСА экспрессируется на высоком уровне нормальными эпителиальными клетками предстательной железы и представляет собой один из наиболее характерных опухоль-ассоциированных антигенов рака предстательной железы. На физиологическом уровне ПСА присутствует в семенной жидкости при высокой концентрации и расщепляет высокомолекулярный белок, ответственный за коагуляцию семенной жидкости, с образованием более мелких полипептидов. Указанное действие приводит к разжижению коагулята. ПСА присутствует также в сыворотке и его можно определять методом моноклонального иммунорадиометрического анализа или поликлонального радиоиммуноанализа. В настоящее время ПСА является наиболее широко распространенным опухолевым маркером, используемым для анализа, диагностики и мониторинга рака предстательной железы. Прежде всего, для определения ПСА в сыворотке широкое клиническое применение находят некоторые типы иммуноанализа. Недавно разработан анализ цепной реакции полимеризации с использованием обратной транскриптазы (ОТ-ПЦР) для определения мРНК ПСА в сыворотке. Однако ПСА нельзя использовать в качестве специфического маркера заболевания, так как повышенные концентрации ПСА регистрируются у значительного процента пациентов с диагнозом гиперплазии предстательной железы (ГПЖ) и простатита (25-86%) (Gao и др., Prostate, 31, cc.264-281 (1997)), а также при других доброкачественных нарушениях и у некоторых здоровых мужчин, что является фактором, который значительно ограничивает диагностическую специфичность указанного маркера. В контексте настоящего изобретения предпочтительная последовательность по крайней мере одной РНК, предпочтительно мРНК, кодирующей ПСА, при использовании в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит или включает последовательность, депонированную с кодом NM_001648, более предпочтительно, содержит или включает последовательность, представленную на фиг.1 (SEQ ID NO:1), и наиболее предпочтительно по крайней мере одна РНК, кодирующая ПСА, содержит или включает кодирующую последовательность, представленную на фиг.2 или на фиг.3 (SEQ ID NO:2 или 3). Согласно другому предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в альтернативном или в дополнительном варианте кодирует антигенную последовательность ПСА, выбранную из фрагмента, варианта или эпитопа последовательности ПСА, депонированной с кодом NM_001648, или представленной на фиг.1, фиг.2 или фиг.3 (SEQ ID NO:1, 2 или 3).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции кодирует ПСМА. В контексте настоящего изобретения термин «ПСМА» обозначает простат-специфический мембранный антиген или так называемую фолатгидролазу 1 (ФОЛГ-1) или «ПСМ». ПСМА представляет собой трансмембранный гликопротеин типа II с молекулярной массой 100 кДа, при этом экспрессия ПСМА в значительной степени ограничена тканями предстательной железы, но регистрируемые концентрации мРНК ПСМА наблюдаются в головном мозге, слюнной железе, тонкой кишке, а также в почечно-клеточной карциноме (Israeli и др., Cancer Res., 53, cc.227-230 (1993)). ПСМА на высоком уровне экспрессируется в большинстве случаев первичного и метастазирующего рака предстательной железы, но также экспрессируется в большинстве нормальных внутриэпителиальных неопластических образований (Gao и др. (1997), см. выше). Прежде всего, ПСМА на высоком уровне экспрессируется в опухолевых клетках предстательной железы и в не относящейся к предстательной железе сосудистой системе солидных опухолей, а также представляет собой мишень для визуализации рака и противораковых терапевтических агентов. ПСМА выполняет функцию глутаматкарбоксипептидазы (GCPII) при действии на низкомолекулярные субстраты, включая фолат, противораковое лекарственное средство метотрексат, а также на нейропептид N-ацетил-L-аспартил-L-глутамат. Было установлено, что при раке предстательной железы экспрессия ПСМА коррелирует с прогрессированием заболевания, при этом наиболее высокие уровни экспрессии наблюдаются при гормонорезистентном и метастазирующем заболевании. В клетках ПСМА находится в цитоплазме и/или мембранах. ПСМА считается биомаркером рака предстательной железы (РПЖ) и в настоящее время его интенсивно исследуют для применения в качестве мишени для визуализации и лечения. В контексте настоящего изобретения предпочтительная последовательность по крайней мере одной РНК, предпочтительно мРНК, кодирующей ПСМА, при использовании в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит или включает последовательность, депонированную с кодом NM_004476, более предпочтительно, содержит или включает последовательность, представленную на фиг.4 (SEQ ID NO:4), и наиболее предпочтительно по крайней мере одна РНК, кодирующая ПСМА, содержит или включает кодирующую последовательность, представленную на фиг.5 или фиг.6 (SEQ ID NO:5 или 6). Согласно другому предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в альтернативном или в дополнительном варианте кодирует антигенную последовательность ПСМА, выбранную из фрагмента, варианта или эпитопа последовательности ПСМА, депонированной с кодом NM_004476, или представленной на фиг.5 или фиг.6 (SEQ ID NO:5 или 6).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции кодирует АСКП. В контексте настоящего изобретения «АСКП» обозначает «антиген стволовых клеток предстательной железы». АСКП сверхэкспрессируется на всех стадиях развития рака предстательной железы, включая низкодифференцированную внутриэпителиальную неоплазию предстательной железы (PIN), андроген-зависимые и андроген-независимые опухоли предстательной железы. Ген АСКП характеризуется 30% гомологией по сравнению с антигеном-2 стволовых клеток, членом семейства Thy-I/Ly-6 антигенов, присоединенных к клеточной поверхности через гликозилфосфатидилинозит (ГФИ), и кодирует белок, содержащий 123 аминокислотных остатка, N-концевую сигнальную последовательность, C-концевую последовательность, связанную с ГФИ, а также многочисленные участки N-гликозилирования. Экспрессия мРНК АСКП в значительной степени активируется с повышением активности в андроген-зависимом и андроген-независимом ксенотрансплантатах рака предстательной железы. При проведении анализа мРНК in situ установлено, что экспрессия АСКП локализована в базальных клетках эпителия, предполагаемом компартменте стволовых клеток в предстательной железе. Методом проточной цитометрии установлено, что АСКП предпочтительно экспрессируется на клеточной поверхности и присоединяется к ней через ГФИ. Методом анализа флуоресцентной гибридизации in situ установлено, что ген АСКП расположен в хромосоме 8q24. 2, области аллельного усиления, характерной для более 80% случаев рака предстательной железы. АСКП можно использовать в качестве маркера рака предстательной железы для распознавания злокачественного рака предстательной железы, нормальной предстательной железы и доброкачественной неоплазии. Например, при раке предстательной железы АСКП экспрессируется в чрезвычайно высоких концентрациях по сравнению с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ГПЖ). В контексте настоящего изобретения предпочтительная последовательность по крайней мере одной РНК, предпочтительно мРНК, кодирующей АСКП, при использовании в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит или включает последовательность, депонированную с кодом NM_005672, более предпочтительно, содержит или включает последовательность, представленную на фиг.7 (SEQ ID NO:7), и наиболее предпочтительно по крайней мере одна РНК, кодирующая АСКП, содержит или включает кодирующую последовательность, представленную на фиг.8 или на фиг.9 (SEQ ID NO:8 или 9). Согласно другому предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в альтернативном или в дополнительном варианте кодирует антигенную последовательность АСКП, выбранную из фрагмента, варианта или эпитопа последовательности АСКП, депонированной с кодом NM_005672 или представленной на фиг.8 или фиг.9 (SEQ ID NO:8 или 9).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции кодирует ШТЭАП. В контексте настоящего изобретения «ШТЭАП» обозначает шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП), так называемый ШТЭАП-1. ШТЭАП или ШТЭАП-1 является новым белком клеточной поверхности и экспрессируется предпочтительно в ткани предстательной железы человека и в других распространенных злокачественных образованиях, включая карциному предстательной железы, мочевого пузыря, ободочной кишки и яичников, а также при саркоме Юинга, что указывает на функцию указанного белка в качестве практически универсального опухолевого антигена. Прежде всего, ШТЭАП в значительной степени экспрессируется при первичном раке предстательной железы, причем экспрессия в нормальных тканях снижена. Положительный результат при проведении анализа на ШТЭАП методом Карла Мейера (p равно 0,001) в образцах костного мозга с высокой точностью коррелирует с продолжительностью жизни при образовании новых метастаз. В контексте настоящего изобретения предпочтительная последовательность по крайней мере одной РНК, предпочтительно мРНК, кодирующей ШТЭАП (или ШТЭАП-1), при использовании в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит или включает последовательность, депонированную с кодом NM_012449, более предпочтительно, содержит или включает последовательность, представленную на фиг.10 (SEQ ID NO:10), и наиболее предпочтительно по крайней мере одна РНК, кодирующая ШТЭАП, содержит или включает кодирующую последовательность, представленную на фиг.11 или на фиг.12 (SEQ ID NO:11 или 12). Согласно другому предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в альтернативном или в дополнительном варианте кодирует антигенную последовательность ШТЭАП, выбранную из фрагмента, варианта или эпитопа последовательности ШТЭАП, депонированной с кодом NM_012449, или представленной на фиг.11 или на фиг.12 (SEQ ID NO:11 или 12).
Антигены, антигенные белки или антигенные пептиды, как определено выше, которые кодируются по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, включают фрагменты или варианты указанных последовательностей. Указанные фрагменты или варианты обычно включают последовательность, гомология которой по сравнению с одним из упомянутых выше антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов или по сравнению с одной из упомянутых выше последовательностей или по сравнению с последовательностями кодирующих их нуклеиновых кислот, составляет по крайней мере 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, предпочтительно по крайней мере 70%, более предпочтительно по крайней мере 80%, также более предпочтительно по крайней мере 85%, еще более предпочтительно по крайней мере 90% и наиболее предпочтительно по крайней мере 95% или даже 97% по сравнению с полноразмерной последовательностью дикого типа в отношении нуклеотидной или аминокислотной последовательности.
«Фрагменты» антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов в контексте настоящего изобретения включают последовательность антигена, антигенного белка или антигенного пептида, как определено выше, которая по сравнению с аминокислотной последовательностью (или последовательностью кодирующей ее нуклеиновой кислоты) является укороченной по N-концевому фрагменту, C-концевому фрагменту и/или в середине последовательности по сравнению с аминокислотной последовательностью исходного (природного) белка (или последовательностью нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный белок). Таким образом, указанное укорочение проводят в отношении аминокислотной или, соответственно, нуклеотидной последовательности. В связи с этим в отношении указанного фрагмента, как определено выше, гомология последовательности предпочтительно относится к полноразмерному антигену, антигенному белку или антигенному пептиду, как определено выше, или к полноразмерной последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный антиген, антигенный белок или антигенный пептид.
Фрагменты антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов в контексте настоящего изобретения, кроме того, включают последовательность антигена, антигенного белка или антигенного пептида, как определено выше, длина цепи которой составляет приблизительно от 6 до приблизительно 20 или более аминокислот, например, длина цепи фрагментов, которые подвергаются процессингу и презентации молекулами ГКГ класса I, предпочтительно составляет от приблизительно 8 до приблизительно 10 аминокислот, например, 8, 9 или 10 (или даже 6, 7, 11 или 12 аминокислот), или длина цепи фрагментов, которые подвергаются процессингу и презентации молекулами ГКГ класса II, предпочтительно составляет от приблизительно от 13 или более аминокислот, например 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более аминокислот, причем указанные фрагменты выбирают из любого участка аминокислотной последовательности. Указанные фрагменты обычно распознаются Т-клетками в форме комплекса, состоящего из пептидного фрагмента и молекулы ГКГ, т.е. фрагменты в природной форме обычно не распознаются.
Фрагменты антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено выше, включают также эпитопы указанных антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов. Эпитопы (также называемые «антигенные детерминанты») в контексте настоящего изобретения обычно обозначают фрагменты, расположенные на внешней поверхности (природных) антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено в данном контексте, предпочтительно содержащие 5-15 аминокислот, более предпочтительно содержащие 5-12 аминокислот, еще более предпочтительно содержащие 6-9 аминокислот, которые распознаются антителами или рецепторами В-клеток, т.е. в природной форме. Указанные эпитопы антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, кроме того, выбирают из любых упомянутых в данном контексте вариантов указанных антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов. В данном контексте антигенные детерминанты представляют собой конформационные или прерванные эпитопы, которые состоят из сегментов антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено в данном контексте, которые включают прерванную аминокислотную последовательность антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено в данном контексте, но объединены с образованием трехмерной структуры или непрерывных или линейных эпитопов, которые состоят из одной полипептидной цепи.
«Варианты» антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено выше, кодируются по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, при этом нуклеиновые кислоты, кодирующие антиген, антигенный белок или антигенный пептид, как определено выше по крайней мере одна (м) РНК заменены. Таким образом, образуется антиген, антигенный белок или антигенный пептид, содержащий аминокислотную последовательность, которая отличается от исходной последовательности одной или более мутацией (ями), например, включает одну или более замен, вставок и/или делеций аминокислот. Предпочтительно, указанные фрагменты и/или варианты характеризуются одинаковой биологической функцией или специфической активностью по сравнению с полноразмерным природным антигеном или антигенным белком, например, специфическим антигенным свойством.
По крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению кодирует также антиген или антигенный белок, как определено выше, при этом кодируемая аминокислотная последовательность включает консервативные аминокислотные замены по сравнению с физиологической последовательностью. Термин «варианты», как определено выше, прежде всего, включает указанные кодируемые аминокислотные последовательности, а также кодирующие их нуклеотидные последовательности. Если аминокислоту одного класса заменяют на другую аминокислоту того же класса, то такие замены называют консервативными. Прежде всего указанными аминокислотами являются аминокислоты, включающие боковые алифатические цепи, положительно или отрицательно заряженные боковые цепи, ароматические группы в боковых цепях, или аминокислоты, боковые цепи которых образуют водородные связи, например, боковые цепи которых содержат гидроксильную функциональную группу. Указанное обозначает, например, что аминокислоту, содержащую боковую полярную цепь, заменяют на другую аминокислоту, также содержащую полярную боковую цепь, или, например, аминокислоту с гидрофобной боковой цепью, заменяют на другую аминокислоту, также содержащую гидрофобную боковую цепь (например, серин (треонин) заменяют на треонин (серии) или лейцин (изолейцин) заменяют на изолейцин (лейцин)). Вставки и замены, прежде всего, можно использовать в таких участках последовательности, которые не изменяют трехмерную структуру или не влияют на область связывания. Модификации трехмерной структуры за счет вставки (ок) или делеции (й) регистрируют, например, с использованием спектров кругового дихроизма (КД) (Urry, Absorption, Circular Dichroism and ORD of Polypeptides, в сборнике Modern Physical Methods in Biochemistry, ред. Neuberger и др., Elsevier, Амстердам (1985)).
Кроме того, варианты антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено выше, которые кодирует по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, включают также последовательности, в которых нуклеиновые кислоты по крайней мере одна (м) РНК заменены в соответствии с вырожденным генетическим кодом, чтобы не изменить характерную аминокислотную последовательность антигена, антигенного белка или антигенного пептида, т.е. аминокислотная последовательность или по крайней мере ее часть не должна отличаться от исходной последовательности одной или более мутацией (ями), как определено выше.
Для определения процента гомологии (идентичности) двух последовательностей (нуклеотидных последовательностей, например, последовательностей РНК или мРНК, как определено в данном контексте, или аминокислотных последовательностей, предпочтительно кодируемых аминокислотных последовательностей, например аминокислотных последовательностей антигенов, антигенных белков или антигенных пептидов, как определено выше), последовательности совмещают, а затем выравнивают их между собой. Таким образом, в первую последовательность можно включать пробелы и сравнивать компонент в первой последовательности с компонентом в соответствующем положении второй последовательности. Если в одном и том же положении первой и второй последовательности присутствует один и тот же компонент, две последовательности идентичны в указанном положении. Процент гомологии двух последовательностей равен числу идентичных положений, деленному на общее число положений. Процент гомологии двух последовательностей определяют с использованием математического алгоритма. Предпочтительным, не ограничиваясь только им, примером математического алгоритма, который можно использовать, является алгоритм, описанный в статье Karlin и др., PNAS USA, 90, cc.5873-5877 (1993), или в статье Altschul и др., Nucleic Acids Res., 25, cc.3389-3402 (1997). Указанный алгоритм интегрирован в программу BLAST. Указанная программа позволяет идентифицировать последовательности, которые идентичны последовательностями по настоящему изобретению.
Активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает, как определено выше по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, выбранных из антигенов указанной выше группы, так как специфическая комбинация по настоящему изобретению по крайней мере двух (предпочтительно различных) антигенов из упомянутой выше группы способна эффективно стимулировать иммунитет (приобретенный), что можно использовать для лечения рака предстательной железы (РПЖ). Однако в настоящем изобретении предлагаются также такие активные (иммуностимулирующие) композиции, которые включают по крайней мере одну РНК, кодирующую три или четыре (предпочтительно различных) антигена, выбранных из антигенов указанной выше группы, причем возможна любая комбинация указанных антигенов, и все возможные комбинации включены в объем настоящего изобретения.
Более предпочтительно, в настоящем изобретении предлагается также активная (иммуностимулирующая) композиция, включающая по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере три или четыре (предпочтительно различных) антигена, выбранных из антигенов указанной выше группы, причем возможна любая комбинация указанных антигенов.
Соответственно, в другом предпочтительном варианте по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению кодирует по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, выбранных из антигенов указанной выше группы, включающей (по крайней мере) одну следующую комбинацию антигенов:
- ПСА и ПСМА, или
- ПСА и АСКП, или
- ПСА и ШТЭАП, или
- ПСМА и АСКП, или
- ПСМА и ШТЭАП, или
- АСКП и ШТЭАП,
или
- ПСА, ПСМА и АСКП, или
- ПСА, ПСМА и ШТЭАП, или
- ПСМА, АСКП и ШТЭАП, или
- ПСА, АСКП и ШТЭАП, или
или
- ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЭАП.
Согласно следующему предпочтительному варианту в настоящем изобретении предлагается активная (иммуностимулирующая) композиция, включающая по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два, три или четыре (предпочтительно различных) антигена,
а) в которой по крайней мере один антиген выбран из:
- шестого трансмембранного эпителиального антигена предстательной железы (ШТЭАП), и
б) в которой другой антиген (ы) выбран (ы) по крайней мере из одного антигена из следующих специфических антигенов или их комбинаций:
- простат-специфического антигена (ПСА), или
- простат-специфического мембранного антигена (ПСМА), или
- антигена стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
или
- ПСА и ПСМА, или
- ПСА и АСКП, или
- ПСМА и АСКП,
или
- ПСА, ПСМА и АСКП.
Согласно еще более предпочтительному варианту в настоящем изобретении предлагается активная (иммуностимулирующая) композиция, включающая по крайней мере одну РНК, кодирующую четыре (предпочтительно различных) антигена, выбранных из ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЭАП.
По крайней мере, одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению обычно является любая РНК, предпочтительно, но, не ограничиваясь только ими, кодирующая РНК, циклическая или линейная РНК, одноцепочечная или двухцепочечная РНК (которая представляет собой РНК, образованную при нековалентном связывании двух одноцепочечных РНК), или частично двухцепочечная или частично одноцепочечная РНК, которые по крайней мере частично комплементарны (указанные частично двухцепочечная или частично одноцепочечная РНК включают более длинную и более короткую одноцепочечную РНК или две одноцепочечные РНК, длина которых приблизительно одинакова, при этом одна одноцепочечная молекула РНК частично комплементарна с другой одноцепочечной молекулой РНК, и, в связи с этим, в указанной области обе молекулы образуют двухцепочечную РНК, т.е. частично двухцепочечную или частично одноцепочечную РНК относительно полноразмерной последовательности РНК). Более предпочтительно по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению является одноцепочечная РНК, более предпочтительно линейная РНК. Наиболее предпочтительно по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению является матричная РНК (мРНК). В данном контексте матричная РНК (мРНК) обычно обозначает РНК, которая включает (по крайней мере) несколько структурных элементов, например, необязательную область 5'-UTR, расположенный слева участок связывания с рибосомой, за которым следует кодирующая область, необязательную область 3'-UTR, за которой следует полиА-концевой фрагмент (и/или полиС-концевой фрагмент).
В одном, прежде всего, предпочтительном варианте каждый по крайней мере один из двух (предпочтительно различных) антигенов в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению кодируется одной (моноцистронной) РНК, предпочтительно одной (моноцистронной) мРНК. Другими словами, активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает по крайней мере две (моноцистронные) РНК, предпочтительно мРНК, причем каждая из двух указанных (моноцистронных) РНК, предпочтительно мРНК, кодирует только один (предпочтительно различный) антиген, выбранный из упомянутых выше групп или подгрупп, предпочтительно в одной из упомянутых выше комбинаций.
