RU2462247C2 - Способы дозирования перорально активного 1,2,4-оксадиазола для терапии, подавляющей нонсенс-мутацию - Google Patents

Способы дозирования перорально активного 1,2,4-оксадиазола для терапии, подавляющей нонсенс-мутацию Download PDF

Info

Publication number
RU2462247C2
RU2462247C2 RU2009117590/15A RU2009117590A RU2462247C2 RU 2462247 C2 RU2462247 C2 RU 2462247C2 RU 2009117590/15 A RU2009117590/15 A RU 2009117590/15A RU 2009117590 A RU2009117590 A RU 2009117590A RU 2462247 C2 RU2462247 C2 RU 2462247C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
dose
fluorophenyl
oxadiazol
benzoic acid
patient
Prior art date
Application number
RU2009117590/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2009117590A (ru
Inventor
Самит ХИРАВАТ (US)
Самит ХИРАВАТ
Лангдон МИЛЛЕР (US)
Лангдон Миллер
Original Assignee
ПиТиСи ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=39102963&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RU2462247(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by ПиТиСи ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК. filed Critical ПиТиСи ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК.
Publication of RU2009117590A publication Critical patent/RU2009117590A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2462247C2 publication Critical patent/RU2462247C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине и касается способа лечения или управления заболеваниями, обусловленными нонсенс-мутацией(ями): кистозным фиброзом, вызванным преждевременным стоп-кодоном в мРНК, кодируемой геном CFTR, и мышечной дистрофией Дюшенна, вызванной преждевременным стоп-кодоном в мРНК, кодируемой геном дистрофина. Способ включает введение нуждающемуся в этом больному эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата непрерывным лечением, где первая доза, вторая доза и третья доза вводятся в течение 24 часов по формуле 1X, 1X и 2Х, где Х представляет собой дозу 18-22 мг/кг. Изобретение обеспечивает безопасные и эффективные схемы дозирования лекарственного препарата, которые снижают побочные эффекты и позволяют достичь оптимального терапевтического эффекта. 16 з.п. ф-лы, 2 ил., 8 табл., 17 пр.

