RU2481398C2 - Hla-a*1101-ограниченный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция - Google Patents
Hla-a*1101-ограниченный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция Download PDFInfo
- Publication number
- RU2481398C2 RU2481398C2 RU2009128979/10A RU2009128979A RU2481398C2 RU 2481398 C2 RU2481398 C2 RU 2481398C2 RU 2009128979/10 A RU2009128979/10 A RU 2009128979/10A RU 2009128979 A RU2009128979 A RU 2009128979A RU 2481398 C2 RU2481398 C2 RU 2481398C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- peptide
- ser
- lys
- hla
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 247
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 101150084041 WT1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 246
- 108700020467 WT1 Proteins 0.000 claims abstract description 244
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 claims abstract description 106
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 claims abstract description 106
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims abstract description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 48
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 41
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 33
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims abstract description 11
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 5
- 102100022748 Wilms tumor protein Human genes 0.000 claims abstract 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 47
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 23
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 23
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 23
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 23
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 claims description 22
- VNCLJDOTEPPBBD-GUBZILKMSA-N Gln-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VNCLJDOTEPPBBD-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 19
- LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N 0.000 claims description 19
- JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N Thr-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N 0.000 claims description 19
- CVLIHKBUPSFRQP-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CVLIHKBUPSFRQP-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 14
- GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N Gln-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GTBXHETZPUURJE-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 14
- VZKBJNBZMZHKRC-XUXIUFHCSA-N Pro-Ile-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VZKBJNBZMZHKRC-XUXIUFHCSA-N 0.000 claims description 14
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 claims description 14
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 14
- XUZQMPGBGFQJMY-SRVKXCTJSA-N Gln-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N XUZQMPGBGFQJMY-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 13
- QFBNNYNWKYKVJO-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N QFBNNYNWKYKVJO-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 13
- CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N Ser-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 13
- SJJHXJDSNQJMMW-SRVKXCTJSA-N Glu-Lys-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O SJJHXJDSNQJMMW-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 11
- MXJYXYDREQWUMS-XKBZYTNZSA-N Glu-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MXJYXYDREQWUMS-XKBZYTNZSA-N 0.000 claims description 11
- YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YQHZVYJAGWMHES-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims description 11
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 8
- VKAWJBQTFCBHQY-GUBZILKMSA-N Cys-Gln-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N VKAWJBQTFCBHQY-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 5
- JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N Gln-Arg-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JFOKLAPFYCTNHW-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 5
- TVOOGUNBIWAURO-KATARQTJSA-N Lys-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O TVOOGUNBIWAURO-KATARQTJSA-N 0.000 claims description 5
- WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims description 5
- BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N Ser-Cys-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N BLPYXIXXCFVIIF-FXQIFTODSA-N 0.000 claims description 5
- OJKVFAWXPGCJMF-BPUTZDHNSA-N Trp-Pro-Ser Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O OJKVFAWXPGCJMF-BPUTZDHNSA-N 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 abstract 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 abstract 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 abstract 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 abstract 1
- 102000040856 WT1 Human genes 0.000 description 231
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 45
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 31
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 30
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 29
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 14
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 8
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 8
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 8
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 8
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 4
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 4
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 4
- 208000034176 Neoplasms, Germ Cell and Embryonal Diseases 0.000 description 4
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 4
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000003115 germ cell cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 4
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 125000006178 methyl benzyl group Chemical group 0.000 description 4
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 4
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 3
- JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N Ser-Ser-Ser-Ser Chemical compound OCC(N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CO)C(O)=O JURQXQBJKUHGJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 125000002653 sulfanylmethyl group Chemical group [H]SC([H])([H])[*] 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- VOKWBBBXJONREA-DCAQKATOSA-N Asn-Met-His Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N VOKWBBBXJONREA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N Gln-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N Met-Thr-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IHRFZLQEQVHXFA-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 2
- QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QKQDTEYDEIJPNK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N Ser-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WTKQMHWYSBWUBE-UHFFFAOYSA-N (3-nitropyridin-2-yl) thiohypochlorite Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CN=C1SCl WTKQMHWYSBWUBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobutanoic acid Natural products CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 3-nitro-2-pyridylthio) group Chemical group 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N D-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101100103014 Homo sapiens WT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000621309 Homo sapiens Wilms tumor protein Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 208000019691 hematopoietic and lymphoid cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 102000046004 human WT1 Human genes 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000010349 pulsation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N thioacetamide Natural products CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/82—Translation products from oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/001153—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464452—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/464453—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/572—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 cytotoxic response
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области иммунологии. Представлен пептид, полученный из белка WT1, который способен связываться с молекулой HLA-А*1101 и индуцировать CTL, имеющий последовательность SEQ ID NO:6 или SEQ ID NO:7, представленные в описании. Кроме того, описан пептидный димер, применяемый для тех же целей и состоящий из двух пептидных мономеров, выбранных из группы пептидов, состоящей из SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:8 и SEQ ID NO:9, имеющихся в описании. Представлена нуклеиновая кислота, кодирующая указанный пептид и экспрессионный вектор, содержащий указанную нуклеиновую кислоту. Описана фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101, содержащая указанные пептид, нуклеиновую кислоту или вектор. Описаны WT1-специфичный CTL, индуцируемый указанным пептидом или димером, и антиген-презентирующая клетка, презентирующая указанный пептид. Имеются сведения о способе и наборе для индукции WT1-специфичного CTL и для индукции антиген-презентирующей клетки. Представлен способ in vitro диагностики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101, включающий инкубирование указанных CTL или антиген-презентирующей клетки с образцом, полученным у индивида, позитивного по HLA-A*1101, и определение количества указанной CTL или антиген-презентирующей клетки. Изобретение позволяет расширить ассортимент связывающихся с HLA-A*1101 пептидов, полученных из антигена WT1. 14 н.п. ф-лы, 1 табл., 14 ил., 1пр.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к HLA-A*1101-ограниченному пептиду WT1, в частности пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, где пептид обладает способностью связываться с молекулой HLA-A*1101, а также индуцировать CTL. Настоящее изобретение также относится к пептидному димеру, обладающему способностью связываться с молекулой HLA-A*1101 и индуцировать CTL, в котором два пептидных мономера, каждый содержащий аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот белка WT1, и содержащий по крайней мере один остаток цистеина, связаны между собой дисульфидной связью. Кроме того, настоящее изобретение относится к полинуклеотиду, кодирующему этот пептид, к фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рака, содержащей этот пептид, и тому подобное.
Уровень техники
Ген WT1 (ген опухоли Вильямса 1) был идентифицирован как ген, ответственный за опухоль Вильямса, которая представляет собой рак почек у детей (непатентные документы 1 и 2). WT1 является транскрипционным фактором, со структурой «цинкового пальца». Первоначально ген WT1 считался геном-супрессором рака. Однако последующие исследования (непатентные документы 3, 4, 5 и 6) показали, что ген WT1 скорее функционирует как онкоген в гематопоэтических опухолях и солидных раках.
Ген WT1 экспрессируется на высоком уровне во многих типах злокачественных опухолей. Кроме того, было изучено, свободен ли от мутаций продукт гена WT1, который является аутогенным белком, обладает иммуногенностью в живом организме. Результаты показали, что этот белок является продуктом гена WT1, который экспрессируется на высоком уровне в клетках опухоли, фрагментируется в результате внутриклеточного процессинга, конечные пептиды образуют комплексы с молекулами MHC класса I, и эти комплексы находятся на поверхностях клеток, и что CTL, распознающие такие комплексы, могут быть индуцированы с помощью пептидной вакцинации (непатентные документы 7, 8 и 9). Было также показано, что у мыши, иммунизированной пептидом WT1 или кДНК WT1, трансплантированные клетки опухоли, экспрессирующие ген WT1, с высокой вероятностью отторгаются (непатентные документы 7 и 10), в то время как нормальные ткани, физиологически экспрессирующие ген WT1, не повреждаются индуцированными CTL (непатентный документ 7). Было показано в экспериментах in vitro с использованием клеток человека, что, если пептид Db126 или пептид WH187 (аминокислоты 187-195 из SEQ ID NO:1, SLGEQQYSV), обладающий высокой способностью связываться с молекулой HLA-A*0201, которая является одной из молекул MHC класса I человека, используются для стимуляции мононуклеарных клеток периферической крови человека, имеющих HLA-A*0201, индуцируются WT1-специфичные CTL, эти индуцированные CTL имеют цитоксическую активность, специфичную для клеток опухоли, экспрессирующих эндогенно ген WT1 на высоком уровне, а цитоксическая активность таких CTL является HLA-A2-ограниченной (непатентный документ 11). Было показано в экспериментах in vitro на клетках человека с использованием пептида WT1, который соответствует HLA-A*2402 (было обнаружено, что среди HLA-A аллелей он наиболее часто встречается у японцев) (WT1235; аминокислоты 235-243 из SEQ ID NO:1, CMTWNQMNL), что индуцируются WT1-специфические CTL (TAK-1) (непатентный документ 12), и индуцированные CTL не супрессируют способность к образованию колоний нормальных гематопоэтических стволовых, которые частично физиологически экспрессируют ген WT1 (непатентные документы 12 и 13). Эти данные убедительно указывают на то, что не только у мышей, но и у человека, могут быть индуцированы WT1-специфичные CTL; такие CTL обладают цитоксической активностью против опухолевых клеток, экспрессирующих ген WT1 на высоком уровне, но не имеют цитоксической активности против нормальных клеток, экспрессирующих физиологически ген WT1 (непатентные документы 7, 10, 11, 12 и 13).