Согласно другому, прежде всего, предпочтительному варианту активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает (по крайней мере) одну би- или полицистронную РНК, предпочтительно мРНК, т.е. (по крайней мере) одну РНК, которая содержит две или более последовательности, кодирующие по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, выбранные из упомянутых выше групп или подгрупп, предпочтительно в одной из упомянутых выше комбинаций. Указанные последовательности (по крайней мере) одной би- или полицистронной РНК, кодирующие по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, разделены по крайней мере одной последовательностью участка внутренней посадки рибосомы (IRES), как определено ниже. Таким образом, термин «кодирующая по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена» обозначает, но, не ограничиваясь только ими, что (по крайней мере) одна (би- или полицистронная) РНК, предпочтительно мРНК, кодирует, например по крайней мере два, три или четыре (предпочтительно различных) антигена упомянутых выше групп (ы) антигенов или их фрагментов или вариантов, определенных выше. Более предпочтительно, но, не ограничиваясь только ими, (по крайней мере) одна (би- или полицистронная) РНК, предпочтительно мРНК, кодирует, например по крайней мере два, три или четыре (предпочтительно различных) антигена упомянутых выше подгрупп (ы) антигенов или их фрагментов или вариантов, определенных выше. В данном контексте так называемая последовательность участка внутренней посадки рибосомы (IRES), как определено выше, может осуществлять функцию единственного участка связывания с рибосомой, но также может обеспечивать образование би- или полицистронной РНК, как определено выше, которая кодирует некоторые белки, которые транслируются рибосомами независимо друг от друга. Примеры последовательностей IRES, которые можно использовать согласно настоящему изобретению, включают последовательности РНК пикорнавирусов (например, вирус ящера), пестивирусов (CFFV), вирусов полиомиелита (ВП), вирусов энцефаломиокардита (ВЭМК), вирусов гепатита С (ВГС), вирусов классической чумы свиней (ВКЧС), вируса мышиного лейкоза (ВМЛ), вирусов иммунодефицита обезьян (ВИО) или вирусов паралича сверчка (ВПС).
Согласно следующему, прежде всего, предпочтительному варианту активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает смесь по крайней мере одной моноцистронной РНК, предпочтительно мРНК, как определено выше, и по крайней мере одной би- или полицистронной РНК, предпочтительно мРНК, как определено выше. По крайней мере, одна моноцистронная РНК и/или по крайней мере причем одна би- или полицистронная РНК предпочтительно кодируют различные антигены или их фрагменты или варианты, определенные выше, где антигены предпочтительно выбирают из упомянутых выше групп или подгрупп антигенов, более предпочтительно в одной из упомянутых выше комбинаций. Однако по крайней мере одна моноцистронная РНК и по крайней мере одна би- или полицистронная РНК предпочтительно также кодируют (частично) идентичные антигены, выбранные из упомянутых выше групп или подгрупп антигенов, предпочтительно в одной из упомянутых выше комбинаций, при условии, что активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает в целом по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, как определено выше. Указанный вариант является предпочтительным, например, для поочередного введения, например, при введении активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, через определенные интервалы времени. Компоненты указанной активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, прежде всего, различные РНК, кодирующие по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, содержатся, например, в наборе (различных компонентов) композиции, или, например, их вводят в отдельности в виде компонентов различных активных (иммуностимулирующих) композиций по настоящему изобретению.
Предпочтительно длина по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, выбранных из определенной выше группы антигенов, более предпочтительно в указанных выше комбинациях, обычно составляет от приблизительно 50 до приблизительно 20000, или от 100 до приблизительно 20000 нуклеотидов, предпочтительно от приблизительно 250 до приблизительно 20000 нуклеотидов, более предпочтительно от приблизительно 500 до приблизительно 10000, наиболее предпочтительно от приблизительно 500 до приблизительно 5000.
Согласно одному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, кодирующая по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, выбранных из определенных выше групп (ы) или подгрупп (ы) антигенов, более предпочтительно в указанных выше комбинациях, представлена в форме модифицированной РНК, при этом по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции включает любую модификацию, как определено в данном контексте. Модификации, как определено в данном контексте, предпочтительно приводят к стабилизации по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению.
В связи с этим согласно первому варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению представлена в виде «стабилизированной РНК», предпочтительно стабилизированной мРНК, т.е. в виде (м) РНК, которая в значительной степени устойчива в отношении деградации in vivo (например, под действием экзо- или эндонуклеаз). Указанную стабилизацию проводят, например, при модификации фосфатов в основной цепи по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению. Модификация основной цепи согласно настоящему изобретению обозначает модификацию, при которой фосфаты в основной цепи нуклеотидов РНК модифицируют химически. Нуклеотиды, которые предпочтительно можно использовать для такой модификации, включают, например, фосфаты в основной цепи, модифицированные фосфоротиоатным методом, при этом предпочтительно по крайней мере один из атомов кислорода в фосфатной группе в основной цепи заменен на атом серы. Стабилизированные (м) РНК, кроме того, включают, например: неионогенные фосфатные аналоги, такие как, например, алкил- или арилфосфонаты, в которых заряженный атом кислорода в фосфонатной группе заменен на алкильную группу или арильную группу, или на фосфодиэфиры и алкилфосфотриэфиры, в которых фрагмент, содержащий заряженный атом кислорода, присутствует в алкилированной форме. Указанные модификации основной цепи обычно включают, но, не ограничиваясь только ими, модификации, выбранные из группы, включающей метилфосфонаты, фосфорамидаты и фосфоротиоаты (например, цитидин-5'-O-(1-тиофосфат)).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению может в дополнительном или в альтернативном варианте также включать модификации сахаридных остатков. В контексте настоящего изобретения модификация сахаридного остатка обозначает химическую модификацию сахаридного остатка в составе нуклеотида по крайней мере в одной РНК и обычно включает, но, не ограничиваясь только ими, модифицированные сахаридные остатки, выбранные из группы, включающей 2'-дезокси-2'-фторолигорибонуклеотид (2'-фтор-2'-дезоксицитидин-5'-трифосфат, 2'-фтор-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфат), 2'-дезокси-2'-деаминолигорибонуклеотид (2'-амино-2'-дезоксицитидин-5'-трифосфат, 2'-амино-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфат), 2'-O-алкилолигорибонуклеотид, 2'-дезокси-2'-С-алкилолигорибонуклеотид (2'-O-метилцитидин-5'-трифосфат, 2'-метилуридин-5'-трифосфат), 2'-С-алкилолигорибонуклеотид и изомеры указанных соединений (2'-арацитидин-5'-трифосфат, 2'-арауридин-5'-трифосфат), или азидотрифосфат (2'-азидо-2'-дезкосицитидин-5'-трифосфат, 2'-азидо-2'-дезоксиуридин-5'-трифосфат).
По крайней мере, одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению может в дополнительном или в альтернативном варианте также включать по крайней мере одну модификацию основания, которая предпочтительно пригодна для значительного повышения экспрессии белка, кодируемого по крайней мере одной последовательностью РНК, по сравнению с не-модифицированной, т.е. природной последовательностью РНК. Значительное повышение в данном случае обозначает повышение экспрессии белка по сравнению с экспрессией природной последовательности РНК, по крайней мере на 20%, предпочтительно, по крайней мере на 30%, 40%, 50% или 60%, более предпочтительно по крайней мере на 70%, 80%, 90% или даже на 100% и наиболее предпочтительно по крайней мере на 150%, 200% или даже 300% или более. Согласно настоящему изобретению нуклеотид, включающий указанную модификацию основания, предпочтительно выбирают из группы нуклеотидов с модифицированными основаниями, включающей 2-амино-6-хлорпуринрибозид-5'-трифосфат, 2-аминоаденозин-5'-трифосфат, 2-тиоцитидин-5'-трифосфат, 2-тиоуридин-5'-трифосфат, 4-тиоуридин-5'-трифосфат, 5-аминоаллилцитидин-5'-трифосфат, 5-аминоаллилуридин-5'-трифосфат, 5-бромцитидин-5'-трифосфат, 5-бромуридин-5'-трифосфат, 5-иодцитидин-5'-трифосфат, 5-иодуридин-5'-трифосфат, 5-метилцитидин-5'-трифосфат, 5-метилуридин-5'-трифосфат, 6-азацитидин-5'-трифосфат, 6-азауридин-5'-трифосфат, 6-хлорпуринрибозид-5'-трифосфат, 7-деазааденозин-5'-трифосфат, 7-деазагуанозин-5'-трифосфат, 8-азааденозин-5'-трифосфат, 8-азидоаденозин-5'-трифосфат, бензимидазолрибозид-5'-трифосфат, N1-метиладенозин-5'-трифосфат, N1-метилгуанозин-5'-трифосфат, N6-метиладенозин-5'-трифосфат, O6-метилгуанозин-5'-трифосфат, псевдоуридин-5'-трифосфат или пуромицин-5'-трифосфат, ксантозин-5'-трифосфат. Прежде всего, предпочтительными для модификаций оснований являются нуклеотиды, выбранные из группы нуклеотидов с модифицированными основаниями, включающей 5-метилцитидин-5'-трифосфат, 7-деазагуанозин-5'-трифосфат, 5-бромцитидин-5'-трифосфат и псевдоуридин-5'-трифосфат.
Согласно другому варианту по крайней мере одну РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению аналогичным образом можно модифицировать (и предпочтительно стабилизировать) при включении других модифицированных нуклеотидов, содержащих модифицированные остатки рибозы или основания. В основном по крайней мере одна (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению включает любой природный нуклеотид, например, гуанозин, урацил, аденозин и/или цитозин или аналог указанных нуклеотидов. В связи с этим аналоги нуклеотидов определяют как неприродные варианты распространенных в природе нуклеотидов. Соответственно, аналоги являются химическими производными нуклеотидов, содержащими неприродные функциональные группы, которые предпочтительно включают в природный нуклеотид или удаляют из него или на которые заменяют природные группы в нуклеотиде. Соответственно, каждый компонент природного нуклеотида можно модифицировать, а именно, компонент основания, компонент сахаридного остатка (рибозы) и/или компонент фосфата, образующих основную цепь (см. выше) последовательности РНК. Аналоги гуанозина, урацила, аденозина и цитидина включают, но, не ограничиваясь только ими, любые природные или не-природные остатки гуанозина, урацила, аденозина, тимидина или цитозина, которые модифицированы химическим методом, например, ацетилированием, метилированием, гидроксилированием и т.п., включая 1-метиладенозин, 1-метилгуанозин, 1-метилинозин, 2,2-диметилгуанозин, 2,6-диаминопурин, 2'-амино-2'-дезоксиаденозин, 2'-амино-2'-дезоксицитидин, 2'-амино-2'-дезоксигуанозин, 2'-амино-2'-дезоксиуридин, 2-амино-6-хлорпуринрибозид, 2-аминопуринрибозид, 2'-арааденозин, 2'-арацитидин, 2'-арауридин, 2'-азидо-2'-дезоксиаденозин, 2'-азидо-2'-дезоксицитидин, 2'-азидо-2'-дезоксигуанозин, 2'-азидо-2'-дезоксиуридин, 2-хлораденозин, 2'-фтор-2'-дезоксиаденозин, 2'-фтор-2'-дезоксицитидин, 2'-фтор-2'-дезоксигуанозин, 2'-фтор-2'-дезоксиуридин, 2'-фтортимидин, 2-метиладенозин, 2-метилгуанозин, 2-метилтио-N6-изопентениладенозин, 2'-O-метил-2-аминоаденозин, 2'-O-метил-2'-дезоксиаденозин, 2'-O-метил-2'-дезоксицитидин, 2'-O-метил-2'-дезоксигуанозин, 2'-O-метил-2'-дезоксиуридин, 2'-O-метил-5-метилуридин, 2'-O-метилинозин, 2'-O-метилпсевдоуридин, 2-тиоцитидин, 2-тиоцитозин, 3-метилцитозин, 4-ацетилцитозин, 4-тиоуридин, 5-(карбоксигидроксиметил)урацил, 5,6-дигидроуридин, 5-аминоаллилцитидин, 5-аминоаллилдезоксиуридин, 5-бромуридин, 5-карбоксиметиламинометил-2-тиоурадил, 5-карбоксиметиламинометилурацил, 5-хлорарацитозин, 5-фторуридин, 5-иодуридин, 5-метоксикарбонилметилуридин, 5-метоксиуридин, 5-метил-2-тиоуридин, 6-азацитидин, 6-азауридин, 6-хлор-7-деазагуанозин, 6-хлорпуринрибозид, 6-меркаптогуанозин, 6-метилмеркаптопуринрибозид, 7-деаза-2'-дезоксигуанозин, 7-деазааденозин, 7-метилгуанозин, 8-азааденозин, 8-бромаденозин, 8-бромгуанозин, 8-меркаптогуанозин, 8-оксогуанозин, бензимидазолрибозу, β-D-маннозилквеозин, дигидроурацил, инозин, N1-метиладенозин, N6-([6-аминогексил]карбамоилметил)аденозин, N6-изопентениладенозин, N6-метиладенозин, N7-метилксантозин, метиловый эфир N-урацил-5-оксиуксусной кислоты, пуромицин, квеозин, урацил-5-оксиксусную кислоту, метиловый эфир урацил-5-оксиуксусной кислоты, вибутоксозин, ксантозин и ксилоаденозин. Получение указанных аналогов известно специалисту в данной области, например, описано в патентах US 4373071, US 4401796, US 4415732, US 4458066, US 4500707, US 4668777, US 4973679, US 5047524, US 5132418, US 5153319, US 5262530 и US 5700642. В случае описанного выше аналога согласно настоящему изобретению, прежде всего, предпочтительны аналоги, которые повышают иммуногенность РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и/или не препятствуют проведению другой модификации РНК.
Согласно конкретному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению включает липидную модификацию. Указанная липидно-модифицированная РНК обычно обозначает РНК, как определено в данном контексте, кодирующую по крайней мере два антигена, выбранные из группы антигенов, как определено выше, предпочтительно в указанных выше комбинациях. Указанная липидно-модифицированная РНК обычно, кроме того, содержит по крайней мере один линкер, ковалентно присоединенный к указанной РНК, а также по крайней мере один липид, ковалентно присоединенный к соответствующему линкеру. В другом варианте, липидно-модифицированная РНК включает (по крайней мере, одну) РНК, как определено в данном контексте, и по крайней мере один (бифункциональный) липид, ковалентно присоединенный (в отсутствии линкера) к указанной РНК. Согласно третьему варианту, липидно-модифицированная РНК включает РНК, как определено в данном контексте, и по крайней мере один линкер, ковалентно присоединенный к указанной РНК, а также по крайней мере один липид, ковалентно присоединенный к соответствующему линкеру, и по крайней мере один (бифункциональный) липид, ковалентно присоединенный (в отсутствии линкера) к указанной РНК.
Липид, содержащийся по крайней мере в одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению (в составе комплекса или за счет ковалентного присоединения к указанной РНК), обычно обозначает липид или липофильный остаток, который предпочтительно сам по себе характеризуется биологической активностью. Указанные липиды предпочтительно включают природные вещества или соединения, такие как, например, витамины, например, α-токоферол (витамин Е), включая RRR-α-токоферол (ранее D-α-токоферол), L-α-токоферол, рацемат D,L-α-токоферола, сукцинат витамина Е (СВЕ), или витамин А и его производные, например, ретиноевую кислоту, ретинол, витамин D и его производные, например, витамин D, а также предшественники эргостерола, витамин Е и его производные, витамин K и его производные, например, витамин K и родственные соединения хинона или фитола, или стероиды, такие как желчные кислоты, например, холиевую кислоту, дезоксихолевую кислоту, дегидрохолиевую кислоту, кортизон, дигоксигенин, тестостерон, холестерин или тиохолестерин. Другие липиды или липофильные остатки согласно настоящему изобретению включают, но, не ограничиваясь только ими, полиалкиленгликоли (Oberhauser и др., Nucl. Acids Res., 20, с.533 (1992)), алифатические группы, такие как, например, С1-С20алканы, С1-С20алкены или С1-С20алканолы и т.п., такие как, например, додекандиол, остатки гексадеканола или ундецила (Saison-Behmoaras и др., EMBO J., 10, с.111 (1991), Kabanov и др., FEBS Lett., 259, с.327 (1990), Svinarchuk и др., Biochimie, 75, с.49 (1993)), фосфолипиды, такие как, например, фосфатидилглицерин, диацилфосфатидилглицерин, фосфатидилхолин, дипальмитоилфосфатидилхолин, дистеароилфосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, дигексадецил-рац-глицерин, сфинголипиды, цереброзиды, ганглиозиды, или 1,2-ди-О-гексадецил-рац-глицеро-3-Н-фосфонат триэтиламмония (Manoharan и др., Tetrahedron Lett., 36, с.3651 (1995), Shea и др., Nucl. Acids Res., 18, с.3777 (1990)), полиамины или полиалкиленгликоли, такие как, например, полиэтиленгликоль (ПЭГ) (Manoharan и др., Nucleosides & Nucleotides, 14, с.969 (1995)), гексаэтиленгликоль (ГЭК), пальмитин или остатки пальмитиновой кислоты (Mishra и др., Biochim. Biophys. Acta, 1264, с.229 (1995)), октадециламины или остатки гексиламинокарбонилоксихолестерина (Crooke и др., J. Pharmacol. Exp. Ther., 277, с.923 (1996)), а также воски, терпены, алициклические углеводороды, остатки насыщенных и моно- или полиненасыщенных жирных кислот и т.п.
По крайней мере, одну РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению аналогичным образом можно стабилизировать различными способами для предотвращения деградации РНК in vivo. В данной области известно, что нестабильность и (быстрая) деградация мРНК или РНК in vivo, в основном, представляет серьезную проблему при использовании композиций на основе РНК. Указанная нестабильность РНК обычно обусловлена деградацией РНК под действием ферментов, «РНКаз» (рибонуклеаз), при этом присутствие указанных рибонуклеаз в некоторых случаях приводит к полной деградации РНК в растворе. Соответственно, природная деградация мРНК в цитоплазме клеток чрезвычайно тонко регулируется, и перед использованием указанных композиций примеси РНКаз обычно удаляют стандартной обработкой, прежде всего, в присутствии диэтилпирокарбоната (DEPC). В связи с этим, в предшествующем уровне техники известен ряд механизмов природной деградации, которые можно также использовать. Например, структура концевого фрагмента играет важную роль для мРНК in vivo. Например, в концевом 5'-фрагменте природной мРНК присутствует так называемая «кэп-структура» (модифицированный гуанозин), а в концевом 3'-фрагменте обычно содержится последовательность, включающая вплоть до 200 остатков аденозина (так называемый полиА-концевой фрагмент).
Таким образом, по крайней мере одну РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, прежде всего, если она представлена в виде мРНК, можно стабилизировать с целью исключить деградацию под действием РНКаз за счет включения так называемой 5'-кэппированной структуры «5'-кэп». В этой связи, прежде всего, предпочтительной структурой «5'-кэп» является структура 7G(5')ppp (5'(A,G(5')ppp(5')A или G(5')ppp(5')G. Однако указанную модификацию осуществляют, только если предварительно не проведена модификация, например, липидо-модификация, по концевому 5'-фрагменту (м)РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, или если указанная модификация не снижает иммуногенные свойства (не-модифицированной или химически модифицированной) (м)РНК.
Согласно другому предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит, прежде всего, если РНК представлена в форме мРНК, в концевом 3'-фрагменте полиА-концевой фрагмент, включающий обычно приблизительно 10-200 остатков аденозина, предпочтительно приблизительно 10-100 остатков аденозина, более предпочтительно приблизительно 20-100 остатков аденозина или наиболее предпочтительно приблизительно 40-80 остатков аденозина.
Согласно следующему предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению содержит, прежде всего, если РНК представлена в форме мРНК, в концевом 3'-фрагменте полиС-концевой фрагмент, включающий обычно приблизительно 10-200 остатков цитозина, предпочтительно приблизительно 10-100 остатков цитозина, более предпочтительно приблизительно 20-70 остатков цитозина или наиболее предпочтительно приблизительно 20-60 или даже 10-40 остатков цитозина.
Согласно еще одному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению модифицирована и, таким образом, стабилизирована, прежде всего, если РНК представлена в форме мРНК, за счет изменения содержания G/C в РНК, предпочтительно в кодирующей области по крайней мере одной РНК.
Согласно, прежде всего, предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения, содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению изменяют, прежде всего, повышают по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области соответствующей (м) РНК дикого типа, т.е. в не-модифицированной (м) РНК. Кодируемую аминокислотную последовательность по крайней мере одной (м) РНК, предпочтительно не модифицируют по сравнению с кодирующей аминокислотной последовательностью конкретной (м) РНК дикого типа.
Указанную модификацию по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению выбирают с учетом того факта, что последовательность любой транслируемой области (м) РНК имеет важное значение для эффективной трансляции указанной (м) РНК. В связи с этим, композиция и последовательность различных нуклеотидов играют важную роль. Прежде всего, последовательности с повышенным содержанием G (гуанозин)/С (цитозин) более стабильны по сравнению с последовательностями с повышенным содержанием А (аденозин)/и (урацил). В связи с этим, согласно настоящему изобретению кодоны (м) РНК изменяют по сравнению с соответствующей (м) РНК дикого типа, при этом, сохраняя транслируемую аминокислотную последовательность таким образом, чтобы она включала повышенное количество нуклеотидов G/C. Так как несколько кодонов кодируют одну и ту же аминокислоту (так называемое вырождение генетического кода), следует выявить наиболее пригодные кодоны, которые определяют стабильность (так называемое альтернативное использование кодонов).