Description

По настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки США №60/851450, зарегистрированной 12 октября 2006 г., которая включена в настоящее описание ссылкой в полном объеме.
1. Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к конкретным дозам и схемам дозирования при использовании соединения 1,2,4-оксадиазолбензойной кислоты для лечения или предотвращения заболеваний, связанных с нонсенс-мутациями. В частности, изобретение относится к конкретным дозам и схемам дозирования при использовании 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты у млекопитающих, страдающих заболеваниями, связанными с нонсенс-мутациями.
2. Уровень техники
Новый класс соединений 1,2,4-оксадиазола и их использование для лечения, предотвращения или управления заболеваниями, облегчающимися путем модуляции преждевременной терминации трансляции или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, описывается в патенте США №6992096 Bl, зарегистрированном 31 января 2006 г., озаглавленном «Соединения 1,2,4-оксадиазолбензойной кислоты и их использование для подавления нонсенс-кодонов и лечения заболевания», который приведен в настоящем описании в виде ссылки в полном объеме. Одно такое соединение представляет собой 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту. Как и в отношении всех лекарств, подходящие дозы и схемы дозирования для лечения больных, страдающих такими заболеваниями, как кистозный фиброз и мышечная дистрофия Дюшенна, существенны для достижения желаемого или оптимального терапевтического эффекта без побочных или нежелательных эффектов.
Следовательно, существует потребность в безопасных, эффективных и нетоксичных дозах и схемах дозирования, которые либо предотвращают, либо снижают любые побочные или нежелательные эффекты, или обеспечивают оптимальный терапевтический эффект, или действуют в обоих случаях, что обеспечивает желаемый терапевтический профиль.
3. Краткое изложение сущности изобретения
Изобретение охватывает схемы дозирования, где конкретные дозы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата вводят в конкретные временные интервалы для модуляции преждевременной терминации трансляции или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, или для облегчения одного или более связанных с ними симптомов при снижении или избегании побочных эффектов или нежелательных эффектов. В изобретении дополнительно охватываются конкретные дозы и единицы лекарственных форм 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методам введения нуждающемуся в этом больному эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в течение 24-часового периода. Изобретение также относится к методам введения нуждающемуся в этом больному фармацевтической композиции, включающей эффективное количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в течение 24-часового периода. Доза при каждом введении в течение 24-часового периода может быть той же самой или различаться. В одном варианте осуществления при введении три раза в течение 24-часового периода доза при первых двух введениях является одинаковой, а третья доза составляет двойную первую дозу. В другом варианте осуществления все три дозы являются одинаковыми.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методам лечения, предотвращения или управления заболеванием, облегчающимся путем модуляции преждевременной терминации трансляции или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, включающим введение нуждающемуся в этом больному эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в течение 24-часового периода. Предпочтительно введение осуществляется три раза в день постоянно или с периодом отдыха в течение ряда дней, недель, месяцев или лет.
Изобретение также относится к методам лечения, предотвращения или управления заболеванием, облегчающимся путем модуляции преждевременной терминации трансляции или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, включающим введение нуждающемуся в этом больному фармацевтической композиции, включающей эффективное количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в течение 24-часового периода. Предпочтительно введение осуществляется три раза в день постоянно или с периодом отдыха в течение ряда дней, недель, месяцев или лет.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу лечения, предотвращения или снижения кашля, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу увеличения экспрессии дистрофина в мышце, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу введения эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, в котором активный агент вводят нуждающемуся в этом больному один, два или три раза в течение 24-часового периода, где каждое введение предпочтительно разделено на приблизительно 4-14 часов. В конкретном варианте осуществления доза активного агента растет от первой к третьей дозе.
В другом варианте осуществления изобретение относится к постоянной терапии, где 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят нуждающемуся в этом больному в течение определенного периода времени (например, 5, 7, 10, 14, 20, 24, 28, 60 или 120 дней или дольше).
В другом варианте осуществления изобретение относится к введению 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата в единичной или разделенной (например, три раза в день) дозах между 0,1 мг/кг и 500 мг/кг, 1 мг/кг и 250 мг/кг, 1 мг/кг и 150 мг/кг, 1 мг/кг и 100 мг/кг, 1 мг/кг и 50 мг/кг, 1 мг/кг и 25 мг/кг, 1 мг/кг и 10 мг/кг или 2 мг/кг и 10 мг/кг нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в дозе приблизительно 4 мг/кг, приблизительно 7 мг/кг, приблизительно 8 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 14 мг/кг или приблизительно 20 мг/кг. В другом варианте осуществления любую дозу 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, описанную в предшествующем варианте осуществления, вводят один, два или три раза в течение 24-часового периода.
В другом варианте осуществления изобретение относится к препаратам в виде единичной дозированной формы, которые включают между приблизительно 35 мг и приблизительно 1400 мг, приблизительно 125 мг и приблизительно 1000 мг, приблизительно 250 мг и приблизительно 1000 мг или приблизительно 500 мг и приблизительно 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.
В другом варианте осуществления изобретение относится к препаратам в виде единичной дозированной формы, которые включают 35 мг, 50 мг, 70 мг, 100 мг, 125 мг, 140 мг, 175 мг, 200 мг, 250 мг, 280 мг, 350 мг, 500 мг, 560 мг, 700 мг, 750 мг, 1000 мг или 1400 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. В предпочтительном варианте осуществления изобретение относится к препаратам в виде единичной дозированной формы, которые включают 125 мг, 250 мг или 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. В другом варианте осуществления изобретение относится к методу поддержания концентрации в плазме 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, составляющей более приблизительно 0,1 мкг/мл, 0,5 мкг/мл, 1 мкг/мл, 2 мкг/мл, приблизительно 5 мкг/мл, приблизительно 10 мкг/мл, приблизительно 20 мкг/мл, приблизительно 25 мкг/мл, приблизительно 40 мкг/мл, приблизительно 50 мкг/мл, 100 мкг/мл, 200 мкг/мл, 300 мкг/мл, 400 мкг/мл или 500 мкг/мл у больного в течение, по меньшей мере, приблизительно 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному.
4. Подробное описание
4.1. Краткое описание фигур
На Фиг.1 представлены профили зависимости концентрации 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты в плазме от времени и параметры PK у 37 из 38 больных на фазе 2 исследования мышечной дистрофии Дюшенна при уровнях доз 4-, 4- и 8 мг/кг; 10-, 10- и 20 мг/кг; и 20-, 20- и 40 мг/кг. Данные одного больного исключены из анализа из-за недостаточности данных.
На Фиг.2 представлено действие на среднюю частоту кашля в течение 24 часов при введении 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты индивидууму. Эти данные указывают на то, что введение 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты обеспечивает первоначальное улучшение средней частоты кашля с последующим временным увеличением средней частоты кашля, за которым следует общее улучшение средней частоты кашля.
4.2. Определения
Применяемый в настоящем описании термин «преждевременная терминация трансляции» относится к последствию мутации, которая изменяет кодон, соответствующий аминокислоте, на стоп-кодон.
Применяемый в настоящем описании термин «распад мРНК, опосредуемый нонсенс-мутацией» относится к любому механизму, который опосредует распад мРНК, содержащих кодоны преждевременной терминации трансляции. В конкретном варианте осуществления распад мРНК, опосредуемый нонсенс-мутацией, возникает из-за нонсенс-мутации ДНК.
Применяемый в настоящем описании термин «кодон преждевременной терминации» или «преждевременный стоп-кодон» относится к возникновению стоп-кодона там, где должен быть кодон, соответствующий аминокислоте.
Применяемый в настоящем описании термин «нонсенс-мутация» представляет собой точечную мутацию, изменяющую кодон, соответствующий аминокислоте, на стоп-кодон. В конкретном варианте осуществления нонсенс-мутация представляет собой мутацию, которая возникает в ДНК и затем транскрибируется в мРНК.
Применяемый в настоящем описании термин «подавление нонсенс-мутации» относится к ингибированию или подавлению преждевременной терминации трансляции и/или распада мРНК, опосредуемых нонсенс-мутацией. В конкретном варианте осуществления распад мРНК возникает из-за нонсенс-мутации ДНК.
Применяемый в настоящем описании термин «модуляция преждевременной терминации трансляции и/или распада мРНК, опосредуемых нонсенс-мутацией» относится к регуляции экспрессии гена путем изменения уровня подавления нонсенс-мутации. Например, если желательно увеличить продукцию дефектного белка, кодируемого геном с преждевременным стоп-кодоном, т.е. позволить прочтение через преждевременный стоп-кодон дефектного гена, так что может происходить трансляция гена, то модуляция преждевременной терминации трансляции и/или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, ведет к положительной регуляции, подавляющей нонсенс-мутацию.
Применяемые в настоящем описании термины «неблагоприятный(ные) эффект(ы)» или «побочный(ные) эффект(ы)» включают, но не ограничиваются этим, тошноту, рвоту, диарею, головную боль, повышенную аланинаминотрансферазу (АЛТ) сыворотки, повышенную аспартатаминотрансферазу (АСТ) сыворотки, головокружение, повышенную креатинкиназу сыворотки (КК), абдоминальную боль, абдоминальные газы, глазную боль, припухлость глаз, жжение глаз, чувствительность сосков, болезненность молочных желез, боль в мышечно-скелетной части грудной клетки, быстропроходящую сыпь, зуд, болезненность подчелюстного лимфатического узла, повышенную лактатдегидрогеназу (ЛДГ) сыворотки, повышенную альдолазу сыворотки и повышенные триглицериды сыворотки.
Применяемые в настоящем описании термины «активный агент», «лекарство» и «лекарственное соединение» относятся к 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоте или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвату или гидрату.
Применяемый в настоящем описании термин «доза(ы)» обозначает количество активного агента, предназначенного для однократного введения.
Применяемый в настоящем описании термин «единичная дозированная форма» включает таблетки; таблетки в виде капсул; капсулы, такие как мягкие эластичные желатиновые капсулы; саше; крахмальные капсулы; пастилки; лепешки; колодные растворы; порошки; растворы; желе; единицы жидких лекарственных форм, подходящие для перорального введения или введения в слизистую больного, включая суспензии (например, водные или неводные жидкие суспензии), эмульсии (например, эмульсии масла в вод или жидкую эмульсию воды в масле), растворы и эликсиры; и стерильные твердые агенты (например, кристаллические или аморфные твердые агенты), которые могут быть восстановлены с обеспечением жидких дозированных форм, подходящих для перорального или парентерального введения больному. Единичная дозированная форма необязательно должна вводиться в виде одной дозы.
Применяемые в настоящем описании термины «схема дозирования» и «дозирование» обозначают количество активного ингредиента, данное в единицу времени и продолжительность введения.
Применяемый в настоящем описании термин «больной» обозначает животное (например, корову, лошадь, овцу, свинью, цыпленка, индейку, куропатку, кошку, собаку, мышь, крысу, кролика, морскую свинку и т.д.), предпочтительно млекопитающее, такое как не являющееся приматом и примат (например, обезьяна или человек), наиболее предпочтительно человек. В определенных вариантах осуществления больной представляет собой плод, эмбрион, младенца, ребенка, подростка или взрослого. В одном варианте осуществления путем предварительного скрининга определяется, что больной обладает нонсенс-мутацией. В другом варианте осуществления путем предварительного скрининга определяется, какую нонсенс-мутацию имеет больной (т.е. УАА, УГА или УАГ).
Применяемый в настоящем описании термин «эффективное количество» относится к такому количеству 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которое достаточно для обеспечения терапевтического успеха при лечении или управлении заболеванием или для замедления или сведения к минимуму симптомов, связанных с заболеванием. В одном варианте осуществления термин «эффективное количество» относится к количеству 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которое достаточно для достижения желаемого уровня в плазме в течение определенного периода времени. Предпочтительные варианты эффективного количества специально описываются в настоящем документе.
Применяемые в настоящем описании термины «управлять», «управляющий» и «управление» относятся к благотворным эффектам, которые возникают у больного при введении 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которые не приводят к излечению заболевания.
Применяемые в настоящем описании термины «предотвращать», «предотвращающий» и «предотвращение» относятся к предотвращению возникновения, рецидива, распространения или ухудшения заболевания или его симптома у больного в результате введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Так как заболевания, связанные с нонсенс-мутацией, могут быть генетическими, можно проводить скрининг больного на присутствие нонсенс-мутации. В том случае, когда путем скрининга определяется, что больной имеет нонсенс-мутацию, больному может быть введено эффективное количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата для предотвращения возникновения, рецидива, распространения или развития заболевания или его симптоматики.
Применяемые в настоящем описании термины «лечить», «лечащий» и «лечение» относятся к ликвидации или облегчению заболевания или симптомов, связанных с заболеванием. В определенных вариантах осуществления такие термины относятся к сведению к минимуму распространения или ухудшения заболевания в результате введения больному с таким заболеванием 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.
Применяемый в настоящем описании термин «фармацевтически приемлемые соли» относится к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот или оснований, включая неорганические кислоты и основания и органические кислоты и основания. Подходящие аддитивные соли фармацевтически приемлемых оснований для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты включают, но не ограничиваются этим, соли металлов, полученные из алюминия, кальция, лития, магния, калия, натрия и цинка или органические соли, полученные из лизина, N,N'-дибензилэтилендиамина, хлорпрокаина, холина, диэтаноламина, этилендиамина, меглюмина (N-метилглюкамина) и прокаина. Подходящие нетоксичные кислоты включают, но не ограничиваются этим, неорганические и органические кислоты, такие как уксусная, альгиновая, о-аминобензойная, бензолсульфоновая, бензойная, камфорсульфоновая, лимонная, этиленсульфоновая, муравьиная, фумаровая, фуранкарбоновая, галактуроновая, глюконовая, глюкуроновая, глютаминовая, гликолевая, бромисто-водородная, хлористо-водородная, изэтионовая, молочная, малеиновая, яблочная, миндальная, метансульфоновая, муциновая, азотная, памоевая, пантотеновая, фенилуксусная, фосфорная, пропионовая, салициловая, стеариновая, янтарная, сульфаниловая, серная, винная и п-толуолсульфоновая кислота. Конкретные нетоксичные кислоты включают хлористо-водородную, бромисто-водородную, фосфорную, серную и метансульфоновую кислоты. Примеры конкретных солей, таким образом, включают гидрохлоридные и мезилатные соли. Другие примеры солей хорошо известны в данной области техники, смотри, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).
Применяемый в настоящем описании термин «гидрат» означает 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, которая дополнительно включает стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной нековалентными межмолекулярными связями.
Применяемый в настоящем описании термин «сольват» означает 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, которая дополнительно включает стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя, связанного нековалентными межмолекулярными связями.
4.3. Заболевания, связанные с преждевременной терминацией трансляции
Изобретение охватывает методы лечения, предотвращения или управления заболеваниями или нарушениями, которые облегчаются при подавлении преждевременной терминации трансляции и/или разрушения мРНК, опосредованного нонсенс-мутацией, у больного, которые включают введение нуждающемуся в этом больному эффективного количества биологически доступного перорально соединения (т.е. 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата) в соответствии с описанными в настоящем документе дозами и/или схемами дозирования.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение охватывает лечение, предотвращение или управление любым заболеванием, которое связано с преждевременной терминацией трансляции экспрессии гена и/или разрушением мРНК, опосредованным нонсенс-мутацией. В одном варианте осуществления заболевание частично обусловлено отсутствием экспрессии гена из-за преждевременного стоп-кодона. Конкретные примеры генов, которые могут характеризоваться преждевременной терминацией трансляции и/или разрушением мРНК, опосредованным нонсенс-мутацией, и заболеваний, связанных с преждевременной терминацией трансляции и/или разрушением мРНК, опосредованным нонсенс-мутацией, представлены в патентной заявке США №60/390747, озаглавленной: методы идентификации низкомолекулярных соединений, которые модулируют преждевременную терминацию трансляции и разрушение мРНК, опосредованным нонсенс-мутацией, зарегистрированной 21 июня 2002 г., которая приведена в настоящем описании в качестве ссылки в полном объеме.
В конкретном варианте осуществления методы, композиции, дозы единицы лекарственных форм и схемы дозирования, предлагаемые в настоящем описании, пригодны для лечения, предотвращения или управления заболеванием, связанным с нонсенс-мутацией в гене эмбриона или плода, который имеет или предрасположен, или восприимчив к заболеванию, связанному с нонсенс-мутацией в гене, такому как описанное в настоящем документе. В соответствии с этим вариантом осуществления беременной женщине вводят эффективное количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которые проходят через плаценту в эмбрион или плод. В конкретном варианте осуществления эффективное количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата вводят перорально беременной женщине.
Заболевания или нарушения, связанные с или облегчающиеся при подавлении преждевременной терминации трансляции и/или распада мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, включают, но не ограничиваются этим: генетическое заболевание, рак, аутоиммунное заболевание, заболевание крови, коллагеноз, диабет, нейродегенеративное заболевание, пролиферативное заболевание, сердечно-сосудистое заболевание, легочное заболевание, воспалительное заболевание или заболевание центральной нервной системы.
Конкретные генетические заболевания в объеме методов изобретения включают, но не ограничиваются этим, множественную эндокринную неоплазию (типа 1, 2 и 3), амилоидоз, мукополисахаридоз (типа I и III), врожденную гипоплазию надпочечников, аденоматозный полипоз coli, болезнь Гиппеля-Ландау, синдром Менкеса, гемофилию A, гемофилию B, заболевание, связанное с коллагеном VII, синдром Алагилля, синдром Тоунес-Брока, опухоль с палочковидными ядрами, врожденный буллезный эпидермолиз, синдром Гурлера, синдром Коффина-Лоури, аниридию, болезнь Шарко-Маритута, миотубулярную миопатию, X-хромосом-зависимую миотубулярную миопатию, X-хромосом-зависимую хондродисплазию, X-хромосом-зависимую агаммаглобулинемию, поликистозное заболевание почек, спинальную мышечную атрофию, семейный аденоматозный полипоз, недостаточность пируватдегидрогеназы, фенилкетонурию, нейрофиброматоз 1, нейрофиброматоз 2, болезнь Альцгеймера, болезнь Тея-Сакса, синдром Ретта, синдром Германского-Пудлака, синдром эктодермальной дисплазии/хрупкости кожи, дисхондростеоз Лери-Вейлля, рахит, заболевание с гипофосфатемией, адренолейкодистрофия, гиратная атрофия, атеросклероз, нейросенсорную глухоту, дистонию, болезнь Дента, острую перемежающуюся порфирию, болезнь Коудена, буллезный эпидермолиз Герлитца, болезнь Вильсона, синдром Тричера-Коллинса, недостаточность пируваткиназы, гигантизм, карликовость, гипотиреоз, гипертиреоз, старение, ожирение, болезнь Паркинсона, заболевание С Неймана-Пика, кистозный фиброз, мышечную дистрофию, заболевание сердца, камни в почках, атаксию-телангиэктазию, семейную гиперхолестеринемию, пигментозный ретинит, заболевание лизосомного хранения, туберозный склероз, мышечную дистрофию Дюшенна и синдром Марфана.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание. В предпочтительном варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит или реакция трансплантата против хозяина.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой болезнь крови. В предпочтительном варианте осуществления болезнь крови представляет собой гемофилию A, болезнь Фон Виллебранда (типа 3), атаксию-телангиоэктазию, b-талассемию, или камни в почках.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой коллагеноз. В предпочтительном варианте осуществления коллагеноз представляет собой несовершенный остеогенез, или цирроз.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой диабет.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой воспалительное заболевание. В предпочтительном варианте осуществления воспалительное заболевание представляет собой артрит.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой заболевание центральной нервной системы. В одном варианте осуществления заболевание центральной нервной системы представляет собой нейродегенеративное заболевание. В предпочтительном варианте осуществления заболевание центральной нервной системы представляет собой множественный склероз, мышечную дистрофию, мышечную дистрофию Дюшенна, болезнь Альцгеймера, болезнь Тея-Сакса, поздний детский нейрональный цероид-липофусциноз (LINCL) или болезнь Паркинсона.
В другом варианте осуществления генетическое заболевание представляет собой рак. В предпочтительном варианте осуществления рак является раком головы и шеи, глаза, кожи, ротовой полости, глотки, пищевода, грудной клетки, кости, легкого, ободочной кишки, сигмовидной кишки, прямой кишки, желудка, простаты, молочной железы, яичников, почки, печени, поджелудочной железы, мозга, кишечника, сердца или надпочечников. Рак может быть первичным или метастатическим. Типы рака включают солидные опухоли, гематологические типы рака и другие неоплазии.
В другом предпочтительном варианте осуществления рак связан с генами-супрессорами опухолей (смотри, например, Garinis et al. 2002, Hum Gen 111:115-117; Meyers et al. 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95: 15587-15591; Kung et al. 2000, Nature Medicine 6(12): 1335-1340. Такие гены-супрессоры опухолей включают, но не ограничиваются этим, APC, ATM, BRACl, BRAC2, MSHl, pTEN, Rb, CDKN2, NFl, NF2, WT1 и p53.