Продуктом гена WT1 является ядерный белок, который расщепляется протеасомами в цитоплазме на пептиды. Фрагментированные пептиды транспортируются в просвет эндоплазматического ретикулума с помощью молекул TAP (транспортер, связанный с процессингом антигена), образуют комплексы с молекулами MHC класса I и располагаются на поверхности клеток. WT1-специфичные CTL индуцируются в результате распознавания комплексов WT1 пептид - молекула MHC класса I клетками-предшественниками CTL посредством TCR, оказывая таким образом цитоксический эффект на клетки опухоли, презентирующие продукт гена WT1 с помощью молекул MHC класса I (непатентные документы 7, 8 и 9). Кроме того, требуется по крайней мере чтобы пептид WT1, используемый в иммунотерапии рака, направленной на продукт гена WT1, находился в форме, которая связывается с молекулой MHC класса I в живом организме. Однако молекулы MHC класса I различные, и аминокислотные последовательности пептидов WT1, связанных с соответствующими молекулами MHC класса I, отличаются друг от друга. Поэтому, требуется получить пептид, соответствующий каждому подтипу MHC класса I. Однако к настоящему времени известны только HLA-A*2402, HLA-A*0201-, HLA-A*2601- и HLA-A*3303-ограниченные пептиды как HLA-ограниченные пептиды WT1. (Патентный документ 1, непатентный документ 11, патентный документ 2 и патентный документ 3, соответственно). Таким образом, существует необходимость найти HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1.
Патентный документ 1: WO 2003/106682.
Патентный документ 2: WO 2005/095598.
Патентный документ 3: Японская Патентная Заявка №2006-45287.
Непатентный документ 1: Daniel A. Haber et al., Cell. 1990 Jun 29; 61(7):1257-69.
Непатентный документ 2: Call KM et al., Cell. 1990 Feb 9; 60(3):509-20.
Непатентный документ 3: Menke AL et al., Int Rev Cytol. 1998; 181:151-212. Review.
Непатентный документ 4: Yamagami T et al., Blood. 1996 Apr 1; 87(7):2878-84.
Непатентный документ 5: Inoue K et al., Blood. 1998 Apr 15; 91(8):2969-76.
Непатентный документ 6: Tsuboi A et al., Leuk Res. 1999 May; 23(5):499-505.
Непатентный документ 7: Oka Y et al., J Immunol. 2000 Feb 15; 164(4):1873-80.
Непатентный документ 8: Melief CJ et al., Immunol Rev. 1995 Jun; 145:167-77.
Непатентный документ 9: Ritz J, J Clin Oncol. 1994 Feb; 12(2):237-8.
Непатентный документ 10: Tsuboi A et al., J Clin Immunol. 2000 May; 20(3):195-202.
Непатентный документ 11: Oka Y et al., Immunogenetics. 2000 Feb; 51(2):99-107.
Непатентный документ 12: Ohminami H et al., Blood. 2000 Jan 1; 95(1):286-93.
Непатентный документ 13: Gao L et al., Blood. 2000 Apr 1; 95(7):2198-203.
Сущность изобретения
Задачи, решаемые изобретением
Задачи, решаемые настоящим изобретением, состоят в получении пептида, который является HLA-A*1101 - ограниченным и содержит аминокислотную последовательность из белка WT1, и полинуклеотида, его кодирующего, а также фармацевтической композиции для лечения и профилактики рака, их содержащей, и тому подобное.
Способы решения задач
В результате интенсивных исследований с учетом ситуации, описанной выше, автор изобретения обнаружил, что среди пептидов, каждый из которых содержит аминокислотную последовательность, включающую 9 последовательных аминокислот белка WT1, пептиды, каждый обладающий способностью связываться с молекулой HLA-A*1101, могут интенсивно индуцировать WT1-специфичную CTL. Таким образом, было выполнено настоящее изобретение.
Настоящее изобретение представляет:
(1) пептид, содержащий аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот белка WT1, где пептид обладает способностью связываться с молекулой HLA-A*1101 и индуцировать CTL;
(2) пептид согласно (1), где аминокислота в положении 9 аминокислотной последовательности представляет собой Lys или Arg;
(3) пептид согласно (1), где аминокислотная последовательность выбрана из группы, состоящей из:
Ala Ala Gly Ser Ser Ser Ser Val Lys (SEQ ID NO:2),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3),
Arg Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys (SEQ ID NO:4),
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8),
Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9),
Asn Met His Gln Arg Asn Met Thr Lys (SEQ ID NO:10);
(4) пептид согласно (3), где аминокислотная последовательность представляет собой Ala Ala Gly Ser Ser Ser Ser Val Lys (SEQ ID NO:2);
(5) пептидный димер, обладающий способностью связываться с молекулой HLA-A*1101 и индуцировать CTL, в котором два пептидных мономера, каждый содержащий аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1 и включающую по крайней мере один остаток цистеина, связаны друг с другом посредством дисульфидной связи;
(6) пептидный димер согласно (5), где аминокислотная последовательность пептидного мономера выбрана из группы, состоящей из:
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8),
Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9);
(7) фармацевтическая композиция для лечения и профилактики рака, содержащая пептид согласно (1) и/или пептидный димер согласно (5);
(8) способ лечения или профилактики рака, включающий введение эффективного количества пептида согласно (1) и/или пептидного димера согласно (5) HLA-A*1101-позитивному индивиду;
(9) полинуклеотид, кодирующий пептид согласно (1);
(10) вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид согласно (9);
(11) фармацевтическая композиция для лечения и профилактики рака, содержащая полинуклеотид согласно (9) или вектор согласно (10);
(12) способ лечения или профилактики рака, включающий введение эффективного количества полинуклеотида согласно (9) или вектора согласно (10) HLA-A*1101-позитивному индивиду;
(13) WT1-специфичный CTL, который индуцирован с помощью пептида согласно (1) и/или пептидного димера согласно (5);
(14) способ индукции WT1-специфичного CTL, включающий культивирование мононуклеарной клетки периферической крови в присутствии пептида согласно (1) и/или пептидного димера согласно (5) для индуцирования WT1-специфичного CTL из мононуклеарной клетки периферической крови;
(15) набор для индукции WT1-специфичного CTL, содержащий пептид согласно (1) и/или пептидный димер согласно (5) в качестве существенного компонента;
(16) антиген-презентирующая клетка, презентирующая пептид WT1, который индуцирован с помощью пептида согласно (1) и/или пептидного димера согласно (5);
(17) способ индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующий пептид WT1, включающий культивирование незрелой антиген-презентирующей клетки в присутствии пептида согласно (1) и/или пептидного димера согласно (5) для индуцирования антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1, из незрелой антиген-презентирующей клетки;
(18) набор для индуции антиген-презентирующей клетки, презентирующий пептид WT1, включающий пептид согласно (1) и/или пептидный димер согласно (5) как существенный компонент; и
(19) способ диагностики рака, включающий использование CTL согласно (13) или антиген-презентирующей клетки согласно (16).
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение относится к пептиду, который является HLA-A*1101-ограниченным и содержит аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот белка WT1, и кодирующий его полинуклеотид, а также фармацевтическую композицию для лечения и/или профилактики рака, содержащую пептид и тому подобное. Следовательно, возможно индуцировать in vivo и in vitro WT1-специфичные CTL у индивидов, имеющих HLA-A*1101. Поскольку доля позитивных HLA-A*1101 среди японцев высока (около 17,9%), то WT1-специфичные CTL можно индуцировать у большого числа индивидов.
Краткое описание чертежей
Фиг.1 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1251.
Фиг.2 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1279.
Фиг.3 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1312.
Фиг.4 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1313.
Фиг.5 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1338.
Фиг.6 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1378.
Фиг.7 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1386.
Фиг.8 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1415.
Фиг.9 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1436.
Фиг.10 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1378 пептидом (a, b и c представляют цитоксическую активность, наблюдаемую при использовании PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1, 2 и 3, соответственно).
Фиг.11 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1378 пептидным димером (a и b представляют цитоксическую активность, наблюдаемую при использовании PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1 и 2, соответственно).
Фиг.12 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного модифицированным WT1378 пептидом (G → I) (a, b и c представляют цитоксическую активность, наблюдаемую при использовании PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1, 2 и 3, соответственно).