В зависимости от аминокислоты, кодируемой по крайней мере одной (м) РНК, существуют различные возможности модификации последовательности (м) РНК по сравнению с соответствующей последовательностью дикого типа. В случае аминокислот, которые кодируются кодонами, которые содержат исключительно нуклеотиды G или С, модификации кодона не требуется. В связи с этим, модификации кодонов, кодирующих Pro (CCC или CCG), Arg (CGC или CGG), Ala (GCC или GCG) и Gly (GGC или GGG), не требуется, так как они не содержат нуклеотиды А или U.
И наоборот, кодоны, которые содержат нуклеотиды А и/или U, заменяют на другие кодоны, которые кодируют те же аминокислоты, но не содержат нуклеотидов А и/или U. Примеры включают:
кодоны CCU или ССА, кодирующие Pro, заменяют на ССС или CCG,
кодоны CGU или CGA или AGA или AGG, кодирующие Arg, заменяют на CGC или CGG,
кодоны GCU или GCA, кодирующие Ala, заменяют на GCC или GCG,
кодоны GGU или GGA, кодирующие Gly, заменяют на GGC или GGG.
В других случаях, хотя удаление нуклеотидов А или U из кодонов является невозможным, тем не менее содержание нуклеотидов А и U можно снизить за счет использования кодонов, которые характеризуются более низким содержанием нуклеотидов А и/или U. Примеры включают:
кодон UUU, кодирующий Phe, заменяют на UUC,
кодоны UUA, UUG, CUU или CUA, кодирующие Leu, заменяют на CUC или CUG,
кодоны UCU или UCA или AGU, кодирующие Ser, заменяют на UCC, UCG или AGC,
кодон UAU, кодирующий Tyr, заменяют на UAC,
кодон UGU, кодирующий Cys, заменяют на UGC,
кодон CAU, кодирующий His, заменяют на САС,
кодон САА, кодирующий Gln, заменяют на CAG,
кодоны AUU или AUA, кодирующие Ile, заменяют на AUC,
кодоны ACU или АСА, кодирующие Thr, заменяют на АСС или ACG,
кодон AAU, кодирующий Asn, заменяют на ААС,
кодон ААА, кодирующий Lys, заменяют на AAG,
кодоны GUU или GUA, кодирующие Val, заменяют на GUC или GUG,
кодон GAU, кодирующий Asp, заменяют на GAC,
кодон GAA, кодирующий Glu, заменяют на GAG,
кодон UAA (стоп-кодон) заменяют на UAG или UGA.
С другой стороны, в случае кодонов, кодирующих Met (AUG) и Trp (UGG), модификация последовательности является невозможной.
Перечисленные выше замены можно использовать в отдельности или во всех возможных комбинациях для повышения содержания G/C по крайней мере в одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению по сравнению с соответствующей конкретной (м) РНК дикого типа (т.е. исходной последовательностью). Таким образом, например, все присутствующие в последовательности дикого типа кодоны, кодирующие Thr, заменяют на кодон АСС (или ACG). Однако предпочтительно используют, например, комбинации указанных выше замен:
замену в исходной последовательности ((м) РНК дикого типа) всех кодонов, кодирующих Thr, на АСС (или ACG) и
замену в исходной последовательности всех кодонов, кодирующих Ser, на UCC (или UCG или AGC),
замену в исходной последовательности всех кодонов, кодирующих Ile, на AUC и
замену всех кодонов, кодирующих Lys, на AAG и
замену всех кодонов, кодирующих Tyr, на UAC,
замену в исходной последовательности всех кодонов, кодирующих Val, на GUC (или GUG) и
замену всех кодонов, кодирующих Glu, на GAG и
замену всех кодонов, кодирующих Ala, на GCC (или GCG) и
замену всех кодонов, кодирующих Arg, на CGC (или CGG),
замену в исходной последовательности всех кодонов, кодирующих Val, на GUC (или GUG) и
замену всех кодонов, кодирующих Glu, на GAG и
замену всех кодонов, кодирующих Ala, на GCC (или GCG) и
замену всех кодонов, кодирующих Gly, на GGC (или GGG) и
замену всех кодонов, кодирующих Asn, на ААС,
замену в исходной последовательности всех кодонов, кодирующих Val, на GUC (или GUG) и
замену всех кодонов, кодирующих Phe, на UUC и
замену всех кодонов, кодирующих Cys, на UGC и
замену всех кодонов, кодирующих Leu, на CUG (или CUC) и
замену всех кодонов, кодирующих Gln, на CAG и
замену всех кодонов, кодирующих Pro, на ССС (или CCG) и т.п.
Предпочтительно, содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению повышают по крайней мере на 7%, более предпочтительно, по крайней мере на 15%, прежде всего, предпочтительно, по крайней мере на 20% по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области (м) РНК дикого типа, которая кодирует антиген, антигенный белок или антигенный пептид, как определено в данном контексте, или их фрагмент или вариант. Согласно конкретному варианту заменяют по крайней мере 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, более предпочтительно по крайней мере 70%, еще более предпочтительно по крайней мере 80% и наиболее предпочтительно по крайней мере 90%, 95% или даже 100% заменяемых кодонов в области, которая кодирует антиген, антигенный белок или антигенный пептид, как определено в данном контексте, или их фрагмент или вариант, или полноразмерную последовательность (м) РНК дикого типа, таким образом повышая содержание G/C в указанной последовательности.
В данном контексте, прежде всего, содержание G/C по крайней мере в одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, прежде всего, в области, кодирующей белок, предпочтительно повышено до максимального уровня (т.е. 100% кодонов заменены) по сравнению с последовательностью дикого типа.
Согласно настоящему изобретению, следующую предпочтительную модификацию по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению выбирают с учетом того, что эффективность трансляции определяется также различной частотой присутствия тРНК в клетках. Таким образом, если по крайней мере в одной (м) РНК активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению повышено содержание так называемых «редких кодонов», то уровень трансляции по крайней мере одной соответствующей модифицированной последовательности (м) РНК значительно снижается по сравнению с вариантом, когда присутствуют кодоны, кодирующие относительно «часто встречаемые» молекулы тРНК.
Согласно настоящему изобретению область по крайней мере в одной модифицированной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, которая кодирует адъювантный белок, модифицирована по сравнению с соответствующей областью (м) РНК дикого типа и при этом по крайней мере один кодон последовательности дикого типа, который кодирует тРНК, которая относительно редко встречается в клетке, заменен на кодон, который использует тРНК, которая относительно часто встречается в клетке и переносит ту же аминокислоту, что и относительно мало встречаемая тРНК. За счет указанной модификации, последовательность по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению модифицируют и включают в последовательность кодоны, доступные для относительно часто встречающейся тРНК. Другими словами, согласно настоящему изобретению, за счет указанной модификации все кодоны последовательности дикого типа, которые кодируют тРНК, которая относительно редко встречается в клетке, в каждом случае заменяют на кодон, который использует тРНК, которая относительно часто встречается в клетке, и которая, в каждом случае, переносит ту же аминокислоту, что и относительно редкая тРНК.
Специалисту в данной области известны тРНК, которые относительно часто встречаются в клетке и которые наоборот относительно редко встречаются в клетке, см., например, статью Akashi, Curr. Opin. Genet. Dev., 11 (6) 660-666 (2001). Прежде всего, предпочтительны кодоны, которые используют тРНК (конкретной аминокислоты), которая встречается наиболее часто, например, кодон, кодирующий Gly, который использует тРНК, которая наиболее часто встречается в клетке (человека).
Согласно настоящему изобретению, прежде всего, предпочтительно комбинировать повышенное, прежде всего повышенное до максимального уровня содержание нуклеотидов G/C в последовательности по крайней мере одной модифицированной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и «часто встречающие» кодоны без модификации аминокислотной последовательности белка, кодируемого кодирующей областью (м) РНК. Указанный предпочтительный вариант обеспечивает получение, прежде всего, эффективно транслируемой и стабилизированной (модифицированной) по крайней мере одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению.
Идентификацию по крайней мере одной модифицированной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, как описано выше (повышенное содержание G/C, замена тРНК), проводят с использованием компьютерной программы, описанной в заявке WO 02/098443, содержание которой в полном объеме включено в настоящее описание в качестве ссылки. Используя указанную компьютерную программу, можно модифицировать нуклеотидную последовательность любой требуемой (м) РНК с использованием генетического кода или его вырожденности таким образом, чтобы получить в результате максимальное содержание G/C в комбинации с использованием кодонов, которые используют молекулы тРНК, наиболее часто встречающиеся в клетке, при этом аминокислотная последовательность, кодируемая по крайней мере одной модифицированной (м) РНК, предпочтительно сохраняется в не модифицированном виде по сравнению с не-модифицированной последовательностью. В другом варианте, также можно изменять только содержание G/C или только более эффективно использовать кодоны по сравнению с исходной последовательностью. Исходная программа Visual Basic 6.0 (используемая среда разработки Microsoft Visual Studio Enterprise 6.0, Servicepack 3) также описана в заявке WO 02/098443.
В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения содержание A/U вблизи с участком связывания с рибосомой по крайней мере в одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению повышено по сравнению с содержанием A/U вблизи с участком связывания с рибосомой в соответствующей (м) РНК дикого типа. Указанная модификация (повышенное содержание A/U вблизи с участком связывания с рибосомой) повышает эффективность связывания с рибосомой по крайней мере в одной (м) РНК. Эффективное связывание рибосом с участком связывания с рибосомой (последовательность Козака: GCCGCCACCAUGG (SEQ ID NO:27), AUG образует старт-кодон) в свою очередь влияет на эффективность трансляции по крайней мере одной (м) РНК.
Согласно следующему варианту осуществления настоящего изобретения по крайней мере одна (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению модифицирована с учетом потенциально дестабилизирующих элементов последовательности. Прежде всего, кодирующую область и/или не транслируемую 5'- и/или 3'-область по крайней мере одной указанной (м) РНК модифицируют по сравнению с соответствующей (м) РНК дикого типа таким образом, чтобы удалить дестабилизирующие элементы последовательности, при этом кодируемую аминокислотную последовательность по крайней мере одной модифицированной (м) РНК предпочтительно не изменяют по сравнению с соответствующей (м) РНК дикого типа. Например, известно, что в последовательностях РНК эукариотов присутствуют дестабилизирующие элементы последовательности (ДЭН), с которыми связываются сигнальные белки и регулируют ферментативную деградацию РНК vivo. Следовательно, для дополнительной стабилизации по крайней мере одной модифицированной (м)РНК, можно проводить одну или более указанных модификаций, необязательно в области, которая кодирует антиген, антигенный белок или антигенный пептид, как определено в данном контексте, по сравнению с соответствующей областью (м) РНК дикого типа таким образом, чтобы полностью или в значительной степени удалить дестабилизирующие элементы последовательности. Согласно настоящему изобретению с использованием указанных модификаций по крайней мере из одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению можно также удалить ДЭП, присутствующие в не транслируемых областях (3'- и/или 5'-UTR).
Указанные дестабилизирующие последовательности представляют собой, например, обогащенные AU последовательности, которые присутствуют в областях 3'-UTR множества нестабильных РНК (Caput и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, cc.1670-1674 (1986)). В связи с этим по крайней мере одну (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению предпочтительно модифицируют по сравнению с (м) РНК дикого типа, и таким образом по крайней мере одна (м) РНК не содержит указанных дестабилизирующих последовательностей. Указанное также относится к мотивам последовательностей, которые распознаются возможными эндонуклеазами, например, к последовательности GAACAAG, которая присутствует в сегменте 3'-UTR гена, который кодирует рецептор трансферина (Binder и др., EMBO J., 13, cc. 1969-1980 (1994)). Указанные мотивы последовательности также предпочтительно удалять по крайней мере из одной (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению.
Согласно настоящему изобретению также предпочтительно, чтобы по крайней мере одна (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению включала по крайней мере одну модифицированную IRES, как определено выше, и/или включала по крайней мере одну модифицированную стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность, например, для повышения эффективности связывания с рибосомой или для обеспечения экспрессии различных кодируемых антигенов, локализованных по крайней мере в одной (би- или полицистронной) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению.
Согласно настоящему изобретению по крайней мере одна (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, кроме того, предпочтительно включает по крайней мере одну стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность. Указанные стабилизирующие последовательности в не транслируемых 5'- и/или 3'-областях увеличивают период полураспада по крайней мере одной (м) РНК в цитозоле. Указанные стабилизирующие последовательности характеризуются 100% гомологией последовательности по сравнению с природными последовательностями, т.е. с РНК вирусов, бактерий и эукариотов, а также указанные последовательности можно использовать в виде частично или полностью синтетических последовательностей. Примером стабилизирующих последовательностей, которые можно использовать в настоящем изобретении для стабилизации РНК, являются не транслируемые последовательности (UTR) гена β-глобина, например, вида Homo sapiens или Xenopus laevis. Другой пример стабилизирующей последовательности характеризуется общей формулой (C/U)CCANxCCC(U/A)PyxUC(C/U)CC (SEQ ID NO:28), которая присутствует в 3'-UTR чрезвычайно стабильной РНК, которая кодирует α-глобин, α-коллаген-(I), 15-липоксигеназу или тирозингидроксилазу (см. Holcik и др., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94, cc.2410-2414 (1997)). Указанные стабилизирующие последовательности можно использовать в отдельности или в комбинации друг с другом, а также в комбинации с другими известными стабилизирующими последовательностями. В связи с этим по крайней мере одна (м) РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению предпочтительно присутствует в виде РНК, стабилизированной не транслируемыми областями (UTR) глобина, прежде всего, в виде РНК, стабилизированной UTR глобина.
Тем не менее можно осуществить замены, вставки или делеции оснований по крайней мере в одной (м)РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, предпочтительно с использованием матрицы ДНК для получения по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению по известным методикам сайт-направленного мутагенеза или с использованием методики лигирования олигонуклеотидных зондов (см., например, Maniatis и др., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 3е изд., Cold Spring Harbor, NY (2001)). В указанном процессе для получения по крайней мере одной (м) РНК проводят транскрипцию in vitro соответствующей молекулы ДНК. Указанная матрица ДНК предпочтительно включает пригодный промотор, например, промотор Т7 или SP6, для транскрипции in vitro, за которым расположена требуемая нуклеотидная последовательность по крайней мере одной РНК и сигнал терминации транскрипции in vitro. Молекулу ДНК, которая образует матрицу по крайней мере одной требуемой РНК, получают ферментативной пролиферацией с последующим выделением в качестве части плазмиды, которую можно реплицировать в бактериях. Плазмиды, которые пригодны по настоящему изобретению, включают, например, плазмиды рТ7Т (код доступа GenBank U26404, Lai и др., Development, 121, cc.2349-2360 (1995)), плазмиды серий pGEM®, например, pGEM®-1 (код доступа GenBank X65300, фирмы Promega) и pSP64 (код доступа GenBank X65327), см. также Mezei и Storts, Purification of PCR Products, ред. Griffin and Griffin, PCR Technology, Current Innovation, CRC Press, Boca Raton, FL (2001).
По крайней мере, одну РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению аналогичным образом можно стабилизировать за счет ассоциации или образования комплексов или связывания по крайней мере одной РНК с катионным соединением, прежде всего, с поликатионным соединением, например, с поликатионным пептидом или белком. Прежде всего, эффективным является применение протамина, нуклеолина, спермина или спермидина в качестве связывающегося с нуклеиновой кислотой (РНК) поликатионного белка. Кроме того, аналогичным образом можно использовать другие катионные пептиды или белки, такие как поли-L-лизин или гистоны. Указанная методика стабилизации РНК описана в патенте ЕР-А-1083232, содержание которого в полном объеме включено в настоящее описание в качестве ссылки. Другие предпочтительные катионные соединения, которые можно использовать для стабилизации РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, включают катионные полисахариды, например, хитозан, полибрен, полиэтиленимин (ПЭИ) или поли-L-лизин (ПLЛ) и т.п. Ассоциация или образование комплексов по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению с катионными соединениями, например, с катионными белками или катионными липидами, например, с олигофектамином (в качестве комплексообразователя на основе липида) предпочтительно повышает перенос по крайней мере одной РНК, присутствующей в виде фармацевтического активного компонента, в клетки, подлежащие обработке, или в организм, нуждающийся в лечении. В данном контексте указанное также относится к стабилизирующему действию по крайней мере на одну РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению за счет образования комплексов, а также справедливо для стабилизации РНК.
Согласно другому, прежде всего, предпочтительному варианту по крайней мере одна РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в дополнительном или в альтернативном варианте кодирует секреторный сигнальный пептид. Указанные сигнальные пептиды представляют собой, но, не ограничиваясь только ими, последовательности, длина которых обычно составляет приблизительно 15-30 аминокислот, и которые предпочтительно расположены в N-концевом фрагменте кодируемого пептида. Сигнальные пептиды, как определено в данном контексте, предпочтительно обеспечивают перенос антигена, антигенного белка или антигенного пептида, кодируемых по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, в определенный компартмент клетки, предпочтительно на клеточную поверхность, в эндоплазматический ретикулум (ЭР) или в эндосомальный-липосомальный компартмент. Примеры последовательностей секреторных сигнальных пептидов, как определено в данном контексте, включают, но, не ограничиваясь только ими, сигнальные последовательности классических или не классических молекул ГКГ (например, сигнальные последовательности ГКГ I и ГКГ II, например, HLA-A*0201 ГКГ класса I), сигнальные последовательности цитокинов или иммуноглобулинов, как определено в данном контексте, сигнальные последовательности консервативной цепи иммуноглобулинов или антител, как определено в данном контексте, сигнальные последовательности Lamp1, тапазина, Erp57, калретикулина, калнексина и других мембранно-ассоциированных белков или белков, ассоциированных с эндоплазматическим ретикулумом (ЭР) или с эндосомальным-липосомальным компартментом. Прежде всего, в настоящем изобретении предпочтительно можно использовать сигнальные последовательности HLA-A*0201 ГКГ класса I.
Любую из указанных выше модификаций можно применять в отношении по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и, кроме того, в отношении любой (м) РНК, используемой в настоящем изобретении, а также при необходимости модификации можно осуществлять любые комбинации, при условии, что указанные комбинации модификаций не оказывают отрицательного действия на структуру по крайней мере одной РНК. Соответствующий выбор может сделать специалист в данной области.