В особенно предпочтительном варианте осуществления ген-супрессор опухоли представляет собой ген p53. Нонсенс-мутации идентифицированы в гене p53 и вовлечены в развитие рака. Было идентифицировано несколько нонсенс-мутаций гена p53 (смотри, например, Masuda et al., 2000, Tokai J Exp Clin Med. 25(2):69-77; Oh et al., 2000, Mol Cells 10(3):275-80; Li et al., 2000, Lab Invest. 80(4):493-9; Yang et al., 1999, Zhonghua Zhong Liu Za Zhi 21(2):114-8; Finkelstein et al., 1998, Mol Diagn. 3(1):37-41; Kajiyama et al., 1998, Dis Esophagus. 11(4):279-83; Kawamura et al., 1999, Leuk Res. 23(2):115-26; Radig et al., 1998, Hum Pathol. 29(11):1310-6; Schuyer et al., 1998, Int J Cancer 76(3):299-303; Wang-Gohrke et al., 1998, Oncol Rep. 5(l):65-8; Fulop et al., 1998, J Reprod Med. 43(2):119-27; Ninomiya et al., 1997, J Dermatol Sci. 14(3):173-8; Hsieh et al., 1996, Cancer Lett. 100(1-2):107-13; Rall et al., 1996, Pancreas. 12(1):10-7; Fukutomi et al., 1995, Nippon Rinsho. 53(11):2764-8; Frebourg et al., 1995, Am J Hum Genet. 56(3):608-15; Dove et al., 1995, Cancer Surv. 25:335-55; Adamson et al., 1995, Br J Haematol. 89(l):61-6; Grayson et al., 1994, Am J Pediatr Hematol Oncol. 16(4):341-7; Lepelley et al., 1994, Leukemia. 8(8):1342-9; McIntyre et al., 1994, J Clin Oncol. 12(5):925-30; Horio et al., 1994, Oncogene. 9(4):1231-5; Nakamura et al., 1992, Jpn J Cancer Res. 83(12):1293-8; Davidoff et al., 1992, Oncogene. 7(1):127-33; b Ishioka et al, 1991, Biochem Biophys Res Commun. 177(3):901-6; раскрытия которых приведены в настоящем описании в качестве ссылки в полном объеме.
Изобретение охватывает методы лечения, предотвращения или управления заболеваниями или нарушениями, которые облегчаются при подавлении преждевременной терминации трансляции и/или разрушения мРНК, опосредованного нонсенс-мутацией, у больного, которые включают введение нуждающемуся в этом больному эффективного количества биологически доступного перорально соединения (т.е. 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата) в соответствии с описанными в настоящем документе дозами и/или схемами дозирования.
В других вариантах осуществления заболевания, которые лечат, предотвращают или которыми управляют с помощью введения нуждающемуся в этом больному эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, включают, но не ограничиваются этим, солидную опухоль, саркому, карциномы, фибросаркому, миксосаркому, липосаркому, хондросаркому, остеогенную саркому, хордому, ангиосаркому, эндотелиосаркому, лимфангиосаркому, лимфангиоэндотелиосаркому, синовиому, мезотелиому, опухоль Эвинга, лейомиосаркому, рабдомиосаркому, карциному ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак яичников, рак простаты, сквамозноклеточную карциному, базальноклеточную карциному, аденокарциному, карциному потовых желез, карциному сальных желез, папиллярную карциному, папиллярные аденокарциномы, цистаденокарциному, медуллярную карциному, бронхогенную карциному, карциному клеток почки, карциному желчного протока, хориокарциному, семиному, эмбриональную карциному, опухоль Вилмса, рак шейки матки, рак семенников, карциному легких, мелкоклеточную карциному легких, карциному мочевого пузыря, эпителиальную карциному, глиому, астроцитому, медуллобластому, краниофарингиому, эпендимому, саркому Капоши, пинеалому, гемангиобластому, невриному слухового нерва, олигодендроглиому, менангиому, меланому, нейробластому, ретинобластому, опухоль, происходящую из клеток крови, острый лимфобластный лейкоз, острый лимфобластный В-клеточный лейкоз, острый лимфобластный Т-клеточный лейкоз, острый миелобластный лейкоз, острый промиелоцитный лейкоз, острый монобластный лейкоз, острый эритролейкемический лейкоз, острый мегакариобластный лейкоз, острый миеломоноцитный лейкоз, острый нелимфоцитный лейкоз, острый недифференцированный лейкоз, хронический миелоцитный лейкоз, хронический лимфоцитный лейкоз, волосковоклеточный лейкоз или множественную миелому. Смотри, например, Harrison's Principles of Internal Medicine, Eugene Braunwald et al., eds., pp. 491-762 (15th ed. 2001).
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу лечения, предотвращения или снижения кашля, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления больной страдает кистозным фиброзом. В другом варианте осуществления кашель представляет собой хронический кашель. В другом варианте осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в виде предлагаемой в настоящем описании дозированной формы или в соответствии со схемой дозирования, предлагаемой в настоящем описании.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу увеличения экспрессии дистрофина в мышце, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления изобретение относится к методу увеличения экспрессии дистрофина в мышечных клетках, включающему контактирование мышечных клеток эффективным количеством 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. В одном варианте осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в виде предлагаемой в настоящем описании дозированной формы или в соответствии с предлагаемой в настоящем описании схемой дозирования.
4.4. Дозы и схемы дозирования
Не будучи ограниченным теорией, настоящее изобретение охватывает частично конкретные дозы и схемы дозирования 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которые оптимизируют подавление преждевременной терминации трансляции и/или разрушения мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией. В предпочтительном варианте осуществления разрушение мРНК, опосредуемое нонсенс-мутацией, возникает из-за нонсенс-мутации ДНК.
Новые методы изобретения охватывают лечение, предотвращение и управление заболеваниями или их симптомами, поддающимися лечению или предотвращению путем подавления преждевременной терминации трансляции и/или разрушения мРНК, опосредуемого нонсенс-мутацией, при снижении или избегании неблагоприятных или нежелательных эффектов, например, токсичности или побочных эффектов. Предпочтительным путем введения описанных в настоящем документе доз и схем дозирования является пероральный (т.е. путем проглатывания раствора, коллоидного раствора или раствора с дополнительным активным агентом с концентрацией, более высокой, чем насыщающая концентрация активного агента).
Описанные в настоящем документе дозы и схемы дозирования, как считается, являются пригодными из-за их способности к достижению и поддержанию желаемой концентрации активного агента в плазме. Без ограничения теорией считается, что достижение и поддержание относительно постоянной концентрации активного агента в плазме (такой как, описанная в разделе 4.4.) в течение, например, 24-часового периода времени или дольше обеспечивает благоприятный терапевтический эффект у больного. Дозы и схемы дозирования, описанные в настоящем документе, пригодны для достижения и поддержания таких терапевтических концентраций активного агента в плазме.
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, где активный агент вводят нуждающемуся в этом больному один раз в течение 12- или 24-часового периода.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, где активный агент вводят нуждающемуся в этом больному два раза в течение 12- или 24-часового периода, где каждое введение предпочтительно отделено приблизительно 4-14 часами, в одном варианте осуществления - 12 часами. В этих вариантах осуществления активный агент может быть введен, например, во время приема пищи, такого как завтрак или ужин.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, где активный агент вводят нуждающемуся в этом больному три раза в течение 12- или 24-часового периода, где каждое введение предпочтительно отделено приблизительно 4-14 часами. В конкретном варианте осуществления активный агент вводят один раз утром, один раз днем и один раз вечером. Предпочтительные интервалы между дозами включают 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 и 14 часов.
В одном варианте осуществления доза активного агента повышается на протяжении 24-часового периода. В другом варианте осуществления вторая вводимая доза повышается (например, удваивается). В другом варианте осуществления первая и вторая вводимые дозы поддерживаются постоянными, а третья вводимая доза повышается (например, удваивается). В конкретном варианте осуществления три дозы в течение 24-часового периода вводят в соответствии с формулой: 1X, 1X, 2X, где X представляет собой конкретную начальную дозу (например, 4 мг/кг, 7 мг/кг, 10 мг/кг, 20 мг/кг, 25 мг/кг, 30 мг/кг, 35 мг/кг, 40 мг/кг или 50 мг/кг). В другом варианте осуществления активный агент вводят в пределах приблизительно 10, 15, 30, 45 или 60 минут (т.е. перед или после) приема пищи больным. В одном варианте осуществления эффективным количеством активного агента опрыскивают пищу или смешивают его с ней. В другом варианте осуществления активный агент вводят без пищи.
Особенно предпочтительной схемой дозирования является такая, когда больному вводят активный агент в пределах 30 минут после приема пищи с приблизительными интервалами 6-, 6- и 12 часов (например, ~7:00 утра после завтрака, ~1:00 дня после обеда и ~7:00 вечера после ужина).
В еще одном варианте осуществления изобретение относится к введению 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата в одной или разделенных дозах (например, три раза в течение 24-часового периода) между 0,1 мг/кг и 500 мг/кг, 1 мг/кг и 250 мг/кг, 1 мг/кг и 150 мг/кг, 1 мг/кг и 100 мг/кг, 1 мг/кг и 50 мг/кг, 1 мг/кг и 25 мг/кг, 1 мг/кг и 10 мг/кг или 2 мг/кг и 10 мг/кг нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в дозе приблизительно 2-6 мг/кг, приблизительно 5-9 мг/кг, приблизительно 6-10 мг/кг, приблизительно 8-12 мг/кг, приблизительно 12-16 мг/кг или приблизительно 18-22 мг/кг. В конкретном варианте осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в дозе приблизительно 4 мг/кг, приблизительно 7 мг/кг, приблизительно 8 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 14 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг или приблизительно 50 мг/кг. В другом варианте осуществления любую дозу 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, описанную в предшествующем варианте осуществления вводят три раза в течение 24-часового периода.
В другом варианте осуществления изобретение относится к продолжительной терапии, где 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят ежедневно нуждающемуся в этом больному в течение определенного периода времени (например, 5, 7, 10, 14, 20, 24, 28, 60 или 120 дней или более). В одном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода. В другом варианте осуществления активный агент постоянно вводят ежедневно, еженедельно, ежемесячно или ежегодно. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 4 мг/кг, приблизительно 4 мг/кг и приблизительно 8 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 7 мг/кг, приблизительно 7 мг/кг и приблизительно 14 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг и приблизительно 20 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг и приблизительно 60 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг и приблизительно 20 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В конкретном варианте осуществления активный агент постоянно вводят три раза в течение 24-часового периода в дозах приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг и приблизительно 80 мг/кг в течение дней, недель, месяцев или лет. В каждый 24-часовой период, когда вводится активный агент, его предпочтительно вводить 3 раза в приблизительные интервалы 6-, 6- и 12-часовые интервалы (например, ~7:00 утра после завтрака, ~1:00 дня после обеда и ~7:00 вечера после ужина). Для лечения, предотвращения или управления кистозным фиброзом и мышечной дистрофией Дюшенна.
Периоды лечения для курса терапии могут продолжаться в течение одной недели, двух недель, трех недель, четырех недель, пяти недель, шести недель, семи недель, восьми недель, девяти недель, десяти недель, одиннадцати недель, двенадцати недель, тринадцати недель, четырнадцати недель, четырех месяцев, пяти месяцев, шести месяцев, семи месяцев, восьми месяцев, девяти месяцев, десяти месяцев, одиннадцати месяцев, одного года, двух лет, трех лет, четырех лет, пяти лет или дольше. Периоды лечения могут прерываться периодами отдыха, которые могут продолжаться один день, одну неделю, две недели, три недели, четыре недели, пять недель, шесть недель, семь недель, восемь недель, девять недель, десять недель, одиннадцать недель, двенадцать недель, тринадцать недель, четырнадцать недель, четыре месяца, пять месяцев, шесть месяцев, семь месяцев, восемь месяцев, девять месяцев, десять месяцев, одиннадцать месяцев, один год, два года, три года, четыре года, пять лет или дольше. Такие определения могут быть сделаны специалистом в данной области (например, врачом).
В конкретном варианте осуществления лечение продолжается в течение 14 дней, с последующим отсутствием лечения в течение 14 дней, с последующим продолжением лечения в течение дополнительных 14 дней. В одном варианте осуществления доза, принимаемая в течение вторых 14 дней лечения, выше, чем принимаемая в течение первых 14 дней лечения. В качестве неограничивающего примера, нуждающемуся в этом больному вводят три дозы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата (например, 4 мг/кг, 4 мг/кг и 8 мг/кг) в течение 24-часового периода в продолжение 14 непрерывных дней, с последующим отсутствием лечения в течение 14 дней, с последующим введением трех доз 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата (например, 10 мг/кг, 10 мг/кг и 20 мг/кг) в течение 24-часового периода в продолжение дополнительных 14 непрерывных дней.
В другом варианте осуществления лечение продолжается в течение 28 дней. Непрерывное лечение может быть прервано на один или более дней, месяцев, недель или лет. За непрерывным лечением может следовать период отдыха, продолжающийся один или более дней, месяцев, недель или лет, с последующим непрерывным лечением, возобновляемым после периода отдыха.
В определенных вариантах осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в соответствии с дозами и схемами дозирования, описанными в настоящем документе, в сочетании со вторым активным агентом (например, одновременно или последовательно). В конкретных вариантах осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в соответствии с дозами и схемами дозирования, описанными в настоящем документе, в сочетании с аминогликозидом, кортикостероидом, ферментом поджелудочной железы, антибиотиком, инсулином, гипогликемическим агентом, омега-3-жирной кислотой, химиотерапевтическим агентом или ферментом заместительной терапии. Введение второго активного агента может быть местным, энтеральным (например, пероральным, дуоденальным, ректальным), парентеральным (например, внутривенным, внутриартериальным, внутримышечным, подкожным, внутридермальным или внутрибрюшинным) или внутриоболочечным. В определенных вариантах осуществления 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат вводят в соответствии с дозами и схемами дозирования, описанными в настоящем документе, в сочетании с лучевой терапией.
Должно быть понятно, что количество агента, вводимого нуждающемуся в этом больному, рассчитывается или может быть рассчитано на основе фактической массы больного, о котором идет речь, или средней массы популяции больных, о которых идет речь (например, белых мужчин, белых женщин, афроамериканских мужчин, афроамериканских женщин, азиатских мужчин, азиатских женщин, включая взрослых и детей).
4.5. Концентрации в плазме
В одном варианте осуществления изобретение относится к методу поддержания концентрации в плазме 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата выше, чем: приблизительно 0,1 мкг/мл, приблизительно 0,5 мкг/мл, приблизительно 2 мкг/мл, приблизительно 5 мкг/мл, приблизительно 10 мкг/мл, приблизительно 20 мкг/мл, приблизительно 25 мкг/мл, приблизительно 40 мкг/мл, приблизительно 50 мкг/мл, приблизительно 100 мкг/мл, приблизительно 150 мкг/мл, приблизительно 200 мкг/мл, приблизительно 250 мкг/мл или приблизительно 500 мкг/мл, у больного в течение, по меньшей мере, приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления введение является пероральным. Уровни 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата в плазме могут быть измерены, например, высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ).
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу поддержания концентрации в плазме 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата от приблизительно 0,1 мкг/мл до приблизительно 500 мкг/мл или от приблизительно 2 мкг/мл до приблизительно 10 мкг/мл у больного в течение, по меньшей мере, приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, включающему введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному один, два или три раза в день в тех же или увеличивающихся дозах (например, 1X, 1X, 2X, как описано в настоящем документе). В конкретном варианте осуществления введение является пероральным.
В конкретном варианте осуществления уровень в плазме больного 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата поддерживается выше приблизительно 2 мкг/мл в течение, по меньшей мере, приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, с помощью введения активного агента один, два или три раза в день нуждающемуся в этом больному. В другом варианте осуществления уровень в плазме больного 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата поддерживается между от приблизительно 2 мкг/мл до приблизительно 10 мкг/мл в течение, по меньшей мере, приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, с помощью введения активного агента один, два или три раза в день нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления уровень в плазме больного 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата поддерживается выше приблизительно 10 мкг/мл в течение, по меньшей мере, приблизительно 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 8, 12 или 24 часов или дольше, с помощью введения активного агента один, два или три раза в день нуждающемуся в этом больному. В конкретном варианте осуществления введение является пероральным.
В конкретном варианте осуществления в настоящем описании предлагаются методы достижения Cmax от 1 мкг/мл до 1000 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 750 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 500 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 400 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 300 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 250 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 200 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 150 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 100 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 50 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 40 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 30 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 20 мкг/мл, от 1 мкг/мл до 10 мкг/мл или от 10 мкг/мл до 30 мкг/мл 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата у больного, включающие введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в день нуждающемуся в этом больному.
В конкретном варианте осуществления в настоящем описании предлагаются методы достижения AUC0-24 от 50 до 1000 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 750 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 500 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 400 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 300 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 250 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 200 мкг·час/мл, от 50 мкг·час/мл до 150 мкг·час/мл или от 50 мкг·час/мл до 100 мкг·час/мл 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата у больного, включающие введение эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата один, два или три раза в день нуждающемуся в этом больному.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному, который дает профиль в плазме in vivo с 90% доверительным интервалом (CI) для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 87 мкг·час/мл на 1 день введения или 91 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 10 мкг/мл на 1 день введения или 11 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 0,5 мкг/мл на 1 день введения или 0,6 мкг/мл на 28 день введения.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному, который обеспечивает профиль в плазме in vivo с 90% CI для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 291 мкг·час/мл на 1 день введения или 235 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 27 мкг/мл на 1 день введения или 22 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 3,8 мкг/мл на 1 день введения или 3,4 мкг/мл на 28 день введения.
В другом варианте осуществления изобретение относится к методу введения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата нуждающемуся в этом больному, который обеспечивает профиль в плазме in vivo с 90% CI для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 866 мкг·час/мл на 1 день введения или 490 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 76 мкг/мл на 1 день введения или 46 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 9,6 мкг/мл на 1 день введения или 6,7 мкг/мл на 28 день введения.
4.6. Популяции больных
Конкретные популяции больных, для которых пригодны методы и композиции настоящего изобретения, включают взрослых и детей, которые болеют или восприимчивы (например, из-за факторов окружающей среды или генетических факторов) к заболеванию, связанному с нонсенс-мутацией, такой как описанные в настоящем документе мутации.
В одном варианте осуществления было определено путем предварительного скрининга, что больной или родственник больного обладает нонсенс-мутацией (т.е. УАА, УГА или УАГ).
4.7. Фармацевтические композиции и составы единичных дозированных форм
Фармацевтические композиции и отдельные единичные дозированные формы, включающие 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат, также охватываются изобретением. Индивидуальные дозированные формы по изобретению могут подходить для перорального введения, введения в слизистую (включая подъязычное, защечное, ректальное, интраназальное или вагинальное введение) или для парентерального введения (включая подкожное, внутримышечное, болюсное, внутриартериальное или внутривенное введение). Предпочтительные фармацевтические композиции и отдельные единичные дозированные формы подходят для перорального введения.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой твердую пероральную единичную дозированную форму. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой жидкую пероральную единичную дозированную форму. В конкретном варианте осуществления в настоящем изобретении предлагаются дозы, составы единичных дозированных форм и фармацевтические композиции, в которых 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат являются биодоступными перорально. Преимущества перорального введения могут включать легкость введения, более частое согласие больного со схемой дозирования, клиническую эффективность, более редкие осложнения, более короткое пребывание в больнице и суммарную экономию стоимости.
В другом варианте осуществления изобретение относится к составам единичных дозированных форм, которые включают между приблизительно 35 мг и приблизительно 1400 мг, приблизительно 125 мг и приблизительно 1000 мг, приблизительно 250 мг и приблизительно 1000 мг или приблизительно 500 мг и приблизительно 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. В одном варианте осуществления состав единичных дозированных форм включает 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат и один или более носителей или эксципиентов, подходящих для суспендирования в фармацевтически приемлемом растворителе (например, в воде, молоке, газированном напитке, соке, яблочном соусе, детском питании или детской питательной смеси) во флаконе.
В другом варианте осуществления изобретение относится к составам единичных дозированных форм, которые включают 35 мг, 50 мг, 70 мг, 100 мг, 125 мг, 140 мг, 175 мг, 200 мг, 250 мг, 280 мг, 350 мг, 500 мг, 560 мг, 700 мг, 750 мг, 1000 мг или 1400 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Предпочтительные составы единичных дозированных форм включают приблизительно 125 мг, приблизительно 250 или приблизительно 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. В одном варианте осуществления состав единичных дозированных форм включает 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат и один или более носителей или эксципиентов, подходящих для суспендирования в фармацевтически приемлемом растворителе (например, в воде, молоке, газированном напитке, соке, яблочном соусе, детском питании или детской питательной смеси) во флаконе. Предпочтительными составами единичных дозированных форм являются порошки и саше.
В одном варианте осуществления изобретение относится к твердой единичной дозированной форме, включающей 250 мг, 500 мг, 750 мг или 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которая при введении нуждающемуся в этом больному три раза в сутки в дозе 4 мг/кг, 4 мг/кг и 8 мг/кг, соответственно, дает профиль в плазме in vivo с 90% доверительным интервалом (CI) для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 87 мкг·час/мл на 1 день введения или 91 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 10 мкг/мл на 1 день введения или 11 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 0,5 мкг/мл на 1 день введения или 0,6 мкг/мл на 28 день введения.