Фиг.13 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного модифицированным WT1378 пептидом (G → V) (a, b и c представляют цитоксическую активность, наблюдаемую при использовании PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1, 2 и 3, соответственно).
Фиг.14 представляет цитоксическую активность CTL, индуцированного WT1379 пептидом (a, b и c представляют цитоксическую активность, наблюдаемую при использовании PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1, 2 и 3, соответственно).
Наилучший вариант осуществления изобретения
В одном из аспектов настоящее изобретение относится к пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, где пептид обладает способностью связываться с молекулой HLA-A*1101 и индуцировать CTL (в описании также обозначен как "пептид WT1"). Аминокислотная последовательность белка WT1 человека представлена как SEQ ID NO:1. Пептид по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1. Если пептид по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, включающую цистеин(ы), такую как аминокислотная последовательность SEQ ID NO:3, 7, 8 или 9, как описано ниже, то стабильность может быть увеличена путем замещения цистеина(нов) в аминокислотной последовательности другим веществом, такой как другая аминокислота (например, серин, аланин и α-аминобутировая кислота) или путем модифицирования SH-группы цистеина(нов) защитной группой, известной в данной области техники (например, карбоксиметильной группой или пиридилэтильной группой). Пептид по настоящему изобретению является пептидом ракового антигена, который может индуцировать CTL вследствие презентации (с помощью антиген-презентирующей клетки) пептида, формируемого в результате процессинга пептида по настоящему изобретению в клетке.
Как описано выше, объектом настоящего изобретение является получение HLA-A*1101-ограниченного пептида. Таким образом, пептид по настоящему изобретению обладает способностью связываться с молекулой HLA-A*1101. Способность к связыванию может определяться способом, известным в данной области. Примеры таких способов включают способ, основанный на использовании компьютера, такой как Rankpep, BIMAS или SYFPEITHI, и исследование конкурентного связывания с известным пептидом, обладающим способностью связываться с молекулой HLA-A*1101. Например, чтобы оценить обладает ли пептид по настоящему изобретению способностью к связыванию, установленная способность к связыванию может сравниваться с таковой у известного HLA-A*1101-ограниченного пептида. Примеры пептидов, обладающих способностью к связыванию в соответствии с настоящим изобретением, включают пептид, у которого показатель афинности к HLA-A*1101 молекуле, как определено способом, описанным в примере 1, составляет 4 или более, предпочтительнее 5 или более, более предпочтительнее, 6 или более.
Пептид по настоящему изобретению дополнительно обладает способностью индуцировать CTL. Ген WT1 экспрессируется в своей нативной форме на высоком уровне, например, в гематопоэтических опухолях, таких как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидных раках, таких как рак желудка, рак толстой кишки, рак легкого, рак молочной железы, герминогенный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Следовательно, пептид по настоящему изобретению может индуцировать CTL с высокой скоростью у индивида, страдающего таким заболеванием. Способность индуцировать CTL относится к способности индуцировать CTL in vivo или in vitro. Такую способность можно определить, используя общий способ, такой как способ, в котором цитоксическая активность CTL определяется с использованием теста с высвобождением хрома.
Пептид по настоящему изобретению может иметь Lys или Arg в положении 9 аминокислотной последовательности. Считается, что при наличии такой аминокислоты, способность пептида связываться с молекулой HLA-A*1101 становится выше.
Аминокислотная последовательность, состоящая из 9 аминокислот, включенных в пептид по настоящему изобретению, предпочтительно представляет собой Ala Ala Gly Ser Ser Ser Ser Val Lys (SEQ ID NO:2), Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3), Arg Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys (SEQ ID NO:4), Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5), Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6), Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7), Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8), Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9) или Asn Met His Gln Arg Asn Met Thr Lys (SEQ ID NO:10). Наиболее предпочтительной последовательностью является последовательность Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7). Кроме того, последовательность может иметь замещение одной или нескольких, предпочтительно, от одной до пяти, аминокислот на другие аминокислоты в девяти аминокислотах любой из SEQ ID NO:2-10. Любая из этих девяти аминокислот или другие замещенные аминокислоты могут быть соответствующим образом модифицированы. В любом случае, пептид по настоящему изобретению сохраняет способность связываться с молекулой HLA-A*1101.
Как описано выше, пептидом по настоящему изобретению может быть любой пептид при условии, что он содержит аминокислотную последовательность, которая получена из белка WT1 и состоит из 9 последовательных аминокислот. Таким образом, пептидом по настоящему изобретению может быть, например, пептид, состоящий только из аминокислотной последовательности любой SEQ ID NO:2-10, или белок WT1 или его часть, включающая аминокислотную последовательность любой SEQ ID NO:2-10. Количество аминокислот, включенных в пептид по настоящему изобретению, конкретно не ограничено, и это количество составляет, например, 9-500, 9-300, 9-200, 9-100, 9-50, 9-30 и 9-12 аминокислот. Разные вещества можно присоединить к N-концу и/или к C-концу аминокислотной последовательности, состоящей из 9 последовательных аминокислот в пептиде по настоящему изобретению. Например, можно присоединить аминокислоту, пептид или его аналог. Если такое вещество присоединено к пептиду по настоящему изобретению, это вещество может подвергаться обработке, например, ферментом в живом организме или посредством процесса, такого как внутриклеточный процессинг, и, в конечном счете, аминокислотная последовательность, состоящая из 9 последовательных аминокислот, может продуцироваться и презентироваться как комплекс с молекулой HLA-A*1101 на поверхности клетки, тем самым приводя к эффекту индуцирования CTL. Таким веществом может быть вещество, которое модулирует растворимость пептида по настоящему изобретению или увеличивает его стабильность (устойчивость к протеазам, и т.д.). Альтернативно, это может быть вещество, которое специфически доставляет пептид по настоящему изобретению, например, к данной ткани или органу, или она может обладать способностью увеличивать эффективность поглощения с помощью антиген-презентирующей клетки или тому подобное. Таким может быть вещество, которое увеличивает способность индуцировать CTL, такое как пептид-помощник или тому подобное.
Пептид по настоящему изобретению может быть синтезирован способами, в основном используемыми в данной области или их вариантами. Такие способы описаны, например, в Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; Peptide-Gosei, Maruzen Co., Ltd., 1975; Peptide-Gosei No Kiso To Jikken, Maruzen Co., Ltd., 1985; и Iyakuhin No Kaihatsu (Zoku), Vol. 14, Peptide-Gosei, Hirokawa - Book store, 1991.
Пептид по настоящему изобретению может быть также получен с помощью методов генной инженерии, основанных на информации о нуклеотидной последовательности, которая кодирует пептид по настоящему изобретению. Такие методы генной инженерии хорошо известны специалистам в данной области.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к пептидному димеру, обладающему способностью связываться с молекулой HLA-A*1101 и индуцировать CTL, в котором два пептидных мономера, каждый включающий аминокислотную последовательность, состоящую из 9 последовательных аминокислот из белка WT1, и включающий по крайней мере один остаток цистеина, связаны друг с другом посредством дисульфидной связи (в настоящем описании обозначен как "пептидный димер WT1"). Стабильность пептидного димера по настоящему изобретению увеличивается по сравнению с таковой у пептидного мономера вследствие образования димера. Пептидным димером по настоящему изобретению является пептидный димер опухолевого антигена, который может индуцировать CTL благодаря презентации (с помощью антиген-презентирующей клетки) пептида, формирующегося в результате процессинга пептида по настоящему изобретению в клетке.
Пептидный димер по настоящему изобретению образуется путем связывания двух пептидных мономеров посредством дисульфидной связи между остатками цистеина, представленными в мономерах. Таким образом, каждый из пептидных мономеров, включенный в пептидный димер WT1 настоящего изобретения, представляет собой пептид WT1, как описано выше, и включает по крайней мере один остаток цистеина. Пептидный димер WT1 по настоящему изобретению может быть гомодимером или гетеродимером.
В пептидном димере WT1 по настоящему изобретению аминокислотная последовательность, входящая в состав пептидного мономера, предпочтительно представляет собой Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3), Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7), Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8) или Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9). Наиболее предпочтительно, последовательность представляет собой последовательность Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7).
Пептидный димер WT1 настоящего изобретения можно получить способами, известными в данной области. Например, если пептидные мономеры включают одну пару остатков цистеина, то пептидный димер WT1 по настоящему изобретению может быть получен, например, путем удаления всех защитных групп, включая группы на цистеиновых боковых цепях, и затем, подвергая полученный мономерный раствор окислению воздухом в щелочной среде, либо добавлением оксиданта в щелочной или кислой среде до образования дисульфидной связи. Примеры оксидантов включают йод, диметилсульфоксид (DMSO) и гексацианожелезокислый калий.