Согласно другому варианту активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению включает адъювант. В данном контексте адъювант обозначает любое соединение, которое можно использовать для ускорения введения и доставки активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению. Кроме того, указанный адъювант может но не ограничиваясь только ими, инициировать или усиливать иммунный ответ (врожденного иммунитета), т.е. неспецифический иммунный ответ. Другими словами, после введения активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению обычно инициирует приобретенный иммунный ответ за счет действия по крайней мере двух антигенов, кодируемых по крайней мере одной РНК, содержащейся в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению. Кроме того, активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению может индуцировать (поддерживающий) врожденный иммунный ответ за счет добавления адъюванта, как определено в данном контексте, в активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению. Указанный адъювант выбирают из любого известного пригодного в данном случае адъюванта, т.е. ускоряет индуцирование иммунного ответа у млекопитающего. Предпочтительно адъювант выбирают из группы, включающей, но, не ограничиваясь только ими, TDM, MDP, мурамилдипептид, плюроники, раствор алюмокалиевых квасцов, гидроксид алюминия, ADJUMER (полифосфазен), алюмофосфатный гель, глюканы из водорослей, альгамулин, гель гидроксида алюминия (квасцы), гель гидроксида алюминия с высокой степенью адсорбции белка, гель гидроксида алюминия с низкой вязкостью, AF или SPT (эмульсия, включающая 5% сквалан, 0,2% твин 80, 1,25% плюроник L121, фосфатно-солевой буферный раствор, рН 7,4), AVRIDINE™ (пропандиамин), BAY R1005™ (гидроацетат (N-(2-дезокси-2-L-лейциламино-β-D-глюкопиранозил)-N-октадецилдодеканоиламида), CALCITRIOL™ (1α,25-дигидроксивитамин D3), кальцийфосфатный гель, САРТМ (кальцийфосфатные наночастицы), холерный голотоксин, гибридный белок холерный токсин-А1-белок-А-D-фрагмент, субъединицу В холерного токсина, CRL 1005 (блоксополимер Р1205), цитокин-содержащие липосомы, DDA (бромид диметилдиоктадециламмония), DHEA (дегидроэпиандростерон), DMPC (димиристоилфосфатидилхолин), DMPG (димиристоилфосфатидилглицерин), комплекс DOC/алюм (натриевая соль дезоксихолевой кислоты), полный адъювант Фрейнда, неполный адъювант Фрейнда, γ-инулин, адъювант Gerbu (смесь, включающая 1) N-ацетилглюкозаминил-(Р1-4)-N-ацетилмурамил-L-аланил-D-глютамин (GMDP), 2) хлорид диметилдиоктадециламмония (DDA), 3) комплекс цинковая соль L-пролина (ZnPro-8), ГМ-КСФ), GMDP (N-ацетилглюкозаминил-(β1-4)-N-ацетилмурамил-L-аланил-D-изоглютамин), имиквимод (1-(2-метилпропил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин), ImmTher™ (дипальмитат N-ацетилглюкозаминил-N-ацетилмурамил-L-Ala-D-изоGlu-L-Ala-глицерина), DRV (иммунолипосомы из везикул, полученных методом дегидратации-регидратации), интерферон-γ, интерлейкин-1β, интерлейкин-2, интерлейкин-7, интерлейкин-12, ISCOMS™, ISCOPREP 7.0.3.™, липосомы, LOXORIBINE™ (7-аллил-8-оксогуанозин), пероральный адъювант LT (лабильный энтеротоксин-протоксин из E.coli), микросферы и микрочастицы любого состава, MF59™ (сквален-водная эмульсия), MONTANIDE ISA 51™ (очищенный неполный адъювант Фрейнда), MONTANIDE ISA 720™ (метаболизируемый масляный адъювант), MPL™ (3-Q-дезацил-4'-монофосфориллипид А), МТР-РЕ и липосомы МТР-РЕ (мононатриевая соль (N-ацетил-L-аланил-D-изоглютаминил-L-аланин-2-(1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-(гидроксифосфорилокси))этиламида), MURAMETIDE™ (Nac-Mur-L-Ala-D-Gln-ОСН3), мурамилпальмитин (MURAPALMITINE™) и D-мурамилпальмитин (D-MURAPALMITINE™) (Nac-Mur-L-Thr-D-изоGln-sn-глицериндипальмитоил), NAGO (галактозоксидаза-нейраминидаза), наносферы или наночастицы любого состава, NISV (везикулы неионогенного ПАВ), PLEURAN™ (β-глюкан), PLGA, PGA и PLA (гомо- и сополимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, микро/наносферы), плюроник L121™, ПММА (полиметилметакрилат), PODDS™ (протеиноидные микросферы), производные полиэтиленкарбамата, поли-rA/поли-rU (комплекс полиадениловая кислота/полиуридиловая кислота), полисорбат 80 (твин 80), белковые кохлеаты (фирмы Avanti Polar Lipids, Inc., Alabaster, AL), STIMULON™ (OS-21), Quil-A (сапонин Quil-A), S-28463 (4-амино-отек-диметил-2-этоксиметил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-этанол), SAF-1™ (состав адъюванта «Syntex»), протеолипосомы вируса Сендай и липидные матрицы, содержащие белки вируса Сендай, Span-85 (триолеат сорбита), Specol (эмульсия, содержащая Marcol 52, Span 85 и твин 85), сквален или Robane® (2,6,10,15,19,23-гексаметилтетракозан и 2,6,10,15,19,23-гексаметил-2,6,10,14,18,22-тетракозагексан), стеарилтирозин (гидрохлорид октадецилтирозина), Theramid® (Н-ацетилглюкозаминил-N-ацетилмурамил-L-Ala-D-изоGlu-L-Ala-дипальмитоксипропиламид), Theronyl-MDP (Termurtide™ или [thr 1]-MDP, N-ацетилмурамил-L-треонил-D-изоглютамин), частицы Ту (частицы Ту-VLP или вирусоподобные частицы), липосомы Уолтера-Рида (липосомы, содержащие липид А, абсорбированный на гидроксиде алюминия) и липопептиды, включая Pam3Cys, прежде всего, соли алюминия, такие как Adju-phos, Alhydrogel, Rehydragel, эмульсии, включая CFA, SAF, IFA, MF59, провакс (Provax), титермакс (TiterMax), монтанид (Montanide), ваксфектин (Vaxfectin), сополимеры, включая Optivax (CRL1005), L121, полоксамер 4010 и т.п., липосомы, включая Stealth, кохлеаты, включая BIORAL, адъюванты растительного происхождения, включая QS21, Quil A, Iscomatrix, ISCOM, адъюванты, пригодные для совместной стимуляции, включая томатин (Tomatine), биополимеры, включая PLG, РММ, инулин, микробные адъюванты, включая ромуртид (Romurtide), детокс (DETOX), MPL, CWS, маннозу, нуклеотидные последовательности CpG, CpG7909, лиганды TLR 1-10 человека, лиганды TLR 1-13 мыши, ISS-1018, IC31, имидазохинолины, амплиген (Ampligen), Ribi529, имоксин (IMOxine), IRIV, VLP, холерный токсин, термолабильный токсин, Pam3Cys, флагеллин (Flagellin), ГФИ, LNFPIII/Льюис X, противомикробные пептиды, UC-1V150, гибридный белок RSV, cdiGMP, a также адъюванты, пригодные в качестве антагонистов, включая нейропептид CGRP.
Пригодные адъюванты также выбирают из катионных или поликатионных соединений, при этом адъювант предпочтительно получают при образовании комплексов по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению с катионным или поликатионным соединением. Ассоциация или образование комплексов по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции с катионными или поликатионными соединениями, как определено в данном контексте, предпочтительно придает по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции свойства адъюванта и оказывает стабилизирующее действие на РНК. Прежде всего, предпочтительные катионные или поликатионные соединения выбирают из катионных или поликатионных пептидов или белков, включая протамин, нуклеолин, спермин или спермидин, или других катионных пептидов или белков, таких как поли-L-лизин (ПLЛ), полиаргинин, основные полипетиды, проникающие в клетки пептиды (ПКП), включая ВИЧ-связывающие пептиды, Tat, ВИЧ-1 Tat (ВИЧ), Tat-пептиды, пенетратин (Penetratin), VP22-пептиды или аналогичные пептиды, HSV VP22 (простой герпес), MAP, KALA или домены белковой трансдукции (ДБТ), РрТ620, обогащенные пролином пептиды, обогащенные аргинином пептиды, обогащенные лизином пептиды, MPG-пептид (ы), Рер-1, L-олигомеры, пептид (ы) кальцитонина, пептиды сложного локуса Antennapedia (прежде всего, из Drosophila antennapedia), pAntp, pIsl, FGF, лактоферрин, транспортан, буфорин-2, Вас715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-пептиды, SAP, протамин, спермин, спермидин или гистоны. Кроме того, предпочтительные катионные или поликатионные соединения включают катионные полисахариды, например, хитозан, полибрен, катионные полимеры, например, полиэтиленимин (ПЭИ), катионные липиды, например, DOTMA: хлорид [1-(2,3-сиолеилокси)пропил)]-N,N,N-триметиламмония, DMRIE, ди-С14-амидин, DOTIM, SAINT, DC-Chol, BGTC, СТАР, DOPC, DODAP, DOPE: диолеилфосфатидилэтаноламин, DOSPA, DODAB, DOIC, DMEPC, DOGS: диоктадециламидоглицилспермин, DIMRI: бромид димиристооксипропилдиметилгидроксиэтиламмония, DOTAP: диолеоилокси-3-(триметиламмоний)пропан, DC-6-14: хлорид O,O-дитетрадеканоил-N-(α-триметиламмонийацетил)диэтаноламина, CLIP1: хлорид рац[(2,3-диоктадецилоксипропил)(2-гидроксиэтил)]диметиламмония, CLIP6: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксиметилокси)этил]триметиламмоний, CLIP9: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксисукцинилокси)этил]триметиламмоний, олигофектамин, или катионные или поликатионные полимеры, например, модифицированные полиаминокислоты, такие как полимеры β-аминокислот или обращенные полиамиды и т.п., модифицированные полиэтилены, такие как ПВП (поли(N-этил-4-винилпириднийбромид)) и т.п., модифицированные акрилаты, такие как пДМАЭМА (поли(диметиламиноэтилметилакрилат)) и т.п., модифицированные амидоамины, такие как пАМАМ (поли(амидоамин)) и т.п., модифицированные сложные поли-β-аминоэфиры (ПБАЭ), такие как модифицированные в диаминоконцевом фрагменте сополимеры 1,4-бутандиолдиакрилата и 5-амино-1-пентанола и т.п., дендримеры, такие как дендримеры полипропиламина или дендримеры на основе пАМАМ и т.п., полиимин (ы), такие как полиэтиленимин (ПЭИ), полипропиленимин и т.п., полиаллиламин, полимеры на основе сахаридов, такие как полимеры на основе циклодекстрина, полимеры на основе декстрана, хитозан и т.п., силановые полимеры, такие как сополимеры PMOXA-PDMS и т.п., блокполимеры, включающие комбинацию одного или более катионных блоков (например, выбранных из катионного полимера, как описано выше) и одного или более гидрофильных или гидрофобных блоков (например, полиэтиленгликоль) и т.п.
Кроме того, предпочтительные катионные или поликатионные белки или пептиды, которые можно использовать в качестве адъюванта за счет образования комплексов по крайней мере с одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, выбирают из следующих белков или пептидов общей формулы (I):
(Arg)l,(Lys)m,(His)n,(Orn)o,(Xaa)x, где l+m+n+o+x=8-15, a l, m, n или о независимо равны любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15, при условии, что общее содержание Arg, Lys, His и Orn составляет по крайней мере 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида, а Хаа обозначает любую аминокислоту, выбранную из природных или неприродных аминокислот, за исключением Arg, Lys, His или Orn, и x равен любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3 или 4, при условии, что общее содержание Хаа не превышает 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида. В данном контексте, прежде всего, предпочтительными олигопептидами аргинина являются, например, Arg7, Arg8, Arg9, Arg7, H3R9, R9H3, H3R9H3, YSSR9SSY, (RKH)4, Y(RKH)2R и т.п.
Пригодные адъюванты, кроме того, выбирают из нуклеиновых кислот формулы (II): GlXmGn, где: G обозначает гуанозин, урацил или аналог гуанозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, индекс l равен целому числу от 1 до 40, причем, если l равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если l>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, то присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, при этом, если n равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог.
Другие пригодные адъюванты, кроме того, выбирают из нуклеиновых кислот формулы (III): ClXmCn, где: С обозначает цитозин, урацил или аналог цитозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, l равен целому числу от 1 до 40, причем, если l равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если l>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, причем, если n равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог.
Согласно одному предпочтительному варианту в настоящем изобретении, кроме того, предлагается вакцина, содержащая активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению. Вакцина по настоящему изобретению дополнительно включает фармацевтически приемлемый носитель и/или другие вспомогательные вещества и добавки и/или адъюванты. Согласно, прежде всего, предпочтительному варианту антигены, кодируемые по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, включенной в вакцину по настоящему изобретению, выбирают из упомянутой выше группы.
Вакцина по настоящему изобретению обычно включает безопасное и эффективное количество по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, как определено выше, кодирующей по крайней мере два антигена, как определено выше, более предпочтительно кодирующей по крайней мере два антигена, выбранных из упомянутых выше групп, предпочтительно в любой из указанных комбинаций. Используемый в данном контексте термин «безопасное и эффективное количество» обозначает количество по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в вакцине, как определено выше, которое является достаточным для значительного и благоприятного действия на рак предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентный рак предстательной железы, а также родственные заболевания или нарушения. Однако, в то же время, «безопасное и эффективное количество» является достаточно малым, чтобы исключить серьезные побочные действия, т.е. чтобы обеспечить целесообразное соотношение польза/риск. Указанные пределы обычно определяет квалифицированный специалист в области медицины. В отношении вакцины по настоящему изобретению термин «безопасное и эффективное количество» предпочтительно обозначает количество РНК (и, в связи с этим по крайней мере двух кодируемых антигенов), достаточное для стимуляции приобретенного иммунного ответа, но при этом не наблюдается избыточная или приносящая вред иммунная реакция, а также предпочтительно не наблюдаются иммунные реакции ниже детектируемого предела измерения. Указанное «безопасное и эффективное количество» по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции в вакцине, как определено выше, кроме того, выбирают в зависимости от типа РНК, например, моноцистронная, би- или полицистронная РНК, так как би- или полицистронная РНК индуцирует экспрессию кодируемого антигена (ов) на значительно более высоком уровне по сравнению с равным количеством моноцистронной РНК. «Безопасное и эффективное количество» по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, как определено выше, которая содержится в вакцине по настоящему изобретению, кроме того, изменяется в зависимости от конкретного состояния, подлежащего лечению, а также возраста и физического состояния пациента, нуждающегося в указанном лечении, степени тяжести состоянии, продолжительности лечения, типа сопутствующего курса лечения, конкретного используемого фармацевтически приемлемого носителя и аналогичных факторов, известных лечащему врачу. Вакцину по настоящему изобретению можно использовать в качестве фармацевтической композиции или в качестве вакцины по настоящему изобретению в медицине, а также в ветеринарии.
Вакцина по настоящему изобретению обычно включает фармацевтически приемлемый носитель. Используемый в данном контексте термин «фармацевтически приемлемый носитель» предпочтительно включает жидкую или не жидкую основу вакцины по настоящему изобретению. Если вакцина по настоящему изобретению представлена в жидкой форме, носителем обычно является апирогенная вода, изотонические солевые или буферные растворы (водные), например, фосфатный, нитратный буферные растворы и т.п. Для инъекции вакцины по настоящему изобретению, прежде всего, можно использовать воду или, предпочтительно, буферный раствор, более предпочтительно водный буферный раствор, содержащий натриевую соль, предпочтительно по крайней мере 50 мМ раствор натриевой соли, кальциевую соль, предпочтительно по крайней мере 0,01 мМ раствор кальциевой соли, и необязательно калиевую соль, предпочтительно по крайней мере 3 мМ раствор калиевой соли. Согласно предпочтительному варианту натриевая, кальциевая и необязательно калиевая соли представлены в форме галогенидов, например, хлоридов, иодидов или бромидов, или в форме гидроксидов, карбонатов, гидрокарбонатов или сульфатов и т.п. Не ограничиваясь только ими, примеры натриевых солей включают, например, NaCl, NaI, NaBr, Na2CO3, NaHCO3, Na2SO4, примеры необязательных калиевых солей включают, например, KCl, KI, KBr, K2CO3, KHCO3, K2SO4, а примеры кальциевых солей включают, например, CaCl2, CaI2, CaBr2, СаСО3, CaSO4, Ca(OH)2. Кроме того, в буферном растворе могут содержаться органические анионы упомянутых выше катионов. Согласно более предпочтительному варианту буферный раствор, пригодный для инъекции, как определено выше, может содержать соли, выбранные из хлорида натрия (NaCl), хлорида кальция (CaCl2) и необязательно хлорида калия (KCl), при этом кроме хлоридов могут присутствовать другие анионы. CaCl2 можно заменить на другую соль, подобную KCl. Обычно соли в буферном растворе для инъекции присутствуют при концентрация по крайней мере 50 мМ в случае хлорида натрия (NaCl) по крайней мере 3 мМ в случае хлорида калия (KCl) и по крайней мере 0,01 мМ в случае хлорида кальция (CaCl2). В качестве буферного раствора для инъекции можно использовать гипертонический, изотонический или гипотонический раствор по сравнению со специфической средой для сравнения, т.е. буферный раствор характеризуется более высоким, равным или более низким содержанием соли по сравнению со специфической средой для сравнения, причем предпочтительно использовать такие концентрации упомянутых выше солей, которые не приводят к повреждению клеток за счет осмоса или концентрационных эффектов. Среды для сравнения включают, например, среды, присутствующие «in vivo», т.е. биологические жидкости, такие как кровь, лимфа, цитозоль, или другие биологические жидкости, или, например, жидкости, которые можно использовать в качестве сред для сравнения «in vitro», такие как стандартные буферные растворы или жидкости. Указанные стандартные буферные растворы или жидкости известны специалисту в данной области. В качестве жидкой основы, прежде всего, предпочтителен лактатный раствор Рингера.
Однако также можно использовать один или более совместимых твердых или жидких наполнителей или разбавителей или инкапсулирующих соединений, которые пригодны для введения пациенту. Используемый в данном контексте термин «совместимый» обозначает, что компоненты вакцины по настоящему изобретению можно смешивать по крайней мере с одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, кодирующей по крайней мере два антигена, как определено выше, и при этом в обычных условиях не происходит никаких взаимодействий, которое в значительной степени снижают фармацевтическую эффективность вакцины по настоящему изобретению. Безусловно, фармацевтически приемлемые носители, наполнители и разбавители должны характеризоваться достаточно высокой степенью чистоты и достаточно низкой токсичностью, то есть их можно использовать для введения субъекту, нуждающемуся в лечении. Некоторые примеры соединений, которые можно использовать в качестве фармацевтически приемлемых носителей, наполнителей или их компонентов включают сахара, такие как, например, лактоза, глюкоза и сахароза, крахмалы, такие как, например, кукурузный крахмал или картофельный крахмал, целлюлозу и ее производные, такие как, например, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, порошкообразный трагакант, солод, желатин, жир, твердые скользящие вещества, такие как, например, стеариновая кислота, стеарат магния, сульфат кальция, растительные масла, такие как, например, арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и масло какао, полиолы, такие как, например, полипропиленгликоль, глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль,альгиновую кислоту.
Выбор фармацевтически приемлемого носителя в принципе определяется способом введения вакцины по настоящему изобретению. Вакцину по настоящему изобретению можно вводить, например, системным или местным способом. Способы системного введения в основном включают, например, чрескожный, пероральный, парентеральный способы, включая подкожные, внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные, внутрикожные и внутрибрюшинные инъекции/или интраназальные способы введения. Способы местного введения в основном включают, например, способы местного применения, а также внутрикожные, чрескожные, подкожные или внутримышечные инъекции или введение внутрь пораженных тканей, внутричерепные, внутрилегочные, внутрисердечные и подъязычные инъекции. Более предпочтительно, вакцины можно вводить внутрикожным, подкожным или внутримышечным способом. В связи с этим, композиции/вакцины предпочтительно получают в виде состава в жидкой или твердой форме. Пригодное количество вакцины по настоящему изобретению, предназначенной для введения, определяют по данным стандартных экспериментов на моделях животных. Указанные модели включают, но, не ограничиваясь только ими, модели кролика, овцы, мыши, крысы, собаки и нечеловекообразных приматов. Предпочтительные стандартные лекарственные формы для инъекции включают стерильные водные растворы, стерильные физиологические растворы или их смеси. рН указанных растворов доводят приблизительно до 7,4. Пригодные носители для инъекции включают гидрогели, устройства с контролируемым или замедленным высвобождением, полимолочную кислоту и коллагеновые матрицы. Пригодные фармацевтически приемлемые носители для местного применения включают носители, которые пригодны для применения в лосьонах, кремах, гелях и т.п. Если вакцина по настоящему изобретению предназначена для перорального введения, предпочтительной стандартной лекарственной формой являются таблетки, капсулы и т.п. Фармацевтически приемлемые носители для получения стандартных лекарственных форм, которые можно использовать для перорального введения, известны в предшествующем уровне данной области техники. В связи с этим, их выбор зависит от вторичных факторов, таких как вкус, стоимость и стабильность при хранении, которые не учитывались при создании настоящего изобретения, и такие носители может выбрать специалист в данной области техники.
Для дальнейшего повышения иммуногенности вакцина по настоящему изобретению может дополнительно включать одно или более вспомогательных веществ. Таким образом, предпочтительно достигается синергетическое действие по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции, как определено выше, и вспомогательного вещества, которое необязательно присутствует в вакцине по настоящему изобретению, как описано выше. В этом отношении в зависимости от различных типов вспомогательных веществ можно обсуждать различные механизмы действия. Например, в первый класс пригодных вспомогательных веществ включены соединения, которые обеспечивают созревание дендритных клеток (ДК), например, липополисахариды, ФНО-α или лиганд CD40. В основном, в качестве вспомогательного вещества можно использовать любой агент, который действует на иммунную систему по механизму «сигнал об опасности» (ЛПС, GP96 и т.п.), или цитокины, такие как гранулоцитарно-макрофагоцитарный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), которые влияют на иммунный ответ, индуцированный иммуностимулирующим адъювантом по настоящему изобретению, или усиливают его по механизму лиганд-мишень. Прежде всего, предпочтительными вспомогательными веществами являются цитокины, такие как монокины, лимфокины, интерлейкины или хемокины, которые в дополнение к индуцированию приобретенного иммунного ответа за счет кодирования по крайней мере двух антигенов повышают врожденный иммунитет, такие как ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-8, ИЛ-9, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-13, ИЛ-14, ИЛ-15, ИЛ-16, ИЛ-17, ИЛ-18, ИЛ-19, ИЛ-20, ИЛ-21, ИЛ-22, ИЛ-23, ИЛ-24, ИЛ-25, ИЛ-26, ИЛ-27, ИЛ-28, ИЛ-29, ИЛ-30, ИЛ-31, ИЛ-32, ИЛ-33, интерфероны: ИФ-α, ИФ-β, ИФ-γ, ГМ-КСФ, Г-КСФ, М-КСФ, LT-β или ФНО-α, факторы роста, такие как гормоны роста человека.
Другие добавки, которые можно включать в вакцину по настоящему изобретению, включают эмульгаторы, такие как, например, твин®, смачивающие агенты, такие как, например, лаурилсульфат натрия, красители, агенты для улучшения вкуса, фармацевтические носители, агенты для получения таблеток, стабилизаторы, антиоксиданты, консерванты.
Вакцина по настоящему изобретению, кроме того, включает также любое другое соединение, которое известно в качестве иммуностимулирующего в связи с его связывающей аффинностью (в качестве лигандов) в отношении Toll-подобных рецепторов человека TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, или в связи со связывающей аффинностью (в качестве лигандов) в отношении Toll-подобных рецепторов мыши TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, TLR10, TLR11, TLR12 или TLR13.