В одном варианте осуществления изобретение относится к твердой единичной дозированных форме, включающей 250 мг, 500 мг, 750 мг или 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которая при введении нуждающемуся в этом больному три раза в сутки в дозе 10 мг/кг, 10 мг/кг и 20 мг/кг, соответственно, обеспечивает профиль в плазме in vivo с 90% CI для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 291 мкг·час/мл на 1 день введения или 235 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 27 мкг/мл на 1 день введения или 22 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 3,8 мкг/мл на 1 день введения или 3,4 мкг/мл на 28 день введения.
В одном варианте осуществления изобретение относится к твердой единичной дозированной форме, включающей 250 мг, 500 мг, 750 мг или 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, которая при введении нуждающемуся в этом больному три раза в сутки в дозе 20 мг/кг, 20 мг/кг и 40 мг/кг, соответственно, обеспечивает профиль в плазме in vivo с 90% CI для трансформированного в натуральный логарифм отношения в пределах от 80% до 125%, от 90% до 115% или от 95% до 110% для, по меньшей мере, одного из следующих параметров биодоступности для 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:
(a) средней AUC0-24 866 мкг·час/мл на 1 день введения или 490 мкг·час/мл на 28 день введения;
(b) средней Cmax 76 мкг/мл на 1 день введения или 46 мкг/мл на 28 день введения; и
(c) средней Cmin 9,6 мкг/мл на 1 день введения или 6,7 мкг/мл на 28 день введения.
Несмотря на то, что рекомендуется хранить описанные в настоящем документе составы единичных дозированных форм при температуре между приблизительно 2°С и приблизительно 8°С, составы единичных дозированных форм могут храниться при комнатной температуре в течение приблизительно 48 часов перед восстановлением. В одном варианте осуществления восстановление 250 мг состава единичной дозированной формы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата осуществляется путем добавления приблизительно 10 мл воды прямо во флакон, содержащий 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат, для достижения концентрации приблизительно 25 мг/мл в суммарном объеме суспензии. Для 1000 мг состава единичной дозированной формы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата приблизительно 20 мл воды добавляют прямо во флакон, содержащий 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат, для достижения концентрации приблизительно 50 мг/мл в суммарном объеме суспензии. Сразу после добавления воды флакон закупоривают и осторожно встряхивают рукой в течение, по меньшей мере, приблизительно 30 секунд для достижения гомогенной суспензии. Хотя восстановленная суспензия может оставаться в исходном пластиковом флаконе до 24 часов перед проглатыванием, рекомендуется, чтобы лекарство принималось через короткое время после восстановления. Если возникает задержка между восстановлением и приемом дозы более чем приблизительно на 15 минут, рекомендуется, чтобы флакон повторно осторожно встряхивали рукой в течение, по меньшей мере, приблизительно 30 секунд. Рекомендуется, чтобы суспензию вводили прямо из флакона. Если предполагается вводить целую единицу лекарственной формы, дополнительно рекомендуется, чтобы флакон один раз промывали водой, и эту воду после промывки принимали, чтобы убедиться, что никакого порошка не осталось во флаконе. Если предполагается вводить частичное количество единицы лекарственной формы, для получения соответствующей дозы могут быть использованы ложка или шприц.
Отдельные единичные дозированные формы по изобретению, подходящие для перорального введения больному, включают, но не ограничиваются этим: саше; облатки; таблетки; таблетки в виде капсулы; капсулы, такие как мягкие эластичные желатиновые капсулы; пилюли; лепешки; диспергированные растворы; порошки; растворы; жидкие единичные дозированные формы, включая суспензии (например, водные или неводные жидкие суспензии); эмульсии (например, эмульсии масла в воде или жидкую эмульсию воды в масле); и эликсиры. В одном варианте осуществления изобретение относится к коллоидному раствору или раствору с дополнительным активным агентом с концентрацией выше насыщающей. Эти и другие пути, в которых конкретные единицы лекарственной формы, охватываемые настоящим изобретением, будут отличаться одна от другой, должны быть очевидны специалистам в данной области техники. Смотри, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed., Mack Publishing, Easton PA (1990).
Это изобретение дополнительно охватывает безводные фармацевтические композиции и единичные дозированные формы, включающие 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат. Безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы изобретения могут быть получены с использованием безводных ингредиентов или ингредиентов с низкой влажностью и условий с низкой влажностью или с низким содержанием влаги.
Типичные пероральные единичные дозированные формы по изобретению получают путем объединения активного(ных) ингредиента(тов) при тесном перемешивании с, по меньшей мере, одним носителем или эксципиентом в соответствии с общепринятыми способами получения фармацевтических составов. Эксципиенты могут иметь большое разнообразие форм в зависимости от желаемой формы препарата для введения. Например, эксципиенты, подходящие для использования в пероральных жидких или аэрозольных лекарственных формах, включают, но не ограничиваются этим, воду, гликоли, масла, спирты, ароматизирующие агенты (например, экстракт ванили), консерванты и окрашивающие агенты. Примеры эксципиентов, подходящих для использования в твердых пероральных лекарственных формах (например, порошках, таблетках, саше, капсулах и таблетках в виде капсул)), включают, но не ограничиваются этим, крахмалы, сахара, микрокристаллическую целлюлозу, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие агенты, связующие агенты и разрыхляющие агенты.
Особенно предпочтительными составами единичных дозированных форм являются порошковые составы, включающие эффективное количество активного агента, который подходит для восстановления в фармацевтически приемлемом растворителе (например, в воде, молоке, газированном напитке, соке, яблочном соусе, детском питании или детской питательной смеси) и для последующего перорального введения. В конкретном варианте осуществления порошок может необязательно содержать один или более носителей или эксципиентов в сочетании с активным агентом. В другом варианте осуществления порошок до введения или восстановления может храниться в запаянном контейнере. В еще одном варианте осуществления порошок может быть инкапсулирован (например, в желатиновую капсулу).
5. Примеры
Следующие примеры предлагаются в качестве иллюстрации, но не ограничения.
5.1 Пример 1: Получение 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты
Figure 00000001
Методы получения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты описаны в патенте США No. 6992096 B2, выданном 31 января 2006, и патентной заявке США no. 11/899813, зарегистрированной 9 сентября 2007, оба которых включены в качестве ссылки в полном объеме. Типичный пример метода получения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты представлен ниже.
К раствору 3-цианобензойной кислоты (44,14 г, 300 ммоль) в ДМФ (0,6 л) добавляли K2CO3 (62,19 г, 450 ммоль) и затем перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. К суспензии добавляли метилйодид (28 мл, 450 ммоль) на протяжении 20 мин, и реакционную смесь перемешивали еще в течение 4 час при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в 1,2 л ледяной воды и перемешивали в течение 30 мин, и осадок отфильтровывали. Белый сгусток растворяли в метаноле (70 мл) и затем переосаждали в холодной воде. Желаемый продукт получали в виде белого порошка с выходом 79% (38 г, чистота по ЖХ/УФ 99%). 1H-ЯМР (CDCl3) δ 8,85 (2H), 8,28 (1H), 8,02 (1H), 4,17 (3H).
К раствору метилового сложного эфира 3-цианобензойной кислоты (50 г, 310 ммоль) в этаноле (500 мл) добавляли 50% водный гидроксиламин (41 мл, 620 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 час при 100°С, и затем растворители удаляли при пониженном давлении. Маслянистый остаток растворяли в смеси 20/80 этанол/толуол (50 мл x 2) и затем вновь концентрировали. Желаемый сложный эфир (61 г, колич. выход) получали в виде белого порошка с чистотой 98% (ЖХ/УФ). 1H-ЯМР (CDCl3) δ 9,76 (1H), 8,24 (1H), 7,82 (2H), 7,51 (1H), 5,92 (2H), 3,82 (3H).
К раствору сложного метилового эфира 3-(N-гидрокарбамимидоил)бензойной кислоты (60 г, 310 ммоль) в безводном ТГФ (200 мл) добавляли диизопропилэтиламин (75 мл, 434 ммоль) при 5°С, и затем к смеси добавляли 2-фторбензоилхлорид (48,1 мл, 403 ммоль) на протяжении 20 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 час при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (400 мл) и затем промывали водой (200 мл × 2). Растворитель удаляли при пониженном давлении, и желаемый продукт кристаллизовали в 60% этилацетате в гексане с получением желаемого продукта (81 г, выход 83%) в виде белого твердого вещества. 1H-ЯМР (CDCl3) δ 8,18 (1H), 8,03 (3H), 7,48 (2H), 7,18 (2H), 5,61 (2H), 3,82 (3H).
44 г сложного метилового эфира 3-(N-2-фторбензоилкарбамимидоил)бензойной кислоты в толуоле (500 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 4 час при 130°С с использованием аппарата Дина-Старка. Реакционную смесь перемешивали при 5°С в течение 18 час. Белый осадок отфильтровывали, и фильтрат концентрировали и перекристаллизовывали в толуоле. Желаемый оксадиазол (38 г, выход 92%) получали в виде белого твердого вещества с чистотой 99% (ЖХ/УФ). 1H-ЯМР (CDCl3) δ 8,91 (1H), 8,38 (1H), 8,15 (2H), 7,62 (2H), 7,35 (2H), 3,95 (3H).
К раствору сложного метилового эфира 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты (3,3 г, 11 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляли 1,5 М водный NaOH (10 мл, 14 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 час при 100°С. Органический растворитель удаляли, и водный раствор разбавляли водой (50 мл) и затем подкисляли водной HCl. Белый осадок отфильтровывали, и белый сгусток промывали холодной водой и затем сушили с помощью лиофилизатора. Желаемую кислоту (3,0 г, выход 96%) получали в виде белого порошка с чистотой 98% (ЖХ/УФ). Точка плавления 242°С; ИК 3000 (ароматический C-H), 1710 (C=O); 1H-ЯМР (D6-ДМСО) δ 8,31 (1H), 8,18 (2H), 8,08 (1H), 7,88 (2H), 7.51 (2H); 13С-ЯМР (D6-ДМСО) δ 172,71, 167,38, 166,48, 161,25, 135,80, 132,24, 131,79, 131,79, 131,08, 130,91, 129,81, 127,76, 125,48, 117,38, 111,70; 19F-ЯМР (D6-ДМСО) δ 109,7.
Фармацевтически приемлемые соли 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты могут быть получены методами, известными специалистам в данной области техники. Натриевая соль может быть получена следующим образом. К раствору сложного метилового эфира 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты (33 г, 11 ммоль) в ТГФ (400 мл) добавляли 1,5 М водный NaOH (100 мл, 144 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 час при 100°С. Органический растворитель удаляли при пониженном давлении, и водный раствор перемешивали 2 час при 5°С. Белый осадок отфильтровывали, и фильтрат концентрировали и вновь осаждали в воде. Белый сгусток промывали холодной водой и затем сушили с помощью лиофилизатора. Желаемую соль (33 г, выход 96%) получали в виде белого порошка с чистотой 98,6% (ЖХ/УФ).
5.2 Пример 2: Пероральное лечение кистозного фиброза, опосредуемого нонсенс-мутацией
В настоящем примере представлен иллюстративный режим введения дозы, пригодный для лечения кистозного фиброза, опосредуемого нонсенс-мутацией.
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат предлагается в виде порошка с ванильным ароматизатором для получения суспензии. Лекарство производится в соответствии современными условиями осуществления производства продуктов (cGMP). Состав может включать связующие и суспендирующие агенты, поверхностно-активные вещества и различные минорные эксципиенты, способствующие процессу производства. Смесь может быть упакована в 40-мл пластиковые (высокоплотный полиэтилен[HDPE]) флаконы, закрытые уплотнительной прокладкой из фольги и белой пластиковой недоступной для детей крышкой. Каждый флакон может содержать 125, 250 или 1000 мг лекарственного вещества, которое составляет 25,0% от общей массы состава. Альтернативно, смесь может быть предоставлена в виде состава саше, таком, как представленном в Примере 6. Эксципиенты (и их доли от общей массы состава) включают суспендирующий агент (Litesse® Ultra [очищенная полидекстроза] - 25,7%), связующий агент, который может также обеспечивать маскировку вкуса (манит - 25,0%), поверхностно-активные агенты (полиэтиленгликоль 3350 - 12,8% и Lutrol® micro F127 [порошок полоксамера 407] - 3,7%), разрыхлитель (кросповидон - 5,0%), и могут присутствовать другие эксципиенты, каждый в количестве менее 2% (гидроксиэтилцеллюлоза, ванильный ароматизатор, стеарат магния [не бычий] и коллоидный диоксид кремния).
На этикетке флакона указывается наименование лекарственного вещества, номер партии, количество лекарственного вещества и условия хранения (например, комнатная температура или охлаждение при температуре от 5° до 8°С).
Дозирование лекарственного вещества основывается на миллиграммах лекарства на килограмм массы тела больного. Доза лекарственного вещества может быть округлена для достижения соответствия с имеющимися размерами флаконов. Схема дозирования обеспечивает то, чтобы суммарная фактическая доза никогда не была ниже на 50 мг и выше на 250 мг назначенной дозы (т.е., всегда была в пределах 5 мг/кг от назначенного уровня дозы). Например, больной с массой тела 40 кг, подлежащий лечению дозой 4 мг/кг, должен получать рассчитанную дозу 160 мг. Такой больной должен получить один 250-мг флакон (всего 250 мг) или 6,25 мг/кг/дозу. Тот же больной при лечении дозой 8 мг/кг вечером должен получить рассчитанную дозу 320 мг и должен получить два 250-мг флакона (всего 500 мг) или 12,5 мг/кг. Тот же больной при лечении дозой 10 мг/кг должен получить рассчитанную дозу 400 мг и должен получить два 250-мг флакона (всего 500 мг) или 12,5 мг/кг. Тот же больной при лечении дозой 20 мг/кг вечером должен получить рассчитанную дозу 800 мг и должен получить один 1000-мг флакон (всего 1000 мг) или 25 мг/кг.
Восстановление и дозирование лекарственного продукта производят при комнатной температуре. Перед восстановлением лекарственного продукта нет необходимости в его специальном нагревании. Лекарственный продукт может быть восстановлен с любым фармацевтически приемлемым растворителем (например, водой, молоком, газированным напитком, соком, яблочным пюре, детским питанием или детской смесью). К каждому предлагаемому 250-мг флакону добавляют ~10 мл воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя для получения концентрации приблизительно 25 мг/мл в суммарном объеме суспензии. К каждому предлагаемому 1000-мг флакону добавляют ~20 мл воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя для получения концентрации приблизительно 50 мг/мл в суммарном объеме суспензии. Сразу после добавления воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя к сухому исследуемому лекарству флакон(ы) закрывают и интенсивно встряхивают вручную в течение приблизительно 60 сек для достижения однородности суспензии. Хотя суспензия может оставаться в исходном пластиковом флаконе на протяжении периода времени до 24 часов до приема, рекомендуется принимать лекарство вскоре после восстановления. При наличии паузы более 15 минут между восстановлением и дозированием, флакон следует интенсивно встряхнуть вручную в течение приблизительно 60 секунд.
Лечение производят непрерывным введением в течение времени, необходимого для больного кистозным фиброзом или предрасположенного к кистозному фиброзу. В Таблице 1 представлены показательные режимы ежедневного дозирования 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, при котором введение производится три раза в день с 6-, 6- и 12-часовыми интервалами (например, в ~7:00 утра, ~1:00 дня и ~7:00 вечера) вместе с пищей. В отдельном варианте осуществления больному вводят 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат, как показано в Таблице 1, непрерывно в течение 14 дней с перерывом в течение 14 дней, последующим дополнительным введением в течение 14 дней и еще одним перерывом в течение 14 дней. В еще одном варианте осуществления больному вводят 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат, как показано в Таблице 1, непрерывно в течение 14 дней в трех дозах в течение дня в количестве 4 мг/кг, 4 мг/кг и 8 мг/кг с перерывом в течение 14 дней, последующим дополнительным введением в течение 14 дней трех доз в день количестве 10 мг/кг, 10 мг/кг и 20 мг/кг и еще одним перерывом в течение 14 дней. В некоторых вариантах осуществления ежедневно следуют режиму введения однократной дневной дозы, представленной в Таблице 1. В других вариантах осуществления в разные дни могут реализоваться разные режимы дозирования, указанные в Таблице 1.
Таблица 1
Схема дозирования
  1 2 3 4
Режим TID дозирование с едой TID дозирование с едой TID дозирование с едой TID дозирование с едой
Схема Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение
Время Доза
~7:00 утра 4 мг/кг 7 мг/кг 10 мг/кг 20 мг/кг
~1:00 дня 4 мг/кг 7 мг/кг 10 мг/кг 20 мг/кг
~7:00 вечера 8 мг/кг 14 мг/кг 20 мг/кг 40 мг/кг
Обозначения: TID = три раза в день
Больные предпочтительно принимают лекарство в пределах 30 минут после еды; в идеале лекарство принимается с приблизительно 6-, 6- и 12-часовыми интервалами (например, в ~7:00 утра после завтрака, ~1:00 дня после обеда и ~7:00 вечера после ужина). Больные потребляют лекарство путем наполнения каждого флакона необходимым количеством воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя, закрытия крышкой и встряхивания каждого флакона в течение приблизительно 60 секунд с последующим проглатыванием содержимого необходимого для дозы количества флаконов необходимого размера. Всю дозу восстановленного лекарства следует принимать сразу. После проглатывания флакон с дозой наполняют наполовину водой или другим фармацевтически приемлемым растворителем, закрывают крышкой и встряхивают, и больной проглатывает эту воду или другой фармацевтически приемлемый растворитель из флакона. Эта процедура промывки производится один раз. В некоторых вариантах осуществления лекарство поставляется в виде саше. В этих вариантах осуществления подходящее количество лекарства может быть отвешено или отмерено и соединено с подходящим фармацевтически приемлемым растворителем перед введением.
5.3 Пример 3: Пероральное лечение мышечной дистрофии Дюшенна, опосредуемой нонсенс-мутацией
В настоящем примере демонстрируется иллюстративный режим дозирования, пригодный для лечение мышечной дистрофии Дюшенна, опосредуемой нонсенс-мутацией.
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат предлагается в виде порошка с ванильным ароматизатором для получения суспензии. Лекарство производится в соответствии современными условиями осуществления производства продуктов (cGMP). Состав может включать связующие и суспендирующие агенты, поверхностно-активные вещества и различные минорные эксципиенты, способствующие процессу производства. Смесь может быть упакована в 40-мл пластиковые (высокоплотный полиэтилен[HDPE]) флаконы, закрытые уплотнительной прокладкой из фольги и белой пластиковой недоступной для детей крышкой. Каждый флакон может содержать 125, 250 или 1000 мг лекарственного вещества, которое составляет 25,0% от общей массы состава. Альтернативно, смесь может быть предоставлена в виде состава саше, таком, как представленном в Примере 6. Эксципиенты (и их доли от общей массы состава) включают суспендирующий агент (Litesse® Ultra [очищенная полидекстроза] - 25,7%), связующий агент, который может также обеспечивать маскировку вкуса (манит - 25,0%), поверхностно-активные агенты (полиэтиленгликоль 3350 - 12,8% и Lutrol® micro F127 [порошок полоксамера 407] - 3,7%), разрыхлитель (кросповидон - 5,0%), и могут присутствовать другие эксципиенты, каждый в количестве менее 2% (гидроксиэтилцеллюлоза, ванильный ароматизатор, стеарат магния [не бычий] и коллоидный диоксид кремния). На этикетке флакона указывается наименование лекарственного вещества, номер партии, количество лекарственного вещества и условия хранения (например, комнатная температура или охлаждение при температуре от 5° до 8°С).
Дозирование лекарственного вещества основывается на миллиграммах лекарства на килограмм массы тела больного. Следует рассчитать общий объем, соответствующий общему количеству миллиграммов лекарства, предназначенному для введения больному. Например, если 30-кг больному следует получить 4 мг/кг, то подлежащая доставке доза должна составлять 30 × 4 = 120 мг. Этому больному следует вводить дозу с использованием флакона с дозой 250 мг. Поскольку каждый мл суспензии во флаконе с дозой 250 мг содержит 250/10 = 25 мг лекарства, то этот больной должен получать 120/25 = ~5 мл суспензии для каждой дозы 4 мг/кг. Тот же самый больной при лечении дозой 8 мг/кг вечером должен получать один 250-мг флакон (10 мл суспензии). Эти объемы суспензий для соответствующих доз следует отбирать из флакона с лекарством с помощью пластикового шприца для перорального дозирования. Для переноса частей объема <10 (для 250-мг флакона) или <20 мл (для 1000-мг флакона) желаемое количество следует отобрать из флакона с исследуемым лекарством в шприц для дозирования подходящего типа и размера (например, Baxa, Exacta-Med, калиброванный, не содержащий латекс, пластиковый шприц для перорального дозирования) и дозировать с помощью того же шприца. В течение первых 24 часов после восстановления из одного и того же флакона с суспензией может быть принято >1 дозы; однако не следует хранить восстановленное лекарство более 24 часов с намерением вновь использовать это вещество для многократных доз для того же больного. Если общее количество лекарства, подлежащее потреблению за 1 день, превышает 10 мл (для 250-мг флакона) или 20 мл (для 1000-мг флакона) восстановленного лекарства, то следует использовать новый флакон лекарства для каждого дозирования.
Восстановление и дозирование лекарственного продукта производят при комнатной температуре. Перед восстановлением лекарственного продукта нет необходимости в его специальном нагревании. Лекарство может быть восстановлено с любым фармацевтически приемлемым растворителем (например, водой, молоком, газированным напитком, соком, яблочным пюре, детским питанием или детской смесью). К каждому предлагаемому 250-мг флакону добавляют ~10 мл воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя для получения концентрации приблизительно 25 мг/мл в суммарном объеме суспензии. К каждому предлагаемому 1000-мг флакону добавляют ~20 мл воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя для получения концентрации приблизительно 50 мг/мл в суммарном объеме суспензии. Сразу после добавления воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя к сухому исследуемому лекарству флакон(ы) закрывают и интенсивно встряхивают вручную в течение приблизительно 60 сек для достижения однородности суспензии. Хотя суспензия может оставаться в исходном пластиковом флаконе на протяжении периода времени до 24 часов до приема, рекомендуется принимать лекарство вскоре после восстановления. При наличии паузы более 15 минут между восстановлением и дозированием, флакон следует вновь интенсивно встряхнуть вручную в течение приблизительно 60 секунд.
Лечение производят непрерывным введением в течение времени, необходимого для больного мышечной дистрофией Дюшенна или предрасположенного к мышечной дистрофии Дюшенна. В Таблице 2 представлены показательные режимы ежедневного дозирования 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, при котором введение производится три раза в день с 6-, 6- и 12-часовыми интервалами (например, в ~7:00 утра, ~1:00 дня и ~7:00 вечера) вместе с пищей. В отдельном варианте осуществления больному вводят 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат по одному из режимов дозирования, показанных в Таблице 2, непрерывно в течение 28 дней. В некоторых вариантах осуществления ежедневно следуют режиму введения однократной дневной дозы, представленному в Таблице 2. В других вариантах осуществления в разные дни могут реализоваться разные режимы дозирования, указанные в Таблице 2. В некоторых вариантах осуществления лекарство предлагается в виде саше. В этих вариантах осуществления подходящее количество лекарства может быть взвешено или отмерено и соединено с подходящим фармацевтически приемлемым растворителем перед введением.
Таблица 2
Схема дозирования
  1 2 3 4
Режим TID дозирование с едой TID дозирование с едой TID дозирование с едой TID дозирование с едой