Если каждый из пептидных мономеров включает два или более остатка цистеина, то пептидный димер WT1 по настоящему изобретению можно также получить способом, описанным выше. В этом случае, изомеры получают за счет разных типов дисульфидных связей. Альтернативно, пептидный димер WT1 по настоящему изобретению можно получить путем выбора комбинации защитных групп для цистеиновых боковых цепей. Примеры комбинаций защитных групп включают комбинации MeBzl (метилбензиловую) группы и Acm (ацетамидметиловую) группу, Trt (тритильную) группу и Acm группу, Npys (3-нитро-2-пиридилтио) группу и Acm группу, и S-Bu-t (S-трет-бутиловую) группу и Acm группу. Например, в случае комбинации MeBzl группы и Acm группы, пептидный димер WT1 можно получить путем удаления защитных групп, отличных от MeBzl группы и защитной группы на цистеиновой боковой цепи, подвергая полученный мономерный раствор окислению воздухом до образования дисульфидной связи между защищенными цистеиновыми остатками, и затем депротекцией и окислением, с применением йода до образования дисульфидной связи между остатками цистеина, предварительно защищенными Acm.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения и профилактики рака, включающей HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1 и/или пептидный димер WT1. Ген WT1 экспрессируется на высоком уровне при разных видах рака и опухолей, включая гематопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома и солидные раки, такие как рак желудка, рак толстой кишки, рак легкого, рак молочной железы, герминогенный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Следовательно, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может использоваться для лечения или профилактики рака. Если фармацевтическая композиция по настоящему изобретению вводится HLA-A*1101-позитивному индивиду, то индуцируются WT1-специфичные CTL с помощью HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 или пептидного димера, включенных в фармацевтическую композицию, и при помощи таких CTL раковые клетки у индивида повреждаются.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может включать, кроме HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1 в качестве активных ингредиентов, например, носитель, эксципиент или тому подобное. HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1 или пептидный димер WT1, включенный в фармацевтическую композицию по настоящему изобретению, индуцирует WT1-специфичный CTL. Таким образом, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать соответствующий адьювант или может использоваться вместе с соответствующим адьювантом для усиления эффективности индукции. Примеры предпочтительных адьювантов включают, но ими не ограничиваются, полный или неполный адьювант Фрейнда и гидроокись алюминия.
Способ использования фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть соответствующим образом выбран, в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние индивида или участок-мишень. Примеры таких способов включают, но ими не ограничиваются, внутрикожное введение, подкожное введение, внутривенное введение, назальное применение и пероральное введение. Количество пептида или димера пептидного, включенного в фармацевтическую композицию по настоящему изобретению, а также лекарственная форма, количество введений и тому подобное фармацевтической композиции по изобретению можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние индивида или участок-мишень. Единичная доза пептида составляет обычно 0,0001 мг-1000 мг, предпочтительно, 0,001 мг-1000 мг.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения и профилактики рака, включающему введение эффективного количества пептида WT1 и/или пептидного димера WT1 HLA-A*1101-позитивному индивиду. Рак, на который направлено лечение или профилактика, может быть любым, и примеры рака включают гематопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома и солидных раков, такие как рак желудка, рак толстой кишки, рак легкого, рак молочной железы, герминогенный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
В дополнительном аспекте, настоящее изобретение относится к способу определения наличия или количества WT1-специфичного CTL у HLA-A*1101-позитивного индивида, включающий:
(a) взаимодействие комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101 с образцом индивида; и
(b) определение наличия и/или количества CTL, распознающего комплекс, содержащийся в образце. Образец индивида может быть любым при условии, что существует вероятность, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают жидкость организма, такую как кровь или лимфу, и ткань. Комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101 может быть получен, например, в виде тетрамера или пентамера с применением способа, известного специалисту в данной области, такого как биотин-стрептавидин способ. Наличие и количество CTL, распознающего такой комплекс, может быть измерено способом, известным специалисту в данной области. В этом аспекте настоящего изобретения комплекс может быть помечен. В качестве метки может использоваться известная метка, такая как флуоресцентная метка или радиоактивная метка. Мечение делает определение наличия и количества CTL легким и быстрым.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к композиции для определения наличия и количества WT1-специфичного CTL у HLA-A*1101-позитивного индивида, включающей HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1.
Кроме того, настоящее изобретение относится к набору для определения наличия или количества WT1-специфичного CTL у HLA-A*1101-позитивного индивида, содержащему HLA-A*1101- ограниченный пептид WT1.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу получения WT1-специфичного CTL с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101, включающему:
(a) взаимодействие комплекса и образца; и
(b) получение CTL, распознающего комплекс, содержащийся в образце. Комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101 описан выше. Образец может быть любым при условии, что существует вероятность, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают образец, полученный у индивида, такой как кровь, и культуру клеток. CTL, распознающий комплекс, может быть получен с использованием способа, известного специалисту в данной области, такого как FACS или MACS. Настоящее изобретение позволяет культивировать полученный WT1-специфичный CTL и использовать его для лечения или профилактики разных типов рака.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к WT1-специфичному CTL, получаемому способом получения WT1-специфичного CTL, с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к полинуклеотиду, кодирующему HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1. Полинуклеотидом по настоящему изобретению может быть ДНК или РНК. Последовательность нуклеотидов настоящего изобретения может быть определена на основе аминокислотной последовательности HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1. Этот полинуклеотид может быть получен известным способом синтеза ДНК или РНК (например, химическим синтетическим методом), методом ПЦР или тому подобное.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к вектору экспрессии, содержащему этот полинуклеотид. Тип вектора экспрессии, включенную последовательность, отличную от последовательности полинуклеотида, и тому подобное можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от типа хозяина, в котором продуцируется вектор экспрессии по настоящему изобретению, цели применения или тому подобное. Возможно лечение и профилактика гематопоэтических опухолей или солидных раков с помощью введения вектора экспрессии настоящего изобретения HLA-A*1101-позитивному индивиду для продуцирования HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 в живом организме и индукции WT1-специфичного CTL, и повреждения клеток гематопоэтической опухоли или клеток солидного рака у индивида.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения и профилактики рака, содержащей полинуклеотид или вектор экспрессии. Эта композиция, способ использования и тому подобное фармацевтической композиции настоящего изобретения в этом аспекте описаны выше.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения и профилактики рака, включающему введение эффективного количества полинуклеотида или вектора экспрессии HLA-A*1101-позитивному индивиду. Примеры типов рака для лечения и профилактики включают гематопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидных раков, таких как рак желудка, рак толстой кишки, рак легкого, рак молочной железы, герминогенный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к клетке, содержащей вектор экспрессии. Клетка по настоящему изобретению может быть получена, например, путем трансформирования клетки-хозяина, такой как E. coli, дрожжей, клетки насекомого или клетки животного, вектором экспрессии. Способ введения вектора экспрессии в клетку-хозяина можно соответствующим образом выбрать из нескольких способов. Пептид по настоящему изобретению может быть получен путем культивирования трансформированной клетки и выделения и очищения получаемого пептида WT1.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к WT1-специфичному CTL, который индуцируется с помощью HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1. CTL по настоящему изобретению распознает комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-A*1101. Таким образом, CTL по настоящему изобретению может использоваться для специфического повреждения клеток опухоли, позитивной по HLA-A*1101, и экспрессии WT1 на высоком уровне.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения и профилактики рака, включающему введение WT1-специфичного CTL HLA-A*1101-позитивному индивиду. Этот способ применения WT1-специфичного CTL можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние индивида или участок-мишень. Примеры таких способов включают, но ими не ограничиваются, внутривенное введение, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, назальное применение и пероральное введение.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу индукции WT1-специфичного CTL, включающему культивирование мононуклеарной клетки периферической крови в присутствии HLA-А*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1 для индукции WT1-специфичного CTL из мононуклеарной клетки периферической крови. Индивид, у которого получают мононуклеарную клетку периферической крови, может быть любым, при условии, что он позитивен по HLA-A*1101. С помощью культивирования мононуклеарных клеток периферической крови в присутствии НLА-А*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1, индуцируются WT1-специфичные CTL из клеток-предшественников CTL, содержащихся в мононуклеарных клетках периферической крови. Возможно лечение и профилактика гематопоэтических опухолей или солидных раков у HLA-A*1101-позитивных индивидов с помощью введения индивиду WT1-специфичного CTL, полученного в соответствии с настоящим изобретением.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для индукции WT1-специфичного CTL, содержащему HLA-A*1101-ограниченный пептид WT1 и/или пептидный димер WT1 в качестве основного компонента. Предпочтительно, этот набор используется в способе индукции WT1-специфичного CTL. Набор по настоящему изобретению может включать кроме HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1, например, средство для получения мононуклеарной клетки периферической крови, адьювант, реакционный сосуд или тому подобное. Как правило, к набору прилагается инструкция по применению. Используя набор по настоящему изобретению, можно эффективно индуцировать WT1-специфичные CTL.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к антиген-презентирующей клетке (такой как дендритная клетка), презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, которая индуцируется с помощью HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1. При применении антиген-презентирующей клетки настоящего изобретения эффективно индуцируются WT1-специфичные CTL.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения и профилактики рака, включающему введение антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, HLA-A*1101-позитивному индивиду. Способ использования антиген-презентирующей клетки можно соответствующим образом выбрать в зависимости от условий, таких как тип заболевания, состояние индивида или участок-мишень. Примеры таких способов включают, но не ограничиваются таковыми, внутривенное введение, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, назальное применение и оральное введение.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу интродукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, включающему культивирование незрелой антиген-презентирующей клетки в присутствии HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 и/или пептидного димера WT1 для индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101 из незрелой антиген-презентирующей клетки. Незрелой антиген-презентирующей клеткой именуется клетка, такая как незрелая дендритная клетка, которая может преобразоваться в антиген-презентирующую клетку. Индивид, от которого получена незрелая антиген-презентирующая клетка, может быть любым, при условии, что он является позитивным по HLA-A*1101. Поскольку незрелые антиген-презентирующие клетки содержатся, например, в мононуклеарных клетках периферической крови, такие клетки могут культивироваться в присутствии пептида WT1 и/или пептидного димера WT1.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к набору для индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, включающему HLA-A*1101-ограниченный WT1 пептид WT1 и/или пептидный димер WT1 как существенный компонент. Предпочтительно, чтобы набор применялся в способе индукции антиген-презентирующей клетки. Другой компонент, который должен включаться в набор настоящего изобретения и тому подобное, описаны выше. Набор настоящего изобретения может применяться для эффективной индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к антителу против HLA-A*1101-ограниченного пептида WT1 или полинуклеотида, кодирующего этот пептид. Антитело настоящего изобретения может быть поликлональным или моноклональным антителом.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу диагностики рака, включающему применение WT1-специфичного CTL, антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, или антитела против HLA-A-ограниченного пептида WT1 или полинуклеотида, кодирующего этот пептид. Предпочтительно, чтобы WT1-специфичный CTL применялся в способе диагностики настоящего изобретения. Например, возможно, диагностика рака с помощью инкубации CTL, антиген-презентирующей клетки или антитела с образцом от HLA-A*1101-позитивного индивида, или введения этого HLA-A*1101-позитивному индивиду и определения, например, положения, сайта или количества такового. CTL, антиген-презентирующая клетка или антитело могут быть помечены. Присоединяя метку, можно эффективно использовать на практике способ для диагностики настоящего изобретения.