Другим классом соединений, которые можно добавлять в вакцину по настоящему изобретению в данном контексте, являются нуклеиновые кислоты CpG, прежде всего, CpG-PHK или CpG-ДНК. CpG-PHK или CpG-ДНК включают одноцепочечную CpG-ДНК (оцСрО-ДНК), двухцепочечную CpG-ДНК (дцДНК), одноцепочечную CpG-PHK (оцСрО-РНК) или двухцепочечную CpG-PHK (дцСрС-РНК). Нуклеиновая кислота CpG предпочтительно присутствует в форме CpG-PHK, более предпочтительно в форме одноцепочечной CpG-PHK (оцСрО-РНК). Нуклеиновая кислота CpG предпочтительно содержит по крайней мере одну или более одну или более (митогенную) динуклеотидную последовательностей) цитозин/гуанин (мотив (ы) CpG). Согласно первому предпочтительному варианту по крайней мере один мотив CpG, присутствующий в указанных последовательностях, т.е. С (цитозин) и G (гуанин) в мотиве CpG, является неметилированным. Все остальные остатки цитозина или гуанина, необязательно содержащиеся в указанных последовательностях, являются метилированными или неметилированными. Однако в другом предпочтительном варианте С (цитозин) и G (гуанин) в мотиве CpG также могут присутствовать в метилированной форме.
Согласно другому предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению можно использовать (для получения вакцины по настоящему изобретению) для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
Согласно следующему предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения вакцину по настоящему изобретению или по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, можно использовать для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
В данном контексте настоящее изобретение включает также способы лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений при введении пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, фармацевтически эффективного количества вакцины по настоящему изобретению, или фармацевтически эффективного количества активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению. Указанный способ обычно включает необязательную первую стадию получения активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, или вакцины по настоящему изобретению, и вторую стадию, включающую введение (фармацевтически эффективного количества) указанной активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или указанной вакцины по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в указанном лечении. Пациентом, нуждающимся в указанном лечении, обычно является любое млекопитающее. В контексте настоящего изобретения млекопитающее предпочтительно обозначает млекопитающее, выбранное из группы, включающей, но, не ограничиваясь только ими, например, козу, крупный рогатый скот, свинью, собаку, кошку, осла, обезьяну, человекообразную обезьяну, грызуна, такого как мышь, хомяк, кролик и, прежде всего, человека, при этом млекопитающее обычно страдает от рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
Настоящее изобретение относится также к применению (для получения вакцины по настоящему изобретению) активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, предпочтительно для индуцирования иммунного ответа у млекопитающего, предпочтительно для лечения рака предстательной железы (РПЖ), более предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
Аналогичным образом настоящее изобретение относится также к применению вакцины по настоящему изобретению как таковой или по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, для индуцирования приобретенного иммунного ответа у млекопитающего, предпочтительно для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
Профилактику или лечение рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, проводят при введении активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и/или вакцины по настоящему изобретению однократно или поочередно, например, в виде набора компонентов, где каждый компонент содержит по крайней мере один предпочтительно различный антиген. Для введения предпочтительно используют любой способ введения, как определено выше. Например, лечение рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, проводят при индуцировании или усилении приобретенного иммунного ответа за счет действия по крайней мере двух (специально выбранных) антигенов, кодируемых по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению. Активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению и/или вакцину по настоящему изобретению вводят до и/или после введения или одновременно с введением другой активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и/или вакцины по настоящему изобретению, как определено в данном контексте, которая включает другую комбинацию РНК, кодирующих другие антигены, при этом каждый антиген, кодируемый по крайней мере одной РНК в составе активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, предпочтительно можно использовать для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. В данном контексте лечение, как определено в настоящем описании, включает также модуляцию заболевания, связанного с раком предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентным раком предстательной железы, а также родственными заболеваниями или нарушениями.
Согласно еще одному варианту настоящее изобретение, кроме того, относится к применению (для получения вакцины (по настоящему изобретению)) активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, для модуляции, предпочтительно для индуцирования или усиления иммунного ответа у млекопитающего, как определено выше, более предпочтительно для лечения и/или поддерживающего лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, или родственных заболеваний или нарушений. В данном контексте поддерживающее лечение рака предстательной железы (РПЖ) включает любую комбинацию стандартных способов лечения рака предстательной железы, таких как хирургия, лучевая терапия, гормональная терапия, периодически проводимая химиотерапия, протонная терапия, или некоторая комбинация указанных способов, а также лечение с использованием активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, как определено в данном контексте. Поддерживающее лечение рака предстательной железы (РПЖ) также предусмотрено в любых других вариантах, определенных в данном контексте.
Активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению или по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, или вакцину по настоящему изобретению вводят поочередно. Поочередный курс лечения обозначает, например, что активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению или по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно) различных антигена, как определено в данном контексте, или вакцину по настоящему изобретению вводят до и/или после проведения или одновременно с проведением стандартного курса лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, например, лекарственное средство по настоящему изобретению или активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению или вакцину вводят до и/или после проведения или одновременно с проведением курса лечения или введения терапевтического агента, пригодного для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. Указанный поочередный курс лечения проводят, например, с использованием набора, предпочтительно набора компонентов, как определено ниже.
Поочередный курс лечения в дополнительном или в альтернативном варианте включает также введение активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или вакцины, предпочтительно по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, как определено выше, в форме, в которой по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, как определено выше, предпочтительно являющуюся частью активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или вакцины, вводят до или после введения или одновременно с введением другой по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, как определено выше, предпочтительно являющейся частью той же самой активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или вакцины. Предпочтительно введение (всех указанных РНК) осуществляют в течение 1 ч, более предпочтительно в течение 30 мин, наиболее предпочтительно в течение 15, 10, 5, 4, 3 или 2 мин или даже в течение 1 мин. Указанный поочередный курс лечения проводят, например, с использованием набора, предпочтительно набора компонентов, как определено ниже.
Согласно последнему варианту в настоящем изобретении предлагаются также наборы, прежде всего наборы компонентов, включающие активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению, и/или вакцину по настоящему изобретению, а также необязательно инструкции по введению и дозировке активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению и/или вакцины по настоящему изобретению. Инструкции содержат информацию по введению и дозировке активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, и/или вакцины по настоящему изобретению. Указанные наборы, предпочтительно наборы компонентов, можно использовать, например, для любого упомянутого выше назначения или применения, предпочтительно для применения по крайней мере одной активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению (для получения лекарственного средства по настоящему изобретению, предпочтительно вакцины) для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. Наборы можно также использовать для применения по крайней мере одной активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению (для получения вакцины по настоящему изобретению) для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, при этом активная (иммуностимулирующая) композиция по настоящему изобретению и/или вакцина благодаря кодированию по крайней мере двух антигенов, может индуцировать или усиливать иммунный ответ у млекопитающего, как определено выше. Указанные наборы, кроме того, можно использовать для применения по крайней мере одной активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению (для получения лекарственного средства по настоящему изобретению, предпочтительно вакцины) для модуляции, предпочтительно для выработки, например, для индуцирования или усиления иммунного ответа у млекопитающего, как определено выше, и предпочтительно для поддерживающего лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений. Наборы компонентов в качестве специальной формы наборов может содержать одну или более идентичных или различных активных (иммуностимулирующих) композиций по настоящему изобретению и/или одну или более идентичных или различных вакцин по настоящему изобретению в различных компонентах набора. Наборы могут также включать в качестве различных компонентов активную (иммуностимулирующую) композицию по настоящему изобретению (например, одну), вакцину по настоящему изобретению (например, одну) и/или по крайней мере одну РНК, кодирующую по крайней мере один антиген, как определено выше, например, каждый компонент набора содержит по крайней мере одну РНК, кодирующую предпочтительно различный антиген. Кроме того, возможна комбинация двух типов наборов компонентов. Наборы компонентов можно использовать, например, если предполагается поочередный курс лечения, например, при использовании различных составов и/или повышенных концентраций активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению, вакцины по настоящему изобретению и/или по крайней мере одной РНК, кодирующей по крайней мере один антиген, как определено выше, в ходе одного курса лечения in vivo. Наборы компонентов можно использовать, если предполагается или назначен (например, по техническим причинам) отдельный состав или отдельное введение различных антигенов активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению (т.е. в виде отдельных компонентов), но, тем не менее, например, требуется обеспечить совместное присутствие различных антигенов in vivo. Прежде всего, наборы компонентов используют в виде специальной формы наборов, в которой каждый компонент содержит по крайней мере один предпочтительно различный антиген, как определено выше, при этом все компоненты набора предпочтительно входят в состав активной (иммуностимулирующей) композиции по настоящему изобретению или вакцины по настоящему изобретению, как определено в данном контексте. Указанные специфические наборы компонентов, прежде всего, можно использовать, если, например, различные антигены включены в различные компоненты набора в отдельности, но затем их вводят млекопитающему, нуждающемуся в указанном лечении, одновременно друг с другом или поочередно. В последнем случае все различные компоненты указанного набора обычно вводят в течение короткого периода времени, и таким образом сразу после введения последнего компонента набора в организме млекопитающего присутствуют все антигены. Любой описанный выше набор можно использовать для лечения, как определено выше.
Преимущества настоящего изобретения
В настоящем изобретении предлагается активная (иммуностимулирующая) композиция для лечения рака предстательной железы (РПЖ), которая включает по крайней мере одну РНК, предпочтительно мРНК, кодирующую по крайней мере два (предпочтительно различных) антигена, способных индуцировать (приобретенный) иммунный ответ у млекопитающего, при этом антигены выбирают из группы, включающей простат-специфический антиген (ПСА), простат-специфический мембранный антиген (ПСМА), антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП) и шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП). Указанная активная (иммуностимулирующая) композиция обеспечивает эффективное лечение рака предстательной железы (РПЖ) или поддерживающее лечение при использовании стандартных способов лечения. Кроме того, при применении РНК в качестве подхода для лечения исключается проблема неконтролируемого размножения введенных последовательностей ДНК. РНК, используемая в активной (иммуностимулирующей) композиции, характеризуется значительными дополнительными преимуществами по сравнению с системами на основе экспрессии ДНК, например, в отношении иммунного ответа, иммунизации или вакцинации. Указанные преимущества включают, среди прочего, невозможность интегрирования введенной в клетку РНК в геном. При этом исключается риск мутации указанного гена, который в противном случае полностью или частично инактивируется или приводит к передаче ложной информации. Кроме того, при этом исключаются другие виды риска применения ДНК в качестве агента для индуцирования иммунного ответа (например, в качестве вакцины), такие как индуцирование патогенных антител против ДНК у пациента, которому вводят чужеродную ДНК, которая индуцирует иммунный ответ (возможно летальный). И наоборот, до настоящего времени антител против РНК не обнаружено.
Чертежи
Следующие чертежи представлены для иллюстрации настоящего изобретения и не ограничивают его объем.
На фиг.1 представлен плазмидный конструкт RNActive САР-КЛК3(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:1), кодирующий простат-специфический антиген (ПСА, известный также как КЛК3). Указанный конструкт включает следующие элементы последовательности:
оптимизированную по содержанию GC последовательность для стабилизации и усовершенствования использования кодонов,
~ 70 остатков аденозина в концевом 3'-фрагменте (полиА-концевой фрагмент),
~ 30 остатков цитозина в концевом 3'-фрагменте (полиС-концевой фрагмент).
Указанный конструкт ДНК соответствует кодирующей мРНК и служит в качестве основы для получения соответствующего конструкта РНК при проведении экспериментов по транскрипции in vitro.
На фиг.2 представлена кодирующая последовательность дикого типа, соответствующая последовательности конструкта РНК RNActive CAP-КЛК3(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:2), кодирующая простат-специфический антиген (ПСА, известный также как КЛК3), т.е. кодирующая последовательность (КД) простат-специфического антигена (ПСА) в отсутствии оптимизированной по содержанию GC последовательности.
На фиг.3 представлена оптимизированная по содержанию GC кодирующая последовательность конструкта РНК RNActive CAP-КЛК3(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:3), кодирующая простат-специфический антиген (ПСА, известный также как КЛК3), т.е. кодирующая последовательность (КД) простат-специфического антигена (ПСА), содержащая оптимизированную по содержанию GC последовательность.
На фиг.4 представлена последовательность плазмидного конструкта RNActive CAP-ФОЛГ-1(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:4), кодирующая простат-специфический мембранный антиген (ПСМА, известный также как ФОЛГ-1). Указанный конструкт включает следующие элементы последовательности:
оптимизированную по GC последовательность для стабилизации и усовершенствования использования кодонов,
~ 70 остатков аденозина в концевом 3'-фрагменте (полиА-концевой фрагмент),
~ 30 остатков цитозина в концевом 3'-фрагменте (полиС-концевой фрагмент).
Указанный конструкт ДНК соответствует кодирующей мРНК и служит в качестве основы для образования соответствующего конструкта РНК при проведении экспериментов по транскрипции in vitro.
На фиг.5 представлена кодирующая последовательность дикого типа, соответствующая последовательности конструкта РНК RNActive САР-ФОЛГ-1(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:5), кодирующая простат-специфический мембранный антиген (ПСМА, известный также как ФОЛГ-1), т.е. кодирующая последовательность (КД) простат-специфического мембранного антигена (ПСМА, известный также как ФОЛГ-1) в отсутствии оптимизированной по содержанию GC последовательности.
На фиг.6 представлена оптимизированная по содержанию GC кодирующая последовательность конструкта РНК RNActive CAP-ФОЛГ-1(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:6), кодирующая простат-специфический мембранный антиген (ПСМА, известный также как ФОЛГ-1), т.е. кодирующая последовательность (КД) простат-специфического мембранного антигена (ПСМА, известный также как ФОЛГ-1) в присутствии оптимизированной по содержанию GC последовательности.
На фиг.7 представлена последовательность плазмидного конструкта RNActive CAP-АСКП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:7), кодирующая антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП). Указанный конструкт включает следующие элементы последовательности:
оптимизированную по содержанию GC последовательность для стабилизации и усовершенствования использования кодонов,
~ 70 остатков аденозина в концевом 3'-фрагменте (полиА-концевой фрагмент),
~ 30 остатков цитозина в концевом 3'-фрагменте (полиС-концевой фрагмент).
Указанный конструкт ДНК соответствует кодирующей мРНК и служит в качестве основы для образования соответствующего конструкта РНК при проведении экспериментов по транскрипции in vitro.
На фиг.8 представлена кодирующая последовательность дикого типа, соответствующая конструкту РНК RNActive CAP-АСКП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:8), кодирующая антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП), т.е. кодирующая последовательность (КД) антигена стволовых клеток предстательной железы (АСКП) в отсутствии оптимизированной по содержанию GC последовательности.
На фиг.9 представлена оптимизированная по содержанию GC кодирующая последовательность конструкта РНК RNActive CAP-АСКП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:9), кодирующая антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП), т.е. кодирующая последовательность (КД) антигена стволовых клеток предстательной железы (АСКП), содержащая оптимизированную по содержанию GC последовательность.
На фиг.10 представлена последовательность плазмидного конструкта RNActive CAP-ШТЕАП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:10), кодирующая шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП). Указанный конструкт включает следующие элементы последовательности:
оптимизированную по содержанию GC последовательность для стабилизации и усовершенствования использования кодонов,
~ 70 остатков аденозина в концевом 3'-фрагменте (полиА-концевой фрагмент),
~ 30 остатков цитозина в концевом 3'-фрагменте (полиС-концевой фрагмент).
Указанный конструкт ДНК соответствует кодирующей мРНК и служит в качестве основы для образования соответствующего конструкта РНК при проведении экспериментов по транскрипции in vitro.
На фиг.11 представлена кодирующая последовательность дикого типа, соответствующая конструкту РНК RNActive CAP-ШТЕАП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:11), кодирующая шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП), т.е. кодирующая последовательность (КД) шестого трансмембранного эпителиального антигена предстательной железы (ШТЭАП) в отсутствии оптимизированной по содержанию GC последовательности.
На фиг.12 представлена обогащенная по содержанию GC кодирующая последовательность, соответствующая конструкту РНК RNActive CAP-ШТЕАП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO:12), кодирующая шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП), т.е. кодирующая последовательность (КД) шестого трансмембранного эпителиального антигена предстательной железы (ШТЭАП), содержащая оптимизированную по содержанию GC последовательность.
На фиг.13 показана детекция антиген-специфического иммунного ответа (иммунного ответа В-клеток) при определении антиген-специфических антител. Как видно на фиг.13, при введении смеси РНК, т.е. смеси РПЖ-РНК, включающей мРНК, кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП, соответственно, наблюдается значительная индукция антиген-специфического иммунного ответа (иммунного ответа В-клеток) за счет образования значительного количества антител IgG2a против ПСА по сравнению с образцами, содержащими буферный раствор, или с контролем.
На фиг.14 показана детекция антиген-специфического клеточного иммунного ответа методом иммуноферментного анализа ELISPOT. Как видно на фиг.14, вакцинация мышей смесью РНК, т.е. смесью РПЖ-РНК, включающей мРНК, кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП, соответственно, или вакцинация мРНК, кодирующей ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП, соответственно, приводит к значительной индукции антиген-специфического иммунного ответа (ЦТЛ) за счет образования значительного количества ИФ-γ по сравнению с наивными мышами и мышами, которым вводили буферный раствор.
На фиг.15 показана иммунизация и оценка размера привитой опухоли при введении смеси РПЖ-РНК по настоящему изобретению, включающей мРНК (5 мкг), кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЕАП, соответственно. Как показано на фиг.15, размер опухоли значительно снижается при иммунизации смесью РПЖ-РНК по п. а), включающей мРНК, кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЕАП, соответственно, которую вводят 2 раза внутримышечно. Размер опухоли снижается в еще более значительной степени, если смесь РПЖ-РНК по п. а) вводят внутримышечно 4 раза.
На фиг.16 представлена индукция ПСА-специфических антител IgG1. На фиг.16, прежде всего, показано присутствие антител IgG1, специфических к опухолевому антигену ПСА, у мышей, которым вводили вакцину мРНК, состоящую из 4 компонентов, содержащую оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Каждую мРНК получали в комбинации с катионным пептидом, протамином. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера), или РНК другого типа (Рр Luc), полученную в комбинации с протамином аналогично вакцине мРНК. Для анализа объединяли сыворотку 5 мышей в каждой группе и титровали. Величина ошибки (отрезок прямой) представляет среднее отклонение двух величин от среднего значения в двух повторах.
На фиг.17 представлена индукция ПСА-специфических антител IgG2a. На фиг.17, прежде всего, показано присутствие антител IgG2a, специфических к опухолевому антигену ПСА, у мышей, которым вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Каждую мРНК получали в комбинации с катионным пептидом, протамином. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера), или РНК другого типа (Рр Luc), полученную в комбинации с протамином аналогично вакцине мРНК. Для анализа объединяли сыворотку 5 мышей в каждой группе и титровали. Величина ошибки (отрезок прямой) представляет среднее отклонение двух величин от среднего значения в двух повторах.
На фиг.18 показаны результаты индукции АСКП-специфических антител IgG1. Прежде всего, на фиг 18 показано присутствие антител IgG1, специфических к опухолевому антигену АСКП, у мышей, которым вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Каждую мРНК получали в комбинации с катионным пептидом, протамином. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера). Для анализа объединяли сыворотку 5 мышей в каждой группе и титровали. Величина ошибки (отрезок прямой) представляет среднее отклонение двух величин от среднего значения в двух повторах.
На фиг.19 показана индукция ПСМА-специфических цитотоксических Т-клеток. 5 мышам в каждой группе вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека, или вводили мРНК другого типа (Рр Luc), полученную в комбинации с протамином аналогично вакцине мРНК. Спленоциты вакцинированных и контрольных мышей выделяли в день 6 после последней вакцинации и стимулировали библиотекой ПСМА или контрольной библиотекой пептидов. Секрецию ИФ-γ регистрировали ex vivo методом анализа ELISPOT. Линии представляют средние значения, и ряд из 5 мышей анализировали в каждой группе отдельно. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, значение p рассчитывали с использованием одностороннего критерия Манна-Уитни.
На фиг.20 показана индукция ПСМА-специфических цитотоксических Т-клеток in vivo. Мышам C57BL/6 в ходе трех циклов вакцинации вводили внутрикожно вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Контрольным мышам вводили контрольную мРНК Рр Luc или буферный раствор (лактатный раствор Рингера). В день 6 после последней вакцинации селективно меченые спленоциты (30×106, популяции с низкой и высокой интенсивностью флуоресценции, нагруженные библиотекой ПСМА или контрольной библиотекой пептидов, смешанные при соотношении 1:1) вливали внутривенно. Через 16 ч спленоциты мышей-реципиентов выделяли и анализировали проточной цитометрией. Отдельные точки на графике представляют данные для отдельных мышей. Линии обозначают средние значения и диапазон значений. В каждой группе анализировали 5 мышей. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, значение p рассчитывали с использованием одностороннего критерия Манна-Уитни.
На фиг.21 показана индукция ПСА-специфических цитотоксических Т-клеток памяти через 10 недель после последней вакцинации. Мышам C57BL/6 в ходе двух циклов вакцинации вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера). Через 10 недель после последней вакцинации селективно меченые спленоциты (30×106, популяции с низкой и высокой интенсивностью флуоресценции, нагруженные библиотекой ПСА или контрольной библиотекой пептидов, смешанные при соотношении 1:1) трансплантировали внутривенно. Через 16 ч спленоциты мышей-реципиентов выделяли и анализировали проточной цитометрией. Отдельные точки на графике соответствуют отдельным данным, а линии представляют средние значения для 6 мышей в каждой группе, которых анализировали в отдельности. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, значение p рассчитывали с использованием одностороннего критерия Манна-Уитни.