Схема Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение Непрерывное ежедневное введение
Время Доза
~7:00 утра 4 мг/кг 7 мг/кг 10 мг/кг 20 мг/кг
~1:00 дня 4 мг/кг 7 мг/кг 10 мг/кг 20 мг/кг
~7:00 вечера 8 мг/кг 14 мг/кг 20 мг/кг 40 мг/кг
Обозначения: TID = три раза в день
Больным вводят лекарство в пределах 30 минут после еды; в идеале лекарство принимается с приблизительно 6-, 6- и 12-часовыми интервалами (например, в ~7:00 утра после завтрака, ~1:00 дня после обеда и ~7:00 вечера после ужина). Больные потребляют лекарство путем наполнения каждого флакона необходимым количеством воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя, закрытия крышкой и встряхивания каждого флакона в течение приблизительно 60 секунд, отбора необходимого объема из флакона с помощью шприца для перорального дозирования и проглатывания содержимого прямо из шприца для дозирования. Весь рассчитанный объем восстановленного лекарства, соответствующий дозе, следует принимать сразу. После проглатывания лекарства больному следует наполнить шприц для дозирования тем же, что и объем дозы, объемом воды или другого фармацевтически приемлемого растворителя и проглотить. Эту процедуру промывки следует производить один раз.
Эффективность лечения может быть определена путем измерения изменения уровней дистрофина в биоптате мышцы extensor digitorum brevis (EDB, короткого разгибателя пальцев) ноги по сравнению исходным уровнем.
5.4 Пример 4: Получение лишенных запаха доз 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат предлагается в виде порошка для получения суспензии. Лекарство производится в соответствии современными условиями осуществления производства продуктов (cGMP). Лекарство может быть тщательно смешано со связующими и суспендирующими агентами, поверхностно-активными веществами и различными минорными эксципиентами, способствующими процессу производства. Смесь упаковывают в 40-мл пластиковые (высокоплотный полиэтилен[HDPE]) флаконы, закрытые уплотнительной прокладкой из фольги и белой пластиковой недоступной для детей крышкой. Каждый флакон может содержать приблизительно 35 мг, приблизительно 70 мг, приблизительно 125 мг, приблизительно 140 мг, приблизительно 175 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 280 мг, приблизительно 350 мг, приблизительно 560 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 1000 мг или приблизительно 1400 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Эксципиенты (и их доли от общей массы состава) необязательно включают суспендирующий агент (Litesse® Ultra [очищенная полидекстроза] - 25,7%), связующий агент, который может также обеспечивать маскировку вкуса (маннит - 25,0%), поверхностно-активные агенты (полиэтиленгликоль 3350 - 12,8% и Lutrol® micro F127 [порошок полоксамера 407] - 3,7%), разрыхлитель (кросповидон - 5,0%), и могут присутствовать другие эксципиенты, каждый в количестве менее 2% (cab-o-sil, гидроксиэтилцеллюлоза, стеарат магния [не бычий] и коллоидный диоксид кремния). На этикетке флакона указывается наименование лекарственного вещества, номер партии, количество лекарственного вещества и условия хранения (например, охлаждение при температуре от 5° до 8°С). Перед введением лекарственный продукт восстанавливают в подходящем объеме фармацевтически приемлемого растворителя (например, воды, молока, газированного напитка, сока, яблочного пюре, детского питания или детской смеси).
5.5 Пример 5: Получение пахучих доз 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат предлагается в виде порошка с ванильным ароматизатором (например, путем добавления ванильного экстракта) для получения суспензии. Лекарство производится в соответствии современными условиями осуществления производства продуктов (cGMP). Лекарство может быть тщательно смешано со связующими и суспендирующими агентами, поверхностно-активными веществами и различными минорными эксципиентами, способствующими процессу производства. Смесь упаковывают в 40-мл пластиковые (высокоплотный полиэтилен[HDPE]) флаконы, закрытые уплотнительной прокладкой из фольги и белой пластиковой недоступной для детей крышкой. Каждый флакон может содержать приблизительно 35 мг, приблизительно 70 мг, приблизительно 125 мг, приблизительно 140 мг, приблизительно 175 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 280 мг, приблизительно 350 мг, приблизительно 560 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 1000 мг или приблизительно 1400 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Эксципиенты (и их доли от общей массы состава) необязательно включают суспендирующий агент (Litesse® Ultra [очищенная полидекстроза] - 25,7%), связующий агент, который может также обеспечивать маскировку вкуса (маннит - 25,0%), поверхностно-активные агенты (полиэтиленгликоль 3350 - 12,8% и Lutrol® micro F127 [порошок полоксамера 407] - 3,7%), разрыхлитель (кросповидон - 5,0%), и могут присутствовать другие эксципиенты, каждый в количестве менее 2% (cab-o-sil, гидроксиэтилцеллюлоза, ванильный ароматизатор, стеарат магния [не бычий] и коллоидный диоксид кремния). На этикетке флакона затем указывается наименование лекарственного вещества, номер партии, количество лекарственного вещества и условия хранения (например, охлаждение при температуре от 2° до 8°С). Перед введением лекарственный продукт восстанавливают в подходящем объеме фармацевтически приемлемого растворителя (например, воды, молока, газированного напитка, сока, яблочного пюре, детского питания или детской смеси). Лекарственный продукт может храниться при комнатной температуре до 48 часов перед восстановлением.
Был процитирован ряд ссылок, полное раскрытие которых включено в настоящее описание в качестве ссылки в их полном объеме.
5.6 Пример 6: Состав саше 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата
Смесь упаковывают с использованием мешочка или саше, который состоит из множества слоев, которые могут включать слой бумаги, слой алюминиевой фольги и слой сурлина. Каждое саше может содержать приблизительно 125 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 500 мг или приблизительно 1000 мг 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Эксципиенты (и их доли от общей массы состава) необязательно включают любой из следующих, как показано в Таблице 3 и Таблице 4.
Таблица 3
Состав
Ингредиент Масса, %
3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат 25,0
Litesse® Ultra 24,75
Полиэтиленгликоль 12,8
Lutrol® micro 3,7
Маннит 25,0
Гидроксиэтилцеллюлоза 1,5
Ванильный ароматизатор 0,75
Кросповидон 5,0
Cab-o-sil 0,5
Стеарат магния 0,5
Тальк 0,5
Таблица 4
Состав
Ингредиент Масса %
3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль, сольват или гидрат 25,0
Litesse® Ultra 25,65
Полиэтиленгликоль 12,8
Lutrol® micro 3,7
Маннит 25,0
Гидроксиэтилцеллюлоза 1,5
Ванильный ароматизатор 0,75
Кросповидон 5,0
Cab-o-sil 0,1
Стеарат магния 0,5
На этикетке саше затем указывается наименование лекарственного вещества, номер партии, количество лекарственного вещества и условия хранения (например, охлаждение при температуре от 2° до 8°С). Перед введением соответствующее количество лекарственного продукта восстанавливают в соответствующем объеме фармацевтически приемлемого растворителя (например, воды, молока, газированного напитка, сока, яблочного пюре, детского питания или детской смеси). Лекарственный продукт может храниться при комнатной температуре до 48 часов перед восстановлением.
5.7 Пример 7: Анализ разности трансэпителиального потенциала (TEPD)
Измерение разности трансэпителиального потенциала (TEPD), известной также как разность назального потенциала, обеспечивает чувствительную оценку транспорта натрия и хлорида непосредственно в секреторных эпителиальных клетках посредством оценки трансэпителиальных биоэлектрических свойств (Knowles et al., 1981, N. Engl. J. Med. 305(25):1489-95; Knowles et al., 1995, Hum. Gene Ther. 6:445). TEPD проводят в каждой ноздре с использованием стандартизованных методов (Standaert et al., 2004, Ped. Pulm. 57:385-92). При процедуре для оценки электрических различий с двух сторон наружной клеточной мембраны клеток слизистой носа в ноздре используют небольшой пластиковый катетер. Величины TEPD выражают в милливольтах, или мв. Хлоридную проводимость, равную или превышающую электроотрицательность -5,0 мв, обычно рассматривают как соответствующую нормальному диапазону. Оценки TEPD производят для назальных эпителиальных клеток, выстилающих нижнюю носовую раковину, поскольку эти клетки более доступны, чем дыхательные эпителиальные клетки, выстилающие нижерасположенные дыхательные пути, и которые, как было показано, обладают такими же транспортными свойствами для ионов (Knowles et al., 1981, Am. Rev. Respir. Dis. 124(4):484-90). Оценки с помощью TEPD могут также производиться на эпителиальных клетках прямой кишки и эпителиальных клетках нижних дыхательных путей. В связи с ролью белка CFTR в транспорте ионов хлорида через клеточные мембраны и в связи с отсутствием этого белка у больных кистозным фиброзом у этих больных наблюдается аномальная TEPD хлоридная проводимость. В качестве конечного показателя TEPD имеет преимущество в том, что с его помощью можно определять изменения в транспорте хлорида, которые представляют собой сумму наличия, функциональной активности и апикальной локализации CFTR в клетках дыхательных путей. Более того, измерение активности CFTR является прямым, на которое, видимо, не влияет поддерживающее или паллиативное лечение CF (за возможным исключением системного введения аминогликозидных антибиотиков). Важно, что имеется указание на возможность корреляции величин TEPD со степенью легочной дисфункции и радиографической аномалии (Ho et al., 1997, Eur. Respir. J. 10(9):2018-22; Fajac et al., 1998, Eur. Respir. J. 12(6):1295-300; Sermet-Gaudelus et al., 2005, Am. J. Respit. Crit. Care Med. 171 (9): 1026-1031). В частности, оценка TEPD индуцированной изопротеренолом хлоридной активности CFTR показала более высокую предикативную величину по сравнению с генотипом в определении FEV1 и радиологического показателя (Ho et al., 1997, Eur Respir J. 10(9):2018-22). Очень маловероятно, чтобы оцениваемая TEPD активность хлоридного канала спонтанно нормализовалась у больных с CF при базальных условиях; ожидается, что любые наблюдаемые улучшения оцениваемой TEPD активности хлоридного канала конкретно указывают на фармакологическую активность корректирующих CFTR лекарственных средств. Соответственно, она стала главным конечным показателем в исследованиях по фармакологической и генной заместительной терапии фазы 1-2, направленной на коррекцию дисфункции CFTR (Peckham et al., 1995, AJ. Clin Sci (London). 89(3):277-84; Wilschanski et al., 2003, N. Engl. J. Med. 349(15): 1433-41).
5.8 Пример 8: Иммунофлуоресценция CFTR
Сбор и обработку соскобов слизистой носа из каждой ноздри больного для измерения белка CFTR с помощью иммунофлуоресценции и количественного определения мРНК CFTR проводят с помощью стандартизованных методов (Clancy et al., 2001, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 163(7):1683-92; Amaral et al., 2004, J. Cyst. Fibros. 3 Suppl 2:17-23). Иммунофлуоресцентное окрашивание нормальных эпителиальных клеток (например, из соскобов слизистой носа) показывает наличие основной части белка CFTR на апикальной поверхности. На животных моделях CF, опосредуемой нонсенс-мутацией, и у больных CF, опосредуемой нонсенс-мутацией, окрашивание отсутствует (например, у больных, гомозиготных по мутации с преждевременным стоп-кодоном) или наблюдается преимущественно в области вокруг ядра (например, у больных с мутацией ΔF508, которая препятствует нормальному внутриклеточному перемещению). Было показано, что успешная продукция функционального белка CFTR дикого или недикого типа и у животных моделей, и у больных связана с восстановлением апикального эпителиального белка CFTR при оценке с помощью иммунофлуоресценции (Clancy et al., 2001, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 163(7):1683-92; Wilschanski et al., 2003, N. Engl. J. Med. 349(15):1433-41).
5.9 Пример 9: Тесты легочной функции
Тесты легочной функции, включая FEV1, FVC и MEF25-75 производят с помощью стандартных процедур спирометрии. Оценки легочной функции (включая MEF25-75, FVC и особенно FEV1) отмечались как определяющие клинические конечные показатели у больных CF (Food and Drug Administration, 62nd Anti-Infective Drugs Advisory Committee. Discussion of NDA for tobramycin solution for inhalation (Tobi®) for the management of cystic fibrosis patients. November, 1997; Tiddens, 2002, Pediatr. Pulmonol. 34(3): 228-31). Было показано, что FEV1 и другие измеряемые показатели легочной функции коррелируют с тяжестью заболевания, предсказывают болезненность в плане использования медицинской помощи и использования антибиотиков IV и указывают на риск связанной с CF смертности (Food and Drug Administration, 62nd Anti-Infective Drugs Advisory Committee. Discussion of NDA for tobramycin solution for inhalation (Tobi®) for the management of cystic fibrosis patients. November, 1997). Проведение тестирования легочной функции является простым (даже у больных в возрасте 7 лет) с использованием широко распространенных стандартизованных оборудования и методов. Интерпретацию осуществляют с помощью широко признанных нормативных уравнений, учитывающих возраст, рост и пол больного. Признано, что улучшение FEV1 служит количественной демонстрацией значимой клинической эффективности при CF, и это послужило основанием для документального принятия дорназы альфа и ингалируемого тобрамицина (Food and Drug Administration, 62nd Anti-Infective Drugs Advisory Committee. Discussion of NDA for tobramycin solution for inhalation (Tobi®) for the management of cystic fibrosis patients. November, 1997).
5.10 Пример 10: Исследование фазы 2 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты в качестве перорального лекарства для опосредуемого нонсенс-мутацией кистозного фиброза
Для включения в исследование больные должны отвечать всем следующим условиям:
1. Диагноз CF на основании документированного подтверждения явно аномального теста слюны (хлорид слюны >60 мЭкв/литр с использованием пилокарпинового ионотофореза (LeGrys, Sweat testing: Sample collection and quantitative analysis: Approved guidelines - Second edition. National Committee for Clinical Laboratory Standards 2000;Vol 20:14));
2. Аномальная секреция хлорида, измеренная с помощью TEPD (положительнее -5 мв по оценке TEPD секреции хлорида под действием амилорида и изопротеренола в отсутствие хлорида);
3. Наличие нонсенс-мутации в одном из аллелей гена cftr;
4. Документированное подтверждение проведения секвенирования гена cftr;
5. Возраст ≥ 18 лет;
6. Масса тела ≥ 40 кг;
7. FEV1 ≥ 40%от предсказанного на основании возраста, пола и роста (стандарты Кнадсона) (Knudson, 1983, Am. Rev. Respir. Dis. 127: 725-734);
8. Насыщенность кислородом (по измерению с помощью импульсной оксиметрии) ≥ 92% в комнатном воздухе;
9. Готовность больных мужчин и женщин, если они не стерилизованы хирургически, воздерживаться от половых сношений или использовать барьерный или медицинский метод предупреждения беременности во время исследования с введением лекарства и в последующие периоды;
10. Отрицательный тест на беременность (для женщин с детородным потенциалом);
11. Готовность и возможность осуществлять назначенные визиты, следовать плану введения, процедурам исследования (включая измерения TEPD, клинические лабораторные тесты и сбор PK) и ограничениям исследования;
12. Способность дать письменное основанное на получении информации согласие; и
13. Наличие лично подписанного и датированного документа об основанном на получении информации согласии, указывающего на то, что больной был информирован обо всех аспектах, имеющих отношение к исследованию.
Наличие любого из следующих условий исключало больного из исследования:
1. Предшествующее или имеющееся медицинское состояние (например, сопутствующее заболевание, психиатрическое состояние, алкоголизм, наркотическая зависимость), история болезни, физические данные, данные ЭКГ или лабораторная аномалия, которые, по мнению исследователя, могли бы неблагоприятно повлиять на безопасность больного, делали бы маловероятным завершение курса лечения или последующего отслеживания или могли бы исказить оценку результатов исследования;
2. Имеющееся острое заболевание, включая острые инфекции верхних или нижних дыхательных путей в пределах 2 недель до начала лечения исследования;
3. История болезни о значительных осложнениях заболевания легких (включая недавнее обильное кровохарканье или пневмоторакс) в пределах 2 месяцев до начала лечения исследования;
4. Аномалии при рентгеновском скрининге грудной клетки, позволяющие предполагать клинически значимое активное легочное заболевание, отличное от CF, или новые значимые аномалии, такие как ателектаз или плевральный выпот, которые могут указывать на клинически значимое активное легочное повреждение, вторичное по отношению к CF;
5. Положительный тест на поверхностный антиген гепатита B, тест с антителом против гепатита C или тест на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ);
6. Гемоглобин <10 г/дл;
7. Сывороточный альбумин <2,5 г/дл;
8. Аномальная функция печени (общий билирубин сыворотки > верхней границы нормы или ALT, AST или GGT > чем в 2,0 раза выше верхней границы нормы);
9. Аномальная функция почек (креатин сыворотки > чем в 1,5 раз выше верхней границы нормы);
10. Беременность или кормление грудью;
11. История болезни о трансплантации органа или переливании крови;
12. Экспозиция с другим исследуемым лекарством в пределах 14 дней до начала лечения исследования;
13. Участие в любом другом терапевтическом клиническом испытании;
14. Использование тиазолидиндионовых агонистов рецептора гамма активаторов пролиферации пероксисом (PPARγ), например, розиглитазона (Avandia® или эквивалент) или пиоглитазона (Actos® или эквивалент);
15. Смена интраназальных лекарственных средств (включая использование кортикостероидов, кромолина, ипратропия бромида, фенилэфрина или оксиметазолина) в пределах 14 дней до начала лечения исследования;
16. Смена лечения системными или ингалируемыми кортикостероидами в пределах 14 дней до начала лечения исследования;
17. Использование или потребность в использовании ингаляции гентамицина или амикацина в пределах 14 дней до начала лечения исследования или во время лечения исследования; или
18. Потребность в системных аминогликозидных антибиотиках в пределах 14 дней до начала лечения исследования.
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота была предоставлена в составе, описанном в настоящем описании. 15 больным (12 фазы 2 испытания, проводившегося в Израиле, и 3 фазы 2 испытания, проводившегося в Соединенных Штатах; семеро больных мыли мужчинами и 8 были женщинами; медианный возраст больных составлял 22 года; и у всех больных имелись множественные признаки и симптомы кистозного фиброза, включая в определенной мере легочную дисфункцию) перорально вводили 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту в соответствии со следующей 56-дневной схемой: введение 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты три раза в день (TID) в дозе 4 мг/кг, 4 мг/кг и 8 мг/кг в течение 14 дней с последующим перерывом в лечении в течение 14 дней (цикл 1 из 28 дней) с последующим введением 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты три раза в день (TID) в дозе 10 мг/кг, 10 мг/кг и 20 мг/кг в течение 14 дней и последующим перерывом в лечении в течение 14 дней (цикл 2 из 28 дней).
Клинические конечные показатели оценивали с помощью процедур, изложенных выше. Измерения TEPD производили до лечения и на 14 и 28 дни цикла 1 и цикла 2. У каждого больного брали соскобы слизистой из каждой ноздри до лечения и на 14 и 28 дни цикла 1 и цикла 2. Легочные тесты, включая FEV1, FVC и MEF25-75, производили до лечения, в день -1 цикла 2, на 13 или 14 день цикла 1 или на 13 или 14 день цикла 2 в исследовании, проводившемся в Израиле, и те же параметры измеряли до лечения и на 13 или 14 день цикла 2 в исследовании, проводившемся в Соединенных Штатах.
Среднее изменение в TEPD хлоридной проводимости . Этот параметр представляет собой среднее изменений TEPD хлоридной проводимости от начала и до конца периода лечения у каждого участника исследования. Например, если изменения TEPD хлоридной проводимости у каждого из трех участников составляли -7,0 мв, -2,0 мв и -9,0 мв, среднее изменение TEPD хлоридной проводимости у этих участников должно составлять -6,0 мв.
Доля больных с ответом хлоридной проводимости . Этот параметр представляет собой долю больных с проявлением ответа TEPD хлоридной проводимости в конце лечения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой. В целях испытания ответ хлоридной проводимости определяется как улучшение TEPD хлоридной проводимости, по меньшей мере, на -5 мв. Например, у больного с исходной величиной TEPD хлоридной проводимости +1 мв и величиной TEPD хлоридной проводимости -6,0 мв в конце лечения улучшение TEPD хлоридной проводимости должно составлять -7,0 мв, что является ответом хлоридной проводимости.
Доля больных с возвращением величин TEPD хлоридной проводимости в нормальный диапазон. Как отмечалось выше, хлоридная проводимость, равная или превышающая электроотрицательность -5 мв, обычно рассматривается как соответствующая нормальному диапазону. Если так, то больного с исходной величиной TEPD хлоридной проводимости +1 мв следует рассматривать как имеющего аномальное значение, поскольку величина более электроположительна, чем -5,0 мв. Если в конце лечения величина TEPD хлоридной проводимости больного улучшалась до -6 мв, то это должно представлять собой возвращение в нормальный диапазон, поскольку улучшенная величина более электроотрицательна, чем -5,0 мв.
На основании пола, возраста и роста больных среднее значение величины FEV1 в начале исследования составляло 66% от нормы, а среднее значение величины FVC в начале исследования составляло 80% от нормы. У четырнадцати из 15 больных, включенных в анализ, имела место колонизация дыхательных путей Pseudomonas aeruginosa, обычной бактериальной инфекцией у больных с кистозным фиброзом, которая может вести к тяжелой пневмонии. У четырнадцати из 15 больных также имелась недостаточность поджелудочной железы с потребностью в хронической заместительной терапии ферментами поджелудочной железы. У больных была малая масса тела при средней массе тела 58,3 кг в начале исследования.
В Таблице 5 представлены результаты TEPG для 5 больных. Для каждого измерения представлены результаты на основе лучшей из ноздрей и среднего для обеих ноздрей. Ранее результаты тестов TEPD обычно представлялись на основе лучшей из ноздрей. Однако в соответствии с недавними указаниями, принятыми Cystic Fibrosis Therapeutics Development Network, рекомендуется представлять результаты TEPD на обеих основах. Были отмечены улучшения в TEPD хлоридной проводимости у больных с разными типами нонсенс-мутаций в гене CFTR.
Таблица 5
Результат TEPD Низкий уровень дозы Высокий уровень дозы
Результат Величина p Результат Величина p
Среднее изменение TEPD хлоридной проводимости:        
Лучшая из ноздрей -9,0 мв <0,001 -6,4 мв 0,010
Среднее для обеих ноздрей -6,7 мв <0,001 -4,4 мв 0,023
Количество больных с улучшением TEPD хлоридной проводимости ≥ -5 мв:        
Лучшая из ноздрей 9/15 (60%) <0,001 8/15 (53%) <0,001
Среднее для обеих ноздрей 6/15 (40%) 0,005 7/15 (47%) <0,001
Количество больных с улучшением TEPD хлоридной проводимости до нормы:        
Лучшая из ноздрей 8/15 (53%) 0,008 8/15 (53%) <0,008
Среднее для обеих ноздрей 6/15 (40%) 0,032 7/15 (47%) <0,016
Лечебные эффекты низкой и высокой дозы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты статистически не различались, что позволяет предполагать, что дальнейшее увеличение дозы может не быть необходимым и что даже меньшие дозы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты могут быть эффективны для улучшения TEPD хлоридной проводимости. Наблюдались также статистически значимые результаты и положительные тенденции для вторичных конечных показателей. В частности, хотя испытания не были усилены для выявления статистически значимых изменений для вторичных конечных показателей, наблюдались статистически значимое улучшение от начала исследования до окончания цикла лечения высокой дозой в величинах FEV1, FVC и массы больных. Результаты представлены в Таблице 6. В результаты по изменению функции легких один больной не был включен, поскольку у этого больного не было проведено измерение функции легких в конце цикла лечения высокой дозой.
Таблица 6
Конечный показатель Начало исследования Окончание лечения высокой дозой Изменение Величина p
Функция легких (выраженная в виде процента от нормы по полу, возрасту и росту):        
Среднее FEV1 65,8% 69,1% 3,3% 0,015
Среднее FVC 80,2% 85,1% 4,9% 0,037
         