Примеры
Следующие примеры более детально иллюстрируют настоящее изобретение, но они не должны быть истолкованы как ограничивающие диапазон его применения.
Пример 1: Выбор пептида WT1
RANKPEP
(http://bio.dfci.harvard.edu/Tools/rankpep.html) применялась для выбора WT1251, WT1279, WT1312, WT1313, WT1338, WT1378, WT1386, WT1415 и WT1436, обладающих высокой способностью связываться с молекулой HLA-A*1101, полученной из пептидов из белка WT1 (SEQ ID NO:1). Аминокислотные последовательности, число аминокислот в SEQ ID NO:1 и показатели афинности к молекуле HLA-A*1101 у этих пептидов представлены в Таблице 1.
| [Таблица 1] | |||
| Пептид | Число аминокислот | Аминокислотная последовательность | Показатель афинности |
| WT1251 (SEQ ID NO:2) |
251-259 | AAGSSSSVK | 15,18 |
| WT1279 (SEQ ID NO:3) |
279-287 | PILCGAQYR | 11,47 |
| WT1312 (SEQ ID NO:4) |
312-320 | RSASETSEK | 14,96 |
| WT1313 (SEQ ID NoO:5) |
313-321 | SASETSEKR | 6,87 |
| WT1338 (SEQ ID NO:6) |
338-346 | SHLQMHSRK | 13,72 |
| WT1378 (SEQ ID NO:7) |
378-386 | TGVKPFQCK | 11,33 |
| WT1386 (SEQ ID NO:8) |
386-394 | KTCQRKFSR | 13,82 |
| WT1415 (SEQ ID NO:9) |
415-423 | SCRWPSCQK | 10,29 |
| WT1436 (SEQ ID NO:10) |
436-444 | NMHQRNMTK | 14,19 |
Получение B-LCL клетки
Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMCs) выделялись с помощью метода центрифугирования в градиенте плотности на основе фиколла (Ficoll-Hypaque) из периферической крови, забранной у HLA-A*1101-позитивного здорового донора. PBMCs высевались в 24-луночный планшет для клеточных культур с плотностью приблизительно 1×107 в среде RPMI 1640, содержащей 10% ФТС (FCS), с добавлением культурального супернатанта клеток B95-8 (клетки, продуцирующие EB вирус). Они культивировались при 37°C с 5% CO2 приблизительно 1 месяц. Были получены B-LCL клетки, трансформированные вирусом EB, которые являлись B-клеточными опухолевыми клетками. Было подтверждено, что полученные B-LCL клетки не экспрессировали ген WT1. B-LCL клетки пульсировали при помощи инкубирования их с 20 мкг/мл WT1251, WT1279, WT1312, WT1313, WT1338, WT1378, WT1386, WT1415 или WT1436 в течение 2 часов, и облучали при 80 Гр радиации. Полученные в результате B-LCL клетки (далее именуемые как B-LCL клетки, пульсированные пептидом WT1) использовали как антигенпрезентирующие клетки для последующих экспериментов.
Индукция WT1-специфичного CTL
3×106 аутологических PBMCs культивировали в 24-луночном планшете для клеточных культур в полной среде (45% RPMI, 45% AMI-V среда и 10% сыворотка AB человека), содержащей 20 мкг/мл WT1251, WT1279, WT1312, WT1313, WT1338, WT1378, WT1386, WT1415 или WT1436 при 37°C с 5% CO2 в течение 1 недели для получения отвечающих клеток. 2×106 полученных отвечающих клеток культивировали вместе с 1×106 B-LCL клетками, пульсированными тем же пептидом WT1 в полной среде в течение 1 недели (первая стимуляция). PBMCs кокультивировали с B-LCL клетками, пульсированными пептидом WT1, еще три раза (со второй по четвертую стимуляции) при условиях, при которых добавляли 20 IU/мл (конечная концентрация) IL2 следующим образом: вторая стимуляция: два раза через день через 3 дня после инициирования стимуляции; третья и четвертая стимуляции: три раза с интервалом в один день через день после инициирования стимуляции. Полученные клетки концентрировали, используя набор Negative Selection Columns Gravity Feed (StemSp), так что соотношение CD8-позитивных T-клеток становилось равным приблизительно 80%, и кокультивировали с B-LCL клетками, пульсированными пептидом WT1 (пятая стимуляция). Для измерения цитоксической активности применялись CD8-позитивные T-клетки (CTLs), полученные через 5 дней после финальной стимуляции.
Цитоксическая активность CTL
Цитоксическая активность CTLs измерялась с использованием теста с высвобождением 51Cr. CTL клетки (далее именуемые эффекторные клетки) смешивали в соотношении (E/T отношение) от 1:1 до 30:1 в 200 мкл среды с клетками-мишенями, в которые инкорпорировался 51Cr, и культивировали в 96-луночном планшете для клеточных культур при 37°C с 5% CO2 в течение 4 часов. B-LCL клетки, пульсированные тем же пептидом WT1, который применялся для индукции CTLs (BLCL-Ps), и B-LCL клетки без пульсирования пептидом WT1 (BLCL-NPs) использовались как клетки-мишени. После культивирования, с помощью центрифугирования собирали супернатанты. Количеств 51Cr, высвобожденного в супернатанты, измеряли с применением жидкостных сцинтиляционных счетчиков. Цитоксическая активность (%) определялась по следующей формуле:
(Высвобождение 51Cr в супернатант образца - Спонтанное высвобождение 51Cr)/(Максимальное высвобождение 51Cr - Спонтанное высвобождение 51Cr)×100,
где Спонтанное высвобождение 51Cr есть высвобождение 51Cr, наблюдаемое, когда клетки-мишени, в которые инкорпорировался 51Cr, культивировали отдельно при тех же условиях, а Максимальное высвобождение 51Cr есть высвобождение 51Cr, наблюдаемое, когда клетки-мишени, в которые инкорпорировался 51Cr, были полностью лизированы с применением 1% Тритона X-100.
Результаты показаны на Фиг.1-9. На этих фигурах, вертикальной оси представляют специфический лизис (%), а горизонтальные оси представляют E/T отношения. BLCL-P изображены сплошными линиями, а BLCL-NP представлены линиями, состоящими из точек. Было подтверждено, что CTL, индуцированные WT1251, WT1279, WT1312, WT1313, WT1338, WT1378, WT1386, WT1415 или WT1436, специфично повреждают BLCL-P, презентирующие пептид WT1 как комплекс с молекулой HLA-A*1101, при сравнении с BLCL-NP. CTL, индуцированные WT1251, WT1279, WT1313, WT1338 или WT1386, применяли для дополнительных экспериментов ниже.