На фиг.22 показана индукция АСКП-специфических цитотоксических Т-клеток памяти через 10 недель после последней вакцинации. Мышам C57BL/6 в ходе двух циклов вакцинации вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера). Через 10 недель после последней вакцинации селективно меченые спленоциты (30×106, популяции с низкой и высокой интенсивностью флуоресценции, нагруженные библиотекой АСКП или контрольной библиотекой пептидов, смешанные при соотношении 1:1) трансплантировали внутривенно. Через 16 ч спленоциты мышей-реципиентов выделяли и анализировали проточной цитометрией. Отдельные точки на графике соответствуют отдельным данным, а линии представляют средние значения для 6 мышей в каждой группе, которые анализировали в отдельности. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, значение p рассчитывали с использованием одностороннего критерия Манна-Уитни.
На фиг.23 показано подавление роста опухоли у мышей, которым вводили вакцину мРНК, включающую 4 компонента, каждый из которых содержал оптимизированные по GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека. Мышам C57 BL/6 вводили внутрикожно в ходе двух циклов вакцинации вакцину мРНК. Контрольным мышам вводили буферный раствор. В день 15 после последней вакцинации мышам прививали опухоль при подкожном введении сингенных опухолевых клеток TRAMP-C1 (1×106). Регистрировали рост опухоли. На графике показан логарифм объема опухоли, определенный в день 52 после прививки опухоли. Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism, значение p рассчитывали с использованием одностороннего критерия Манна-Уитни.
Примеры
Следующие примеры представлены для иллюстрации настоящего изобретения и не ограничивают его объем.
1. Получение кодирующих плазмид
В следующем эксперименте последовательности ДНК, соответствующие последовательностям мРНК, кодирующим антигены
- простат-специфический антиген (ПСА),
- простат-специфический мембранный антиген (ПСМА),
- антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП) и
- шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП),
соответственно, получали и использовали в экспериментах по транскрипции и трансфекции in vitro. В связи с этим последовательность ДНК, соответствующую мРНК, кодирующей природный антиген (последовательности, включающие кодирующие последовательности, указанные на фиг.2, 5, 8 и фиг.11. т.е. SEQ ID NO:2, 5, 8 и 11), оптимизировали по содержанию GC для усовершенствованного использования кодонов и получали последовательность, включающую кодирующие последовательности, указанные на фиг.3, 6, 9 и фиг.12. т.е. SEQ ID NO: 3, 6, 9 и 12. Затем кодирующие последовательности переносили в оптимизированный по содержанию GC конструкт (фирмы CureVac GmbH, Tubingen, Германия), модифицированный за счет включения полиА-концевого фрагмента и полиС-концевого фрагмента (А70-С30). Получали конечные конструкты следующей структуры:
RNActive CAP-КЛК3(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO: 1),
RNActive CAP-ФОЛГ-1(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO: 4),
RNActive CAP-АСКП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO: 7) и
RNActive CAP-ШТЕАП(GC)-muag-A70-C30 (SEQ ID NO: 10),
соответственно.
Конечные конструкты включали последовательность, соответствующую последовательностям, указанным на фиг.1, 4, 7 и фиг.10 (SEQ ID NO: 1, 4, 7 и 10), соответственно, которые включали следующие элементы последовательности:
- оптимизированную по содержанию GC последовательность для стабилизации и усовершенствованного использования кодонов,
~ 70 остатков аденозина в концевом 3'-фрагменте (полиА-концевой фрагмент),
30 остатков цитозина в концевом 3'-фрагменте (полиС-концевой фрагмент).
2. Транскрипция in vitro
Последовательности РНК получали транскрипцией in vitro на основе рекомбинантной плазмидной ДНК, полученной в примере 1. Для этого рекомбинантную плазмидную ДНК линеаризовали и затем проводили транскрипцию in vitro с использованием Т7 РНК-полимеразы. Затем матрицу ДНК разрушали расщеплением ДНКазой I и выделяли РНК осаждением в присутствии LiCl и затем очищали ЖХВР-экстракцией (PUREMessenger®, CureVac GmbH, Tübingen, Германия).
3. Образование комплексов с протамином
Для трансфекции РНК в клетки и организмы, предпочтительно получали комплекс РНК, полученной транскрипцией in vitro, более предпочтительно с протамином при смешивании РНК с протамином.
4. Эксперименты по иммунизации
Для иммунизации РНК, полученную в эксперименте транскрипции in vitro, как описано выше (см. эксперимент 2), предпочтительно полученную в комплексе с протамином, трансфектировали мышам (мышам С57 BL/6). Вакцинацию проводили в различных группах, при этом мышам одной группы (контрольной группы) вводили инъекцией буферный раствор в качестве контроля. В каждой группе 4 мышей иммунизировали при четырехкратном внутрикожном введении 20 мкг РНК (5 мкг на один ген), полученной в комплексе с протамином, при этом РНК кодировала ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЕАП.
5. Оценка антиген-специфического иммунного ответа (иммунного ответа В-клеток)
Антиген-специфический иммунный ответ (иммунный ответ В-клеток) оценивали при детектировании антиген-специфических антител. Для этого через одну неделю после последней вакцинации у вакцинированных мышей отбирали образцы крови и получали сыворотку. Планшеты MaxiSorb (фирмы Nalgene Nunc International) покрывали белком ПСА человека (0,5 мкг/лунка). После блокирования ФСБ 1×, содержащим 0,05% твин-20 и 1% БСА, планшеты инкубировали в присутствии разбавленной мышиной сыворотки (1:30, 1:90, 1:270, 1:810). Затем добавляли конъюгат биотина и вторичных антител (антимышиный IgG2a фирмы Pharmingen). После промывки планшет инкубировали в присутствии конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена и затем определяли степень превращения субстрата ABTS (2,2'-азино-бис-(3-этилбензотиазолин-6-сульфоной кислоты).
Как показано на фиг.13, при введении смеси РНК, т.е. смеси РПЖ-РНК, включающей мРНК, кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП, соответственно (последовательности, указанные на фиг.1, 4, 7 и фиг.10 (SEQ ID NO: 1, 4, 7 и 10), соответственно), наблюдается значительная индукция антиген-специфического иммунного ответа (иммунного ответа В-клеток) при образовании значительного количества антител IgG2a против ПСА по сравнению с образцами, полученными от контрольных мышей.
6. Оценка антиген-специфического клеточного иммунного ответа методом ELISPOT
Через 2 месяца после последней вакцинации мышей забивали, удаляли селезенку и выделяли спленоциты. Спленоциты инкубировали в течение 7 сут в присутствии ИЛ-4 для селекции дендритных клеток. Для оценки антиген-специфического клеточного иммунного ответа после повторной стимуляции определяли уровень секреции ИФ-γ. В качестве клеток-мишеней использовали спленоциты наивной мыши, которые электропорировали в присутствии смеси РПЖ-мРНК (смесь) или мРНК, кодирующей ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП (последовательности, указанные на фиг.1, 4, 7 и фиг.10 (SEQ ID NO: 1, 4, 7 и 10), соответственно).
Для определения ИФ-γ многолуночный планшет с нанесенным покрытием (фирмы Millipore) инкубировали в течение ночи в присутствии 0,1 М карбонат-бикарбонатного буферного раствора для нанесения покрытия (рН 9,6, 10,59 г/л Na2CO3, 8,4 г/л NaHCO3), содержащего антитела против ИФ-γ (фирмы BD Pharmingen, Heidelberg, Германия). Клетки-мишени инкубировали в смеси с клетками-эффекторами в планшете при соотношении 1:20 в течение 24 ч. Планшет промывали ФСБ 1× и инкубировали в присутствии конъюгата биотина с вторичными антителами. После промывки смесью ФСБ 1×/0,05% твин-20 в планшет добавляли субстрат (жидкая субстратная система 5-бром-4-хлор-3-индолилфосфат/нитросиний тетразолий фирмы Sigma Aldrich, Taufkirchen, Германия) и оценивали степень превращения субстрата визуально.
Как показано на фиг.14, вакцинация мышей смесью РПЖ-мРНК, кодирующей ПСА, ПСМА, АСКП или ШТЕАП (последовательности, представленные на фиг.1, 4, 7 и 10 (SEQ ID NO:1, 4, 7 и 10), соответственно) приводит к значительной индукции антиген-специфического иммунного ответа (ЦТЛ) в ответ на все четыре антигена при образовании значительного количества ИФ-γ по сравнению с наивными мышами и мышами, которым вводили буферный раствор.
7. Привитые опухоли
а) Иммунизация
мРНК (20 мкг, смесь РПЖ-РНК, включающую мРНК (5 мкг), кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЕАП, соответственно, например, конструкты RNActive CAP-КЛК3(GC)-muag-A70-C30, RNActive CAP-ФОЛГ-1(GC)-muag-A70-C30, RNActive CAP-АСКП(GC)-muag-A70-C30 и RNActive CAP-ШТЕАП(GC)-muag-A70-C30, соответственно (последовательности, указанные на фиг.1, 4, 7 и фиг.10, т.е. SEQ ID NO: 1, 4, 7 и 10)) вводили мышам внутримышечной инъекцией. Иммунизацию повторяли 1 или 3 раза в течение 7 недель. Через 40 дней после последней иммунизации мышам прививали подкожной инъекцией опухолевые клетки 1 Mio Tramp-C1. В течение 50 сут регистрировали объем опухоли.
б) Результаты
Как показано на фиг.15, объем опухоли значительно снижается при иммунизации смесью РПЖ-РНК по п. а), включающей мРНК, кодирующую ПСА, ПСМА, АСКП и ШТЕАП, соответственно, которую вводят внутримышечно 2 раза. Более значительное снижение объема опухоли наблюдается при введении смеси РПЖ-РНК по п. а) внутримышечно 4 раза.
8. Получение вакцины мРНК и индукция антиген-специфических цитотоксических антител и антиген-специфических цитотоксических Т-клеток
8.1 Получение вакцины мРНК
Вакцина мРНК включает оптимизированные по содержанию GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека (согласно SEQ ID NO:3, 6, 9 и 12), при этом каждую мРНК получают в комбинации с катионным пептидом, протамином, при массовом соотношении 4:1 (РНК/протамин), растворенным в лактатном растворе Рингера (80 об.%).
8.2 Вакцинация
Мышам C57 BL/6 вводили внутрикожно вакцину мРНК (64 мкг, 16 мкг на антиген), как описано выше в п.8.1. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный буферный раствор Рингера) или РНК другого типа (обогащенную по содержанию GC мРНК, кодирующую люциферазу светлячка Photinus pyralis (Pp Luc)), полученную в комбинации с протамином аналогично вакцине мРНК. Вакцинация включала два или три цикла иммунизации в неделю 1, 3 (и 7). Каждый цикл включал 4 инъекции в день 1, 2, 3 и 4 недели.
8.3 Прививка опухоли
В день 15 после завершения вакцинации каждой мыши подкожно трансплантировали клетки TRAMP-C1 (1×106, клеточная линия 1 трансгенной аденокарциномы предстательной железы мыши, экспрессирующая мышиные гомологи ПСМА, АСКП и ШТЕАП человека). Опухоли пальпировались через 4 недели после прививки опухолевых клеток. Рост опухоли регистрировали при измерении размера опухоли штангенциркулем.
8.4 Детектирование антиген-специфических антител
В день 14 после последней вакцинации образцы крови (200 мкл) отбирали из ретроорбитального сплетения и определяли в сыворотке подтипы антиген-специфических антител IgG1 и IgG2a с использованием следующей методики ИФА. 96-Луночные планшеты ИФА покрывали рекомбинантным белком АСКП или очищенным ПСА человека (в обоих случаях концентрация составляла 10 мкг/мл в буферном растворе для покрытия поверхности) и (после блокирования и промывки) инкубировали в присутствии сыворотки при 37°С в течение 4 ч. После инкубации в присутствии биотинилированных антител против IgG1 или IgG2a мыши и последующей инкубации в присутствии конъюгата стрептавидина и пероксидазы хрена добавляли субстрат ТМВ. Колориметрическую реакцию регистрировали при 450 нм с использованием ИФА ридера фирмы Tecan.
8.5 Анализ ELISPOT - оценка ответа цитотоксических Т-клеток (ЦТЛ)
Оценку ответа цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) проводили по уровню секреции ИФ-γ в ответ на специфический стимул, реакцию оценивали визуально на уровне одной клетки с использованием анализа ELISPOT.
Спленоциты мышей, которым вводили вакцину мРНК, как описано выше в п.8.1, и спленоциты контрольных мышей выделяли в день 6 после последней вакцинации (третьего цикла вакцинации) и затем переносили в 96-луночные ИФА планшеты, предварительно покрытые антителами к α-ИФ-γ. Затем клетки стимулировали при 37°С в течение 24 ч библиотекой пептидов ПСМА или библиотекой пептидов ВИЧ. Обе библиотеки использовали при концентрации 1 мкг/пептид/мл. После инкубационного периода клетки вымывали из планшета и регистрировали секретируемый клетками ИФ-γ с использованием биотинилированного вторичного антитела против ИФ-γ мыши, затем в присутствии конъюгата стрептавидин-AKP. Пятна визуализировали с использованием субстрата BCIP/NBT и подсчитывали с использованием автоматического ридера ELISPOT (Immunospot Analyzer, CTL Analyzers LLC).
8.6 Цитотоксичность in vivo
Для оценки активности цитотоксических Т-клеток in vivo проводили лизис специфических клеток-мишеней вакцинированных и контрольных мышей.
Анализ проводили через одну неделю, а также через 10 недель после последней иммунизации для оценки индукции цитотоксических Т-лимфоцитов памяти.
Спленоциты наивных мышей-доноров выделяли и включали метку с использованием флуоресцентного красителя CFSE при двух различных концентрациях красителя. Таким образом, получали две популяции с высокой и низкой интенсивностью флуоресценции. Клетки с низкой флуоресценцией нагружали укороченными пептидами из библиотеки ПСМА, ПСА или АСКП (1 мкг/мл/пептид) при 37°С в течение 3 ч. Контрольные клетки с высокой флуоресценцией нагружали библиотекой пептидов ВИЧ Pol (1 мкг/мл/пептид), соответственно. Обе популяции смешивали при соотношении клетка/клетка 1:1 и трансплантировали внутривенно наивным или вакцинированным мышам-реципиентам. Через 16 ч спленоциты мышей-реципиентов выделяли и подсчитывали число флуоресцентных клеток проточной цитометрией. Сдвиг соотношения число клеток с низкой флуоресценцией/число клеток с высокой флуоресценцией у вакцинированных мышей отражает специфическую гибель клеток-мишеней in vivo. Точное соотношение число наблюдаемых специфических клеток-мишеней/число наблюдаемых контрольных клеток оценивали в виде средней величины, усредненной по данным для всех контрольных мышей. Указанное соотношение позволяет предсказать ожидаемое число специфических мишеней у вакцинированных мышей с учетом наблюдаемого числа контрольных клеток. Соотношение, наблюдаемое число специфических мишеней/предсказанное число специфических мишеней отражает долю выживших (не уничтоженных) специфических мишеней.
Для расчета использовали следующие формулы:
соотношение = число специфических мишеней (наблюдаемых) у контрольных мышей/число контрольных мишеней (наблюдаемых) у контрольных мышей,
соотношение × число наблюдаемых контрольных мишеней у вакцинированных мышей = предсказанное число специфических мишеней у вакцинированных мышей,
% гибели = (1-(число наблюдаемых специфических мишеней/рассчитанное число специфических мишеней).
8.7 Статистический анализ
Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения GraphPad Prism Software, версия 5.01. В связи с отсутствием нормального распределения популяций образцов и малым объемом выборки для анализа различий между исследуемыми группами с уровнем достоверности 5% использовали непараметрические критерии Манна-Уитни.
8.9 Результаты и обсуждение
Мышам вводили вакцину мРНК, включающую оптимизированные по содержанию GC мРНК, кодирующие дифференцировочные антигены ПСМА, ШТЕАП, ПСА и АСКП предстательной железы человека, полученные каждая в отдельности в комбинации с катионным пептидом, протамином, при массовом соотношении РНК/протамин 4:1. Контрольным мышам вводили буферный раствор (лактатный раствор Рингера) или РНК другого типа (Рр Luc), полученную в комбинации с протамином аналогично вакцине мРНК.
а) Индукция антиген-специфических антител в ответ на введение вакцины мРНК
Индукцию специфических антител оценивали для двух или четырех антигенов в зависимости от количества доступного рекомбинантного белка, требующегося для детекции антител. Для двух анализируемых белков, ПСА и АСКП, детектировали антиген-специфические антитела в сыворотке мышей, которым вводили вакцину мРНК. Полученные результаты свидетельствуют о том, что обе РНК являются функциональными и иммуногенными in vivo (см. фиг.16-18).
б) Индукция антиген-специфических цитотоксических Т-клеток в ответ на введение вакцины мРНК
Кроме того, активацию цитотоксических Т-клеток в ответ на введение вакцины мРНК оценивали двумя независимыми функциональными методами анализа: анализом секреции ИФ-γ и анализом цитотоксичности in vivo. ИФ-γ является главным медиатором ответа Th1 и секретируется активированными ЦТЛ. В связи с этим, антиген-специфические цитотоксические Т-клетки в спленоцитах вакцинированных мышей детектировали методом анализа ELISPOT. В качестве антигенного стимула для спленоцитов использовали библиотеку укороченных пептидов ПСМА. Стимуляция указанной библиотекой вызывает значительную секрецию ИФ-γ только в спленоцитах мышей, которым вводили вакцину мРНК, но не у контрольных мышей, которым вводили мРНК, кодирующую белок другого типа, люциферазу (Рр Luc). Все спленоциты не взаимодействуют с контрольной библиотекой пептидов ВИЧ (фиг.19).
Антиген-специфический клеточный иммунитет в ответ на ПСМА можно подтвердить анализом цитотоксичности in vivo. Специфическая гибель клеток-мишеней, нагруженных библиотекой укороченных пептидов ПСМА, наблюдается у всех пяти мышей, которым вводили вакцину мРНК, однако цитотоксическое действие изменяется в диапазоне от 12% до 90%. У мышей, которым вводили контрольную РНК (Рр Luc) или раствор для инъекции (лактатный буферный раствор Рингера), гибель слитых клеток-мишеней не наблюдается (см. фиг.20).
В другом эксперименте исследовали возможность индукции устойчивых эффектов памяти in vivo после введения вакцины мРНК. С этой целью детектировали антиген-специфические цитотоксические Т-клетки памяти через 10 недель после завершения вакцинации методом анализа цитотоксичности in vivo. Специфическая гибель клеток-мишеней наблюдается после вакцинации ПСА, а также АСКП (фиг.21-22). Объединенная вакцина мРНК индуцирует устойчивый продолжительный (по крайней мере, в течение 10 недель) клеточный иммунитет у мышей.
Наконец, исследовали способность вакцины мРНК индуцировать противоопухолевые ответы у мышей. Для этого использовали линию опухолевых клеток TRAMP-C1. Клетки TRAMP-C1 экспрессируют мышиные гомологи антигенов ПСМА, АСКП и ШТЕАП человека, которые включены в вакцину мРНК в качестве антигенов, кодируемых мРНК. Гомология антигенов мыши и человека изменяется в пределах 50-80% для различных антигенов. В связи с тем, что мышей вакцинировали мРНК, кодирующими белки человека, защита в отношении опухолевых клеток TRAMP-C1 опосредована только перекрестной реактивностью. Как показано на фиг.23, введение мышам вакцины мРНК опосредует защиту против роста трансплантированных опухолевых клеток TRAMP-C1. Полученные результаты указывают на способность вакцины мРНК индуцировать перекрестную реактивность у мышей.
Claims (16)
1. Вакцина для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, включающая четыре РНК, каждая из которых кодирует различные антигены их фрагменты, варианты или эпитопы,
шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП),
простат-специфический антиген (ПСА),
простат-специфический мембранный антиген (ПСМА) и
антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
в которой по крайней мере одна РНК является модифицированной РНК, прежде всего стабилизированной РНК, причем модифицированная РНК включает 5'-кэп структуру и/или полиА-концевой фрагмент, содержащий предпочтительно от 10 до 200 остатков аденозина, и/или полиС-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков цитозина, и/или по крайней мере одну IRES и/или по крайней мере одну стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность, кроме того, содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной РНК повышено по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области РНК дикого типа, а кодируемая аминокислотная последовательность по крайней мере одной РНК предпочтительно не изменена по сравнению с кодируемой аминокислотной последовательностью РНК дикого типа.
шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП),
простат-специфический антиген (ПСА),
простат-специфический мембранный антиген (ПСМА) и
антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
в которой по крайней мере одна РНК является модифицированной РНК, прежде всего стабилизированной РНК, причем модифицированная РНК включает 5'-кэп структуру и/или полиА-концевой фрагмент, содержащий предпочтительно от 10 до 200 остатков аденозина, и/или полиС-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков цитозина, и/или по крайней мере одну IRES и/или по крайней мере одну стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность, кроме того, содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной РНК повышено по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области РНК дикого типа, а кодируемая аминокислотная последовательность по крайней мере одной РНК предпочтительно не изменена по сравнению с кодируемой аминокислотной последовательностью РНК дикого типа.