Масса 58,3 кг 59,0 кг 0,7 кг 0,012
Кроме того, хотя изменения симптомов больного формально не измерялись путем использования анкеты по качеству жизни, у исследователей испытания были запрошены сведения об изменениях в симптомах кистозного фиброза. Из 15 больных, включенных в промежуточный анализ, у 6 больных отмечено общее улучшение самочувствия, у 6 отмечено ослабление кашля и у 10 отмечено снижение вязкости слизи и большая прозрачность слизи.
5.11 Пример 11: Экспрессия дистрофина, саркогликана и дистрогликана по данным иммунофлуоресценции и иммуноблоттинга
Биопсию мышцы EDB и покрывающей кожи из ступни проводят под местной анестезией и успокоением в сознании (в некоторых случаях может потребоваться общая анестезия) до лечения и из другой ступни в последний день лечения. Процедуру биопсии производят с помощью стандартных методов (Stedman, 2000, Human Gene Therapy 11:777-90). При процедуре (когда это возможно) отбирают весь мышечный слой. В момент получения биоптата перед лечением образец мышцы разделяют, по меньшей мере, на 3 фрагмента, а образец биоптата, полученного в последний день лечения, разделяют, по меньшей мере, на 2 фрагмента. Образец биоптата помещают в тельфовый марлевый тампон, смоченный раствором Рингера. Образец биоптата исследуют при низком увеличении с помощью анатомического стереомикроскопа для установления ориентации волокон. После этого мышцу рассекают с помощью острого скальпеля поперек (перпендикулярно ориентации волокон), когда это возможно, и оставляют на 2 минуты для обеспечения прекращения спазма. Образец затем замораживают в изопентане, охлажденном в жидком азоте, переносят в емкость с жидким азотом и удерживают на расстоянии 1 дюйма над поверхностью раздела жидкость/пар в течение 2 минут для медленного охлаждения и испарения изопентана перед погружением в жидкий азот с последующим завертыванием в предварительно охлажденную (в жидком азоте и хранившуюся на сухом льду) фольгу с этикеткой, содержащей номер исследования, номер сайта, номер больного, дату, инициалы больного и сторону ступни (правая ступня или левая ступня).
Все контейнеры с образцами имеют ясные этикетки для идентификации индивидуума и даты получения. Этикетки фиксируют на контейнерах с образцами способом, предотвращающим отделение этикеток. Образцы отправляются для анализа/культивирования/общей оценки сразу после проведения процедуры. Для выявления дистрофина используют 3 имеющихся в продаже антитела, которые узнают C-конец, N-конец и стержневой домен белка. Для выявления комплекса саркогликана и дистрогликана по возможности используют имеющиеся в продаже антитела против α-, β-, γ- и δ-саркогликана и β-дистрогликана. Для анализа используют эпифлуоресцентную микроскопию; изображения фиксируют с помощью CCD фотоаппарата после нормализации интенсивности флуоресценции по отношению к образцу нормальной мышцы. Изображения сохраняют в цифровом формате и сохраняют для последующей оценки и окончательной оценки после завершения исследования. Ткани также обрабатывают для выявления дистрофина, саркогликанов и β-дистрогликана с помощью иммуноблоттинга с применением тех же антител. Микроскопические изображения фиксируют и сохраняют для последующей оценки и окончательной оценки после завершения исследования. Оставшиеся образцы мышечной ткани сохраняют для подтверждающих анализов мРНК и белков, участвующих в DMD. Для выявления белка используют иммунологическое окрашивание и иммуноблоттинг.
Биопсия мышцы обычно производят у индивидуумов с DMD в качестве компонента диагностики и меры терапевтического действия в контексте поисковых исследований. EDB была выбрана в связи с тем, что она не является мышцей, необходимой для повседневной активности, и поэтому отбор образца этой мышцы не оказывает неблагоприятного функционального воздействия на индивидуум. Поскольку мышца EDB мало используется, маловероятно, чтобы в ней проявлялось фиброзное замещение мышцы, и, таким образом, представляет собой подходящую ткань для выявления образования дистрофина. Отбор образцов мышцы EDB дает дополнительные практические выгоды, поскольку ее легко идентифицировать, можно препарировать под местной анестезией, и она обеспечивает достаточное количество ткани для проведения необходимых анализов. Иммунофлуоресценция и иммуноблоттинг представляют собой рутинные тесты, проводящиеся на образцах мышечных биоптатов для подтверждения наличия или отсутствия полноразмерного дистрофина. Отсутствие дистрофина рассматривается как подтверждение диагноза DMD. Восстановление дистрофина с локализацией в мышечной мембране рассматривалось в качестве прямого показателя доклинической и клинической фармакодинамической активности (Barton-Davis, 1999, J. Clin. Invest. 104(4):375-81; Politano, 2003, Acta Myol. 22(1): 15-21).
5.12 Пример 12: Миометрия верхних и нижних конечностей
Миометрию верхних и нижних конечностей производят с помощью ручного миометра в соответствии со стандартизированными процедурами (Beenakker, 2001, Neuromuscul. Disord. 11(5):441-6; Hyde, 2001, Neuromuscul. Disord. 11(2):165-70). Рекомендуется (в зависимости от исходного состояния индивидуума), чтобы оцениваемые группы мышц включали мышцы, отводящие бедро, разгибатели колена, локтевые сгибатели и разгибатели и сгибатели руки. Можно производить двустороннюю оценку, и на каждой стороне можно записывать по три измерения для каждой группы мышц. Эти параметры отслеживаются до лечения, через день после окончания лечения и на протяжении отслеживаемого периода после лечения. В периоды до лечения и лечения процедуры миометрии производят до мышечной биопсии.
Миометрические оценки с помощью ручного динамометра представляют собой чувствительный и воспроизводимый показатель мышечной силы у амбулаторных и неамбулаторных индивидуумов (Beenakker, 2001, Neuromuscul. Disord. 11(5):441-6; Hyde, 2001, Neuromuscul. Disord. 11(2):165-70). Межэкспертная надежность у индивидуумов с мышечной дистрофией является высокой (Stuberg, 1988, Phys. Ther. 1988 68(6):977-82; Hyde, 2001, Neuromuscul. Disord. 11(2): 165-70). По сравнению с ручным тестированием мышечной силы миометрия является более чувствительным и менее сложным способом измерения мышечной функции (McDonald, 1995, Am. J. Phys. Med. Rehabil. (5 Suppl):S70-92). Тест может быть легко произведен экспертом (например, врачом или физиотерапевтом).
5.13 Пример 13: Нормированные по времени функциональные тесты
Нормированные по времени функциональные тесты включают время, затрачиваемое на вставание из положения лежа на спине, время, затрачиваемое на прохождение 10 метров, и время, затрачиваемое на подъем на 4 ступени стандартного размера (Mendell, 1989, N. Engl. J. Med. 320(24):1592-7; Griggs, 1991, Arch. Neurol. 48(4):383-8). Эти параметры отслеживают до лечения, на следующий день после окончания лечения и на протяжении отслеживаемого периода после лечения. В периоды до лечения и лечения нормированные по времени функциональные тесты производят до мышечной биопсии.
Эти тесты (время, затрачиваемое на вставание из положения лежа на спине, время, затрачиваемое на прохождение 10 метров, и время, затрачиваемое на подъем на 4 ступени стандартного размера) служат дополнительным показателем функциональной способности амбулаторных индивидуумов. Тесты воспроизводимы, широко используются, просты для осуществления и дают документированную реакцию на терапевтическое вмешательство с использованием стероидов (Mendell, 1989, N. Engl. J. Med. 320(24):1592-7; Griggs, 1991, Arch. Neurol. 48(4):383-8).
5.14 Пример 14: Уровень CK в сыворотке
Активность CK в сыворотке оценивают с помощью имеющегося в продаже связанного с НАДН кинетического теста (Diagnostic Chemicals Ltd., Oxford, CT). Уровни CK в сыворотке измеряют до лечения, на 1 день (перед первой дозой), 7 день, 14 день, 21 день и 27 день периода лечения и на 42 день и 56 день после лечения. CK сыворотки возрастает при мышечной дистрофии Дюшенна и поэтому представляет собой легко измеряемый диагностический маркер заболевания и может служить потенциальным биомаркером фармакологической активности лекарства (Mendell et al., 1989, New Eng. J. Med. 320(24):1592-1597).
CK сыворотки служит показателем целостности мышц во всем организме. Концентрация этого фермента в сыворотке увеличивается 50-100-кратно у индивидуумов с DMD, и измерения ее уровня используют для установления раннего диагноза заболевания (Worton, The muscular dystrophies, In: Scriver CR., Beaudet A.L., Sly W.S., Valle D, eds. The metabolic and molecular basis of inherited disease. 8th ed. Vol. 4. New York: McGraw-Hill, 2001:5493-523). Уровень CK сыворотки измеряют для отслеживания развития заболевания, и он служит в качестве маркера мышечного повреждения. Хотя индуцируемые тренировкой изменения вносят вариабельность (Politano, 2003, Acta. Myol. 22(1):15-21), маркер имеет преимущество благодаря тому, что его можно легко, повторно и часто оценивать с помощью широко применяемого и надежного теста. Предшествующие клинические исследования показали снижение CK сыворотки, совпадающее с улучшением мышечной силы при лечении стероидами (Reitter, 1995, Brain Dev. 17 Suppl.39-43).
5.15 Пример 15: Культура фибробластов кожи и мышечных клеток
Исследования проводят на мышечной ткани и коже от больных для определения того, соответствует ли продукция дистрофина в первичных культурах мышцы от больных продукции дистрофина in vivo. В этих экспериментах производится оценка того, демонстрируют ли фибробласты кожи от больных после дифференцировки в мышечные клетки in vitro под действием трансфекции продуцирующим Myo-D экспрессионным конструктом (Wang, 2001, Development 128:4623-33) продукцию дистрофина в ответ на лечение. Корреляции ответа кожи с клинической активностью могут служить легко осуществляемым предикативным тестом для отбора будущих больных для лечения или для скрининга новых агентов для лечения DMD. Клетки культивируют следующим образом. Биопсийный материал хранят во время транспортировки в пролиферативной среде для человека (или ЗФР) и при необходимости в течение более продолжительных периодов времени на льду. Если ткань не обрабатывают в пределах 24 часов, материал может быть заморожен в пролиферативной среде для человека, содержащей 10% ДМСО, и сохранен в жидком азоте (или сухом льду). В момент времени, когда ткань следует обработать для получения культуры миобластов, биопсийный материал промывают ЗФР. ЗФР в количестве, достаточном для сохранения ткани влажной, добавляют в культуральную чашку. Биопсийный материал тщательно измельчают бритвенными лезвиями до получения полностью однородной суспензии. Добавляют приблизительно 2 мл раствора коллагеназы/диспазы/CaCl2 на грамм ткани и измельчение продолжают в течение нескольких минут (например, для мышечного биоптата 5x5x5 мм используют 1 мл раствора ферментов). Суспензию переносят в стерильную пробирку и инкубируют при 37°С в водяной бане до превращения смеси в тонкий сгусток (например, приблизительно в течение от 20 до 30 минут). Суспензию дополнительно гомогенизируют пипетированием несколько раз во время инкубации. При необходимости можно провести дополнительные циклы ресуспендирования пипетированием с помощью шприца. К суспензии добавляют восемь мл пролиферативной среды для человека и смешивают. Смесь центрифугируют в течение 10 минут при 1200 об/мин. Осадок клеток ресуспендируют в 3 мл пролиферативной среды для человека. Клетки высаживают в одну лунку покрытого коллагеном 6-луночного планшета или, в зависимости от количества материала, в покрытый коллагеном сосуд T25. Клетки культивируют в течение 48 часов при 37°С и 5% CO2. Неприкрепившиеся клетки удаляют и переносят в другую покрытую коллагеном лунку (в качестве дублерных). В первую лунку добавляют свежую пролиферативную среду (3 мл). Клетки первой лунки культивируют до конфлуентности, и было получено до двух конфлуентных сосудов T75. Для хранения клетки из одного сосуда T75 можно заморозить в 4 криопробирках с 1 мл среды для замораживания. Содержание миогенных клеток в культуре определяют окрашиванием десмина. Если доля десмин-положительных клеток слишком низка, необходимо предварительное выращивание культур.
5.16 Пример 16: Фаза 2 исследования 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты в качестве перорального средства для лечения мышечной дистрофии Дюшенна
Для права включения в исследование больные должны отвечать всем следующим условиям:
1. Диагноз мышечной дистрофии Дюшенна (DMD), основанный на клиническом фенотипе, имеющемся в возрасте 5 лет, с повышенной CK сыворотки и отсутствием дистрофина при мышечной биопсии (негативное окрашивание сарколеммы антителом против C-концевой части белка дистрофина);
2. Наличие нонсенс-мутации в гене дистрофина;
3. Документальное подтверждение того, что секвенирование гена дистрофина было произведено или, если секвенирование еще не было произведено, того, что образец крови был отослан для подтверждающего секвенирования гена дистрофина;
4. Физическое обследование или подтверждение радиографической визуализацией мышц EDB обеих ступней;
5. Способность к передвижению;
6. Мужской пол;
7. Возраст ≥ 5 лет;
8. Готовность воздерживаться от половых сношений или использовать барьерный или медицинский метод контрацепции во время исследования с введением лекарства и в последующие периоды для индивидуумов, половая активность которых известна;
9. Готовность и возможность осуществлять назначенные визиты, следовать плану введения, лабораторных тестов, ограничениям исследования и процедурам исследования (включая биопсию мышц, миометрию и отбор PK);
10. Способность дать письменное основанное на получении информации согласие, если возраст составляет ≥ 18 лет; или письменное основанное на получении информации разрешение (с согласием родителя/опекуна), если возраст составляет ≥ 7 лет. Если возраст индивидуума составляет < 7 лет, то должно быть получено только согласие родителя/опекуна по завещанию; и
11. Наличие лично подписанного и датированного документа об основанном на получении информации согласии (для детей в возрасте ≥ 7 лет также требуется разрешение), указывающего на то, что индивидуум/родитель/опекун по завещанию был информирован обо всех аспектах, имеющих отношение к последующему испытанию.
Наличие любого из следующих условий исключало индивидуума из исследования:
1. Предшествующее или имеющееся медицинское состояние (например, сопутствующее заболевание, психиатрическое состояние, алкоголизм, наркотическая зависимость), история болезни, физические данные, данные ЭКГ или лабораторная аномалия, которые, по мнению исследователя, могли бы неблагоприятно повлиять на безопасность индивидуума, делали бы маловероятным завершение курса лечения или последующего отслеживания или могли бы исказить оценку результатов исследования;
2. Клинические симптомы и признаки застойной сердечной недостаточности (American College of Cardiology/American Heart Association Stage C or Stage D) (Hunt, 2001, J. Am. Coll. Cardiol. 55:2101-13);
3. Положительный тест на поверхностный антиген гепатита B, тест с антителом против гепатита C или тест на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ);
4. Гемоглобин <10 г/дл;
5. Сывороточный альбумин <2,5 г/дл;
6. Аномальный GGT или общий билирубин (> верхней границы лаборатории для нормы);
7. Аномальная функция почек (креатин сыворотки > чем в 1,5 раз выше верхней границы лаборатории для нормы);
8. История болезни о трансплантации органа или переливании крови;
9. Проводящаяся иммунодепрессантная терапия (отличная от кортикостероидов);
10. Экспозиция с другим исследуемым лекарством в пределах 28 дней до начала лечения исследования;
11. Участие в настоящее время в любом другом терапевтическом клиническом испытании;
12. Использование в настоящее время тиазолидиндионовых агонистов рецептора гамма активаторов пролиферации пероксисом (PPARγ), например, розиглитазона (Avandia® или эквивалент) или пиоглитазона (Actos® или эквивалент);
13. Изменение системной терапии кортикостероидами (например, начало лечения; прекращение лечения; изменение дозы, схемы или типа стероида) в пределах 3 месяцев до начала лечения исследования; или
14. Системное лечение аминогликозидными антибиотиками в пределах 3 месяцев до начала лечения исследования.
3-[5-(2-Фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойная кислота была предоставлена в составе, описанном в настоящем описании. Лечение производилось на протяжении 28 дней для каждой группы лечения. Исходную группу больных (n=6) лечили ежедневно в течение 28 дней 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой в дозе 4, 4 и 8 мг/кг TID. После рассмотрения результатов клинической безопасности вторую группу больных (n=20) лечили ежедневно в течение 28 дней 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой в дозе 10, 10 и 20 мг/кг TID. Таким образом, каждый больной получал в общей сложности 84 дозы 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты.
У некоторых больных при обоих уровнях дозы на 28 день проявлялось частичное восстановление или увеличение дистрофина в мышечной мембране короткого разгибателя пальцев при окрашивании C-концевого домена белка по сравнению с исходным уровнем. Средние фармакокинетические параметры представлены ниже в Таблице 7, а также показаны на Фиг. 1.
Таблица 7
Параметр 4, 4, 8 мг/кг 10, 10, 20 мг/кг 20, 20, 40 мг/кг
Расчетныйа N=6 Расчетныйа N=20 Расчетныйа N=11b
1 день 28 день 1 день 28 день 1 день 28 день
AUC0-24 мкг·час/мл 176 87 91 439 291 235 470 866 490
Cmax·мкг/мл 18 10 11 47 27 22 44 76 46
Cmin·мкг/мл 7,9 0,5 0,6 19,8 3,8 3,4 ** 9,6 6,7
a Расчетные величины основаны на модели компартментализации по результатам предшествующего исследования с множеством доз
b Больной 002-010 исключен из анализа из-за недостатка данных.
Обозначения: AUC = площадь под кривой концентрация-время; Cmax = максимальная концентрация; Cmin = минимальная концентрация
Кровь для определения концентрации 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты собирают непосредственно перед введением дозы и через 3 часа после введения первой ежедневной дозы исследования лекарства на следующий день после каждого визита.
Исследование дозирования лекарства и время отбора образцов записывают. Если для отбора образца используют гепаринизированный венозный катетер, во избежание повторных уколов иглой, удаляют и отбрасывают, по меньшей мере, 2 мл крови перед началом сбора каждого образца для того, чтобы избежать загрязнения образца гепарином. Прикладываются все усилия для получения образцов крови в установленное время или в пределах ± 5 мин от него. Время сбора крови находится в связи с временем дозирования лекарства исследования.
Каждый образец включает 2 мл венозной крови, отобранной в 5-мл вакутейнер® или эквивалентную пробирку с K3-ЭДТА в качестве антикоагулянта. Сразу после отбора пробирку слегка переворачивают от 8 до 10 раз для смешивания антикоагулянта с образцом крови. Пробирку хранят в вертикальном положении на льду до центрифугирования; центрифугирование и обработку образца производят в пределах 1 часа после отбора образца. Фракцию плазмы отделяют помещением пробирки для сбора в центрифугу с охлаждением (от 4 до 8°С) в горизонтальный ротор (с откидной насадкой) в течение, как минимум, 15 минут при относительной центробежной силе (RCF) от 1500 до 1800. Фракцию плазмы отбирают пипеткой и переносят в две полиэтиленовые замораживаемые пробирки (причем в каждую пробирку вносят приблизительно равные аликвоты). Все отбираемые образцы и пробирки для замораживания ясно метят таким образом, чтобы идентифицировать индивидуума, период исследования и дату и время отбора. Этикетки фиксируют на пробирках способом, предотвращающим отделение этикеток после замораживания. После обработки образцы помещают в морозильник при приблизительно -20°С (или ниже).
Для защиты от утраты образца образцы разделяют на 2 партии, каждая из которых содержит 1 аликвоту плазмы для каждого момента времени (1 аликвоту перед введением дозы и 1 аликвоту после введения дозы). Первые аликвоты образцов отправляют в пределах от 28 до 30 дней после отбора. Образцы множества индивидуумов можно отправлять вместе в виде части одной партии. Перед отправкой образцы упаковывают в термоизолирующие контейнеры с сухим льдом в количестве, достаточном для обеспечения сохранения их в замороженном состоянии, и защищают от поломки во время перевозки. Образцы перевозят в течение ночи с помощью частного курьера.
Образцы хранят для анализа 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты в конце исследования с помощью проверенной высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с методом тандемной масс-спектрометрии (ВЭЖХ/МС-МС). После этого образцы сохраняют для возможного последующего анализа.
Первичной целью испытания было выявление доли больных с повышением экспрессии дистрофина в мышце во время 28-дневного лечения 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой. Данные по иммунофлуоресценции для мышц EDB до и после лечения имелись для всех 38 больных. Как видно из Таблицы 8, данные показали, что при обоих уровнях дозы у больных отмечалось количественное улучшение в окраске дистрофина. В целом у 4 из 6 (67%) (90% CI 27-94%) больных, лечившихся при уровне дозы 4-, 4-, 8-мг/кг, у 10 из 20 (50%) (90% CI 30-70%) больных, лечившихся при уровне дозы 10-, 10-, 20-мг/кг и 6 из 12 (50%) (90% CI 50-75%) больных, лечившихся при уровне дозы 20-, 20-, 40- мг/кг, было показано повышение экспрессии дистрофина после лечения. Эффект, видимо, не зависел от экспрессии дистрофина до лечения (отсутствия или минимального), возраста, использования стероида или локализации или типа нонсенс-мутации.
Имелась возможность предварительной обработки мышечных клеток в культуре мышечных трубок in vitro от 24 из 26 мальчиков в первых 2 группах. При культивировании в присутствии 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты в культурах мышечных трубок показано наличие зависимого от дозы повышения экспрессии дистрофина в ответ на обработку 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой. При концентрации 10 мкг/мл в 24 из 24 случаев (100%) показана продукция полноразмерного дистрофина, что позволяет предполагать потенциал в отношении подавления нонсенс-мутации у всех индивидуумов при достижении достаточной концентрации. У большинства индивидуумов, получавших уровень дозы 4-, 4-, 8-мг/кг; 10-, 10-, 20-мг/кг; или 20-, 20-, 40-мг/кг была снижена CK при сравнении величин в конце лечения с величинами до лечения. Эти изменения были статистически значимыми (p=0,03, p=0,002, p=0,001 для низкой, средней и высокой доз, соответственно). Возвращение средних величин к исходным значениям после прекращения лечения служит дополнительным подтверждением фармакологической активности.
Figure 00000002
Для вариантов этого протокола при каждом уровне дозы рекомендуется использовать 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту TID с 6-, 6- и 12-часовыми (±~30 минут) интервалами. В идеале каждую дозу принимают в пределах ~30 минут после еды (например, ~7:00 утра после завтрака, ~1:00 дня после обеда и ~7:00 вечера после ужина). Хотя ясно, что могут иметь месть вариации в схеме дозирования при амбулаторном лечении, рекомендуется, чтобы предписанный режим (включая интервалы между дозами и связь дозирования с приемами пищи) строго выполнялся в дни сбора образцов PK. Клинические конечные показатели оценивают с использованием процедур, представленных выше.
5.17 Пример 17: Количественная оценка кашля
Общепринято, что избыточный кашель свидетельствует об ухудшенном самочувствии и функции людей. Среди наиболее частых причин, по которым обращаются за первой помощью в Соединенных Штатах, является кашель (Hing et al., 2006, Adv. Data 374:1-33). Больные с хроническим кашлем описывают разочарование, возбудимость, раздражение при опустошающем характере кашля и отрицательное влияние на сон и социальные отношения (Kuzniar et al., 2007, Mayo Clin. Proc. 82(1):56-60). У больных кистозным фиброзом (CF) кашель является одним из наиболее выраженных связанных с заболеванием симптомов, и усиление кашля в дневное и ночное время наряду с повышением продукции мокрот служит наиболее частой причиной внеплановых обращений за медицинской помощью (Sawicki et al., 2006, Ped. Pulm., Suppl. 29:344(#388)). Кашель при CF, по-видимому, связан с обструкцией дыхательных путей слизистогнойными секретами и с хроническим воспалением дыхательных путей; значительное усиление кашля обычно возвещает об обострении легочного заболевания и связано со снижением FEV1 и повышением маркеров воспаления (Smith et al., 2006, Thorax 61(5):425-9). У больных CF сразу после окончания их лечения по поводу обострения легочного заболевания была документирована частота хронического кашля в дневное время от 2 до 5 кашляний в час (там же), но она, возможно, выше вне клиники; здоровые индивидуумы обычно меньше кашляют за весь день (Hsu et al., 1994, Eur. Respir. J. 7(7); 1246-53). Субъективная оценка кашля часто является сомнительной из-за привыкания больного к хроническому характеру события и вследствие этого неспособности пересказать, насколько часто происходил кашель; у больных имеется тенденция к недооценке эпизодов кашля, и часто имеется слабая корреляция между объективной и субъективной оценкой кашля (то же; Coyle et al., 2005, Cough 1:3; Smith et al, 2006, Thorax 61(5):425-9).
Корпорация The VivoMetrics, Inc. LifeShirt® включает чувствительные к движению передатчики, электроды, ларингофон, измерительный блок и 3-осевой акселерометр в облегченный, доступный для стирки жилет, пригодный для больных в возрасте ≥ 5 лет (см. руководство LifeShirt(R) Monitoring System QuickStart, включенное в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме). За счет интегрированного сигнала, поступающего от сенсоров движения и микрофона, частоту и интенсивность кашля можно измерить. Приуроченные к определенному времени данные хранятся на компактной карте, находящейся в записывающем устройстве, и могут быть переправлены производителю, VivoMetrics, Inc., для анализа с помощью специальной программы. Данные могут быть перенесены в Excel, Oracle или SAS.
Было показано, что устройство является очень точным в оценке кашля по сравнению с видео/аудиооценками больных с хроническим обструктивным легочным заболеванием (Coyle et al., 2005, Cough 1:3). Устройство было использовано для получения данных, представленных на Фиг. 2, и оно будет использовано для получения важных дополнительных данных, касающихся клинических преимуществ 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты во время фазы 3 тестирования при CF. Наличие неформально собранных симптоматических данных в фазу 2 исследований 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислоты подтверждает эту концепцию. Примечательно, что у нескольких больных, описанных в исследовании, кашель снизился. Без ограничения теорией, на основании гипотезы о том, что опосредуемая 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]бензойной кислотой индукция функции CFTR должна снижать обструкцию и воспаление дыхательных путей, снижение кашля могло бы служить в качестве симптоматического общего показателя этих фармакологических эффектов и могло бы обеспечить более точную и количественную оценку по сравнению с сообщаемой со слов больного.
Следует понимать, что хотя в настоящем описании с целью иллюстрации были описаны конкретные варианты осуществления изобретения, объем описанного в настоящем описании изобретения не ограничивается раскрытыми в настоящем описании конкретными вариантами осуществления. Эти варианты осуществления предназначены в качестве иллюстраций нескольких аспектов изобретения. Любые эквивалентные варианты осуществления рассматриваются как входящие в объем настоящего изобретения. Действительно, на основании представленного выше описания специалистам в данной области техники должны быть очевидны разнообразные модификации изобретения в дополнение тем, которые показаны и описаны в настоящем описании.