Цитоксическая активность CTL против клетки, эндогенно-экспрессирующей WT1
Цитоксическая активность CTL, индуцированных WT1251, WT1279, WT1313, WT1338 или WT1386, против B-LCL, экспрессирующих WT1, определялась способом, описанным выше. Клетка, экспрессирующая WT1, относится к B-LCL, в которую внесен ген WT1 человека и которая экспрессирует белок WT1 в клетке, и представляет пептид, состоящий приблизительно из 9 аминокислот, полученных в результате процессинга молекулы HLA-A*1101. Результаты показаны на Фиг.1, 2, 4, 5 и 7. На Фигурах, B-LCLs, экспрессирующие WT1, изображены пунктирными линиями. Было подтверждено, что CTL, индуцированные WT1251, WT1279, WT1313, WT1338 или WT1386, обладают цитоксической активностью против клеток, эндогенно-экспрессирующих ген WT1.
Приготовление пептидного димера WT1
Смесь из 227,5 мг WT1378 пептидного мономера, 227,5 мг N-метилглукамин (NMG) и 23 мл воды окисляли воздухом с помощью перемешивания при комнатной температуре приблизительно в течение 2 дней. К полученной смеси добавляли водный раствор 2 г натрия ацетата в 5 мл воды и смесь перемешивали при комнатной температуре приблизительно в течение 20 минут. К полученному раствору добавляли 200 мл воды и около 200 мл ацетонитрила и смесь фильтровали через воронку Кирияма (фильтровальная бумага №5C) и промывали водой (около 50 мл×3). К остатку добавляли около 200 мл воды и остаток лиофилизировали для получения 158 мг неочищенного WT1378 пептидного димера.
Очищение неочищенного пептидного димера WT1
158 мг неочищенного WT1378 пептидного димера растворяли в 9 мл DMSO и инжектировали в ODS C18 колонку (5 cm Φ × 50 cm L, YMC Co., LTD.), соединенную с ВЭЖХ (HPLC) (Shimadzu, LC8AD тип), и калибровали раствором 1 (H2O/1% AcOH) с применением ВЭЖХ (HPLC) насоса. Колонку оставляли приблизительно на 30 минут и элюировали в градиенте концентрации раствора 2 от 0% до 40% (CH3CN/1% AcOH) свыше 360 минут. Фракции, содержащие пептидный димер WT1, собирали с помощью автоматического коллектора фракций, при УФ мониторинге абсорбции при 220 нм. Собранные фракции объединяли, инжектировали в ODS C18 колонку (4,6 mm Φ × 25 cm L, YMC Co., LTD.), соединенную с ВЭЖХ (Hitachi, L-4000 тип), калибровали с помощью 17% раствора 2 и элюировали в градиенте концентрации раствора 2 от 0% до 47% свыше 30 минут для получения 46,6 мг очищенного WT1378 пептидного димера при времени удерживания 20,51 минуты.
FAB.MS 2365,0 (теоретическое значение (theoretical value): 2342,70) Na+ F=0,25%
Индукция CTL с помощью пептидного димера WT1
Способность полученного в результате WT1378 пептидного димера, WT1378 пептида, модифицированного WT1378 пептида (G → I) (SEQ ID NO:11) и модифицированного WT1378 пептида (G → V) (SEQ ID NO:12), а также WT1379 пептида (SEQ ID NO:13, как раскрывается в WO 2002/28414), индуцировать CTL, были изучены с применением PBMCs от HLA-A*1101-позитивных здоровых доноров 1-3 в соответствии со способом, описанным выше. Результаты показаны на Фиг.10-14. На этих фигурах вертикальные оси представляют специфический лизис (%), а горизонтальные оси представляют E/T отношение. BLCL-Ps изображены сплошными линиями, а BLCL-NPs представлены линиями, состоящими из точек. Было подтверждено, что WT1378 пептидный димер обладает способностью индуцировать CTL. Кроме того, было обнаружено, что способность каждого WT1379 пептида, аминокислотная последовательность которого отличается от таковой у WT1378 пептида на одну аминокислоту в одной аминокислотной последовательности белка WT1, индуцировать CTL намного ниже, чем таковая у WT1378 пептида, и, таким образом, пептид WT1 настоящего изобретения обладает отличным и неожиданным эффектом по сравнению с известным пептидом.
Промышленная применимость
Настоящее изобретение относится к HLA-A*1101-ограниченному пептиду WT1, полинуклеотиду, кодирующему этот пептид, фармацевтической композиции, содержащей этот пептид, и тому подобное. Следовательно, настоящее изобретение может использоваться в медицине и тому подобному, например, в области разработки и получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения различных гематопоэтических опухолей и солидных раков, которые экспрессируют ген WT1 на высоком уровне.
Свободный текст перечня последовательностей
SEQ ID NO:11: Модифицированный пептид WT1
SEQ ID NO:12: Модифицированный пептид WT1.
Claims (14)
1. Пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, которая выбрана из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6) или
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
где пептид способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6) или
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
где пептид способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
2. Пептидный димер, состоящий из пептидных мономеров (1) и (2), которые связаны между собой дисульфидной связью:
(1) пептидный мономер, состоящий из аминокислотной последовательности:
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
(2) пептидный мономер, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3),
Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8) или
Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9),
где пептидный димер способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
(1) пептидный мономер, состоящий из аминокислотной последовательности:
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
(2) пептидный мономер, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3),
Lys Thr Cys Gln Arg Lys Phe Ser Arg (SEQ ID NO:8) или
Ser Cys Arg Trp Pro Ser Cys Gln Lys (SEQ ID NO:9),
где пептидный димер способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
3. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101, содержащая пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, которая выбрана из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5), и/или пептидный димер по п.2.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5), и/или пептидный димер по п.2.
4. Применение пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, которая выбрана из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
и/или пептидного димера по п.2 для получения лекарственного средства для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-А*1101.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
и/или пептидного димера по п.2 для получения лекарственного средства для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-А*1101.
5. Полинуклеотид, кодирующий пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, которая выбрана из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6), и
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
где пептид способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6), и
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
где пептид способен связываться с молекулой HLA-A*1101 и способен индуцировать CTL.
6. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п.5.
7. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101, содержащая полинуклеотид, кодирующий пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
или вектор, содержащий указанный полинуклеотид.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
или вектор, содержащий указанный полинуклеотид.
8. Применение полинуклеотида, кодирующего пептид, который состоит из аминокислотной последовательности, которая выбрана из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
или вектора, содержащего указанный полинуклеотид, для получения лекарственного средства для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
или вектора, содержащего указанный полинуклеотид, для получения лекарственного средства для лечения или профилактики рака у индивида, позитивного по HLA-A*1101.
9. WT1-специфичный CTL, который индуцируется in vitro с помощью пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5).
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) или
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5).
10. Способ in vitro индукции WT1-специфичного CTL, включающий культивирование мононуклеарной клетки периферической крови, полученной от индивида, позитивного по HLA-A*1101, в присутствии пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
для индукции WT1-специфичного CTL из мононуклеарной клетки периферической крови.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
для индукции WT1-специфичного CTL из мононуклеарной клетки периферической крови.
11. Антиген-презентирующая клетка, презентирующая пептид WT1 посредством молекулы HLA-A*1101, которая индуцируется in vitro посредством пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5).
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5).
12. Способ индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1, предусматривающий культивирование незрелой антиген-презентирующей клетки, полученной у индивида, позитивного по HLA-А*1101, в присутствии пептида, состоящего из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
для индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1, из незрелой антиген-презентирующей клетки.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
для индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1, из незрелой антиген-презентирующей клетки.
13. Набор для индукции WT1-специфичного CTL и для индукции антиген-презентирующей клетки, презентирующей пептид WT1, содержащий в качестве основного компонента пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из:
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
и/или пептидный димер по п.2, и инструкцию по применению.
Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys (SEQ ID NO:6),
Thr Gly Val Lys Pro Phe Gln Cys Lys (SEQ ID NO:7),
Pro Ile Leu Cys Gly Ala Gln Tyr Arg (SEQ ID NO:3) и
Ser Ala Ser Glu Thr Ser Glu Lys Arg (SEQ ID NO:5),
и/или пептидный димер по п.2, и инструкцию по применению.