2. Вакцина по п.1, в которой длина по крайней мере одной РНК составляет от 250 до 20000 нуклеотидов.
3. Вакцина по п.1, в которой по крайней мере одной РНК является мРНК.
4. Вакцина по п.1, в которой по крайней мере одна РНК включает РНК, выбранную из РНК, которые являются идентичными или идентичными по крайней мере на 80% по сравнению с последовательностями РНК, приведенными в SEQ ID NO:2, 5, 8 или 11.
5. Вакцина по п.1, в которой содержание A/U в участках, соседних с участком связывания с рибосомой по крайней мере в одной РНК, повышено по сравнению с содержанием A/U в участках, соседних с участком связывания с рибосомой в РНК дикого типа.
6. Вакцина по п.5, в которой кодирующая область и/или нетранслируемая 5'- и/или 3'-область модифицированной мРНК изменена по сравнению с РНК дикого типа таким образом, что не содержит дестабилизирующие элементы последовательности, при этом кодируемая аминокислотная последовательность модифицированной мРНК предпочтительно не изменена по сравнению с РНК дикого типа.
7. Вакцина по п.1, в которой по крайней мере одна РНК включает РНК, выбранную из РНК, которые являются идентичными или идентичными по крайней мере на 80% последовательностями РНК, приведенным в SEQ ID NO:1, 3, 4, 6, 7, 9, 10 или 12.
8. Вакцина по п.1, в которой по крайней мере одна РНК образует комплекс с одним или более поликатионами, предпочтительно с протамином или олигофектамином, наиболее предпочтительно с протамином.
9. Вакцина по п.1, которая дополнительно включает по крайней мере один адъювант.
10. Вакцина по п.9, в которой по крайней мере один адъювант выбирают из группы, включающей:
катионные или поликатионные соединения, включающие катионные или поликатионные пептиды или белки, включая протамин, нуклеолин, спермин или спермидин, поли-L-лизин (ПLЛ), полиаргинин, основные полипептиды, пептиды проникающие в клетки (ППК), включая ВИЧ-связующие пептиды, Tat, ВИЧ-1 Tat (ВИЧ), производные Tat-пептидов, пенетратин (Penetratin), VP22-пептиды или пептиды-аналоги, HSV VP22 (простой герпес), MAP, KALA или домены белковой трансдукции (ДБТ), РрТ620, обогащенные пролином пептиды, обогащенные аргинином пептиды, обогащенные лизином пептиды, MPG-пептид(ы), Рер-1, L-олигомеры, пептид(ы) кальцитонина, пептиды сложного локуса Antennapedia (прежде всего, из Drosophila antennapedia), pAntp, pIsl, FGF, лактоферрин, транспортан, буфорин-2, Вас715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-пептиды, SAP, протамин, спермин, спермидин или гистоны, катионные полисахариды, включая хитозан, полибрен, катионные полимеры, включая полиэтиленимин (ПЭИ), катионные липиды, включая DOTMA: хлорид [1-(2,3-сиолеилокси)пропил)]-N,N,N-триметиламмония, DMRIE, ди-С14-амидин, DOTIM, SAINT, DC-Chol, BGTC, СТАР, DOPC, DODAP, DOPE: диолеилфосфатидилэтаноламин, DOSPA, DODAB, DOIC, DMEPC, DOGS: диоктадециламидоглицилспермин, DIMRI: бромид димиристооксипропилдиметилгидроксиэтиламмония, DOTAP: диолеоилокси-3-(триметиламмонио)пропан, DC-6-14: хлорид O,O-дитетрадеканоил-N-(α-триметиламмонийацетил)диэтаноламина, CLIP1: хлорид рац[(2,3-диоктадецилоксипропил)(2-гидроксиэтил)]диметиламмония, CLIP6: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксиметилокси)этил]триметиламмоний, CLIP9: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксисукцинилокси)этил]триметиламмоний, олигофектамин, или катионные или поликатионные полимеры, включая модифицированные полиаминокислоты, включая полимеры β-аминокислот или обращенные полиамиды, модифицированные полиэтилены, включая ПВП (поли(Н-этил-4-винилпириднийбромид)), модифицированные акрилаты, включая пДМАЭМА (поли(диметиламиноэтилметилакрилат)), модифицированные амидоамины, включая пАМАМ (поли(амидоамин)), модифицированный сложный поли-β-аминоэфир (ПБАЭ), включая модифицированные в диаминоконцевом фрагменте сополимеры 1,4-бутандиолдиакрилата и 5-амино-1-пентанола, дендримеры, включая дендримеры полипропиламина или дендримеры на основе пАМАМ, полиимин(ы), включая полиэтиленимин (ПЭИ), полипропиленимин, полиаллиламин, полимеры на основе сахаридов, включая полимеры на основе циклодекстрина, полимеры на основе декстрана, хитозан и т.п., силановые полимеры, такие как сополимеры PMOXA-PDMS и т.п., блокполимеры, включающие комбинацию одного или более катионных блоков, выбранных из катионного полимера, как описано выше, и одного или более гидрофильных или гидрофобных блоков (например, полиэтиленгликоль),
или
катионные или поликатионные белки или пептиды, выбранные из следующих белков или пептидов общей формулы (I): (Arg)l, (Lys)m, (His)n, (Orn)o, (Xaa)x, где l+m+n+o+x=8-15, a l, m, n или о независимо равны любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15, при условии, что общее содержание Arg, Lys, His и Orn составляет по крайней мере 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида, а Хаа обозначает любую аминокислоту, выбранную из природных или неприродных аминокислот, за исключением Arg, Lys, His или Orn, и х равен любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3 или 4, при условии, что общее содержание Хаа не превышает 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида,
или
нуклеиновые кислоты формулы (II) GlXmGn, где G обозначает гуанозин, урацил или аналог гуанозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, индекс 1 равен целому числу от 1 до 40, причем, если 1 равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если 1>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, то присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, при этом если n равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог,
или
нуклеиновые кислоты формулы (III) C1XmCn, где С обозначает цитозин, урацил или аналог цитозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, 1 равен целому числу от 1 до 40, причем, если 1 равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если 1>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, причем, если n равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог.
катионные или поликатионные соединения, включающие катионные или поликатионные пептиды или белки, включая протамин, нуклеолин, спермин или спермидин, поли-L-лизин (ПLЛ), полиаргинин, основные полипептиды, пептиды проникающие в клетки (ППК), включая ВИЧ-связующие пептиды, Tat, ВИЧ-1 Tat (ВИЧ), производные Tat-пептидов, пенетратин (Penetratin), VP22-пептиды или пептиды-аналоги, HSV VP22 (простой герпес), MAP, KALA или домены белковой трансдукции (ДБТ), РрТ620, обогащенные пролином пептиды, обогащенные аргинином пептиды, обогащенные лизином пептиды, MPG-пептид(ы), Рер-1, L-олигомеры, пептид(ы) кальцитонина, пептиды сложного локуса Antennapedia (прежде всего, из Drosophila antennapedia), pAntp, pIsl, FGF, лактоферрин, транспортан, буфорин-2, Вас715-24, SynB, SynB(1), pVEC, hCT-пептиды, SAP, протамин, спермин, спермидин или гистоны, катионные полисахариды, включая хитозан, полибрен, катионные полимеры, включая полиэтиленимин (ПЭИ), катионные липиды, включая DOTMA: хлорид [1-(2,3-сиолеилокси)пропил)]-N,N,N-триметиламмония, DMRIE, ди-С14-амидин, DOTIM, SAINT, DC-Chol, BGTC, СТАР, DOPC, DODAP, DOPE: диолеилфосфатидилэтаноламин, DOSPA, DODAB, DOIC, DMEPC, DOGS: диоктадециламидоглицилспермин, DIMRI: бромид димиристооксипропилдиметилгидроксиэтиламмония, DOTAP: диолеоилокси-3-(триметиламмонио)пропан, DC-6-14: хлорид O,O-дитетрадеканоил-N-(α-триметиламмонийацетил)диэтаноламина, CLIP1: хлорид рац[(2,3-диоктадецилоксипропил)(2-гидроксиэтил)]диметиламмония, CLIP6: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксиметилокси)этил]триметиламмоний, CLIP9: рац[2(2,3-дигексадецилоксипропилоксисукцинилокси)этил]триметиламмоний, олигофектамин, или катионные или поликатионные полимеры, включая модифицированные полиаминокислоты, включая полимеры β-аминокислот или обращенные полиамиды, модифицированные полиэтилены, включая ПВП (поли(Н-этил-4-винилпириднийбромид)), модифицированные акрилаты, включая пДМАЭМА (поли(диметиламиноэтилметилакрилат)), модифицированные амидоамины, включая пАМАМ (поли(амидоамин)), модифицированный сложный поли-β-аминоэфир (ПБАЭ), включая модифицированные в диаминоконцевом фрагменте сополимеры 1,4-бутандиолдиакрилата и 5-амино-1-пентанола, дендримеры, включая дендримеры полипропиламина или дендримеры на основе пАМАМ, полиимин(ы), включая полиэтиленимин (ПЭИ), полипропиленимин, полиаллиламин, полимеры на основе сахаридов, включая полимеры на основе циклодекстрина, полимеры на основе декстрана, хитозан и т.п., силановые полимеры, такие как сополимеры PMOXA-PDMS и т.п., блокполимеры, включающие комбинацию одного или более катионных блоков, выбранных из катионного полимера, как описано выше, и одного или более гидрофильных или гидрофобных блоков (например, полиэтиленгликоль),
или
катионные или поликатионные белки или пептиды, выбранные из следующих белков или пептидов общей формулы (I): (Arg)l, (Lys)m, (His)n, (Orn)o, (Xaa)x, где l+m+n+o+x=8-15, a l, m, n или о независимо равны любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15, при условии, что общее содержание Arg, Lys, His и Orn составляет по крайней мере 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида, а Хаа обозначает любую аминокислоту, выбранную из природных или неприродных аминокислот, за исключением Arg, Lys, His или Orn, и х равен любому числу, выбранному из 0, 1, 2, 3 или 4, при условии, что общее содержание Хаа не превышает 50% в расчете на все аминокислоты в составе олигопептида,
или
нуклеиновые кислоты формулы (II) GlXmGn, где G обозначает гуанозин, урацил или аналог гуанозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, индекс 1 равен целому числу от 1 до 40, причем, если 1 равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если 1>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, то присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, при этом если n равен 1, G обозначает гуанозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают гуанозин или его аналог,
или
нуклеиновые кислоты формулы (III) C1XmCn, где С обозначает цитозин, урацил или аналог цитозина или урацила, Х обозначает гуанозин, урацил, аденозин, тимидин, цитозин или аналог упомянутых выше нуклеотидов, 1 равен целому числу от 1 до 40, причем, если 1 равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если 1>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог, m равен целому числу и по крайней мере равен 3, причем, если m равен 3, Х обозначает урацил или его аналог, если m>3, присутствуют по крайней мере 3 последовательных остатка урацила или аналога урацила, n равен целому числу от 1 до 40, причем, если n равен 1, С обозначает цитозин или его аналог, если n>1 по крайней мере 50% нуклеотидов обозначают цитозин или его аналог.
11. Вакцина по любому из пп.1-10, в которой вакцина индуцирует приобретенный иммунный ответ.
12. Вакцина по любому из пп.1-10, которая дополнительно включает фармацевтически приемлемый носитель.
13. Применение вакцины по любому из пп.1-12 для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений.
14. Набор для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, включающий вакцину по любому из пп.1-13, а также необязательно инструкции по введению и дозировке вакцины.
15. Набор для лечения рака предстательной железы (РПЖ), предпочтительно неоадъювантно- и/или гормонорезистентного рака предстательной железы, а также родственных заболеваний или нарушений, включающий четыре РНК, каждая из которых кодирует различные антигены, их фрагменты, варианты или эпитопы,
шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП),
простат-специфический антиген (ПСА),
простат-специфический мембранный антиген (ПСМА) и
антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
в которой по крайней мере одна РНК является модифицированной РНК, прежде всего стабилизированной РНК, причем модифицированная РНК включает 5'-кэп структуру и/или полиА-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков аденозина, и/или полиС-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков цитозина, и/или по крайней мере одну IRES и/или по крайней мере одну стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность, кроме того содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной РНК повышено по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области РНК дикого типа, а кодируемая аминокислотная последовательность по крайней мере одной РНК предпочтительно не изменена по сравнению с кодируемой аминокислотной последовательностью РНК дикого типа.
шестой трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы (ШТЭАП),
простат-специфический антиген (ПСА),
простат-специфический мембранный антиген (ПСМА) и
антиген стволовых клеток предстательной железы (АСКП),
в которой по крайней мере одна РНК является модифицированной РНК, прежде всего стабилизированной РНК, причем модифицированная РНК включает 5'-кэп структуру и/или полиА-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков аденозина, и/или полиС-концевой фрагмент, включающий предпочтительно от 10 до 200 остатков цитозина, и/или по крайней мере одну IRES и/или по крайней мере одну стабилизирующую 5'- и/или 3'-последовательность, кроме того содержание G/C в кодирующей области по крайней мере одной РНК повышено по сравнению с содержанием G/C в кодирующей области РНК дикого типа, а кодируемая аминокислотная последовательность по крайней мере одной РНК предпочтительно не изменена по сравнению с кодируемой аминокислотной последовательностью РНК дикого типа.
16. Набор по п.15, в котором по крайней мере одной РНК является мРНК.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/EP2007/008771 WO2009046739A1 (en) | 2007-10-09 | 2007-10-09 | Composition for treating prostate cancer (pca) |
EPPCT/EP2007/008771 | 2007-10-09 | ||
PCT/EP2008/008504 WO2009046975A1 (en) | 2007-10-09 | 2008-10-08 | COMPOSITION FOR TREATING PROSTATE CANCER (PCa) |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013151122/10A Division RU2583004C2 (ru) | 2007-10-09 | 2008-10-08 | Композиция для лечения рака предстательной железы |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2010118013A RU2010118013A (ru) | 2011-11-20 |
RU2508125C2 true RU2508125C2 (ru) | 2014-02-27 |
Family
ID=39472544
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010118013/10A RU2508125C2 (ru) | 2007-10-09 | 2008-10-08 | Композиция для лечения рака предстательной железы (рпж) |
RU2013151122/10A RU2583004C2 (ru) | 2007-10-09 | 2008-10-08 | Композиция для лечения рака предстательной железы |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2013151122/10A RU2583004C2 (ru) | 2007-10-09 | 2008-10-08 | Композиция для лечения рака предстательной железы |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US20100305196A1 (ru) |
JP (2) | JP5139530B2 (ru) |
CN (2) | CN104840953A (ru) |
AU (1) | AU2008309931B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0818320A2 (ru) |
CA (1) | CA2696772C (ru) |
DK (1) | DK2195015T3 (ru) |
ES (1) | ES2633246T3 (ru) |
MX (1) | MX2010003768A (ru) |
RU (2) | RU2508125C2 (ru) |
WO (2) | WO2009046739A1 (ru) |
Families Citing this family (139)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9393315B2 (en) | 2011-06-08 | 2016-07-19 | Nitto Denko Corporation | Compounds for targeting drug delivery and enhancing siRNA activity |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
WO2009046739A1 (en) * | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating prostate cancer (pca) |
WO2009046738A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) |
ES2470644T3 (es) * | 2008-05-26 | 2014-06-24 | Universitt Zrich | Nanopart�culas de protamina/ARN para inmunoestimulaci�n |
WO2010037408A1 (en) | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Curevac Gmbh | Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof |
US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
WO2011069529A1 (en) | 2009-12-09 | 2011-06-16 | Curevac Gmbh | Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids |
EP2449113B8 (en) | 2010-07-30 | 2015-11-25 | CureVac AG | Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation |
US8822663B2 (en) | 2010-08-06 | 2014-09-02 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
WO2012019630A1 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein |
HUE058896T2 (hu) | 2010-10-01 | 2022-09-28 | Modernatx Inc | N1-metil-pszeudo-uracilt tartalmazó ribonukleinsavak és azok felhasználásai |
WO2012089225A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-05 | Curevac Gmbh | Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation |
WO2012116715A1 (en) | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in newborns and infants |
WO2012113413A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Curevac Gmbh | Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates |
WO2012116714A1 (en) * | 2011-03-02 | 2012-09-07 | Curevac Gmbh | Vaccination in elderly patients |
US8710200B2 (en) | 2011-03-31 | 2014-04-29 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids encoding a modified erythropoietin and their expression |
US10196637B2 (en) | 2011-06-08 | 2019-02-05 | Nitto Denko Corporation | Retinoid-lipid drug carrier |
JP6184945B2 (ja) | 2011-06-08 | 2017-08-23 | シャイアー ヒューマン ジェネティック セラピーズ インコーポレイテッド | mRNA送達のための脂質ナノ粒子組成物および方法 |
US9464124B2 (en) | 2011-09-12 | 2016-10-11 | Moderna Therapeutics, Inc. | Engineered nucleic acids and methods of use thereof |
RS62993B1 (sr) | 2011-10-03 | 2022-03-31 | Modernatx Inc | Modifikovani nukleozidi, nukleotidi, i nukleinske kiseline, i njihove upotrebe |
CN104114572A (zh) | 2011-12-16 | 2014-10-22 | 现代治疗公司 | 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物 |
WO2013113326A1 (en) | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Curevac Gmbh | Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen |
WO2013120498A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen |
WO2013120497A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein |
WO2013120499A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen |
WO2013120500A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Curevac Gmbh | Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen |
MX358706B (es) | 2012-03-27 | 2018-08-31 | Curevac Ag | Moleculas de acido nucleico artificiales que comprenden un top 5´utr. |
DK3578659T3 (da) | 2012-03-27 | 2024-02-05 | CureVac SE | Kunstige nukelinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression |
SG10201607962RA (en) | 2012-03-27 | 2016-11-29 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
US9572897B2 (en) | 2012-04-02 | 2017-02-21 | Modernatx, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
US9303079B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-04-05 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins |
DE18200782T1 (de) | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
US9283287B2 (en) | 2012-04-02 | 2016-03-15 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins |
RU2737765C2 (ru) * | 2012-05-04 | 2020-12-02 | Пфайзер Инк. | Простатоассоциированные антигены и иммунотерапевтические схемы на основе вакцин |
EA201492055A1 (ru) | 2012-06-08 | 2015-11-30 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | ИНГАЛЯЦИОННАЯ ДОСТАВКА мРНК В НЕЛЕГОЧНЫЕ КЛЕТКИ-МИШЕНИ |
EP4074834A1 (en) | 2012-11-26 | 2022-10-19 | ModernaTX, Inc. | Terminally modified rna |
BR112015018989B1 (pt) | 2013-02-22 | 2023-11-14 | Curevac Ag | Combinação de vacina/inibidor da via de pd-1, inibidor da via de pd-1 e vacina de rna |