Claims (17)

1. Способ лечения или управления кистозным фиброзом, вызванным преждевременным стоп-кодоном в мРНК, кодируемой геном CFTR, у пациента, нуждающегося в этом, или мышечной дистрофией Дюшенна, вызванной преждевременным стоп-кодоном в мРНК, кодируемой геном дистрофина, у пациента, нуждающегося в этом, включающий введение нуждающемуся в этом больному эффективного количества 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата непрерывным лечением, где первая доза, вторая доза и третья доза вводятся в течение 24 ч по формуле 1X, 1X и 2Х, где Х представляет собой дозу 18-22 мг/кг.
2. Способ по п.1, где каждую дозу вводят через 30 мин после еды.
3. Способ по п.1, где каждую дозу вводят перорально.
4. Способ по п.1, где больной является человеком.
5. Способ по п.4, где количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата в каждой дозе определяется весом пациента.
6. Способ по п.5, где количество 3-[5-(2-фторфенил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-бензойной кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, вводимое в каждой дозе, в виде препарата в единичной дозированной форме или в нескольких единичных дозированных формах, находится в диапазоне от 35 мг до 1400 мг.
7. Способ по п.6, где количество препарата в каждой единичной дозированной форме выбрано из 35 мг, 50 мг, 70 мг, 100 мг, 125 мг, 140 мг, 150 мг, 175 мг, 200 мг, 250 мг, 280 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг, 500 мг, 560 мг, 600 мг, 700 мг, 750 мг, 800 мг, 900 мг, 1000 мг или 1400 мг.
8. Способ по п.6, где количество препарата в каждой единичной дозированной форме выбрано из 35 мг, 50 мг, 70 мг, 100 мг, 125 мг, 140 мг, 175 мг, 200 мг, 250 мг, 280 мг, 350 мг, 400 мг, 500 мг, 560 мг, 700 мг, 750 мг, 800 мг, 1000 мг или 1400 мг.
9. Способ по п.6, где количество препарата в каждой единичной дозированной форме выбрано из 125 мг, 200 мг, 250 мг, 350 мг, 450 мг, 600 мг, 750 мг, 900 мг или 1000 мг.
10. Способ по п.1, где экспрессия дистрофина, саркогликана или дистрогликана в мышце увеличена, миометрия верхних или нижних конечностей улучшена, уровни креатинкиназы в сыворотке понижены или показатели функционального теста улучшены.
11. Способ по п.10, где функциональный тест представляет собой нормированный по времени функциональный тест.
12. Способ по п.1, где лечится или управляется кашель, ассоциированный с кистозным фиброзом.
13. Способ по п.1, где первая вводимая доза составляет 20 мг/кг, вторая вводимая доза составляет 20 мг/кг и третья вводимая доза составляет 40 мг/кг.
14. Способ по п.1, где вторая доза вводится через 6 ч после введения первой дозы и третья доза вводится через 6 ч после введения второй дозы.
15. Способ по п.1, где первая доза вводится утром, вторая доза вводится в середине дня и третья доза вводится вечером в пределах 24-часового периода времени.
16. Способ по п.1, где непрерывное лечение включает многократное введение первой дозы, второй дозы и третьей дозы в пределах 24-часовых периодов времени ежедневно, еженедельно, ежемесячно или ежегодно.
17. Способ по п.16, где первая доза в последующий 24-часовой период времени вводится спустя 12 часов после введения третьей дозы в предыдущий 24-часовой период времени.
RU2009117590/15A 2006-10-12 2007-10-11 Способы дозирования перорально активного 1,2,4-оксадиазола для терапии, подавляющей нонсенс-мутацию RU2462247C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US85145006P 2006-10-12 2006-10-12
US60/851,450 2006-10-12