14. Способ in vitro диагностики рака у индивида, позитивного по HLA-А*1101, отличающийся тем, что предусматривает инкубирование CTL по п.9 или антиген-презентирующей клетки по п.11 с образцом, полученным у индивида, позитивного по HLA-A*1101, и определение количества указанной CTL или антиген-презентирующей клетки.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006355356 | 2006-12-28 | ||
| JP2006-355356 | 2006-12-28 | ||
| PCT/JP2007/074146 WO2008081701A1 (ja) | 2006-12-28 | 2007-12-14 | Ｈｌａ－ａ＊１１０１拘束性ｗｔ１ペプチド、およびそれを含む医薬組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009128979A RU2009128979A (ru) | 2011-02-10 |
| RU2481398C2 true RU2481398C2 (ru) | 2013-05-10 |
Family
ID=39588385
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009128979/10A RU2481398C2 (ru) | 2006-12-28 | 2007-12-14 | Hla-a*1101-ограниченный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US8653038B2 (ru) |
| EP (6) | EP2980219B1 (ru) |
| JP (1) | JP5484734B2 (ru) |
| KR (1) | KR101525261B1 (ru) |
| CN (5) | CN101573448B (ru) |
| AR (1) | AR064555A1 (ru) |
| AU (1) | AU2007340679B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0720988A2 (ru) |
| CA (5) | CA2886620A1 (ru) |
| CY (1) | CY1116011T1 (ru) |
| DK (3) | DK2479276T3 (ru) |
| ES (4) | ES2629578T3 (ru) |
| HK (3) | HK1159686A1 (ru) |
| IL (4) | IL199052A0 (ru) |
| MX (1) | MX2009007008A (ru) |
| MY (1) | MY161664A (ru) |
| NO (1) | NO20092774L (ru) |
| NZ (4) | NZ592509A (ru) |
| PH (1) | PH12014500902B1 (ru) |
| PL (1) | PL2341142T3 (ru) |
| PT (1) | PT2341142E (ru) |
| RU (1) | RU2481398C2 (ru) |
| SG (1) | SG177222A1 (ru) |
| SI (1) | SI2341142T1 (ru) |
| TW (3) | TWI599367B (ru) |
| UA (1) | UA103154C2 (ru) |
| WO (1) | WO2008081701A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA200903633B (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2668560C2 (ru) * | 2013-03-29 | 2018-10-02 | Сумитомо Дайниппон Фарма Ко., Лтд. | Конъюгированная вакцина на основе пептида антигена wt1 |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100513563C (zh) | 2003-11-05 | 2009-07-15 | 株式会社国际癌症免疫研究所 | Wt1衍生的hla-dr-结合抗原肽 |
| EP2565201B1 (en) | 2005-10-17 | 2014-11-26 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | WT1 HLA class II-binding peptides and compositions and methods comprising same |
| EP3834836A1 (en) | 2006-04-10 | 2021-06-16 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic wt-1 peptides and uses thereof |
| DK2119778T3 (en) | 2007-02-27 | 2016-01-25 | Int Inst Cancer Immunology Inc | A process for the activation of the helper T cell, and composition for use in this process |
| KR20140009168A (ko) * | 2010-10-05 | 2014-01-22 | 인터내셔널 인스티튜트 오브 캔서 이무놀로지 인코퍼레이티드 | 헬퍼 ｔ 세포의 활성화 방법 |
| US9074000B2 (en) * | 2011-04-01 | 2015-07-07 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | T cell receptor-like antibodies specific for a WT1 peptide presented by HLA-A2 |
| CA2846479A1 (en) | 2011-09-14 | 2013-03-21 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Method for measuring anti-wt1 antibody |
| CA2861206C (en) | 2012-01-13 | 2021-07-06 | Richard J. O'reilly | Immunogenic wt-1 peptides and methods of use thereof |
| EP2896693A4 (en) | 2012-09-12 | 2016-10-12 | Int Inst Cancer Immunology Inc | ANTIGEN SPECIFIC HELPER T CELL RECEPTOR GENES |
| WO2014093118A1 (en) | 2012-12-11 | 2014-06-19 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Methods for high throughput receptor:ligand identification |
| MX2015007745A (es) * | 2012-12-17 | 2015-12-15 | Otsuka Pharma Co Ltd | Metodo para activar la celula t auxiliar. |
| CN105377291B (zh) | 2013-01-15 | 2019-04-02 | 纪念斯隆凯特林癌症中心 | 免疫原性wt-1肽和其使用方法 |
| US10815273B2 (en) | 2013-01-15 | 2020-10-27 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
| US10071051B2 (en) | 2013-02-05 | 2018-09-11 | Nitto Denko Corporation | WT1 peptide cancer vaccine composition for transdermal administration |
| CN103961698A (zh) | 2013-02-05 | 2014-08-06 | 日东电工株式会社 | 经皮或粘膜给予用疫苗组合物 |
| CA2841014A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-05 | Nitto Denko Corporation | Tape preparation of wt1 peptide cancer vaccine for transdermal administration |
| KR20140100419A (ko) | 2013-02-05 | 2014-08-14 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 경피 투여용 ｗｔ1 펩티드 암 백신 조성물 |
| US20140220056A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-07 | Nitto Denko Corporation | Vaccine composition for transdermal administration |
| JP6473292B2 (ja) | 2013-02-05 | 2019-02-20 | 日東電工株式会社 | ワクチン組成物 |
| CN103961702B (zh) | 2013-02-05 | 2019-04-09 | 日东电工株式会社 | 粘膜给予用wt1肽癌症疫苗组合物 |
| CA2840974A1 (en) | 2013-02-05 | 2014-08-05 | Nitto Denko Corporation | Vaccine composition for mucosal administration |
| WO2014157704A1 (ja) * | 2013-03-29 | 2014-10-02 | 大日本住友製薬株式会社 | Ｅｒａｐ１によるトリミング機能をきっかけとしたコンジュゲートワクチン |
| CA2970236A1 (en) * | 2014-12-11 | 2016-06-16 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Compositions comprising wt1 peptide for immunotherapy of angiogenic disease |
| BR112018073606A2 (pt) | 2016-05-18 | 2019-02-26 | Cue Biopharma, Inc. | polipeptídeos multiméricos moduladores de células t e métodos de uso dos mesmos |
| JP2019522466A (ja) | 2016-05-18 | 2019-08-15 | アルバート アインシュタイン カレッジ オブ メディシン，インコーポレイティド | 変異ｐｄ−ｌ１ポリペプチド、ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びそれらの使用方法 |
| CN116970061A (zh) | 2016-12-22 | 2023-10-31 | 库尔生物制药有限公司 | T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法 |
| WO2018129474A1 (en) | 2017-01-09 | 2018-07-12 | Cue Biopharma, Inc. | T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof |
| EP3596118A4 (en) | 2017-03-15 | 2021-04-07 | Cue Biopharma, Inc. | PROCESSES FOR MODULATING AN IMMUNE RESPONSE |
| CN111741972A (zh) * | 2017-12-27 | 2020-10-02 | 大日本住友制药株式会社 | Wt1衍生肽的缀合物和包含其的组合物 |
| EP3737689A4 (en) | 2018-01-09 | 2021-12-01 | Cue Biopharma, Inc. | MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF |
| EP4151227A1 (en) * | 2020-05-12 | 2023-03-22 | Sumitomo Pharma Co., Ltd. | Pharmaceutical composition for treating cancer |
| CA3169949A1 (en) | 2020-05-12 | 2021-11-18 | Cue Biopharma, Inc. | Multimeric t-cell modulatory polypeptides and methods of use thereof |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001062920A2 (en) * | 2000-02-22 | 2001-08-30 | Corixa Corporation | Compositions and methods for diagnosis and therapy of malignant mesothelioma |
| WO2003105855A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-12-24 | Merck & Co., Inc. | Mitotic kinesin inhibitors |
| RU2237674C2 (ru) * | 1998-09-30 | 2004-10-10 | Корикса Корпорейшн | Композиции и способы wt1-специфичной иммунотерапии |
| EA005140B1 (ru) * | 1999-04-02 | 2004-12-30 | Корикса Корпорейшн | Соединения и способы для лечения и диагностики рака легкого |
| US7144581B2 (en) * | 2000-10-09 | 2006-12-05 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
Family Cites Families (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4575374A (en) * | 1983-02-16 | 1986-03-11 | Anis Aziz Y | Flexible anterior chamber lens |
| US5763209A (en) | 1988-09-26 | 1998-06-09 | Arch Development Corporation | Methods and materials relating to the functional domains of DNA binding proteins |
| US5584304A (en) * | 1993-11-18 | 1996-12-17 | Allergan, Inc. | Method of inserting an IOL using a forceps inside a folding tube |
| US5595756A (en) * | 1993-12-22 | 1997-01-21 | Inex Pharmaceuticals Corporation | Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents |
| US5984962A (en) * | 1996-01-22 | 1999-11-16 | Quantum Vision, Inc. | Adjustable intraocular lens |