EA037922B1 (ru) | 2013-03-14 | 2021-06-07 | Шир Хьюман Дженетик Терапис, Инк. | мРНК CFTR И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МУКОВИСЦИДОЗА У МЛЕКОПИТАЮЩЕГО |
HUE055044T2 (hu) | 2013-03-14 | 2021-10-28 | Translate Bio Inc | MRNS-kódolt ellenanyagok bejuttatására szolgáló eljárások és készítmények |
ES2795249T3 (es) | 2013-03-15 | 2020-11-23 | Translate Bio Inc | Mejora sinérgica de la administración de ácidos nucleicos a través de formulaciones mezcladas |
US8980864B2 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-17 | Moderna Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of altering cholesterol levels |
EP3011967B1 (en) * | 2013-06-21 | 2020-06-17 | Gemvax & Kael Co., Ltd. | Hormone secretion regulator, composition containing same, and method for controlling hormone secretion using same |
MX369469B (es) | 2013-08-21 | 2019-11-08 | Curevac Ag | Vacuna contra el virus respiratorio sincitial. |
SG11201510747RA (en) | 2013-08-21 | 2016-03-30 | Curevac Ag | Method for increasing expression of rna-encoded proteins |
SG11201510751YA (en) * | 2013-08-21 | 2016-03-30 | Curevac Ag | Composition and vaccine for treating prostate cancer |
BR112016001192A2 (pt) | 2013-08-21 | 2017-08-29 | Curevac Ag | Vacina contra a raiva |
WO2015024666A1 (en) * | 2013-08-21 | 2015-02-26 | Curevac Gmbh | Composition and vaccine for treating lung cancer |
EP3574916A1 (en) * | 2013-08-21 | 2019-12-04 | CureVac AG | Composition and vaccine for treating lung cancer |
CA2915730A1 (en) | 2013-08-21 | 2015-02-26 | Karl-Josef Kallen | A combination rsv/influenza a vaccine |
EP3052106A4 (en) | 2013-09-30 | 2017-07-19 | ModernaTX, Inc. | Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides |
MX2016004249A (es) | 2013-10-03 | 2016-11-08 | Moderna Therapeutics Inc | Polinulcleotidos que codifican el receptor de lipoproteina de baja densidad. |
BR112016008806A2 (pt) * | 2013-11-01 | 2017-10-03 | Pfizer | Vetores para expressão de antígenos associados à próstata |
CA2925021A1 (en) | 2013-11-01 | 2015-05-07 | Curevac Ag | Modified rna with decreased immunostimulatory properties |
SG11201604198YA (en) | 2013-12-30 | 2016-07-28 | Curevac Ag | Methods for rna analysis |
JP6584414B2 (ja) | 2013-12-30 | 2019-10-02 | キュアバック アーゲー | 人工核酸分子 |
KR102399799B1 (ko) | 2013-12-30 | 2022-05-18 | 큐어백 아게 | 인공 핵산 분자 |
US11254951B2 (en) | 2014-12-30 | 2022-02-22 | Curevac Ag | Artificial nucleic acid molecules |
CA2935878C (en) | 2014-03-12 | 2023-05-02 | Curevac Ag | Combination of vaccination and ox40 agonists |
WO2015149944A2 (en) | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Curevac Gmbh | Polymeric carrier cargo complex for use as an immunostimulating agent or as an adjuvant |
PT3134131T (pt) | 2014-04-23 | 2022-03-24 | Modernatx Inc | Vacinas de ácidos nucleicos |
BR112016026980B1 (pt) | 2014-06-10 | 2022-05-03 | Curevac Real Estate Gmbh | Método para sintetizar uma molécula de rna de uma dada sequência |
CA2953341C (en) | 2014-06-25 | 2023-01-24 | Acuitas Therapeutics Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
ES2791152T3 (es) | 2014-12-12 | 2020-11-03 | Curevac Ag | Moléculas de ácido nucleico artificiales para una expresión proteica mejorada |
EP4353257A2 (en) | 2015-04-13 | 2024-04-17 | CureVac Manufacturing GmbH | Method for producing rna compositions |
WO2016165831A1 (en) | 2015-04-17 | 2016-10-20 | Curevac Ag | Lyophilization of rna |
US10293058B2 (en) | 2015-04-22 | 2019-05-21 | Curevac Ag | RNA containing composition for treatment of tumor diseases |
SG11201708867UA (en) | 2015-04-30 | 2017-11-29 | Curevac Ag | Immobilized poly(n)polymerase |
WO2016180430A1 (en) | 2015-05-08 | 2016-11-17 | Curevac Ag | Method for producing rna |
DK3294326T3 (da) | 2015-05-15 | 2021-05-31 | Curevac Ag | Prime-boost-regimer indbefattende indgivelse af mindst én mrna-konstruktion |
EP3916091A3 (en) | 2015-05-20 | 2022-03-30 | CureVac AG | Dry powder composition comprising long-chain rna |
CN107530448A (zh) | 2015-05-20 | 2018-01-02 | 库瑞瓦格股份公司 | 包含长链rna的干粉组合物 |
US11608513B2 (en) | 2015-05-29 | 2023-03-21 | CureVac SE | Method for adding cap structures to RNA using immobilized enzymes |
CN107873055B (zh) | 2015-05-29 | 2021-09-17 | 库瑞瓦格房地产有限公司 | 包括至少一个切向流过滤步骤的产生和纯化rna的方法 |
WO2017004143A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | Acuitas Therapeutics Inc. | Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
WO2017009376A1 (en) | 2015-07-13 | 2017-01-19 | Curevac Ag | Method of producing rna from circular dna and corresponding template dna |
TW201718638A (zh) | 2015-07-21 | 2017-06-01 | 現代治療公司 | 傳染病疫苗 |
US11364292B2 (en) | 2015-07-21 | 2022-06-21 | Modernatx, Inc. | CHIKV RNA vaccines |
EP3362576A1 (en) | 2015-10-12 | 2018-08-22 | CureVac AG | Automated method for isolation, selection and/or detection of microorganisms or cells comprised in a solution |
US11866754B2 (en) | 2015-10-16 | 2024-01-09 | Modernatx, Inc. | Trinucleotide mRNA cap analogs |
US20190218546A1 (en) | 2015-10-16 | 2019-07-18 | Modernatx, Inc. | Mrna cap analogs with modified phosphate linkage |
WO2017067593A1 (en) * | 2015-10-21 | 2017-04-27 | Biontech Ag | Methods and means for inducing an immune response |
WO2017067592A1 (en) | 2015-10-21 | 2017-04-27 | Biontech Ag | Cytotoxic immunostimulating particles and uses thereof |
EP3364950A4 (en) | 2015-10-22 | 2019-10-23 | ModernaTX, Inc. | VACCINES AGAINST TROPICAL DISEASES |
CA3002922A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
MD3718565T2 (ro) | 2015-10-22 | 2022-09-30 | Modernatx Inc | Vaccinuri împotriva virusului respirator |
AU2016343803B2 (en) | 2015-10-28 | 2021-04-29 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Novel lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
US11413346B2 (en) | 2015-11-09 | 2022-08-16 | Curevac Ag | Rotavirus vaccines |
EP3701963A1 (en) | 2015-12-22 | 2020-09-02 | CureVac AG | Method for producing rna molecule compositions |
WO2017109161A1 (en) | 2015-12-23 | 2017-06-29 | Curevac Ag | Method of rna in vitro transcription using a buffer containing a dicarboxylic acid or tricarboxylic acid or a salt thereof |
EP3416683A1 (en) | 2016-02-17 | 2018-12-26 | CureVac AG | Zika virus vaccine |
US11920174B2 (en) | 2016-03-03 | 2024-03-05 | CureVac SE | RNA analysis by total hydrolysis and quantification of released nucleosides |
ES2844180T3 (es) | 2016-04-08 | 2021-07-21 | Translate Bio Inc | Acido nucleico codificante multimérico y usos del mismo |
EP3448427A1 (en) | 2016-04-29 | 2019-03-06 | CureVac AG | Rna encoding an antibody |
EP3452101A2 (en) | 2016-05-04 | 2019-03-13 | CureVac AG | Rna encoding a therapeutic protein |
EP3452493A1 (en) | 2016-05-04 | 2019-03-13 | CureVac AG | Nucleic acid molecules and uses thereof |
KR20190029576A (ko) | 2016-06-09 | 2019-03-20 | 큐어백 아게 | 핵산 카고용 하이브리드 담체 |
CN109312313A (zh) | 2016-06-13 | 2019-02-05 | 川斯勒佰尔公司 | 用于治疗鸟氨酸转氨甲酰酶缺乏症的信使rna疗法 |
MA46584A (fr) | 2016-10-21 | 2019-08-28 | Modernatx Inc | Vaccin contre le cytomégalovirus humain |
CN106632633B (zh) * | 2016-11-24 | 2020-03-20 | 浙江海洋大学 | 一种绿侧花海葵抗肿瘤寡肽及其用途 |
WO2018096179A1 (en) | 2016-11-28 | 2018-05-31 | Curevac Ag | Method for purifying rna |
AU2017368050A1 (en) | 2016-11-29 | 2019-06-20 | Puretech Lyt, Inc. | Exosomes for delivery of therapeutic agents |
EP3808380A1 (en) | 2016-12-08 | 2021-04-21 | CureVac AG | Rna for treatment or prophylaxis of a liver disease |
US11542490B2 (en) | 2016-12-08 | 2023-01-03 | CureVac SE | RNAs for wound healing |
MA50335A (fr) | 2016-12-08 | 2020-08-19 | Modernatx Inc | Vaccins à acide nucléique contre des virus respiratoires |
EP3558354A1 (en) | 2016-12-23 | 2019-10-30 | CureVac AG | Lassa virus vaccine |
US11141476B2 (en) | 2016-12-23 | 2021-10-12 | Curevac Ag | MERS coronavirus vaccine |
EP3558355A2 (en) | 2016-12-23 | 2019-10-30 | CureVac AG | Henipavirus vaccine |
MA47515A (fr) | 2017-02-16 | 2019-12-25 | Modernatx Inc | Compositions immunogènes très puissantes |
MX2019010155A (es) | 2017-02-27 | 2020-12-10 | Translate Bio Inc | Arnm de cftr optimizado por codón novedoso. |
KR20190124750A (ko) | 2017-02-28 | 2019-11-05 | 사노피 | 치료적 rna |
BR112019015244A2 (pt) | 2017-03-24 | 2020-04-14 | Curevac Ag | ácidos nucleicos codificando proteínas associadas a crispr e usos dos mesmos |
US11357856B2 (en) | 2017-04-13 | 2022-06-14 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for delivery of active agents |
US11820728B2 (en) | 2017-04-28 | 2023-11-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Carbonyl lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids |
IL270631B2 (en) | 2017-05-16 | 2024-03-01 | Translate Bio Inc | Treatment of cystic fibrosis through the administration of mRNA with an optimal codon encoding ctfr |
KR20200024905A (ko) | 2017-07-04 | 2020-03-09 | 큐어백 아게 | 신규 핵산 분자 |
US11639329B2 (en) | 2017-08-16 | 2023-05-02 | Acuitas Therapeutics, Inc. | Lipids for use in lipid nanoparticle formulations |
WO2019036028A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICULAR FORMULATIONS |
WO2019036030A1 (en) | 2017-08-17 | 2019-02-21 | Acuitas Therapeutics, Inc. | LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS |
US11602557B2 (en) | 2017-08-22 | 2023-03-14 | Cure Vac SE | Bunyavirales vaccine |
US10653767B2 (en) | 2017-09-14 | 2020-05-19 | Modernatx, Inc. | Zika virus MRNA vaccines |
KR20200071081A (ko) | 2017-10-19 | 2020-06-18 | 큐어백 아게 | 신규 인공 핵산 분자 |
WO2019092153A1 (en) | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Curevac Ag | Rna sequence adaptation |
EP3723796A1 (en) | 2017-12-13 | 2020-10-21 | CureVac AG | Flavivirus vaccine |
EP3727428A1 (en) | 2017-12-20 | 2020-10-28 | Translate Bio, Inc. | Improved composition and methods for treatment of ornithine transcarbamylase deficiency |
WO2019122371A1 (en) | 2017-12-21 | 2019-06-27 | Curevac Ag | Linear double stranded dna coupled to a single support or a tag and methods for producing said linear double stranded dna |
CN108624691A (zh) * | 2018-06-22 | 2018-10-09 | 杭州西合精准医疗科技有限公司 | 一种用于判断前列腺疾病的标志物及其应用 |
WO2020131656A1 (en) * | 2018-12-17 | 2020-06-25 | Immune Design Corp. | Pathogen-associated molecular pattern molecules and rna immunogenic compositions and methods of using the compositions for treating cancer |
US11351242B1 (en) | 2019-02-12 | 2022-06-07 | Modernatx, Inc. | HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition |
CN114729369A (zh) * | 2019-08-29 | 2022-07-08 | 苏黎世大学 | 最小mRNA及其用途 |
US11576966B2 (en) | 2020-02-04 | 2023-02-14 | CureVac SE | Coronavirus vaccine |
US11241493B2 (en) | 2020-02-04 | 2022-02-08 | Curevac Ag | Coronavirus vaccine |
US20210315986A1 (en) * | 2020-04-13 | 2021-10-14 | Janssen Biotech, Inc. | Psma and steap1 vaccines and their uses |
CN116096702A (zh) | 2020-07-16 | 2023-05-09 | 爱康泰生治疗公司 | 用于脂质纳米颗粒的阳离子脂质 |
US11406703B2 (en) | 2020-08-25 | 2022-08-09 | Modernatx, Inc. | Human cytomegalovirus vaccine |
MX2023007574A (es) | 2020-12-22 | 2023-09-29 | CureVac SE | "vacuna de arn contra variantes de sars-cov-2. |
CN112516296A (zh) * | 2021-02-07 | 2021-03-19 | 无锡市人民医院 | 一种新抗原RNA及免疫佐剂poly(I:C)复合疫苗及其构建方法 |
JP2024515184A (ja) * | 2021-04-19 | 2024-04-05 | ヴェルサメブ アーゲー | 下部尿路症状の治療方法 |
CN114527222A (zh) * | 2022-02-22 | 2022-05-24 | 广州市番禺区中心医院 | 前列腺癌相关标志物及其应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004067570A2 (en) * | 2003-01-28 | 2004-08-12 | Proscan Rx Pharma | Prostate cancer diagnosis and treatment |
RU2234942C2 (ru) * | 1998-07-14 | 2004-08-27 | Корикса Корпорейшн | Выделенный опухолевый полипептид предстательной железы и кодирующий его полинуклеотид |
WO2005016376A1 (de) * | 2003-08-05 | 2005-02-24 | Curevac Gmbh | Transfektion von blutzellen mit mrna zur immunstimulation und gentherapie |
WO2006008154A1 (de) * | 2004-07-21 | 2006-01-26 | Curevac Gmbh | mRNA-GEMISCH ZUR VAKZINIERUNG GEGEN TUMORERKRANKUNGEN |
Family Cites Families (31)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6833438B1 (en) * | 1999-06-01 | 2004-12-21 | Agensys, Inc. | Serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof |
US6387888B1 (en) * | 1998-09-30 | 2002-05-14 | American Foundation For Biological Research, Inc. | Immunotherapy of cancer through expression of truncated tumor or tumor-associated antigen |
EP1159429A2 (en) * | 1999-02-18 | 2001-12-05 | Compugen Ltd. | Psa and klk-2 splicing variants |
AU6158700A (en) | 1999-07-13 | 2001-01-30 | Corixa Corporation | Vaccine |
DE69923840T2 (de) | 1999-09-09 | 2006-04-06 | Curevac Gmbh | Transfer von mRNAs unter Verwendung von polykationischen Verbindungen |
DK1244705T3 (da) * | 1999-12-06 | 2010-05-31 | Agensys Inc | Serpentintransmembrane antigener udtryk i human prostatacancere og anvendelser deraf |
DE50214200D1 (de) * | 2001-06-05 | 2010-03-25 | Curevac Gmbh | Stabilisierte Tumorantigen-mRNA mit erhöhtem G/C-Gehalt |
DE10162480A1 (de) | 2001-12-19 | 2003-08-07 | Ingmar Hoerr | Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen |
WO2003059381A2 (en) | 2002-01-18 | 2003-07-24 | Curevac Gmbh | Immunogenic preparations and vaccines on the basis of mrna |
DE10201732A1 (de) * | 2002-01-18 | 2003-07-31 | Curevac Gmbh | Präperation von Immunogenen und Impfstoffen auf der Grundlage von RNA |
MXPA04012443A (es) * | 2002-06-11 | 2005-04-19 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Composiciones inmunogenicas. |
DE10229872A1 (de) * | 2002-07-03 | 2004-01-29 | Curevac Gmbh | Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA |
WO2004016643A2 (en) | 2002-08-16 | 2004-02-26 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Tumor associated antigen, peptides thereof, and use of same as anti-tumor vaccines |
US7179797B2 (en) | 2002-09-27 | 2007-02-20 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods and compositions for treating prostate cancer using DNA vaccines |
EP1578432A4 (en) * | 2002-10-03 | 2008-07-30 | Epimmune Inc | HLA BINDING PEPTIDES AND USES THEREOF |
NZ550816A (en) * | 2004-04-22 | 2009-12-24 | Agensys Inc | Antibodies and molecules derived therefrom that bind to STEAP-1 proteins |
DE102004042546A1 (de) * | 2004-09-02 | 2006-03-09 | Curevac Gmbh | Kombinationstherapie zur Immunstimulation |
DE102005023170A1 (de) | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Curevac Gmbh | Optimierte Formulierung für mRNA |
ES2735531T3 (es) * | 2005-08-23 | 2019-12-19 | Univ Pennsylvania | ARN que contiene nucleósidos modificados y métodos de uso del mismo |
CN101252879A (zh) * | 2005-09-02 | 2008-08-27 | 宝洁公司 | 有效的头皮健康状况预测器 |
JP2009508493A (ja) * | 2005-09-19 | 2009-03-05 | ベリデックス・エルエルシー | すい臓がんを診断するための方法 |
DE102006007433A1 (de) * | 2006-02-17 | 2007-08-23 | Curevac Gmbh | Adjuvanz in Form einer Lipid-modifizierten Nukleinsäure |
JP2010507361A (ja) | 2006-07-31 | 2010-03-11 | キュアバック ゲーエムベーハー | 具体的には免疫刺激剤/アジュバントとしての、一般式(I):GlXmGn、または一般式(II):ClXmCnで表される核酸 |
DE102006035618A1 (de) | 2006-07-31 | 2008-02-07 | Curevac Gmbh | Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz |
DE102006061015A1 (de) | 2006-12-22 | 2008-06-26 | Curevac Gmbh | Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC |
DE102007001370A1 (de) | 2007-01-09 | 2008-07-10 | Curevac Gmbh | RNA-kodierte Antikörper |
IL183471A0 (en) * | 2007-05-28 | 2007-09-20 | Yaskawa Europ Technology Ltd | Absolute encoder |
WO2009030254A1 (en) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Curevac Gmbh | Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation |
WO2009046738A1 (en) | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) |
WO2009046739A1 (en) * | 2007-10-09 | 2009-04-16 | Curevac Gmbh | Composition for treating prostate cancer (pca) |
US20110053829A1 (en) | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Curevac Gmbh | Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids |
-
2007
- 2007-10-09 WO PCT/EP2007/008771 patent/WO2009046739A1/en active Application Filing
-
2008
- 2008-10-08 US US12/682,187 patent/US20100305196A1/en not_active Abandoned
- 2008-10-08 RU RU2010118013/10A patent/RU2508125C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-10-08 JP JP2010528313A patent/JP5139530B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-10-08 DK DK08802829.5T patent/DK2195015T3/da active
- 2008-10-08 CA CA2696772A patent/CA2696772C/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-10-08 BR BRPI0818320A patent/BRPI0818320A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-10-08 CN CN201510245819.9A patent/CN104840953A/zh active Pending
- 2008-10-08 MX MX2010003768A patent/MX2010003768A/es active IP Right Grant
- 2008-10-08 CN CN200880110986A patent/CN101820900A/zh active Pending
- 2008-10-08 RU RU2013151122/10A patent/RU2583004C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-10-08 ES ES08802829.5T patent/ES2633246T3/es active Active
- 2008-10-08 WO PCT/EP2008/008504 patent/WO2009046975A1/en active Application Filing
- 2008-10-08 AU AU2008309931A patent/AU2008309931B2/en not_active Ceased
-
2012
- 2012-11-15 JP JP2012251528A patent/JP5635058B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-02-05 US US13/759,542 patent/US9402887B2/en active Active
-
2016
- 2016-06-30 US US15/198,456 patent/US10434154B2/en active Active
- 2016-09-20 US US15/271,122 patent/US20170000871A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-08-22 US US16/548,112 patent/US20190365879A1/en active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2234942C2 (ru) * | 1998-07-14 | 2004-08-27 | Корикса Корпорейшн | Выделенный опухолевый полипептид предстательной железы и кодирующий его полинуклеотид |
WO2004067570A2 (en) * | 2003-01-28 | 2004-08-12 | Proscan Rx Pharma | Prostate cancer diagnosis and treatment |
WO2005016376A1 (de) * | 2003-08-05 | 2005-02-24 | Curevac Gmbh | Transfektion von blutzellen mit mrna zur immunstimulation und gentherapie |
WO2006008154A1 (de) * | 2004-07-21 | 2006-01-26 | Curevac Gmbh | mRNA-GEMISCH ZUR VAKZINIERUNG GEGEN TUMORERKRANKUNGEN |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2010118013A (ru) | 2011-11-20 |
RU2583004C2 (ru) | 2016-04-27 |
US10434154B2 (en) | 2019-10-08 |
RU2013151122A (ru) | 2015-05-20 |
JP2010540673A (ja) | 2010-12-24 |
JP5139530B2 (ja) | 2013-02-06 |
WO2009046975A1 (en) | 2009-04-16 |
CA2696772A1 (en) | 2009-04-16 |
CN104840953A (zh) | 2015-08-19 |
CN101820900A (zh) | 2010-09-01 |
DK2195015T3 (da) | 2017-06-19 |
US20100305196A1 (en) | 2010-12-02 |
WO2009046739A1 (en) | 2009-04-16 |
US20160303210A1 (en) | 2016-10-20 |
JP5635058B2 (ja) | 2014-12-03 |
US20170000871A1 (en) | 2017-01-05 |
US20130251742A1 (en) | 2013-09-26 |
AU2008309931B2 (en) | 2013-01-17 |
JP2013082711A (ja) | 2013-05-09 |
BRPI0818320A2 (pt) | 2015-09-08 |
CA2696772C (en) | 2017-09-05 |
US9402887B2 (en) | 2016-08-02 |
AU2008309931A1 (en) | 2009-04-16 |
MX2010003768A (es) | 2010-04-30 |
ES2633246T3 (es) | 2017-09-20 |
US20190365879A1 (en) | 2019-12-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2508125C2 (ru) | Композиция для лечения рака предстательной железы (рпж) | |
US20220096616A1 (en) | Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc) | |
US20160166668A1 (en) | Composition and vaccine for treating prostate cancer | |
EA037217B1 (ru) | Композиция и вакцина для лечения рака легких | |
EP2195015B1 (en) | COMPOSITION FOR TREATING PROSTATE CANCER (PCa) | |
EP3035955B1 (en) | Composition and vaccine for treating lung cancer | |
EP3035954A1 (en) | Composition and vaccine for treating prostate cancer |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20201009 |