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009117590A RU2009117590A (ru) 2010-11-20
RU2462247C2 true RU2462247C2 (ru) 2012-09-27

Family

ID=39102963

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009117590/15A RU2462247C2 (ru) 2006-10-12 2007-10-11 Способы дозирования перорально активного 1,2,4-оксадиазола для терапии, подавляющей нонсенс-мутацию

Country Status (24)

Country Link
US (7) US9226919B2 (ru)
EP (2) EP2073805B1 (ru)
JP (4) JP2010506840A (ru)
KR (4) KR101758341B1 (ru)
CN (2) CN101553226B (ru)
AU (1) AU2007308067B2 (ru)
BR (2) BRPI0719276A2 (ru)
CA (1) CA2675518C (ru)
CL (1) CL2007002923A1 (ru)
DK (1) DK2073805T3 (ru)
ES (1) ES2538359T3 (ru)
HK (2) HK1136214A1 (ru)
HR (1) HRP20150590T1 (ru)
IL (2) IL198147A (ru)
MX (1) MX2009003909A (ru)
NO (1) NO342061B1 (ru)
PE (4) PE20120670A1 (ru)
PL (1) PL2073805T3 (ru)
PT (1) PT2073805E (ru)
RS (1) RS54025B1 (ru)
RU (1) RU2462247C2 (ru)
SI (1) SI2073805T1 (ru)
TW (1) TWI405570B (ru)
WO (1) WO2008045566A1 (ru)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE031794T2 (en) 2003-04-11 2017-08-28 Ptc Therapeutics Inc 1,2,4-oxadiol-benzoic acid compounds and their use for nonsense suppression and disease treatment
EP2007365A2 (en) * 2006-03-30 2008-12-31 PTC Therapeutics, Inc. Methods for the production of functional protein from dna having a nonsense mutation and the treatment of disorders associated therewith
JP2010506840A (ja) * 2006-10-12 2010-03-04 ピーティーシー セラピューティクス，インコーポレーテッド ナンセンス突然変異抑制治療用の経口的に活性な１，２，４−オキサジアゾールの投与方法
WO2012166899A2 (en) 2011-06-03 2012-12-06 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of thyroid and kidney cancer subjects to lenvatinib compounds
KR102497273B1 (ko) * 2014-03-06 2023-02-07 피티씨 테라퓨틱스, 인크. 1,2,4-옥사디아졸 벤조산의 약학 조성물 및 염
RS63559B1 (sr) 2014-08-28 2022-10-31 Eisai R&D Man Co Ltd Derivat hinolina velike čistoće i postupak za njegovu proizvodnju
PL3263106T3 (pl) 2015-02-25 2024-04-02 Eisai R&D Management Co., Ltd. Sposób tłumienia goryczy pochodnej chinoliny
BR112017027227B1 (pt) 2015-06-16 2023-12-12 Eisai R&D Management Co., Ltd Agente anti-câncer
MX2018005361A (es) 2015-10-30 2018-06-07 Ptc Therapeutics Inc Metodos para tratar epilepsia.
AR113780A1 (es) 2017-10-19 2020-06-10 Cipla Usa Inc Síntesis de análogos de aminoglicósidos antibacterianos
WO2019101709A1 (en) 2017-11-23 2019-05-31 Universita' Degli Studi Di Palermo Oxadiazole derivatives for the treatment of genetic diseases due to nonsense mutations
US20240139183A1 (en) * 2021-02-16 2024-05-02 Ribotech Co., Ltd. Compound for suppressing nonsense-mediated mrna decay
KR102378381B1 (ko) * 2021-08-23 2022-03-24 라이보텍(주) 넌센스-매개 mRNA 분해를 억제하기 위한 화합물
EP4337267A1 (en) * 2021-05-11 2024-03-20 RegenxBio Inc. Treatment of duchenne muscular dystrophy and combinations thereof
KR102665711B1 (ko) * 2021-12-21 2024-05-14 재단법인 아산사회복지재단 Ras 활성도를 이용한 신경섬유종증 치료제에 대한 감수성 예측용 바이오마커 조성물 및 Ras 활성 억제제를 포함하는 신경섬유종증 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6660753B2 (en) 1999-08-19 2003-12-09 Nps Pharmaceuticals, Inc. Heteropolycyclic compounds and their use as metabotropic glutamate receptor antagonists
CA2449544A1 (en) 2001-06-08 2002-12-19 Cytovia, Inc. Substituted 3-aryl-5-aryl-[1,2,4]-oxadiazoles and analogs
MY151199A (en) 2001-11-02 2014-04-30 Rigel Pharmaceuticals Inc Substituted diphenyl heterocycles useful for treating hcv infection
CN1691944A (zh) 2002-08-09 2005-11-02 阿斯利康(瑞典)有限公司 作为代谢型谷氨酸受体－5调节剂的噁二唑
GB0303503D0 (en) 2003-02-14 2003-03-19 Novartis Ag Organic compounds
HUE031794T2 (en) * 2003-04-11 2017-08-28 Ptc Therapeutics Inc 1,2,4-oxadiol-benzoic acid compounds and their use for nonsense suppression and disease treatment
US20050075375A1 (en) 2003-05-14 2005-04-07 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds for treating hepatitis C virus
CA2550866A1 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Alza Corporation Methods and dosage forms for increasing solubility of drug compositions for controlled delivery
ES2390804T3 (es) * 2005-04-08 2012-11-16 Ptc Therapeutics, Inc. Composiciones de un 1,2,4-oxadiazol oralmente activo para terapia de supresión de la mutación sin sentido
US20070010553A1 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Astrazeneca Ab New use
CA2662749C (en) 2006-09-08 2015-01-20 Ptc Therapeutics, Inc. Processes for the preparation of 1,2,4-oxadiazole benzoic acids
AU2007300542B2 (en) 2006-09-25 2012-05-17 Ptc Therapeutics, Inc. Crystalline forms of 3-[5-(2-fluorophenyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-yl]-benzoic acid
JP2010506840A (ja) 2006-10-12 2010-03-04 ピーティーシー セラピューティクス，インコーポレーテッド ナンセンス突然変異抑制治療用の経口的に活性な１，２，４−オキサジアゾールの投与方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LINDE L. et al. Nonsense-mediated mRNA decay and cystic fibrosis. Methods Mol Biol. 2011; 741: 137-154, abstract, PMID: 21594783 [онлайн] [Найдено 2011-10-20] найдено в Интернете: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21594783. *

Also Published As

Publication number Publication date
TWI405570B (zh) 2013-08-21
CA2675518A1 (en) 2008-04-17
US20170304275A1 (en) 2017-10-26
AU2007308067B2 (en) 2013-05-30
EP2460520A1 (en) 2012-06-06
BR122019020961B1 (pt) 2021-03-09
DK2073805T3 (da) 2015-06-15
US10172836B2 (en) 2019-01-08
JP2014058533A (ja) 2014-04-03
JP6333227B2 (ja) 2018-05-30
WO2008045566A1 (en) 2008-04-17
EP2073805B1 (en) 2015-03-04
ES2538359T3 (es) 2015-06-19
PE20212245A1 (es) 2021-11-24
PE20120670A1 (es) 2012-06-01
JP2017081946A (ja) 2017-05-18
US20190099405A1 (en) 2019-04-04
KR101758341B1 (ko) 2017-07-14
PL2073805T3 (pl) 2015-08-31
JP2010506840A (ja) 2010-03-04
CL2007002923A1 (es) 2008-06-06
KR20170100072A (ko) 2017-09-01
US9522137B2 (en) 2016-12-20
AU2007308067A1 (en) 2008-04-17
IL198147A0 (en) 2009-12-24
IL198147A (en) 2016-02-29
NO342061B1 (no) 2018-03-19
PT2073805E (pt) 2015-07-13
HK1170690A1 (zh) 2013-03-08
CN101553226A (zh) 2009-10-07
NO20091826L (no) 2009-07-08
CN103211766B (zh) 2015-03-11
RS54025B1 (en) 2015-10-30
MX2009003909A (es) 2009-05-25
US10849885B2 (en) 2020-12-01
US20210038572A1 (en) 2021-02-11
KR20160128468A (ko) 2016-11-07
EP2460520B1 (en) 2015-09-30
US9877952B2 (en) 2018-01-30
HK1136214A1 (en) 2010-06-25
JP2016029078A (ja) 2016-03-03
KR20090074231A (ko) 2009-07-06
US9226919B2 (en) 2016-01-05
RU2009117590A (ru) 2010-11-20
PE20160947A1 (es) 2016-09-26
US20080114039A1 (en) 2008-05-15
JP6129713B2 (ja) 2017-05-17
HRP20150590T1 (hr) 2015-07-03
SI2073805T1 (sl) 2015-10-30
CN103211766A (zh) 2013-07-24
EP2073805A1 (en) 2009-07-01
US20170049752A1 (en) 2017-02-23
US20180140583A1 (en) 2018-05-24
IL236519A0 (en) 2015-02-26
KR20150064244A (ko) 2015-06-10
CA2675518C (en) 2017-11-14
PE20080982A1 (es) 2008-07-19
WO2008045566B1 (en) 2008-06-19
IL236519A (en) 2017-03-30
US20160101087A1 (en) 2016-04-14
CN101553226B (zh) 2015-05-13
US9737513B2 (en) 2017-08-22
BRPI0719276A2 (pt) 2014-04-29
TW200820968A (en) 2008-05-16
BR122019020961B8 (pt) 2021-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2462247C2 (ru) Способы дозирования перорально активного 1,2,4-оксадиазола для терапии, подавляющей нонсенс-мутацию
US11497736B2 (en) Compositions for an orally active 1,2,4-oxadiazole for the treatment of disease
AU2016262645B2 (en) Methods for dosing an orally active 1,2,4-oxadiazole for nonsense mutation suppression therapy
AU2013219243B2 (en) Methods for dosing an orally active 1,2,4-oxadiazole for nonsense mutation suppression therapy