| US6207375B1 (en) * | 1996-12-11 | 2001-03-27 | Mayo Foundation For Medical Educational & Research | TGF-β inducible early factor-1 (TIEF-1) and a method to detect breast cancer |
| US7063854B1 (en) * | 1998-09-30 | 2006-06-20 | Corixa Corporation | Composition and methods for WTI specific immunotherapy |
| US7115272B1 (en) | 1998-09-30 | 2006-10-03 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7901693B2 (en) | 1998-09-30 | 2011-03-08 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US20030039635A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-02-27 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US7655249B2 (en) * | 1998-09-30 | 2010-02-02 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US20030072767A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-04-17 | Alexander Gaiger | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| US20030235557A1 (en) * | 1998-09-30 | 2003-12-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| AU7859900A (en) * | 1999-10-04 | 2001-05-10 | Corixa Corporation | Compositions and methods for wt1 specific immunotherapy |
| US20030082194A1 (en) * | 2000-02-22 | 2003-05-01 | Alexander Gaiger | Compositions and methods for diagnosis and therapy of malignant mesothelioma |
| US20040097703A1 (en) * | 2001-03-22 | 2004-05-20 | Haruo Sugiyama | Wt1 modified peptide |
| IL145015A0 (en) * | 2001-08-21 | 2002-06-30 | Nun Yehoshua Ben | Accommodating lens |
| US7553494B2 (en) * | 2001-08-24 | 2009-06-30 | Corixa Corporation | WT1 fusion proteins |
| JP4365784B2 (ja) | 2002-06-12 | 2009-11-18 | 株式会社癌免疫研究所 | Ｈｌａ−ａ２４拘束性癌抗原ペプチド |
| SE0201863D0 (en) * | 2002-06-18 | 2002-06-18 | Cepep Ab | Cell penetrating peptides |
| KR101399678B1 (ko) | 2003-01-15 | 2014-05-27 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이량체화 펩티드 |
| US7976520B2 (en) * | 2004-01-12 | 2011-07-12 | Nulens Ltd. | Eye wall anchored fixtures |
| US7622119B2 (en) | 2004-03-31 | 2009-11-24 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Cancer antigen peptides derived from WT1 |
| JP2006045287A (ja) | 2004-08-02 | 2006-02-16 | Inax Corp | 弾性接着剤及びタイル張り壁面 |
| JP4719876B2 (ja) * | 2005-04-04 | 2011-07-06 | 国立大学法人愛媛大学 | Ｈｌａクラスｉｉ拘束性ｗｔ１抗原ペプチド |
| WO2010037395A2 (en) * | 2008-10-01 | 2010-04-08 | Dako Denmark A/S | Mhc multimers in cancer vaccines and immune monitoring |
-
2007
- 2007-12-14 EP EP15181734.3A patent/EP2980219B1/en not_active Not-in-force
- 2007-12-14 CN CN2007800487491A patent/CN101573448B/zh active Active
- 2007-12-14 EP EP15201329.8A patent/EP3026115B1/en not_active Not-in-force
- 2007-12-14 CN CN201110235501.4A patent/CN102335439B/zh active Active
- 2007-12-14 CA CA 2886620 patent/CA2886620A1/en not_active Abandoned
- 2007-12-14 ES ES15201329.8T patent/ES2629578T3/es active Active
- 2007-12-14 SG SG2011094588A patent/SG177222A1/en unknown
- 2007-12-14 EP EP12164856.2A patent/EP2479276B1/en not_active Not-in-force
- 2007-12-14 DK DK12164856.2T patent/DK2479276T3/en active
- 2007-12-14 CA CA 2886621 patent/CA2886621A1/en not_active Abandoned
- 2007-12-14 AU AU2007340679A patent/AU2007340679B2/en not_active Ceased
- 2007-12-14 RU RU2009128979/10A patent/RU2481398C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-12-14 ES ES12164856.2T patent/ES2556831T3/es active Active
- 2007-12-14 EP EP10191234.3A patent/EP2341142B8/en not_active Not-in-force
- 2007-12-14 NZ NZ592509A patent/NZ592509A/xx not_active IP Right Cessation
- 2007-12-14 WO PCT/JP2007/074146 patent/WO2008081701A1/ja active Application Filing
- 2007-12-14 PL PL10191234T patent/PL2341142T3/pl unknown
- 2007-12-14 EP EP12164855.4A patent/EP2479275B1/en not_active Not-in-force
- 2007-12-14 NZ NZ592510A patent/NZ592510A/xx not_active IP Right Cessation
- 2007-12-14 CA CA002670658A patent/CA2670658A1/en active Pending
- 2007-12-14 UA UAA200907944A patent/UA103154C2/ru unknown
- 2007-12-14 MX MX2009007008A patent/MX2009007008A/es active IP Right Grant
- 2007-12-14 EP EP07850650A patent/EP2098595A4/en not_active Withdrawn
- 2007-12-14 NZ NZ577443A patent/NZ577443A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-12-14 DK DK10191234.3T patent/DK2341142T3/en active
- 2007-12-14 PT PT101912343T patent/PT2341142E/pt unknown
- 2007-12-14 CA CA2886622A patent/CA2886622A1/en not_active Abandoned
- 2007-12-14 CN CN2011102355279A patent/CN102295682A/zh active Pending
- 2007-12-14 NZ NZ601175A patent/NZ601175A/xx not_active IP Right Cessation
- 2007-12-14 KR KR1020097013472A patent/KR101525261B1/ko active IP Right Grant
- 2007-12-14 CA CA 2886619 patent/CA2886619A1/en not_active Abandoned
- 2007-12-14 CN CN201110235503.3A patent/CN102302788B/zh active Active
- 2007-12-14 MY MYPI20092279A patent/MY161664A/en unknown
- 2007-12-14 US US12/521,533 patent/US8653038B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-12-14 DK DK12164855.4T patent/DK2479275T3/en active
- 2007-12-14 ES ES10191234.3T patent/ES2526425T3/es active Active
- 2007-12-14 ES ES12164855.4T patent/ES2554775T3/es active Active
- 2007-12-14 SI SI200731565T patent/SI2341142T1/sl unknown
- 2007-12-14 CN CN201210153918.0A patent/CN102659924B/zh active Active
- 2007-12-14 JP JP2008552080A patent/JP5484734B2/ja active Active
- 2007-12-14 BR BRPI0720988-6A patent/BRPI0720988A2/pt active Search and Examination
- 2007-12-25 TW TW105115481A patent/TWI599367B/zh active
- 2007-12-25 TW TW096149840A patent/TWI417103B/zh active
- 2007-12-25 TW TW102124491A patent/TWI554280B/zh active
- 2007-12-27 AR ARP070105924A patent/AR064555A1/es unknown
-
2009
- 2009-05-26 ZA ZA2009/03633A patent/ZA200903633B/en unknown
- 2009-06-01 IL IL199052A patent/IL199052A0/en unknown
- 2009-07-27 NO NO20092774A patent/NO20092774L/no not_active Application Discontinuation
-
2011
- 2011-09-22 IL IL215332A patent/IL215332A0/en unknown
- 2011-09-22 IL IL215334A patent/IL215334A0/en unknown
- 2011-09-22 IL IL215333A patent/IL215333A0/en unknown
-
2012
- 2012-01-06 HK HK12100169.1A patent/HK1159686A1/xx unknown
- 2012-01-06 HK HK13100536.6A patent/HK1173187A1/zh unknown
-
2013
- 2013-12-26 US US14/140,698 patent/US9272026B2/en active Active
-
2014
- 2014-04-24 PH PH12014500902A patent/PH12014500902B1/en unknown
-
2015
- 2015-02-04 CY CY20151100113T patent/CY1116011T1/el unknown
-
2016
- 2016-01-22 US US15/003,882 patent/US20160199472A1/en not_active Abandoned
- 2016-08-03 HK HK16109237.6A patent/HK1221252A1/zh unknown
-
2017
- 2017-10-27 US US15/796,368 patent/US20180064795A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2237674C2 (ru) * | 1998-09-30 | 2004-10-10 | Корикса Корпорейшн | Композиции и способы wt1-специфичной иммунотерапии |
| EA005140B1 (ru) * | 1999-04-02 | 2004-12-30 | Корикса Корпорейшн | Соединения и способы для лечения и диагностики рака легкого |
| WO2001062920A2 (en) * | 2000-02-22 | 2001-08-30 | Corixa Corporation | Compositions and methods for diagnosis and therapy of malignant mesothelioma |
| US7144581B2 (en) * | 2000-10-09 | 2006-12-05 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
| WO2003105855A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-12-24 | Merck & Co., Inc. | Mitotic kinesin inhibitors |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2668560C2 (ru) * | 2013-03-29 | 2018-10-02 | Сумитомо Дайниппон Фарма Ко., Лтд. | Конъюгированная вакцина на основе пептида антигена wt1 |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2481398C2 (ru) | Hla-a*1101-ограниченный пептид wt1 и содержащая его фармацевтическая композиция | |
| US8968745B2 (en) | Method of treating cancer with an HLA-A*3303-restricted WT1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same | |
| AU2013205737B2 (en) | HLA-A*1101-restricted WT1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161215 |